CZ20003409A3 - Inhibitory kaspázy a farmaceutická kompozice, která je obsahuje - Google Patents

Inhibitory kaspázy a farmaceutická kompozice, která je obsahuje Download PDF

Info

Publication number
CZ20003409A3
CZ20003409A3 CZ20003409A CZ20003409A CZ20003409A3 CZ 20003409 A3 CZ20003409 A3 CZ 20003409A3 CZ 20003409 A CZ20003409 A CZ 20003409A CZ 20003409 A CZ20003409 A CZ 20003409A CZ 20003409 A3 CZ20003409 A3 CZ 20003409A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
alkyl
group
aryl
optionally replaced
hydrogen atom
Prior art date
Application number
CZ20003409A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ302281B6 (cs
Inventor
Marion W. Wannamaker
Guy W. Bemis
Paul S. Charifson
David J. Lauffer
Michael D. Mullican
Mark A. Murcko
Keith P. Wilsom
James W. Janetka
Robert J. Davies
Anne-Laure Grillot
Zhan Shi
Cornelia J. Forster
Original Assignee
Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vertex Pharmaceuticals Incorporated filed Critical Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Publication of CZ20003409A3 publication Critical patent/CZ20003409A3/cs
Publication of CZ302281B6 publication Critical patent/CZ302281B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/16—Central respiratory analeptics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/32—Alcohol-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Addiction (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)

Description

Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká nové třídy sloučenin, které jsou inhibitory kaspázy, zejména enzymu konvertujícího interleukin1β („ICE) . Tento vynález se také týká farmaceutických prostředků obsahujících tyto sloučeniny. Sloučeniny a farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu jsou zejména velmi vhodné pro inhibici aktivity kaspázy a v důsledku toho je lze s výhodou použít jako činidel proti onemocněním zprostředkovaným interleukinem-1 („IL-1) , apoptózou, faktorem vyvolávajícím interferon gama („IGIF) a interferonem-γ („IFN), včetně zánětlivých onemocnění, autoimunních onemocnění, rozkladných onemocnění kosti, proliferativních poruch, nakažlivých onemocnění a degenerativních onemocnění. Předkládaný vynález se také týká způsobu inhibice aktivity kaspázy a potlačení produkce IGIF a IFN-γ a způsobu léčby onemocnění způsobených interleukinem-1-, apoptózou, IGIF a IFN-γ za použití sloučenin a prostředků podle předkládaného vynálezu. Předkládaný vynález se také týká způsobu přípravy sloučenin podle vynálezu.
Dosavadní stav techniky
Interleukin 1 („IL-1) je důležitým prozánětlivým a imunoregulačním proteinem, který stimuluje diferenciaci a proliferaci fibroblastů, produkci prostaglandinů, kolagenasy a fosfolipasy synoviálními buňkami a chondrocyty, degranulaci basofilů a eosinofilů a aktivaci neutrofilů (Oppenheim, J. H. a kol., Immunology Today, 7, str. 45 -56 (1986)). Jako takový se podílí na patogenezi chronických a akutních zánětlivých a auto• ·
imunitních onemocnění. Například u revmatoidní arthritidy je IL-1 jak mediátorem zánětlivých symptomů, tak mediátorem rozpadu chrupavkového proteoglykanu v postiženém místě. Wood, D. D. a kol., Arthritis Rheum. 26, 975, (1983); Pettipher, E. J. a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 71, 295 (1986); Arend, W. P. a Dayer, J. Μ. , Arthritis Rheum. 38, 151 (1995) . IL-1 je také velmi účinným činidlem vstřebávání kostní tkáně. Jandiski, J. J., J. Oral. Path. 17, 14 5 (1988); Dewhirst, F. E. a kol., J. Immunol. 8, 2562 1985) . Alternativně se nazývá jako „aktivační faktor osteoklastu při destruktivních onemocněních kosti jako je osteoarthritida a. mnohočetný myelom. Bataille, R. a kol., Int. J. Clin. Lab. Res. 21(4), 283 (1992). Při určitých proliferačních poruchách, jako je akutní myelogenní leukémie a mnohočetný myelom, může IL-1 podpořit růst a adhezi nádorových buněk. Bani, M. R., J. Nati. Cancer Inst. 83, 123 (1991); Vídal-Vanaclocha, F., Cancer Res. 54, 2667 (1994). Při těchto poruchách IL-1 také stimuluje vylučování jiných cytokinů, jako je IL-6, které mohou regulovat vývoj nádoru. (Tartour a kol., Cancer Res. 54, 6243 (1994) . IL-1 je produkován převážně periferními krevními monocyty jako součást zánětlivé odpovědi a vyskytuje se ve dvou odlišných agonistických formách, IL-Ια a IL-Ιβ (Mosely, B. S. a kol., Proč. Nat. Acad. Sci., 84 str.. 4572 - 4576 (1987); Lonnemann, G. a kol., Eur. J. Immunol., 19, str. 1531 - 1536 (1989)).
IL-Ιβ je syntetizován jako biologicky neaktivní prekurzor, pIL-Ιβ. pIL-Ιβ postrádá konvenční vedoucí sekvenci (leader sequence) a není upravován signální, peptidasou (March. C. J., Nátuře, 315, str. 641 - 647 (1985)). Místo toho je pIL-Ιβ štěpen enzymem konvertujícím interleukin-1β („ICE„) mezi Asp-116 a Ala-117, čímž vzniká biologicky aktivní C-koncový fragment nacházející' se v lidském séru a synoviální kapalině (Sleath, • ·
P. R. a kol., J. Biol. Chem., 265, str. 14526 - 14528 (1992); A. D. Howard a kol., J. Immunol. , 147, str. 2964 - 2969 (1991)). ICE je cysteinová proteáza primárně umístěná v monocytech. Převádí prekurzor IL-Ιβ na maturovanou formu. Black, R. A. a kol., FEBS Lett., 247, str. 386-390 (1989); Kostura, M. J. a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. United States of Amarica, 86, str. 5227-5231 (1989) . Úprava účinkem ICE je rovněž nutná pro transport maturovaného IL-Ιβ přes buněčnou membránu.
ICE (nebo kaspáza-1) je členem skupiny homologních enzymů nazývaných kaspázy. Tato homologa vykazují sekvenční podobnosti v oblastích aktivního místa enzymů. Tato homologa (kaspázy) zahrnují TX (nebo ICErel_I]: nebo ICH-2) (kaspáza-4) (Faucheu, a kol., EMBO J. , 14, strana 1914 (1995); Kamens J. , a kol., J. Biol. Chem., 270, str. 15250 (1995); Nicholson a kol., J. Biol. Chem., 270 15870 (1995)),.TY (nebo ICEreliIII) (kaspáza-5) (Nicholson a kol., J. Biol. Chem., 270, strana 15870 (1995);
ICH-1 (nebo Nedd-2) (kaspáza-2) (Wang, L. a kol., Cell, 78, str. 739 (1994)), MCH-2 (kaspáza-6), (Fernandes-Alnemri, T. a kol., Cancer Res., 55, str. 2737 (1995),. CPP32 (nebo YAMA nebo apopain) (kaspáza-3) (Fernandes-Alnemri, T. a kol., J. 'Biol. Chem., 269, str. 30761 (1994); Nichoison, D.W. a kol., Nátuře, 376, str. 37 (1995)), CMH-1 (nebo MCH-3) (kaspáza-7) (Lippke, a kol., J. Biol. Chem. 271(4), str. 1825-1828 (1996)); Fernandes-Alnemri, T. a kol., Cancer Res.,' (1995)), Mch5 (kaspáza-8) (Muzio, M. a kol., Cell 85(6), 817-827, (1996)), MCH-6 (kasp,áza-9)· (Duan, H. a kol., J. Biol. Chem., 271 (34), str. 1672016724 (1996)), Mch4 (kaspáza-10) (Vincenz, C., a kol., J. Biol.
Chem., 272, str. 6578-6583 (1997); Fernandes-Alnemri, T. a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. 93, str. 7464-7469 (1996)), Ich-3 (kaspáza-11) (Wang, S. a kol., J. Biol. Chem., 271, str. 20580-20587 (1996)), mCASP-12 (kaspáza-12), (Van de Craen, M.
a kol., FEBS Lett. 403, str. 61-69 (1997); Yuan, Y. a Miura, M. PCT přihláška W095/00160 (1995)), ERICE (kaspáza-13), (Humke, E.W., a kol., J. Biol. Chem., 273(25) str. 15702-15707 (1998)), a MÍCE (kaspáza-14) (Hu, S. a kol., J. Biol. Chem., 273(45) str. 29648-29653 (1998)).
Každý z těchto homologú a také ICE samotný jsou schopny vyvolat apoptózu, pokud se nadměrně exprimuj£ v transfekovaných buňkách. Inhibice jednoho nebo více těchto homologú inhibitorem peptidyl ICE Tyr-Val-Ala-Asp-chlormethylketonem vede k inhibici apoptózy u primárních buněk nebo buněčných kmenů. Lazebník a kol., Nátuře, 371, str. 346 (1994).
Ukázalo se také, že kaspáza je zapojena do řízení programované buněčné smrti nebo apoptózy. Yuan, J. a kol., Cell, 75, str. 641-652 (1993); Miura, M. a kol.', Cell, 75, str. 653-660 (1993); Nett-Fiordalisi, M. A. a kol., J. Cell. Biochem., 17B, str 117 (1993) . Zejména se má za to, že ICE nebo homologa ICE souvisí š regulací ápoptosy u nerodegenerativních onemocnění, jako je Alzheimerova a Parkinsonova choroba (Marx, J. a M. Baringa, Science, 259, str. 760 - 762 (1993); Gagliardini, V. a kol., Science, 263, str. 826 - 828 (1994)). Léčebné aplikace pro inhibici apoptózy mohou zahrnovat léčbu Alzheimerovy nemoci, Parkinsonovy nemoci, mrtvice, infarktu myokardu, atrofie páteře a stárnutí.
Ukázalo se, že ICE zprostředkuje apoptózu (programovaná buněčná smrt) u určitých typů tkání. Steller, Η. , Science, ,267, str. 1445 (1995) ; Whyte, M. a Evan, G. , Nátuře, 376, str. 17 (1995); Martin, S.J. a Green, D.R., Cell, 82, str. 349 (1995); Alnemri, E.S., a kol., J. Biol. Chem., 270, str. 4312 (1995); Yuan, J. Curr. Opin, Cell Biol., 7, str. 211 (1995). Transgenní myš s přerušeným ICE genem je deficientní při apoptóze
• » zprostředkované Fas (Kuida, K. a kol., Science 267, 2000 (1995)j . Tato aktivita ICE je odlišná od aktivity jako enzymu pro zpracování pro-IL-ίβ. Je možné, že u určitých typů tkání nemusí inhibice ICE ovlivňovat sekreci maturovaného IL-Ιβ, ale může inhibovat apoptózu.
Enzymaticky aktivní ICE byl již dříve popsán jako heterodimer složený ze dvou podjednotek, p20 a plO (s molekulovou hmotností 20 kDa respektive 10 kDa) . Tyto podjednotky jsou odvozeny od proenzymu o hmotnosti 45 kDa (p45) přes formu p30, pomocí aktivačního mechanismu, který je autokatalytický (Thornberry, N. A. a kol,, Nátuře, 356, str. 768 - 774 (1992)). Proenzym ICE je rozdělen na několik funkčních domén: prodoménu (pl4), podjednotku p22/20, polypeptidovou spojku a podjednotku plO (Thornberry a kol., viz výše; Casano a kol., Genomics, 20, str. 474 - 481 (1994)) .
p45 o plné délce byl charakterizován pomocí své cDNA-sekvence a aminokyselinové sekvence (mezinárodní patentové přihlášky PCT č. WO 91/15.577 a WO 94/00154) . Známé jsou i cDNA-sekvence a aminokyselinové sekvence p20 a plO (Thornberry a kol., viz výše) . Sekvenovány a klonovány byly rovněž myší a krysí ICE. Vykazují vysokou homologii aminokyselinové sekvence a sekvence nukleové kyseliny s lidským ICE (Miller, D. K. a kol., Ann. N.Y. Acad. Sci., 696, str. 133 -.148.(1993); Molineaux, S. M. a kol., Proč. Nat. Acad. Sci., 90, str. 1809-1813 (1993). Pomocí rozlišení atomů za použití rentgenové krystalografie byla určena trojrozměrná struktura ICE. Wilson, K.P., a kol., Nátuře, 370, str. 270-275 (1994). Aktivní enzym se vyskytuje jako tetramer dvou ,p20 a dvou plO podjednotek.
V nedávné době byly do konverze pro-IGIF na IGIF nebo do produkce IFN-γ in vivo zapojeny ICE a další členy skupiny ICE/ • · • ··
CED-3 (PCT patentová přihláška PCT/US96/.20843 , přihláška WO 97/22619, které, jsou zde uvedeny jako odkaz). IGIF se syntetizuje in vivo jako prekurzor proteinu „pro-IGIF.
Faktor vyvolávající interferon gama (IGIF) je přibližně 18-kDa polypeptid, který stimuluje vylučování interferonu gama (IFNy) T-buňkami. IGIF je vylučován aktivovanými Kupfferovými buňkami a makrofágy in vivo á z- těchto buněk je přenášen za stimulace endotoxinu. Tedy, sloučeniny, které potlačují vylučování IGIF, mohou být užitečné jako inhibitory takové stimulace buněk T, což může snížit hladinu vylučování IFN-γ těmito buňkami.
IFN-γ je cytokin s imunomodulačními účinky na různé imunní buňky. IFN-γ je zapojen zejména do aktivace makrofágu a výběru Thl buněk (F. Belardelli, APMIS, 103, str. 161 (1995)). IFN-Y uplatňuje svůj účinek zejména pomocí modulace vylučování genů přes STÁT a IRF dráhy (C. Schindler a J.E. Darnell, Ann. Rev. Biochem., 64, str. 621 (1995); T. Taniguchi, J. Cancer Res.
Clin. Oncol., 121, str. 516 (1995)) .
Myši, které mají nedostatek IFN-γ nebo jeho receptorů, mají mnohonásobné poruchy funkce imunních buněk, a jsou odolné k endotoxickému šoku (S. Huang a kol., Science, 259, str. 1742 (2993); D. Dalton a kol., Science, 259, str.1739 (1993); B. D.
Car a kol., J. Exp. Med., 179, str. 1437 (1994)). Ukazuje se, že stejně jako IL-12, i IGIF vykazuje schopnost vyvolat produkci IFN-γ buňkami Τ (H. Okamura a kol., Infection and Immunity, 63, str. 3966 (1995); H. Okamura a kol., Nátuře,
378, str. 88 (1995); S,. Ushio a kol., J. Immunol., 156, str.
4274 (1996) ) .
Ukázalo se, zánětlivými, nimi. Tedy, že IFN-γ přispívá k patologii spojené s různými nakažlivými a autoimunními poruchami a onemocněsloučeniny schopné potlačit vylučování IFN-γ by mohly být využitelné pro zmírnění vlivů onemocnění spojených s IFN-γ.
Proto prostředky a způsoby schopné regulovat, převení pro-IGIF na IGIF mohou být využitelné pro potlačení vylučování IGIF a IFN-γ in vivo a tedy pro zmírnění škodlivého vlivu těchto proteinů, které přispívají k poruchám a onemocněním člověka.
Inhibitory kaspázy představují třídu sloučenin vhodných pro kontrolu zánětů nebo apoptózy nebo obojího. Jsou popsány peptidové a peptidylové inhibitory ICE (PCT patentové přihlášky WO 91/15577, WO 93/05071, WO 93/09135, WO 93/12076, WO 93/14777, WO 93/16710, WO 95/35308, WO 96/30395, WO 96/33209 a WO 98/01133; Evropské patentové přihlášky 503 561, 547 699, 618 223, 623 592, a 623 606; a US patenty číslo 5,434,248, 5,710,153, 5,716,929,. a 5,744,451.) ..Ukázalo se, že tyto peptidylové inhibitory ICE blokují vylučování maturovaného IL-Ιβ na myším modelu zánětu (viz. výše) a potlačují růst leukemických buněk in vitro (Estrov a kol., Blood, 84, 380a (1994)). Avšak díky své peptidické povaze se tyto inhibitory vyznačují nežádoucími farmakologickými vlastnostmi, jako je špatná penetrace do buněk a buněčná aktivity, špatná absorpce při orálním podávání a rychlý metabolismus. (Plattner> J. J. a D,W.Norbeck, Drug Discovery Technologies, C. R. Clark a W. H. Moos (Ellis Horwood, Chichester, Anglie, 1990) str. 92-126. Tyto vlastnosti brání jejích využití jako účinných léčiv.
Je také známo, že ICE inhibují in vitro také nepeptydylové sloučeniny. PCT patentová přihláška WO 95/26958; US patent 5,552,400; Dolle a kol., J. Med. Chem., 39, str. 2438-2440 (1996) .
Neni však jasné, zda tyto sloučeniny mají vhodný farmakologický profil prd terapeutické využití.
··
Existuje tedy potřeba sloučenin, které budou účinně inhibovat kaspázu a které budou mít výhodnou in vivo aktivitu pro použiti jako činidel pro, prevenci a léčbu chronických a akutních forem onemocnění zprostředkovaných IL-1, apoptózou, IGIF a IFN-γ, a také zánětlivých onemocnění, autoimunních onemocnění, rozkladných onemocnění kosti, proliferativních poruch, nakažlivých onemocnění a degenerativních onemocnění.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález poskytuje novou třídu sloučenin a jejich farmaceuticky přijatelných derivátů, které jsou využitelné jako inhibitory kaspázy, zejména inhibitory ICE. Tyto sloučeniny mohou být použity samotné, nebo ve spojení s jinými léčebnými nebo profylaktickými činidly jako jsou antibiotika, imunomodulátory nebo jiná protizánětlivá činidla, pro léčbu nebo profylaxi onemocnění zprostředkovaných IL-1, apoptózou, IGIF nebo IFN-γ. V souladu s výhodným provedením jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu schopny vázat se na aktivní místo' kaspázy a inhibovat aktivitu tohoto enzymu.
Předmětem podle předkládaného vynálezu je poskytnout .novou třídu sloučenin obecného vzorce I, které mají výhodné in vivo profily:
kde jsou různé substituenty popsány podle předkládaného vynálezu. ,
Dalším předmětem podle předkládaného vynálezu je poskytnout farmaceutické kompozice, včetně mnohasložkových kompozic.
9 · ·
99 • 9 9·· • 9 9 · 9
9 · 9 9 9 • · 9 9 ·
9 ·« • 99
Předkládaný vynález také poskytuje způsoby použití a přípravy sloučenin podle předkládaného vynálezu a podobných sloučenin.
Podrobný popis vynálezu
Aby mohl být vynález lépe pochopen, následuje podrobný popis.
V předkládaném vynálezu se používají následující zkratky a definice.
Zkratky:
Ac2O
MeCn
AMC n-Bu
DMF
DIEA
DMA
EDC
Et2O
EtOAc
Fmoc
HBTU
HOBT
MeOH
NMP
TFA pNA , anhydrid kyseliny octové acetonitril aminomethy 1kumarin normální butylová skupina dimethylformamid
N,N-diisopropylethylamin
Ν,Ν-dimethylacetamid hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu diethylether ethylacetát
9-fluorenylmethyoxykarbony1
O-benzotriazol-l-yl-Ν,Ν,Ν',Ν'tetramethýluronium hexafluorfosfát hydrát 1-hydroxybenzotriazolu methanol
N-methylpyrrolidon kyselina trifluoroctová p-nitroanilin • · 9 9
999 99 · ·· • ·.'-··♦ * 9 9 9 9 ·
Definice
Termín „kaspáza znamená enzym, který je členem skupiny enzymů, které zahrnují ICE (viz. H. Hara, Ntl. Acad. Sci., 94, str. 2007-2012 (1997)) .
Termíny „HBV, „HCV, a „HGV znamenají virus hepa.titidy-B, virus hepatitidy-C a virus hepatitidy-G.
Termín ,,Κ£ znamená číselnou míru účinnosti sloučeniny inhibující aktivitu cílového enzymu, jako je ICE. Nižší hodnoty znamenají vyšší účinnost. Hodnota je odvozena pomocí úpravy experimentálně zjištěných údajů podle standardních rovnic pro kinetiku enzymů (viz. I. H. Segel, Enzyme Kinetics, WileyInterscience, 1975).
Termín „faktor indukující interferon gama nebo „IGIF znamená faktor, který je schopen vyvolat endogenní produkci IFN-γ.
Termín „inhibitor kaspázy znamená sloučeninu, která je schopna vykázat detekovatelnou inhibici jedné nebo více kaspáz. Termín „inhibitor ICE znamená sloučeninu, která je schopna inhibovat enzym ICE a popřípadě dále jednu nebo více dalších kaspáz. Inhibice ICE může být určena za použití postupů popsaných a uvedených jako odkazy.
Odborníci zjistili, že in vivo inhibitor enzymu není nutně in vitro inhibitorem enzymu. Například proléková forma sloučeniny typicky vykazuje nízkou nebo · žádnou aktivitu při in vitro testech. Takové prolékové formy mohou být přeměněny pomocí metabolického nebo jiného biochemického postupu v těle pacienta za získání in vivo inhibitoru ICE.
Termín „cytokin znamená molekulu, která zprostředkuje interakce mezi buňkami.
• ·
*· ·· • · · · · • 9 9 9 9
9 9 9 9 · • · 9 9 9
Termín „stav znamená jakékoli onemocnění, poruchu nebo účinek, který způsobuje škodlivé biologické následky pro subjekt.
Termín „subjekt znamená živočicha nebo jednu něbo více buněk živočišného původu, S výhodou je živočichem savec, výhodněji člověk. Buňky mohou být v jakékoli formě, včetně, ale bez omezení, buněk ponechaných v tkáních, shluků buněk, imortalizovaných buněk, transfektováných buněk nebo transformovaných buněk a buněk odvozených od živočichů, které jsou fyzikálně nebo fenotypicky pozměněné.
Termín „pacient, jak je podle vynálezu používán, označuje libovolného savce, zejména člověka.
Termín „alkylová skupina je přímý nebo rozvětvený, nasycený alifatický uhlovodík obsahující 1 až 6 atomů uhlíku.
Termín „alkenylová skupina znamená přímý nebo rozvětvený nenasycený uhlovodík obsahující 2 až 6 atomů uhlíku a nejméně jednu dvojnou vazbu.
Termín „alkinylová skupina znamená přímý nebo rozvětvený nenasycený uhlovodík obsahující 2 až 6 atomů uhlíku a nejméně jednu trojnou vazbu.
Termín „cykloalkylová skupina znamená mono- .nebo polycyklický, nearomatický uhlovodíkový kruhový systém, který může popřípadě obsahovat nenasycené vazby v kruhovém systému. Mezi příklady patří cyklohexylová skupina, adamantylová skupina, norbornylová skupina a spirocyklopentylová skupina.
Termín „arylová skupina znamená mono- nebo polycyklický kruhový systém, který obsahuje 6, 10, 12 nebo 14 atomů uhlíku, ve kterém je alespoň jeden kruh aromatický. Arylové skupiny podle předkládaného vynálezu jsou popřípadě jednou, nebo vícekrát ···· ·» ··· ·· ·· ·· substituované skupinou Ř11. Mezi příklady patří fenylová skupina, naftylová skupina a tetrahydronaftylová skupina.
Termín „heteroarylová skupina znamená mono-.nebo. polycyklický kruhový systém, který obsahuje 1 až 15 atomů uhlíku a 1 až 4 heteroatomy, přičemž je alespoň jeden z kruhů aromatický. Heteroatomy jsou atom síry, dusíku nebo kyslíku. Heteroarylové skupiny podle předkládaného vynálezu jsou popřípadě jednou nebo vícekrát substituované skupinou R11.
Termín „heterocyklická skupina,, znamená mono- nebo. polycyklický kruhový systém, který obsahuje 1 až 15 atomů uhlíku a 1 až 4 heteroatomy, kde mono- nebo polycyklický kruhový systém může popřípadě obsahovat nenasycené vazby, ale není aromatický. Heteroatomy jsou nezávisle na sobě atom síry, dusíku a kyslíku.
Termín „alkylarylová skupina znamená alkylovou skupinu, kde atom vodíku alkylové skupiny.je nahrazen arylovou skupinou.
Termín „alkylhetéroarylová skupina znamená alkylovou skupinu, kde atom vodíku alkylové skupiny je nahrazen heteroarylovou skupinou.
Termín „aminokyselinový postranní řetězec znamená jakoukoli skupinu připojenou k ct- uhlíku přírodní, nebo nepřírodní aminokyseliny.
Termín „substituovaný znamená nahrazení atomu vodíku ve sloučenině substituující skupinou.
Termín „přímý řetězec znamená postupně nerozvětvený řetězec kovalentně vázaných atomů. Přímý řetězec může být substituovaný, ale tyto substituenty netvoří součást přímého řetězce.
·· ·· ·♦ • · · · • · · « · · • · · • · · · · · • · · • · · • · · ·· to · ·
V chemických vzorcích znamenají kulaté závorky způsob vazby v molekulách nebo skupinách. Závorky se používají zejména pro vyznačení: 1) že k příslušnému atomu je vázán více než jeden' atom nebo skupina; 2) místa rozvětvení (tj . atom těsně před otevřením závorky je vázaný jak k atomu nebo skupině v závorkách, tak k atomu nebo skupině těsně za ukončením závorky). Příkladem prvního použití je skupina „-N(alkyl)2, která znamená, že jsou dvě alkylové skupiny vázané k atomu dusíku. Příkladem druhého použití je .skupina ,,-C(O)NH2, která znamená, že karbonylová skupina a aminoskupina („NH2) jsou obě vázány k vyznačenému . atomu uhlíku. Skupina -C(O)NH2 může být znázorněna jinými -způsoby, včetně následující struktury:
Substituenty mohou být znázorněny v různých formách. Tyto různé formy jsou odborníkům pracujícím v této oblasti známé a ' mohou se používat zaměnitelným způsobem. Například methylový' substituent na fenylovém kruhu může být znázorněn v následujících formách':
Různé formy substituentů, jako je methylová skupina, se podle vynálezu používají zaměniteným způsobem.
Pokud je to nutné, jsou další definice uvedeny v popise.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu
Sloučeninami podle provedení A podle předkládaného vynálezu jsou sloučeniny vzorce I:
X je skupina -C(R3)2- nebo skupina -N(R3)-;
m je 0 nebo 1;
R je atom vodíku, skupina -C(O)R8, skupina -C(O)C(O)R8, skupina -S(O)2R8, skupina -S(O)Ra, skupina -C(O)ORa, skupina C(O)N(H)Ra, skupina -S (0) 2N (H) -R8, skupina -S (0) N (H) -R8, skupina -C (0) C (0) N (H) R8, skupina -C (0) CH=CHR8, skupina -C(O)CH2ORa, skupina -C (0) CH2N (H) R8, skupina -C (0) N(R8) 2, skupina -S (0) 2N (R8) 2, skupina -S(O)N(R8)2, skupina -C (O) C (0) N (R8) 2, skupina -C(O)CH2N(R8)2, skupina -CH2R8, skupina -CH2-alkenyl-R8, nebo skupina CH2-alkinyl-R8; ·· • Φ φφ • ΦΦΦ ·· φ ·· φφφ · « φ φ φ · φ φ φ · · φφφ φφ φ φ φ φ φ φ φ φ • φ * φ φφ φφ
R2 je skupina -Η a každá skupina R3 je nezávisle skupina -H, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl-R9, nebo skupina alkinyl-R9, nebo R2 jedna skupina R3 společně s atomy,, ke kterým jsou vázány, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylová skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -Rn, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
R4 je skupina -H a každá skupina Rs je nazávisle skupina -H, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, Skupina alkenyl-R9, nebo skupina -alkinyl-R9, nebo skupina R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde atom vodíku vázaný k. jakémukoli atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylová skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
Rs je skupina -H ;
R7 je skupina -OH, skupina -OR8, nebo skupina -N(H)OH;
každá skupina R8 je nezávisle -alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -arylová. skupina, -heteroarylové skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina, -alkylarylová skupina, -alkylheteroarylová skupina nebo -alkylheterocyklylová skupina,
«· • e· ··
• « « • ·· · • * • • •
• • « • · • • • •
•
• • • • · 9 • • • •
···· ·· ··· »· ·· ··
kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylové skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R9 je nezávisle -arylová skupina, -heteroarylová skupina, cykloalkylové skupina, nebo -heterocyklylová.skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylové skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen, skupinou -R11, a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen, skupinou -R1;
každá skupina R10 je nezávisle skupina -OH, skupina -SH, skupina -F, skupina -Cl, skupina -Br, skupina -I, skupina -N02, skupina -CN, skupina -NH2, skupina -CO2H/ skupina -C(O)NH2, skupina ' -N(H)C(O)H, skupina -N (H) C (0) NH2, -perf luoralkylová skupina, -0-alkylová skupina, -0-arylová skupina, -O-alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, -N(H)arylová skupina,
N(H)-alkylarylová skupina, skupina -N(alkyl)2, -C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -C(O)N(alkyl)2, -N(H)C(0)alkylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -N(H)C(O)N(alkyl)2, -S-alkylová skupina, -S-arylová skupina, -S-alkylarylová skupina, -S (0) 2alkylová skupina, -S(0)alkylová skupina, -C(0)alkylová skupina, skupina -CH2NH2, -CH2N (H) alkylová skupina, nebo skupina -CH2N(alkyl) 2.,„ -alkylová skupina, -cykloalkylové skupina, -arylová skupina, -heteroarylová skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylové skupina, -alkylarylová skupina, alkylheteroarylová skupina, nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde.atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku -arylové
skupiny nebo -heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku je ' ' i popřípadě nahrazen skupinou R1; a každá skupina R11 je nezávisle skupina -OH, skupina -SH, skupina -F, skupina -Cl, skupina -Br, skupina -I, skupina -NO2, skupina -CN, skupina -NH2, skupina -CO2H, skupina -C(O)NH2, skupina -N(H)C(O)H, skupina -N(H)C(O)NH2, -alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -perfluoralkylová skupina, -O-alkylová skupina, -O-arylová skupina, -O-alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, '-N(H)arylová skupina, -N(H)-alkylarylová skupina,, skupina -N(alkyl)2, -C(O)N(H)alkylová skupina, skupina -C (0) N (alkyl) 2, -N (H) C (0) alkylová skupina, -N (H) C (0) N (H) alkylová skupina, skupina -N(H)C(0)N(alkyl)2, -S-alkylová skupina, -S-arylová skupina, -S-alkylarylová skupina, -S (0) 2alkylová skupina, -S(0)alkylová skupina, -C(O)alkylová skupina, skupina -CH2NH2, -CH2N (Ή) alkylová skupina, nebo skupina -CH2N (alkyl) 2.
V alternativní formě provedení A:
R1 je H, skupina -R8, skupina -C(O)Ra, skupina -C(O)C(O)R8, skupina -S(O)2R8, skupina -S(O)R8, skupina -C(O)OR8, skupina C(0)N(H)R8, skupina -S (O) 2N (H) -R8, skupina -S (O) N (H)-R8, skupina -C (0) C (0) N (H) R8, skupina -C (0) CH=CHR3, skupina -C(O)CH2OR8, skupina -C(O) CH2N(H)R8, skupina -C(O)N(R8)2, skupina -S (Ό) 2N (R8) 2, skupina -S(O)N(R8)2, skupina -C (0) C (0) N (R8) 2, skupina -C(0)CH2N(R8)2, skupina -CH2R8, skupina -CH2-alkenyl-R8, nebo skupina -CH2-alkinyl-R8 ;
R2 je skupina -H a každá skupina R3 je nezávisle skupina -H, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl -R9, nebo skupina alkinyl-R9, nebo každá skupina R3, společně s atomem, ke kterému je vázána, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo he.terocyklický kruhový systém, nebo R2 a • β '· ·
jedna skupina R3, společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří: tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlí.ku alkylové skupliny nebo cykloalkylová skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R10 je nezávisle skupina -OH, skupina -SH, skupina -F, skupina -Cl, skupina -Br, skupina -I, skupina -N02, -CN, skupina -NH2, skupina -CO2H, skupina -C(O)NH2, skupina N(H)C(O)H, skupina -N(H)C(0)NH2, -perfluoralkylová skupina, -0alkylová skupina,. -0-arylová skupina, -0-alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, -N(H)arylová skupina, -N(H)-alkylarylová skupina, skupina -N(alkyl)2, -C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -C(0)N(alkyl)2, -N(H)C(0)alkylová skupina, -N(H)C(0)0alkylová skupina, -N(H)C(0)Oarylová skupina, -N(H)C(0)Oalkylarylová skupina, -N(H)C(0)Oheteroarylová skupina, -N(H)C(0)0alkylheteroarylová skupina, -N(H)C(0)Ocykloalkylová. skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -N(H)C(0)N(alkyl)2, -N(H)C(0)N(H)arylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylarylová skupina,, -N(H)C(0)N(H)heteroarylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylheteroarylová' skupina, -N(H)C(0)N(H)cykloalkylová skupina, -Salkylová skupina, -S-aryiová skupina, -S-alkylarylová skupina, -S (0) 2alkylová skupina, -S(0)alkylová skupina, -C(0)alkylová skupina, skupina -CH2NH2, -CH2N (H) alkylová skupina, nebo skupina -CH2N(alkyl)2, -alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -arylová skupina, -heteroarylová skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina, -alkylarylová skupina, -alkylheteroarylová skupina, nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11
a atom· vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku je popřípadě nahrazený skupinou -R1; a další substituenty jsou definovány výše.
S výhodou ve výše uvedených provedeních:
m j e 0 ;
R2 je -H ; jedna . skupina R3 je -H druhá skupina R5 je skupina R3, skupina -alkenyl-R9, nebo skupina -alkinyl-R9; nebo
R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je nahrazen skupinou R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou R1, kde kruhovým systémem je:
• · '
V alternativním výhodném provedení X je skupina C(R3)2 nebo R3 je aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl-R9, nebo skupina alkinyl-R9.
Výhodněji jedna skupina R3 je -H a druhá skupina R3 je alkylová skupina; nebo
R4 jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický heterocyklický kruhový systém, kde jakýkoli atom vodíku vázaný k atomu uhlíku kruhového' systému je popřípadě nahrazen skupinou R10 a jakýkoli atom vodíku vázaný k atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou R1, vybranou ze skupiny, kterou tvoří:
Nej výhodněji je jedna skupina R3 atom vodíku a druhá skupina R3 je skupina -C(H) (CH3)2 nebo -C(.CH3)3; a
R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázánhy, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde jakýkoli atom vodíku vázaný k atomu uhlíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou R10 a jakýkoli atom vodíku vázaný k atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou R1 vybranou ze skupiny, kterou tvoří:
• 4 · · * *
4 · 4 4 ·
V alternativním nejvýhodnějším provedení jedna skupina R3 je atom vodíku a druhá skupina R3 je methylová skupina, skupina -C (H) (CH3)2 nebo skupina -C(CH3)3 a R4 a R5 jsou přímo definovány výše.
Podle dalšího provedeni B předkládaný vynález poskytuje slou-
r8C)H
s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, tvoří kruh (g): JO
'N (g)
R12 je -C (0) alkylová skupina, -C (0) cykloalkylová skupina,. -C(0)alkyenylová ‘skupina, -C(0)alkylarylová skupina, -C(0)alkylheteroarylová skupina, -C(0)heterocyklylová skupina, nebo -C(0)alkylheterocyklylová skupina;
R13 je -H, -alkylová skupina, -arylová skupina, -alkylarylová skupina nebo -alkylheteroarylová skupina; a ostatní substituenty jsou popsány výše.
S výhodou v (c) , (d) , (e) , nebo (f) , Ra je methylová skupina, ethylová skupina, n-propylová skupina, isopropylová skupina, cyklopentylová skupina, fenethylová skupina nebo benzylová skupina.
Výhodné definice pro další jednotlivé složky provedení B jsou stejné, jako bylo uvedeno výše pro A.
Výhodné provedení C podle předkládaného vynálezu poskytuje sloučeninu vzorce I:
kde Y je:
(a)
R7 m
.H nebo (b)
HO H • · ·· » . ··· ·· ·· • ·· · ♦ · ♦ * · «· · • · · · · · · · · * • · · * · · ··· ·· · • · · · · · · · · · ··»· ·· ··· ·· ·· ·· m je O nebo 1;
X je skupina -C(R3)2
R1 je H, skupina -R8, skupina -C(O)R8, skupina -C(O)C(O)R3, skupina -S.(O)2R8, skupina -S(O)R8, skupina -C(O)OR8, skupina C(O)N(H)R8, skupina -S (O) 2N (H)-R8, -S (O) N (H)-R8, skupina -C(O)C(O)N(H)R8, skupina -C (O) CH=CHR8, skupina -C(O)CH2OR8, skupina -C(O)CH2N(H)R8, skupina -C(O)N(R8)2, skupina -S (O) 2N (R8) 2, skupina -S(O)N(R8)2, skupina -C (O) C (Q) N (R8) 2, skupina -C (O) CH2N (R8) 2, skupina -CH2R8, skupina -CH2-alkenyl-R8, nebo skupina -CH2alkinyl-R8;
R2 je -H a každá skupina R3 je nezávisle -H, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl-R9, nebo skupina alkinyl-R9, nebo každá skupina R3 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k.jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
R4 je -H každá skupina R5 je nezávisle -H, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina -alkenyl-R9, nebo skupina -alkinyl-R9, nebo R4 jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoři tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny fc· fcfc · fcfc fcfc fcfc • · · · fcfcfc .· · fcfcfc • fcfc fcfcfc fcfcfcfc • fc fcfc fcfc fcfcfc fcfc · • fcfc fcfcfc fcfcfcfc • fcfcfc fcfc fcfcfc fcfc fcfc fcfc je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípaděnahrazen skupinou -R1;
Rs je -H;
R7 je skupina -OH, skupina -OR8, skupina -N(H)OH, nebo skupina -N (H) S (0) 2R8 ;
každá skupina R8 je nezávisle -alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -arylová skupina, -heteroarylová.skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina -alkylarylová skupina, -alkylheteroarylová skupina, nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylová skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R9 j e nezávisle -arylová skupina, -heteroarylová skupina, cykloalkylová skupina, nebo -heterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylová skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom. vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá, skupina R10 je nezávisle skupina -OH, skupina -SH, skupina -F, skupina -Cl, skupina -Br, skupina -I, skupina -N02, skupina -CN, skupina -NH2, skupina -CO2H, skupina -C(0)NH2, skupina -N(H)C(0)H, skupina -N(H)C(0)NH2, -perfluoralkylová skupina, -0-alkylová skupina, -0-arylová skupina, -O-alkylary25 »· · ·
• fc • • fc ·· • fc
• • «· fc • • * • •
• • fc · • • • • •
•
• fc fc • • • • »
• · • fcfc fc · • fc • ·
lová skupina, -Ν(H)alkylová skupina, -Ν(H)arylová skupina, -Ν(H)-alkylarylová skupina, skupina -N(alkyl) 2, -C(0)Ν(H)alkylová skupina, skupina -C(0)N(alkyl)2, -Ν(H)C(0)alkylová skupina, -Ν(H)C(0)Oalkylová skupina, -N (H) C (0) Oarylová skupina, -Ν(H)C(0)Oalkylarylová skupina, -Ν(H)C(0)Oheteroarylová skupina, -Ν(H)C(0)Oalkylheteroarylová skupina, -Ν(H)C(0)Ocykloalkylová skupina, -Ν(H)C(0)Ν(H)alkylová skupina, skupina -N(H)C(0)N(alkyl)2, -Ν (H)C(0)Ν(H)arylová skupina,· -Ν(H)C(0)Ν(H)alkylarylová skupina, -Ν (H) C (O) N.(H) heteroarylová skupina, -Ν(H)C(O)Ν(H)alkylhetéroarylová skupina, -Ν(H)C(0)Ν(H)cykloalkýlová skupina, -S-alkylová skupina, -S-ayylová skupina, -Salkylarylová skupina, -S (0) 2alkylová skupina, -S(O)alkylová skupina, -C(0)alkylová skupina, skupina -CH2NH2, -CH2N(H)alkylová skupina, nebo skupina -CH2N (alkyl) 2, -alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -arylová skupina, -heteroarylová skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová. skupina alkylarylová skupina, -alkylhetéroarylová skupina, nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen · skupinou R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku je popřípadě nahrazen skupinou R1; a každá skupina R11 je nezávisle skupina -OH, skupina -SH, skupina -F, skupina -Cl, skupina -Br, skupina -I, skupina -N02, skupina -CN, skupina -NH2, skupina -CO2H, skupina -C(O)NH2, skupina -N(H)C(O)H, skupina -Ν (H) C (0) NH2, -alkylová skupina, cykloalkylová skupina, -perfluoralkylová skupina, -0-alkylová skupina, -0-arylová skupina, -O-alkylarylová skupina, -Ν(H)alkylová skupina, -N(H)arylová skupina, -Ν(H)-alkylarylová skupina, skupina -N(alkyl)2, -C(O)Ν(H)alkylová skupina, skupina C(0)N(alkyl) 2, -Ν(H)C(0)alkylová skupina, -Ν(H)C (0)Ν(H)alkylová skupina, skupina -Ν(H)C(O)N(alkyl)2, -S-alkylová skupina, -Sarylová skupina, -S-alkylarylová skupina, -S (0) 2alkylová sku* · „ , « · · ♦ ······ z o ······ ···»· ·· ·· pina, -S(0)alkylová skupina, -C(0)alkylová skupina, skupina CH2NH., -C.H2N (H) alkylová skupina, nebo skupina -CH2N (alkyl)2;
pod podmínkou, že pokud jedna skupina R3 je skupina -H, potom druhá skupina R3 není skupina -H.
Další výhodné provedení D podle předkládaného vynálezu poskytuje sloučeninu vzorce I, kde Y je:
r8o
h or8 (d)
nebo
OR'
OR8 do
NH
R(f) je -C(0)alkylová skupina, -C(0)cykloalkylová skupina,
C(0)alkyenylová skupina, -C(0)alkylarylová skupina, -C(0)alkylheteroarylová skupina, -C(O)heterocyklylová skupina, nebo C(0)alkylheterocyklylová skupina; a ostatní substituenty jsou popsány výše kromě 'toho, že obě skupiny R3 mohou být skupina. -H.
Ve všech provedeních A-D jsou výhodné sloučeniny, kde:
R1 je skupina -C(0)R8 nebo skupina -C (O) (0)R8;
R2 a jedna skupina R3 jsou skupina -H a druhá skupina R3 je aminokyselinový postranní řetězec, skupina -Ra, skupina alkenyl-R9, nebo skupina alkinyl-R9; nebo
R'' a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém vybraný ze skupiny, kterou tvoří:
• 9 « · 99 · · ·
• · ♦ ·
99 9 99
99 • 9 9 9
9.99 9 • 9 9 9
9 9 9
9 9
•.
pod podmínkou, že všechny kruhové systémy jsou popřípadě substituované jednou nebo více skupinami R10.
Alternativně jsou výhodnými sloučeninami provedení A-D sloučeniny, kde R3 je atom vodíku a další skupina R3 je methylová skupina, isopropylová skupina, terč.butylová skupina, skupina -CH.SR8, skupina ~ -CH2SO2R8, skupina -CH2CH2SR8, skupina -CH2CH2SOR8.
Dále jsou výhodnými sloučeninami provedení A-D sloučeniny, kde R4 a·jedna skupina Rs společně s atomy, ke'kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém:
a druhá skupina Rs je atom vodíku; nebo jedna skupina R3 je atom vodíku a druhá skupina R3 je methylová skupina.
Alternativně jsou výhodnými sloučeninami provedení A-D sloučeniny, kde R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém:
a- druhá skupina R5 je atom vodíku.
Ve výše uvedeném alternativním provedení je R10 s výhodou 4fluorová skupina nebo 4,4-difluorová skupina.
• 4 ·* ·· · · · ·
4 4
9 9 9
4 4
4994 49 4 '44 94 • 4 4 9
4 4 4
9 4 4
4 4 4
49
Nejvýhodnějšími sloučeninami podle předkládaného vynálezu jsou sloučeniny, kde R3 je methylová skupina,· a
R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou-vázány, tvoří kruhový systém: .
a druhá skupina Rs je atom vodíku.
Alternativně jsou sloučeniny, kde R3 R' společně s atom systém:
Ή R10 nej výhodnějšími sloučeninami je methylová skupina; a R4 a y, ke kterým jsou vázány, provedení A-D jedna skupina tvoří kruhový a druhá skupina R5 je atom vodíku; a je 4-fluoroskupina nebo 4,4-difluoróskupina.
Výhodnými kde Y je:
(B) nebo (D) jsou sloučeniny,
Specifické sloučeniny podle předkládaného vynálezu zahrnují příklady 5a-5bd, 7a-7at, 9a-9g, 15a-15f, 16a-16b, 17a-17e,
18a-18f, 20a-20t, 23a-23i, 24a-24e, 25a-25e, 26a-26h, 27a-27n, 28a-28c, 29a-29s, 32a-32e, 34, Gl, G2, 41, 42, 45, 46, 51,. 52, .56, 57, 60, 61, 64, 65, 68, 69, 72, 73, 76-93, 98a-z, aa-az, a ba-bb, 101, 102a, 102b, 108a-d, 110, 111,. 116a-h, 120a a b,
121, 122 a-v, a 123 a-c, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou obsahovat jeden nebo více „asymetrických atomů uhlíku a mohou se tedy vyskytovat ve formě racemátů nebo racemických směsí, jednotlivých enantiomerů, diastereomerních směsí a jednotlivých diastereomerů. Všechny steréogenní atomy uhlíku mohou mít R nebo S konfiguraci. Ačkoli mohou být specifické sloučeniny a struktury uvedené jako příklady podle předkládaného vynálezu znázorněny v určité stereochemické konfiguraci, vynález zahrnuje také sloučeniny a struktury, které mají také opačnou stereochemii na daném chirálním centru a dále také jejich směsi.
Všechny tyto isomerní formy těchto sloučenin jsou záměrně součástí podle předkládaného vynálezu, stejně jako jejich farmaceuticky přijatelné deriváty.
·· ·· • · · »
• · • ·· • 4 4
99
Termín „farmaceuticky přijatelný derivát znamená farmaceuticky přijatelné soli, estery nebo soli těchto esterů .sloučenin podle předkládaného vynálezu nebo jakékoli' jiné sloučeniny, které jsou po podávání pacientovi schopné poskytnout (přímo nebo nepřímo) sloučeninu podle předkládaného vynálezu nebo její aktivní metabolit nebo zbytek.
Farmaceuticky přijatelné soli sloučenin podle předkládaného vynálezu zahrnují například soli odvozené od farmaceuticky přijatelných anorganických a organických kyselin a baží. Příklady vhodných kyselin zahrnují kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu bromovodíkovou, kyselinu sírovou, kyselinu dusičnou, kyselinu chloristou, kyselinu fumarovou, kyselinu maleinovou, kyselinu fosforečnou, kyselinu glykolovou, kyselinu mléčnou, kyselinu salicylovou, kyselinu jantarovou, kyselinu p-toluensulfonovou, kyselinu vinnou, kyselinu octovou, kyselinu citrónovou, kyselinu methansulfonovou, kyselinu mravenčí, kyselinu benzoovou, kyselinu malonovou, kyselinu naftalen-2-sulfonovou a kyselinu benzensulfonovou. Další kyseliny, jako je kyselina šúave.lová, přestože nejsou samotné farmaceuticky přijatelné, mohou se použít při přípravě solí vhodných jako meziprodukty při přípravě sloučenin podle vynálezu a jejich farmaceuticky přijatlených kyselých adičních solí. Soli odvozené od příslušných baží zahrnuji solí alkalických kovů (například sodíku), soli kovů alkalických zemin (například hořčíku), amoniové soli a soli N-(alkyl)/ obsahující v každé alkylové části 1 až 4 atomy uhlíku.
Předkládaný vynález také předpokládá „kvarternizaci skupin obsahujících bazické atomy dusíku sloučenin podle vynálezu. Bazické atomy dusíku se mohou kvarternízovat jakýmkoli činidlem známým odborníkům pracujícím v této oblasti, přičemž mezi tato činidla patří například nižší alkylhalogenidy, jako jsou
4 4 4 4 4 4.-4 · · 4 • * · 4 4 4 4 4 4 4 • 4 44 4 4 444 44 · • 44 444 >444 ••44 44 444 44 44 44 methyl, ethyl, propyl a butylchloridy, bromidy a jodidy; dialkylsulfáty, včetně dimethyl, diethyl, dibutyl a diamylsulfátů; halogenidy s dlouhým řetězcem, jako jsou decyl, lauryl, myristyl a stearylchloridy, bromidy a jodidy a arylalkylhalogenidy včetně benzyl a fenethylbromidů. Pomocí takovéto kvarternizace se mohou získat produkty rozpustné nebo dispergovatelné v oleji nebo ve vodě.
Pokud jsou sloučeniny mnohokrát substituované, každý substituent může být vybrán nezávisle na ostatních substituentech, pokud taková kombinace poskytně stabilní sloučeninu.
Kombinacemi substituentů a proměnných podle předkládaného vynálezu jsou .pouze ty, které vedou ke vzniku stabilních sloučenin. Termín „stabilní znamená sloučeniny, které mají dostatečnou stabilitu, aby umožňovala výrobu a podávání savcům pomocí způsobů známých v této oblasti. Typicky jsou tyto sloučeniny stabilní při teplotě 40 “C.nebo nižší, v nepřítomnosti vlhkosti· nebo jiných chemicky reaktivních podmínek, alespoň jeden týden.
Výhodné sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou po orálním podání snadno absorbovat do krevního řečiště pacienta. Tato orální využitelnost umožňuje použití těchto sloučenin jako vynikajících činidel pro léčení a prevenci Onemocnění zprostředkovaných IL-1-, apoptózou, IGIF nebo IFN-γ orálním podáváním.
Je třeba poznamenat, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou existovat v různých rovnovážných formách, v závislosti na podmínkách, mezi které patří výběr rozpouštědla, pH, a další podmínky, které jsou odborníkům pracujícím v této oblasti známé. Předkládaný vynález výslovně zahrnuje všechny takové formy. Zejména se může mnoho sloučenin _ podle před• to • to • to • · · ··· ·· • · · • ••to ·· • to ·· to· · • to · • · · • ·· · ·· ·· kládaného vynálezu (zvláště sloučeniny obsahující aldehydovou nebo ketonovou skupinu a karboxylovou kyselinovou skupinu v Y) vyskytovat ve formě poloacetalu nebo hydrátu. Například sloučeniny podle provedení A jsou ve formě poloacetalu, když Y je:
V závislosti na výběru rozpouštědla a dalších podmínek, které jsou odborníkům v této oblasti známé, mohou být sloučeniny také ve formě hydrátů, acyloxyacetalů, acetalů nebo enolů. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou v hydratované formě, když Y je:
a R8 je atom vodíku;
ve formě acyloxyacetalů, když Y je:
ve formě acetalu, když Y je:
• · · • · a R3 je jiné, než atom vodíku;
• · 9
9 9 • fcfc • · 9 a ve formě enolů, když Y je:
OR
Dále je třeba poznamenat, že rovnovážné formy sloučenin podle předkládaného vynálezu mohou zahrnovat tautomerní formy. Všechny takové formy jsou výslovně součástí podle předkládaného vynálezu.
Sloučeniny vzorce I se mohou syntetizovat za použiti běžných způsobů. S výhodou se tyto sloučeniny běžně syntetizují ze snadno dostupných výchozích látek.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou připravit za použití způsobů popsaných podle předkládaného vynálezu. Jak budeodborníkům pracujícím v této oblasti zřejmé, tyto způsoby sami o sobě neznamenají, že je sloučeniny popsané a nárokované podle předkládaného vynálezu možné syntetizovat pouze tímto způsobem. Další způsoby budou odborníkům pracujícím v této oblasti zřejmé. Dále se mohou různé syntetické kroky vedoucí k požadovaným sloučeninám popsané podle vynálezu provádět v zaměněném pořadí.
Je třeba'poznamenat, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou modifikovat příslušnými funkčními skupinami za účelem zlepšení jejich určitých biologických vlastností. Tyto modifikace jsou odborníkům pracujícím v této oblasti známé a patří mezi ně úpravy zvyšující biologickou penetraci do daného biologického systému (například krevního, lymfatíckého systému, centrálního nervového systému), zvyšující orální biolo• Φ » φφ ·· <· φ φ φ φ Φ·· · · · · · φφφ φφφ ΦΦΦ Φ δ φφ φ φφ·φφφφ φφφφ φφ ··· ·* ·· ·· gickou využitelnost, zvyšující rozpustnost, aby bylo možné injekční podávání, změní metabolismus nebo změně rychlost vylučování. Dále se. mohou sloučeniny změnit do forem proléčiva tak, že požadovaná sloučenina vznikne v těle pacienta jako důsledek působení metabolických nebo biochemických procesů na proléčivu. Takové formy proléčiv typicky vykazují malou nebo žádnou aktivitu při in vitro testech. Mezi některé příklady proléčiv patří ketalové, acetalové, oximové, iminové a hydrazonové formy sloučenin, které obsahují ketonové nebo aldehydové skupiny, zejména pokud se vyskytují ve skupině Y sloučenin podle předkládaného vynálezu. Mezi další příklady proléčiv patří poloketalové, poloacetalové, acyloxyketalové, acyloxyacetalové, ketalové, acetalové a enolové formy, které jsou popsané podle předkládaného vynálezu.
Kompozice a způsoby
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou inhibitory kaspázy a zejména inhibitory ICE. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou tedy schopné zasáhnout a inhibovat onemocnění zprostředkovaná IL-1, apoptózou, IGIF a IFN-γ a tedy omezovat aktivitu tohoto proteinu při zánětlivých onemocněních, autoimunních onemocněních, destruktivních kostních onemocněních, proliferativních onemocněních, . infekčních . onemocněních a degenerativních onemocněních. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu například inhibují konverzi prekurzoru IL-Ιβ na maturovaný IL-Ιβ pomocí inhibice ICE. Protože je ICE esenciální pro vznik maturovaného IL-1, inhibice tohoto enzymu účinně blokuje iniciaci fyziologických účinků a symptomů zprostředkovaných IL-1, jako jsou záněty, pomocí inhibice vzniku maturovaného IL-1. Tedy pomocí inhibice aktivity prekurzoru IL-Ιβ sloučeniny podle předkládaného vynálezu účinně fungují jako inhibitory IL-1. 37
·· «« φ ·* ·· »·
• · • « • · · • • e • •
• • * • · • • • • φ
• • · • · • 4 • •
··*· ··· ♦♦ ·· • ·
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu také inhibují konverzi pro-IGIF na aktivní, maturovaný IGIF pomocí inhibice ICE. Protože je ICE esenciální pro vznik maturovaného IGIF, inhibice ICE účinně blokuje vznik fyziologických účinků a symptomů zprostředkovaných IGIF, pomoci inhibice vzniku maturovaného IGIF. IGIF je tedy esenciální, pro vznik IFN-γ. ICE tedy účinně blokuje vznik fyziologických účinků a symptomů zprostředkovaných IFN-γ pomoci inhibice vzniku maturovaného IGIF a tedy produkce IFN-γ.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou překvapivě biologicky využitelné ve srovnáni s peptidylovými inhibitory, které jsou popsané například v EP 618 223, EP 623 592, WO 93/09135, WO 93/16710, US patentu číslo 5,434,248, WO 95/35308 nebo WO 96/33209.
Farmaceutické, kompozice a způsoby podle předkládaného vynálezu budou tedy vhodně pro kontrolu aktivity kaspázy in vivo. Kompozice a způsoby podle předkládaného vynálezu budou tedy vhodné pro kontrolu hladiny IL-1, IGIF nebo IFN-γ in vivo pro léčení nebo zpomalení postupu, závažnosti nebo účinku onemocnění zprostředkovaných IL-1, apoptózou, IGIF nebo IFN-γ, včetně onemocnění, poruch nebo účinků.
Farmaceutické kompozice podle předkládaného vynálezu obsahuji sloučeninu vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl a farmaceuticky přijatelný nosič. Tyto kompozice mohou popřípadě obsahovat další terapeutické činidlo. Tato činidla zahrnuji protizánětlivá činidla, inhibitor matricové metaloproteázy, inhibitor lipoxygenázy, antagonistu cytokinu, imunosupresivum, protirakovinné činidlo, antivirové činidlo, cytokin, růstový faktor, imunomodulátor, prostaglandin nebo sloučeninu proti hyperproliferaci cév, vynález se však neomezuje pouze na tyto ··· ··» ···· ···· ·· *«· ·· ·· ·· příklady.
Termín „farmaceuticky přijatelný nosič zahrnuje netoxický nosič, který se může podávat pacientovi společně se sloučeninou podle předkládaného vynálezu a který neruší její farmakologickou aktivitu.
Farmaceuticky . přijatelné nosiče, které se mohou použít ve farmaceutických kompozicích podle předkládaného vynálezu, zahrnují iontoměniče, aluminu, stearát hlinitý, lecitin, sérové proteiny, jako je lidský sérový albumin, pufrovací látky, jako jsou fosfáty, glycin, kyselinu sorbovou, sorban draselný., částečné směsi glyceridu nasycených rostlinných mastných kyselin, vodu, soli nebo elektrolyty, jako je protaminsulfát, hydrogenfosforečnan sodný, hydrogenfosforečnan draselný, chlorid sodný, soli zinku, koloidní oxid křemičitý, trikřemičitan hořečnatý, polyvinylpyrrolidon, látky založené na celulóze, polyethylenglykol, sodnou sůl karboxymethylcelulózy, polyakryláty, vosky, blokové polymery polyethylen-polyoxypropylen, lanolin a samoemulgační systémy pro dodávání ,léku (SEEDS), jako jsou α-tokoferol, polyethylenglykol 1000 sukcinát, nebo další podobné polymerní doručovací materice.
Ve farmaceutických kompozicích obsahujících pouze sloučeninu z provedení A-D jako aktivní složku, mohou způsoby podávání těchto kompozic dále zahrnovat krok podávání dalšího činidla tomuto pacientovi. Tato činidla zahrnují protizánětlivá činidla, inhibitor matricové metaloproteázy, inhibitor lipoxygenázy, antagonistu cytokinů, imunosupresivum, protirakovinné činidlo, antivirové činidlo, cytokin, růstový faktor, imunomodulátor, prostaglandin nebo sloučeninu proti cévní hyperproliferaci, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „farmaceuticky přijatelné množství znamená množství • · • · · · · · ···· ·· ··· ·· účinné při léčení nebo zlepšení onemocnění zprostředkovaných IL-1, apoptózou, IGIF nebo IFN-γ u pacienta. Termín „profylakticky účinné množství znamená množství účinné při prevenci nebo zmírnění onemocnění zprostředkovaných IL-1, apoptózou, IGIF nebo IFN-γ u pacienta.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou použít běžným způsobem při kontrole hladiny IGIF a IFN-γ in vivo a pro léčení onemocnění nebo snížení postupu nebo závažnosti účinků, které jsou zprostředkovány IL-1, apoptózou, IGIF nebo IFN-γ. Tyto způsoby léčení, jejich dávkovači hladiny a režimy mohou být vybrány odborníkem pracujícím v této oblasti z dostupných způsobů a technik. '
Například se může sloučenina podle předkládaného vynálezu kombinovat s farmaceuticky přijatelnými přísadami pro podávání pacientovi trpícímu onemocněním zprostředkovaným IL-1, apoptózou, IGIF nebo IFN-γ farmaceuticky přijatelným způsobem a v množství účinném pro snížení závažnosti tohoto onemocnění.
Alternativně se mohou sloučeniny podle předkládaného vynálezu použít v kompozicích a způsobech pro léčení a ochranu pacientů proti onemocněním zprostředkovaným IL-1, apoptózou, IGIF nebo IFN-γ po delší dobu. Sloučeniny se mohou v těchto prostředcích použít buď samotné nebo' společně, s jinými sloučeninami podle předkládaného vynálezu způsobem, který odpovídá běžnému použití inhibitorů enzymů ve farmaceutických kompozicích. Například se může sloučenina podle předkládaného vynálezu kombinovat s. farmaceuticky přijatelnými přísadami, které jsou běžné pro použití ve vakcínách a mohou se.podávat v profylakticky účinných množstvích pro ochranu pacientů po delší časový úsek proti onemocněním zprostředkovaným IL-1, apoptózou, IGIF nebo IFN-γ.
Sloučeniny vzorce I se mohou také podávat společně s jinými inhibitory kašpázy nebo ICE, čímž se zvýší účinek léčení nebo profylaxe proti různým onemocněním zprostředkovaným IL-1, apoptózou, IGIF nebo IFN-γ.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou dále použít v kombinaci bud' s běžnými protizánětlívými činidly nebo . s inhibitory matricové metaloproteázy, inhibitory lipogenázy a antagonisty cytokinů jinými než IL-Ιβ.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou také podávat v kombinaci s imunomodulátory (například jako je bropirimin, antihumánní protilátka interferonu alfa, IL-2, GM-CSF, methioninenkefalin, interferon alfa, diethyldithiokarbamát,, nádorový nekrózní faktor, naltrexon a EPO), s prostaglandiny nebo protivirovými činidly (například jako je 3TC, polysulfatované polysacharidy, ganiclovir, ribavirin, acyclovir, interferon alfa, trimethotrexate a fancyclovir) nebo proléčivy těchto nebo podobných sloučenin pro prevenci nebo léčbu symptomů onemocnění zprostředkovaných IL-1, jako jsou záněty.
Pokud se sloučeniny podle předkládaného vynálezu podávají při kombinované terapii s jinými činidly, mohou se pacientovi podávat postupně nebo současně. Alternativně mohou farmaceutické nebo profylaktické kompozice podle předkládaného vynálezu obsahovat kombinaci sloučeniny vzorce I a dalšího terapeutického nebo profylaktického činidlaFarmaceutické kompozice podle předkládaného vynálezu se mohou podávat perorálně, parenterálně, pomocí inhalačního spreje, místně, rektálně, nasálně, bukálně, vaginálně nebo pomocí implantovaného zásobníku. Výhodné je perorální podávání. Farmaceutické kompozice podle vynálezu mohou obsahovat jakékoli běžné netoxické farmaceuticky přijatelné nosiče, přísady nebo vehikula. V některých případech se může pH kompozice upravit pomocí farmaceuticky přijatelných kyselin, baží nebo pufrů, čímž se zvýší stabilita formulované sloučeniny nebo její dodávací formy. Termín parenterální zahrnuje podle předkládaného vynálezu subkutánní, intrakutánní, nitrožilní, intramuskulární, intraartikulární, intrasynoviální, intrasternální, intrathekální, intralesionální a . intrakraniální injekční nebo infuzní techniky.
Farmaceutické kompozice mohou být bud' ve formě sterilních injektovatelných . přípravků, například sterilních injektovatelných vodných nebo olejových suspenzí. Tyto suspenze mohou být formulovány pomocí technik, které jsou odborníkům pracujícím v této oblasti známé, za použití vhodných dispergujících nebo zvlhčujících činidel (jako je například Tween 80) a suspendujících činidel. Sterilní injektovatelné přípravky mohou být také sterilní injektovatelné roztoky nebo suspenze v netoxických parenterálně přijatelných ředidlech nebo rozpouštědlech, například jako je roztok v 1,3-butandiolu. Mezi přijatelná vehikula a rozpouštědla, která se mohou použít, patří mannitol, voda, Ringerův roztok a. izotonický roztok chloridu sodného. Dále se jako rozpouštědlo nebo. suspendující médium používají sterilní, fixované oleje. Pro tento účel se mohou použít jakékoli směsi fixovaných olejů, včetně syntetických mono- nebo diglyceridů. Při přípravě injekčních prostředků jsou vhodné mastné kyseliny, jako je kyselina olejová a její glyceridové deriváty, jako jsou přírodní, farmaceuticky přijatelné oleje, jako je olivový olej nebo ricínový olej, zejména jejich polyethoxylované formy. Tyto olejové roztoky nebo suspenze mohou také obsahovat ředidla nebo dispergační činidla na bázi alkoholů s dlouhým řetězcem, které jsou popsány například v Pharmacopoeia Helvetica, nebo podobné alkoholy.
·· ·· > ·· ·· ·· • ·· · ··> · · · · · • toto ··· ···· ·· ·· ·· ··· ·· · • ·· ··· · ·· · ···· ·· ··· ·· ·· ··
Farmaceutické kompozice podle předkládaného vynálezu se mohou podávat perorálně v jakékoli perorálně přijatelné dávkovači formě včetně tobolek, tablet a vodných suspenzí a roztoků, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady. V případě tablet přo perorální použití se obvykle používají laktóza a kukuřičný škrob. Typicky se také přidávají lubrikační činidla, jako je stearát hořečnatý. Pro perorální podávání ve formě tobolek jsou vhodnými ředidly laktóza a sušený kukuřičný škrob. Pokud se perorálně podávají vodné suspenze a roztoky a propylenglykol, aktivní činidlo se smísí s emulgačním nebo suspendujícím činidlem. Pokud je to nutné, mohou se přidat určitá sladidla a/nebo příchutě a/nebo barviva.
Farmaceutické kompozice podle předkládaného vynálezu se mohou také podávat ve formě čípků pro rektální podávání. Tyto kompozice se mohou připravit smísením sloučeniny podle předkládaného vynálezu s vhodnou nedráždivou přísadou, .která je pevná při teplotě místnosti, ale kapalná při rektální teplotě a proto taje v rektu za uvolnění aktivních složek. Mezi takové látky patří kakaové máslo, včelí vosk a polyethylenglykoly.
Místní podávání farmaceutických, kompozic podle předkládaného vynálezu je zvláště vhodné, pokud se léčí místa nebo orgány, které jsou snadno dostupné pro místní aplikaci. Pro místní aplikaci na pokožku se mohou farmaceutické kompozice formulovat do formy vhodných mastí obsahujících aktivní sloučeniny suspendované nebo rozpuštěné v nosiči. Nosiče pro místní podávání sloučenin, podle předkládaného vynálezu zahrnují minerální oleje, kapalná vazelína, bílá vazelína, propylenglykol, sloučenina polyoxyethylen polyoxypropylen, emulgační vosk a voda, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady. Alternativně může být farmaceutická kompozice formulována do formy mléka nebo krému obsahujícího aktivní sloučeninu suspendovanou nebo • 9
rozpuštěnou v nosiči. Mezi vhodné nosiče patří minerální oleje, sorbitanmonostearát, polysorbát 60, cetylestery vosků, cetearylal.kohol, 2-oktyldodekanol, benzylalkohol a voda, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady. Farmaceutické kompozice podle předkládaného vynálezu se mohou také místné aplikovat do dolní části intestinálního traktu pomocé rektálních čípkových prostředků nebo vhodného klystýrového prostředku. Předmětem podle předkládaného vynálezu jsou také místně aplikované transdermální náplasti.
Farmaceutické kompozice podle předkládaného vynálezu se mohou také podávat pomocí nosního aerosolu nebo inhalačně. Tyto kompozice se připraví podle postupů, které jsou odborníkům v oblasti farmaceutických prostředků známé a mohou se připravit jako roztoky v šalinu, za použití benzylalkoholu nebo jiné vhodné konzervační látky, látky podporující absorpci pro zvýšení biologické využitelnosti, fluorovaných uhlovodíků a/nebo jiných solubilizačních nebo dispergačních činidel, která jsou odborníkům pracujícím v této oblasti známá.
Při monoterapii pro. prevenci a léčení onemocnění zprostředkovaných IL-1, apoptózou, IGIF a IFN-γ, mezi která patří zánětlivá onemocnění, autoimunní onemocnění, destrukční onemocnění kostí, proliferativní onemocnění, infekční onemocnění, degenerativní onemocnění, nekrotická onemocnění, zánětlivá peritonitida, osteoarthritida, akutní pankreatitida, chronická pankreatitida, astma, syndrom dýchacího stresu dospělých, glomerulonefritida, revmatoidní arthritida, systémový lupus erythematosus, skleroderma, chronická thyroidítida, Gravesova nemoc, autoimunní gastritida, diabetes mellitus závislý na insulinu (typ 1), autoimunní hemolytická anemie, autoimunní neutropenie, thrombocytopenie, chronická aktivní hepetitida, myastenia gravis, , zánětlivá střevní onemocnění, Crohnova nemoc, psoriáza, atopická dermatitida, onemocnění štěp vs. hostitel, osteoporóza, onemocnění kostí spojená s mnohočetným myelomem, leukémie a podobná onemocnění, myelodysplastický syndrom, akutní myelogenní leukemie, chronická myelogenní leukemie, metastatická melanom, Kaposiho sarkom, mnohočetný myelom, sepse, septický šok, Shigellosa, Alzheimerova nemoc, Parkinsonova nemoc, mozková ischemie, ischemie myokardu, spinální muskulární atrofie, mnohočetná skleróza,· encefalitida související s AIDS, stárnutí, vypadávání vlasů, neurologické poškození způsobené mrtvicí, ulcerativní kolitida, infekční hepatitida, mladický diabetes,lišej, akutní dermatomyositida, ekzém, primární cirrhosa, uveitida, Behcetova nemoc, atopické kožní onemocnění, čistá aplasie červených krvinek, aplastická anémie, amyotrofní, laterální skleróza, nefrotický syndrom a systémová onemocnění nebo onemocnění s účinkem lokalizvaným na játrech nebo jiných orgánech, která mají zánětlivou nebo apoptotickou složku způsobenou přebytkem konzumovaného alkoholu v potravinách nebo virem, jako je HBV, HCV, HGV, virus žluté horečky, virus dengue 'a virus japonské encefalitidy, jsou vhodné dávkovači ladiny mezi 0,01 až 100 mg/kg tělesné hmotnosti za den, s výhodou 0,5 až 75 -mg/kg tělesné hmotnosti za den a nejvýhodněji 1 až 50 mg/kg tělesné hmotnosti za den aktivní složky sloučeniny podle vynálezu.
Typicky se farmaceutické.kompozice podle předkládaného vynálezu podávají 1 až 5krát denně nebo alternativně jako kontinuální infuze. Toto podávání se může použít při chronické i akutní terapii. Množství aktivní složky, která se může kombinovat s nosičem za vzniku jednotlivé dávkovači formy, se bude měnit podle léčeného pacienta a konkrétního způsobu podávání. Typický - přípravek bude obsahovat 5 až 95 % hmotnostních aktivní složky. S výhodou takový prostředek obsahuje.20 až 80 % aktivní složky.
• · ·· 4 44 44 44
44 4 444 4 4 44 4
444 444 4 44 4 · · · 4444444
4444 44 444 44 44 44
Pokud kompozice podle předkládaného vynálezu obsahuje kombinaci sloučeniny vzorce I a jedné nebo více dalších terapeutických nebo profylaktických látek, budou jak sloučenina, tak další činidlo přítomny v dávkové hladině 10 až 80 % dávky normálně používané při monoterapii.
Po zlepšení stavu pacienta se může, pokud je to nutné, podávat pacientovi udržovací dávka sloučeniny, kompozice nebo kombinace podle předkládaného vynálezu.. Potom' se může dávka nebo frakvence podávání nebo obojí snížit, jako funkce symptomů, na hladinu, při které se udržuje zlepšený stav a pokud se symptomy zmírní na požadovanou hladinu, léčení se může ukončit. Může být však nutné pacienty občasně léčit po dlouhou doby při jakémkoli opakování onemocnění nebo symptomů.
Jak bude odborníkům v této oblasti zřejmé, je možné použít nižší nebo vyšší dávky, než bylo uvedeno, výše. Specifické dávkování a režimy léčby pro každého konkrétního pacienta budou záviset na různých faktorech, včetně aktivity specifické použité sloučeniny, věku, tělesné hmotnosti, celkového zdravotního stavu, času podávání, rychlosti vylučování, kombinace léků, závažnosti a průběhu onemocnění a dispozice pacienta k onemocnění a úsudku ošetřujícího lékaře.
Onemocnění zprostředkovaná IL-1 nebo apoptózou, která je možné léčit nebo předcházet sloučeninami podle předkládaného vynálezu, zahrnují zánětlivá onemocnění, autoimunní onemocnění, poruchy proliferace, infekční onemocnění a degenerativní onemocnění. Onemocnění zprostředkovaná apoptózou, která je možné léčit nebo předcházet sloučeninami podle předkládaného vynálezu, zahrnují degenerativní onemocnění, vynález se -však neomezuje pouze na tyto příklady.
Zánětlivá onemocnění,zprostředkovaná IL-1 nebo apoptózou, kte46 • · ·· · ·· · · · · • ·· ·' · · · · * · · · * · · · ♦ · · · · · • · ·· · · · · · · · · · .·· · · · ···· ···· ·· ··· ·· ·· ·· rá lze léčit nebo předcházet, zahrnují osteoarthritidu, akutní paňkreatitidu, chronickou pankreatitidu, astma, a syndrom dýchacího stresu dospělých, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady. Zánětlivá onemocnění s výhodou zahrnují osteoarthritidu nebo akutní pankreatitidu.
.Aptoimunní onemocnění zprostředkovaná IL-1 nebo apoptózou, která lze léčit nebo předcházet, zahrnují glomerulonefritidu, revmatoidní arthritidu, systémový lupus erythematosus, skleroderma, chronickou thyroitidu, Gravesovu nemoc, autoimunní gastritidu, diabetes mellitus závislý na insulinu (typu I), autoimunní hemolytickou anemií, autoimunní neutropenii, thrombocytopenii, chronickou aktivní hepatitidu, myasthenii gravis, mnohočetnou sklerózu, zánětlivé střevní onemocnění, Crohnovu nemoc, psoriázu, atopickou dermatitidu, a onemocnění /štěp vs. hostitel, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
S výhodou autoimunní onemocnění zahrnují revmatoidní arthritidu, zánětlivé střevní onemocněni, Grohnovu nemoc, psoriázu, nebo atopickou dermatitidu.
Destruktivní onemocnění kostí zprostředkovaná IL-1 nebo ·apoptózou, která lze léčit nebo předcházet, zahrnují osteoporózu a kostní onemocnění spojené s mnohočetným myelomem, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Proliferativní onemocnění zprostředkovaná IL-1 nebo apoptózou, která lze léčit nebo předcházet, zahrnují leukémii a podobná onemocnění, jako je myelodysplastický syndrom, akutní myelogenní leukémie, chronická myelogenní leukémie, metastatický melanom, Kaposiho sarkom a mnohočetný myelom, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.Infekční onemocnění zprostředkovaná IL-1 nebo apoptózou, která lze léčit nebo předcházet, zahrnují sepsi, septický šok a Shi-
• « 44 • 44 44 44
• 4 4 4 4 4 · 4 4 • 4 4
4 4 4 4 4 4 • 4 4 4
4
• 4 4 4 4 4 4 4 4 . 4
• · · 4 44 • 4 4 • 4 4 4 4 4
gellózu, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Degenerativní nebo nekrotická onemocnění zprostředkovaná IL-1 nebo apoptózou, která lze léčit nebo předcházet sloučeninami podle předkládaného vynálezu, zahrnují Alzheimerovu nemoc, Parkinsonovu nemoc, mozkovou ischemii a ischemii myokardu, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady. Degenerativní m onemocněním je s výhodou Alzheimerova nemoc.
Degenerativní onemocnění zprostředkovaná IL-1 nebo apoptózou, která lze léčit nebo předcházet sloučeninami podle předkládaného vynálezu, zahrnují Alzheimerovu nemoc, Parkinsonovu nemoc, mozkovou ischemii, ischemii myokardu,spinální svalovou atrofii, mnohočetnou sklerózu, encefalitidu související s AIDS, encefalitidu související s HIV, stárnutí, vypadávání vlasů, a neurologické poškození způsobené mrtvicí, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Pomocí sloučenin podle předkládaného vynálezu se mohou léčit další onemocnění, která mají zánětlivou nebo apoptotickou složku. Těmito onemocněními mohou být systémová onemocnění nebo onemocnění s účinkem lokalizovaným v játrech nebo jiných orgánech a mohou být způsobena například nadměrnou konzumací alkoholu v potravinách nebo viry, jako jsou HBV, HCV, HGV, virus žluté horečky, virus dengue a virus Japonské encefalitidy.
Onemocnění zprostředkovaná IGIF nebo IFN-γ, která se mohou léčit nebo předcházet pomocí sloučenin podle předkládaného vynálezu, zahrnují zánětlivá onemocnění, infekční, autoimunní, proliferativní, neurodegenerativní a nekrotické stavy, vynález se však neomezuje póze na tyto příklady.
Zánětlivá onemocnění zprostředkovaná IGIF nebo IFN-γ, která se
ΦΦ ·Φ φ ·· ·· ·· • φ φ φ · φ φ φ · φ ·· φ φφ φ φφ φ φ φφ φ • Φ φ φ φφ φφφ φφ φ • ΦΦ φφφ φφφφ φφφφ φφ φφφ φφ φφ φφ mohou léčit nebo předcházet pomocí sloučenin podle předkládaného vynálezu, zahrnují osteoarthritidu, akutní pankreatitidu, chronickou pankreatitidu, astma, revmatoidní arthritidu, zánětlivé střevní onemocnění, Crohnovu nemoc, ulcerativní kolitidu, mozkovou ischemii, ischemii myokardu a syndrom dýchacího stresu dospělých, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady. Zánětlivá onemocnění s výhodou zahrnují revmatoidní arthritidu, ulcerativní kolitidu, Crohnovu nemoc, hepatitidu nebo syndrom dýchacího stresu dospělých.
Infekční onemocnění zprostředkovaná IGIF nebo IFN-γ, která se mohou léčit nebo předcházet pomocí sloučenin podle předkládaného vynálezu, zahrnují hepatitidu, sepse, septický. šok a Shigellosu, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Autoimunní onemocnění zprostředkovaná IGIF nebo IFN-γ, , která se mohou léčit nebo předcházet pomocí sloučenin podle předkládaného vynálezu, zahrnují glomerulonefritidu, systémový lupus erythematosus, skleroderma, chronickou thyroitidu, Gravesovu nemoc, autoimunní gastritidu, diabetes mellitus závislý na insulinu (typu I), mladický diabetes, autoimunní hemolytickou anemii, autoimunní neutropenii, thrombocytopenii, myasthenii gravis, mnohočetnou sklerózu, psoriázu, lichenplanus, onemocnění štěp vs. hostitel, akutní dermatomyositidu,. ekzém, přiimární cirrhosu, hepatitidu, uveitidu, Behcetovu nemoc, atopické kožní onemocnění,- čistou aplasii červených krvinek, aplas-, tickou anemii, amyotrofní laterální sklerózu, a nefrotický syndrom, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
S výhodou autoimunní onemocnění zahrnují glomerulonefritidu, diabetes mellitus závislý na insulinu (typu I) , mladický diabetes, psoriázu, onemocnění štěp vs. hostitel nebo hepatitidu.
Výhodnější onemocnění, která lze léčit nebo předcházet, zahr49 •44 44 4 44, 4444
44 4 444 4 4 44 4
4 4 4 · · 4 44 4
4 4 44 444 4 4 4
44 444 44 4 4
4444 44 444 44 44 44 nují revmatoidní arthritidu, zánětlivé střevní onemocnění, včetně Crohnovy nemoci a ulcerativní kolitidy, zánětlivou peritonitidu, septický šok, pankreatitidu, traumatickou mozkovou příhodu, odmítnutí transplantovaného orgánu, osteoarthri-. tidu, astma, psoríázu, Alzheimerovu nemoc, atopickou dermatitidu nebo leukémie a podobná onemocnění, jako je myelodysplastický syndrom nebo mnohočetný myelom.
Podle jednoho provedení tedy předkládaný vynález poskytuje způsob léčení nebo prevence onemocnění zprostředkovaného IL-1 nebo apoptózou u pacienta, přičemž způsob zahrnuje krok podávání jakékoli sloučeniny, farmaceutické kompozice nebo požadované kombinace popsané podle vynálezu a farmaceuticky přijatelného nosiče pacientovi.
Další provedení podle předkládaného vynálezu poskytuje způsob potlačení produkce IGIF u pacienta, kdy způsob zahrnuje krok podávání jakékoli sloučeniny, farmaceutické kompozice nebo požadované kombinace popsané podle vynálezu a farmaceuticky přijatelného nosiče pacientovi.
Ještě další provedení podle předkládaného vynálezu poskytuje způsob snížení produkce IFN-γ u pacienta, kdy způsob zahrnuje krok podávání jakékoli sloučeniny, farmaceutické kompozice nebo požadované kombinace popsané podle vynálezu a farmaceuticky přijatelného nosiče pacientovi.
Ačkoli je předkládaný vynález zaměřen na použití sloučenin podle předkládaného vynálezu pro prevenci a léčení onemocnění zprostředkovaných IL-1, apoptózou, IGIF a IFN-γ, sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou také použít jako inhibiční činidla pro další cysteinové proteázy.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou také vhodné jako
·· ·· • · · • · ο ···» ·· • ·· komerční· reagencie, které se účinně váží ke kaspáze nebo jiným cysteinovým proteázám, mezi které patří ICE, vynález se však neomezuje pouez na tento příklad. Jako komerční reagenty se mohou sloučeniny podle předkládaného vynálezu a jejich deriváty použít pro blokování proteolýzy cílového peptidu při biochemických nebo buněčných testech na ICE a homologa ICE nebo se mohou derivátizovat tak, že se váží ke stabilní pryskyřici jako vazebnému substrátu pro použití při afinitní chromatografií. Tato a další použití, která charakterizují komerční inhibitory cysteinových proteáz, budou odborníkům pracujícím v této oblasti zřejmá. ,
Aby mohl být vynález lépe pochopen, jsou připojeny následující příklady. Tyto příklady slouží pouze pro ilustraci a rozhodně je nelze považovat za omezení rozsahu předkládaného vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Podmínky analytické vysokotlaké chromatografie (HPLC):
Kolona: C-18, velikost částic: 5 μ, velikost pórů: 100 A, Velikost kolony: 4,6 x 150 mm
Rozpouštědlo A: 0,1 % TFA/l % MeCN/98,9 % voda
Rozpouštědlo B: 0,1 % TFA/99,9 % MeCN
Gradient: A ku B během 20 minut při průtoku 1 ml/min
Kolona : Kyano, velikost částic: 5 μ, velikost pórů: 100 A, Velikost kolony: 4,6 x 150 mm,
Rozpouštědlo A: 0,1 % TFA/l % MeCN/98,.9 % voda
Rozpouštědlo B: 0,1 % TFA/99,9 % MeCN
Gradient: A/B = 99 %/l % ku 50 %/.5O % během 20 minut při průtoku 1 ml/min
·· Φ . ·· ·· e ·
• · • ··' ·· · · • · • ·
' · • · • · ♦ • · • ♦
• * · • · · • · • ·
···· ·« ·· - ·· ··
HPLC hmotová spektrální. analýza:
Hmotová spektrální analýza: Všechna hmotová spektrální data se měří za použití hmotového' spektrometru Micromass Quattro II triple quadrupole (Beverly, MA) opatřeného kapalinokružným elektronsprejovým ionizačním zdrojem. Hmotový spektrometr je spojen s HPLC systémem vyrobeným, společností Hewlett-Packard (HP1100). Automatickým samplerem systému je kapalinový manipulátor Gilson 215 (Middleton, WI). Celé zařízení se kontroluje pomocí software MassLynx od společnosti Micromass.
Hmotová spektrální analýza se provádí pomocí kapalinové chromatograf ie-MS pro určení čistoty za současného potvrzení molekulové hmotnosti. V případech, kdy se čistota vzorku určí jinými způsoby, se místo úplné chromatografické analýzy použije průtoková nástřiková analýza (FIA). Shromáždí se všechny případy jak pozitivních, tak negativních iontových spekter.
Podmínky získání hmotového spektra: Při všech experimentech byl hmotový spektrometr konfigurován v elektronsprejovém módu s kapalinokružnou odečtovou elektrodou. Pro snížení průtoku z HPLC na 40 % původního průtoku se použil separátor toku. Teplota u vstupu byla nastavena na 140 °C a průtok sušícího plynu byl nastaven na maximální signál. Rozlišení hmotového spektrometru bylo nastaveno na 0,65 amu FWHM a data se «
odečítala centroidním způsobem. Při pozitivním iontovém módu bylo kuželové napětí nastaveno na 25 V, kapilární napětí na 3,8 kV. Při negativním iontovém módu bylo kuželové napětí nastaveno na 25 V, kapilární napětí na 3,5 kV. Jak při pozitivním, tak při negativním iontovém módu byl čas získání úplného spektra 1 s při spínacím čase 0,25 sekundy mezi skeny. Rozsah hmoty skenovaný při očekávané molekulové hmotnosti nižší než 350 amu byl 70 až 500 m/z, zatímco u molekul s očekávanou
.·· » »* ·· »·
• « 9 « ·· · • R • •
• • · • · • • ♦ • •
•
• • · • · • • • • •
···· ·· ··· Φ» ·· ··
hmotností vyšší než 350 amu byl skenovaný poměr hmoty k náboji 200-1000 m/z.
Podmínky chromatografie: Kapalinová chromatografie se provádí za použití YMC AQ C18 kolony (150 mm x 3 mm při 5gm částicích a velikosti pórů 120 A) . Při analýze se MeCN s 0,2 % kyseliny mravenčí smísí s vodou s 0,2 % kyseliny mravenčí za vzniku elučního gradientu. Profil gradientu se skládá z výchozích 15 % MeCN:voda a množství MeCN se zvyšuje lineárně během 10 minut na 90 %. Tato koncentrace se udržuje konstantní 2 minuty a potom se nastaví výchozí podmínky. Během celé analýzy je průtok 0,9 ml/min.
Podmínky průtokové nástřikové analýzy: Při získávání FIA údajů se použije směs 1:1 vody a acetonitrilu. (přičemž obě kapaliny obsahují 0,2 %. kyseliny mravenčí) . Průtok se nastaví na 0,3 ml/min.
1H-NMR
Všechna 1H NMR spektra se získají za použití NMR spektrometru Bruker Instruments AMX-500 v daném rozpouštědle.
Způsoby syntézy
Obecný postup pro přípravu sloučeniny vzorce I, provedení C (Schémata I až VI)
Postup při přípravě analogů 5a-5bd
Schéma I
Ve schématech I-VIII znamená proměnná a je definovaná tak, jak je popsáno ve
LR připojení pryskyřice schématu I výše.
Krok 1: 6,7 g (0,8 mmol/gram vsádky, 5,36 mmol) pryskyřice obsahující hydrochlorid 4-methylbenzhydrylaminu (schéma I) se promyje 3x50 ml dimethylformamidu, 3x50 ml 10% DIEA/DMF a 3x50 ml N-methylpyrrolidinonu. K suspenzi promyté pryskyřice v 25 ml NMP se postupně přidá 3,5 g (1,1 ekvivalentu, 5,90 mmol) • · • ·· · · · · · · · · · ·········· · · · ·· · · · . · ···· ·· ··· ·· ·· »· sloučeniny vzorce 1, 3,1 ml (3,33 ekvivalentu, 17,70 mmol)
DIEA, 797 mg (1,1 ekvivalentu, 5,90 mmol) hydrátu 1-hydroxybenzotriazolu a 2,24 g (1,1 ekvivalentu, 5,90 mmol) O-benzotriazol-N,N,N,N-tetramethyluroniumhexafluorofosfátu (HBTU). Sloučenina vzorce T se připraví podle postupu popsaného v literatuře A.M. Murphy a kol., J. Am. Chem. Soc, 114, strany 3156-3157 (1992). Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc za použití ramenového míchadla.
Získaná směs se filtruje a pryskyřice se promyje dimethylformamidem, potom se reaguje s 12 ml 20% roztoku anhydridů kyseliny octové v dimethylformamidu 30 minut při teplotě místnosti. Směs se filtruje a pryskyřice se postupně promyje 2x50 ml dimethylformamidu, 50 ml methanolu, 2x50 ml směsi dimethyl- : formamidu a dichlormethanu 1:1, 50 ml methanolu a 3x50 ml dichlormethanu. Po sušení ve vakuu se získá 9,0 g pryskyřice 2 (0,48 mmol/gram navážky).
Krok 2: K 4,5 g pryskyřice 2 (0,48 mmol/gram, 2,16 mmol) se přidá 25 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu. Suspenze se míchá 5 minut při teplotě místnosti a potom se odstraní rozpouštědlo. Postup se opakuje po 20 minutách. Pryskyřice se potom postupně promyje 2x40 ml dimethylformamidu, 40 ml methanolu, 2x4 0 ml dichlormethanu, 4 0 ml methanolu a 40 ml NMP. K suspenzi pryskyřice v 4 0 ml NMP se postupně přidá 2,92 g N-Fmoc-prolinu (4 ekvivalenty, 8,64 mmol), 3,0 ml DIEA (8 ekvivalentů, 17,28 mmol), 1,17 HOBt (4 ekvivalenty, 8,64 mmol) a 3,27 g HBTU. (4 ekvivalenty, 8,64 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc a rozpouštědlo se odstraní. Tento kondenzační postup se zopakuje po 3 hodinách. Pryskyřice se potom postupně promyje 2x40 ml, dimethylformamidu, 40 ml methanolu, 2x40 ml směsi dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, 40 ml methanolu a 3x40 ml dichlormethanu a krátce se suší • · 4 ο· ve vakuu za získání pryskyřice 3.
Krok 3 : Suspenze pryskyřice 3 v .25 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu se míchá 5 minut při teplotě místnosti. Ze suspenze se odstraní rozpouštědlo. Postup se zopakuje po 20 minutách. Pryskyřice se postupně promyje 2x40 ml dimethylformamidu, 40 ml methanolu, 2x40 ml dichlormethanu, 40 ml methanolu, a 2x40 ml NMP. K suspenzi pryskyřice v 40 ml NMP se postupně přidá 2,93 g N-Fmoc-valinu (4 ekvivalenty, 8,64 mmol), 3,0 ml DIEA (8 ekvivalentů, 17,28 mmol), 1,17 g HOBt (4 ekvivalenty, 8,64 mmol) , a 3,2 g HBTU (4 ekvivalenty, 8,64 mmol) . Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Tento kondenzační postup se zopakuje po 3 hodinách. Pryskyřice se potom promyje 2x40 ml dimethylformamidu, 40 ml methanolu, 2x40 ml směsi dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, 40 ml methanolu a 3x40 ml dichlormethanu a suší se ve vakuu za získání pryskyřice 4 (0,45 mmol/gram).
Krok 4: K 0,05mmol podílu pryskyřice 4 se přidají 2 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu. Suspenze se míchá 5 minut při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Postup se zopakuje po 20 minutách. Získaná pryskyřice se potom postupně promyje 3x5. ml dimethylformamidu, 5 ml methanolu a 3x5 ml NMP. Potom se přidá, požadovaná karboxylová kyselina (4 ekvivalenty, 0,2 mmol), potom 0,8 ml 0,25M roztoku HOBt v NMP, 0,14 ml DIEA (8 ekvivalentů, 0,4 mmol) a 0,8 ml 0,25M roztoku HBTU v NMP. Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc a rozpouštědlo se odstraní. Pryskyřice se promyje postupně 2x5 ml dimethylformamidu, 5 ml methanolu, 2x5 ml směsi dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, 5 ml methanolu a 3x5 ml dichlormethanu a suší se ve.vakuu. K pryskyřici se potom přidá . 2ml část 95% roztoku kyseliny trifluoroctové ve vodě. Směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti a filtruje se. Filtrát se odpaří a zbytek se převede do směsi acetonitrilu a vody a čistí se pomocí preparativní vysokotlaké kapalinové chromatografie za získání sloučenin 5a-5bd.
Pokud není uvedeno jinak, získané produkty, podmínky analytické HPLC, HPLC retenční časy, čistota produktu a hmotová spektrální data získaná v příkladech 5a-5bd, 7a-7at, 9a-9g,
15a-15f, 16a-16b, 17a-17e,. 18a-18f, 20a-20t, 23a-23i, 24a-24e, 25a-25e, 26a-26h, 27a-27n, 28a~28c, 29a-29s, 32a-32e jsou uvedeny v tabulce 1.
Tabulka 1: Fyzikální údaje pro vybrané příklady
Př. Výtěžek (mg) HPLC gradient/ čas (min) Retenční čas (min) Čistota (%) Hmot. sp. (M+H nebo M+Na)
5a 1,0 5-45%/l0' 4,66 92 475,2
5b 1,0 5-45%/l01 6,86 85 457,2
5c 4,0 , 5-45%/l0' 5,98 85 469,2
5d 1,5 5-45%/10' 6,82 95 467,5
5e 1,0 5-45%/l0' 5,52 95 418,2
5f 0,6 5-45%/l0' 4,28 93 434,2
5g 6,4 10-60%/10’ 8,57 97 504,7(+Na)
5h 15,6 10-60%/10' , 4,51 99 459,2
5i 6,6 5%-90%/l0' 9,34 90 506,1
5j 5,1 5%-90%/l0' 10,04 . 95 506,1
5k 10,7 5%-90%/l0' 8,64 85 520,1
51 6,6 5%-90%/l0' 8,72 85 540,1
5m 6,8 5%-90%/l0' 7,89 85 502,0
5n 1,9 5%-0%/l0' 6,46 85 494,1
' 50 3,8 5%-90%/l0' 7,04 85 506,1
5p 6,8 5%-90%/l0' 11,62 95 576,0
5q 2,2 5%-90%/l0' 9,72 90 508,1
5r 3,8 5%-90%/l0' 7,27 85 462,1
5s 4,3 5%-90%/l01 6,46 90 470,1
5t 5,9 5%-60%/9' 60%-90 %/2’ 10,27 90 486,2
5u 3,1 5%-60%/9' 60%-90 %/2' 9,09 80 522,1
5v 1,0 5%-60%/9' 60%-90%/2' 11,63 85 502,2
5w 10,3 5%-60%/9' 60%-90%/2' 8,75 95 470,2
• 9 • · >9 ··
9 • 9 • 9 99 '
9« ·
• 9
9
Př. Výtěžek (mg) HPLC gradient/ čas (min) Retenční čas (min) Čistota (%) Hmo t. sp. (M+H nebo M+Na)
5x 8,8 5%-60%/9' 60%-90%/2' 8,88 95 565,1
5y 6,6 5%-60%/9' 60%-90%/21 12,32 95 518,2
5 z 10,2 5%-60%/9' 60%-90%/2' 12,63 95 502,2
5aa 2,5 5%-60%/9' 60%-90%/2' 9,57 95 554,1
5ab 7,8 ,5%-60%/9 ' 60%-90%/2' 10,54 85 538,2
5ac 1,4 5%-60%/9' 60%-90%/2' 9,2 8 95 476,2
5 ad 5,3 5%-60%/9' 60%-90%/21 6,51 85 469,2
5ae 4,3 5%-60%/9' 60%-90%/2' 9,81 95 551,1
5af 0,9 5%-60%/9' 60%-90%/2' 9,98 90 547,4
5ag 5,7 5%-60%/9' 60%-90%/2' 10,31 90 526,2.
5ah 1,4 5%-60%/9' 60%-90%/2' 8,13 85 542,1
5ai 10,9 10%-90%/l0' 5,88 ' 85 584,2
5aj 4,2 10%-90%/l01 5,89 90 556,2
5ak 7,8 10%-90%/l0' 5,54 85 568,3.
5al 8,4 10%-90%/l0' 6,25 95 516,2
5am 7,6 10%-90%/l0' ' 6,49 95 474,3
5an ' 6,2 10%-90%/l0' 6,00 95 500,2
5ao 9,4 10%-9Ó%/l0' 6,68 95. 581,3
5ap 6,4 10%-90%/lO' 4,30 90 500,3
5aq 5,2 10%-90%/l0' 6,45 95 559,2
5ar 1,4 10%-90%/l0' 5,38 90 561,3
5 as 16,2 10%-90%/l01 4,25 95 .475,2
5at 15,4 10%-90%/l01 6,68 95 560,3
5 au 5,9 10%-90%/l0’ 6,70 90 · 498,3 '
5av 4,1 10%-90%/l01 5,13 85 531,2
5aw 5,5 10%-90%/10’ 6,53 85 570,3
5ax 14,0 10%-90%/l0! 6,26 90 5 5 7,3
5ay 10,4 10%-90%/l01 6,52 90 510,3
5az 9,2 10%-90%/l0' 5,96 95 522,3
5ba 8,5 10%-90%/l0’ 6,69 95 562,3
5bb 4,6 10%-90%/l01 6,00 85 520,2
5bc 8,8 10%-90%/l01 4,96 90 546,2
• fc ·· fc fcfc fcfc * · · · fcfcfc · fc fcfc .*ίί· Σίίβίϊϊ fcfc « 'fcfc ··· fcfcfc •fcfcfc fcfc fcfcfc fcfc' fcfc
Př. Výtěžek (mg) HPLC gradient/ čas (min) Retenční čas (min) Čistota (%) Hmot. sp. (M+H nebo M+Na)
5bd 8,2 10%-90%/10' 8,01 95 536,3
7a 2,1 5-45%/ΙΌ' 5,28 86 440,2
7b 1,7 5-45%/l0' •4,12 ' 94 3 90,2
7c ' 0,5 5-45.%/l0 ' 4,04 94 . 434,2
7d 1,1 5-45%/l0' 4,29 95 441,2
7e 1,1 5-45%/10' 3,28 98 447,2 ' .
7f 1,0 5-45%/l0·' 3,96 97 420,2
7g 11,0 1O%-9O%/1O' 4,00 95 ' 483,4
7h 6,0 10%-90%/l0' , 4,90 95 439,3
7i 12,0 10%-90%/10' 6,40 95 474,3
7j 6,6 10%-90%/l0' 4,50 95 461,4
7k 4,0 10%-90%/l0' 5, 40 95 480,4
71 .8,6 10%-90%/l0' 2,61 95 435,3
7m 6,0 10%-90%/l0' 4,29 95 ' 438,4 '
7n 15,4 10%-90%/l0' 2,00 85 433,4
70 8,4 10%-90%/l0' 4,01 90 470,0
7p 3,0 10%-90%/l0' 4,61 95 434,4
7q 5,7 10%-90%/l01 3,89 95, 434,3
7r 8,8 10%-90%/l0' 2,94 95 42 5,3
7s 10,5 10%-90%/l0' - 3,89 90 433,4
7t 6,9 10%-90%/10' 2,45 85 419,3
7u 11,6 10%-90%/10' 1,98 85 433,3
. 7v 4,6 10%-90%/l0' 4,60 95 489,4
7w 13,8 10%-90%/10' 4,20 95 453,3
7x 6,0 10%-90%/l0' 3,90 95 483,2
7y 12,0 10%-90%/l0 ' 5,40 95 489,2
7z 10,0 10%-90%/l0' 5,40 95 517,2
7aa 11,0 10%-90%/l0' 5,30 95 453,8
7ab 10,0 10%-90%/l0' 5,60 95 595,1
7ac 3,9 10-60%/l01 4,59 88 , 469,2
7 ad 13,0 5-45%/l01 4,48 88 415,2
7ae 4,9 5-45%/l01 4,37 88 426,2
7af 20,6 5-45%/l0,0' 4,68 86 405,3
7ag 14,9 5-45%/l0' 4,7.8 82' 4.0 6,3
7ah 9,5 5-45%/l0' 7,40 91 447,3 (+Na)
7ai 10,8 5-45%/l0' 9,21 95 480,8(+Na)
7aj 8,3 5-45%/l0‘ 9,14 92 481,1(+Na)
7ak 13,6 5-45%/l0' 8,05 96 464,8(+Na)
7al 8,1 5-45%/l0' 7,04 ' 91 448,8(+Na)
7am 7,8 5-45%/l0' 8,54' 90 480,4 (+Na)
7an 4,3 5-45%/l0' 7,48- 88 460,9(+Na)
7ao 13,5 5-45%/l0' 7,45 92· 460,7(+Na)
7ap 2,5 5-45%/l0' 6,52 93 440,3(+Na)
φ Φ · · · φ · · · · φ • · φ φ · · φ φ φ φ φ · φφ» φφφ φφφφ
Př. Výtěžek (mg) HPLC gradient/ čas (min) Retenční čas (min) (%) .HírfQfc*. áp,? ’ (M+H nebo M+Na)
7aq 1,4 5-45%/10' 3,30 84 405,2
7ar 15,10 5-45%/l0' 3,79 97 41.3,3 0
7as 15,70 5-45%/l0' 5,50 8 8 441,30
7at 22,20 5-45%/l01 4,49 94 415,30
9a 0,5 10-60%/l0' 7,08 98 527,4(+Na)
9b . 1,2 10-60%/l0' 8,31 93 570,5(+Na)
9c 2,5 10-60%/l0' 8,46 97 569,6
9d 1,2 10-60%/l0' 7,22 85 562,1
9e 0,4 , 10-60%/l0' 7,86 95 543,2(+Na)
9f 4,3 10-60%/l0' 8,11 . 96 542,5
9g 2,1 10-60%/l0' 7,18 93 526,3
15a 1,0 10%-60%/l0' 5,76 95 477,6
15b 3,9 10%-60%/l0' 6,32 91 483,8
15c 2,9 10%-90%/l0' 3,30 85 463,3
15d 1,3 10%-90%/l01 4,26 95 531
15e 1,0 10%-90%/l0' 3,10 85 482,3
15f 1,2 10%-90%/l0' . 3,60 95 484,6
16a 2,5 . 10%-90%/l0' 2,80 95 456,3
16b 6,0 10%-90%/10' 1,90 95 454,2
17a 1,0 10%-90%/l01 3,30 85 496,8.
17b 1,1 10%-90%/l0' 3,62 85 498,3
... 17c 2,3 10%-90%/l01 5,80 95 573,2
17d 1,6 10%-90%/10' 1,60 95 525,1
17e 1,5 10%-90%/l0' 2,62 95 52 6,3
18a 1,0 10%-90%/l0' 3,90 95 528,3
18b 1,2 10%-90%/l0' 5,27· 95 562,3
18c 2,2 10%-90%/l0' 4,09 95 499,2
18d 1,5 10%-90%/l0' 3,78 95 498,3
18e 1,2 10%-90%/l0' 4,78 95 541,3
18f 7,1 . 10%-90%/l0' 3,84 98 526,1
20a 2,0 5-45%/l0' 6,95 91 483,2
20b 1,3 5-45%/l0' 7,58 99 482,2
20c 2,5 10%-90%/l0' 5,89 85 483,3
20d 4,3 10%-90%/l0' 4,09 90 471,3
20e 3,6 10%-90%/l0' 4,65 95 455,3
. 20f 12,2 10%-90%/l0' 3,25 95 518,3
?0g 12,1 10%-90%/10' 5,01 • 90 487,2
20h 3,3 10%-90%/10' 4,30 90 533,2
20i 5,0 10%-90%/l0' 4,16 90 485,2
20j 1,3 10%-90%/l01 3,45 85 531,2
20k 9,7 10%-90%/10' 5,41 90 516,2
201 3,8 10%-90%/l01 3,73 85 504,2
20m 6,6 10%-90%/l0' 4,52 90 488,2
• · • « • 4
44
4 4 4
4 4 4
4 4 4
4 4 · 4
444 4··
4 4
4 4 4
4 4 4
Př. Výtěžek (mg) HPLC gradient/ čas (min) Retenční čas (min) Čistota (%) Hmot. sp. (M+H nebo M+Na)
20η 1,8 10%-90%/l01 2,85 90 551,2
200 7,0 10%-90%/101 4,70 95. 520,2
20p i,2 10%-90%/l0' 4,00 95 566,2
20q 2,3 10%-90%/10' 4,93 95 481,3
20r 3,6 10%-90%/l0' 4,45 95 519, 3
2 Os 3,0 10%-90%/l0' 4,18 95 552,2
20t 6,0 10%-90%/l0' 3,80 90 . .517,4
23a 21, ,0 10-60%/l0' 8,11 99 495,4
23b 25,0 10-60%/101 8,94 99 539,8(+Na)
23c 2 6,0 10-60%/.10 1 8,55 , 99 539,9(+Na)
23d 12,6 10%-90%/l0' 3,90 8 5 453,3
23e 8,3 10%-90%/l01 5,16 85 501,3
23f. 12,5 10%-90%/10' 3,41 80 425,3
23g 1,5 10%-90%/l0' 3,34 85 452,3
23h 8,4 10%-9Ů%/l0' .3,84 ' 90 451,3 '
23i 9,0 10%-90%/l0' 3,78 85 469,4
24a 1,1 10-60%/l2' 8,76 90 480,5
24b 3,1 10-60%/l0' 5,14 90 375,4
24c 7,2 . ;10-60%/10 ' 10,33 96 531,0
24d . 3,4 10-60%/l0' 6,51 95 426,5(+Na)
24e 6,9 10-60%/l01 7,22 99 455,5
25a 1,9 5-45%/10' 5,38 85 455,2
25b 1,5 5-45%/l0' . 6,90 97 483,2
25c 1,0 5-45%/10' 8,09 94 497,2
25d 12,8 5-45%/l0' 5,75 88% 453,3
25e 9,5 5-45%/10' 7,76 90% 495,2
26a 10,2 5-45%/l0’ 7,36 95 455,1(+Na)
26b 1,1 5-45%/l0' 7,38 89 476,3
26c · 13,8 5-45%/10' 8,13 98 483,2
26d 2,3 5-45%/l0' 10,35 99 503,0
26e 12,8 5-45%/lQ' 11,11 99 523,2
26f 13,2 10-60%/l0' 12,11 99 545,0
2 6g 0,7 10-60%/l0' 10,89 87 523,2
26h 4,4 ' ΙΌ-60%/10'' 11,62 99 545,8
2 7a 5,0 10%-90%/l01 4,42 95 475,3
27b 16,4 10-60%/l0' 5,20 92 505,1
27c 2,7 5-45%/l01 7,50 82 476,6 (+Na)
27d 1,6 5-45%/121 8,70 90 503,2
27e. 4,4 5-45%/l21 7,80 .82 489,2
27f 1,2 5-45%/l2' 6,95 85 476,3
. 27g 2,5 5-45%/l2' 6,67 82 510,1
2 7h 1,1 5-45%/l2' 8,49 95 524,1
2 7i 0,9 5-45%/l21 7,34 90 J4 84,3
• «
61, ·· 9« «9 « · • ·
9
9999 99
99 99
9 9 9 9 9
9 9 * 9 9 * 9 9 9 9 « 9
9 9 9 9 9 <9 99 9·
Př. Výtěžek (mg) HPLC gradient/ čas (min) Retenční čas (min) Čistota (%) Hmot. sp. (M+H nebo M+Na)
27j 4,3 5-45%/l2' 5,77 82 470,3
27k 1,3 5-45%/l2' 5,33 95 551,1
271 16,6 5-45%/l0' 5,90 91 477,2
27m - 7,0 5-45%/101 7,70 93 494,2
27n 15,1 5-45%/l0' 3,99 86 466,2
28a 1,2 5-45%/l0' 5,91 86 487,1
28b 0,5 5-45%/l0' 6,86 ; 98 486,1
28c 1,5 5-45%/l0' 7,47 93 515,1
29a 4,5 5-45%/l2' 8,21 98 392
2 9b 28,0 5-45%/121 11,80 96 443,3
2 9c 1,7 5-45%/l0' 3,73 97 415,2
29d 1,7 5-45%/10' 4,62 89 414,2
29e 0,6 5-45%/10' . 4,94 85 436,2
29f 1,1 5-45%/l0' 6,23 97 442,2
2 9g 1,7 5-45%/l0' 6,39 90 457,2
29h 0,7 5-45%/l0' 3,56 92 408,2
29i 0,7 5-45%/l0' 6,50 96 431,2
29j 0,4 5-45%/l0' 7,24 89 445,2
29k 1,6 5-45%/l0' 7,07 90 456,2
291 0,9 5-45%/l0' 3,08 99 408,2
2 9m 1,5 10-60%/l0' 6,68 90 406,3
2 9n . 6/4 10-60%/l0' 4„ 27 87% 42 2/3
290 8,4 10-60%/10' 4,42 86% 422,3
29p 13,2 10-60%/l0' 5,62 83% 450,3
29q 15,1 5-45%/10’ 3,79 97% 413,3
29r 15,7 5-45%/l0' 5,50 . 88% 441,3
29s 19,9 5-45%/l0' 4,30 95% 394,3
32a 7,7 5-60%/20' 14,2 90 469,3
32b 4,0 5-60%/20' 13,4 85 485,1 (+Na)
32c 2,5 5-60%/20' 11., 1 90 459,3
32d 3,0 5-60%/20' 8,19 95 471,3
32e 4,9 5-60%/20' 14,2 90 486,2
·· 44 • · · ·
4 4 «··· 4» ' 44 44 *4 «44 4 4 44 ·
4 4 4 4 4 4 «4 444 44 4 • · 4 4 4 4 4 ··# ♦» 4 4 44
5d
5m
5g
.0
4 4 4 • 4 4 4
4 4 • 4 • 4 4
4 4 4
4 4
4 4
4· 4 4
4 4 4 4
- 44 • 4 4 4
4 4 4
4 4 4
4 4 4
44
• 9 9 ♦ • · 9 9 • · · . 9 * ·
99 9 «9 • ·· 99 ·· · 9 9 «99 9 • φ 9 9 · · » • · 9 · 9 9 9 · • · · 9 · 9 9
999 »9 99 99
O .0
5am to · to · • toto · to· · to« · * • · to » to· ·· to ·· · ♦ to to •
to to • to · to·· · toto • · · • ·· toto «· ··
Cl «4 44 » 4 4 4
4 4
4 « *
44 • · 4 ·
4 4 · · 4 »444 44
4 4 4 »4
5bc
5bd
Postup přípravy analogů 7a-7at,
Schéma II
Fmot\
Krok 4
R1-CO2H
Analoga 7a-7at se připraví pomocí postupu popsaného výše ve schématu I pouze náhradou Fmoc-valinu za Fmoc-alanin v kroku ’ 3 ('schéma II) ;
Krok 3: Suspenze 3,5 g (1,75 mmol) pryskyřice 3 v 20 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu se míchá 5 minut při teplotě místnosti. Ze suspenze se odstraní rozpouštědlo.
« · ♦ « · • · •« φ
·· φφ φφ ♦ · ···· » « · φφφ φφ φφ
Postup se zopakuje po 20 minutách. Pryskyřice se postupně promyje 2x3 0 ml dimethyl formamidu, 3 0 ml methanolu, 2x3 0 ml dichlormethanu, 30 ml methanolu, a 2χ30 ml NMP. K suspenzi pryskyřice v 30 ml NMP se postupně přidá 1,44 g N-Fmoc-alaninu (4 ekvivalenty, 7,0 mmol), 2,4 ml DIEA (8 ekvivalentů, 14,0 mmol), 0,95 g HOBt (4 ekvivalenty, 7,0 mmol), a 2,66 g HBTU (4 ekvivalenty, 7,0 mmol) . Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Tento kondenzační postup se zopakuje po 3 hodinách. Pryskyřice se potom promyje 2x30 ml dimethylformamidu, 30 ml methanolu, 2x30 ml směsi dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, 3 0 ml methanolu a 3x3 0 ml dichlormethanu a suší se ve vakuu za získání pryskyřice 6 (0,50 mmol/gram).
Krok 4: K 0,125mmol podílu pryskyřice 6 se přidá 5 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu. Suspenze se míchá 5 minut při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Postup se zopakuje po 20 minutách. Získaná pryskyřice se potom postupně promyje 3x5 ml dimethylformamidu, 5 ml methanolu a 3x5 ml NMP. Potom se přidá požadovaná karboxylová kyselina (4 ekvivalenty, 0,6 mmol), potom 2,0 ml 0,25M roztoku HOBt v NMP, 0,35 ml DIEA (8 ekvivalentů, 1,0 mmol) a 0,8 ml 0,25M roztoku HBTU v NMP. Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc a rozpouštědlo se odstraní. Pryskyřice se promyje postupně. 3x5 ml dimethylformamidu, 5 ml methanolu, 2x5 ml směsi dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, 5 ml methanolu a 3x5 ml dichlormethanu a suší Se ve vakuu. K pryskyřici se potom přidá 5ml část 95% roztoku kyseliny trifluoroctové ve vodě. Směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti a filtruje se. Filtrát se odpaří a zbytek se převede do směsi acetonitrilu a ' vody a čistí se pomocí preparativní vysokotlaké kapalinové chromatografie za získání sloučenin 7a-7at.
·· ·· • ·« ·· ' ··
• · • • •« « • • « • •
• • • • « Φ • · • •
•
• • • · » * • 4 · • •
··♦· ·· »*» · · »« ··
IZ
H2N
O
7g
Postup při
přípravě analog 9a-9g
Krok 1
Krok
Boc--N
CO2H
Krok 3
Krok 5 —,->.
O • · fc · · • fcfc fcfcfc · fcfc fc · · fcfcfc fc fcfcfcfc fcfc fcfcfc • fc • · . • fc fc
Krok 1: 10,0, g (0,75 mmol/gram navážky, 7,5 mmol) pryskyřice AgroPore.-aminomethyl (katalogové. číslo 800047) se promyje 3x40 ml dimethylformamidu, 3x40 ml 10% DIEA/DMF, 3x40 ml dimethylformamidu a NMP. K výše uvedené pryskyřici se postupně přidá 3,88 g (0,87 ekvivalentu, 6,55 mmol) sloučeniny 1, 3>13 g (1,14 ekvivalentu, 8,25 mmol) HBTU, 1,26 g (1,14 .ekvivalentu, 8,25 mmol) HOBt, a 40 ml NMP. Reagenty se potom smísí probubláváním dusíku přes dno baňky 2 minuty při teplotě místnosti. Přidá se 4,35 ml (3,33 ekvivalentu, 25 mmol) N,N-diisopropylethylaminu a získaná suspenze se přes noc míchá při teplotě místnosti, filtruje se, potom se postupně promyje 3x40 ml NMP a 3x40 ml dimethylformamidu. Pryskyřice se potom reaguje s 50 ml 20% roztoku anhydridu kyseliny octové v dimethylformamidu 38 minut při teplotě místnosti. Směs se filtruje a pryksyřice se promyje postupně 3x4 0 ml NMP, 3x40 ml dichlormethanu, 3x4 0 ml směsi methanolu a dichlormethanu 1:1 a 3x40 ml methanolu. Po sušení ve vakuu se získá 13,76 g pryksyřice 2 (0,35 mmol/gram navážky).
Krok 2: Sedm reakčních nádob (každá) se naplní 181 g pryskyřice 2 (0,48 mmol/gram, 0,063 mmol), potom se promyjí 3x1 ml dichlormethanu a 3x1 ml NMP. Potom se každá nádoba reaguje s 1 ml 25% roztoku piperidinu v dimethylformamidu a míchá se (vír) při teplotě místnosti 15 minut. Tento postup se zopakuje třikrát. Každá nádoba se potom promyje třikrát 1 ml NMP. Obsah nádob se potom reaguje s 500 μΐ 0,4M roztoku (2S,4R)-Fmoc-4amino-l-Boc-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (0,4M HOBT) v NMP, 500 μΐ 0,4M roztoku HBTU/NMP a 250 μΐ 1,6M roztoku DIEA/NMP a míchá se potom 3 hodiny při teplotě. místnosti. Po míchání se z nádob odstraní rozpouštědlo a postup se opakuje.
Krok 3 : Získaná pryskyřice se promyje 3x1 ml NMP a potom se
0 00 00 00 « 00 0 0 0 0 0 · 00 0
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0000 00 000 00 0« 0 0 zpracuje 1 ml 25% roztoku piperidinu v dimethylformamidu a míchá se (vír) 15 minut při'teplotě místnosti. Postup se zopakuje třikrát. Získaná pryskyřice se promyje 3x1 ml NMP a potom ' se reaguje bud' s anhydridem kyseliny octové nebo s isopropylisokyanátem nebo s methansulfonylchloridem nebo methylchloroformiátem. , Pro acetanhydrid: se přidá 3 00 μΐ 1,6M roztoku DIEA/NMP v 1 ml roztoku 0,5M acetanhydridu/O,125M DIEA/0,015M HOBt v NMP. . Pro isopropylisokyanát ·. se přidá 300 μΐ 1,6M roztoku DIEA/NMP a 1 ml roztoku 1M isopropylisokyanátu v NMP.
Pro methansulfonylchlorid: se přidá 600 μΐ roztoku 1M pyridinu v dichlormethanu a 600 μΐ roztoku 1M methansulfonylchloridu v dichlormethanu. Pro methylchloroformiátse přidá 500 μΐ 1,6M roztoku DIEA/NMP a 1 ml roztoku 0,7M methylchloroformiátu v dichlormethanu. Získané suspenze se míchají 6 hodin pří teplotě místnosti, rozpouštědlo se odstraní a kondenzační postup se zopakuje.
Krok 4: Získaná pryskyřice se promyje 3x1 ml NMP, potom se reaguje se směsí kyseliny trifluoroctové a dichlormethanu 1:1 30 minut při teplotě místnosti. Získaná pryskyřice se promyje 3x1 ml dichlormethanu a 3x1 ml NMP. Pryskyřice se potom reaguje s 500 μΐ roztoku 0,4M Fmoc-valin-karboxylové kyseliny/'0,4M HOBt/NMP, 500 μΐ roztoku 0,4M HBTU/NMP a 250 μΐ roztoku 1,6M DIEA/NMP a míchá se 3 hodiny při teplotě místnosti.
Po míchání se z nádob odstraní rozpouštědlo a kondenzační postup se. zopakuje.
Krok 5: Získaná pryskyřice se promyje 3x1 ml NMP, potom se reaguje s 1 ml 25% roztoku piperidinu v dimethylformamidu a míchá se (vír) 15 minut při teplotě místnosti. Postup se zopakuje třikrát, získaná pryskyřice se promyje 3x1 ml NMP, potom buď 500 μΐ rpztoku 0,4M 1-isochinolinkarboxylové kyseliny/0,4M ·· ·· » ·· ·« 44
4 · · · · 4 · 4 · 4
9 · · 9 9 9 4 9
9 4 - 4 9 9 4 4 4
7½ ···· *· ·♦· ·« 44 44
HOBt/NMP nebo 500 μΐ roztoku 0,4M p-anisové kyseliny/0,4M HOBt/NMP. Získaná směs se reaguje s 50 0 μΐ roztoku 0,4M HBTU/ NMP a 250 μΐ roztoku 1,6M DIEA/NMP, potom se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odstraní a postup se zopakuje. Získaná pryskyřice se reaguje s 1,5 ml 95% roztoku kyseliny trifluoroctové ve vodě a míchá se při teplotě místnosti jednu hodinu a filtruje se. Filtrát se odpaří a zbytek se převede do směsi 2:1:2 dimethylformamidu/acetonitrilu/vody a čistí se pomocí preparativní vysokotlaké chromatografie za získání sloučenin 9a-9g.
φ • · φ φ ♦ φ φ φ ' φ · φφφφ φφ φ φ φ φ φ * φ · φ φ φ φ φφ φφ
Postup při přípravě analogů 15-18
Schéma IV:
.CO2Bu-t
Fmoc< H
N'
r3
11, R3=CH(CH3)2
12, R3=CH3
Krok 5
15, R3=CH(CH3)2
16, R3=CH3
17, R3=CH(CH3)2
18, R3=CH3
Příprava analogů 15 a 16 (schéma IV) :
Syntéza 4 - terč.butylesteru 1-(9H-fluoren-9-ylm.ethyl) esteru 2(S)-piperazin-1,2,4 -trikarboxylové kyseliny
K roztoku 3 g (15 mmol) 2 -(S)-piperazinkarboxylové kyseliny (Lonza) v 30 ml směsi vody a dioxanu 1:1 se přidá roztok 3,3 g (15 mmol, v-5 ml dioxanu) (Boč)20 v dioxanu, přičemž se pH udr• ··· ··· ·· ·· · ··· · · · · · · · • · · · ·· ··· ·· · ··· ··♦···♦ ' ' ···· ·· ··· ·· ·· ·· zuje pomocí IN roztoku hydroxidu sodného na hodnotě.11. pH se udržuje 3 hodiny při teplotě místnosti. pH roztoku se potom pomocí IN kyseliny chlorovodíkové upraví na 9,5, ochladí se na 0 °C a reaguje se s 3,87 g (15 mmol) Fmoc-Cl. pH se udržuje 1 hodinu na hodnotě 9,5 a směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Získaná suspenze se filtruje a filtrát se zpracuje IN roztokem hydrogensíranu draselného na pH 2 a extrahuje se 2x75 ml ethylacetátu. Organická vrstva se promyje solankou a suší se síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se za získání bezbarvého oleje. Olej se rozpustí v ethylacetátu a přidá se k hexanu za získání 3,5 g (výtěžek 51 %) bílé pevné látky (po izolaci) . XH NMR spektrum (500 MHz, perdeuterodimethylsulfoxid) δ 1,55 (s, 9H) , 2,80-3,5 (m, 3H) , 3,8-4,9 (m, 5H) , 5,7 (šs,
1H) , 7,3 (m, 2H) , 7,3-7,9 (m, 8H) , kapalinová chromatografie/ hmotové spektrum (ES') múz 451,3 (M-H) .
Krok 1: K 5 g pryskyřice 2 (0,3 75 mmol/gram, 1,82 mmol) se přidá 2 5 ml 2 0% roztoku piperidinu v dimethylformamidu. Suspenze se míchá 5 minut při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Po 20 minutách se postup opakuje. Pryskyřice se potom postupně promyje 2x50 ml dimethylformamidu, 50 ml methanolu, 2x50 ml dichlormethanu, 50 ml methanolu a 50 ml NMP. K suspenzi pryskyřice v 25 ml NMP se postupně přidá 3,5 g (4 ekvivalenty, 7,48 mmol) N-Fmoc-Boc-piperazinkarboxylové kyseliny, 1,0 ml (8 ekvivalentů, 14,96 mmol) DIEA,· 1,01 g (4 ekvivalenty, 7,48 mmol) HOBt a 2,83 g (4 ekvivalenty, 7,48 mmol) HBTU. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Kondenzační postup se zopakuje po 3 hodinách. Pryskyřice se potom postupně promyje 2x50 ml dimethylformamidu, 50 ml methanolu, 2x50 ml směsi dimethylformamidu a dichlormethanu, 1x50 ml methanolu a 3x50 ml dichlormethanu a krátce se suší ve vakuu za získání pryskyřice 10.
·· · »· · · · · v« · » · · · · · · · • 4 4 44 · · 4 · 4 _4 44 44 444 44 4 r-τ O 444 4444444 /O 4444 44 444 4» 44 44
Krok 2: K 5 g (0,335 mmol/gram navážky, 1,675 mmol) pryskyřice 10 se přidá 25 ml 20% roztoku piperidinu v dimethalformamidu. Suspenze se míchá 5 minut při.teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Postup se zopakuje po 20 minutách. Pryskyřice se potom postupně promyje 2x50 ml dimethylformamidu, 50 ml methanolu, 2x50 ml dichlormethanu, 50 ml methanolu a 2x50 ml NMP. K suspenzi pryskyřice s 25 ml NMP se postupně přidá 2,08 g N-Fmoc-valinu nebo N-Fmoc-alaninu (4 ekvivalenty, 6,7 mmol), 1,17 ml (4 ekvivalenty, 6,7 mmol) DIÉA, 0,905 g (4 ekvivalenty, 6,7 mmol) HOBt a 1,38 g (4 ekvivalenty, 3,66 mmol) HBTU). Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Tento kondenzační postup se zopakuje po 3 hodinách. Pryskyřice se potom postupně promyje 2x50 ml dimethylformamidu, 50 ml methanolu, 2x50 ml směsi dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, 50 ml methanolu a 3x50 ml dichlormethanu a suší se ve vakuu za získání pryskyřice 11 nebo 12 (0,35 mmol/gram, 5g).
Krok 3: K 1,5- g (0,165 mmol) pryskyřice 11 nebo 12 se přidají 2 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu. Suspenze se míchá 5 minut při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Postup se zopakuje po 20 minutách. Získaná pryskyřice se postupně promyje 3x15 ml dimethylformamidu, 15 ml methanolu a 3x15 ml NMP. Potom se přidá požadovaná karboxylová kyseliny (4 ekvivalenty, 0,66 mmol), potom 0,25 g (0,66 mmol) HOBT, 0,12 ml (4 ekvivalenty, 0,66 mmol) DIEA a 0,89 g (0,66 mmol) HBTU v NMP. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Pryskyřice se postupně promyje 2x15 ml dimethylformamidu, 15 ml methanolu, 2x15 ml směsi dimethylformamidu a dichlormethanu, 15 ml methanolu a 3x15 ml dichlormethanu a suší se ve vakuu za získání pryskyřice 13 nebo .14.
Krok 4Potom se přidají k pryskyřici 2 ml 95% roztoku kyše79
líny trifluoroctové ve vodě. Směs se míchá při teplotě místnosti a filtruje se. Filtrát se odpaří a zbytek se převede do směsi acetonitril-voda a čistí se pomocí preparativní vysokotlaké chromatografie za získání sloučenin 15 a 16.
15a 15d
15c
Postup při syntéze analogů 17 a 18 (viz. schéma IV):
Krok 5: Pryskyřice 13 nebo 14 se reaguje s 2 ml 25% roztoku kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu 30 minut a promyje se 2x5 ml dimethylformamidu, 2c5 ml 10% DIEA. v dichlormethanu, 2x5 ml směsi dimethylformamidu v dichlormethanu, 5 ml methanolu a 3x5 ml dichlormethanu a suší se 5 minut. Získaná pryskyřice sé promyje 3x1 ml NMP, potom se reaguje s anhydridem ky80 • · · · · · « · · _ * • · « · ·· ♦·· ·· · · ·* seliny octové nebo methoxyoctovou kyselinou, nebo 2-propansulfonylchloridem nebo isopropylisokyanátem nebo methansulfonylchloridem nebo methylchloroformiátem podle postupu použitého pro přípravu analogů 9 (schéma III) . Sloučeniny 17 a 18 se . získají tak, jak je popsáno v kroku 4 pro přípravu sloučeniny 15 a 16.
Sloučenina 17a a 17b se připraví pomocí reduktivní aminace za použití Na(0Ac)3BH a HCHO (38% ve vodě, 0,2 ml) .a 0,02 ml kyseliny octové před krokem 4 a sloučenina 18c se připraví reakcí s fosgenem následované amoniakem před krokem 4.
18a
18d
Postup při přípravě
Sloučeniny 20a-20t. přípravu sloučenin
Frnoc-aminokyselina za
Schéma V analogu 20 se pripravi 5 (schéma I) ,
Fmoc-valin v kroku 3 podle postupu popsaného pro pouze se zamění příslušná (schéma V).
O
4 4 4 « 4 4 • · · 4 4 4 4 · 4 *4 ·
44« ♦ 4 4 · 4 4 4
4 » ·4 444 ·4 4 • 4 4 4 4 4 4 44 ♦
·...·♦ ... .. ·· ··
Příprava 3 - ({l-[2 -(4-amino-3-chlorbenzoylamino)-3-methylsúlfonylpropionyl] pyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanové kyseliny (20i)
Suspenze 0,132 mmol pryskyřice 3 v 4 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu se míchá 5 minut při teplotě místnosti a ze směsi se odstraní rozpouštědlo'. Postup se zopakuje po 20 minutách. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát dichlormethanem, jednou methanolem a dvakrát NMP. K suspenzi pryskyřice ve 4 ml NMP se postupně přidá 189 mg N-Fmoc-methylcysteinu (4 ekvivalenty, 0,528 mmol), 0,185 ml DIEA (8 ekvivalentů, 1,056 mmol), 71 mg HOBt (4 ekvivalenty, 0,528 mmol) a 200 mg HBTU (4 ekvivalenty, 0,528 mmol) . Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odpaří. Tento kondenzační postup se zopakuje po 4 hodinách. Pryskyřice se potom postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem a dvakrát směsí dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, jednou methanolem a třikrát dichlormethanem a suší se ve vakuu.
Suspenze 100 mg této pryskyřice ve 2 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu se míchá 5 minut při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Postup se zopakuje po 20 minutách. Pryskyřice se potom postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát dichlormethanem, jednou methanolem a dvakrát NMP. K suspenzi pryskyřice ve 2 ml NMP se postupně přidá 38 mg 4-amino-3-chlorbenzoové kyseliny (4 ekvivalenty, 0,2 mmol), 0,140 ml (8 ekvivalentů, 0,4 mmol) DIEA, 27 mg (4 ekvivalenty, 0,2 mmol) HOBt a 76 ml (4 ekvivalenty, 0,4 mmol) HBTU. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Pryskyřice se potom postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem a dvakrát směsí • φ · · • · φ φφφ φ φ φ φ φ φ ♦ φ φ φ -β φ φ φ φ φ φφ φ
Q-3 φ φ φ φφ φ ·ΦΦ«
Oj φφφφφ· φφφφφ φφ φφ dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, jednou methanolem třikrát dichlormethanem a suší se ve vakuu. Pryskyřice se potom 1 hodinu reaguje s 2 ml 95% kyseliny trifluoroctové ve vodě. Suspenze se filtruje, filtrát se odpaří ve vakuu a čistí se pomocí preparativní vysokotlaké kapalinové chromatografie za získání sloučeniny uvedené v názvu (20i).
Příprava 3- ( {l- [2- (3,5-dichlor-4-hydroxybenzoylamino) -4-methansulfonylbutyřyl]pyrrolidin-2-karbonylJamino) -4-oxobutanové kyseliny (2Op)
Sloučenina 2Op se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 20i za použití N-Fmoc-methioninu jako první složky kondenzované k pryskyřici 3 a 3,5-dichlor-4-hydroxybenzoové kyseliny jako druhé složky.
Příprava . 3-[(1-(2-[(isochinolin-l-karbonyl)-5-amino]-3-methansulfonylpropionyl}pyrrolidin-2-karbonyl) amino] -4-oxobutové kyseliny (20r)
N-Fmoc-methylcystein se za použití způsobu popsaného v Β. M. Trošt a D. P. Curran, Tetrahedron Lett. 22, str. 1287-190 (1981) oxiduje na odpovídající sulfon. K roztoku 0,714 g (2 mmol) N-Fmoc-methylcysteinu v 24 ml směsi methanolu a vody 1:1 se při 0 °C přidá 3,68 g (3 ekvivalenty, 6 mmol) Oxone™. Směs se míchá 48 hodin při teplotě místnosti, pomocí 6N kyseliny chlorovodíkové se okyselí na pH 2 a extrahuje se třikrát 100 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu za získání 0,700 g (výtěžek 89 %) sulfonu: 1H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 50Ό MHz) δ 2,97 .(s, 3H) , 3,49-3,59 (m, 2H) , 4,25 (m, 1H) , 4,30 4,38 (m, 2H) , 4,46 (m, 1H) , 7,33 (t, 2H), 7,42 (t, 2H, ) , 7,70-8,00 (m, 4H) ; přesná hmotnost vypočtena pro ' C19H19NOsS m/e 389,09, nalezeno m/e 390,2. 84
Suspenze 0,250 mmol pryskyřice 3 v 10 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu se míchá 5 minut při teplotě místnosti a ze směsi se odpaří rozpouštědlo. Postup se zopakuje po 20 minutách. Pryskyřice se postupně promyje. dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát dichlormethanem, jednou methanolem a dvakrát NMP. K suspenzi pryskyřice v 6 ml NMP se. postupně přidá 200' mg N-Fmoc-methylcysteinsulfonu (4 ekvivalenty, 0,50 mmol), 0,175 ml DIEA (8 ekvivalentů, 1,00 mmol), 70 mg HOBt (4 ekvivalenty , 0,50 mmol) a 188 mg HBTU (4 ekvivalenty, 0,50 mmol) . Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Tento kondenzační postup se opakuje po 3 hodinách. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát směsí, dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, jednou methanolem a třikrát dichlormethanem a suší se ve vakuu.
Suspenze 150 mg této pryskyřice ve 4 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu se míchá 5 minut při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Pryskyřice se potom postupně promyje dvakrát dimethylformamídem, jednou, methanolem, dvakrát dichlormethanem, jednou methanolem a dvakrát NMP. K suspenzi pryskyřice ve 3 ml NMP se postupně přidá 52 mg lisochinolihkarboxylové kyseliny (4 ekvivalenty, 0,3 mmol), 0,104 ml DIEA (8 ekvivalentů, 0,6 mmol), 37 mg HOBt (4 ekvivalenty, 0,3 mmol) a 104 mg HBTU (4 ekvivalenty, 0,3 mmol) . Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. a rozpouštědlo se odstraní. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, a dvakrát směsí dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, jednou methanolem a třikrát dichlormethanem a suší se ve vakuu. Pryskyřice se potom reaguje se 2 ml 95% kyseliny trifluoroctové ve vodě 1 hodinu. Suspenze se filtruje, filtrát se odpaří ve vakuu a čistí se pomocí preparativní vysokotlaké kapalinové chromatografie za získáni sloučeniny • · » · · • · · ·
• · • · 9,9
9 9 · • · 9 9
9 9 9 9 « · · ·
99 uvedené v názvu 20r.
Příprava 3 -({l -[2 -(3,5-dichlor-4-hydroxybenzoylamino)-3-methansulfonylpropionyl]pyrrolidin-2-karbonylJamino)-4-oxobutanové kyseliny (20s)
Sloučenina, 20s se připraví podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 20i, za použití 3., 5-dichlor-4-hydroxybenzoové kyseliny místo 1-isochinolinkarboxylové kyseliny.
SO2CH3
20f
Postup při přípravě analogů 23
Sloučeniny 23a-23i se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučenin '7 (schéma II) pouze náhradou vhodné Fmocaminokyseliny za Fmoc-prolin v kroku 2 (schéma VI).
Schéma VI
FmQQ^
.COjBu-t
H.
O^N^'
H
Krok 1
·· ·· » · * 4 .44 4
94 94
9 9 9 9 4 · 4 4 9 4
Fmoc^
.CO2Bu-t
H n'lr
R4
N
Fmoc<
C/iDH
Krok 2
Krok 3 FmQC’^x4— Re, kBu-t
Fmocx.
H ri-co2h
Krok
Příprava 3 -((2 -[2 -(4-amino-3-chlorbenzoylamino)-propionyl]-4methyl-3,4-dihydro-2H-pyrazol-3-karbonyl}amino)-4-oxobutanové kyseliny (23g)
Sloučenina 23g se připraví podle postupu popsaného pro přípravu ' sloučeniny · 7 , pouze náhradou 1-(9H-fluoren-9-ylmethyl)esteru 4-methyl-4,5-dihydro-pyrazol-1,5-dikarboxylové kyseliny za Fmoc-prolin (schéma II) v kroku 2.
Příprava 1 - (9H-fluoren-9-ylmethyl)esteru 4-methyl-4,5-dihydropyrazol -1,5-dikarboxylové kyseliny:
K roztoku 650 mg (2 mmol) (10,10-dimethyl-3,3-dioxo-λ4-thia-4 88 fcfc·· fcfcfc fcfcfcfc • fcfcfc fcfcfcfc · fcfcfc ♦ fcfc fcfcfc fcfcfc* • · fcfc ' · · · fc · fcfc fc fc fcfc fcfcfc fcfcfc fc • •«fc ·· ··· ·· fcfc ·· aza-tricyklo [5,2,1, O0,0] dec-4-yl) - (4-methyl-3,4-dihydro-2Hpyrazol-3-yl)-methanonu (J. Am. Chem. Soc., 119, str. 83798380 (1997)) v 6 ml vody a 14 ml tetrahydrofuranu míchajícímu se při 0 °C se přidá 420 mg (10 mmol, 5 ekvivalentů) hydroxidu lithného. Směs se míchá 2 hodiny při 0 °C a 30 minut při teplotě místnosti, zředí se 20 ml vody a promyje se 20 ml etheru. pH roztoku se upraví na 9 a přidá se roztok 519 mg (2 mmol, 1 ekvivalent) Fmoc-Cl ve 3 ml dioxanu. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, promyje se etherem, okyselí se na pH 23 a extrahuje se 3x40 ml ethylacetátu. . Spojené organické extrakty se promyji solankou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu za získání 690 mg (výtěžek 98 %) bezbarvé pěny, která se identifikuje jako sloučenina uvedená v názvu. XH NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 500 MHz) δ 1,2 (d, 3H) , 3,2 (m, 1H) , 4,2-4,6 (m, 3H) , 7,1 (s, 1H) , 7,2-7,5 (m, 5H) , 7,78,0 (m, 4H) . Přesná hmota vypočtená pro C20H18N2O4 m/e 3 50,13, nalezeno m/e 351,3.
Příprava 3-((l-[2-(4-amino-3-chlorbbnzoylamino)-propionyl]-4methoxypyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanové kyseliny (23i)
Sloučenina 23i se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 7 pouze názhradou N-Fmoc-4-methoxyprolinu za Fmoc-prolin (schéma II) v kroku 2.
Příprava N-Fmoc-4-methoxyprolinu:
K roztoku 735 mg (3 mmol) methylesteru N-Boc-4-hydroxyprolinu v 20 ml tetrahydrofuranu míchajícímu se při 0 °C se přidá 79 mg (1,1 ekvivalentu, 3,3 mmol) 60% hydridu sodného v minerálním oleji. Směs se míchá při 0 °C 1 hodinu a přidá se 0,56 ml methyljodidu (3 ekvivalenty, 9 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc, rozloží se přidáním nasyceného vodného
44 4 44 ·4 44
4 4 4 444 4 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 4 4 4 4 ·· 4 · 44 444 4 4 ·
4 4 44 4 4 44 4 ···· 44 444 4· 44 44 roztoku chloridu amonného, zředí se vodou a estrahuje se třikrát 80 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty se promyjí solankou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu za získání světle žlutého oleje. Olej se převede do 9 ml methanolu a 3 ml vody a přidá se 3 78 mg (3 ekvivalenty, 9 mmol) hydroxidu lithného. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, zředí se vodou, okyselí se na pH 3 a extrahuje se třikrát 80 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty se promyj í solankou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu. Zbylý olej se převede do 10 ml kyseliny trifluoroctové a roztok se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti a odpaří se ve vakuu. Zbývající olej se zředí 6 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného a 3 ml dioxanu a přidá se roztok 77 9 mg (1 ekvivalent, 3 mmol) 9-fluorenylmethylchloroformiátu v 5 ml dioxanu. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, zředí se vodou, okyselí se na pH 3 a extrahuje se. třikrát 8 0 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty se promyji solankou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu za získání oleje, který se čistí pomocí kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí dichlormethanu a methanoli 20:1. Získá se 600 mg (55 %) N-Fmoc-4-methoxyprolinu: přesná hmotnost vypočtena pro C21H21NO5 m/e 367,14, nalezeno m/e 368,4.
K roztoku 0,125 mmol pryskyřice 2 se přidají 4 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu. Směs se míchá 5 minut při teplotě místnósti a rozpouštědlo se odstraní. Postup se zopakuje po 20 minutách. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát dichlormethanem, jednou methanolem a dvakrát NMP. K suspenzi pryskyřice ve 4 ml NMP se postupně přidá 184 mg (4 ekvivalenty, 0,50 mmol) M-Fmoc-4-methoxyprolinu, 0,175 ml (8 ekvivalentů, 1,00 mmol) DIEA, 70 mg (4 ekvivalenty, 0,50 mmol) HOBt a 188 mg (4 ekvivalenty, 0,50 mmol) HBTU. Směs se míchá přes noc při teplotě • · ·
• ·· fcfc fc.
fc · • ♦ fcfcfc • fcfc fcfc fcfc « fcfc · fcfc ♦ • · · · fcfc fcfc místnosti a rozpouštědlo se odpaří. Tento kondenzační postup se zopakuje po 3 hodinách. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát směsí dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, jednou methanolem a třikrát dichlormethanem a suší se ve vakuu.
K pryskyřici se přidají 4 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu. Směs se míchá 5 minut při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Postup se zopakuje po 20 minutách. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát dichlormethanem, jednou methanolem a dvakrát NMP. . K suspenzi pryskyřice v 4 ml NMP se postupně přidá 156 mg (4 ekvivalenty, 0,50 mmol) N-Fmoc-álaninu,. 0,175 ml (8 ekvivalentů, 1,0 0 mmol) DIEA, 70 mg (4 ekvivalenty, 0,5 0 mmol) HOBt a 188 mg (4 ekvivalenty, 0,50 mmol) HBTU. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Tento kondenzační postup se zopakuje po 3 hodinách. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát směsí dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, jednou methanolem a třikrát dichlormethanem a suší se ve vakuu.
K pryskyřici se přidají 4 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu. Směs se míchá 5 minut při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Postup se zopakuje po 20 minutách. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát dichlormethanem, jednou methanolem a dvakrát NMP. K suspenzi pryskyřice ve 4 ml NMP se postupně přidá 80 mg (4 ekvivalenty, 0,50 mmol) 4-amino-3-chlorbenzoové kyseliny, 0,175 ml (8 ekvivalentů, 1,00 mmol) DIEA, 70 mg (4 ekvivalenty, 0,50- mmol) HOBt a 188 mg (4 ekvivalenty, 0,50 mmol) HBTU. Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc a rozpouštědlo se odstraní. Pryskyřice se postupně promyje dva91 krát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát směsí dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, jednou methanolem a třikrát dichlormethanem a suší se ve vakuu/
Pryskyřice se 1 hodinu reaguje s 4 ml 95% kyseliny trifluoroctové ve vodě. Směs se filtruje. Filtrát se odpaří ve vakuu za získání oleje, který se čistí pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie za získání sloučeniny uvedené v názvu (23i) .,
23e
O ·0
0 0
0 0
Postup při přípravě analog 24a-e
00 • 9 0 0 • · · • 00
0999 99
0 0
0 0 0
00 · 0 ·
9 9 9 • 0 0 0 0
0 9 9
00
Sloučeniny 24a-24e se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučenin 5 (schéma I) pouze náhrdou buď Fmoc-azetidinkarboxylové kyseliny nebo trans-2-fenyl-Fmoc-azetidinkarboxylové kyseliny za Fmoc-prolin v kroku 2.
24c
Postup při přípravě analog 25
Sloučenina 25a-25e se připraví podle postupů popsaných pro přípravu sloučenin 5 a 7 (schéma I a schéma II) pouze náhradou Fmoc-2 (S)-pipekolové kyseliny za Fmoc-prolin v kroku 2 a kondenzací buď Fmoc-valinu nebó Fmoc-alaninu nebo Fmocterc.leucinu v kroku 3.
25b 25e
Postup při přípravě analog 26a-h
Sloučeniny 26a-26h se přípravu sloučenin 23 za Fmoc-alanin v kroku připraví (schéma VI podle postupu popsaného pro ) pouze náhradou Fmoc-valinu .
26c
26h φ φ »···
Φ Φ Φ Φ Φ Φ • ΦΦ ΦΦ Φ Φ • Φ ·· • • •
·· · φ Φ Φ Φ • Φ
Φ Φ • · • • Φ • •
ΦΦ φφφ ΦΦ ΦΦ ΦΦ
Postup při přípravě analog 27
Sloučeniny 27a-27n se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučenin 7 (schéma II) pouze náhradou Fmoc-4,4difluorprolinu za Fmoc-prolin v kroku 2.
Příprava dimethylesteru 4, 4-difluorprolinu:
K roztoku 9,63 ml (7,2 mmol) oxalylchloridu v 10,6 ml dichlormethanu míchajícímu se při -78 °C se přidá roztok 0,94 ml (13,2 mmol). methylsulfoxidu v 15 ml dichlormethanu. Roztok se míchá 30 minut při teplotě -78 °C. Potom se přikape roztok 1,47 g (6 mmol) methylesteru N-Boc-4-hydroxyprolinu v 19 ml dichlormethanu. Směs se míchá 1,5 hodiny při teplotě .-78 °C a přidá se 3,34 ml (24 mmol) triethylaminu. Roztok se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Zředí se 100 ml dichlormethanu, postupně se promyje 100 ml vody, 100 ml IN roztoku kyseliny chlorovodíkové a 100 ml solanky, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu. Zbytek se čistí pomocí kolonové chromatografie na. silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a hexanu 1:3. Získá se 1,294 g (výtěžek 89 %) methylesteru N-Boc-4-oxo-prolinu-. 3H NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,45 (m,
9H), 2,60 • · φ · • toto · • · · • · · ···to ·· ··· · · ·· * ··· · ·· · • · ··· toto · • · · · · · · ··· ·· ·< to· (m, 1H) , 2,95 (m, 1H) , 3,75 (m, 3H) , 3,90 (m, 2H), 4,80 (m, 25 1H)
K roztoku 808 mg (3,33 mmol) methylesteru N-Boc-4-oxoprolinu v 13 ml dichlormethanu míchajícímu se při teplotě 0 °C se přidá 0,88 ml (7,19 mmol, 2,2 ekvivalentu) DAST. Směs se míchá 2 hodiny při 0 °C, 16 hodin při teplotě místnosti a nalije se do ledové vody. Směs se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti. Organická vrstva se oddělí, promyje se vodou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu. Zbytek se čistí pomocí kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a hexanu 1:8 za získání 754 mg (výtěžek 79 %) difluorovaného derivátu ve formě světle žlutého oleje. XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,50 (m, 9H) , 2,45 (tri, 1H) ,
2,70 (m, 1H),.3,75 (m, 3H), 3,80 (m, 2H), 4,50 (m, 1H) .
Příprava N-Fmoc-4,4-difluorprolinu:
K roztoku 754 mg (2,85 mmol) methylesteru N-Boc 4,4-difluorprolinu v 5 ml tetrahydrofuranu míchajícímu se při 0 °C se přidá roztok 179 mg (4,27 mmol) hydroxidu lithného ve vodě. Roztok se míchá 3 hodiny při 0 °C, 1 hodinu při teplotě místnosti, zředí se vodou, extrahuje se etherem, okyselí se na pH 2-3 a extrahuje se dvakrát 30 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty se promyjí solankou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu za získání 652 mg (91 %) kyseliny ve formě světle žluté pevné látky.
Roztok 652 mg (2 mmol) N-Boc-4,4-dif luorprolinu v 10 ml směsi kyseliny trifluoroctové a dichlormethanu 1:1 se míchá 45 minut při 0 °C a odpaří se ve vakuu. Zbytek se převede do 3 ml dioxanu a přidá se 5 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného, potom 675 mg (1 ekvivalent) Fmoc-Cl v 5 ml dioxanu. Směs se . míchá při teplotě místnosti 16 hodin, zředí se 20 ml'
• 9 99 • · · 1 · • 9 · · • · · 9 • 9 99 vody, extrahuje se dvakrát 20 ml diethyletheru, okyselí se na pH 2 a extrahuje se třikrát 30 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty se promyjí 50 ml solanky, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu. Zbytek se čistí pomocí kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí dichlormethanu a methanolu 10:1), za získání 850 mg (88 %) N-Fmoc-
4,4-difluorprolinu ve formě hnědavé pevné látky . KH NMR (500
MHz, deuterochloroform) δ 2,55 (m, 1H), 2,95 (m, 1H) , 3 , 80 (m,
2H) , 4,20 (m, 1H) , 4,30 (m, 2H) , 4,55 (m, 1H) , 7,32 (m, 2H) ,
7,45 (m, 2H) , 7,70 (m, 2H) , 7,90 (m, 2H) . Přesně vypočtená hmotnost pro C20H17F2NO-4 m/e 3 73,11, nalezeno m/e 3 74,4.
Sloučeniny 28a-28c se připraví podle postupu popsaného pro sloučeniny 5 a 7 (schéma I a schéma II)., pouze náhradou Fmocdimethylthioprolinu za Fmoc-prolin v kroku 2.
28a, X=N 28c
28b, X=C
Obecné postupy pro přípravu sloučenin provedení A vzorce I (schémata VII-VIII)
Sloučeniny podle provedení A vzorce I, kde R4 je atom vodíku a jedna skupina Rs je atom vodíku
Postup přípravy analog 29
Sloučeniny 29a-29s se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučenin 5 (schéma I) pouze náhradou Fmoc-alaninu za Fmoc-prolin v kroku 2 a za použití bud' Fmoc-valinu nebo Fmocalaninu nebo Fmoc-terč.leucinu v kroku 3.
• 00 0.0 *·
000 0 0 0 0 ' 0
0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 0
000 00 0 0. 00
Postup přípravy analog 32
Sloučeniny 32a-32e se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučenin 5 (schéma I) pouze náhradou 2 - (3 - terč.butoxykarbonylamino-2-oxopyrrolidin-l-yl) -4-methylpentanové kyseliny (30) (Neosystem katalogové číslo ΒΒ021Ό1) za Fmoc-prolin v kroku 2, po kterém následuje krok 4 (schéma VII).
Sloučeniny podle provedení A vzorce I, kde R2 a R3 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří pětičlenný kruh • 0 • 0
100
Schéma VII
32c
Sloučeniny podle provedení A vzorce I, kde X je skupina. N-CH3 o··········· ··· ··· · · · · • · · · · · · · · · · · ··· ··· ···· ····*······ · · ··
101
Schéma VIII
Krok 3
Příprava 3- ( (l- [N- (isochinolin-1-karbonyl)-N-methylhydrazinokarbonyl]pyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanové kyseliny (34)
Suspenze 0,250 mmol pryskyřice 3 (schéma VIII) v 10 ml 20% roztoku piperidinu v dimethylformamidu se míchá 5 minut pří teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Postup se zopakuje po 20 minutách. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát směsí dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1, jednou methanolem a třikrát dichlormethanem, a krátce se suší. K pryskyřici se přidá 5 ml suchého dichlormethanu, 0,128 ml (3 ekvivalenty, 0,75mmol) DIEA a 0,400. ml (3 ekvivalenty, 0,75 mmol) 20% roztoku fosgenu v toluenu. Suspenze se míchá 1,5 hodiny při teplotě místnosti. Směs se zbaví rozpouštědla a pryskyřice se promyje několikrát dichlormethanem. K suspenzi pryskyřice v 5 ml dichlormethanu se přidá 0,133 ml (10 ekvivalentů, 2,5 mmol) methylhydrazinu.
• » · · 4 4 4 4 · · · ·
4 44 4 4 44 4
4 44 44 444 44 4 • 4 · 4444444
102 ···· ·· ··· ·· ·· ··
Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát směsí dimethylformamidu a dichlormethanu 1:1), jednou methanolem a třikrát dichlormethanem a suší se ve vakuu.
K 0,075 mmol pryskyřice ve 3 ml NMP se postupně přidá 52 mg (4 ekvivalenty, 0,3 mmol) 1-isochinolinkarboxylové kyseliny, 0,19 ml (8 ekvivalentu, 0,6 mmol) DIEA, 37 mg (4 ekvivalenty, , 0,3 mmpl) HOBt a 104 mg (4 ekvivalenty, 0,3 mmol) HBTU. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odstraní. Pryskyřice se postupně promyje dvakrát dimethylformamidem, jednou methanolem, dvakrát směsí dimethylformamidu 1:1, jednou methanolem a třikrát dichlormethanem a suší se ve vakuu.
Pryskyřice se reaguje se 4 ml 95% kyseliny trifluoroctové ve vodě 1 hodinu. Směs se filtruje. Filtrát se odpaří ve vakuu za získání oleje, který se čistí pomocí vysokotlaké chromatografie za získání sloučeniny uvedené v názvu 34.
Sloučeniny podle provedení A vzorce I, kde R3 = = atom vodíku: '
G1
3- ({l - [ (Amino-3 -chlorbenzoylamino) acetyl ]pyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (Gl)
Sloučenina se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 7 pouze náhradou Fmoc-glycinu za Fmoc-alanin v kroku 3 (schéma II) za získání 4,3 mg sloučeniny uvedené v názvu. Kapalinová chromatografie-hmotové spektrum (ES+). m/.e = 425,2 • · · · • · · · · • · · • · • · ·
103 • · · * ···· ·· ··· ·· ·· (M+H).
- ( (l- [iAmino-3-chlorbenzoylamino)acetyl] -4,4-difluorpyrro1idin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (G2)
Sloučenina se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 7 a 27 pouze náhradou Fmoc-glycinu za Fmoc-alanin v kroku 3 (schéma II) . Získá se 10,0 mg sloučeniny uvedené v názvu. Kapalinová chromatografie-hmotové spektrum (ES+) m/e = 461,2 (M+H).
104
Obecné postupy pro přípravu sloučenin podle provedení C vzorce I a provedení D vzorce I, kde Y = C (schémata IX-XXII)
Schéma IX
Cesta B
Zdroje vybraných cyklických systémů
105
0 0 » 0 · 0 · 0 0 0 • · · · * 0 · 0 · 00 0
0 0 0 0 0 00 0 0 0 00 00 000 00 0
00 000 0000 0 0 0 0 00 ' 000 00 0« 00
Struktura Odkaz
O Blythin, D.J., J. Orq. Chem., 59, str.
6098-6100 (1994)
N—l —CO2R 0
Decicco, C.P. a kol., Syn. Lett., 615-616, (1995) str.
YY o co2r
/ Bennion, C. a kol., J. Med. Chem. , 34,
N=X Str. 439-447 (1991);
1 /s /NY co2r Jensen, K.A. a kol., Acta Chemica
Scand., 13, str. 1097-1103 (1961)
komerčně dostupný
co2r >
Mish, M. R., J. Am. Chem. Soc. 119
TV str. 8379-8380 (1997)
co2r
Xi, N. a kol., J. Am. Chem. Soc. , 120
A/ str. 80-86 (1998)
co2r
Φ Φ · φ · · · ·« φφ • φ · · β · φ φ · *· · φφφ φφφ φφφ» • φ φφ φφ φφφ φφ φ φ φ φ φφφ φφφφ φφφφ φφ «φφ φφ φφ φφ
106
Struktura Odkaz
Á J Merour, J.Y. a kol., Lett., 32, str.·2469-2470 Tetrahedron (1991) ;
1 co2h Ross.en, K. , Tetrahedron Lett. , 36,
str. 6429-6422 (1995)
Schéma X
39, R=CH3 44, R=4-MeOPh-
45. R=4-MeOPh- 4g R=4.MeOPh.
• *
107 • 4
Ethylester 5- terč.butyl-3 -[2-(9H- f luoren -9 -ylmethoxykarbonylamino) - 3-methylbutyryl] -2, 3-dihyd.ro [1,3,4] ťhiadiazol-2karboxylové kyseliny (37)
K míchající se suspenzi 2,63 g (25 mmol) polyvinylpyridinu v roztoku 2,16 g (10.mmol) ethylesteru 5-terč.butyl-2,3-dihydro[1,3,4]thiadiazol-2-karboxylové kyseliny (36), (J. Med.
Chem., 34, str. 439 (1991)) v suchém toluenu se se přikape
4,76 g (12,1 mmol) 9H-fluoren-9-ylmethylesteru (1-chlorkarbonyl-2-methylpropyl)karbamové kyseliny v 20 ml bezvodého toluenu. Po 16 hodinách míchání se suspenze filtruje a filtrát se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu Sodného. Organická vrstva se oddělí, promyje se vodou, suší se nad bezvodým síranem sodným a odpaří se za získání žlutého oleje. Po čištěni pomocí velmi' rychlé chromatografie za eluce směsí hexanu a ethylacetátu 9/1 se získá 2,66 g (výtěžek 49 %) sloučeniny uvedené v názvu 37 ve formě čirého, viskózného oleje. NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 0,89 (d, 1,5H), 0,93 (d, 1,5H), 1,00 (d, 1,5H), 1,06 (d, 1,5H), 1,22 (t, 3H) ,
1.28 (s, 9H), 2,12-2,22 (m, 0,5H), 2,32-2,42 (m, 0,5H), 4,184.28 (m, 2H) 4,31-4,45 (m, 2H) ,. 4,96-5,01 (m, 0,5H) , 5,02.5,10 (m, 0,5H), 5,52 (d, 0,5H), 5,61 (d, 0,5H), 6,10 (s, 0,5H), 6,13 (s, 0,5H) , 7,27-7,34 (m, 2H) , 7,35-7,42 (m, 2H) ,
7,56-7,64 (m, 2H) , 7,73-7,78 (m, 2H).
Ethylester 3-(2-acetyl amino-3-methylbutyryl)- 5 - terč.butyl- 2,3dihydro-(1,2,4]thiadiazol-2-karboxylové kyseliny (38)
K roztoku 0,508 g (0,94 mmol) sloučeniny (37) (schéma IX) v 10 ml acetonitrilu se přidá 1 ml diethylaminu. Roztok se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a získaný olej se azeotropicky destiluje s dichlormethanem (4x). Surový olej se rozpustí v 5 ml dichlormethanu a přidá se
108
• 0 0 · • 00 0 · 0 0
• · 0 0 • 0 0 0 0 • 0 0
• 0 0 0 0 0 0 0 0 ·
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 «0 0 0 0 0 0 0 00
0,26 ml (1,86 mmol) triethylaminu a 80 μΐ (1,1 mmol) acetylchloridu. Roztok se míchá v dusíkové atmosféře při teplotě místnosti 2 hodiny. Rozpouštědlo se odpaří, surová látka se rozpustí v ethylac-etátu a promyje se dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou a suší se nad bezvodým síranem sodným, filtruje se a odpaří se za získání žlutého oleje. Po čištění pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie na silikagelu za použití směsi hexanu a ethylacetátu 95/5 až 90/10 % jako eluentu se získá 0,301 g (výtěžek 89 %) produktu ve formě žlutého oleje. 1H-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 0,88 (dd, 3H) , 0,99 (dd, 3H) , 1,16-1,45 (m, 12H) , 2,02 (s, 3H) , · 2,092,19 (m, 0,5H), 2,30-2,40 (m, 0,5H), 4,12-4,29 (m, 2H), 5,205,27 (m, 0,5H), 5,30-5,36 (m, 0,5H), 6,60(s, 0,5H), 6,90 (s, 0,5H), 6,20-6,31 (m, 1H). Analytická HPLC (kolona C18), (směs diastereomerů) 7,77, 7,98 min. Kapalinová chromatografie-HS (ES+) m/e=358,3 20 (M+H).
- (2-Acetylamino-3-methylbutyryl) -5-terč.butyl-2,3-dihydro[1,2,4]thiadiazol-2-karboxylová kyselina (39)
K roztoku 0,301 g (0,84 mmol) sloučeniny 38 v 10 ml methanolu se přidá 1,7 ml (1,7 mmol) IN roztoku hydroxidu sodného. Reakční směs se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odpaří.. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje se dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného a solankou a suší se nad bezvodým síranem sodným, filtruje se a odpaří se za získání 0,277 g, kvantitativně) sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté pevné látky.
Příprava allylesteru 2-(benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny (40)
109 ·· 99 « ·· 99 99 •999 999999··
9 9 9 9 · 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 999 99 99 ·«
Sloučenina 40 se připraví z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanově kyseliny pomocí modifikace postupu popsaného v Bioorg. Med. Chem. Lett. Vol. 2, No. 6, str. 613618, (1992) .
K roztoku 27,52 g (352 mmol) dimethylsulfoxidu v 240 ml dichlormethanu se se při -78 °C přidá 24,4 g (192 mmol) oxalylchloridu. Po 15 minutách se pomalu přidá roztok 41,44 g (160 mmol) terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny ve 100 ml dichlormethanu a směs se míchá při -78 °C dalších 1,5 hodiny. Přidá se 62,0 g (480 mmol) DIEA a směs se nechá 15 minut ohřívat na teplotu místnosti. Získaný roztok se zředí 300 ml dichlormethanu, promyje se dvakrát 500 ml 0,5N roztoku hydrogensíranu sodného, dvakrát 300 ml vody a dvakrát 400 ml solanky. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem sodným a odpaří se ve vakuu na objem 200 ml. K tomuto roztoku se přidá 48 g (444 mmol) benzylalkoholu, potom 30 g 3A molekulových sít a 0,8 g p-toluensulfonové kyseliny. Reakční směs se nechá míchat 4 dny a přidá se 96 ml kyseliny trifluoroctová. Získaná suspenze se míchá 1 hodinu a potom se odpaří ve vakuu. Přidá se 500 ml ethylacetátu a směs se filtruje přes křemelinu. Filtrát se promyje dvakrát 500 ml hydrogenuhličitanu Sodného, dvakrát 400 ml vody a dvakrát 300 ml solanky. Organický roztok se suší nad bezvodým síranem sodným, filtruje se a odpaří se ve vakuu za získání 90. g světle žlutého oleje, který se míchá dvakrát se 400 ml hexanu za získání 31 g surového produktu ze spodní vrstvy zbytku. Pomocí chromatografie za použití směsi ethylacetátu a hexanu (4/96 až 22/78) se získá 6,97 g allylesteru anti-2-(benzyloxy5-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny (vyšší Rf), 4,53 g syndiastereomeru a 12,97 g směsi diastereomerů (celkový výtěžek 53 %) . 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) pro anti diastereomer: 5 2,41-2,45 (m, H) , 3,02-3,07 (m, H) , 4,28 (š,
110 ·* to· · · ·' ·* ·« *♦·· toto * * ··· · • toto ··· · ··· • · ·· ·· ··· ·· · toto· ··· ···* ···· ·· ··· «· «· ·· Η) , 4,50-4,80 (m, 3H) , 4,80-5,15 (m, 2H) , 5,24-5,32 (m, 2H) ,
5,48 (s, Η) , 5,88-6,00 (m, Η), 7,31-7,56 (m, 5H); pro syn diastereomer: 82,49-2,53 (m, Η) , 2,83-2,89 (m, Η) , 4,57-4,65 (m,
4H) , 4,87-4,90 (m, Η) , 5,12-5,30 (m, 3H) , 5,52-5,53 (d, Η) ,
5,88-6,00 (m, H) ,. 7,31-7,39 (m, 5H) ; retenční čas při analytické HPLC: 10,49 minut, pro anti diastereomer a 10,37 minut pro syn diastereomer; LC-MS: m/z = 292 (M+H+) .
(2-benzyloxy-5-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)-amid 3 - (2-acetylamino-3-methylbutyryl)-5-terc.butyl-2,3-dihydro[1,2,4]thiadiazol2-karboxylové kyseliny (41)
K roztoku 0,385 g (1,32 mmol) allylesteru (2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny (40) v 2 ml dimethylformamidu se přidá 0,456 g (2,92 mmol) DMBA a 0,136 g (0,12 mmol) Pd(PPh3)4 a roztok se míchá 15 minut při teplotě místnosti. Přidá se roztok sloučeniny 39 v 4,5 ml dichlormethanu a 0,5 ml dimethylformamidu, pootom 0,168 g (1,24 mmol) HOBT a 0,256 g (1,33 mmol) EDC. Reakční směs se míchá v dusíkové atmosféře 18 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří. Surová látka se rozpustí v ethylacetátu a promyje se dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou a suší se nad bezvodým síranem sodným, filtruje se a odpaří se za získání žluté pevné látky. Po čištění pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie se získá 374 mg (výtěžek 88 %) sloučeniny uvedené v názvu (41) ve formě směsi diastereomerů. ’Ή-ΝΜΗ (500MHz, deuteróchloroform) δ 0,75-1,05 (m, 6H) , 1,191,.34 (m, 9H) , 1,93-2,08 (m, 3H) , 2,19-2,50 ' (m, 2Η) , 2,80-3,.03 (m, 1H) , 4,56-4,93 (m, 3H) , 5,02-5,20· (m, 1H) , 5,46-5,56 (m,
1H), 5,95-6,16 (m, 2H), 6,86-6,95 (m, 1H), 7,20-7,43 (m, 5H). Analytická HPLC (kolona C18), (směs diastereomerů) 8,58 minuty. LC-MS (ES+) m/e=519,2 (M+H).
111
Příprava 3-([3-(2-acetyl amino-3-methylbutyryl)-5-terc.butyl2, 3-dihydro-[1,3,4]thiadiazol-2-karbonyl]-amino)-4-oxobutanové kyseliny (42)
Podle způsobu A (viz schéma XXIII) se hydrolyzuje vzorek 45 mg (0,087 mmol) sloučeniny 41 a získá se 17. mg (výtěžek 45 %) sloučeniny uvedené v názvu. Analytická HPLC (kolona C18): 5,15 minuty. LC-MS (ES + ) m/e=429,3 (M+H).
ethylester 5-terč.butyl-3-[2-(4-methoxy-benzoylamino)-3-methylbutyryl)-2, 3-dihydro-[1,3,4]thiadiazol-2-karboxylové kyseliny (43)
Sloučenina se připraví podle postupu uvedeného výše pro sloučeninu 38, za použití anisoylchloridu. Získá se 216 mg (50 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě amorfní pevné látky. XH NMR (500 MHz, deuterochlorof orm). δ 0,92 (d, 1,5H), 0,98 (d, 1,5H),
1,03 (d, 1,5H), 1,07 (d, 1,5H), 1,21- (t, 3H) , 1,28 (s, H),
2,21-2,28 (m, 0,5H), 2,41-2,48 (m, 0,5H), 3,83 (s, 3H) , 4,154,28 (m, 2H) , 5,41-5,46 (m, 0,5H), 5,48-5,53 (m, 0,5H), 6,08 (s, 0,5H), 6,13 (s, 0,5H), 6,75 (d, 0,5H), 6,85 (d, 0,5H), 6,91 (d, 2H), 7,59 (d, 2H).
5-terc.butyl-3-[2-(4-methoxybenzoylamino)-3-methylbutyryl]2, 3-dihydro-[1,3, 4]thiadiazol-2-karboxylová kyselina (44)
Sloučenina se připraví pomocí ppostupu popsaného pro přípravu, sloučeniny 39. Získá se 180 mg (kvantitativně) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. XH NMR (500 MHz, deuterochlorof orm) δ 0,92 (d, 1,.5H),. 0,96 (d, 1,5H.) , 1,03 (d, 1,5H), 1,07 (d, 1,5H), 2,22-2,30 (m, 0,5H), 2,37-2,45 (m, 0,5H), 3,83 (s, 1,5H) 3,84 (s/ 1,5H), 5,41-5,48 (m, 1H),.6,14 (s, 0,5H), 6,15 (s, 0,5H), 6,87-6,95 (m, 2H) , 7,75-7,83 (m, 3H) .
112
• · fcfc • fcfc • fc fc ·
fc · • • • · · • • • • fc
• • • • · • • • fc fc
•
fc • • • · fc • • • •
• fcfcfc • · • fcfc fcfc • fc fcfc
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydro-furan-3-yl) amid 5-terc .butyl-3[2- (4 -methoxy-benzoylamino) -3 -methylbutyryl] -2, 3-dihydro[1,3,4]thiadiazol-2-karboxylové kyseliny (45a a 45b)
Sloučenina se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 41. Získá se surová sloučenina uvedená v názvu ve formě 4 diastereomerů. Surová látka se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za eluce gradientem směsi dichlormethan až dichlormethan/ethylacetát 6/4 za získání 31 mg složky o vyšším Rf jako jednoho diastereomerů (45a). Analytická HPLC (kolona Microsorb C18) 19,87 minuty. XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) (jeden diastereomer) δ 1,04 (d, 3H), 1,14 (d, 3H),
1,28 (S, 9H) , 2,77 (d, 0 ,5H) , 2,81 (d, 0,5H), 2 ,90 (d, 0, 5H) ,
2,95 (d, 0, 5H) , 3,84 (s, 3H) , 4,44-4,49 (m, 1H) , 4,53 (d, 1H) ,
4,85 (d, 1H) , 5,02-5,08 (m, 1H), 6,37 (s, 1H) , 6,41 (d, 1H) ,
6,93 (d, 2H) , 7,26-7,40 (m, 5H), 7,75 (d, 2H) , 7,92-7,96 (m,
1H) .
Frakce o nižším Rf obsahuje 185 mg pevné látky jako směsi diastereomerů (45b) 3:1:2. Analytická HPLC: kolona Microsorb
C18 19,00, 19,26, 20,02 minut, ’Ή NMR (500 MHz, deuterochloroform) (3:1:2 směs tří diastereomerů) δ 0,89 (d, 2,25 Η) , 0,98 (d, 0,75H), 1,02 (d, 0,5H), 1,03 (d, 1,5H), 1,08 (d, 0,25H), 1,10 (d, 0,75H), 1,16 (s, 0,75H)', 1,17 (s, 2,25H), 1,23 (s, 0,375H), 1,24 (s, 1,125H), 1,28 (s, 1,125 Η), 1,29 (s, 3,375H), 2,12-2,18 (m, 0,33H), 2,32-2,42 (m, 0,67H), 2,43-2,51 (m, 0,5H), 2,61-2,67 (m, 0,5H), 2,84-2,92 (m, 0,5H), 2,96-3,07 (m, 0,5H), 3,85 (s, 3H) , 4,58-4,71 (m, 2H) , 4,81 (d, 0,16H),
4,86 (d, 0,32H), 4,91 (d, 0,52H), 5.,09-5,13 (m, 0,33H), 5,145,18 (m, 0,67H), 5,35 (dd, 1H), 5,46 (s, 0,16H), 5,53 (d, 0,32H), 5,58-5,62 (d, 0,52H), 6,17 (s, 0,52H), 6,20 (s, 0,16H), 6,34 (s, 0,32H), 6,50 (d, 0,32H), 6,62 (d, 0,16H),
6,67 (d, 0,52H), 6,86 (d, 0,33H), 6,91 (d, 0,67H), 6,94 (d,
113 ·· φφ φφφ φφ Φ· φ φ φ · φ φ * φ φ φ φ φ φ φ φ φφ φ φ φφ φ • · · ♦ ♦· φφφ φφ φ φ φ φ φ φ φ φ φφ φ φφφφ φφ φφφ φφ φφ φφ
Ι,ΟΗ), 7,24-7,43 ! (m, 5Η) , 7,61 (d, 1Η) , 7,70 (d 0,33Η), 7,71 (d, 0,67Η), 7,76 (d, 1Η).
Příprava 3-((5-terc.butyl-3-[2-(4-methoxybenzoylamino)-3-methylbutyryl]-2, 3 -dihydro [1,3,4]thiadiazol-2-karbonylJamino)-4oxobutanové kyseliny 46a
30mg vzorek sloučeniny 45a se hydrolyzuje podle postupu B (viz. schéma XXIII) a získá .se 8 mg (30% výtěžek) požadované látky. Analytická HPLC (kolona Microsorb C-18, acetonitril/voda s pufrem TFA) 12,85 minut, 4H NMR (500 MHz, deuteromethanol) δ 0,98-1,1 (m, 6H), 1,28 (s, 9H), 2,20-2,31 (m, 1H), 2,40-2,48 (m, 1H) , 2,6-2,72 (m, 1H) , 3,84 (s, 3H) , 4,18-4,26 (m, 1H) , 4,56-4,62 (m, 1H), 5,25-5,32 (m, 1H), 6,24-6,28 (m, 1H), 6,98 (d, 2H), 7,85 (d, 2H).
Příprava 3-((5-terc.butyl-3-[2-(4-methoxybenzoylamino)-3-methyl -butyryl]-2, 3-dihydro[1,3,4]thiadiazol-2-karbonylJamino)- .
4-oxobutanové kyseliny 46b
30mg vzorek sloučeniny 45b (směs 3 diastereomerů) se hydrolyzuje podle způsobu B (viz. schéma XXIII) a získá se 22 mg (výtěžek 84 %) požadovaného produktu ve formě směsi diastereomerů 3:2. Analytická HPLC (kolona Microsorb kyano) 7,08, 7,78 minut. ;H NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 0,98-1,08 (m, 4H), 1,09-1,12 (m, 2H), 1,29 a 1,31 (2 singlety, 9H), 2,23-2,30 (m,
0,5H), 2,36-2,55 , (m, 1,5H), 2,62-2,72 (m, 1H) , 3,85 (s, 3H) , 4,18-4,27 (m, 1H), 4,58-4,65 (m, 1H), 5,27-5,33 (m, 1H), 6,236,27 (m, 1H), 7,00 (d, 2H), 7,70-7,88 (m, 2H).
·· ·· • 9 9 · • · ·
9 ·
9999 99 .9 9
9 9 9'
9 9
114
9-9
999 99
9 9 9
9 9 9
9 9 9
9 9 9
99
Schéma XI
terč.butylester 1- (2 -benzyloxykarbonylamino - 2 -methyl -propionyl) pyrrolidin-2 -karboxylové kyseliny (49)
K roztoku 2,00 g (12 mmol) terč.butylesteru prolinu (47) v 15 ml dichlormethanu se přidá 3,05 g, (13 mmol) N-karbobenzyloxy2-methylalaninu, 2,36 g (17 mmol) HOBT (2,36g, I7mmol) a 3,43 g (18 mmol) EDC a roztok se míchá při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře 48 hodin. Rozpouštědlo se odpaří, ‘surová látka se rozpustí v ethylacetátu a dvakrát se promyje 0, 5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou a suší se nad bezvodým síranem sodným, filtruje se a odpaří se za získání 4,68 g (100 %) bílé pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuterochloroform) 5 1,202,15 (m, 4H) , 1,43 (s, 9H) , 1,59 (d, 6H) , 3,21-3,79 (m, 2H) , 4,35 (šs, 1H), 4,82-5,19 (m, 3H), 5,74 (šs, 1H), 7,17-7,49 (m, «· ·· · ·· ·· * toto · ··♦ · · «· · tototo «toto ···· • to to· to·······
115 ··· ······· ···· ·· ··· ·· ·· ··
5H) . - Analytická HPLC (kolona C18) 10,66 minuty. LC-MS (ES + ) m/e = 391,3 (M+H).
terč.butylester 1-(2-(4-methoxybenzoylamino)-2-methyl-propionyl ]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (50)
K roztoku 1,00 g (2,56 mmol) sloučeniny 49 v 20 ml methanolu se přidá 200 mg 10% palladia na uhlí a směs se míchá ve vodíkové atmosféře 2 hodiny. Směs se filtruje přes 0,45μιη PTFE filtr a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu za získání bezbarvého oleje, tento olej se rozpustí v 25 ml dichlormethanu a přidá se 660 μί (3,79 mmol) DIEA a 480 mg (2,8 mmol) p-anisoylchloridu. Roztok se míchá 18 hodin při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře. Rozpouštědlo- se odpaří ve vakuu a olej se rozpustí v ethylacetátu. Organická fáze se promyje dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, vodou, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická fáze se suší nad síranem sodným, filtruje se a odpaří se za získání bílé pevné látky, která se čistí pomocí kolonové chromatografie za eluce směsí dichlormethanu a methanolu (99/1 až 98/2 %) a získá se 655 mg (výtěžek 65 %) sloučeniny uvedené, v názvu. XH-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,47 (s, 9H) , 1,68-2,24 (m, 5H) , 1,80 (d, 6H) , 3,55-3,68 (m, 1H) , 3,72-3,93 (m, 1H) ,
3,84 (s, 3H) , 4,43-4,55 .(m, 1H) , 6,90 (d, 2H) , 7,60 (šs, 1H) , 7,77 (d, 2H). Analytická HPLC (kolona C18) 8,98 minuty.
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-methoxybenzoylamino)-2-methyl -propionyl] -pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (51)
K roztoku 325 mg (0,83 mmol) sloučeniny 50 v 5 ml dioxanu se přidá 463 μΐ (3,32 mmol) triethylaminu a 642 μΐ (3,32 mmol) TMS-triflátu a roztok se míchá 5 hodin při 100 °C, potom 18 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se zředí vodou,
116 ·· · * ·· 4 * · 4 · 4 • . · · 4 4 · · 4 4 · ···· 44 44« ·* 44 ♦· pomocí nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného se pH upraví na hodnotu 8 a extrahuje se diethyletherem, suší se nad bezvodým síranem sodným, filtruje se a odpaří se za získání 230 mg (výtěžek 83' %) bílé pevné látky, která se použije přímo v dalším kroku.
K roztoku 1,027 g (3,5 mmol) allylesteru (2-benzyloxy-5-oxo-
tetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny (40) v 20 ml
dichlormethanu se přidá 543 mg (3,48 mmol) DMBA a 280 mg (0, , 24
mmol) Pd(PPh3)4 a roztok se míchá 20 minut v při teplotě
místnosti v dusíkové atmosféře. Přidá se 818 mg (2,45 mmol) 1-
[2-(4-methoxybenzoylamino)-2-methyl-propionyl]pyrrolidin-2karboxylové kyseliny v 5 ml dichlormethanu a potom 0,534 g (3,95 mmol) HOBT a 738 mg (3,84 mmol) EDO. Reakční směs se míchá v dusíkové atmosféře 18 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří, surová látka se rozpustí v ethylacetátu a dvakrát se promyje 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, filtruje se a odpaří se za získání žluté pevné látky. Po čištění pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie za eluce směsí ethylacetátu a hexanu 20/80 až 50/50 % se. získá 760 mg (výtěžek 61 %) produktu ve formě světle žluté pevné látky. 1NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,53 (d, 6H) , 1,65-1,93 (m, 3H) , 1,96-2,14 (m, 1H) , 2,60 (dd, 0,1H) , 2,77 (dd, 0,85H), 2,94 (dd, 0,85H), 3,04-3,11 (m, 0,2H), 3,42-3,52 (m, 1H), 3,57-3,67 (m, 1H) , 3,84 (s, 3H) , 4,38-4,76 (m, 3H) , 4,84 (d, 1H) , 5,645,7.0 (m, 1H) , 6,96-7,.03 (m, 2H) , 7,23-7,43 (m, 5H) , 7,78-7,97 (m, 2H) . Analytická HPLC (kolona C18) 13,32, 14,37 minuty,
LC-MS (ES+) m/e=524,3 (M+H).,
Příprava 3-({l-[2-(4-methoxybenzoylamino)-2-methylpropionyl]pyrrolidin-2-karbonyl}-amino)-4-oxobutanové kyseliny (52) • 9 9» » · <1 · • 9 9 » 99 ··
9 9 9 9
9 9 9 9
117
6lmg (0,14 mmol) vzorek sloučeniny 51 se hydrolyzuje podle způsobu C (viz. schéma XXIII) a získá se 30 mg (výtěžek 60 %) sloučeniny uvedené v názvu. Analytická HPLC (kolona C18) 6,79 minuty. LC-MS (£31-) m/e=434,3 (M+H).
Schéma XII
58, X=CI, Y=NH2
55, X=H, Y=MeO 59, X=CI, Y=NH2
56,X=H, Y=MeO 60, X=CI. Y=NH2
terc.butylester 1-[2- (4-methoxybenzoalami.no) -3-tnethylbutyryl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (54)
K suspenzi 2,011 g (7,44 mmol) H-val-pro-OtBu.HCl (53) v 20 ml dichlormethanu se přidá 3,2 ml (18,4 mmol) DIEA a potom roztok 1,26 g (7,4 mmol) 4-methoxybenzoylchloridu v 5 ml dichlor118 ·· #* · « φφ φφ φφ • · φ · · · * φ φ β φ φ ·« φ ' φφ φ φ φφ φ ·· · · · · φφφ φφ φ • · · «φφ φφφφ φφφφ φφ φφφ φφ «φ φφ methanu. Roztok se míchá 1 hodinu v dusíkové atmosféře při teplotě místnosti a potom se odpaří. Získaný olej se rozpustí v ethylacetátu a promyje se dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu draselného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, potom se odpaří ve vakuu a získá se 2,814 g (výtěžek 94 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,05 (dd, 6H) , 1,46 (s, 9H), 1,88-2,29 (m, 5H), 3,65-3,74 (m, 1H), 3,81-3,92 (m, 1H) , 3,85 (s,'3H), 4,32-4,42 (m, 1H) ,- 4,81-4,91 (m, 1H) , 6,79-6,86 (m, 1H), 6,91 (d, 2H), 7,78 (d, 2H). Analytická HPLC (kolona kyano) 10,18 minuty.
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl) amid 1-(2-(4-methoxybenzoylamino) -3 -methylbutyryl ]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (56) l,079g (2,67 mmol) vzorek sloučeniny 54 se rozpustí v 40 ml
15% kyseliny trifluoroctová v dichlormethanu a směs se míchá 4 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a získá se 0,93 g (100 %) sloučeniny 55 ve formě bílé pevné látky, která se použije v dalším kroku.
K roztoku 1,796 g (6,17 mmol) sloučeniny 40 v 20 ml dichlormethanu se přidá 1,119 g (7,17 mmol) DMBA a 0,683 (0,5 9. mmol)
Pd(PPh3)4 a roztok se míchá 20 minut při teplotě místnosti. Přidá se roztok - 0,928 g (2,67. mmol) sloučeniny 55 v 17 ml dichlormethanu a 2 ml dimethylformamidu, potom 0,811 g (6,0.1 mmol) HOBT a 1,16 g (6,04 mmol) EDC. Reakční směs se míchá v dusíkové .atmosféře 18 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se promyje dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou a suší se nad bezvodým síranem sodným, filtruje se a odpaří se za získání žluté pevné látky.
• 4 <9
4
44
4 4
4 4 • Φ «·
Φ 4 4 Φ
Φ> · Φ · • · 4 4
4 4 4
49
119
4
4994
4 · ··· »·
Po čištění pomocí velmi rychlé chromatografie za eluce směsí ethylacetátu a dichlormethanu (10/90 až 40/60) se získá 910 mg (63 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle žluté pevné látky. XH-NMR (50 0MHz, deuterochloroform) δ 0,96 (dd, 6H)., 1,84-2,19 (m, 4H), 2,25-2,38 (m, 1H), 2,45 (dd, 1H), 2,80-2,98 (m, 1H) , 3,60-3,72 (m, 1H) , 3,82-3,95 (m, 1H) , 3,86 (s, 3H) ,
4,26-4,95 (m, 6H) , 5,41 (s, 0,2H), 5,53 (d, 0,8H), 6,67-6,77 (m, 1H) , 6,88-6,99 (d, 2H) , 7,22-7,57 (m, 5H) , 7,71-7,82 (d,
2H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diástereomerů) 9,21 minuty. LC-MS (ES+) m/e= 538,3 (M+H).
3- ( {l- [2- (4-Methoxybenzoylamino) -3-methylbutýryl] pyrrolídin-2karbonyl}amino) -4-oxobutanova kyselina (57)
125mg (0,23 mmol) vzorek sloučeniny 56 se hydrolyzuje podle způsobu A (viz. schéma XXIII) a získá se 60 mg (výtěžek 58 %) sloučeniny uvedené v názvu: Analytická HPLC 5,71 minuty. LC-MS (ES+) m/e=448,2 (M+H).
Příprava 4-amino-3-chlorbenzoové kyseliny:
Suspenze 4,82 g (31,58 mmol) 4-amino-3-chlorbenzonitrilu se ve 140 ml 6N roztoku kyseliny chlorovodíkové zahřívá k varu pod zpětným chladičem. Sraženina se rozpustí zahříváním a získá se bezbarvý roztok. Po dalším zahřívání se roztok zakalí. Po 9 hodinách se reakční směs ochladí na teplotu místnosti. Získaná sraženina se filtruje, potom se rozpustiv tetrahydrofuranu a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se opakovaně odpaří z toluenu a získá se 3,18 g (59 %) bílé pevné látky. 1H-NMŘ (500MHz, deuteromethanol: deuterochlorof orm 1:4) δ 6,80 (d, 1H) , 7,75 (dd, 1H), 7,94 (d, 1H). Analytická HPLC (kolona kyano) 8,73 minuty.
terč.butylester 1-[2-(4-amino-3-chlorbenzoylamino)-3-methylbutyryl ] pyrrol idin-2 -karboxyl ové kysel iny (58) • ·
120
K suspenzi 1,707 g (6,31 mmol) sloučeniny 53 v 25 ml dichlor\ methanu se při 0 °C přidá 3,2 ml (18,4 mmol) DIEA, potom roztok 1,298 ' g (7,56 mmol) 4-amino-3-chlorbenzoové kyseliny, 1,00.5 g (7,44 mmol) HOBT- a 1,456 g (7,58 mmol) EDO. Získaná směs se míchá 15 minut při 0 °C, potom se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se 18 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a získaný olej se rozpustí v ethylacetátu, promyje se dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu. sodného a solankou a získá se 2,68 g bílé pevné látky. .Po čištění pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi methanolu a dichlormethanu (1/99 až 2/98) jako eluentu se získá 2,04 G (výtěžek 76 %) sloučeniny 58 ve formě bílé pevné látky. ^-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,05 (dd, 6H) , 1,47 (s, 9H) , 1,86-2,2 (m, 5H) , 3,62-3,76 (m,
1H) , 3,78-3,94 (m, 1H) , 4,39 (dd, 1H) , 4,79-4,89 (dd, 1H) , 6,73 (d, 1H) , 6,78 (d, 1H) , 7,52 (dd, 1H) , 7,75 (d, 1H) . Analytická HPLC (kolona kyano) 16,18 minuty. LC-MS (ES) m/e=424,3 (M+H).
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1- [2- (4-amino-3 chlorbenzoylamino) -3 -methylbutyrylJ pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (60)
0,632g (1,4-9 mmol) vzorek sloučeniny 58 se rozpustí v 20 ml 50% kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu a roztok se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti. Zbývající kyselina trifluoroctová s eodstraní opakovaným odpařením z dichlormethanu (3x) a získá se produkt ve formě bílé pevné látky.
385mg (1,04 mmol) vzorek se nechá reagovat se sloučeninou 40 pomocí postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 56. Izoluje se 265 mg (45 %) sloučeniny uvedené v názvu (60) ve formě žluté pevné látky. XH NMR (500 MHz, deuteromethanol) δ 0,89-1,12 » · · (m, 6H) , 1,72-2,26 (m, 5H) , 2,49 (dd, 0,25H), 2,60 (dd, 0,7H),
2,80 (dd, 0,75H), 2,96-3,09 (m, 0,3H), 3,64-3,77 (m, 1H) ,
3,94-4,10 (m, 1H) , 4,20-4,74 (m, 4H) , 4,76-4,95 (m, 1H) , 5,51 (s, 0,5H), 5,61-5,70 (m, 1,5H), 6,79 (dd, 1H) , 7,23-7,43 (m, 5H) , 7,48-7,61 (m, 1,4H), 7,68-7,81 (m, 1H) , 7',99-8,12 (m, 0,6H).
Analytická HPLC (kolona kyano.) (směs 2 diastereomerú) 14,90, 15,20 minuty. LC-MS (ES+) m/e=557,2 (M+H).
3- ( {l- [2- (4-Amino-3-chlorbenzoylamino) -3 -methylbutyryí] pyrrolidin-2-karbonyljamino) -4-oxobutanová kyselina (61)
45mg (0,08 mmol) vzorek sloučeniny 60 se hydrolyzuje podle způsobu A (viz. schéma XXIII) a získá se 30 mg (výtěžek 80 %) sloučeniny uvedené v názvu: XH NMR (500MHz, deuteromethanol) 1,06 (dd, 6Ή) , 1,78-2,38 (m, 5H) , 2,3-8-2,86 (m, 2H) , 3,62-3,83 (m, * 1H) , 4,12-4,76 (m, 4H), 7,04-7,21 (m, 1H) , 7,58-8,01 (m,
2H); Analytická HPLC 8,16 minuty. LC-MS (ES+) m/e=467,3 (M+H).
Schéma XIII
122
terč.butylester 1- [2-(4-hydroxy-3,5-dimethylbenzoylamino)-3methylbutyryl]-pyrroli din - 2-karboxylové kyseliny (63)
K roztoku' 600 mg (1,22 mmo-1) sloučeniny 62 (připravené ze sloučeniny 53 a Fmoc-Cl) v 10 ml bezvodého dimethylformamidu se přidají 3 ml diethylaminu. Roztok se míchá v dusíkové atmosféře při teplotě místnosti 3 hodiny a rozpouštědlo se odpaří. Získaný olej se rozpustí v 8 ml dichlormethanu a přidá se 0,302 g (1,82 mmol) 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzoové kyseliny, 338mg (2,5mmol) HOBT a 0,456g (2,43mmol) EDO a roztok se míchá 18 hodin v dusíkové atmosféře při. teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a získaný olej se rozpustí v ethylacetátu, promyje se dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíránu, sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou a získá se 0,8 0 g surového produktu ve formě bílé pevné látky. Po čištění pomocí velmi rychlé chromatografie za eluce směsí, methanolu a dichlormethanu (1/99 až 2/98 %) se získá 380 mg (výtěžek 75 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,06 (dd, 6H) , 1,47 (s, 9H) , 1,90-2,32 (m, 5H) , 2,24 (s, 6H) , 3,653,75 (m, 1H) , 3,84-3,92 (m, 1H), 4,36-4,42 (m, 1H), 4,824,88 (m, 1H) , 5,53-5,61 (m, 1H) , 6,77-6,85 (m, 1H) , 7,42 (s, 2H) . Analytická HPLC (kolona kyano) 17,53 minuty. LC-MS, (ES+) m/e=419,.3 (M+H) .
( 2-benzyloxy-5-oxo-tetrahydrofuran-3-yl) -amid 1- [2- (4-hydroxy3,5-dimethylbenzoylamino) -3-methylbutyryl] -pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (64)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 63 a sloučeniny 40 pomocí způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 56 a získá se 352 mg (72 %) sloučeniny uvedené v názvu (64) ve formě světle žluté pevné látky. 1H-NMR (500MHz,. deuterómethanol) δ 0,83-1,28 (m,
123 šH) , 1,66-2,37 (m, 3H) , 2,23 (s, 6H) , . 2,48-2,54 (m, 0,2Η), 2,61 (ddd, 0,8Η), 2,72 (ddd, 0,9Η), 3,01-3,09 (m, 1Η) , 3,663,76 (m, iH) , 3,95-4,07 (m, 1Η) , 4,484,73 (m, 3Η) , 4,75-4,92 (m, 1Η) , 5,45-5,48 (m, Ο,ΙΗ), 5,61-5,64 (m, Ο,ΙΗ), 5,64-5,70 (σι, 0,8Η) , 7,21-7,62 (m, 6H) , 7,88-8,04 (m, 1Η) . Analytická
HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 17,73 minuty. LC-MS (ES) m/e= 552,3 (M+H).
3- ( fl - [2- (4-Hydroxy-3,5-dimethylbenzoylamino) -3-methylbutyryl]pyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (65)
160mg (0,29 mmol) vzorek sloučeniny 64 se hydrolyzuje podle způsobu A (viz. schéma XXIII) a získá se 13,1 mg (výtěžek 10 %) sloučeniny uvedené v názvu: Analytická HPLC (kolona kyano) 10,28 minuty. LC-MS (ES + ) m/e=462,.2 (M+H).
Schéma XIV
terč.butylester 1- [2- (2-9H-fluoren-9-yl-acetylamino)-3,3-dimethylbutyryl]-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (66)
K roztoku 1,033 g (6,0 mmol), II schéma 5) H-pro-OtBu (53) v 20 ml dichlormethanu a 5 ml dimethylformamidu se přidá 2,337 g (6,60 mmol,· I, schéma 5) Fmoc-tLeu-OH, 1,63 g (12,1 mmol) HOBT a 2,30 g (12,0 mmol) EDC' a roztok se míchá při teplotě míst• · · · « · · · • · · · • · · · • · · ·
124
nosti v dusíkové atmosféře 18 hodin. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se rozpustí v ethylacetátu, potom se promyje dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem sodným a odpaří se za získání 3,65 g světle žluté pevné látky. Po čištění pomocí velmi rychlé chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a hexanu (10/90 až 20/80) se získá 2,25 g
(výtěžek 74 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500MHz, deu-
terochloroform) δ 1,09 (s, 9H) , 1,47 (s, 9H) , 1,79-2,28 (m,
3H), 3,62-3,72 (m, 1H), 3,76-3,83 (m, 1H) , 4,18- 4,43 (m, 4H) ,
5,48-5,67 (m, 1H) , 7,28 - 7,44 (m, 4H) , 7,55-7,64 (m, 2H) , 7,727,82 (m, 2H). Analytická HPLC (kolona kyano) 11,95 minuty. LCMS (ES+) m/e = 507,3 (M+H).
terč.butyl ester 1-[2- (4-methoxybenzoylamino)-3,3-dimethylbutyryl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (67)
K roztoku 0,503 g (0,99 mmol) sloučeniny 66 v 8 ml dimethylformamidu se přidá 2,5 ml diethylaminu a roztok se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se třikrát odpaří z dichlormethanu. Získaný olej se rozpustí v 9 ml dichlormethanu a přidá se 260 μΐ (1.,49 mmol) DIEA a 190 mg (1,05 mmol) 4-methoxybenzoylchloridu. Roztok se míchá 18 hodin v dusíkové atmosféře a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a dvakrát se promyje 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou a potom se suší nad bezvodým síranem sodným a odpaří se za získání 0,529 g bílé pevné látky. Po čištění pomocí velmi rychlé chromatografie na silikagelu za použití směsi methanolu a dichlormethanu (1/99 až 2/98 %) jako eluentu se získá 2,25 g (74 %) sloučeniny uvedené v názvu. XHNMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,01 (s, 1?4H), .12 5
0 0 0 · · · · 0 ·· • 0 0 · · · · 0 · 00 0
000 000 0000
0 0 0· 000 0 0 0
00 000 000 0
0000 00 000 00 00 00
1,11 (s, 7,6H), 1,73-2,25 (m, 4H) , 2,47-2,77 (m, 1H) , 2,81 (dd, 0,7H), 2,91-3,11 (m, 0,3H), 3,61-4,03 (m, 3H) , 3,84 (s,
3H) , 4,29-4,49 (m, ' IH) , ' 4,49-5,00 (m, 5H) , 5,46 (s, 0,15H),
5,58-5,73 (m, 0,85H), 6,94-7,04 (m, 2H) , 7,27-7,41 (m, 4H) ,
7.61- 7,73 (m, 1H), 7,74-7,84 (m, 2H). Analytická HPLC (kolona kyano) 13,10 minuty.
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3^-yl) -amid 1- [2- (4-methoxybenzoylamino) -3,3 -dimethylbutyryl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (68)
K roztoku 0,90 g (1,74 mmol) sloučeniny 67 v 25 ml dichlormethanu se přidá 2,1 ml (18,0 mmol) 2,6-lutidinu a 2,3 ml (11,9 mmol) TMS-třiflátu a reakční směs se míchá 1,5 hodiny při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře. Získaná směs se zředí dichlormethanem, dvakrát se promyje 10% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou a suší se nad bezvodým síranem sodným, filtruje se a odpaří se. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu, potom1 se reaguje s 0,6 ml (3,5 mmol) DIEA a 0,355 g (2,09 mmol) 4-methoxybenzoylchloridu a nechá se v dusíkové atmosféře, při teplotě místnosti míchat 18 hodin. Surový produkt se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za eluce směsí dichlormethanu a methanolu 99/1 za získání 274 mg (výtěžek 28 %) sloučeniny uvedené v názvu. ^-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,01 (s, 1,4H), 1,11: (s, 7,6H), 1,73-2,25 (m,
4H), 2,47-2,77 (m, 1H), 2,81 (dd, 0,7H), 2,91-3,11 (m, 0,3H),
3.61- 4,03 tm, 3H), 3,84 (s, 3H), 4,29-4,49 (m, 1H), 4,49-5,00 (m, 5H), 5,46 (s, 0,15H), 5,58-5,73 (m, 0,85H), 6,94-7,04 (m,
2H) , 7,27-7,41 (m, 4H) , 7,61-7,73 (m, 1H) , 7,747,84 (m, 2H) .
Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 17,03,
17,39 minuty. LC-MS (ES+) m/e=552,3 (M+H).
3- ( {l- [2- (4-Methoxybenzoylamino) -3,3-dimethylbutyryl]pyrroli• · ·· · ·· ·· • · · · ♦ · · · · * · ·
6 ďin-2-karbonyl}amino) -4-oxobutanová kyselina (69)
117mg (0,2.1 mmol) vzorek sloučeniny 68 se hydrolyzuje podle způsobu C (viz. schéma XXIII) a získá se 40 mg (výtěžek 41 %) sloučeniny uvedené v názvu: Analytická HPLC 7,16 min. LC-MS (ES*) m/e=462,3 (M+H).
benzylester 1-(2-terč.butoxykarbonylamino-3, 3-dimethyl-butyryl)pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (70)
K supenzi 2,00 g (8,66 mmol) H-pro-OBzl·HCI v 20 ml dichlormethanu se přidá 2,25 ml (12,92 mmol) DIEA za vzniku bezbarvého roztoku. Přidá se 1,95 g (9,52 mmol) Boc-tLeu-OH, 1,76 g (13,03 mmol) HOBT a 2,49 g (12,95 mmol) EDC a roztok se míchá v dusíkové atmosféře při teplotě místnosti 18 hodin. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu, zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje se vodou, dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného . a solankou. Organická fáze se suší nad bezvodým síranem sodným a odpaří se za získání 3,57 g (výtěžek 99 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 0,99 (s, 9H) , 1,40 (s, 9H), 1,88-2,33 (m, 4H), 3,58-3,90 (m, 2H), 4,21-4,35 (d, 1H) , 4,53-4,66 (m, 1H) , 5,04-5,38 (m, 3H) , 7,14-7,42 (m,
127
99 9 99 99 99
99 9 999 9 9 · · 9
999 999 9999
9 99 99 999 99 ·
9· 999 9 999
9999 99 999 99 99 99
5H) . LC-MS (ES + ) m/e=419,4 (M+H).
terč. butylester (l - [2 - (2-benzyloxy- 5-oxo-tetrahydro-furan- 3 ylkarbamoyl) -pyrrolidin-1-karbonyl] -2, 2-dimethyl propyl}karbamové kyseliny (71) .
871mg (2,08 mmol) vzorek sloučeniny 70 se rozpustí v 15 ml methanolu a přidá se 200 mg 10% palladia na uhlí. Suspenze se míchá 1 hodinu ve vodíkové atmosféře, potom se filtruje přes křemelinu a rozpouštědlo se odpaří. Získaný zbytek se reaguje se sloučeninou 40 podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 56 za získáni 889 mg (výtěžek 71 %) sloučeniny uvedené v názvu 71. XH-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 0,93 (s, 9H) ,
1,44 (s, 9H), 1,78-2,18 (m, 4H), 2,29-2,49 (m, 2H), 2,76-3,04 (m, 1H) , 3,50-3,70 (m, 1H) , 3,70-3,85 (m, 1H) , 4,20-4,37. (m,
1H) , 4,49-4,78 (m, 3H) ,. 4,78-4,98 (m, 1H) , 5,12-5,26. (m, 1H) ,
5,40-5>59 (m, 1H) , 7,10-7,78 (m, 5H) . Analytická HPLC (kolona kyano) 11,17 minuty. LC-MS (ES+) m/e=518,3 (M+H).
(2 -benzyloxy-5-oxo-tetrahydro-furan-3 -yl) amid 1- [2- (4-amino-3chlorbenzoylamino)-3,3-dimethylbutyryl]pyrrolidin-2-karboxylo ve kyseliny (72)
Roztok 456 mg (0,088 mmol) sloučeniny 71 v 20 ml dichlormethanu se reaguje s 5 ml bezvodé kyseliny trifluoroctové, potom se míchá v dusíkové atmosféře při teplotě místnosti 1 hodinu a odpaří se do sucha. Zbytek se třikrát opakovaně odpaří z dichlormethanu, potom se suší ve vakuu. Získaný zbytek se rozpustí v 20 ml dichlormethanu, ochladí se na 0 °C, potom se reaguje s 1,3 ml (8 ekvivalentů, 2,46 mmol) DIEA, potom se 202 mg (1,17 mmol) 4-amino-3-chlor-benzoově kyseliny, 183 mg (1,35 mmol) HOBT a 279 mg (1,45 mmol) EDC. Získaná směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se 18 hodin. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se rozpustí v ethylacetátu, potom ·· ·· ř · * « > ·· I
128 ···· se promyje třikrát destilovanou vodou, dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická vrstva se suší nad síranem sodným, filtruje se a odpaří se do sucha za získání zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatograf ie, za eluce směsí dichlormethanu a methanolu (99/1 až 97/3 %). Získá se 28-5 mg (výtěžek 57 %) sloučeniny uvedené v názvu (72) ve formě žluté pevné látky.
XH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 0,91-1,24 (m, 9H), 1,70-2,27 (m, 4H) , 2,47-2,85 (m, 1,5H), 2,99-3,13 (m, 0,5H), 3,39-3,53 (m, 0,5H), 3,60-3,78 (m, 1,5H), 3,85-4,04 (m, 1H) , 4,24-4,47 (m, 2H) , 4,53-4,97 (m, 4H) , 5,46 (s, 0,3H), 3,88-4,02 (m,
0,lH), 5,60-5,69 (m, 0,6H), 6,80 (d, 1H) , 7,22-7,77 (m, 7H) .
Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 15,90, 16,23 minuty. LC-MS. (ES+) m/e=571,2 (M+H).
- ({l- [2- (4-Amino-3-chlorbenzoylamj.no) -3,3 -dimethylbutyryl] pyrrolidin-2-karbonyl}amino) -4-oxobutanová kyselina (73)
40mg (0,07 mmol) vzorek sloučeniny 72 se hydrolyzuje podle způsobu’A (viz. schéma XXIII) a získá se 25 mg (výtěžek 74 %) sloučeniny uvedené v názvu: Analytická HPLC (kolona kyano) 10,66 minuty. LC-MS (ES+) m/e=481,3 (M+H).
• «φ φφ ·· φφ φ φ φ · φ · φφφ φφφφ φ φ φφφ φ · · φφφ φφφφ φφφ φφ φφ φφ
ΦΦ » φ φ φ φ
129 φ φ φφ
Schéma XVI
76-93 terč. bu tyl ester {2- [2- (2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3ylkarbamoyl) -pyrrolidin- 1-yl] -1-methyl-2-óxo-ethylJkarbamové kyseliny (75)
K roztoku 6,69 g (23,0 mmol) sloučeniny 40 v bezvodém dichlormethanu se přidá ,3,97 g (25,4 mmol) 1,3-dimethylbarbiturové kyseliny (DMBA) a 1,12 g (0,97 mmol) Pd(PPh3)4. Roztok se míchá 15 minut při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře, ochladí se na 0 °C, potom se přidá 5,087 g (17,8 mmol) Boc-ala-pro-OH (BaChem) , . 3,60 g (26,7 mmol) HOBT a 5,12 g (26,7 mmol) EDC. Získaný roztok se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se 18 hodin v dusíkové atmosféře. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se rozpustí v ethylacetátu, potom se dvakrát promyje 0,'5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem sodným a odpaří se za získání 12,23 g' oranžového oleje. Po čištění pomocí, velmi rychlé chromatografie na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a ethylacetátu (80/20 až 60/40) jako eluentu se získá 7,28 g (výtěžek 86 %) sloučeniny uvedené v názvu (75) ve formě žluté pevné látky. XHNMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,19-1,31 (m/ • * • · • ·
130
3H) , 1,42 (s, 9H), 1,69-2,29 (m, 4H) , 2,45-2,67 ( m, 0 , 9H)
2,71-2,86 (m, 0,5H), 2,99-3,10 (m, 0,6H), 3,49-3,84 (m, 2H)
4,244,45 (m, 2,5H), 4,57-4,73 (m, 1,5H), 4,76-4,92 (m, 1H)
5,45 (S, 0,45H), 5,63-5,68 (m , - 0,55H), 7,25-7,40 (m, 5H)
Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 15,99, 16,33 minuty. LC-MS (ES + ) m/e=476,3 (M+H).
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)-amid 1-[2-(4-amino-3chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (76) l,899g (3,99 mmol) vzorek sloučeniny 75 v 20 ml dichlormethanu se reaguje s 5 ml bezvodé kyseliny trifluoroctové, potom se míchá. 1 hodinu v dusíkové atmosféře při teplotě místnosti a odpaří se do sucha. Zbytek se třikrát opakovaně odpaří z dichlormethanu a potom se suší ve vakuu. Získaný zbytek se rozpustí ve 20 ml dichloremthanu, ochladí se na 0 °C, potom se reaguje s 5,6 ml (8 ekvivalentů, 32,1 mmol)' DIEA, 0,910 g (5,3 mmol) 4-amino-3-chlorbenžoové kyseliny, 0,824 g (6,1 mmol) HOBT a 1,197 g (6,23 mmol) EDC. Získaná směs se ohřeje na teplotu místnosti a míchá se 18; hodin.- Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se rozpustí v ethylacetátu, potom se promyje třikrát destilovanou vodou, dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická vrstva se suší nad síranem sodným, filtruje se a odpaří se za získání zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi dichlormethanu a methanolu (99/1 až 97/3) jako eluentu. Získá se 1,221 g (výtěžek 58 %) sloučeniny uvedené vnázvu ve formě bílé pevné látky. 1H-NMR (5θΟΜΗζ, deuterochlorof orm) δ 1,15
131 (d, 0,25H), 1,29-1,60 (m, 2,75H), 2,41-2,54 (m, 0,5H), 2,552,70 (m, 0,5H), 2,77 (dd, 0,5H), 3,03 (ddd, 0,5H) , 3,59-3,75 (m, 1H) , 3,75-3,98 (m, 1H) , 4,26-5,01 (m, , 5H) , 5,41 - 5 , 57 (m, 1H) , 5,60-5,76 (m, 0,5H), 6,706,92 (m, 0,5H), 7,15-7,48 (m, 5H) , 7,48-7,68 (m, 1H) , 7,68-7,88 (m, 1H) , 8,15-8,34 (m, 1H) .
Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 14,44, 14,89 minuty. LC-MS (ES*) m/e=529,3 (M+H).
(2-benzyloxy-5 -oxo-tetrahydro-furan-3-yl)amid 1-(2-(4-methoxy3,5-dimethylbenzoylamino)propionyl] -pyrrolidin-2 -karboxylové kyseliny (77) ·
Sloučenina se syntetizuje ze sloučeniny 75 a 3,5-dimethyl-4methoxybenzoové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 1,18 g (44 %) sloučeniny uvedené v názvu. ^-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,40 (m, 3H), 1,672,41 (m, 4H) , 2,28 (s, 6H), 2,48 (ddd, 0,5H), 2,62 (dd, 0,5H),
2,78 (ddd, 0,5H), 3,04 (ddd, 0,5H), 3,62-3,94 (m, 3H), 3,71 (s, 3H), 4,21-4,51 (m, 2H), 4,59-4,85 (m, 4H), 5,46 (s,
0,25H), 5,52 (s, 0,25H),' 5,63 (d, 0,4H), 5,67 (d, 0,lHj, 7,177,45 (m, 5H) , 7,45-7,65 (m, 2H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 15,06, 15,39 minuty. LC-MS (ES*) m/e=538 (M+H)
Příprava 4-acetylamino-3-chlorbenzoové kyseliny
K roztoku 4-amino-3-chlorbenzoové kyseliny (10,0 g, 58,3 mmol) ve 100 ml bezvodého tetrahydrofuranu se přidá 20,7 ml (291,1 mmol) acetylchloridu a roztok se míchá při teplotě místnosti
132 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a produkt se sráží z hexanu, odfiltruje se a. získá se 11,73 g (výtěžek 94 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuteromethanol ) δ 2,28 (s, 3H) , 7,92 (dd, 1H) , 7,99-8,16 (m, 2H). Analytická HPLC (kolona kyano) 7,84 min.
(2 -benzyloxy-5-oxotetrahydro- furan-3 -yl) amid 1 - [2- (4 -acetyl amino-3-chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (78)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 4-acetylamino-3chlorbenzoové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 146 mg (výtěžek 19 %) sloučeniny uvedené v názvu.. XH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,28-1,52
(m, 3H), 1,68- 2,38 (m, 4H), 2,20 (s , 3H) , 2,41-2,88 (m, 1,5H
2,96-3,10 (m, 0,5H) , 2,96-3,10 (m, 0,5H) , 3,43-3,75 (m, 1H
3,80-3,96 (m, 1H) , 4,25-5,00 (m, %H) , 5,42-5,54 (m, 0,5H
5,63-5,78 (m, 0,5H) , 7,13-7,48 (m, 0 5H) , 7,79-8., 14 (m, 2,5H
8,56-8,70 (m, 0., 5H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs
diastereomerú) 8,64 min. LC-MS (ES + ) m/e=571,2 (M+H).
(2 -benzyloxy-5 -oxo tetrahydro-furan-3 -yl)amid 1-[2-(3-isopropoxybenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (79)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 3-isopropoxybenzoové
133
• · kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 120 mg (výtěžek 58 %) sloučeniny uvedené v názvu. XHNMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,27 (d, 6H) , 1,33-1,52 (m,
3H) , 1,69-2,31 (m, 4H), 2,49 (dd, 0,3H), 2,63 (dd, 0,7H), 2,78 (dd, 0,7H), 3,03 (dd, 0,3H), 3,43-3,73 (m, 1H) , 3,78-3,94 (m,lH), 4,274,47 (m, 2H) , 4,47-4,87 (m, 4H) , 5,47 (s, 0,7H), 5,53 (d, 0,3H), 5,64 (d, 0,8H) , 5,72 (d, 0,2H) , 6,98 - 7, 12 (m, 1H), 7,19-7,47 (m, 9H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 14,54, 14,85 minuty. LC-MS (ES) m/e=538 (M+H).
(2 - [2- (2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3 -ylkarbamoyl)pyrroli din-l-yl]-l-methyl-2-oxoethyl}amid chinoxalin-2-karboxylové kyseliny (80)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 2-chinoxalinkarboxylové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 122 mg (výtěžek 60 %) sloučeniny uvedené v názvu. lH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,12-1,67 (m, 3H), 1,68-2,34 .(m, 4H) , 2,35-2,70 (m, 0,85H), 2,70-2,95 (m, 0,75H),.3,06 (dd,
0,4H), 3,41-3,49 (m, 2H) , 4,18-5,03 (m, 6H) , 5,47 (d, 0,5H), 5,55, (d, 2H) , 5,67 (dd, 1H) , 5,71 (dd, .0,3H), 7,037,53 (m, 5H) , 7,80-8,06 (m, 2H) , 8,06-8,34 (m, 2H) , 9,43-9,48 (m, 1H) .
Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 9,06 minuty. LC-MS (ES*) m/e=532,3 (M+H).
134
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid l-[2-(3-benz.yloxy4 -methoxybenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyše líny (81)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 3-benzyloxy-4-methoxybenzoové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 142 mg (výtěžek 58 %) sloučeniny uvedené v názvu. ^NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,14 (d, 0,3H)\
1,27-1,52 (m, 2,7H), 1,66-2,30 (m, 4H), 2,47 (dd, 0,4H), 2,59 (dd, 0,6H), 2,77 . (dd, 0,6H), 3,02 (dd, 0,4H), 3,41-3,72 (m,
1H) , 3-,72-3,99 (m, 2H) , 3,86 (s, 3H) , 4,19-4,86 (m, 5H) , 4,995,15 (m, 2H) , 5,45 (m, 0,8H), 5,65 (m, 1,2H), 6,98 (dd, 1H) , 7,11-7,63 (m, 12H). Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 12,28, 12,44 minuty. LC-MS (ES+) m/e=616,3 (M+H)'.
-Allyloxy-3,5-dimethylbenzoová kyselina
Směs- 3,32 g (20 mmol) 4-hydroxy-3,5-dimethylbenzoové kyseliny, 7,26 g (60 mmol) allylbromidu, 455- mg (2 mmol) benzyltriethylamoniumchloridu a 6,9 g (50 mmol) uhličitanu draselného v 50 ml dimethylformamidu se míchá 16 hodin při teplotě místnosti. Směs se zředí 200 ml ethylacetátu, promyje se vodou a solankou. Organická vrstva se suší nad síranem sodným,, filtruje se a odpaří se ve vakuu za získání 5,3 g esteru ve formě oleje. Ester se zahřívá k varu pod zpětným chladičem s 5 g (125 mmol) hydroxidu sodného ve směsi vody a methanolu (50 ml/50 ml) 6 hodin. Směs se odpaří ve vakuu, čímž se odstraní methanol a
• · · • · · »
135 získaný roztok se zředí 200 ml vody, promyje se směsí ethylacetátu a hexanu (30 ml/70 ml) . Vodná vrstva se při 0 °C okyselí pomocí koncentrovaného roztoku kyseliny chlorovodíkové na pH 2. Získaná sraženina se odfiltruje a promyje se vodou, suší se za vysokého vakua a získá se 3,86.g (výtěžek 94 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) : δ 2,33 (s, 6H) , 4,35-4,37 (m, 2H) , 5,28-5,30 (m, Η) ,
5,42-5,46 (m, Η), 6,07-6,15 (m, Η), 7,79 (s, 2H); retenční čas
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydro-furan-3-yl)-amid 1-[2-(4-allyloxy-3,5-díchlorbenzoylamino)propionyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (82)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 4-allyloxy-3,5-dichlorbenzoové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 208 mg (47 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,05-1,58 (m,
3H) , 1,68-3,21 (m, 7H) , 3,39-3,90 (m, 3H) , 4,05-5,01 (m, 6H) ,
5,22-5,62 (m, 3H), 6,04-6,25 (m, 1H) , 6,94-7,63 (m, 8H).
Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 9,69, 9,89 minuty. LC-MS (ES+) m/e=604,2 (M+H).
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)-amid 1- [2- (3,5-di-.
chlor-4 -hydroxybenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové. kyseliny (83) • · · · • 9 9 4
9 « • · <
· <
9999 99
136
140mg , (0,23mmol) vzorek sloučeniny 82 se rozpustí v 4 ml dichlormethanu s reaguje se s 35,4 mg (0,26 mmol) DMBA a 32 mg (0,028 mmol) Pd(PPh3)4. Roztok se míchá 15 minut při 0 °C, 2 hodiny se zahřívá na teplotu místnosti, potom se zředí dichlormethanem a dvakrát se. promyje vodou a solankou. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se'čistí pomocí velmi rychlé chromatografie na silikagelu za použití směsi methanolu a dichlormethanu (1/99 až 3/97) jako eluentu a získá se 93,2 mg (výtěžek 71 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,16 (d, 0,25H), 1,28-1,49 (m, 2,75H), 1,632,33 (m, 4H) , 2,48 (dd, 0,4H) , 3,39-3,59 (m, 0,2H), 3,60-3,73 (m, 0,8H), 3,73-3,96 (m, 1H), 4,24-4,48 (m, 2H), 4,57-4,92 (m,
7H), 5,44 (s, 0,4H), 5,50 (d, 0,4H), 5,64 (d, 0,8H), 5,75 (d,
0,5H), 7,16-7,43 (m, 5H) , 7,78-7,89 (m, 1,6H), 8,40-8,63 (m,
0,4H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 11,57, 11,82 minuty. LC-MS· (ES+) m/e = 564,l (M+H)
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)-amid .2-(2-benzoylaminopropionyl) pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (84)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a benzoylchloridu podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 8 mg (výtěžek 38 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvého oleje.' XH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,35-1,54 (m, 3H) , 1,72-2,30 (m, 4H) , 2,42-2,70 (m, 1,3H)„, 2,74-2,84 (m, 0,5H), 3,03 (dd, 0,2H), 3,41-3,75 (m, 2H), 3,81-3,96 (m, 1H) , 4,22-4,86 (m, 4H) , 5,46 (s, 0,3H), 5,51-5,54 (m, 0,1Ή), 5,66 (d, 0,5H), 5,72 (d, 0,lH), 7,20-7,57 (m, 7H) , 7,77-7,89 (m, \
7 • · fc* * · · · fc · · • · ♦ • fcfcfc fcfc fc • fc fcfc fc · . · « fc • · · fcfc fcfc fcfcfc fcfcfc · ·
2H) , 8,42-8,67 (m, 1H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů) 15,23, 15,67 minuty. LC-MS (ES*) m/e=481,2 (M+H)
{2- (2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran - 3-ylkarbamoyl)pyrrolidin1-yl]-1-methyl-2-oxoethyl}amid isochinolin-1-karboxylové kyseliny (85)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 1-isochinolinkarboxylové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 76. Získá, se 732 mg (výtěžek 53) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,22-1,56 (m, 3H) ,
1,70-2,34 (m, 4H) , 2,43-2,7 (m, 0,9H), 2,73-2,89 (m, 0,5H),
3,06 (ddd, 0,6H), 3,42-3,81 (m, 2H), 3,84-4,01 (m, 1H), 4,295,00 (m, 5H), 5,47 (d, 0,65H), 5,55 (s, 0,3H), 5,67 (d, 0,8H), 5,72 (d, 0,25H), 7,21-7,43 , (m, 5H) , 7,49-7,83 (m, 2,8H), 7,888,04 (m, 1,8H), 8,45-8,54 (m, 0,8H), 8,97-9,06 (m, 0,6H). Analytická HPLC (směs 2 diastereomerů) 15,71, 16,04 minuty.
LC-MS (ES*) m/e = 531,2 (M+H).
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)-amid 1-[2-(4-Amino-5 chlor-2 -me thoxybenzoyl amino) propionyl ] pyrrol idin- 2 -karboxylové kyseliny (86)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 4-amino-5-chlor-2methoxybenzoové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu to·
138 * to « « · « • · <
»··· ··
(výtěžek 61 %) sloučeniny uve -
deuteromethanol) δ 1,22 (d,
1,682,36 (m, 4H) , 2,38-2,89 (m,
, 37-3,98 (m, 6H) , 4,27-4,98 (m,
5-5,56 (s, 0,lH) , 5,60-5,75 (m,
6H) , 5,44-5,50 (m, 0,4H) , 5
0,5H), 6,50 (s, 1H) , 7,17-7,45 (m, 4H) , 7,73-7,90 (m, 1H) ,
8,49-8,70 (m, 1H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerů). 16,39, 16,82 minuty. LC-MS (ES*) m/e= 559,2 (M+H).
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-acetylamino -5-chlor-2-methoxybenzoylamino)propionyl]pyrroli din-2-karboxylové kyseliny (87)
Sloučenina se připraví, ze sloučeniny 75 a 4-acetylamino-5 chlor-2-methoxybenzoové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 364 mg (výtěžek 74 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-3SIMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1-,201,27 (m, 0,25), 1,35-1,49 (m, 0,75H), 1,72-2,30 (m, 4H), 2,23
(s, 3H) , 2,42-2,58 (m, 0,6H), 2,59-2,68 (m , 0,5H)
(m, 0,7H) , 2,993,11 (m, 0,7H) , 3,41-4,07 (m, 5H) ,
(m, 5H) , 4,79-5,56 (m, 0,5H), 5,65-5,73 (m , 0,5H)
(m, 4,3H) , 7,90-8,09 (m, , 2H) , 8,71-8,85 (m, 0,7H).
HPLC (kolona kyano), 1 ^směs 2 diastereomerů) 15
minuty. LC-MS (ES*) m/e = 601,1 (M+H).
139 • fc fcfc ► fcfc • · <
• fc fc· > fc fc. 'fc » fcfc · (2- [2- (2 -benzyloxy-5-oxotetrahydro-f uran-3 -ylkarbamoyl) -pyrrolidin-1-yl] -1-methyl-2-oxoethyíJamid pyridin-2-karboxylové kyseliny (88)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a pyridin-2-karboxylové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 233 mg (výtěžek 42 %) sloučeniny uvedené v názvu. ^-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,30-1,59 (m, 3H), 1,68-2,36 (m, 4H) , 2,39-2,57 (m, 0,6H), 2,57-2,69 (m, 0,35H), 2,71-2,87 (m, 0,4H), 3,05 (dd, 0,65H), 3,39-3,93 (m, 3H), 4,24-4,99 (m,
5H), 5,49-5,55 (m, 0,8H), 5,63-5,77 (m, 1,2H) , 7,17-7,46 (m,
5H) , 7,49-7,60 (m, 1H), 7,89-7,99 (m, 1H)., 8,03-8,12 (m,· 1H) ,
8,58-8,67 (m, 1H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2
diastereomerů) 8,63 min. LC-MS (ES+) m/e=481,3 (M+H).
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3 -yl).-amid] 1- (2- (4 -amino3,5-dichlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (89)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 3,5-dichlor-4-aminobenzoové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 162 mg (70 %) sloučeniny uvedené v názvu.
1H-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,21-1,58 (m, 3H) , 1,582,37 (m, 4H) , 2,37-3,13 (m, 2H) , 3,43-3,74 (m, 1,5H), 3,77140
44
4 I
4 I
44 · *· • 4 4 · · · ·
4 4 4 4
4 4 4 4 4
4 4 4 4
4 4 4 44 4 4 4 44
3,94 (m, 1H) , 4,28 4,51 (m, 1,5H) , 4,50-5,01 (m, 3H) , 5,415,77 (m, 1H) , 7,15-7,49 (m, 5H) , 7,66-7,88 (m, 2H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerú) 8,36 min. LCMS (ES) m/e=563,2 (M+H).
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)-amid 1-[2-(4-methoxy-.
benzoylamino) přopionyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyseliny (90)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 4-methoxy-benzoylchloridu podle postupu použitího pro.přípravu sloučeniny 76. Získá, se 404 mg (50 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500MHz, deuterómethanol) δ 1,19 (d, 0,3H), 1,29-1,58 (m,
2,7H), 1,58-2,38 (m, 4H) , 2,43-2,69 (m, 1H) , 2,74-2,86 (m, 0,6H), 2,99-3,11 (m, 0,4H), 3,39-3,75 (m, 1,5H), 3,77-3,94 (m,
1H) , 3,84 (s, 3H) , 4,29-4,94 (m, 4,5H) , 5,45-5,55 (m, 4,5H), 5,635,71 (m, 0,5H) , 5,73 (d, 0,lH), 6,85-7,09 (m, 2H) , 7,197,44 (m, 4H), 7,73-7,92 (m, 2H), 8,26-8,44 (m, 1Ή). Analytická
HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerú) 15,18, 15,65 min.
LC-MS (ES‘) m/e=510,2 (M+H).
(2-benzyloxy-5'-oxo tetrahydrofuran-3 -yl) amid 1-(2-(( 9 -oxo - 9Hfluoren-4-karbonyl) -amino] prop ionyl}pyrrolidin-2-karboxylová kyseliny (91)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 9-oxo-9H-fluoren141 «· »» · *· ·· ·· * »· · ··» · · ·» ♦ *·* «»· »»·» ·· φ · φ φ · φ · φφφ • φ φ φ φ φ φ φφ · φφφφ φφ φφφ φφ ·· ·· karboxylové kyseliny podél postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 403 mg (44 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,38-1,59 (m,
3H) , 1,75-2,37 (m, 4H) , 2,43-2,59 (m, 0,65H), 2,59-2,72 (m,
0,35H), 2,79-2,89 (m, 0,35H), 3,01-3,11 (m, 0,65H), 3,68-3,86 (m, 1H) , 3,92-4,09 (m, 1H) , 4,35-5,03 (m, 7H) , 5,42-5,90 (m,
1H) , 7,06-8,00 (m, 12H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs diástereomerů).12,30 min. LC-MS (ES*) m/e=582,l (M+H).
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-y!)-amid 1- [2- (3,5-dichlor-4 -methoxybenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (92)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 3,5-dichlor-4methoxybenzoové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 364 mg (46 %) sloučeniny uvedené v názvu. ‘'H-NMR ('500MHz, . deuteromethanol) δ 1,17 (d, 0,25H),
1, 28-1,53 (m, 2,75H), 1,642,33 (m, 4H) , 2,39-2,94 (m, 1,5H)
2 , 94-3,12 (m, 0., 5H) , 3,41-3,74 (m, 2H) , 3,74-4,00 (m, 1H)
3, 91 (S, 3H) , 4,26-5, 02 (m, 5H) , 5, 42-5, 81 ím, 1H) , , 7,08 (d
0,4H), 7,21-7,43 (m, 4,6H), 7,53-7,69 (m, 0,8H), 7,85-7,97 (m,
1,2H) . Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diástereomerů) 10,79 min. LC-MS (ES*) m/e=578,2 (M+H).
142 φ· ·♦ · • · · · ·· • · · · • · · · · • · · * • · · « ·· 99 9 •9 ·· ·· • 9 ' 9 9 9 ·
9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9
99 99 (2- (2-benzyloxy-5-οχο tetrahydrofuran-3 -ylkarbamoyl) -pyrroli din-l-yl]-1-methyl-2-oxoethyl] amid chinolin-6-karboxylové kyseliny (93) , .
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 75 a 6-chinolinkarboxylové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 76. Získá se 344 mg (71 %.) sloučeniny uvedené v názvu. lH-ŇMR (500MHz, deuteromethanol) δ '1,11-1,58 (m, 3H), 1,69-2,40 (m,
4H), 2,42-3,11 (m, 2H) , 3,80-4,01 (m, 1H), 4,29-4,99 (m, 5H),
5,445,54 (m, 0,5H), 5,63-5,73 (d, 0,4H), 5,73-5,79 (d, 0,1'H),
7,18-7,43 (m, 5H), 7,56-7,67 (m, 1H), 8,08 (d, 1H) , 8,13-8,25 (m, 1H), 8,40-8,56 (m, 2H) , 8,88-8,99 (m, 1H). Analytická HPLC (kolona kyano) (směs 2 diastereomerú) 10,27, 10,50 min. LC-MS (ES*) m/e=531,2 (M+H).
Schéma XVII
fcfc ·· • · · • · fc · fc ·
143 fcfcfcfc ·· fcfc
terč .butylester 1- (2-benzyloxykarbonylaminopropionyl) pyrrolidin-2 -karboxylové kyseliny (95)
Sloučenina se připraví podle postupu pospaného v Pierre Chevallet, Patrick Garrouste, Barbara Malawaska & Jean Martinez, Tetrahedron Letters, Vol. 34, str. 74097412, (1993). Směs 10,0 g (31,2 mmol) Cbz-ala-pro-OH, 180 g (1,31 mol) terč.butylbromidu, 7,11 g (31,2 mmol) benzyltriethylamoniumchloridu a 180 g (1,30 mol) uhličitanu draselného a 225 ml N,N-dimethylacetamidu (DMA) se míchá 24 hodin při teplotě 55 °C. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a zředí se 1 litrem ledové vody, extrahuje se třikrát 200 ml ethylacetátu. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem sodným, filtruje se a odpaří se ve vakuu za získání 14 g oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografíe za použití směsi hexanu a ethylacetátu 95/5 až 50/50. Získá se 11,73 g (výtěžek 99,7 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě čirého oleje. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) : δ 1,25-1,50 (m, 12 Η) , 1,85-2,25 (m,
4H) , 3,42-3,70 (m, 2H) , 4,25-4,57 (m, 2H)., 5,07-5,11 (m, 2H) ,
5,69 (d, Η) , 7,28-7,38 (m, 5H) ; retenční čas analytické HPLC:
11,07 min; LC-MS: m/z = 377 (M+H*).
97a, X=CI, Y=NH2, Z=H 97b, X=CI, Y=AcNH, Z=H 97c, X=CI, Y=AcNH, Z=CH3O
96a, X=C1, Y=NH2, Z=H 96b, X=CI, Y=AcNH, Z=H 96c, X=CI, Y=AcNH, Z=CH3O terč. butylester 1 - [2- (4 -amino-3 -chlorbenzoylamino)propionyl ] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (96a) φ φ · · φ φ φ φ · φφφφ φφφφ φφ φφφ φ φφ φφ φφ φφ φ φ φφφ φ φ φφ φφφ φφφφ
144 *..... .”· ·· “ ·’
Κ 10,50 g (27,9 mmol) roztoku sloučeniny 95 v 100 ml methanolu se přidá suspenze 5,00 g 10% palladia na uhlí v 50 ml ethylacetátu. Reakční směs se míchá 48 hodin ve vodíkové atmosféře, filtruje se přes křemelinu a rozpouštědlo se odpaří a získá se voskovitá pevná látka. Ta se rozpustí ve 100 ml dichlormethanu a 50 ml dimethylformamidu a roztok se ochladí na 0 °C. Přidá se 5,82 g (27,2 mmol) 4-amino-3-chlorbenzoové kyseliny, 14,58 ml (83,7 mmol) DIEA, 3,77 g (27,9 mmol) HOBT a 6,68 g (34,8 mmol) EDC a roztok se míchá 15 minut při 0 °C, potom 24 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se zředí ethylacetátem, promyje se dvakrát hydrogensÍránem sodným, dvakrát 10% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, potom se suší nad síranem horečnatým, filtruje a odpaří. Surový produkt se čistí pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie za použití směsi dichlormethanu a methanolu (99/1' až 97/3 %) a získá se 7,75 g (70 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,27-1,67 (m, 12H), 1,822,14 (m, 4H), 3,48-3,85 (m, 2H), 4,26-4,53 (m, 3H), 4,81-4,98 (m, 1H) , 6,71 (d, 1H) , 7,15 (m, 1H) , 7,50 (dd, 1H) , 7,75 (d,
1H) . Analytická HPLC 10,83 min. LC-MS (ES + ) m/e = 396,3 (MH+) .
1- [2-(4-Amino-3-chlorbenzoylamino)propionyl] pyrrolidin-2karboxylová kyselina (97a)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 96a reakcí s kyselinou trifluoroctovou v dichlormethanu. Po dokončení reakce se rozpouštědlo odpaří ve vakuu a zbytek se opakovaně odpaří z toluenu. Získaný zbytek se suší ve vakuu do konstantní hmotnosti .
terč.butylester 1-[2-(4-acetylamino-3-chlorbenzoylamino)-propionyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (96b)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 95 a 4-acetylamino-3145 chlorbenzoové kyseliny za použití způsobu popsaného pro přípravu sloučeniny 96a. Získá se 9,18 g (77 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,30-1,62 (m,
12H) , 1,85-2,16 (m, 3H) , 2,16-2,44 (m, ,1H) , 2,27 (s, 3H) ,
3,47-3,83 (m, 2H),.4,34-4„54 (m, 1H), 4,8,9 (m, 1H), 7,27-7,39 (m, 1H), 7,59-7,71 (m, 2H) , 7,83-7,97 (m, 1H) , 8,47 (d, 1H) .
Analytická HPLC 9,43 min.
- [2 -(4-Acetylmino-3-chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina (97b)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 96b pomocí reakce s kyselinou trifluoroctovou v dichlormethanu. Po ukončení reakce se rozpouštědlo odpaří ve vakuu a zbytek se opakovaně odpaří z toluenu. Získaný zbytek se suší ve vakuu do konstantní hmotnosti.
4-Acetylamino-5-chlor-2-methoxybenzoová kyselina
2,09 g (8,11 mmol) methylesteru 4-acetylamino-5-chlor-2-methoxybenzoové kyseliny se rozpustí v 110 ml methanolu a přidá se 25,48 mmol hydroxidu lithného rozpuštěného v 3.0 nl směsi methanolu a vody 1:1 a roztok se míchá 6 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu, přidá se ethylacetát a organická fáze se promyje 0,5N roztokem kyseliny chlorovodíkově a potom se dvakrát extrahuje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Vodná fáze se okyselí 12N roztokem kyseliny chlorovodíkové na pH 1 a vyloučená sraženina se extrahuje do dichlormethanu. Spojené extrakty se suší nad bezvodým síranem sodným, filtrují se a odpaří se za získání 0,933 g (výtěžek 50 %) sloučeniny uvedené v názvu. ^-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 2,31 (s, ' 3H) , 4,10 (s, 3H) ,
7,78-7,92 (šs, 1H) , 8,17 (s, 1H) , 8,45 (s, 1H) . Analytická HPLC 5,62 min. 146 ···· ·· • ·· ·· ·· ··· ♦ ' · · · *
9 · · · 9 9
9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9
999 99 99 99 terc.butylester 1- [2-(4-acetylamino-5-chlor-2-methoxy-benzoylamino) propionyl] pyrrolidin-2 -karboxylové kyseliny (96c)
K roztoku 1,534 g (4,07 mmol) sloučeniny 95 v 40 ml methanolu se přidá 650 mg 10% palladia na uhlí a směs se míchá 2 hodiny ve vodíkové atmosféře. Suspenze se filtruje přes křemelinu a získá se žlutý olej. Ten se nechá reagovat s 4-acetyl-5-chlor2-methoxybenzoovou kyselinou podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 96a a získá se 497 mg (výtěžek ,52 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,46
(d, 3H) , 1,49 (s , 9H) , 1,80-2,01 (m, 3H) , 2,19-2,40 (m, 1H) ,
2,22 (s, 3H) , 3,58-3,72 (m, 1H) , 3,78-3,89 (m, 1H), 3,98-4,09
(s, 3H) , .4,31 -4,45 (s, ÍH) , 4,78-4,95 (m, 1H), 7,89-8,10 (m,
2H). Analytická HPLC 11,31 min. ·
1- [2- (4-Acetylamino-5-chlor-2-methoxybenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (97c)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 96c pomocí reakce s kyselinou trifluoroctovou v dichlormethanu. Po dokončení reakce se rozpouštědlo odpaří ve vakuu a. zbytek se opakovaně odpaří z toluenu. Získaný zbytek se suší ve vakuu do konstantní hmotnosti.
(5-oxo-2- fenethyloxy tetrahydrof uran-3-yl)-amid 1-[2-(4-amino3-chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyselí ny (98a)
K roztoku 194 mg (0,54 mmol) allylesteru (5-oxo-2-fenethyloxytetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny (připraveného podle
147
9» • 9 9 9
9 9
9 9
9999 99
99 . 99 99 · 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9
999 99 9
9 9 9 ·9 9
999 99 99 . 99 postupu použitého pro přípravu sloučeniny 40 za použití fenethylalkoholu) v 5 ml dichlormethanu se při 0 °C. přidá 196 mg (1,26 mmol) DMBA a 32 mg (0,03 mmol) Pd (PPh3) 4. Roztok se míchá 15 minut a přidá se roztok 166 mg (0,49 mmol) sloučeniny 97a (připravené ze sloučeniny 96a reakcí s kyselinou trifluoroctovou v dichlormethanu) a 680 μΐ (3,90 mmol) ve 2 ml dichloremthanu s potom 98 mg (0,73 mmol) HOBT a 122 mg (0,63 mmol) EDC. Roztok se míchá 15 minut při 0 °C, potom . 18 hodin při teplotě .místnosti. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se rozpustí v ethylacetátu a dvakrát se promyje 0,5N roztokem hydrogensíránu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Suší se nad bezvodým síranem sodný a odpaří za získání oranžové pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie za použití směsi dichlormethanu a methanolu (99/1 až 97/3 %) jako eluentu a získá se 190 mg (73 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,29
(d, 0,6H), 1,41 (d, 2,4H), 1,78 (m, 1H) , 2,08 (m, 3H) , 2,56
(m, 1H), 2,77 (dd, 1H), 2,94 (t, 2H), 3,53 (m, 0,3H), 3,67 (m,
0,8H), 3,85 (m, 2H), 3,96-4,08 (m, 1H) , 4,40 (m, 2H), 4,62 (m,
1H), 4,67-4 ,79 (m, 1H), 5,57 (d, 0,7H), 5,60 (d, 0,3H), 6,78
(dd, 1H) , 7,21 (m, 5H) , 7,58 (m, 1H) , 7,79 (m, 1H), 8,26 (d,
1H). Analytická HPLC 14,52 min. LC-MS (ES+) m/e=543,2 (ΜΗΊ .
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)-amid 1-[2-(4-amino-3chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98b)
148 φφ φφ φ · φ φ « φ φ • · · φφφφ ·φ φ »· φ® φ · φφφ φφφ φφφ φφ •φ ·φ • φ · φ φ · φ φ φ φ φ φφφ φ φφ φ φ
Sloučenina se připraví ze syn diastereomerů allylesteru (2benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny- (40) a sloučeniny 97a podle způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Izoluje se 720 mg (výtěžek 51 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle -žluté pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,16 (d, 0,5H), 1,40 (d, 2,5H) , 1,64-2,25 (m, 4H) , 2,61 (dd, 1H), 2,79 (dd,. 1H) , 3,37-3,59 (m, 1H) ,
3,59-3,74 (m, 1H), 3,77-3,92 (m, 1H), 4,29-4,47 (m, 1H), 4,475,02 (m, 4H) , 5,48 (s, 0,5H), 5,66 (d, 1H), 5,68 (d, 0,5H), 6,79 (d, 1H) , 7,17-7,52 (m, 5H) , 7,48-7,62 (m, 1H) , 7,687,83(m, 1H). Analytická. HPLC 15,98 min. LC-MS (ES*) m/e=529,2 (MH*) .
/2 -benzyloxy-5-oxotetrahydrof uran-3 -yl) -amid 1- [2- (4-am'ino-3chl orbenzoyl amino) propi onyl ] pyrrol idin-2-karboxylové kyseliny (98c)
Sloučenina se připraví z allylesteru anti-(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrof uran-3 -yl ) -karbamové kyseliny (40) a sloučeniny 97a podle způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Izoluje se 186,6 mg (výtěžek 46 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,30-1,52 (m, 3H), 1,76-2,33 (m,4H), 2,41-2,59 (m, 1H), 2,90 (dd,
0,15H), 3,04 (dd, 0,85H), 3,44-3,75 (m, 1,5H) , 3,82-3,95. (m, 1H) , 4,27-4,42 (m, 2H) , 4,42-4,56 (m, 0,5H). , 4,56-4,86 (m,
4H) , 5,42-5,55 (m, 1H) , 6,79 (d, 1H) , 7,21-7,42 (m, 4,6H),
7,54-7,63 (m, 1,4H) , 7,76-7,83. (m, 0,65H), 8,60-8,68 (m,
0,35H). Analytická HPLC 15,19 min. LC-MS (ES*) m/e = 529,3 (MH*) .
·· ·· *· • · · · · · • · · · · ·
9 9 9 · · · • 9 9 9 9 9 • 9 · · · · allylester 2-(ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny
Sloučenina se připraví' z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny tak, jak popsáno pro přípravu sloučeniny 40 za použití' ethanolu.Po chromatografii za použití směsi hexanu a ethylacetátu (95/5 až 80/20) se získá 0,94 g allylesteru anti-2-(ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny (vyšší Rf) , 1,96 g syn diastereomerů (nižší Rf) a 8,08 g směsi diastereomerů (celkový výtěžek 60 %) . XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform) pro anti diastereomer: δ 1,13-1,31 (m, 3H) , 2,31-2,45 (m, 1H), 2,92-3,08 (m, 1H) , 3,52-3,72 (m, 1H) ,
3,78-3,92 (m, 1H), 4,10-4,25 (m, IH), 4/45-4,70 (m, 2H), 5,00 (šs, 1H), 5,12-5,45 (m, 3H), 5,80-5,95 (m, 1H); pro syn diastereomer 1,13-1,35 (m, 3H), 2,38-2,50 (m, 1H) , 2,75-2,92 (m, 1H) , 3,60-3,73 (m, 1H) , 3,82-3,95 (m, 1H) , 4,40-4,70 (m, 3H), 5,10-5,52 (m, 4H) , 5,80-5,94 (m, 1H) ; LC-MS: m/z = 230 (M+H+) pro oba diastereomery.
(2-ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-amino-3chlorbenzoylamino)propionyl ] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98d)
Sloučepina se připraví z allylesteru (2-ethoxy-5-oxo-tetrahydrof uran- 3 -yl ) karbamové kyseliny a sloučeniny 97a ..podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Izoluje se 175 mg (77 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. XH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,13 (t, 0,5H), 1,23 (t, 2,5H), 1,36 (d, 0,5H), 1,44 (d, 2,5H), 1,75-2,38 (m, 4H) , 2,56 (dd, • · • · · · » · · · · • · · · » ” • · · · ♦ · • · · · · · · • · · · · ·
150
1H) , 2,76 (dd, 1H) , 3,45-3,97 (m,
4,67 (m, 1H), 4,74 (kv, 1H) , 5,55
6,75-6,82 (m, 1H) , 7,56 (dd, 1H) ,
Analytická HPLC. 8,17 min. LC-MS (ES + ) m/e = 467,4 (MH*) .
5H) , 4,47 (dd, 1H) , 4,59(d, 0,2H) , 5,56 (d, 0,8H) ,
7,77 (d, 1H) , 8,39 (d, 1H) .
allylester (2-cyklopentyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl) -karbamové kyseliny
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu, který je popsaný pro přípravu sloučeniny 40 za použití cyklopentanolu. Získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě směsi diastereomerů. Po čištění pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie za použití směsi hexanu a ethylacetátu (90/10 až 80/20 se získá syn diastereomer sloučeniny uvedené v názvu: syn diastereomer 1H NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,5-2,0 (m, 8H),
2,45 (dd, 1H) , 2,81 (dd, 0,9H), 3,0 (dd, 0,1H.) , 4 , 31 (m, 1H) ,
4,59 (m, 4H) , 5,23 (m, 1H) , 5,32 (m, 1H) , 5,45 (s, 0,1H) ,. 5,51
(s, , 0,9H), 5,92, (m, 1H) ppm; anti diastereomer 1H-NMR (500
MHz, deuterochloroform) δ 1,50 (m, 2H),. 1,67 (m, 6H) , 2,36 (d, 1Ή) , 2,8 (dd, 0,08H), 2,96 (dd, 0,92H), 4,13 (m, 1H) , 4,25 (m, 1H) , 4,55 (š, 2.H) , 5,20 (d, 1H) , 5,30 (m, 2H) , 5,43 (s,
0,92H), 5,5 (d, 0,08H),. 5,89 (s, 1H) ppm.
(2 - cyklopentyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3 -yl) amid 1- [2- (4-ami no-3 -chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98e)
Sloučenina se připraví z allylesteru (2-cyklopentyloxy-5-oxo-
151 tetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny a sloučeniny 97a podle způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 98a a získá se 280 mg (51 %) sloučeniny uvedené v názvu. ^-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,38 (d, 0,5H), 1,44 (d, 2,5H), 1,49-2,35 (m,
12H), 2,47 (dd, 0,7H), 2,56 (dd, 0,3H), 2,75 (dd, 0,3H), 2,812,88 (m, O,1H), 2,97 (dd, 0,6H), 3,47-3,76 (m, 0,2H), 3,823,96 (m, 1H) , 4,10-4;40 (m, 2H) , 4,40-4,46 (m, 1H) , 5,44 (d,
0,5H), 5,50 (d, 0,2H), 5,65 (d, 0,3H), 6,79(d, 1H), 7,54-7,64 (m, 1H) , 7,78 (d, 1H) , 8,21-8,31 (m, 1H) . Analytická HPLC
15,02, 15,34 min. LC-MS (ES) m/e = 507,3 (MH)
allylester (2-cyklohexyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)-karbamové kyseliny
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 4.0 za použití cyklohexanolu. Získá se 4,62 g (výtěžek 85 %) sloučeniny uvedené v názvu jako směsi diastereomerú ve formě světle žlutého oleje. Po čištění pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie za použití směsi hexanu a ethylacetátu (90/10 až 80/20) jako eluentu se získá 394 mg (výtěžek 7 %) syn diastereomerů sloučeniny uvedené v názvu. XH NMR (500MHz, deuterochlorof orm) δ 1,11-2,09 (m, 10H) , 2,352,6.1 (dd, 1H) , 2,72-2,98 (dd, 1H) , 3,60-3,83 (m, 1H) , 4,324,72 (m, 3H) , 5,06-5,43 (m, 2H) , 5,60 (d, IHj,. 5,82-6,03 (m,
1H) .
(2 -cyklohexyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)-amid 1-(2-(4-acetylamino-3-chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylo152 • to toto • ·· « to · « •··· ·· vé kyseliny (98f)
Sloučenina· se připraví z allylesteru syn-(2-cyklohexyloxy-5oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny a sloučeniny 97b podle způsobu použitého, pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 121 mg (výtěžek 33 %') sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,06-1,61 (m, 9H) , 1,61-2,37 (m,
7H)., 2,22 (s, 3H) , 2,52-2,81 (m, 2H), 3,49-3,78 (m, 2H) , 3,84-
3 , 97 (m, 1H) , 4,42-4,57 (m, 1H) , 4,57-4,69 (m, 1H), 5,67 -5,81
(m, 1H) , 7,727,89 (m, 1H), 7,89-8,12 (m, 2H). Analytická HPLC
9, 84 min. LC-MS (ES*) m/e=563,3 (MH*) .
(2-cyklohexyloxy-5-oxo tetrahydro furan-3-yl) -amid 1- [2- (4-amino-3-chlorbenzoylamino) propionyl] pyrro lidin-2-karb oxyl ové kyseliny (98g)
Sloučenina se připraví z allylesteru syn-(2-cyklohexyloxy-5oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny a sloučeniny 97a podle způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se
153 mg (výtěžek 47 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500
MHz, deuteromethanol) δ 1,06-2,38 (m, 14H), 1,42 (d, 3H) ,
2,50-2,66 (m, 1H), - 2, 69-2,82 (dd, 1H), 3,06-3,75 (m, 2H) ,
3 ,80-3,94 (m, 1H) , 4,40 -4,52 (m, 1H) , 4,57-4,65 (m, 1H) , 4,70-
4,80 (m, 1H), 5,72 (d, 1H) , 6,71 (m, 1H) , 7,50-7,63 (m, 1H) ,
7,78 (d, 0,6H),,.8,42 (d, 0,4H). Analytická HPLC 10,30 min. LCMS (ES*) m/e=521,2 (MH*) .
153 · 0 0 0 · 0 ·
0 0 • · ·
0 0
000« 00
(2-ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-amino-3chlorbenzoylamino) propionyl ]pyrrolidin-2-karbamové kyseliny (98h)
Sloučenina se připraví z allyl'esteru(2-eth'oxy-5-oxotetrahydřofuran-3-yl)karbamové kyseliny a sloučeniny 97a podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Izoluje se 195 mg (výtěžek 82 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. ^-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,32-1,55 (tn, 3H) , 1,58-1,77 (m, 3H) , 1,98-2,54 (m, 4H) , 2,68-2,76 (d, 0,3H),
2,79-2,89 (m, 0,7H), 2,96-3,10 (m, 0,7H), 3,18-3,27 (dd,
0,3H), 3,72-4,18 (m, 4H) , 4,46-5,12 (m, 3H) , 5,60 (s, 0,4H), 5,74-5,84 (m, 0,6H), 7,03 (d, 0,8H), 7,75-7,86 (m, IH) , '8,01 (d, 0,7H), 8,35 (d, 0,3H), 8,74 (d, 0,2H). Analytická HPLC 8,31 min. LC-MS (ES+) m/e=467,3 (MH+) .
allylester [S-oxo-2- (tricyklo [3,3,1,1°'°] dec-2-yloxy) -tetrahydrofuran-3-yl]karbamové kyseliny
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu popsaného pro
154 ··♦· ·· přípravu sloučeniny 40 za použití 6,21 g (5 ekvivalentů) 2-adamantanolu. Získá se 1,52 g (výtěžek 61 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě žlutého oleje. XH NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,38-2,22 (m, 14H) , 2,40 (d, 0,2H) , 2,53 (dd, 0,7H), 2,87 (dd, 0,7H), 2,87 (dd, 0,8H), 3,00-3,12 (m, 0,3H), 3,84-3,97 (m, 1H) , 4,40-4,71 (m, 3H) , 5,18-5,44 (m, 2H) , 5,535,69 (m, 1H), 5,82-6,02 (m, 1H) .
[5-oxo-2 - (tricyklo [3,3,1,10,0] dec-2-yloxy) - tetrahydrofuran-3 yl]amid 1- [2- (4-amino-3 -chlorbenzoylamino) propionyl] pyrrolidin-2 -karboxylové kyseliny (98i)
Sloučenina se připraví z allylesteru [5-oxo-2-(tricyklo [3,3,1,1°'0 ]dec-2-yloxy)tetrahydrofuran-3-yl]karbamové kyseliny a sloučeniny 97a podle způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Izoluje se 76 mg (výtěžek 13 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. XH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,38-2,22 (m, 14H) ,. 2,40 (d, 0,2H), 2,53 (dd, 0,7H),
2,87 (dd, 0,8H), 3,00-3,12 (m, 0,3H), 3,84-3,97 (m, 1H), 4,404,71 (m, 3H), 5,18-5,44 (m, 2H), 5,53-5,69 (m, 1H), 5,82-6,02 (m, 1H) . Analytická HPLC. 11,89 min. LC-MS (ES + ) m/e= 573,2 (MH*) .
98j (2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-acetylamino-5-chlor-2-methoxybenzoylamino)propionyl]-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98j)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru syn-{2-[2-(2-benzyl~ oxy-5-oxotetrahydrofuran-3-ylkarbamoyl)pyrrolidin-1-yl]-1-mefc ·
155 ·· ·· ♦ fc · · ·· · fc fc fc fcfc · fc fcfcfc fcfc · • · fcfcfc · fcfc ·· fcfc thyl-2-oxoethyí}karbamové kyseliny a sloučeniny 97c podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 222 mg (82 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,23 (d, 0,6H), 1,42 (d, 2,4H), 1,72-2,27 (m, 4H) , 2,23 (s, 3H) , 2,63 (dd, 1H) , 2,77-2,88 (m, 1H) , 3,43-3,52 (m,
0,5H), 3,56-3,71 (m, 1,5H), 3,74-,3,85 (m, iH) , 3,98 (s, 3H) ,
4,38-4,50 (m, 1,5H), 4,51-4,92 (m, 4,5H), 5,63-5,76 (m, 1H) ,
7,23-7,40 (m, 5H) , 7,97 (s, 1H),'8,45 (d, IH) , .8,69-8,80 (m,
1H) . Analytická HPLC 11,63 min. LC-MS (ES*) m/e= 601,2 (MH*) .
Syntéza (2-ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amidu 1 -[2 -(4-amino-3 -chlorbenzoylamino) propionyl ] pyrrolidin-2 -karboxylové kyseliny (98k)
Sloučenina se připraví z allylesteru anti-(2-ethoxy-5-oxotetrahydro furan-3-yl)karbamové kyseliny a sloučeniny 97a podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 175 mg (59 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,10-1,28 (m, 3H) , 1,42 (d,
0,6H),. 1,46 (d, 2,4H), 1,75-2,45 (m, 4H) , 2,45-2,70 (m, 1H) ,
2,80-3,05 (m, 1H), 3,50-3,95 (m, 4H), 4,20-4,75 (m, 3H), 4,754,90 (m, 1H) , 5,32 (s, 0,8H), 5,38. (s, 0,2H), 6,80 (d, 1H) , 7,55-7,84 (m, 2H) . Analytická HPLC: 10,47 min. LC-MS (ES*).: m/e. = 467,3 (M+H*) .
9 · · ·
156 ♦ ··· 99
9 9·
9 9
Syntéza (2-ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amidu 1-[2 - (4-amino-3,5-dichlorbenzoyl amino)propionyl]pyrrol i din-2-karboxylové' kyseliny (981)
Sloučenina se připraví z allylesteru (2-ethoxy-5-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny a terč.butyl 1-[2-(4-amino3, 5-dichlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny podle způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 158 mg (výtěžek 54 %) sloučeniny uvedené v názvu). ΉNMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,081,30 (m, 3H), 1,32-1,52. (m, 3H), 1,72-2,44 (m, 4H), 2,40-3,05 (m, 2H) , 3,50-3,97 (m, 4H) , 4,25-a,70 . (m, 3H) , 4,70-4,86 (m,
1H) , 5,33 (s, 0,4H), 5,47 (s, 0,lH), 5,56 (d, 0,4H), 5,62’ (d,
0,lH)', 7,50 (s, IH) , 7,80 (s, 1H) . Analytická HPLC: 10,84 min. LC-MS (ÉS+) : m/e = '501,2 (M+H+) .
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl) amid 1 -[2 -(4-amino-3chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98m)
Sloučenina se připraví podle způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 98a za použití Cbz-Ala-D-pro-OH. Získá se 230 mg (výtěžek 69 %) sloučeniny uvedené v názvu. ^-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,30 (d, 1,2H), 1,45 (d,
1/8H), 1,62-2,40 (m, 4H) , 2,40-3,10 (m, 2H) , 3,30-3,97 (m,
2H) , 4,33-4,95 (m, 5H) , 5,30 (s, 0,5H), 5,68 (d, 0,5H), 6,80 (d, 1H), 7,25-7,95 (m, 7H). Analytická HPLC: 11,56, 11,91 min. LC-MS (ES+) : m/e = 529,2 (M+H+).
157 fcfc fcfc fc fcfc fc · • · • · fcfcfcfc fcfc
fcfc fcfc • 9 · · • ·· · * ·· · • ·· · fcfc fcfc • ·
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-acetylamino-3-chlorbenzoylamino) propionyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98n)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97b a allylesteru syn-(2benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny podle způsobu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 210 mg (64 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochlorof orm: deuteromethanol) § 1,33 (d, 0,6H), 1,44 (d, 2,4H), 1,68-2,40 (m, 4H) , 2,26 (s, 3H) , 2,55-3,05 (m, 2H) , 3,40-3,90 (m, 2H), 4,20-4,95 (m, 5H), 5,68 (d, 0,8H), 5,84 (d, 0,2H), 7,15-8,30 (m, 8H). Analytická HPLC: 15,67 min. LC-MS (ES*) : m/e = 571,1 (M+H*) .
Allylester kyseliny (2-isopropoxy-5-oxotetrahydrofuran- 3-yl)karbamové
Sloučenina se připraví podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 40 za použití isopropanolu. Získá se 3,80 g (výtěžek 81 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvého oleje. ^-NMR (500 MHz, deuteročhlóroform) δ 1,1.0-1,35 (m, 6H) , 2,32-2,60 (m, 1H), 2,82 (dd, 0,5H), 3,02 (dd, 0,5H), 3,82-4,11 (m, 1H), 4,48-4,66 (m, 3H), 5,20-5,36 (m, 2H), 5,54 (dd, 1H) ,
5,82-6,05 (m, 1H). LC-MS (ES*): m/e = 244,2 (M+H*).
0
158 • 0 0
0 0 0
00 0 0 0 0
0 0 0
0 0 0
0 0 0
0' 00' (2-isopropoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-amino-3chlorbenzoylamino)propionyl-3 -pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98o)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97a a allylesteru (2isopropoxy-5-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se·200 mg (výtěžek 66 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz,
1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,05-1,35 (m, 6H) ,
1,35-1,50 (m, 3H), 1,70-2,45 (m, 4H), 2,45-3,05 (m, 2H), 3,554,10 (m, 3H) , 4,15-4/88 (m, 4H) , 5,48 (s, 0,4H), 5,58 (s,
0,lH), 5,64 (d, 0,4H), 5,70 (d, 0,lH), 6,78 (d, 1H), 7,58 (d,
1H) , 7,80 (s, 1H) . Analytická HPLC: 12,19, 12,40 min. LC-MS (ES*) : m/e = 581,2 (M+H*) .
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-acetylamino-3,5-dichlorbenzoylamino) propionyl] -pyrrolidin-2 -karboxylové kyseliny (98p)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 1-[2 -(4-acetylamino3,5-dichlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a allylesteru syn-(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran3-yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 230 mg (výtěžek 72 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol ) δ 1,36 (d, 0,6H), 1,47 (d, 2,4H), 1,68-2,47 (m,
4H) , 2,23 (s, 3H) , 2,60-3,15 (m, 2H) , 3,40-3,90 (m, 2H), 4,154,95 (m, 5H) , 5,68 (d, 0,8H), 5,84 (d, 0,2H), 7,20-7,98 (m, 7H) . Analytická HPLC: 13,07 min. LC-MS (ES*): m/e = 605,1
(2-cyklopentyloxy-5-oxotetrahydro£uran-3 -yl) amid 1- [2- (4-acetylamino-3-chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylo vé kyseliny (98q)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97b a allylesteru (2cyklopentyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 215 mg (69 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (50 0 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuterómethanol) δ 1,35-1,90 (m, 11H) , 1,902,35 (m, 4H) , 2,24 (s/ 3H) , 2,40-3,10 (m, 2H) , 3,50-3,95 (m,
3H) , 4,15-4,90 (m, 3H). , 5,44 (s , 0,55H) , 5,56 (s, 0,15H),'5,64 (d, 0,22H), 5,71 (d, 0,08H), 7,70-8,25 (m, 3H) . Analytická HPLC: 12,13 min. LC-MS (ES+) : m/e = 549,2 (M+H+) .
Syntéza (2-ethoxy-5-oxotetrahydro-furan-3-yl)amid 1- [2-.(4-acetylamino-3 -chlorbenzoylamino)propionyl] -pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98r)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97b a allylesteru syn-(2ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 68 mg (24 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, 1:1, deute-
rochloroform:deuteromethanol) 160 δ 1,13 • · · fc · · · • · · fc «fcfc · fcfc· fcfcfc • fcfc.··· ···· fcfc ··· ·· (t, 0,6H), fcfc fcfc • · ·' · • fc · · • · · · • fc · ·
1,28 (t,
2,4H), 1,38 (d, 0,6H), 1,48 (d, 2,4H) , 1,75-2,40 (m, 4H) , 2,2 2
(s, 3H) , 2,55-2,88 (m, 2H) , 3,50-3,92 (m, 4H) , 4,40 -4,90 (m,
3H) , 5,57 (d, 0,8H), 5,61 (d, 0,2H), 7,60-8,20 (m, 3H) .
Analytická HPLC:
8,64 min.
LC-MS (ES*) m/e
509,2 (M+H*)
Příprava allylesteru (2-cyklopentylmethoxy-5-oxotetrahydrofuran - 3-yl)karbanové kyseliny
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxy-butanové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 40 za použití 6,5 ml (60 mmol) cyklopentylmethanolu. Získá se 2,98 g (celkový výtěžek 52 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě směsi epimerů. Po čištění se získá 0,97 g (výtěžek 17 %) 4(S),5(R) ve formě bezbarvého oleje. ’Ή. NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,19 (m, 2H) ,
1,54 (m, 4H), 1,71 (m, 2H) , 2,16 (m, IH) , 2,44 (dd, J=17,2,
10,4 Hz, IH), 2,82 (dd, J=17,2, 8,4 Hz, IH) 1 , 3,44 (dd, J=9,3,
7,2 Hz, IH), 3,71 (dd, J=9,3, 7,2Hz, IH), 4,5 7 (m, 3H) , 5,-3 2
(m, 3H) , 5,41 (d, J=5,2Hz, IH) , 5,91 (ddt, J=I7,1, 10,4, 5Hz,
IH) ppm. LC-MS (ES*): m/e = 284.
Také se izoluje 0,66 g (výtěžek 11 %) epimerní směsi a 1,35 g (výtěžek 24 %) 4(S),5(S) epimeru ve formě voskovité pevné látky. ^-NMR (500Hz, deuterochloroform) δ 1,20 (m, 2H) , 1,54 (m, 4H) , 1,69 (m, 2H) , 2,10 (m, IH) , 2,37 (d, J=8,l Hz, IH) , 2,97 (dd, J=18,0, 7,6 Hz, IH), 3,42· (dd, J=7,3, 1,7 Hz, IH) , 3,49 (m, 2H), 3,64 (dd, J=9,0, 7,3 Hz, IH), 4,19 (š, IH), 4,55 (m, 2H) , 5,25 (m, 2H) , 5,36 (s, IH) ., 5,87 (m, IH) ppm. LC-MS • 9
161
999 99
99 (ES*): m/e=284 (M+H).
(2-cyklopentylmethoxy-5-oxo-tetrahydrof uran-3 -yl) -amid 1- [2(4-amino-3 -chlorbenz oyl amino) prop i onyl ] pyrro li din- 2 -karboxylové kyseliny (98s)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97a a allylesteru syn-(2cyklopentylmethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyselí ny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se. 195 mg (výtěžek 51 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform: deuteromethanol) δ 1,15-1,90 (m, 11H),. 1,90-2,40 (m, 5H), 2,55-2,78 (m, 2H), 3,50-3,90 (m,
4H) , 4,38-4,92 (m, 3H) , 5,53 (d, 0,8H), 5,57 (d, 0,2H), 6,78 (d, 1H) , 7,50-8,15 (m, 2H) . Analytická HPLC: 1.0,48 min. LC-MS (ESU: m/e = 521,2 (M+HU ·
allylester (5-OXO-2- (3-fenylpropoxy)tetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 3-allýloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 40 za použití 3 -fenylpropanolu. Získá se 1,15 g (výtěžek 32 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvého oleje. XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,822,05 (m, 2H) , 2,38 (dd, 1H) , 2,68 (m, 2H) , 2,82 . (dd, 1H) ,
3,55-3,65 (m, 1H), 3,82-3,92 (m, IH), 4,48-4,72 (m, 3H), 5,125,59 (m, 3H), 5,82-6,03 (m, 1H) , 7,11-7,45 (m, 5H). Analytická
HPLC: 9,08 min. LC-MS (ES*): m/e = 320,2 (M+H* .
• to ·· .to ·· · • to ·· to toto • · · toto to to toto · ·· ·
162 • · · · ·.
··· ·· ··· ·· to · (5-oxo-2 - (3 - f enylpropoxyl) tetrahydrofuran-3 -yl) amid 1- [2- (4amino - 3 -chlorbenzoylamino) propionyl ] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98t)
Sloučenina.se připraví ze sloučeniny 97b a allylesteru syn-(5oxo-2-(3-fenylpropoxy)tetrahydrofuran-3'-yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 200 mg (výtěžek 57 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, 1:1 déuterochlo.roform: deuteromethanol) δ 1,34 (d, 0,6H),
1,44 (d, 2,4H), 1,75-2,40 (m, 6H) , 2,50-2,95 (m, 4H) , 3,473,95 (m, 4H) , 4,38-4,82 (m, 3H) , 5,52. (d, 0,8H), 5,56 (d, 0,2H), 6,75-8,25 (m, 8H) . Analytická HPLC: 1.0,79 min. LC-MS (ES*) : m/e = 557,2 (M+H*) .
Syn téza (2- cyklopen tylmethoxy-5-oxofc.e trahydrófuran -3 -yl ) ami du
1- [2- (4 -acetylamino-3 -chlorbenzoylamino)propionyl]-pyrrolidin2- karboxylové kyseliny (98u)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97b a allylesteru syn-(2cyklopentylmethoxy- 5 -oxotetrahydrof uran- 3 -yl). karbamové kysel i ny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 215 mg (výtěžek 67 %) sloučeniny uvedené v názvu. ^-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,38 (d,
0,6H),.l,47 (d, 2,4H), 1,11-1,88 (m, 8H) , 1,92-2,40 (m, 5H) ,
2,24 (s, 3H), 2,53-2,86 (m, 2H), 3,30-3,90 (m, 4H), 4,38-4,89 (m, 3H) , 5,53 (d, 0,8H) , 5,60 (d, 0,2H), 7,68-8,22 (m, 3H) .
Analytická HPLC: 9,90 min. LC-MS (ES*) : m/e = 563,3 (M+H*) .
Φ» φφ • · · < • · ( • · 4 • · 4 <··· ΦΦ
Φ Φ ,Φ Φ Φ Φ · Φ
163
(5-οχο-2- (3-fenylpropoxyl) tetrahydrofuran-3-yl) amid 1- [2-(4acetylamíno-3-chlorbenzoylamino) propionyl ] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98v)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru l-[2-(4-acetylamino3-chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyselí ny a allylesteru syn-(5-oxo-2-(3-fenylpropoxyl)tétrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého . pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 238 mg (výtěžek 75 .%) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol ) δ 1,33 (d, 0,6H), 1,56 (d, 2,4H), 1,78-2,45 (m,
6H) , 2,27 (s, 3H) , 2,53-2,97 (m, 4H) , 3,53-3,94 (m, 4H) , 4,474,86 (m, 3H) , 5,53 (d, 0,8H) , 5,62 (d, 0,2H) , 7,11-8,26 (m, 8H) . Analytická HPLC: 10,27 min. LC-MS (ES*): m/e = 599,2 (M+H*) .
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl) amid l-[2-(4-amíno-3tri f luorme.thylbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2 -karboxylové kyseliny (98w)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru {2-[2-(2-benzyloxy5-oxotetrahydrofuran-3-ylkarbmoyl)pyrrolidin-l-yl]-1-methyl-2 oxoethyl}karbamové kyseliny a 4-amino-3-trifluormethylbenzoové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98^.
Φ· ·· ·♦ • · · » · • · · • · · · • · · ···· ·· · • · • ·
164
99 » ·. · • · · · • · · · • 9 9 9
99
Získá se 56. mg (výtěžek 48 %) sloučeniny uvedpné v názvu. 1HNMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,201,55 (m, 3H), 1,75-2,50 (m, 4H), 2,50-3,10 (m, 2H), 3,50-4,00 (m, 2H) , 4,30-5,00 (m, 5H), 5,42 (s, 0,4H), 5,51 (s, 0,2H),
5,62 (d, 0,3H) , 5,78 (d, 0,lH), 6,84 (d, 1H) , 7,20-8,15 (m,
7H) . Analytická HPLC: 14,90, 15,2.0 min. LC-MS (ES*) : m/e =
563,2 (M+H*)..
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(3-chlor-4dimethyl aminobenzoylamino) propionyl ] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98x)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru {2-[2-(2-benzyloxy5-oxotetrahydrofuran-3-ylkarbmoyl)pyrrolidin-1-yl]-1-methyl-2oxoethyl}-karbamové kyseliny a 3-chlor-4-dimethylaminobenzoové kyseliny podle postupu pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 82 mg (výtěžek 44 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500
MHz, 1:1 deuterochlorof orm: deuteromethanol.) δ 1,181,53 (m, 3H), 1,70-2,40 (m, 4H), 2,55-3,10 (m, 2H), 2,84 (s, 6H), 3,453,94 (m, 2H) , 4,25-4,95 (m, 5H) , 5,46 (s, 0,3H), 5,51 (s, 0,2H), 5,63 (d, 0,4H), 5,73 (d, 0,lH), 7,05 (d, 1H), 7,15-7,95 (m, 7H). Analytická HPLC: 11,85, 12,19 min. LC-MS (ES*): m/e =
557,3 (M+H*) .
F
98y
165 ·· 4* • 9 9 9
9 9 '9 9 9 4
4 4
4444 49
94 *· *·
ΦΦΦΦ 4 4 9 9
4 4 4 4 9 4
4.9 9 4 4 ·9 4
9 4 4 4 4 4
494 44 44 99 (2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1- [2- (4-dimethylamino-3,5 -difl uorbenzoylamino) propionyl ] pyrrol idin-2-karboxylové kyseliny (98y)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru {2- [2- (2-benzyloxy5 -oxotetrahydrofuran-3-ylkarbmoyl)pyrrolidin-1-yl]-1-methyl-2 oxoethyl}karbamové kyseliny a 4-dimethylamino-3,5-dichlorbenzoové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 106 mg (výtěžek 65 %) sloučeniny uvedené v názvu). 1H-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform: deuteromethano!) δ 1,10-1,55 (m, 3H) ,. 1,75-2,30 (m, 4H)., 2,45-3,15 (m, 2H), 2,84 (s, 6H), 3,40-3,95 (m, 2H), 4,15-4,95 (m, 5H), 5,47 (s, 0,35H), 5,54 (s, 0,15H), 5,67' (d, 0,4H), 5,77 (d, 0,lH),
7,20-7,70 (m, 7H). Analytická HPLC: 12,21, 12,51 min. LC-MS (ES*) : m/e = 559,2 (M+H*).
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-amino2,3,5,6-tetrafluorbenzoylamino) propionyl ] pyrrolidin-2karboxylové kyseliny (98z)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru {2 -[2 -(2-benzyloxy5-oxotetrahydrofuran-3-ylkarbmoyl)pyrrolidin-l-yl]-l-methyl-2oxoethyl}-karbamové kyseliny a 4-amino-2,3,5,6-tetrafluor-benzoové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 58 mg (výtěžek 73 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,ΙΟΙ,50 (m, 3H), 1,62-2,35 (m, 4H), 2,45-3,12 (m, 2H), 3,50-3,90 (m, 2H) , 4,20-4,95 (m, 5H) , 5,42 (s, 0,4H), 5,52 (s, 0,lH),
5,64 (d, 0,4H), 5,82 (d/ 0,lH), 7,25-7,65 (m, 5H). Analytická
166
HPLC: 16,56, 16,90.min.
LC-MS (ES*) m/e
567,2 (M+H*) .
(2 -benzyloxy-5-oxotetrahydrof uran-3 -yl) amid 1- (2- [3-chlor-4 (2,2-dimethylpropionylamino)benzoylamino]propionylJpyrrolidin2-karboxylové kyseliny (98aa)
K suspenzi 100 mg (0,19 mmol) sloučeniny 98b a 200 mg póly (4vinylpyridinu) se přidá 70 μΐ (0,57 mmoí) pivaloylchloridu.. Získaná suspenze se míchá přes noc při teplotě místnosti, filtruje se a zředí se 25. ml ethylacetátu. Organická vrstva se promyje dvakrát 25 ml 10% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, jednou 25 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se do sucha a získá se 98 mg (výtěžek 85 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,10-1,55 (m, 3H), 1,38 (s, 9H), 1,65-2,40 (m, 4H), 2,60-3,10 (m, 2H), 3,463,88 (m, 2H) , 4,20-4,95 (m, 5H)., 5,62 (d, 0,8H), 5,78 (d, 0,2H), 7,15-8,30 (m, 8H) . Analytická HPLC: 11,82 min. LC-MS (ES*) : m/e = 613,2 (M+H*) .
(2-benzyloxy-5-oxótetrahydrofuran-3-yl) amid 1- [2 - (3 -chlor-4 propíony lamino) benzoylamino) propionyl ] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98ab) .
167
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 98b a propionylchloridu podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98aa. Získá se 104 mg (95 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,16 (t, 0,6H), 1,18 (d,
0,6H), 1,27 (t, 2,4H), 1,38 (d, 2,4H), 1,72-2,35 (m, 4H) ,
2,45-2,58 (m, 2H) , 2,58-3,05 (m, 2H) , 3,45-3,85 (m, 2H) , 4,2.04,88 (m, 5H) , 5,64 (d, 0,8H), 5,76 (d, 0,2H), 7,20 -8,35 . (m, 8H) . Analytická HPLC: 5,89 min. LC-MS (ES*): m/e (M+H').
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(3-chlor-4fenyl ace tyl amino) benzoyl amino) propi onyl ] - pyrrol idin-2- karboxy love kyseliny (98ac)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 98b a fenylacetylchloridu podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98aa. Získá se. 85 mg (77 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,18 (d, 0,6H), 1,40 (d,
2,4H), 1,72-2,38 (m, ' 4H) , 2,58-3,05 (m, 2H) , ' 3,46-3,78 (m, 2H) , 3,85 (s, 2H) , 4,18-4,92 (m, 5H), 5,63 (d, 0,8H), 5,75 (d, 0,2H), 7,15-8,34 (m, 13H) . Analytická HPLC: 11,63 min. LC-MS (ES*) : m/e = 647,2 (M+H*) .
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amide 1 -[2-(3-chlor-4methylbutyrylamino) benzoylamino)propionyl] -pyrrolidin-2 168
ΦΦ ·· · ·· φφ . φφ • φφφ φφφφ φ · φ · φ φ' φ · · · φ · · · φ φ φ φ φ φ φφφ·· · • · · ······· ,φφφφ φφ ··· ·· <· φ· karboxylové kyseliny (98ad)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 98b a isovalerylchloridu podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98aa. Získá se 60 mg (58 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,07 (d, 5H) , 1,15 (d,
0,5H), 1,27 (d, 1H) , 1,45 (d, 2,2H) , 1,67-2,30 (m, 5H) , 2,34 (d, 2H) , 2,58-3,05 (m, 2H) , 3,48-3,88 (m, 2H) , 4,10-4,98 (m,
5H) , 5,68 (d, 0,7H) , .5,78 (m, 0,3H) , 7,18-8,33 (m, 8H) . Analytická HPLC: 10,74 min. LC-MS (ES+) : m/e = 613,2 (M+H‘) .
(2-ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid. 1-[2-(4-Methoxy-3, 5dimethylbenzoyl amino) propionyl ] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98ae)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 1- [2-(4-methoxy-3., 5dímethylbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a allylesteru syn-(2-ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 174 mg (výtěžek 81 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, deuterochlorof orm) : 1,04 (t, 0,45H), 1,27 (t, 2,55H), 1,34-1,45 (m, 3H) , 1,95-2,45 (m, 10H) , 2,'782,84 (m, Η) , 3,60-3,90 (m, 8H) , 4,50-4,70 (m, 2H) , 4,9 0 - 4, 94 (m, Η) , 5,45 (d, 0,85H), 5,61 (d, 0,15H), 6,99 (d, Η) , 7,15 (d, Η) , 7,45 (s, 2H) ; retenční čas při analytické HPLC: 10,09 min; LC-MS: m/z = 476 (M+H+) .
• · · · « • · · · • · ·
. · · • ·· · ··
169
(2 -ethoxy-5-oxotetrahydrof uran-3 -yl) amid 1-[2-(4-methoxy-3,5dímethylbenzoylamino) propionyl ] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98af)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 1-[2 -(4-methoxy-3,5dimethylbenzoylamino)propionyl]-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a allylesteru anti-(2-ethoxy-5-oxote.trahydrofuran-3-yl.)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 168 mg (výtěžek 77 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform): δ 1,10-1,35 (m, 3H) , 1,35-1,60 (m, 3H) , 1,90-2,45 (m, 10H) , 2,60-3,00 (m,
Η) , 3,55-3,95 (m, 8H) , 4,15-4,60 (m, 2H) , 4,83-5,00 (m, Η) ,
5,29 (s, Η) , 6,95-7,06 (m, Η) , 7,50 (s, 2H) , 7,92 (d, H) ;
retenční čas při analytické HPLC: 10,14 min; LC-MS: m/z = 476 (M+H) .
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3 -yl) amid 1- [2- (4-methoxy3,5-dimethylbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98ag)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 1 - [2 - (4-methoxy-3,5 dimethylbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a allylesteru syn-(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3 yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu
170 sloučeniny 98a. Získá se 406 mg (výtěžek 71 %) sloučeniny uvedené v názvu. lH-NMR (500 MHz, deuterochloroform) : δ 1,0 9 (d, 0,6H), 1,35 (m, 2,4H), 1,90-2,20 (m, 3H) , 2,22-2,50 (m,
10H) , 2-,84-2,90 (m, Η) , 3,52-3,62 (m, 1,6H), 3,65-3,80 (m,
3,4H) , 4,10-4,40 (m, Η) , 4,50-4,75. (m, 3H) , 4,82-4,95 (m, 2H) ,
5,54 (d, 0,8H), 5,80 (d, 0,2H), 6,87 (d, Η) , 7,10-7,40 (m,
6H) , 7,45 (s, 2H) , retenční čas při analytické HPLC: 16,71 min1; LC-MS: m/z = 538 (M+Hý
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl) amid 1-[2- (4-allyloxy3,5-dimethylbenzoylamino)propionyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98ah)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 1-[2-(4-allyloxy3,5-dimethylbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a sloučeniny 40 podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 264 mg (výtěžek 46 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, deuterochlorof orm) : δ 1,091,43 (m, 3H), 1,90-2,20 (m, 3H), 2,20-2,38 (m, 7H), 2,38-2,52 (m, Η) , 2,80-2,95 (m, Η) , 3,52-3,67 (m, Η) , 3,70-3,80 (m, Η) , 4,10-4,40 (m, 2H), 4,40-4,95 (m, 5H), 5,26-5,55 (m, 3H), 6,006,14 (m, Η) , 6,87 (d, Η), 7,10-7,70 (m, 8H); retenční čas při
98ai ·· ·· · ·· ·« ·· « ·· · · · » · · « · 9
171 allylester (2- [IR- (2S-isopropyl - 5R-methylcýklohexyloxy)] -5oxotetrahydrofuran-3-yl}karbamové kyseliny
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu' použitého pro přípravu sloučeniny 40 za použití (IR,-2S, 5R)-(-)-mentholu. Získá se 0,32 g syn diastereomeru (nižší Rf) sloučeniny uvedené v názvu a 4,25 g směsi anti/syn diastereomerů. (celkový výtěžek 67 %) . 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) směs: δ
0,70-1,05 (m, 13H) , 1,20-1,47 (m, 2H) , 1,60-1,80 (m, 2H) ,
1,94-2,20 (m, 2H) , 2,35-2,50 (m, Η) , 2,82-3,04 (m, Η) , 3,403,61 (m,.H), 4,43-4,70 (m, 3H) , 5,15-5,35 (m, 2H) , 5,48-5,61 (m, Η) , 5,90-5,94 (m, H) ; pro syn diastereomer 0,70-1,05 (m,
13H) , 1,20-1,47 (m, 2H) , 1,60-1,80 (m, 2H) , 1,94-2,18 (m, 2H) ,'
2,40-2,50 (m, Η) , 2,82-2,92 (m, Η) , 3,54-3,61 (m, Η) , 4,454,70 (m, 3H) , 5,18-5,35 (m, 2H) , 5,58-5,61 (m, Η) , 5,90-5,93 (m, H) ; LC-MS: m/z = 340 (M+H+) pro směs anti/syn diastereomerů .
4-Benzyloxy-3,5-dimethylbenzoová kyselina
Sloučenina se připraví podle způsobu popsaného pro přípravu 4allyloxy-3,5-dimethylbenzoové. kyseliny. Získá se 2,43 g (56 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform) : δ 4,87 (s, 2H), 7,36-7,48 (m, 5H) , 7,92 (s, 2H) ; LC-MS:
m/z = 255 (M-H+) .
(2-[IR-(2S - isopropyl -5R-meihylcyklohexyloxy)]-5-oxotetrahydrofuran-3-yl}-amid 1-[2-(4-benzyloxy-3, 5-dimethylbenzoylamino)propionyl]-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98ai)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 1-[2 -(4-benzyloxy3,5-dimethylbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a allylesteru {2-[IR-(2S-isopropyl-5R-methylcyklohe172
00 0 00 00 00 • · · 0 · · 0 · · · * «·· 0 0 · 0000 • 0 0 0 00 0 0 0 00 0 • 0 0 00 0 · 00 ·
0·· 00 000 00 0· 0· xyloxy)]-5-oxotetrahydrofuran-3-yl}karbamové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 130 mg (výtěžek 39 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform): δ 0,45-1,10 (m, 12H), 1,15-1,90 (m, 8H) ,
1,90-2,45 (m, 12H), 2,80-2,84 (m, H), 3,50-3,85 (m, 3H), 4,454,70 (m, 2H) , 4,80-4,95 (m,. . 3H) , 5,62 (d, H) , 7,05 (d, H) ,
7,17 (d, H) , 7,30-7,60 (m, 7H) , 7,62-7,75 (m, H) ; retenční čas při analytické HPLC: 15,90 a 16,08 min; LC-MS: m/z = 662 (M+H*) .
(2- (IR- (2S-isopropyl-5R-methyl-cyklohexyloxy) ] -5-oxotetrahydrofuran-3-yl} amid 1-[2-(4-hydroxy-3,5-dimethylbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98aj)
Roztok 110 mg (0/17 mmol) {2-[IR-(2S-isopropyl-5R-methylcyklohexyloxy)]- 5-oxotetrahydro-furan-3-yl}amidu 1-[2-(4-benzyloxy3,, 5-dimethylbenzoylamino) propionyl] pyrrolidin-2 -karboxylové kyseliny ve 2 ml ethylacetátu se míchá s 20 mg 10% palladia na uhlí 24 hodin ve vodíkové atmosféře, potom se filtruje přes křemelinu a odpaří se ve vakuu. Zbytek se čistí pomocí chromatografie za použití směsi dichlormethanu a methanolu (99/1 až 96/4) jako eluentu a získá se 58 mg sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform): δ 0,70--
1, 00 (m, 10H) , 1,20-1,80 ( m, 10H), 1,90-2,40 (m, 11H) , 2,82-
2,86 (m, H) , 3,57-3,78 (m, 3H) , 4,55-4,67 (m, 2H) , 4., 90 -4,94
(m, H), 5,29 (s, H) , 5,62 (d, H) , 6,90 (d, H) , 7,14 (d , H) ,
7,42 (S, 2H); retenční čas při analytické HPLC :- 12,84 a 13,05
173 min; LC-MS: m/z = 572 (M+H*)
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)-amid 1-[2-(4-hydroxy3,5 -dimethylbenzoylamino)propionyl]pyrrolídin-2-karboxylové kyseliny (98ak)
Roztok 230 mg (0,41 mmol) sloučeniny 98ah v 10 ml dichlormethanu se 20 hodin při teplotě místnosti reaguje s 65 mg (0,42 mmol) DMBA a 50 mg Pd(PPh3)4. Směs se odpaří ve vakuu do sucha a čistí se pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi dichlormethanu a methanolu (99,5/0,5 až 97/3) jako eluentu. Získá, se 181 mg sloučeniny uvedené v názvu.. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform): δ 1,08 (d, 0,75H), 1,20-1,35 (m, 2,25H),
1,70-2,50 (m, 12H.) , 2,80-2,90 (m, H), 3,50-3,65 (m, Η) , 3,703,80 (m, Η) , 4,10-4,25 (m, Η) , 4,35-4,98 (m, 3H) , 5 ,53 (d,
0,75H), 5,85 (d, 0,25H), 6,81 (d, Η) , 7,13-7,60 (m, 8H) ;
retenční čas při analytické HPLC: 10,38 a 10,56 min; LC-MS:
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-dimethylaminobenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98al) , .
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 1-[2-(4-dimethylaminobenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a
174
00 0 00 00 00
00 0 000 0 0 »0 ·
0 0 00 0 0 00 0
0 00 0 0 00 0 00 0
00 00 0 0000
0000 00 000 00 00 00 allylesteru syn-(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 60 mg (výtěžek 45 %) sloučeniny uvedené v názvu. ^-NMR (500 MHz, deuterochloroform) : δ 1,04 (d, 0,75H), 1,35 (d, 2,25H), 1,80-2,50 (m, 5H) , 2,75-3,20 (m, 8H) , 3,45-3,75 (m, 2H), 4,05-4,20 (m, 0,5H), 4,30-4,80 (m, 3,5H), 4,80-4,95 (m, 1,5H), 5,52 (d, Η) , 5,75-6,00 (m, 0,5H), 6,60-6,90 (m,
3H) , 7,10-7,50 (m, 4H) , 7,50-7,80 (m, 2H) ; retenční čas analytické HPLC: 10,46 min; LC-MS: m/z = 523 (M+H*).
{2R- (IR- (2S-isopropyl-5R-methyl-cyklohexyloxy)]-5-oxotetrahydrof uran-3 -yl) amid 1-[2- (4-amino-3-chlorbenzoylamino)-propionyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98am)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 1-[2-(4-amino-3chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (97a) a allylesteru syn-{2-[lR-(2S-isopropyl-5R-methylcyklohexyloxy)]-5-oxotetrahydrofuran-3-yl}karbamové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 103 mg (67 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform) : δ 0,70-1,10 (m, 12H) , 1,20-1,50 , (m, 5H) , 1,50-
1,85 (m, 2H), 1,90-2,30 (m, 5H) , 2,75-2,85 (m, Η), 3,50-3,70
(m, 2H) , 3,70-3,82 (m, Η) , 4,20-4,65 (m, 4H) , 4,80-4,95 (m,
Η) , 5,61 (d, Η) , 6,70-6 ,73 (m, Η) , 6,95 (d, H) , 7,15 (d, Η) ,
7,49-7,51 (m, Η) , 7,73 (s, H) ; retenční čas při analytické
HPLC: 12,88 min; LC-MS: m/z = 577 (M+H*).
• to toto - · toto ♦ ♦ ·· • toto to · · to to · · toto to • to · ·· · to <· · ·· ·· ·· · ·· · · · • to· · ·· ···· ···· ·· ··· ·· ·· ··
175
allylester {2- [1S- (2R-isopropyl-5S-methylcyklohexyloxy) ]-5oxotetrahydro-furan-3-yl}karbamové kyseliny
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 40 za použití (1S,2R,5S)-(+) -mentholu. Získá se 855 mg anti diastereomerů (vyšší Rf) sloučeniny uvedené v názvu, 503 mg syn diastereomerů (nižší Rf) a 459 mg směsi anti/syn diastereomerů (celkový výtěžek 66 %) . ^-NMR (500 MHz, deuterochloroform) anti diastereomer: δ 0,74-1,00 (m, 12H), 1,20-1,45 (m, 2H), 1,58-1,72 (m, 2H), 1,98-2,12 (m,
2H) , 2,18-2,40 (m, Η) , 2,98-3,03 (m, Η) , 3,49-3,54 (m, Η) ,
4,17 (š, Η) , 4,59 (š, 2H) , 4,97 (š, Η) , .5,22-5,3 3 (m, 2H) ,
5.58 (s, Η), 5,87-5,93 (m, H); pro syn diastereomer 0,75-1,02 (m, 12H) , 1,25-1,45 (m, 2H) , 1,,57-1,70 (m, 2H) , 2,00-2,16 (m,
2H) , 2,40-2,52 (m, Η) , 2,78-2,90 (m, Η) , 3,40-3,50 (m, Η) ,
4.58 (š, 2H) , 5,24-5,35 (m, 2H) , 5,51-5,52 (d, Η) , 5,85-5,98 (m, H) ; LC-MS : m/z = 340 (M+H*) pro oba diastereomery.
{2R-[1S- (2R-isopropyl-5S-methyl-cyklohexyloxy)]-5-oxotetrahydrofuran-3-yl}amid 1- [2- (4-amino-3-chlorbenzoylamino)propionyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98an)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97a a allylesteru syn-{2[1S- (2R-isopropyl-5S-methylcyklohexyloxy)]-5-oxotetrahydrofuran-3-yl}karbamové kýseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 88 mg (výtěžek 50 %) sloučeniny
4· ·· · 44 44 ·· • · · · 4 · * · 4 44 4
444 444 444 4
176
44 444 444
4444 ·4 444 44 44 44 uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, deuterochlorof orm) : δ 0,701,10 (m, 12H) , 1,20-1,50 (m, 14H) , 1,50-1,70 (š, 2H) , 1,90-
2,25 ( :m, 4H) , 2,27-2,37 (m, H)
(m, H) , 3,35-3,80 (m, 3H) , 4,2
H) ,' 4, 88-4,92 (m, Η) , 5,53 (d,
Η) , 7, 20 (d, Η) , 7,50-7,53 (m,
při analytické HPLC: 13,20 min;
, 2,40 -2, 50 (m, Η), 2,75- 2,79
0-4,57 (m, 3H) , 4,60-4,70 (m,
Η) , 6, 716,75 (m, Η) , 6,90 . (d,
Η) , 7, 75 (d, H) ; retenční čas
LC-MS: m/z = 577 (M+H*) .
allylester (2-cyklohexylmethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3 -yl) karbamové kyseliny
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 40 za použití cyklohexylmethanolu. Získá se 1,04 g (vyšší Rf) (výtěžek 35 %) anti diastereomerů sloučeniny uvedené v názvu a 1,295 g (nižší Rf) (výtěžek 44 %) syn diastereomerů. 1H NMR (500 MHz, deuterochlorof orm) pro anti diastereomer: δ 0,90-0,96 (m, 2H) , 1,10-1,30 (m, 3H) , 1,551,85 (m, . 6H) , 2,37-2,41 (d, Η) , 2,97-3,03 (m, Η) , , 3,34-3,38 (m, Η) , 3,58-3,62 (m, Η) , 4,55-4,70 (m, 2H) , 4,70-4,73 (m, Η) ,
5,03 (šs, Η) , 5,22-5,37 (m, 3H) , 5,87-5,93 (m, H) ; pro syn diastereomer 0,91-0,97 (m, 2H) , 1,10-1,31 (m, 3H) , 1,56-1,90 (m, 7H,) , 2,44-2,48 (m, Η) , 2,81-2,87 (m, Η) , 3,35-3,39 (m,
Η) , 3,63-3,67 (m, Η) , 4,53-4,70 (m, 3H) , 5,20-5,50 (m, 3H) , 5,89-5,95 (m, H) ; LC-MS: m/z = 298 (M+H*) pro oba diastereomery.
(2-cyklohexylmethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4acetylamino-3-chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2 44 44 • · · 4
4 4
4 4
4444 44
177 karboxylové kyseliny (98ao)
• 44 4
4 4 ·
4 4 4 • 4 4 4
44
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97b a allylesteru syn-(2cyk.1 ohexy1me t hoxy - 5 - oxo t e t r ahydr o f uran - 3 - y 1) karbamové kys e 1 i ny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny.98a. Získá se 212 mg (výtěžek 64 %) sloučeniny uvedené v názvu. lH NMR (500 MHz, deuterochloroform) : δ 0,70-1,30 (m, 5H) , 1,30-1,85 (m, 9H) , 1,85-2,60 (m, 8H) , 2,75-3,00 (m, Η) , 3,10-3,80 (m, 4H) , 4,30-4,95 (m, 3H), 5,42 (d, 0,85H), 5,62 (d, 0,15H), 6,87 (d, 0,15H), 7,08 (d, 0,85H), 7,25 (d, H), 7,60-7,90 (m, 3H), 8,08 (d, 0,15H), 8,50 (d, 0,85H); retenční čas při analytické HPLC:
11,81 min; LC-MS: m/z = 577 (M+H+) -
(2R- [1S- (2R-isopropyl-5S-methylcyklohexyloxy) ] -5-oxotetrahydrofuran-3-yl}amid 1-[2-(4-acetylamino-3-chlor-benzoylamino)-propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98ap)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97b a allylesteru syn-{2[ 1S-(2R-isopropyl-5S-methylcyklohexyloxy)]-5-oxotetrahydrofuran-3-yl}karbamové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 223 mg (výtěžek 63 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) : δ 0,70-1,15 (m, , 12H) , 1,20-1,85 (m, 8H), 1,85-2,60 (m,
9H) , 2,74-2,88 (m, Η) , 3,35-3,85 (m, 3H) , 4,4 0 - 4,5.5 (m, Η) ,
4,65-4,78 (m, Η), 4,88-4,91 (m, Η), 5,53 (d, Η) , 7,00-7,25 (m,
2H), 7,60-7,90 (m, 3H), 8,50 (d, H); retenční čas při analytické HPLC: 13,31 min; LC-MS: m/z = 619 (M+H+) .
• 9 99 9 99 99 -99
99 9 999 9 9 99 9 • 99 99 9 9999 • 9 99 99 999 99 9
178
(2-cyklohexylmethoxy-5-oxotetrahydro-f uran-3 -yl) amid 1- [2- (4amino-3 -chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98aq)
Sloučenina se připraví.ze sloučeniny 97a a allylesteru syn-(2cyklohexylmethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 113 mg (výtěžek 56 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) : δ 0,70-1,35 (m, 5H) , 1,35-1,90 (m, 5H) , 1,90-2,20 (m, 3H) , 2,30-2,60 (m, Η) , 2,80-3,00 (m, Η) , 3,15-3,80 (m, 4H) , 4,28-4,75 (m, 4H) , 4,89-4,93 (m, Η) , 5,42 (d, Η) , 6,74 (d, Η) , 6,87 (d, Η) , 7,30 (d, Η) , 7,51-7,53 (m, Η) , 7,74 (d, H) ; retenční čas při analytické HPLC: 12,02 . min; LC-MS: m/z = 535 (M+H+) .
allylester (2-butoxy-5-oxotetrahydrofuran-3 -yl) karbamové kyseliny ,
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu popsaného ,pro přípravu sloučeniny 40 za použití n-butanolu. Získá se 878 mg (výtěžek 29 %) sloučeniny uvedené v názvu .(313 mg anti diastereomerů, 260 mg syn diastereomerů a 305 mg směsi). ^H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) pro anti diastereomer: δ (vyšší
179
• · ·· • ·· 99 ··
• ♦ • • • · · 9 9 • • •
• ♦ • * · • 9 • • »
•
• • • • · • 9 • *
···· • · • ·· 99 • · ·«
Rf) 0,89-0,96 (t, 3H) , 1,32-1,40 (m, 2H) , 1,54-1,63 (m, 2H) ,
2,37-2,41 (d, Η) , 2,98-3,04 (kv, Η) , 3,55-3,60 (m, Η) , 3,773,82 (m, Η) , 4,19-4,22 (m, Η) , 4,58 (š, 2H) , 5,03 (Š, Η) , 5,23-5,40 (m, 3H) , 5,87-5,93 (m, Η) , pro syn diastereomer (nižší Rf) 0,91-0,95 (t, 3H) , 1,34-1,39 (m, 2H), 1,56-1,63 (m, 2H) , 2,42-2,50 (m, Η) , 2,83-2,87 (m, Η) , 4,07-4,11 (t, Η) ,
4,45-4,50 (m, 0,5H) , 4,51-4,70 (m, 2,5H) , 5,23-5,35 (m, 2H) , 5,42-5,43 (d, Η), 5,80-5,95 (m, H); LC-MS: m/z = 258 (M+H*) pro oba diastereomery.
(2-butoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-amino-3chlorbenzoylamino) propionyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98ar)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97a a allylesteru syn-(2butoxy-5-oxotétrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 118 mg (výtěžek 48 %) sloučeniny uvedené v názvu jako syn diastereomeru. ^-NMR (500 MHz, deuterochloroform): δ 0,80-1,02 (m, 2H) ,
1,35-1,51 (m, 5H), 1,51-1,70 (m, 2H), 1,90-2,27 (m, 3H), 2,302,46 (m, Η) , 2-,80-2,90 (m, H) , 3,55-3,94 (m, 4H) , 4,30-4,75 (m, 4H), 4,90-5,00 (m, Η), 5,44-5,46 (m, Η), 6,73-6,80 (m, Η), 6,80-6,93 (m, Η), 7,16-7,25 (m, H), 7,497,60 (m, Η), 7,70-7,84 (m, H) ; retenční čas pro analytickou HPLC: 9,71. min; LC-MS: m/z = 495 (M+H*) .
allylester kyseliny (2-i sobutoxy-5-oxotétrahydrofuran- 3-yl)karbamové
180 *·' toto · toto ·· ·* • toto · · · · · · ·* * • to· ·«· ···· ·· ·« ··'··· toto to • toto ··· ···· • ••to ·· ··· ·· ·« ··
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny za použití isobutanolu, Získá se 190 mg (výtěžek 7,3 %) sloučeniny uvedené v názvu jako anti diastereomeru a 290 mg (výtěžek 11 %) syn diastereomerú. XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform) pro anti diastereomer: δ (vyšší
Rf) 0,85-1,05 (m, 6H) , 1,82 -1,98 (m, Η) , 2,37-2,42 (d, Η) ,
2,98-3,04 (m, Η) , 3,31-3,35 (m, Η) , 3,55-3,58 (m, Η) , 4,20-
4,30 (t, Η) , 4,58 (š, 2H) , 5,07 (š, H) , 5,22-5,43 (m, 3H) ,
5,845,96 (m, Η) , pro syn diastereomer (nižší Rf) 0,85-1,05 (τη, 6H) , 1,88-1,95 (m, Η) , 2,40-2,51 (m, Η),, 2,83-2,90 (m, Η) ,
3,33-3,36 (m, Η) , 3,61-3,65 (m, Η) , 3,87-3,88 (d, Η) , .4,404,68 (m, 3H) , 5,20-5,40 (m, 2H) , 5,42-5,43 (d, Η) , 5,80-5,97 (m, H) ; LC-MS: m/z = 258 (M+H+) pro oba diastereomery.
(2-isobutoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl) amid 1-[2- (4-amino-3chl orbenzoylamino) propi onyl ] pyrrol i din - 2-karboxylové kysel iny (98as)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97a.a allylesteru syn-(2isobutoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny za použití postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 93 mg (výtěžek 38 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform): δ 0,74-0,76 (t, Ó,6H), 0,80-1,00 (m,
5,4H) , 1,40-1,50 (m, 3H) , 1,90-2,22 (m, 3H) , 2,33-2,45 (m, Η) ,
2,80-2,90 (m, H)., 3,32-3,38 (m, Η) , 3,55-3,80 (m, 3H) , 4,38 (š, Η) , 4,50-4,60 (m, Η) , 4,70-4,80 (m, H), 4,90-5,00 (m, Η) ,
5,42-5,45 (m, Η) , 6,74-6,76 (d, Η) , 6,86-6,88 (d, Η) , 7,317,33 (d, Η), 7,51-7,53 (m, Η), 7,74-7,75 (d, H); retenční čas při analytické HPLC: 9,63 & 9,80 min; LC-MS: m/z =. 495 (M+H*) .
181
·· 99 • • 9 9« 99
• · • • ·· · 9 9 • 9 9
• • • • · 9 9 9 9 9
• 9999 • • 99 • 9 999 99 9 9 99 9 9 9 99
allylester [2 - (indan-2-yl) oxy-5-oxotetrahydrofuran-3 -yl] karba mové kyseliny
Sloučenina se připraví z 5,2 g (20 mmol) terč.butylesteru 3allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny vzorce 40 za použití 8,05.g (60 mmol) 2-indanolu. Získá se 4,10 g (výtěžek 65 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě směsi epimerú. Po čištění se získá 1,76 g (výtěžek 28 %) 4(S),5(R) epimeru ve formě žlutého
oleje. XH NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 2,42 (dd, J=17,2,
10., 5Hz, 1H) , 2,79 (dd, J=17,2, 8,4Hz, 1H) , 2,99 (dd, 'J=16,7,
4,1Hz, 1H) , 3,04 (dd, J=I6,7, 4,1Hz, 1H) , 3,22 (dd, J=I7,2,
6,6Hz, 1H) , 3,26 (dd, J=17,2, 6,6Hz, 1H) , 4,53 (m, 3H), 4,70
(m, 1H) , 5, 2 0 (m, 2H) , 5,60 (d, J=5,3Hz, 1H) , ! 5,87 (m, 1H) ,
7,17 (m, 4H) ppm. LC-MS (ES*) : m/e=318 (M+H)·. Analytická HPLC (kolona C18).: 17,094 min.
Také se izoluje 0,75 g (výtěžek 12 a 1,59 g (25
4(S),5(S) epimeru ve formě bílé pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 2,38 (d, J=17,9Hz, 1H) , 3,0 (m, 3H) , 3,22 (m, 2H) , 4,13 (m, 1H) , 4,58 (m, 2H), 4,68 (m, 2H) , 4,98 (šs, 1H) , 5,26 (m, 1H) , 5,57 (s, 1H) , 5,88 (ddt, J=18,0, 11,1,
5,4Hz, 1H) , 7,20 (m, 4H) ppm. LC-MS (ES*): m/e=318 (M+H). Analytická HPLC (kolona C18): 17,025 (5,5 %), 17,325 (94,5 %) min [2- (indan-2-yloxy) - 5-oxo tetrahydro furan-3 -yl] amid
1- [2-(4-
182 • ·
amino -3- chl orbenzoylamino) propi onyl Jpyrrol idin-2-karboxylové kyseliny (98at)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97a a allylesteru [2(indanol-2-yl)oxy-5-oxotetrahydró-furan-3-yl] karbamové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny,98a. Získá se 0,20 g (výtěžek 58 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě směsi epimerů 71:29 jako bílé pevné látky. ^H-NMR (500 MHz-, deuterochloroform) δ 1,0-1,5 (m, 3H) , 1,6-2,3 (m, 4H) ,
2,42 (m, IH) , 2,6-3,4 (m, 6H) ,' 3,5-4,1 (m, 3H) , 4(2-4,9 (m,
4H), 5,65 (d, J=5,0Hz, 0,80H), 5,8 (m, 0,07H), 5,85 (d,
J=5,0Hz, 0,13Η), 6,8-7,3 (m, 6H), 7,4-7,9 (m, 3H) ppm. Analytická HPLC (kolona C18) 16,035 (71,4. %) , 16,476 (28,6 %) min.
LC-MS (ES*) : m/e = 555 (M+H) .
[2-(indan-2 -yloxy)-5-oxotetrahydrofuran-3-yl]amid 1 -[2-(4-acetyl amino -3- chl orbenzoylamino) propi onyl ] pyrroli din-2-karboxyl o vé kyseliny (9Sau)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97b a allylesteru [2(indanol- 2-yl)oxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl]karbamové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 0,22 g (výtěžek 57 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě směsi epimerů 76:24 jako bělavé pevné látky. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,08 (d, j=6,.9Hz, 0,4H), 1,26 (d,
J=6,9Hz, 0,6H) , 1,35 (d, J=6,9Hz, 2H) , 1,8-2,3 (m, 3H) , 2,28 (s, 2H) , 2 ,29 (s, IH) , 2,4 (m, IH) , 2,8 (m, IH) , 3,10 (m,
• · · · ·
• · · · * * • · · · 183 ···♦·· ·· Φ · · · · · • · · · · · • ·· ·· ··
2H) , 3,27 (m, 2H) , 3,58 (m, 2H) , 3,69 (m, 1H) , 4,5-4,9 (m,
4H) , 5,65 (d, J=5,3Hz, 0, 68H), 5,84 (d, J=5,3Hz, 0,18H), 6,38
(š, 0,14H) , 6,9-7,7 (m, 6H), 7,6-7,9 (m, 3H) , 8,33 (Šd,
J=6,8Hz, 0,18H), 8,51 (šd, J=8,0Hz, 0,82H) ppm. Analytická
HPLC (kolona C18) 15,596 (76,2 %)., 15,932 (23,8 %) min. LC-MS (ES*)' : m/e = 597 (M+H) .
(2 - cyklopentyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3 -yl) amid 1- [2- (4-amino-3- chlorbenzoylamino) propionyl]pyrrol i din -2-karboxylové kyseliny (98av)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97a a allylesteru syn-(2cyklopentyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 0,19 g (výtěžek 59 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bělavé pevné látky. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,22,4 (m, ·15H), 2,4-3,1 (m, 2H) , 3,6-3,9 (m, 2H) , 4,2-4,4 (m, 2H), 4,5-5,0 (m, 4H), 5,40 (d, J=5,0Hz, 0,35H), 5,55 (d, J=5,0Hz, 0,65H), 6,8-8,2 (m, 5H) ppm. Analytická HPLC (kolona C18) 14,065 min. LC-MS (ES*): m/e=507 (M+H).
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(3,5-dichlor4 -hydroxybenzoylamino/propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové
184 kyseliny (98aw)
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru 1-[2-(4-allyloxy3,5-dimethylbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a sloučeniny syn-40 podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 1,087 g (výtěžek 64 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle žluté pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,09 (d, J=6,9Hz, 0,6H),
1,33 (d, J=6,9Hz, 2,4H) , 1,96 (m, 1H) , 2,03 (m, 1H) , 2,10 (m, 1H) , 2,2-8 (m, 0,8H), 2,40 (dd, J=17,3 ,. 10,2Hz, 0,8H), 2,56 '(m, 0,2H), 2,85 (dd, J=17,3/ 8,5Hz, 0,8H), 3,09 (dd, J=17,7,
10,2Hz, 0,2H), 3,57 (m, 1H) , 3,73 (dt, J=9,2., 7,9Hz, 0,8H),
4,09 (m, 0,2H),. 4,21 (d, J=7,9Hz, 0,2H), 4,44 (d, J=9,5Hz,
0,2H), 4,55' (dd, J=8,0, 3,0Hz, 0,8H), 4,62 (d, J=ll,6Hz, 1H),
4,70 (m, 1H) , 4,80 (m, 1H) , 4,89 (d, J=ll,6Hz,. 0,8H) , 5,52. (d,
J=5,2Hz, 0,8H), 5,82 (d, J=5,2Hz, 0,2H), 6,51 (š, 0,2H), 6,62 (š, 0,8H), 7,0-7,4 (m, 7H), 7,43 (s, 0,4H), 7,66 (d, J=l,0Hz, 1,6H) ppm. Analytická' HPLC (kolona C18) 10,135 min. LC-MS (ES*): m/e= 564, 566 (6:4) (M+H).
(2 - cyklopentyloxy-5 -oxotetrahydrof uran-3 -yl) amid 1- [2- (4-amino-3 -chlorbenzoylamino) propionyl ] pyrrol idin- 2 -karboxylové kyseliny (98ax)
Sloučenina se připraví podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny (98av) za použité anti-(2-cyklopentyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amidu. Získá se 0,24 g (výtěžek 74 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bělavé pevné látky. XH-NMR (500MHz, deutěrochloroform) δ 1,41 (d, J=6',5Hz, 3H) , 1,7 (m,
185
7H), 1,98 (š, 2H) , 2,1'3 (Š, 2H) , 2,27 (m, IH), 2,69 (m, IH) ,
2,86 (dd, J=18,0, 6,8Hz, 0,7H), 2,98 (dd, J=18,3, 8,2Hz,
0,3H), 3,60 (š, 1,4H), 3,77 (š, 0,6H), .4,1-4,6 (m, 5H) , 4,82 (m, IH) , 5,27 (m, 0,65H), 5,51 (d, J=5,3Hz, 0,05H), 5,59 (šs,
0,3H), 6,76 (š, IH), 7,00 (š, IH), 7,49 (š, IH) , 7,74 (š, IH), 7,89 (š, IH) ppm. Analytická HPLC (kolona C18) 9,756 min. LCMS (ES*) : m/e = 507 (M+H) .
(2-ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl) amid l-[2-(4-acetylamino3 - chlorbenzoylamino) propionyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98ay)
Sloučenina se připraví z allylesteru (2-ethoxy-5-oxo-tetrahydrofuran- 3 -yl ) karbamové kyseliny a sloučeniny 97b podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 51 mg (výtěžek 18 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. ΧΗNMR (500MHz, 1:1 deuterochloroform:deuteromethanol) δ 1,08-
1,35 (m, 3H), 1,35-1,55 (m, 3H) , 1,75-2,44 (m, 4H) , 2,2 6 (s,
3H) , 2,44-3,07 (m, 2H), 3,4.8-3,97 (m, 2H), 4,18 -4,92 (m, 5H) ,
5,32 (d, 0,4H), 5,-47 (d, 0,lH), 5,58 (d, 0, 4H) , 5,64 (d,
0,1Η), 7,70-8,35 (m, 3H). Analytická HPLC 10,37, 10,54 min.
LC-MS (ES*) m/e= 509,2 (M+H*).
98az • ·
186 ··· allylester [2-(2-chlorethoxy) -5-oxotetrahydrofuran-3 -yl] karba mové kyseliny
Sloučenina se připraví z 5,2 g (20 mmol) terč.butylesteru 3allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 40 za použití 4,05 ml (60 mmol) chlorethanolu. Získá se 1,84 g (výtěžek 35 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě směsi epimerú. Pro antidiastereomer: 1H-NMR (500' MHz,deuterochloroform) . δ 2,42 (dd, J=18,lHz, 1H) ,
3,00 (dd, J=18,l, 7,8Hz, 1H), 3,63 (m, 2H), 3,85 (m, 1H) , 4,02
(m, 1H) , 4,23 (m, 1H) , 4,57 (šs, 2H) , 5,17 (šs, 1H) , 5, 22 (d,
H=ll ,5HZ, 1H) , 5,29 (d, J=16,8Hz, 1H) , 5,44 (s, 1H) , 5, 89 (m,
1H) ppm; LC-MS (ES+) m/e= 264 (M+H). Pro syn-diastereomer: XHNMR (500 MHz, deuterochlorof orm) δ 2,47 (dd, J=17,3, 10,7Hz, 1H), 2,83 (dd, J=17,3, 8,4Hz, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,83 (m, 1H),
4,11 (m, 1H) , 4,57 (m, 3H) , 5,22 (d, H=10,4HZ, 1H),. 5,30 (d,
J=17,2Hz, 1H) , 5,33, (m, 1H) , 5,47 (d, J=5,2Hz, 1H) , 5,89 (ddt, J=17,l, 11,0, 5,4Hz, 1H) ppm; LC-MS (ES+) m/e= 264 (M+H).
allylester [2-(2 -morf olin-4-ylethoxy)-5-oxotetrahydrofuran-3yl]karbamové kyseliny
Sloučenina se připraví z allylesteru [2-(2-chlorethoxy)-5-oxotetrahydrofuran-3-yl] karbamové kyseliny a reakcí s 2 ekvivalenty morfolinu a 1 ekvivalentem jodidu draselného v dimethylformamidu.
[2-(2-morfolin-4-ylethoxy)-5-oxotetrahydrofuran-3-yl]amid 1[2- (4-amino-3 -chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrol idin - 2-karboxylové kyseliny (98az)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97a a allylesteru syn-[2(2-morfolin-4-ylethoxy)-5-oxotetrahydrofuran-3-yl]karbamové kyseliny podle způsobu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a.
• Φ , *· • ♦ » φ • · · · • · · ·
187
allylester . [2-(4-chlorbenzylóxy)-5-oxotetrahydrofuran-3-yl]karbamové kyseliny;
Sloučenina se připrav! z terč.butylesteru 3-allyloxykarbonylamino-4-hydroxybutanové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 40 za použití 4-chlorbenzylalkoholu. Získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě bílé pevné látky. Antidiastereomer: HPLC (kolona C18) 10,924 min; ^-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 2,41 (d, J=8,0Hz, 1H) , 3,02 (dd, J=18,l, 7,5Hz, 1H) , 4,25 (š, 1H) , 4,56 (m, 2H) , 4,58 (d, J=ll,7Hz,
1H) , 4,79 (d, J=ll,7Hz, 1H) , 4,99 (š, 1H) , 5,22 (dd, J=10,4, 1,1Hz, 1H) , 5,28 (dd, J=17,2, 1,3Hz, 1H), 5,44 (s, 1H) , 5,86 (m, 1H), 7,25 (d, J=8,4Hz, 2H), 7,32 (d, J=8,4Hz, 2H) ppm; LCMS (ES*) m/e=326 (M+H); Syn-diastereomer: HPLC (kolona C18)
10,780 min; 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 2-,47 (dd, J=17,3, 10,5Hz, 1H) , 2,85 (dd, J=17,3, 8,4Hz, 1H) , 4,55 (m„
3H), 4,58 (d, J=ll,7Hz, 1H), 4,84 (d, J=ll,7Hz, 1H) , 5,23 (dd,
H=10,4, 1,1Hz, 1H) , 5,30 (d, J=16,6Hz, 1H) , 5,49 (d, J=5,0Hz,
1H) , 5,89 (ddt, J=17,l, 11,0, 5,4Hz, 1Ή) , 7,2.3 (d, J=8,3Hz,
2H) , 7,31 (d, J=8,3Hz, 2H) ppm; LC-MS (ES*) m/e= 326 . (M+H) .
[2- (4-chlorbenzyloxy)-5-oxotetrahydrofuran-3-yl]amid 1- [2- (4amino-3 -chlorbenzoylamino.)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (98ba)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97a a allylesteru syn-[2(4-chlorbenzyloxy)- 5-oxotetrahydrofuran-3-yl]karbamové kyseliny podle postupu'popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 154 mg (výtěžek 65 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě ·· ·· » · · « • · 1
188 světle růžové pevné látky. HPLC (kolona C18)· 10,597 min; ^-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,14 (d, J=6,8Hz, .0,75H), 1,34, (d, J=6,8Hz, 2,25H), 1,6 (š, 0,25H), 1,91 (m, 1H) , 2,03 (m,
1H), 2,10 (m, 1H), 2,29 (m, 0,75H), 2,40 (dd, J=17,3, 10,3Hz,
0,75H), 2,51 (m, 0,25H), 2,82 (dd, .. J=17,3, 8,5Hz, 0,75H), 3,08 (dd, J=17,9, 10,9Hz, 0,25H), 3,58 (m, 1H) , 3,72 (dd, J=16,5, 8,7Hz, 0,75H), 4,10 (m, 0,25H), 4,22 (d, J=8,0Hz, 0,25H), 4,39 (d, J=10,8Hz, 0,25H), 4,54 (dd, J=9,l, 2,9Hz, 0,75H), 4,60 (d,
J=ll,9Hz, 0,75H), 4,68 (m, 1H) , 4,85 (d, J=ll,7Hz, 0,75H),.
4,86 (m, 1H) , 5,49 (d, J=5,2Hz, 0,75H), 5,81 (d, J=5,2Hz,
0,25H), 6,2 (š, 0,25H), 6,74. (m, 2H), 7,05 (d, J=S,5Hz, 0,5H),
7,17 (d, J=8,4Hz, 0,5H), 7,30 (m, 3,25H), 7,48 (dd, J=8,4,
2,0Hz, 0,75H), 7,56 (d, J=l,9Hz, 0,25H), 7,73 (d, J=l,9Hz,
0,75H), 8,42 (d, J=5,7Hz, 0,25H) ppm; LC-MS (ES*) m/e=563, 565 (M+H).
[2-(4-chlorbenzyloxy)-5-oxotetrahydrofuran-3~yl]amide. 1- [2-(4acetylamino-3-chlorbenzoylamino) propionyl ] pyrrolidin-2 karboxylové kyseliny (98bb)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 97b a allylesteru syn-[2 (4-chlor-benzyloxy)-5-oxotetrahydrofuran-3-yl]karbamové kyseliny podle postupů popsaného pro přípravu sloučeniny 9.8a. Získá se 165 mg (výtěžek 64 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle žluté pevné látky. HPLC (kolona C18) 10,491.min;
XH-NMR (500 MHz, deuterochlorof orm) δ 1,16 (d, J=6,8Hz, 0,6H)',
1,35, (d, J=6,8Hz, 2,4H), 1,94 (m, 1H), 2,04 (m, 1H), 2,10 (m,
1H) , 2,25 (s, 3H) , 2,28 (m, 1H) , 2,40 (dd, J=17,3, 10,4 Hz,
99
4 4
4 4
189
44 00
9 4 9 9 4
4 4 4 .4 4
4 · *0 · ··
0 0 · 0 0 •00 00 00
0,8H), 2,53 (m, 0,2H), 2,84 (dd, J=17,3, 8,5Hz, 0,8H), 3,02 (dd, J=17,5, 10,5Hz, 0,2H), 3,58 (m, 1H) , 3,72 (ddd, J=17,2, 8,3, 8,3Hz, 0,8H), 4,13 (m, 0,2H), 4,22 (d, J=B,2Hz, 0,2H), 4,40 (d, J=10,9Hz, 0,2H), 4,54 (dd, J=8,l, 3,0Hz, 0,8H), 4,60 (d, J=ll,8Hz, 0,8H), 4,69 (m, 1H) , 4,85 (d, J=ll,5Hz, 0,8H),
4,87 (m, 1H), 5,49 (d, J=5,2Hz, 0,8H), 5,80 (d, J=5,2Hz, 0,2H), 6,47 (š, 0,2H), 6,95 (d, J=8,3Hz, 0,8H),.7,05 (d,
J=8,3Hz, 0,4H), 7,18 (d, J=8,3Hz, 0,4H), 7,29 (m, 3,2H)', 7,49 (dd, J=8,6, 1,9Hz, 0,2H), 7,63 (dd, J=8,6, 1,9Hz, 0,8H;, 7,74 (d, J=l,9Hz, 1H) , 7,85 (d, J=l,9Hz, 0,8H), 8,25 (d, J=6,4Hz,
0,·2Η), 8,51 (m, 0,8H) ppm; LC-MS (ES+) m/e=605, 607 (M+H).
Schéma XVIII
Boď
-*CO2H
100
102a, Y=AcNH 102b, Y=NH2
terč.butylester 2- (2-benzyloxy-5-oxotetrahydrof uran-3 -ylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny (100)
Sloučenina se připraví z 1-terc.butylesteru piperidin-1,2-dikarboxylové, kyseliny 99 a sloučeniny 40 podle způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 75. Získá se 2,63 g (výtěžek 57 %) sloučeniny uvedené v názvu. 1H-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,15-1,79 (m, 15H), 2,12-2,50 (m, 2H), 2,56-2,83 (m, 1H) , 2,89 (dd, 0,5H) , 3,05 (dd, 0,5H), 3,81-4,15 (šs, 1H) , φφφφ φφφφ φφφφ φφ φ ΦΦΦΦ··· φφφφ φφ φφφ··· ιΠΛ · · · φφφ ΦΦΦΦ ±27U ΦΦΦΦ ·· ··· ·· ·· ··
4,36-4,97 (m, 3Η) , 5,37-5,61 (m, 1Η) , 6,42-6,89 (ŠS, 1Η) ,
7,17-7,51 (m, 5H) . LC-MS (ES+) m/e=419,4 (MH+) .
terč.butylester (2- [2-(2-benzyloxy-5-oxo-tetrahydrofuran-3ylkarbamoyl) piperidin-l-yl] -1-methyl-2-oxo-ethyl}karbamové kyseliny (101) terč.Butylester 2-(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-ylkarbamoyl) piperidin-l-karboxylové, kyseliny (100) se rozpustí v 25 ml 20% kyseliny trifluoroctová v dichlormethanu a míchá se 50 minut při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se azeotropicky čtyřikrát destiluje s dichlormethanem. Získaný olej se rozpustí v 20 ml dichlormethanu a 5 ml dimethylformamidu, ochladí se na 0 °C a reaguje se s 4,7 ml (27,0 mmol) DIEA, 970 mg (5,1 mmol) Boc-alaninu, 924 mg (6,8 mmol) HOBT a 1,31 g (6,8 mmol) EDC a roztok se 18 hodin míchá v dusíkové atmosféře. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu, zbytek se. rozpustí v ethylacetátu á dvakrát se promyje 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem sodným a odpaří se. Získá se oranžová pevná látka, která se rozpustí v dichlormethanu a přikape se. k diethyletheru a získá se bílá sraženina. Získá'se 1,21 g (výtěžek 73 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. XH-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,10-1,79 (m, 18H), 1,98-2,19 (m, 0,5H), 2,28-2,88 (m, 3H) , 2,89-3,13 (m, 0,5H), 3,78-3,95 (m, 0,5H), 4,21-5,16 (m, 5,5H), 5,38-5,59 (m, 0,3H), 5,66 (d,
0,4H), 5,80 (d, 0,3H), 7,24-7,40 (m, 5H). LC-MS (ES+) m/e=490,3 (MH+) .
(2 -benzyloxy-5-oxo tetrahydrof uran-3 -yl) amid 1- [2- (4-acetylamino-3-chlorbenzoy lamino) propionyl ] piperidin-2-karboxylové kyseliny (102a)
- 44
I · · « • · I
191 ·4 » 4 · · > · 4 · » 4 4 4 » 4 4 4
44
Sloučenina se připraví z terč.butylesteru {2-[2-(2-benzyloxy5-oxotetrahydro-furan-3-ylkarbamoyl)piperidin-1-yl]-1-methyl2-oxoethyl}karbamové kyseliny a 4-acetylamino-3-chlorbenzoové kyseliny podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 71 mg (výtěžek 47 %) sloučeniny uvedené v. názvu. XHNMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,10-1,97 (m, 10H) , 2,102,68 (m, 5H), 2,73-3,24 (m, 2H), 3,62-3,92 (m, 1H), 4,24-5,27 (m, 5H), 5,48-5,59 (m, 0,5H), 5,75-5,85 (m, 0,5H), 6,51-6,61 (d, 1H) , 7,05-7^45 (m, 4H) , 7,52-8,12 (m, 4H) . Analytická HPLC
8,30 min. LC-MS (ES+) m/e = 585,3 (MH+) .
(2 -benzyloxy-5-oxotetrahydrof uran-3 -yl) amid 1-[2-(4-amino-3chlorbenzoylamino) propionyl ] piperidin-2-karboxylové kyseliny (102b)
Sloučenina se připraví podle postupu popsaného výše pro přípravu sloučeniny 102a. Získá se 0,06 g (výtěžek 27 .%) sloučeniny uvedené v názvu vé formě žluté pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,2-1,8 (m, 7H) ; 2,1-2,6 (m,
2H) , 2,7-3,2 (m, 4H) , 3,6-4,0 (m, lHj , 4,3-4,9 (m, 7H) , 5,05,8 (m, 2H), 6,5-7,0 (m, 2H), 7,2-7,8 (m, 8H) ppm. Analytická HPLC (kolona kyano) 14,559 (39,6 %) , .15,198 (60,4 %). LC-MS (ES+) : m/e=543 (M+H)
1-benzylester 2-terc.butylester 4-hydroxy-pyrrolidin-l, 2-di karboxylové kyseliny (104)
Sloučenina 104 se připraví podle, postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 95.
Suspenze 4,854 g (18 mmol) Cbz-Hyp-OH ve 135 ml DMA, 4,105 g (18 mmol) benzyltriethylamoniumch.loridu, 64 g (46 mmol) uhličitanu draselného a 99 ml (859 mmol) 2-brom-2-methylpropanu se míchá 18 hodin při 55 °C. Směs se zředí ledovou vodou a třikrát se extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou, 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného a solankou a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a získá se 5,368 g (výtěžek 98 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě žlutého oleje. ^-NMR. (500MHz, deuterochlorof orm) δ 1,33 (s, ' 5H) , 1,47 (s, 4H) ,
2,01-2,14 (m, 1H), 2,22-2,38 (m, 1H), 3,50-3,72 (m, 2H), 4,344,45 (m, 1H) , 4,45-4,53 (m, 1H) , 5,04-5,20 (m, 2H) , 7,22-7,42 (m, 5H) . Analytická HPLC 10,14 min. LC-MS (ES*) m/e = 322,2
193
9 ·· · 9 9 99 9 9 • 9 9 · ·· · · -9 99 9
9 99 · 9 99 9
99 · 9 999 99 9
99 «99 9999
9999 99 999 99 99 99 (ΜΗ+) .
1-benzylester 2-terc.butylester 4-fluorpyrrolidin-l,2-dikarboxylové kyseliny (105)
Roztok. 4,262 g (13,96 mmol) sloučeniny 104 ve .100 ml dichlormethanu se při -78 °C reaguje s 1,80 ml (13,6 mmol) DAST, míchá se 10 -minut a potom se ohřeje na teplotu místnosti a míchá se 60 hodin . v dusíkové atmosféře. Směs se nalije do 350 ml 10% ledového roztoku hydrogenuhličitanu sodného a dvakrát se extrahuje dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou, solankou, suší se nad bezvodým síranem sodným a odpaří se za získání 4,299 g hnědého oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie na silikagelu za použití směsi hexanu a ethylacetátu (90/10 až 80/20 %) jako eluentu. Získá se 2,805 g (výtěžek 64 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě žlutého oleje. XH-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ 1,37 (s, 4,5H), 1,45 (s, 4,5H), 2,20-2,55 (m, 2H), 3,61-3,93 (m,
2H) , 4,41 (d, 0,5H), 4,49 (d, 0,5H) , 5,03-5,21 (m, 3H) , 7,237,44 (m, 5H) . Analytická HPLC 12,15 min. LC-MS (ESU m/e=324,2 (MHU’
1-benzylester 2-terc.butylester 1 - (2 -benzyl oxykarbonyl amino propionyl)-4-fluorpyrrolidin-1,2-dikarboxylové kyseliny (106)
Roztok 2,72 g (8,42 mmol) sloučeniny 105 v 50 ml methanolu a 1,27 g 10% palladia na uhlí se míchá 2 hodiny ve vodíkové atmosféře, potom se filtruje přes křemelinu a rozpouštědlo se odpaří a získá se 1,526 g žlutého oleje. Tento olej se rozpustí v 30 ml dichlormethanu a reaguje se při 0 °C s 1,5 ml (8,6 mmol) DIEA, 2,34 g (10,5 mmol) Cbz-ala-OH a 2,32 g (12 mmol) EDC. Směs se míchá dalších 10 minut při teplotě 0 °C, potom se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se 18 hodin. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se rozpu-stí v ethyl194 to ·· toto ·· • •to · to to· · tototo · to · · • · tototo ·· · tototo · to ♦ to ··· ·· toto «· acetátu, potom se dvakrát promyje 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem sodným a odpaří se za získání bílé pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie za použití směsi hexanu a ethylacetátu (80/20 až 60/40 %) jako eluentu. Získá se 286 g (výtěžek 86 % z 1-benzylesteru 2-terč.butylesteru 4fluorpyrrolidin-1,2-dikarboxylové kyseliny). Tí-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,26-1,59 (m, 12H) , 2,20-2,67 (m, 2H) , 3,45-4,13 (m, 2H), 4,25-4,47 (m, 1H), 4,58-4,71 (m, 1Ή), 4,965,17 (m, 2H), 5,19-5,45 (m, 1H), 7,23-7,48 (m, 5H). Analytická HPLC 16,36min. LC-MS (ES+) m/e = 395,3 (MH+) .
terč.butylester 1 - [2-.(4 - amino-3 -chlorbenzoylamino)propionyl] 4-fluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (107)
Suspenze 2,65 g (6,72 mmol) sloučeniny 106 v 40 ml methanolu a 1,32 g 10% palladia na uhlí se míchá 1,5 hodiny ve vodíkové atmosféře., filtruje se přes křemelinu a odpaří se za získání 1,694 g voskovité pevné látky. Pevná látka se rozpustí v 25 ml dichlormethanu a reaguje se při 0 °C s 3,4 ml (19,5 mmol) DIEA, 1,362 g (7,9 mmol) 4-amino-3-chlorbenzoové kyseliny, 1,164 g (8,62 mmol) HOBT a 1,645 g (8,57 mmol) EDC.Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se 18 hodin. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu, čtyřikrát se promyj e vodou, dvakrát 0,5N roztokem hydrogensíranu sodného, dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem sodným a odpaří se za získání bílé pevné látky, která se , čistí pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie za použití směsi dichlormethanu a methanolu (99/1 až 98/2 %) jako eluentu. Získá se 2,705 g (výtěžek 97 %) produktu ve formě bílé pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,33 (s,
195
9H), 1,48 (d, 3Η), 2,31-2,55 (m, 2Η), 3,93 (dd, 1Η), 4,02-4,21 (m, 1Η), 4,59-4,76 (m, 1Ή), 5,31 (šs, 0,5H), 5,41 (šs, 0,5Η),
6,78 (d, 1Η) , 7,57 (dd, IH) , 7,78 (s, 1H) , 8,31 (d, IH) . Analytická HPLC 14,14 min. LC-MS (ES*) m/e = 414,2 (MH*) .
(2-benzyloxy-5-oxotétrahydrofuran-3-yl) amid 1-[2-(4-amino-3chlorbenzoylamino)propionyl]-4-f1uorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (108a)
Sloučenina se připraví z allylesteru syn-(2-benzyloxy-5-oxotetrahydro f uran -3 -yl) karbamové kyseliny a sloučeniny 107a podle způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Izoluje se 41 mg (výtěžek 15 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 0,94 (d,
0,3H), 1,07 (d, IH) , 1,40 (m, 1,7H), 2,21-2,65 (m, 2,2H),
2,70-2,85 (m, 1,4H), 2,96-3,08 (m, 1,4H), 2,96-3,08 (dd,
0,4H), 3,57-4,24 (m,3H) , 4,41-4,93 (m, 4H) , 5,14-5,45 (m, IH) ,
5,60-5,67 (m, 0,6H), 5,77 (d, 0,4H), 6,77 (dd, IH), 7,15-7,41 (m, 5H) , 7,51-7,62 (m, IH) , 7,77 (dd, IH) . Analytická HPLC
12,83 min. LC-MS (ES*) m/e= 547,1 (MH*) .
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1- [2- (4 -amino-3 chlorbenzoylamino)propionyl] -4 - f luorpyrrolidin-2-karboxylové • 0 00 » 001 • 0 1
196 kyseliny (108b)
Sloučenina se připraví z allylesteru (2-benzyloxy-5-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny a sloučeniny 107a podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 98a. Izoluje se 654 mg (výtěžek 54 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. XH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ.1,07 (d, 0,5H), 1,25-1,56 (m, 2,5H) , 2,21-2,65 (m, 2,3H), 2,68-2,89 (m, IH) ,
2,91-3,10 (m, 0,7H), 3,57-4,23 (m, 2H) , 4,32-4,95 (m, 5H) ,
5,16-5,52 (m, IH) , 5,45-5,50 (m, 0,3H), 5,54-5,58 (m, 0,2H), 5,61-5,67 (m, 0,3H), 5,77 (d, 0,2H), 6,72-6,84 (m, IH) , 7,-167,41 (m, 5H), 7,50-7,65 (m, IH), 7,71-7,87 (m, IH). Analytická
HPLC 12,83 min. LC-MS (ES+) m/e=547,l (MH+) .
(2-ethoxy-5-oxotetrahydroíuran-3-yl)amid 1-[2-(4-amino-3 chlorbenzoylamino)propionyl]-4-f1uor-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (108c)
Sloučenina se připraví z allylesteru <syn-(2-ethoxy-5-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny a sloučeniny 107a podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 100,3 mg (výtěžek 38 %) sloučeniny uvedené v názvu. XH-NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,09 (t, 1,2H), 1,25 (t, 1,8H), 1,40 (d,
IH) , 1,49 (d, 2H) , 2,33-2,61 (m, 2H) , 2,65-2,95 (m, 2H) , .. 3 ,' 44 4,30 (m, 4H) , 4,47-4,79 (m, 3H) , 5,18-5,25 (m, 0,2H), 5,275,36 (m, 0,5H), 5,39-5,46 (m, 0,3H), 5,56 (m, IH) , 6,72-6,94 (m, 0,8H), 7,54-7,69 (m, 0,8H), 7,79 (d, 0,55H), 8,‘o6 (d, • Φ • · · φ φ φ φ
197 φφ •Φ φφ ' φ» φ φ φ · < φ
Φ φ · « φ ř φφφ φφ ·φ φφ
0,55Η), 9,00 (d, 0,3Η) . Analytická HPLC 8,46 min. LC-MS (ES*) m/e = 485,2 (MH*) .
[2- (2-isopropyl -5-me thylcyklohexyl) -5-oxote trahydrofuran -3yl]amid 1-[2-(4-amino-3-chlorbenzoylamino) propionyl]-4-fluorpyrrolidin-2 -karboxylové kyseliny (108d)
Sloučenina se připraví z allylesteru {2-(lR-(2S-isopropyl-5Rmethylcyklohexyloxy)]- 5-oxotetrahydrofuran-3-yl}karbamové kyseliny a sloučeniny 107a podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98a. Získá se 95 mg (výtěžek 31 %) sloučeniny uvedené v názvu. /H-NMR (500 MHz, deuteromethanol) δ 0,42 (d,
2H), 0,57 (d, 2H) , 0,60-1,10 (m, 10H) , 1,22-1,76 (m, 6H) ,
1,96-2,17 (m, 1H), 2,29-2,60 (m, 2H) , 2,61-2,88 (m, 1,5H),
3,02-3,23 (dd, 0,5H), 3,37-3, 47 (m, 0,5H), 3,50-3,61 (m,
0, 5H) , 3, 63-4,24 (m, , 2H) , 4,48-4,62 (m, 3H) , 5,18-5,48 (m,
1H) , 5,72 (d, 0,4H), 5,82 (d, 0,6H), 6,77-6,84 (m, 1H) , 7,53-
7, 67 (m, 1H) , 7,78 (d, 0,4H), 7,84 (d, 1H) . Analytická HPLC
8 , 34 min. LC-MS (ES*) m/e= 595 (MH*) .
Schéma XX
bamoyl) -pyrrolidin-l-yl] -1-methyl -2-oxoethyl}karbamové kyseliny (109)
Sloučenina se připraví z allylesteru (2-ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny 74 podle způsobu použitého pro přípravu sloučeniny 75. Získá se 660 mg (výtěžek 73 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle žluté pevné látky. XHNMR (500 MHz, deuteromethanol) δ 1,14-1,3 6 (m, 6H) , 1,42 (s,
9H), 1,75-2,29 (m, 0,5H), 2,99 (dd, 0,5H), 3,43-3,91 (m, 4H),
4,07-4,52 (m, 2,5H), 4,53-4,72 (m, 0,5H), 5,37 (s, 0,5H), 5,57 (d, 0,5H). Analytická HPLC (směs 2 diastereomerů) 7,92, 8,14 min. LC-MS (ES*) m/e = 414,3 (MH*) .
(2 -ethoxy-5-oxoterahydrofuran-3-yl)amid 1- [2-(4-allyloxy-3,5di chlorbenzoyl amino) propi onyl ] pyr rol i din-2- karboxylové kyseliny (110)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 109 a 4-allyloxy-3,5dichlorbenzoové kyseliny podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 82. Získá se 228 mg (65 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. XH NMR (500 MHz,
199
• fc • fc. fc fcfc ·· •fc
fc · • • • · fc • • · • •
• • • • · • • · • •
•
• • • • fc • • · • •
• fcfcfc fcfc ··· fcfc • fc • fc
deuteromethanol) δ 1,10-1,30 (m, 4H) , 1,32-1,52 (m, 3H), 1,632,31 (m, 4H) , 2,41-2,50 (d, 0,5H) , 2,52-2,61 (dd, 0,5Η), 2,,672.81 (m, 0,5Η), 2,94-3,05 (dd, 0,5Η), 3,47-3,96 (m, 4Η), 4,214.81 (m, 5Η) , 5,22-5,32 (m, 1Η) , 5,35-5,49 (m, 1,5Η), 5,555,63 (m, 0,5Η), 6,06-6,21 (m, 1Η) , 7,90 (s, 1Η) . Analytická
HPLC (směs 2 diastereomerů) 12,56 min. LC-MS (ES*) m/e = 542,3 (MH*) .
(2-ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(3,5-dichlor-4hydroxybenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyselí ny (111)
K roztoku 194 mg (0,-36 mmol) sloučeniny 110 v 5 ml dichlormethanu se při 0 °C přidá 7 0,7 mg (0,45 mmol) DMBA a 50,3 mg (0,044 mmol) Pd(PPh3)4. Roztok se po 15 minutách ohřeje na teplotu místnosti, míchá se 2 hodiny, zředí se dichlormethanem, potom se dvakrát promyje vodou a solankou. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem sodným a odpaří se za získání surového produktu. Po čištění pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi dichlormethanu a methanolu (99/1 až 95/5 %) jako eluentu se získá 138,6 mg (výtěžek 77 %) sloučeniny uvedené v názvu.. XH NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,13-1,31 (m, 3H), 1,35-1,49 (m, 3H), 1,84-2,35 (m, 4H), 2,433,05 (m, 2H) , 3,48-3,93 (m, 4H) , 4,22-4,80 (m, 3H) , 5,38 (d,
0,4H), 5,46 (s, Ο,ΙΗ), 5,55-5,61 (m, · 0,5H) , 7,76-7,94 (m, 2H) .
Analytická HPLC 8,70 min. LC-MS (ES*) m/e = 502,2 (MH*) .
200
<
Schéma XXI
v?
0 . COjBu-t
112
X
115a. X=CI, Y=NH2, 2=H 115b, X=CI, .Y=AcNH, Z=H 115c, X=CI, Y=AcNH, 2=CH3O
116a-116h
Sloučeniny 116a-116h se připraví podle postupu popsaného pro přípravu sloučeniny 98 pouze náhradou terč.butylesteru l-(2benzyloxykarbonylaminopropionyl)-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (114) za terč.butylester l-(2-benzyloxykarbonylaminopropionyl)pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (95).
Příprava terč.butylesteru l-(2-benzyloxykarbonylamino-propionyl)-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (114)
Roztok 0,42 g (1,23 mmol) 1-benzylesteru 2-terč.butylesteru 4,4-difluorpyrrolidin-1,2-dikarboxylové kyseliny (113) (Karanewsky, a kol., J. Med. Chem. 33, str. 1459-1469 (1990)) a 0,22 g 10% palladia na uhlí v 6 ml methanolu se míchá 3 hodiny při tlaku vodíku 105 Pa. Směs se filtruje přes křemelinu a
201 odpaří se. Zbytek se rozpustí ve 4 ml dichlormethanu a 2 ml dimethylformamidu a ochladí se na 0 °C. Přidá se 0,30 g (1,35 mmol) 2-benzyloxykarbonylaminopropionové kyseliny, 0,30 g (1,54 mmol) EDC, 0,65 ml DIEA a 0,17 g (1,23 mmol) HOBt a reakční směs se míchá 0,5 hodiny při 0 °C, potom 16 hodin při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se rozpustí v ethylacetátu, potom se promyje 10% roztokem hydrogensíranu sodného, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a solankou, suší se nad síranem sodným a odpaří se. Po čištění pomocí velmi rychlé chromatografie na silikagelu za použití směsi 25:75 ethylacetátu a hexanu se získá 0,3,9 g (výtěžek 77 %) terc.butylesteru 1-(2-benzyloxykarbonylaminopropionyl)-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve formě bezbarvého oleje.
^-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,3-1,6 (m, 12H), 2,5 (m, 0,8H), 2,7 (m, 1,2H), 3,9, (m, 1H) , 4,1 (m, 1H) , 4,4 (m, 1H) ,
4,7 (m, 1H) , 5,1 (m, 2H), 5,59 (Šd, J=7,7Hz, 0,8H), 5,7 (šd, J=7,7Hz, 0,2H), 7,35 (m, 5H) ppm. Analytická HPLC (kolona kyano) 17,069 min. LC-MS (ES*): m/e=413 (M+H), 357 (M+H-te,rc.butyl) , 313 [M+H-(CO2terc.butyl)] .
(2-benzyloxy-5-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-amino-3chlorbenzoylamino)propionyl]-4,4-difluor-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (116a)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 115a a sloučeniny syn-40. Získá se 0,14 g (výtěžek 73 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bělavé pevné látky. XHNMR (500 MHz, deuteromethanol) δ
202
1,0-1,5 (tn, 3H) , 2,0-3,5 (m, 4H+CH3OH) , 3,5-5,5 (M, 6Η+Η2Ο) ,
5,6-5,8 (m, 1Η), 6,7-6,8 (m, 1Η), 7,1-7,8 (m, 8H) , 8,2-8,6 (m, IH) ppm. Analytická HPLC (kolona kyano) 13,744 min. LC-MS (ES+) : m/e=565 (M+H) .
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)-amid 1 -[2 -(4-acetylamino-3-chlorbenzoylamino)propionyl)-4,4-difluorpyrroli din-2 karboxylové kyseliny (116b)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 115b a sloučeniny'syn-40. Získá se 0,08 g (výtěžek 38 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bělavé pevné látky. XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,03 (d, J=6,9Hz, 0,4H), 1,30 (d, J=6,9Hz, 0,6H), 2,25 (d,
J=2,9Hz, 3H) , 2,4-3,2 (m, 4H) , 3,6-4,4 (m, 4H) , 4,6-4,9 (m 3H) , 5,52 (d, J=5,2Hz, 0,6H) , 5,78 (d, J=5,2Hz, 0,4H) , 6,6 (šs, IH) , 6,9-7,9 (m, 8H) , 8,39 (d, J=8,l Hz, 0,4H), 8,44 (d,
J= 8,3Hz, 0,6H), 8,74 (d, J=6,8Hz, IH) ppm. Analytická HPLC (kolona kyano) 11,830 min. LC-MS (ES+) : m/e= 607 (M+H).
(2 -benzyloxy-5-oxotetrahydrof uran-3 -yl) amid 1- [2- (4-acetyl-ami no- 5 - chlor - 2-methoxybenzoylamino) propionyl ] -4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (116 c)
Sloučenina se. připraví ze sloučeniny 115c a sloučeniny syn-40. Získá se 0,07 g (výtěžek 29 %) sloučeniny uvedené 'v názvu, ve
203 formě bělavé pevné látky. ^-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 0,99 (d, J=6,9Hz, 1,35H), 1,32 (d, J=6,9Hz, 1,65H), 2,25 (s,
1,5H), 2,26 (s, 1,5H), 2,3-3,2 (m, 4H), 3,95 (s, 0,55H), 3,98 (s, 0,45H), 3,7-4,1 (m, 2,5H), 4,2-4,5 (m, 1,5H), 4,6-4,9 (m,
3H), 5,52 (d, J=5,3Hz, 0,55H), 5,80 (d, J=5,3Hz, 0,45H), 7,07,4 (m, 4H) , 7,7-7,9 (m, 2H) , '8,0-8,4 (m, 2H) , 8,49 (d, J=6,5Hz, 1H), 8,93 (d, J=6,7Hz, 1H) ppm. Analytická HPLC (kolona kyano) 12,959 min. LC-MS (ES*): m/e=637 (M+H).
(2-ethoxy-5-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-acetylamino3 -chlorbenzoy lamino) propionyl] -4,4-difluorpyrrolidin-2 karboxylové kyseliny (116d)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 115b a allylesteru syn(2-ethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny. Získá se 0,27 g (výtěžek 66 %) bělavé pevné látky ve formě směsi epimeru 92:8. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,0-1,5 (m, 6H) , 2,25 (s, 1,8H), 2,26 (s, 1,2H), 2,3-3,1 (m, 4H) , 3,3-4,3 (m, 4H) , 4,5-4,9 (m, 3H) , 5,45 (d, J=5,3Hz, 0,75H), 5,59 (d, J=5,2Hz, O.,25H) , 6,7-7,1 (m, 2H) , 7,62 (dd, J=8,7, 2,0Hz, 1H) ,
7,76 (m, 1H), 7,85 (d, J=2,0Hz, 1H), 8,48 (m, 1H) ppm. Analytická HPLC (kolona C18) 13,300 (91,8 '%) , 14,046. (8,2 %) min. LC-MS (ES*): m/e 545 (M+H).
204
• ·· ·· ·· • · 9 9 · · · • · 9 9 9 9 9
9 9 .9 9 9 9
99 99 99 (2-cyklohexyloxy-5-oxotetrahydrof uran-3 -yl.) amid 1- [2- (4-acetylamino-3 -chlorbenzoylamino)propionyl]-4,4-difluorpyrrolidin2-karboxylové kyseliny (116e)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 115b a allylesteru syn(2-cyklohexyloxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny. Získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě směsi epimerú 93:7. XH-NMR (500 MHz, deutěrochloroform) δ 1,0-2,0 (m, 13H) ,
2,25 (s, 2H) , 2,26 (s, 1H) , 2,40 (dd, J=17,3, 10,1Hz, 1H) ,
2,84 (dd, J=17 ,3, 8,5Hz , 1H) , 2,5 -3,0 (m, 2H) , 3,5-4,3 (m,
3,5H), 4, 5-4,9 (m, 2,5H) , 5,59 (d, J=5,3Hz, ,0,75H), 5,76 (d,
J=5,2Hz, 0,25 Η) , 6,74 (šd, J= 5,7Hz, 0,25H) , 6,93 (šd,
J=7,1Hz, 1H) , 7,06 (šd, J=7,8Hz, 0,75H), 7,62 (dd, J=8,6,
2,0Hz, 1H) , 7,78 (m, 1H) , 7,85 (d, J=2,0Hž, 1H) , 8,35 (šd,
J=6,6Hz, 0,25H), 8,50 (šd, J=8,2Hz, 0,75H) ppm. Analytická HPLC (kolona C18) 17,112 (93 %), 17,433 (7 %) min. LC-MS (ES*): m/e=599 (M+H).
(2- (indanol-2-yl)oxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl]amid 1- [2- (4acetylamino-3-chlorbenzoylamino)propionyl]-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (116f)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 115b a allylesteru [2(indanol-2-yl)oxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl]karbamové kyseliny. Získá se - 0,34 g (výtěžek 71 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě směsi epimerú 62:38 jako bělavé pevné látky. ^-NMR (500 MHz, deutěrochloroform) δ 1,09 (d, J=6,9Hz, 0,6H), 1,21
205 (d, J=6,9Hz, 0,9H), 1,33 (d, J=6, 9Hz, 0,9H), 1,42 (d, J=6,9Hz,
0,6H), 2,28 (s, 2H) , 2,29 (s, 1H) , 2,40 (dd, J=17,4, 10,3Hz,
1H) , 2,4-3,3 (m, 7H) , 3,6-4,2 (m, 2H) , 4,5-4,8 (m, 4H) , 5,66 (m, 0,6H), 5,84 (d, J=4,3Hz, 0,2H), 6,22 (m, 0,2H), 6,7-7,0 (m, 2 H) , 7,2-7,3 (m, 4 H) , 7,5-7,7 (m, 1H) , 7,8-8,0 (in, 211),
8,52 (m, 0,6H), 8,62 (šd, J=6,5Hz; ,0,4H) ppm. Analytická HPLC (kolona C18) 16,556 (62,0 %), 16,824 (38,0 %) min. LC-MS (ES*): m/e=633 (M+H).
(2-cyklopen tylmethoxy-5-oxo tetrahydrof uran-3-yl) amid 1- [2- (4acetylamino-3 -chlorbenzoylamino)propionyl] -4, 4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (116g)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 115b a allylesteru syn(2-cyklopentylmethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny. Získá se 0,20 g (výtěžek 44 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bělavé pevné látky. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform) δ 1,0-1,8 (m, 11H) , 1,9-3,0 (m, 5H), 2,26 (s, 3H) , 3,29 (m, 0,25H), 3,47 (m, 0,75H), 3,58 (m, >0,25H), 3,74 (m,
0,75H) , 3,8 (m, 0,75H), 4,1 (m, 0,25H), 4,25 (m, 1H) , 4,4-4,8 (m, 3H) , 5,44 (d, J=5,2Hz, 0,75H), 5,62 (d, J=5,2Hz, 0,25H) ,
6,7 (š, 0,25H), 6,91 (d, J=7,lHz, 1H) , 7,1 (m, 0,75H), 7,59 (d, J=8,5Hz, 0,25H), 7,63 (dd, J=8,5, 2,5Hz, 0,75H), 7,75 (m,
1H) , 7,86 (d, J=l,8Hz, 1H) , 8,33 (šd, J=6,5Hz, 0,25H), 8,49 (šd, J=8,4Hz, 0,75H) ppm. Analytická HPLC (kolona C18) 17,705 min. LC-MS (ES*) : m/e = 599 (M+H) .
206
(2-fenylethoxy-5-oxotetrahydrofuran-3-yl)amid 1-[2-(4-acetylamino-3 -chlorbenzoylamino)propionyl]-4,4-difluor-pyrrolidin-2karboxylové kyseliny (116h)
Sloučenina se připraví ze sloučeniny 115b a allylesteru syn(5-oxo-2-fenethyloxytetrahydrofuran-3-yl)karbamové kyseliny. Získá se 0,15 g (výtěžek 24 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bělavé pevné látky. 1H-NMR (500MHz, deuterochloroform) δ
1,29 (d, J=6,9Hz, 0,75H), 1,4 0 (d, J=6,9Hz, 2,25H), 2,2 5 (s ,
2,25H), 2,26 (s, 0,75H), 2,3-3 , 0 (m, 6H) , 3,7-4,8 (m, 7H) ,
5,38 (d, J=5,3Hz, 0,75H) ,' 5,67 (d, J=5,lHz, 0,25H), 6,65 (m,
1H), 6,90 (d, J=7,0Hz, 0,75H), 7,06 (d, J=7,6Hz, 0,25H), 7,17,3 (m, 5H), 7,57 (d, J=8,6Hz, 0,25H),· 7,63 (d, J=8,6Hz,
0,75H), 7,75 (m, 1H) , 7,86 (d, J=l,8Hz, 1H) , 8,35 (d, J=6,2 Hz, 0,25H), 8,49 (d, J=8,3Hz, 0,75H) ppm. Analytická HPLC (kolona C18) 17,265 min. LC-MS (ES+) : m/e=621 (M+H).
207 ·· ·· · ·« • · · · · · · · ft · ft · ♦ · • ft ·· • · · · • ·· · • · · · • · ft · · · · · · · · • ft ··
Schéma XXII
117 40
120b= syn terč.butylester 2-(2-benzyloxy-5-oxotetrahyárofuran-3-ylkarbamoyl) pyrrolidin- 1 -karboxylové kyseliny (118)
Sloučenina se připraví z 1,16 g (4,0 mmolj sloučeniny 40 a Boc-Pro-OH podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny 100 (schéma XVIII). Získá se 1,53 g (výtěžek 94 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform): 1,61 (š, 9H) , 1,88 (š, 2H) , 2,00-2,50 (m,
3H) , 2,803,10 (m,. Η) , 3,20-3,60 (m, 2H) , 4,05-4,45 (m, 1,5H),
4,58-4,80 (m, 1,5H), 4,83-4,98 (m, Η), 5,43-5,53 (m, Η), 7,267,45 (m, 5H) > 7,60-7,80 (d, H) ; Analytická HPLC: 11,32 min;
LC-MS: m/e = 405 (M+H+) .
-Fenylaminopropionová kyselina (119)
Směs 356 mg (4,0 mmol) alaninu, 816 mg (4,0 .mmol) jodbenzenu, 160 mg (0,2 mmol) trans-dichlorbis(tri-o-tolylfosfin) palladia (II) {Pd [P (o-Tol) 3] 2C12} , 40 mg (0,2 mmol) jodidu měďného, 552 mg (4,0 mmol) uhličitanu draselného, 160 mg. (0,8 mmol benzyltriethylamoniumchloridu, 1,6 ml triethylaminu a 0,8 ml vody v
208 ·· to* « toto ·· • 999 99 9 9 9 9 9 9
9 · 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9 • 999 99 9 9 9' 99 99 99 ml dimethylformamidu se 20 hodin míchá při 100 °C v dusíkové atmosféře. Směs se ochladí na teplotu místnosti, zředí se 50 ml ethylacetátu a 50 ml vody, okyselí se přidáním 6N kyseliny chlorovodíkové na pH = 2 až 3 . Vodná vrstva se extrahuje čtyřikrát 50 ml ethylacetátu. Spojené organické vrstvy se promyjí vodou, solankou, suší se nad bezvodým síranem sodným, filtrují se a odpaří se ve vakuu za získání červeného oleje. Po čištšní pomocí směsi hexanu, ethylacetátu a kyseliny octové (95/5/0,5 až 80/20/0,5) se získá 300 mg (výtěžek 45 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě růžové pevné látky. 1H-NMR (500 MHz, deuterochloroform/deuteromethanol = 0,5 ml/3 kapky): δ
1,45. (d, 3H) , 4,02-4,15 (m, H), 6,57-6,70 (m, 3H) , 7,11-7,25 (m, 2H) ; analytická HPLC: 6,10 min. LC-MS: m/e = 166 (M+H+) .
(2-benzyloxy-5-oxotetrahydrof uran-3-yl)-amid l-(2-fenylaminopropionyl)pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (120a a 120b)
Roztok 405 mg (1,0 mmol) sloučeniny 118 se 1 hodinu reaguje s 2 ml kyseliny trifluoroctové v 2 ml dichlormethanu. Reakční roztok se odpaří ve vakuu a azeotropicky čtyřikrát destiluje s dichlormethanem a získá se (2-benzyloxy-5-oxotetrahydro-furan-3-yl)amid pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve formě světle žluté pevné látky. XH NMR (500 MHz, deuterochloroform): δ 1,87-2,15 (m, 4H) , 2,30-2,70 (m, 2H) , 2,80-3,08 (m, Η) , 3,45 (Š, 2H) , 4,35-4,98 (m, 3H) , 5,30-5,56 (m, Η) , 7,10-7,60 (m,
5H) ; analytická HPLC: 7,78/8,20 min; LC-MS: m/e = 305 (M+H+) .
300 mg (1,8 mmol) 2-Fenylaminopropionové kyseliny (119). v 10 ml dichlormethanu se při 0 °C 10 minut reaguje s 2 70 mg (2,0 mmol) HOBT a 2,1 g (11 mmol) EDC. Přidají se 2 ml diisopropylethylaminu a potom roztok (2-benzyloxy-5-oxo-tetrahydrofuran3-yl)amidu pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 10 ml dichlormethanu. Směs se míchá 4 hodiny při teplotě místnosti, zředí
209
99 99 9 99 9 9 99
• 9 9 • 9 9 9 9 9 9 9 9
• 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 · 9 • · 9 9 9 9 ·
9 99 9 • 9 999 9 9 9 9 . 99
se 40 ml dichlormethanu, promyje se vodou a potom solankou. Organická vrstva se suší nad bezvodým síranem sodným, filtruje se a odpaří se ve vakuu a získá se žlutá pevná látka. Po čištění omočí velmi rychlé chromatografie za použití směsi dichlormethanu a methanolu (99/1 až 98/2) se získá 151 mg (výtěžek 3 3' %) anti diastereomerů sloučeniny uvedené v názvu 120a a 129 mg (výtěžek 29 %) syn diastereomerů (120 b) ve formě bílé pevné látky. XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform) pro
anti diastereomer: δ 1,37-1,41 (m, 3H) , 1,50-2,45 (m,
2,60-2,70 (m, 0,3H), 2,89-2,94 (m, 0 ,7H) , 3,40-3,80 (m,
4,10-4,50 (m, 3H), 4, 50-4,90 (m, 3H) , 5,26 (S, 0,3H), 5,3 8
0,7H), 6,45-6,60 (m, 2,3H), 6,6 5-6,8 0 (m, Η) , 7,10- 7,20
2,5H), 7,25-7,50 (m, 4,5H), 7,53 -7,70 (m, 0,7H), 7,82 (d,
Pro syn diastereomer: 0,86-0,89 (m, Η) , 1,20-1,40 (m, 4H) ,
1,80-2,45 (m, 4H), 2,80-2,86 (m, Η), 3,58-3,65 (m, 2H),-4,204,40 (m, Η) , 4,50-4,75 (m, 2H) , 4,90 (d, Η) , 5,52 (d, Η) ,
6,456,70 (m, 3H) , 6,75-6,85 (m, Η) , 7,10-7,20 (m, 2,.3H) , 7,307,50 (m, 5,7H) ; Analytická HPLC: 10,55 min pro anti diastereomer a 10,62 min pro syn diastereomer; LC/MS: m/e = 452 (M+H+) pro oba diastereomery.
- Oxo -3- { [1- (2- fenyl aminopropi onyl) pyrrol i din-2-karbonyl ] ami no}-butanová kyselina (121)
Sloučenina se připraví ze 151 mg (0,33 mmol). sloučeniny 12 0 pomocí hydrolýzy podle způsobu A. Získá se 101 mg (výtěžek 83 %) sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. XH-NMR (500 MHz, deuterochloroform/deuteromethanol l/l): δ 1,20-1,65 (rn,. 2H) , 1,65-2,35 (m, 3H) , 2,40-3,00 (m, Η) , 3,20-3,80 (m, 2H) , 3,90-4,90 (m, 7H) , 7,25-7,80 (m, 5H) ; .Analytická HPLC: 6,38 min.; LC-MS: m/e = 362 (M+HU .
210 ·· ·· · ·« ·· ·♦ ♦ · · · 44 4 4 4 4 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 4 4 4 4 9 9 9 4 4 4
4 4 4 4 4 4 4 4 4
4444 44 444 44 99 44
Obecné způsoby pro přípravu sloučenin podle provedení C vzorce I (schémata XXIII-XXV)
Schéma XXIII
Způsob hydrolýzy A:
0,005-50mmol vzorek alkylpoloacetalu se rozpustí v 2,5N kyselině chlorovodíkové v acetonitrilu · (10/1) a míchá se při teplotě místnosti dokud neskončí chemická reakce. Vznikající vodná vrstva se promyje dvakrát 20 ml diethyletheru a lyofilizuje se za získání produktu.
Způsob hydrolýzy B:
0,005-50mmol vzorek alkylpoloacetalu se převede do čisté kyseliny mravenčí a míchá se přes noc při teplotě místnosti. Směs se trituruje směsí hexanu a diethyletheru 3:1 a získá se sraženina. Rozpouštědlo se slije a sraženina se promyje diethyletherem a získá se produkt.
Způsob hydrolýzy C:
0,005-50mmol vzorek alkylpoloacetalu se rozpustí v methanolu a přidá se 20% Pd(OH)2 na uhlí a míchá se vodíkové atmosféře,
211
44 · 44 4* 4·
44 4 4 4 · 4 4 44 4
4 44 4 4 44 4
44 4 4 444 44 4
44 44 4 4444
4444 44 444 44 44 44 dokud se reakce nedokončí. Získaná suspenze se filtruje a roztok se odpaří ve vakuu, potom se trituruje směsí 3:1 hexanu a diethyletheru a získá se sraženina. Rozpouštědlo se slije a sraženina se promyje diethyletherem a získá se produkt.
Způsob, hydrolýzy D:
0,005-50mmol vzorek alkylpoloačetalu ve směsi acetonitrilu a vody (1/2) se protřepává.s kyselou.pryskyřicí (Dowex 50w x 2, H* typ) dokud se reakce nedokončí. Roztok se filtruje a pryskyřice se promyje směsí acetonitrilu a vody (1/4). Získaná vodná vrstva se promyje diethyletherem, odpaří se do malého objemu ve vakuu, potom se lyofilizuje a získá se produkt.
Schéma XXIV:
-Oxo- 3 -[(1- {2-[9-oxo-9H-£1uoren- 4-karbonyl)amino]propionyl}pyrrolidin-2-karbonyl)amino]butanová kyselina (122a)
109,Omg (0,l9mmol) vzorek sloučeniny 91 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 88 mg (výtěžek 96 %) sloučeniny, uvedené v názvu: analytická HPLC 7,15 min. LC-MS (ES+) m/e=492,2 (M+H).
122b φ· ·· · ♦ · *· ·· • · · · ···· ···· • · · ··· · ··· • · · · · · 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 999 99 99 .99
212
- ({l - [2- (4-Amino-3 - chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2karbonylJamino)-4-oxobutanová kyselina (122b)
51,0mg (0,096mmol) vzorek sloučeniny 76 se hydrolyzuje podle' způsobu A a získá se 43,0' mg (výtěžek 100 %) sloučeniny uvedené v názvu: /H-NMR (500 MHz, deuteromethanol/deuterovaná voda: 0,5 ml/10 kapek): δ 1,37-1,52 (m, 3H) , 1,80-2,20 (m,
3H) , 2,20-2,37 (m, Η) , 2,49-2,60 (m, Η) , 2,60-2,75 (m, Η) ,
3,70-3,80 (m, Ή) , 3,80-3,95 (m, H), 4,20-4,35 (m, Η) , 4,404,50 (m, Η) , 4,50-4,70 (m, Η) , 4,70-4,85 (m, H),, 6,85-6,87 (d,
Η) , 7,58-7,60 (m, Η) , 7,77 (s, H) ; retenční Čas analytické
HPLC: 6,54 min; LC-MS: m/z = 439- (M+H*).
122c
3- ( {l- [2- (3,5-Dichlor-4-methoxybenzoylamino) propionyl] pyrrolidin-2-karbonylJamino)-4-oxobutanová kyselina (122c)
51,0mg (0,088mmol) vzorek sloučeniny 92 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 24,0 mg (výtěžek 56 %) sloučeniny uvedené v názvu. Analytická HPLC 6,41 min. LC-MS (ES*) m/e=488,3 (M+H).
- (fl-[2-(4-Methoxy-3,5-dimethylbenzoylamino)propionyl] pyrrolidin-2-karbonylJamino)-4-oxobutanové kyseliny (122d)
55,0mg (0,102mmol) vzorek sloučeniny 77 se hydrolyzuje podle způsobu A á získá se 44,0 mg (výtěžek 96 %) sloučeniny uvedené
213
• · 00 0 00 0« • 0
0 0 • 0 0 0 · • 0 0 • 0
• • 0 0 0 0 0 0 0 0
0
• • 00« 0 00 0 ' 0 0 000 0 00 • • • 0 • 00 0
v názvu: analytická HPLC (C18) 8,70 min, XH NMR (deuterochloroform, 500MHz): 6 1,23-1,70 (m, 3H) , 1,80-2,70 (m, 10H) ,
2,70-3,15 (m, 2H), 3,58-4,20 (m, 5H), 6,00 (m, Η), 6,80-7,90 (m, 4H); LC-MS
4,32-5,50 (m, 3H), 5,60(ES*) m/e=448,2 (M+H).
4-Oxo-3- [ (1- (2- [pyridin-2-karbonyl) amino] propionyl Jpyrrolidin2-karbonyl)amino]butanová kyselina (122e)
55,0mg (0,114mmol) vzorek sloučeniny 88 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 30,0 mg (výtěžek 67 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 4,60 min. LC-MS (ES*) m/e=391,3 (M+H).
3- ((l- [2-(4-Acetylamino-3-chlorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanové kyseliny (122f)
52mg (0,09lmmol) vzorek sloučeniny 78 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 40 mg (výtěžek 91 %) sloučeniny uvedené v názvu: ςΗ NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,08-1,61 (m, 3H),
1,77-2,41 (m, 3H), 2,21 (s, 3H) , 2,41-2,77 (m, 2H), 3,43-3,63 (m, 0,3H), 3,65-3,76 (m, 1H) , 3,81-3.,94. (m, 1H) , 4,18-4,34 (m, 1H), 4,42-4,64 (m, 1,7H), 4,77 (kv, 1H), 7,79 (dd, 1H) ;
analytická HPLC 4,97 min. LCMS (ES*) m/e=481,3 (M+H).
214
·· • · • ♦ < 9 9 99
• • • • • · · 9 9 '9 9 9
• • • • · 9 9 9 9 9
•
• • • 9 9 9 • · 9 •
• ·· • • · 999 99 ·· 99
3- ({l- [2- (4 -Amino-3,5-díchlorbenzoylamino) propionyl ] pyrroli din-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (122g)
44,3mg (0,079mmol) vzorek sloučeniny. 89 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 30 mg (výtěžek 81 %) sloučeniny uverdené v názvu: analytická HPLC 5,40 min. LC-MS (ESf) m/e=473,2 (M+H).
3- ( fl- [2- (3-Isopropoxybenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2 karbony1}amino)-4-oxobutanová kyselina (122h)
52,0mg (0',097mmol) vzorek sloučeniny 79 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 30,0mg (výtěžek 69 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 8,92 min. LC-MS (ES+) m/e=448,3 (M+H).
-({l-[2 -(3-benzyloxy-4-methoxybenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (122i)
50,8mg (0,082mmol) vzorek sloučeniny 81 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 22,4mg (výtěžek 52 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 6,72 min. LC-MS (ES+) m/e=526,3 (M+H).
·# ·* ► '· · · » · · ♦ ft · · · > · · 9 ··
215 o
- Oxo-3- [ (1- (2- [ (chinoxalin-2-karbonyl) amino]propionyl} pyrrolidin-2-karbonyl)amino]butanová kyselina (122 j)
38,0mg (0,072mmol) vzorek sloučeniny 80 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 32,0 mg (výtěžek 100 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 5,95 min. LC-MS (ES*) m/e=442,3 (M+H).
3- ( (l- [2-(3,5-Dichlor-4-hydroxybenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (122k)
35mg (0,060mmol) vzorek sloučeniny 83 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 29,4 mg (výtěžek 75 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 7,91 min. 1H-NMR (500 MHz, deuteromethanol) δ 1,47 (m, 3H) , 1,8-2,3 (m, 4H) , 2,49 (m, 1H), 2,61 (m, 1H), 3,5 (šm, 0,2H), 3,69 (šm, 0,9H), 3,84 (šm, 0,9H), 4,27 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 4,73 (m, 1H), 7,83 (m, 2H) ppm, LC-MS (ES*) m/e=474,l (M+H).
-({1-[2 -(4-Amino-3-trifluormethylbenzoylamíno)propionyl] • to to» to ·· to • · ·
216 • to · • toto» · · r .«· ·· ·· • to· * · ' · · · to · to ·>·· ·· · · · · t · to · · · · « · ·«· ·· ·< ·>
pyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (1221) lOmg (0,021mmol) vzorek sloučeniny 98w se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 7,9 mg (výtěžek 94 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 6,64 min. LC-MS (ES*) m/e=473,3 (M+H).
-({1-[2 -(3-Chlor-4-dimethylaminobenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (122m)
10,Omg (0,021mmol) vzorek sloučeniny 98x se hydrolyzuje podle
způsobu A a získá se 7,0 mg (výtěžek 84 %) sloučeniny uvedené
v názvu : analytická HPLC 5,15 min. LC- •MS (ES*) m/e=467,3 (M+H) .
O II O
F. ΙΎ vN\/ ΌΗ
'''kt 0 H
1 T
1 F , H O
122n
-((1-[2-(4-Dimethylamino-3,5-difluorbenzoylamino)propionyl]pyrrolidin-2-karbonyl}amino) -4-oxobutanová kyselina (122n).
20,0mg (0,043mmol) vzorek sloučeniny 98y se hydrolyzuje podle způsobu A a. získá se 16,8 mg (výtěžek 100 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 5,86 min. LC-MS (ES*) m/e=469., 3 (M+H).
H2N
122o
Cl
O
99 9 ·· 44
* » « · ·· · 9 4 · * • 4
• • · • · 9 • • 4
•
• • · • · 4 • • • «
·· ·· ·« ··· 49 <· 49
217
- ( (l - [2 - (4 -Amino-3 -chlorbenzoylamino) propionyl ] pyrrolidin-2karbonyl}amino) -4-oxobutanové kyselina (122o)
20,0mg (0,046mmol) vzorek sloučeniny 98m se hydrolyzuje podle, způsobu A a získá se 16,7mg (výtěžek 100 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 8,47 min. LC-MS (ES*j m/e = 439,2 (M+H).
122p
- ( {l - [2 - (4 -Amino-2, 3,5, 6- tetrafluorbenzoylamino)propionyl] pyrrolidin-2-karbonyljamino)-4-oxobutanové kyselina (122p)
20,0mg (0,042mmol) vzorek sloučeniny 98z se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 15,3mg (výtěžek 91 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 7,90 min. LC-MS (ES*) m/e=4'77,2 (M+H).
4-Oxo-3-[(1-(2-[(čhinolin-6-karbonyl) amino] propionyl}pyrrolidin-2-karbonyl)amino]butanové kyselina (122q)
44mg (0,080mmol) vzorek sloučeniny 93 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 41 mg (výtěžek 100 %) sloučeniny uvedené v názvu: 3H NMR (500MHz, deuteromethanol) δ 1,24-1,69 (m, 3H) ,
1,75-2,37 (m, 4H), 2,39-2,87 (m, 2H), 3,46-4,04 (m, 2H), 4,114,77 (m, 3H) , 8,19 (dd, 1H) , 8,33 (d, 1H),'8,56-8,58 (m, 1H) , 8,85 (s, 1H), 9,27-9,39 (m, 2H); analytická HPLC 4,91 min. LCMS (ES*) m/e=441,2 (M+H).
·· ·· >
• ·
218
- ({l- [2 - (4-Acetylamino-5-chlor-2-methoxybenzoylamino) -propionyl] pyrrolidin-2-karbonyl Jamino)-4-oxobutanová kyselina (122r)
44,5mg (0,074mmol) vzorek sloučeniny 87 se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 34,5 mg (výtěžek 91 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 6,88 min. LC-MS (ES*) m/e=511,2 (M+H).
- [ (1 - (2 - [3 -Chlor-4- (2,2-dimethylpropionylamino) běnzoylamino] propionylJpyrrolidin-2-karbonyl) amino] -4-oxobutanová kysel (122s) ína l9,0mg (0,036mmol) vzorek sloučeniny 98aa se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 14,5 mg (výtěžek 90 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 7,28 min. LC-MS (ES*) m/e=523,3 (M+H)
122t
- ({l- [2- (3-Chlor-4 -propionylaminobenzoylamino)propionyl] pyrrolidin-2-karbonylJamino)-4-oxobutanová kyselina (122t)
21,0mg (0,042mmol) vzorek sloučeniny 98ab se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se'17,5 mg (výtěžek 97%) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 5,72 min. LC-MS (ES*) m/e=495,2 (M+H).
·· ·· · ·· ·· ·· • · · · ··· · · ·· · • · · ·······
219
- ((l- (2 - (3-Chlor-4 -fenyl acetylaminobenzoylamino)propionyl] pyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (122u)
10,0mg (0,017mmol) vzorek sloučeniny 98ac se hydrolyzuje; podle způsobu A a získá se 7,9 mg (výtěžek 85 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 7,52 min. LC-MS (ES*) m/e=557,2 (M+H).
3- [ (.1- {2- [3-Chlor-4- (3-methylbutyrylamino)benzoylamino]propionyl}pyrrolidin-2-karbonyl) amino]-4-oxobutanová kyselina (122v)
8,0mg (0,015mmol) vzorek sloučeniny 98ad se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 6,5 mg (výtěžek 96 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 6,92 min. LC-MS (ES*) m/e=523,2 (M+H).
Schéma XXV
108a, X=CI, Y=NH2. 2=H, Qi=F, Q2=H 116b, X=CI. Y=AcNH, 2=H, Qi=Q2=F 116c, X=CI, Y=AcNH, Z=CH3O,Qi=Q2=F
123a, X=CI, Y=NH2, Z=H, Qi=F. Q;>=H 123b, X=CI. Y=AcNH, Z=H, Qi=Q2=F 123c, X=CI. Y=AcNH, Z=CH3O,Qi=Q2=F
00 • · ♦ 0 ·
0 0 0 .0
0,0 0 0 0 0 • 0 0 0 0 • · • · • 0 • 0
220
3- ({l- [2- (4-Amino-3-chl orbenzoyl amino) propionyl] -4-fluorpyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (123a)
12,4mg (0,022mmol) vzorek sloučeniny 108b se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 9,6mg (výtěžek 93 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 6,99 min. LC-MS (ES+) m/e=473,2 (M+H).
3-((l- [2-(4-Acetylamino-3-chlorbenzoylamino)propionyl]-4, 4-difluorpyrrolidin-2-karbonyl}amino)-4-oxobutanová kyselina (123b)
26,2mg (0,043mmol) vzorek sloučeniny 116b se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se 10,8 mg (výtěžek 49 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 9,89 min. LC-MS (ES+) m/e=517,2.
3- (fij[2-(4-Acetylamino-3-chlor-2-methoxybenzoylamino)propionyl]-4, 4-difluorpyrrolidin-2-karbonylJamino)-4oxobutanová kyselina (123c)
23,lmg (0,036mmol) vzorek sloučeniny 116c se hydrolyzuje podle způsobu A a získá se l,8mg (výtěžek 9 %) sloučeniny uvedené v názvu: analytická HPLC 11,87 min. LC-MS (ES+) m/e=547,1 (M+H) ,
Biologické způsoby
Za použití způsobů popsaných dále byly získány in vitro, ex vivo a in vivo údaje o vybraných sloučeninách podle předkládaného vynálezu. Výsledky jsou uvedeny v tabulkách 2 až 8. Označení „ND znamená, že se sloučenina v uvedeném testu netestovala.
V testech ICE kaspázy znamená kategorie „A inhibici <10 nM. Kategorie „B znamená inhibici 10 až 100 pM. Kategorie „C znamená inhibici >1000 nM. Viz. tabulky 2a 3.
9 ·
221
Při testu PBMC znamená kategorie „A inhibici <500 nM. Kategorie „B znamená inhibici 500 až 1000 nM. Kategorie „C znamená inhibici 1001 až 2000 nM. Kategorie „D znamená inhibici >2000 nM. Viz tabulka 4.
Při testu úplné krve znamená kategorie „A inhibici <2500 nM. Kategorie „B znamená inhibici 2500 až 7500 nM. Kategorie „C znamená inhibici >7500 nM. Viz tabulka 5.
Při in sítu metabolickém testu jsou hodnoty [f (g) ) x f (h) ] uvedeny následujícím způsobem: kategorie „A <0,25. Kategorie „B znamená 0,25 až 0,49. Kategorie „C znamená 0,5-0,75. Kategorie „D znamená >0,75. při měření vylučování žluče znamená kategorie „A <5 %. Kategorie „B znamená 5-10 %. Kategorie „C znamená >10 %. Viz. tabulka 6.
Při i. v. clearance testu jsou hodnoty uvedeny následujícím způsobem: kategorie „A znamená < 50. Kategorie „B znamená' 50'-80. Kategorie „C znamená > 80. Viz. tabulka 7.
Při testu biologické využitelnosti jsou uvedeny hodnoty Cmax ^g/ml) následujícím způsobem: kategorie „A znamená < 2,5. Kategorie „B znamená 2,5-5,0. Kategorie „C znamená > 5,0. Hodnoty AUC ^g x hod/ml) jsou uvedeny následujícím způsobem: kategorie „A znamená < 2,5. Kategorie „B znamená 2,5-5,0. Kategorie „C znamená > 5,0. Rozmezí poločasů života (hodiny) jsou uvedeny následujícím způsobem: kategorie „A znamená < 1,5. Kategorie „B znamená 1,5-2,0. Kategorie „C znamená > 2,0..Hodnoty F (%) jsou uvedeny následujícím způsobem: kategorie „A znamená < 33. Kategorie „B znamená 33-67. Kategorie „C znamená > 67. Viz tabulka 8.
• ·
222
• 9 · « • ♦ * » • · ♦ · · • · · ·
In vitro testy
Inhibice enzymu
Hodnoty KA pro testované sloučeniny s různými kaspázami se získají podle způsobu popsaného v Margolin a kol. (J. Biol. Chem., -str. 272 7223-7228 (1997)). Testy se provádějí v 10 nM
Tris (Sigma Corp. , St Lous MO) pH 7,5, 1 mM dithiothreitolu (DTT, Research Organic INC, Cleveland, OH) a 0,1 % CHAPS (Pierce, Rockford IL) při teplotě 37 °C. Pro kaspázu 3- se pro zlepšení stability enzymu přidá k pufru 8% glycerol. Do 96jamkové mikrotitrační destičky se pipetují 65μ1 alikvoty testového pufru a 5μ1 alikvoty příslušných roztoků inhibitorů v dimethylsulfoxidu, reagují se s 10 μΐ kaspázy, potom se zředí testovým pufrem (0,5-40 nM aktivního proteinu pomocí .titrace aktivního místa). Pro každé stanovení se použije kontrolní vzorek obsahující dimethylsulfoxid, ale žádnou sloučeninu. Destičky se potom inkubují 15 minut při teplotě 30 °C, potom se přidá 20 μΐ příslušného substrátu (konečná koncentrace ,1-4 X ΐς,, konečný objem testu 100 μΐ) , čímž se zahájí reakce. Reakční rychlost se měří při 37 °C buď sledováním vzrůstu absorbance závislého na čase při 405 nm (pro substráty pNA) nebo fluorescence (Ex.390, Em 460) (pro substráty AMC) . Získané rychlosti se vynesou proti koncentraci inhibitoru a upraví se podle Morrisonovy rovnice síly vazby pro kompetitivní inhibitory (Morrison, J.F., Biochem, Biophys. Acta, str. 185, 269-286 (1969)). Pro jednotlivé testy se použijí následující substráty:
Kaspáza-1 Suc-YVAD-pNA (Bachem, King of Prussia, PA) (konečná
koncentrace při testu 80 μΜ), Kaspáza-3 Ac-DEVD-pNA (Bachem, King of Prussia, PA) (konečná
koncentrace při testu 60 μΜ), Kaspáza-4 Ac-WEHD-AMC (Synpep, Dublin, CA) (konečná končen-
• · · · ·· ··· · · · trace při testu 20 μΜ),
Kaspáza-7 Ac-DEVD-AMC (Bachem, King of Prussia, PA) (konečná koncentrace při testu 50 μΜ),
Kaspáza-8 Ac-DEVD-pNA (Bachem, King of Prussia, PA) (konečná koncentrace při testu 80 μΜ),
Tabulka 2: Údaje o inhibici kaspázy-1
223
Příklad Kaspáza-1 Ki (nM)
5a A
5b A
5c A
5d A
5e B
5f B
• fc fcfc · ·· ·· fcfc • · · fc · · · · fc fc· · • fc · » ·' · · · · · • · fcfc · fc fcfcfc fcfc fc fc fc fc fcfc fc fc fcfc fc •fcfcfc fcfc ··· fcfc fcfc fcfc
224
Příklad Kaspáza-1 Ki (nM)
sg B
5h A
5 i A
5j A
5k A
51 • B
5m A
5n A
5o B
5p B
5q B
5r B
55 B
5t C
5U B
5v B
5w B
5x A
5y A
5z A
5aa A
5ab B
5ac A
5 ad A
5ae B
5af B
5ag A
5ah B
5ai A
5aj B
5ak B
·· *· · 44 • · 4 4 444 4
4 4 4 4 4
4 4 4 4 4 4
4 4 4 4 4
4444 44 444 44
44
4 4 4
4 4 4 • · 4 4
4 4 4
44
225
Příklad Kaspáza-1 Ki (nM)
5al A
5am A
5an B
5ao B
5ap B
5aq B
5ar A
5as A
5at B
5au B
5av B
5aw A
5ax A
5ay A
5az A
5ba A
5bb A-
5bc B
5bd A
7a A
7b B
7c A
7d A
7e B
7f B
7g A
7h B
7i B
7j C
7k B
71 B
226 ·· ·· • · · • · • · • · ···· ·· * ·
• 9 ·· • · · · • · · · • · · · • · · · • · · ·
Příklad Kaspáza-1 Ki (nM)
7m ' B
7n B
7o A
7p A
7q B
7r B
7s B
7t B
. 7u B
7V B
7w A
> 7x B
7y B
7z B
7aa A
7ab B
7ac B
7ad B
7ae B
7af B
7ag B
7ah A
7ai A
7aj A
7ak A
7al B
7am A
7an A
7ao B
7ap B
7aq B
227 • · · · • · · · • · · • · · • · · ·· · · · · • ·· ·♦ «« • · · · · · · «
9 ' 9 · · · · • · ··· · · · • · · · · · · • · · · · · · ··
Příklad Kaspáza-1 Ki (nM)
7 ar A
7 as A
7at A
9a B
9b A
9C A
9d A
9e A
9f A
9g A
15a A
15b A
15C A
15d B
. 15e B
15f B
lSa B
16b A
17a B
17b B
17c A
17d B
17e ,B
18a B
18b A
18 c B
18d B
18e A
18f B
20a A
2 0b A
• to ··
I ·· to · • to to • to • · • ‘ · ·· ·· • ♦· · • · · to • · to to • ·· · ·· ··
8
Příklad Kaspáza-1 Ki (nM)
20c A
20d B
20e A
20f A
20g A
20h A
20i B
20j B
20k A
201 A
2 0m A
2 On A
20o A .
2 Op A
20q B
20r B
2 Os A
20t B
23a A
23b B
23c A
23d A
23e A
23 f B
23g A
23h A
23i B
24a A
24b C
24 c A
24d B
·» ·· ·
9 9 9 99 9 9
9 9 9 9.9
9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9
9999 99 999 99
99
9 9 9
9 9 9
9 9 9
99
229
Příklad Kaspáza-1 Ki (nM)
24e B
25a A
25b A
25c A
25d A
25e A
26a A
2 6b A
26c A
26d A
26e A
26f A
26g A
26h A
27a B
27b B
27c B
27d A
27e B
27f B
27g A
27h B
27Í B
27j B
27k B
271 B .
27m B
27n B
28 a A
28b . A
28C A
230 »♦ fc· • fcfc fc • · · • . · · ···· fcfc * fc* ·· · · • · ·· • · « • · · • fcfc ·· fc· ·« fc · · · • · · fc • fcfc · « fcfc · fcfc fcfc
Příklad Kaspáza-1 Ki (nM)
29a A
29b A
29c A
29d A
2 9e A
29f A
29g A
29h A
29Í A
29j A
29k A
291 B
29m A
29n B
29o B
'29p A
29q A
29r A
29s B
32a C
32b C
32c C
32d C
32e ’ B
34 C
Gl C
G2 B
42 B
46b A
46a C ,
57 A
231 • » • fc ··>· ·· w ·· ···· ···· • · · · · · » • ···· ··· ··· ···· ··· ·· ·· ··
Příklad Kaspáza-1 κί (nM)
65 A
61 A
69 A
73 A
121 C
122a A
122b A
122c A
122d A
122e B
122f A
122g A
122h B
122i A
122 j B
122k A
1221 B
12 2 τη B
122η B
1220 C
122p A
122q B
122r B
122 S B
122t B
122U A
122V B
123a B
123b B
123c B
232
• · • · • 4 4 4 4 4 4 4 4 4 *4 4 4 4 4 4 4 4 •
' · • 4 4 4 4 4 4 4 4
• 4
• • 4 4 4 4 4 4 4 4
• · · · 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4
Tabulka 3: Údaje o inhibici kaspázy-3, kaspázy-4 a kaspázy-8
Příklad Kaspáza-3 Ki (nM) Kaspáza-4 Ki (nM) Kaspáza-8 Ki (nM)
7c c ND C
7d c ND B
7f c ND C
24a c ND ND
29a c ND ND
29b c ND ND
32d B ND ND
4 6b B ND ND
. 69 C ND B
122b C A B
122d c . A C
122f c ND B
122k c ND B
PBMC buněčný test
Test IL-ΐβ se smíšenou populací mononukleárních buněk lidské periferní krve (PBMC) nebo mononukleárních obohacených adherentních buněk Zpracování pre-IL-Ιβ pomocí ICE se může měřit v buněčné kultuře za použití různých zdrojů buněk. Lidské PBMC získané od zdravých dárců poskytují smíšenou populaci subtypů lymfocytů a monojaderných buněk, které poskytují spektrum interleukinů a cytokinů jako odezvu na mnoho tříd fyziologických stimulátorů. Adherentní monojaderné buňky z PBMC nabízejí obohacený zdroj normálních monocytů pro selektivní studii produkce cytokinů aktivovanými buňkami.
Experimentální postup:
Připraví se počátečná série roztoků testované sloučeniny v dimethylsulfoxidu, potom se .zředí do 'RPMI-10% FBS média » ·· • · · • · ·
233 (obsahujícího 2 mM L-glutaminu, 10 mM HEPES, 50 U a 50 gg/ml pen/strep) v tomto pořadí a získají se léčiva o čtyřnásobné koncentraci, než je konečná koncentrace, obsahující 0,4 % dimethylsulfoxidu nebo 0,4 % ethanolu. Konečná koncentrace dimethylsulfoxidu je 0,1 % pro všechny roztoky léčiv. Pro počáteční screening sloučeniny se obvykle použije titrace. koncentrace, která vymezuje zjevné Ki pro testované sloučeniny určené při testu inhibice ICE.
Obvykle se testuje 5-6 roztoků sloučeniny a buněčná .'složka testů se provádí dvojnásobně, při dvojnásobném.ELISA stanovení u každého supernatantu buněčné kultury.
Izolace PBMS a test IL-1
Buňky „buffy coat izolované z jedné pinty (0,473 1) lidské krve (získá se konečný objem 40-45 ml plazmy plus buněk) se zředí médiem na 80 ml a dělící zkumavky LeukoPREP (Becton Dickinson) se převrství vždy 10 ml suspenze buněk. Po 15 minutách odstřeďování při 1500-1800xg se vrstva plazma/médium odsaje a potom se Pasteurovou pipetou odebere vrstva mononukleárních buněk a převede se do 15ml kuželovité odstřeďovací zkumavky (Corning). Přidá se médium do konečného objemu 15 ml, buňky se pomocí obrácení opatrně promíchají a odstředuje se 15 minut při 300xg. PBMC peleta se resuspenduje v malém objemu média, buňky se spočítají a upraví se na 6 x 10s buněk/ml.
Pro buněčný test se do každé jamky 24jamkové mikrotitračni destičky pro tkáňové kultury s plochým dnem (Corning) přidá 1,0 ml suspenze buněk, 0,5 ml roztoku testované sloučeniny a 0,5 ml roztoku LPS (Sigma #L-3012; 20 ng/ml roztok připravený v úplném RPMI médiu; konečná koncentrace LPS 5 ng/ml). Přidání 0,5 ml testované sloučeniny a LPS je obvykle dostačující' pro promíchání obsahu jamek. Pro pokus se použijí tři kontrolní
• · · · • · · ·· · ·
• · ·. • · · • · · ·
• · · • · · • · · ·
• · · · · · • · 9 • · »·
směsi buď s LPS samotným, kontrolním rozpouštědlem a/nebo dalším médiem pro úpravu konečného objemu kultury na '2,0 ml. Buněčné kultury se inkubují 16-18 hodin při 37 °C' v přítomnosti 5 % oxidu uhličitého.
Na konci doby inkubace se buňky sklidí a převedou se do 15ml kuželovité odstřeďovací zkumavky. Po 10 minutách odstřeďování při 200 xg se supernatanty sklidí a převedou se do 1,5 ml Eppendorfových zkumavek. Je třeba poznamenat, že buněčná peleta se může použít při biochemickém testování pre-IL-ΐβ a/nebo maturovaného IL-Ιβ v cytosolových extraktech pomocí Westernového přenosu nebo ELISA se .specifickými protilátkami preIL-Ιβ.
Izolace adherentních monojaderných buněk:
PBMC se izoluje a připraví podle postupu pospaného výše. Do jamek se nejprve přidá 1,0 ml média, potom 0,5 ml suspenze PBMC. Po 1 hodině inkubace se destičky opatrně protřepou a z každé jamky se odsají neadherentní buňky. Buňky se potom opatrně třikrát promyjí 1,0 ml média a nakonec se suspendují v 1,0 ml média. Obohacení na adherentní buňky obvykle poskytne 2,5-3,0 x 105 buněk na jamku. Přidání testovaných sloučenin, LPS, podmínky inkubace buněk a zpracování supernatantů probíhá podle postupu popsaného výše.
ELISA:
Pro měření maturovaného IL-Ιβ se může použít sada Quantikin (R&D Systems). Testy se provádějí podle doporučení výrobce. Pozorují se hladiny maturovaného IL-Ιβ asi 1-3 ng/ml v PBMC a pozitivním kontrolním vzorku monojaderných buněk. ELISA test se provádí při zředěních supernatantů 1:5, 1:10 a 1:20 z LPS pozitivní kontroly, čímž se vybere optimální zředění superna« · • · · · · · ··· ·· ·· ·« ··
235 tantů v testovém poli.
Inhibiční účinnost sloučenin se muže prezentovat hodnotou IC50, . což je koncentrace inhibitoru, při které se v supernatantu detekuje 50 % maturovaného IL-ΐβ ve srovnání s pozitivní kontrolou.
Odborníkům v této oblasti je zřejmé, že hodnoty získané při 'testech mohou být závislé na mnoha faktorech. Hodnoty nemusí nutně představovat kvantitativní výsledky.
Tabulka 4: Údaje z PBMC buněčného testu
Příklad PBMC ICSO (nM)
5a D
5b B
5c B
5d B
5e B
5f C
5g C
5h A
236 • · • · · « • · 1 ♦ · · • · « • ·· · ·· ·· ··· ··
Příklad PBMC IC50 (nM)
5X C
5j D
5k D
51 : A
5τη A
5n B
5r D
5s. B
5u C
5v D
5w B.
5x B
sy B
52 B
5aa B
5ab B
5ac A
5ad A
5ag B
5ai A
5aj B
5ak B
5al D
5am D
5ao D
5aq D
5ar D
5as D
5at D
5au D
5av D
237 *· ·· • · · · • · · • · · • · · ···· ·· ·· • · · · · • · · · · · • · · · · • · · ·
Příklad PBMC IC50 (nM)
5aw C
5ax B
5ay B
5az B
5ba C
5bb . B
5bd C
7a D
7b B
7c A
7d A
7e D
7f D
7g A
7h B
7k B
71 B
7m B
7n B
7o A
7p D
7q D
7s B
7t D
. 7u D
7v D
7w C
7X D
7y ' D
7z C
9a B
238 • 99
9 . · 9 • · » • · * • · · • · · ·· • · 9 9 • 9 9 · • 9 9 ·
9 · · · φ 9 9 9
9 99
Příklad PBMC IC50 (nM)
9b B
9c A
9d B
9e C
9f B
9g C
15a D
15b C
15c B
15d C
15e D
15f D
16a A
16b C
17b C
17c D
17d D
17e B
18a B
18b B
18c B
18d B
18e C
18f D
20a B
20b . B
20c C
20d D
20e C
20f B
20g A
239 • to toto
• to
·· ·· • * * · • to· · • ·· · • ·· · •« to·
Příklad PBMC IC50 (nM)
20h A
20i B
20 j D
20k A
201 B
2 0m B
20n ' B
200 A
2 Op A
20q B
20r B .
20S C
20t B
23a C
23b B
23c C
23d B
23e B
23f C
23g C
23h C
23i A
24a B
24b D
24c A
24d B
24e C
25a A
25 b B
25c B
26a C
240 «· «· 0 0 0 ·
• 0 0 0 0000 00
0.
0 • «
0 0 * ·
00
00
0 0 ♦
0 0 *
0 0 · '0 0 0
0 0 0
Příklad PBMC IC50 (nM)
26b B
26c B
26d B
26e A
26f A
26g A
26h A
27a A
28a B
28b B
28c B
29a A
29b C
29c B
29d B
29e A
29g B
2 9h A
29i A
29j B
29k A
291 B
29m B
42 D
4 6b D
57 B
65 B
.61 B
69 A
73 B
> 122a D
·· ·· • A ♦ 9 · toto·· ··· toto · « * · · · • to «· • to «· «· F to to t 4
241
Příklad PBMC IC50 (nM)
122b B
122c D
122d B
122e C
122f B
122g B
122h C
122i C
122j D
122k· A
1221 B .
Test úplné krve na produkci IL-Ιβ
Hodnoty ICS0 sloučenin podle předkládaného vynálezu při testu ř
úplné krve se získají pomocí způsobů popsaných níže:
Záměr:
Test úplné krve je jednoduchý způsob pro měření produkce IL-Ιβ (nebo jiných cytoki.nú) a aktivity potenciální inhibitorů. Komplexnost tohoto testovacího systému, s plným obsazením typů lymfoidních a zánětlivých buněk, spektrem plazmových proteinů a červených krvinek, je ideální in vitro simulací lidských in vivo fyziologických podmínek.'
Materiály:
Stříkačky prosté pyrogenu (asi 30 cm3)
Sterilní vakuové zkumavky prosté pyrogenu obsahující lyofili- zovaný Na2EDTA (4,5 mg/lOml zkumavku)
Vzorek úplné lidské krve (asi 30-50 cm3) l,5ml Eppendorfovy zkumavky
Zásobní roztoky testované sloučeniny (25 mM v dimethylsulfoxidu nebo jiném rozpouštědle
242 v 9 · 99 9 9 99 9 •999-99 999 99 99 99
Roztok chloridu sodného (0,9%) a HBSS prostý endotoxinu
Zásobní roztok lipopolysacharidu (Sigma; kat. č. # L-3012) při 1 mg/ml v HBSS
IL-Ιβ ELISA sada (R&D Systems; kat. č. # DLB50)
TNFa ELISA sada (R&D Systems; kat. č. # DTA50)
Vodní lázeň nebo inkubátor
Experimentální postup testu úplné krve:
Inkubátor nebo vodní lázeň se nastaví na teplotu 30 °C. Do l,5ml Eppendorfových zkumavek se umístí alikvot 0,25. ml krve.
Poznámka: je třeba zajistit převráceni zkumavky se vzorkem úplné krve po každých dvou alikvotech. Pokud se buňky usadí a nejsou jednotně suspendované, mohou vzniknout rozdíly mezi opakovanými stejnými pokusy. Tyto rozdíly mezi opakovanými alikvoty lze také minimalizovat použitím pipety s plastovou jednorázovou špičkou.
Pomocí série zředění se připraví roztoky léčiva ve sterilním šalinu prostém pyrogenu. Pro počáteční screening sloučeniny se obvykle použije série roztoků, která vymezuje zjevné Ki pro testovanou sloučeninu určené při testu ínhibice ICE. Pro mimořádně hydrofobní sloučeniny se připraví roztoky v čerstvé plasmě získané od stejného dárce krve nebo v 5% dimethylsulfoxidu obsahujícím PBS, čímž se zvýší rozpustnost.
Přidá se 25 μΐ roztoku testované sloučeniny nebo kontrolního vehikula a vzorek se opatrně promíchá. Potom se přidá 5,0 μΐ roztoku LPS (250 ng/ml čerstvě připraveného zásobního roztoku: konečná koncentrace LPS 5,0 ng/ml) a vzorek se opět promíchá. Zkumavky se za občasného míchání inkubují při 30 °C ve vodní lázni 16-18 hodin. Alternativně se mohou zkumavky, na- stejný inkubační čas umístit do otočné sady při 4 otáčkách za minutu.
« 44 44 4 4 44
4444 4 4 444 44 4 4 4 4
243
Tento test se může provést dvojnásobně až trojnásobně s následujícími kontrolními vzorky: negativní kontrola - bez LPS; pozitivní kontrola - bez testovaného inhibitoru; kontrolní vehikulum - nejvyšší koncentrace DMSO nebo rozpouštědla sloučeniny použitého při pokusu. Ke kontrolním zkumavkám se přidá další šalin, čímž se normalizují objemy pro kontrolní a experimentální vzorky úplné krve.
Po inkubační době se vzorky úplné krve odstřeďují 10 minut při, 2000 otáčkách za minutu, plazma se převede do čerstvé odstřeďovací zkumavky a odstřeďuje se při 1000 x g, aby se odstranily zbývající destičky, pokud je to nutné. Vzorky plazmy se mohou před testem na hladinu cytokinu pomocí testu ELISA zmrazit na -70 °C.
ELISA:
Pro měření IL-Ιβ a TNF-α se může použít sada Quantikin R & D Sytems (614 McKinley Plače N.E. Minneapolis, MN 55413). Testy se provádějí podle instrukce výrobce. V pozitivních kontrolních vzorcích se pozorují hladiny IL-Ιβ 1-5 ng/ml. Aby výsledky ELISA , spadaly do lineárního rozmezí standardních křivek ELISA, je obvykle dostačující zředění plazmy pro všechny vzorky 1:200. Pokud se pozorují rozdíly při testu úplné krve, může být nutné optimalizovat standardní zředění. Nerad, J.L. a kol., J. Leukocyte Biol., 52, str. 687-692 (1992).
fc · <
fc ·
Tabulka 5: Údaje z testu úplné krve
244 • fc ·* • fcfc · • · fc fc fc fc • · fc fcfcfcfc fcfc • fcfc • fc • fcfc • · · • fcfc • fc fcfc
Příklad Úplná krev ICS0 (nM)
5a A
5b A
5c A
5d B
5e A
5f B
5h A
5i C
5j C
5k B
51 C
5m A
5n B
5r C
5S C
5u A
5w A
5x A
5y , B
5z C
5aa A
5ab B
5ac A
5ad A
5ag B
5ai c
5aj c
Sak c
5ax B
5ay B
00 00 • 0 0 0 0 0
0 0 t 0 #
0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0
00 00
245
0« 00 • 0 0 0
0 · • 0 · * · 0
00·· 00
Příklad Úplná krev IC50 (nM)
5az A
5bb B
7a B
7b A
7c A
7d B
7e C
7f B
7g B
7h A
7k A
71 A
7m B
7n A
7o A
7p B
7q A
7s B
7t B
7U B
7v A
7w A
7x C
7y C
7z A
7aa B
7ab A
7ac B
7ad B
7ah B
7ai B
246 ·· • · *
• ·'· · ·· ·· ·· • * 4 4 4
4 4 4 4
4 4 4 4 4
4 · · · 4
44 44 44
Příklad Úplná krev IC50 (nM)
7aj C
7ak B
7am B
7an B
7ao B
7ap C .
9a B
9b B
9C A
9d A
9e B
9f A
9g B
15a B
15b B
15c A
16b A
18a A
18b A
18c A
18d A
18e A
18f B
20a A.
20b C
20c B
20d B
20e B
20f A
20g A
20h A
fc
247 • fc fcfc • · · • · • · • fcfc • fcfcfc ·· fc • fcfc fc · • · • fcfc • · ·· « · • · • · • · • fc ·♦ ··
Příklad Úplná krev ICS0(nM)
20i A
20k A
201 A
2 0m A
2 0a A
200 A
2 Op A
20q C
20r B
20s A
20t A
23a B
23b B
23c B
23d A
23e B
23f A
23g A
23h A
23i B
24a B
24c B
24d B
24e B
25a B
25b B
25c B .
25d A
25e C
26c B
26d A
248 • 9 99 • · · 9 9 9
9«
9999 99
9 9 •
999
9
9
9 ·
9 9 · 9
9 9 9
9 9
Příklad Úplná krev IC50(nM)
2Se A
26f B
2 6g B
26h A
27a A
27b A
27d A
27e A
2 7f B
27g B
27h B
27i B
271 B
27m B
27n A
28a B
28b B
28c C
29a A
2 9c A
29d A
29e A
29g A
29h ' A
29i A
29j A
29k A
291 A
29n B
290 A
2 9p A
• · • ·
249 • ·
9 · · · ♦ « · ·
999 9 '9 9
9 9
9 9
9 9
99 9 9
9 9 9
9 9 9
9 9 9
9 9 9
99
Příklad Úplná krev IC50 (nM)
29q A
29r A
29s A
G2 B
42 B
46b B
57 C
65 A
61 A
69 A
73 A
122a A
122b A
122c B
122d A
1226 B
122f A
122g A
122h A
122Í A
122j ' B
122k A
1221 A
122m B
122p B
122q B
122r B
122S B
123a A
123b ! B
250 ·· · φ ·· ··· ·· φ • · · · · φ φ φφ φ ·«·» ·· ΦΦ· φφ φφ φφ
Ex vivo testy
Metabolismus' a vylučování
Pro testování metabolismu gastrointestinální stěny (GI), metabolismu jater (f(h)) a vylučování žluči se provádí studie u krys jednocestná perfuzní studie. Použitý způsob je popsaný v Pang C. S., J. Pharmacol. Exp. Therapeutics, 333, str.. 788798 (1984) .
Tabulka 6: Údaje o metabolismu a vylučování
Příklad f (g)Xf (h) ;Vylučováni žluči
5c A C
5k B A
5m B C
7d D A
7f C A
7ac C C
18f D A
20f B C
20g B A
23b B B
24a C A
24c A C
24e A C
25d C c
25e C B -
26c A c
26e B B
26f A C
27a C A
27b B A
29b A B
251 • · ft · ·' • · · • · · · ♦ · · • · · · · ft ' ft • *· • « ft • · · ft · · · • · ft • ft ft* «
ft
Příklad . f (g)Xf (h, Vylučování žluči
29g B B
29n C A
29o C A
2 9p B C
29g C A
29r C B
'4 6b ‘ B C
57 B B
65 B C
69 C A
122a B A
122b C A
122c c B
122d c A
122r B A
In vivo testy
In vivo test clearance u krys - rychlost clearance
Rychlost clearance u krys (ml/min/kg) pro sloučeniny podle předkládaného vynálezu se může určit, pomocí, způsobů popsaných níže:
Reprezentativní postup
Jeden den před farmakokinetickou studií se kanyluji krční žíla a tepna. M. J. Free, R.A. Jaffee; „Cannulation techniques for. the collection blood and other hodily fluids; Animal Models; str. 480-495; N.J. Alexander; Ed. ; Academie Press; (1978). Pomocí krční žíly se podává 10 mg léčiva na ml v nosiči, který obvykle obsahuje: propylenglykol/salin obsahující 100 mM hydrogenuhličitanu sodného v poměru 1:1. Zvířata se dávkují 10 až 20 mg léčiva/kg a vzorky krve se odebírají v čase 0, 2, 5, 7, 10, 15, 20, 30, 60 a 90 minut ze zbývajícího katétru v krční
252
* · ·· • aa • a a a
• · • • • a * • • a • •
• • ' · - • • • • •
a a
• • ' a a a • • • • •
···« • e «·· a· • a ··
tepně. Vzorky krve se odstředí na plazmu a skladují, se před analýzou při teplotě -20 °C. Farmakokinetická analýza údajů se provádí pomocí nelineární regrese za použití standardního software, jako je Rstrip Pcnonlin (SCI Software, clearance.
(MicroMath . Software, UT) a/nebo NC) , čímž se získají údaje o
Reprezentativní provedení analýzy:
Plazma krys se extrahuje v ekvivalentním objemu acetonitrilu (obsahujícím 0,1% kyselinu trifluoroctovou). Vzorky se potom odstřeďují přibližně při 1 000 x g a supernatant se analyzuje za použití gradientní HPLC. Typický postup testu je popsán dále.
200 μΐ plazmy se sráží s 200 μΐ 0,1% kyseliny trifluoroctové (TFA) v acetonitrilu a 10 μΐ 50% vodného roztoku chloridu zinečnatého, promíchá se a odstředuje se při 1000 x g a supernatant se odebere a analyzuje se pomocí HPLC.
Postup HPLC:
Kolona: Zorbac SB-CN (4.,6 x 150 mm) (velikost částic 5 μιη) Teplota na koloně: 50 °C Průtok: 1,0 ml/min Objem nástřiku: 75 μΐ
Mobilní fáze: A=0,l% TFA ve vodě a B=100% acetonitril
Použitý gradient: 100 % A až 30 % A v 15,5 min., 0 % A v 16 min., 100 % A v 19,2 min.
Vlnová délka: 214 nm .
Standardní křivka se získá při koncentraci 20, 10, 5, 2 a 1 μ9/πι1.
253
Φ· ·· Φ Φφ φφ φφ
• · • • e Φ · • • • φ •
• • • Φ « φ • • • •
φ
• Φ • Φ · φ • • φ φ
φφφφ ΦΦ φφφ ·· ·· φφ
Tabulka 7: Údaje o clearance
Příklad Test clearance u krys i.v. (ml/min/kg)
7d A
7f B
20h B
2 0m A
65 C
122b B
122c C
122d B
122f A
Biologická využitelnost
Perorální farmakokinetická studie
Samci krys Sprague-Dawley (Harlan, Indianapolis, IN, 300350 g) se anestetizují nitrosvalovou injekcí směsi ketaminu/ rompunu. Do pravé krční tepny se vloží kanyla PE-50, pomocí které se odebírají vzorky krve. Krysy se před použitím při studii nechají zotavit z chirurgického zákroku přes noc (> 16 hodin). Testované sloučeniny se perorálně podávají v 25% Cremophor EL/voda (hmotnostně) nebo 100% propylenglykolu (PG) v objemu dávky 10 ml/kg. Vzorky krve (asi 0,30 ml) se odebírají v 0,25, 0,50, 1,0, 1,5, 2, 3, 4, 6, a 8 hodinách po dávkování, plazma se oddělí odstředěním a před analýzou se skladuje při teplotě -20 °C. Kvantitativní hodnocení vzorků plazmy se provede za použití gradientní HPLC/MS/MS nebo pomocí enzymatického způsobu popsaného dále:
HPLC/MS/MS způsob kvantitativního hodnodení ICE inhibitorů v plazmě krys
254
Příprava vzorku • do Eppendorfových odstřeďovacích viálek se dávkují alikvotní díly 50μ1 plazmy, • k plazmě se pro vysrážení plazmových proteinů přidá stejný objem acetonitrilu, • vzorky se 5 minut míchají a odstředují se 5 minut při 14 000 otáčkách ža minutu, • do 12 mm HPLC viálek na kapalné vzorky se umístí 75 μΐ supernatantu, • pro analýzu prostřednictvím hmotového spektrometru se nastřikuje 50μ1 vzorek.
Instrumentální parametry HPLC:
HPLC: Hewlet Packard HP1100 Binary Solvent .Delivery System.
Podmínky HPLC gradientu:
A = voda 0,2 % kyseliny mravenčí
B = acetonitril 0,2 % kyseliny mravenčí
Mobilní fáze:
Čas % A % B
100 0
100 0
0 100
0 100
11,5 100 0
100 0
HPLC analytická kolona: Keystone Phenyl -2 Hypersil 2,0x100 • · • · • · • «
255 ............
mm, 5 μ 120 A velikost pórů, P/N # 105-39-2
Objem nástřiku: 50 μΐ
Průtok: 0,20 ml/min
Instrumentální parametry hmotové spektrometrie:
Zařízení: P E Sciex API-365 Tandem Mass, Spectrometer
Způsob ionizace: Turbo-ionspray (ESI)
Polarita: pozitivní
Klidová doba: 300 msec
Doba přerušení: 5 msec
Doba skenování: 0,9 sec
Skenovací mód: MRM (Multiple Reaction Monitoring)
ICE enzymatický test pro určení množství inhibitorů ICE v plazmě krys
50μ1 plazmy se extrahuje 150 μΐ acetonitrilu, zpracuje se ultrazvukem, míchá se, odstředí se při 10 000 x g a 150 μΐ supernatantu se suší při teplotě místnosti za míchání v odparce Sorvall. Vzorky se rekonstruují v 100 μΐ pufru (10 mM tris-HCl, pH 7,5 s 0,1 % CHAPS, 1 mM DTT) za současného zpracovávání ultrazvukem. 10 μΐ každého vzorku se smísí s 10 μΐ ICE (1,1 mg/ml) v mikrotitrační destičce s 60 μΐ pufru. Vzorky se inkubují 15 minut při teplotě místnosti, potom se přidá 20 μΐ Succ YVAD-pNA. (400 μΜ, předehřáto na 37 °C) a destičky se monitorují 20 minut při 405 nm při 37 °C za použití počítadla SpectraMax. Údaje se zpracují za použití čtyřparametrové rovnice se Software SpectraMax za použití extrahované standardní křivky. Testy jsou lineární od 0,15 do 2,0-3,0 μg/ml aldehydu.
Farmakokinetické parametry:
Farmakokinetická analýza těchto údajů o koncentraci v plazmě ·· • · · · • ·
256 se provádí za použití nedělených způsobů. Plocha pod křivkou (AUC,0.t)) se určí z času nula do posledního měřeného časového okamžiku za použití lineárního lichoběžníkového pravidla. Rychlost eliminace, (ke) se určí pomocí nelineární regrese z poslední fáze křivky koncentrace plazmy a času. Plocha pod koncem křivky se určí jako poměr poslední měřené koncentrace ku ke. Plocha pod křivkou od času nula k afinitě (AUC(O-oo)) se získá přičtením plochy pod koncem k AUC(O-t). Poločas eliminace se určí jako . 0,693/ke. Zaznamenají se pozorované hodnoty pro pík koncentrace plazmy (Cmax). Pro studii proléčiva: využitelnost aldehydu (biologická využitelnost) se vypočte následujícím způsobem: (AUCald/proléčivo p . o.) / (AUCald/ ald i. v.) x (dávka ald, ald i.v./dávka proléčiva, proléčivo p.o.) x (MW proléčiva/MW aldehydu).
Tabulka 8: Údaje o biologické využitelnosti
Příklad Cmax (ug/mL) AUC (ggXh/mL) t 1/2 (hod) F {%)
56 A · B A
45 A B
90 C C A , C
85 A B B A
68 A C B
76 C c C
77 B B A A
78 A A B A
P’ ............ 85 B C C
83 A C C
• to •••to ··
257
Příklad Cmax (pg/mL) AUC ; (ngXh/mL) t 1/2 (hod) F (%)
98d A A B
98h A C B
98e C C B
98c B C C
98k B C B
98ae A A B
98af A A B
98b C C B
111 A A C
980 A A B
108a A A B
9'8ag C C B C
98a B B C
98am A A B
116a C C B
98an A A B
116g A A c,
116h A A B
116e A A B
108b 1 A A B
Antivirové testy
Účinnost sloučenin podle předkládaného vynálezu při léčení nebo prevenci virových onemocnění, poruch nebo stavů, se může určit pomocí různých in vitro a in vivo testů. Mohou se například provádět testy pro určení schopnosti těchto sloučenin inhibovat zánětlivé odezvy spojené s vírovými infekcemi. Při in vitro testech se mohou využít úplné buňky nebo izolované části buněk. In vivo testy zahrnují zvířecí modely virových onemocnění.
Mezi příklady těchto zvířecích modelů patří modely HBV nebo • · • ·
258
HCV infekcí u hlodavců, model HBV infekce u sviště lesního a model HCV infekce u šimpanze.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou· také hodnotit na zvířecích modelech nadměrného příjmu alkoholu v potravě, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Další testy, které se mohou použít pro hodnocení sloučenin podle předkládaného vynálezu, jsou popsány v PCT patentové přihlášce PCT/US96/20843, zveřejněné 26, června 1997 po číslem WO 97/22619. Mezi tyto testy patří in vivo farmakokinetické studie u myší, inhibice homologů ICE, inhibice apoptózy, in vivo akutní test na protizánětlivou účinost, měření hladiny léčiva v krvi, testy IGIF, karagénový peritoneální zánětlivý test u myší a arthritida vyvolaná kolagenem typu II.
Protože jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu schopné inhibovat kaspázu, zejména ICE, in vitro a dále se mohou podávat orálně savcům, jsou zjevně klinicky- využitelné pro léčení onemocnění zprostředkovaných IL-1, apoptózou, IGIF a IFN-γ.
Přestože bylo popsáno mnoho provedení podle předkládaného vynálezu, je zřejmé, že se naše základní konstrukce mohou změnit za získání jiných provedení, která využívají produkty a způsoby podle předkládaného vynálezu.
Wb*«nHMMHWldl>fcUSKu;
.AU^MA^WWWW.
»· ·· fcfc · • · fcfc • · · » « « · fcfc
259

Claims (29)

00 00 00 -Ν(Η)-alkylarylová skupina, skupina -N(alkyl)2, -C(O)N(H)alkylová skupina, skupina -C(0)N(alkyl)2, -N(H)C(0)alkylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -N(H)C(Ó)N(alkyl)2, -S-alkylová skupina, -S-arylová skupina, -S-alkylarylová skupina, -S (O) 2alkylová skupina, -S(0)alkylová skupina, -C(0)alkylová skupina, skupina -CH2NH2, -CH2N(H) alkylová skupina nebo skupina -CH2N (alkyl)2; R12 je -C (0) alkylová skupina, -C (O) cykloalkylová skupina, -Č(0)alkyenylová skupina, -C(0)alkylarylová skupina, -C(0)alkylheteroarylová skupina, -C(O)heterocyklylová skupina, nebo -C(O)alkylheterocyklylová skupina,· R13 je atom vodíku, -alkylová skupina, -arylová skupina, -alkylarylová skupina nebo -alkylheteroarylová skupina. PATENTOVÉ
1. Sloučenina vzorce I:
R2 N • · · · · · • fcfcfc fcfc · • · · fcfc · • fcfc fcfc fcfc
TV 2000-31^ kde Y je:
(a)
Ύ pod podmínkou, že pokud R7 je hydroxylová skupiny, potom Y může být také:
(b)
HO H
X je skupina -C(R3)2- nebo skupina -N(R3)-;
m je 0 nebo 1;
R1 je atom vodíku, skupina -R8, skupina -C(O)R8, skupina C(O)C(O)R8, skupina -S(O)2R8, skupina -S(O)R8, skupina -C(O)OR8, skupina -C(O)N(H)R8, skupina -S (0) 2N (H) -R8, skupina -S(O)N(H)R8, skupina -C (0) C (0) N (H) R8, skupina -C (0) CH=CHRa, skupina C(O)CH2OR8, skupina -C (0) CH2N (H) R8, skupina -C(O)N(R8)2, skupina -S (0) 2N(R8) 2, skupina -S(O)N(R8)2, skupina -C (O) C (O) N (R3) 2, ·· • · · • · • · ··· ··
260 skupina -C (O) CH2N (R8) 2, skupina -CH2R8, nebo skupina -CH2-alkinyl-R8;
• to ·· • · · · • ·· · • ·· · • · · · • to ·· skupina -CH2-alkenyl-R8,
R2 je atom vodíku a každá skupina R3 je nezávisle atom vodíku, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl-R9, nebo skupina alkinyl-R9, nebo každá skupina R3 společně s atomem, ke kterému je vázána, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, nebo R2 a jedna skupina R3 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli, atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylová skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;.
R4 je atom vodíku a každá skupina Rs je nazávisle atom vodíku, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl-R9, nebo skupina -alkinyl-R9, nebo skupina R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém vybraný ze skupiny, kterou tvoří:
261 kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylová skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1, nebo R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém;
R6 je atom vodíku;
R7 je skupina -OH, skupina -OR8, nebo skupina -N(H)OH;
každá skupina R8 je nezávisle -alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -arylová skupina, -heteroarylová skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina, -alkylarylová skupina, -alkyl.heteroarylová skupina nebo -alkylheterocykΦΦ φφ φ · φ • · φ φ φ φ φφφφ φφ » φ * • · · φ φ φ • · • φ
262 lylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli' atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylové skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R9 je nezávisle -arylová skupina, -heteroarylová skupina, cykloalkylová skupina, nebo -heterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylové skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R10 je nezávisle hydroxylová skupina, thioskupina, atom fluoru, atom chloru,' atom bromu, atom jodu, nitroskupina, kyanoskupina, aminoskupina, karboxylová skupina, skupina -C(O)NH2, skupina -N(H)C(O)H, skupina -N(H) C (0}NH2, -perfluoralkylová skupina, -0-alkylová skupina, -0-arylová skupina, -O-alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, -N(H)arylová skupina, -N(H)-alkylarylová skupina, skupina -N(alkyl)2, -C(O)N(H)alkylová skupina, skupina -C(0)N(alkyl) 2, -N(H)C(0)alkylová skupina, -N(H)C(0)Oalkylová skupina, -N(H)C(0)0arylová skupina, -N(H)C(O)Oalkylarylová skupina,' -N(H)C(0)Oheteroarylová skupina, -N(H)C(O)Óalkylheteroarylová skupina, -N(H)C(0)Ocykloalkylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -N(H)C(O)N(alkyl)2, -N(H)C(0)N(H)arylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylarylová skupina, -N(H)C(0)N(H)heteroarylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylheteroarylová skupina,
N(H)C(0)N(H)cykloalkylová skupina, -S-alkylová skupina, -Sarylová skupina, -S-alkylarylová skupina, -S (0) 2alkylová sku• 4 4
263 • · • .4 • 4
2. Sloučenina vzorce I:
kde Y je:
264 pod podmínkou, že pokud Rs s atomem dusíku, ke kterému není atom vodíku, R6 a Y, společně jsoíl vázány,, tvoří kruh (g) :
m (9>
R1 je atom vodíku,· skupina -R8, skupina -C(O)R8, skupina C(O)C(O)R8, skupina -S(O)2R8, skupina -S(O)Ra, skupina -C(O)OR8, skupina -C(O)N(H)R8, skupina -S (O) 2N (H)-R8, skupina -S(O)N-(H)R8, skupina -C (0) C (0) N (H) R8, skupina -C (0) CH=CHR8, skupina C(O)CH2OR8, skupina -C (0) CH2N (H) R8, skupina -C(O)N(R8)2, skupina -S (0) 2N(R8) 2, skupina -S(O)N(R8)2, skupina -C (0) C (0) N (R8) 2, skupina -C (0) CH2N (R8) 2, skupina -CH2R8, skupina -CH2-alkenyl-R8, nebo skupina -CH2-alkinyl-R8;
R2 je atom vodíku a každá skupina R3 je nezávisle atom vodíku, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, , skupina alkenyl-R9, nebo skupina alkinyl-R9, nebo každá skupina R3 společně s·atomem, ke kterému je vázána, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, nebo R2 a jedna skupina R3 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylové skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10·, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku
265 • fc fcfc • ·.· • · • · • fc • fcfcfc fcfc • fcfcfcfc • fcfcfcfc • fcfcfcfc · • fcfcfcfc • fc fcfc • fcfc arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
R4 je atom vodíku a každá skupina R5 je nazávisle atom vodíku, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl-R9, nebo skupina -alkinyl-R9, nebo skupina 'R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém vybraný ze skupiny, kterou tvoří:
kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylová skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10,
3. Sloučenina obecného vzorce I kde Y je (a)
R2
N nebo (b)
HO H
269 • · · 9 4 9 9 4 4 4
4944 49 944 49 9· 44 m je Ο nebo 1;
X je skupina -C(R3)2
R1 je atom vodíku, skupina -R8, skupina -C(O)R8, skupina C(O)C(O)R8, skupina -S(O)2R8, skupina -S(O)R8, skupina -C(O)OR8, skupina -C(O)N(H)R8, skupina -S (O) 2N (H)-R8, -S (O) N (H)-R8, skupina -C (O) C (0) N (H) R8, skupina -C (0) CH=CHR3, skupina -C(O)CH2OR8, skupina -C (O) CH2N (H) R8, skupina -C(O)N(R8)2, skupina -S(O)2N(R8)2, skupina -S(O)N(R8)2, skupina -C (O) C (0) N (R8) 2, skupina C (O) CH2N (R8) 2, skupina -CH2R8, skupina -CH2-alkenyl-R8, nebo skupina -CH2-alkinyl-R8;
R2 je atom vodíku a každá skupina R3 je nezávisle atom vodíku, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl-R9, nebo skupina alkinyl-R9, nebo každá skupina R3,.společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
R4 je atom vodíku a každá skupina R5 je nezávisle atom vodíku,' aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl-R9, nebo skupina -alkinyl-R9, nebo R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém vybraný ze skupiny, kterou tvoří:
kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylová skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1, nebo R4 a jedna skupina R5, společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém:
271 • ·
Rs je atom vodíku;
R7 je hydroxylová skupina, skupina -OR8, skupina -N(H)OH, nebo skupina -N(H)S(0) 2R8;
každá skupina R8 je,nezávisle -alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -arylová skupina, -heteroarylová skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina -alkylarylová skupina, -alkylheteroarylová skupina, nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R9 je nezávisle -arylová skupina, -heteroarylová. skupina, cykloalkylová .skupina, nebo -heterocyklylové skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R10 je nezávisle hydroxylová skupina, thioskupina, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu, nitroskupina, kyanoskupina, aminoskupina, karboxylová skupina, skupina -C(0)NH2, skupina -N(H)C(0)H, skupina -N(H) C.(0)NH2, perfluoralkylová skupina, -0-alkylová skupina, -0-arylová skupina, -0-alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, N(H)arylová skupina, -N(H)-alkylarylová skupina, skupina N(alkyl)2, -C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -C(O)N(alkyl) 2, N(H)C(0)alkylová skupila, -N(H)C(0)Oalkylová skupina,
·
4 9 9 4 4 9
49449 49 9 9 a druhá skupina Rs je atom vodíku.
4 9 4 9 4 9 9
4 4. 9 9 4 9 9
4. Sloučenina vzorce I:
kde Y je:
(c) m j e 0 nebo 1 ;
X je skupina -C(R3)
R1 je atom vodíku, skupina -R8, skupina -C(O)Ra, skupina C(O)C(O)R8, skupina -S(O)2R8, skupina -S(O)R8, skupina -C(O)OR8, skupina -C(O)N(H)R8, skupina -S (0) 2N (H)-R8, -S (0) N (H)-R3, skupina -C (0) C (O) N(H) Rs, skupina -C (O) CH=CHR8, skupina -C(O)CH2OR8, skupina -C (O) CH2N (H) Ra, skupina -C(0)N(Ra) 2, skupina -S(O)2N(R8)2, skupina -S(O)N(R8)2, skupina -C (0) C (O) N (R8) 2, skupina -C (0) CH2N(R8) 2, skupina -CH2R8, skupina -CH2-alkenyl-R8, nebo skupina -CH2-alkinyl-R8;
R2 je atom vodíku a každá skupina R3 je nezávisle atom vodíku, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl-R9, nebo skupina alkinyl-R9, nebo každá skupina R3 společně s atomy, ke kterým je vázána, tvoří tříčlenný až sedmičlenný cyklický nebo heterocyklický kruhový systém, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázáný
274 • · fcfc · · · ·· · ·· « · · * · · ·· • · · · · · · · * • · ·· · · · · · · · • · · ······ ······ ··· · · · · k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
R4 je atom vodíku a každá skupina R5 je nezávisle atom vodíku, aminokyselinový postranní řetězec, skupina -R8, skupina alkenyl-R9, nebo skupina -alkinyl-R9, nebo R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém vybraný ze skupiny, kterou tvoří:
kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo • ·
75 cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1, nebo R4 a jedna skupina R5, společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém:
Rs je atom vodíku;
každá skupina R8 je nezávisle -alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -arylová skupina, -heteroarylová skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina -alkylarylová skupina, -alkylhetéroarylová skupina, nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný · k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R9 je nezávisle -arylová skupina, -heteroarylová skupina, cykloalkylová skupina, nebo -heterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku alkylové nebo cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R10 je nezávisle hydroxylová skupina, thioskuφ · «· · ♦ ·. · · · · φ · · · φφφφ ···· • · · · · * · · · · • · · · · · · · · · · · • · φ · · · · · φ ·
276 ...... ........
pina, atom fluoru, atom. chloru, atom bromu, atom jodu, nitroskupina, kyanoskupina, aminoskupina, karboxylová skupina, skupina -C(O)NH2, skupina -N(H)C(O)H, skupina -N (H).C (0) NH?, perfluoralkylová skupina, -0-alkylová skupina, -0-arylová skupina, -O-alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, -N(H)arylová skupina, -N (H)-alkylarylová skupina, skupina -N(alkyl)2, -C(0)N(H)alkylová skupina, skupina. -C (O)N(alkyl) 2, -N(H)C(O)alkylová skupina, -N(H)C(0)Oalkylová skupina, -N(H)C(0)0arylová skupina, -N(H)C(0)Oalkylarylová skupina, -N.(H)C(0)Oheteroarylová skupina, -N (H)C (0)Oalkylheteroarylová skupina, -N(H)C(0)Ocykloalkylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -N(H)C(O)N(alkyl)2, -N(H)C(0)N(Ή)arylová skupina, -N(H)C(O)N(H)alkylarylová skupina, -N(H)C(O)N(H)heteroarylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylheteroarylová skupina,
-N(H)C(0)N(H)cykloalkylová skupina, -S-'alkylová skupina, -Sarylová skupina, -S-alkylarylová skupina, -S (0) 2alkýlová skupina, -S(0)alkylová skupina, -C(0)alkylová skupina, skupina -CH2NH2, -CH2N (H) alkylová skupina, nebo skupina -CH2N (alkyl) 2, -alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -arylová skupina, -heteroarylová skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina, -alkylarylová skupina, -alkylheteroarylová skupina, nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku -arylové skupiny nebo -heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku je popřípadě nahrazen skupinou R1; a každá skupina R11 je nezávisle hydroxylová skupina, thioskupina, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu, nitroskupina, kyanoskupina, aminoskupina, karboxylová skupina, skupina -C(O)NH2, skupina -N(H)C(O)H, skupina -N(H) C (0)NH2, -alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -perfluoralkylová skupina, -0-alkylová skupina, .-0-arylová skupina,
-O2 77 • ·· ·· 999 9 9 9 9 < 9
4 4 4 ·· nitroskupina, kyanoskupina, aminoskupina, karboxylová skupina, skupina -C(O)NH2, skupina -N(H)C(O)H, skupina -N (H) C (0) NH2, perfluoralkylová skupina, -O-alkylová skupina, -O-arylová skupina, -0-alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, N(H)arylová skupina, -N(H)-alkylarylová skupina, skupina N (alkyl) 2, -C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -C(0)N(alkyl)2, N(H)C(0)alkylová skupina, -N(H)C(0)Oalkylová skupina,
N(H)C(O)Oarylová skupina, -N(H)C(O)Oalkylarylová skupina,
N(H)C(0)Oheteroarylová skupina, -N(H)C(O)Oalkylheteroarylová skupina, -N(H) C(0)Ocykloalkylová skupina, -N(H)C(O)N(H)alkylová skupina, skupina -N(H)C(O)N(alkyl)2, -N(H)C(0)N(H)arylová skupina, -N(H)C(O)N(H)alkylarylová skupina, -N(H)C(0)N(H)heteroarylová skupina, -N(H)C(O)N(H)alkylheteroarylová skupina, -N(H)C(0)N(H)cykloalkylová skupina, -S-alkylová skupina, -Sarylová skupina, -S-alkylarylová. skupina, -S (0) 2alkylová skupina, -S (O alkylová skupina, -C (0) alkylová skupina, skupina CH2NII2, -CH2N(K) alkylová skupina, nebo skupina -CH2N (alkyl) 2, alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -arylová skupina, heteroarylové skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina, -alkylarylová skupina, -alkylheteroarylová skupina, nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku -arylové skupiny nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku je popřípadě nahrazen skupinou R1; a každá skupina R11 je nezávisle hydroxylová skupina, thioskupina, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu, nitroskupina, kyanoskupina, aminoskupina, karboxylová skupina, skupina -C(O)NH2, skupina -N(H)C(0).H, skupina -N (H) C (O) NH2, alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -perfluoralkylová skupina, -O-alkylová skupina, -0-arylová skupina, -O-alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, -N(H)arylová skupina,
268 • 0 00 • · · • ·
0
0· •000 00 · •0 00 ·* • · t . 0 · ·
0 0 0 0 0
0 0 0 · · ·
0 0 0 0 0
4 4 4
4 4 · · 4 · · ·
4 4 • · · • 444 44 .··
4 ·
4 4 pina, -S (O)alkylová skupina, -C (0)alkylová skupina, skupina CHjNHj, -CH2N(H).alkylová skupina, nebo skupina -ČH2N(alkyl) 2, alkylová skupina, -cykloalkylová skupina, -arylová skupina, heteroarylová skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina, -alkylarylová skupina, -alkylheteroarylová skupina, nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku -arylové skupiny nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku je popřípadě nahrazen skupinou R1; a každá skupina R11 je nezávisle hydroxylová skupina, thioskupina, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu, nitroskupina, kyanoskupina, aminoskupina, karboxylová skupina, skupina -C(0)NH2, skupina -N(H)C(0)H, skupina -N (H) C (0) NH2, alkylová skupina, -cykloalkylová skupina,' -perfluoralkylová skupina, -0-alkylová skupina, -0-arylová skupina, -0-alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, -N(H)arylová skupina, -N(H)-alkylarylová skupina, skupina -N(alkyl) 2, -C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -C(0)Ň(alkyl)2, -N(H)C(O)alkylová skupina, -N(H)C(O)N(H)alkylová skupina, skupina -N(H)C(0)N(alkyl)2, -S-alkylová skupina, -S-arylová skupina, -S-alkylarylová skupina, -S (O) 2alkylová skupina, -S(0)alkylová skupina, C(0) alkylová skupina, skupina -CH2NH2, . -CH2N (H) alkylová skupina, nebo skupina -CH2N (alkyl) 2.
4 4
4 4 • 4 4 • 4 4
5. Sloučenina podle nároku 2 nebo 4, kde Y je:
.....O
·· «· * φφ . φφ φφ • · φ · φ φ φ · · · · , φ φφφ φ φ · φ φ φ φ • · φ φ φ φ φφφ φφ φ
6. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 5, kde R4 a jedna skupina Rs společně., s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém vybraný ze skupiny, kterou tvoří:
280
N.
• · to · ♦ ·· · • · · • · · ···· ·· to · · ·* ·· • toto to to toto to • · · ···* toto to · to · to to ·· · · ·· · ··· to· «· ·· nebo kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku -alkylové skupiny nebo -cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou R10, nebo R4 a jedna skupina Rs společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém:
7. Sloučenina podle nároku 6, kde jedna skupina R3 je atom vodíku a druhá skupina R3 je methylová skupina, isopropylová skupina, ' terč.butylová skupina, skupina -CH2SR8, skupina -CH2SO2R8, skupina -CH2CH2SR8 nebo skupina -CH2CH2SO2R8.
8. Sloučenina podle nároku 7, kde jedna skupina R3 je atom vodíku a druhá skupina R3 je methylová skupina.
9 · 9 9 9 9
999 99 99 99 sarkom, mnohočetný myelom, sepse, Alzheimerova nemoc, Parkinsonova septický šok, Shigellosa, nemoc, mozková ischemia, ischemie myokardu, spinální muskulární atrofie, mnohočetná skleróza, encefalitida související s AIDS, encefalitida spojená s HIV, stárnutí, -vypadávání vlasů, neurologické poškození způsobené mrtvicí, ulcerativní kolitida, traumatické poškození mozku, odmítnutí transplantovaného orgánu, hepatitida-B, hepatitida-C, hepatitida-G, žlutá horečka, horečka dengue, nebo japonská encefalitida, u pacienta.
9 9 9 9 9 9 ·
9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9
9 9 9 4 9 4
9. Sloučenina podle nároku 8, kde R1 je skupina -C(O)Ra nebo skupina -C(O)C(O)R8.
9 9 · · · 9
999 99 9 9 9 9 alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, -Ň(H)arylová skupina, -N(H)-alkylarylová skupina, skupina -N(alkyl)2, -C (0) N(H) alkylová skupina, skupina -C (O)N(alkyl) 2, -N(H)C(O)alkylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -N (H) C (0) N (alkyl) 2, -S-alkylová skupina, -S-arylová skupina, S-alkylarylová skupina, -S (0) 2alkylová skupina, -S(0)alkylová skupina, -C (0) alkylová skupina, skupina -CH2NH2, -CH2N(H) alkylová skupina nebo skupina -CH2N (alkyl) 2; a
R12 je -C(O)alkylová skupina, -C(O)cykloalkylová skupina, -C (0) alkyenylová skupina, -C(O)alkylarylová skupina, -C(0)alkylheteroarylová skupina, -C(0)heterocyklylová skupina, nebo -C (0)alkylheterocyklylová skupina.
9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9
• · 9 9' • 9· 9 9 9 9 9 9 · 9 9 9 9 9 9 · • 9 · 9 · · 9 9 9 9 9999 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9
Ň(H)C(O)Oarylová skupina, -N(H)C(O)Oalkylarylová skupina, -N(H)C(0)Oheteroarylová skupina, -N(H)C(O)Oalkylheteroarylová skupina, -N(H)C(0)Ocykloalkylová skupina, -N(H)C(O)N(H)alkylová skupina, skupina -N(H)C(O)N(alkyl)2, -N(H)C(O)N(H)arylová skupina, -N(H)C(O)N(H)alkylarylová skupina, -N(H)C(0)N(H)heteroarylová skupina, -N(H)C(O)N(H)alkylheteroarylová skupina, -N(H)C(0)N(H)cykloalkylové skupina, -S-alkylová skupina, -Sarylová skupina, -S-alkylarylová skupina, -S (O) 2alkylová skupina, -S(Ojalkylová skupina, -C (O)alkylová skupina, skupina -CH2NH2, -CH2N (H) alkylová skupina, nebo skupina -CH2N (alkyl) 2, -alkylová skupina, -cykloalkylové skupina, -arylová skupina, -heteroarylová skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina, -alkylarylová skupina, -alkylheteroarylová skupina, nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku -arylové skupiny nebo -heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou R11 a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku je popřípadě nahrazen skupinou R1; a každá skupina R11 je nezávisle hydroxylová skupina, thioskupina, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu, nitroskupina, kyanoskupina, aminoskupina, karboxylová skupina, skupina -C(0)NH2, skupina -N(H)C(0)H, skupina .-N(H) C (O) NH2, alkylová skupina, -cykloalkylové skupina,, -perfluoralkylová skupina, -0-alkylová skupina, -0-arylová skupina, -0-alkylarylová skupina, -N(H)alkylová skupina, -N(H)arylová skupina, -N(H)-alkylarylová skupina, skupina -N(alkyl) 2, -C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -C(0)N(alkyl)2, -N(H)C(O)alkylová skupina, -N(H)C(0)N(H)alkylová skupina, skupina -N(H)C(OjN(alkyl) 2, -S-alkylová skupina, -S-arylová skupina, -S-alkylarylová skupina, -S (0) 2alkylová skupina, -S(0)alkylová skupina, -C(0)alkylová skupina, skupina -CH2NH2, -CH2N (H) alkylová skupina nebo skupina -CH2N (alkyl) 2;
273 pod podmínkou, že pokud jedna skupina R3 je atom vodíku, potom druhá skupina Ř3 není atom vodíku.
• 9.
• · » ·
266 atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1, nebo R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém;
Rs je atom vodíku;
každá skupina Ra je nezávisle -alkylová skupina, -cykloalkýlová skupina, -arylová skupina, -heteroarylová skupina, -heterocyklylová skupina, -alkylcykloalkylová skupina, -alkylarylová skupina, -alkylheteroarylová skupina nebo -alkylheterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylové skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R9 je nezávisle -arylová skupina,.-heteroarylová skupina, cykloalkylová skupina, nebo -heterocyklylová skupina, kde atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu uhlíku na alkylové nebo cykloalkylové skupině je popřípadě nahrazen skupinou -R10, atom vodíku vázaný k jakémukoli uhlíku arylové nebo heteroarylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou -R11, a atom vodíku vázaný k jakémukoli atomu dusíku kruhového systému je popřípadě nahrazen skupinou -R1;
každá skupina R10 je nezávisle hydroxylová skupina, thioskupina, atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu,
267 ·· • 4 4 ·
10. Sloučenina podle nároku 6, kde R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou vázány, tvoří kruhový systém vybraný ze skupiny, kterou tvoří:
a druhá skupina Rs je atom vodíku, kde atom vodíku vázaný ke kterémukoli atomu uhlíku -alkylové nebo -cykloalkylové skupiny je popřípadě nahrazen skupinou R10.
11. Sloučenina podle nároku 10, kde jedna skupina R3 je. atom vodíku a druhá skupina R3 je' methylová skupina, isopropylová skupina, terč.butylová skupina, skupina -CH2SR3, skupina -CH2SO2R8, skupina -CH2CH2SR8 nebo skupina -CH2CH2SO2R8.
12. Sloučenina podle nároku 11, kde jedna skupina R3 je atom vodíku a druhá skupina R3 je methylová skupina.
13. Sloučenina podle nároku 12, kde R1 je skupina -C(O)R8 nebo skupina -C(O)C(O)R8. :
14. Sloučenina podle nároku 6, kde R4 a jedna skupina R5 společně s atomy, ke kterým jsou výzány, tvoří kruhový systém:
JN jggjKgr*·»'
282 • 4» 9
9444 94
94 ·4 44
15. Sloučenina podle nároku 14, kde jedna skupina R3 je atom vodíku a druhá skupina R3 je methylová skupina, isopropylová skupina, terč.butylová skupina, skupina -CH2SR8, skupina -CH2SO2R8, skupina -CH2CH2SR8 nebo skupina -CH2CH2SO2R8.
16. Sloučenina podle nároku 15, kde jedna skupina R3 je atom vodíku a druhá'skupina R3 je methylová skupina.
17. Sloučenina podle nároku 16, kde R1 je skupina -C(O)Ra nebo skupina -C(O)C(O)R8.
18. Sloučenina podle nároku 1 nebo podle nároku 3 vybraná se skupiny, kterou tvoří: 5a-5bd, 7a-7at, 20a-20t, 23a-23i, 24a24e, 26d, 26e, 29a-29s, 32a-32e, 34, 42, 46, 52, 57, 61, 65, 69, 73, 121 a 122a-v.
19. Sloučenina podle nároku 4, vybraná se skupiny, kterou tvoři: 41, 45, 51, 56, 60, 64, 68, 72, 76-93, 98a-z, 98aa-az,
98ba a 98 bb, 101, 102a, 102b, 108a-108d, 110, 111, 116a-116h, a 120a a 120b.
20. Sloučenina vybraná ze skupiny, kterou tvoří: 37, 38, 39, 43, 44, 49, 50, 54, 55, 58, 59, 67, 71, 75, 96a-96c, 97a-97c, 100, 106, 107, 109, 115a-115o, 120a, 120b,
283
21. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje
a) sloučeninu podle kteréhokoli z nároků 1-19 a
b) farmaceuticky přijatelný nosič, adjuvant nebo vehikulum.
22. Způsob léčení nebo prevence onemocnění vybraného ze skupiny kterou tvoří onemocnění zprostředkované IL-1, onemocnění zprostředkované apoptózou, zánětlivé onemocnění, autoimunní onemocnění, destrukční onemocnění kosti, proliferativní onemocnění, infekční onemocnění, degénerativní onemocnění, nekrotické onemocnění, onemocnění způsobené nadbytečným příjmem alkoholu v potravě, onemocnění zprostředkované virem,
284 ·· ·· • · · · • · · ♦ · · • · · ··*· ·· zánětlivá peritonitida, osteoarthritida, pankreatitida, astma, syndrom dýchacího stresu dospělých, glomerulonefritida, revmatoidní arthritida, systémový lupus erythematosus, skleroderma, chronická thyroiditida, Graveova nemoc, autoimunní gastritida, diabetes mellitus závislý na insulinu (typ 1), autoimunní hemolytická anemie, autoimunní neutropenie, thrombocytopenie, chronická aktivní hepatitida, myastenia gravis, zánětlivé střevní onemocnění, Crohnova nemoc, psoriáza, atopická dermatitida, onemocnění štěp vs. hostitel, osteoporóza, leukémie a podobná onemocnění, myelodysplastický syndrom, kostní onemocnění spojené s mnohočetným myelomem, akutní myelogenní leukemie, chronická myelogenní leukemie, metastatický melanom, Kaposiho sarkom, mnohočetný myelom, sepse, septický šok, Shigellosá, Alzheimerova nemoc, Parkinsonova nemoc, mozková ischemie, ischemie myokardu, spinální muskulární atrofie, mnohočetná skleróza, encefalitida související s AIDS, encefalitida spojená, s HIV, stárnutí, vypadávání vlasů, neurologické poškození způsobené mrtvicí, ulcerativní kolitida, traumatické poškození mozku, odmítnutí transplantovaného orgánu, hepatitida-B, &epatitida-C, hepatitida-G, žlutá horečka, horečka dengue, nebo japonská encefalitida, u pacienta, vyznačující se. tím, že se skládá z kroku podávání sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 19 nebo farmaceutické kompozice podle nároku 21, tomuto pacientovi .
23. Způsob podle nároku 22, vyznačuj ící se tím, že onemocněním je revmatoidní arthritida, zánětlivé střevní onemocnění, Crohnova nemoc, ulcerativní kolitida, zánětlivá peritonitida, septický šok, pankreatitida, traumatické poškození mozku, odmítnutí transplantovaného orgánu, osteoarthritida, astma, psoriáza, Alzheimerova nemoc, atopická dermatitida, leukémie a podobná onemocnění, myelodysplastický syndrom
285 • φφφ φ φφ φφ φφ • φ · φ φ φ · · · · φ · • · φ φ · · · ·· φ • φ φ* φ φ φφφ φφ φ φφφ φφφ φφφφ φφφφ φφ φφφ φφ φφ ·· * nebo mnohočetný myelom.
24. Způsob inhibice funkce zprostředkované ICE u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje krok podávání sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1. až 19 nebo farmaceutické kompozice podle nároku 21 tomuto pacientovi.
25. Způsob snížení produkce IGIF a IFN-γ u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje krok.podávání sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 19 nebo farmaceutické kompozice podle nároku 21 tomuto pacientovi.
26. Použití sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 19 nebo farmaceutické kompozice podle nároku 21 při výrobě léčiva pro léčeni nebo prevenci onemocnění vybraného ze skupiny, kterou tvoří onemocnění zprostředkované IL-1, onemocnění zprostředkované apoptózou, zánětlivé onemocnění, autoimunní onemocnění, destrukční onemocnění kosti, proliferativní onemocnění, infekční onemocnění, degenerativní onemocnění, nekrotické onemocnění, onemocnění způsobené, nadbytečným příjmem alkoholu v potravě, onemocnění zprostředkované virem, zánětlivá peritonitida, osteoarthritida, pankreatitida, astma, syndrom dýchacího stresu dospělých, glomerulonefritida, revmatoidní arthritida, systémový lupus erythematosus, skleroderma, chronická thyroiditida, Graveova ' nemoc, autoimunní gastritida, diabetes mellitus závislý na insulinu (typ 1) , autoimunní hemolytická anemie, autoimunní neutropenie, thrombocytopenie, chronická aktivní hepatitida, myastenia gravis, zánětlivé střevní onemocnění, Crohnova nemoc, psoriáza, atopická dermatitida, onemocnění štěp vs. hostitel, osteoporóza, leukémie a podobná onemocnění, myelodysplastický syndrom, kostní onemocnění spojené s mnohočetným myelomem, akutní myelogenní leukemie, chronická myelogenní leukemie, metastatický melanom, Kaposiho
286 ··· • · · 9 9 9 9
27. Použití podle nároku 26, kde onemocněním je revmatoidní arthritida, zánětlivé. střevní onemocnění, Crohnova nemoc, ulcerativní kolitida, zánětlivá peritonitida, septický šok, pankreatitida, traumatické poškození mozku, odmítnutí transplantovaného orgánu, osteoarthritida, astma, psoriáza, Alzheimerova nemoc, atopická dermatitda, leukemie a podobná onemocnění, myelodysplastický syndrom nebo mnohočetný myelom.
28. Použití sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 19 nebo farmaceutické kompozice podle nároku 21 při výrobě léčiva pro inhibici funkce zprostředkované ICE u pacienta.
29. Použití sloučeniny podle kteréhokoli z nároků T až 19 nebo farmaceutické kompozice podle nároku 21 při výrobě léčiva pro snížení produkce IGIF nebo IFN-γ u pacienta.
CZ20003409A 1998-03-19 1999-03-19 Inhibitory kaspázy a farmaceutická kompozice, která je obsahuje CZ302281B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US7877098P 1998-03-19 1998-03-19

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20003409A3 true CZ20003409A3 (cs) 2001-01-17
CZ302281B6 CZ302281B6 (cs) 2011-01-26

Family

ID=22146109

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20003409A CZ302281B6 (cs) 1998-03-19 1999-03-19 Inhibitory kaspázy a farmaceutická kompozice, která je obsahuje

Country Status (33)

Country Link
US (3) US6531474B1 (cs)
EP (6) EP2261233A3 (cs)
JP (3) JP4594520B2 (cs)
KR (2) KR100928878B1 (cs)
CN (1) CN1321129C (cs)
AP (1) AP2000001919A0 (cs)
AR (1) AR019011A1 (cs)
AT (1) ATE410439T1 (cs)
AU (1) AU769033B2 (cs)
BG (1) BG104863A (cs)
BR (2) BR9909660A (cs)
CA (1) CA2324226C (cs)
CZ (1) CZ302281B6 (cs)
DE (1) DE69939689D1 (cs)
DK (1) DK1064298T3 (cs)
ES (1) ES2315010T3 (cs)
GE (1) GEP20043163B (cs)
HU (1) HU227920B1 (cs)
ID (1) ID27002A (cs)
IL (3) IL138469A0 (cs)
IS (1) IS5622A (cs)
NO (1) NO331829B1 (cs)
NZ (2) NZ506963A (cs)
PL (1) PL204619B1 (cs)
PT (1) PT1064298E (cs)
RU (1) RU2274642C2 (cs)
SI (1) SI1064298T1 (cs)
SK (1) SK286736B6 (cs)
TR (1) TR200103406T2 (cs)
TW (1) TWI243828B (cs)
UA (2) UA74133C2 (cs)
WO (1) WO1999047545A2 (cs)
ZA (1) ZA200004652B (cs)

Families Citing this family (80)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7244677B2 (en) 1998-02-04 2007-07-17 Semitool. Inc. Method for filling recessed micro-structures with metallization in the production of a microelectronic device
WO1999047545A2 (en) * 1998-03-19 1999-09-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of caspases
US6242422B1 (en) 1998-10-22 2001-06-05 Idun Pharmacueticals, Inc. (Substituted)Acyl dipeptidyl inhibitors of the ice/ced-3 family of cysteine proteases
US7157430B2 (en) 1998-10-22 2007-01-02 Idun Pharmaceuticals, Inc. (Substituted)acyl dipeptidyl inhibitors of the ICE/CED-3 family of cysteine proteases
US7326542B2 (en) 1998-12-02 2008-02-05 Princeton University Compositions and methods for regulating bacterial pathogenesis
US6720415B2 (en) 1998-12-02 2004-04-13 Princeton University Compositions and methods for regulating bacterial pathogenesis
WO2001027085A1 (en) * 1999-10-13 2001-04-19 Merck Frosst Canada & Co. Nicotinyl aspartyl ketones as inhibitors of caspase-3
US6395767B2 (en) * 2000-03-10 2002-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Cyclopropyl-fused pyrrolidine-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV and method
US6525024B1 (en) 2000-04-17 2003-02-25 Idun Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of the ICE/ced-3 family of cysteine proteases
US6559176B1 (en) 2000-05-10 2003-05-06 Princeton University Compounds and methods for regulating bacterial growth and pathogenesis
PE20011350A1 (es) 2000-05-19 2002-01-15 Vertex Pharma PROFARMACO DE UN INHIBIDOR DE ENZIMA CONVERTIDORA DE INTERLEUCINA-1ß (ICE)
ATE510837T1 (de) * 2000-09-13 2011-06-15 Vertex Pharma Caspase inhibitoren und deren verwendung
WO2002070544A2 (en) * 2001-03-02 2002-09-12 Idun Pharmaceuticals, Inc. Methods, compositions and kits for preserving antigenicity
SG10201603108QA (en) 2001-06-26 2016-05-30 Amgen Inc Antibodies To OPGL
WO2003068242A1 (en) * 2002-02-11 2003-08-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Phospholipids as caspase inhibitor prodrugs
EP1483241A4 (en) 2002-03-08 2006-12-13 Bristol Myers Squibb Co CYCLIC DERIVATIVES AS MODULATORS OF CHEMOKINE RECEPTOR ACTIVITY
FR2839309B1 (fr) 2002-05-03 2004-07-23 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de l'acide hexahydro-pyridazine-3- carboxylique, chimiotheques les contenant, leur utilisation comme medicaments, compositions pharmaceutiques les contenant et leurs procedes de preparation
US7001899B2 (en) 2002-06-10 2006-02-21 The Procter & Gamble Company Interleukin converting enzyme inhibitors
WO2004022536A1 (en) * 2002-09-04 2004-03-18 Glenmark Pharmaceuticals Limited New heterocyclic amide compounds useful for the treatment of inflammatory and allergic disorders: process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
CN100471871C (zh) 2002-09-06 2009-03-25 安姆根有限公司 治疗性人抗－il－1r1单克隆抗体
MXPA05004432A (es) 2002-10-23 2005-11-23 Glenmark Pharmaceuticals Ltd Compuestos triciclicos novedosos utiles para el tratamiento de desordenes inflamatorios y alergicos, procedimiento para su preparacion y composiciones farmaceuticas que lo contienen.
FR2846969A1 (fr) * 2002-11-08 2004-05-14 Salles Jean Pierre Nouveaux vecteurs moleculaires amphiphiles fluorocarbones a usage biomedical et medical
JP2006519755A (ja) * 2002-11-20 2006-08-31 ロレアル ピラゾール−カルボキシアミドを含有する毛髪の手入れ用又は睫毛用の組成物、毛髪及び睫毛の成長を刺激し、及び／又は抜毛を防止するためのそれらの使用
FR2847160A1 (fr) * 2002-11-20 2004-05-21 Oreal Composition capillaire contenant un compose pyrasol-carboxamide, son utilisation pour stimuler la pousse des cheveux et/ou freiner leur chute
SI1620429T1 (sl) 2003-04-11 2009-08-31 Glenmark Pharmaceuticals Sa Nove heterociklične spojine, uporabne za zdravljenje vnetnih in alergijskih motenj: postopek za njihovo pripravo in farmacevtski sestavki, ki jih vsebujejo
AU2003902704A0 (en) * 2003-05-29 2003-06-19 Crc For Waste Management And Pollution Control Limited Of Unsw Process for producing a nanoscale zero-valent metal
CN101524351A (zh) * 2003-12-01 2009-09-09 沃泰克斯药物股份有限公司 使用ice抑制剂治疗感染疾病
EP1541124B1 (en) * 2003-12-12 2009-02-11 Dr. Straetmans Chemische Produkte GmbH Compositions with anisic acid and glycerides
AR047981A1 (es) 2004-02-27 2006-03-15 Vertex Pharma Inhibidores de caspasa y sus usos correspondientes
AU2011226946B2 (en) * 2004-02-27 2012-05-03 Vertex Pharmaceuticals Incoporated Caspase Inhibitors and Uses Thereof
CA2820541A1 (en) * 2004-02-27 2005-09-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitors and uses thereof
ES2532967T3 (es) * 2004-03-12 2015-04-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Proceso y productos intermedios para la preparación de inhibidores de la acetal caspasa aspártica
NZ551196A (en) * 2004-05-14 2010-08-27 Emisphere Tech Inc Compounds and compositions for delivering active agents
AU2012200214B2 (en) * 2004-05-14 2013-10-24 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
AU2005247409B2 (en) 2004-05-15 2011-11-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Treating seizures using ICE inhibitors
GB0411056D0 (en) 2004-05-18 2004-06-23 Novartis Ag Organic compounds
CN1980658A (zh) 2004-05-27 2007-06-13 沃泰克斯药物股份有限公司 治疗自身炎性疾病的ice抑制剂
EP1778718B1 (en) * 2004-07-02 2014-10-08 Genentech, Inc. Inhibitors of iap
US20100190688A1 (en) * 2004-07-12 2010-07-29 Bin Chao Tetrapeptide analogs
PT1796660T (pt) * 2004-09-17 2017-02-13 Biomas Ltd Utilização de tricloro(dioxietileno-o,o¿)telurato de amónio (as101) para a inibição da enzima de conversão da interleucina-1 beta
AR051933A1 (es) 2004-10-13 2007-02-21 Glenmark Pharmaceuticals Sa Proceso para la preparacion de n-(3,5 dicloropirid-4-ilo)-4-difluormetoxi-8-metano sulfonamido-dibenzo[b,d] furano-1-carboxamida
KR101317119B1 (ko) 2004-12-17 2013-10-11 그렌마크 파머수티칼스 에스. 아. 염증성 및 알레르기성 장애의 치료에 유용한 신규한헤테로사이클릭 화합물
PT1831227E (pt) 2004-12-17 2013-08-23 Glenmark Pharmaceuticals Sa Proteínas buganina modificadas, citotoxinas e métodos e utilizações das mesmas
JP4673068B2 (ja) * 2005-01-19 2011-04-20 独立行政法人科学技術振興機構 Ｔｈ１型アレルギー疾患治療用組成物
DE102005017116A1 (de) * 2005-04-13 2006-10-26 Novartis Ag Hemmstoffe für Inhibitoren von Apoptose Proteinen (IAP)
WO2007015931A2 (en) * 2005-07-28 2007-02-08 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitor prodrugs
TW200736277A (en) 2005-11-14 2007-10-01 Amgen Inc RANKL antibody-PTH/PTHrP chimeric molecules
US20100068150A1 (en) * 2006-07-07 2010-03-18 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Selective Caspase Inhibitors
JP2010510224A (ja) * 2006-11-17 2010-04-02 アボット・ラボラトリーズ ケモカイン受容体拮抗薬としてのアミノピロリジン類
US8084862B2 (en) 2007-09-20 2011-12-27 International Business Machines Corporation Interconnect structures with patternable low-k dielectrics and method of fabricating same
US7709370B2 (en) * 2007-09-20 2010-05-04 International Business Machines Corporation Spin-on antireflective coating for integration of patternable dielectric materials and interconnect structures
US8618663B2 (en) 2007-09-20 2013-12-31 International Business Machines Corporation Patternable dielectric film structure with improved lithography and method of fabricating same
US8343458B2 (en) * 2008-04-03 2013-01-01 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Probes for in vivo targeting of active cysteine proteases
JP2011523927A (ja) * 2008-05-27 2011-08-25 インペリアル イノベーションズ リミテッド 焼結可能なガラスから多孔質足場を製造する方法
US20110152343A1 (en) * 2009-12-22 2011-06-23 Functional Genetics, Inc. Protease inhibitors and broad-spectrum antiviral
GB201001070D0 (en) 2010-01-22 2010-03-10 St George's Hospital Medical School Theraputic compounds and their use
US9365612B2 (en) 2010-01-29 2016-06-14 United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Caspase inhibitors
GB201011411D0 (en) 2010-07-06 2010-08-18 St Georges Hosp Medical School Therapeutic compounds and their use
WO2012061785A2 (en) 2010-11-05 2012-05-10 Brandeis University Ice inhibiting compounds and uses thereof
US9956260B1 (en) 2011-07-22 2018-05-01 The J. David Gladstone Institutes Treatment of HIV-1 infection and AIDS
IN2014CN02806A (cs) 2011-10-14 2015-07-03 Bristol Myers Squibb Co
IN2014CN02805A (cs) 2011-10-14 2015-07-03 Bristol Myers Squibb Co
MY165742A (en) 2011-10-14 2018-04-23 Bristol Myers Squibb Co Substituted tetrahydroisoquinoline compounds as factor xia inhibitors
MX2015002231A (es) 2012-08-23 2015-07-17 Alios Biopharma Inc Compuestos antivirales.
US9315519B2 (en) 2012-10-12 2016-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Guanidine substituted tetrahydroisoquinoline compounds as factor XIa inhibitors
EP2906551B1 (en) 2012-10-12 2018-02-28 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of a factor xia inhibitor
US9403774B2 (en) 2012-10-12 2016-08-02 Bristol-Myers Squibb Company Guanidine and amine substituted tetrahydroisoquinoline compounds as factor xia inhibitors
ES2712699T3 (es) 2013-03-25 2019-05-14 Bristol Myers Squibb Co Tetrahidroisoquinolinas que contienen azoles sustituidos como inhibidores del factor XIa
UY35971A (es) 2014-01-31 2015-07-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporación Del Estado De Delaware Macrociclos con grupos p2? aromáticos como inhibidores del factor xia
NO2760821T3 (cs) 2014-01-31 2018-03-10
US9737556B2 (en) 2014-06-13 2017-08-22 Trustees Of Tufts College FAP-activated therapeutic agents, and uses related thereto
IL249370B (en) 2014-06-13 2022-06-01 Tufts College Fap-activated therapeutic agents, and uses related thereto
ES2714283T3 (es) 2014-09-04 2019-05-28 Bristol Myers Squibb Co Macrociclos de diamida que son inhibidores de FXIa
US9453018B2 (en) 2014-10-01 2016-09-27 Bristol-Myers Squibb Company Pyrimidinones as factor XIa inhibitors
MX2021006326A (es) 2015-09-17 2022-12-16 Inhibidores de pcna.
US10995084B2 (en) 2016-07-22 2021-05-04 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. Pyrrolidine derivative
FI3558335T3 (fi) 2016-12-23 2023-07-19 Casp Aid Inc Kaspaasi-1-inhibitio ja sen käyttötarkoituksia neurologisten tilojen ehkäisyyn ja hoitoon
EP3836954B1 (en) 2018-08-13 2025-05-07 Iltoo Pharma Combination of interleukin-2 with an interleukin 1 inhibitor, conjugates and therapeutic uses thereof
WO2020168294A1 (en) 2019-02-15 2020-08-20 Lysosomal And Rare Disorders Research And Treatment Center, Llc Methods and compositions for treating lysosomal storage disorders: ambroxol as treatment agent for mucopolysaccharidoses iii (sanfilippo syndrome)
US20230404972A1 (en) * 2020-11-25 2023-12-21 Lysosomal and Rare Disorders Research and Treatment Center, Inc. Inhibition of caspase pathway as a treatment for lysosomal storage disorders

Family Cites Families (80)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2973111A (en) * 1958-02-11 1961-02-28 Dempster Brothers Inc Compaction bodies
US5874424A (en) 1995-12-20 1999-02-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of interleukin-1β converting enzyme
US6204261B1 (en) * 1995-12-20 2001-03-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of interleukin-1β Converting enzyme inhibitors
US4465679A (en) 1983-01-31 1984-08-14 Usv Pharmaceutical Corporation 1,2-Diaza-3-one compounds, their use in treating hypertension and pharmaceutical compositions thereof
IL72523A (en) 1983-08-12 1988-06-30 Takeda Chemical Industries Ltd 3-amino-4-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzoxazepine derivatives,their production and pharmaceutical compositions containing them
US5055451A (en) 1986-12-22 1991-10-08 Syntex Inc. Aryloxy and arylacyloxy methyl ketones as thiol protease inhibitors
US5158936A (en) 1986-12-22 1992-10-27 Syntex (U.S.A.) Inc. Aryloxy and arylacyloxy methyl ketones as thiol protease inhibitors
US5008245A (en) 1988-10-27 1991-04-16 University Of Kentucky Research Foundation Novel peptidyl carbamate inhibitors of the enzyme elastase
CA2021660A1 (en) 1989-07-26 1991-01-27 Philippe Bey Peptidase inhibitors
NZ235155A (en) 1989-09-11 1993-04-28 Merrell Dow Pharma Peptidase substrates in which the carboxy terminal group has been replaced by a tricarbonyl radical
US5416013A (en) 1990-04-04 1995-05-16 Sterling Winthrop Inc. Interleukin 1β protease and interleukin 1β protease inhibitors
WO1991015577A1 (en) 1990-04-04 1991-10-17 Black, Roy, A. INTERLEUKIN 1'beta' PROTEASE
EP0503561B1 (de) 1991-03-15 1998-10-28 Hoechst Aktiengesellschaft Verfahren zur diastereoselektiven reduktiven Pinakol-Kupplung von homochiralen alpha-Aminoaldehyden
CA2071674C (en) * 1991-06-21 2003-08-19 Kevin T. Chapman Peptidyl derivatives as inhibitors of interleukin-1.beta. converting enzyme
JP3190431B2 (ja) 1991-07-01 2001-07-23 三菱化学株式会社 ケトン誘導体
DE69229252T2 (de) 1991-08-16 1999-12-16 Merck & Co., Inc. DNS, welche das Interleukin-1B-Vorläufer-Converting-Enzym kodiert
US5278061A (en) 1991-08-16 1994-01-11 Merck & Co., Inc. Affinity chromatography matrix useful in purifying interleukin-1β converting enzyme
US6348570B1 (en) 1991-08-16 2002-02-19 Merck & Co., Inc. Chromophore containing compounds and their use in determining interleukin-1β convertase activity
EP0533226A3 (en) 1991-08-16 1993-08-18 Merck & Co. Inc. Novel chromophore containing compounds
WO1993005071A1 (en) 1991-08-30 1993-03-18 Sterling Winthrop Inc. INTERLEUKIN 1β PROTEASE AND INTERLEUKIN 1β PROTEASE INHIBITORS
ATE140449T1 (de) 1991-10-07 1996-08-15 Hoechst Ag Verfahren zur diastereoselektiven reduktiven pinakol-kupplung von homochiralen alpha- aminoaldehyden
GB9123326D0 (en) 1991-11-04 1991-12-18 Sandoz Ltd Improvements in or relating to organic compounds
AU1339092A (en) 1991-12-13 1993-07-19 Corvas International, Inc. Reagents for automated synthesis of peptide analogs
EP0547699A1 (en) 1991-12-19 1993-06-23 Merck & Co. Inc. Peptidyl derivatives as inhibitors of interleukin-1B converting enzyme
AU3479593A (en) 1992-01-31 1993-09-01 Merck & Co., Inc. Peptidyl derivatives as inhibitors of interleukin-1beta converting enzyme
ES2118940T3 (es) 1992-02-21 1998-10-01 Merck & Co Inc Peptidil-derivados utiles como inhibidores de la enzima conversora de la interleucina-1 beta.
AU4634993A (en) 1992-06-24 1994-01-24 Merck & Co., Inc. Dna encoding precursor interleukin 1beta converting enzyme
WO1994003480A1 (en) 1992-07-31 1994-02-17 Pfizer Inc. Peptidyl 4-amino-2,2-difluoro-3-oxo-1,6-hexanedioic acid derivatives as antiinflammatory agents
CA2109646C (en) 1992-11-24 2000-03-07 Gaston O. Daumy Para-nitroanilide peptides
EP0618223A3 (en) 1993-03-08 1996-06-12 Sandoz Ltd Peptides, the release of Interleukin 1-Bêta, useful as anti-inflammatory agents.
CA2122227A1 (en) 1993-04-29 1994-10-30 Roland E. Dolle Peptide analogs as irreversible interleukin-1.beta. protease inhibitors
US5462939A (en) 1993-05-07 1995-10-31 Sterling Winthrop Inc. Peptidic ketones as interleukin-1β-converting enzyme inhibitors
US5411985A (en) 1993-05-17 1995-05-02 Merck & Co., Inc. Gamma-pyrone-3-acetic acid as an inhibitor or interleukin-1 β inventory enzyme
JPH0789951A (ja) 1993-06-03 1995-04-04 Sterling Winthrop Inc インターロイキン−１β転換酵素阻害剤
DK0644197T3 (da) 1993-06-04 1999-06-07 Vertex Pharma Peptidphosphinyloxymethylketoner som inhibitorer af interleukin-1beta-konverterende enzymer
EP0711174A4 (en) 1993-06-24 1997-11-12 Gen Hospital Corp GENES FOR PROGRAMMED CELL DEATH AND PROTEINS
WO1995005192A1 (en) 1993-08-13 1995-02-23 Merck & Co., Inc. SUBSTITUTED KETONE DERIVATIVES AS INHIBITORS OF INTERLEUKIN-1β CONVERTING ENZYME
DE59405370D1 (de) * 1993-11-11 1998-04-09 Basf Ag P-Hydroxyanilinderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Bekämpfung von Schadpilzen oder Schädlingen
US5714484A (en) 1993-12-08 1998-02-03 Prototek, Inc. α-(1,3-dicarbonylenol ether) methyl ketones as cysteine protease inhibitors
US5486623A (en) 1993-12-08 1996-01-23 Prototek, Inc. Cysteine protease inhibitors containing heterocyclic leaving groups
ES2210289T3 (es) 1994-03-31 2004-07-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Derivados de pirimidinilo como inhibidores de interleuquinas.
EP0758891A4 (en) 1994-04-29 1997-12-03 Sanofi Winthrop Inc HALOMETHYLAMIDES AS IL-1 BETA PROTEASE INHIBITORS
US5492824A (en) 1994-05-12 1996-02-20 Basf Ag Ice and ice-like compositions and methods of making same
US5552400A (en) 1994-06-08 1996-09-03 Sterling Winthrop Inc. Fused-bicyclic lactams as interleukin-1β converting enzyme inhibitors
US5716929A (en) * 1994-06-17 1998-02-10 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of interleukin-1β converting enzyme
US6057119A (en) 1994-06-17 2000-05-02 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Crystal structure and mutants of interleukin-1β converting enzyme
US5756466A (en) 1994-06-17 1998-05-26 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of interleukin-1β converting enzyme
US5847135A (en) 1994-06-17 1998-12-08 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Inhibitors of interleukin-1β converting enzyme
US5565430A (en) 1994-08-02 1996-10-15 Sterling Winthrop Inc. Azaaspartic acid analogs as interleukin-1β converting enzyme inhibitors
GB2292149A (en) * 1994-08-09 1996-02-14 Ferring Res Ltd Peptide inhibitors of pro-interleukin-1beta converting enzyme
US5498616A (en) 1994-11-04 1996-03-12 Cephalon, Inc. Cysteine protease and serine protease inhibitors
TW394764B (en) 1995-02-14 2000-06-21 Mitsubishi Chemcal Corp Oxygen-containing heterocyclic derivatives
JPH09165360A (ja) * 1995-03-31 1997-06-24 Takeda Chem Ind Ltd システインプロテアーゼ阻害剤
CA2215211A1 (en) 1995-03-31 1996-10-03 Takeda Chemical Industries, Ltd. Cysteine protease inhibitor
US5798442A (en) 1995-04-21 1998-08-25 Merck Frosst Canada, Inc. Peptidyl derivatives as inhibitors of pro-apoptotic cysteine proteinases
EP0851760A4 (en) 1995-08-31 1998-11-25 Smithkline Beecham Corp INTERLEUKIN CONVERSION ENZYME AND APOPTOSIS
WO1997008174A1 (en) 1995-08-31 1997-03-06 Smithkline Beecham Corporation Interleukin converting enzyme and apoptosis
US5744451A (en) 1995-09-12 1998-04-28 Warner-Lambert Company N-substituted glutamic acid derivatives with interleukin-1 β converting enzyme inhibitory activity
EP0761680A3 (en) 1995-09-12 1999-05-06 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Tetrazole compounds having Interleukin-1beta converting enzyme inhibitory activity
WO1997024339A1 (fr) * 1995-12-27 1997-07-10 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Derives de tetrazole et medicaments les contenant a titre d'ingredients actifs
WO1998001133A1 (fr) 1996-07-08 1998-01-15 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Inhibiteurs de la resorption osseuse
WO1998004539A1 (fr) 1996-07-29 1998-02-05 Mitsubishi Chemical Corporation Derives heterocycliques oxygenes
EP0929311B8 (en) 1996-09-12 2006-02-01 Idun Pharmaceuticals, Inc. INHIBITION OF APOPTOSIS USING INTERLEUKIN-1 beta-CONVERTING ENZYME (ICE)/CED-3 FAMILY INHIBITORS
ATE229973T1 (de) * 1996-09-12 2003-01-15 Idun Pharmaceuticals Inc C-terminale modifizierte (n-substituierte)-2- indolyl dipeptide als inhibitoren von der ice/ced-3 cysteinprotease familie
AU739496B2 (en) 1996-09-12 2001-10-11 Idun Pharmaceuticals, Incorporated Novel tricyclic compounds for the inhibition of the ice/ced-3 protease family of enzymes
US5869519A (en) * 1996-12-16 1999-02-09 Idun Pharmaceuticals, Inc. C-terminal modified (n-substituted)-2-indolyl dipeptides as inhibitors of the ICE/ced-3 family of cysteine proteases
US5968927A (en) * 1996-09-20 1999-10-19 Idun Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic compounds for the inhibition of the ICE/ced-3 protease family of enzymes
US6184244B1 (en) * 1996-12-16 2001-02-06 Idun Pharmaceuticals, Inc. C-terminal modified (N-substituted)-2-indolyl dipeptides as inhibitors of the ICE/ced-3 family of cysteine proteases
US5877197A (en) * 1996-12-16 1999-03-02 Karanewsky; Donald S. C-terminal modified (N-substituted)-2-indolyl dipeptides as inhibitors of the ICE/ced-3 family of cysteine proteases
US6054487A (en) * 1997-03-18 2000-04-25 Basf Aktiengesellschaft Methods and compositions for modulating responsiveness to corticosteroids
HUP9700816A3 (en) 1997-04-28 1999-06-28 Gyogyszerkutato Intezet 3(r)-3-amino-4-carboxy-butiraldehyde derivatives inhibiting release of interleukin-1-beta
US6184210B1 (en) * 1997-10-10 2001-02-06 Cytovia, Inc. Dipeptide apoptosis inhibitors and the use thereof
AU742034B2 (en) * 1997-10-31 2001-12-13 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Creped nonwoven materials and liner
WO1999047545A2 (en) * 1998-03-19 1999-09-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of caspases
US6197750B1 (en) * 1998-07-02 2001-03-06 Idun Pharmaceuticals, Inc. C-terminal modified oxamyl dipeptides as inhibitors of the ICE/ced-3 family of cysteine proteases
US6242422B1 (en) * 1998-10-22 2001-06-05 Idun Pharmacueticals, Inc. (Substituted)Acyl dipeptidyl inhibitors of the ice/ced-3 family of cysteine proteases
PE20011350A1 (es) 2000-05-19 2002-01-15 Vertex Pharma PROFARMACO DE UN INHIBIDOR DE ENZIMA CONVERTIDORA DE INTERLEUCINA-1ß (ICE)
WO2005047906A1 (en) * 2003-11-10 2005-05-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods for monitoring il-18
AR047981A1 (es) * 2004-02-27 2006-03-15 Vertex Pharma Inhibidores de caspasa y sus usos correspondientes
CN1980658A (zh) * 2004-05-27 2007-06-13 沃泰克斯药物股份有限公司 治疗自身炎性疾病的ice抑制剂

Also Published As

Publication number Publication date
WO1999047545A2 (en) 1999-09-23
PL343611A1 (en) 2001-08-27
CN1321129C (zh) 2007-06-13
PL204619B1 (pl) 2010-01-29
TR200103406T2 (tr) 2002-06-21
UA74133C2 (uk) 2005-11-15
IS5622A (is) 2000-09-08
EP2261233A3 (en) 2011-04-20
SK286736B6 (sk) 2009-04-06
EP2261233A2 (en) 2010-12-15
NO20004546L (no) 2000-11-09
NZ506963A (en) 2003-10-31
NO20004546D0 (no) 2000-09-12
BR9909660A (pt) 2000-11-21
ATE410439T1 (de) 2008-10-15
AP2000001919A0 (en) 2000-09-30
KR100928878B1 (ko) 2009-11-30
EP1064298A2 (en) 2001-01-03
JP2010241822A (ja) 2010-10-28
AU3098699A (en) 1999-10-11
BRPI9909660B1 (pt) 2018-09-18
US20030232986A1 (en) 2003-12-18
NO331829B1 (no) 2012-04-16
WO1999047545A3 (en) 1999-11-25
AR019011A1 (es) 2001-12-26
KR100898094B1 (ko) 2009-05-18
NZ528282A (en) 2005-05-27
DK1064298T3 (da) 2009-01-19
EP2261234A2 (en) 2010-12-15
IL138469A0 (en) 2001-10-31
UA96113C2 (en) 2011-10-10
HUP0103575A2 (hu) 2002-02-28
CA2324226A1 (en) 1999-09-23
EP2261235A3 (en) 2011-04-20
ES2315010T3 (es) 2009-03-16
HUP0103575A3 (en) 2002-10-28
HK1035733A1 (en) 2001-12-07
BRPI9909660B8 (pt) 2021-05-25
US6531474B1 (en) 2003-03-11
ID27002A (id) 2001-02-22
EP2261234A3 (en) 2011-04-20
KR20080020703A (ko) 2008-03-05
TWI243828B (en) 2005-11-21
EP1064298B1 (en) 2008-10-08
JP2006206600A (ja) 2006-08-10
PT1064298E (pt) 2009-01-02
US20090048226A1 (en) 2009-02-19
BG104863A (en) 2001-04-30
AU769033B2 (en) 2004-01-15
SK13822000A3 (sk) 2001-04-09
EP2261235A2 (en) 2010-12-15
EP2011800A2 (en) 2009-01-07
US8691848B2 (en) 2014-04-08
RU2274642C2 (ru) 2006-04-20
HU227920B1 (en) 2012-06-28
CA2324226C (en) 2012-06-05
CN1323314A (zh) 2001-11-21
KR20010042038A (ko) 2001-05-25
CZ302281B6 (cs) 2011-01-26
JP4594520B2 (ja) 2010-12-08
EP2261232A3 (en) 2011-04-20
ZA200004652B (en) 2002-04-24
JP2002506878A (ja) 2002-03-05
US7358273B2 (en) 2008-04-15
IL206621A0 (en) 2010-12-30
EP2261232A2 (en) 2010-12-15
IL138469A (en) 2010-11-30
DE69939689D1 (de) 2008-11-20
SI1064298T1 (sl) 2009-02-28
GEP20043163B (en) 2004-01-26
EP2011800A3 (en) 2009-06-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2274642C2 (ru) Ингибиторы каспаз
EP0942925B1 (en) Inhibitors of interleukin-1 beta converting enzyme
WO1999046248A1 (en) 1,2-diazepane derivatives as interleukin-1beta converting enzyme inhibitors
MXPA00009162A (en) Inhibitors of caspases
BRPI9917881B1 (pt) compostos inibidores de caspases, composição farmacêutica e uso de ditos compostos
AU2003255217A1 (en) Inhibitors of Caspases
HK1152052A (en) Inhibitors of caspases
AU2007200251A1 (en) Inhibitors of Caspases
HK1035733B (en) Inhibitors of caspases
EP1466921A1 (en) Inhibitors of interleukin-1 beta converting enzyme

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Effective date: 20190319