NO331829B1 - Cykliske forbindelser med caspaseinhibitor-aktivitet, sammensetninger inneholdende slike samt anvendelse derav ved fremstilling av medikamenter - Google Patents

Cykliske forbindelser med caspaseinhibitor-aktivitet, sammensetninger inneholdende slike samt anvendelse derav ved fremstilling av medikamenter Download PDF

Info

Publication number
NO331829B1
NO331829B1 NO20004546A NO20004546A NO331829B1 NO 331829 B1 NO331829 B1 NO 331829B1 NO 20004546 A NO20004546 A NO 20004546A NO 20004546 A NO20004546 A NO 20004546A NO 331829 B1 NO331829 B1 NO 331829B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
alkyl
aryl
optionally replaced
oxo
hydrogen atom
Prior art date
Application number
NO20004546A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20004546D0 (no
NO20004546L (no
Inventor
David Jeffrey Lauffer
Mark A Murcko
Guy W Bemis
Michael D Mullican
Keith P Wilson
Anne-Laure Grillot
Marion W Wannamaker
Paul S Charifson
James W Janetka
Robert J Davies
Zhan Shi
Cornelia J Forster
Original Assignee
Vertex Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vertex Pharma filed Critical Vertex Pharma
Publication of NO20004546D0 publication Critical patent/NO20004546D0/no
Publication of NO20004546L publication Critical patent/NO20004546L/no
Publication of NO331829B1 publication Critical patent/NO331829B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/16—Central respiratory analeptics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/32—Alcohol-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

Foreliggende oppfinnelse vedrører nye klasser av forbindelser som er kaspaseinhibitorer, spesielt inter-leukln-lp-konverterende enzym-inhibitorer ("ICE"-inhibitorer). Denne oppfinnelse vedrører også farmasøytiske sammensetninger omfattende disse forbindelser. Forbindelsene og de farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse er spesielt velegnet for å inhibere kaspaseaktivitet, og følgelig kan de med fordel anvendes som midler mot interleukin-1- ("IL-1"), apoptose-, interferon-y-induserende faktor- (IGIF) eller interferon-y- ("IFN-y") medierte sykdommer, inklusive inflammatoriske sykdommer, autoimmune sykdommer, destruktive benlidelser, proliferative lidelser, infeksjonssykdommer og degenerative sykdommer. Denne oppfinnelse vedrører også metoder for å inhibere kaspaseaktiviteten og redusere IGlF-produksjonen og IFN-y-produksjonen og metoder for å behandle interleukin-1-, apoptose- og interferon-y-medierte sykdommer under anvendelse av forbindelsene og sammensetninger ifølge denne oppfinnelse. Denne oppfinnelse vedrører også fremgangsmåter for å fremstille forbindelsene ifølge denne oppfinnelse.

Description

Oppfinnelsens område
Foreliggende oppfinnelse vedrører nye klasser av forbindelser med struktur og sammensetning som angitt i krav 1 og som er kaspase-inhibitorer, spesielt inhibitorer av det interleukin-l(3-konverterende enzym ("ICE"-inhibitorer) . Denne oppfinnelse vedrører også farmasøytiske sammensetninger omfattende disse forbindelser som angitt i krav 17. Forbindelsene og de farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse er spesielt velegnet for å inhibere kaspaseaktivitet, og følgelig kan de med fordel anvendes som midler mot interleukin-1- ("IL-1"), apoptose-, interferon-y-induserende faktorsykdommer (IGIF) eller interferon-y- ("IFN-y") medierte sykdommer, inklusive inflammatoriske sykdommer, autoimmune sykdommer, destruktive benlidelser, proliferative lidelser, infeksjonssykdommer og degenerative sykdommer. Denne oppfinnelse vedrører også anvendelse som angitt i krav 18 for fremstilling av medikamenter for å inhibere kaspaseaktiviteten og redusere IGIF-produksjonen og IFN-y-produksjonen og for å behandle interleukin-1-, apoptose- og interferon-y-mediated sykdommer.
Bakgrunnen for oppfinnelsen
Interleukin 1 ("IL-1") er et essensielt pro-inflammatorisk og immunoregulatorisk protein som stimulerer fibroblast-differensiasjonen og proliferasjonen, produksjonen av prostaglandiner, kollagenase og fosfolipase ved hjelp av synoviale celler og kondrocytter, basofil og eosinofil degranulering og neutrofil aktivering. Oppenheim, J.H. et al, Immunology Today, 7, s. 45-56 (1986) . Som sådant er det involvert i patogenesen av kroniske og akutte inflammatoriske og autoimmune sykdommer. For eksempel i reumatoid artritt er IL-1 både en mediator av inflammatoriske sykdommer og av destruksjon av bruskproteoglykan i angrepne ledd. Wood, D.D. et al., Arthritis Rheum. 26, 975, (1983); Pettipher, E.J. et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA 71, 295 (1986); Arend, W.P. og Dayer, J.M., Arthritis Rheum. 38, 151 (1995). IL-1 er også et meget kraftig benresorpsjonsmiddel. Jandiski, J.J., J. Oral Path 17, 145 (1988); Dewhirst, F.E. et al., J. Immunol. 8, 2562 1985) . Alternativt omtales det som "osteoklastaktiverende faktor" i destruktive bensykdommer så som osteoartritt og myelomatose. Bataille, R. et al., Int. J. Clin. Lab. Res. 21(4), 283 (1992). I visse proliferative lidelser, så som akutt myelogenøs leukemi og myelomatose kan IL-1 fremme tumorcellevekst og adhesjon. Bani, M.R., J. Nati. Cancer Inst. 83, 123 (1991); Vidal-Vanaclocha, F., Cancer Res. 54, 2667 (1994). I disse lidelser stimulerer IL-1 også produksjonen av andre cytokiner så som IL-6, som kan modulere tumorutvikling (Tartour et al., Cancer Res. 54, s. 6243 (1994). IL-1 produseres hovedsake-lig ved perifere blodmonocytter som en del av den inflammatoriske respons og forekommer i to distinkte agonistformer, IL-la og IL-lp. Mosely, B.S. et al., Proe. Nat. Acad. Sei., 84, s. 4572-4576 (1987); Lonnemann, G. et al., Eur. J. Immunol., 19, s. 1531-1536 (1989).
IL-ip syntetiseres som en biologisk inaktiv forløper, pIL-ip. pIL-ip mangler en konvensjonell ledersekvens og produseres ikke av en signalpeptidase. March, C.J., Nature, 315, s,641-647 (1985). Isteden spaltes pIL-lp av interleukin-lp-konverterende enzym ("ICE") mellom Asp-116 og Ala-117 og
produserer det biologisk aktive C-terminalfragment som fins i humant serum og synovial væske. Sleath, P.R., et al., J. Biol. Chem., 265, s. 14526-14528 (1992); A.D. Howard et al., J. Immunol., 147, s. 2964-2969 (1991). ICE er en cysteinprotease som er lokalisert primært i monocyttene. Den omdanner forløper-IL-ip til den modne form. Black, R.A. et al., FEBS Lett., 247, s,386-390 (1989); Kostura, M.J. et al., Proe. Nati. Acad. Sei. U. S. A., 86, s. 5227-5231
(1989). Bearbeidelse ved hjelp av ICE er også nødvendig for transporten av maturt IL-ip gjennom cellemembranen. ICE (eller kaspase-1) er et medlem av en familie av homo-loge enzymer som kalles kaspaser. Disse homologer har sekvenslikheter i de aktive seteregioner av enzymene. Slike homologer (kaspaser) omfatter TX (eller ICErei-n eller ICH-2) (kaspase-4) (Faucheu, et al., EMBO J., 14, s. 1914
(1995); Kamens J., et al., J. Biol. Chem., 270, s. 15250
(1995); Nicholson et al., J. Biol. Chem., 270 15870
(1995) ), TY (eller ICErei-m) (kaspase-5) (Nicholson et al., J. Biol. Chem., 270, s. 15870 (1995); ICH-1 (eller Nedd-2) (kaspase-2) (Wang, L. et al., Cell, 78, s. 739
(1994) ), MCH-2 (kaspase-6), (Fernandes-Alnemri, T. et al., Cancer Res., 55, s. 2737 (1995), CPP32 (eller YAMA eller apopain) (kaspase-3) (Fernandes-Alnemri, T. et al., J. Biol. Chem., 269, s. 30761 (1994); Nicholson, D.W. et al., Nature, 376, s. 37 (1995)), CMH-1 (eller MCH-3) (kaspase-7)
(Lippke, et al., J. Biol. Chem., 271(4), pl825-1828
(1996) ); Fernandes-Alnemri, T. et al., Cancer Res.,
(1995) ), Mch5 (kaspase-8) (Muzio, M. et.al., Cell 85(6), 817-827, (1996)), MCH-6 (kaspase-9) (Duan, H. et.al., J. Biol. Chem., 271(34), s. 16720-16724 (1996)), Mch4 (kaspase-10) (Vincenz, C. ét.al., J. Biol. Chem., 272,_s." 6578-6583 (1997); Fernandes-Alnemri, T. et.al., Proe. Nati. Acad. Sei. 93, s. 7464-7469 (1996)), Ich-3 (kaspase-11)
(Wang, S. et.al., J. Biol. Chem., 271, s. 20580-20587
(1996) ), mCASP-12 (kaspase-12), (Van de Craen, M. et.al., FEBS Lett. 403, s. 61-69 (1997); Yuan, Y.and Miura, M. PCT Publication WO95/00160 (1995)), ERICE (kaspase-13), (Humke, E.W., et.al., J. Biol. Chem., 273(25) s. 15702-15707
(1998)) og MICE (kaspase-14) (Hu, S. et.al., J. Biol. Chem., 273(45) s. 29648-29653 (1998)).
Enhver av disse ICE-homologer, liksom ICE i seg selv, er istand til å indusere apoptose når de overuttrykkes i transfekte cellelinjer. Inhibisjon av én eller flere av disse homologer med peptidyl-ICE-inhibitoren Tyr-Val-Ala-Asp-klormetylketon resulterer i inhibisjon av apoptose i primære celler eller cellelinjer. Lazebnik et al., Nature, 371, s. 346 (1994) .
Kaspaser synes også å være involvert i reguleringen av programmert celledød eller apoptose. Yuan, J. et al., Cell, 75, s. 641-652 (1993); Miura, M. et al., Cell, 75, s. 653-660 (1993); Nett-Fiordalisi, M.A. et al., J. Cell Biochem., 17B, s. 117 (1993). Spesielt antas ICE eller ICE-homologer å være assosiert med reguleringen av apoptose i neurodegenerative sykdommer, så som Alzheimers og Parkinsons sykdom. Marx, J. og M. Baringa, Science, 259, s. 760-762 (1993); Gagliardini, V. et al., Science, 263, s. 826-828 (1994). Terapeutisk anvendelse for inhibisjon av apoptose kan omfatte behandling av Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, slag, myokardialt infarkt, spinal atrofi og aldring.
ICE har vist seg å mediere apoptose (programmert celledød) i visse vevstyper. Steller, H., Science, 267, s. 1445
(1995); Whyte, M. og Evan, G., Nature, 376, s. 17 (1995); Martin, S.J. og Green, D.R., Cell, 82, s. 349 (1995); Alnemri, E.S., et al., J. Biol. Chem., 270, s. 4312 (1995) ; Yuan, J. Curr. Opin. Cell Biol., 7, s. 211 (1995). En transgen mus med en disrupsjon av ICE-genet mangler Fas-mediert apoptose (Kuida, K. et al., Science 267, 2000
(1995)). Denne aktivitet hos ICE er forskjellig fra dets rolle som det fremstillende enzym for pro-IL-ip. Det er tenkelig at i visse vevstyper kan inhibisjon av ICE ikke påvirke sekresjonen av maturt IL-lp, men kan inhibere apoptose .
Enzymatisk aktivt ICE er tidligere blitt beskrevet som en heterodimer bestående av to subenheter, p20 og plO (20kDa henholdsvis 10kDa molekylvekt). Disse subenheter avledes fra et 45kDa-proenzym (p45) ved hjelp av en p30-Form, ved en aktiveringsmekanisme som er autokatalytisk. Thornberry, N.A. et al., Nature, 356, s,768-774 (1992). ICE-proenzymet er blitt inndelt i flere funksjonelle domener: et prodomene (pl4), en p22/20 subenhet, et polypeptidisk bindeledd og en plO-subenhet. Thornberry et al. , supra; Casano et al., Genomics, 20, s. 474-481 (1994).
Fullengde-p45 er blittkarakterisert vedsitt cDNA og sine aminosyresekvenser. PCT-patentsøknadene WO 91/15577 og WO 94/00154. p20-Og plO-CDNA og aminosyresekvensene er også kjent. Thornberry et al., supra. ICE fra mus og rotter er også blitt sekvensert og klonet. De har høy aminosyre- og nukleinsyresekvenshomologi med humant ICE. Miller, D.K. et al., Ann. N. Y. Acad. Sei., 696, s. 133-148 (1993); Molineaux, S.M. et al., Proe. Nat. Acad. Sei., 90, s. 1809-1813 (1993) . Den tre-dimensjonale struktur av ICE er blitt påvist ved atomisk resolution ved hjelp av røntgen krystallografi. Wilson, K.P., et al., Nature, 370, s. 270-275 (1994) . Det aktive enzym forekommer som en tetramer av to p20- og to pl0-subenheter.
Nylig er ICE og andre medlemmer av ICE/CED-3-familien blitt forbundet med omdannelsen av pro-IGIF til IGIF eller med produksjonen av IFN-y in vivo (PCT-Søknad PCT/US96/20843, publikasjon nr. WO 97/22619. IGIF syntetiseres ihvivo som forløperproteinet "pro-IGIF".
Interferon-gamma-induserende faktor (IGIF) er et tilnærmelsesvis 18-kDa-polypeptid som stimulerer T-celle-produksjonen av interferon-gamma (IFN-y). IGIF produseres av aktiverte Kupffer-celler og makrofager in vivo og eksporteres ut av slike celler ved endotoksinstimulering. Således vil en forbindelse som reduserer IGIF-produksjonen, kunne være nyttig som en inhibitor av slik T-cellestimulering som i sin tur vil kunne redusere nivåene av IFN-y-produksjonen ved hjelp av disse celler.
IFN-y er et cytokin med immunomodulatoriske virkninger på mange forskjellige immune celler. Især er IFN-y involvert i makrofagaktivering og Thl-celleseleksjon (F. Belardelli, APMIS, 103, s. 161 (1995)). IFN-y utøver sine virkninger delvis ved å modulere ekspresjonen av gener via STAT- og IRF-reaksjonsgangen (C. Schindler og J.E. Darnell, Ann. Rev. Biochem., 64, s. 621 (1995); T. Taniguchi, J. Cancer Res. Clin. Oncol., 121, s. 516 (1995)).
Mus som mangler IFN-y eller dets reseptor har multiple defekter i immuncellefunksjonen og er resistente mot endo-toksisk sjokk (S. Huang et al., Science, 259, s. 1742
(1993); D. Dalton et al., Science, 259, s. 1739 (1993); B. D. Car et al., J. Exp. Med., 179, s. 1437 (1994)). Sammen med IL-12 forekommer IGIF å være en kraftig induktor av IFN-y-produksjonen ved hjelp av T-celler (H. Okamura et al., Infection og Immunity, 63, s. 3966 (1995); H. Okamura et al., Nature, 378, s. 88 (1995); S. Ushio et al., J. Immunol., 156, s. 4274 (1996)).
IFN-y har vist seg å bidra til patalogien forbundet med mange forskjellige inflammatoriske, smittsomme og autoimmune lidelser og sykdommer. Således vil forbindelser som er istand til å redusere IFN-y-produksjonen, kunne være nyttige for å lindre virkningene av IFN-y-relaterte patolo-gier.
Følgelig vil preparater og metoder som er istand til å regulere omdannelsen av pro-IGIF til IGIF kunne være nyttige for å redusere IGIF og IFN-y-produksjonen in vivo, og således for å lindre de skadelige virkninger av disse pro-teiner som bidrar til lidelser og sykdommer hos mennesker.
Kaspase-inhibitorer representerer en klasse av forbindelser som er nyttige for å kontrollere inflammasjon eller apoptose eller begge deler. Peptid- og peptidylinhibitorer av ICE er blitt beskrevet (PCT-patentsøknadene WO 91/15577, WO 93/05071, WO 93/09135, WO 93/12076, WO 93/14777,
WO 93/16710, WO 95/35308, WO 96/30395, WO 96/33209 og WO 98/01133; de europeiske patentsøknader 503 561, 547 699, 618 223, 623 592, og 623 606; og US-patenter nr. 5,434,248, 5,710,153, 5,716,929, og 5,744,451). Slike peptidylinhibitorer av ICE er blitt påvist å blokkere produksjonen av maturt IL-ip i en musemodell for inflammasjon ( vide infra) og å undertrykke veksten av leukemiceller in vitro (Estrov et al., Blood, 84, 380a (1994)). Imidlertid er det slik at, på grunn av sin peptidiske natur, er slike inhibitorer vanligviskarakterisert veduønskede farmakologiske egenskaper, så som dårlig cellepenetrasjon og celleaktivitet, dårlig oral absorpsjon, ustabilitet og hurtig metabolisme. Plattner, J.J. og D.W. Norbeck, i Drug Discovery Technologies, CR. Clark og W.H. Moos, Eds. (Ellis Horwood, Chichester, England, 1990), s. 92-126. Disse egenskaper har hemmet deres utvikling til effektive legemidler.
Ikke-peptidyliske forbindelser er blitt beskrevet som inhibitorer av ICE in vitro. PCT-patentsøknad WO 95/26958; US Patent 5,552,400; Dolle et al., J. Med. Chem., 39, s. 2438-2440 (1996).
Det er imidlertid ikke klart hvorvidt disse forbindelser har de egnede farmakologiske profiler slik at de vil være terapeutisk nyttige.
Følgelig foreligger det et behov for forbindelser som effektivt kan inhibere kaspaser, og som har gunstig aktivitet in vivo, slik at de kan brukes som midler for å forebygge og behandle kroniske og akutte former av IL-1-, apoptose-, IGIF- eller IFN-y-mediated sykdommer, samt inflammatoriske, autoimmune og destruktive bensykdommer, proliferative, smittsomme eller degenerative sykdommer.
Oppsummering av oppfinnelsen
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer nye klasser av forbindelser, og farmasøytisk akseptable derivater derav, som er nyttige som kaspase-inhibitorer, spesielt, som ICE-inhibitorer. Disse forbindelser kan anvendes alene eller i kom binasjon med andre terapeutiske eller profylaktiske midler, så som antibiotika, immunomodulatorer eller andre anti-inflammatoriske midler, for behandling eller profylakse av sykdommer mediert av IL-1, apoptose, IGIF eller IFN-y. I henhold til en foretrukken utførelsesform er forbindelsene ifølge denne oppfinnelse istand til å bindes til det aktive sete i en kaspase og å inhibere aktiviteten av enzymet.
Det er et vesentlig formål ved denne oppfinnelse å tilveiebringe nye klasser av forbindelser representert ved formel I, hvilke har gunstige profiler in vivo:
hvori
(A) Y er
(a)
eller
(b)
X er -C(R3)2- eller -N(R3)-; RI er H, -R8, -C(0)R8, -C(0)C(0)R8, -S(0)2R8, -S(0)R8, -C(0)0R8, -C(0)N(H)R8, -S (0) 2N (H)-R8, -S (0) N (H)-R8 , -C(0)C(0)N(H)R8, -C(0)CH=CHR8, -C(0)CH20R8, -C(0)CH2N(H)R8, -C(0)N(R8)2, -S (0) 2N (R8) 2, -S(0)N(R8)2, -C (0) C (0) N (R8) 2, -C(0)CH2N(R8)2, -CH2R8, -CH2-(C2-C6)alkenyl-R8 eller -CH2- (C2-C6) alkynyl-R8; R2 er -H, og hver R3 er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R8, (C2-C6) alkenyl-R9 eller (C2-C6) alkynyl-R9, eller R2 og en R3, sammen med atomet som de er bundet til, danner et 3- til 7-leddet cyklisk eller heterocyklisk ringsystem hvor heteroatomene uavhengig er svovel, nitrogen eller oksygen, hvori et hydrogenatom som er bundet til ethvert -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -RIO, et hydrogenatom som er bundet til ethvert -aryl-eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med - Ril, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -RI; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, - (CH2)3NH (=NH)NH2, -CH2C (=0)NH2, -CH2C(=0)0H, -CH2SH, - (CH2)2C (=0)NH2, - (CH2)2C(=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH (CH3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH20H, -CH(0H)CH3, -CH(CH3)2;
R7 er -OH, -0R8 eller -N(H)0H;
hver RIO er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02,
-CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H)C(0)NH2, -(Cx-C6) perf luoralkyl, -0- (Ci-C6) alkyl, -0-(C6-Ci4) aryl, -0-(Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N (H) (Ci-C6) alkyl, -N (H) (C6-Cn) aryl, -N (H) - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -C(0)N (H) (Ci-C6) alkyl, -C(0)N ( (Ci-C6) alkyl)2, -N (H) C (0) (Ci-C6) alkyl, -N (H) C (0) N (H) (Ci-C6) alkyl, -N (H) C (0) N ( (Ci~ C5)alkyl2, -S-(d-C6) alkyl, -S-(C6-Cn) aryl, -S-(Ci-C6) alkyl (C6-Cn) aryl, -S (0) 2 (Ci-C6) alkyl, -S (0) (Ci-Ce) alkyl, -C (0) (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N (H) (d-C6) alkyl, -CH2N((CX-C6) alkyl) 2, - (Ci-C6) alkyl, - (C5-Ci0) cykloalkyl, - (C6-Ci4) aryl, - (C1-C15) heteroaryl, - (C1-C15) heterocyklyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) cykloalkyl - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, - (Ci-C6) alkyl (Ci-C15) heteroaryl eller - (Ci-C6) alkyl (C1-C15) heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til et -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med Ril og et hydrogenatom bundet til et nitrogenatom er eventuelt erstattet med RI; eller
B) Y er:
X er -C(R3)2- eller -N(R3)-; RI er H, -R8, -C(0)R8, -C(0)C(0)R8, -S(0)2R8, -S(0)R8, -C(0)0R8, -C(0)N(H)R8, -S (0) 2N (H) -R8, -S (0) N (H) -R8, -C(0)C(0)N(H)R8, -C(0)CH=CHR8, -C(0)CH20R8, -C(0)CH2N(H)R8, -C(0)N(R8)2, -S (0) 2N (R8) 2, -S(0)N(R8)2, -C (0) C (0) N (R8 ) 2, -C (0)CH2N(R8)2, -CH2R8, -CH2-(C2-C6)alkenyl-R8 eller -CH2- (C2-C6) alkynyl-R8; R2 er -H, og hver R3 er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R<8>, (C2-C6) alkenyl-R9 eller (C2-C6) alkynyl-R9, eller R2 og én R3 sammen med atomene som de er bundet til, danner et 3- til 7-leddet cyklisk eller heterocyklisk ringsystem hvor heteroatomene uavhengig er svovel, nitrogen eller oksygen, hvori et hydrogenatom som er bundet til ethvert -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<11>, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -R<1>; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, -(CH2)3NH (=NH)NH2, -CH2C(=0)NH2, -CH2C (=0)OH, -CH2SH, -(CH2)2C(=0)NH2, -(CH2)2C(=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH (CH3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH20H, -CH(0H)CH3,
og -CH(CH3)2; hver RIO er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H)C (0)NH2, -perf luoralkyl, -0- (d-C6) alkyl, -0- (C6-d4) aryl, -0- (Ci-C6) alkyl (C6-Cn) aryl, -N (H) (Ci-C6) alkyl, -N (H) (C6-Cn) aryl, -N(H)-(Ci-C6) alkyl (C6-C14)aryl, -N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -C(0)N(H)-(Ci-C6) alkyl, -C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -N (H) C (0) (Ci-C5) alkyl, -N (H) C (0) N (H) (d-Cs) alkyl, -N (H) C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -S-(d-C6) alkyl, -S-(C6-Ci4) aryl, -S- (Ci-C6) alkyl (C6-C14) aryl, -S (0)2- (Ci-C6) alkyl, -S (0) - (d-C6) alkyl, -C (0) - (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N (H) (Cx-Cs) alkyl eller -CH2N ( (Ci-C6) alkyl) 2 , (Ci-C6) -alkyl, - (C5-C10) cykloalkyl, (C6-Cn) -aryl, (Ci-
C15) -heteroaryl, - (C1-C15) heterocyklyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) - cykloalkyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) aryl, - (Ci-C6) alkyl (C1-C15) - heteroaryl eller - (Ci-C6) alkyl (C1-C15) heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med Ril, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med RI; eller
C) Y er:
(a)
(b)
X er -C(R<3>)2-
Rl er H, -R8, -C(0)R8, -C (0) C (0) R8, -S(0)2R8, -S(0)R8,
-C(0)0R8, -C(0)N(H)R8, -S (0) 2N (H) -R8, -S (0) N (H) -R8, -C(0)C(0)N(H)R8, -C(0)CH=CHR8, -C(0)CH20R8, -C(0)CH2N(H)R8, -C(0)N(R8)2, -S(0)2N(R8)2, -S(0)N(R8)2, -C(0)C(0)N(R8)2, -C (0)CH2N(R8)2, -CH2R8, -CH2-(C2-C6)alkenyl-R8 eller -CH2- (C2-C6) alkynyl-R8; R<2>er -H, og hver R<3>er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R<8>, (C2-C6) alkenyl-R9 eller (C2-C6) alkynyl-R9, hvori ethvert hydrogenatom bundet til et -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<11>, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -R<1>; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, - (CH2) 3NH (=NH) NH2, -CH2C(=0)NH2, -CH2C(=0)OH, -CH2SH, -(CH2)2C(=0)NH2, -(CH2)2C(=0)OH, -CH(CH3)CH2CH3, -CH2CH (CH3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH20H, -CH(0H)CH3,
og -CH(CH3)2; R7 er -OH, -OR<8>eller -N(H)0H; hver RIO er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H)C (0)NH2, -(Ci~C6) perf luoralkyl, -0- (Ci-C6) alkyl, -0- (C6-C14) aryl, -0-(Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N (H) (Ci-C6) alkyl, -N (H) (C6-Ci4) aryl, -N (H) - (d-Ce) alkyl (C6-d4) aryl, -N ( (d-C6) alkyl) 2, -C (0)N (H) (d-C6) alkyl, -C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2 , -N (H) C (0) - (d-C6) alkyl, -N(H)C(0)N(H) (d-C6)alkyl, -N (H) C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -S-(Ci-C6) alkyl, -S- (C6-d4) aryl, -S-(d-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -S (0) 2-(Ci-C6) alkyl, -S (0) - (d-C6) alkyl, -C (0) - (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N (H) - (d"C6) alkyl, -CH2N ( (Ci-C6) alkyl) 2, - (Ci-C6) alkyl, - (C5-Ci0) cykloalkyl, - (C6-Ci4) aryl, - (C1-C15) heteroaryl, - (C1-C15) heterocyklyl, - (Ci-d) alkyl (C5-C10) cykloalkyl - (d-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, - (Ci-C6) alkyl (Ci-Ci5) heteroaryl eller - (Ci-C6) alkyl (C1-C15) - heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med Ril, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med RI; og forutsatt at om enR<3>er -H, så er den andre R<3>ikke -H; eller
D) Y er:
X er -C(R<3>)2-
Rl er H, -C(0)R8, -C (0) C (0) R8, -S(0)2R8, -S(0)R8, -C(0)0R8,
-C(0)N(H)R8, -S(0)2N(H)-R8, -S(0)N(H)-R8 , -C (0)C (0)N(H)R8, -C(0)CH=CHR8, -C(0)CH20R8, -C(0)CH2N(H)R8, -C(0)N(R8)2, -S(0)2N(R8)2, -S(0)N(R8)2, -C(0)C(0)N(R8)2, -C(0)CH2N(R8)2, -CH2R8, -CH2-(C2-C6)alkenyl-R8 eller -CH2-(C2-C6)alkynyl-R8; R<2>er -H, og hver R<3>er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R8, (C2-C6) alkenyl-R<9>eller (C2-C6) alkynyl-R<9>, hvori et hydrogenatom bundet til et -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<10>, et hydrogenatom bundet til et -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<11>, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -R<1>; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, - (CH2) 3NH (=NH) NH2, -CH2C(=0)NH2, -CH2C(=0)0H, -CH2SH, -(CH2)2C(=0)NH2, -(CH2)2C(=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH (CH3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH20H, -CH(0H)CH3,
og -CH (CH3)2; hver R<10>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H) C (0) NH2, - (Ci-C4)perfluoralkyl, -0-(Ci-C6) alkyl, -0- (C6-Ci4) aryl, -0-(Ci-C6) alkyl (C6-C14) aryl, -N(H) (Ci-C6) alkyl, -N(H) (C6-C14) aryl, -N(H) - (Ci-C6) alkyl (C6-C14) aryl, -N (Ci-C6) alkyl) 2, -C(0)N(H) (Ci-C6) alkyl, -C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -N (H) C (0) - (Cx-C6) alkyl, -N (H) C (O)N(H (Ci-C6) alkyl, -N (H) C (0) N ( (Ci-C6)alkyl)2, -S-(Ci-C6) alkyl, -S-(C6-Ci4) aryl, -S-(Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -S (0) 2 (Ci-C6) alkyl, -S (0) (Ci-C6) alkyl, -C (0 (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N(H)- (d-C6) alkyl, -CH2N((Ci-C6)alkyl)2, - (Ci-C6) alkyl, - (C5-Ci0) cykloalkyl, - (C6-C14) aryl, (C1-C15) heteroaryl, (C1-C15) heterocyklyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) cykloalkyl, - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, - (Ci-C6) alkyl (Ci-C15) heteroaryl eller - (C1-C6) alkyl (C1-C15) heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med Ril, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet medR<1>;og
hvor
m er 0 eller 1;
R4 og en R<5>sammen med atomene til hvilke de er bundet danner et ringsystem valgt fra og den andre R<5>er H, hvor et hydrogenatom bindet til ethvert nitrogenatom av ringsystemet eventuelt er erstattet med R<1>, eller R4 og en R<5>sammen med atomene til hvilke de er bundet danner et ringsystem
og den andre R5 er H;
R6 er -H;
Hver R<8>er uavhengig - (Ci-Ce) alkyl, - (C5-C10) -cykloalkyl, -
(C6-C14) aryl, - (C1-C15) heteroaryl, - (C1-C15) heterocyklyl, -
(Cx-Cs) alkyl (C5-C10)-cykloalkyl, - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -
(Ci-C6) alkyl (Ci-Ci5) heteroaryl eller - (d-C6) alkyl (Ci-ds)heterocyklyl, hvor et hydrogenatom bundet til ethvert alkyl eller cykloalkyl karbonatom er eventuelt erstattet med R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert aryl eller heteroaryl karbonatom er eventuelt erstattet med R11, og et hydrogenatom bindet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet medR<1>;
hver R<9>er uavhengig - (d~d4) aryl, - (d_ds) heteroaryl, -
(C5-C10) cykloalkyl eller - (d_ds) heterocylkyl, hvor et hydrogenatom bundet til ethvert alkyl eller cykloalkyl karbonatom er eventuelt erstatt av R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert aryl eller heteroaryl karbonatom er eventuelt erstattet med R<11>, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med R<1>;
hver R<11>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N(H)C(0)NH2, -(Ci-C5) alkyl, - (C5-C10) cykloalkyl, - (Ci-C6) perf luoralkyl, -0- (Ci-C6) alkyl, -0- (C6-d4) aryl, -0- (Ci-C6) alkyl (C6-d4) aryl, -N(H) (Ci-C6) alkyl, -N (H) (C6-d4) aryl, -N (H) - (d-C6) alkyl (C6-C14)aryl, -N ( (d-C6) alkyl) 2, -C (0) N (H) (d-C6) alkyl,
-C (0)N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -N(H)C(0) (Ci-C6) alkyl,
-N (H) C (0) N (H) (Ci-Ce) alkyl, -N (H) C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -S-(Ci-Cs) alkyl, -S- (C6-d4) aryl, -S-(Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -S (0) 2 (Ci-C6) alkyl, -S (0) (Ci-C6) alkyl, -C (0) (Ci-Cs) alkyl, -CH2NH2, -CH2N (H) (Ci-C5) alkyl eller -CH2N ( (Ci-C6) alkyl) 2 ; og
R<12>er -C (0) (Ci-C6) alkyl, -C (0) (C5-C10) cykloalkyl, -C(0)(Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -C(0) (Cx-C6) alkyl (C1-C15) heteroaryl,
-C (0) (C1-C15) heterocyklyl eller -C(0) (Ci-C6) alkyl (Ci-
C15) heterocyklyl.
Det er et ytterlige formål ved denne oppfinnelse å tilveiebringe farmasøytiske sammensetninger, inklusive multi-kom-ponentsammensetninger.
Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen
Foråt oppfinnelsen beskrevet heri kan bli bedre forstått, angis følgende detaljerte beskrivelse.
Følgende forkortelser og definisjoner anvendes gjennomgå-ende i beskrivelsen.
Forkortelser
Uttrykket "kaspase" refererer til et enzym som er et medlem av familien av enzymer som omfatter ICE (se H. Hara, Nati. Acad. Sei., 94, s. 2007-2012 (1997)).
Uttrykkene "HBV", "HCV" og "HGV" refererer til hepatitt-B-virus, hepatitt-C-virus henholdsvis hepatitt-G-virus.
Uttrykket "Kj_" refererer til et numerisk mål på effektiviteten av en forbindelse når det gjelder å inhibere aktiviteten av et målenzym så som ICE. Lave verdier av Kj_ reflek-terer høy effektivitet. K-j_-verdien avledes ved å tilpasse eksperimentelt bestemte hastighetsdata til standard enzyma-tiske kinetiske ligninger (se I. H. Segel, Enzyme Kinetics, Wiley-interscience, 1975).
Uttrykket "interferon gamma-induserende faktor" eller "IGIF" refererer til en faktor som er istand til å stimu-lere endogen produksjon av IFN-y.
Uttrykket "kaspase-inhibitor" refererer til en forbindelse som er istand til å oppvise påvisbar inhibisjon av én eller flere kaspaser. Uttrykket "ICE-inhibitor" refererer til en forbindelse som er istand til å oppvise påvisbar inhibisjon av ICE og eventuelt én eller flere ytterligere kaspaser. Inhibisjon av disse enzymer kan bestemmes under anvendelse av metodene beskrevet ifølge referansene heri.
Fagmannen vil forstå at en enzyminhibitor in vivo er ikke nødvendigvis en enzyminhibitor in vitro. For eksempel oppviser en medisinforløperform av en forbindelse vanligvis liten eller ingen aktivitet i undersøkelser in vitro. Slike medisinforløperformer kan endres ved metaboliske eller andre biokjemiske prosesser i pasienten og tilveiebringe en ICE-inhibitor in vivo.
Uttrykket "cytokin" refererer til et molekyl som medierer interaksjoner mellom celler.
Uttrykket "tilstand" refererer til enhver sykdom, lidelse eller effekt som fremkaller skadelige biologiske kon-sekvenser i et individ.
Uttrykket "individ" refererer til et dyr eller til én eller flere celler avledet fra et dyr. Fortrinnsvis er dyret et pattedyr, mest foretrukket et menneske. Cellene kan være i enhver form, inklusive, men ikke begrenset til celler til-bakeholdt i vev, celleopphopninger, immortaliserte celler, transfekterte eller transformerte celler og celler avledet fra et dyr som er blitt fysisk eller fenotypisk endret.
Uttrykket "pasient" anvendt i denne ansøkning refererer til ethvert pattedyr, fortrinnsvis mennesker.
Uttrykket "alkyl" refererer til et rettkjedet eller forgre-net, mettet alifatisk hydrokarbon inneholdende 1 til 6 karbonatomer.
Uttrykket "alkenyl" refererer til et rettkjedet eller for-grenet umettet hydrokarbon inneholdende 2 til 6 karbonatomer og minst én dobbeltbinding.
Uttrykket "alkynyl" refererer til et rettkjedet eller for-grenet umettet hydrokarbon inneholdende 2 til 6 karbonatomer og minst én trippelbinding.
Uttrykket "cykloalkyl" refererer til et mono- eller polycyklisk, ikke-aromatisk, hydrokarbonringsystem som kan eventuelt inneholde umettede bindinger i ringsystemet. Eksempler omfatter cykloheksyl, adamantyl, norbornyl og spirocyklopentyl.
Uttrykket "aryl" refererer til et mono- eller polycyklisk ringsystem som inneholder 6, 10, 12 eller 14 karboner hvori minst én ring i ringsystemet er aromatisk. Arylgruppene ifølge denne oppfinnelse er eventuelt substituert en eller flere ganger med R^. Eksempler på arylringsystemer omfatter fenyl, naftyl og tetrahydronaftyl.
Uttrykket "heteroaryl" refererer til et mono- eller polycyklisk ringsystem som inneholder 1 til 15 karbonatomer og 1 til 4 heteroatomer, og hvori minst én ring i ringsystemet er aromatisk. Heteroatomene er svovel, nitrogen eller oksygen. Heteroarylgruppene ifølge denne oppfinnelse er eventuelt substituert en eller flere ganger med R^.
Uttrykket "heterocyklisk" refererer til et mono- eller polycyklisk ringsystem som inneholder 1 til 15 karbonatomer og 1 til 4 heteroatomer, hvori det mono- eller polycykliske ringsystem eventuelt kan inneholde umettede bindinger, men det er ikke aromatisk. Heteroatomene er uavhengig svovel, nitrogen eller oksygen.
Uttrykket "alkylaryl" refererer til en alkylgruppe, hvori et hydrogenatom i alkylgruppen er erstattet med et aryl-radikal.
Uttrykket "alkylheteroaryl" refererer til en alkylgruppe, hvori et hydrogenatom i alkylgruppen er erstattet med et heteroarylradikal.
Uttrykket "aminosyresidekjede" refererer til enhver gruppe bundet til a-karbonatomet i en naturlig eller ikke-naturlig forekommende aminosyre.
Uttrykket "substituere" refererer til å erstatte et hydrogenatom i en forbindelse med en substituentgruppe.
Uttrykket "rettkjedet" refererer til en tilstøtende ufor-grenet kjede av kovalent bundne atomer. Den rette kjede kan være substituert, men disse substituenter er ikke en del av den rette kjede.
I de kjemiske formler anvendes her parenteser for å betegne konnektivitet i molekylene eller gruppene. Spesielt anvendes parentesene for å betegne: 1) at mer enn ett atom eller én gruppe er bundet til et spesielt atom; eller 2) et knu-tepunkt (dvs. atomet umiddelbart før den åpne parentes er bundet både til atomet eller gruppen i parentesen og atomet eller gruppen umiddelbart etter den lukkede parentes). Et eksempel på den første anvendelse er "-N (alkyl)2", som angir to alkylgruppebindinger til et N-atom. Et eksempel på den andre anvendelse er "-C(0)NH2", som angir en karbonyl-gruppe og en aminogruppe ("NH2") begge bundet til det angitte karbonatom. En "-C(0)NH2"-gruppe kan være representert på andre måter, inklusive følgende struktur:
Substituentene kan være representert i forskjellige former. Disse forskjellige former er kjent for fagmannen og kan anvendes om hverandre. For eksempel kan en metylsubstituent på en fenylring være representert i en av de følgende former :
Forskjellige former av substituenter så som metyl anvendes heri om hverandre.
Andre definisjoner er angitt i beskrivelsen hvor det er nødvendig.
Forbindelser ifølge denne oppfinnelse
Forbindelsene i en utførelsesform A ifølge denne oppfinnelse har formel I:
hvori:
(A) Y er
eller (b) X er -C(R<3>)2~eller -N(R<3>)-;R<1>er H, -R<8>, -C(0)R8, -C(0)C(0)R<8>, -S(0)2R<8>, -S(0)R8, -C(0)OR<8>, -C(0)N(H)R<8>, -S (0) 2N (H)-R8, -S (0) N (H)-R8, -C(0)C(0)N(H)R<8>, -C(0)CH=CHR<8>, -C(0)CH2OR<8>, -C (0)CH2N(H)R8, -C(0)N(R<8>)2, -S (0)2N (R8)2, -S(0)N(R<8>)2, -C(0)C(0)N(R<8>)2, -C (0)CH2N(R8)2, -CH2R<8>, --CH2-(C2-C6) alkenyl-R8 eller -CH2-(C2-C6) alkynyl-R8 ;
R<2>er -H, og hver R<3>er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R<8>, (C2-C6) alkenyl-R9 eller (C2-C6) alkynyl-R9, eller R og en R<3>, sammen med atomet som de er bundet til, danner et 3- til 7-leddet cyklisk eller heterocyklisk ringsystem hvor heteroatomene uavhengig er svovel, nitrogen eller oksygen, hvori et hydrogenatom som er bundet til ethvert -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -rIO, et hydrogenatom som er bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -RH, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -R<1>; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra
-H, -CH3, - (CH2)3NH(=NH)NH2, -CH2C (=0)NH2, -CH2C(<=>0)0H, -CH2SH, - (CH2) 2C(=0)NH2, - (CH2)2C(=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH (CH3)2 1 -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH2OH, -CH(OH)CH3, -CH (CH3)2;R<7>er -OH, -OR<8>eller -N(H)OH; hverR<10>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H)C (0)NH2, -(Ci-C6) perf luoralkyl, -0- (Ci-C6) alkyl, -0- (C6-Ci4) aryl, -0- (Ci~ C6) alkyl (C5-Ci4) aryl, -N (H) (Ci-C6) alkyl, -N (H) (C6-Ci4) aryl, -N(H) - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -C(0)N(H) (Ci-C6) alkyl, -C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2 , -N (H) C (0) (Ci-C6) alkyl, -N(H)C(0)N(H) (Ci-C6)alkyl, -N (H) C (0) N ( (Ci-C6)alkyl2, -S-(Ci-C6) alkyl, -S-(C6-Ci4) aryl, -S-(Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -S (0) 2 (Ci-C6) alkyl, -S (0) (Ci-C6) alkyl, -C (0) (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N (H) (Ci-C6) alkyl, -CH2N((Ci-C6) alkyl) 2, - (Ci-C6) alkyl, - (C5-C10) cykloalkyl, - (C6-Ci4) aryl, - (C1-C15) heteroaryl, - (C1-C15) heterocyklyl, - (Cx-Ce) alkyl (C5-C10) cykloalkyl - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, - (Ci-C6) alkyl (Ci-C15) heteroaryl eller - (Ci-Cs) alkyl (C1-C15) heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til et -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med RH og et hydrogenatom bundet til et nitrogenatom er eventuelt erstattet med Ri; eller
B)
Y er:
X er -C(R<3>)2~eller -N(R<3>)-;R<1>er H, -R8, -C(0)R8, -C(0)C(0)R<8>, -S(0)2R<8>, -S(0)R8, -C(0)OR<8>, -C(0)N(H)R<8>, -S (0) 2N (H)-R8, -S (0) N (H) -R8, -C (0)C (0)N(H)R8, -C(0)CH=CHR<8>, -C(0)CH2<O>R<8>, -C(0)CH2N(H)R<8>, -C(0)N(R<8>)2, -S(0)2N(R<8>)2, -S(0)N(R<8>)2, -C (0) C (0) N (R8 ) 2, -C (0)CH2N(R8)2, -CH2R8,-CH2"(C2-C6)alkenyl-R8 eller -CH2- (C2-C5) alkynyl-R8;R<2>er -H, og hver R<3>er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R<8>, (C2-C6) alkenyl-R9 eller (C2-C6) alkynyl-R9, eller R<2>og én R<3>sammen med atomene som de er bundet til, danner et 3- til 7-leddet cyklisk eller heterocyklisk ringsystem hvor heteroatomene uavhengig er svovel, nitrogen eller oksygen, hvori et hydrogenatom som er bundet til ethvert -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<11>, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -R<1>; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, -(CH2)3NH(=NH)NH2,
-CH2C (=0)NH2, -CH2C(=0)0H, -CH2SH, - (CH2)2C (=0)NH2,
-(CH2)2C(=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH (CH3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH20H, -CH(0H)CH3,
og -CH(CH3)2<;> hver R<10>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H)C(0)NH2, -perf luoralkyl, -0-(d-C6) alkyl, -0-(C6-Ci4) aryl, -0-(d-C6) alkyl (C6-Cn) aryl, -N (H) (d-C6) alkyl, -N(H) (C6-C14) aryl, -N (H) - (d"C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N( (Ci-C6)alkyl)2, -C (0) N (H) - (d"C6) alkyl, -C(0)N((d"C6)alkyl)2, -N (H) C (0) (d-C6) alkyl, -N (H) C (0) N (H) (d-C6) alkyl, -N(H)C(0)N( (Ci-C6)alkyl)2, -S-(d-C6) alkyl, -S-(C6-Ci4) aryl, -S-(d-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -S(0)2-(Ci-C6) alkyl, -S (0) - (Ci-C6) alkyl, -C (0) - (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N (H) (d-C6) alkyl eller -CH2N((CX-C6) alkyl) 2, (Ci-C6) -alkyl, - (C5-C10) cykloalkyl, (C5-Ci4)-aryl, (Ci-Cis)-heteroaryl, - (Ci-Cis) heterocyklyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) cykloalkyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) - aryl, - (Ci-C6) alkyl (C1-C15) heteroaryl eller - (Ci~
C6) alkyl (C1-C15) heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med R<11>, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med R<1>; eller
C) Y er:
(a)
(b)
X er -C(R<3>)2-
R<1>er H, -R<8>, -C(0)R8, -C(0)C(0)R<8>, -S(0)2R<8>, -S(0)R8, -C(0)OR<8>, -C(0)N(H)R<8>, -S (0) 2N (H)-R8, -S (0) N (H) -R8, -C (0)C (0)N(H)R8, -C (0)CH=CHR8, -C(0)CH2OR<8>, -C(0)CH2N(H)R8, -C(0)N(R<8>)2, -S (0)2N (R8)2, -S(0)N(R<8>)2, -C (0)C (0)N (R8)2, -C (0)CH2N (R8)2, -CH2R<8>, -CH2-(C2-C6) alkenyl-R8 eller -CH2-(C2-C6) alkynyl-R8;
R<2>er -H, og hver R<3>er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R<8>, (C2-C6) alkenyl-R9 eller (C2-C6) alkynyl-R9, hvori ethvert hydrogenatom bundet til et -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R10, et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R11, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -R<1>; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, - (CH2) 3NH (=NH) NH2,
-CH2C (=0) NH2, -CH2C(=0)0H, -CH2SH, - (CH2 ) 2C (=°) NH2 '
- (CH2)2C(=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH20H, -CH(0H)CH3,
og -CH(CH3)2<;>R<7>er -OH, -OR<8>eller -N(H)0H; hver R<10>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, -NH2, -CO2H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H)C(0)NH2, - (Ci-C6) perf luoralkyl, -0- (Ci-C6) alkyl, -0-(C6-d4) aryl, -0-(Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N(H) (Ci-C6) alkyl, -N(H) (C6-Ci4) aryl, -N (H) - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N( (Ci-C5)alkyl)2, -C (0) N (H) (d-C6) alkyl, -C(0)N((C1-C6)alkyl)2/-N(H)C(0)-(Ci-C5)alkyl, -N (H) C (0) N (H) (Ci-C6) alkyl, -N(H)C(0)N( (C1-C6)alkyl)2, -S-(d-C6) alkyl, - S- (C6-Ci4) aryl, -S-(Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -S(0)2-(d-C6) alkyl, -S (0) - (Ci-C6) alkyl, -C (0) - (d~C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N (H) - (d-Ce) alkyl, -CH2N ( (Ci-C6) alkyl)2, - (d-d) alkyl, - (C5-d0) cykloalkyl, - (d~d4) aryl, - (d~ C15) heteroaryl, - (d-d5) heterocyklyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) cykloalkyl - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, - (Ci-C6) alkyl-(d-d5) heteroaryl eller - (d-C6) alkyl (C1-C15)-heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med R<11>, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med Ri; og forutsatt at om en
R<3>er -H, så er den andre R<3>ikke -H; eller
D) Y er:
X er -C (R3) 2-
R<1>er H, -C(0)R<8>, -C(0)C(0)R<8>, -S(0)2R<8>, -S(0)R8, -C(0)OR<8>,
-C(0)N(H)R<8>, -S (0) 2N (H) -R8, -S (0) N (H) -R8, -C(0)C(0)N (H)R8, -C(0)CH=CHR8, -C(0)CH2OR<8>, -C(0)CH2N(H)R8,-C(0)N(R<8>)2, -S(0)2N(R8)2, -S(0)N(R<8>)2, -C(0)C(0)N(R<8>)2, -C(0)CH2N(R<8>)2, -CH2R<8>, -CH2-(C2-C6) alkenyl-R8 eller -CH2-(C2-C6) alkynyl-R8;R<2>er -H, og hver R<3>er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R8, (C2-C6) alkenyl-R<9>eller (C2-C6) alkynyl-R<9>, hvori et hydrogenatom bundet til et -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R10, et hydrogenatom bundet til et -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<11>, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -R<1>; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, - (CH2) 3NH (=NH) NH2, -CH2C (=0) NH2, -CH2C(=0)0H, -CH2SH, - (CH2)2C(=0)NH2, -(CH2)2C(=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH (CH3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH2OH, -CH(OH)CH3,
og -CH(CH3)2<;> hver R<10>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H) C (0) NH2, - (Ci~ C4) perf luoralkyl, -0-(Ci-C6) alkyl, -0-(C6-C14) aryl, -0- (Ci-C6) alkyl (C6-Cn) aryl, -N(H) (d-C6) alkyl, -N(H) (C6-Ci4) aryl, -N(H) - (Ci-C6) alkyl (C6-Cn) aryl, -N(d-C6) alkyl) 2, -C(0)N(H) (Ci-Cs) alkyl, -C (0) N ( (d-C6) alkyl) 2, -N (H) C (0) - (d-C6) alkyl, -N (H) C (0) N (H (Ci-C6) alkyl, -N (H) C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -S-(Ci-C6) alkyl, -S-(C6-Ci4) aryl, -S-(d~ C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -S (0) 2 (Ci-C5) alkyl, -S (0) (Ci-C6) alkyl, -C (0 (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N (H) - (Ci-C6) alkyl, -CH2N((d-C6)alkyl)2, - (Ci-C6) alkyl, - (C5-C10) cykloalkyl, - (C6-Ci4) aryl, (C1-C15) heteroaryl, (C1-C15) heterocyklyl, - (d-C6) alkyl (C5-C10) cykloalkyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-Ci4) aryl, - (Ci-C6) alkyl (Ci-C15) heteroaryl eller - (Ci-d) alkyl (C1-C15) heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med Ril, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet medR<1>;og
hvor
m er 0 eller 1;
R<4>og en R<5>sammen med atomene til hvilke de er bundet danner et ringsystem valgt fra og den andre R<5>er H, hvor et hydrogenatom bindet til ethvert nitrogenatom av ringsystemet eventuelt er erstattet med R<1>, eller R4 og en R<5>sammen med atomene til hvilke de er bundet danner et ringsystem
og den andre R^ er H;
R6 er -H;
hver R<8>er uavhengig - ( C1- C5) alkyl, - (C5-C10) -cykloalkyl, -
(C6-Ci4) aryl, - (C1-C15) heteroaryl, - (C1-C15) heterocyklyl, -
(Ci-C6) alkyl (C5-C10)-cykloalkyl, - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -
(Ci-C6) alkyl (C1-C15) heteroaryl eller - (Ci-C6) alkyl (Ci-C15)heterocyklyl, hvor et hydrogenatom bundet til ethvert
alkyl eller cykloalkyl karbonatom er eventuelt erstattet med R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert aryl eller heteroaryl karbonatom er eventuelt erstattet med R11, og et hydrogenatom bindet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med R<1>;
hver R9 er uavhengig - (C6-C14) aryl, - (C6-C15) heteroaryl, -
(C5-C10) cykloalkyl eller - (C1-C15) heterocylkyl, hvor et hydrogenatom bundet til ethvert alkyl eller cykloalkyl karbonatom er eventuelt erstatt av R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert aryl eller heteroaryl karbonatom er eventuelt erstattet med R<11>, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med R<1>;
hver R<11>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H)C(0)NH2, - (Ci-C6) alkyl, - (C5-C10) cykloalkyl, - (Ci-C6) perf luoralkyl, -0- (Ci-C6) alkyl, -0- (C6-Ci4) aryl,
-0-(Ci-C6) alkyl (C6-Cn) aryl, -N (H) (Ci-C6) alkyl,
-N(H) (C6-Ci4) aryl, -N (H) - (Ci-C6) alkyl (C6-C14) aryl,
-N( (Ci-C6)alkyl)2, -C (0) N (H) (Ci-C6) alkyl, -C(0)N((d-C6)alkyl)2, -N(H)C(0) (Ci-C6)alkyl, -N (H) C (0) N (H) (d-C6) alkyl, -N(H)C(0)N( (C1-C6)alkyl)2, -S-(Ci-C6) alkyl, -S- (C6-Ci4) aryl, -S- (Ci-C6) alkyl (C6-C14) aryl, -S (0) 2 (d-C6) alkyl, -S (0) (d-C6) alkyl, -C (0) (d-C6) alkyl,
-CH2NH2, -CH2N (H) (Ci-d) alkyl eller -CH2N((Ci-
C6) alkyl)2; og
R12 er -C (0) (Ci-C6) alkyl, -C (0) (C5-C10) cykloalkyl, -C (0) (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -C(0) (d-C6) alkyl (Ci-Cis) heteroaryl, -C(0) (Ci-C15) heterocyklyl eller -C(0)
(Ci-C6) alkyl (C1-C15) heterocyklyl.
Foretrukne forbindelser av utførelsesformene (B) eller (D) er de forbimdelser hvori Y er:
hvori Z representerer -OR<8>, og Z er: CH3O,
Spesifikke forbindelser ifølge denne oppfinnelse omfatter eksemplene 5a-5bd, 7a-7at, 9a-9g, 15a-15f, 16a-16b, 17a-17e, 18a-18f, 20a-20t, 23a-23i, 24a-24e, 25a-25e, 26a-26h, 27a-27n, 28a-28c, 29a-29s, 32a-32e, 34, Gl, G2, 41, 42, 45, 46, 51, 52, 56, 57, 60, 61, 64, 65, 68, 69, 72, 73, 76-93, 98a-z, aa-az, og ba-bb, 101, 102a, 102b, 108a-d, 110, 111, 116a-H, 120a og b, 121, 122a-v og 123 a-C.
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan inneholde én eller flere "asymmetriske" karbonatomer og kan således opp-tre som racemater og racemiske blandinger, enkeltvise enan-tiomerer, diastereomere blandinger og individuelle diastereomerer. Ethvert stereogent karbon kan ha R- eller S-konfigurasjon. Selv om spesifikke forbindelser og strukturer som er eksemplifisert i denne ansøkning kan være avbildet i en spesiell stereokjemisk konfigurasjon, er forbindelser og strukturer med enten den motsatte stereokjemi ved et gitt chiralt senter eller blandinger derav også innbefattet.
Alle slike isomere former av disse forbindelser er uttrykkelig innbefattet i foreliggende oppfinnelse, liksom farma-søytisk akseptable derivater derav.
Uttrykket "farmasøytisk akseptable derivat" betyr ethvert farmasøytisk akseptabelt salt av en forbindelse ifølge denne oppfinnelse.
Farmasøytisk akseptable salter av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse omfatter for eksempel de salter som er avledet fra farmasøytisk akseptable uorganiske og organiske syrer og baser. Eksempler på egnede syrer omfatter salt-syre, hydrobromsyre, svovelsyre, salpetersyre, perklorsyre, fumarsyre, maleinsyre, fosforsyre, glykolsyre, melkesyre, salicylsyre, ravsyre, toluen-p-sulfonsyre, vinsyre, eddik-syre, sitronsyre, metansulfonsyre, maursyre, benzosyre, malonsyre, naftalen-2-sulfonsyre og benzensulfonsyre. Andre syrer, så som oksalsyre, selv om de i seg selv ikke er far-masøytisk akseptable, kan anvendes i fremstillingen av salter som er nyttige som mellomprodukter ved fremstillingen av forbindelsene ifølge oppfinnelsen og deres farma-søytisk akseptable syreaddisjonssalter. Salter avledet fra egnede baser omfatter alkalimetall- (f.eks. natrium), jord-alkalimetall- (f.eks. magnesium), ammonium- og N-(Ci_4-alkyl)4 + -salter.
Denne oppfinnelse omfatter også "kvaternisering" av enhver basisk nitrogenholdig gruppe i forbindelsene beskrevet heri. Det basiske nitrogen kan kvaterniseres med ethvert middel som er kjent for den vanlige fagmann inklusive for eksempel lavere alkylhalogenider, så som metyl-, etyl-, propyl- og butylklorider, -bromider og -jodider; di-alkylsulfater inklusive dimetyl-, dietyl-, dibutyl- og di-amylsulfater; langkjedede halogenider så som decyl-, lauryl-, myristyl- og stearylklorider, -bromider og -jodider; og aralkylhalogenider inklusive benzyl- og fen-etylbromider. Vann- eller olje-løselige eller dispergerbare produkter kan oppnås ved slik kvaternisering.
Ved multippel substituering kan hver substituent velges uavhengig av andre substituenter forutsatt at kombinasjonen av substituenter resulterer i dannelse av en stabil forbindelse.
Kombinasjoner av substituenter og variabler innbefattet i denne oppfinnelse er bare de som resulterer i dannelse av stabile forbindelser. Uttrykket "stabil", anvendt heri, refererer til forbindelser som innehar en stabilitet som er tilstrekkelig stor til å muliggjøre fremstilling og administrasjon til et pattedyr ved metoder som er kjent i faget. Normalt er slike forbindelser stabile ved en temperatur på 40 °C eller mindre, i fravær av fuktighet eller andre kjemisk reaktive betingelser, i minst en uke.
Foretrukne forbindelser ifølge denne oppfinnelse kan lett absorberes i pasientens blodstrøm ved oral administrasjon. Denne orale tilgjengelighet gjør at slike forbindelser er utmerkede midler for oralt administrert behandlings- og forebyggelseskurer mot IL-1-, apoptose-, IGIF- eller IFN-y-medierte sykdommer.
Det bør være underforstått ar forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan forekomme i forskjellige likevektsformer, avhengig av betingelsene inklusive valg av løsningsmiddel, pH og annet som er kjent den utøvende fagmann. Alle slike former av disse forbindelser er uttrykkelig innbefattet i foreliggende oppfinnelse. Spesielt kan mange av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse, spesielt de som inneholder aldehyd- eller ketongrupper og karboksylsyregrupper i Y, ha hemi-acetal- eller hydratform. For eksempel er forbindelser av utførelsesform A i hemiacetalform når Y er:
Avhengig av valget av løsningsmiddel og andre betingelser som er kjent for den utøvende fagmann, kan forbindelser ifølge denne oppfinnelse også ha hydrat-, acyloksyacetal-, acetal- eller enolform. For eksempel er forbindelser ifølge denne oppfinnelse i hydratform når Y er:
og R<8>er H; acyloksyacetalform når Y er: acetalform når Y er, og R<8>er noe annet enn H: og enolform når Y er:
Dessuten bør det være underforstått at likevektsformene av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan omfatte tauto-mere former. Alle slike former av disse forbindelser er uttrykkelig innbefattet i foreliggende oppfinnelse.
Forbindelsene med formel I kan syntetiseres under anvendelse av konvensjonelle teknikker. Med fordel syntetiseres disse forbindelser med letthet fra lett tilgjengelige ut-gangsmaterialer.
Forbindelser ifølge denne oppfinnelse kan fremstilles under anvendelse av prosessene beskrevet heri. Som forståelig for den utøvende fagmann, er disse prosesser ikke den eneste måte å syntetisere forbindelsene beskrevet og krevet i denne ansøkning. Ytterligere metoder vil være åpenbare for vanlige fagkyndige personer. I tillegg kan de forskjellige syntetiske trinn beskrevet heri utføres i en annen sekvens eller rekkefølge for å gi de ønskede forbindelser.
Det bør være underforstått at forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan modifiseres ved hjelp av passende funk-sjonaliteter for å forsterke selektive biologiske egenskaper. Slike modifikasjoner er kjent i faget og omfatter slike som øker den biologiske penetrasjon inn i et gitt biologisk system (f.eks. blodet, det lymfatiske system, det sentrale nervesystem), øker den orale tilgjengelighet, øker oppløseligheten for å muliggjøre administrasjon ved injeksjon, endrer metabolismen og endrer ekskresjonshastigheten. I tillegg kan forbindelsene endres til medisinforløperform slik at den ønskede forbindelse oppstår i pasientens kropp som et resultat av innvirkningen av metaboliske eller andre biokjemiske prosesser på medisinforløperen. Slike medisinforløperformer oppviser vanligvis liten eller ingen aktivitet i undersøkelser in vitro. Noen eksempler på medisinforløperformer omfatter ketal-, acetal-, oksim-, imin- og hydrazonformen av forbindelser som inneholder keton- eller aldehydgrupper, spesielt hvor de opptrer i Y-gruppen i forbindelsene ifølge denne oppfinnelse. Andre eksempler på medisinforløperformer omfatter hemi-ketal-, hemi-acetal-, acyloksyketal-, acyloksyacetal-, ketal-, acetal- og enolformene som er beskrevet heri .
Sammensetninger og fremgangsmåter
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse er kaspase-inhibitorer, og spesielt ICE-inhibitorer. Følgelig er disse forbindelser istand til å sikte inn og inhibere foreteelser i IL-1-, apoptose-, IGIF- og IFN-y-medierte sykdommer, og således inhibere den ultimate aktivitet av proteinet i inflammatoriske sykdommer, autoimmune sykdommer, bendestruktive sykdommer, proliferative lidelser, infeksjonssykdommer og degenerative sykdommer. For eksempel inhiberer forbindelsene ifølge denne oppfinnelse omdannelsen av forløper-IL-ip til maturt IL-lp ved å inhibere ICE. Fordi ICE er essensielt for produksjonen av maturt IL-1, blokkerer inhibisjon av dette enzym effektivt initieringen av IL-l-medierte fysiologiske virkninger og symptomer, så som inflammasjon, ved å inhibere produksjonen av maturt IL-1. Ved således å inhibere IL-ip-forløperaktiviteten, fungerer forbindelsene ifølge denne oppfinnelse effektivt som IL-l-inhibitorer.
Forbindelser ifølge denne oppfinnelse inhiberer også omdan-nelse av pro-IGIF til aktivt, maturt IGIF ved å inhibere ICE. Fordi ICE er essensielt for produksjonen av maturt IGIF, blokkerer inhibisjon av ICE effektivt initiasjonen av IGIF-medierte fysiologiske virkninger og symptomer ved å inhibere produksjonen av maturt IGIF. IGIF er i sin tur essensielt for produksjonen av IFN-y. ICE blokkerer derfor effektivt initiasjonen av IFN-y-medierte fysiologiske virkninger og symptomer ved å inhibere produksjonen av maturt IGIF og således produksjonen av IFN-y.
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse er overraskende bio-tilgjengelige sammenlignet med peptidylinhibitorer, så som de som er beskrevet i for eksempel EP 618 223, EP 623 592, WO 93/09135, WO 93/16710, US-patent nr. 5,434,248, WO 95/35308 eller WO 96/33209. Således vil de farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse kunne være nyttige for å regulere kaspaseaktiviteten in vivo. Sammensetningene og fremgangsmåtene ifølge denne oppfinnelse vil derfor kunne være nyttige for å regulere IL-1-, IGIF- eller IFN-y-nivåene in vivo og for å behandle eller redusere utbredelsen, alvoret eller virkningene av IL-1-, apoptose-, IGIF- eller IFN-y-medierte tilstander, inklusive sykdommer, lidelser eller virkninger.
Farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse omfatter en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav og en farmasøytisk akseptabel bærer. Slike sammensetninger kan eventuelt omfatte et ytterligere terapeutisk middel. Slike midler omfatter et anti-inflammatorisk middel, en matriksmetalloprotease-inhibitor, en lipoksygenase-inhibitor, en cytokin-antagonist, en immunosuppressant, et anti-cancermiddel, et anti-virusmiddel, et cytokin, en vekstfaktor, en immunomodulator, et prostaglandin eller en anti-vaskulær hyperproli ferasjonsforbindelse.
Uttrykket "farmasøytisk akseptabel bærer" refererer til en ikke-toksisk bærer som kan administreres til en pasient, sammen med en forbindelse ifølge denne oppfinnelse, og som ikke ødelegger den farmakologiske aktivitet derav.
Farmasøytisk akseptable bærere som kan anvendes i de farma-søytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse omfatter ionebyttere, aluminiumoksid, aluminiumstearat, lecitin, serumproteiner, så som humant serumalbumin, buffersubstanser så som fosfater, glycin, sorbinsyre, kaliumsorbat, partielle glyceridblandinger av mettede vegetabilske fettsyrer, vann, salter eller elektrolytter, så som protaminsulfat, dinatriumhydrogenfosfat, kaliumhydrogenfosfat, natriumklorid, sinksalter, kolloid silika, magnesiumtrisilikat, polyvinylpyrrolidon, cellu- lose-baserte substanser, polyetylenglykol, natriumkarboksy-metylcellulose, polyakrylater, vokser, polyetylen-polyoksy-propylen-blokk-polymerer, ullfett og selv-emulgerende medi-kamentavgivende systemer (SEDDS) så som a-tokoferol, polyetylenglykol 1000-succinat eller andre lignende polymere levansematrikser.
I farmasøytiske sammenstninger omfattende bare én forbindelse av utførelsesformene A-D som den aktive komponent,
kan metoder for å administrere disse sammensetninger i tillegg omfatte trinnet å administrere til individet et ytterligere middel. Slike midler omfatter et anti-inflammatorisk middel, en matriksmetalloprotease-inhibitor, en
lipoksygenase-inhibitor, en cytokin-antagonist, en immunosuppressant, et anti-cancermiddel, et anti-virusmiddel, et cytokin, en vekstfaktor, en immunomodulator, et prostaglandin eller en anti-vasculær hyperpro-liferasjonsforbindelse.
Uttrykket "farmasøytisk effektiv mengde" refererer til en mengde som er effektiv i å behandle eller lindre en IL-1-, apoptose-, IGIF- eller IFN-y-mediert sykdom i en pasient. Uttrykket "profylaktisk effektiv mengde" refererer til en mengde som er effektiv i å forebygge eller vesentlig minske IL-1-, apoptose-, IGIF- eller IFN-y-medierte sykdommer i en pasient.
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan anvendes på konvensjonell måte for å regulere IGIF- og IFN-y-nivåene in vivo og for å behandle sykdommer eller redusere utbredelsen eller alvoret av virkningene som medieres av IL-1, apoptose, IGIF eller IFN-y. Slike behandlingsmetoder, deres doseringsnivåer og betingelser kan velges av personer med ordinære kunnskaper i faget fra tilgjengelige metoder og teknikker.
For eksempel kan en forbindelse ifølge denne oppfinnelse kombineres med en farmasøytisk akseptabel adjuvant for administrasjon til en pasient som lider av en IL-l-apoptose-, IGIF- eller IFN-y-mediert sykdom på enfarmasøytisk akseptabel måte og i en mengde som er effektiv i å minske alvoret av sykdommen.
Alternativt kan forbindelsene ifølge denne oppfinnelse anvendes i sammensetninger for å behandle eller beskytte individer mot IL-1, apoptose-, IGIF eller IFN-y medierte sykdommer over en utstrakt tid. Forbindelsene kan anvendes i slike sammensetninger enten alene eller sammen med andre forbindelser ifølge denne oppfinnelse på en måte som er i samsvar med konvensjonell utnyttelse av enzym-inhibitorer i farmasøytiske sammensetninger. For eksempel kan en forbindelse ifølge denne oppfinnelse kombineres med farmasøytisk akseptable adjuvanter som konvensjonelt anvendes i vaksiner og administreres i profylaktisk effektive mengder for å beskytte individer under en utstrakt tids-periode mot IL-1-, apoptose-, IGIF eller IFN-y-medierte sykdommer.
Forbindelsene med formel I kan også ko-administreres med andre kaspase- eller ICE-inhibitorer for å øke virkningen av terapien eller profylaksen på forskjellige IL-1-, apoptose-, IGIF- eller IFN-y medierte sykdommer.
I tillegg kan forbindelsene ifølge denne oppfinnelse anvendes i kombinasjon med enten konvensjonelle anti-inflammatoriske midler eller med matriksmetalloprotease-inhibitorer, lipoksygenase-inhibitorer og antagonister av cytokiner som ikke er IL-ip.
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan også administreres i kombinasjon med immunomodulatorer (f.eks. bropirimin, anti-humant alfa-interferonantistoff, IL-2, GM-CSF, metionin-enkefalin, interferon-alfa, dietylditiokarbamat, tumornekrosefaktor, naltrexon og EPO) , med prostaglandiner eller med antivirale midler (f.eks. 3TC, polysulfaterte polysakkarider, ganiklovir, ribavirin, acyklovir, alfa- interferon, trimetotrexat og fancyklovir) eller medisinfor-løpere for disse eller beslektede forbindelser for å forebygge eller bekjempe IL-l-medierte sykdomssymptomer så som inflammasj on.
Når forbindelsene ifølge denne oppfinnelse administreres i kombinasjonsterapier med andre midler, kan de administreres sekvensielt eller samtidig til pasienten. Alternativt omfatter farmasøytiske eller profylaktiske sammensetninger i henhold til denne oppfinnelse en kombinasjon av en forbindelse med formel I og et annen terapeutisk eller profylaktisk middel.
De farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse kan administreres oralt, parenteralt, ved inhaleringsspray, topisk, rektalt, nasalt, bukkalt, vaginalt eller via et im-plantert reservoar. Vi foretrekker oral administrasjon. De farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse kan inneholde enhver konvensjonell ikke-toksisk farmasøytisk akseptabel bærer, adjuvant eller vehikkel. I noen tilfeller kan pH-verdien i formuleringen innstilles med farmasøytisk akseptable syrer, baser eller buffere for å forsterke sta-biliteten av den formulerte forbindelse eller dens leve-ringsform. Uttrykket parenteral som er anvendt heri, omfatter subkutan, intrakutan, intravenøs, intramuskulær, intra-artikulær, intrasynovial, intrasternal, intratekal, intra-lesjonal og intrakranial injeksjon eller infusion.
De farmasøytiske sammensetninger kan være i form av et sterilt injiserbart preparat, for eksempel som en steril injiserbar vandig eller oljeaktig suspensjon. Denne suspensjon kan formuleres i henhold til teknikker kjent i faget under anvendelse av egnede dispersjons- eller fuktemidler (så som for eksempel Tween 80) og suspensjonsmidler. Det sterile injiserbare preparat kan også være en steril injiserbar løsning eller suspensjon i en ikke-toksisk parenteralt akseptabel diluent eller løsningsmiddel, for eksempel som en løsning i 1,3-butandiol. Blant de akseptable vehikler og løsningsmidler som kan anvendes, er mannitol, vann, Ringers løsning og isotonisk natriumkloridløsning. I tillegg anvendes med fordel sterile, faste oljer som løsningsmiddel eller suspensjonsmedium. For dette formål kan enhver mild fast olje anvendes inklusive syntetiske mono- eller digly-cerider. Fettsyrer, så som oljesyre og dens glyceridderiva-ter er nyttige i fremstillingen av injiserbare midler, liksom naturlige farmasøytisk akseptable oljer, så som oliven-olje eller kastorolje, spesielt deres polyoksyetylerte ver-sjoner. Disse oljeløsninger eller suspensjoner kan også inneholde en langkjedet alkoholdiluent eller dispersant, så som de som er beskrevet i Pharmacopeia Helvetica eller en lignende alkohol.
De farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse kan administreres oralt i enhver oralt akseptabel doseringsform inklusive, men ikke begrenset til, kapsler, tabletter og vandige suspensjoner og løsninger. Vedrørende tabletter for oral anvendelse omfatter bærere som normalt anvendes, laktose og maisstivelse. Smøremidler, så som mag-nesiumstearat, er også vanligvis tilsatt. For oral administrasjon i kapselform omfatter nyttige diluenter laktose og tørket maisstivelse. Når vandige suspensjoner og løsnin-ger og propylenglykol administreres oralt, kombineres den aktive ingrediens med emulgerings- og suspensjonsmidler. Hvis ønskelig, kan visse søtningsstoffer og/eller aroma-stoffer og/eller farvestoffer tilsettes.
De farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse kan også administreres i form av suppositorier for rektal administrasjon. Disse sammensetninger kan fremstilles ved å blande en forbindelse ifølge denne oppfinnelse med en egnet ikke-irriterende eksipiens som er fast ved romstemperatur, men flytende ved den rektale temperatur og derfor vil smelte i rektum og frigi de aktive komponenter. Slike materialer omfatter, men er ikke begrenset til, kakaosmør, bivoks og polyetylenglykoler.
Topisk administrasjon av de farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse er spesielt nyttige når den ønskede behandling involverer områder eller organer som er lett tilgjengelige ved topisk applikasjon. For applikasjon topisk på huden bør den farmasøytiske sammensetning formuleres med et egnet salve inneholdende de aktive komponenter suspendert eller oppløst i en bærer. Bærere for topisk administrasjon av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse omfatter, men er ikke begrenset til, mineralolje, flytende petroleum, hvit petroleum, propylenglykol, polyoksyetylen-polyoksypropylenforbindelse, emulgerende voks og vann. Alternativt kan den farmasøytiske sammensetning formuleres med en egnet lotion eller krem inneholdende den aktive forbindelse suspendert eller oppløst i en bærer. Egnede bærere omfatter, men er ikke begrenset til, mineralolje, sorbitan-monostearat, polysorbat 60, cetylestervoks, cetearylalko-hol, 2-oktyldodekanol, benzylalkohol og vann. De farmasøy-tiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse kan også appliseres topisk i det lavere intestinale system ved rektale suppositorieformuleringer eller i en egnet enema-for-' mulering. Topisk administrerte transdermale plastere er også innbefattet i denne oppfinnelse.
De farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse kan administreres ved nasal aerosol eller inhalering. Slike sammensetninger er fremstilt i henhold til teknikker som er velkjent i faget farmasøytisk formulering og kan fremstilles som løsninger i saltløsning under anvendelse av benzylalkohol eller andre egnede konserveringsmidler, absorp-sjonsfremmere for å forsterke biotilgjengeligheten, fluor-karboner og/eller andre solubiliserende eller dispergerende midler som er kjent i faget.
Doseringsnivåer på mellom ca. 0,01 og ca. 100 mg/kg kroppsvekt pr. dag, fortrinnsvis mellom 0,5 og ca. 75 mg/kg kroppsvekt pr. dag og mest foretrukket mellom ca. 1 og 50 mg/kg kroppsvekt pr. dag av den aktive ingrediens er nyttige i en monoterapi for forebyggelse og behandling av IL- 1-, apoptose-, IGIF-, og IFN-y-medierte sykdommer, inklusive inflammatoriske sykdommer, autoimmune sykdommer, destruktive benlidelser, proliferative lidelser, infeksjonssykdommer, degenerative sykdommer, nekrotiske sykdommer, inflammatorisk peritonitt, osteoartritt, akutt pankreatitt, kronisk pankreatitt, astma, respiratorisk distress-syndrom hos voksne, glomerulonefritt, reumatoid artritt, systemisk lupus erytematosus, skleroderma, kronisk tyroiditt, Graves' sykdom, autoimmun gastritt, insulin-avhengig diabetes mellitus (Type I), autoimmun hemolytisk anemi, autoimmun neutropeni, trombocytopenia, kronisk aktiv hepatitt, myastenia gravis, inflammatorisk tarmsyndrom, Crohns sykdom, psoriasis, atopisk dermatitt, "graft vs. host"-sykdom, osteoporose, myelomatose-relatert benlidelse, leukemier og relaterte lidelser, myelodysplastisk syndrom, akutt myelogenøs leukemi, kronisk myelogenøs leukemi, metastatisk melanom, Kaposis sarkom, myelomatose, sepsis, septisk sjokk, shigellosis, Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, cerebral iskemi, myokardial iskemi, spinal muskulær atrofi, multippel sklerose, AIDS-relatert encefalitt, HIV-relatert encefalitt, aldring, alopesi, neurologisk skade på grunn av slag, ulcerativ kollitt, smittsom hepatitt, juvenil diabetes, lichenplanus, akutt dermatomyositt, eksem, primær cirrhose, uveitis, Behcets sykdom, atopisk hudsykdom, ren rødcelleaplasi, aplastisk anemi, amyotrofis lateral sklerose, nefrotisk syndrom og systemiske sykdommer eller sykdommer med virkninger lokalisert i leveren eller andre organer som har en inflammatorisk eller apoptotisk komponent forårsaket av altfor stort alkoholinntak eller viruser, så som HBV, HCV, HGV, gul feber-virus, dengue feber-virus og japansk encefalitt-virus.
Normalt vil de farmasøytiske sammensetninger ifølge denne oppfinnelse administreres fra ca. 1 til 5 ganger pr. dag eller alternativt som en kontinuerlig infusjon. Slik administrasjon kan anvendes som en kronisk eller akutt terapi. Mengden av aktiv ingrediens som kan kombineres med bærer-materialene for å fremstille en enkelt doseringsform vil variere avhengig av individet som behandles og den spesi-elle administrasjonsmåte. Et typisk preparat vil inneholde fra ca. 5% til ca. 95% aktiv forbindelse (w/w). Fortrinnsvis inneholder slike preparater fra ca. 20% til ca. 80% aktiv forbindelse.
Når sammensetningene ifølge denne oppfinnelse omfatter en kombinasjon av en forbindelse med formel I og en eller flere ytterligere terapeutiske eller profylaktiske midler, bør begge forbindelser og det ytterligere middel være nær-værende ved doseringsnivåer på mellom ca. 10% til 80% av doseringen som normalt administreres i en monoterapeutisk kur.
Ved forbedring av en pasients tilstand, kan en oppretthol-delsesdose av en forbindelse, sammensetning eller kombinasjon ifølge denne oppfinnelse administreres, hvis nødven-dig. Følgelig kan doseringen eller administrasjonsfrekven-sen eller begge deler, reduseres, som en funksjon av symptomene, til en level hvor den forbedrede tilstand bibe-holdes; når symptomene er blitt lindret til det ønskede nivå, bør behandlingen opphøre. Pasienten kan imidlertid behøve intermitterende behandling på langtidsbasis ved tilbakevendelse av sykdomssymptomene.
Som fagmannen vil forstå, kan lavere eller høyere doser enn de som er angitt ovenfor, være påkrevet. Spesifikke dose-rings- og behandlingskurer for hver enkelt pasient vil avhenge av mange forskjellige faktorer, inklusive aktiviteten av den spesifikke forbindelse som anvendes, alderen, kroppsvekten, den generelle helsetilstand, kjønnet, kost-holdet, administrasjonstiden, ekskresjonshastigheten, medi-sinkombinasjonen, sykdommens alvor og forløp og pasientens disposisjon for sykdommen og den behandlende leges forgodt-befinnende .
IL-1- eller apoptose-medierte sykdommer som kan behandles eller forebygges ved hjelp av forbindelsene ifølge denne
oppfinnelse, omfatter inflammatoriske sykdommer, autoimmune sykdommer, proliferative lidelser, infeksjonssykdommer og degenerative sykdommer. De apoptose-medierte sykdommer som kan behandles eller forebygges ved hjelp av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse, omfatter degenerative sykdommer. IL-1- eller apoptose-medierte inflammatoriske sykdommer som kan behandles eller forebygges, omfatter osteoartritt, akutt pankreatitt, kronisk pankreatitt, astma og respiratorisk distress-syndrom hos voksne. Fortrinnsvis er den inflammatoriske sykdom osteoartritt eller akutt pankreatitt. IL-1- eller apoptose-medierte autoimmune sykdommer som kan behandles eller forebygges, omfatter glomerulonefritt, reumatoid artritt, systemisk lupus erytematosus, skleroderma, kronisk tyroiditt, Graves' sykdom, autoimmun gastritt, insulin-avhengig diabetes mellitus (Type I), autoimmun hemolytisk anemi, autoimmun neutropeni, trombocytopenia, kronisk aktiv hepatitt, myastenia gravis, multippel sklerose, inflammatorisk tarmsyndrom, Crohns sykdom, psoriasis, atopisk dermatitt og "graft vs. host"-sykdom. Fortrinnsvis er den autoimmune sykdom reumatoid artritt, inflammatorisk tarmsyndrom, Crohns sykdom, psoriasis eller atopisk dermatitt. IL-1- eller apoptose-medierte destruktive benlidelser som kan behandles eller forebygges, omfatter osteoporose og myelomatose-relatert benlidelse. IL-1- eller apoptose-medierte proliferative sykdommer som kan behandles eller forebygges, omfatter leukemier og relaterte lidelser, så som myelodysplastisk syndrom, akutt myelogenøs leukemi, kronisk myelogenøs leukemi, metastatisk melanom, Kaposis sarkom og myelomatose. IL-1- eller apoptose-medierte infeksjonssykdommer som kan behandles eller forebygges, omfatter septisk sjokk og shigellosis. IL-1- eller apoptose-medierte degenerative eller nekrotiske sykdommer som kan behandles eller forebygges ved hjelp av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse, omfatter Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, cerebral iskemi og myokardial iskemi. Fortrinnsvis er den degenerative sykdom Alzheimers sykdom. IL-1- eller apoptose-medierte degenerative sykdommer som kan behandles eller forebygges ved hjelp av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse, omfatter Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, cerebral iskemi, myokardial iskemi, spinal muskulær atrofi, multippel sklerose, AIDS-relatert encefalitt, HIV-relatert encefalitt, aldring, alopesi og neurologisk skade på grunn av slag.
Andre sykdommer som har en inflammatorisk eller apoptotisk komponent, kan behandles eller forebygges ved hjelp av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse. Slike sykdommer kan være systemiske sykdommer eller sykdommer med virkninger lokalisert i leveren eller andre organer og kan være forårsaket av for eksempel et altfor stort alkoholinntak eller viruser, så som HBV, HCV, HGV, gul feber-virus, dengue-feber-virus og japansk encefalitt-virus.
IGIF- eller IFN-y-medierte sykdommer som kan behandles eller forebygges ved hjelp av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse, omfatter inflammatoriske, smittsomme, autoimmune, proliferative, neurodegenerative og nekrotiske tilstander.
IGIF- eller IFN-y-medierte inflammatoriske sykdommer som kan behandles eller forebygges, omfatter osteoartritt, akutt pankreatitt, kronisk pankreatitt, astma, reumatoid artritt, inflammatorisk tarmsyndrom, Crohns sykdom, ulcerativ kollitt, cerebral iskemi, myokardial iskemi og respiratorisk distress-syndrom hos voksne. Fortrinnsvis er den inflammatoriske sykdom reumatoid artritt, ulcerativ kollitt, Crohns sykdom, hepatitt eller respiratorisk distress-syndrom hos voksne.
IGIF- eller IFN-y-medierte infeksjonssykdommer som kan behandles eller forebygges, omfatter smittsom hepatitt, sepsis, septisk sjokk og shigellosis.
IGIF- eller IFN-y-medierte autoimmune sykdommer som kan behandles eller forebygges omfatter glomerulonefritt, systemisk lupus erytematosus, skleroderma, kronisk tyroiditt, Graves' sykdom, autoimmun gastritt, insulin-avhengig diabetes mellitus (Type I), juvenil diabetes, autoimmun hemolytisk anemi, autoimmun neutropeni, trombocytopenia, myastenia gravis, multippel sklerose, psoriasis, lichenplanus, "graft vs. host"-sykdom, akutt dermatomyositt, eksem, primær cirrhose, hepatitt, uveitis, Behcets sykdom, atopisk hudsykdom, ren rødcelleaplasi, aplastisk anemi, amyotrofisk lateral sklerose og nefrotisk syndrom. Fortrinnsvis er den autoimmune sykdom glomerulonefritt, insulin-avhengig diabetes mellitus (Type I), juvenil diabetes, psoriasis, "graft vs. host"-sykdom eller hepatitt.
Mer foretrukne sykdommer som kan behandles eller forebygges, omfatter reumatoid artritt, inflammatorisk tarmsyndrom, inklusive Crohn's sykdom og ulcerativ kolitt, inflammatorisk peritonitt, septisk sjokk, pankreatitt, traumatisk hjerneskade, organtransplantasjonsfrastøtning, osteoartritt, astma, psoriasis, Alzheimers sykdom, atopisk dermatitt eller leukemier og relaterte lidelser, så som myelodysplastisk syndrom eller myelomatose.
Skjønt denne oppfinnelse fokuserer på anvendelsen av forbindelsene beskrevet heri for å forebygge og behandle IL-1-, apoptose-, IGIF- og IFN-y-medierte sykdommer, kan for bindelsene ifølge denne oppfinnelse også anvendes som inhibitoriske midler for andre cysteinproteaser.
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse er også nyttige som kommersielle reagenser som effektivt bindes til kaspaser eller andre cysteinproteaser inklusive ICE. Som kommersielle reagenser kan forbindelsene ifølge denne oppfinnelse, og deres derivater, anvendes til å blokkere proteolysen av et målpeptid i biokjemiske eller cellulære undersøkelser for ICE og ICE-homologer eller kan derivatiseres til å bindes til et stabilt resin som et bundet substrat for affinitetskromatografiske applikasjoner. Disse og andre anvendelser, som karakteriserer kommersielle cysteinproteaseinhibitorer, vil være åpenbare for personer med ordinære kunnskaper i faget.
Foråt denne oppfinnelse skal kunne forstås bedre, er føl-gende eksempler angitt.
GENERELLE METODER
Analytiske HPLC- betingelser:
Kolonne: C-18, Partikkelstørrelse: 5 u, Porestørrelse: 100Å,
Kolonnestørrelse: 4,6 x 150 mm
Løsningsmiddel A: 0,1% TFA 1% MeCN / 98,9% vann Løsningsmiddel B: 0,1% TFA 99,9% MeCN
Gradient: A til B i 20 min ved en strømningshastighet av 1
ml/min
Kolonne: Cyano, Partikkelstørrelse: 5 u, Porestørrelse: 100Å,
Kolonnestørrelse: 4,6 x 150 mm
Løsningsmiddel A: 0,1% TFA 1% MeCN / 98,9% vann Løsningsmiddel B: 0,1% TFA 99,9% MeCN
Gradient: A / B = 99% / 1% til 50% / 50% i 20 min ved en strømningshastighet av 1 ml/min
HPLC- massespektrometrisk analyse
Massespektrometrisk analyse: Alle massespektrometriske data ble innhentet under anvendelse av et "Micromass Quattro II triple quadrupole"-massespektrometer (Beverly, MA) utstyrt med en kryss-strømmende elektrosprayende ionisasjonskilde. Massespektrometeret ble koblet til et HPLC-system produsert av Hewlett-Packard (HP1100). Autoprøvetageren for systemet var et Gilson 215 (Middleton, WI) væskehåndteringsapparat. Alt utstyr ble regulert ved hjelp av en MassLynx' programvarepakke innkjøpt fra Micromass.
De massespektrometriske analyser ble utført ved væskekromatografi-MS for å bestemme renheten og bekrefte molekyl-vekten simultant. I de tilfeller hvor prøvens renhet var blitt bestemt ved andre midler, ble en strømningsinjek-sjonsanalyse (FIA) anvendt istedenfor den fulle kromatografiske analyse. I alle tilfeller ble både positive og negative ionespektre innhentet.
Massespektrometriske akvisisjonsbetingelser: For alle eksperimenter ble massespektrometeret konfigurert i elek-trospray-modus med den krysstrømmende mot-elektrode. En strømningsdeler ble anvendt for å redusere strømmen fra HPLC til 40% av den opprinnelige strøm. Inngangstempera-turen ble satt til 140 °C, og den tørkende gasstrøm ble innstilt for å maksimalisere signalene. Resolusjonen av massespektrometeret ble justert til 0,65 amu FWHM, og dataene ble innhentet i centroid modus. I positiv ionemodus ble den koniske spenning innstilt til 25V, den kapillære spenning var 3,8 kV. I negativ ionemodus ble den koniske spenning innstilt til 25 V, og den kapillære spenning ble innstilt til 3,5 kV. I både positiv og negativ ionemodus var tiden for å oppnå et fullt spektrum ls med en koplingstid på 0,25 sekunder mellom scanningene. Forholdet masse/ladning scannet for molekyler med en forventet molekylvekt på mindre enn 350 amu var 70-500 m/z, mens for molekyler med en forventet masse på mer enn 350 amu var masse/ladning-forholdet 200-1000 m/z.
Kromatografiske betingelser: Væskekromatografi ble utført under anvendelse av en YMC AQ C18-kolonne (150 mm X 3mm med 5um partikkelstørrelse og en 120Å porestørrelse). For alle analyser ble MeCN med 0,2 % maursyre kombinert med vann med 0,2% maursyre og utgjorde elueringsgradienten. Gradientpro-filen bestod i å begynne med 15 % MeCN: vann og øke mengden av MeCN lineært i ti minutter til 90%. Denne konsentrasjon ble holdt konstant i 2 minutter før retur til de initielle betingelser. Under hele analysen var strømningshastigheten 0,9ml/min.
Strømningsinjeksjonsbetingelser: En l:l-blanding av vann til MeCN (begge med 0,2% maursyre tilsatt) ble anvendt for å oppnå FIA-dataene. Strømningshastigheten ble innstilt til 0,3 ml/min.
<1>tt NMR
Alle<1>H NMR-spektre ble utført under anvendelse av et Bruker Instruments AMX-500 NMR-spektrometer i det angitte løsningsmiddelet.
SYNTETISKE METODER
Generell prosedyre for fremstillingen av forbindelser med formel I, utførelsesform C (Skjemaene I-VI)
Prosedyre for fremstillingen av analogene 5a-5bd.
I skjemaene I-VIII refererer variabelen LR til bindeledd-resinet og er definert som vist ovenfor i Skjema I.
Trinn 1: En 6,7 g porsjon (0,8 mmol/gram innmatning, 5,36 mmol) av 4-metyl-benzhydrylamin-hydrokloridsaltresin (Skjema I) ble vasket med DMF (3 x 50 ml), 10% DIEA/DMF (3 x 50 ml) og N-metylpyrrolidinon (NMP)(3 x 50 ml). Til en suspensjon av det vaskede resin i 25 ml NMP ble tilsatt suksessivt forbindelse 1 (1,1 ekv., 3,5 g, 5,90 mmol) DIEA (3,33 ekv., 3,1 ml, 17,70 mmol), 1-hydroksybenzotriazol-hydrat (HOBt) (1,1 ekv., 797 mg, 5,90 mmol), og O-benzotri-azol-N,N,N,N'-tetrametyluroniumheksafluorfosfat (HBTU) (1,1 ekv., 2,24 g, 5,90 mmol). Forbindelse 1 ble fremstilt i henhold til litteraturprosedyren beskrevet av A. M. Murphy et al, J. Am. Chem. Soc, 114, s. 3156-3157 (1992). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten under anvendelse av et håndleddsrysteapparat.
Den resulterende blanding ble filtrert, og resinet ble skylt med DMF, deretter behandlet med 12 ml av en 20% løs-ning av eddiksyreanhydrid i DMF i 30 minutter ved romstemperatur. Blandingen ble filtrert, og resinet ble vasket suksessivt med DMF (2 x 50ml), CH3OH (50ml), 1:1 DMF/ CH2C12(2 x 50ml), CH3OH (50ml) og CH2C12(3 x 50ml). Etter tørking in vacuo ble 9,0 gram av resin 2 oppnådd (0,48 mmol/gram innmatning).
Trinn 2: Til 4,5 g av resin 2 (0,48 mmol/gram, 2,16 mmol) ble tilsatt 25 ml av en 20% løsning av piperidin i DMF. Suspensjonen ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble deretter vasket suksessivt med DMF (2 x 40 ml), CH3OH (40 ml), CH2C12(2 x 40 ml), CH3OH (40 ml) og NMP (40 ml) . Til en suspensjon av resin i 40 ml NMP ble tilsatt suksessivt 2,92 g N-Fmoc-prolin (4 ekv., 8,64 mmol), 3,0 ml DIEA (8 ekv., 17,28 mmol), 1,17 g av HOBt (4 ekv., 8,64 mmol) og 3,27 g av HBTU (4 ekv., 8,64 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Denne koblingsprosedyre ble gjentatt i 3 timer. Resinet ble deretter vasket suksessivt med DMF (2 x 40 ml), CH3OH (40 ml), 1:1 DMF/ CH2C12(2 x 40 ml), CH3OH (40 ml) og CH2C12(3 x 40 ml) og kort tørket in vacuo for å tilveiebringe resin 3.
Trinn 3: En suspensjon av resin 3 i 25 ml av en 20% løsning av piperidin i DMF ble rotert ved romstemperatur i 5 minut ter. Suspensjonen ble avsugd. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (2 x 40 ml), CH3OH (40 ml), CH2C12(2 x 40 ml), CH3OH (40 ml) og NMP (2 x 40 ml). Til en suspensjon av resin i 40 ml NMP ble tilsatt suksessivt 2,93 g N-Fmoc-valin (4 ekv., 8,64 mmol), 3,0 ml DIEA (8 ekv., 17,28 mmol), 1,17 g HOBt (4 ekv., 8,64 mmol) og 3,27 g HBTU (4 ekv., 8,64 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Denne koblingsprosedyre ble gjentatt i 3 timer. Resinet ble deretter vasket suksessivt med DMF (2 x 40 ml), CH3OH (40 ml), 1:1 DMF/ CH2C12(2 x 40 ml), CH3OH (40 ml) og CH2C12(3 x 40 ml) og tørket in vacuo for å tilveiebringe resin 4 (0,45 mmol/gram).
Trinn 4: Til en 0,05 mmol porsjon av resin 4 ble tilsatt 2 ml av en 2-0% løsning av piperidin i DMF. Suspensjonen ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Det resulterende resin ble vasket suksessivt med DMF (3x5 ml), CH3OH (5 ml), og NMP (3x5 ml). Den ønskede karboksylsyre ble deretter tilsatt (4 ekv., 0,2 mmol), etterfulgt av 0,8 ml av en 0,25M løsning av HOBt i NMP, 0,14 ml DIEA (8 ekv., 0,4 mmol) og 0,8 ml av en 0,25M løsning av HBTU i NMP. Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (2x5 ml), CH3OH (5 ml), 1:1 DMF/ CH2C12(2x5 ml), CH3OH (5 ml) og CH2CI2(3x5 ml) og tørket in vacuo. En 2 ml porsjon av en 95% løsning av TFA i vann ble deretter tilsatt til resinet. Blandingen ble omrørt ved romstemperatur i en time og filtrert. Filtratet ble inndampet, og residuet ble tatt opp i acetonitril-vann og renset ved hjelp av preparativ HPLC for å tilveiebringe forbindelsene 5a-5bd.
Produktutbytte, analytiske HPLC-betingelser, HPLC-retensjonstid, produktrenhet og massespektrometriske data oppnådd for eksemplene 5a-5bd, 7a-7at, 9a-9g, 15a-15f, 16a-16b, 17a-17e, 18a-18f, 20a-20t, 23a-23i, 24a-24e, 25a-25e, 26a-26h, 27a-27n, 28a-28c, 29a-29s, 32a-32e er angitt i Tabell 1, hvis intet annet er sagt.
f
Prosedyre for fremstilling av analogene 7a- 7at
Analoger av 7a-7at ble fremstilt som beskrevet ovenfor i Skjema I unntatt at det ble anvendt Fmoc-alanin istedenfor Fmoc-valin i Trinn 3 (Skjema II).
Trinn 3: En suspensjon av resin 3 (3,5 g, 1,75 mmol) i 20 ml av en 20% løsning av piperidin i DMF ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter. Væsken ble fjernet fra suspensjonen. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (2 x 30 ml), CH3OH (30 ml), CH2C12(2 x 30 ml), CH3OH (30 ml) og NMP (2 x 30 ml). Til en suspensjon av resin i 30 ml NMP ble tilsatt suksessivt 1,44 g N-Fmoc-alanin (4 ekv., 7,0 mmol), 2,4 ml DIEA (8 ekv., 14,0 mmol), 0,95 g av HOBt (4 ekv., 7,0 mmol) og 2,66 g av HBTU (4 ekv., 7,0 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Denne koblingsprosedyre ble gjentatt i 3 timer. Resinet ble deretter vasket suksessivt med DMF (2 x 30 ml), CH3OH (30 ml), 1:1 DMF/ CH2C12(2 x 30 ml), CH3OH (30 ml) og CH2C12(3 x 30 ml) og tørket in vacuo for å tilveiebringe resin 6 (0,50 mmol/gram).
Trinn 4: Til en 0,125 mmol porsjon av resin 6 ble tilsatt 5 ml av en 20% løsning av piperidin i DMF. Suspensjonen ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Det resulterende resin ble vasket suksessivt med DMF (3x5 ml), CH3OH (5 ml) og NMP (3x5 ml). Den ønskede karboksylsyre ble deretter tilsatt (4 ekv., 0,6 mmol), etterfulgt av 2,0 ml av en 0,25M løsning av HOBt i NMP, 0,35 ml DIEA (8 ekv., 1,0 mmol) og 2,0 ml av en 0,25M løsning av HBTU i NMP. Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (3x5 ml), CH3OH (5 ml), 1:1 DMF/ CH2C12(2x5 ml), CH3OH (5 ml) og CH2C12(3x5 ml) og tørket in vacuo. En 5 ml porsjon av en 95% løsning av TFA i vann ble deretter tilsatt til resinet. Blandingen ble omrørt ved romstemperatur i en time og filtrert. Filtratet ble inndampet, og residuet ble oppløst i acetonitril-vann og renset ved hjelp av preparativ HPLC for å tilveiebringe forbindelsene 7a-7at.
Prosedyre for fremstilling av analogene 9a- 9g
Trinn 1: En 10,0 g porsjon (0,75 mmol/gram innmatning, 7,5 mmol) AgroPore-aminometyl-resin (katalognummer 800047) ble vasket med DMF (3 x 40 ml), 10% DIEA/DMF (3 x 40 ml), DMF og NMP (3 x 40 ml). Til ovennevnte resin ble tilsatt suksessivt forbindelse 1 (0,87 ekv., 3,88 g, 6,55 mmol), HBTU (1,14 ekv., 3,13 g, 8,25 mmol), HOBt (1,14 ekv., 1,26 g, 8,25 mmol) og NMP (40 ml). Reagensene ble deretter blandet ved å boble nitrogen gjennom bunnen av kolben i to minutter ved romstemperatur. N,N-diisopropyletylamin (3,33 ekv., 4,35 ml, 25 mmol) ble tilsatt, og den resulterende suspensjon ble blandet ved romstemperatur over natten, filtrert, deretter vasket suksessivt med NMP (3x 40 ml) og DMF (3x 40 ml). Resinet ble deretter behandlet med 50 ml av en 20% løsning av eddiksyreanhydrid i DMF i 38 minutter ved romstemperatur. Blandingen ble filtrert, og resinet ble vasket suksessivt med NMP (3x 40 ml) CH2C12(3x 40 ml), 1:1 CH3OH / CH2C12(3x 40 ml) og CH3OH (3x 40 ml) . Etter tørking in vacuo ble 13,76 gram av resin 2 oppnådd (0,35 mmol/gram innmatning).
Trinn 2: Syv reaksjonskar ble hver fylt med 181 mg resin 2 (0,48 mmol/gram, 0,063 mmol), deretter vasket med CH2C12(3 x 1 ml) og NMP (3x1 ml). Deretter ble hvert kar behandlet med 1 ml av en 25% løsning av piperidin i DMF og blandet (vortex) ved romstemperatur i 15 minutter. Denne prosedyre ble gjentatt i triplikat. Hvert kar ble deretter vasket tre ganger med NMP (3x1 ml). Karene ble deretter behandlet med 500 ul av en løsning av 0,4 M (2S,4R)-Fmoc-4-amino-l-Boc-pyrrolidin-2-karboksylsyre /0,4 M HOBt/ NMP, 500 ul av en løsning av 0,4 M HBTU/ NMP og 250 yl av en løsning av 1,6 M DIEA/ NMP og blandet i 3 timer ved romstemperatur. Etter blandingen ble karene avsugd, og prosedyren ble gjentatt .
Trinn 3:Det resulterende resin ble vasket med NMP (3 x lml) og deretter behandlet med 1 ml av en 25% løsning av piperidin i DMF og blandet (vortex) ved romstemperatur i 15 minutter. Prosedyren ble gjentatt i triplikat. Det resulte rende resin ble vasket med NMP (3 x lml) deretter behandlet med enten eddiksyreanhydrid eller isopropyl-isocyanat eller metansulfonylklorid eller metylklorformiat. For eddiksyreanhydrid: tilsett 300 yl av en 1,6 M DIEA/ NMP-løsning og 1 ml av en løsning av 0,5 M eddiksyreanhydrid/O, 125 M DIEA/ 0,015 M HOBt i NMP. For isopropyl-isocyanat: tilsett 300 yl av en 1,6 M DIEA/ NMP-løsning og 1 ml av en løsning av 1 M isopropyl-isocyanat i NMP. For metansulfonylklorid: tilsett 600 yl av en løsning av 1 M pyridin i CH2CI2og 600 yl av en løsning av IM metansulfonylklorid i CH2C12. For metylklorformiat: tilsett 500 yl av en 1,6 M DIEA/ NMP-løsning og 1 ml av en løsning av 0,7 M metylklorformiat i CH2CI2. De resulterende suspensjoner ble blandet i 6 timer ved romstemperatur, løsningsmiddelet ble suget vekk, og koblingsprosedyren ble gjentatt.
Trinn 4: Det resulterende resin ble vasket med NMP (3 x lml), deretter behandlet med en l:l-blanding av TFA/ CH2CI2ved romstemperatur i 30 minutter. Det resulterende resin ble deretter vasket med CH2C12(3 x lml) og NMP (3 x lml). Resinet ble deretter behandlet med 500 yl av en løsning av 0,4 M Fmoc-valin-karboksylsyre/O,4 M HOBt/ NMP, 500 yl av en løsning av 0,4 M HBTU/ NMP og 250 yl av en løsning av 1,6 M DIEA/ NMP og blandet i 3 timer ved romstemperatur. Etter blanding ble karene tømt for væske, og koblingsprosedyren ble gjentatt.
Trinn 5: Det resulterende resin ble vasket med NMP (3 x lml), deretter behandlet med 1 ml av en 25% løsning av piperidin i DMF og blandet (vortex) ved romstemperatur i 15 minutter. Denne prosedyre ble gjentatt i triplikat. Det resulterende resin ble vasket med NMP (3 x lml), deretter behandlet med enten 500 yl av en løsning av 0,4 M 1-isokinolin-karboksylsyre/0,4 M HOBt/ NMP eller 500 yl av en løs-ning av 0,4 M p-anissyre/0,4 M HOBt/ NMP. De resulterende blandinger ble behandlet med 500 yl av en løsning av 0,4 M HBTU/ NMP og 250 yl av en løsning av 1,6 M DIEA/ NMP deretter blandet i 3 timer ved romstemperatur, løsningsmid- delet ble fjernet, og prosedyren ble gjentatt. Det resulterende resin ble behandlet med 1,5 ml av en 95% løsning av TFA i vann og omrørt ved romstemperatur i en time og deretter filtrert. Filtratet ble inndampet, og residuet ble tatt opp i en 2:1:2-blanding av DMF/acetonitril/vann og renset ved hjelp av preparativ HPLC for å tilveiebringe forbindelsene 9a-9g.
Prosedyre for syntese av analogene 15- 18:
Fremstilling av analogene 15 og 16 ( Skjema IV) : Syntese av 2-( S)- piperazin- 1, 2, 4- trikarboksyIsyre- 4- tert-butylester- 1-( 9H - fluoren- 9- ylmetyl) ester.
Til en løsning av 2-(S)-piperazin-karboksylsyre-(Lonza)
(3g, 15 mmol) i 1:1 H20:dioksan (30 ml) ble tilsatt en løs-ning av (Boc)20 i dioksan (3,3g, 15mmol, i 5ml dioksan) mens pH-verdien ble holdt ved 11 med IN NaOH. pH-verdien ble opprettholdt i 3 timer ved romstemperatur. Løsningen ble innstilt til pH 9,5 med IN HC1, avkjølt til 0°C og behandlet med Fmoc-Cl (3,87g, 15 mmol). pH-verdien ble holdt ved 9,5 i 1 time, og blandingen ble omrørt ved romstemperatur over natten. Den resulterende suspensjon ble filtrert, og filtratet ble behandlet med IN KHS04til pH 2, deretter ekstrahert med etylacetat (2 x 75 ml). Det organiske lag ble tørket med saltlake og MgS04, filtrert og konsentrert hvilket gav en farveløs olje. Oljen ble oppløst i etylacetat og tilsatt til heksan hvilket gav 3,5g (51% utbytte) av et hvitt fast stoff etter isolering.<1>R NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 1,55 (s, 9H) 2,80- 3,5 (m, 3H) , 3,8-4,9 (m, 5H) , 5,7 (bs, 1H) , 7,3 (m, 2 H) , 7,3- 7,9 ppm (m, 8H) , LC/MS (ES") m/e 451,3 (M-H)
Trinn 1: Til 5 g av resin 2 (0,375 mmol/gram, 1,82 mmol) ble tilsatt 25 ml av en 20% løsning av piperidin i DMF. Suspensjonen ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble deretter vasket suksessivt med DMF (2 x 50 ml), CH3OH (50 ml), CH2C12(2 x 50 ml), CH3OH (50 ml) og NMP (50 ml). Til en suspensjon av resin i 25 ml NMP ble tilsatt suksessivt 3,5g N-Fmoc-Boc piperazinkarboksylsyre-(4 ekv., 7,48 mmol), 1,0 ml DIEA (8 ekv., 14,96 mmol), 1,01 g av HOBt (4 ekv., 7,48 mmol) og 2,83g av HBTU (4 ekv., 7,48 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Denne koblingsprosedyre ble gjentatt i 3 timer. Resinet ble deretter vasket suksessivt med DMF (2 x 50 ml), CH3OH (50 ml), 1:1 DMF/ CH2C12(2 x 50 ml), CH3OH (1 x 50 ml) og CH2C12(3 x 50 ml) og kort tørket in vacuo for å tilveiebringe resin 10.
Trinn 2: Til 5 g (0,335 mmol/gram innmatning, 1,675 mmol) av 10 ble tilsatt 25 ml av en 20% løsning av piperidin i DMF. Suspensjonen ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble deretter vasket suksessivt med DMF (2 x 50 ml), CH3OH (50 ml), CH2C12(2 x 50 ml), CH30H (50 ml) og NMP (2 x 50 ml). Til en suspensjon av resin i 25 ml NMP ble tilsatt suksessivt 2,08g N-Fmoc-valin eller N-Fmoc-alanin (4 ekv., 6,7 mmol), l,17ml DIEA (4 ekv., 6,7 mmol), 0,905 g HOBt (4 ekv., 6,7mmol) og 1,38 g HBTU (4 ekv., 3,66 mmol) . Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Denne koblingsprosedyre ble gjentatt i 3 timer. Resinet ble deretter vasket suksessivt med DMF (2 x 50 ml), CH3OH (50 ml), 1:1 DMF/ CH2C12(2 x 50 ml), CH3OH (50 ml) og CH2C12(3 x 50 ml) og tørket in vacuo for å tilveiebringe resin 11 henholdsvis 12 (0,35 mmol/gram, 5g).
Trinn 3: Til en l,5g ( 0,165 mmol) porsjon av resin 11 eller 12 ble tilsatt 2 ml av en 20% løsning av piperidin i DMF. Suspensjonen ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Det resulterende resin ble vasket suksessivt med DMF (3 x 15 ml), CH3OH (15 ml) og NMP (3 x 15 ml). Den ønskede karboksylsyre ble deretter tilsatt (4 ekv., 0,66 mmol), etterfulgt av 0,25g HOBt (0,66mmol), 0,12 ml DIEA (4 ekv., 0,66 mmol) og 0,89g (0,66mmol) HBTU i NMP. Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (2 x 15 ml), CH3OH (15 ml), 1:1 DMF/ CH2C12(2 x 15 ml), CH3OH (15 ml) og CH2C12(3 x 15 ml) og tørket in vacuo for å tilveiebringe 13 eller 14.
Trinn 4: En 2 ml porsjon av en 95% løsning av TFA i vann ble deretter tilsatt til resinet. Blandingen ble omrørt ved romstemperatur i en time og filtrert. Filtratet ble inndampet, og residuet ble tatt opp i acetonitril-vann og renset ved hjelp av preparativ HPLC for å tilveiebringe forbindelsene 15 og 16.
Prosedyre for syntese av analogene 17 og 18 ( se Skjema IV) : Trinn 5: Resin 13 eller 14 ble behandlet med 2 ml 25% TFA/CH2C12i 30 min og vasket med DMF (2x5 ml), 10% DIEA/CH2CI2(2x5 ml) DMF/CH2CI2(2x5 ml), CH30H (5 ml) og CH2CI2(3x5 ml) og tørket i fem minutter. Det resulterende resin ble vasket med NMP (3x1 ml), deretter behandlet med eddiksyreanhydrid eller metokseddiksyre eller 2- propansulfonylklorid eller isopropyl-isocyanat eller metan-sulf onylklorid eller metylklorformiat i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille analogene 9 (Skjema III). Forbindelsene 17 og 18 ble oppnådd som beskrevet i Trinn 4 for forbindelsene 15 og 16.
Forbindelsene 17a og 17b ble fremstilt ved reduktiv amine-ring under anvendelse av Na(OAc)3BH og HCHO (38% i H20, 0,2 ml) og CH3COOH (0,02 ml) forut for Trinn 4, og forbindelse 18c ble fremstilt ved behandling med fosgen etterfulgt av ammoniakk forut for Trinn 4.
Prosedyre for fremstillingen av analogene 20.
Forbindelsene 20a-20t ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet for forbindelsene 5 (Skjema I) unntatt at en passende Fmoc-aminosyre ble anvendt istedenfor Fmoc-Valin i Trinn 3 (Skjema V).
Fremstilling av 3-({ 1-[ 2-( 4- amino- 3- klor- benzoylamino)- 3-metylsulfonyl- propionyl]- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4-okso- smørsyre ( 20i)
En suspensjon av 0,132 mmol av resin 3 i 4 ml 20% piperidin i DMF ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble avsuget. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og NMP (to ganger). Til en suspensjon av resinet i 4 ml NMP ble tilsatt suksessivt 189 mg N-Fmoc-metylcystein (4 ekv., 0,528 mmol), 0,185 ml DIEA (8 ekv., 1,056 mmol), 71 mg HOBt (4 ekv., 0,528 mmol) og 200 mg HBTU (4 ekv., 0,528 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Denne koblingsprosedyre ble gjentatt i 3 timer. Resinet ble deretter vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang) og 1:1 DMF/ CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og CH2CI2(tre ganger) og tørket in vacuo.
En suspensjon av 100 mg av dette resin i 2 ml 20% piperidin i DMF ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang) , CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og NMP (to ganger). Til en suspensjon av resin i 2 ml NMP ble tilsatt suksessivt 38 mg 4-amino-3-klorbenzosyre (4 ekv., 0,2 mmol), 0,140 ml DIEA (8 ekv., 0,4 mmol), 2 7 mg HOBt (4 ekv., 0,2 mmol) og 76 mg HBTU (4 ekv., 0,4 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Resinet ble deretter vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang) og 1:1 DMF/ CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og CH2C12(tre ganger) og tørket in vacuo. Resinet ble deretter behandlet med 2 ml 95% TFA i vann i lh. Suspensjonen ble filtrert, filtratet ble konsentrert in vacuo og renset ved hjelp av preparativ HPLC for å tilveiebringe tittelforbindelsen (20i).
Fremstilling av 3-({ 1-[ 2-( 3, 5- diklor- 4- hydroksy- benzoylamino)- 4- metansulfonyl- butyryl]- pyrrolidin- 2- karbonyl}-amino)- 4- okso- smørsyre ( 20p)
Forbindelse 20p ble fremstilt i henhold til prosedyren anvendt for fremstillingen av 20i under anvendelse N-Fmoc-metionin som den første komponent koblet til resin 3, og 3,5-diklor-4-hydroksybenzosyre som den andre komponent.
Fremstilling av 3-[ ( 1-{ 2-[ ( isokinolin- l- karbonyl)- amino]- 3-metansulfonyl- propionyl}- pyrrolidin- 2- karbonyl)- amino]- 4-okso- smørsyre ( 20r)
N-Fmoc-metylcystein ble oksidert til det tilsvarende sulfon under anvendelse av metoden beskrevet av B. M. Trost og D. s. Curran, Tetrahedron Lett. 22, s. 1287-190 (1981). Til en løsning av 0,714 g (2 mmol) N-Fmoc-metylcystein i 24 ml ble en l:l-løsning av CH3OH-vann omrørt ved 0°C tilsatt 3,68 g (3 ekv., 6 mmol) Oxone™. Blandingen ble omrørt ved romstemperatur i 48 h, fortynnet med vann, surgjort til pH 2 under anvendelse av 6N HC1, og ekstrahert med tre 100 ml porsjoner av etylacetat. De kombinerte organiske ekstrakter ble tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo for å tilveiebringe 0,700 g (89% utbytte) sulfon: lti NMR (DMSO-d6, 500 MHz) 8 2,97 (s, 3H), 3,49-3,59 (m, 2H), 4,25 (m, 1H), 4,30-4,38 (m, 2H), 4,46 (m, 1H), 7,33 (t, 2H), 7,42 (t, 2H, ) , 7,70-8, 00 (m, 4H) ; nøyaktig masse beregnet for C19H19NO6S m/e 389,09, funnet m/e 390,2.
En suspensjon av 0,250 mmol av resin 3 i 10 ml 20% piperidin i DMF ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble avsuget. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang) , CH2CI2(to ganger) , CH3OH (en gang) og NMP (to ganger). Til en suspensjon av resinet i 6 ml NMP ble tilsatt suksessivt 200 mg N-Fmoc-metylcystein sulfon (4 ekv., 0,50 mmol), 0,175 ml DIEA (8 ekv., 1,00 mmol), 70 mg HOBt (4 ekv., 0,50 mmol) og 188 mg HBTU (4 ekv., 0,50 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Denne koblingsprosedyre ble gjentatt i 3 timer. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), 1:1 DMF/ CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og CH2CI2(tre ganger) og tørket in vacuo .
En suspensjon av 150 mg av dette resin i 4 ml 20% piperidin i DMF ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og NMP (to ganger). Til en suspensjon av resin i 3 ml NMP ble tilsatt suksessivt 52 mg 1-isokinolinkarboksylsyre-(4 ekv., 0,3 mmol), 0,104 ml DIEA (8 ekv., 0,6 mmol), 37 mg HOBt (4 ekv., 0,3 mmol) og 104 mg HBTU (4 ekv., 0,3 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), og 1:1 DMF/ CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og CH2C12(tre ganger) og tørket in vacuo. Resinet ble deretter behandlet med 2 ml 95% TFA i vann i 1 time. Suspensjonen ble filtrert, og filtratet ble konsentrert in vacuo og renset ved hjelp av preparativ HPLC for å tilveiebringe tittelforbindelsen (20r).
Fremstilling av 3-({ 1-[ 2- ( 3, 5- diklor- 4- hydroksy- benzoylamino)- 3- metansulfonyl- propionyl]- pyrrolidin- 2- karbonyl}-amino)- 4- okso- smørsyre ( 20s)
Forbindelse 20s ble fremstilt i henhold til prosedyren anvendt for fremstillingen av 20i, under anvendelse av 3,5-diklor-4-hydroksybenzosyre istedenfor 1-isokinolinkarboksylsyre.
Prosedyre for fremstillingen av analogene 23
Forbindelsene 23a-23i ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet for forbindelsene 7 (Skjema II) unntatt at en passende Fmoc-aminosyre ble anvendt istedenfor Fmoc-prolin i Trinn 2 (Skjema VI).
Fremstilling av 3-({ 2-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- pro-pionyl] - 4- metyl- 3, 4- dihydro- 2ff- pyrazol- 3- karbonyl} - amino) - 4- okso- smørsyre ( 23g)
Forbindelse 23g ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet for forbindelser 7 unntatt at det ble anvendt 4-metyl-4,5-dihydro-pyrazol-l,5-dikarboksylsyre 1-(9#-fluoren-9-ylmetyl)ester istedenfor Fmoc-prolin (Skjema II) i Trinn 2 .
Fremstilling av 4- metyl- 4, 5- dihydro- pyrazol- l, 5- dikarboksylsyre- 1-( 9H - f luoren- 9- ylmetyl) ester: Til en løsning av 650 mg (2 mmol) (10,10-dimetyl-3,3-di-okso-A,6-tia-4-aza-tricyklo [5, 2, 1, 0°'°] dec-4-yl) - (4-metyl-3, 4-dihydro-2#-pyrazol-3-yl)-metanon ( J. Am. Chem. Soc., 119, s. 8379-8380 (1997)) i 6 ml vann og 14 ml THF omrørt ved 0 C ble tilsatt 420 mg (10 mmol, 5 ekv.) litiumhydroksid. Blandingen ble omrørt ved 0°C i 2 timer og ved romstemperatur i 30 minutter, ble fortynnet med 20 ml vann og vasket med eter (20 ml). pH-verdien i løsningen ble deretter innstilt til 9, og en løsning av 519 mg (2 mmol, 1 ekv.) Fmoc-Cl i 3 ml dioksan ble tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romstemperatur over natten, vasket med eter, surgjort til pH 2-3 og ekstrahert med 3 40-ml porsjoner etylacetat. De kombinerte organiske ekstrakter ble vasket med saltlake, tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo for å tilveiebringe 690 mg (98% utbytte) av et farveløst skum som ble identifisert som tittelforbindelsen. 1ti NMR (DMSO-d6, 500 MHz) 8 1,2 (d, 3H), 3,2 (m, 1H), 4,2-4,6 (m, 3H), 7,1 (s, 1H), 7,2-7,5 (m, 5H), 7,7-8,0 (m, 4H). Nøyaktig masse beregnet for C20Hi8N2Cmm/e 350, 13, funnet m/e 351,3
Fremstilling av 3-({ 1-[ 2-( 4- amino- 3- klor- benzoylamino)- pro-pionyl]- 4- metoksy- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso-smørsyre ( 23i)
Forbindelse 23i ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet for forbindelser 7 unntatt at det ble anvendt N-Fmoc-4-metoksyprolin istedenfor Fmoc-prolin (Skjema II) i Trinn 2.
Fremstilling av N- Fmoc- 4- metoksyprolin:
Til en løsning av 735 mg (3 mmol) N-Boc-4-hydroksyprolin-metylester i 20 ml THF omrørt ved 0°C ble tilsatt 79 mg (1,1 ekv., 3,3 mmol) 60% natriumhydrid i mineralolje. Blandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time, og metyljodid (0,56 ml, 3 ekv., 9 mmol) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romstemperatur over natten, reaksjonen ble undertrykket ved tilsetning av mettet vandig ammoniumklorid, og blandingen ble fortynnet med vann og ekstrahert med tre 80ml porsjoner etylacetat. De kombinerte organiske ekstrakter ble vasket med saltlake, tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo for å tilveiebringe en lysegul olje. Oljen ble tatt opp i 9 ml CH3OH og 3 ml vann, og 378 mg (3 ekv., 9 mmol) litiumhydroksid ble tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romstemperatur over natten, fortynnet med vann, surgjort til pH 3 og ekstrahert med tre 80 ml porsjoner etylacetat. De kombinerte organiske ekstrakter ble vasket med saltlake, tørket (MgSO,j) og konsentrert in vacuo. Den gjenværende olje ble tatt opp i 10 ml TFA, og løsningen ble omrørt ved romstemperatur i 2 timer og konsentrert in vacuo. Den gjenværende olje ble fortynnet med 6 ml 10% vandig natriumkarbonat og 3 ml dioksan, og en løsning av 9-fluorenylmetylklorformiat (779 mg, 1 ekv., 3 mmol) i 5 ml dioksan ble tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romstemperatur over natten, fortynnet med vann, surgjort til pH 3 og ekstrahert med tre 80 ml porsjoner etylacetat. De kombinerte organiske ekstrakter ble vasket med saltlake, tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo for å tilveiebringe en olje, som ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi over silikagel eluert med CH2C12/ CH3OH 20:1, for å tilveiebringe 600 mg (55%) N-Fmoc-4-metoksyprolin: nøyaktig masse beregnet for C2iH2iN05m/e 367, 14 funnet m/e 368, 4.
Til en 0,125 mmol porsjon av resin 2 ble tilsatt 4 ml 20% piperidin i DMF. Blandingen ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og NMP (to ganger). Til en suspensjon av resinet i 4 ml NMP ble tilsatt suksessivt 184 mg N-Fmoc-4-metoksyprolin (4 ekv., 0,50 mmol), 0,175 ml DIEA (8 ekv., 1,00 mmol), 70 mg HOBt (4 ekv., 0,50 mmol) og 188 mg HBTU (4 ekv., 0,50 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over nat ten, og væsken ble fjernet. Denne koblingsprosedyre ble gjentatt i 3 timer. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), 1:1 DMF/ CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og CH2C12(tre ganger) og tørket in vacuo.
Til resinet ble tilsatt 4 ml 20% piperidin i DMF. Blandingen ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH30H (en gang), CH2C12(to ganger), CH30H (en gang) og NMP (to ganger). Til en suspensjon av resinet i 4 ml NMP ble tilsatt suksessivt 156 mg N-Fmoc-alanin (4 ekv., 0,50 mmol), 0,175 ml DIEA (8 ekv., 1,00 mmol), 70 mg HOBt (4 ekv., 0,50 mmol) og 188 mg HBTU (4 ekv., 0,50 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Denne koblingsprosedyre ble gjentatt i 3 timer. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), 1:1 DMF/ CH2C12(to ganger) , CH3OH (en gang) og CH2C12(tre ganger) og tørket in vacuo.
Til resinet ble tilsatt 4 ml 20% piperidin i DMF. Blandingen ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og NMP (to ganger). Til en suspensjon av resinet i 4 ml NMP ble tilsatt suksessivt 80 mg 4-amino-3-klorbenzosyre (4 ekv., 0,50 mmol), 0,175 ml DIEA (8 ekv., 1,00 mmol), 70 mg HOBt (4 ekv., 0,50 mmol) og 188 mg HBTU (4 ekv., 0,50 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), 1:1 DMF/ CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og CH2C12(tre ganger) og tørket in vacuo.
Resinet ble behandlet med 4 ml 95% TFA i vann i 1 time. Blandingen ble filtrert. Filtratet ble konsentrert in vacuo for å tilveiebringe en olje, som ble renset ved HPLC for å tilveiebringe tittelforbindelsen (23i).
Prosedyre for fremstilling av analogene 24a- e
Forbindelsene 24a-24e ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet for forbindelser 5 (Skjema I) unntatt at det ble anvendt enten Fmoc-azetidinkarboksylsyre eller trans- 2-fenyl-Fmoc-azetidinkarboksylsyre istedenfor Fmoc-prolin i Trinn 2.
Prosedyre for fremstillingen av analogene 25
Forbindelsene 25a-25e ble fremstilt i henhold til prosedy-rene beskrevet for forbindelsene 5 og 7 (Skjema I og Skjema II) unntatt at det ble anvendt Fmoc-2(S)-pipekolinsyre istedenfor Fmoc-prolin i Trinn 2 og kobling av enten Fmoc-valin eller Fmoc-alanin eller Fmoc-tert-leucin i Trinn 3.
Prosedyre for fremstilling av analogene 26a- h
Forbindelsene 26a- 26h ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet for Forbindelsene 23 (Skjema VI) unntatt at det ble anvendt Fmoc-valin istedenfor Fmoc-alanin i Trinn 3 .
Prosedyre for fremstillingen av analogene 27
Forbindelsene 27a- 27n ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet for forbindelser 7 (Skjema II) unntatt at det ble anvendt Fmoc-4,4-difluorprolin istedenfor Fmoc-prolin i Trinn 2 .
Fremstilling av N- Boc- 4, 4- difluorprolinmetylester:
Til en løsning av 9,63 ml (7,2 mmol) oksalylklorid i 10,6 ml CH2C12omrørt ved -78 °C ble tilsatt en løsning av 0,94 ml (13,2 mmol) metylsulfoksid i 15 ml CH2CI2. Løsningen ble omrørt ved -78 °C i 30 min. En løsning av 1,47 g (6 mmol) N-Boc-4-hydroksyprolinmetylester i 19 ml CH2C12ble deretter tilsatt dråpevis. Blandingen ble omrørt ved -78°C i 1,5 h, og 3,34 ml (24 mmol) trietylamin ble tilsatt. Løsningen fikk anta romstemperatur og ble omrørt over natten. Den ble deretter fortynnet med 100 ml CH2CI2, vasket suksessivt med 100 ml vann, 100 ml IN HC1 og 100 ml saltlake, tørket (MgSOzj) og konsentrert in vacuo. Residuet ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi over silikagel (eluert med etylacetat/heksan, 1:3), for å tilveiebringe 1,294 g (89% utbytte) av N-Boc-4-okso-prolinmetylester.<1>R NMR (500 MHz, CDCI3) 8 1,45 (m, 9H) , 2,60 (m, 1H) , 2,95 (m, 1H) , 3,75 (m, 3H), 3,90 (m, 2H), 4,80 (m, 1H).
Til en løsning av 808 mg (3,33 mmol) N-Boc-4-okso-prolin-metylester i 13 ml CH2C12omrørt ved 0°C ble tilsatt 0,88 ml (7,19 mmol, 2,2 ekv.) DAST. Blandingen ble omrørt ved 0°C i 2 timer, ved romstemperatur i 16 timer, og helt i isvann. Blandingen ble omrørt ved romstemperatur i 2 timer. Den organiske fase ble separert, vasket med vann, tørket (MgSCU) og konsentrert in vacuo. Residuet ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi over silikagel (eluert med etylacetat-heksan, 1:8), for å tilveiebringe 754 mg (79% utbytte) av difluorert derivat som en lysegul olje.<1>H NMR (500 MHz, CDCI3) 8 1,50 (m, 9H), 2,45 (m, 1H) , 2,70 (m,
1H), 3,75 (m, 3H), 3,80 (m, 2H), 4,50 (m, 1H).
Fremstilling N- Fmoc- 4, 4- difluorprolin:
Til en løsning av 754 mg (2,85 mmol) N-Boc 4,4-difluorprolinmetylester i 5 ml THF omrørt ved 0°C ble tilsatt en løs-ning av 179 mg (4,27 mmol) litiumhydroksid i 5 ml vann. Løsningen ble omrørt ved 0°C i 3 h og ved romstemperatur i 1 time, fortynnet med vann, ekstrahert med eter, surgjort til pH 2-3 og ekstrahert med to 30 ml porsjoner etylacetat. De kombinerte organiske ekstrakter ble vasket med saltlake, tørket (MgSCM) og konsentrert in vacuo for å tilveiebringe 652 mg (91%) syre som et lysegult fast stoff.
En løsning av 652 mg (2 mmol) N-Boc-4,4-difluorprolin i 10 ml 1;1 TFA/ CH2C12ble omrørt ved 0°C i 45 min og konsentrert in vacuo. Residuet ble tatt opp i 3 ml dioksan, og 5 ml 10% vandig natriumkarbonat ble tilsatt, etterfulgt av en løsning av 675 mg (1 ekv.) Fmoc-Cl i 5 ml dioksan. Blandingen ble omrørt ved romstemperatur i 16 h, fortynnet med 20 ml vann, ekstrahert med 2 20-ml porsjoner dietyleter, surgjort til pH 2 og ekstrahert med tre 30-ml porsjoner etylacetat. De kombinerte organiske ekstrakter ble vasket med 50 ml saltlake, tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo. Residuet ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi over silikagel (eluert med CH2C12/ CH3OH 10:1), for å tilveiebringe 850 mg (88%) N-Fmoc-4,4-difluorprolin som et brun-aktig fast stoff. 1ti NMR (500 MHz, CDC13) 8 2,55 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 3,80 (m, 2H), 4,20 (m, 1H), 4,30 (m, 2H), 4,55 (m, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,45 (m, 2H), 7,70 (m, 2H), 7,90 (m, 2H) . Nøyaktig masse beregnet for C2oHi7F2N04m/e 373,11, funnet m/e 374,4.
Prosedyre for fremstillingen av analogene 28
Forbindelsene 28a- 28c ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet for forbindelsene 5 og 7 (Skjema I og Skjema II) unntatt at det ble anvendt Fmoc-dimetyltioprolin istedenfor Fmoc-prolin i Trinn 2.
Generelle prosedyrer for fremstillingen av forbindelser med utførelsesform A Formel I ( Schemes VII- VIII)
Forbindelser med utførelsesform A Formel I hvor R4=H og én R5=H:
Prosedyre for fremstillingen av analogene 29
Forbindelsene 29a- 29s ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet for forbindelsene 5 (Skjema I) unntatt at det ble anvendt Fmoc-alanin istedenfor Fmoc-prolin i Trinn 2 og under anvendelse av enten Fmoc-valin eller Fmoc-alanin
eller Fmoc-tert-leucin i Trinn 3.
Prosedyre for fremstillingen av analogene 32
Forbindelser 32a-32e ble fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet for forbindelser 5 (Skjema I) unntatt at det ble anvendt 2-(3-tert-butoksykarbonylamino-2-okso-pyrrolidin-l-yl)-4-metyl-pentansyre (30) (Neosystem katalognummer BB02101) istedenfor Fmoc-prolin i Trinn 2 etterfulgt av Trinn 4 (Skjema VII).
Forbindelser med utførelsesform A Formel I hvori R2og R3sammen med atomene som de er bundet til, danner en 5- leddet ring
Forbindelse med utførelesdanner et Formel I hvori X=N- CH3
Fremstilling av 3 - ({ 1-[ N-( isokinolin- 1- karbonyl)- N- metyl-hydrazinokarbonyl]- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso-smørsyre ( 34)
En suspensjon av 0,250 mmol av resin 3 (Skjema VIII) i 10 ml 20% piperidin i DMF ble rotert ved romstemperatur i 5 minutter, og væsken ble fjernet. Prosedyren ble gjentatt i 20 minutter. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), 1:1 DMF/ CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og CH2C12(tre ganger), og kort tørket. Til resinet ble tilsatt 5 ml tørt CH2C12, 0,128 ml DIEA (3ekv., 0,75 mmol) og 0,400 ml av en 20% løsning av fosgen i toluen (3 ekv., 0,75 mmol). Suspensjonen ble rotert ved romstemperatur i 1,5 timer. Væsken ble avsuget, og resinet ble vasket med CH2C12flere ganger. Til en suspensjon av resin i 5 ml CH2C12ble tilsatt 0,133 ml metylhydrazin (10 ekv., 2,5 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), 1:1 DMF/ CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og CH2CI2(tre ganger) og tørket in vacuo.
Til en 0,075 mmol porsjon av resinet i 3 ml NMP ble tilsatt suksessivt 52 mg 1-isokinolinkarboksylsyre-(4 ekv., 0,3 mmol), 0,19 ml DIEA (8 ekv., 0,6 mmol), 37mg HOBt (4 ekv., 0,3 mmol) og 104 mg HBTU (4 ekv., 0,3 mmol). Blandingen ble rotert ved romstemperatur over natten, og væsken ble fjernet. Resinet ble vasket suksessivt med DMF (to ganger), CH3OH (en gang), 1:1 DMF/ CH2C12(to ganger), CH3OH (en gang) og CH2C12(tre ganger) og tørket in vacuo.
Resinet ble behandlet med 4 ml 95% TFA i vann i 1 time. Blandingen ble filtrert. Filtratet ble konsentrert in vacuo for å tilveiebringe en olje, som ble renset ved HPLC for å tilveiebringe tittelforbindelsen (34).
Forbindelser med utførelsesform A Formel I hvori R3= R3= H:
3-({ 1-[( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- acetyl]- pyrrolidin- 2-karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( Gl)
Fremstilt som beskrevet for forbindelser 7 unntatt at det ble anvendt Fmoc-glycin istedenfor Fmoc-alanin i Trinn 3 (Skjema II) for å tilveiebringe 4,3mg av tittelforbindelsen. LC-MS (ES<+>) m/e=425,2 (M+H)
3-({ 1-[( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- acetyl]- 4, 4- difluor-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( G2)
Fremstilt som beskrevet for forbindelser 7 og 27 unntatt at det ble anvendt Fmoc-glycin istedenfor Fmoc-alanin i Trinn 3 (Skjema II) for å tilveiebringe 10,0mg av tittelforbindelsen. LC-MS (ES<+>) m/e=461,2 (M+H)
Generelle prosedyrer for fremstillingen av forbindelser med utførelsesform C Formel I og utførelsesform D Formel I hvori Y= c ( Skjemaene IX- XXii)
Kilder for utvalgte ringsystemer
5- tert- Butyl- 3-[ 2-( 9H - f luoren- 9- ylmetoksykarbonylamino)- 3-metyl- butyryl]- 2, 3- dihydro-[ 1, 3, 4] tiadiazol- 2- karboksylsyre- etylester ( 37)
En omrørt suspensjon av polyvinylpyridin (2,63g, 25mmol) i en løsning av 5-tert-butyl-2,3-dihydro-[1,3, 4]tiadiazol-2-karboksylsyre-etylester (36), ( J. Med. Chem., 34, s. 439
(1991)), (2,16g, lOmmol) i tørt toluen ble behandlet med dråpevis tilsetning av (l-klorkarbonyl-2-metyl-propyl)-kar baminsyre-9ff-f luoren-9-ylmetylester (4,76g, 12,lmmol) i 20ml vannfritt toluen. Etter omrøring i 16 timer ble suspensjonen filtrert, og filtratet ble vasket med mettet natriumbikarbonatløsning. Det organiske lag ble separert, vasket med vann, tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet hvilket gav en gul olje. Rensing ved hjelp av flash-kromatografi under eluering med 9/1 heksan/ etylacetat gav 2,66 g (49% utbytte) av tittelforbindelsen (37) som en klar, viskøs olje. 1ti NMR (500MHz, CD3OD) 5 0,89(d, 1,5H), 0,93 (d, 1,5H), 1,00 (d, 1,5H), 1,06 (d, 1,5H), 1,22 (t, 3H) , 1,28 (s, 9H) , 2,12-2,22 (m, 0,5H), 2, 32-2, 42 (m, 0,5H), 4,18-4,28 (m, 2H) , 4,31-4,45 (m, 2H) , 4,96-5,01 (m, 0,5H), 5,02-5,10 (m, 0,5H), 5,52 (d, 0,5H), 5,61 (d, 0,5H), 6,10 (s, 0,5H), 6,13 (s, 0,5H), 7,27-7,34 (m, 2H), 7,35-7,42 (m, 2H), 7, 56-7, 64 (m, 2H) , 7, 73-7, 78 (m, 2H) .
3-( 2- Acetylamino- 3- metylbutyryl)- 5- tert- butyl- 2, 3- dihydro-[ 1, 2, 4] - tiadiazol- 2- karboksylsyre- etylester ( 38)
Til en løsning av (37) (Skjema IX) (0,508g, 0,94 mmol) i CH3CN (10 ml) ble tilsatt dietylamin (1 ml). Løsningen ble omrørt ved romstemperatur i 2 timer, løsningsmiddelet ble fjernet in vacuo, og den resulterende olje ble destillert azeotropt med CH2CI2(4x) . Råoljen ble oppløst i CH2CI2(5 ml) og trietylamin (0,26ml, l,86mmol), og acetylklorid (80fil, l,lmmol) ble tilsatt. Løsningen ble omrørt ved romstemperatur under en N2-atmosfære i 2 timer. Løsningsmid-delet ble inndampet, og råmaterialet ble oppløst i EtOAc og vasket med 0,5N NaHS04(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake og ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav en gul olje. Rensing ved hjelp av flash-kolonnekromatografi på silikagel under anvendelse av heksan/- EtOAc (95/5 til 90/10%) gav produktet som en gul olje (0,301g, 89% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CDC13) 5 0,88 (dd, 3H) , 0,99 (dd, 3H) , 1,16-1,45 (m, 12H), 2,02 (s, 3H), 2,09-2,19 (m, 0,5H), 2,30-2,40 (m, 0,5H), 4,12-4,29 (m, 2H), 5,20-5,27 (m, 0,5H), 5,30-5,36 (m, 0,5H), 6,60(s, 0,5H), 6,90 (s, 0,5H), 6,20-6,31 (m, 1H). Analytisk HPLC (C18-ko lonne),(blanding av diastereomerer) 7,77, 7,98min. LC-MS (ES<+>) m/e=358,3 (M+H).
3- ( 2- Acetylamino- 3- metylbutyryl)- 5- fcert- butyl- 2, 3- dihydro-[ 1, 2, 4] tiadiazol- 2- karboksylsyre-( 39)
Til en løsning av 38 (0,301g, 0,84mmol) i MeOH (lOml) ble tilsatt IN NaOH-løsning (l,7ml, l,7mmol). Blandingen ble omrørt ved romstemperatur i 2 timer, og løsningsmiddelet ble inndampet. Residuet ble oppløst i EtOAc og vasket med 0,5N NaHS04(2x) og saltlake og ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav tittelforbindelsen som et gult fast stoff (0,277g, kvantitativt).
Fremstilling av 2-( benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3-yl)- karbaminsyre- allylester ( 40)
Forbindelse 40 ble fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4- hydroksy-smørsyre-tert-butylester ved hjelp av en modifi-kasjon av prosedyren beskrevet i Bioorg. Med. Chem. Lett. Vol. 2, No. 6, s. 613-618, (1992).
Til en løsning av DMSO (27,52 g, 352 mmol) i CH2C12(240 ml) ved -78°C ble tilsatt oksalylklorid (24,4 g, 192 mmol). Etter 15 min ble en løsning av 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre-tert-butylester (41,44 g, 160 mmol) i CH2CI2(100 ml) langsomt tilsatt, og blandingen ble omrørt ved -78°C i ytterligere 1,5 timer. DIEA (62,0 g, 480 mmol) ble tilsatt, og blandingen fikk anta romstemperatur i 15 min. Den resulterende løsning ble fortynnet med CH2Cl2(300 ml), vasket med 0,5 N NaHS04(500 ml x 2), vann (300 ml x 2) og saltlake (400 ml x 2). Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og konsentrert in vacuo til et volume av 200ml. Til denne løsning ble tilsatt benzylalkohol (48 g, 444 mmol), etterfulgt av 3Å molekylsikt (30 g) og p-toluensulfonsyre (0,8 g). Reaksjonsblandingen ble om-rørt i 4 dager, og TFA (96 ml) ble tilsatt. Den resulterende suspensjon ble omrørt i en time, deretter inndampet in vacuo. Etylacetat (500 ml) ble tilsatt, og blandingen ble filtrert gjennom celitt. Filtratet ble vasket med mettet NaHC03(500 ml x 2), vann (400 ml x 2) og saltlake (300 ml x 2). Den organiske løsning ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet in vacuo hvilket gav 90 g av en lysegul olje, som ble omrørt med heksan (400 ml x 2) hvilket gav 31 g av et råprodukt fra det lavere residuum. Kromatografi under anvendelse av etylacetat/heksan (4/96 til 22/78) gav 6,97 g av anti- 2-(benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester (høyere Rf), 4,53 g av syn-diastereomeren og 12,97 g av blandingen av diastereomerer (totalt utbytte 53%) .<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) for anti-diastereomeren: 8 2,41-2,45 (m, H), 3,02-3,07 (m, H), 4,28 (br, H), 4,50-4, 80 (m, 3H), 4,80-5,15 (m, 2H) , 5,24-5,32 (m, 2H), 5,48 (s, H), 5,88-6,00 (m, H), 7,31-7,56 (m, 5H); for syn-diastereomer: 8 2,49-2,53 (m, H), 2,83-2,89
(m, H), 4,57-4,65 (m, 4H), 4,87-4,90 (m, H), 5,12-5,30 (m,
3H), 5, 52-5, 53 (d, H), 5, 88-6, 00 (m, H) , 7,31-7,39 (m, 5H); retensjonstid på analytisk HPLC: 10,49 min for anti-diastereomeren og 10,37 min for syn-diastereomeren; LC-MS: m/z = 292 (M+H+) .
3- ( 2- Acetylamino- 3- metylbutyryl)- 5- tert- butyl- 2, 3- dihydro-[ 1, 2, 4]- tiadiazol- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso-tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 41)
Til en løsning av (2-benzyloksy-5-okso-tetrahydrofuran-3-yl)-karbaminsyre-allylester (40) (0,385g, l,32mmol) i DMF (2ml) og CH2C12(2ml) ble tilsatt DMBA (0,456g, 2,92mmol) og Pd(PPh3)4(0,136g, 0,12mmol), og løsningen ble omrørt ved romstemperatur i 15 min. En løsning av (39) i CH2CI2(4,5ml) og DMF (0,5ml) ble tilsatt, etterfulgt av HOBT (0,168g, l,24mmol) og EDC (0,256g, l,33mmol). Blandingen ble omrørt ved romstemperatur i 18 timer under N2. Løs-ningsmiddelet ble inndampet. Råmaterialet ble oppløst i EtOAc og vasket med 0,5N NaHS04(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake og ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav et gult fast stoff. Rensing ved hjelp av flash-kolonnekromatografi gav tittelforbindelsen (41) som en blanding av diastereomerer (374mg, 88% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CDC13) 5 0,75-1,05 (m, 6H), 1,19-1,34 (m, 9H) , 1, 93-2, 08 (m, 3H), 2,19-2,50 (m, 2H) , 2, 80-3, 03 (m, 1H), 4,56-4,93 (m, 3H), 5,02-5,20 (m, 1H), 5,46-5,56 (m, 1H) , 5,95-6,16 (m, 2H) , 6, 86-6, 95 (m, 1H) , 7, 20-7, 43 (m, 5H) . Analytisk HPLC (C18-kolonne) , (blanding av diastereomerer) 8,58min. LC-MS (ES<+>) m/e=519,2 (M+H).
Fremstilling av 3-{[ 3-( 2- acetylamino- 3- metyl- butyryl)- 5-ter t- butyl- 2, 3- dihydro-[ 1, 3, 4] tiadiazol- 2- karbonyl]- amino)-4- okso- smørsyre ( 42)
En 45 mg (0,087mmol) prøve av 41 ble hydrolysert i henhold til metode A (se Skjema XXIII) hvilket gav 17 mg (45% utbytte) av tittelforbindelsen. Analytisk HPLC (C18-kolonne): 5,15 min. LC-MS (ES<+>) m/e=429,3 (M+H).
5- tert- Butyl- 3-[ 2-( 4- metoksy- benzoylamino)- 3- metyl-butyryl]- 2, 3- dihydro-[ 1, 3, 4] tiadiazol- 2- karboksylsyre-etylester ( 43)
Ble fremstilt ved hjelp av metoden rapportert ovenfor for forbindelse 38 under anvendelse av anisoylklorid hvilket gav 216mg (50%) av tittel forbindelsen som et amorft fast stoff.<1>R NMR (500 MHz, CDC13) 8 0,92 (d, 1,5H), 0,98 (d, 1,5H), 1,03 (d, 1,5H), 1,07 (d, 1,5H), 1,21 (t, 3H), 1,28 (s, (H), 2,21-2,28 (m, 0,5H), 2,41-2,48 (m, 0,5H), 3,83 (s, 3H), 4,15-4,28 (m, 2H), 5,41-5,46 (m, 0,5H), 5,48-5,53 (m, 0,5H), 6,08 (s, 0,5H), 6,13 (s, 0,5H), 6,75 (d, 0,5H), 6,85 (d, 0,5H), 6,91 (d, 2H) , 7,59 (d, 2H) .
5- tert- Butyl- 3-[ 2-( 4- metoksy- benzoylamino)- 3- metyl-butyryl]- 2, 3- dihydro-[ 1, 3, 4] tiadiazol- 2- karboksylsyre- ( 44)
Fremstilt ved hjelp av prosedyren beskrevet i 39 hvilket gav 180mg (kvantitativt) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.<1>H NMR (500 MHz, CDCI3) 8 0,92 (d, 1,5H), 0,96
(d, 1,5H), 1,03 (d, 1,5H), 1,07 (d, 1,5H), 2,22-2,30 (m, 0,5H), 2,37-2,45 (m, 0,5H), 3,83 (s, 1,5H) 3,84 (s, 1,5H), 5,41-5,48 (m, 1H), 6,14 (s, 0,5H), 6,15 (s, 0,5H), 6,87-6,95 (m, 2H), 7,75-7,83 (m, 3H).
5- tert- Butyl- 3-[ 2-( 4- metoksy- benzoylamino)- 3- metyl-butyryl]- 2, 3- dihydro-[ 1, 3, 4] tiadiazol- 2- karboksylsyre-( 2-benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 45a og 45b)
Ble fremstilt ved hjelp av prosedyren rapportert for forbindelse 41 hvilket gav den ubehandlede tittelforbindelse som 4 diastereomerer. Råmaterialet ble renset ved hjelp av flash-kromatografi, under eluering med en gradient av CH2C12til CH2Cl2/etylacetat (6/4) hvilket gav 31mg av den høyere Rf-komponent som en enkelt diastereomer (45a). Analytisk HPLC (Microsorb C18-kolonne) 19,87 min. 1ti NMR (500 MHz, CDCI3) (enkelt diastereomer) 8 1,04 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 1,28 (s, 9H), 2,77 (d, 0,5H), 2,81 (d, 0,5H), 2,90 (d, 0,5H), 2,95 (d, 0,5H), 3,84 (s, 3H), 4 , 44-4, 49 (m, 1H) , 4,53 (d, 1H), 4,85 (d, 1H), 5,02-5,08 (m, 1H), 6,37 (s, 1H), 6,41 (d, 1H), 6,93 (d, 2H), 7,26-7,40 (m, 5H), 7,75 (d, 2H), 7,92-7,96 (m, 1H).
Den lavere Rf-fraksjon inneholdt 185mg av et fast stoff som en 3:1:2-blanding av diastereomerer (45b). Analytisk HPLC: Microsorb C18-kolonne. 19,00, 19,26, 20,02 minutter,<1>H NMR (500 MHz, CDCI3) (3:1:2-blanding av 3 diastereomerer) 8 0,89 (d, 2,25 H), 0,98 (d, 0,75H), 1,02 (d, 0,5H), 1,03 (d, 1,5H), 1,08 (d, 0,25H), 1,10 (d, 0,75H), 1,16 (s, 0,75H), 1,17 (s, 2,25H), 1,23 (s, 0,375H), 1,24 (s, 1,125H), 1,28 (s, 1,125 H), 1,29 (s, 3,375H), 2,12-2,18 (m, 0,33H), 2,32-2,42 (m, 0,67H), 2,43-2,51 (m, 0,5H), 2,61-2,67 (m, 0,5H), 2,84-2,92 (m, 0,5H), 2,96-3,07 (m, 0,5H), 3,85 (s, 3H), 4,58-4,71 (m, 2H), 4,81 (d, 0,16H), 4,86 (d, 0,32H), 4,91 (d, 0,52H), 5,09-5,13 (m, 0,33H), 5,14-5,18 (m, 0,67H), 5,35 (dd, 1H), 5,46 (s, 0,16H), 5,53 (d, 0,32H), 5,58-5,62 (d, 0,52H), 6,17 (s, 0,52H), 6,20 (s, 0,16H), 6,34 (s, 0,32H), 6,50 (d, 0,32H), 6,62 (d, 0,16H), 6,67 (d, 0,52H), 6,86 (d, 0,33H), 6,91 (d, 0,67H), 6,94 (d, 1,0H), 7,24-7,43 (m, 5H), 7,61 (d, 1H), 7,70 (d, 0,33H), 7,71 (d, 0,67H), 7,76 (d, 1H).
Fremstilling av 3-({ 5- tert- butyl- 3-[ 2-( 4- metoksy- benzoylamino) - 3- metyl- butyryl]- 2, 3- dihydro-[ 1, 3, 4] tiadiazol- 2-karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 4 6a)
En 30mg prøve av 45a ble hydrolysert i henhold til metode B (se Skjema XXIII) hvilket gav 8mg (30% utbytte) av det ønskede produkt. Analytisk HPLC (Microsorb C-18-kolonne, acetonitril/ vann, med TFA buffer) 12,85 min,<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) 8 0,98-1,1 (m, 6H), 1,28 (s, 9H), 2,20-2,31 (m, 1H), 2, 40-2, 48 (m, 1H), 2,6-2,72 (m, 1H) , 3,84 (s, 3H) , 4,18-4,26 (m, 1H), 4, 56-4, 62 (m, 1H) , 5, 25-5,32 (m, 1H) , 6,24-6,28 (m, 1H), 6,98 (d, 2H), 7,85 (d, 2H).
Fremstilling av 3-({ 5- tert- butyl- 3-[ 2-( 4- metoksy- benzoylamino) - 3- metyl- butyryl]- 2, 3- dihydro-[ 1, 3, 4] tiadiazol- 2-karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 46b)
En 30mg prøve av 45b (blanding av 3 diastereomerer) ble hydrolysert i henhold til metode B (se Skjema XXIII) hvilket gav 22mg (84% utbytte) av det ønskede produkt som en 3:2-blanding av diastereomerer. Analytisk HPLC (Microsorb cyano-kolonne) 7,08, 7,78min.<X>H NMR (500MHz, CD3OD) 8 0,98-1,08 (m, 4H), 1,09-1,12 (m, 2H), 1,29&1,31 (2 singlets, 9H), 2,23-2,30 (m, 0,5H), 2,36-2,55 (m, 1,5H), 2,62-2,72 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 4,18-4,27 (m, 1H), 4,58-4,65 (m, 1H), 5,27-5,33 (m, 1H), 6,23-6,27 (m, 1H), 7,00 (d, 2H), 7,70-7,88 (m, 2H).
1- ( 2- Benzyloksykarbonylamino- 2- metyl- propionyl)- pyrrolidin-2- karboksylsyre- tert- butylester ( 49)
Til en løsning av prolin-tert-butylester (47) (2,00g, 12mmol, i CH2C12(15ml) ble tilsatt N-karbobenzyloksy-2-metylalanin (3,05g, 13mmol), HOBT (2,36g, 17mmol) og EDC (3,43g, 18mmol), og løsningen ble omrørt ved romstemperatur under N2i 48 timer. Løsningsmiddelet ble inndampet, råmaterialet ble oppløst i EtOAc og vasket med 0,5N NaHS04(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake og ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav et hvitt fast stoff (4,68g, 100%).<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 1,20-2,15 (m, 4H), 1,43 (s, 9H), 1,59 (d, 6H), 3,21-3,79 (m, 2H), 4,35 (br s, 1H), 4,82-5,19 (m, 3H), 5,74 (br s, 1H), 7,17-7,49 (m, 5H). Analytisk HPLC (C18-kolonne) 10,66 min. LC-MS (ES<+>) m/e= 391,3 (M+H).
1- [ 2- ( 4- Metoksy- benzoylamino)- 2- metyl- propionyl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre- tert- butylester ( 50)
Til en løsning av 49 (l,00g, 2,56mmol) i MeOH (20ml) ble tilsatt 10% Pd/C (200mg), og blandingen ble omrørt under H2i 2 timer. Blandingen ble filtrert gjennom et 0,45jim PTFE-filter, og løsningsmiddelet ble fjernet in vacuo hvilket gav en farveløs olje. Denne olje ble oppløst i CH2C12
(25ml) og DIEA (660|Xl, 3,79mmol), og p-anisoylklorid (480mg, 2,8mmol) ble tilsatt. Løsningen ble omrørt ved romstemperatur under N2i 18 timer. Løsningsmiddelet ble fjernet in vacuo, og oljen ble oppløst i EtOAc. Den organiske fase ble vasket med 0,5N NaHS04(2x), vann, mettet NaHCC>3 (2x) og saltlake. Den organiske fase ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav et hvitt fast stoff som ble renset ved hjelp av flash-kolonnekromatografi, under eluering med CH2Cl2/MeOH (99/1 til 98/2%) hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (655mg, 65% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 1,47 (s,
9H), 1,68-2,24 (m, 5H), 1,80 (d, 6H), 3,55-3,68 (m, 1H), 3, 72-3, 93 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 4,43-4, 55 (m, 1H) , 6,90 (d, 2H) , 7,60 (br s, 1H), 7,77 (d, 2H) . Analytisk HPLC (C18-kolonne)8,98min.
1-[ 2-( 4- Metoksy- benzoylamino)- 2- metyl- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 51)
Til en løsning av 50 (325mg, 0,83mmol) i dioksan (5ml) ble tilsatt trietylamin (463^1, 3,32mmol) og TMS-triflat (642(al, 3,32mmol), og løsningen ble omrørt ved 100 C i 5 timer, deretter ved romstemperatur i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med vann, innstilt til pH 8 med mettet NaHC03og ekstrahert med Et20, tørket over Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav et hvitt fast stoff (230mg, 83% utbytte) som ble anvendt direkte i neste trinn. Til en løsning av (2-benzyloksy-5-okso-tetrahydrofuran-3-yl)-karbaminsyre-allylester (40) (l,027g, 3,5mmol) i CH2CI2(20ml) ble tilsatt DMBA (543mg, 3,48mmol) og Pd(PPh3)4(280mg, 0,24mmol), og løsningen ble omrørt ved romstemperatur under N2i 20 minutter. En løsning av 1-[2-(4-metoksy-benzoylamino) -2-metyl-propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-(818mg, 2,45mmol) i CH2C12(5ml) ble tilsatt, etterfulgt av HOBT (0,534g, 3,95mmol) og EDC (738mg, 3,84mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romstemperatur i 18 timer under N2. Løsningsmiddelet ble inndampet, råmaterialet ble oppløst i EtOAc og vasket med 0,5N NaHS04(2x) , mettet NaHC03(2x) og saltlake og ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav et gult fast stoff. Rensing ved hjelp av flash-kolonnekromatografi, under eluering med etylacetat/heksan (20/80 til 50/50%), gav produktet som et lysegult fast stoff (760mg, 61% utbytte) .<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,53 (d, 6H) , 1,65-1,93
(m, 3H), 1,96-2,14 (m, 1H), 2,60 (dd, 0,1H), 2,77 (dd, 0,85H), 2,94 (dd, 0,85H), 3,04-3,11 (m, 0,2H), 3,42-3,52 (m, 1H), 3,57-3,67 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 4,38-4,76 (m, 3H), 4,84 (d, 1H), 5,64-5,70 (m, 1H), 6,96-7,03 (m, 2H), 7, 23-7,43 (m, 5H) , 7, 78-7, 97 (m, 2H) . Analytisk HPLC (C18-kolonne) 13,32, 14,37 min. LC-MS (ES<+>) m/e=524,3 (M+H).
Fremstilling av 3-({ 1-[ 2-( 4- metoksy- benzoylamino)- 2- metyl-propionyl] - pyrroiidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre
( 52)
En 61mg (0,14mmol) prøve av 51 ble hydrolysert i henhold til metode C (se Skjema XXIII) for å tilveiebringe 30mg (60% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC (C18-kolonne) 6,79min. LC-MS (ES<+>) m/e=434,3 (M+H).
1-[ 2-( 4- Metoksy- benzoylamino)- 3- metylbutyryl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre- tert- butylester ( 54)
Til en suspensjon av H-val-pro-OtBu»HCl (53) (2,011g, 7,44mmol) i CH2C12(20ml) ble tilsatt DIEA (3,2ml, 18,4mmol) etterfulgt av en løsning av 4-metoksy-benzoylklorid (l,26g, 7,4mmol) i CH2CI2(5ml). Løsningen ble omrørt ved romstemperatur under nitrogen i 1 time deretter konsentrert. Den resulterende olje ble oppløst i EtOAc og vasket med 0,5N KHS04(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake, deretter konsentrert in vacuo hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (2,814g, 94% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 5 1,05 (dd, 6H), 1,46 (s, 9H), 1,88-2,29 (m, 5H), 3,65-3,74 (m, 1H), 3,81-3,92 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 4,32-4,42 (m, 1H), 4,81-4,91 (m, 1H) , 6, 79-6, 86 (m, 1H) , 6,91 (d, 2H), 7,78 (d, 2H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 10,18min.
1-[ 2-( 4- Metoksy- benzoylamino)- 3- metylbutyryl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl) - amid ( 56)
En l,079g (2,67mmol) prøve av 54 ble oppløst i 15% TFA i CH2CI2(40ml) og omrørt ved romstemperatur i 4 timer. Løsningsmiddelet ble konsentrert in vacuo hvilket gav 55 som et hvitt fast stoff (0,93g, 100%) som ble anvendt i neste trinn.
Til en løsning av 40 (l,796g, 6,17mmol) i CH2C12(20ml) ble tilsatt DMBA (l,119g, 7,17mmol) og Pd(PPh3)4(0,683g, 0,59mmol), og løsningen ble omrørt ved romstemperatur i 20 minutter. En løsning av 55 (0,928g, 2,67mmol) i CH2C12(17ml) og DMF (2ml) ble tilsatt, etterfulgt av HOBT (0,811g, 6,01mmol) og EDC (l,16g, 6,04mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romstemperatur i 18 timer under N2. Løsningsmiddelet ble inndampet, råmaterialet ble oppløst i EtOAc og vasket med 0,5N NaHS04(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake og ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav et gult fast stoff. Rensing ved hjelp av flash-kromatografi under eluering med etylacetat/ CH2CI2(10/90 til 40/60%) gav tittelforbindelsen som et lysegult fast stoff (910mg, 63% utbytte).<:>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 0,96 (dd, 6H), 1,84-2,19 (m, 4H), 2,25-2,38 (m, 1H), 2,45 (dd, 1H), 2, 80-2, 98 (m, 1H), 3, 60-3, 72 (m, 1H) , 3,82-3,95 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 4, 26-4, 95 (m, 6H) , 5,41(s, 0,2H), 5,53 (d, 0,8H), 6,67-6,77 (m, 1H), 6,88-6,99 (d, 2H), 7,22-7,57 (m, 5H), 7,71-7,82 (d, 2H) .
Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 9,21 min. LC-MS (ES<+>) m/e= 538, 3 (M+H).
3-({ 1-[ 2-( 4- Metoksy- benzoylamino)- 3- metyl- butyryl]-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 57)
En 125mg (0,23mmol) prøve av 56 ble hydrolysert i henhold til metode A (se Skjema XXIII) for å tilveiebringe 60mg (58% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 5,71 min. LC-MS (ES<+>) m/e=448,2 (M+H).
Fremstilling av 4- amino- 3- klor- benzosyre:
En suspensjon av 4-amino-3-klorbenzonitril (4,82g, 31,58mmol) ble oppvarmet til tilbakeløp i 6N HC1 (140ml). Fellingen ble oppløst ved oppvarming hvilket gav en farve-løs løsning. Ved ytterligere oppvarming ble løsningen uklar. Etter 9timer ble reaksjonsblandingen avkjølt til romstemperatur. Den resulterende utfelling ble filtrert, deretter oppløst i THF, og løsningsmiddelet ble inndampet. Residuet ble gjentatte ganger konsentrert fra toluen hvilket gav et hvitt fast stoff (3,18g, 59% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD30D:CDC13 1 :4) 8 6, 80 (d, 1H), 7,75 (dd, 1H), 7,94 (d, 1H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 8,73 min.
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- 3- metylbutyryl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre- tert- butylester ( 58)
Til en suspensjon av 53 (l,707g, 6,31mmol) i CH2CI2(25ml)
ved 0°C ble tilsatt DIEA (3,2ml, 18,4mmol) etterfulgt av en løsning av 4-amino-3-klorbenzosyre (l,298g, 7,56mmol), HOBT (l,005g, 7,44mmol) og EDC (l,456g, 7,58mmol). Den resulterende blanding ble omrørt ved 0'C i 15 minutter, deretter fikk den anta romstemperatur og ble omrørt i 18 timer. Løs-ningsmiddelet ble inndampet, og den resulterende olje ble oppløst i EtOAc, vasket med 0,5N NaHS04(2x) , mettet NaHC03(2x) og saltlake hvilket gav et hvitt fast stoff (2,68g). Flash-kromatografi under anvendelse av Me0H/CH2Cl2(1/99 til 2/98%) gav 2,04g (76% utbytte) av 58 som et hvitt fast stoff.<X>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 1,05 (dd, 6H), 1,47 (s,
9H), 1, 86-2, 29 (m, 5H), 3, 62-3, 78 (m, 1H) , 3, 78-3, 94 (m,
1H) , 4,39 (dd, 1H) , 4, 79-4,89 (dd, 1H), 6,73 (d, 1H) , 6,78 (d, 1H), 7,52 (dd, 1H), 7,75 (d, 1H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 16,18min. LC-MS (ES<+>) m/e=424,3 (M+H).
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benxoylamino)- 3- metylbutyryl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 60)
En 0,632g (l,49mmol) prøve av 58 ble oppløst i 50% TFA i CH2CI2(20ml), og løsningen ble omrørt ved romstemperatur i 2 timer. Gjenværende TFA ble fjernet ved gjentatt konsen-trering fra CH2C12(3x) hvilket gav produktet som et hvitt fast stoff.
En 385mg (l,04mmol) prøve fikk reagere med 40 ved hjelp av metoden anvendt for forbindelse 56. Tittelforbindelsen (60) ble isolert som et gult fast stoff (265mg, 45% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 0,89-1,12 (m, 6H) , 1,72-2,26 (m, 5H) , 2,49 (dd, 0,25H), 2,60 (dd, 0,7H), 2,80 (dd, 0,75H), 2, 96-3, 09 (m, 0,3H), 3, 64-3, 77 (m, 1H) , 3,94-4,10 (m, 1H) , 4, 20-4, 74 (m, 4H) , 4, 76-4, 95 (m, 1H), 5,51 (s, 0,5H), 5,61-5,70 (m, 1,5H), 6,79 (dd, 1H), 7,23-7,43 (m, 5H), 7,48-7,61 (m, 1,4H), 7,68-7,81 (m, 1H) , 7,99-8,12 (m, 0,6H).
Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 14,90, 15,20 min. LC-MS (ES<+>) m/e=557,2 (M+H).
3 - ( { 1-[ 2- ( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- 3- metyl- butyryl]-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 61)
En 45mg (0,08mmol) prøve av 60 ble hydrolysert i henhold til metode A (se Skjema XXIII) for å tilveiebringe 30mg (80% utbytte) av tittelforbindelsen: 1ti NMR (500MHz, CD3OD) 6 1,06 (dd, 6H), 1,78-2,38 (m, 5H), 2,38-2,86 (m, 2H), 3, 62-3, 83 (m, 1H) , 4,12-4,76 (m, 4H) , 7,04-7,21 (m, 1H), 7,58-8,01 (m, 2H) ; Analytisk HPLC 8,16 min. LC-MS (ES<+>) m/e=467,3 (M+H).
1-[ 2-( 4- hydroksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- 3- metyl-butyryl] - pyrrolidin- 2- karboksylsyre- tert- butylester ( 63)
Til en løsning av 62 (fremstilt fra 53 og Fmoc-Cl) (600mg, l,22mmol) i vannfritt DMF (lOml) ble tilsatt dietylamin
(3ml). Løsningen ble omrørt ved romstemperatur under N2i 3 timer, og løsningsmiddelet ble inndampet. Den resulterende olje ble oppløst i CH2C12(8ml), og 3,5-dimetyl-4-hydroksy-benzosyre (0,302g, l,82mmol), HOBT (338mg, 2,5mmol) ogEDC (0,456g, 2,43mmol) ble tilsatt, og løsningen ble omrørt ved romstemperatur under N2i 18 timer. Løsningsmiddelet ble konsentrert in vacuo, og den resulterende olje oppløst i EtOAc, vasket med 0,5N NaHS04(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake hvilket gav råproduktet som et hvitt fast stoff (0,80g). Flash-kromatografi under eluering med Me0H/CH2Cl2(1/99 til 2/98%) gav 380mg (75% utbytte) av et hvitt fast stoff.<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 1,06 (dd, 6H), 1,47 (s,
9H), 1,90-2,32 (m, 5H), 2,24 (s, 6H), 3,65-3,75 (m, 1H), 3,84-3,92 (m, 1H), 4,36-4,42 (m, 1H), 4,82-4,88 (m, 1H), 5,53-5,61 (m, 1H) , 6,77-6, 85 (m, 1H), 7,42 (s, 2H) . Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 17,53 min. LC-MS (ES<+>) m/e=419,3 (M+H).
1-[ 2-( 4- hydroksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- 3- metyl-butyryl] - pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso-tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 64)
Fremstilt fra 63 og 40 ved hjelp av metoden anvendt for å fremstille 56 hvilket gav tittelforbindelsen (64) som et lysegult fast stoff (352mg, 72% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD30D) 8 0,83-1,28 (m, 6H), 1,66-2,37 (m, 3H), 2,23 (s,
6H) , 2, 48-2, 54 (m, 0,2H), 2,61 (ddd, 0,8H), 2,72 (ddd, 0,9H), 3,01-3,09 (m, 1H) , 3, 66-3, 76 (m, 1H) , 3, 95-4, 07 (m, 1H) , 4, 48-4, 73 (m, 3H), 4, 75-4, 92 (m, 1H), 5, 45-5, 48 (m, 0,1H), 5,61-5,64 (m, 0,1H), 5,64-5,70 (m, 0,8H), 7,21-7,62 (m, 6H) , 7, 88-8,04 (m, 1H) . Analytisk HPLC (cyano-kolonne)
(blanding av 2 diastereomerer) 17,73 min. LC-MS (ES<+>) m/e= 552,3(M+H).
3- ( { 1-[ 2-( 4- hydroksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- 3- metyl-butyryl ]- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 65)
En 160mg (0,29mmol) prøve av 64 ble hydrolysert i henhold til metode A (se Skjema XXIII) for å tilveiebringe 13,lmg (10% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 10,28min. LC-MS (ES<+>) m/e=462,2 (M+H).
1- [ 2- ( 2- 9fi- f luoren- 9- yl- acetylamino) - 3, 3- dimetyl- butyryl] - pyrrolidin- 2- karboksylsyre- tert- butylester ( 66)
Til en løsning av H-pro-OtBu (53) (l,033g, 6,0mmol, II, Skjema 5) i CH2C12(20ml) og DMF (5ml) ble tilsatt Fmoc-tLeu-OH (2,337g, 6,60mmol, I, Skjema 5), HOBT (l,63g, 12,lmmol) og EDC (2,30g, 12,0mmol), og løsningen ble omrørt ved romstemperatur under N2i 18 timer. Løsningsmiddelet ble fjernet in vacuo, og residuet ble oppløst i EtOAc, deretter vasket med 0,5N NaHS04(2x) , mettet NaHC03(2x) og saltlake. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og inndampet hvilket gav et lysegult fast stoff (3,65g). Flash-kromatografi under anvendelse av EtOAc/heksan (10/90 til 20/80%) gav tittelforbindelsen (66)
(2,25g, 74% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 5 1,09 (s,
9H) , 1,47 (s, 9H), 1, 79-2, 28 (m, 3H) , 3,62-3, 72 (m, 1H) , 3, 76-3, 83 (m, 1H) , 4,18-4,43 (m, 4H) , 5, 48-5, 67 (m, 1H) , 7,28-7,44 (m, 4H), 7,55-7,64 (m, 2H), 7,72-7,82 (m, 2H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 11,95 min. LC-MS (ES<+>) m/e=507,3 (M+H).
1-[ 2-( 4- Metoksy- benzoylamino)- 3, 3- dimetyl- butyryl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre- tert- butylester ( 67)
Til en løsning av 66 (0,503g, 0,99mmol) i DMF (8ml) ble tilsatt dietylamin (2,5ml), og løsningen ble omrørt ved romstemperatur i 1 time, og løsningsmiddelet ble inndampet. Det resulterende residuum ble gjentatte ganger konsentrert fra CH2CI2(3x) . Den resulterende olje ble oppløst i CH2CI2(9ml), og DIEA (260(il, l,49mmol) og 4-metoksy-benzoylklorid (190mg, l,05mmol) ble tilsatt. Løsningen ble omrørt under N2i 18 timer, og løsningsmiddelet ble konsentrert in vacuo. Residuet ble oppløst i EtOAc og vasket med 0,5N NaHSCM(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake, deretter tør-ket over vannfritt Na2S04og inndampet hvilket gav et hvitt fast stoff (0, 529g) . Flash-kromatografi på silikagel under anvendelse av MeOH/CH2Cl2(1/99 til 2/98%) gav tittelforbindelsen (2,25g, 74% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,01 (s, 1,4H), 1,11 (s, 7,6H), 1, 73-2, 25 (m, 4H) , 2,47-2,77 (m, 1H), 2,81 (dd, 0,7H), 2,91-3,11 (m, 0,3H), 3,61-4,03 (m, 3H), 3,84 (s, 3H), 4,29-4,49 (m, 1H), 4,49-5,00 (m, 5H), 5,46 (s, 0,15H), 5,58-5,73 (m, 0,85H), 6,94-7,04 (m, 2H), 7,27-7,41 (m, 4H) , 7,61-7,73 (m, 1H) , 7,74-7,84 (m, 2H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 13,10 min.
1-[ 2-( 4- Metoksy- benzoylamino)- 3, 3- dimetyl- butyryl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 68)
Til en løsning av 67 (0,90g, l,74mmol) i CH2C12(25ml) ble tilsatt 2,6-lutidin (2,lml, 18,0mmol) og TMS-triflat (2,3ml, ll,9mmol), og blandingen ble omrørt ved romstemperatur under N2i l,5timer. Den resulterende blanding ble fortynnet med CH2CI2, vasket med 10% NaHCC>3 (2x) og saltlake, deretter tørket over Na2SC>4, filtrert og inndampet. Residuet ble oppløst i CH2CI2, deretter behandlet med DIEA (0,6ml, 3,5mmol) og 4-metoksy-benzoylklorid (0,355g, 2,09mmol) og ble omrørt under N2ved romstemperatur i 18 timer. Råproduktet ble renset ved hjelp av flash-kromato grafi under eluering med CH2C±2/MeOH (99/1) hvilket gav tittelforbindelsen (274mg, 28% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,01 (s, 1,4H), 1,11 (s, 7,6H), 1,73-2,25 (m, 4H), 2,47-2,77 (m, 1H), 2,81 (dd, 0,7H), 2,91-3,11 (m, 0,3H), 3,61-4,03 (m, 3H), 3,84 (s, 3H), 4, 29-4, 49 (m, 1H) , 4,49-5,00 (m, 5H), 5,46 (s, 0,15H), 5,58-5,73 (m, 0,85H), 6,94-7,04 (m, 2H), 7,27-7,41 (m, 4H), 7,61-7,73 (m, 1H) , 7,74-7,84 (m, 2H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 17,03, 17,39min. LC-MS (ES<+>) m/e=552,3
(M+H).
3-({ 1-[ 2-( 4- Metoksy- benzoylamino)- 3, 3- dimetyl- butyryl]-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 69)
En 117mg (0,21mmol) prøve av 68 ble hydrolysert i henhold til metode C (se Skjema XXIII) for å tilveiebringe 40mg (41% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 7,16 min. LC-MS (ES<+>) m/e=462,3 (M+H).
1-( 2- tert- Butoksykarbonylamino- 3, 3- dimetyl- butyryl)-pyrroiidin- 2- karboksylsyrebenzylester ( 70)
Til en suspensjon av H-pro-OBzl»HCl (2,00g, 8,66mmol) i CH2C12(20ml) ble tilsatt DIEA (2,25ml, 12,92mmol) hvilket gav en farveløs løsning. Boc-tLeu-OH (l,95g, 9,52mmol), HOBT (l,76g, 13,03mmol) og EDC (2,49g, 12,95mmol) ble tilsatt, og løsningen ble omrørt under N2ved romstemperatur i 18 timer. Løsningsmiddelet bel fjernet in vacuo, residuet ble oppløst i EtOAc og vasket med H20, 0,5N NaHS04(2x) , mettet NaHC03(2x) og saltlake. Tørket over vannfritt Na2SO<! og inndampet hvilket gav tittelforbindelsen. (3,57g, 99% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 0,99 (s, 9H), 1,40 (s, 9H), 1, 88-2, 33 (m, 4H), 3, 58-3, 90 (m, 2H) , 4,21-4,35 (d, 1H), 4,53-4,66 (m, 1H), 5,04-5,38 (m, 3H), 7,14-7,42 (m, 5H). LC-MS (ES<+>) m/e=419,4 (M+H).
{ 1-[ 2-( 2- Benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- ylkarbamoyl)-pyrroiidin- 1- karbonyl]- 2, 2- dimetyl- propyl}- karbaminsyre-tert- butylester ( 71)
En 871mg (2,08mmol) prøve av 70 ble oppløst i MeOH (15ml), og 10% Pd/C (200mg) ble tilsatt. Suspensjonen ble omrørt under H2i 1 time, deretter filtrert gjennom celitt, og løsningsmiddelet ble inndampet. Dette resulterende residuum ble omsatt med 40 i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 56 hvilket gav 889mg (71% utbytte) av tittelforbindelsen (71).<X>H-NMR (500MHz, CDCI3) 8 0,93 (s, 9H) , 1,44 (s, 9H), 1,78-2,18 (m, 4H), 2,29-2,49 (m, 2H), 2,76-3,04 (m, 1H), 3, 50-3, 70 (m, 1H) , 3,70-3,85 (m, 1H) , 4,20-4,37 (m, 1H), 4, 49-4, 78 (m, 3H) , 4, 78-4, 98 (m, 1H) , 5,12-5,26 (m, 1H) , 5, 40-5, 59 (m, 1H) , 7,10-7,78 (m, 5H) . Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 11,17 min. LC-MS (ES<+>) m/e=518,3
(M+H).
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- 3, 3- dimetyl- butyryl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 72)
En løsning av 456mg (0,088mmol) av 71 i CH2C12(20ml) ble behandlet med vannfritt TFA (5ml), deretter omrørt ved romstemperatur under N2i 1 time og inndampet til tørrhet. Residuet ble gjentatte ganger konsentrert fra CH2C12(3x) , deretter tørket under vakuum. Det resulterende residuum ble oppløst i CH2C12(20ml), avkjølt til 0 C, deretter behandlet med DIEA (l,3ml, 8ekv., 2,46mmol) etterfulgt av 4-amino-3-klor-benzosyre (202mg, l,17mmol), HOBT (183mg, l,35mmol) og EDC (279mg, l,45mmol). Den resulterende blanding fikk anta romstemperatur og ble omrørt i 18 timer. Løsningsmiddelet ble fjernet in vacuo, og residuet ble oppløst i EtOAc deretter vasket med destillert vann (3x), 0,5N NaHS04(2x) , mettet NaHC03(2x) og saltlake. Det organiske lag ble tør-ket over Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav et residuum som ble renset ved hjelp av flash-kromatografi, under eluering med CH2Cl2/MeOH (99/1 til 97/3%), hvilket gav 285mg (57% utbytte) av tittelforbindelsen (72) som et gult fast stoff.
<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 0,91-1,24 (m, 9H), 1,70-2,27 (m, 4H), 2,47-2,85 (m, 1,5H), 2,99-3,13 (m, 0,5H), 3,39-3,53 (m, 0,5H), 3,60-3,78 (m, 1,5H), 3,85-4,04 (m, 1H), 4,24-4,47 (m, 2H), 4,53-4,97 (m, 4H), 5,46 (s, 0,3H), 3,88-4,02 (m, 0,1H), 5,60-5,69 (m, 0,6H), 6,80 (d, 1H), 7,22-7,77 (m, 7H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 15,90, 16,23 min. LC-MS (ES<+>) m/e=571,2 (M+H).
3-({ 1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoyIamino)- 3, 3- dimetyl-butyryl ]- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 73)
En 40mg (0,07mmol) prøve av 72 ble hydrolysert i henhold til metode A (se Skjema XXIII) for å tilveiebringe 25mg (74% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 10,66 min. LC-MS (ES<+>) m/e=481,3 (M+H).
{ 2-[ 2-( 2- Benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- ylkarbamoyl)-pyrrolidin- l- yl]- l- metyl- 2- okso- etyl}- karbaminsyre- tert-butylester ( 75)
Til en løsning av 40 (6,69g, 23,0mmol) i vannfritt CH2C12ble tilsatt 1,3-dimetylbarbitursyre (DMBA) (3,97g, 25,4mmol) og Pd(PPh3)4(l,12g, 0,97mmol). Løsningen ble om-rørt under N2ved romstemperatur i 15 min, avkjølt til 0 C, etterfulgt av tilsetning av Boc-ala-pro-OH (BaChem)
(5,087g, 17,8mmol), HOBT (3,60g, 26,7mmol) ogEDC (5,12g, 26,7mmol). Den resulterende løsning ble fikk anta romstemperatur og ble omrørt under N2i 18 timer. Løsningsmiddelet ble konsentrert in vacuo, og residuet ble oppløst i EtOAc, deretter vasket med 0,5N NaHS04(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og inndampet hvilket gav en oransje olje (12,23g). Flash-kolonnekromatografi på silikagel under anvendelse av CH2Cl2/EtOAc (80/20 til 60/40) gav tittelforbindelsen 75 som et gult fast stoff (7,28g, 86% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,19-1,31 (m, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,69-
2,29 (m, 4H) , 2,45-2,67 (m, 0,9H), 2,71-2,86 (m, 0,5H), 2,99-3,10 (m, 0,6H), 3,49-3,84 (m, 2H), 4,24-4,45 (m, 2,5H), 4,57-4,73 (m, 1,5H), 4,76-4,92 (m, 1H), 5,45 (s, 0,45H), 5,63-5,68 (m, 0,55H), 7,25-7,40 (m, 5H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 15,99, 16,33 min. LC-MS (ES<+>) m/e=476, 3 (M+H).
[ 1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin-2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3-yl)- amid] ( 76)
En l,899g (3,99mmol) prøve av 75 i CH2C12(20ml) ble behandlet med vannfritt TFA (5ml), deretter omrørt ved romstemperatur under N2i 1 time og inndampet til tørrhet. Residuet ble gjentatte ganger konsentrert fra CH2C12(3x) , deretter tørket under vakuum. Det resulterende residuum ble oppløst i CH2C12(20ml), avkjølt til 0°C, deretter behandlet med DIEA (5,6ml, 8ekv., 32,lmmol), 4-amino-3-klor-benzosyre (0,910g, 5,3mmol), HOBT (0,824g, 6,lmmol) ogEDC (l,197g,
6,23mmol). Den resulterende blanding ble oppvarmet til romstemperatur og omrørt i 18 timer. Løsningsmiddelet ble fjernet in vacuo, og residuet ble oppløst i EtOAc, deretter vasket med destillert vann (3x), 0,5N NaHS04(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake. Det organiske lag ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav et residuum som ble renset ved hjelp av flash-kromatografi under anvendelse av CH2Cl2/Me0H (99/1 til 97/3%) . Tittelforbindelsen ble oppnådd som et hvitt fast stoff (l,221g, 58% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD30D) 5 1,15 (d, 0,25H), 1,29-1,60 (m, 2,75H), 2,41-2,54 (m, 0,5H), 2,55-2,70 (m, 0,5H), 2,77 (dd, 0,5H), 3,03 (ddd, 0,5H), 3, 59-3, 75 (m, 1H), 3, 75-3, 98 (m, 1H) , 4,26-5,01 (m, 5H), 5,41-5,57 (m, 1H). 5,60-5,76 (m, 0,5H), 6, 70-6, 92 (m, 0,5H), 7,15-7,48 (m, 5H) , 7, 48-7, 68 (m, 1H) ,
7,68-7,88 (m, 1H), 8,15-8,34 (m, 1H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 14,44, 14,89min. LC-MS (ES<+>) m/e=529,3 (M+H).
[ 1-[ 2-( 4- Metoksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid]
(77) ble syntetisert fra 75 og 3,5-dimetyl-4-metoksybenzo-syre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (l,18g, 44% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,40 (m, 3H) , 1,67-2,41 (m, 4H) , 2,28 (s, 6H), 2,48 (ddd, 0,5H), 2,62 (dd, 0,5H), 2,78 (ddd, 0,5H), 3,04 (ddd, 0,5H), 3,62-3,94 (m, 3H), 3,71 (s, 3H) , 4,21-4,51 (m, 2H) , 4, 59-4, 85 (m, 4H), 5,46 (s, 0,25H), 5,52 (s, 0,25H), 5,63 (d, 0,4H), 5,67 (d, 0,1H), 7,17-7,45 (m, 5H) , 7, 45-7, 65 (m, 2H) . Analytisk HPLC (cyano-kolonne)
(blanding av 2 diastereomerer) 15,06, 15,39min. LC-MS (ES<+>) m/e=538 (M+H)
Fremstilling av 4- acetylamino- 3- klorbenzosyre
Til en løsning av 4-amino-3-klor-benzosyre (10,Og, 58,3mmol) i vannfritt THF (lOOml) ble tilsatt acetylklorid (20,7ml, 291,lmmol), og løsningen ble omrørt ved romstemperatur i 48 timer. Løsningsmiddelet ble inndampet, og produktet ble utfelt fra heksan, deretter filtrert og tørket hvilket gav et hvitt fast stoff (ll,73g, 94% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 2,28 (s, 3H), 7,92 (dd, 1H), 7,99-8,16 (m, 2H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 7,84 min.
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 78)
Fremstilt fra 75 og 4-acetylamino-3-klor-benzosyre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (146mg, 19% utbytte) .<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1, 28-1, 52 (m, 3H), 1, 68-2, 38 (m, 4H) , 2,20 (s, 3H) , 2,41-2,88 (m, 1,5H), 2,96-3,10 (m, 0,5H), 2,96-3,10 (m, 0,5H), 3, 43-3, 75 (m, 1H) , 3,80-3, 96 (m, 1H) , 4,25-5,00 (m, %H), 5,42-5,54 (m, 0,5H), 5,63-5,78 (m, 0,5H), 7,13-7,48 (m, 05H), 7,79-8,14 (m, 2,5H), 8,56-8,70 (m, 0,5H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 8,64 min. LC-MS (ES<+>) m/e=571,2 (M+H).
1-[ 2-( 3- Isopropoksy- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl) - amid ( 79)
Fremstilt fra 75 og 3-isopropoksybenzosyre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (120mg, 58% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,27 (d, 6H), 1,33-1,52 (m, 3H), 1,69-2,31 (m, 4H), 2,49 (dd, 0,3H), 2,63 (dd, 0,7H), 2,78 (dd, 0,7H), 3,03 (dd, 0,3H), 3,43-3,73 (m, 1H), 3,78-3,94 (m,lH), 4,27-4,47 (m, 2H), 4,47-4,87 (m, 4H), 5,47 (s, 0,7H), 5,53 (d, 0,3H), 5,64 (d, 0,8H), 5,72 (d, 0,2H), 6,98-7,12 (m, 1H) , 7,19-7,47 (m, 9H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 14,54, 14,85 min. LC-MS (ES<+>) m/e=538
(M+H) .
Kinoksalin- 2- karboksylsyre-{ 2-[ 2-( 2- benzyloksy- 5- okso-tetrahydrofuran- 3- ylkarbamoyl)- pyrrolidin- l- yl]- l- metyl- 2-okso- etyl}- amid ( 80)
Fremstilt fra 75 og 2-kinoksalin-karboksylsyre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (122mg, 60% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,12-1,67 (m, 3H), 1,68-2,34 (m, 4H), 2,35-2,70 (m, 0,85H), 2,70-2,95 (m, 0,75H), 3,06 (dd, 0,4H), 3,41-3,49 (m, 2H), 4,18-5,03 (m, 6H), 5,47 (d, 0,5H), 5,55, (d, 2H), 5,67 (dd, 1H), 5,71 (dd, 0,3H), 7,03-7,53 (m, 5H) , 7, 80-8,06 (m, 2H), 8, 06-8, 34 (m, 2H), 9,43-9,48 (m, 1H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 9,06 min. LC-MS (ES<+>) m/e=532,3 (M+H).
1-[ 2-( 3- Benzyloksy- 4- metoksy- benzoylamino)- propionyl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 81)
Fremstilt fra 75 og 3-benzyloksy-4-metoksybenzosyre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 76 for å til veiebringe tittelforbindelsen (142mg, 58% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,14 (d, 0,3H), 1,27-1,52 (m, 2,7H), 1,66-2,30 (m, 4H), 2,47 (dd, 0,4H), 2,59 (dd, 0,6H), 2,77 (dd, 0,6H), 3,02 (dd, 0,4H), 3,41-3,72 (m, 1H), 3,72-3,99 (m, 2H), 3,86 (s, 3H), 4,19-4,86 (m, 5H), 4,99-5,15 (m, 2H), 5,45 (m, 0,8H), 5,65 (m, 1,2H), 6,98 (dd, 1H) , 7,11-7,63 (m, 12H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 12,28, 12,44 min. LC-MS (ES<+>) m/e=616,3
(M+H).
4- Allyloksy- 3, 5- dimetyl- benzosyre
En blanding av 4-hydroksy-3, 5-dimetyl-benzosyre (3,32 g, 20 mmol), allylbromid (7,26 g, 60 mmol), benzyltrietylammoniumklorid (455 mg, 2 mmol) og K2C03(6,9 g, 50 mmol) i DMF (50 ml) ble omrørt ved romstemperatur i 16 timer. Blandingen ble fortynnet med etylacetat (200 ml), vasket med vann, saltlake. Det organiske lag ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet in vacuo hvilket gav 5,3 g av esteren som en olje. Esteren ble kokt under tilbakeløp med NaOH (5 g, 125 mmol) i vann/metanol (50 ml/50 ml) i 6 timer. Blandingen ble inndampet in vacuo for å fjerne metanolen, og den resulterende løsning ble fortynnet med vann (200 ml) , vasket med etylacetat/heksan (30 ml/70 ml). Det vandige lag ble surgjort ved 0°C med konsentrert HCl-løsning til pH 2. Den resulterende utfelning ble oppsamlet ved filtrering og vasket med vann, tørket over høyvakuum for å tilveiebringe 3,86 g (utbytte 94%) av tittelforbindelsen.<X>H-NMR (500 MHz, CDCI3) : 8 2,33 (s, 6H), 4,35-4,37 (m, 2H) , 5,28-5,30 (m, H), 5,42-5,46 (m, H), 6,07-6,15 (m, H), 7,79 (s, 2H) ; retensjonstid på analytisk HPLC: 11,28 min; LC-MS: m/z = 205 (M-H+) .
1- [ 2- ( 4- Allyloksy- 3, 5- diklor- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 82)
Fremstilt fra 75 og 4-allyloksy-3,5-diklor-benzosyre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (208mg. 47% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 1,05-1,58 (m, 3H) , 1,68-3,21 (m, 7H), 3, 39-3, 90 (m, 3H) , 4,05-5,01 (m, 6H), 5, 22-5, 62 (m, 3H), 6,04-6,25 (m, 1H), 6,94-7,63 (m, 8H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 9,69, 9,89min. LC-MS (ES<+>) m/e=604,2 (M+H).
1-[ 2-( 3, 5- Diklor- 4- hydroksy- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 83)
En 140 mg prøve av 82 (0,23mmol) ble oppløst i CH2C12(4ml) og behandlet med DMBA (35,4mg, 0,26mmol) og Pd(PPh3)4
(32mg, 0,028mmol). Løsningen ble omrørt ved 0°C i 15 minutter, oppvarmet til romstemperatur i 2 timer, deretter fortynnet med CH2C12og vasket med vann (2x) og saltlake. Løs-ningsmiddelet ble konsentrert in vacuo, og residuet ble renset ved hjelp av flash-kromatografi på silikagel under anvendelse av MeOH/CH2Cl2(1/99 til 3/97) hvilket gav tittelforbindelsen (93,2mg, 71% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,16 (d, 0,25H), 1,28-1,49 (m, 2,75H), 1,63-2,33
(m, 4H) , 2,48 (dd, 0,4H), 3,39-3,59 (m, 0,2H), 3,60-3,73 (m, 0,8H), 3,73-3,96 (m, 1H), 4,24-4,48 (m, 2H), 4,57-4,92 (m, 7H), 5,44 (s, 0,4H), 5,50 (d, 0,4H), 5,64 (d, 0,8H), 5,75 (d, 0,5H), 7,16-7,43 (m, 5H) , 7, 78-7, 89 (m, 1,6H), 8,40-8,63 (m, 0,4H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne)
(blanding av 2 diastereomerer) 11,57, 11,82 min. LC-MS (ES<+>) m/e=564,l (M+H)
1-( 2- Benzoylamino- propionyl)- pyrrolidin- 2- karboksylsyre- ( 2-benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 84)
Fremstilt fra 75 og benzoylklorid i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen som en farveløs olje (8mg, 38% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1, 35-1, 54 (m, 3H), 1, 72-2, 30 (m, 4H) , 2,42-2,70 (m, 1,3H), 2,74-2,84 (m, 0,5H), 3,03 (dd, 0,2H), 3,41-3,75 (m, 2H) , 3,81-3,96 (m, 1H) , 4, 22-4, 86 (m, 4H) , 5,46 (s, 0,3H), 5,51-5,54 (m, 0,1H), 5,66 (d, 0,5H), 5,72 (d, 0,1H), 7,20-7,57 (m, 7H), 7,77-7,89 (m, 2H), 8,42-8,67 (m, 1H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 15,23, 15,67 min. LC-MS (ES<+>) m/e=481,2
(M+H)
I sokino1in- 1- karboksylsyre-{ 2-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- ylkarbamoyl)- pyrrolidin- l- yl]- l- metyl- 2- okso-etyl}- amid ( 85)
Fremstilt fra 75 og 1-isokinolinkarboksylsyre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (732mg, 53% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,22-1,56 (m, 3H), 1,70-2,34 (m, 4H), 2,43-2,71
(m, 0,9H), 2,73-2,89 (m, 0,5H), 3,06 (ddd, 0,6H), 3,42-3,81 (m, 2H), 3,84-4,01 (m, 1H), 4,29-5,00 (m, 5H), 5,47 (d, 0,65H), 5,55 (s, 0,3H), 5,67 (d, 0,8H), 5,72 (d, 0,25H), 7,21-7,43 (m, 5H), 7,49-7,83 (m, 2,8H), 7,88-8,04 (m, 1,8H), 8,45-8,54 (m, 0,8H), 8,97-9,06 (m, 0,6H). Analytisk HPLC (blanding av 2 diastereomerer) 15,71, 16,04 min. LC-MS (ES<+>) m/e=531,2 (M+H).
1-[ 2-( 4- Amino- 5- klor- 2- metoksy- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 86)
Fremstilt fra 75 og 4-amino-5-klor-2-metoksybenzosyre i henhold til prosedyren anvendt for 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (330mg, 61% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1. 22 (d, 0,25H), 1,29-1,50 (m, 0,75H), 1,68-2,36 (m, 4H), 2,38-2,89 (m, 1,5H), 2,94-3,14 (m, 0,5H), 3,37-3,98 (m, 6H), 4,27-4,98 (m, 6H), 5,44-5,50 (m, 0,4H), 5,53-5,56 (s, 0,1H), 5,60-5,75 (m, 0,5H), 6,50 (s, 1H), 7,17-7,45 (m, 4H), 7,73-7,90 (m, 1H), 8,49-8,70 (m, 1H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 16,39, 16,82 min. LC-MS (ES<+>) m/e= 559,2 (M+H).
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 5- klor- 2- metoksy- benzoylamino) - propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso-tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 87)
Fremstilt fra 75 og 4-acetylamino-5-klor-2-metoksybenzosyre i henhold til prosedyren anvendt for 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (364mg, 64% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,20-1,27 (m, 0,25), 1,35-1,49 (m, 0,75H), 1,72-2,30 (m, 4H), 2,23 (s, 3H), 2,42-2,58 (m, 0,6H), 2,59-2,68 (m, 0,5H), 2,73-2,86 (m, 0,7H), 2,99-3,11 (m, 0,7H), 3,41-4,07 (m, 5H) , 4, 29-4, 97 (m, 5H) , 4, 79-5, 56 (m, 0,5H), 5,65-5,73 (m, 0,5H), 7,18-7,44 (m, 4,3H), 7, 90-8, 09 (m, 2H) , 8,71-8,85 (m, 0,7H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne)
(blanding av 2 diastereomerer) 15,61, 16,01 min. LC-MS
(ES<+>) m/e= 601, 1 (M+H) .
Pyridin- 2- karboksylsyre{ 2-[ 2 -( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- ylkarbamoyl)- pyrrolidin- l- yl]- l- metyl- 2- okso-etyl}- amid ( 88) Fremstilt fra 75 og pyridin-2-karboksylsyre i henhold til prosedyren anvendt for 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (233mg, 42% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,30-1,59 (m, 3H) , 1, 68-2, 36 (m, 4H), 2, 39-2, 57 (m, 0,6H), 2,57-2,69 (m, 0,35H), 2,71-2,87 (m, 0,4H), 3,05 (dd, 0,65H), 3,39-3,93 (m, 3H), 4,24-4,99 (m, 5H), 5,49-5,55 (m, 0,8H), 5, 63-5, 77 (m, 1,2H), 7,17-7,46 (m, 5H), 7, 49-7, 60 (m, 1H) , 7, 89-7, 99 (m, 1H), 8,03-8,12 (m, 1H) , 8, 58-8, 67 (m, 1H) . Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 8,63 min. LC-MS (ES<+>) m/e=481,3 (M+H). [ 1-[ 2-( 4- Amino- 3, 5- diklor- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid] ( 89) Fremstilt fra 75 og 3,5-diklor-4-aminobenzosyre i henhold til prosedyren anvendt for 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (162mg, 70% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,21-1,58 (m, 3H) , 1, 58-2, 37 (m, 4H) , 2,37-3,13 (m, 2H) , 3,43-3,74 (m, 1,5H), 3,77-3,94 (m, 1H), 4,28-4,51 (m, 1,5H), 4,50-5,01 (m, 3H) , 5,41-5,77 (m, 1H) , 7,15-7,49 (m, 5H), 7,66-7,88 (m, 2H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 8,36 min. LC-MS (ES<+>) m/e=563,2 (M+H).
1-[ 2-( 4- Metoksy- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid
( 90)
Fremstilt fra 75 og 4-metoksy-benzoylklorid i henhold til prosedyren anvendt for 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (404mg, 50%).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,19 (d, 0,3H), 1,29-1,58 (m, 2,7H), 1,58-2,38 (m, 4H), 2,43-2,69 (m, 1H) , 2, 74-2, 86 (m, 0,6H), 2,99-3,11 (m, 0,4H), 3,39-3,75 (m, 1,5H), 3,77-3,94 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 4,29-4,94 (m, 4,5H), 5,45-5,55 (m, 4,5H), 5,63-5,71 (m, 0,5H), 5,73 (d, 0,1H), 6, 85-7, 09 (m, 2H) , 7,19-7,44 (m, 4H) , 7,73-7,92 (m, 2H) , 8, 26-8, 44 (m, 1H) . Analytisk HPLC (cyano-kolonne)
(blanding av 2 diastereomerer) 15,18, 15,65 min. LC-MS (ES<+>) m/e=510,2 (M+H) .
1-{ 2 - [ ( 9- Okso- 9H- fluoren- 4- karbonyl)- amino]- propionyl}-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 91) Fremstilt fra 75 og 9-okso-9H-fluoren-karboksylsyre i henhold til prosedyren anvendt for 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (403mg, 44% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 1,38-1,59 (m, 3H), 1,75-2,37 (m, 4H), 2,43-2,59 (m, 0,65H), 2,59-2,72 (m, 0,35H), 2,79-2,89 (m, 0,35H), 3,01-3,11 (m, 0,65H), 3, 68-3, 86 (m, 1H) , 3, 92-4,09 (m, 1H) , 4, 35-5, 03 (m, 7H) , 5, 42-5, 90 (m, 1H) , 7, 06-8, 00 (m, 12H) . Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 12,30 min. LC-MS (ES<+>) m/e=582,l (M+H).
1-[ 2-( 3, 5- Diklor- 4- metoksy- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 92)
Fremstilt fra 75 og 3,5-diklor-4-metoksy-benzosyre i henhold til prosedyren anvendt for 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (364mg. 46% utbytte).<1>H-NMR (500MHz,
CD3OD) 8 1,17 (d, 0,25H), 1,28-1,53 (m, 2,75H), 1,64-2,33 (m, 4H), 2,39-2,94 (m, 1,5H), 2,94-3,12 (m, 0,5H), 3,41- 3,74 (m, 2H), 3,74-4,00 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 4,26-5,02 (m, 5H) , 5,42-5,81 (m, 1H), 7,08 (d, 0,4H), 7,21-7,43 (m, 4,6H), 7,53-7,69 (m, 0,8H), 7,85-7,97 (m, 1,2H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 10,79min. LC-MS (ES<+>) m/e=578,2 (M+H).
Kinolin- 6- karboksylsyre-{ 2-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- ylkarbamoyl)- pyrrolidin- l- yl]- l- metyl- 2- okso- etyl}-l- metyl- 2- okso- etyl}- amid ( 93)
Fremstilt fra 75 og 6-kinolinkarboksylsyre i henhold til prosedyren anvendt for 76 for å tilveiebringe tittelforbindelsen (344mg, 71% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,11-1,58 (m, 3H) , 1, 69-2, 40 (m, 4H) , 2,42-3,15 (m, 2H), 3,80-4,01 (m, 1H), 4, 29-4, 99 (m, 5H) , 5, 44-5, 54 (m, 0,5H), 5,63-5,73 (d, 0,4H), 5, 73-5, 79 (d, 0,1H), 7,18-7,43 (m, 5H) , 7,56-7,67 (m, 1H), 8,08 (d, 1H), 8,13-8,25 (m, 1H) , 8,40-8,56 (m, 2H), 8,88-8,99 (m, 1H). Analytisk HPLC (cyano-kolonne) (blanding av 2 diastereomerer) 10,27, 10,50 min. LC-MS (ES<+>) m/e=531,2 (M+H).
1- ( 2- Benzyloksykarbonylamino- propionyl)- pyrrolidin- 2-karboksylsyre- tert- butylester ( 95)
Fremstilt i henhold til metoden beskrevet i Pierre Chevallet, Patrick Garrouste, Barbara Malawaska&Jean Martinez i Tetrahedron Letters, Vol. 34, s. 7409-7412,
(1993). En blanding av Cbz-ala-pro-OH (10,0 g, 31,2 mmol), tert-butylbromid (180 g, 1,31 mol), benzyltrietylammoniumklorid (7,11 g, 31,2 mmol) og K2C03(180 g, 1,30 mol) i N,N-dimetylacetamid (DMA) (225 ml) ble omrørt ved 55°C i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romstemperatur og fortynnet med én liter is-vann, ekstrahert med etylacetat (200 ml x 3). Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet in vacuo hvilket gav 14 g olje, som ble renset ved hjelp av flash-kromatografi under anvendelse av heksan/etylacetat (95/5 til 50/50) for å tilveiebringe 11,73 g (utbytte 99,7%) av tittelforbindelsen som en klar olje.<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 8 1,25-1,50 (m, 12 H), 1,85-2,25 (m, 4H), 3,42-3,70 (m, 2H) , 4, 25-4, 57 (m, 2H) , 5,07-5,11 (m, 2H) , 5,69 (d, H) , 7, 28-7, 38 (m, 5H) ; retensjonstid på analytisk HPLC: 11,07 min; LC-MS: m/z = 377 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre- tert- butylester ( 96a)
Til en løsning av 95 (10,50g, 27,9mmol) i MeOH (lOOml) ble tilsatt en suspensjon av 10% Pd/C (5,00g) i EtOAc (50ml). Blandingen ble omrørt under H2i 48 timer, filtrert gjennom celitt, og løsningsmiddelet ble inndampet hvilket gav et voksaktig fast stoff. Dette ble oppløst i CH2CI2(lOOml) og DMF (50ml), og løsningen ble avkjølt til 0°C. 4-Amino-3-klorbenzosyre (5,82g, 27,2mmol), DIEA (14,58ml, 83,7mmol), HOBT (3,77g, 27,9mmol) og EDC (6,68g, 34,8mmol) ble tilsatt, og løsningen ble omrørt ved 0°C i 15 minutter deretter ved romstemperatur i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med EtOAc, vasket med NaHS04(2x), 10% NaHC03
(2x) og saltlake, deretter tørket over MgS04, filtrert og inndampet. Råproduktet ble renset ved hjelp av flash-kolonnekromatografi, under anvendelse av CH2Cl2/MeOH (99/1 tn 97/3%) hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (7,75g, 70% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,27-1,67 (m, 12H) , 1,82-2,14 (m, 4H), 3, 48-3, 85 (m, 2H) , 4,26-4,53 (m, 3H), 4,81-4,98 (m, 1H), 6,71 (d, 1H), 7,15 (m,
1H), 7,50 (dd, 1H), 7,75 (d, 1H). Analytisk HPLC 10,83 min. LC-MS (ES<+>) m/e=396, 3 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 97a)
Fremstilt fra 96a ved behandling med TFA/ CH2C12. Etter fullstendig reaksjon ble løsningsmiddelet fjernet in vacuo, og residuet ble gjentatte ganger inndampet fra toluen. Det resulterende residuum ble tørket under vakuum til konstant vekt.
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre- tert- butylester ( 96b)
Fremstilt fra 95 og 4-acetylamino-3-klorbenzosyre i henhold til metoden anvendt for 96a for å tilveiebringe tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (9,18g, 77% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,30-1,62 (m, 12H), 1,85-2,16 (m, 3H), 2,16-2,44 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 3, 47-3, 83 (m, 2H) , 4,34-4,54 (m, 1H), 4,89 (m, 1H), 7,27-7,39 (m, 1H), 7,59-7,71 (m, 2H), 7,83-7,97 (m, 1H), 8,47 (d, 1H). Analytisk HPLC 9,43 min.
1-[ 2-( 4- Acetylmino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 97b)
Fremstilt fra 96b ved behandling med TFA/ CH2C12. Etter fullstendig reaksjon ble løsningsmiddelet fjernet in vacuo, og residuet ble gjentatte ganger inndampet fra toluen. Det resulterende residuum ble tørket under vakuum til konstant vekt.
4- Acetylamino- 5- klor- 2- metoksy- benzosyre
4-Acetylamino-5-klor-2-metoksy-benzosyre-metylester (2,09g, 8,llmmol) ble oppløst i MeOH (llOml), og LiOH-løsning (25,48mmol i 30ml, 1:1 MeOH:H20) ble tilsatt, og løsningen
ble omrørt ved romstemperatur i 6 timer. Løsningsmiddelet ble konsentrert in vacuo, EtOAc ble tilsatt, og den organiske fase ble vasket med 0,5N HC1, deretter ekstrahert med mettet NaHC03(2x) . Den vandige fase ble surgjort med 12N HC1 til pH 1, og den resulterende utfelning ble ekstrahert inn i CH2CI2. De kombinerte ekstrakter ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (0,933g, 50% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 5 2,31 (s, 3H), 4,10 (s, 3H), 7,78-7,92 (br s, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,45 (s, 1H). Analytisk HPLC 5,62 min.
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 5- klor- 2- metoksy- benzoylamino)-propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre- tert- butylester ( 96c)
Til en løsning av 95 (l,534g, 4,07mmol) i MeOH (40ml) ble tilsatt 10%Pd/C (650mg), og blandingen ble omrørt under H2i 2 timer. Suspensjonen ble filtrert gjennom celitt og inndampet hvilket gav en gul olje. Denne fikk reagere med 4-acetyl-5-klor-2-metoksybenzosyre ifølge prosedyren anvendt for fremstillingen av 96a hvilket gav tittelforbindelsen (497mg, 52% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,46 (d,
3H) , 1,49 (s, 9H), 1,80-2,01 (m, 3H), 2,19-2,40 (m, 1H), 2,22 (s, 3H) , 3, 58-3, 72 (m, 1H), 3, 78-3, 89 (m, 1H), 3,98-4.09 (s, 3H), 4,31-4,45 (s, 1H), 4,78-4,95 (m, 1H), 7,89-8.10 (m, 2H). Analytisk HPLC 11,31 min.
1-[ 2- ( 4- Acetylamino- 5- klor- 2- metoksy- benzoylamino)-propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 97c)
Fremstilt fra 96c ved behandling med TFA/ CH2C12. Etter fullstendig reaksjon ble løsningsmiddelet fjernet in vacuo, og residuet ble gjentatte ganger inndampet fra toluen. Det resulterende residuum ble tørket under vakuum til konstant vekt.
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre- ( 5- okso- 2- fenetyloksy- tetrahydro- furan- 3- yl)-amid ( 98a)
Til en løsning av (5-okso-2-fenetyloksy-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester (194mg, 0,54mmol) (fremstilt som beskrevet for (40) under anvendelse av fenetylalkohol) i vannfritt CH2C12(5ml) ved 0°C ble tilsatt DMBA (196mg, l,26mmol) og Pd(PPh3)4(32mg, 0,03mmol). Løsningen ble om-rørt i 15 min, og en løsning av 97a (fremstilt fra 96a ved behandling med TFA i CH2C12) (166mg, 0,49mmol) og DIEA (680ul, 3,90mmol) i CH2C12(2ml) ble tilsatt etterfulgt av HOBT (98mg, 0,73mmol) og EDC (122mg, 0,63mmol). Løsningen ble omrørt ved 0 C i 15 min, deretter ved romstemperatur i 18 timer. Løsningsmiddelet ble fjernet in vacuo, og residuet ble oppløst i EtOAc, deretter vasket med 0,5N NaHS04(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake. Tørket over vannfritt Na2S04og inndampet hvilket gav et oransje fast stoff som ble renset ved hjelp av flash-kolonnekromatografi, under anvendelse av CH2Cl2/MeOH (99/1 tu 97/3%) hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (190mg, 73% utbytte) .<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,29 (d, 0,6H), 1,41 (d, 2,4H), 1,78 (m, 1H), 2,08 (m, 3H), 2,56 (m, 1H), 2,77 (dd, 1H), 2,94 (t, 2H), 3,53 (m, 0,3H), 3,67 (m, 0,8H), 3,85 (m, 2H) , 3, 96-4, 08 (m, 1H), 4,40 (m, 2H), 4,62 (m, 1H), 4,67-4,79 (m, 1H), 5,57 (d, 0,7H), 5,60 (d, 0,3H), 6,78 (dd, 1H), 7,21 (m, 5H), 7,58 (m, 1H), 7,79 (m, 1H), 8,26 (d, 1H) . Analytisk HPLC 14,52 min. LC-MS (ES<+>) m/e=543, 2 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl) - amid ( 98b)
Ble fremstilt fra syn-diastereomeren av (2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester (40) og 97a ifølge metoden anvendt for 98a. Tittelforbindelsen ble isolert som et lysegult fast stoff (720mg, 51% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,16 (d, 0,5H), 1,40 (d, 2,5H), 1,64-2,25 (m, 4H), 2,61 (dd, 1H), 2,79 (dd, 1H), 3,37-3,59 (m, 1H) , 3,59-3, 74 (m, 1H) , 3, 77-3, 92 (m, 1H), 4,29-4,47 (m, 1H), 4,47-5,02 (m, 4H), 5,48 (s, 0,5H), 5,66 (d, 1H), 5,68 (d, 0,5H), 6,79 (d, 1H), 7,17-7,52 (m, 5H), 7,48-7,62 (m, 1H), 7,68-7, 83(m, 1H) . Analytisk HPLC 15,98min. LC-MS (ES<+>) m/e=529, 2 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl) - amid ( 98c)
Fremstilt fra anti- (2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylesteren (40) og 97a ifølge metoden anvendt for 98a. Tittelforbindelsen ble isolert som et hvitt fast stoff (186,6mg, 46% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,30-1,52 (m, 3H), 1,76-2,33 (m,4H), 2,41-2,59 (m, 1H)<,>2,90 (dd, 0,15H), 3,04 (dd, 0,85H), 3, 44-3, 75 (m, 1,5H), 3,82-3,95 (m, 1H), 4,27-4,42 (m, 2H), 4,42-4,56 (m, 0,5H), 4, 56-4, 86 (m, 4H) , 5, 42-5, 55 (m, 1H), 6,79 (d, 1H), 7,21-7,42 (m, 4,6H), 7,54-7,63 (m, 1,4H), 7,76-7,83 (m, 0,65H), 8,60-8,68 (m, 0,35H). Analytisk HPLC 15,19min. LC-MS (ES<+>) m/e=529, 3 (MH+) .
2-( Etoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- karbaminsyre-allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre-tert-butylester som beskrevet for (40) under anvendelse av etanol. Kromatografi under anvendelse av heksan/etylacetat (95/5 til 80/20) gav 0,94 g av anti- 2-(etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester (høyere Rf), 1,96 g av syn-diastereomeren (lavere Rf) og 8,08 g av blandingen av diastereomerene (totalt utbytte 60%) .<2>H-NMR (500 MHz, CDCI3) for anti-diastereomeren: 8 1,13-1,31 (m, 3H), 2,31-2,45 (m, 1H), 2,92-3,08 (m, 1H), 3,52-3,72 (m, 1H), 3,78-3,92 (m, 1H), 4,10-4,25 (m, 1H), 4,45-4,70 (m, 2H), 5,00 (bs, 1H), 5,12-5,45 (m, 3H), 5,80-5,95 (m, 1H); for syn-diastereomeren 1,13-1,35 (m, 3H), 2,38-2,50 (m, 1H), 2,75-2,92 (m, 1H), 3,60-3,73 (m, 1H), 3,82-3,95 (m, 1H), 4,40-4,70 (m, 3H), 5,10-5,52 (m, 4H), 5,80-5,94 (m, 1H); LC-MS: m/z = 230 (M+H<+>) for begge diastereomerer.
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid
( 98d)
Fremstilt fra (2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester og 97a ifølge metoden anvendt for 98a. Tittelforbindelsen ble isolert som et hvitt fast stoff
(175mg, 77% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,13 (t, 0,5H), 1,23 (t, 2,5H), 1,36 (d, 0,5H), 1,44 (d, 2,5H), 1,75-2,38 (m, 4H), 2,56 (dd, 1H), 2,76 (dd, 1H), 3,45-3,97 (m, 5H), 4,47 (dd, 1H), 4, 59-4, 67 (m, 1H) , 4,74 (q, 1H) , 5,55 (d, 0,2H), 5,56 (d, 0,8H), 6, 75-6, 82 (m, 1H) , 7,56 (dd, 1H), 7,77 (d, 1H), 8,39 (d, 1H). Analytisk HPLC 8,17 min. LC-MS (ES<+>) m/e=467, 4 (MH+) .
( 2- Cyklopentyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre-tert-butylester som beskrevet for 40 under anvendelse av cyklopentanol for å tilveiebringe tittelforbindelsen som en blanding av diastereomerer. Flash-kolonnekromatografi under anvendelse av heksan/EtOAc (90/10 til 80/20) gav syn-diastereomer av tittelforbindelsen: syn-diastereomer<1>H NMR (500MHz, CDCI3) 5 1,5-2,0 (m, 8H), 2,45 (dd, 1H), 2,81 (dd, 0,9H), 3,0 (dd, 0,1H), 4,31 (m, 1H), 4,59 (m, 4H), 5,23 (m, 1H), 5,32 (m, 1H), 5,45 (s, 0,1H), 5,51 (s, 0,9H), 5,92,
(m, 1H) ppm; anti-diastereomer<2>H-NMR (500 MHz, CDC13) 6 1,50 (m, 2H), 1,67 (m, 6H), 2,36 (d, 1H), 2,8 (dd, 0,08H), 2,96 (dd, 0,92H), 4,13 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,55 (br, 2H) , 5,20 (d, 1H), 5,30 (m, 2H), 5,43 (s, 0,92H), 5,5 (d, 0,08H), 5,89 (s, 1H) ppm.
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- cyklopentyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3-yl)- amid ( 98e)
Fremstilt fra (2-cyklopentyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester og 97a ifølge metoden anvendt for 98a hvilket gav tittelforbindelsen (280mg, 51% utbytte) .<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,38 (d, 0,5H), 1,44 (d, 2,5H), 1,49-2,35 (m, 12H), 2,47 (dd, 0,7H), 2,56 (dd, 0,3H), 2,75 (dd, 0,3H), 2,81-2,88 (m, 0,1H), 2,97 (dd, 0,6H), 3,47-3,76 (m, 0,2H), 3,82-3,96 (m, 1H), 4,10-4,40 (m, 2H) , 4, 40-4, 46 (m, 1H) , 5,44 (d, 0,5H), 5,50 (d, 0,2H), 5,65 (d, 0,3H), 6,79 (d, 1H), 7,54-7,64 (m, 1H), 7,78 (d, 1H), 8,21-8,31 (m, 1H). Analytisk HPLC 15,02, 15,34 min. LC-MS (ES<+>) m/e=507, 3 (MH<+>)
( 2- Cykloheksyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre tert-butylester som beskrevet for 40 under anvendelse av cykloheksanol for å tilveiebringe tittelforbindelsen som en blanding av diastereomerer (lysegul olje) (4,62g, 85% utbytte) . Flash-kolonnekromatografi under anvendelse av heksan/EtOAc (90/10 til 80/20) gav 394 mg (7% utbytte) av syn-diastereomer av tittelforbindelsen.<1>ti NMR (500MHz, CDC13) 8.1,11-2,09 (m, 10H), 2,35-2,61 (dd, 1H) , 2, 72-2, 98 (dd, 1H), 3,60-3,83 (m, 1H), 4,32-4,72 (m, 3H), 5,06-5,43 (m, 2H), 5,60 (d, 1H), 5, 82-6, 03 (m, 1H) .
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 2- cykloheksyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 98f)
Fremstilt fra syn-(2-cykloheksyloksy-5-okso-tetrahydrofuran-3-yl)-karbaminsyre-allylester og 97b ifølge metoden, anvendt for 98a hvilket gav tittelforbindelsen (121mg, 33% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,06-1,61 (m, 9H), 1,61- 2,37 (m, 7H), 2,22 (s, 3H), 2,52-2,81 (m, 2H), 3,49-3,78 (m, 2H) , 3,84-3,97 (m, 1H) , 4, 42-4, 57 (m, 1H) , 4,57-4,69 (m, 1H) , 5,67-5,81 (m, 1H) , 7, 72-7, 89 (m, 1H), 7,89-8,12 (m, 2H). Analytisk HPLC 9,84 min. LC-MS (ES<+>) m/e=563,3
(MH<+>) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- cykloheksyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3-yl)- amid ( 98g)
Fremstilt fra syn-(2-cykloheksyloksy-5-okso-tetrahydrofuran-3-yl)-karbaminsyre-allylester og 97a ifølge metoden anvendt for 98a hvilket gav tittelforbindelsen (153mg, 47% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 6 1,06-2,38 (m, 14H), 1,42 (d, 3H) , 2, 50-2, 66 (m, 1H) , 2, 69-2, 82 (dd, 1H), 3,06-3,75 (m, 2H) , 3, 80-3, 94 (m, 1H) , 4, 40-4, 52 (m, 1H), 4,57-4,65 (m, 1H) , 4, 70-4, 80 (m, 1H), 5,72 (d, 1H), 6,71 (m, 1H), 7,50-7,63 (m, 1H), 7,78 (d, 0,6H), 8,42 (d, 0,4H). Analytisk HPLC 10,30 min. LC-MS (ES<+>) m/e=521,2 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid
( 98h)
Fremstilt fra (2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester og 97a ifølge metoden anvendt for 98a. Tittelforbindelsen ble isolert som et hvitt fast stoff (195mg, 82% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,32-1,55
(m, 3H) , 1, 58-1, 77 (m, 3H) , 1, 98-2, 54 (m, 4H), 2,68-2,76 (d, 0,3H), 2,79-2,89 (m, 0,7H), 2,96-3,10 (m, 0,7H), 3,18-3,27 (dd, 0,3H), 3,72-4,18 (m, 4H) , 4,46-5,12 (m, 3H) , 5,60 (s, 0,4H), 5,74-5,84 (m, 0,6H), 7,03 (d, 0,8H), 7,75-7,86 (m, 1H) , 8,01(d, 0,7H), 8,35 (d, 0,3H), 8,74 (d, 0,2H). Analytisk HPLC 8,31 min. LC-MS (ES<+>) m/e=467, 3 (MH+) .
[ 5- Okso- 2-( tricyklo[ 3. 3. 1. 1°' °] dec- 2- yloksy)- tetrahydrofuran- 3- yl]- karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre tert-butylester som beskrevet for 40 under anvendelse av 2-adamantanol (6,21g, 5 ekvivalenter) for å tilveiebringe tittelforbindelsen som en lysegul olje (l,52g, 61% utbytte) .<1>ti NMR (500MHz, CDCI3) .8.1, 38-2, 22 (m, 14H) , 2,40
(d, 0,2H), 2,53 (dd, 0,7H), 2,87 (dd, 0,7H), 2,87 (dd, 0,8H), 3,00-3,12 (m, 0,3H), 3,84-3,97 (m, 1H), 4,40-4,71 (m, 3H) , 5,18-5,44 (m, 2H) , 5, 53-5,-69 (m, 1H) , 5,82-6,02 (m, 1H) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre- [ 5- okso- 2- ( tricyklo [ 3. 3. 1. 1°' °] dec- 2- yloksy) - tetrahydro- furan- 3- yl]- amid ( 98i)
Fremstilt fra [5-okso-2-(tricyklo [3 . 3 .1.1°'°] dec-2-yloksy)-tetrahydro-furan-3-yl]-karbaminsyre-allylester og 97a ifølge metoden anvendt for 98a. Tittelforbindelsen ble isolert som et hvitt fast stoff (76mg, 13% utbytte).<X>H-NMR
(500MHz, CD3OD) 8 1,38-2,22 (m, 14H), 2,40 (d, 0,2H), 2,53 (dd, 0,7H), 2,87 (dd, 0,8H), 3,00-3,12 (m, 0,3H), 3,84-3,97 (m, 1H), 4,40-4,71 (m, 3H), 5,18-5,44 (m, 2H), 5,53-5,69 (m, 1H), 5,82-6,02 (m, 1H). Analytisk HPLC. ll,89min. LC-MS (ES<+>) m/e= 573, 2 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 5- klor- 2- metoksy- benzoylamino)-propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso-tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 98j)
Fremstilt fra syn-{ 2-[2-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydrofuran-3-ylkarbamoyl)-pyrrolidin-l-yl]-l-metyl-2-okso-etyl}-karbaminsyre-tert-butylester og 97c ifølge prosedyren anvendt for 98a for å tilveiebringe tittelforbindelsen (222mg, 82% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,23 (d, 0,6H), 1,42 (d, 2,4H), 1,72-2,27 (m, 4H), 2,23 (s, 3H), 2,63 (dd, 1H), 2,77-2,88 (m, 1H), 3,43-3,52 (m, 0,5H), 3,56-3,71 (m, 1,5H), 3,74-3,85 (m, 1H), 3,98 (s, 3H), 4,38-4,50 (m, 1,5H), 4,51-4,92 (m, 4,5H), 5,63-5,76 (m, 1H), 7,23-7,40 (m, 5H), 7,97 (s, 1H), 8,45 (d, 1H), 8,69-8,80 (m, 1H) Analytisk HPLC 11,63 min LC-MS (ES<+>) m/e= 601,2
(MH<+>) .
Syntese av 1-[ 2-( 4- amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98k)
Fremstilt fra ant i-(2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester og 97a ifølge metoden anvendt for 98a for å tilveiebringe 175 mg av tittelforbindelsen (59%).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 5 1,10-1,28 (m, 3H) , 1,42 (d, 0,6H), 1,46 (d, 2,4H), 1,75-2,45 (m, 4H), 2,45-2,70 (m, 1H), 2,80-3,05 (m, 1H), 3,50-3,95 (m, 4H), 4,20-4,75 (m, 3H), 4,75-4,90 (m, 1H), 5,32 (s, 0,8H), 5,38 (s, 0,2H), 6,80 (d, 1H), 7,55-7,84 (m, 2H). Analytisk HPLC: 10,47 min. LC-MS (ES+) : m/e = 467, 3 (M+H+) .
Syntese av 1-[ 2-( 4- amino- 3, 5- diklor- benzoylamino)-propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso-tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 981)
Fremstilt fra (2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester og 1-[2-(4-amino-3,5-diklor-benzoylamino) -propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester i henhold til metoden anvendt for 98a for å tilveiebringe 158 mg av tittelforbindelsen (54% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 1,08-1,30 (m, 3H), 1,32-1,52 (m, 3H), 1,72-2,44 (m, 4H), 2,40-3,05 (m, 2H), 3,50-3,97 (m, 4H), 4,25-4,70 (m, 3H), 4,70-4,86 (m, 1H), 5,33 (s, 0,4H), 5,47 (s, 0,1H), 5,56 (d, 0,4H), 5,62 (d, 0,1H), 7,50 (s, 1H), 7,80 (s, 1H). Analytisk HPLC: 10,84 min. LC-MS (ES+) : m/e = 501,2 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre- ( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)-amid ( 98m)
Fremstilt i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a under anvendelse av Cbz-Ala-D-pro-OH for å tilveiebringe 230 mg av tittelforbindelsen (69% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,30 (d, 1,2H), 1,45 (d,
I, 8H), 1, 62-2, 40 (m, 4H) , 2,40-3,10 (m, 2H), 3, 30-3, 97 (m, 2H) , 4,33-4, 95 (m, 5H), 5,30 (s, 0,5H), 5,68 (d, 0,5H), 6,80 (d, 1H), 7,25-7,95 (m, 7H). Analytisk HPLC: 11,56, II, 91 min. LC-MS (ES+) : m/e = 529, 2 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98n)
Fremstilt fra 97b og syn-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydrofuran-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 210 mg av tittelforbindelsen (64% utbytte).<X>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 5 1,33 (d, 0,6H), 1,44 (d, 2,4H), 1,68-2,40 (m, 4H), 2,26 (s, 3H) , 2, 55-3, 05 (m, 2H) , 3,40-3,90 (m, 2H) , 4,20-4,95 (m, 5H), 5,68 (d, 0,8H), 5,84 (d, 0,2H), 7,15-8,30 (m, 8H) . Analytisk HPLC: 15,67 min. LC-MS (ES+) : m/e = 571, 1 (M+H+) .
( 2- Isopropoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- karbaminsyre-allylester
Fremstilt som beskrevet for forbindelse 40 under anvendelse av isopropanol for å tilveiebringe 3,80 gram (81% utbytte) av tittelforbindelsen som en farveløs olje.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 1,10-1,35 (m, 6H), 2,32-2,60 (m, 1H), 2,82 (dd, 0,5H), 3,02 (dd, 0,5H), 3,82-4,11 (m, 1H), 4,48-4,66 (m, 3H), 5,20-5,36 (m, 2H), 5,54 (dd, 1H), 5,82-6,05 (m, 1H) . LC-MS (ES + ) : m/e = 244, 2 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- isopropoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)-amid ( 98o)
Fremstilt fra 97a og (2-isopropoksy-5-okso-tetrahydrofuran-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 200 mg av tittelforbindelsen (66% utbytte).<X>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,05-1,35 (m, 6H), 1,35-1,50 (m, 3H), 1,70-2,45 (m, 4H), 2,45-3,05 (m, 2H), 3,55-4,10 (m, 3H), 4,15-4,88 (m, 4H), 5,48 (s, 0,4H), 5,58 (s, 0,1H), 5,64 (d, 0,4H), 5,70 (d, 0,1H), 6,78 (d, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,80 (s, 1H) . Analytisk HPLC: 12,19, 12,40 min. LC-MS (ES+) : m/e = 581,2 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3, 5- diklor- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98p)
Fremstilt fra 1-[2-(4-acetylamino-3,5-diklor-benzoylamino)-propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester og syn-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 230 mg av tittelforbindelsen (72% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,36 (d, 0,6H), 1,47 (d, 2,4H), 1,68-2,47 (m, 4H), 2,23 (s, 3H), 2,60-3,15 (m, 2H), 3,40-3,90 (m, 2H), 4,15-4,95 (m, 5H), 5,68 (d, 0,8H), 5,84 (d, 0,2H), 7,20-7,98 (m, 7H). Analytisk HPLC: 13,07 min. LC-MS (ES+) : m/e = 605, 1 (M+H+) .
1-[ 2- ( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- cyklopentyloksy- 5- okso-tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 98q)
Fremstilt fra 97b og (2-cyklopentyloksy-5-okso-tetrahydrofuran-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 215 mg av tittelforbindelsen (69% utbytte).<X>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,35-1,90 (m, 11H), 1,90-2,35 (m, 4H), 2,24 (s, 3H), 2,40-3,10 (m, 2H), 3,50-3,95 (m, 3H), 4,15-4,90 (m, 3H), 5,44 (s, 0,55H), 5,56 (s, 0,15H), 5,64 (d, 0,22H), 5,71 (d, 0,08H), 7,70-8,25 (m, 3H). Analytisk HPLC: 12,13 min. LC-MS (ES+) : m/e = 549, 2 (M+H+) .
Syntese av 1-[ 2-( 4- acetylamino- 3- klor- benzoylamino)-propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso-tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 98r)
Fremstilt fra 97b og syn-(2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 68 mg av tittelforbindelsen (24%).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 5 1,13 (t, 0,6H), 1,28 (t, 2,4H), 1,38 (d, 0,6H), 1,48 (d, 2,4H), 1,75-2,40 (m, 4H), 2,22 (s, 3H), 2,55-2,88 (m, 2H), 3,50-3,92 (m, 4H), 4,40-4,90 (m, 3H), 5,57 (d, 0,8H), 5,61 (d, 0,2H), 7,60-8,20 (m, 3H). Analytisk HPLC: 8,64 min. LC-MS (ES+) : m/e = 509, 2 (M+H+) .
Fremstilling av ( 2- cyklopentylmetoksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre-tert-butylester som beskrevet for forbindelse 40 under anvendelse av cyklopentylmetanol (6,5 ml, 60 mmol) for å tilveiebringe 2,98 gram (52% totalt utbytte) av tittelforbindelsen som en blanding av epimerer. Rensing gav 0,97 gram (17% utbytte) av den 4 (S), 5(R) som en farveløs olje.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) 8 1,19 (m, 2H) , 1,54 (m, 4H) , 1,71 (m, 2H), 2,16 (m, 1H), 2,44 (dd, J=17,2, 10,4Hz, 1H), 2,82
(dd, J=17,2, 8,4Hz, 1H), 3,44 (dd, J=9,3, 7,2Hz, 1H), 3,71 (dd, J=9,3, 7,2Hz, 1H), 4,57 (m, 3H), 5,32 (m, 3H), 5,41 (d, J=5,2Hz, 1H), 5,91 (ddt, J=17,l, 10,4, 5Hz, 1H) ppm. LC-MS. (ES+): m/e=284.
Også isolert ble epimerblandingen (0,66 gram, 11% utbytte) og 4(S)-, 5(S)epimeren (1,35 gram, 24% utbytte) som et voksaktig fast stoff.<X>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 1,20 (m,
2H) , 1,54 (m, 4H), 1,69 (m, 2H), 2,10 (m, 1H), 2,37 (d, J=8,lHz, 1H), 2,97 (dd, J=18,0, 7,6Hz, 1H), 3,42 (dd, J=7,3, 1,7Hz, 1H), 3,49 (m, 2H), 3,64 (dd, J=9,0, 7,3Hz, 1H), 4,19 (br, 1H), 4,55 (m, 2H), 5,25 (m, 2H), 5,36 (s, 1H), 5,87 (m, 1H) ppm. LC-MS (ES+): m/e=284 (M+H).
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- cyklopentylmetoksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98s)
Fremstilt fra 97a og syn-(2-cyklopentylmetoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 195 mg av tittelforbindelsen (51% utbytte).<X>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,15-1,90 (m, 11H), 1,90-2,40 (m, 5H), 2,55-2,78 (m, 2H), 3,50-3,90 (m, 4H), 4,38-4,92 (m, 3H), 5,53 (d, 0,8H), 5,57 (d, 0,2H), 6,78 (d, 1H), 7,50-8,15 (m, 2H) . Analytisk HPLC: 10,48 min. LC-MS (ES+) : m/e = 521,2 (M+H+) .
( 5- Okso- 2-( 3- fenyl- propoksy)- tetrahydro- furan- 3- yl)-karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre-tert-butylester som beskrevet for forbindelse 40 under anvendelse av 3-fenylpropanol for å tilveiebringe 1,15 gram (32% utbytte) av tittelforbindelsen som en farveløs olje.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 1, 82-2, 05 (m, 2H) , 2,38 (dd, 1H) , 2,68 (m, 2H), 2,82 (dd, 1H), 3,55-3,65 (m, 1H), 3,82-3,92 (m, 1H), 4,48-4,72 (m, 3H), 5,12-5,59 (m, 3H), 5,82-6,03
(m, 1H), 7,11-7,45 (m, 5H). Analytisk HPLC: 9,08 min. LC-MS (ES+) : m/e = 320, 2 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 5- okso- 2-( 3- fenyl- propoksyl)- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98t)
Fremstilt fra 97b og syn-(5-okso-2-(3-fenyl-propoksyl)-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 200 mg av tittelforbindelsen (57% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,34 (d, 0,6H), 1,44 (d,
2,4H), 1,75-2,40 (m, 6H), 2,50-2,95 (m, 4H), 3,47-3,95 (m, 4H), 4,38-4,82 (m, 3H), 5,52 (d, 0,8H), 5,56 (d, 0,2H), 6, 75-8,25 (m, 8H) . Analytisk HPLC: 10,79 min. LC-MS (ES+) : m/e = 557, 2 (M+H+) .
Syntese av 1-[ 2-( 4- acetylamino- 3- klor- benzoylamino)-propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- cyklopentylmetoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 98u)
Fremstilt fra 97b og syn-(2-cyklopentylmetoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 215 mg av tittelforbindelsen (67% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,38 (d, 0,6H), 1,47 (d, 2,4H), 1,11-1,88 (m, 8H), 1,92-2,40 (m, 5H), 2,24 (s, 3H), 2,53-2,86 (m, 2H), 3,30-3,90 (m, 4H), 4,38-4,89 (m, 3H), 5,53 (d, 0,8H), 5,60 (d, 0,2H), 7,68-8,22 (m, 3H). Analytisk HPLC: 9,90 min. LC-MS (ES+) : m/e = 563, 3 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 5- okso- 2-( 3- fenyl- propoksyl)-tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 98v)
Fremstilt fra 1-[2-(4-acetylamino-3-klor-benzoylamino)-propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester og syn-(5-okso-2-(3-fenyl-propoksyl)-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 238 mg av tittelforbindelsen (75% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,33 (d, 0,6H), 1,56 (d, 2,4H), 1,78-2,45 (m, 6H), 2,27 (s, 3H), 2, 53-2, 97 (m, 4H) , 3, 53-3, 94 (m, 4H), 4,47-4,86 (m, 3H), 5,53 (d, 0,8H), 5,62 (d, 0,2H), 7,11-8,26 (m, 8H) . Analytisk HPLC: 10,27 min. LC-MS (ES+) : m/e = 599, 2 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- trifluormetyl- benzoylamino)- propionyl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98w)
Fremstilt fra {2-[2-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-ylkarbmoyl)-pyrrolidin-l-yl]-l-metyl-2-okso-etyl}-karbaminsyre-tert-butylester og 4-amino-3-trifluormetyl-benzosyre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 56 mg av tittelforbindelsen (48% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,20-1,55 (m, 3H), 1,75-2,50 (m, 4H), 2,50-3,10 (m, 2H), 3,50-4,00 (m, 2H), 4,30-5,00 (m, 5H), 5,42 (s, 0,4H), 5,51 (s, 0,2H), 5,62 (d, 0,3H), 5,78 (d, 0,1H), 6,84 (d, 1H), 7,20-8,15 (m, 7H) . Analytisk HPLC: 14, 90, 15, 20 min. LC-MS (ES+) : m/e = 563, 2 (M+H+) .
1-[ 2- ( 3- Klor- 4- dimetylamino- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98x)
Fremstilt fra {2-[2-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-ylkarbamoyl)-pyrrolidin-l-yl]-l-metyl-2-okso-etyl}-karbaminsyre-tert-butylester og 3-klor-4-dimetylamino-benzosyre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 82 mg av tittelforbindelsen (44% utbytte).<X>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,18-1,53 (m, 3H), 1,70-2,40 (rn,- 4H) , 2,55-3,10 (m, 2H), 2,84 (s, 6H) , 3,45-3,94 (m, 2H), 4,25-4,95 (m, 5H), 5,46 (s, 0,3H), 5,51 (s, 0,2H), 5,63 (d, 0,4H), 5,73 (d, 0,1H), 7,05 (d, 1H), 7,15-7,95 (m, 7H) . Analytisk HPLC: 11,85, 12,19 min. LC-MS (ES+) : m/e = 557, 3 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Dimetylamino- 3, 5- difluor- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98y)
Fremstilt fra {2-[2-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-ylkarbamoyl)-pyrrolidin-l-yl]-l-metyl-2-okso-etyl}-karbaminsyre tert-butylester og 4-dimetylamino-3,5-diklor-benzosyre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 106 mg av tittelforbindelsen (65% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 5 1,10-1,55 (m, 3H), 1,75-2,30 (m, 4H), 2,45-3,15 (m, 2H), 2,84 (s, 6H), 3,40-3,95 (m, 2H), 4,15-4,95 (m, 5H), 5,47 (s, 0,35H), 5,54 (s, 0,15H), 5,67 (d, 0,4H), 5,77 (d, 0,1H), 7,20-7,70 (m, 7H) . Analytisk HPLC: 12,21, 12,51 min. LC-MS (ES+) : m/e = 559, 2 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 2, 3, 5, 6- tetrafluor- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98z) Fremstilt fra {2-[2-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-ylkarbmoyl)-pyrrolidin-l-yl]-l-metyl-2-okso-etyl}-karbaminsyre-tert-butylester og 4-amino-2,3,5,6-tetrafluor-benzosyre i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 58 mg av tittelforbindelsen (73% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,30-1,50 (m, 3H), 1,62-2,35 (m, 4H), 2,45-3,12 (m, 2H), 3,50-3,90 (m, 2H), 4,20-4,95 (m, 5H), 5,42 (s, 0,4H), 5,52 (s, 0,1H), 5,64 (d, 0,4H), 5,82 (d, 0,1H), 7,25-7,65 (m, 5H). Analytisk HPLC: 16, 56, 16, 90 min. LC-MS (ES+) : m/e = 567,2 (M+H<+>) .
l-{ 2-[ 3- Klor- 4-( 2, 2- dimetylpropionylamino)- benzoylamino]-propionyl}- pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso-tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 98aa)
Til en suspensjon av 98b (100 mg, 0,19 mmol) og poly(4-vinylpyridin) (200 mg) ble tilsatt pivaloylklorid (7 0|iL, 0. 57 mmol). Den resulterende suspensjon ble omrørt over natten ved romstemperatur og ble filtrert og fortynnet med EtOAc (25 ml). Det organiske lag ble vasket med 10% NaHC03 (2 x 25 ml), mettet NaCl (1 x 25 ml), tørket (MgS04) og inndampet til tørrhet for å tilveiebringe 98 mg av tittelforbindelsen (85% utbytte) etter kromatografi.<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,10-1,55 (m, 3H), 1,38 (s, 9H), 1, 65-2,40 (m, 4H) , 2,60-3,10 (m, 2H) , 3, 46-3, 88 (m, 2H), 4,20-4,95 (m, 5H), 5,62 (d, 0,8H), 5,78 (d, 0,2H), 7,15-8,30 (m, 8H) . Analytisk HPLC: 11,82 min. LC-MS (ES+) : m/e = 613,2 (M+H+) .
1-[ 2- ( 3- Klor- 4- propionylamino)- benzoylamino)- propionyl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98ab)
Fremstilt fra 98b og propionylklorid i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98aa for å tilveiebringe 104 mg av tittelforbindelsen (95% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13: CD3OD) 8 1,16 (t, 0,6H), 1,18 (d, 0,6H), 1,27
(t, 2,4H), 1,38 (d, 2,4H), 1,72-2,35 (m, 4H), 2,45-2,58 (m,
2H) , 2, 58-3, 05 (m, 2H) , 3, 45-3, 85 (m, 2H) , 4, 20-4, 88 (m, 5H), 5,64 (d, 0,8H), 5,76 (d, 0,2H), 7,20-8,35 (m, 8H). Analytisk HPLC: 9,89 min. LC-MS (ES+) : m/e = 585, 2 (M+H+) .
1-[ 2- ( 3- Klor- 4- fenylacetylamino)- benzoylamino)- propionyl]-pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98ac)
Fremstilt fra 98b og fenylacetylklorid i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98aa for å tilveiebringe 85 mg av tittelforbindelsen (77% utbytte).<X>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDCI3: CD3OD) 8 1,18 (d, 0,6H), 1,40 (d, 2,4H), 1,72-2,38 (m, 4H), 2, 58-3, 05 (m, 2H) , 3, 46-3, 78 (m, 2H) , 3,85 (s, 2H), 4,18-4,92 (m, 5H), 5,63 (d, 0,8H), 5,75 (d, 0,2H), 7,15-8,34 (m, 13H) . Analytisk HPLC: 11,63 min. LC-MS (ES+) : m/e = 647, 2 (M+H+) .
1- [ 2- ( 3- Klor- 4- metyl- butyrylamino)- benzoylamino)-propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso-tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 98ad)
Fremstilt fra 98b og isovalerylklorid i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98aa for å tilveiebringe 60 mg av tittelforbindelsen (58% utbytte) .<X>H-NMR (500 MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 8 1,07 (d, 5H), 1,15 (d, 0,8H), 1,27 (d, 1H), 1,45 (d, 2,2H), 1,67-2,30 (m, 5H), 2,34 (d, 2H), 2,58-3,05 (m, 2H), 3,48-3,88 (m, 2H), 4,10-4,98 (m, 5H), 5,68
(d, 0,7H), 5,78 (m, 0,3H), 7,18-8,33 (m, 8H). Analytisk HPLC: 10,74 min. LC-MS (ES+) : m/e = 613,2 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Metoksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- propionyl]- pyrro-1idin- 2- karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3-yl)- amid ( 98ae) Fremstilt fra 1-[2-(4-metoksy-3,5-dimetyl-benzoylamino)-propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester og syn-(2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a for å tilveiebringe 174 mg (81% utbytte) av tittelforbindelsen.<X>H-NMR (500 MHz, CDCI3) : 6 1,04 (t, 0,45H), 1,27 (t, 2,55H), 1,34-1,45 (m, 3H), 1,95-2,45 (m, 10H), 2,78-2,84 (m, H), 3,60-3,90 (m, 8H), 4,50-4,70 (m, 2H), 4,90-4,94 (m, H), 5,45 (d, 0,85H), 5,61 (d, 0,15H), 6,99 (d, H), 7,15 (d, H), 7,45 (s, 2H); retensjonstid på analytisk HPLC: 10,09 min; LC-MS: m/z = 476 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Metoksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- propionyl]- pyrro-1idin- 2- karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3-yl)- amid ( 98af)
Fremstilt fra 1-[2-(4-metoksy-3,5-dimetyl-benzoylamino)-propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester og anti-(2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 168 mg (77% utbytte) av tittelfor bindelsen.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 8 1,10-1,35 (m, 3H) , 1, 35-1, 60 (m, 3H) , 1, 90-2, 45 (m, 10H), 2, 60-3, 00 (m, H) , 3,55-3,95 (m, 8H), 4,15-4,60 (m, 2H), 4,83-5,00 (m, H), 5,29 (s, H), 6,95-7,06 (m, H), 7,50 (s, 2H), 7,92 (d, H); retensjonstid på analytisk HPLC: 10,14 min; LC-MS: m/z = 476 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Metoksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- propionyl]- pyrro-1idin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98ag)
Fremstilt fra 1-[2-(4-metoksy-3,5-dimetyl-benzoylamino)-propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester og syn-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester (40) i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 406 mg (utbytte 71%) av tittelforbindelsen.<X>H-NMR (500 MHz, CDCI3) : 8 1,09 (d, 0,6H), 1,35 (m, 2,4H), 1,90-2,20 (m, 3H), 2,22-2,50 (m, 10H), 2,84-2,90 (m, H), 3,52-3,62 (m, 1,6H), 3,65-3,80 (m, 3,4H), 4,10-4,40 (m, H) , 4, 50-4, 75 (m, 3H) , 4, 82-4, 95 (m, 2H) , 5,54 (d, 0,8H), 5,80 (d, 0,2H), 6,87 (d, H), 7,10-7,40 (m, 6H), 7,45 (s, 2H); retensjonstid på analytisk HPLC: 16,71min<1>;LC-MS: m/z = 538 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Allyloksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98ah)
Fremstilt fra 1-[ 2-(4-allyloksy-3,5-dimetyl-benzoylamino)-propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester og 40 i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 264 mg (utbytte 46%) av tittelforbindelsen.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 5 1, 09-1, 43 (m, 3H) , 1, 90-2, 20 (m, 3H) , 2,20-2,38 (m, 7H), 2,38-2,52 (m, H), 2,80-2,95 (m, H), 3, 52-3, 67 (m, H), 3, 70-3, 80 (m, H) , 4,10-4,40 (m, 2H) , 4, 40-4, 95 (m, 5H), 5, 26-5, 55 (m, 3H) , 6,00-6,14 (m, H) , 6,87 (d, H), 7,10-7,70 (m, 8H); retensjonstid på analytisk HPLC: 18,56 og 18,92 min<1>; LC-MS: m/z = 564 (M+H<+>)
{ 2-[ IR-( 2S- Isopropyl- 5R- metyl- cykloheksyloksy)]- 5- okso-tetrahydro- furan- 3- yl}- karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre tert-butylester som beskrevet for 40 under anvendelse av (IR, 2S, 5R)-(-)-mentol hvilket gav 0,32 g av syn-diastereomer (lavere Rf) av tittelforbindelsen og 4,25 g av blandingen av anti/syn-diastereomerer (totalt utbytte 67%) .<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) blanding: 5 0,70-1,05 (m, 13H), 1,20-1,47 (m, 2H), 1,60-1,80 (m, 2H), 1,94-2,20 (m, 2H), 2,35-2,50 (m, H), 2,82-3,04 (m, H), 3,40-3,61 (m, H), 4,43-4,70 (m, 3H), 5,15-5,35 (m, 2H), 5,48-5,61 (m, H), 5,90-5,94 (m, H); for syn-diastereomer 0,70-1,05 (m, 13H), 1,20-1,47 (m, 2H), 1,60-1,80 (m, 2H), 1,94-2,18 (m, 2H), 2,40-2,50 (m, H), 2,82-2,92 (m, H), 3,54-3,61 (m, H), 4,45-4,70 (m, 3H), 5,18-5,35 (m, 2H), 5,58-5,61 (m, H), 5,90-5,93 (m, H); LC-MS: m/z = 340 (M+H<+>) for blandingen av anti/syn-diastereomerer .
4- Benzyloksy- 3, 5- dimetyl- benzosyre
Fremstilt ved hjelp av metoden anvendt til synthesize 4-allyloksy-3,5-dimetyl-benzosyre hvilket gav 2,43 g (utbytte 56%) av tittelforbindelsen.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 8 4,87 (s, 2H), 7,36-7, 48 (m, 5H) , 7,92 (s, 2H); LC-MS: m/z = 255
(M-H<+>) .
1- [ 2- ( 4- Benzyloksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-{ 2-[ IR-( 2S- isopropyl- 5R- metyl-cykloheksyloksy)]- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl}- amid ( 98ai)
Fremstilt fra 1-[2-(4-benzyloksy-3,5-dimetyl-benzoylamino)-propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester {2-[1R-(2S-isopropyl-5R-metyl-cykloheksyloksy)]-5-okso-tetrahydro-f uran-3-yl } -karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 130 mg (utbytte 39%) av tittelforbindelsen.<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 5 0, 45-1, 10 (m, 12H), 1,15-1,90 (m, 8H), 1,90-2,45 (m, 12H) , 2, 80-2, 84 (m, H) , 3, 50-3, 85 (m, 3H) , 4,45-4,70 (m, 2H) , 4, 80-4, 95 (m, 3H) , 5,62 (d, H) , 7,05 (d, H) , 7,17 (d, H) , 7, 30-7,60 (m, 7H) , 7, 62-7, 75 (m, H) ; retensjonstid på analytisk HPLC: 15,90 og 16,08 min; LC-MS: m/z = 662
(M+H<+>) .
1-[ 2- ( 4- Hydroksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-{ 2-[ IR-( 2S- isopropyl- 5R- metyl-cykloheksyloksy)]- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl}- amid ( 98aj)
En løsning av 1-[2-(4-benzyloksy-3,5-dimetyl-benzoylamino)-propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-{2-[lR-(2S-isopropyl-5R-metyl-cykloheksyloksy)]-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl}-amid (110 mg, 0,17 mmol) i etylacetat (2 ml) ble omrørt med 10% palladium på karbon (20 mg) under hydrogenatmosfære i 24 timer, deretter filtrert gjennom Celitt og inndampet in vacuo. Det resulterende residuum ble renset ved hjelp av kromatografi under anvendelse av CH2Cl2/metanol (99/1 til 96/4) hvilket gav 58 mg av tittelforbindelsen.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 8 0, 70-1, 00 (m, 10H), 1, 20-1, 80 (m, 10H), 1,90-2,40 (m, 11H), 2,82-2,86 (m, H), 3,57-3,78 (m, 3H), 4, 55-4, 67 (m, 2H) , 4,90-4, 94 (m, H), 5,29 (s, H) , 5,62 (d, H) , 6,90 (d, H), 7,14 (d, H) , 7,42 (s, 2H); retensjonstid på analytisk HPLC: 12,84 og 13,05 min; LC-MS: m/z = 572
(M+H<+>) .
1-[ 2-( 4- Hydroksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98ak)
En løsning av 98ah (230 mg, 0,41 mmol) i CH2C12(10 ml) ble behandlet med DMBA (65 mg, 0,42 mmol) og Pd(PPh3)4(50 mg) ved romstemperatur i 20 timer. Blandingen ble konsentrert til tørrhet in vacuo og renset ved hjelp av flash-kromatografi under anvendelse av CH2C12/metanol (99,5/0,5 til 97/3) hvilket gav 181 mg av tittelforbindelsen.<X>H-NMR (500 MHz, CDCI3) : 8 1,08 (d, 0,75H), 1, 20-1, 35 (m, 2,25H), 1,70-2,50 (m, 12H), 2,80-2,90 (m, H), 3,50-3,65 (m, H), 3,70-3,80 (m, H), 4,10-4,25 (m, H) , 4, 35-4, 98 (m, 3H), 5,53 (d, 0,75H), 5,85 (d, 0,25H), 6,81 (d, H), 7,13-7,60 (m, 8H) ; retensjonstid på analytisk HPLC: 10,38 og 10,56 min; LC-MS: m/z = 524 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Dimetylamino- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre- ( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl) - amid ( 98al)
Fremstilt fra 1-[2-(4-dimetylamino-benzoylamino)-propion-yl ] -pyrrolidin-2-karboksylsyre- tert-butylester og syn-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 60 mg (45% utbytte).<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 8 1,04 (d, 0,75H), 1,35 (d, 2,25H), 1,80-2,50 (m, 5H), 2,75-3,20 (m, 8H), 3,45-3,75 (m, 2H), 4,05-4,20 (m, 0,5H), 4,30-4,80 (m, 3,5H), 4,80-4,95 (m, 1,5H), 5,52 (d, H), 5,75-6,00 (m, 0,5H), 6,60-6,90 (m, 3H), 7,10-7,50 (m, 4H), 7,50-7,80 (m, 2H); retensjonstid på analytisk HPLC: 10,46 min; LC-MS: m/z = 523 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-{ 2R-[ IR-( 2S- isopropyl- 5R- metyl- cykloheksyloksy)]- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl}- amid ( 98am)
Fremstilt fra 1-[2-(4-amino-3-klor-benzoylamino)-propion-yl] -pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester (97a) og syn-{2-[IR-(2S-isopropyl-5R-metyl-cykloheksyloksy)]-5-okso-tetrahydro-f uran-3-yl } -karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 103 mg (utbytte 67%) av tittelforbindelsen.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 5 0, 70-1, 10 (m, 12H), 1, 20-1, 50 (m, 5H), 1,50-1,85 (m, 2H), 1,90-2,30 (m, 5H), 2,75-2,85 (m, H), 3,50-3,70 (m, 2H), 3,70-3,82 (m, H), 4,20-4,65 (m, 4H), 4,80-4,95 (m, H), 5,61 (d, H), 6, 70-6, 73 (m, H), 6,95 (d, H), 7,15 (d, H) , 7,49-7,51 (m, H), 7,73 (s, H); retensjonstid på analytisk HPLC: 12,88 min; LC-MS: m/z = 577 (M+H+) .
{ 2-[ IS-( 2R- Isopropyl- 5S- metyl- cykloheksyloksy)]- 5- okso-tetrahydro- f uran- 3 - yl }- karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre tert-butylester som beskrevet for 40 under anvendelse av (IS, 2R, 5S)-( + )-mentol hvilket gav 855 mg an ti-diastereomer (høyere Rf) av tittelforbindelsen, 503 mg syn-diastereomer (lavere Rf) og 459 mg blandingen av anti/syn-diastereomerer (totalt utbytte 66%).<2>H-NMR (500 MHz, CDC13) anti-diastereomer: 5 0,74-1,00 (m, 12H), 1,20-1,45 (m, 2H), 1, 58-1, 72 (m, 2H) , 1,98-2,12 (m, 2H) , 2,18-2,40 (m, H) , 2,98-3,03 (m, H), 3,49-3,54 (m, H), 4,17 (br, H), 4,59 (br, 2H), 4,97 (br, H), 5,22-5,33 (m, 2H), 5,58 (s, H), 5,87-5,93 (m, H); for syn-diastereomeren 0,75-1,02 (m, 12H), 1,25-1,45 (m, 2H), 1,57-1,70 (m, 2H), 2,00-2,16 (m, 2H), 2,40-2,52 (m, H), 2,78-2,90 (m, H), 3,40-3,50 (m, H), 4,58 (br, 2H), 5,24-5,35 (m, 2H), 5,51-5,52 (d, H), 5,85-5,98 (m, H); LC-MS: m/z = 340 (M+H<+>) for begge diastereomerer.
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-{ 2R-[ IS-( 2R- isopropyl- 5S- metyl- cykloheksyloksy)]- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl}- amid ( 98an)
Fremstilt fra 97a og syn-{2-[IS-(2R-isopropyl-5S-metyl-cykloheksyloksy)]-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl}-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 88 mg (50% utbytte) av tittelforbindelsen.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 5 0, 70-1, 10 (m,
12H), 1,20-1,50 (m, 14H), 1,50-1,70 (br, 2H), 1,90-2,25 (m, 4H) , 2, 27-2,37 (m, H) , 2,40-2, 50 (m, H) , 2, 75-2,79 (m, H) , 3, 35-3,80 (m, 3H) , 4,20-4, 57 (m, 3H) , 4, 60-4, 70 (m, H) , 4,88-4, 92 (m, H) , 5,53 (d, H) , 6,71-6,75 (m, H) , 6,90 (d, H) , 7,20 (d, H) , 7, 50-7, 53 (m, H), 7,75 (d, H); retensjonstid på analytisk HPLC: 13,20 min; LC-MS: m/z = 577 (M+H+) .
( 2- Cykloheksylmetoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre-tert-butylester som beskrevet for 40 under anvendelse av cykloheksylmetanol hvilket gav 1,04 g (høyere RF) (35% utbytte) av anti-diastereomeren av tittelforbindelsen og 1,295 g (lavere Rf) (44% utbytte) av syn-diastereomeren.<2>H-NMR (500 MHz, CDC13) for anti-diastereomeren: 5 0,90-0,96 (m, 2H), 1,10-1,30 (m, 3H) , 1, 55-1, 85 (m, 6H), 2,37-2,41 (d, H), 2,97-3,03 (m, H), 3,34-3,38 (m, H), 3,58-3,62 (m, H) , 4, 55-4, 70 (m, 2H) , 4, 70-4, 73 (m, H), 5,03 (bs, H), 5,22-5, 37 (m, 3H) , 5, 87-5, 93 (m, H); for syn diastereomer 0,91-0,97 (m, 2H) , 1,10-1,31 (m, 3H) , 1, 56-1, 90 (m, 7H), 2,44-2,48 (m, H), 2,81-2,87 (m, H), 3,35-3,39 (m, H), 3,63-3,67 (m, H), 4, 53-4,70 (m, 3H), 5, 20-5, 50 (m, 3H) , 5,89-5,95 (m, H); LC-MS: m/z = 298 (M+H<+>) for begge diastereomerer .
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrro-1idin- 2- karboksylsyre-( 2- cykloheksylmetoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 98ao)
Fremstilt fra 97b og syn-(2-cykloheksylmetoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 212 mg (64% utbytte) av tittelforbindelsen.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 5 0, 70-1, 30 (m, 5H), 1, 30-1, 85 (m, 9H) , 1,85-2,60 (m, 8H) , 2, 75-3,00 (m, H) , 3,10-3,80 (m, 4H) , 4, 30-4, 95 (m, 3H), 5,42 (d, 0,85H), 5,62 (d, 0,15H), 6,87 (d, 0,15H), 7,08 (d, 0,85H), 7,25 (d, H) , 7,60-7,90 (m, 3H) , 8,08 (d, 0,15H), 8,50 (d, 0,85H); retensjonstid på analytisk HPLC: 11,81 min; LC-MS: m/z = 577 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-{ 2R-[ IS-( 2R- isopropyl- 5S- metyl- cykloheksyloksy)]- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl}- amid ( 98ap)
Fremstilt fra 97b og syn-{ 2-[IS-(2R-isopropyl-5S-metyl-cykloheksyloksy)]-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl}-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 223 mg (63% utbytte) av tittelforbindelsen.<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 5 0, 70-1, 15 (m, 12H) , 1, 20-1, 85 (m, 8H) , 1, 85-2, 60 (m, 9H), 2, 74-2, 88 (m, H) , 3, 35-3, 85 (m, 3H) , 4, 40-4, 55 (m, H) , 4, 65-4, 78 (m, H) , 4,88-4,91 (m, H), 5,53 (d, H), 7,00-7,25 (m, 2H), 7,60-7,90 (m, 3H), 8,50 (d, H); retensjonstid på analytisk HPLC: 13,31 min; LC-MS: m/z = 619 (M+H+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- cykloheksylmetoksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98aq)
Fremstilt fra 97a og syn-(2-cykloheksylmetoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 113 mg (56% utbytte) av tittelforbindelsen.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 6 0,70-1, 35 (m, 5H) , 1, 35-1, 90 (m, 8H) , 1,90-2,20 (m, 3H), 2,30-2,60 (m, H), 2,80-3,00 (m, H), 3,15-3,80 (m, 4H), 4,28-4,75 (m, 4H), 4,89-4,93 (m, H), 5,42 (d, H), 6,74 (d, H) , 6,87 (d, H) , 7,30 (d, H), 7,51-7,53 (m, H), 7,74 (d, H); retensjonstid på analytisk HPLC: 12,02 min; LC-MS: m/z = 535 (M+H+) .
( 2- Butoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- karbaminsyre-allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre tert-butylester som beskrevet for 40 under anvendelse av n-butanol hvilket gav 878 mg (29% utbytte) av tittelforbin- deisen (313 mg av anti-diastereomeren, 260 mg av syn-diastereomeren og 305 mg av blandingen).<1>H-NMR (500 MHz,
CDC13) for anti-diastereomeren: 8 (høyere Rf) 0,89-0,96 (t, 3H), 1,32-1,40 (m, 2H), 1,54-1,63 (m, 2H), 2,37-2,41 (d, H), 2,98-3,04 (q, H), 3,55-3,60 (m, H), 3,77-3,82 (m, H), 4,19-4,22 (m, H) , 4,58 (br, 2H), 5,03 (br, H) , 5,23-5,40 (m, 3H), 5,87-5,93 (M, H), for syn-diastereomeren (lavere Rf) 0,91-0,95 (t, 3H), 1,34-1,39 (m, 2H), 1,56-1,63 (m, 2H) , 2, 42-2, 50 (m, H) , 2,83-2, 87 (m, H) , 4,07-4,11 (t, H), 4,45-4,50 (m, 0,5H), 4,51-4,70 (m, 2,5H), 5,23-5,35 (m, 2H), 5,42-5,43 (d, H), 5,80-5,95 (m, H); LC-MS: m/z = 258 (M+H<+>) for begge diastereomerer.
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- butoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid
( 98ar)
Fremstilt fra 97a og syn-(2-butoksy-5-okso-tetrahydrofuran-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 118 mg (48% utbytte) av tittelforbindelsen som en syn-diastereomer.<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 8 0,80-1, 02 (m, 2H), 1,35-1,51 (m, 5H), 1,51-1,70 (m, 2H), 1,90-2,27 (m, 3H), 2,30-2,46 (m, H), 2, 80-2, 90 (m, H), 3, 55-3, 94 (m, 4H) , 4, 30-4, 75 (m, ' 4H) , 4,90-5,00 (m, H), 5,44-5,46 (m, H), 6,73-6,80 (m, H), 6,80-6,93 (m, H), 7,16-7,25 (m, H), 7,49-7,60 (m, H), 7,70-7,84 (m, H); retensjonstid på analytisk HPLC: 9,71 min; LC-MS: m/z = 495 (M+H+) .
( 2- Isobutoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- karbaminsyre-allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre tert-butylester som beskrevet for 40 under anvendelse av isobutanol hvilket gav 190 mg (utbytte 7,3%) av tittelforbindelsen som en anti-diastereomer og 290 mg (utbytte 11%) av syn-diastereomeren.<1>H-NMR (500 MHz, CDCI3) for anti-diastereomeren: 5 (høyere Rf) 0,85-1,05 (m, 6H), 1,82-1,98 (m, H) , 2, 37-2, 42 (d, H) , 2, 98-3, 04 (m, H) , 3,31-3,35 (m, H) , 3,55-3, 58 (m, H) , 4, 20-4, 30 (t, H), 4,58 (br, 2H) , 5,07 (br, H) , 5, 22-5, 43 (m, 3H) , 5, 84-5,96 (m, H), for syn-diastereomeren (lavere Rf) 0, 85-1,05 (m, 6H) , 1, 88-1, 95 (m, H), 2,40-2,51 (m, H), 2,83-2,90 (m, H), 3,33-3,36 (m, H), 3,61-3,65 (m, H), 3,87-3,88 (d, H), 4,40-4,68 (m, 3H), 5,20-5,40 (m, 2H) , 5, 42-5, 43 (d, H) , 5, 80-5, 97 (m, H) ; LC-MS: m/z =
258 (M+H<+>) for begge diastereomerer.
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- isobutoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)-amid ( 98as)
Fremstilt fra 97a og syn-(2-isobutoksy-5-okso-tetrahydrofuran-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 93 mg (38% utbytte) av tittelforbindelsen.<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 8 0,74-0,76 (t, 0,6H), 0,80-1,00 (m, 5,4H), 1,40-1,50 (m, 3H) , 1,90-2, 22 (m, 3H) , 2, 33-2,45 (m, H) , 2, 80-2,90 (m, H), 3, 32-3, 38 (m, H) , 3, 55-3, 80 (m, 3H), 4,38 (br, H) , 4,50-4,60 (m, H), 4, 70-4, 80 (m, H) , 4, 90-5, 00 (m, H) , 5,42-5,45 (m, H) , 6, 74-6, 76 (d, H) , 6, 86-6, 88 (d, H) , 7,31-7,33 (d, H), 7,51-7,53 (m, H), 7,74-7,75 (d, H); retensjonstid på analytisk HPLC: 9,63&9,80 min; LC-MS: m/z = 495 (M+H+) .
[ 2-( Indan- 2- yl) oksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl]- karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre-tert-butylester (5,2 gram, 20 mmol) som beskrevet for 40 under anvendelse av 2-indanol (8,05 gram, 60 mmol) hvilket gav 4,10 gram (65% utbytte) av tittelforbindelsen som en blanding av epimerer. Rensing gav 1,76 gram (28% utbytte ) av 4(S)-, 5(R)-epimeren som en gul olje.<X>H NMR (500 MHz, CDCI3) 5 2,42 (dd, J=17,2, 10,5Hz, 1H), 2,79 (dd, J=17,2, 8,4Hz, 1H), 2,99 (dd, J=16,7, 4,1Hz, 1H) , 3,04 (dd, J=16,7, 4,1Hz, 1H), 3,22 (dd, J=17,2, 6,6Hz, 1H), 3,26 (dd, J=17,2, 6,6Hz, 1H), 4,53 (m, 3H), 4,70 (m, 1H), 5,20 (m, 2H), 5,60 (d, J=5,3Hz, 1H) , 5,87 (m, 1H), 7,17 (m, 4H) ppm. LC-MS (ES+): m/e=318 (M+H). Analytisk HPLC (C18-kolonne): 17,094 min .
Også isolert ble epimerblandingen (0,75 gram, 12% utbytte), og 4(S)-, 5(S)-epimeren (1,59 gram, 25%) som et hvitt fast stoff.<X>H-NMR (500MHz, CDC13) 5 2, 38 (d, J=17,9Hz, 1H) , 3,0 (m, 3H), 3,22 (m, 2H), 4,13 (m, 1H), 4,58 (m, 2H), 4,68 (m, 2H), 4,98 (br s, 1H), 5,26 (m, 1H), 5,57 (s, 1H), 5,88 (ddt, J=18,0, 11,1, 5,4Hz, 1H), 7,20 (m, 4H) ppm. LC-MS (ES+): m/e=318 (M+H). Analytisk HPLC (C18-kolonne):17,025 (5,5%), 17,325 (94,5%) min.
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-[ 2-( indan- 2- yloksy)- 5- okso- tetrahydro- furan-3- yl]- amid ( 98at)
Fremstilt fra 97a og [2-(indanol-2-yl]oksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav tittelforbindelsen som en 71:29-blanding av epimerer som et hvitaktig fast stoff (0,20g, 58% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 1,0-1,5 (m, 3H) , 1,6-2,3 (m, 4H) , 2,42 (m, 1H) , 2,6-3,4 (m, 6H) , 3,5-4,1 (m, 3H) , 4,2-4,9 (m, 4H), 5,65 (d, J=5,0Hz, 0,80H), 5,8 (m, 0,07H), 5,85 (d, J=5,0Hz, 0,13H), 6,8-7,3 (m, 6H) , 7,4-7,9 (m, 3H) ppm. Analytisk HPLC (C18-kolonne) 16,035 (71,4%), 16,476 (28,6%) min. LC-MS (ES+): m/e=555 (M+H).
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-[ 2-( indan- 2- yloksy)- 5- okso- tetrahydro- f uran- 3- yl ] - amid ( 98au)
Fremstilt fra 97b og [2-(indanol-2-yl]oksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav tittelforbindelsen som en 76:24-blanding av epimerer som et hvitaktig fast stoff (0,22g, 57% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, CDCI3) 8 1,08 (d, J=6,9Hz, 0,4H), 1,26 (d, J=6,9Hz, 0,6H), 1,35 (d, J=6,9Hz, 2H), 1,8-2,3 (m, 3H), 2,28 (s, 2H), 2,29 (s, 1H) , 2,4 (m, 1H), 2,8 (m, 1H), 3,10 (m, 2H), 3,27 (m, 2H) , 3,58 (m, 2H) , 3,69 (m, 1H) , 4,5-4,9 (m, 4H) , 5,65 (d, J=5,3Hz, 0,68H), 5,84 (d, J=5,3Hz, 0,18H), 6,38 (br, 0,14H), 6,9-7,7 (m, 6H), 7,6-7,9 (m, 3H), 8,33 (br d, J=6,8Hz, 0,18H), 8,51 (br d, J=8,0Hz, 0,82H) ppm. Analytisk HPLC (C18-kolonne) 15,596 (76,2%), 15,932 (23,8%) min. LC-MS (ES+): m/e=597 (M+H).
1-[ 2- ( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- cyklopentyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3-yl)- amid ( 98av)
Fremstilt fra 97a og syn-(2-cyklopentyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitaktig fast stoff (0,19g, 59% ut-bytte).<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 1,2-2,4 (m, 15H), 2,4-3,1 (m, 2H) , 3,6-3,9 (m, 2H) , 4,2-4,4 (m, 2H) , 4,5-5,0 (m, 4H), 5,40 (d, J=5,0Hz, 0,35H), 5,55 (d, J=5,0Hz, 0,65H), 6,8-8,2 (m, 5H) ppm. Analytisk HPLC (C18-kolonne) 14,065 min. LC-MS (ES+): m/e=507 (M+H).
1-[ 2-( 3, 5- Diklor- 4- hydroksy- benzoylamino)- propionyl]- pyrro-1idin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 98aw)
Fremstilt fra 1-[2-(4-allyloksy-3,5-dimetyl-benzoylamino)-propionyl]-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester og syn- AO i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav tittelforbindelsen som et lysegult fast stoff (l,087g, 64% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 1,09 (d, J=6,9Hz, 0,6H), 1,33 (d, J=6,9Hz, 2,4H), 1,96 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 2,28 (m, 0,8H), 2,40 (dd, J=17,3, 10,2Hz, 0,8H), 2,56 (m, 0,2H), 2,85 (dd, J=17,3, 8,5Hz, 0,8H), 3,09 (dd, J=17,7, 10,2Hz, 0,2H), 3,57 (m, 1H) , 3,73 (dt, J=9,2, 7,9Hz, 0,8H), 4,09 (m, 0,2H), 4,21 (d, J=7,9Hz, 0,2H), 4,44 (d, J=9,8Hz, 0,2H), 4,55 (dd, J=8,0, 3,0Hz, 0,8H), 4,62 (d, J=ll,6Hz, 1H), 4,70 (m, 1H), 4,80 (m, 1H), 4,89 (d, J=ll,6Hz, 0,8H), 5,52 (d, J=5,2Hz, 0,8H), 5,82 (d, J=5,2Hz, 0,2H), 6,51 (br, 0,2H), 6,62 (br, 0,8H), 7,0-7,4 (m. 7H), 7,43 (s, 0,4H), 7,66 (d, J=l,0Hz, 1,6H) ppm. Analytisk HPLC (Cl8-kolonne) 10,135 min. LC-MS (ES+): m/e= 564, 566 (6:4) (M+H).
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-( 2- cyklopentyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3-yl)- amid ( 98ax)
Fremstilt i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille (98av) under anvendelse av anti-(2-cyklopentyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-amid hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitaktig fast stoff (0,24 g, 74% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 5 1,41 (d, J=6,5Hz, 3H), 1,7 (m, 7H), 1,98 (br, 2H), 2,13 (br, 2H), 2,27 (m, 1H), 2,69 (m, 1H), 2,86 (dd, J=18,0, 6,8Hz, 0,7H), 2,98 (dd, J=18,3, 8,2Hz, 0,3H), 3,60 (br, 1,4H), 3,77 (br, 0,6H), 4,1-4,6 (m, 5H), 4,82 (m, 1H) , 5,27 (m, 0,65H), 5,51 (d, J=5,3Hz, 0,05H), 5,59 (br s, 0,3H), 6,76 (br, 1H) , 7,00 (br, 1H) , 7,49 (br, 1H) , 7,74 (br, 1H), 7,89 (br, 1H) ppm. Analytisk HPLC (C18-kolonne) 9,756 min. LC-MS (ES+): m/e=507 (M+H).
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrro-1idin- 2- karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3-yl)- amid ( 98ay)
Fremstilt fra (2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester og 97b ifølge metoden anvendt for 98a. Tittelforbindelsen ble isolert som et hvitt fast stoff (51 mg, 18% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, 1:1 CDC13:CD30D) 5 1,08-1,35 (m, 3H), 1,35-1,55 (m, 3H), 1,75-2,44 (m, 4H), 2,26 (s, 3H), 2,44-3,07 (m, 2H), 3,48-3,97 (m, 2H), 4,18-4,92 (m, 5H), 5,32 (d, 0,4H), 5,47 (d, 0,1H), 5,58 (d, 0,4H), 5,64 (d, 0,1H), 7,70-8,35 (m, 3H). Analytisk HPLC 10,37, 10,54 min. LC-MS (ES<+>) m/e= 509, 2 (M+H+) .
[ 2-( 2- Klor- etoksy)- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl]- karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre tert-butylester (5,2g, 20 mmol) som beskrevet for 40 under anvendelse av kloretanol (4,05ml, 60 mmol) hvilket gav l,84g (35% utbytte) av tittelforbindelsen som en blanding av epimerer. For anti-diastereomeren:<1>H-NMR (500 MHz,
CDC13) 6 2,42 (dd, J=18,lHz, 1H), 3,00 (dd, J=18,l, 7,8Hz, 1H), 3,63 (m, 2H), 3,85 (m, 1H), 4,02 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,57(br s, 2H), 5,17 (br s, 1H), 5,22 (d, H=ll,5Hz, 1H) , 5,29 (d, J=16,8Hz, 1H), 5,44 (s, 1H), 5,89 (m, 1H) ppm; LC-MS (ES+) m/e= 264 (M+H). For syn-diastereomeren:<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) 5 2,47 (dd, J=17,3, 10,7Hz, 1H), 2,83 (dd, J=17,3, 8,4Hz, 1H), 3,65 (m, 2H) , 3,83 (m, 1H) , 4,11 (m, 1H), 4,57(m, 3H), 5,22 (d, H=10,4Hz, 1H), 5,30 (d, J=17,2Hz, 1H), 5,33, (m, 1H), 5,47 (d, J=5,2Hz, 1H), 5,89 (ddt, J=17,l, 11,0, 5,4Hz, 1H) ppm; LC-MS (ES+) m/e= 264
(M+H).
[ 2-( 2- Morfolin- 4- yl- etoksy)- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl]-karbaminsyre- allylester
Fremstilles fra [2-(2-klor-etoksy)-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl]-karbaminsyre-allylester ved omsetning med morfolin (2 ekv.) og Kl (1 ekv.) i DMF.
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-[ 2-( 2- morfolin- 4- yl- etoksy)- 5- okso- tetrahydro- f uran- 3- yl ] - amid ( 98az)
Fremstilles fra 97a og syn-[2-(2-morfolin-4-yl-etoksy) -5-okso-tetrahydro-furan-3-yl]-karbaminsyre-allylester ifølge metoden anvendt for 98a.
[ 2-( 4- Klor- benzyloksy)- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl]- karbaminsyre- allylester
Fremstilt fra 3-allyloksykarbonylamino-4-hydroksy-smørsyre-tert-butylester som beskrevet for 40 under anvendelse av 4-klorbenzylalkohol hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff. Anti-diastereomer: HPLC (C18-kolonne) 10,924 min;<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 2,41 (d, J=8,0Hz,
1H) , 3,02 (dd, J=18,l, 7,8Hz, 1H), 4,25 (br, 1H), 4,56 (m, 2H),4,58 (d, J=ll,7Hz, 1H), 4,79 (d, J=ll,7Hz, 1H), 4,99 (br, 1H), 5,22 (dd, J=10,4, 1,1Hz, 1H), 5,28 (dd, J=17,2, 1,3Hz, 1H), 5,44 (s, 1H), 5,86 (m, 1H), 7,25 (d, J=8,4Hz, 2H), 7,32 (d, J=8,4Hz, 2H) ppm; LC-MS (ES+) m/e=326 (M+H); Syn-diastereomer: HPLC (C18-kolonne) 10,780 min;<1>H-NMR (500 MHz, CDCI3) 8 2, 47 (dd, J=17,3, 10,5Hz, 1H) , 2,85 (dd, J=17,3, 8,4Hz, 1H), 4,55 (m, 3H), 4,58 (d, J=ll,7Hz, 1H), 4,84 (d, J=ll,7Hz, 1H), 5,23 (dd, H=10,4, 1,1Hz, 1H), 5,30 (d, J=16,6Hz, 1H) , 5,49 (d, J=5,0Hz, 1H) , 5,89 (ddt, J=17,l, 11,0, 5,4Hz, 1H), 7,23 (d, J=8,3Hz, 2H), 7,31 (d, J=8,3Hz, 2H) ppm; LC-MS (ES+) m/e= 326 (M+H).
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2-karboksylsyre-[ 2-( 4- klor- benzyloksy)- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl]- amid ( 98ba)
Fremstilt fra 97a og syn-[2-(4-klor-benzyloksy)-5-okso-tetrahydro-f uran-3-yl ] -karbaminsyre-allylester ifølge metoden anvendt for 98a hvilket gav 154 mg (65% utbytte) av tittelforbindelsen som som et lyserødt fast stoff. HPLC (C18-kolonne) 10,597 min;<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 1,14
(d, J=6,8Hz, 0,75H), 1,34, (d, J=6,8Hz, 2,25H), 1,6 (br, 0,25H), 1,91 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 2,29 (m, 0,75H), 2,40 (dd, J=17,3, 10,3Hz, 0,75H), 2,51 (m, 0,25H), 2,82 (dd, J=17,3, 8,5Hz, 0,75H), 3,08 (dd, J=17,9, 10,9Hz, 0,25H), 3,58 (m, 1H), 3,72 (dd, J=16,5, 8,7Hz, 0,75H), 4,10 (m, 0,25H), 4,22 (d, J=8,0Hz, 0,25H), 4,39 (d, J=10,8Hz, 0,25H), 4,54 (dd, J=9,l, 2,9Hz, 0,75H), 4,60 (d, J=ll,9Hz, 0,75H), 4,68 (m, 1H), 4,85 (d, J=ll,7Hz, 0,75H), 4,86 (m, 1H), 5,49 (d, J=5,2Hz, 0,75H), 5,81 (d, J=5,2Hz, 0,25H), 6,2 (br, 0,25H), 6,74 (m, 2H), 7,05 (d, J=8,5Hz, 0,5H), 7,17 (d, J=8,4Hz, 0,5H), 7,30 (m, 3,25H), 7,48 (dd, J=8,4, 2,0Hz, 0,75H), 7,56 (d, J=l,9Hz, 0,25H), 7,73 (d, J=l,9Hz, 0,75H), 8,42 (d, J=5,7Hz, 0,25H) ppm; LC-MS (ES+) m/e=563, 565 (M+H).
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-[ 2-( 4- klor- benzyloksy)- 5- okso-tetrahydro- f uran- 3- yl ] - amid ( 98bb)
Fremstilt fra 97b og syn-[2-(4-klor-benzyloksy)-5-okso-tetrahydro-f uran-3-yl]-karbaminsyre-allylester i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 98a hvilket gav 165mg (64% utbytte) av tittelforbindelsen som et lysegult fast stoff. HPLC (C18-kolonne) 10,491 min;<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) 5 1,16 (d, J=6,8Hz, 0,6H), 1,35, (d, J=6,8Hz, 2,4H), 1,94 (m, 1H), 2,04 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,28 (m, 1H), 2,40 (dd, J=17,3, 10,4Hz, 0,8H), 2,53 (m, 0,2H), 2,84 (dd, J=17,3, 8,5Hz, 0,8H), 3,02 (dd, J=17,5, 10,5Hz, 0,2H), 3,58 (m, 1H), 3,72 (ddd, J=17,2, 8,3, 8,3Hz, 0,8H), 4,13 (m, 0,2H), 4,22 (d, J=8,2Hz, 0,2H), 4,40 (d, J=10,9Hz, 0,2H), 4,54 (dd, J=8,l, 3,0Hz, 0,8H), 4,60 (d, J=ll,8Hz, 0,8H), 4,69 (m, 1H), 4,85 (d, J=ll,8Hz, 0,8H), 4,87 (m, 1H), 5,49 (d, J=5,2Hz, 0,8H), 5,80 (d, J=5,2Hz, 0,2H), 6,47 (br, 0,2H), 6,95 (d, J=8,3Hz, 0,8H), 7,05 (d, J=8,3Hz, 0,4H), 7,18 (d, J=8,3Hz, 0,4H), 7,29 (m, 3,2H), 7,49 (dd, J=8,6, 1,9Hz, 0,2H), 7,63 (dd, J=8,6, 1,9Hz, 0,8H), 7,74 (d, J=l,9Hz, 1H), 7,85 (d, J=l,9Hz, 0,8H), 8,25 (d, J=6,4Hz, 0,2H), 8,51 (m, 0,8H) ppm; LC-MS (ES+) m/e=605, 607 (M+H).
2- ( 2- Benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- ylkarbamoyl)-piperidin- l- karboksylsyre- tert butylester ( 100)
Fremstilt fra piperidin-1,2-dikarboksylsyre 1-tert-butylester 99 og 40 ifølge metoden anvendt i fremstillingen av 75 hvilket gav tittelforbindelsen som et gult fast stoff (2,63g, 57% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 1,15-1,79
(m, 15H) , 2,12-2,50 (m, 2H) , 2, 56-2, 83 (m, 1H) , 2,89 (dd, 0,5H), 3,05 (dd, 0,5H), 3,81-4,15 (br s, 1H), 4,36-4,97 (m, 3H), 5,37-5,61 (m, 1H), 6,42-6,89 (br s, 1H), 7,17-7,51 (m, 5H) . LC-MS (ES<+>) m/e=419,4 (MH+) .
{ 2-[ 2- ( 2- Benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- ylkarbamoyl)-piperidin- 1- yl]- l- metyl- 2- okso- etyl}- karbaminsyre- tert-butylester ( 101)
2-(2-Benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-ylkarbamoyl)-piperidin-l-karboksylsyre-tert-butylester (100) ble oppløst i 20% TFA i CH2CI2(25ml) og omrørt ved romstemperatur i 50
min. Løsningsmiddelet ble inndampet, og den gjenværende syre ble destillert azeotropt med CH2CI (4x). Den resulterende olje ble oppløst i CH2C12(20ml) og DMF (5ml), av-kjølt til 0°C og behandlet med DIEA (4,7ml, 27,0mmol), Boc-alanin (970mg, 5,lmmol), HOBT (924mg, 6,8mmol) og EDC (l,31g, 6,8mmol), og løsningen ble omrørt under N2 i 18 timer. Løsningsmiddelet ble konsentrert in vacuo, deretter oppløst i EtOAc og vasket med 0,5N NaHS04(2x), mettet NaHC03(2x) og saltlake. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og inndampet hvilket gav et orange fast stoff som ble oppløst i CH2C12og tilsatt dråpevis til dietyleter hvilket gav en hvit utfelning av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (l,21g, 73% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CDCI3) 6 1,10-1,79 (m, 18H), 1,98-2,19 (m, 0,5H), 2,28-2,88 (m, 3H), 2,89-3,13 (m, 0,5H), 3,78-3,95 (m, 0,5H), 4,21-5,16 (m, 5,5H), 5,38-5,59 (m, 0,3H), 5,66 (d, 0,4H), 5,80 (d, 0,3H), 7,24-7,40 (m, 5H). LC-MS (ES<+>) m/e=490, 3 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- piperidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan-3- yl) amid ( 102a)
Fremstilt fra {2-[2-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-ylkarbamoyl)-piperidin-1-yl]-l-metyl-2-okso-etyl}-karbaminsyre-tert-butylester og 4-acetylamino-3-klorbenzosyre ved hjelp av prosedyren anvendt i fremstillingen av 98a hvilket gav tittelforbindelsen (71mg, 47% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CDCI3) 8 1,10-1,97 (m, 10H), 2,10-2,68 (m, 5H), 2,73-3,24 (m, 2H), 3,62-3,92 (m, 1H), 4,24-5,27 (m, 5H), 5,48-5,59 (m, 0,5H), 5,75-5,85 (m, 0,5H), 6,51-6,61 (d, 1H), 7,05-7,45 (m, 4H), 7,52-8,12 (m, 4H). Analytisk HPLC 8,30 min. LC-MS (ES<+>) m/e=585, 3 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- piperidin- 2-karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl) - amid ( 102b)
Fremstilt som ovenfor for 102a hvilket gav tittelforbindelsen (0,06g, 27% utbytte) som et gult fast stoff.<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 51,2-1,8 (m, 7H) , 2,1-2,6 (m, 2H) , 2,7-3,2 (m, 4H) , 3,6-4,0 (m, 1H) , 4,3-4,9 (m, 7H) , 5,0-5,8 (m, 2H) , 6,5-7,0 (m, 2H), 7,2-7,8 (m, 8H) ppm. Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 14,559 (39,6%), 15,198 (60,4%). LC-MS (ES+): m/e=543 (M+H).
4- Hydroksy- pyrrolidin- l, 2- dikarboksylsyre- 1- benzylester- 2-tert- butylester ( 104)
Forbindelse 104 ble fremstilt i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille forbindelse 95.
En suspensjon av Cbz-Hyp-OH (4,854g, 18mmol) i DMA (135ml), benzyltrietylammoniumklorid (4,105g, 18mmol), K2CO3(64g, 46mmol) og 2-brom-2-metylpropan (99ml, 859mmol) ble omrørt ved 55 C i 18 timer. Blandingen ble fortynnet med isvann og ekstrahert med EtOAc (3x). Den organiske fase ble vasket med vann, 0,5N NaHS04-løsning og saltlake og tørket, og løsningsmiddelet ble fjernet in vacuo hvilket gav tittelforbindelsen som en gul olje (5, 368g, 98% utbytte)."""H-NMR (500MHz, CDCI3) 8 1,33 (s, 5H), 1,47 (s, 4H) , 2,01-2,14 (m, 1H) , 2, 22-2, 38 (m, 1H) , 3, 50-3, 72 (m, 2H) , 4,34-4, 45 (m, 1H) , 4, 45-4, 53 (m, 1H) , 5, 04-5, 20 (m, 2H) , 7,22-7, 42 (m, 5H) . Analytisk HPLC 10,14 min. LC-MS (ES<+>) m/e=322, 2 (MH+) .
4- Fluor- pyrrolidin- l, 2- dikarboksylsyre- 1- benzylester- 2-tert- butylester ( 105)
En løsning av 104 (4,262, 13,96mmol) i CH2C12(lOOml) at -78°C ble behandlet med DAST (l,80ml, 13,6mmol), omrørt i 10 min, deretter oppvarmet til romstemperatur og omrørt i 60h under N2. Blandingen ble helt i iskaldt NaHC03(10% løsning, 350ml) og ekstrahert med CH2C12(2x). Den organiske fase ble vasket med vann, saltlake, tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert hvilket gav en brun olje (4,299g) som ble renset ved hjelp av flash-kolonnekromatografi på silikagel under anvendelse av heksan/EtOAc (90/10 til 80/20%). Tittelforbindelsen ble oppnådd som en gul olje (2,805g, 64% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 8 1,37 (s, 4,5H), 1,45 (s, 4,5H), 2, 20-2, 55 (m, 2H) , 3,61-3,93 (m, 2H), 4,41 (d, 0,5H), 4,49 (d, 0,5H), 5,03-5,21 (m, 3H) , 7,23-7,44 (m, 5H). Analytisk HPLC 12,15 min. LC-MS (ES<+>) m/e=324, 2 (MH+) .
1-( 2- Benzyloksykarbonylamino- propionyl)- 4- fluor- pyrrolidin-1, 2- dikarboksylsyre 1- benzylester 2- tert- butylester ( 106)
En løsning av 105 (2,72g, 8,42mmol) i MeOH (50ml) og 10% Pd/C (l,27g) ble omrørt under H2i 2 timer og deretter filtrert gjennom celitt, og løsningsmiddelet ble inndampet hvilket gav en gul olje (l,526g). Denne olje ble oppløst i CH2C12(30ml) og behandlet med DIEA (l,5ml, 8,6mmol), Cbz-ala-OH (2,34g, 10,5mmol) og EDC (2,32g, 12mmol) ved 0°C. Blandingen ble omrørt i ytterligere 10 min ved 0°C, deretter fikk den anta romstemperatur og ble omrørt i 18 timer. Løsningsmiddelet ble konsentrert in vacuo, og residuet ble oppløst i EtOAc, deretter vasket med 0,5N NaHSO^(2x) , mettet NaHC03(2x) og saltlake. Det organiske lag ble tør-ket over vannfritt Na2S04og inndampet hvilket gav et hvitt fast stoff som ble renset ved hjelp av flash-kolonnekromatografi, under eluering med heksan/EtOAc (80/20 til 60/40%). Tittelforbindelsen ble isolert som et hvitt fast stoff (286g, 86% fra 4-fluor-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-l-benzylester-2-tert-butylester).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1, 26-1, 59 (m, 12H) , 2, 20-2, 67 (m, 2H) , 3,45-4,13 (m, 2H), 4,25-4,47 (m, 1H), 4,58-4,71 (m, 1H), 4,96-5,17 (m, 2H), 5,19-5,45 (m, 1H), 7,23-7,48 (m, 5H). Analytisk HPLC 16,36 min. LC-MS (ES<+>) m/e=395, 3 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4- fluor-pyrrolidin- 2- karboksylsyre- tert- butylester ( 107)
En suspensjon av 106 (2,65g, 6,72mmol) i MeOH (40ml) og 10% Pd/C (l,32g) ble omrørt under en atmosfære av H2i l,5timer, filtrert gjennom celitt og konsentrert hvilket gav et voksaktig fast stoff (l,694g). Det faste stoff ble oppløst i CH2C12(25ml) og behandlet med DIEA (3,4ml, 19,5mmol), 4-amino-3-klorbenzosyre (l,362g, 7,9mmol), HOBT (l,164g, 8,62mmol) og EDC (l,645g, 8,57mmol) ved 0°C under N2. Blandingen ble fikk anta romstemperatur og ble omrørt i 18 timer. Løsningsmiddelet ble konsentrert in vacuo. Residuet ble oppløst i EtOAc, vasket med vann (4x), 0,5N NaHSCM(2x) , mettet NaHC03(2x) og saltlake. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og inndampet hvilket gav et hvitt fast stoff som ble renset ved hjelp av flash-kolonnekromatografi under anvendelse av CH2Cl2/MeOH (99/1 til 98/2%). Produktet ble oppnådd som et hvitt fast stoff (2, 705g, 97%).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8l,33(s, 9H) , 1,48 (d, 3H), 2,31-2,55 (m, 2H), 3,93 (d,d, 1H), 4,02-4,21 (m, 1H) , 4, 59-4,76 (m, 1H), 5,31 (br s, 0,5H), 5,41 (br s,
0,5H), 6,78 (d, 1H) , 7,57 (d,d, 1H), 7,78 (s, 1H) , 8,31 (d, 1H) . Analytisk HPLC 14,14 min. LC-MS (ES<+>) m/e=414,2 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4- fluor- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 108a)
Fremstilt fra syn-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester og 107a ifølge metoden anvendt for syntesen av 98a. Tittelforbindelsen ble isolert som et hvitt fast stoff (41mg, 15% utbytte).<X>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 0, 94 (d, 0,3H), 1,07 (d, 1H) , 1,40 (m, 1,7H), 2,21-2,65 (m, 2,2H), 2,70-2,85 (m, 1,4H), 2,96-3,08 (m, 1,4H), 2,96-3,08 (dd, 0,4H), 3,57-4,24 (m,3H), 4,41-4,93 (m, 4H) , 5,14-5,45 (m, 1H) , 5, 60-5, 67 (m, 0,6H), 5,77 (d, 0,4H), 6,77 (dd, 1H), 7,15-7,41 (m, 5H), 7,51-7,62 (m, 1H), 7,77 (dd, 1H). Analytisk HPLC 12,83 min. LC-MS (ES<+>) m/e= 547, 1 (MH<+>) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4- fluor-pyrroiidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 108b)
Fremstilt fra (2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester 107a ifølge metoden anvendt for syntesen av 98a. Tittelforbindelsen ble isolert som et hvitt fast stoff (654mg, 54% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,07 (d, 0,5H), 1,25-1,56 (m, 2,5H), 2,21-2,65 (m, 2,3H), 2,68-2,89 (m, 1H), 2,91-3,10 (m, 0,7H), 3,57-4,23 (m, 2H), 4,32-4,95 (m, 5H), 5,16-5,52 (m, 1H), 5,45-5,50 (m, 0,3H), 5,54-5,58 (m, 0,2H), 5,61-5,67 (m, 0,3H), 5,77 (d, 0,2H), 6,72-6,84 (m, 1H), 7,16-7,41 (m, 5H), 7,50-7,65 (m, 1H), 7,71-7,87 (m, 1H). Analytisk HPLC 12,83 min. LC-MS (ES<+>) m/e=547, 1 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4- fluor-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 108c)
Fremstilt fra syn-(2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester og 107a ifølge metoden anvendt for syntesen av 98a hvilket gav tittelforbindelsen (100,3mg, 38% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD30D) 8 1,09 (t, 1,2H), 1,25 (t, 1,8H), 1,40 (d, 1H), 1,49 (d, 2H), 2,33-2,61 (m, 2H), 2,65-2,95 (m, 2H), 3,44-4,30 (m, 4H), 4,47-4,79 (m, 3H), 5,18-5,25 (m, 0,2H), 5,27-5,36 (m, 0,5H), 5,39-5,46 (m, 0,3H), 5,56 (m, 1H), 6,72-6,94 (m, 0,8H), 7,54-7,69 (m, 0,8H), 7,79 (d, 0,55H), 8,06 (d, 0,55H), 9,00 (d, 0,3H). Analytisk HPLC 8,46 min. LC-MS (ES+) m/e= 485,2 (MH+).
1- [ 2- ( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4- fluor-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-[ 2-( 2- isopropyl- 5- metyl-cykloheksyl)- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl]- amid ( 108d)
Fremstilt fra {2-[IR-(2S-isopropyl-5R-metyl-cykloheksyloksy)]-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl}-karbaminsyre-allylester og 107a ifølge metoden anvendt for syntesen av 98a hvilket gav tittelforbindelsen (95mg, 31% utbytte). 1H-NMR (500MHz, CD30D) 5 0, 42 (d, 2H) , 0,57 (d, 2H) , 0,60-1,10 (m, 10H), 1,22-1,76 (m, 6H), 1,96-2,17 (m, 1H), 2,29-2,60 (m, 2H), 2,61-2,88 (m, 1,5H), 3,02-3,23 (dd, 0,5H), 3,37-3,47 (m, 0,5H), 3,50-3,61 (m, 0,5H), 3,63-4,24 (m, 2H), 4,48-4,62 (m, 3H), 5,18-5,48 (m, 1H), 5,72 (d, 0,4H), 5,82 (d, 0,6H), 6,77-6,84 (m, 1H), 7,53-7,67 (m, 1H), 7,78 (d, 0,4H), 7,84 (d, 1H) Analytisk HPLC 8,34 min. LC-MS (ES+) m/e= 595 (MH+).
{ 2-[ 2-( 2- Etoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- ylkarbamoyl)- pyrrolidin- l- yl] - l- metyl- 2- okso- etyl} karbaminsyre- tert- butylester ( 109)
Fremstilt fra (2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester 74 ifølge metoden anvendt i syntesen av 75 hvilket gav tittelforbindelsen som et lysegult fast stoff (660mg, 73% utbytte). 1H-NMR (500MHz, CD30D) 8 1,14-1,36 (m, 6H), 1,42 (s, 9H), 1,75-2,29 (m, 4H), 2,48 (dd, 0,5H), 2,58 (dd, 0,5H), 2,72-2,85 (m, 0,5H), 2,99 (dd, 0,5H), 3,43-3,91 (m, 4H), 4,07-4,52 (m, 2,5H), 4,53-4,72 (m, 0,5H), 5,37 (s, 0,5H), 5,57 (d, 0,5H). Analytisk HPLC (blanding av 2 diastereomerer) 7,92, 8,14 min. LC-MS (ES+) m/e=414,3 (MH+) .
1-[ 2-( 4- Allyloksy- 3, 5- diklor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso- tetrahydro- furan-3- yl)- amid ( 110)
Fremstilt fra 109 og 4-allyloksy-3,5-diklor-benzosyre ifølge metoden anvendt i syntesen av 82 hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (228mg, 65%). 1H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1. 10-1,30 (m, 4H) , 1,32-1,52 (m, 3H), 1,63-2,31 (m, 4H) , 2,41-2,50 (d, 0,5H), 2,52-2,61 (dd, 0,5H), 2,67-2,81 (m, 0,5H), 2,94-3,05 (dd, 0,5H), 3,47-3,96 (m, 4H) , 4,21-4,81 (m, 5H) , 5, 22-5, 32 (m, 1H), 5,35-5,49 (m, 1,5H), 5,55-5,63 (m, 0,5H), 6,06-6,21 (m, 1H), 7,90 (s, 2H). Analytisk HPLC (blanding av 2 diastereomerer) 12,56 min. LC-MS (ES+) m/e=542,3(MH+).
1-[ 2-( 3, 5- Diklor- 4- hydroksy- benzoylamino)- propionyl]- pyrro-1idin- 2- karboksylsyre-( 2- etoksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3-yl)- amid ( 111)
Til en løsning av 110 (194mg, 0,36mmol) i CH2C12 (5ml) ble tilsatt DMBA (70,7mg, 0,45mmol) og Pd(PPh3)4 (50,3mg, 0,044mmol) ved 0°C. Løsningen ble oppvarmet til romstemperatur etter 15 minutter, omrørt i 2 timer, fortynnet med CH2C12, deretter vasket med vann (2x) og saltlake. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og inndampet hvilket gav råproduktet. Flash-kromatografi under anvendelse av CH2Cl2/MeOH (99/1 til 95/5%) gav tittelforbindelsen (138,6mg, 77% utbytte).<1>H-NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,13-1,31 (m, 3H) , 1, 35-1,49 (m, 3H) , 1,84-2, 35 (m, 4H) , 2,43-3,05 (m, 2H), 3,48-3,93 (m, 4H), 4,22-4,80 (m, 3H), 5,38 (d, 0,4H), 5,46 (s, 0,1H), 5,55-5,61 (m, 0,5H), 7,76-7,94 (m, 2H). Analytisk HPLC 8,70 min. LC-MS (ES<+>) m/e=502,2
(MH<+>) .
Forbindelsene 116a- 116h ble fremstilt som beskrevet ovenfor for forbindelsene 98 unntatt at det ble anvendt l-(2-benzyloksykarbonylamino-propionyl)-4,4-difluor-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester (114) istedenfor l-(2-benzyloksykarbonylamino-propionyl)-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester (95) .
Fremstilling av 1-( 2- benzyloksykarbonylamino- propionyl)-4, 4- difluor- pyrrolidin- 2- karboksylsyre- tert- butylester
( 114)
En løsning av 4 , 4-difluor-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-l-benzylester-2-tert-butylester (113) (Karanewsky, et.al., J_;_
Med. Chem. 33, s. 1459-1469 (1990)) (0,42 g, 1,23 mmol) og 10% palladium på karbon (0,22g) i metanol (6 ml) ble omrørt ved 1 atm hydrogentrykk i 3h. Blandingen ble filtrert gjennom Celitt og inndampet. Residuet ble oppløst i CH2CI2(4 ml) og DMF (2 ml) og avkjølt til 0°C. 2-Benzyloksykarbonylamino-propionsyre (0,30 g, 1,35 mmol), EDC (0,30, 1,54 mmol), DIEA (0,65 ml) og HOBt (0,17 g, 1,23 mmol) ble tilsatt, og reaksjonsblandingen ble omrørt 0,5h ved 0 C, deretter 16h ved romstemperatur under nitrogen. Løsningsmidde-let ble fjernet in vacuo, og residuet ble oppløst i etylacetat, deretter ble vasket med 10% natriumbisulfat, mettet natriumbikarbonat, vann og saltlake, ble tørket over natriumsulfat og ble inndampet. Rensing ved hjelp av flash-kromatografi på silika, eluering med 25:75 etylacetat: heksan gav 1-(2-benzyloksykarbonylamino-propionyl)-4,4-difluor-pyrrolidin-2-karboksylsyre-tert-butylester (0,39 g, 77% utbytte) som en farveløs olje.
<X>H-NMR (500 MHz, CDCI3) 8 1,3-1,6 (m, 12H) , 2,5 (m, 0,8H), 2,7 (m, 1,2H), 3,9 (m, 1H), 4,1 (m, 1H), 4,4 (m, 1H), 4,7 (m, 1H), 5,1 (m, 2H), 5,59 (br d, J=7,7Hz, 0,8H), 5,7 (br d, J=7,7Hz, 0,2H), 7,35 (m, 5H) ppm. Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 17,069 min. LC-MS (ES+): m/e=413 (M+H), 357 (M+H-tert-butyl), 313 [M+H-(C02tert-butyl) ] .
1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4, 4- difluor-pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso- tetrahydrofuran- 3- yl)- amid ( 116a)
Fremstilt fra 115a og syn-40 hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitaktig fast stoff (0,14g, 73% utbytte).<X>H-NMR (500 MHz, CD3OD) 8 1,0-1,5 (m, 3H) , 2,0-3,5 (m, 4H+CH3OH) , 3,5-5,5(M, 6H+H20) , 5,6-5,8 (m, 1H), 6,7-6,8 (m, 1H), 7,1-7,8 (m, 8H), 8,2-8,6 (m, 1H) ppm. Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 13,744 min. LC-MS (ES+): m/e=565 (M+H).
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4, 4-difluor- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5- okso-tetrahydro- f uran- 3- yl ) - amid ( 116b)
Fremstilt fra 115b og syn-40 hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitaktig fast stoff (0,08 g, 38% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) 5 1,03 (d, J=6,9Hz, 0,4H), 1,30 (d, J=6,9Hz, 0,6H), 2,25 (d, J=2,9Hz, 3H), 2,4-3,2 (m, 4H) , 3,6-4,4 (m, 4H), 4,6-4,9 (m 3H), 5,52 (d, J=5,2Hz, 0,6H), 5,78 (d, J=5,2Hz, 0,4H), 6,6 (br s, 1H), 6,9-7,9 (m, 8H), 8,39 (d, J=8,l Hz, 0,4H), 8,44 (d, J= 8,3Hz, 0,6H), 8,74 (d, J=6,8Hz, 1H) ppm. Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 11,830 min. LC-MS (ES+): m/e= 607 (M+H).
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 5- klor- 2- metoksy- benzoylamino)- propion-yl] - 4, 4- difluor- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- benzyloksy- 5-okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 116c)
Fremstilt fra 115c og syn-40 hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitaktig stoff (0,07g, 29% utbytte).<X>H-NMR (500 MHz, CDCI3) 5 0, 99 (d, J=6,9Hz, 1,35H), 1,32 (d, J=6,9Hz, 1,65H), 2,25 (s, 1,5H), 2,26 (s, 1,5H), 2,3-3,2 (m, 4H) , 3,95 (s, 0,55H), 3,98 (s, 0,45H), 3,7-4,1 (m, 2,5H), 4,2-4,5 (m, 1,5H), 4,6-4,9 (m, 3H), 5,52 (d, J=5,3Hz, 0,55H), 5,80 (d, J=5,3Hz, 0,45H), 7,0-7,4 (m, 4H) , 7,7-7,9 (m, 2H), 8,0-8,4 (m, 2H), 8,49 (d, J=6,5Hz, 1H) , 8,93 (d, J=6,7Hz, 1H) ppm. Analytisk HPLC (cyano-kolonne) 12,959 min. LC-MS (ES+): m/e=637 (M+H).
1-[2-(4-Acetylamino-3-klor-benzoylamino)-propionyl]-4,4-difluor-pyrrolidin-2-karboksylsyre-(2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-amid (116d).Fremstilt fra 115b og syn-(2-etoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester hvilket gav tittelforbindelsen som en 92:8-blanding av epimerer. Hvitaktig fast stoff (0,27g, 66% utbytte). 'H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 1,0-1,5 (m, 6H) , 2,25 (s, 1,8H), 2,26 (s, 1,2H), 2,3-3,1 (m, 4H), 3,3-4,3 (m, 4H), 4,5-4,9 (m, 3H), 5,45 (d, J=5,3Hz, 0,75H), 5,59 (d, J=5,2Hz, 0,25H), 6,7-7,1 (m, 2H), 7,62 (dd, J=8,7, 2,0Hz, 1H), 7,76 (m, 1H), 7,85 (d, J=2,0Hz, 1H), 8,48 (m, 1H) ppm. Analytisk HPLC (C18-kolonne) 13,300(91,8%), 14,046 (8,2%) min. LC-MS (ES+): m/e 545 (M+H).
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4, 4-difluor- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- cykloheksyloksy- 5-okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 116e)
Fremstilt fra 115b og syn-(2-cykloheksyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester hvilket gav tittelforbindelsen som en 93:7-blanding av epimerer.<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 1,0-2,0 (m, 13H), 2,25 (s, 2H) , 2,26 (s, 1H), 2,40 (dd, J=17,3, 10,1Hz, 1H), 2,84 (dd, J=17,3, 8,5Hz, 1H) , 2,5-3,0 (m, 2H), 3,5-4,3 (m. 3,5H), 4,5-4,9 (m. 2,5H), 5,59 (d, J=5,3Hz, 0,75H), 5,76 (d, J=5,2Hz, 0,25 H), 6,74 (br d, J= 5,7Hz, 0,25H), 6,93 (br d, J=7,lHz, 1H), 7,06 (br d, J=7,8Hz, 0,75H), 7,62 (dd, J=8,6, 2,0Hz, 1H), 7,78 (m, 1H), 7,85 (d, J=2,0Hz, 1H), 8,35 (br d, J=6,6Hz, 0,25H), 8,50 (br d, J=8,2Hz, 0,75H) ppm. Analytisk HPLC (C18-kolonne) 17,112 (93%), 17,433 (7%) min. LC-MS (ES+): m/e=599 (M+H).
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4, 4-difluor- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-[ 2-( indanol- 2- yl) oksy- 5-okso- tetrahydro- furan- 3- yl]- amid ( 116f)
Fremstilt fra 115b og [2-(indanol-2-yl]oksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester hvilket gav tittelforbindelsen som en 62:38-blanding av epimerer. Hvitaktig fast stoff (0,34g, 71% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) 5 1,09 (d, J=6,9Hz, 0,6H), 1,21 (d, J=6,9Hz, 0,9H), 1,33 (d, J=6,9Hz, 0,9H), 1,42 (d, J=6,9Hz, 0,6H), 2,28 (s, 2H), 2,29 (s, 1H), 2,40 (dd, J=17,4, 10,3Hz, 1H), 2,4-3,3 (m, 7H) , 3,6-4,2 (m, 2H) , 4,5-4,8 (m, 4H), 5,66 (m, 0,6H), 5,84 (d, J=4,3Hz, 0,2H), 6,22 (m, 0,2H), 6,7-7,0 (m, 2H), 7,2-7,3 (m, 4H) , 7,5-7,7 (m, 1H) , 7,8-8,0 (m, 2H), 8,52 (m, 0,6H), 8,62 (br d, J=6,5Hz, 0,4H) ppm. Analytisk HPLC (C18-kolonne) 16,556 (62,0%), 16,824 (38,0%) min. LC-MS (ES+): m/e=633 (M+H).
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4, 4-difluor- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- cyklopentylmetoksy- 5-okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 116g)
Fremstilt fra 115b og syn-(2-cyklopentylmetoksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitaktig fast stoff (0,20g, 44% utbytte).<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) 8 1,0-1,8 (m, 11H), 1,9-3.0 (m, 5H), 2,26 (s, 3H), 3,29 (m, 0,25H), 3,47 (m, 0,75H), 3,58 (m, 0,25H), 3,74 (m, 0,75H), 3,8 (m, 0,75H), 4.1 (m, 0,25H), 4,25 (m, 1H), 4,4-4,8 (m, 3H), 5,44 (d, J=5,2Hz, 0,75H), 5,62 (d, J=5,2Hz, 0,25H), 6,7 (br, 0,25H), 6,91 (d, J=7,lHz, 1H), 7,1 (m, 0,75H), 7,59 (d, J=8,5Hz, 0,25H), 7,63 (dd, J=8,5, 2,5Hz, 0,75H), 7,75 (m, 1H), 7,86 (d, J=l,8Hz, 1H), 8,33 (br d, J=6,5Hz, 0,25H), 8,49 (br d, J=8,4Hz, 0,75H) ppm. Analytisk HPLC (Cl8-kolonne) 17,705 min. LC-MS (ES+): m/e=599 (M+H).
1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4, 4-difluor- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2- fenyletoksy- 5- okso-tetrahydro- f uran- 3- yl)- amid ( 116h)
Ble fremstilt fra 115b og syn-(5-okso-2-fenetyloksy-tetrahydro-furan-3-yl)-karbaminsyre-allylester hvilket gav tittelforbindelsen som et hvitaktig fast stoff (0,15g, 24% ut bytte).<1>H-NMR (500MHz, CDC13) 5 1,29 (d, J=6,9Hz, 0,75H), 1,40 (d, J=6,9Hz, 2,25H), 2,25 (s, 2,25H), 2,26 (s, 0,75H), 2,3-3,0 (m, 6H) , 3,7-4,8 (m, 7H), 5,38 (d, J=5,3Hz, 0,75H), 5,67 (d, J=5,lHz, 0,25H), 6,65 (m, 1H), 6,90 (d, J=7,0Hz, 0,75H), 7,06 (d, J=7,6Hz, 0,25H), 7,1-7,3 (m, 5H), 7,57 (d, J=8,6Hz, 0,25H), 7,63 (d, J=8,6Hz, 0,75H), 7,75 (m, 1H), 7,86 (d, J=l,8Hz, 1H), 8,35 (d, J=6,2 Hz, 0,25H), 8,49 (d, J=8,3Hz, 0,75H) ppm. Analytisk HPLC (C18-kolonne) 17,265 min. LC-MS (ES+): m/e=621 (M+H).
2-( 2- Benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- ylkarbamoyl)-pyrroiidin- 1- karboksylsyre- tert- butylester ( 118)
Fremstilt fra 40 (1,16 g, 4,0 mmol) og Boc-Pro-OH i henhold til prosedyren anvendt for å fremstille 100 (Skjema XVIII) hvilket gav 1,53 g (94% utbytte) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 8 1,61 (br, 9H) , 1,88 (br, 2H), 2, 00-2, 50 (m, 3H) , 2,80-3,10 (m, H), 3,20-3,60 (m, 2H), 4,05-4,45 (m, 1,5H), 4,58-4,80 (m, 1,5H), 4,83-4,98 (m, H), 5,43-5,53 (m, H), 7,26-7,45 (m, 5H), 7,60-7,80 (d, H); Analytisk HPLC: 11,32 min; LC-MS: m/e = 405 (M+H+) .
2- Fenylaminopropionsyre ( 119)
En blanding av alanin (356 mg, 4,0 mmol), jodbenzen (816 mg, 4,0 mmol), trans-diklorbis(tri-O-tolylfosfin)-palladium (II) {Pd[P(o-Tol) 3] 2C12} (160 mg, 0,2 mmol), kobber(I)jodid (40 mg, 0,2 mmol), K2C03(552 mg, 4,0 mmol), benzyltrietylammoniumklorid (160 mg, 0,8 mmol), trietylamin (1,6 ml) og vann (0,8 ml) i DMF (8 ml) ble omrørt under nitrogenatmo-sfære ved 100°C i 20 timer. Blandingen ble avkjølt til romstemperatur, fortynnet med etylacetat (50 ml) og vann (50 ml), surgjort med 6N HC1 til pH-verdien = 2 til 3. Det vandige lag ble ekstrahert med etylacetat (50 ml x 4). De kombinerte organiske lag ble vasket med vann, saltlake, tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet in vacuo hvilket gav en rød olje. Flash-kromatografi under anvendelse av heksan/etylacetat/eddiksyre (95/5/0,5 til 80/20/0,5) gav 300 mg (45% utbytte) av tittelforbindelsen som et rosa fast stoff.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13/CD30D =0,5 ml/3 dråper): 8 1,45 (d, 3H) , 4,02-4,15 (m, H), 6,57-6,70 (m, 3H), 7,11-7,25 (m, 2H); Analytisk HPLC: 6,10 min. LC-MS: m/e = 166 (M+H+) .
1-( 2- Fenylamino- propionyl)- pyrrolidin- 2- karboksylsyre-( 2-benzyloksy- 5- okso- tetrahydro- furan- 3- yl)- amid ( 120a og 120b)
En løsning av 118 (405 mg, 1,0 mmol) ble behandlet med TFA (2 ml) i CH2C12(2 ml) i en time. Reaksjonsløsningen ble inndampet in vacuo og detillert azeotropt med CH2C12fire ganger hvilket gav pyrrolidin-2-karboksylsyre-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-amid som et lysegult fast stoff.<X>H-NMR (500 MHz, CDC13) : 8 1,87-2,15 (m, 4H), 2,30-2,70 (m, 2H), 2,80-3,08 (m, H), 3,45 (br, 2H), 4,35- 4,98 (m, 3H), 5,30-5,56 (m, H), 7,10-7,60 (m, 5H); Analytisk HPLC: 7, 78 / 8, 20 min.; LC-MS: m/e = 305 (M+H+) .
2-Fenylaminopropionsyre (119) (300 mg, 1,8 mmol) i CH2CI2(10 ml) ble behandlet med HOBT (270 mg, 2,0 mmol) og EDC (2,1 g, 11 mmol) ved 0°C i 10 min. Diisopropyletylamin (2 ml) ble tilsatt, etterfulgt av en løsning av pyrrolidin-2-karboksylsyre-(2-benzyloksy-5-okso-tetrahydro-furan-3-yl)-amid i CH2CI2(10 ml). Blandingen ble omrørt ved romstemperatur i 4 timer, fortynnet med CH2CI2(40 ml) , vasket med vann, deretter saltlake. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04, filtrert og inndampet in vacuo hvilket gav et lysegult fast stoff. Flash-kromatografi under anvendelse av CH2CI2/metanol (99/1 til 98/2) gav 151 mg (33% utbytte) av anti-diastereomeren av tittelforbindelsen (120a) og 129 mg (29% utbytte) av syn-diastereomeren (120b) som et hvitt fast stoff.<1>H-NMR (500 MHz, CDC13) for anti-diastereomeren: 5 1,37-1,41 (m, 3H) , 1, 50-2,45 (m, 4H) , 2,60-2,70 (m, 0,3H), 2,89-2,94 (m, 0,7H), 3,40-3,80 (m, 2H) , 4,10-4,50 (m, 3H) , 4, 50-4, 90 (m, 3H), 5,26 (s, 0,3H), 5,38 (s, 0,7H), 6,45-6,60 (m, 2,3H), 6,65-6,80 (m, H), 7,10-7,20 (m, 2,5H), 7,25-7,50 (m, 4,5H), 7,53-7,70 (m, 0,7H), 7,82 (d, H). For syn-diastereomeren: 5 0,86-0,89 (m, H), 1, 20-1, 40 (m, 4H) , 1, 80-2, 45 (m, 4H) , 2, 80-2, 86 (m, H) , 3, 58-3,65 (m, 2H) , 4, 20-4, 40 (m, H) , 4, 50-4, 75 (m, 2H) , 4,90 (d, H), 5,52 (d, H), 6,45-6,70 (m, 3H), 6,75-6,85 (m, H) , 7,10-7,20 (m, 2,3H), 7,30-7, 50 (m, 5,7H); Analytisk HPLC: 10,55 min for anti-diastereomeren og 10,62 min for syn-diastereomeren; LC/MS: m/e = 452 (M+H<+>) for begge diastereomerer.
4- Okso- 3-{ [ 1- ( 2- fenylamino- propionyl)- pyrrolidin- 2-karbonyl]- amino}- smørsyre ( 121)
Fremstilt fra 120 (151 mg, 0,33 mmol) under anvendelse av hydrolysemetode A hvilket gav 101 mg (83% utbytte) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.<1>H-NMR (500 MHz, CDCI3/CD3OD = 1/1): 5 1, 20-1, 65 (m, 2H), 1, 65-2, 35 (m, 3H) , 2,40-3,00 (m, H), 3,20-3,80 (m, 2H), 3,90-4,90 (m, 7H) , 7,25-7,80 (m, 5H); Analytisk HPLC: 6,38 min.; LC-MS: m/e = 362 (M+H+) .
Generelle prosedyrer for fremstilling av forbindelser med utførelsesform C Formel I ( Skjemaene XXIII- XXV)
Hydrolysemetode A:
En 0,005-50 mmol prøve av alkylhemiacetalet ble oppløst i 2,5 N HC1/ CH3CN (10/ 1) og omrørt ved romstemperatur inntil reaksjonen var fullstendig. Det resulterende vandige lag ble vasket med dietyleter (2 x 20 ml) og lyofilisert hvilket gav produktet.
Hydrolysemetode B:
En 0,005-50 mmol prøve av alkylhemiacetal ble tatt opp i ublandet maursyre og omrørt over natten ved romstemperatur. Blandingen ble triturert med en 3:l-blanding av heksan/- dietyleter hvilket gav en utfelning. Løsningsmiddelet ble dekantert, og felningen ble vasket med dietyleter hvilket gav produktet.
Hydrolysemetode C:
En 0,005-50 mmol prøve av alkylhemiacetalet ble oppløst i CH3OH og 20% Pd(0H)2/C og omrørt under H2inntil reaksjonen var fullstendig. Den resulterende suspensjon ble filtrert, og løsningen ble konsentrert in vacuo, deretter triturert med en 3:l-blanding av heksan/dietyleter hvilket gav en utfelning. Løsningsmiddelet ble dekantert, og felningen ble vasket med dietyleter hvilket gav produktet.
Hydrolysemetode D:
En 0,005-50 mmol prøve av alkylhemiacetalet i CH3CN/ vann (1/ 2) ble rystet med surt resin (Dowex 50w x 2, H+<->type) inntil reaksjonen var fullstendig. Løsningen ble filtrert, og resinet ble vasket med CH3CN/vann (1/4). Det resulterende vannlag ble vasket med dietyleter, konsentrert til et mindre volum in vacuo, deretter lyofilisert hvilket gav produktet.
4- Okso- 3-[( l-{ 2-[ 9- okso- 9ff- fluoren- 4- karbonyl)- amino]-propionyl}- pyrroiidin- 2- karbonyl)- amino]- smørsyre ( 122a)
En 109,Omg (0,19mmol) prøve av 91 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 88mg (96% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 7,15 min. LC-MS (ES<+>) m/e=492,2
(M+H).
3-({ 1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrroii-din- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122b)
En 51,Omg (0,096mmol) prøve av 76 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 43,Omg (100% utbytte) av tittelforbindelsen:<X>H-NMR (500 MHz, CD3OD/D20: 0,5 ml/10 dråper) : 6 1,37-1,52 (m, 3H), 1,80-2,20 (m, 3H), 2,20-2,37 (m, H), 2,49-2,60 (m, H), 2,60-2,75 (m, H), 3,70-3,80 (m, H), 3,80-3, 95 (m, H), 4, 20-4,35 (m, H), 4,40-4, 50 (m, H) , 4,50-4,70 (m, H), 4,70-4,85 (m, H), 6,85-6,87 (d, H), 7,58-7,60 (m, H), 7,77 (s, H); retensjonstid på analytisk HPLC: 6,54 min; LC-MS: m/z = 439 (M+H+) .
3-({ l-[ 2-( 3, 5- Diklor- 4- metoksy- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122c)
En 51,Omg (0,088mmol) prøve av 92 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 24,Omg (56% utbytte) av tit telforbindelsen: Analytisk HPLC 6,41 min. LC-MS (ES<+>) m/e=488, 3 (M+H) .
3 - ({ 1-[ 2-( 4- Metoksy- 3, 5- dimetyl- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122d) En 55,Omg (0,102mmol) prøve av 77 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 44,Omg (96% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC (C18) 8,70 min,<X>H-NMR (CDC13, 500Mhz): 8 1,23-1,70 (m, 3H), 1,80-2,70 (m, 10H), 2,70-3,15 (m, 2H), 3,58-4,20 (m, 5H), 4,32-5,50 (m, 3H), 5, 60-6,00 (m, H) , 6, 80-7,90 (m, 4H) ; LC-MS (ES<+>) m/e=448,2 (M+H).
4- Okso- 3-[ ( 1- { 2-[ pyridin- 2- karbonyl)- amino]- propionyl}- pyrrolidin- 2- karbonyl)- amino]- smørsyre ( 122e)
En 55,Omg (0,114mmol) prøve av 88 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 30,Omg (67% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 4,60 min. LC-MS (ES<+>) m/e=391,3 (M+H).
3-({ 1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122 f)
En 52mg (0,091mmol) prøve av 78 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 40mg (91% utbytte) av tittelforbindelsen:<1>E NMR (500MHz, CD3OD) 8 1,08-1,61 (m, 3H) , 1,77-2,41 (m, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,41-2,77 (m, 2H) , 3,43-3,63 (m, 0,3H), 3,65-3,76 (m, 1H), 3,81-3,94 (m, 1H), 4,18-4,34 (m, 1H), 4, 42-4, 64 (m, 1,7H), 4,77 (q, 1H) , 7,79 (dd, 1H); Analytisk HPLC 4,97 min. LC-MS (ES<+>) m/e=481,3 (M+H).
3-({ 1-[ 2-( 4- Amino- 3, 5- diklor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122g)
En 44,3mg (0,079mmol) prøve av 89 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 30mg (81% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 5,40 min. LC-MS (ES<+>) m/e=473,2 (M+H).
3-({ 1-[ 2-( 3- Isopropoksy- benzoylamino)- propionyl]- pyrroii-din- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122h)
En 52, Omg (0, 097mmol) prøve av 79 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 30,Omg (69% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 8,92 min. LC-MS (ES<+>) m/e=448,3 (M+H).
3- ( { 1-[ 2- ( 3- Benzyloksy- 4- metoksy- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122i)
En 50,8mg (0,082mmol) prøve av 81 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 22,4mg (52% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 6,72 min. LC-MS (ES<+>) m/e=526,3 (M+H).
4- Okso- 3-[ ( 1-{ 2-[ ( kinoksalin- 2- karbonyl)- amino]- propionyl}-pyrrolidin- 2- karbonyl)- amino]- smørsyre ( 122j )
En 38,Omg (0,072mmol) prøve av 80 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 32,Omg (100% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 5,95 min. LC-MS (ES<+>) m/e=442,3 (M+H).
3-({ l-[ 2-( 3, 5- Diklor- 4- hydroksy- benzoylamino)- propionyl]-pyrroiidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122k)
En 35mg (0,060mmol) prøve av 83 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 29,4mg (75% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 7,91 min.<1>H-NMR (500 MHz, CD3OD) 5 1,47 (m, 3H). 1,8-2,3 (m, 4H), 2,49 (m, 1H), 2,61 (m, 1H) , 3,5 (br m, 0,2H), 3,69 (br m, 0,9H), 3,84 (br m, 0,9H), 4,27 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 4,73 (m, 1H), 7,83 (m, 2H) ppm, LC-MS (ES<+>) m/e=474,l (M+H).
3-({ 1-[ 2-( 4- Amino- 3- trifluormetyl- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 1221) En lOmg (0,021mmol) prøve av 98w ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 7,9mg (94% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 6,64 min. LC-MS (ES<+>) m/e=473,3 (M+H).
3- ({ 1- [ 2- ( 3- Klor- 4- dimetyIamino- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122m)
En 10, Omg (0,021mmol) prøve av 98x ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 7,Omg (84% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 5,15 min. LC-MS (ES<+>) m/e=467,3 (M+H).
3- ({ 1- [ 2- ( 4- Dimetylamino- 3, 5- difluor- benzoylamino)-propionyl]- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre
( 122n)
En 20,Omg (0,043mmol) prøve av 98y ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 16,8mg (100% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 5,86 min. LC-MS (ES<+>) m/e=469,3 (M+H).
3 - ( { 1- [ 2 - ( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122o)
En 20,Omg (0,046mmol) prøve av 98m ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 16,7mg (100% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 8,47 min. LC-MS (ES<+>) m/e=439,2 (M+H).
3- ({ 1-[ 2- ( 4- Amino- 2, 3, 5, 6- tetrafluor- benzoylamino)- propio-nyl] - pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122p)
En 20,Omg (0,042mmol) prøve av 98z ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 15,3mg (91% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 7,90 min. LC-MS (ES<+>) m/e=477,2 (M+H).
4- Okso- 3-[( 1-{ 2-[( kinolin- 6- karbonyl)- amino]- propionyl}-pyrrolidin- 2- karbonyl)- amino]- smørsyre ( 122q)
En 44mg (0,080mmol) prøve av 93 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 41mg (100% utbytte) av tittelforbindelsen:<1>H NMR (500MHz, CD3OD) 5 1,24-1,69 (m, 3H), 1,75-2, 37 (m, 4H), 2, 39-2, 87 (m, 2H), 3, 46-4, 04 (m, 2H) , 4,11-4,77 (m, 3H), 8,19 (dd, 1H), 8,33 (d, 1H), 8,56-8,58 (m, 1H), 8,85 (s, 1H), 9,27-9,39 (m, 2H); Analytisk HPLC 4,91 min. LC-MS (ES<+>) m/e=441,2 (M+H).
3-({ 1-[ 2-( 4- Acetylamino- 5- klor- 2- metoksy- benzoylamino)-propionyl]- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre
( 122r)
En 44,5mg (0,074mmol) prøve av 87 ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 34,5mg (91% utbytte) av tit telforbindelsen: Analytisk HPLC 6,88min. LC-MS (ES<+>) m/e=511,2 (M+H).
3 - [ ( l-{ 2-[ 3- Klor- 4-( 2, 2- dimetyl- propionylamino)- benzoylamino] - propionyl}- pyrrolidin- 2- karbonyl)- amino]- 4- okso-smørsyre ( 122s)
En 19,Omg (0,036mmol) prøve av 98aa ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 14,5mg (90% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 7,28min. LC-MS (ES<+>) m/e=523,3 (M+H).
3-({ 1-[ 2-( 3- Klor- 4- propionylamino- benzoylamino)- propionyl]-pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 122t)
En 21,Omg (0,042mmol) prøve av 98ab ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 17,5mg (97% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 5,72 min. LC-MS (ES<+>) m/e=495,2 (M+H).
3- ({ 1-[ 2- ( 3- Klor- 4- fenylacetylamino- benzoylamino)-propionyl]- pyrroiidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre
( 122u)
En 10,Omg (0,017mmol) prøve av 98ac ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 7,9mg (85% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 7,52 min. LC-MS (ES<+>) m/e=557,2 (M+H).
3 - [ ( l-{ 2-[ 3- Klor- 4-( 3- metyl- butyrylamino)- benzoylamino]-propionyl}- pyrroiidin- 2- karbonyl}- amino]- 4- okso- smørsyre
( 122v)
En 8,Omg (0,015mmol) prøve av 98ad ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 6,5mg (96% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 6,92 min. LC-MS (ES<+>) m/e=523,2 (M+H).
3 - ({ 1-[ 2-( 4- Amino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]- 4- fluor-pyrroiidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre ( 123a)
En 12,4mg (0,022mmol) prøve av 108b ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 9,6mg (93% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 6,99min. LC-MS (ES<+>) m/e=473,2 (M+H).
3-({ 1-[ 2 - ( 4- Acetylamino- 3- klor- benzoylamino)- propionyl]-4, 4- difluor- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4- okso- smørsyre
( 123b)
En 26,2mg (0,043mmol) prøve av 116b ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav 10,8mg (49% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 9,89min. LC-MS (ES<+>) m/e=517,2
3-({ 1-[ 2-( 4- Acetylamino- 3- klor- 2- metoksy- benzoylamino)-propionyl]- 4, 4- difluor- pyrrolidin- 2- karbonyl}- amino)- 4 - okso- smørsyre ( 123c)
En 23,lmg (0,036mmol) prøve av 116c ble hydrolysert i henhold til metode A hvilket gav l,8mg (9% utbytte) av tittelforbindelsen: Analytisk HPLC 11,87 min. LC-MS (ES<+>) m/e=547,1 (M+H).
Biologiske metoder
Det ble innhentet in vitro-, ex vivo- og in vivo- data for utvalgte forbindelser ifølge denne oppfinnelse under anvendelse av metodene beskrevet nedenfor. Resultatene er vist i tabellene 2-8. Betegnelsen "ND" indikerer at forbindelsen ikke ble testet i den beskrevet undersøkelse.
I ICE-kaspaseundersøkelsene indikerer kategori "A" <10 nM inhibisjon. Kategori "B" indikerer 10-1000 nM inhibisjon. Kategori "C" indikerer >1000 nM inhibisjon. Se tabellene 2 og 3 .
I PBMC-undersøkelsen indikerer kategori "A" <500 nM inhibisjon. Kategori "B" indikerer 500-1000 nM inhibisjon. Kategori "C" indikerer 1001-2000 nM inhibisjon. Kategori "D" indikerer >2000 nM inhibisjon. Se Tabell 4.
I helblod-undersøkelsen indikerer kategori "A" <2500 nM inhibisjon. Kategori "B" indikerer 2500-7500 nM inhibisjon. Kategori "C" indikerer >7500 nM. Se Tabell 5.
I metabolisme-undersøkelsen in situ angis verdier av [f(g) X f(h)] som følger: Kategori "A" indikerer <0,25. Kategori "B" indikerer 0,25-0,49. Kategori "C" indikerer 0,5-0,75. Kategori "D" indikerer >0,75. I den biliære ekskresjonsmå-ling indikerer kategori "A" <5%. Kategori "B" indikerer 5-10%. Kategori "C" indikerer >10%. Se Tabell 6.
I klareringsundersøkelsen i.v. angis verdiene som følger: Kategori "A" indikerer <50. Kategori "B" indikerer 50-80. Kategori "C" indikerer >80. Se Tabell 7.
I biotilgjengelighetsundersøkelsen beskrives Cmax-verdiene (Og/ml) som følger: Kategori "A" indikerer <2,5. Kategori "B" indikerer 2,5-5,0. Kategori "C" indikerer >5,0. AUC-verdiene (Og x hr/ml) beskrives som følger: Kategori "A" indikerer <2,5. Kategori "B" indikerer 2,5-5,0. Kategori "C" indikerer >5,0. Halveringstiden (timer) beskrives som følger: Kategori "A" indikerer <1,5. Kategori "B" indikerer 1,5-2,0. Kategori "C" indikerer >2,0. F-verdiene (%) beskrives som følger: Kategori "A" indikerer <33. Kategori "B" indikerer 33-67. Kategori "C" indikerer >67. Se Tabell 8 .
Undersøkelser in vitro
Enzym- inhibisj on
Ki-verdier for testforbindelsene med de forskjellige kaspaser ble oppnådd ved hjelp av metoden beskrevet av Margolin et al. ( J. Biol. Chem., 272 s. 7223-7228 (1997)). Under-søkelsene ble utført i 10 mM Tris (Sigma Corp, St Louis MO) pH 7,5, 1 mM Ditiothreitol (DTT, Research Organic INC, Cleveland, OH) og 0,1% CHAPS (Pierce, Rockford IL) ved 37
EC. For kaspase-3 ble en løsning av 8% glycerol tilsatt til undersøkelsesbufferløsningen for å forbedre enzymstabilite-ten. En 65 ul alikvot av undersøkelsesbufferen og en 5 yl alikvot av de passende fortynninger av inhibitor i DMSO ble pipettert inn i en 96 brønners plate, behandlet med 10 yl kaspase, deretter fortynnet i undersøkelsesbuffer (0,5-40 nM aktivt protein ved aktiv setetitrering). En kontroll inneholdende DMSO, men ingen forbindelse ble medtatt for hver bestemmelse. Platene ble deretter inkubert i 15 minutter ved 37 °C, før tilsetning av det egnede substrat (20 uL, sluttkonsentrasjon 1-4 X KM, sluttundersøkelsesvolum 100 yl) for å initiere reaksjonen. Reaksjonshastighetene ble målt ved 37°C enten ved å følge den tidsavhengige øk-ning i absorbansen ved 405 nM (for pNA-substratene) eller i fluorescens (Ex 390, Em 460) (for AMC-substratene). De opp-nådde hastigheter ble fremstilt grafisk som funksjon av inhibitorkonsentrasjonen, og dataene anbragt i Morrisons "tight-binding" ligning for kompetitive inhibitorer (Morrison, J.F., Biochem. Biophys. Acta, 185 s. 269-286
(1969) ) . Substratene som ble anvendt for de individuelle undersøkelser, var som følger: Kaspase-1 Suc-YVAD-pNA (Bachem, King of Prussia, PA)
(sluttkonsentrasjon i undersøkelsen 80 uM),
Kaspase-3 Ac-DEVD-pNA (Bachem, King of Prussia, PA) (slutt-konsentras j on i undersøkelsen, 60 uM)
Kaspase-4 Ac-WEHD-AMC (Synpep, Dublin, CA) (sluttkonsentrasjon i undersøkelsen 20 uM),
Kaspase-7 Ac-DEVD-AMC (Bachem, King of Prussia, PA) (slutt-konsentras j on i undersøkelsen 50 uM) ,
Kaspase-8 Ac-DEVD-pNA (Bachem, King of Prussia, PA) (slutt-konsentras j on i undersøkelsen 80 uM).
PBMC- celleundersøkelse
IL- ip- undersøkelse med en blandet populasjon av humane perifere mononukleære blodceller ( PBMC) eller berikede adherente mononukleære celler
Behandlingen av pre-IL-lp ved ICE kan måles i cellekulturer under anvendelse av mange forskjellige cellekilder. Humane PBMC innhentet fra friske donatorer tilveiebringer en blandet populasjon av lymfocyttiske sub-typer og mononukleære celler som frembringer et spekter av interleukiner og cytokiner i respons til mange klasser av fysiologiske stimula-torer. Adherente mononukleære celler fra PBMC tilveiebringer en beriket kilde av normale monocytter for selektive studier av cytokin-produksjon ved hjelp av aktiverte celler.
Eksperimentell prosedyre:
En initiell fortynningsserie av testforbindelseene i DMSO eller etanol fremstilles, med en påfølgende fortynning i RPMI-10% FBS-medium (inneholdende 2 mM L-glutamin, 10 mM HEPES, 50 U henholdsvis 50 (xg/ml pen/strep) for å oppnå medikamenter ved 4x den avsluttende testkonsentrasjon inneholdende 0,4% DMSO eller 0,4% etanol. Sluttkonsentrasjonen av DMSO er 0,1% for alle medikamentfortynninger. En konsen-trasjonstitrering som grupperer den åpenbare Kj_-verdi for en testforbindelse bestemt i en ICE-inhibisjonsundersøkelse anvendes vanligvis for den primære utskillelse av forbindelsene .
Generelt testes 5-6 forbindelsesfortynninger, og den cellulære komponent av undersøkelsen utføres i duplikat, med duplikate ELISA-bestemmelser på hver cellekulturs super-natant.
PBMC- isolering og IL- l- undersøkelse:
Bøffelhudceller isolert fra en halvliter humant blod (hvilket gir et 40-45 ml sluttvolum av plasma plus celler) for-tynnes med medium til 80 ml, og LeukoPREP-separasjonsrør (Becton Dickinson) belegges hver med 10 ml cellesuspensjon. Etter 15 min sentrifugering ved 1500-1800 xg gjennomluftes plasma/medielaget, og deretter oppsamles det mononukleære cellelag med en Pasteur-pipette og overføres til et 15 ml konisk sentrifugrør (Corning). Mediet tilsettes for å bringe volumet opp til 15 ml, cellene blandes forsiktig ved inversjon og centrifuges ved 300 xg i 15 min. PBMC-bunn-fallet suspenderes på nytt i et lite volum av mediet, cellene telles og innstilles til 6 x 10^ celler/ml.
For den cellulære undersøkelse tilsettes 1,0 ml av celle-suspensjonen til hver brønn i en 24-brønners flatbunnet vevskulturplate (Corning), 0,5 ml testforbindelse fortynning og 0,5 ml LPS løsning (Sigma #L-3012; 20 ng/ml løsning fremstilt i fullstendig RPMI-medium; endelig LPS-konsentrasjon 5 ng/ml). 0,5 ml tilsetning av testforbindelse og LPS er vanligvis tilstrekkelig for å blande innholdet i brøn-nene. Tre kontrollblandinger kjøres pr. eksperiment, med enten LPS alene, løsningsmiddelkontroll og/eller ytterligere medium for å innstille kulturens sluttvolum til 2,0 ml. Cellekulturene inkuberes i 16-18 timer ved 37 °C i nær-vær av 5% CC>2 •
Mot slutten av inkubasjonsperioden høstes cellene og over-føres til 15 ml koniske sentrifugerør. Etter sentrifugering i 10 min ved 200 xg høstes supernatantene og overføres til 1,5 ml Eppendorf-rør. Det bør noteres at cellemassen kan utnyttes for biokjemisk evaluering av pre-IL-lp-og/eller modent IL-ip-innhold i cytosol-ekstrakter ved hjelp av Western-blotting eller ELISA med pre-IL-lp-spesifikke anti-sera.
Isolering av adherente mononukleære celler:
PBMC isoleres og fremstilles som beskrevet ovenfor. Mediet (1,0 ml) tilsettes først til brønnene etterfulgt av 0,5 ml PBMC-suspensjon. Etter én times inkubasjon rystes platene forsiktig, og ikke-adherente celler avsuges fra hver brønn. Brønnene vaskes deretter forsiktig tre ganger med 1,0 ml medium og suspenderes til slutt igjen i 1,0 ml medium. Berikningen for adherente celler gir vanligvis 2,5-3,0 x IO<5>celler pr. brønn. Tilsetningen av testforbindelser, LPS, celleinkubasjonsbetingelsene og bearbeidelsen av supernatantene foregår som beskrevet ovenfor.
ELISA:
"Quantikine"-utstyr (R&D Systems) kan anvendes for målingen av modent IL-ip. Undersøkelsene utføres i henhold til produsentens angivelser. Nivåer av modent IL-lp på ca. 1-3 ng/ml i både PBMC og positive kontroller for adherente mononukleære celler iakttas. ELISA-undersøkelsene utføres på 1:5-, 1:10- og 1:20-fortynninger av supernatanter fra LPS-positive kontroller for å velge den optimale fortynning for supernatantene i test-panelet.
Den inhibitoriske potens av forbindelsene kan representeres ved hjelp av en IC5Q-verdi, som er konsentrasjonen av inhibitor hvor 50% av modent IL-ip påvises i supernatanten sammenlignet med de positive kontroller.
Fagmannen vil forstå at verdiene oppnådd i celleunder-søkelsene, kan avhenge av multiple faktorer. Verdiene representerer ikke nødvendigvis fine kvantitative resultater.
Helblodsundersøkelse vedrørende IL- lP- produksjon
IC5o_verdier for forbindelser ifølge denne oppfinnelse i en helblodsundersøkelse ble oppnådd under anvendelse av metoden beskrevet nedenfor:
Formål
Helblodsundersøkelsen er en enkel metode for å måle produksjonen av IL-ip (eller andre cytokiner) og aktiviteten av potentielle inhibitorer. Kompleksiteten av dette undersø-kelsessystem, med dets fulle komplettering av lymfoide og inflammatoriske celletyper, spekter av plasmaproteiner og rode blodceller er en ideell representasjon in vitro av fysiologiske tilstander in vivo hos mennesker.
Materialer:
Pyrogen-frie sprøyter(~30 ml)
Pyrogen-frie sterile vakuumrør inneholdende lyofilisert
Na2EDTA (4,5 mg/10 ml rør)
Helblodsprøve fra menneske (~30-50 ml)
1,5 ml Eppendorf-rør
Stmløsninger av testforbindelsene (~25mM i DMSO eller et
annet løsningsmiddel)
Endotoksin-fri natriumkloridløsning (0,9%) og HBSS Lipopolysakkarid (Sigma; Cat. # L-3012) stamløsning på
lmg/ml i HBSS
IL-lp-ELISA Kit (R&D Systems; Cat # DLB50)
TNFa-ELISA Kit (R&D Systems; Cat # DTA50)
Vannbad eller inkubator
Eksperimentell prosedyre for helblodsundersøkelsen: Innstill inkubator eller vannbad ved 30 °C. Fordel alikvoter på 0,25ml blod i 1,5 ml Eppendorf-rør. Bemerk: Ikke unnlat å snu helblodsprøverørene opp ned etter annenhver alikvot. Forskjeller i replikatene kan oppstå hvis cellene sedimenterer og ikke fordeles jevnt. Anvendelse av en positiv fortrengningspipette vil også minimalisere forskjeller i dupliserte alikvoter.
Fremstill medisinfortynninger i sterilt pyrogenfritt salt-vann ved en seriefortynning. En fortynningsserie som grupperer den påviselige Kj_-verdi for en testf orbindelse bestemt i en ICE-inhibisjonsundersøkelse anvendes vanligvis for den primære forbindelsesavskjerming. For ekstremt hydrofobe forbindelser fremstill forbindelsesfortynninger i friskt plasma innhentet fra den samme bloddonator eller i PBS-inneholdende 5% DMSO for å forsterke oppløseligheten.
Tilsett 25 yl testforbindelsesfortynning eller vehikkelkontroll og bland prøven forsiktig. Tilsett deretter 5,0 yl LPS-løsning (250 ng/ml nyfremstilt fra stamløsning: 5,0 ng/ml sluttkonsentrasjon LPS) og bland igjen. Inkuber rørene ved 30 °C i et vannbad i 16-18 timer med leilighets-vis blanding. Alternativt kan rørene anbringes i en rotator justert til 4 rpm for den samme inkubasjonsperiode. Denne undersøkelse bør utføres i duplikat eller triplikat med følgende kontroller: Negativ kontroll - ingen LPS; positiv kontroll - ingen testinhibitor; vehikkelkontroll - den høyeste konsentrasjon av DMSO eller forbindelsesløsnings-middel anvendt i eksperimentet. Ytterligere saltoppløsning tilsettes til alle kontrollrør for å normalisere volumet for både kontrollprøvene og de eksperimentelle helblods-testprøver.
Etter inkubasjonsperioden sentrifugeres helblodsprøvene i 10 minutter ved~2000 rpm i en mikrofuge, plasmaet over-føres til et rent mikrofugerør og centrifugeres ved 1000 x g for å pelletere gjenværende blodplate, hvis nødvendig. Plasmaprøvene kan lagres frosne ved -70 °C forut for under-søkelsen av cytokinnivåene ved hjelp av ELISA.
ELISA:
R&D Systems (614 McKinley Place N.E. Minneapolis, MN 55413) "Quantikine"-utstyr kan anvendes for måling av IL-ip og TNF-a. Undersøkelsene utføres i henhold til produsentens angivelser. IL-ip-nivåer på -1-5 ng/ml i positive kontroller i et utvalg av individer kan iakttas. En 1:200 fortynning av plasma for alle prøver er vanligvis tilstrekkelig for eksperimenter for at ELISA-resultatene skal falle innen det lineære området av ELISA standardkurvene. Det kan være nødvendig å optimalisere standardfortynningene hvis man observerer forskjeller i helblodsundersøkelsen. Nerad, J.L. et al., J. Leukocyte Biol. , 52, s. 687-692 (1992) .
Undersøkelser ex vivo
Metabolisme og ekskresjon
Engangsperfusjonsstudier i rotter ble utført for å under-søke metabolismen i den gastrointestinale (GI) vegg (f(g)), levermetabolismen (f(h)) og den biliære ekskresjon. Metoden som ble anvendt, er blitt beskrevet i Pang, C.S., J. Pharmacol. Exp. Therapeutics, 333, s. 788-798 (1984).
Undersøkelser in vivo
Undersøkelse på rotter in vivo - klareringshastigheter
Klareringshastigheten i rotter (ml/min/kg) for forbindelser ifølge denne oppfinnelse kan oppnås under anvendelse av metoden beskrevet nedenfor:
Representativ prosedyre
Kanyleringer av de jugulare og karotide kar i rotter under anestesi utføres én dag forut for den farmakokinetiske studie. M.J. Free, R.A. Jaffee; 'Cannulation techniques for the collection of blood and other bodily fluids'; i: Animal Models; s. 480-495; N.J. Alexander, Ed.; Academic Press;
(1978). Medikamentet (lOmg/ml) administreres via den jugulare vene i et vehikkel som vanligvis består av propylenglykol/saltoppløsning, inneholdende lOOmM natriumbikarbonat i forholdet 1:1. Dyrene doseres med 10-20 mg medikament/kg og blodprøver tas ved 0, 2, 5, 7, 10, 15, 20, 30, 60, og 90 minutter fra et innsatt karotid kateter. Blodet sentrifugeres til plasma og lagres ved -20 °C inntil de analyseres. Farmakokinetiske analyse av dataene utføres ved ikke-lineær regresjon under anvendelse av standard programvare så som RStrip (MicroMath Programvare, UT) og/eller Pcnonlin (SC I Programvare, NC) for å oppnå klareringsverdiene.
Representativ analyse:
Rotteplasma ekstraheres med det samme volum av acetonitril (inneholdende 0,1% TFA). Prøvene sentrifugeres deretter ved tilnærmelsesvis 1,000 x g, og supernatanten analyseres ved hjelp av gradient HPLC. En typisk undersøkelsesprosedyre er beskrevet nedenfor.
200 yl plasma utfelles med 200 yl 0,1% trifluoreddiksyre (TFA) i acetonitril og 10 yl av en 50% vandig sinkklorid-løsning, virvles og sentrifugeres deretter ved -1000 x g, og supernatanten oppsamles og analyseres ved hjelp av HPLC.
HPLC-prosedyre:
En standardkurve fremstilles for konsentrasjonene 20, 10, 5, 2 og 1 yg/ml.
Biotilgj engelighet
Orale farmakokinetiske studier
Sprague-Dawley hannrotter (Harlan, Indianapolis, IN, 300-350 g) ble anestetisert ved hjelp av en intramuskulær injeksjon av en ketamin/rompun-blanding. En PE-50-kanyle ble innsatt i den høyre karotide arterie for prøvetaking av arterieblod. Rottene fikk komme seg etter inngrepet over natten (<>>16 timer) før de ble anvendt i studien. Testforbindelsene ble administrert oralt i 25% Cremophor EL/vann (w/w) eller 100% propylenglykol (PG) i et dosevolum av 10 ml/kg. Blodprøver (-0,30 ml) ble tatt 0,25, 0,50, 1,0, 1,5, 2, 3, 4, 6, og 8 timer etter doseringen, plasma ble separert ved sentrifugering og lagret ved -20°C i påvente av analyse. Kvantifisering av plasmaprøvene ble utført under anvendelse av en gradient HPLC/MS/MS-metode eller en enzymatisk metode omtalt nedenfor: HPLC/ MS/ MS- metode for kvantifisering av ICE- inhibitorer i rotteplasma
Behandling av prøvene
1. 50|il plasma alikvoteres inn i Ependorf-centrif ugeglass. 2. Et like stort volum av acetonitril tilsettes til plasmaet for å utfelle plasmaproteiner. 3. Prøvene virvles i 5 minutter og sentrifugeres ved 14,000 rpm i 5 minutter. 4. 75^1 av supernatanten overføres til 12mm HPLC væske-prøvetakningsflasker. 5. 50jai prøve injiseres for analyse ved hjelp av massespektrometeret.
Instrumentelle HPLC- parametere
HPLC: Hewlett Packard HP1100 binært løsningsmiddel-leveransesystem.
Betingelser for HPLC- gradientene
A = H2O 0,2% maursyre
B = Acetonitril 0,2% maursyre
Mobil fase:
Analytisk HPLC-kolonne : Keystone-fenyl -2 Hypersil
2,0xl00mm, 5ja 120Å porestørrelse, P/N# 105-39-2 In j eks j onsvolum: 50|il
Flythastighet:0,20 ml/min.
Instrumentelle massespektrometriske parametere
Instrument: P E Sciex API-365 Tandem massespektrometer Ionisasjonsteknikk: Turbo-ionespray (ESI)
Polaritet: Positiv
Oppholdstid: 300 msek
Pausetid: 5 msek
Scanningstid: 0,9 sek
Scanningsmodus: MRM (Multippel reaksjonsovervåkning)
ICE- enzymatisk undersøkelse for kvantifisering av ICE-inhibitorer i rotteplasma 50 ul plasma ble ekstrahert med 150 ul acetonitril, soni-kert, virvlet og sentrifugert ved 10,000xg, og 180 ul av supernatanten ble tørket i en Sorvall-vortex-evaporator ved romstemperatur. Prøvene ble rekonstituert i 100 yl buffer (10 mM tris-HCl, pH 7,5 med 0,1% CHAPS, 1 mM DTT) med soni-kering. 10 yl av hver prøve ble blandet med 10 yl ICE (1,1 mg/ml) i en mikrotiterplate med 60 yl buffer. Prøvene ble inkubert i 15 min. ved romstemperatur, deretter ble 20 yl Succ YVAD-pNA (400 uM, på forhånd oppvarmet til 37°C) tilsatt, og platen ble overvåket ved 405 nm i 20 min. ved 37°C under anvendelse av en SpectraMax-avleser. Dataene ble til-passet under anvendelse av en 4 parameters tilpasning med SpectraMax-programvare under anvendelse av en ekstrahert standardkurve. Undersøkelsen var lineær fra 0,15 til 2,0-3,0 yg/ml aldehyd.
Farmakokinetiske parametere
Farmakokinetisk analyse av disse plasmakonsentrasjonsdata ble utført under anvendelse av ikke-kompartmentelle metoder. Arealet under kurven (AUC(0-t)) ble bestemt fra tid null til det sist målte tidspunkt under anvendelse av den lineære trapesformede norm. Elimineringsraten (ke) ble beregnet ved log-lineær regresjon fra terminalfasen av plasmakonsentrasjons-tidskurvene. Arealet under kurvens hale ble beregnet som forholdet mellom den sist målte konsentrasjon og ke-verdien. Arealet under kurven fra tid null til uendelig (AUC(O-oo)) ble oppnådd ved å addere arealet under halen til AUC(O-t). Elimineringshalverings-tiden ble beregnet som 0,693/ke. De observerte verdier for den høyeste plasmakonsentrasjon (Cmax) ble nedtegnet. For medisinforløperstudier: Aldehydtilgjengeligheten (biotilgjengeligheten) ble beregnet som: (AUCald/medisin-forløper p.o.)/(AUCald/ald i.v.) x (dose ald, ald i.v./dose medisinforløper, medisinforløper p.o.) x (MW medisinforløper/MW aldehyd).
Antivirale undersøkelser
Effektiviteten av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse når det gjelder antiviralt beslektede sykdommer, lidelser eller tilstander kan evalueres i forskjellige undersøkelser in vitro og in vivo. For eksempel kan undersøkelsene ut-føres for å bestemme disse forbindelsers evne til å inhibere inflammatoriske responser forbundet med virale infek-sjoner. Undersøkelsene in vitro kan benytte hele celler eller isolerte cellulære komponenter. Undersøkelsene in vivo omfatter dyremodeller for virale sykdommer. Eksempler på slike dyremodeller omfatter, men er ikke begrenset til, gnagermodeller for HBV- eller HCV-infeksjon, Woodchuck-modellen for HBV-infeksjon og sjimpansemodellen for HCV-infeks j on .
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan også vurderes i dyremodeller for alkohol-indusert sykdom.
Andre undersøkelser som kan anvendes for å evaluere forbindelsene ifølge denne oppfinnelse, er beskrevet i PCT-ansøk-ning PCT/US96/20843, publisert 26 juni 1997, under publika-sjonsnr. WO 97/22619. Slike undersøkelser omfatter farmakokinetiske studier in vivo i mus, inhibisjon av ICE-homologer, inhibisjon av apoptose, akutt undersøkelse in vivo vedrørende anti-inflammatorisk effektivitet, måling av blodnivåer av medikamenter, IGIF-undersøkelser, peritoneal karragenan-inflammasjonsundersøkelse i mus og type II-kollagen-indusert artritt.
I den grad forbindelsene ifølge denne oppfinnelse er istand til å inhibere kaspaser, spesielt ICE, in vitro og videre, og kan gis oralt til pattedyr, er de av åpenbar klinisk nytte for behandling av IL-1-, apoptose-, IGIF- og IFN-y-medierte sykdommer.

Claims (20)

1 . Forbindelse representert ved formel I:
hvori: (A) Y er (a)
eller (b)
X er -C(R<3>)2"eller -N(R3)-; R<1>er H, -C(0)R<8>, -C(0)C(0)R<8>, -S(0)2R<8>, -S(0)R8, -C(0)OR<8>, -C(0)N(H)R<8>, -S (0) 2N (H)-R8, -S(0)N(H)-R<8>, -C(0)C(0)N(H)R<8>, -C(0)CH=CHR<8>, -C(0)CH2OR8, -C (0)CH2N(H)R8, -C(0)N(R<8>)2, -S(0)2N(R<8>)2, -S(0)N(R<8>)2, -C(0)C(0)N(R<8>)2, -C (0)CH2N(R8)2,<->CH2R8,-CH2-(C2-C6)alkenyl-R<8>eller -CH2-(C2-C6) alkynyl-R8; R<2>er -H, og hver R<3>er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R<8>, (C2-C6) alkenyl-R9 eller (C2-C6) alkynyl-R9, eller R2 og en R<3>, sammen med atomet som de er bundet til, danner et 3- til 7-leddet cyklisk eller heterocyklisk ringsystem hvor heteroatomene uavhengig er svovel, nitrogen eller oksygen, hvori et hydrogenatom som er bundet til ethvert -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -rIO, et hydrogenatom som er bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -RH, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -Ri; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, - (CH2)3NH(=NH)NH2, -CH2C (=0)NH2, -CH2C(<=>0)0H, -CH2SH, - (CH2)2C (=0)NH2, - (CH2)2C (=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH(C<H>3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH20H, -CH(0H)CH3,
og -CH(CH3)2<;> R<7>er -OH, -OR<8>eller -N(H)0H; hver r<!>° er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H) C (0) NH2, - (Ci-C6) perf luoralkyl, -0- (Ci-C6) alkyl, -0-(C6-Cn) aryl, -0-(Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N (H) (Ci-C6) alkyl, -N(H)(C6-Ci4)aryl, -N (H) - (d-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N((Ci-C6)alkyl)2, -C(0)N(H) (Ci-C6)alkyl, -C(0)N((Ci-C6)alkyl)2, -N (H) C (0) (Ci-C6) alkyl, -N (H) C (0) N (H) (Ci-C6)alkyl, -N (H) C (0) N ( (Ci-C6) alkyl2, -S-(Ci-C6) alkyl, -S-(C6-Ci4) aryl, -S-(Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -S(0)2(Ci-C6)alkyl, -S (0) (Ci-C6) alkyl, -C (0) (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N(H) (Ci-C6) alkyl, -CH2N ( (Ci-C6) alkyl) 2, - (Ci-C6) alkyl, - (C5-C10) cykloalkyl, - (C6-Ci4) aryl, - (Ci-C15) heteroaryl, - (C1-C15) heterocyklyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) cykloalkyl - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, - (Ci-C6) alkyl-(C1-C15) heteroaryl eller - (Ci-C6) alkyl (Ci-C15)heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til et -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med rH og et hydrogenatom bundet til et nitrogenatom er eventuelt erstattet med Ri; eller B) Y er:
X er -C(R<3>)2~eller -N(R<3>)-; R<1>er H, -C(0)R<8>, -C(0)C(0)R<8>, -S(0)2R<8>, -S(0)R8, -C(0)OR<8>, -C(0)N(H)R<8>, -S (0) 2N (H)-R8, -S (0) N (H)-R8, -C(0)C(0)N(H)R<8>, -C(0)CH=CHR<8>, -C(0)CH2<O>R<8>, -C (0) CH2N (H) R8, -C(0)N(R<8>)2, -S (0) 2N (R8) 2, -S(0)N(R<8>)2, -C(0)C(0)N(R<8>)2, -C(0)CH2N(R<8>)2, -CH2R<8>, -CH2"(C2-C6)alkenyl-R<8>eller -CH2-(C2-C6)alkynyl-R8; R<2>er -H, og hver R<3>er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R<8>, (C2-C6) alkenyl-R9 eller (C2-C6) alkynyl-R9, eller R<2>og én R<3>sammen med atomene som de er bundet til, danner et 3- til 7-leddet cyklisk eller heterocyklisk ringsystem hvor heteroatomene uavhengig er svovel, nitrogen eller oksygen, hvori et hydrogenatom som er bundet til ethvert -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<11>, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -R<1>; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, -(CH2)3NH(=NH)NH2, -CH2C (=0)NH2, -CH2C(=0)0H, -CH2SH, - (CH2)2C (=0)NH2, - (CH2)2C(=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH (CH3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH20H, -CH(0H)CH3,
og -CH(CH3)2<;> hver R<10>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N (H)C (0)H, -N (H)C (0)NH2, -perfluoralkyl, -0-(Ci-C6)alkyl, -0- (C6-Ci4) aryl, -0- (Ci-C6) alkyl (C6-Cn) aryl, -N(H) (d-Cg) alkyl, -N (H) (C6-Ci4) aryl, -N(H)-(d" C6) alkyl (C6-C14) aryl, -N ( (Ci-C6) alkyl) 2 , -C(0)N(H)-(d-C<g>) alkyl, -C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -N(H)C(0)(d-C6)alkyl, -N (H) C (0) N (H) (d-C6) alkyl, -N(H)C(0)N( (d-C6) alkyl) 2, -S-(Ci-C6) alkyl, -S-(C6-Ci4)aryl, -S-(d-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -S(0)2-(d" C6)alkyl, -S (0) - (Ci-Cs) alkyl, -C (0) - (Ci-Cs) alkyl, -CH2NH2, -CH2N(H) (Ci-C6)alkyl eller -CH2N ( (Ci~ C6) alkyl) 2, (Ci-Cs) -alkyl, - (C5-C10) cykloalkyl, (C6-Ci4)-aryl, (C1-C15) -heteroaryl, - (C1-C15) heterocyklyl, - (Ci-Cs) alkyl (C5-C10) cykloalkyl, - (d-C6) alkyl (C5-C10) aryl, - (Ci-C6) alkyl (d-C15) heteroaryl eller - (Ci-Cg) alkyl (C1-C15) heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med R<11>, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med Ri; eller C) Y er: (a) (b)
X er -C (R3) 2- R<1>er H, -C(0)R<8>, -C(0)C(0)R<8>, -S(0)2R<8>, -S(0)R8, -C(0)OR<8>, -C(0)N(H)R<8>, -S (0) 2N (H)-R8, -S (O)N(H)-R8, -C(0)C(0)N(H)R<8>, -C (0) CH=CHR8, -C(0)CH2OR8, -C (0)CH2N(H)R8, -C(0)N(R<8>)2, -S (0) 2N(R8) 2, -S(0)N(R<8>)2, -C (0) C (0) N (R8 ) 2 , -C (0)CH2N(R8)2, -CH2R8,-CH2-(C2-C6)alkenyl-R<8>eller -CH2-(C2-C6) alkynyl-R8; R<2>er -H, og hver R3 er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R<8>, (C2-C6) alkenyl-R9 eller (C2-C6) alkynyl-R9, hvori ethvert hydrogenatom bundet til et -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<11>, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -R<1>; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, - (CH2) 3NH (=NH) NH2, -CH2C (=0) NH2, -CH2C (=0) OH, -CH2SH, -(CH2)2C(=0)NH2, -(CH2)2C(=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH (CH3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH2OH, -CH(OH)CH3,
og -CH(CH3)2<;> R<7>er -OH, -OR<8>eller -N(H)OH; hverR<10>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N(H)C(0)NH2, - (Ci-C6) perfluoralkyl, -0-(Ci-C6) alkyl, -0-(C6-Ci4) aryl, -0- (Ci-C6) alkyl (C6-C14) - aryl, -N (H) (d-C<g>) alkyl, -N (H) (C6-Ci4) aryl, -N (H) - (Ci-Cg) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -C(0)N(H) (Ci-C6) alkyl, -C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2 , -N (H) C (0) - (Ci-C6) alkyl, -N (H) C (0) N (H) (Ci-C6) alkyl, -N(H)C(0)N( (Ci-C5) alkyl) 2, -S-(Ci-C6) alkyl, -S-(C6-Ci4)aryl, -S-(Ci-C6) alkyl (C6-C14) aryl, -S(0)2-(Ci-C6)alkyl, -S (0) - (Ci-C6) alkyl, -C (0) - (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N (H) - (Ci-C6) alkyl, -CH2N ( (C:-C6) alkyl) 2, - (Ci-C6) alkyl, - (C5-Ci0) cykloalkyl, - (C6-Ci4) aryl, - (C1-C15) heteroaryl, - (C1-C15) heterocyklyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) cykloalkyl - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, - (Ci-C6) alkyl (C1-C15) heteroaryl eller - (Ci-C6) alkyl (C1-C15) heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med R<il>, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med R<1>; og forutsatt at om en R<3>er -H, så er den andre R<3>ikke -H; eller D) Y er:
X er -C(R<3>)2- R1 er H, -C(0)R<8>, -C(0)C(0)R<8>, -S(0)2R<8>, -S(0)R<8>, -C(0)OR<8>, -C(0)N(H)R<8>, -S (0) 2N (H)-R8, -S(0)N(H)-R<8>, -C(0)C(0)N(H)R<8>, -C(0)CH=CHR<8>, -C(0)CH2OR8, -C (0) CH2N (H) R8, -C(0)N(R<8>)2, -S(0)2N(R8) 2< -S(0)N(R<8>)2, -C (0)C(0)N(R8)2, -C (0)CH2N(R8) 2> -CH2R<8>, -CH2-(C2-C6)alkenyl-R<8>eller -CH2-(C2-C6) alkynyl-R8; R2 er -H, og hver R3 er uavhengig -H, en aminosyresidekjede, -R<8>, (C2-C6) alkenyl-R9 eller (C2-C6) alkynyl-R9, hvori et hydrogenatom bundet til et -alkyl- eller -cykloalkylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R<10>, et hydrogenatom bundet til et -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med -R11, et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom i ringsystemet er eventuelt erstattet med -R<1>; og hvor aminosyre sidekjeden er valgt fra -H, -CH3, - (CH2) 3NH (=NH) NH2, -CH2C (=0) NH2, -CH2C(=0)0H, -CH2SH, -(CH2)2C(=0)NH2, -(CH2)2C(=0)OH, -CH (CH3)CH2CH3, -CH2CH (CH3)2, -(CH2)4NH2, -(CH2)2SCH3, -CH2Ph, -CH20H, -CH(0H)CH3,
og -CH(CH3)2<;> hver R<10>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -NH2, -C02H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H) C (0) NH2, - (C1-C4) perf luoralkyl, -0- (Ci-C6) alkyl, -0-(C6-d4) aryl, -0-(Ci-C6) alkyl (C6-C14) aryl, -N(H) (Ci-C6) alkyl, -N(H) (C6-Cn) aryl, -N (H) - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N(Ci-C6)-alkyl)2, -C(0)N(H) (Ci-C6)alkyl, -C (0) N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -N(H)C (0) - (Ci-C6) alkyl, -N(H)C(0)N (H (Ci-C6) alkyl, -N(H)C(0)N( (Ci-C6)alkyl)2, -S-(d-C6) alkyl, -S-(C6-C14)aryl, -S-(d-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -S (0)2(d-C6) alkyl, -S (0) (Ci-C6) alkyl, -C (0 (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N(H)-(Ci-C6)alkyl, -CH2N ( (d-C6) alkyl) 2, - (d-C6) alkyl, - (C5-C10) cykloalkyl, - (C6-Ci4) aryl, (C1-C15) heteroaryl, (Ci-C15) heterocyklyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) cykloalkyl, - (Ci-C6) alkyl (C6-C14) aryl, - (Ci-Ce) alkyl (C1-C15) heteroaryl eller - (Ci-C6) alkyl (C1-C15) heterocyklyl, hvori et hydrogenatom bundet til ethvert -aryl- eller -heteroarylkarbonatom er eventuelt erstattet med Ril, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet medR<1>;og hvor m er 0; R4 og en R<5>sammen med atomene til hvilke de er bundet danner et ringsystem valgt fra
og den andre R<5>er H, hvor et hydrogenatom bindet til ethvert nitrogenatom av ringsystemet eventuelt er erstattet medR<1>, eller R<4>og enR<5>sammen med atomene til hvilke de er bundet danner et ringsystem
og den andre R^ er H; R<6>er -H; Hver R8 er uavhengig - (Cl-Ce) alkyl, - (C5-C10) -cykloalkyl, - (C6-C14) aryl, - (C1-C15) heteroaryl, - (C1-C15) heterocyklyl, - (Ci-C6) alkyl (C5-C10) -cykloalkyl, - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) - aryl, - (Ci-C6) alkyl (C1-C15) heteroaryl eller - (Ci-C6) alkyl (C1-C15)heterocyklyl, hvor et hydrogenatom bundet til ethvert alkyl eller cykloalkyl karbonatom er eventuelt erstattet med R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert aryl eller heteroaryl karbonatom er eventuelt erstattet med R<11>, og et hydrogenatom bindet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med R<1>; hver R<9>er uavhengig - (C6-Ci4) aryl, - (C6-C15) heteroaryl, - (C5-C10) cykloalkyl eller - (C1-C15) heterocylkyl, hvor et hydrogenatom bundet til ethvert alkyl eller cykloalkyl karbonatom er eventuelt erstatt av R<10>, et hydrogenatom bundet til ethvert aryl eller heteroaryl karbonatom er eventuelt erstattet med R<11>, og et hydrogenatom bundet til ethvert nitrogenatom er eventuelt erstattet med R<1>; hverR<11>er uavhengig -OH, -SH, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -NH2, -CO2H, -C(0)NH2, -N(H)C(0)H, -N (H) C (0) NH2, - (Ci-C6) alkyl, - (C5-C10) cykloalkyl, - (Ci-C6) perf luoralkyl, -0- (Ci-C6) alkyl, -0- (C6-Cn)aryl, -0- (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -N(H)(Ci-C6)alkyl, -N(H) (C6-Ci4) aryl, -N (H) - (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4)aryl, -N ( (Ci-C6) alkyl) 2, -C (0) N (H) (d-C6) alkyl, -C(0)N( (Ci-C6)alkyl)2, -N(H)C(0) (Ci-C6) alkyl, -N (H) C (0) N (H) (d-Ce) alkyl, -N (H) C (0) N ( (d-C6)alkyl)2, -S-(d-C6) alkyl, -S-(C6-Ci4) aryl, -S- (Ci-C6) alkyl (C6-C14) aryl, -S (0) 2 (d-C6) alkyl, -S (0) (Ci-C5) alkyl, -C (0) (Ci-C6) alkyl, -CH2NH2, -CH2N (H) (Ci-C6) alkyl eller -CH2N ( (Ci-C6) alkyl) 2 ; og r12 er -c (0) (Ci-C6) alkyl, -C (0) (C5-C10) cykloalkyl, -C(0) (Ci-C6) alkyl (C6-Ci4) aryl, -C(0) (Ci-C6) alkyl-(C1-C15) heteroaryl, -C (0) (C1-C15) heterocyklyl eller -C (0) (Ci-C6) alkyl (C1-C15) heterocyklyl.
2. Forbindelse ifølge krav 1, alternativ (B) eller (D), hvor Y er
og V er: CH30,
3. Forbindelse i henhold til krav 1, hvori en R<3>er -H, og den andre RJ er metyl, isopropyl, tert-butyl, -CH2SR<8>, -CH2S02R<8>, -CH2CH2SR<8>eller -CH2CH2S02R8 når X er -C(R<3>)2-.
4 . Forbindelse i henhold til krav 3 hvori én R<3>er - H, og den andreR<3>er metyl når X er -C(R<3>)2-.
5. Forbindelse i henhold til krav 4 hvori Ri er -C(0)R<8>eller -C(0)C(0)R<8>.
6. Forbindelse i henhold til krav 1 hvori R<4>og én R° sammen med atomene som de er bundet til, danner et ringsystem valgt fra
og den andre R^ er H.
7. Forbindelse ifølge krav 1, hvor den ene R<3>er -H og den andre R<3>er metyl, isopropyl, tert-butyl, -CH2SR<8>, -CH2S02R8, -CH2CH2SR<8>eller - CH2CH2S02R<8>når X er -C(R<3>)2-; og hvorR<4>ogR<5>sammen med atomene til hvilke de er bundet danner et ringsystem valgt fra:
og den andre R<5>er H.
8. Forbindelse i henhold til krav 7 hvori én R<3>er - H, og den andre r<3>er metyl når X er -C(R<3>)2-.
9. Forbindelse i henhold til krav 8 hvori Ri er -C(0)R<8>eller -C(0)C(0)R<8>.
10. Forbindelse i henhold til krav 1 hvori en R<4>og en R5 sammen med atomene som de er bundet til, danner et ringsystem:
og den andre R<5>er H.
11. Forbindelse i henhold til krav 1, hvori én R<3>er -H, og den andre R<3>er metyl, isopropyl, tert-butyl, -CH2SR<8>, -CH2S02R<8>, -CH2CH2SR<8>eller -CH2CH2S02R8 når X er -C(R<3>)2-, hvor en R4 og en R<5>sammen med atomene til hvilke de er bundet danner et ringsystem
og den andre R^ er H.
12. Forbindelse i henhold til krav 11 hvori én R<3>er - H, og den andre r<3>er metyl når X er -C(R<3>)2-.
13. Forbindelse i henhold til krav 12 hvori R^- er -C(0)R<8>eller -C(0)C(0)R<8>.
14. Forbindelse valgt fra gruppen bestående av: 5a-5bd, 7a-7at, 20a-20t, 23b-23d, 23q-23, 24a-24e, 26e, 29a-29s, 32a-32e, 34, 42, 46, 52, 57, 61, 65, 69, 73,
121 og 122 a-v:
15. Forbindelse ifølge krav 1, alternativ (D) valgt fra gruppen bestående av: 51, 56, 60, 64, 68, 72, 76-93, 98a-z, 98aa-az, 98ba, 98bb, 101, 102a, 102b, 110 og 111 :
16. Forbindelse valgt fra gruppen bestående av: 37, 38, 39, 41, 43, 44-45, 50, 58, 59, 71, 75, 96a-96c, 97a-97c, 107, 108a-d, 109, 115a-115c, 116a-h, 120a og 120b:
17. Farmasøytisk sammensetning omfattende: a) en forbindelse i henhold til ethvert av kravene 1-15; og b) en farmasøytisk akseptabel bærer, adjuvant eller vehikkel.
18. Anvendelse av en forbindelse ifølge ethvert av kravene 1-15 eller en farmasøytisk sammensetning ifølge krav 18 for fremstilling av et medikament for å behandle eller forebygge en sykdom valgt fra en IL-l-mediert sykdom, en apoptosemediert sykdom, en inflammatorisk sykdom, en autoimmun sykdom, en destruktiv benlidelse, en proliferativ lidelse, en smittsom sykdom, en degene-rativ sykdom, en nekrotisk sykdom, en sykdom pga. altfor stort alkoholinntak, en virusmediert sykdom, inflammatorisk peritonitt, osteoartritt, pankreatitt, astma, respiratorisk distress-syndrom hos voksne, glomerulonefritt, reumatoid artritt, systemisk lupus erytematosus, skleroderma, kronisk tyroiditt, Graves sykdom, autoimmun gastritt, insulin-avhengig diabetes mellitus (Type I), autoimmun hemolytisk anemi, autoimmun neutropeni, trombocytopeni, kronisk aktiv hepatitt, myastenia gravis, inflammatorisk tarmsyndrom, Crohns sykdom, psoriasis, atopisk dermatitt, "graft vs host"-sykdom, osteoporose, leukemier og relaterte lidelser, myelodysplastisk syndrom, myelomatose-relatert benlidelse, akutt myelogenøs leukemi, kronisk myelogenøs leukemi, metastatisk melanom, Kaposis sarkom, myelomatose, sepsis, septisk sjokk, shigellosis, Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, cerebral iskemi, myokardial iskemi, spinal muskulær atrofi, multippel sklerose, AIDS-relatert encefalitt, HIV-relatert encefalitt, aldring, alopesi, neurologisk skade på grunn av slag, ulcerativ kolitt, traumatisk hjerneskade, organtransplan-tasjonsfrastøtning, hepatitt-B, hepatitt-C, hepatitt-G, gul feber, dengue-feber eller japansk encefalitt i en pasient.
19. Anvendelse ifølge krav 18, hvor sykdommen er reumatoid artritt, inflammatorisk tarmsyndrom, Crohns sykdom, ulcerative kolitt, inflammatorisk peritonitt, septisk sjokk, pankreatitt, traumatisk hjerneskade, or-gantransplantasjonsfrastøtning, osteoartritt, astma, psoriasis, Alzheimers sykdom, atopisk dermatitt, leukemi og relaterte lidelser, myelodysplastisk syndrom eller multippelt myelom.
20. Forbindelse ifølge krav 1, eller krav 2 hvor R<1>er -C(0)R<8>eller -C(0)C(0)R<8>.
NO20004546A 1998-03-19 2000-09-12 Cykliske forbindelser med caspaseinhibitor-aktivitet, sammensetninger inneholdende slike samt anvendelse derav ved fremstilling av medikamenter NO331829B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US7877098P 1998-03-19 1998-03-19
PCT/US1999/005919 WO1999047545A2 (en) 1998-03-19 1999-03-19 Inhibitors of caspases

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20004546D0 NO20004546D0 (no) 2000-09-12
NO20004546L NO20004546L (no) 2000-11-09
NO331829B1 true NO331829B1 (no) 2012-04-16

Family

ID=22146109

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20004546A NO331829B1 (no) 1998-03-19 2000-09-12 Cykliske forbindelser med caspaseinhibitor-aktivitet, sammensetninger inneholdende slike samt anvendelse derav ved fremstilling av medikamenter

Country Status (34)

Country Link
US (3) US6531474B1 (no)
EP (6) EP2261234A3 (no)
JP (3) JP4594520B2 (no)
KR (2) KR100898094B1 (no)
CN (1) CN1321129C (no)
AP (1) AP2000001919A0 (no)
AR (1) AR019011A1 (no)
AT (1) ATE410439T1 (no)
AU (1) AU769033B2 (no)
BG (1) BG104863A (no)
BR (2) BR9909660A (no)
CA (1) CA2324226C (no)
CZ (1) CZ302281B6 (no)
DE (1) DE69939689D1 (no)
DK (1) DK1064298T3 (no)
ES (1) ES2315010T3 (no)
GE (1) GEP20043163B (no)
HK (1) HK1035733A1 (no)
HU (1) HU227920B1 (no)
ID (1) ID27002A (no)
IL (3) IL138469A0 (no)
IS (1) IS5622A (no)
NO (1) NO331829B1 (no)
NZ (2) NZ528282A (no)
PL (1) PL204619B1 (no)
PT (1) PT1064298E (no)
RU (1) RU2274642C2 (no)
SI (1) SI1064298T1 (no)
SK (1) SK286736B6 (no)
TR (1) TR200103406T2 (no)
TW (1) TWI243828B (no)
UA (2) UA74133C2 (no)
WO (1) WO1999047545A2 (no)
ZA (1) ZA200004652B (no)

Families Citing this family (76)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4594520B2 (ja) * 1998-03-19 2010-12-08 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド カスパーゼのインヒビター
US7157430B2 (en) 1998-10-22 2007-01-02 Idun Pharmaceuticals, Inc. (Substituted)acyl dipeptidyl inhibitors of the ICE/CED-3 family of cysteine proteases
US6242422B1 (en) * 1998-10-22 2001-06-05 Idun Pharmacueticals, Inc. (Substituted)Acyl dipeptidyl inhibitors of the ice/ced-3 family of cysteine proteases
US7326542B2 (en) 1998-12-02 2008-02-05 Princeton University Compositions and methods for regulating bacterial pathogenesis
US6720415B2 (en) 1998-12-02 2004-04-13 Princeton University Compositions and methods for regulating bacterial pathogenesis
WO2001027085A1 (en) * 1999-10-13 2001-04-19 Merck Frosst Canada & Co. Nicotinyl aspartyl ketones as inhibitors of caspase-3
US6395767B2 (en) * 2000-03-10 2002-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Cyclopropyl-fused pyrrolidine-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV and method
US6525024B1 (en) 2000-04-17 2003-02-25 Idun Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of the ICE/ced-3 family of cysteine proteases
EP1282415A2 (en) 2000-05-10 2003-02-12 Princeton University Office of Techology Licensing & I.P. Compounds and methods for regulating bacterial growth and pathogenesis
PE20011350A1 (es) 2000-05-19 2002-01-15 Vertex Pharma PROFARMACO DE UN INHIBIDOR DE ENZIMA CONVERTIDORA DE INTERLEUCINA-1ß (ICE)
EP1317454B1 (en) * 2000-09-13 2011-05-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitors and uses thereof
WO2002070544A2 (en) * 2001-03-02 2002-09-12 Idun Pharmaceuticals, Inc. Methods, compositions and kits for preserving antigenicity
ES2907826T3 (es) 2001-06-26 2022-04-26 Amgen Inc Anticuerpos para OPGL
US7410956B2 (en) * 2002-02-11 2008-08-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitor prodrugs
US7087604B2 (en) 2002-03-08 2006-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
FR2839309B1 (fr) 2002-05-03 2004-07-23 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de l'acide hexahydro-pyridazine-3- carboxylique, chimiotheques les contenant, leur utilisation comme medicaments, compositions pharmaceutiques les contenant et leurs procedes de preparation
US7001899B2 (en) 2002-06-10 2006-02-21 The Procter & Gamble Company Interleukin converting enzyme inhibitors
WO2004022536A1 (en) * 2002-09-04 2004-03-18 Glenmark Pharmaceuticals Limited New heterocyclic amide compounds useful for the treatment of inflammatory and allergic disorders: process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
MEP32508A (en) 2002-09-06 2010-10-10 Amgen Inc Therapeutic human anti-il-1r1 monoclonal antibody
KR20050065624A (ko) 2002-10-23 2005-06-29 그렌마크 파머수티칼스 엘티디. 염증성 및 알레르기 질환의 치료에 유용한 신규한트리사이클릭 화합물, 이의 제조 방법 및 이를 함유하는약제 조성물
FR2846969A1 (fr) * 2002-11-08 2004-05-14 Salles Jean Pierre Nouveaux vecteurs moleculaires amphiphiles fluorocarbones a usage biomedical et medical
FR2847160A1 (fr) * 2002-11-20 2004-05-21 Oreal Composition capillaire contenant un compose pyrasol-carboxamide, son utilisation pour stimuler la pousse des cheveux et/ou freiner leur chute
AU2003295041A1 (en) * 2002-11-20 2004-06-18 L'oreal Composition for hair care or eyelashes containing a pyrazol-carboxamide, its use for stimulating hair and eyelash growth and/or for preventing loss thereof
EA010634B1 (ru) 2003-04-11 2008-10-30 Гленмарк Фармасьютикалс С.А. Новые гетероциклические соединения, применяемые для лечения нарушений аллергической или воспалительной природы: способы синтеза и содержащие их фармацевтические составы
AU2003902704A0 (en) * 2003-05-29 2003-06-19 Crc For Waste Management And Pollution Control Limited Of Unsw Process for producing a nanoscale zero-valent metal
AU2005249503B2 (en) 2003-11-10 2011-08-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated ICE inhibitors for the treatment of autoinflammatory diseases
EP1696894A1 (en) * 2003-12-01 2006-09-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Treating infectious diseases using ice inhibitors
DK1541124T3 (da) * 2003-12-12 2009-05-18 Straetmans Chemische Produkte Sammensætninger med anissyre og glycerider
AU2011226946B2 (en) * 2004-02-27 2012-05-03 Vertex Pharmaceuticals Incoporated Caspase Inhibitors and Uses Thereof
WO2005085236A2 (en) 2004-02-27 2005-09-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitors and uses thereof
CN1942466B (zh) * 2004-02-27 2011-02-23 沃泰克斯药物股份有限公司 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶抑制剂及其用途
PL1725548T3 (pl) * 2004-03-12 2015-08-31 Vertex Pharma Sposoby i związki pośrednie do wytwarzania acetali asparaginowych jako inhibitorów kaspazy
AU2012200214B2 (en) * 2004-05-14 2013-10-24 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
AU2005244904B2 (en) * 2004-05-14 2011-10-13 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
JP4848367B2 (ja) * 2004-05-15 2011-12-28 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｉｃｅインヒビターを使用した発作の処置
GB0411056D0 (en) 2004-05-18 2004-06-23 Novartis Ag Organic compounds
AU2005271831A1 (en) * 2004-07-12 2006-02-16 Idun Pharmaceuticals, Inc. Tetrapeptide analogs
EP1796660B1 (en) * 2004-09-17 2016-11-23 BioMAS Ltd. Use of ammonium trichloro(dioxyethylene-o,o')tellurate (as101) for the inhibition of interleukin-1beta-converting enzyme
EP1799632A2 (en) 2004-10-13 2007-06-27 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Process for the preparation of n-(3,5-dichloropyrid-4-yl)-4-difluoromethoxy-8-methanesulfonamido-dibenzo[b,d]furan-1-carboxamide
MX2007007345A (es) 2004-12-17 2007-09-07 Glenmark Pharmaceuticals Sa Compuestos heterociclicos novedosos utiles para el tratamiento de trastornos inflamatorios y alergicos.
SI1831227T1 (sl) 2004-12-17 2013-09-30 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Nove heterociklične spojine uporabne za zdravljenje vnetnih in alergijskih motenj
JP4673068B2 (ja) * 2005-01-19 2011-04-20 独立行政法人科学技術振興機構 Ｔｈ１型アレルギー疾患治療用組成物
DE102005017116A1 (de) * 2005-04-13 2006-10-26 Novartis Ag Hemmstoffe für Inhibitoren von Apoptose Proteinen (IAP)
EP1910379B1 (en) * 2005-07-28 2011-10-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitor prodrugs
AR056806A1 (es) 2005-11-14 2007-10-24 Amgen Inc Moleculas quimericas de anticuerpo rankl- pth/ pthrp
EP2043672A4 (en) * 2006-07-07 2009-10-21 Univ Leland Stanford Junior SELECTIVE CASPASE INHIBITORS
CA2669917A1 (en) * 2006-11-17 2008-05-22 Dawn M. George Aminopyrrolidines as chemokine receptor antagonists
US8084862B2 (en) * 2007-09-20 2011-12-27 International Business Machines Corporation Interconnect structures with patternable low-k dielectrics and method of fabricating same
US7709370B2 (en) * 2007-09-20 2010-05-04 International Business Machines Corporation Spin-on antireflective coating for integration of patternable dielectric materials and interconnect structures
US8618663B2 (en) 2007-09-20 2013-12-31 International Business Machines Corporation Patternable dielectric film structure with improved lithography and method of fabricating same
WO2009124265A1 (en) * 2008-04-03 2009-10-08 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Probes for in vivo targeting of active cysteine proteases
US20110144765A1 (en) * 2008-05-27 2011-06-16 Imperial Innovations Limited Process For Producing Porous Scaffolds From Sinterable Glass
US20110152343A1 (en) * 2009-12-22 2011-06-23 Functional Genetics, Inc. Protease inhibitors and broad-spectrum antiviral
GB201001070D0 (en) 2010-01-22 2010-03-10 St George's Hospital Medical School Theraputic compounds and their use
US9365612B2 (en) 2010-01-29 2016-06-14 United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Caspase inhibitors
GB201011411D0 (en) 2010-07-06 2010-08-18 St Georges Hosp Medical School Therapeutic compounds and their use
US9116157B2 (en) 2010-11-05 2015-08-25 Brandeis University Ice-cleaved alpha-synuclein as a biomarker
US9956260B1 (en) 2011-07-22 2018-05-01 The J. David Gladstone Institutes Treatment of HIV-1 infection and AIDS
IN2014CN02805A (no) 2011-10-14 2015-07-03 Bristol Myers Squibb Co
EP2899183B1 (en) 2011-10-14 2018-09-19 Bristol-Myers Squibb Company Substituted Tetrahydroisoquinoline Compounds as Factor Xia Inhibitors
AR088456A1 (es) 2011-10-14 2014-06-11 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de tetrahidroisoquinolina sustituidos como inhibidores del factor xia
WO2014031784A1 (en) 2012-08-23 2014-02-27 Alios Biopharma, Inc. Compounds for the treatment of paramoxyvirus viral infections
WO2014059202A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Bristol-Myers Squibb Company Guanidine substituted tetrahydroisoquinoline compounds as factor xia inhibitors
US9920034B2 (en) 2012-10-12 2018-03-20 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of a factor XIa inhibitor
EP2906541B1 (en) 2012-10-12 2017-11-22 Bristol-Myers Squibb Company Guanidine and amine substituted tetrahydroisoquinoline compounds as factor xia inhibitors
WO2014160668A1 (en) 2013-03-25 2014-10-02 Bristol-Myers Squibb Company Tetrahydroisoquinolines containing substituted azoles as factor xia inhibitors
US9777001B2 (en) 2014-01-31 2017-10-03 Bristol-Myers Squibb Company Macrocycles with aromatic P2′ groups as factor xia inhibitors
NO2760821T3 (no) 2014-01-31 2018-03-10
WO2015192124A1 (en) 2014-06-13 2015-12-17 Trustees Of Tufts College Fap-activated therapeutic agents, and uses related thereto
JP6526796B2 (ja) 2014-09-04 2019-06-05 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｆｘｉａ阻害剤であるジアミドマクロ環
US9453018B2 (en) 2014-10-01 2016-09-27 Bristol-Myers Squibb Company Pyrimidinones as factor XIa inhibitors
NZ740817A (en) 2015-09-17 2024-03-22 City Of Hope Pcna inhibitors
US10995084B2 (en) 2016-07-22 2021-05-04 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. Pyrrolidine derivative
WO2018112626A1 (en) 2016-12-23 2018-06-28 Andrea Leblanc Caspase-1 inhibition and uses thereof for prevention and treatment of neurological conditions
US20210236599A1 (en) 2018-08-13 2021-08-05 Iltoo Pharma Combination of interleukin-2 with an interleukin 1 inhibitor, conjugates and therapeutic uses thereof
WO2022115612A1 (en) * 2020-11-25 2022-06-02 Lysosomal and Rare Disorders Research and Treatment Center, Inc. Inhibition of caspase pathway as a treatment for lysosomal storage disorders

Family Cites Families (80)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2973111A (en) * 1958-02-11 1961-02-28 Dempster Brothers Inc Compaction bodies
US6204261B1 (en) 1995-12-20 2001-03-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of interleukin-1β Converting enzyme inhibitors
US5874424A (en) 1995-12-20 1999-02-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of interleukin-1β converting enzyme
US4465679A (en) 1983-01-31 1984-08-14 Usv Pharmaceutical Corporation 1,2-Diaza-3-one compounds, their use in treating hypertension and pharmaceutical compositions thereof
IL72523A (en) 1983-08-12 1988-06-30 Takeda Chemical Industries Ltd 3-amino-4-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzoxazepine derivatives,their production and pharmaceutical compositions containing them
US5055451A (en) 1986-12-22 1991-10-08 Syntex Inc. Aryloxy and arylacyloxy methyl ketones as thiol protease inhibitors
US5158936A (en) 1986-12-22 1992-10-27 Syntex (U.S.A.) Inc. Aryloxy and arylacyloxy methyl ketones as thiol protease inhibitors
US5008245A (en) 1988-10-27 1991-04-16 University Of Kentucky Research Foundation Novel peptidyl carbamate inhibitors of the enzyme elastase
ZA905737B (en) 1989-07-26 1991-05-29 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
NZ235155A (en) 1989-09-11 1993-04-28 Merrell Dow Pharma Peptidase substrates in which the carboxy terminal group has been replaced by a tricarbonyl radical
WO1991015577A1 (en) 1990-04-04 1991-10-17 Black, Roy, A. INTERLEUKIN 1'beta' PROTEASE
US5416013A (en) 1990-04-04 1995-05-16 Sterling Winthrop Inc. Interleukin 1β protease and interleukin 1β protease inhibitors
DK0503561T3 (da) 1991-03-15 1999-07-05 Hoechst Ag Fremgangsmåde til fremstilling af diastereoselektiv reduktiv pinakol-kobling af homochirale alfa-aminoaldehyder
DE69226820T2 (de) * 1991-06-21 1999-05-12 Merck & Co Inc Peptidylderivate als Inhibitoren von Interleukin-1B-konvertierenden Enzymen
JP3190431B2 (ja) 1991-07-01 2001-07-23 三菱化学株式会社 ケトン誘導体
US6348570B1 (en) 1991-08-16 2002-02-19 Merck & Co., Inc. Chromophore containing compounds and their use in determining interleukin-1β convertase activity
DE69229252T2 (de) 1991-08-16 1999-12-16 Merck & Co Inc DNS, welche das Interleukin-1B-Vorläufer-Converting-Enzym kodiert
EP0533226A3 (en) 1991-08-16 1993-08-18 Merck & Co. Inc. Novel chromophore containing compounds
US5278061A (en) 1991-08-16 1994-01-11 Merck & Co., Inc. Affinity chromatography matrix useful in purifying interleukin-1β converting enzyme
WO1993005071A1 (en) 1991-08-30 1993-03-18 Sterling Winthrop Inc. INTERLEUKIN 1β PROTEASE AND INTERLEUKIN 1β PROTEASE INHIBITORS
DE59206778D1 (de) 1991-10-07 1996-08-22 Hoechst Ag Verfahren zur diastereoselektiven reduktiven Pinakol-Kupplung von homochiralen alpha-Aminoaldehyden
GB9123326D0 (en) 1991-11-04 1991-12-18 Sandoz Ltd Improvements in or relating to organic compounds
WO1993012076A1 (en) 1991-12-13 1993-06-24 Corvas International Inc. Reagents for automated synthesis of peptide analogs
EP0547699A1 (en) 1991-12-19 1993-06-23 Merck & Co. Inc. Peptidyl derivatives as inhibitors of interleukin-1B converting enzyme
AU3479593A (en) 1992-01-31 1993-09-01 Merck & Co., Inc. Peptidyl derivatives as inhibitors of interleukin-1beta converting enzyme
DE69320176T2 (de) 1992-02-21 1999-04-08 Merck & Co Inc Peptidylderivate und inhibitoren des interleukin-1-g(b)-konvertierenden enzyms
JPH08500242A (ja) 1992-06-24 1996-01-16 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド インターロイキン１β前駆体の転換酵素をコードするＤＮＡ
JP2602181B2 (ja) 1992-07-31 1997-04-23 ファイザー・インク． 消炎薬としてのペプチジル４−アミノ−２，２−ジフルオロ−３−オクソ−１，６−ヘキサン二酸誘導体
CA2109646C (en) 1992-11-24 2000-03-07 Gaston O. Daumy Para-nitroanilide peptides
EP0618223A3 (en) * 1993-03-08 1996-06-12 Sandoz Ltd Peptides, the release of Interleukin 1-Bêta, useful as anti-inflammatory agents.
CA2122227A1 (en) 1993-04-29 1994-10-30 Roland E. Dolle Peptide analogs as irreversible interleukin-1.beta. protease inhibitors
US5462939A (en) 1993-05-07 1995-10-31 Sterling Winthrop Inc. Peptidic ketones as interleukin-1β-converting enzyme inhibitors
US5411985A (en) 1993-05-17 1995-05-02 Merck & Co., Inc. Gamma-pyrone-3-acetic acid as an inhibitor or interleukin-1 β inventory enzyme
JPH0789951A (ja) 1993-06-03 1995-04-04 Sterling Winthrop Inc インターロイキン−１β転換酵素阻害剤
DE69413167T2 (de) 1993-06-04 1999-05-06 Vertex Pharma Peptid-Phosphinyloxymethyl-Ketonen als Inhibitoren von Interleukin-1 beta-konvertierenden Enzymen
WO1995000160A1 (en) 1993-06-24 1995-01-05 The General Hospital Corporation Programmed cell death genes and proteins
AU7714594A (en) 1993-08-13 1995-03-14 Merck & Co., Inc. Substituted ketone derivatives as inhibitors of interleukin-1beta converting enzyme
DK0653417T3 (da) * 1993-11-11 1998-03-30 Basf Ag P-Hydroxyanilinderivater, fremgangsmåde til deres fremstilling og deres anvendelse til bekæmpelse af skadelige svampe eller skadedyr
US5486623A (en) 1993-12-08 1996-01-23 Prototek, Inc. Cysteine protease inhibitors containing heterocyclic leaving groups
US5714484A (en) 1993-12-08 1998-02-03 Prototek, Inc. α-(1,3-dicarbonylenol ether) methyl ketones as cysteine protease inhibitors
PT752987E (pt) 1994-03-31 2004-03-31 Vertex Pharma Derivados de pirimidinilo como inibidores da interleucina
MX9605196A (es) 1994-04-29 1997-12-31 Sanofi Winthrop Inc Halometilamidas como inhibidores de la proteasa il-1b.
US5492824A (en) 1994-05-12 1996-02-20 Basf Ag Ice and ice-like compositions and methods of making same
US5552400A (en) 1994-06-08 1996-09-03 Sterling Winthrop Inc. Fused-bicyclic lactams as interleukin-1β converting enzyme inhibitors
US5847135A (en) 1994-06-17 1998-12-08 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Inhibitors of interleukin-1β converting enzyme
US6057119A (en) 1994-06-17 2000-05-02 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Crystal structure and mutants of interleukin-1β converting enzyme
US5756466A (en) 1994-06-17 1998-05-26 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of interleukin-1β converting enzyme
US5716929A (en) 1994-06-17 1998-02-10 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of interleukin-1β converting enzyme
US5565430A (en) 1994-08-02 1996-10-15 Sterling Winthrop Inc. Azaaspartic acid analogs as interleukin-1β converting enzyme inhibitors
GB2292149A (en) * 1994-08-09 1996-02-14 Ferring Res Ltd Peptide inhibitors of pro-interleukin-1beta converting enzyme
US5498616A (en) 1994-11-04 1996-03-12 Cephalon, Inc. Cysteine protease and serine protease inhibitors
TW394764B (en) 1995-02-14 2000-06-21 Mitsubishi Chemcal Corp Oxygen-containing heterocyclic derivatives
CA2215211A1 (en) 1995-03-31 1996-10-03 Takeda Chemical Industries, Ltd. Cysteine protease inhibitor
JPH09165360A (ja) * 1995-03-31 1997-06-24 Takeda Chem Ind Ltd システインプロテアーゼ阻害剤
US5798442A (en) 1995-04-21 1998-08-25 Merck Frosst Canada, Inc. Peptidyl derivatives as inhibitors of pro-apoptotic cysteine proteinases
JPH11514345A (ja) 1995-08-31 1999-12-07 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション インターロイキン変換酵素およびアポプトーシス
EP0859779A4 (en) 1995-08-31 2000-04-12 Smithkline Beecham Corp INTERLEUKIN CONVERSION ENZYME AND APOPTOSIS
US5744451A (en) 1995-09-12 1998-04-28 Warner-Lambert Company N-substituted glutamic acid derivatives with interleukin-1 β converting enzyme inhibitory activity
EP0761680A3 (en) 1995-09-12 1999-05-06 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Tetrazole compounds having Interleukin-1beta converting enzyme inhibitory activity
WO1997024339A1 (fr) 1995-12-27 1997-07-10 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Derives de tetrazole et medicaments les contenant a titre d'ingredients actifs
AU3359697A (en) 1996-07-08 1998-02-02 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Bone resorption inhibitors
WO1998004539A1 (fr) 1996-07-29 1998-02-05 Mitsubishi Chemical Corporation Derives heterocycliques oxygenes
IL128940A0 (en) * 1996-09-12 2000-02-17 Idun Pharmaceuticals Inc C-terminal modified (n-substituted)-2-indolyl dipeptides as inhibitors of the ice/ced-3 family of cysteine proteases and pharmaceutical compositions containing them
AU739496B2 (en) 1996-09-12 2001-10-11 Idun Pharmaceuticals, Incorporated Novel tricyclic compounds for the inhibition of the ice/ced-3 protease family of enzymes
US5869519A (en) 1996-12-16 1999-02-09 Idun Pharmaceuticals, Inc. C-terminal modified (n-substituted)-2-indolyl dipeptides as inhibitors of the ICE/ced-3 family of cysteine proteases
ATE310528T1 (de) 1996-09-12 2005-12-15 Idun Pharmaceuticals Inc Hemmung der apoptose unter verwendung von inhibitoren der interleukin-1 beta converting enzym (ice)/ced-3 familie
US5968927A (en) 1996-09-20 1999-10-19 Idun Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic compounds for the inhibition of the ICE/ced-3 protease family of enzymes
US5877197A (en) 1996-12-16 1999-03-02 Karanewsky; Donald S. C-terminal modified (N-substituted)-2-indolyl dipeptides as inhibitors of the ICE/ced-3 family of cysteine proteases
US6184244B1 (en) 1996-12-16 2001-02-06 Idun Pharmaceuticals, Inc. C-terminal modified (N-substituted)-2-indolyl dipeptides as inhibitors of the ICE/ced-3 family of cysteine proteases
US6054487A (en) 1997-03-18 2000-04-25 Basf Aktiengesellschaft Methods and compositions for modulating responsiveness to corticosteroids
HUP9700816A3 (en) 1997-04-28 1999-06-28 Gyogyszerkutato Intezet 3(r)-3-amino-4-carboxy-butiraldehyde derivatives inhibiting release of interleukin-1-beta
US6184210B1 (en) 1997-10-10 2001-02-06 Cytovia, Inc. Dipeptide apoptosis inhibitors and the use thereof
ES2229545T3 (es) * 1997-10-31 2005-04-16 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Materiales no tejidos, rizados y recubrimiento.
JP4594520B2 (ja) * 1998-03-19 2010-12-08 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド カスパーゼのインヒビター
US6197750B1 (en) 1998-07-02 2001-03-06 Idun Pharmaceuticals, Inc. C-terminal modified oxamyl dipeptides as inhibitors of the ICE/ced-3 family of cysteine proteases
US6242422B1 (en) 1998-10-22 2001-06-05 Idun Pharmacueticals, Inc. (Substituted)Acyl dipeptidyl inhibitors of the ice/ced-3 family of cysteine proteases
PE20011350A1 (es) * 2000-05-19 2002-01-15 Vertex Pharma PROFARMACO DE UN INHIBIDOR DE ENZIMA CONVERTIDORA DE INTERLEUCINA-1ß (ICE)
JP2007510931A (ja) 2003-11-10 2007-04-26 バーテックス　ファーマシューティカルズ　インコーポレイテッド Ｉｌ−１８をモニターするための方法
AU2005249503B2 (en) 2003-11-10 2011-08-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated ICE inhibitors for the treatment of autoinflammatory diseases
WO2005085236A2 (en) 2004-02-27 2005-09-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitors and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
IL138469A0 (en) 2001-10-31
BG104863A (en) 2001-04-30
HU227920B1 (en) 2012-06-28
UA74133C2 (uk) 2005-11-15
IL206621A0 (en) 2010-12-30
JP2006206600A (ja) 2006-08-10
KR100928878B1 (ko) 2009-11-30
ATE410439T1 (de) 2008-10-15
PT1064298E (pt) 2009-01-02
EP1064298A2 (en) 2001-01-03
SK13822000A3 (sk) 2001-04-09
JP4594520B2 (ja) 2010-12-08
HK1035733A1 (en) 2001-12-07
AU769033B2 (en) 2004-01-15
JP2010241822A (ja) 2010-10-28
CZ302281B6 (cs) 2011-01-26
PL204619B1 (pl) 2010-01-29
RU2274642C2 (ru) 2006-04-20
AR019011A1 (es) 2001-12-26
EP2261234A2 (en) 2010-12-15
HUP0103575A3 (en) 2002-10-28
BRPI9909660B8 (pt) 2021-05-25
US8691848B2 (en) 2014-04-08
NZ528282A (en) 2005-05-27
EP2011800A2 (en) 2009-01-07
JP2002506878A (ja) 2002-03-05
AP2000001919A0 (en) 2000-09-30
ZA200004652B (en) 2002-04-24
WO1999047545A2 (en) 1999-09-23
DK1064298T3 (da) 2009-01-19
CA2324226C (en) 2012-06-05
KR100898094B1 (ko) 2009-05-18
IL138469A (en) 2010-11-30
US6531474B1 (en) 2003-03-11
IS5622A (is) 2000-09-08
CN1321129C (zh) 2007-06-13
EP2261233A3 (en) 2011-04-20
KR20080020703A (ko) 2008-03-05
NO20004546D0 (no) 2000-09-12
EP2261232A2 (en) 2010-12-15
GEP20043163B (en) 2004-01-26
ID27002A (id) 2001-02-22
TWI243828B (en) 2005-11-21
CN1323314A (zh) 2001-11-21
NO20004546L (no) 2000-11-09
US20090048226A1 (en) 2009-02-19
BR9909660A (pt) 2000-11-21
DE69939689D1 (de) 2008-11-20
US20030232986A1 (en) 2003-12-18
EP2011800A3 (en) 2009-06-24
SI1064298T1 (sl) 2009-02-28
WO1999047545A3 (en) 1999-11-25
CZ20003409A3 (cs) 2001-01-17
PL343611A1 (en) 2001-08-27
ES2315010T3 (es) 2009-03-16
SK286736B6 (sk) 2009-04-06
EP1064298B1 (en) 2008-10-08
EP2261233A2 (en) 2010-12-15
HUP0103575A2 (hu) 2002-02-28
EP2261235A3 (en) 2011-04-20
CA2324226A1 (en) 1999-09-23
KR20010042038A (ko) 2001-05-25
US7358273B2 (en) 2008-04-15
EP2261235A2 (en) 2010-12-15
TR200103406T2 (tr) 2002-06-21
UA96113C2 (en) 2011-10-10
NZ506963A (en) 2003-10-31
EP2261234A3 (en) 2011-04-20
EP2261232A3 (en) 2011-04-20
AU3098699A (en) 1999-10-11
BRPI9909660B1 (pt) 2018-09-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2324226C (en) Inhibitors of caspases
AU735075B2 (en) Inhibitors of interleukin-1beta converting enzyme
NO324354B1 (no) ICE-inhibitorforbindelser, farmasoytisk sammensetning inneholdende disse og deres anvendelse.
US6426413B1 (en) Inhibitors of caspases
AU2003255217A1 (en) Inhibitors of Caspases
AU2007200251A1 (en) Inhibitors of Caspases
MXPA00009162A (en) Inhibitors of caspases
BRPI9917881B1 (pt) compostos inibidores de caspases, composição farmacêutica e uso de ditos compostos

Legal Events

Date Code Title Description
MK1K Patent expired