CS204989B2 - Method of producing cephalosporin antibiotics - Google Patents

Description

ČESKOSLOVENSKA SOCIALISTICKÁ

REPUBLIKA

(19J

POPIS VYNÁLEZU

K PATENTU 204989 (Π) (B2)

(22) Přihlášeno 20 08 74 (21) (PV 5916-78) (32) (31) (33) Právo přednosti od 21 08 73(39645/73) Velká Británie (40) Zveřejněno 31 07 30 (51) Int. Cl.3C 07 D 501/60C 07 D 501/04//A 81 K 31/545

ÚŘAD PRO VYNÁLEZYA OBJEVY (45) Vydáno 15 12 83 (72) COOX MARIIN CHRISTOPHER, LIVERPOOL, GREGORY GORDON IAN,Autor vynálezu CHALFONT ST. PETER a BRADSHAW JANICE, HARROW (Velká

Británie) (73)

Majitel patentu GLAXO OPERATIONS UK LIMITED, GREENFORD (Velká Británie) (54) Způsob výroby cefalosporinových antibiotik 1

Vynález se týká způsobu výroby antibio-tik cefalosporinové řady.

Tyto sloučeniny jsou v průběhu přihláš-ky pojmenovány podle nomenklatury s po-užitím zkratky „cefam” podle j. Am. Chem.Soc., 1962, 84, 3400, přičemž termín „če-řeni” se vztahuje na základní cefamovoustrukturu s jednou dvojnou vazbou.

Je známa řada cefalosporinových slouče-nin s různým stupněm antibakteriální účin-nosti, přičemž tyto sloučeniny mají dvojnouvazbu v poloze 3 a obvykle jsou v poloze 3substituovány methylovou skupinou nebosubstituovanou methylovou skupinou a v po-loze 7/3-acylamidovou skupinou. Je dobřeznámo, že antibiotické vlastnosti určitýchkyselin 3-cefem-4-karboxylových jsou pře-vážně určovány povahou substituentů v po-loze 7β a v poloze 3. Byly vyvíjeny snahynalézt vhodné kombinace těchto skupin,které by dávaly vznik sloučeninám s dob-rými antibiotickými vlastnostmi.

Cefalosporinová antibiotika mají široképoužití u lidí i u zvířat, například při léčběonemocnění, která jsou způsobena bakterie-mi odolnými k jiným antibiotikům, napří-klad penicilinovým sloučeninám a k léčběnemocných, přecitlivělých na penicilín, čas-to je žádoucí užít cefalosporin, účinný pro-ti grampozitivním i gramnegativním mik- 2 roorganismům, přičemž je stále nutno na-lézat cefalosporinová antibiotika s širším aširším spektrem.

Praktické použití řady cefalosporinovýchantibiotik je omezeno poměrně vysokou cit-livostí na /3-laktamázy různých bakterií.Další nevýhodou cefalosporinových antibio-tik je, že podléhají rozkladu in vivo. Řadaznámých antibiotik tohoto typu je deakti-vována tímto způsobem, často velmi rychle,převážně působením enzymů, například es-teráz lidského nebo živočišného organismu.

Další potíž s mnoha cefalosporiny pro te-rapeutické užití spočívá v tom, že podléha-jí degradaci in vivo. Tak byl zjištěn u znač-ného počtu známých cefalosporinových an-tibiotik nedostatek v tom, že jsou po po-dání, často rychle, desaktivovány enzymy(například esterázami).

Bylo zjištěno, že určitá skupina antibio-tik se zvláštní kombinací 7/3-acylamidosku-pin a substituentu v poloze 3 má širokéspektrum účinnosti a zároveň velkou stá-lost proti (3-laktamázám i dobrou stálost vorganismu. Tyto sloučeniny mají jako 7-acyl-amidovou skupinu 2-aryl-2-(etherifikovanáoxyiminoskupina) acetamidoskupinu, kteráse nachází v podstatě ve formě syn-isome-ru, přičemž v poloze 3 se nachází karba-moyloxymethylová skupina. 204989 204989 4

R«NCO

Vynálezem je tedy způsob výroby anti-biotik obecného vzorce I (III) OR*

kde R1 znamená furyl, thienyl nebo fenyl, R2 znamená alkyl o 1 až 4 atomech uhlí-ku, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku ne-bo fenyl,

Ra znamená vodík nebo esterotvornouskupinu, poskytující fyziologicky neškodnéestery, ve formě syn-isomeru nebo ve směsi syn--isomeru a anti-isomeru s obsahem alespoň90 o/o syn-isomeru, jakož i jejich fyziolo-gicky neškodných solí v případě, kde Raznamená vodík, nebo 1-oxidů.

Nejvýhodnějšími sloučeninami podle vy-nálezu jsou syn-isomery obecného vzorce I,v podstatě prosté odpovídajících anti-iso-merů.

Způsob výroby se podle tohoto vynálezuprovádí tak, že se uvádí při teplotě —50až +50 °C do reakce sloučenina obecnéhovzorce II

kde

Acyl znamená skupinuRi . co . co— N. \ OR2 ve které R1 a R2 mají svrchu uvedený význam, B znamená S nebo S -> O, R11 znamená vodík nebo skupinu bloku-jící karboxyl, jako například difenylmethylnebo terc.butyl, přerušovaná čára mezi polohami 2, 3 a 4 molekuly značí, že sloučenina může být 2- -cefemovou nebo 3-cefemovou sloučeninou, s karbamoylačním činidlem, kterým je iso-

kyanát obecného vzorce III kde R13 značí labilní skupinu, jako napříkladmono-, di- nebo trichloracetyl, nebo chlor-sulfonyl, provede se převedení A2-isomeru na poža-dovaný AMsomer a/nebo se odstraní skupi-na, blokující karboxyl nebo N-ochrannáskupina, a/nebo se redukuje sulfoxid cefa-losporinu na odpovídající sulfid, a poslézese izoluje sloučenina obecného vzorce I,popřípadě po oddělení syn-isomeru a anti--isomeru a popřípadě po převedení slouče-niny obecného vzorce I na její 1-oxid (vpřípadě, kde Ra značí vodík) nebo na jejífyziologicky neškodné soli, nebo estery.

Způsob podle vynálezu se výhodně pro-vádí tak, že se sloučenina obecného vzor-ce I nebo její fyziologicky neškodná sůl(v případě, že Ra je vodík) nebo její 1-oxidse izoluje ve formě syn-isomeru, prostéhopřítomnosti anti-isomeru. K výrobě výhodných sloučenin obecnéhovzorce I, kde R1 značí 2-furyl, se jako vý-chozí látky používá sloučeniny vzorce II,kde R1 znamená 2-furyl. Při výrobě jiných výhodných sloučeninobecného vzorce I, kde R2 znamená ethyl,terc.butyl, cyklopentyl nebo fenyl, se ob-dobně postupuje tak, že jako výchozí látkyse používá sloučeniny obecného vzorce II,kde R2 má zmíněný výše uvedený význam.

Sloučeniny podle vynálezu se nacházejív syn(cis)isomerní formě vzhledem ke kon-figuraci skupiny —OR2 ke karboxamidosku-pině. V popise tohoto vynálezu znamenátedy konfigurace syn tuto strukturu: R1 . C . CONH—

N \ OR2 .

Konfigurace syn je tímto způsobem vy-značena, podle publikace Ahmad a Spenserv Can. J. Chem. 1961, 39, 1340.

Solemi sloučenin obecného vzorce I mo-hou, být soli s anorganickými zásadami, na-příklad alkalickými kovy, jako sodíkem adraslíkem, kovy alkalických zemin,, jakovápníkem nebo soli s organickými zásada-mi, jako prokainem, fenylethylbenzylami-nem, dibenzylethylendiaminem, ethanolami-nem, diethanolaminem, triethanolaminem aN-methylglukosaminem. Soli mohou být ta-ké ve formě resinátů, například s· polysty-rénovou pryskyřicí nebo kopolymerem po-lystyrenu a divinylbenzenu s příčnými můst-ky a s obsahem aminoskupin nebo kvartér -ních aminoskupin. V případě, že R1 ve vzorci I znamená fu- ryl, může jít o 2-furyl nebo 3-furyl, v pří- padě, že jde o thienyl, může jít o 2-thienyl 204989

S nebo 3-thienyl. Výhodným významem R1 je2-furyl.

Jak již bylo uvedeno, znamená substitu-ent R2 ve vzorci I alkyl o 1 až 4 atomechuhlíku, například methyl, ethyl nebo terc.-butyl, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku,například cyklopentyl nebo fenyl.

Sloučeniny podle vynálezu mají cennévlastnosti, a to vysokou účinnost proti vel-kému množství grampozitivních a gramne-gativních mikroorganismů a současně vy-sokou stálost proti /3-laktamázám různýchgramnegativních organismů a dobrou stá-lost in vivo, zejména v případě působeníesteráz.

Sloučeniny podle vynálezu je možno vý-hodně užít k léčbě různých onemocnění li-dí i zvířat, způsobených bakteriemi. Důležitou sloučeninou podle vynálezu jekyselina [6R,7R) -3-karbamoyloxymethyl-7-

- [ 2- (f ur-2-yl) -2-methoxyiminoacetamido ] --3-cefem-4-karboxylová ve formě syn-iso-meru, kterou lze vyjádřit obecným vzor-cem IV

r Η H jL-C. CONH —j—-kSxi XOCH3 O COOH flV) obvykle ve formě soli s alkalickým kovem,zejména ve formě sodné soli. Tato slou-čenina je účinná na velkou řadu gramne-gativních a grampozitivních mikroorganis-mů, například Staphylococcus aureus, Strep-tococcus pyogenes a Streptococcus vilidans,Diplococcus pneumoniae, Haemophilus in-fluenzae, Neisseria a Clostridia species,Escherichia coli, Klebsiella, Próteus a Ente-robacter species, jak bylo prokázáno in vitroi in vivo. Sloučeniny mají in vitro vysokouúčinnost zejména proti Haemophilus influ-enzae, Neisseria gonorrhoeae a Neisseriameningitidis. Sloučenina je velmi stálá pro-ti β-laktamázám řady gramnegativních or-ganismů, jak bylo prokázáno například invitro proti enzymům různých kmenů Esche-richia, Enterobacter a Klebsiella. Sloučeni-na je odolná k působení esteráz savců atedy stálá v lidských i v živočišných orga-nismech, jak je možno prokázat vysokouhladinou nezměněné sloučeniny v moči. Mi-moto dochází ke vzniku vysokých hladintěchto sloučenin v séru po parenterálnímpodání u lidí i u zvířat, přičemž slouče-nina se málo váže na sérum. Užití vysoce rozpustných zásaditých so-lí, například sodných solí, je výhodné, pro-tože tyto soli se velmi rychle rozmístí pocelém těle po podání.

Bylo zjištěno, že (6R,7R)-3-karbamoyloxy- methyl-7- [ 2- (fur-2-yl) -2-methoxyiminoacet- amido ]-3-cefem-4-karboxylát sodný ve for- mě syn-isomeru se vyskytuje v celé řaděrůzných krystalických forem, včetně solvá-tů, přičemž všechny tyto soli spadají dooboru vynálezu.

Sodná sůl se obvykle vyrábí tak, že seroztok sloučeniny obecného vzorce IV uve-de v reakci v polárním rozpouštědle, jakodimethylacetamidu, ve směsi těchto rozpouš-tědel, jako ve směsi dimethylacetamidu aacetonu nebo dimethylamidu a formamidu,nebo v polárních směsích vody a organic-kých rozpouštědel, například ve směsi vo-dy a acetonu s malým molárním přebyt-kem 2-ethylhexanoátu sodného, a to ve for-mě roztoku ve vhodném alkoholu, jakoethanolu, v ketonu, jako acetonu, v chlo-rovaném uhlovodíku, jako methylenchlori-du, v esteru, jako ethylacetátu, nebo vetheru, jako dioxanu, obvykle při teplotěmístnosti a vysrážená sůl se oddělí po pří-padném zchlazení roztoku, například na 4 °C. V případě, že se užije v podstatě bezvo-dých rozpouštědel, získá se forma I (6R,-7R) -3-kar bamoyloxymethyl-7- [ 2- [f ur-2-yl) --2-methoxyiminoacetamido ] -3-cef em-4-kar-boxylátu sodného ve formě syn-isomeru.Tento materiál obsahuje přibližně 1,5 %vody. V případě, že rozpouštědlo obsahujevíce než 2 °/o vody, je výsledkem reakcesůl formy II, která také obsahuje přibliž-ně 2 % vody. V případě, že rozpouštědloobsahuje více než 60 % dioxanu, získá sesůl formy III, tento materiál je solvátemdioxanu s obsahem přibližně 1 mol dioxa-nu. Formu II je možno získat také tak, žese užije rozpouštědla s obsahem vody přiteplotě 60 až 80 °C. Krystalizací téže slou-čeniny z lyofilizované formy v příslušnémbezvodém, vodu obsahujícím nebo dioxanobsahujícím rozpouštědle je rovněž možnozískat formu I, II nebo III. V případě, že se forma I vystaví působe-ní vodních par, například při relativní vlh-kosti 75 %, absorbuje sůl další množstvívody a její krystalická forma se mění naformu, IV, která obsahuje přibližně 4 %vody, tj. přibližně 1 mol a jde tedy prav-děpodobně o hydrát. Tato forma je rever-zibilní, takže formu IV je možno převéstzpět na formu I, například sušením ve va-kuu kysličníkem fosforečným. Forma IIneabsorbuje další množství vody, lze ji všakpřevést na formu I zahříváním suspenzeformy II ve vroucím methanolu.

Formu II je možno vysrážet ve forměgelu, který je pak možno sušit ve vakuu,čímž se získá pevná látka, která má velmivysokou hustotu, je velmi málo krystalic-ká nebo je amorfní. Krystalickou formu IIIje však možno také získat tak, že se navodný roztok sodné soli působí velkým pře-bytkem [například 8 objemů) dioxanu, po-případě za přítomnosti malého množstvíethanolu a pak se oddělí výsledné bílé jeh-ličkovité krystalky po případném zchlaze-ní na 4 °C, po promytí produktu dioxanem 204989 a tyto krystalky se suší například ve va-kuu při 20 °C.

Forma III je hygroskopická a při vysta-vení vlivu vodních par například při vlh-kosti 75 % ztrácí tato forma dioxan a mě-ní se na formu IV, kterou je pak možnosušit, například kysličníkem fosforečnýmna formu I. V případě, že se tímto způso-bem zpracovává krystalická forma III, krys-talická forma se nemění. Formu III je mož- Čtyři formy sodné soli (6R,7R)-3-karba-moy loxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-) -2-methoxyimi-noacetamido ] cef-3-em-4-karboxylátu (syn- -isomer), tak, jak byly svrchu popsány, by-ly charakterizovány v rtg záření ve forměprášku (d-vzdálenosti a intenzity) a spek-trem v infračerveném světle:

Rentgenoskopické hodnoty práškovýchvzorků:

no převést na formu I zahříváním v horkémmethanolu, pak dojde ke ztrátě krystalické Kamera: Debye-Scherrer, rádius 114,6 mmzáření: měď Ka = 1,5418 10~10 mintenzita (I) při vizuálním srovnání s kalib-rovaným standardem: I formy v případě,krystalické formě Forma I d že forma III byla v této užita. I d 8,33 80 3,05 4 7,44 4 2,93 14 (široký) 6,85 45 2,72 8 špatně oddělený 6,38 5 2,69 10 špatně oddělený 5,86 4 2,57 9 5,36 4 2,47 6 4,82 100 2,40 10 4,56 35 2,35 10 4,36 6 2,26 4 4,19 40 2,20 3 3,95 26 2,11 8 (široký) 3,82 24 2,04 3 3,62 28 1,94 4 3,47 28 1,89 5 3,32 10 1,82 6 (široký) 3,19 10 1,77 2 Forma II d I d I 8,78 60 3,49 14 7,81 9 3,07 6 (široký) 6,65 25 2,91 8 4,68 100 (široký) 2,77 6 4,45 10 2,32 3 (široký) 4,20 10 2,19 2 3,76 20 (široký) 2,08 2 Forma III d I d I 14,98 60 4,29 20 12,95 40 4,16 100 10,16 20 3,81 25 8,23 45 3,60 20 7,52 5 3,47 5 6,61 65 3,32 10 6,08 3 3,26 30 5,57 20 3,13 17 4,98 40 2,43 10 4,73 60 2,15 15 (široký) (široký) 204989

Forma IV

IQ

d I

d I 8,85 70 7,80 6 7,15 25 6,01 20 5,06 18 4,65 100 4,30 25 4,0.1 25 IR spektrum Spektrometr — Perkin-Elmer 521, oblast Forma I 3520 w +1590 s 1262 m 3460 m 1556 m 1248 m 3370 m 1534 s 1170 m 3265 s 1480 m 1152 m 1770 sh 1410 s 1134 w 1752 s 1400 s 1112 m 1706 s 1338 s 1076 m 1660 s 1328 s 1054 sh 1620 s 1284 m +1042 s Forma II 3526 m 1544 s 3492 w 1478 m +3364 m 1412 s 3250 m 1393 s 1758 s 1332 s 1695 s 1284 m 1665 s 1268 m 1642 sh 1240 m 1624 s 1172 m Forma III 3465 m 1532 s 3415 m 1482 m 3345 m 1412 s 3275 m 1395 s 3200 m 1326 s 1780 s 1285 m 1702 s 1260 m 1660 s 1230 m 1632 m 1225 m 1618 s 1196 w 1552 m 1180 m Forma IV 3585 w 1594 s 1264 m 3520 w 1555 m 1240 m 3370 m 1540 m 1172 w +3260 s 1478 m 1152 m 1758 s 1410 s 1114 w 1712 s 1400 s 1078 m 1664 s 1330 s 1058 m 1620 s 1285 m 1042 m 3,75 35 3,10 1 2,93 4 2,76 12 2,62 1 2,41 2 2,30 3 4000—650 cm- 1 spektra zaznamenána v nu jolovém mulu (pruhy pro nujol byly vylou ceny) 1004 m 754 m 978 m918 w882 s878 sh838 w814 w790 w778 w 1152 m 920 w 1142 m 882 m 1112 m 878 w 1080 m 840 w 1058 m 818 w +1045 m 792 w 1005 m 752 m 980 m 954 w 1155 m 820 w +1124 s 800 w 1078 m 790 w +1058 s 768 m 1048 s 748 m 1014 m 985 m 938 w 888 m 878 s 836 w 1008 m 788 w 980 m 752 m 956 w 920 w 882 m 878 w 838 w 818 w 11 12 s =silný sh = hrb m = střední w = slabý -j- = pruhy, charakteristické, pro určitoukrystalickou formu V případě, že sloučenina I má být pro ně-které použití přítomna ve formě nerozpust-né soli, je možno tuto sůl připravit běžnýmzpůsobem, například reakcí s příslušnýmaminem.

Ve sloučenině obecného vzorce II uvede-ném výše R11 znamená atom vodíku neboskupinu blokující karboxyl, jako zbytek ali-fatického nebo aralifatického alkoholu tvo-řícího ester, fenolu, silanolu nebo stanna-nolu nebo symetrickou nebo smíšenou an-hydridovou skupinu, odvozenou od přísluš-né kyseliny. Výše uvedené fyziologicky neškodné deri-váty karboxylových kyselin obecného vzor-ce 1 (v případě, kde Ra je vodík) je možnovyrobit jakýmkoli známým způsobem. Solise zásadami je možno vytvořit například re-akcí cefalosporinové kyseliny s 2-ethylhe-xanoátem sodným nebo draselným. Biologic-ky přijatelné estery je možno získat použi-tím běžných esterifikačních činidel. 1-oxi-dy je možno získat tak, že se na odpovídají-cí sulfidy působí oxidačním činidlem, napří-klad perkyselinou jako kyselinou rnetajo-distou, peroctovou, monoperftalovou nebon-chlorperbenzoovou, terc.butylhypochlori-deim, například za přítomnosti slabé zásadyjako pyridinu.

Toto karbamoylační činidlo obecnéhovzorce III slouží k vytváření (v poloze 3 ce-falosporinové sloučeniny) N-ochranné kar-bamoyloxymethylové skupiny obecnéhovzorce —CH2O.CO.NHRi3 kde R13 má svrchu uvedený význam, a tuto skupinu je pak možno převést na žá-danou nesubstituovanou 3-karbamoyloxyme-thylovou skupinu odštěpení skupiny R13, na-příklad hydrolýzou. Snadno odštěpitelnýmiskupinami ve významu R13 jsou napříkladchlorsulfonyl, bromsulfonyl, arylalkylovéskupiny jako benzyl, p-methoxybenzyl a di-fenylmethyl, terc.butyl, halogenované nižšíalkanoylové skupiny jako dichloracetyl atrichloracetyl a halogenované nižší alkoxy-karbonylové skupiny jako 2,2,2-trichloretho-xykarbonyl. Skupiny R13 tohoto typu s vý-jimkou arylalkylových skupin jako difenyl-methylové skupiny je obvykle možno odště-pit kyselou nebo zásaditou hydrolýzou, na-příklad zásaditou hydrolýzou za použitíhydrogenuhličitanu sodného. Halogenovanéskupiny jako chlorsulfonyl, trichloracetyl a2,2,2-trichlorethoxykarbonyl je rovněž mož-no štěpit redukcí, kdežto chloracetyl je možno odštěpit působením thloamidů jakomočoviny. Arylalkylové skupiny, jako dife-nylmethyl je možno odštěpit kyselinou, na-příklad silnou organickou kyselinou jakokyselinou trifluoroctovou.

Karbamoylační činidlo vzorce III účelněse používá v přebytku (například alespoň1,1 mol vzhledem ke sloučenině vzorce II).Karbamoylaci je možno usnadnit přítomnos-tí báze, například terciární organické báze,jako nižšího trialkylaminu, (například tri-ethylaminu) nebo použitím kyseliny vzorceII ve formě soli s alkalickým kovem (na-příklad sodíkem), ačkoli takové usnadňová-ní nemusí být nutné v případě, že se užijeaktivnějších isokyanátů, například slouče-nin vzorce III, v nichž R13 znamená skupi-nu, silně odebírající elektrony, jako je na-příklad chlorsulfonyl nebo trichloracetyl.Karbamoylační reakce volných kyselin vzor-ce II se přebytkem isokyanátů vzorce III,kde R13 je chlorsulfonyl nebo trichlorace-tyl jsou tedy zvláště výhodné pro svou jed-noduchost, protože v tomto případě nenínutné dočasně blokovat a pak odblokovatkarboxylovou skupinu v poloze 4 cefalospo-rinového jádra a také proto, že je možno vel-mi snadno odstranit skupinu R13 ve výsled-ném cefalosporinu, například hydrolýzou vevodném roztoku hydrogenuhličitanu sodné-ho.

Je třeba uvést, že může být žádoucí u-držet nebo i zavést N-substituující skupinuR13 v průběhu přeměny na meziprodukty 3--karbamoyloxymethylových sloučenin, pro-tože pak nedochází k nežádoucím vedlej-ším reakcím, zahrnujícím karbamoyloxyme-thylovou skupinu. 3-hydroxymethylové výchozí látky propoužití k provádění způsobu podle vynálezuje možno vyrobit způsobem, popsaným na-příklad v britském patentu č. 1 121 308 abelgickém patentu č. 783 449.

Jako blokující skupina na 7-karboxylovéskupině sloučenin obecného vzorce II je žá-doucí skupina, kterou je možno pozdějisnadno odstranit, s výhodou skupina o 1 až20 atomech uhlíku, například některá z dob-ře známých skupin, k tomuto účelu, tak jakbyly uvedeny například ve svrchu uvede-ném belgickém patentu č. 783 449. Výhodný-mi skupinami jsou například nižší arylalko-xykarbonylové skupiny jako p-methoxyben-zyloxykarbonylová, p-nitrobenzyloxykarbo-nylová a difenylmethoxykarbonylová, nižšíalkoxykarbonylové skupiny jako terc.buto-xykarbonylová a nižší halogenalkoxykarbo-nylové skupiny, jako 2,2,2-trichlorethoxy-karbonylová skupina. Tuto skupinu je pakmožno odstranit známým způsobem, napří-klad kyselou, zásaditou nebo enzymatickykatalyzovanou hydrolýzou. V případě, že se na konci reakce žíská sulfoxid sloučeniny obecného vzorce I, je možno provést reakci na odpovídající sulfid například tak, že se redukuje odpovídající acyloxysulfoniová sůl nebo alkyloxysulfo- 204989 13 14 niová sůl, připravená přímo v reakční smě-si reakcí například s acetylchloridem v pří-padě acetoxysulfoniové soli, přičemž tatoredukce se provádí například dithionidemsodíku nebo jodidovým iontem, napříkladroztokem jodidu draselného v rozpouštědle,mísitelném s vodou, jako jsou kyselina oc-tová, tetrahydrofuran, dioxan, dimethyl-formamid nebo dimethylacetamid. Reakcese provádí při teplotě —20 až +50 °C. V případě, že reakčním produktem je es-ter kyseliny 2-cefem-4-karboxylové, je mož-no získat žádanou 2-cefemovou sloučeninupůsobením zásady.

Antibiotické sloučeniny získané podle vy-nálezu je možno zpracovávat na farmaceu-tické přípravky pro vhodné způsoby podá-vání způsobem obdobným jako u jiných an-tibiotik; ze sloučenin vyráběných podle vy-nálezu je zejména možno zpracovávat slou-čeniny obecného vzorce I nebo jejich fyzio-logicky neškodné soli (v případech, značí-liRa v obecném vzorci I vodík) nebo uprave-né pro použití v humánní nebo veterinárnímedicíně. K podávání se jich užívá spolu sběžnými farmaceutickými nosiči nebo po-mocnými látkami.

Antibiotika podle vynálezu mohou být proinjekční podání v ampulích nebo ve většíchnádobách s konzervačním činidlem. Můžejít o suspenze, roztoky nebo emulze v olejinebo ve vodném prostředí za případnéhopoužití činidel, usnadňujících vznik suspen-ze, stabilizátorů a/nebo dispergačních čini-del. Účinná látka může mít také formu práš-ku, který se rozpouští těsně před podánímnapříklad ve sterilní, bezpyrogenní vodě.

Ve veterinárním lékařství může napříkladjít i o intramamární přípravky (pro podánído mléčné žlázy) buď v dlouhodobě neborychle působících vehikulech. Přípravky obvykle obsahují minimálně 0,1procenta, například 0,1 až 99 %, s výhodou10 až 60 % účinné látky v závislosti na způ-sobu podávání. Jednotlivá dávka obsahujes výhodou 50 až 1500 mg účinné látky. Udospělých lidí se podává výhodně 500 až4000 mg denně, v závislosti na frekvenci po-dávání.

Sloučeniny podle vynálezu je také možnopodávat v kombinaci s jinými kompatibilní-mi léčivy, jako antibiotiky, například peni-ciliny, jinými cefalosporiny nebo tetracykli- ny.

Vynález bude osvětlen řadou následují-cích příkladů. Všechny teploty jsou uvede-ny ve stupních Celsia, teploty tání byly sta-noveny na Kofíerově bloku. Příklad 1

Syn-isomer kyseliny (6R,7R)-3- -karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) -2- -methoxyiminoacetamido]-3-cef em-4- -karboxylové

Metoda (i) 750 ml acetonu se zchladí na 0 °C a půso-bí se na něj 28,8 ml trichloracetylisokyaná-tu (250 mmol) a výsledný roztok se znovuzchladí. Přidá se 45,6 g (120 mmol) syn-iso-meru kyseliny (6R,7R)-7-(2-(fur-2-yl)-2-me-thoxyiminoacetamido ] -3-hydroxymethyl--3-cefem-4-karboxylové k promíchanému i-sokyanátovému roztoku po částech v 5 mi-nutových intervalech tak, aby teplota re-akce nepřekročila 6 °C. Žlutý roztok se dal-ších 15 minut míchá a přidá se 4,5 ml me-thanolu. Roztok se koncentruje na 60 ml akoncentrovaný roztok se rozpustí v 750 mlmethanolu. Přidá se hydrogenuhličitan sod-ný (45,3 g, 540 mmol) ve vodě (600 ml),což je sledováno přidáním aktivního uhlí(4,5 g) a vzniklá suspenze se míchá 2 ho-diny při teplotě místnosti. Aktivní uhlí seodstraní filtrací přes infusoriovou hlinku,pH světle žlutého filtrátu se upraví zředě-nou kyselinou chlorovodíkovou na pH 4,5.Roztok se za sníženého tlaku koncentrujena poloviční objem a přidá se stejný díl vo-dy. Zředěnou kyselinou chlorovodíkovou sepH upraví na 2,0 a produkt se izoluje filt-rací, promyje se vodou (3X 150 ml) a sušípři 40 °C ve vakuu 16 hodin. Získá se výsled-ná sloučenina (37,46 g, 74,5%), [ía]D20+63,7° (c 1,0, 0,2 M pH 7 fosfátový pufr),Amax (pH 6 fosfátový pufr) 274 nm (ε17 600 ). Údaje získané infračervenou a NMR-spek-troskopií potvrzují strukturu výsledné slou-čeniny.

Metoda (ii)

Na kyselinu tvořenou syn-isomerem(6R,7R )-7-(2-( fur-2-yl) -2-methoxyimino-acetamido) ~3-hydroxymethyl ] -3-cef em-4--karboxylové (3,81 g, 9,55 mmol) ve směsi70 ml dichlormethanu a 25 ml tetrahydrofu-ranu se při teplotě 5 °C působí dichlorace-tylisokyanátem (2,6 ml, 25 mmol). S reakč-ní směsí se pak zachází stejným způsobemjako v metodě (i) a získá se výsledná slou-čenina (3,36 g, 83,0%), [α]η2θ +63°, Arnux 273,5 nm (ε 17 800) s podobným infračerve-ným a NMR-spektrem jako produkt vzniklýpodle metody (i).

Metoda (iii)

Na kyselinu tvořenou syn-isomerem kyse-liny (6R,7R) -7- [ 2- (f ur-2-yl) -2-methoxyimi- noacetamido j -3-hydroxymethyl-3-cef em--4-karboxylové (19,05 g, 50 mmol) v bezvo-dém acetonitrilu (250 ml) se působí při tep-lotě mezi 5 až 10 °C chlorsulfonylisokyaná-tem (6,33 g, 75 mmol] v acetonitrilu (80mililitrů).

Reakční směs se míchá při teplotě mezi 0 až 5 °C 10 minut a přidá se 50 ml vody.

Směs se míchá při asi 20 °C a po 20 minu- tách se oddělí bílá krystalická tuhá látka. 204989 15 16

Odpaření a filtrace poskytují výslednousloučeninu, (18,17 g, 85,7%, [ ce ] D20 +62,5°,Amax 273,5 nm (ε 17 820), s infračerveným aNMR-spektrem podobným spektru produktuzískaném podle metody (i). Druhý výtěžek(1,88 g, 8,6 %) produktu s podobnými kon-stantami se získá odpařením materské te-kutiny. Příklad 2

Forma I syn-isomeru (6R,7R)-3- -karbamoyloxymethyl-7-[2-(fur-2-yl)-2- -methoxyiminoacetamido ]-3-cefem-4- -karboxylátu sodnéhoMetoda (i)

Na 100,0 g syn-isomeru kyseliny (6R,7R)--3-karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (fur-2-yl) -2--methoxyiminoacetamido ] -3-cef em-4--karboxylové ve směsi N,N-dimethylacetami-du (400 ml) s 1 litrem acetonu se působí 40gramy 2-ethylhexanoátem sodným ve 200 mlacetonu. Směs se zakládá a třepe se při tep-lotě okolí po 1,25 hodiny. Produkt se odfilt-ruje, promyje se acetonem (500 ml) a pakse vysráží acetonem (3X 300 ml) a nako-nec se vysráží etherem a získá se výslednásloučenina (101,4 g, 92,5%) obsahující poekvilibraci v atmosféře 0,65 molekvivalentůvody. Produkt má [w]D20 +61° (c 0,5, pH 4,5 fosfátový pufr) a Amax 273 nm 1 % E lcZ^ 412 (H2O). Údaje infračervené a NMR-spektroskopiepotvrzují strukturu výsledné sloučeniny ainfračervené spektrum indikuje, že slouče-nina je solí formy I.

Metoda (11)

Způsob podle metody (i) se opakuje s vý-jimkou, že cefalosporinová kyselina se zpo-čátku rozpustí ve směsi N,N‘-dimethylacet-amidu s ethanolem denaturovaným metha-nolem namísto směsi N,N-dimethylacetami-du s acetonem a získá se výsledná slouče-nina (80%) s vlastnostmi podobnými pro-duktu získanému způsobem podle metody(i). Infračervené spektrum indikuje, žesloučenina je solí formy I.

Metoda (iii) 4,24 g (10 mmol) syn-isomeru kyseliny(6R,7R) -3-karbamoyloxymethyl-7- (2- (fur--2-yl) -2-methoxyiminoacetamido ] -3--cefem-4-karboxylové se rozpustí v N,N-di-methylacetamidu (20 ml), který se sušil mo-lekulárním sítem (Lindě 4A) po 24 hodin.K němu se přidá roztok 2-ethylhexanoátufosforečným) v ethylacetátu (80 ml), kterýsodného (2,0 g, 12 mmol, rekrystalizované-ho z dioxanu a sušeného nad kysličníkembyl zbaven vody molekulárním sítem (Lin-dě 4A) sušením po 24 hodin. Roztok se v u- zavřené nádobě promíchává asi 15 minut,dokud nezačne krystalizace a pak se při 4°Celsia jednu hodinu chladí. Produkt se od-filtruje, promyje s bezvodým ethylacetátem(asi 100 ml) a pokud je ještě vlhký roz-pouštědly se přenese do pece a při 20 °C su-ší ve vakuu nad kysličníkem fosforečnýmpřes noc, aby vznikla výsledná sloučenina(3,89 g, 87%).

Infračervená a NMR-spektra produktusouhlasí se spektry autentického vzorku.Příklad 3

Forma II syn-isomeru (6R,7R)-3- -karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (fur-2-yl) -2- -methoxyiminoacetamido ] -3-cef em-4- -karboxylátu sodnéhoMetoda (i) 0,2 g aktivního uhlí se přidá k roztokusyn-isomeru kyseliny (6R,7R)-3-karbamoyl-oxymethyl-7- [ 2- (fur-2-yl) -2-methoxy-iminoacetamido ] -3-cef em-4-karboxylové(4,00 g, 9,42 mmol) ve směsi 132 ml acetonua 1,33 ml vody. Suspenze se 30 míchá a filt-ruje přes lůžko s infusoriovou hlinkou, filt-rační lůžko se promyje 10 ml acetonu. Filt-rovaný roztok 2-ethylhexanoátu sodného(1,66 g, 10 mmol) v acetonu (20,0 ml) sepo hodině přidá k míchanému filtrátu. Vý-sledná suspenze se míchá dalších 10 minuta bílá sraženina se odfiltruje, promyje ace-tonem (2X 25 ml) a suší ve vakuu, abyvznikla výsledná sloučenina (4,06 g, 93,0 %)[«Id20 +60° (c 0,91, H2O), Amax (H2O) 274nm (ε 17 400), [nalezeno: C: 41,0, 41,2, H: 3,45, 3,6, N: 12,3, 12,4,Na: 5,2, S: 6,6, 6,85, H2O: 2,7, 2,7 %.

Pro CieHtsNéNaOeS . 0,7 H2O (459,0)vypočteno: C: 41,8, H: 3,6, N: 12,2, Na: 5,0, S: 7,0,H2O: 2,7 %], čistota pomocí HPLC 99,4 %. NMR-spektrum výsledné sloučeniny odpo-vídalo autentickému vzorku a infračervenéspektrum indikovalo, že produkt je formouII soli antibiotika.

Metoda (ii)

Syn-isomer kyseliny (6R,7R)-3-karbamoyl-oxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) -2-methoxy-iminoacetamido ] -3-cef em-4-karboxylové(16,98 g, 40 mmol) se přidá k promícháva-né směsi 333 ml acetonu a 8,5 ml vody. Popůsobení aktivním uhlím a filtrací tohotoroztoku se pomalu během hodiny přidá 2--ethylhexanoát sodný (7,32 g, 44 mmol) vacetonu (85 ml). Reakční směs se míchá 15 204989 17 18 minut, filtruje se a produkt se promyje a-cetonem (2X 65 ml) a suší ve vakuu při 20°Celsia přes noc, aby vznikla výsledná slou-čenina (17,95 g, 93,5%) obsahující 0,5 molFkO. NMR-spektrum produkt se potvrzuje,že souhlasí se spektrem autentického vzor-ku, infračervené spektrum indikuje, že pro-dukt je solí formy II. Přikládá

Forma III syn-isomeru (6R,7R)-3- -karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) -2- -methoxyiminoacetamido ] -3-cefem-4- -karboxylátu sodného 4,0 g syn-isomeru (6R,7R)-3-karbamoyl-oxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) -2-methoxy-iminoacetamido ] -3-cefem-4-karboxylátusodného se rozpustí ve 20,0 ml vody. 20 mlmeťhanolu a 160 ml dioxanu se přidá a roz-tok se filtruje a pak se ponechá při 4 °C vy-krystalizovat. Velmi bílé, jehlovité krystalkyse odfiltrují, promyjí 100 ml dioxanu a po-kud jsou ještě dioxanem zavlhlé se přene-sou do pece a suší se při 20 °C ve vakuupřes noc, aby vznikla výsledná sloučenina(3,96 g, 78,5%). Infračervené a NMR-spek-tra produktu odpovídají spektru autentické-ho vzorku. Příklad 5

Forma IV syn-isomer (6R,7R)-3- -karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) -2- -methoxyiminoacetamido ] -3-cef em-4- -karboxylátu sodného

Vzorky formy I a formy III syn-isomeru3-karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) -2--methoxyiminoacetamido ] -3-cef em-4--karboxylátu sodného připravené podle me-tody (iii) příkladu 2 a 4 se ponechají zvlh-nout (na 75% relativní vlhkosti), čímžvznikne výsledná sloučenina. Infračervenáa NMR-spektra produktů souhlasila s auten-tickým vzorkem. Stanovení vody podle KarlFischera dává 4,0 respektive 3,85 % (1 molHžO je ekvivalentní 3,9 % ). Příklad 6 a) Syn-isomer terc.butyl-(6R,7R)-3- -karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) -2- -methoxyiminoacetamido]-3-cef em-4- -karboxylátu

Suspenze 4,4 g syn-isomeru kyseliny(6R,7R) -3-karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (fur--2-yl) -2-methoxyimino acetamido) -3--cefem-4-karboxylové ve 200 ml bezvodéhomethylenchloridu se vystaví účinku 6,6 mlO-terc.butyl-N,N‘-dicyklohexylisomočoviny,aby se vytvořil bledě žlutý roztok. Po 24hodinách při 23 °C, výchozí materiál zůstá-vá a přidá se ještě 3,3 ml isomočoviny. Po48 hodinách se směs filtruje a filtrát za sní- ženého tlaku se odpaří. Výsledný materiálse rozmíchá se směsí etheru a ethylacetátu,aby se odstranila zbývající dicyklohexylmo-čovina. Filtrát se promyje nasyceným vod-ným roztokem hydrogenuhličitanu sodnéhoa vodou, pak se suší a odpaří, aby vzniklapěna (5,2 g). Chromatografií na silikageluse směsí toluen : ethylacetát v poměru 2 : 1jako rozpouštědla se získá výsledná slouče-nina (3,9 g) jako bledě žlutá pěna, Amax (e-thanol) 275,5 nm (ε Í8 400). b) Syn-isomer terc.butyl-(lR,6R,7R)-3- -karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) - -2-methoxyiminoacetamido ] -3-cef em-4- -karboxylát-l-oxidu 0,3 ml terc.butylhypochloritu se přidá ksilně promíchávanému roztoku 0,98 g terc.-butyl- (6R,7R) -3-karbamoyloxymethyl-7-- [ 2- (f ur-2-yl) -2-methoxyiminoacetamido) --3-cefem-4-karboxylátu ve 25 ml pyridinu a1 ml vody při —45 °C. Po dvouminutovémmíchání se přidá 1 ml 2 N kyseliny sírovéa směs se ihned vlije do 100 ml 20% (hmot-nost/objem) kyseliny ortofosforečné. Roztokse extrahuje ethylacetátem (2X 100 ml) akombinované organické extrakty se promyjíroztokem hydrogenuhličitanu sodného (100mililitrů) a vodou (100 ml) a suší se síra-nem hořečnatým a zahustí ve vakuu. Suro-vý produkt se chromatografuje na silikage-lových preparačních deskách s užitím ethyl-acetátu jako eluátu, menší složka S-oxidupředbíhá R-oxid. Extrakcí pomalejší složkys ethylacetátem se získá výsledná sloučeni-na (0,27 g, 27 %). Údaje infračervené a NMR-spektroskopiepotvrzují strukturu výsledné sloučeniny. c) Syn-isomer 1-oxid kyseliny (lR,6R,7R)-3- -karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) -2- -methoxyiminoacetamido ] -3-cef em-4- -karboxylové 0,42 g syn-isomeru terc.butyl-(lR,6R,7Rj--3-karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) -2--methoxyiminoacetamido]-3-cef em-4--karboxylát-l-oxidu se rozpustí v 5 ml kyse-liny trifluoroctové a míchá se při teplotěmístnosti 8 minut. Roztok se odpaří ve va-kuu na červený olej, rozpustí se v 5 ml smě-si ethylacetátu s acetonem (1:1) a přidáse po kapkách za míchání k 50 ml petrole-theru (50 až 80 °C). Usazená tuhá látka sebo zátek, přidržovaných aluminiovými těs-nícími kroužky, čímž se předchází výměněshromáždí a suší se v exsikátoru. Surovýprodukt se rozmíchá s ethylacetátem a te-kutá fáze se oddělí a po kapkách přidá k50 ml petroletheru (60 až 80 °C), aby vznik-la výsledná sloučenina jako bezbarvá tuhálátka (150 mg, 40 %), Amax (0,25 N NaHCOs) 263,5 (s 15 000) a 281 nm (ε 13 700), vmax(nujol) 1,799 (/3-laktam), 1725 a 1716(COOH a OCONH2), 1684 a 1538 (CONH) a1060 a 1050 cm"1 (S — O), τ (MezSO-de) 204989 19 hodnoty zahrnuje 0,02 (d, J8Hz, CONH), 4,17(dd, }4 a 8Hz, 7-H), 4,99 (d, J4Hz, 6-H) a6,09 (s, N-OCHs). P ř í k 1 a d 7

Syn-isomer 1-oxid kyseliny (lS,6R,7R)-3- -karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-yl) -2- -methoxyiminoacetamido ] -3-cef em-4- -karboxylové K promíchávanému roztoku syn-isomeru(6R,7R) -3-karhamoyloxymethyl-7- [ 2- (fur--2-y1) -2-methoxyiminoacetamido ] -3--cefem-4-karboxylátu sodného (2,59 g) vevodě (25 ml) se přidá 1,93 g metaperjodátusodného. Roztok se míchá po 30 minut přiteplotě okolí a pak se okyselí 2 N kyselinouchlorovodíkovou přidávanou po kapkách.Výsledná sraženina se shromáždí, postupněpromyje vodou, ethanolem a etherem a u-suší se ve vakuu, a získá se výsledná slouče-nina jako bílý prášek (1,63 g) [ajn20 +113°(c 0,86, MezSO), Amax (pH 6 pufr) 264,5 (ε17 200) a 279 nm (ε 15 600), umax (nujol)1770 (č-laktam), 1740 a 1716 (CO2H), 1688,1654, 1589 a 1530 (CONH a OCONH2) a 1039cm-1 (S -> O), τ (MezSQ-de) 0,60 (d, J8Hz,NH), 2,11, 3,19, 3,31 (multiplet, furylovéprotony), 4,08 (q, J5 a 8Hz, C-7H), 4,87 a5,45 (ABq, J13Hz, CH2OCONH2), 4,96 (d,J5Hz, C-6H), 6,08 (s, OCH3], 6,10 a 6,42 (ABq, J18HZ, C-2 CH2). Příklad 8

Syn-isomer kyseliny (1R,6R,7R)- a (1S,6R,7R) -3-karbamoyloxymethyl-7- [ 2- - (fur-2-yl) -2-methoxyiminoacetamido ] - -3-cefem-4-karboxylové

Roztok 1,93 g jodistanu sodného v 10 mlvody se přidá k promíchávanému roztoku(6R,7R) -3-karbamoyloxymethyl-7- [ 2- (f ur-- 2-y 1) -2-methoxyiminoacetamido ] -3--cefem-4-karboxylátu (2,59 g) ve vodě (25mililitrů). V míchání se pokračuje 30 mi-nut při teplotě místnosti a roztok se pak 0-kyselí 2 N kyselinou chlorovodíkovou (2mililitry). Usazený lS-oxid se odfiltruje,promyje se ethanolem (5 ml) a etherem(20 ml) a suší se v exsikátoru a získá se1,59 g bezbarvé tuhé látky, [*x]D +110° (c1, MezSO), odpovídající produktu popsané-mu v příkladu 7.

Matečné tekutiny se nasytí chloridemsodným a filtrují se. Filtrát se extrahujeethylaeetátem (2X 100 ml). Organické ex- ao trakty se spojí, suší se síranem hořečnatyma koncentrují ve vakuu, přičemž vzniknežlutá tuhá látka. Surový produkt se promy-je acetonem a nerozpustný materiál se od-straní filtrací. Filtrát se odpaří dosucha apromytí acetonem se opakuje za vzniku 380miligramů lR-oxidu, [a]D —88° (c 1,Me2SO), τ (Me2SO-d6) s podobnými údaji ja-ko jsou uvedené v příkladu 6.

Příklady výroby farmaceutických přípravkůPříklad A

Suchý prášek pro přípravu injekčního roz-toku

Sterilní syn-isomer (6R,7R)-3-karbamoyl-oxymethyl-7- [ 2- (f ur-2-y 1) -2-methoxy-iminoacetamido ]-3-cef em-4-karboxylátusodného se naplní do skleněných ampulí,označený obsah je 500 mg nebo 1,0 g cefa-losporinové sloučeniny. Plnění se provádíasepticky pod vrstvou dusíku. Fiolky se u-zavírají s použitím gumových kotoučků ne-plynů nebo vzniknutí mikroorganismů. Pro-dukt je určen k rozpuštění vodou pro injek-ce nebo jiným vhodným sterilním vehikulemtěsně před aplikací.

Příklad B

Intramammární injekce (pro skot)

Procentuální složení (hmot./hmot. °/o)

Syn-isomer (6R,7R) -3-karbamoyloxy-methyl-7-[2-(fur-2-yl)-2--methoxyiminoacetamido]-3-cef em- -4-karboxylát sodný 8,33 vehikulum do 100,00 vehikulum (složení):

Tween 60 3,00 bílý včelí vosk 6,00 podzemnicový olej 91,00

Poslední tři složky se spolu zahřívají na150 °C jednu hodinu a pak se za míchání o-chladí na teplotu místnosti. Sterilní antibio-tikum, jemně práškované, se přidá aseptickyk tomuto vehikulu a produkt se jemně roz-ptýlí na vysokorychlostním mixéru. Preparátse plní asepticky do sterilních deformova-telných hliníkových tub s náplní o hmotnos-ti 3,0 g; každá tuba obsahuje 250 mg cefa-losporinové sloučeniny. Výrobek je určen kaplikaci do mléčné žlázy mlékovodem.

Claims (5)

1. 204989 21 22 PŘEDMĚT VYNÁLEZU

   1. Způsob výroby cefalosporinových anti-biotik obecného vzorce I Η H ' * S ríc- conu -—i—r "-OR1 ° (W (ij kde R1 znamená furyl, thienyl nebo fenyl R2 znamená alkyl o 1 až 4 atomech uhlí-ku, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku nebofenyl a Ra znamená vodík nebo esterotvornouskupinu, poskytující fyziologicky neškodnéestery, ve formě syn-isomeru nebo směsi syn-isome-ru a anti-isomeru s obsahem alespoň 90 %syn-isomeru, jakož i jejich fyziologicky ne-škodných solí v případě, kde Ra znamenávodík, nebo 1-oxidů, vyznačující se tím, žese uvádí při teplotě —50 až +50 °C do re-akce sloučenina obecného vzorce II

   kde Acyl znamená skupinu Rl.C.CO- N \ OR2 ve které R1 a R2 mají výše uvedený význam, B znamená síru nebo S -> O, R11 znamená vodík nebo skupinu, blokují- cí karboxyl, jako například difenylmethylnebo terc.butyl, přerušovaná čára mezi polohami 2, 3 a 4molekuly značí, že sloučenina může být 2--cefemovou nebo 3-cefemovou sloučeninou,s karbamoylačním činidlem, kterým je iso-kyanát obecného vzorce III R13NCO, (III), kde R13 značí labilní skupinu, jako napříkladmono-, di- nebo tríchloracetyl nebo chlor-sulfonyl, provede se převedení A2-isomeru na poža-dovaný A3-isomer a/nebo se odstraní skupi-na, blokující karboxyl nebo N-ochranná sku-pina, a/nebo se redukuje sulfoxid cefalospo-rinu na odpovídající sulfid, a posléze se i-zoluje sloučenina obecného vzorce I, popří-padě po oddělení syn-isomeru a anti-isome-ru a popřípadě po převedení sloučeniny najejí 1-oxid v případě, jestliže Ra značí vo-dík nebo na její fyziologicky neškodné solinebo estery.
2. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující setím, že se sloučenina obecného vzorce I ne-bo její fyziologicky neškodná sůl, v případě,že Ra je vodík, nebo se její 1-oxid izolujeve formě syn-isomeru, prostého přítomnostianti-isomeru.
3. 3. Způsob podle bodu 1 nebo 2 k výroběsloučenin obecného vzorce I, kde R1 značí2-furyl, vyznačující se tím, že se jako výcho-zí látky používá sloučeniny vzorce II, kdeR1 znamená 2-furyl, a ostatní obecné sym-boly mají výše uvedený význam.
4. 4. Způsob podle bodu 1 nebo 2 k výroběsloučenin obecného vzorce I, kde R2 značímethyl, ethyl, terc.butyl, cyklopentyl nebofenyl, vyznačující se tím, že jako výchozílátky se používá sloučeniny obecného vzor-ce II, kde R2 má v tomto bodě udaný vý-znam a ostatní obecné symboly mají výšeuvedený význam.
5. 5. Způsob podle bodu 1 až 4 k výroběsloučeniny obecného vzorce I, kde R1 zna-mená 2-furyl, R2 znamená methyl a Ra zna-mená vodík, vyznačující se tím, že jako vý-chozí sloučeniny se používá sloučeniny o-becného vzorce II, kde R1 znamená 2-furyla R2 znamená methyl a ostatní obecné sym-boly mají výše uvedený význam. Severografia, n. p., závod 7, Most