CN1964979B

CN1964979B - 新颖的水溶性前药

Info

Publication number: CN1964979B
Application number: CN2005800190556A
Authority: CN
Inventors: 梅田勋; 大和田润; 小泽佐和子
Original assignee: Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2004-04-09
Filing date: 2005-04-08
Publication date: 2011-07-27
Anticipated expiration: 2025-04-08
Also published as: BRPI0509732A; EP1757609A1; JPWO2005097803A1; US20080015157A1; NO20065137L; US7910593B2; JP4823894B2; RU2006139644A; AU2005230994A1; MXPA06011679A; MY145850A; CN1964979A; CA2563502A1; HK1100083A1; RU2413731C2; TWI351284B; NZ550665A; IL178465A0; KR20070011457A; EP1757609A4

Abstract

本发明提供了式(1)所示的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物(其中R¹表示氢原子、或C1-C6烷基；W表示含有叔氨基或磺酰基的二价基团；以及Y表示含有醇式羟基的Y-OH所示化合物的残基)。

Description

新颖的水溶性前药

技术领域

本发明涉及新颖的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物。本发明还涉及含有上述物质的药物组合物、或含有在水溶液中的上述物质的液体制剂。

背景技术

喜树碱类、紫杉烷类、抗癌核苷酸类以及类似物可以有效对抗各种肿瘤细胞，因而预期可用作治疗剂，例如抗癌剂(专利文献1和2)。大部分上述化合物都是亲脂性的，由于具有低的水溶性，导致它们在注射剂方面的应用(非肠道给药)有时受到限制(专利文献1)。

为了增加这类亲脂性药物在水中的溶解性，一直在对水溶性前药进行研究(非专利文献1和专利文献1)。

[专利文献1]WO03/043631

[专利文献2]WO03/045952

[非专利文献1]Shan等人，J.Pharm.Sci.，86(7)，765-767，1997

发明内容

本发明所要解决的技术问题

大部分亲脂性药物的水溶性前药在给药之后主要都是通过酶转化为其活性形式。然而，这种转化在给药一定时间之后才出现，并且还在种间和个体之间存在差异性，因而一直对上述前药的开发构成疾病。因此，强烈需要开发出可以通过非肠道给药的水溶性前药，它不依赖于酶转化，并且显示出微小的种间或个体差异性。

此外，在某些情形中，前药在血液中转化为活性形式的速率和效率是不够的，因而需要缩短药物血药浓度升高所需要的时间。

更具体地说，本发明目的在于提供可以通过非肠道给药的水溶性前药，其向活性形式的转化与酶无关或者是显示出微小的种间或个体差异性，且具有极高的转化速率和效率。

解决技术问题的手段

在为解决上述问题进行深入研究后，本发明人发现含有具特定结构的可溶性侧链的前药化合物显示出极好的水溶性，并且由于其迅速转化为活性形式，使得其种间或个体差异性很小。从而使本发明得以完成。本发明特别适合用于水不溶性药物领域，例如含有仲醇式羟基或叔醇式羟基的喜树碱。

更具体地说，本发明包括：

<1>式(1)所示的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，

(其中

R¹表示氢原子或C1-C6烷基；

W表示含有叔氨基或磺酰基的二价基团；

Y表示具有醇式羟基的Y-OH所示化合物的残基)；

<2>如<1>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中所述水溶性前药如式(2)所示：

[其中

R¹和Y定义同式(1)；

X表示C＝O或C1-C3亚烷基；

R²和R⁴各自独立地表示氢原子、C1-C6烷基、或氨基酸侧链；以及

R³表示C1-C6烷基]；

<3>如<2>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中R¹是氢原子、甲基、或乙基；

<4>如<2>或<3>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中R²是氢原子或甲基；

<5>如<2>至<4>中任意一项所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中R³是C1-C3烷基；

<6>如<2>至<5>中任意一项所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中R⁴是氢或甲基；

<7>如<1>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中所述水溶性前药如式(3)所示：

[其中

R¹和Y定义同式(1)；

n表示整数1-6；以及

R⁵表示氢原子或-COOR⁶(其中R⁶表示氢原子或C1-C6烷基)]；

<8>如<7>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中R¹是氢原子、甲基、或乙基；

<9>如<7>或<8>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中n是1，以及R⁵是氢原子或-COOR⁶(其中R⁶表示氢原子或C1-C6烷基)；

<10>如<7>或<8>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中n是整数2-6，以及R⁵是氢原子；

<11>如<1>至<10>中任意一项所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中所述Y-OH中的羟基(-OH)是仲或叔醇式羟基；

<12>如<1>至<11>中任意一项所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中Y-OH是不溶性化合物；

<13>如<1>至<12>中任意一项所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中Y-OH是喜树碱类、唑类抗真菌剂类(azoleantifungal agent)、紫杉烷类、或抗癌核苷酸类；

<14>如<1>至<13>中任意一项所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中Y是式(4)所示基团：

[其中

*表示连接位置；

m是0或1；

R¹¹表示氢原子、卤素原子、或C1-C6烷基；

R¹²表示氢原子、卤素原子、C1-C6烷基、或羟基；

R¹³表示氢原子、氨基、硝基、或(二甲氨基)甲基；

R¹⁴表示氢原子、C1-C6烷基、(4-甲基哌嗪基)甲基、或(叔丁氧亚氨基)甲基；

R¹³和R¹⁴、以及R¹¹和R¹²分别可以彼此相连形成5-或6-元环，其中所述5-或6-元环可以含有1-2个杂原子，并且可以含有1-3个选自下述A组中的取代基，其中所述A组中的取代基可以进一步含有1-3个选自下述B组中的取代基：

A组：C1-C10烷基、氨基、单-C1-C8烷基氨基、二-C1-C8烷基氨基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、以及X＝所示基团(其中X表示氧原子或硫原子)；

B组：C1-C6烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、二-C1-C6烷基氨基、C3-C7环烷基、杂环、以及芳环(其可以含有1-3选自羟基、C1-C6烷氧基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、和二-C1-C6烷基氨基中的取代基)]；

<15>如<14>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中Y是式(5)所示基团：

{其中

*表示连接位置；

R¹¹和R¹²定义同权利要求14；以及

Z表示-NH-C(＝X)-N(R²¹)-或-N＝C(R²²)-N(R²¹)-

[其中R²¹表示氢原子或可含有1-3个选自下述B组中的取代基的C1-C10烷基：

B组：C1-C6烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、二-C1-C6烷基氨基、C3-C7环烷基、杂环、以及芳环(其可以含有1-3选自羟基、C1-C6烷氧基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、和二-C1-C6烷基氨基中的取代基)；

R²²表示氢原子、氨基、或者可含有1-3个选自下述C组中的取代基的C1-C6烷基、可含有1-3个选自下述C组中的取代基的C1-C6烷氧基、可含有1-3个选自下述C组中的取代基的C1-C6烷硫基、可含有1-3个选自下述C组中的取代基的单-C1-C6烷基氨基、或可含有1-3个选自下述C组中的取代基的二-C1-C6烷基氨基：

C组：C1-C6烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、C3-C7环烷基、杂环、以及芳环(其可以含有1-3个选自羟基、C1-C6烷氧基、氨基、单-C1-C6烷基氨基、和二-C1-C6烷基氨基中的取代基)；以及

X表示氧原子或硫原子]}；

<16>如<15>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中Y是式(6)所示基团：

[其中*表示连接位置；以及

R¹¹、R¹²、和R²¹定义同<15>中所述的]；

<17>如<16>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中R¹¹和R¹²是氢原子；以及

R²¹表示氢原子、或可含有选自下述D组中的取代基的C1-C8烷基：

D组：C1-C3烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、单-C1-C3烷基氨基、二-C1-C3烷基氨基、C3-C7环烷基、杂环、以及芳环(其可以含有1-3个选自羟基、C1-C3烷氧基、和卤素原子中的取代基)；

<18>如<16>或<17>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中Y是含有至少一种醇式羟基的化合物(Y-OH)的残基，其中所述化合物选自：

a)(9S)-1-丁基-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

b)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-[2-(4-吗啉代)乙基]-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

c)(9S)-1-[3-(二甲氨基)丙基]-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

d)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-苯乙基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

e)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-[2-(吡啶-2-基)乙基]-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

f)(9S)-9-乙基-1-庚基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

g)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-丙基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

h)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-[2-(吡啶-3-基)乙基]-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

i)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(3-苯丙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

j)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(2-甲基丙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

k)(9S)-9-乙基-1-己基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉(quinaoline)-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

l)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

m)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-[2-(4-甲氧苯基)乙基]-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

n)(9S)-1-苄基-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

o)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

p)(9S)-1，9-二乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

q)(9S)-1-[2-(4-氯苯基)乙基]-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

r)(9S)-9-乙基-1-[2-(4-氟苯基)乙基]-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

s)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(1-甲基乙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；以及

t)(9S)-1-(3，3-二甲基丁基)-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

<19>如<15>所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中Y是式(7)所示基团：

[其中

*表示连接位置；以及

R¹¹、R¹²、和R²¹定义同权利要求15]；

<20>如<19>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中R¹¹和R¹²是氢原子；以及

R²¹是氢原子、或可含有选自下述D组中的取代基的C1-C8烷基：

<21>如<19>或<20>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中Y是含有至少一种醇式羟基的化合物(Y-OH)的残基，其中所述化合物选自：

a)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2(3H)-硫酮-10，13(9H，15H)-二酮；

b)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-苯乙基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2(3H)-硫酮-10，13(9H，15H)-二酮；以及

c)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2(3H)-硫酮-10，13(9H，15H)-二酮；

<22>如<15>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中Y是式(8)所示基团：

[其中

*表示连接位置；以及

R¹¹、R¹²、R²¹、和R²²定义如<15>中所述]；

<23>如<22>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中R¹¹是氢原子；

R¹²是氢原子或C1-C3烷基；

R²¹是氢原子、或可含有1-3个选自下述D组中的取代基的C1-C8烷基；以及

R²²是氢原子、氨基、或者可含有1-3个选自下述D组中的取代基的C1-C6烷基、可含有1-3个选自下述D组中的取代基的C1-C6烷氧基、可含有1-3个选自下述D组中的取代基的C1-C6烷硫基、可含有1-3个选自下述D组中的取代基的单-C1-C6烷基氨基、或可含有1-3个选自下述D组中的取代基的二-C1-C6烷基氨基：

<24>如<22>或<23>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中Y是含有至少一种醇式羟基的化合物(Y-OH)的残基，其中所述化合物选自：

a)(9S)-1-丁基-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

b)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-[2-(4-吗啉代)乙基]-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

c)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-丙基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

d)(9S)-1-苄基-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

e)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-苯乙基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

f)(9S)-2，9-二乙基-9-羟基-1-苯乙基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

g)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(3-苯丙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

h)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

i)(9S)-2，9-二乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

j)(9S)-2，9-二乙基-9-羟基-1-(2-甲基丙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

k)(9S)-9-乙基-1-庚基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

l)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-甲基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

m)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(2-甲基丙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

n)(9S)-9-乙基-1-己基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

o)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

p)(9S)-1，9-二乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

q)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-[2-(4-甲氧苯基)乙基]-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

r)(9S)-1-[2-(4-氯苯基)乙基]-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

s)(9S)-9-乙基-1-[2-(4-氟苯基)乙基]-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

t)(9S)-9-乙基-1-[2-(4-氟苯基)乙基]-9-羟基-2-甲基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

u)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(1-甲基乙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

v)(9S)-1-(3，3-二甲基丁基)-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

w)(9S)-9-乙基-9-羟基-2-甲氧基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

x)(9S)-2，9-二乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

y)(9RS)-9-乙基-9-羟基-4-甲基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

z)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(2-羟乙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

aa)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(2-羟乙基)-2-甲基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

bb)(9S)-9-乙基-9-羟基-2-甲基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

cc)(9S)-2，9-二乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

dd)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-2-丙基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

ee)(9S)-9-乙基-9-羟基-2-羟甲基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

ff)(9S)-9-乙基-9-羟基-2-羟甲基-1-(2-甲基丙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

gg)(9S)-9-乙基-9-羟基-2-羟甲基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’] 中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

hh)(9S)-2-氯甲基-9-乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

ii)(9S)-2-氨甲基-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

jj)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-2-三氟甲基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

kk)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-2-甲硫基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

ll)(9S)-9-乙基-2-乙硫基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

mm)(9S)-2-(二甲氨基)-9-乙基-9-羟基-1-(2-甲基丙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；以及

nn)(9S)-2-(丁氨基)-9-乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

<25>如<13>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，其中所述唑类抗真菌剂类是三唑；

<26>如<25>中所述的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，包括至少一种选自下述的三唑：

a)2-[(1R，2R)-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙基]-4-[4-(2，2，3，3-四氟丙氧基)苯基]-3(2H，4H)-1，2，4-三唑酮；

b)(+)-2-(2，4-二氟苯基)-3-甲基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-3-(6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哒嗪-3-基硫基(thio))丁-2-醇；

c)(2R)-2-(2，4-二氟苯基)-1-[3-[(E)-4-(2，2，3，3-四氟丙氧基)-苯乙烯基]-(1，2，4-三唑-1-基)-3-(1，2，4-三唑-1-基)]丙-2-醇；

d)dl-苏式-2-(2，4-二氟苯基)-3-甲基-磺酰基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-醇；

e)(-)-4-[4-[4-[4-[[5-(2，4-二氟苯基)-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)四氢呋喃-3-基]甲氧基]苯基]哌嗪基]]苯基]-2[(1S，2S)-1-乙基-2-羟丙基]-3H-1，2，4-三唑-3-酮；

f)(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-醇；

g)3-甲基-3-甲硫基-1-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(三氟甲基苯基)-丁-2-醇；

h)(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]]-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4，5-三氟苯基)-丁-2-醇；

i)(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]]-2-(3-氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-醇；以及

j)(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]]-2-(2，5-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-醇；

<27>如<1>中式(1)所示的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物，包括至少一种选自下述的水溶性前药：

(a)(9S)-9-乙基-9-{[甲基-(2-甲氨基-乙基)-氨基]-乙酰氧基}-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

(b)(9S)-9-乙基-9-(甘氨酰基-肌氨酰氧基(sarcosyloxy))-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

(c)(9S)-9-{[(2-氨基-乙基)-甲基-氨基]-乙酰氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

(d)(9S)-9-乙基-9-(肌氨酰基(sarcosyl)-肌氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

(e)(9S)-9-[2-(2-氨基乙磺酰基)乙氧羰基氧基]-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

(f)(氨乙酰基-甲基-氨基)-乙酸(S)-4-乙基-3，13-二氧代-3，4，12，13-四氢-1H-2-氧杂-6，12a-二氮杂-二苯并[b，h]芴-4-基酯；

(g)(9S)-9-{2-[(R-2-氨基-2-甲氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

(h)(9S)-9-{2-[(R-2-氨基-2-乙氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

(i)(9S)-9-乙基-9-(N-甲基丙氨酰基-N-甲基丙氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；以及

(j)(9S)-9-乙基-9-(肌氨酰基-N-甲基丙氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

<28>药物组合物，其中含有<1>至<27>中任意一项的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物作为有效成分；

<29>用于细胞增殖性疾病的治疗剂，其中含有<14>至<24>中任意一项的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物作为有效成分；

<30>根据<29>的治疗剂，其中所述细胞增殖性疾病是癌症；

<31>根据<30>的治疗剂，其中所述癌症是实体瘤；

<32>根据<30>或<31>的治疗剂，其中所述癌症是结肠直肠癌、肺癌、乳腺癌、胃癌、子宫颈癌、和/或膀胱癌；

<33>抗真菌剂，其中含有<25>至<27>中任意一项的水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物作为有效成分；以及

<34>式(9)所示化合物在制备式(2)所示水溶性前药、或者其可药用盐、或它们的水合物或溶剂化物中的用途：

[其中

X表示C＝O或C1-C3亚烷基；

R¹表示氢原子、或C1-C6烷基；

与R¹相连的氮原子可以被保护基团保护；

R²和R⁴各自独立地表示氢原子、C1-6烷基、或氨基酸侧链；

R³表示C1-C6烷基；以及

R⁷表示卤素原子或OR⁸所示基团(其中R⁸表示氢原子或C1-C6烷基)]

(其中

Y表示含有醇式羟基的Y-OH所示化合物的残基；以及

X、R¹、R²、R³、和R⁴定义同式(9))；

<35>制备式(2)所示化合物的方法：

(其中

X表示C＝O或C1-C3亚烷基；

R¹表示氢原子、或C1-C6烷基；

R²和R⁴各自独立地表示氢原子、C1-6烷基、或氨基酸侧链；以及R³表示C1-C6烷基；

Y表示含有醇式羟基的Y-OH所示化合物的残基)，其中所述方法包括下述步骤：

将式(9)所示化合物

[其中X、R¹、R²、R³、和R⁴定义同式(2)；

R⁷表示卤素原子或OR⁸所示基团(其中R⁸表示氢原子或C1-C6烷基)；以及

与R¹相连的氮原子可以被保护基团保护]

与含有醇式羟基的Y-OH所示化合物反应，得到式(2)所示化合物；

<36>式(9)所示化合物、其可药用盐、或其水合物或溶剂化物：

[其中

X表示C＝O或C1-C3亚烷基；

R¹表示氢原子、或C1-C6烷基；

与R¹相连的氮原子可以被保护基团保护；

R²和R⁴各自独立地表示氢原子、C1-6烷基、或氨基酸侧链；

R³表示C1-C6烷基；以及

R⁷表示卤素原子或OR⁸所示基团(其中R⁸表示氢原子或C1-C6烷基)]。

本文中所使用的术语“烷基”是指由脂肪族烃除去单个氢原子之后得到的单价基团，其具有含氢和碳原子的烃基或烃结构的部分集合，且在其主链上不含杂原子或不饱和碳-碳键。所述烷基可以具有直链或支链结构。

术语“C1-C3烷基”是指具有1-3个碳原子的烷基，术语“C1-C6烷基”是指具有1-6个碳原子的烷基，术语“C1-C8烷基”是指具有1-8个碳原子的烷基，以及术语“C1-C10烷基”是指具有1-10个碳原子的烷基。

烷基的具体实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、异丁基、戊基、异戊基、2，3-二甲基丙基、己基、2，3-二甲基己基、1，1-二甲基戊基、庚基、以及辛基。

本文中所使用的术语“亚烷基”是指由上述烷基再除去氢原子得到的二价基团，亚烷基的实例优选包括C1-C3亚烷基，更优选包括C1-C2亚烷基。亚烷基的具体实例包括亚甲基、1，2-亚乙基、1，1-亚乙基、1，3-亚丙基、四亚甲基、五亚甲基(pentamethylene group)、和六亚甲基(hexamethylene group)。

本文中所使用的术语“烷氧基”是指-O-R’基团，其中R’为上述烷基。“C1-C6烷氧基”的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、3-甲基丁氧基、和2，2-二甲基丙氧基。

本文中所使用的术语“烷硫基”是指-S-R’基团，其中R’为上述烷基。

“C1-C8烷硫基”的实例包括甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁硫基、戊硫基、己硫基、庚硫基、和辛硫基。

本文中所使用的术语“羟基”是指HO-基团。

本文中所使用的术语“卤素原子”是指氟原子、氯原子、溴原子、或碘原子。

本文中所使用的术语“氨基”是指NH₂-基团，包括被甲酰基、乙酰基、三苯甲基、叔丁氧羰基、苄基、苄氧羰基保护的氨基，这样的保护基团是本领域众所周知的。在上述氨基中，优选NH₂-。

本文中所使用的术语“单烷基氨基”是指-NH-R’基团，其中R’为上述烷基，包括被甲酰基、乙酰基、三苯甲基、叔丁氧羰基、苄基、苄氧羰基保护的氨基，这样的保护基团是本领域众所周知的。“单-C1-C6烷基氨基”的实例优选包括N-甲氨基、N-乙氨基、N-丙氨基、N-异丙氨基、N-丁氨基、N-(1-甲基丙基)氨基、N-(2-甲基丙基)氨基、和N-戊氨基，更优选包括N-乙氨基、N-丙氨基、和N-丁氨基。

本文中所使用的术语“二烷基氨基”是指-NR’R”基团，其中R’和R”各自独立地表示上述烷基。“二-C1-C6烷基氨基”的实例优选N，N-二甲氨基、N，N-二乙氨基、N，N-二丙氨基、N，N-二异丙氨基、N，N-二丁氨基、N-甲基-N-乙基氨基、和N-甲基-N-丙基氨基，更优选包括N，N-二甲氨基和N，N-二乙氨基。

本文中所使用的术语“叔氨基”是指其中氨基的全部氢被取代的基团。

本文中所使用的术语“磺酰基”是指-SO₂-所示的基团。

本文中所使用的术语“醇式残基”是指Y-OH所示醇中由Y表示的部分。

本文中所使用的术语“C3-C7环烷基”是指环中不含任何杂原子的3-至7-元环。“环烷基”的实例优选包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、和环庚基，更优选包括环戊基和环己基。

本文中所使用的术语“杂环”是指含有一个或多个选自N、S、和O中的杂原子的3-至10-元环。所述杂环的优选实例包括噁唑基、噻唑基、4，5-二氢噁唑基、4，5-二氢噻唑基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、咪唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基、噁二唑基、噻二唑基、吡咯烷基、四氢噻吩基、四氢呋喃基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、以及1-甲基哌嗪基，更优选包括咪唑基、吡啶基、吗啉基、和吡咯烷基。

本文中所使用的术语“芳环”是指芳族碳环基团，或者具体为6-至10-元芳环或部分芳环，其实例包括苯基、萘基、和四氢萘环，优选苯基和萘基环。最优选苯基环。

本文中所使用的术语“苯基-C1-C8烷基”是指其中C1-C8烷基上的一个氢原子被苯基取代的基团。

本文中所使用的术语“杂环-C1-C8烷基”是指其中C1-C8烷基上的一个氢原子被杂环取代的基团。

本文中所使用的术语“烷氧苯基C1-C8烷基”是指其中C1-C8烷基上的一个氢原子被烷氧苯基取代的基团。术语“烷氧苯基”是指其中苯基上的一个氢原子被烷氧基取代的基团。

本文中所使用的术语“卤素苯基C1-C8烷基”是指其中C1-C8烷基的一个氢原子被卤素原子取代的基团。

术语“可药用盐”是指式(1)所示的水溶性前药与适宜的无毒性有机或无机酸、或者有机或无机碱形成的的常见盐，其保留有该前药的生理效能和特性。

与酸形成的盐的实例包括由无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、和硝酸衍生得到的盐；以及由有机酸例如对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、和富马酸衍生得到的盐。

与碱形成的盐的实例包括由氢氧化钾、氢氧化钠、氢氧化铵、和氢氧化季铵例如氢氧化四甲铵衍生得到的盐。

本发明的水溶性前药当放置于大气中时，可以吸附湿气、吸附水分、或者形成水合物，这类水合物也被包括在本发明中。

此外，本发明的水溶性前药可以吸附其它类型的溶剂形成溶剂化物，这类溶剂化物也被包括在本发明中。

本文中所使用的“氨基酸侧链”的实例包括天然存在的氨基酸侧链以及非天然存在的氨基酸侧链。

“天然存在的氨基酸侧链”的实例优选为天然存在的氨基酸的侧链，例如甲基、异丙基、2-甲基丙基、1-甲基丙基、苄基、吲哚-3-基甲基、2-(甲硫基)乙基、4-氨基丁基、和3-氨基丙基，更优选为天然存在的亲脂性氨基酸的侧链例如甲基、2-甲基丙基、苄基、和吲哚-3-基甲基。

“非天然存在的氨基酸侧链”的实例优选为C5-C12烷基、环烷基甲基、被取代或未被取代的芳基甲基、(环烷基硫基)甲基、和烷硫基-(CH₂)_r-，其中r是整数1或2。

“C5-C12烷基”的实例是含有5-12个碳原子的直链或支链烷基；更优选为C8-C12直链烷基例如正辛基、壬基、癸基、十一烷基、和十二烷基。

“烷硫基-(CH₂)_r-”的实例是包括含有2-10个碳原子的直链或支链烷基的烷硫基甲基或烷硫基乙基，例如乙硫基甲基、乙硫基乙基、正丙硫基甲基、正丁硫基甲基、正戊硫基甲基、正辛硫基甲基、正壬硫基甲基、正癸硫基甲基、和叔丁硫基甲基；更优选为乙硫基乙基、正丙硫基甲基、和正丁硫基甲基。

“被取代或未被取代的芳基甲基”的实例优选包括4-苯基苄基、萘-2-基甲基、[4-(4-羟基苯氧基)苯基]甲基、和(4-低级烷氧苯基)甲基(术语“低级烷氧基”是指含有1-6个碳原子的直链或支链烷基链，其优选实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、和异丙氧基)。“被取代或未被取代的芳基甲基”的最优选实施方案包括4-苯基苄基、萘-2-基甲基、(4-甲氧苯基)甲基、和[4-(4-羟基苯氧基)苯基]甲基。

本文中所使用的术语“不溶性化合物”是指在水中不溶解的化合物，其实例是指在蒸馏水中的溶解度优选为1mg/mL或者更小、更优选为0.1mg/mL 或者更小的化合物(所述溶解度符合“Japanese Pharmacopoeia，第14版，Ggeneric Rule 23”的规定)。这类化合物的实例包括喜树碱、唑类抗真菌剂类、紫杉烷类、和抗癌核苷酸。

本文中所使用的术语“可溶性侧链”是指与“Y”结合的基团，或者例如在式(1)中指“R¹-NH-W-CO-O-”。

本文中所使用的术语“活性形式”是指由其水溶性前药、其可药用盐、或其水合物或溶剂化物水解得到的化合物(Y-O-)。

本发明中的术语“紫杉烷类”是指紫杉醇[Front.Biotechnol.Pharm.(2000)，1，336-348]、泰索帝[J.Med.Aromat.Plant Sci.(2001)，22/4A-23/1A 4-5]、IDN5109[Chirality，(2000)，12(5/6)，431-441]、BMS 188797[Clinical CancerResearch.5(suppl.)，3859，Nov 1999]、和BMS184476[J.Clinical Oncology19：2493-2503，1 May 2001]。

本文中所使用的术语“喜树碱类”[(a)Cancer Chemotherapy andBiotherapy：Principle and Practice，第2版，Lippincott-Ravenmeans，第463-484 页，(b)Biochim.Biophys.Acta(1998)，1400(1-3)，107-119]是指任何含有喜树碱主链的化合物，例如喜树碱、SN-38、9-氨基喜树碱、9-硝基喜树碱、和BN-80915[Anti-cancer Drugs(2001)，12(1)，9-19]。

本文中所使用的术语“抗癌核苷酸类”是指胞苷衍生物[CancerChemotherapy and Biotherapy：Principle and Practice，第2版，Lippincott-Ravenmeans，第213-233页]，例如DFDC(吉西他滨)，DMDC[Clin.Cancer Res.(2000)，6(6)，2288-2294]、FMDC[Curr.Opin.Invest.Drugs(PharmaPress Ltd.)(2000)，1(1)，135-140]、阿糖胞苷、地西他滨[IDrugs(2000)，3(12)，1525-1533]、曲沙他滨[Clin.Cancer Res.(2000)，6(4)，1574-1588]、2’-氰基-2’-脱氧胞苷(CNDAC)、3′-乙炔基胞苷(TAS106)[Jpn.J.Cancer Res.(2001)，92(3)，343-351]、5-氟-5’-脱氧胞苷[Bioorg.Med.Chem.Lett.，(2000)，8，1697-1706]、和5-乙烯基-5’-脱氧胞苷，或者腺苷衍生物[Cancer Chemotherapyand Biotherapy：Principle and Practice，第2版，Lippincott-Ravenmeans，第235-252页]例如氟达拉滨、和克拉曲滨。

本文中所使用的术语“细胞增殖性疾病”是指由细胞内转导系统、或某些蛋白质的信号转导机制中的缺陷引起的疾病，其实例包括引起癌症的疾病。

在式(1)所示的本发明前药中，优选化合物的实例是下述化合物。

在式(1)所示的水溶性前药中，优选式(2)或(3)所示的化合物。

在式(2)所示的化合物中，R¹优选为氢原子、甲基或乙基；更优选为氢原子或甲基；尤其优选为氢原子。

X优选为羰基或亚甲基；更优选为羰基。

R²优选为氢原子或甲基。

R⁴优选为氢原子或甲基。

R³优选为C1-C3烷基，更优选为甲基或乙基，尤其优选为甲基。

组成式(2)所示化合物的可溶性侧链部分的X、和R¹-R⁴的优选组合实例如下所示，但是并不能理解为本发明受这些实例的限制。

表1

	R¹	R²	R³	R⁴	X
						1	H	H或-CH₃	-CH₃	H或-CH₃	C＝O
2	H	H或-CH₃	-C₂H₅	H或-CH₃	C＝O
						3	-CH₃	H或-CH₃	-CH₃	H或-CH₃	C＝O
4	-CH₃	H或-CH₃	-C₂H₅	H或-CH₃	C＝O
						5	-C₂H₅	H或-CH₃	-CH₃	H或-CH₃	C＝O
6	-C₂H₅	H或-CH₃	-C₂H₅	H或-CH₃	C＝O
						7	H	H或-CH₃	-CH₃	H或-CH₃	-CH₂-
8	H	H或-CH₃	-C₂H₅	H或-CH₃	-CH₂-
						9	-CH₃	H或-CH₃	-CH₃	H或-CH₃	-CH₂-
10	-CH₃	H或-CH₃	-C₂H₅	H或-CH₃	-CH₂-
						11	-C₂H₅	H或-CH₃	-CH₃	H或-CH₃	-CH₂-

12

-C₂H₅

H或-CH₃

-C₂H₅

H或-CH₃

-CH₂-

在表1中，式(2)化合物的实例优选为含有包括在引用编号1、2、3、和4中的可溶性侧链的化合物，更优选为含有包括在引用编号1和2中的可溶性侧链的化合物。

如果存在上述可溶性侧链的话，即使Y-OH是不溶性化合物，它也可以转化为具有良好水溶性的化合物。例如，所述水溶性前药在pH为4或者更低的溶液中可以长时间保持稳定；但是当pH为5或更高时、特别是在pH为7-8的生理条件下时，由该仲或叔醇式羟基衍生得到的活性形式可以在短时间内迅速地定量游离。

在式(3)所示化合物中，R¹优选为氢原子、甲基、或乙基；更优选为氢原子或甲基；尤其优选为氢原子。

在式(3)中，n优选为1-3，更优选为1。

当n是1时，R⁵优选为氢原子或-COOR⁶(R⁶是C1-C3烷基)，更优选为氢原子、-COOCH₃、或-COOC₂H₅。

当n是2-6时，R⁵优选为氢原子。

组成式(3)所示化合物的可溶性侧链的n、R¹、和R⁵的优选组合实例如下所示，但是并不能理解为本发明受这些实例的限制。

表2

	R¹	n	R⁵
				1	H	1′	H
2	H	1	-CO₂CH₃
				3	H	1	-CO₂C₂H₅
4	-CH₃	1	H
				5	-CH₃	1	-CO₂CH₃
6	-CH₃	1	-CO₂C₂H₅
				7	-C₂H₅	1	H
8	-C₂H₅	1	-CO₂CH₃
				9	-C₂H₅	1	-CO₂C₂H₅
10	H	2	H
				11	H	2	-CO₂CH₃
12	H	2	-CO₂C₂H₅
				13	-CH₃	2	H
14	-CH₃	2	-CO₂CH₃
				15	-CH₃	2	-CO₂C₂H₅
16	-C₂H₅	2	H
				17	-C₂H₅	2	-CO₂CH₃
18	-C₂H₅	2	-CO₂C₂H₅
				19	H	3	H
20	H	3	-CO₂CH₃
				21	H	3	-CO₂C₂H₅
22	-CH₃	3	H

23	-CH₃	3	-CO₂CH₃
				24	-CH₃	3	-CO₂C₂H₅
25	-C₂H₅	3	H
				26	-C₂H₅	3	-CO₂CH₃
27	-C₂H₅	3	-CO₂C₂H₅

在表2中，含有可溶性侧链的式(3)化合物实例优选为引用编号1、2、3、4、5、和6中的化合物，更优选为引用编号1、3、和4中的化合物。

如果存在上述可溶性侧链的话，即使Y-OH是不溶性化合物，它也可以转化为具有良好水溶性的化合物。例如，所述水溶性前药在pH为4或者更低的溶液中可以长时间保持稳定；但是当pH为5或更高时、特别是在pH为7-8的生理条件下时，由该仲或叔醇式羟基衍生得到的活性形式可以在短时间内迅速地定量游离出来。

在本发明中，式(1)中的Y为具有醇式羟基的Y-OH所示化合物的残基。

Y-OH中的羟基优选为仲或叔醇式羟基。所述Y-OH可以是不溶性化合物，但是即使其不溶解，在连接上前述基团之后也显示出良好的水溶性。此外，所述水溶性前药在pH为4或者更低的溶液中可以长时间保持稳定；但是当pH为5或更高时、特别是在pH为7-8的生理条件下时，由该醇式羟基衍生得到的活性形式(Y-O-)可以在短时间内迅速地定量游离。

对于可与增溶性基团相连、且被包括在本发明上式中的Y-OH并无特别限制，只要其为含有醇式羟基、优选仲或叔醇式羟基、更优选叔醇式羟基的化合物即可。

这类化合物的实例优选为喜树碱类、唑类抗真菌剂类、紫杉烷类、和抗癌核苷酸类。

喜树碱类

在本文中，由喜树碱类衍生得到的基团实例包括下面由Y所示的基团。前述Y是式(4)所示的基团：

Figure 388882DEST_PATH_G200580019055601D00041

其中

*表示连接位置；

m是0或1；

R¹¹表示氢原子、卤素原子、或C1-C6烷基；

R¹²表示氢原子、卤素原子、C1-C6烷基、或羟基；

R¹³表示氢原子、氨基、硝基、或(二甲氨基)甲基；

R¹⁴表示氢原子、C1-C6烷基、(4-甲基哌嗪基)甲基、或(叔丁氧亚氨基)甲基；以及

R¹³和R¹⁴、以及R¹¹和R¹²可以分别彼此相连形成5-或6-元环，其中所述5-或6-元环可以含有1-2个杂原子，并且可以含有1-3个选自下述A组中的取代基，其中所述A组的取代基可以进一步含有1-3个选自下述B组中的取代基：

A组：C1-C10烷基、氨基、单-C1-C8烷基氨基、二-C1-C8烷基氨基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、和X＝所示基团(其中X表示氧原子或硫原子)；

B组：C1-C6烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、二-C1-C6烷基氨基、C3-C7环烷基、杂环、以及芳环(其可以含有1-3个选自羟基、C1-C6烷氧基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、和二-C1-C6烷基氨基中的取代基)。

在式(4)所示基团中，与由醇式羟基衍生得到的氧原子相连的碳的立体化学优选具有S构型。

在本文中，式(4)所示化合物的优选实例包括其中R¹¹优选为氢原子，R¹² 优选为氢原子或羟基，R¹³表示氢原子或(二甲氨基)甲基，以及R¹⁴表示氢原子或乙基的化合物。

式(4)所示化合物的实例包括下述化合物：

4(S)-乙基-4-羟基-1H-吡喃并[3’，4’：6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，14(4H，12H)-二酮(喜树碱)；

9-氨基喜树碱；

9-硝基喜树碱；

5(R)-乙基-9，10-二氟-1，4，5，13-四氢-5-羟基-3H，15H-氧杂

并(oxepino)[3’，4’：6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15-二酮(BN-80915)；和7-乙基-10-羟基喜树碱(SN-38)。

式(4)所示化合物的其它优选实施方案包括其中所述Y如下通式(5)所示的化合物：

其中

*表示连接位置；

R¹¹和R¹²分别具有与式(4)中R¹¹和R¹²相同的定义；以及

Z表示-NH-C(＝X)-N(R²¹)-或-N＝C(R²²)-N(R²¹)-。

在本文中，

R²¹表示氢原子或可以含有1-3个选自下述B组中的取代基的C1-C10烷基：

B组：C1-C6烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、二-C1-C6烷基氨基、C3-C7环烷基、杂环和芳环(其可以含有1-3个选自羟基、C1-C6烷氧基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、和二-C1-C6烷基氨基中的取代基)；

X表示氧原子或硫原子。

此外，其中Y如式(5)所示的化合物的实例是含有如式(6)、(7)、或(8)所示的Y的化合物。

前述Y为如下式(6)所示的水溶性前药。

R¹¹、R¹²、和R²¹定义同式(4)和(5)。

在式(6)中，R¹¹和R¹²优选为氢原子。

R²¹优选为氢原子、或可含有选自下示D组中的取代基的C1-C8烷基：

D组：C1-C3烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、单-C1-C3烷基氨基、二-C1-C3烷基氨基、C3-C7环烷基、杂环、以及芳环(其可以含有1-3个选自羟基、C1-C3烷氧基、和卤素原子中的取代基)。

R²¹更优选为C1-C8烷基、苯基-C1-C8烷基、杂环-C1-C8烷基、烷氧苯基C1-C8烷基、或者卤代苯基C1-C8烷基。

R²¹进一步更优选为甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基、正丁基、1，1-二甲基乙基、2-甲基丙基、2，2-二甲基丙基、正戊基、3-甲基丁基、2-正己基、3，3-二甲基丁基、正庚基、正辛基、苄基、苯乙基、2-(二甲氨基)乙基、2-(4-吗啉代)乙基、3-(二甲氨基)丙基、2-(吡啶-2-基)乙基、2-(吡啶-3-基)乙基、2-(4-甲氧苯基)乙基、2-(4-氯苯基)乙基、2-(4-氟苯基)乙基、或者3-苯丙基。

所述式(6)所示化合物的实例包括其中Y表示含有至少一种醇式羟基(例如在9位上)的化合物(Y-OH)的残基的那些化合物，其中所述化合物选自：

a)

(9S)-1-丁基-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

b)

(9S)-9-乙基-9-羟基-1-[2-(4-吗啉代)乙基]-1H，12H-喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

c)

(9S)-1-[3-(二甲氨基)丙基]-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

k)(9S)-9-乙基-1-己基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

t)(9S)-1-(3，3-二甲基丁基)-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮。

其中，更优选下述化合物：

b)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-苯乙基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

c)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(2-甲基丙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

d)(9S)-9-乙基-1-己基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

e)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

f)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

g)(9S)-1-[2-(4-氯苯基)乙基]-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

h)(9S)-9-乙基-1-[2-(4-氟苯基)乙基]-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；以及

i)(9S)-1-(3，3-二甲基丁基)-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮。

前述Y如下式(7)所示的化合物如下所述。

R¹¹、R¹²、和R²¹定义同式(4)和(5)。

在式(7)中，R¹¹、和R¹²优选为氢原子。

R²¹优选为氢原子或可含有选自下示D组中的取代基的C1-C8烷基：

R²¹更优选为苯基或C1-C6烷基，进一步更优选为苯基、3-甲基丁基、或正戊基。

所述式(7)所示化合物的实例包括其中Y表示含有至少一种醇式羟基(例如在9位上)的化合物(Y-OH)的残基的化合物，其中所述化合物选自：

b)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-苯乙基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2(3H)-硫酮-10，13(9H，15H)-二酮；和

c)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2(3H)-硫酮-10，13(9H，15H)-二酮。

其中Y如式(8)所示的化合物如下所述。

R¹¹、R¹²、R²¹、和R²²分别具有与式(4)和(5)中R¹¹、R¹²、R²¹和R²²相同的含义。

在式(8)中，

(i)R¹¹优选为氢原子。

(ii)R¹²优选为氢原子或C1-C3烷基，更优选为氢原子或甲基。

(iii)R²¹优选为氢原子、或可含有1-3个选自下述D组中的取代基的C1-C8烷基：

(iv)R²¹更优选为甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基、正丁基、1，1-二甲基乙基、2-甲基丙基、2，2-二甲基丙基、正戊基、3-甲基丁基、2-正己基、3，3-二甲基丁基、正庚基、正辛基、苄基、苯乙基、2-(二甲氨基)乙基、2-(4-吗啉代)乙基、3-(二甲氨基)丙基、2-(吡啶-2-基)乙基、2-(吡啶-3-基)乙基、2-(4-甲氧苯基)乙基、2-(4-氯苯基)乙基、2-(4-氟苯基)乙基、或者3-苯丙基。

(v)R²²优选为氢原子、氨基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、可含有1-3个选自下述D组中的取代基的C1-C6烷硫基、可含有1-3个选自下述D组中的取代基的单-C1-C6烷基氨基、或者可含有1-3个选自下述D组中的取代基的二-C1-C6烷基氨基：

(vi)R²²更优选为氢原子、甲基、乙基、丙基、羟甲基、氨甲基、(甲氨基)甲基、(二甲氨基)甲基、氯甲基、三氟甲基、苯基、2-吡啶基、甲氧基、乙氧基、甲硫基、乙硫基、甲氨基、丁氨基、或者二甲氨基。

至于上述(i)-(vi)，可以根据判断将优选的实施方案进行组合。允许的组合实例是(i)、(ii)、(iii)、和(v)；(i)、(ii)、(iii)、和(vi)；(i)、(ii)、(iv)、和(v)；以及(i)、(ii)、(iv)、和(vi)。

所述式(8)所示化合物的实例包括其中Y表示含有至少一种醇式羟基(例如在9位上)的化合物(Y-OH)的残基的化合物，其中所述化合物选自：

b)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-[2-(4-吗啉代)乙基]-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐；

l)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-甲基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5] 吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

gg)(9S)-9-乙基-9-羟基-2-羟甲基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

hh)(9S)-2-氯甲基-9-乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

mm)(9S)-2-(二甲氨基)-9-乙基-9-羟基-1-(2-甲基丙基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐；以及

nn)(9S)-2-(丁氨基)-9-乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐。

在上述喜树碱类中，特别优选的实例是下述化合物：

5(R)-乙基-9，10-二氟-1，4，5，13-四氢-5-羟基-3H，15H-氧杂并(oxepino)[3’，4’：6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15-二酮(BN-80915)；

bb)(9S)-9-乙基-9-羟基-2-甲基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；以及

ee)(9S)-9-乙基-9-羟基-2-羟甲基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

唑类抗真菌剂类

当Y是由唑类抗真菌剂类衍生得到的残基时，所述唑类抗真菌剂类的实例包括三唑。

所述唑类抗真菌剂类的实例包括至少一种选自下述的化合物：

(2R，3R)-3-{4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基}-2-(2，5-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-醇；

2-[(1R，2R)-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙基]-4-[4-(2，2，3，3-四氟丙氧基)苯基]-3(2H，4H)-1，2，4-三唑酮；

(+)-2-(2，4-二氟苯基)-3-甲基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-3-(6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哒嗪-3-基硫基)丁-2-醇；

(2R)-2-(2，4-二氟苯基)-1-[3-[(E)-4-(2，2，3，3-四氟丙氧基)-苯乙烯基]-(1，2，4-三唑-1-基)-3-(1，2，4-三唑-1-基)]丙-2-醇；

dl-苏式-2-(2，4-二氟苯基)-3-甲基-磺酰基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-醇；

(-)-4-[4-[4-[4-[[5-(2，4-二氟苯基)-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)四氢呋喃-3-基]甲氧基]苯基]哌嗪基]]苯基]-2[(1S，2S)-1-乙基-2-羟丙基]-3H-1，2，4-三唑-3-酮；

(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-醇；

3-甲基-3-甲硫基-1-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(三氟甲基苯基)-丁-2-醇；

(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4，5-三氟苯基)-丁-2-醇；以及

(2R，3R)-3-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2-(3-氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-醇。

在本发明的水溶性前药中，由喜树碱类衍生得到的化合物实例包括下述化合物：

(b)(9S)-9-乙基-9-(甘氨酰基-肌氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

(d)(9S)-9-乙基-9-(肌氨酰基-肌氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

(j)(9S)-9-乙基-9-(肌氨酰基-N-甲基丙氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

本发明的水溶性前药优选为(b)、(d)、(e)、和(h)化合物，更优选为(b)和 (e)化合物。

附图简述

图1为示出了化合物2A在人血清中随时间转化为内酯形式和羧酸盐(carboxylate)形式的百分比变化的图。

图2为示出了化合物2A在小鼠血清中随时间转化为内酯形式和羧酸盐形式的百分比变化的图。

图3为示出了化合物2A在猴血清中随时间转化为内酯形式和羧酸盐形式的百分比变化的图。

图4为示出了化合物2A在狗血清中随时间转化为内酯形式和羧酸盐形式的百分比变化的图。

图5为示出了一定时间后化合物2A在各pH下的残留百分数(％)(pH稳定性)的图。

图6为示出了对照化合物2在人血清中随时间转化为内酯形式和羧酸盐形式的百分比变化的图。

图7为示出了对照化合物2在小鼠血清中随时间转化为内酯形式和羧酸盐形式的百分比变化的图。

完成本发明的最佳方式

在本发明中，式(1)所示化合物可以采用下述方法制备，但是所述制备本发明化合物的方法并不意味着对本发明构成限制。尽管本发明的水溶性前药都是新化合物，但是它们可以通过熟知的化学方法，使用可商购得到的原料、或者经标准方法合成得到的原料(如果需要的话)制备得到。

在下述制备方法中，R¹、R²、R³、R⁴、X、Y、R⁵、n、R⁷、以及R⁸分别具有与式(2)、(3)、和(9)中R¹、R²、R³、R⁴、X、Y、R⁵、n、R⁷、以及R⁸相同的含义。P¹表示氨基保护基团，P²表示来自羰基化试剂的残基，以及Hal表示卤素原子(即氯原子、溴原子、或碘原子)。

反应方法1-1

反应方法1-2

<反应方法1>

反应方法1示出了在其可溶性侧链上含有叔氨基的水溶性前药的制备实例。

式(2)所示的水溶性前药可以方便地通过例如将Y-OH中存在的仲或叔羟基酰化得到。

制备化合物3a

如反应方法1-1所述，(3a)可以通过将仲或叔醇(1a)与适宜的化合物(2a)在适宜的溶剂中、在缩合剂的存在下反应得到。化合物2a的实例包括羧酸(R⁷＝OH)、羧酸酯(R⁷＝OR⁸)、和酰卤化合物(R⁷＝卤素原子:氯原子等)，其中优选羧酸。

Y-OH可以商购得到或者通过已知方法制得(WO03/045952、WO03/043631等)。

当化合物(2a)是二肽(X＝CO)羧酸、或肽衍生物(X＝CH₂)时，用于制备上述化合物(2a)的氨基酸衍生物可以商购得到，或者通过文献(例如J.Am.Chem.Soc.2000，122，762-766；J.Org.Chem，1998，5240；Tetrahedron Asymmetry， 1995，1741；Tetrahedron Asymmetry，1998，4249)中描述的已知方法制备。所述羧酸可以通过已知方法转化为羧酸酯(R⁷＝OR⁸)或酰卤化合物(R⁷＝卤素原子)。

此外，所述二肽衍生物可以通过本领域技术人员熟知的标准肽化学方法制备得到[参见“The Practice of Peptide Synthesis”，M.Bodansky和A.Bodansky，第2版，1994(Springer-Verlag)]。

用于上述缩合反应中的溶剂实例包括二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙腈、氯仿、二噁烷、和二甲基甲酰胺。

缩合剂的实例包括1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐、二环己基碳二亚胺、BOP、HBTU、TNTU、PyBroP^TM、PyBOP^TM、TBTU、TSTU、和HOBt [参见The Combinatorial Chemistry Catalog，Feb.，1997；可由Novabiochem.商购得到缩合剂]。

制备化合物4a

虽然根据相应羧酸的种类来制备化合物4a，但通常优选使用相应的羧酸中氨基被保护的羧酸(2a)。缩合反应之后，接着除去化合物(3a)中的保护基团，得到化合物(4a)所示的水溶性前药。

将所得到的含有氨基保护基团的水溶性前药按照例如方法1-2中所示的方法脱保护。

方法1-1和1-2中的缩合反应以及对氨基保护基团P¹的选择可以适当地采用已知方法完成(参见“The Practice of Peptide Synthesis”，M.Bodansky和A.Bodansky，第2版，1994(Springer-Verlag)；“Protective Groups in OrganicSynthesis”，Theodora Greene，1999(Wiley-Interscience))。

氨基保护基团的实例包括下述：

氨基甲酸酯(R¹R²NX形式)

甲氧羰基、9-芴基甲氧羰基、9-(2-磺基(sulfo))芴基甲氧羰基、9-(2，7-二溴)芴基甲氧羰基、4-甲氧苯甲酰甲基氧基羰基、乙氧羰基、2，2，2-三氯乙氧羰基、2-三甲基甲硅烷基乙氧羰基、苯乙氧羰基、1-(1-金刚烷基)-1-甲基乙氧羰基、2-氯乙氧羰基、2-溴乙氧羰基、2-碘乙氧羰基、2，2-二氯乙氧羰基、2，2-二溴乙氧羰基、2，2，2-三氯乙氧羰基、2，2，2-三溴乙氧羰基、1，1-二甲基-2-氯乙氧羰基、1，1-二甲基-2-溴乙氧羰基、1，1-二甲基-2，2-二溴乙氧羰基、1，1-二甲基-2，2，2-三氯乙氧羰基、1-甲基-1-(4-联苯基)乙氧羰基、1-(3，5-二叔丁基苯基)-1- 甲基乙氧羰基、2-(2’-吡啶基)乙氧羰基、2-(4’-吡啶基)乙氧羰基、2-(N，N-二环己基羧酰胺)乙氧羰基、叔丁氧羰基、1-金刚烷氧羰基、乙烯氧羰基、烯丙氧羰基、1-异丙基烯丙氧羰基、肉桂酰氧羰基、4-硝基肉桂酰氧羰基、8-喹啉基氧羰基、哌啶基氧羰基、苄氧羰基、对甲氧苄氧羰基、对硝基苄氧羰基、对氯苄氧羰基、对溴苄氧羰基、对氰基苄氧羰基、邻硝基苄氧羰基、2，4-二氯苄氧羰基、4-甲基亚硫酰基苄氧羰基、9-蒽基甲氧羰基、二苯基甲氧羰基、2-甲硫基乙氧羰基、2-甲磺酰基乙氧羰基、2-(对甲苯磺酰基)乙氧羰基、[2-(1，3-dithianyl)]甲氧羰基、4-甲硫基苯氧羰基、2，4-二甲硫基苯氧羰基、2-膦基乙氧羰基、2-三苯基膦基异丙氧羰基、1，1-二甲基-2-氰基乙氧羰基、间氯-对乙酰基苄氧羰基、对(二羟基硼烷基)苄氧羰基、5-苯并异噁唑基甲氧羰基、2-(三氟甲基)-6-色满基(chromonyl)甲氧羰基、间硝基苯氧羰基、3，5-二甲氧苄氧羰基、3，4-二甲氧基-6-硝基苄氧羰基、以及苯基(邻硝基苯基)甲氧羰基；

脲型

哌啶基羰基、对甲苯磺酰基氨基羰基、和苯氨基硫代羰基(phenylaminothiocarbonyl)；

其它

叔戊氧基羰基、苄基硫代羰基、环丁氧基羰基、环戊氧基羰基、环己氧基羰基、环丙基甲氧羰基、对癸氧基苄氧羰基、二异丙基甲氧羰基、2，2-二甲氧羰基乙烯氧基羰基、邻(N，N-二甲基羧酰胺)苄氧羰基、1，1-二甲基-3-(N，N-二甲基羧酰胺)丙氧羰基、1，1-二甲基丙炔氧基羰基、二(2-吡啶基)甲氧羰基、2-呋喃基甲氧羰基、异冰片氧基羰基、异丁氧基羰基、异烟酰(isonicotinyl)氧基氧基、对(对甲氧苯基偶氮)苄氧羰基、1-甲基环丁氧基羰基、1-甲基环己氧基羰基、1-甲基-1-环丙基甲氧羰基、1-甲基-1-(3，5-二甲氧苯基)乙氧羰基、1-甲基-1-(对苯偶氮基苯基)乙氧羰基、1-甲基-1-苯基乙氧羰基、1-甲基-1-(4-吡啶基)乙氧羰基、对(苯偶氮基)苄氧羰基、2，4，6-三叔丁基苯氧羰基、4-(三甲基铵)苄氧羰基、以及2，4，6-三甲基苄氧羰基；以及

酰胺(R¹R²NX形式)

甲酰基、乙酰基、氯乙酰基、三氯乙酰基、三氟乙酰基、苯乙酰基、3-苯基丙酰基、甲基吡啶基、苯甲酰基、对苯基苯甲酰基、邻硝基苯乙酰基、邻硝基苯氧乙酰基、乙酰乙酰基、(N-二硫苄氧羰基氨基)乙酰基、3-(对羟基苯基)丙酰基、3-(邻硝基苯基)丙酰基、2-甲基-2-(邻硝基苯氧基)丙酰基、2-甲基-2-(邻苯偶氮基苯氧基)丙酰基、4-氯丁酰基、3-甲基-3-硝基丁酰基、邻硝基苯乙烯醛基(cinnamoyl)、邻硝基苯甲酰基、和邻(苯甲酰甲基)苯甲酰基。

在缩合反应之后除去氨基保护基团可以通过本领域技术人员已知的方法完成，例如使用三氟乙酸除去Boc基团、使用哌啶除去Fmoc基团以及使用四丁基氟化铵除去2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基(Teoc)、三甲基甲硅烷基乙基和叔丁基二甲基甲硅烷基、以及使用催化氢化除去Cbz基团的方法。

反应方法2-1

反应方法2-2

<反应方法2>

反应方法2示出了制备其中可溶性侧链含有磺酰基的水溶性前药的方法的实例。

制备化合物2b

首先，将醇(1b)羰基化得到化合物(2b)。羟基的羰基化通过将醇(1b)与适宜的羰基化试剂在适宜溶剂中进行反应完成。

可使用的溶剂实例包括二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙腈、氯仿、二噁烷、和二甲基甲酰胺。

可使用的羰基化试剂包括对硝基苯基氯甲酸酯、羰基二咪唑、和光气(phosgenes)。

上述反应通常在大约-10℃至25℃下反应大约1-24小时。

制备化合物3b

含有可溶性侧链的化合物3b可以通过已知方法制备(Tetrahedron(1999)，55：6623-6634)。

除去醇(3b)中的氨基可以适当采用已知方法完成(参见The Practice ofPeptide Synthesis，M.Bodansky和A.Bodansky，第2版，1994(Springer-Verlag))。

制备化合物4b

接下来，可以将含有相应被保护的氨基的醇(3b)与羰基化化合物(2b)在适宜溶剂的存在下反应，得到氨基被保护的碳酸酯(4b)。

上述反应通常在大约15℃-25℃下反应大约2-48小时。

制备化合物5b

通过已知方法除去碳酸酯(4b)的氨基保护基团后，可以得到化合物(5b)。除去氨基保护基团可以采用已知方法完成，例如反应1中所示的方法。其实例包括使用三氟乙酸除去Boc基团、使用哌啶除去Fmoc基团、使用四丁基氟化铵除去2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基(Teoc)、三甲基甲硅烷基乙基和叔丁基二甲基甲硅烷基、以及使用催化氢化除去Cbz基团。

反应2-2示出了上述方法的具体实例。

反应3-1

Figure DEST_PATH_G16981942150138000D000011

反应3-2

<反应3>

反应3示出了用于制备其中可溶性侧链含有磺酰基的水溶性前药的另一方法的实例。

制备化合物2c

首先，由醇(1c)制备得到2-卤代的碳酸乙酯(2c)。

醇(1c)中的羟基向2-卤代的碳酸乙酯(2)的转化可以通过与商购得到的氯甲酸酯在适宜溶剂中反应完成。

上述反应通常在大约-10℃至25℃下进行大约1-24小时。

制备化合物3c

含有可溶性侧链的硫醇化合物3c可以由商购产品制备，或者通过已知方法制备(Tetrahedron，1999，55，6623-6634；和J.Org.Chem.1995，60，8105-8109)。

保护硫醇化合物(3c)中的氨基可以适当采用已知的方法完成(参见ThePractice of Peptide Synthesis，M.Bodansky和A.Bodansky，第2版，1994(Springer-Verlag))。

制备化合物4c

接下来，氨基被保护的碳酸酯(4c)可以通过将相应的氨基被保护的硫醇化合物(3c)与2-卤代的碳酸乙酯(2c)在适宜溶剂中、在碱存在下反应制得。

可使用的溶剂实例包括二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙腈、氯仿、二噁烷、二甲基甲酰胺、甲醇、和乙醇。

可使用的碱实例包括三乙胺、二异丙基乙基胺、碳酸钾、和碳酸钠。

上述反应通常在大约15℃-100℃下进行大约1-24小时。

制备化合物5c

此外，化合物5c可以采用已知方法、通过将化合物4c与过氧化试剂反应制得。

可使用的过氧化试剂实例包括臭氧、过氧化氢、和间氯过氧苯甲酸。

上述反应通常在大约-10℃至100℃下进行大约1-24小时。

制备化合物6c

化合物(6c)可以通过采用已知方法除去化合物5c中的氨基保护基团制得。除去氨基保护基团可以采用已知方法完成，例如反应1中所示的方法。其实例包括使用三氟乙酸除去Boc基团、使用哌啶除去Fmoc基团、和使用四丁基氟化铵除去2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基(Teoc)、三甲基甲硅烷基乙基和叔丁基二甲基甲硅烷基、以及使用催化氢化除去Cbz基团。

反应3-2示出了上述方法的具体实例。

前面对制备本发明水溶性前药的方法实例进行了示例性说明。反应1-3中感兴趣化合物的分离和纯化可以应用标准的化学操作完成，例如萃取、浓缩、除去溶剂、结晶、过滤、重结晶、以及各种色谱法。

式(1)-(8)所示的本发明水溶性前药、其可药用盐、及它们的水合物、和溶剂化物包括上述水溶性前药的全部立体异构体(例如对映异构体、和非对映异构体包括顺式和反式几何异构体)、异构体的外消旋物、以及其它混合物。式(1)-(8)所示的本发明水溶性前药尤其包括各种立体异构体。

式(1)-(8)所示的本发明水溶性前药、其可药用盐、及它们的水合物、和溶剂化物可以存在不同的互变异构形式，例如酮和烯醇形式、以及亚胺和烯胺形式或者它们的混合物。互变异构体以该互变异构组合在溶液中的混合物形式存在。在固体形式中，通常是一种互变异构体占优。本发明包括本发明化合物的所有互变异构体，包括其中仅仅指明了一种互变异构体的情形。

此外，本发明包括本发明化合物的阻转异构体。阻转异构体是指可以拆分成不受旋转限制异构体的式(1)-(8)所示水溶性前药。

这些异构体根据其物理化学特性，可以通过标准方法分离。例如，外消旋化合物可以通过标准旋光拆分方法拆分为立体纯的异构体，例如使用具有旋光活性酸如酒石酸光学拆分衍生得到非对映异构盐。非对映异构混合物可以采用分步结晶、以及各种色谱技术(例如薄层色谱法、柱色谱法、和气相色谱法)进行分离。

当本发明的水溶性前药可以以游离形式获得时，它们可以通过标准方法形成盐、转化为其水合物或溶剂化物。

或者，当本发明化合物以盐、水合物、或溶剂化物形式获得时，这些化合物可以通过标准方法转化为其游离形式。

式(1)-(8)所示的本发明水溶性前药、其可药用盐、及它们的水合物、和溶剂化物显示出良好的水溶性，同时由于它们通过化学转化迅速转化为活性形式，使得其种间或个体差异性较小。

特别地，当应用于含有醇式基团、或者优选仲或叔醇式羟基的不溶性药剂时，本发明非常有用。

例如，本发明的水溶性前药可以很容易溶解用于细胞增殖性疾病的预防或治疗剂，例如喜树碱类、紫杉烷类、和抗癌核苷酸类；或者用作抗真菌剂的不溶性化合物，例如唑类抗真菌剂类。因此，含有由上述不溶性化合物衍生得到的本发明式(1)-(8)所示水溶性前药、其可药用盐、或它们的水合物、或溶剂化物作为活性成分的药物组合物是适宜的抗真菌剂、或者用于细胞增殖性疾病的预防或治疗剂。

前述细胞增殖性疾病的实例是癌症。癌症的实例包括结肠直肠癌、肺癌、乳腺癌、胃癌、子宫颈癌、膀胱癌等。

此外，本发明涉及细胞增殖性疾病或真菌疾病的预防或治疗方法。本发明还涉及包括下述步骤的方法：向需要该预防或治疗的患者施用治疗有效量的式(1)-(8)任意一项所示的水溶性前药、或者其可药用盐、水合物、溶剂化物。所述方法特别适用于治疗细胞增殖性疾病包括癌症和实体瘤，例如结肠直肠癌、肺癌、乳腺癌、胃癌、子宫颈癌、和膀胱癌。

当使用本发明的药物组合物作为细胞增殖性疾病的预防剂或治疗剂、或者作为抗真菌剂时，给药的方法优选包括非肠道(静脉内、肌内、或皮下)给药、局部(滴注)给药、和吸入(口或鼻喷雾)给药。给药方式优选包括例如充入适合以小剂量给药的适宜容器中的含水口服溶液剂和混悬剂、以及非肠道溶液剂。此外，给药方式可以根据不同的给药方法进行调节，包括涉及制剂的控制释放，例如皮下移植。

本发明的药物组合物优选为水溶液状制剂。更具体地说，本发明的水溶液状制剂含有式(1)-(8)所示的水溶性前药、其可药用盐、及它们的水合物、和溶剂化物。

作为水溶液可以使用包括磷酸盐缓冲剂、生理盐水、和各种输液。

水溶液的pH优选为4或者更低，更优选为3或者更低，进一步更优选为2-3，在这样的pH下，式(1)-(8)所示的水溶性前药、其可药用盐、及它们的水合物、和溶剂化物可以在溶液中长时间保持稳定。在另一方面，优选在pH5或者更高、或者更优选在pH7-8的生理条件下，衍生自醇式羟基的活性形式可以在短时间内迅速地定量游离。

因此，例如当其注射形式在优选为4或者更低、更优选为3或者更低、进一步更优选2-3的pH下给药时，其活性形式可以迅速离解在血液中，此时的水溶液状制剂是特别有效的。

水溶液状制剂通过熟知的方法，使用各种添加剂例如稳定剂、调味剂和稀释剂制备得到。

稳定剂的实例包括对羟基苯甲酸酯例如对羟基苯甲酸甲酯、和对羟基苯甲酸丙酯；醇类例如氯丁醇、苄醇、和苯乙醇；苯扎氯铵；酚类例如苯酚和甲酚；硫柳汞；脱氢乙酸；以及山梨酸。

芳香剂的实例包括常用的甜味剂、酸味剂、和香料。

此外，可用于制备液体制剂的溶剂实例乙醇、苯酚、氯甲酚、纯化水、和蒸馏水。

表面活性剂或乳化剂的实例包括聚山梨酯80、聚氧乙烯40硬脂酸酯、和聚桂醇。

当使用本发明的药物组合物作为细胞增殖性疾病的预防剂或治疗剂、或者抗真菌剂时，可使用的式(1)-(8)所示的水溶性前药、或其可药用盐、或它们的水合物、或溶剂化物的用量可以根据患者症状、年龄、体重、相对健康状况、是否存在其它治疗剂、给药方法等变化而变化。

例如，上述活性成分(水溶性前药)可以按照有效剂量递送至患者(温血动物特别是人)；例如对于非肠道制剂而言，日剂量优选为0.1-1000mg/kg体重，进一步更优选为10-800mg/kg体重。根据症状不同，上述剂量可以适当地每天给药一次或者分成几部分一天给药几次。

对于式(1)-(8)所示的水溶性前药、或其可药用盐、或它们的水合物、或溶剂化物在水溶液中的浓度没有限制，这取决于疾病的严重程度和类型，但是通常优选为(1)μM至(500)μM。

在此将本文中引用的所有现有技术参考文献引入作为参考。

实施例

下面参照实施例对本发明进行具体的示例性说明，但是不应当理解为对其构成限制。

NMR分析使用JEOL JNM-EX270(270MHz)、JNMGSX400(400MHz)、或JNM-A500(500MHz)完成。NMR数据以ppm(百万分之几)报道，参照样本溶剂的氘固定信号。

质谱数据使用JEOL JMS-DX303、或JMS-SX/SX102A获得。

来自装备有高效液相色谱法装置的质谱仪数据使用装备有Waters996-600E梯度高效液相法装置的micromass(Micromass，ZMD)、或者装备有Agilent 1100梯度高效液相色谱法装置(Agilent Technologies)的micromass(Finnigan，Navigator)获得。

对于合成有机反应，商购得到的试剂使用时不再进一步纯化。

在实施例中，室温是指大约20-25℃的温度。

所有的无水反应在氮气氛下进行。除非另有指定，减压浓缩或除去溶剂使用旋转蒸发器完成。

在制备化合物时，如果需要的话它们具有被保护基团保护的官能基团，并且这些保护基团可以在制备得到目标分子的保护形式之后除去。保护基团的选择、以及连接和脱连接操作可以例如按照描述在“Greene和Wuts，Protective Group in Organic Synthesis，第2版，John Wiley&Sons，1991”中的方法完成。

高效液相色谱法采用下述两种条件之一。

高效液相色谱法条件1

柱：Combi ODS(ODS，5μm，4.6mm I.D.x 50mm，Wako Pure Chemicals)，COSMOSIL(ODS，5μm，4.6mm I.D.x 50mm，Nakalai Tesque)，或者InertsilC18(ODS，5μm，4.6mm I.D.x 50mm，GL Science)

流动相：(溶剂A)含有0.01％三氟乙酸的水，(溶剂B)含有0.01％三氟乙酸的乙腈。

洗脱方法：在溶剂B中分级梯度洗脱：10％-95％(3.5分钟)，95％-10％(1分钟)，以及10％(0.5分钟)

流速：4.0mL/分钟

高效液相色谱法条件2

柱：Combi ODS(ODS，5μm，4.6mm I.D.x 50mm，Wako Pure Chemicals)，COSMOSIL(ODS，5μm，4.6mm I.D.x 50mm，Nakalai Tesque)，或InertsilC18(ODS，5μm，4.6mm I.D.x 50mm，GL Science)

流动相：(溶剂A)含有0.01％三氟乙酸的水，(溶剂B)含有的0.01％三氟乙酸的乙腈。

洗脱方法：在溶剂B中分级梯度洗脱：30％-35％(0.2分钟)，35％-98％(3.3分钟)，98％-30％(1分钟)，以及30％B(0.5分钟)

流速：4.0mL/分钟

[实施例1]

(9S)-9-乙基-9-{[甲基-(2-甲氨基-乙基)-氨基]-乙酰氧基}-1-戊基-1H， 12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐(化合物1A)

步骤1-A

{[2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸苄基酯

将854mg(4.54mmol)已知物质甲基-(2-甲基-氨基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(J.Med.Chem.，2000，43，3093)溶解于二氯甲烷(50mL)中，然后向该溶液中加入2-溴乙酸苄基酯(1.0mL，6.35mmol)，混合物在室温下搅拌大约24小时。

反应完毕后，将反应溶液浓缩，所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(己烷∶乙酸乙酯＝5∶1-3∶1)，得到534.3mg(35％)为无色粘性油状物的{[2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸苄基酯。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：1.42(9H，s)，2.40(3H，s)，2.65(2H，t，J＝7.1Hz)，2.82(3H，s)，3.20-3.38(2H，m)，3.34(2H，s)，5.13(2H，s)，7.24-7.38(5H，m)

ESI(LC-MS正性模式(positive mode))m/z 337(M+H)。

步骤1-B

{[2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸

将534.3mg(1.59mmol)步骤1-A中制备的{[2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸苄基酯溶解于甲醇(20mL)中，然后加入51mg 5％钯-碳，将其在氢气氛和室温下搅拌1小时。通过过滤除去不溶性物质，滤液浓缩得到391.1mg(100％)为无色粘性油状物的{[2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：1.43(9H，s)，2.72(3H，s)，2.87(3H，s)，2.95-3.10(2H，m)，3.45(2H，s)，3.31-3.63(2H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 247(M+H)

步骤1-C

(9S)-9-({[2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酰氧基)-9-乙基-1- 戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮

将391mg(1.59mmol)步骤1-B中制备的{[2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸、279mg(0.61mmol)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮(按照WO03/045952中实施例2.15制备)、525mg(2.74mmol)1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐、以及224mg(1.83mmol)4-二甲氨基吡啶溶解于二氯甲烷(15mL)中，然后在室温下搅拌4小时。

反应溶液用0.15N盐酸水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物使用硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝30∶0-10∶1)，得到136.4mg(33％)为黄色无定形物质的(9S)-9({[2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酰氧基)-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：0.85-0.95(6H，m)，1.27-1.50(4H，m)，1.40(9H，s)，1.70-1.84(2H，m)，2.03-2.30(2H，m)，2.39(3H，s)，2.58-2.70(2H，m)，2.80(3H，s)，3.18-3.36(2H，m)，3.48(2H，s)，3.81(2H，t，J＝7.3Hz)，5.21(2H，s)，5.37(1H，d，J＝17.3Hz)，5.64(1H，d，J＝17.3Hz)，7.07(1H，s)，7.14(1H，dd，J＝1.3，7.3Hz)，7.38(1H，s)，7.53-7.70(2H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 687(M+H)。

步骤1-D

(9S)-9-乙基-9-{[甲基-(2-甲氨基-乙基)-氨基]-乙酰氧基}-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐

将136.4mg(0.20mmol)步骤1-C制备的(9S)-9-({[2-(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酰氧基)-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮溶解于1N盐酸-乙酸溶液(3mL)中，然后在室温下搅拌2.5小时。

向反应溶液中加入乙酸乙酯，然后将其在室温下搅拌30分钟，所得到的固体通过过滤收集，得到102.7mg(74％)为黄红色固体的(9S)-9-乙基-9-{[甲基-(2-甲氨基-乙基)-氨基]-乙酰氧基}-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸(化合物1A)。

¹H-NMR(270MHz，CD₃OD)δ(ppm)：0.99(3H，t，J＝6.9Hz)，1.09(3H，t，J＝7.4Hz)，1.40-1.62(4H，m)，1.88-2.02(2H，m)，2.15-2.31(2H，m)，2.75(3H，s)，2.96-3.06(3H，m)，3.39-3.62(4H，m)，4.25(2H，t，J＝7.9Hz)，4.44-4.60(1H，m)，4.87-5.03(1H，m)，5.53(2H，s)，5.54(1H，d，J＝17.2Hz)，5.67(1H，d，J＝17.2Hz)，7.55(1H，d，J＝7.3Hz)，7.96-8.17(3H，m)，8.33(1H，s)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 587(M+H)。

[实施例2]

(9S)-9-乙基-9-(甘氨酰基-肌氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐(化合物2A)

步骤2-A

(9S)-9-{[N-(叔丁氧羰基)-甘氨酰基]-肌氨酰氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮

将1.4g(5.67mmol)已知物质[N-(叔丁氧羰基)-甘氨酰基]-肌氨酸(Helvetica Chimica Acta，1991，74，197)、1.3g(2.84mmol)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮、2.2g(11.34mmol)1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐、和1.4g(11.34mmol)4-二甲氨基吡啶溶解于二氯甲烷(50mL)中，然后在室温下搅拌1.5小时。

反应溶液用0.2N盐酸水溶液和碳酸氢钠饱和水溶液洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物使用硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝100∶1-30∶1)，得到1.34g(69％)为黄红色无定形物质的(9S)-9-{[N-(叔丁氧羰基)-甘氨酰基]-肌氨酰氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：

旋转异构体A^*0.86-1.04(6H，m)，1.24-1.53(4H，m)，1.38(9H，s)，1.70-1.90(2H，m)，2.03-2.36(2H，m)，3.04(3H，s)，3.83(2H，t，J＝7.1Hz)，3.96-4.05(2H，m)，4.12(1H，d，J＝17.7Hz)，4.57(1H，d，J＝17.7Hz)，5.21(2H，s)，5.38(1H，d，J＝17.3Hz)，5.46-5.56(1H，m)，5.66(1H，d，J＝17.3Hz)，7.10-7.21(2H，m)，7.40(1H，s)，7.60-7.75(2H，m)；

旋转异构体B^*0.86-1.04(6H，m)，1.24-1.53(4H，m)，1.38(9H，s)，1.70-1.90(2H，m)，2.03-2.36(2H，m)，3.02(3H，s)，3.83(2H，t，J＝7.1Hz)，3.90-3.96(2H， m)，4.12(1H，d，J＝17.7Hz)，4.57(1H，d，J＝17.7Hz)，5.24(2H，s)，5.38(1H，d，J＝17.3Hz)，5.46-5.56(1H，m)，5.68(1H，d，J＝17.3Hz)，7.10-7.21(2H，m)，7.40(1H，s)，7.60-7.75(2H，m)。

^*两种旋转异构体A和B的比例大约为5∶1。

ESI(LC-MS正性模式)m/z 687(M+H)。

步骤2-B

(9S)-9-乙基-9-(甘氨酰基-肌氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐

将1.33g(1.94mmol)步骤2-A制备的(9S)-9-{[N-(叔丁氧羰基)-甘氨酰基]-肌氨酰氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮溶解于1N盐酸-乙酸溶液(15mL)中，然后在室温下搅拌2小时45分钟。

向反应溶液中加入乙酸乙酯，然后将其在室温下搅拌30分，所得到的固体通过过滤收集，得到1.28g(100％)为黄色固体的(9S)-9-乙基-9-(甘氨酰基-肌氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸(化合物2A)。

¹H-NMR(270MHz，CD₃OD)δ(ppm)：

旋转异构体A^*0.99(3H，t，J＝7.1Hz)，1.03(3H，t，J＝7.6Hz)，1.34-1.58(4H，m)，1.90-2.00(2H，m)，2.14-2.30(2H，m)，3.11(3H，s)，3.99(2H，s)，4.25(2H，t，J＝7.3Hz)，4.56(1H，d，J＝17.9Hz)，4.57(1H，d，J＝17.9Hz)，5.51(1H，d，J＝17.4Hz)，5.52(2H，s)，5.61(1H，d，J＝17.4Hz)，7.52-7.57(1H，m)，7.89(1H，s)，7.80(1H，d，J＝8.2Hz)，8.10(1H，t，J＝8.2Hz)，8.38(1H，s)；

旋转异构体B^*0.99(3H，t，J＝7.1Hz)，1.08(3H，t，J＝7.3Hz)，1.34-1.58(4H，m)，1.90-2.00(2H，m)，2.14-2.30(2H，m)，3.08(3H，s)，3.90(1H，d，J＝16.5Hz)， 4.02(1H，d，J＝16.5Hz)，4.25(2H，t，J＝7.3Hz)，4.62(1H，d，J＝18.8Hz)，4.76(1H，d，J＝18.8Hz)，5.52(2H，s)，5.53(1H，d，J＝16.9Hz)，5.65(1H，d，J＝16.9Hz)，7.52-7.57(1H，m)，8.03(1H，d，J＝8.2Hz)，8.10(1H，t，J＝8.2Hz)，8.19(1H，s)，8.34(1H，s)。

^*两种旋转异构体A和B的比例大约为3∶2。

ESI(LC-MS正性模式)m/z 587(M+H)。

[实施例3]

(9S)-9-{[(2-氨基-乙基)-甲基-氨基]-乙酰氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐(化合物3A)

步骤3-A

{[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸苄基酯

将500mg(1.42mmol)肌氨酸苄基酯对甲苯磺酸酯、478mg(2.13mmol)2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基溴化物、和0.25mL(2.13mmol)二异丙基乙基胺溶解于二氯甲烷(10mL)中，然后在室温下搅拌大约3天。反应完毕后，将反应溶液浓缩，所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(乙酸乙酯)，得到175mg(38％)为无色粘性油状物的{[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸苄基酯。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：1.44(9H，s)，2.37(3H，s)，2.63(2H，t，J＝6.0Hz)，3.20(2H，br.q)，3.33(2H，s)，5.15(1H，br.s)，5.16(2H，s)，7.32-7.39(5H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 323(M+H)。

步骤3-B

{[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸

将162mg(0.5mmol)步骤3-A制备的{[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸苄基酯溶解于甲醇(5mL)中，然后向其中加入5％钯-碳，将其在氢气氛和室温下搅拌1小时。过滤除去不溶性物质后，滤液浓缩得到116mg(100％)为无色粘性油状物的{[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸。

¹H-NMR(270MHz，CD₃OD)δ(ppm)：1.45(9H，s)，2.91(3H，s)，3.22(2H，t，J＝6.3Hz)，3.41(2H，t，J＝6.3Hz)，3.63(2H，s)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 233(M+H)。

步骤3-C

(9S)-9-({[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酰氧基)-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮

将112mg(0.48mmol)步骤3-B制备的{[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酸、157mg(0.34mmol)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮、197mg(1.03mmol)1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐、和83mg(0.68mmol)4-二甲氨基吡啶溶解于二氯甲烷(10mL)中，然后在室温下搅拌3小时。

反应溶液用0.3N盐酸水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到61mg(27％)为黄色粘性油状物的(9S)-9-({[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酰氧基)-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：0.88-1.00(6H，m)，1.32-1.53(4H，m)，1.42(9H，s)，1.73-1.86(2H，m)，2.08-2.36(2H，m)，2.39(3H，s)，2.63(2H，t，J＝5.9Hz)，3.20(2H，br.q)，3.46(2H，s)，3.82(2H，t，J＝7.1Hz)，5.21(1H，br.s)，5.22(2H，s)，5.40(1H，d，J＝17.2Hz)，5.67(1H，d，J＝17.2Hz)，7.10(1H，s)，7.14(1H，br.d)，7.40(1H，br.s)，7.58-7.70(2H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 673(M+H)。

步骤3-D

(9S)-9-{[(2-氨基-乙基)-甲基-氨基]-乙酰氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐

将58mg(0.086mmol)步骤3-C制备的(9S)-9-({[2-(叔丁氧羰基氨基)-乙基]-甲基-氨基}-乙酰氧基)-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮溶解于1N盐酸-乙酸溶液(2mL)中，然后在室温下搅拌4小时。

向反应溶液中加入乙酸乙酯，然后将其在室温下搅拌30分钟，所得到的固体通过过滤收集，从而得到54mg(93％)为黄色固体的(9S)-9-{[(2-氨基-乙基)-甲基-氨基]-乙酰氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐(化合物3A)。

¹H-NMR(270MHz，CD₃OD)δ(ppm)：0.99(3H，t，J＝6.9Hz)，1.09(3H，t，J＝7.3 Hz)，1.39-1.62(4H，m)，1.88-2.02(2H，m)，2.16-2.30(2H，m)，3.07(3H，s)，3.37-3.61(4H，m)，4.25(2H，br.t)，4.62(1H，d，J＝17.5Hz)，5.05(1H，d，J＝17.5Hz)，5.52(2H，s)，5.53(1H，d，J＝17.5Hz)，5.67(1H，d，J＝17.5Hz)，7.55(1H，br.d)，7.98-8.16(3H，m)，8.32(1H，s)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 573(M+H)。

[实施例4]

(9S)-9-乙基-9-(几氨酰基-肌氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐(化合物4A)

步骤4-A

(9S)-9-{[N-叔丁氧羰基)-肌氨酰基]-肌氨酰氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮

将113mg(0.44mmol)已知物质[N-(叔丁氧羰基)-肌氨酰基]-肌氨酸、100mg(0.22mmol)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮、125mg(0.65mmol)1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐、和53mg(0.44mmol)4-二甲氨基吡啶溶解于二氯甲烷(6mL)中，然后在室温下搅拌3.5小时。

反应溶液用0.25N盐酸水溶液和碳酸氢钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到103mg(68％)为黄色无定形物质的(9S)-9-{[N-叔丁氧羰基)-肌氨酰基]-肌氨酰氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ(ppm)：

0.88-1.02(6H，m)，1.25-1.51(13H，m)，1.73-1.82(2H，m)，2.11-2.32(2H，m)，2.84(3H，m)，3.02(3H，m)，3.80(2H，br.t)，3.92-4.29(3H，m)，4.58-4.71(1H，m)，5.12-5.70(4H，m)，7.04-7.19(2H，m)，7.39(1H，m)，7.55-7.68(2H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 701(M+H)。

步骤4-B

(9S)-9-乙基-9-(肌氨酰基-肌氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐

将98mg(0.14mmol)步骤4-A制备的(9S)-9-{[N-叔丁氧羰基)-肌氨酰基]-肌氨酰氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”4””：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮溶解于1N盐酸-乙酸溶液(3mL)中，然后在室温下搅拌2小时。

向反应溶液中加入乙酸乙酯，然后将其在室温下搅拌30分钟，所得到的固体通过过滤收集，从而得到67mg(71％)为黄色固体的(9S)-9-乙基-9-(肌氨酰基-肌氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐(化合物4A)。

¹H-NMR(270MHz，CD₃OD)δ(ppm)：0.96-1.11(6H，m)，1.40-1.62(4H，m)，1.87-2.01(2H，m)，2.15-2.31(2H，m)，2.71(3H，s)，3.10(3H，m)，4.05-4.15(2H，m)，4.24(2H，br.t)，4.55-4.70(2H，m)，5.46-5.70(4H，m)，7.52(1H，m)，7.81-8.15(3H，m)，8.34(1H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 601(M+H)。

[实施例5]

(氨乙酰基-甲基-氨基-乙酸(S)-4-乙基-3，13-二氧代-3，4，12，13-四氢-1H-2-氧杂-612a-二氮杂-二苯并[b，h]芴-4-基酯盐酸盐(化合物5A)

步骤5-A

(叔丁氧羰基氨乙酰基-甲基-氨基)-乙酸(S)-4-乙基-3，13-二氧代-3，4，12，13-四氢-1H-2-氧杂-6，12a-二氮杂-二苯并[b，h]芴-4-基酯

将441mg(1.93mmol)N-(叔丁氧羰基)-甘氨酰基]-肌氨酸、250mg(0.77mmol)喜树碱、343mg(1.93mmol)1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐、和87mg(0.77mmol)4-二甲氨基吡啶溶解于二氯甲烷(130mL)中，然后在室温下搅拌15小时。

反应溶液用0.3N盐酸水溶液和碳酸氢钠洗涤，无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)，得到410mg(99％)为黄色固体的(叔丁氧羰基氨乙酰基-甲基-氨基)-乙酸(S)-4-乙基-3，13-二氧代-3，4，12，13-四氢-1H-2-氧杂-6，12a-二氮杂-二苯并[b，h]芴-4-基酯。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：

1.00(3H，t，J＝7.6Hz)，1.35(9H，s)，2.08-2.34(2H，m)，3.05(3H，s)，3.90-4.24(3H，m)，4.61(1H，m)，5.28(2H，br.s)，5.40(1H，d，J＝17.2Hz)，5.47(1H，br.s)，5.69(1H，d，J＝17.2Hz)，7.30(1H，s)，7.68(1H，br.t)，7.84(1H，br.t)，7.93(1H，br.d)，8.29(1H，br.d)，8.40(1H，s)

FAB-MS(正性模式)m/z 577(M+H)。

步骤5-B

(氨乙酰基-甲基-氨基)-乙酸(S)-4-乙基-3，13-二氧代-3，4，12，13-四氢-1H-2-氧杂-6，12a-二氮杂-二苯并[b，h]芴-4-基酯盐酸

将39mg(0.068mmol)步骤5-A制备的(叔丁氧羰基氨乙酰基-甲基-氨基)-乙酸(S)-4-乙基-3，13-二氧代-3，4，12，13-四氢-1H-2-氧杂-6，12a-二氮杂-二苯并[b，h]芴-4-基酯溶解于1N盐酸-乙酸乙酯溶液(2mL)中，然后在室温下搅拌4小时。

向反应溶液中加入乙酸乙酯，然后将其在室温下搅拌30分钟，所得到的固体通过过滤收集，得到28mg(82％)为黄色固体的(氨乙酰基-甲基-氨基)-乙酸(S)-4-乙基-3，13-二氧代-3，4，12，13-四氢-1H-2-氧杂-6，12a-二氮杂-二苯并[b，h]芴-4-基酯盐酸盐(化合物5A)。

¹H-NMR(270MHz，DMSO-d₆)δ(ppm)：

0.92(3H，t，J＝7.3Hz)，2.11-2.24(2H，m)，2.92-2.98(3H，m)，3.90(2H，m)，4.40-4.78(2H，m)，5.30(2H，br.s)，5.40-5.60(2H，m)，7.18-7.27(1H，m)，7.75(1H，br.t)，7.89(1H，br.t)，8.12-8.28(2H，m)，8.25(br.s)，8.72(1H，s)

ESI (LC-MS正性模式)m/z 477(M+H)。

[实施例6]

(9S)-9-{2-[(R-2-氨基-2-甲氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮三氟乙酸盐(化合物6A)

步骤6-A

(9S)-9-(2-溴-乙氧羰基氧基)-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮

将620mg(1.35mmol)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮、0.29mL (2.70mmol)2-溴乙基氯甲酸酯、0.47mL(2.70mmol)二异丙基乙基胺、165mg (1.35mmol)4-二甲氨基吡啶溶解于二氯甲烷(20mL)中，然后在室温下搅拌大约24小时。

反应溶液用0.3N盐酸水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(乙酸乙酯)，得到681mg(83％)为黄色固体的(9S)-9-(2-溴-乙氧羰基氧基)-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：0.93(3H，t，J＝7.3Hz)，1.00(3H，t，J＝7.6Hz)，1.31-1.54(4H，m)，1.72-1.86(2H，m)，2.08-2.35(2H，m)，3.50(2H，t，J＝6.2Hz)，3.83(2H，t，J＝7.3Hz)，4.41(2H，t，J＝6.2Hz)，5.23(2H，s)，5.37(1H，d，J＝17.0Hz)，5.68(1H，d，J＝17.0Hz)，7.16(1H，br.d)，7.22(1H，s)，7.40(1H，s)，7.59-7.71(2H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 609，611(M+H)。

步骤6-B

(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-甲氧羰基)乙硫基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮

将50mg(0.082mmol)步骤6-A制备的(9S)-9-(2-溴-乙氧羰基氧基)-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮、58mg(0.25mmol)叔丁氧羰基半胱氨酸甲基酯、和34mg(0.25mmol)碳酸钾在乙腈(2mL)中在室温下搅拌6小时。

向反应混合物中加入二氯甲烷后，溶液用0.3N盐酸水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到51mg(82％)为黄色固体的(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-甲氧羰基)乙硫基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：0.93(3H，t，J＝7.0Hz)，0.98(3H，t，J＝7.6Hz)，1.30-1.54(4H，m)，1.41(9H，s)，1.68-1.86(2H，m)，2.05-2.34(2H，m)，2.78(2H，t，J＝6.8Hz)，2.89-3.05(2H，m)，3.71(3H，s)，3.82(2H，t，J＝7.3Hz)，4.23(2H，t，J＝6.8Hz)，4.46(1H，m)，5.23(2H，s)，5.37(1H，d，J＝17.0Hz)，5.42(1H，m)，5.67(1H，d，J＝17.0Hz)，7.17(1H，br.d)，7.22(1H，s)，7.40(1H，s)，7.60-7.70(2H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 764(M+H)。

步骤6-C

(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-甲氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮

将98mg(0.13mmol)步骤6-B制备的(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-甲氧羰基)乙硫基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮、和158mg (0.26mmol)Oxone^TM在甲醇(5mL)中在室温下搅拌2.5小时。

向反应混合物中加入二氯甲烷，混合物用水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝40∶1)，得到93mg(92％)为黄色固体的(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-甲氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。ESI(LC-MS正性模式)m/z 796(M+H)。

步骤6-D

(9S)-9-{2-[(R-2-氨基-2-甲氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮三氟乙酸盐

将93mg(0.12mmol)(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-甲氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮溶解于三氟乙酸盐(3mL)中，然后在室温下搅拌1小时。

向反应溶液中加入二乙醚，在室温下搅拌10分钟。所得到的固体通过过滤收集，得到88mg(94％)为黄色固体的(9S)-9-{2-[(R-2-氨基-2-甲氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮三氟乙酸(化合物6A)。

¹H-NMR(270MHz，CD₃OD)δ(ppm)：0.95(3H，t，J＝7.3Hz)，1.03(3H，t，J＝7.3Hz)，1.37-1.56(4H，m)，1.76-1.92(2H，m)，2.10-2.28(2H，m)，3.69-4.05(6H，m)，3.90(3H，s)，4.48-4.82(3H，m)，5.35(2H，s)，5.48(1H，d，J＝16.8Hz)，5.64(1H，d，J＝16.8Hz)，7.13(1H，br.d)，7.28(1H，s)，7.56(1H，d，J＝8.3Hz)，7.71(1H，m)，7.80(1H，s)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 696(M+H)。

[实施例7]

(9S)-9-{2-[(R-2-氨基-2-乙氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐(化合物7A)

步骤7-A

(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-乙氧羰基)乙硫基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮

将270mg(0.44mmol)(9S)-9-(2-溴-乙氧羰基氧基)-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮、333mg(1.33mmol)叔丁氧羰基半胱氨酸乙基酯、和184mg(1.33mmol)碳酸钾在乙腈(10mL)中在室温下搅拌20小时。

向反应混合物中加入二氯甲烷后，混合物用0.3N盐酸水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到159mg(46％)为黄色油状物的(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-乙氧羰基)乙硫基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：0.93(3H，t，J＝7.3Hz)，0.97(3H，t，J＝7.3Hz)，1.25(3H，t，J＝7.3Hz)，1.32-1.53(4H，m)，1.41(9H，s)，1.73-1.85(2H，m)，2.05-2.35(2H，m)，2.79(2H，t，J＝6.9Hz)，2.88-3.05(2H，m)，3.83(2H，t，J＝7.3Hz)，4.09-4.28(4H，m)，4.43(1H，m)，5.23(2H，s)，5.37(1H，d，J＝17.2Hz)，5.43(1H，m)，5.67(1H，d，J＝17.2Hz)，7.17(1H，br.d)，7.21(1H，s)，7.40(1H，s)，7.60-7.70(2H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 778(M+H)。

步骤7-B

(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-乙氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮

将159mg(0.20mmol)(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-乙氧羰基)乙硫基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮、和252mg(0.41mmol)Oxone^TM在甲醇(8mL)中在室温下搅拌2小时。

向反应混合物中加入二氯甲烷后，混合物用水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝40∶1)，得到141mg(88％)为黄色固体的(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-乙氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：0.93(3H，t，J＝6.9Hz)，0.99(3H，t，J＝7.6Hz)，1.29(3H，t，J＝7.3Hz)，1.32-1.55(4H，m)，1.45(9H，s)，1.72-1.87(2H，m)，2.07-2.32(2H，m)，3.25-3.52(2H，m)，3.73(2H，m)，3.84(2H，t，J＝7.3Hz)，4.23(2H，q，J＝7.3Hz)，4.55(2H，br.t)，4.71(1H，m)，5.25(2H，s)，5.37(1H，d，J＝ 17.2Hz)，5.69(1H，d，J＝17.2Hz)，5.76(1H，d，J＝7.9Hz)，7.18(1H，br.d)，7.19(1H，s)，7.40(1H，s)，7.61-7.72(2H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 810(M+H)。

步骤7-C

(9S)-9-{2-[R-2-氨基-2-乙氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐

将140mg(0.17mmol)(9S)-9-{2-[(R-2-叔丁氧羰基氨基-2-乙氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮溶解于1N盐酸-乙酸溶液(5mL)中，然后在室温下搅拌1小时。

向反应溶液中加入乙酸乙酯后，在室温下搅拌30分钟。所得到的固体通过过滤收集，得到127mg(94％)为黄色固体的(9S)-9-{2-[R-2-氨基-2-乙氧羰基)乙磺酰基]乙氧羰基氧基}-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐(化合物7A)。

¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ(ppm)：0.99(3H，t，J＝7.6Hz)，1.04(3H，t，J＝7.2Hz)，1.36(3H，t，J＝7.2Hz)，1.40-1.60(4H，m)，1.92-2.00(2H，m)，2.10-2.25(2H，m)，3.70-3.86(3H，m)，4.10(1H，dd，J＝15.2，4.0Hz)，4.25(2H，t，J＝8.0Hz)，4.36(2H，q，J＝7.6Hz)，4.60(2H，t，J＝5.2Hz)，4.77(1H，m)，5.52(1H，d，J＝16.8Hz)，5.54(2H，s)，5.65(1H，d，J＝16.8Hz)，7.54(1H，d，J＝7.6Hz)，7.83(1H，s)，7.91(1H，d，J＝8.0Hz)，8.09(1H，br.t)，8.38(1H，s)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 710(M+H)。

[实施例8]

(9S)-9-[2-(2-氨基乙磺酰基)乙氧羰基氧基]-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐(化合物8A)

步骤8-A

(9S)-9-[2-(2-叔丁氧羰基氨基乙磺酰基)乙氧羰基氧基]-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮

将825mg(1.8mmol)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮、543mg (2.7mmol)对硝基苯基氯甲酸酯、0.47mL(2.7mmol)二异丙基乙基胺、和220mg(1.8mmol)4-二甲氨基吡啶溶解于冰上的二氯甲烷(16mL)中，然后在室温下搅拌3小时。接下来向该溶液中加入1.6g(6.3mmol)2-(2-叔丁氧羰基氨基乙磺酰基)乙醇(Tetrahedron，55(1999)，6623-6634)，将其在室温下搅拌大约24小时。

反应溶液用0.3N盐酸水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去溶剂。所得到的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)，得到550mg(42％)为黄色固体的(9S)-9-[2-(2-叔丁氧羰基氨基乙磺酰基)乙氧羰基氧基]-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

¹H-NMR(270MHz，CDCl₃)δ(ppm)：0.94(3H，t，J＝7.3Hz)，1.00(3H，t，J＝7.3 Hz)，.1.33-1.55(4H，m)，1.43(9H，s)，1.73-1.86(2H，m)，2.07-2.31(2H，m)，3.20-3.49(4H，m)，3.70(2H，m)，3.84(2H，t，J＝7.3Hz)，4.57(2H，br.t)，5.25(2H，s)，5.37(1H，d，J＝17.2Hz)，5.45(1H，m)，5.69(1H，d，J＝17.2Hz)，7.15-7.20(2H，m)，7.41(1H，s)，7.61-7.73(2H，m)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 738(M+H)。

步骤8-B

(9S)-9-[2-(2-氨基乙磺酰基)乙氧羰基氧基]-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐

将530mg(0.72mmol)步骤8-A制备的(9S)-9-[2-(2-叔丁氧羰基氨基乙磺酰基)乙氧羰基氧基]-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮溶解于1N盐酸-乙酸溶液(10mL)中，然后在室温下搅拌1小时。

向反应溶液中加入乙酸乙酯，然后将其在室温下搅拌30分钟，所得到的固体通过过滤收集，得到480mg(94％)为黄色固体的(9S)-9[2-(2-氨基乙磺酰基)乙氧羰基氧基]-9-乙基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮盐酸盐(化合物8A)。

¹H-NMR(270MHz，CD₃OD)δ(ppm)：0.94-1.05(6H，m)，.1.40-161(4H，m)，1.90-2.04(2H，m)，2.07-2.28(2H，m)，3.48-3.81(6H，m)，4.25(2H，br.t)，4.55(2H，m)，5.51(1H，d，J＝17.2Hz)，5.53(2H，s)，5.65(1H，d，J＝17.2Hz)，7.52(1H，d，J＝7.6Hz)，7.90(1H，s)，7.93(1H，d，J＝8.6Hz)，8.08(1H，br.t)，8.35(1H，s)

ESI(LC-MS正性模式)m/z 638(M+H)。

[测试实施例1]

测量了实施例2制备的化合物2A在人、小鼠、猴、和狗血清中转化为活性形式的百分比。所述活性形式在内酯形式和羧酸盐形式(carboxylate form)之间迅速达到平衡，后两者可以单独进行量化。

将化合物2A在37℃温育，在人、小鼠、猴、和狗血清中的浓度为50μM。在指定时间(0、30、60、120、和360分钟)终止温育，样本经去蛋白质处理后通过HPLC分析。

HPLC分析条件如下：

HPLC条件

柱：Develosil C30-UG-3，3μm，50×4.6mm I.D

柱温：在大约25℃下保持恒温

流动相：A：10mM磷酸盐缓冲液(pH4.7)

B：乙腈

/B(分钟)：90/10(0)→90/10(0.4)→40/60(6)→2/98(8)→90/10(9)→90/10(15)

流速：1.0mL/分钟

检测：光二极管矩阵检测器，检测波长350nm

注射量：30μL

结果如表3、和图1-4所示。结果表明，本发明的水溶性前药(化合物2A)在人、小鼠、猴、和狗血清中快速转化为内酯形式，同时证实不存在种间差异性。在温育后第360分钟，内酯-羧酸盐平衡向羧酸盐形式移动。发现羧酸盐形式的百分比在人血清中最高，在小鼠和猴血清中大致相同，在狗血清中相对于小鼠和猴血清而言略低。

一般来说，溶液中的喜树碱在其中3位上的羰基与2位上的氧形成6-元环酯的结构及其开环结构之间存在快速平衡。内酯形式是指前面的状态，羧酸盐形式(carboxylate form)是指后面的状态。

表3

(测量值，％)

[测试实施例2]

测量了化合物2A在不同pH值下的稳定性。将上述化合物置于不同pH的溶液中，浓度为25μM。在25℃下温育0、3、和6小时后，化合物通过HPLC分析。

在各pH下使用的缓冲溶液如下所示。

pH2.0：50mM HCl-KCl缓冲溶液

pH3.0：50mM柠檬酸盐缓冲溶液

pH4.0：50mM柠檬酸盐缓冲溶液

pH5.0：50mM琥珀酸盐缓冲溶液

pH6.5：50mM磷酸盐缓冲溶液

pH7.4：50mM磷酸盐缓冲溶液

进行HPLC分析的条件如下所示：

HPLC条件

柱：Develosil C30-UG-3，3μm，50×4.6mm I.D

柱温：在大约25℃下保持恒温

流动相：A：10mM磷酸盐缓冲溶液(pH4.7)

B：乙腈

(分钟)：90/10(0)→90/10(0.4)→40/60(6)→2/98(8)→90/10(9)→90/10(15)

流速：1.0mL/分钟

检测：光二极管矩阵检测器，检测波长350nm

注射量：30μL

结果如表4和图5所示。结果表明，化合物2A所示的本发明化合物在pH为3时稳定，在pH4时稳定性略微降低(6小时后96.1％)。

在pH6.5和pH7.4时的数值在温育后第3和6小时已经达到0％。此外还证实，上述化合物按照依赖于pH的方式化学转化为内酯形式和羧酸盐形式。

表4

(残留百分比，％)

[测试实施例3]

将实施例制得的水溶性前药(化合物1A-8A)与(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮(专利文献2中的代表化合物：对照化合物1)在蒸馏水中的溶解性进行对照。

结果如表5所示。发现本发明水溶性前药的溶解性相对于对照化合物1而言明显提高。

表5

化合物编号在蒸馏水中的溶解性

1A ＞10mg/mL

2A ＞10mg/mL

3A ＞10mg/mL

4A ＞10mg/mL

5A ＞10mg/mL

6A ＞10mg/mL

7A ＞10mg/mL

8A ＞10mg/mL

对照化合物1 ＜0.01mg/mL

[测试实施例4]

将前述式(2)和(3)所示的水溶性喜树碱前药非肠道施用至结肠癌小鼠模型中，在宽的剂量范围内均显示出强烈的抑制癌症生长活性。因此，这些前药可用作抗肿瘤剂。抗肿瘤活性的实例如下所示。

[测量抗肿瘤活性]

测量了本发明化合物中的代表性实例的抗肿瘤活性。通过将由AmericanType Culture Collection(Virginia，USA)获得的人结肠癌细胞系HCT116皮下植入购自Charles River Japan的BALB/c裸鼠右侧腹部，得到携带有肿瘤的小鼠，然后用于测量抗肿瘤活性。

在1周留验期之后，将商购得到的裸鼠在其右侧腹部皮下植入5×10⁶ HCT116细胞。使用肿瘤尺寸达到200mm³左右的小鼠进行试验。

将化合物溶解于1mM柠檬酸缓冲溶液盐水pH 4中，静脉内给药。给药每周1次，持续3周，总共3次。使用下述等式，以肿瘤生长抑制作用(TGI)形式测得抗肿瘤活性。

肿瘤生长抑制作用(TGI)(％)＝{(1-药物治疗组的平均肿瘤体积变化/对照组的平均肿瘤体积变化)×100}

结果如表6所示。

表6

[测试实施例5]

测量了实施例2制得的化合物2A在人、大鼠、小鼠、猴、和狗血清中转化为活性形式的百分比。所述活性形式在内酯形式和羧酸盐形式之间迅速达到平衡，后两者可以单独进行量化。

将化合物2A在37℃下温育，在人、大鼠、小鼠、猴、和狗血清中的浓度为50μM。在指定时间(0、30、60、120、和360分钟)终止温育，样本经去蛋白质处理后通过HPLC分析。

HPLC分析条件如下：

HPLC条件

柱：Develosil C30-UG-3，3μm，50×4.6mm I.D

柱温：在大约25℃下保持恒温

流动相：A：10mM磷酸盐缓冲液(pH4.7)

B：乙腈

/B(分钟)：90/10(0)→90/10(0.4)→40/60(6)→2/98(8)→90/10(9)→90/10(15)

流速：1.0mL/分钟

检测：光二极管矩阵检测器，检测波长350nm

注射量：30μL

结果如表7所示。结果表明，本发明的水溶性前药(化合物2A)在人、大鼠、小鼠、猴、和狗血清中快速转化为内酯形式，同时证实不存在种间差异性。在温育后第360分钟，内酯-羧酸盐平衡向羧酸盐形式移动。发现羧酸盐形式的百分比在人血清中最高，在小鼠和猴血清中大致相同，在狗血清中相对于小鼠和猴血清而言略低。

一般来说，溶液中的喜树碱在其中3位上的羰基与2位上的氧形成6-元环酯的结构及其开环结构之间存在快速平衡。内酯形式是指前面的状态，羧酸盐形式是指后面的状态。

表7

(测量值，％)

[对照测试实施例1]

类似于测试1，测量了(9S)-9-乙基-9-(色氨酰基-γ-谷氨酰氧基)-1-戊基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮[专利文献1中的代表性化合物(Q)：对照化合物2]随着时间在人和小鼠血清中转化为内酯形式和羧酸盐形式的百分比。

来自人血清中的结果如图6所示，来自小鼠血清中的结果如图7所示。在两种情形中，转化率和功效都比较低，并且还观察到存在种间差异性。

工业适用性

本发明的水溶性前药、及其可药用盐、水合物、或溶剂化物含有具特定结构的酯链，使得其显示出极好的水溶性。此外，本发明的水溶性前药通过化学转化迅速转化为活性形式，降低了种间或个体差异性。特别地，当应用于不溶性药物例如含有醇式羟基的喜树碱时，本发明极其有用。

Claims

1.式(2)或(3)所示的水溶性前药、或者其可药用盐，

在式(2)中

R¹表示氢原子或C1-C6烷基；

X表示C＝O或C1-C3亚烷基；

R²和R⁴各自独立地表示氢原子、C1-C6烷基、或氨基酸侧链；且

R³表示C1-C6烷基；

在式(3)中

R¹如式(2)定义；

n表示整数1-6；以及

R⁵表示氢原子或-COOR⁶，其中R⁶表示氢原子或C1-C6烷基，

其中在式(2)和(3)中，Y表示具有醇式羟基的Y-OH所示化合物的残基，其中Y-OH是喜树碱类。

2.权利要求1的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R¹是氢原子、甲基、或乙基。

3.权利要求1的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R²是氢原子或甲基。

4.权利要求2的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R²是氢原子或甲基。

5.权利要求1的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R³是C1-C3烷基。

6.权利要求2的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R³是C1-C3烷基。

7.权利要求3的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R³是C1-C3烷基。

8.权利要求4的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R³是C1-C3烷基。

9.权利要求1的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R⁴是氢或甲基。

10.权利要求2的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R⁴是氢或甲基。

11.权利要求3的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R⁴是氢或甲基。

12.权利要求4的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R⁴是氢或甲基。

13.权利要求5的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R⁴是氢或甲基。

14.权利要求6的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R⁴是氢或甲基。

15.权利要求7的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R⁴是氢或甲基。

16.权利要求8的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R⁴是氢或甲基。

17.权利要求1的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R¹是氢原子、甲基、或乙基。

18.权利要求1的水溶性前药、或者其可药用盐，其中n是1，以及R⁵是氢原子或-COOR⁶，其中R⁶表示氢原子或C1-C6烷基。

19.权利要求17的水溶性前药、或者其可药用盐，其中n是1，以及R⁵是氢原子或-COOR⁶，其中R⁶表示氢原子或C1-C6烷基。

20.权利要求1的水溶性前药、或者其可药用盐，其中n是整数2-6，以及R⁵是氢原子。

21.权利要求17的水溶性前药、或者其可药用盐，其中n是整数2-6，以及R⁵是氢原子。

22.权利要求1-21中任意一项的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是式(4)所示基团：

其中

*表示连接位置；

m是0或1；

R¹¹表示氢原子、卤素原子、或C1-C6烷基；

R¹²表示氢原子、卤素原子、C1-C6烷基、或羟基；

R¹³表示氢原子、氨基、硝基、或(二甲氨基)甲基；

R¹⁴表示氢原子、C1-C6烷基、(4-甲基哌嗪基)甲基、或(叔丁氧亚氨基)甲基；R¹³和R¹⁴、以及R¹¹和R¹²分别可以彼此相连形成5-或6-元环，其中所述5-或6-元环可以含有1-2个杂原子，并且可以含有1-3个选自下述A组中的取代基，其中所述A组中的取代基可以进一步含有1-3个选自下述B组中的取代基：

A组：C1-C10烷基、氨基、单-C1-C8烷基氨基、二-C1-C8烷基氨基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、以及X＝所示的基团，其中X表示氧原子或硫原子；

B组：C1-C6烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、二-C1-C6烷基氨基、C3-C7环烷基、杂环、以及芳环，其可以含有1-3选自羟基、C1-C6烷氧基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、和二-C1-C6烷基氨基中的取代基。

23.权利要求22的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是式(5)所示基团：

其中

*表示连接位置；

R¹¹和R¹²定义同权利要求9；以及

Z表示-NH-C(＝X)-N(R²¹)-或-N＝C(R²²)-N(R²¹)-

其中R²¹表示氢原子或可含有1-3个选自下述B组中的取代基的C1-C10烷基：

B组：C1-C6烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、二-C1-C6烷基氨基、C3-C7环烷基、杂环、以及芳环，其可以含有1-3选自羟基、C1-C6烷氧基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、和二-C1-C6烷基氨基中的取代基；

C组：C1-C6烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、单-C1-C3烷基氨基、二C1-C3烷基氨基、C3-C7环烷基、杂环、和芳环，其可以含有1-3个选自羟基、C1-C6烷氧基、卤素原子、氨基、单-C1-C6烷基氨基、或二-C1-C6烷基氨基中的取代基；以及

X表示氧原子或硫原子。

24.权利要求23的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是式(6)所示基团：

其中*表示连接位置；以及

R¹¹、R¹²、和R²¹定义同权利要求23。

25.权利要求24的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R¹¹和R¹²是氢原子；以及

D组：C1-C3烷氧基、羟基、卤素原子、氨基、单-C1-C3烷基氨基、二-C1-C3烷基氨基、C3-C7环烷基、杂环、以及芳环，其可以含有1-3个选自羟基、C1-C3烷氧基、和卤素原子中的取代基。

26.权利要求24的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是含有至少一种醇式羟基的化合物Y-OH的残基，其中所述化合物选自：

m)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-[2-(4-甲氧苯基)乙基]-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；n)(9S)-1-苄基-9-乙基-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2，10，13(3H，9H，15H)-三酮；

27.权利要求25的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是含有至少一种醇式羟基的化合物Y-OH的残基，其中所述化合物选自：

28.权利要求23的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是式(7)所示基团：

其中

*表示连接位置；以及

R¹¹、R¹²、和R²¹定义同权利要求23。

29.权利要求28的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R¹¹和R¹²是氢原子；以及

30.权利要求28的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是含有至少一种醇式羟基的化合物Y-OH的残基，其中所述化合物选自：

31.权利要求29的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是含有至少一种醇式羟基的化合物Y-OH的残基，其中所述化合物选自：

c)(9S)-9-乙基-9-羟基-1-戊基-1H，12H-喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-2(3H)-硫酮-10，13(9H，15H)-二酮。

32.权利要求23的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是式(8)所示基团：

其中

*表示连接位置；以及

R¹¹、R¹²、R²¹、和R²²定义同权利要求23。

33.权利要求32的水溶性前药、或者其可药用盐，其中R¹¹是氢原子；

R¹²是氢原子或C1-C3烷基；

R²1是氢原子、或可含有1-3个选自下述D组中的取代基的C1-C8烷基；以及

34.权利要求32的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是含有至少一种醇式羟基的化合物Y-OH的残基，其中所述化合物选自：

i)(9S)-2，9-地乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

s)(9S)-9-乙基-1[2-(4-氟苯基)乙基]-9-羟基-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮；

nn)(9S)-2-(丁氨基)-9-乙基-9-羟基-1-(3-甲基丁基)-1H，12H-吡喃并[3”，4”：6’，7’]中氮茚并[1’，2’：6，5]吡啶并[4，3，2-de]喹唑啉-10，13(9H，15H)-二酮。

35.权利要求33的水溶性前药、或者其可药用盐，其中Y是含有至少一种醇式羟基的化合物Y-OH的残基，其中所述化合物选自：

36.权利要求1中式(2)或(3)所示的水溶性前药、或者其可药用盐，包括至少一种选自下述的水溶性前药：

37.药物组合物，其包括权利要求1-36中任意一项的水溶性前药、或者其可药用盐作为有效成分。

38.用于细胞增殖性疾病的治疗剂，其包括权利要求22-35中任意一项的水溶性前药、或者其可药用盐作为有效成分。

39.根据权利要求38的治疗剂，其中所述细胞增殖性疾病是癌症。

40.根据权利要求39的治疗剂，其中所述癌症是实体瘤。

41.根据权利要求39或40的治疗剂，其中所述癌症是结肠直肠癌、肺癌、乳腺癌、胃癌、子宫颈癌、和/或膀胱癌。

42.式(9)所示化合物在制备式(2)所示水溶性前药、或者其可药用盐中的用途：

其中

X表示C＝O或C1-C3亚烷基；

R¹表示氢原子、或C1-C6烷基；

与R¹相连的氮原子可以被保护基团保护；

R²和R⁴各自独立地表示氢原子、C1-6烷基、或氨基酸侧链；

R³表示C1-C6烷基；以及

R⁷表示卤素原子或OR⁸所示基团，其中R⁸表示氢原子或C1-C6烷基

其中

Y表示含有醇式羟基的Y-OH所示化合物的残基；以及

X、R¹、R²、R³、和R⁴定义同式(9)。

43.制备式(2)所示化合物的方法：

其中

X表示C＝O或C1-C3亚烷基；

R¹表示氢原子、或C1-C6烷基；

R²和R⁴各自独立地表示氢原子、C1-6烷基、或氨基酸侧链；以及

R³表示C1-C6烷基；

Y表示含有醇式羟基的Y-OH所示化合物的残基，其中所述方法包括下述步骤：

将式(9)所示化合物

其中X、R¹、R²、R³、和R⁴定义同式(2)；

R⁷表示卤素原子或OR⁸所示基团，其中R⁸表示氢原子或C1-C6烷基；以及

与R¹相连的氮原子可以被保护基团保护

与含有醇式羟基的Y-OH所示化合物反应，得到式(2)所示化合物。