CN1922182B - 作为激酶抑制剂的吡咯并三嗪化合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供式(I)的化合物和其药学上可接受的盐。这些式(I)化合物抑制生长因子受体例如HER1、HER2和HER4的酪氨酸激酶活性，由此使得该化合物可用作抗增殖剂。式(I)化合物也可用于治疗其它与通过生长因子受体起作用的信号转导途径有关的疾病。

Description

作为激酶抑制剂的吡咯并三嗪化合物

本申请要求申请于2003年12月29日的美国临时申请号60/533,335的优先权，其公开的全部内容引入本文作为参考。

技术领域

本发明涉及抑制生长因子受体例如HER1、HER2和HER4的酪氨酸激酶活性的化合物，由此使其可用作抗癌剂。化合物也可用于治疗除癌症以外的疾病，其与通过生长因子受体例如HER1、HER2和HER4操作的信号转导途径有关。

背景技术

受体酪氨酸激酶(RTKs)在生物化学信号横跨细胞的质膜的传输中很重要。这些跨膜分子特征性地由通过质膜中的片段连接至细胞内酪氨酸激酶域(domain)的细胞外配体结合域组成。

人类表皮生长因子受体(HER)家族是由四个称为HER1、HER2、HER3和HER4的不同受体酪氨酸激酶所组成。这些激酶也称为erbB1、erbB2等。HER1也普遍称为表皮生长因子(EGF)受体。除HER3外，这些受体具有对磷酸基受体(phosphoacceptor)蛋白的酪氨酸残基具有特异性的内在蛋白激酶活性。HER激酶表现在大部分上皮细胞以及上皮起源的肿瘤细胞。他们也常常表现于间充质(mesenchymal)起源的肿瘤细胞例如肉瘤或横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcomas)。RTKs例如HER1和HER2涉及细胞增殖且与疾病例如牛皮癣和癌有关。通过这些激酶的抑制作用破坏信号传导将具有抗增殖和治疗效果。

受体酪氨酸激酶的酶活性可通过过表达或通过配体介导的二聚合作用刺激。已证明HER受体家族用于均二聚物和异二聚物(heterodimer)的形成。均二聚合作用的例子为通过配体的EGF家族(其包括EGF、转化生长因子α、β细胞素(betacellulin)、肝素结合的EGF和表皮调节素(epiregulin))之一的HER1(EGF受体)的二聚合作用。在四个HER受体激酶中的异二聚合作用可通过结合至配体的神经调节素(heregulin)(也称为神经调节蛋白(neuregulin))家族的成员来促进。该异二聚合作用如涉及HER2和HER3，或HER3/HER4组合，造成受体二聚物的酪氨酸激酶活性的显著刺激，即使其中一个受体(HER3)为酶促(enzymatically)惰性的。HER2的激酶活性已显示也由于受体单独在各种细胞类型中的过表达而活化。受体均二聚物和异二聚物的活化造成酪氨酸残基在受体上和在其它细胞内蛋白上的磷酸化作用。此接着细胞内信号途径例如那些涉及与微管有关的蛋白激酶(MAP激酶)和磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol)3-激酶(PI3激酶)的活化作用。这些途径的活化已显示导致细胞增殖和细胞凋亡的抑制作用。HER激酶信号的抑制作用已显示抑制细胞增殖和生存。

所有的蛋白激酶包含约250-300个氨基酸残基的结构保守的催化域¹。图1显示HER1²的X射线结构，其包含蛋白激酶家族所有成员的高保守特征。蛋白激酶折叠(fold)分成两个亚域，或叶(lobe)。较小的N-端叶(terminallobe)，或N叶，由五个股β折叠(five-stranded β sheet)和一个显著的(prominent)α螺旋，所谓的螺旋αC构成。C叶较大且主要为螺旋状。两个叶通过单一多肽链(连接区/铰链区)连接，其用作一旦ATP和/或底物结合时两个域可彼此相对旋转的铰链。ATP结合在两个叶之间的深裂缝中并位于连接链β1和β2的高保守环下。此磷酸酯(phosphate)结合环，或P环，包含保守的富含甘氨酸的基序(GXGXψG)，其中ψ通常为酪氨酸或苯丙氨酸。甘氨酸残基允许该环非常近地接近ATP的磷酸酯(phosphate)并通过主链相互作用配位。该保守的芳族侧链封住(cap)磷酸酯(phosphate)转移的位点。ATP通过其腺嘌呤部分和连接区的主链原子间的氢键固定到酶上和其核糖环接至C-端区的起始的残基上。

最优选磷酸转移需要几个在所有已知激酶中绝对保守的催化残基的精确空间排列。Asp813和Asn818(HER1编号如参考文献2中给出或编号为如于REFSEQ：登记(accession)NM_005228中所发现的Asp 837和Asn842)从在活性位点的基部的高保守的环结构，所谓的催化环放出。Asp813与底物(substrate)的攻击(attacking)羟基侧链相互作用，而Asn818参加定向Asp813的氢键合相互作用。在涉及三磷酸基的配位的两个二价金属阳离子间的结合也需要Asn818和另一绝对保守的催化残基，Asp831(编号如在REFSEQ：登记NM_005228中所发现的Asp855)。

很多结合至不同蛋白激酶的与ATP、其类似物、或小分子抑制剂复合的结构已提供了对催化域和ATP-结合的裂缝和存在于结合域的类似和不同的组织的清楚描述³。现清楚的是有一些结合裂缝内的区域不被ATP占据，且这些显示在激酶家族成员之间的结构差异。图2显示具有人类细胞周期蛋白(cyclin)-依赖性激酶2(CDK2)的铰链区的ATP的相互作用⁴。所有已知激酶ATP结合位点的总的区域描画在图中如：(1)腺嘌呤结合区；(2)核糖袋(ribosepocket)；(3)磷酸酯结合袋(phosphate binding pocket)；(4)大部分疏水区1，在腺嘌呤环之后，和(5)区2，与核糖袋相邻的裂缝或隧道和指向激酶域的表面-暴露区的腺嘌呤的N3氮。激酶/抑制剂复合物(complex)的有效结构表明可利用不被ATP占据的区域，例如区域1和2，以增加结合相互作用并由此增加结合效力，以及也可能调整因为在这些区域中的激酶间的序列不同的选择性。

结晶学、建模、筛选和药物化学努力的组合已导致对吡咯并三嗪化学型(chemotype)在ATP结合位点的结合方式的了解。根据吡咯并三嗪化学型抑制剂在VEGFR-2中的X射线结晶结构，已显示吡咯并三嗪环结合在腺嘌呤袋中且使得几个主要与铰链区域的相互作用相似于ATP。在此结合方式中，C5基团定向进入高保守的核糖-磷酸酯袋。C4基团，视其化学选区(constituency)而定，可定向进入特异性区域1内并且C6基团定向进入特异性区域2内。此化学型在HER1中的列举实例的模型化显示本发明所要求的C5基团可至少占据(occupy)核糖-磷酸酯袋，并与至少一或多个涉及磷酸酯结合的绝对保守的残基，例如，Asn818和Asp831(HER1编号)相互作用。

激酶催化核心结构的保守性质使其成为由吡咯并三嗪环和C5基团提供的总激酶抑制剂模板的优良目标。此模板可被成功地衍生以通过靶向(targeting)ATP-结合位点的不良保守区来制备特异性和有效的激酶ATP-竞争性抑制剂。

已令人惊讶地发现本发明化合物和其它的化合物例如公开在美国专利US 5,457,105、5,616,582和5,770,599中，其包含小苯胺衍生物如二环的C4位点没有取代基，显示HER1和HER2活性。

参考文献

(1)S.K.Hanks and T.Hunter，Protein kinases 6.The eukaryotic proteinkinase superfamily：kinase(catalytic)domain structure and classification.FASEBJ.9(1995)，pp.576-596.

(2)PDB ID：1M14

Stamos，J.，Sliwkowski，M.X.，Eigenbrot，C.：Structure ofthe EpidermalGrowth Factor Receptor Kinase Domain Alone and in Complex with a4-Anilinoquinazoline Inhibitor.J.Biol.Chem.277 pp.46265(2002).

(3)H.M.Berman，J.Westbrook，Z.Feng，G.Gilliland，T.N.Bhat，H.Weissig，I.N.Shindyalov，P.E.Bourne.The Protein Data Bank.Nucleic Acids Research，28 pp.235-242(2000)：website：http://www.pdb.org/.

(4)PDB ID：1HCK

Schulze-Gahmen，U.，De Bondt，H.L.，Kim，S.H.：High-resolution crystalstructures of human cyclin-dependent kinase 2 with and without ATP：boundwaters and naturalligand as guides for inhibitor design.J Med Chem 39pp.4540(1996).

附图说明

图1描述了HER1的X射线结构，典型激酶的关键部分被有色标识(color-coded)。

图2描述了与ATP复合的CDK2的X射线结构。描绘出典型的ATP-结合位点的不同区域。

发明详述

本发明提供式I的化合物，使用该化合物的药物组合物及使用该化合物的方法。

根据本发明公开了式I化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，

其中符号具有下列意义且对于每次出现独立地选自：

R¹为环烷基或被取代的环烷基、芳基或被取代的芳基、杂环基或被取代的杂环基；

R²为芳基、被取代的芳基、杂芳基或被取代的杂芳基、杂环基或被取代的杂环基；

R³为氢、烷基或被取代的烷基；

X为直接键(direct bond)、-NR³-或-O-；

Y为直接键、烷基或被取代的烷基、链烯基或被取代的链烯基、炔基或被取代的炔基；

条件是R²不是吲唑基或被取代的吲唑基。

这些化合物抑制生长因子受体例如HER2的酪氨酸激酶活性。

在另一具体实施方案中，本发明包含式I的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中

R¹为杂环基或被取代的杂环基；

R²为芳基、被取代的芳基、杂芳基或被取代的杂芳基；

R³为氢；

X为-NR³-或-O-；

Y为烷基或被取代的烷基。

优选的R²取代基包括

唑基、噻吩基、吡啶基、噻唑基、吡嗪基和苯基，其全部可适当地被一个或多个取代基所取代。

优选的R¹取代基包括苄基、咪唑基-乙基、(甲基-咪唑基)-乙基、哌啶基-乙基、吡啶基-丙基、吡啶基-甲基、吗啉基-乙基、(甲基-咪唑基)-甲基、吡啶基-乙基、氨基-哌啶基-甲基、4-氨基-1-甲基-哌啶-3-醇、(甲基-哌嗪基)-乙基、吡啶基-乙基、(甲基-哌啶基)-乙基、(甲基-咪唑基)-丙基、(甲基-哌啶基)-甲基、(甲基-哌嗪基)-丙基、二异丙基氨基-乙基、哌啶基-丙基、二甲基氨基-乙基、二甲基氨基-丙基、[(三氟-乙酰基)-哌啶基]-丙基、哌啶基-乙基、哌嗪基-乙基、哌嗪基-丙基、吡咯烷基-乙基、三唑基-乙基、三唑基-丙基、(二甲基氨基-乙氧基)-乙基、咪唑基-丙基、[(三氟-乙酰基)-哌啶基]-丙基、(哌嗪基-乙氧基)-乙基、[(三氟-乙酰基)-哌嗪基]-丙基、[(三氟-乙酰基)-哌嗪基]-乙基、哌啶基-甲基、吡唑基-乙基、(氨基-乙氧基)-乙基、(甲氧基-乙氧基)-乙基、吡唑基-丙基、[(甲氧基-乙基)-甲基-氨基]-乙基、吗啉基-丙基、(氰基甲基-哌嗪基)-乙基、[(氰基-乙基)-甲基-氨基]-乙基、[(甲氧基-乙基)-哌啶基]-甲基、[(甲氧基-乙基)-哌啶基]-乙基、[(氟代-乙基)-甲基-氨基]-乙基、[(氟代-乙基)-甲基-氨基]-丙基、(甲基-哌啶基)-丙基、[(甲磺酰基-乙基)-哌嗪基]-乙基、[(氰基-乙基)-哌嗪基]-乙基、[(甲氧基-乙基)-哌嗪基]-乙基、[(甲氧基-乙基)-甲基-氨基]-丙基、(氰基甲基-甲基-氨基)-丙基、(氰基甲基-甲基-氨基)-乙基、[(甲磺酰基-乙基)-甲基-氨基]-丙基、(二氟-哌啶基)-丙基、(二氟-哌啶基)-乙基、[(氰基-乙基)-甲基-氨基]-丙基、[(甲磺酰基-乙基)-甲基-氨基]-乙基、[(三氟-乙基)-哌嗪基]-乙基、[氰基甲基-(甲磺酰基-乙基)-氨基]-丙基、[氰基甲基-(甲磺酰基-乙基)-氨基]-乙基、(氰基甲基-哌嗪基)-丙基、[(甲磺酰基-乙基)-哌嗪基]-丙基、[(氰基-乙基)-哌嗪基]-丙基、[(三氟-乙基)-哌嗪基]-丙基、(甲磺酰基-乙基-氨基)-乙基、[(氰基-乙基)-哌啶基]-甲基、(氰基甲基-哌啶基)-甲基、(羟基-哌啶基)-丙基、[(甲磺酰基-乙基)-哌啶基]-甲基、哌啶基-甲基、哌啶基、咪唑基-丙基、1-甲基-[1，4]-二氮杂环庚烷-6-醇，甲磺酰基-丙基、(甲磺酰基-乙基-氨基)-丙基、吡咯烷基-甲基、甲磺酰基-乙基、(氰基甲基-氨基)-乙基、(氰基甲基-氨基)-丙基、(二氧代-硫吗啉基(thiomorpholinyl))-丙基、(氧代-哌啶基)-丙基、[(二氟-乙基)-甲基-氨基]-乙基、吗啉基-甲基、(羟基-吡咯烷基)-丙基、(羟基-哌啶基)-丙基、吡咯烷基-甲基、(羟基-吡咯烷基)-丙基、甲基-哌啶基、(甲基-吡咯烷基)-甲基、吗啉基-甲基、吡咯烷基-甲基、(甲基-四氢-吡啶基)-甲基、(氰基-乙基)-哌啶基、氮杂环丁烷基、(甲磺酰基-乙基)-哌啶基、(氰基-甲基)-哌啶基、异丙基-哌啶基、丙基-哌啶基、乙酰基-哌啶基、乙基-哌啶基、烯丙基-哌啶基、四氢-吡喃基、(羟基-乙基)-哌啶基、(甲基-吡咯烷基)-甲基、(甲氧基乙基)-哌啶基、哌啶基、(甲氧基-乙基)-氮杂环丁烷基、(甲氧基-甲氧基甲基-乙基)-哌啶基、(甲氧基-乙酰基)-哌啶基、甲氧基羰基-哌啶基、(羟基-乙酰基)-哌啶基、哌啶-羧酸-乙酰氧基-乙基、哌啶-羧酸-乙酰氧基-甲基-乙基、羟基-哌啶基、氨基-环己基、哌啶基、哌啶-羧酸-甲基-氧代-二氧杂环戊烯基(dioxolyl)甲基、羟基甲基-哌啶基、(氨基甲基)-环己基、氨基-甲基-环己基、羟基-哌啶基-甲基、吗啉基、氨基-环己基、羟基甲基-哌啶基、四氢-吡喃基、甲磺酰基-丙基、氨基-甲基-丙基、氨基-环己基、氨基-甲基-环己基、(羟基-哌啶基)-丙基、哌啶基、氨基-丙基、吗啉基-甲基、哌啶基、(叔-丁氧基羰基-吗啉基)-甲基、苄基、咪唑基-乙基、哌啶基-乙基、甲氧基乙基、(二乙基氨基)-(甲氧基乙基)、吡咯烷基-乙基、乙酰胺和甲基。

在另一具体实施方案中，本发明包含式II的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，

其中

X为直接键、-NR³-或-O-；

Z为或-NR⁷-；

R²为芳基或被取代的芳基、杂芳基或被取代的杂芳基，

R³、R⁴和R⁵独立地选自氢、烷基和被取代的烷基；

R⁶、R^6a和R^6b独立地选自一或多个氢、卤素、烷基、烷氧基、芳氧基、-CN、-NH₂、-OH、-COOH、-CH₂OR⁵、-CONHSO₂R⁵、-CONR⁴R⁵、-NH烷基、-NHCO烷基、-NR⁴SO₂烷基、-NR⁴SO₂NR⁴R⁵、-OCONR⁴R⁵、-CF₃和-OCF₃，其中两个可连接至相同的环碳原子上，条件是所得化合物为化学上稳定的；

R⁷为氢、烷基或-NH₂，和

n为0、1、2或3。

在另一具体实施方案中，本发明包含式III的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，

其中

X为直接键、-NR³-或-O-；

R²为芳基或被取代的芳基、杂芳基或被取代的杂芳基，

R³、R⁴和R⁵独立地选自氢、烷基和被取代的烷基；

R⁶、R^6a和R^6b独立地选自一或多个氢、卤素、烷基、烷氧基、芳氧基、-CN、-NH₂、-OH、-COOH、-CH₂OR⁵、-CONHSO₂R⁵、-CONR⁴R⁵、-NH烷基、-NHCO烷基、-NR⁴SO₂烷基、-NR⁴SO₂NR⁴R⁵、-OCONR⁴R⁵、-CF₃和-OCF₃，其中两个可连接至相同的环碳原子上，条件是所得化合物为化学上稳定的；和

n为0、1、2或3。

在另一具体实施方案中，本发明包含式III的化合物，

其中

R²为苯基、被取代的苯基、吡啶基、被取代的吡啶基、嘧啶基、被取代的嘧啶基、

唑、被取代的唑、噻唑、被取代的噻唑、吡嗪基或被取代的吡嗪基；

R⁶、R^6a和R^6b独立地选自一或多个氢、-NH₂、OH、烷氧基、-CONR⁴R⁵、-NR⁴SO₂烷基、-NR⁴SO₂NR⁴R⁵、-OCONR⁴R⁵、-NH烷基和-NHCO烷基；

X为-NH-；和

n为1或2。

本发明的优选化合物包括下列

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-(3-氯-4-氟苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-2-萘基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-苯基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-(3-乙炔基苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

5-[(4-氨基哌啶-1-基)甲基]-N-(4-氟-3-甲氧基苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

(3R，4R)-4-氨基-1-[[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇，

(3S，4S)-4-氨基-1-[[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-[[4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇，

(3S，4S)-4-氨基-1-[[4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-[[4-[(3-甲氧基-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)-氨基]吡咯并[2，1-f]-[1，2，4]-三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙氧基苯基)-氨基]-吡咯并[2，1-f]-[1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-醇

(3R，4R)-4-氨基-1-{[4-(2-萘基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基}哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基-4-甲基-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-溴苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]-三嗪-5-基}甲基)-哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-氟-5-甲氧基-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-醇，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇，

(3R，4S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-氯苯基)氨基]-吡咯并[2，1-f][1，2，4]-三嗪-5-基}甲基)-哌啶-3-醇，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-醇，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇，

(3R，4S)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)-氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇，

(3R，4S)-4-氨基-1-({4-[(3-氯苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]-三嗪-5-基}甲基)-哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基氨基甲酸酯，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)-氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-基氨基甲酸酯，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-基氨基甲酸酯，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-基氨基甲酸酯，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)-氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-基氨基甲酸酯，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-3-甲基哌啶-3-醇，

(3R/S，5R/S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3，5-二醇，

(3S，5S)-4-氨基-1-({4-[(4-氟-3-甲氧基-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3，5-二醇，

(3R，5R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)-氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3，5-二醇，

5-{[(3R，4R)-4-氨基-3-甲氧基哌啶-1-基]甲基}-N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

5-(((4aR，8aR)-rel-六氢-1H-吡啶并(pyrido)[3，4-b][1，4]嗪-6(7H)-基)甲基)-N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-(甲基磺酰基)哌啶-3-甲酰胺，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-甲基哌啶-3-甲酰胺，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-甲基哌啶-3-甲酰胺，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-甲酰胺，

((3R，4R)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-4-((R)-1-苯基乙基氨基)哌啶-3-基)甲醇，

N-[(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]脲，

N-(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]甲磺酰胺，和

N-{(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]甲磺酰胺，

或其药学上可接受的盐。

下列为本说明书中所使用的术语的定义。除非另外指出，本文所提供的基团或术语的最初定义单独或作为其它基团的一部分应用于本说明书中。

术语″烷基″是指1至20个碳原子，优选1至7个碳原子的直链或支链未被取代的烃基。术语″低级烷基″是指1至4个碳原子的未被取代的烷基。

术语″被取代的烷基″是指被例如一至四个如下列取代基所取代的烷基：卤素、羟基、烷氧基、氧代基、烷酰基、芳氧基、烷酰氧基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基、二取代的胺类，其中2个胺基取代基选自烷基、芳基或芳烷基；烷酰基氨基、芳酰基氨基、芳烷酰基氨基、被取代的烷酰基氨基、被取代的芳基氨基、被取代的芳烷酰基氨基、硫羟(thiol)、烷硫基、芳硫基、芳烷基硫基、烷基硫羰基、芳基硫羰基、芳烷基硫羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳烷基磺酰基、磺酰胺基，例如SO₂NH₂，被取代的磺酰胺基、硝基、氰基、羧基、氨基甲酰基，例如CONH₂、被取代的氨基甲酰基例如CONH烷基、CONH芳基、CONH芳烷基或其中在氮上有两个选自烷基、芳基或芳烷基的取代基的情形；烷氧基羰基、芳基、被取代的芳基、胍基、杂环基例如吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基(pyrrolidyl)、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基(pyrrolidinyl)、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、高哌嗪基(homopiperazinyl)等等，和被取代的杂环基。其中上述取代基进一步被烷基、烷氧基、芳基或芳烷基取代。

术语″卤素″或″卤代″是指氟、氯、溴和碘。

术语″芳基″是指在环部分具有6到12个碳原子的单环或双环芳族烃基，例如苯基、萘基、联苯基和二苯基，每个可被取代。

术语″芳烷基″是指通过烷基直接键合的芳基或被取代的芳基例如苄基。

术语″芳氧基″是指通过烷氧基(例如甲氧基或乙氧基)直接键合的芳基或被取代的芳基。

术语″被取代的芳基″是指被例如一至四个下列取代基所取代的芳基：如烷基、被取代的烷基、链烯基、被取代的链烯基、炔基、被取代的炔基、芳基、被取代的芳基、芳烷基、卤基、三氟甲氧基、三氟甲基、羟基、烷氧基、烷酰基、烷酰氧基、芳氧基、芳烷氧基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基、二烷基氨基、烷酰基氨基、硫羟、烷硫基、脲基、硝基、氰基、羧基、羧基烷基、氨基甲酰基、烷氧基羰基、烷基硫羰基、芳基硫羰基、芳基磺酰基胺、磺酸、烷基磺酰基、磺酰胺基、芳氧基等等。该取代基可进一步被羟基、卤基、烷基、烷氧基、链烯基、炔基、芳基或芳烷基取代。

术语″杂芳基″是指任意被取代的芳基，例如其为4至7员单环、7到11员二环，或10到15员三环环系，其具有包含至少一个杂原子和至少一个碳原子的环，例如，吡啶、四唑、吲唑。

术语″链烯基″是指2到20个碳原子，优选2到15个碳原子，和最优选2到8个碳原子的具有一到四个双键的直链或支链烃基。

术语″被取代的链烯基″是指被例如一至两个下列取代基所取代的链烯基：如卤基、羟基、烷氧基、烷酰基、烷酰氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷酰基氨基、硫羟、烷硫基、烷基硫羰基、烷基磺酰基、磺酰胺基、硝基、氰基、羧基、氨基甲酰基、被取代的氨基甲酰基、胍基、吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基等等。

术语″炔基″是指2到20个碳原子，优选2到15个碳原子，和最优选2到8个碳原子的具有一到四个三键的直链或支链烃基。

术语″被取代的炔基″是指被例如下列取代基所取代的炔基：如卤基、羟基、烷氧基、烷酰基、烷酰氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷酰基氨基、硫羟、烷硫基、烷基硫羰基、烷基磺酰基、磺酰胺基、硝基、氰基、羧基、氨基甲酰基、被取代的氨基甲酰基、胍基和杂环基，如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基等等。

术语″环烷基″是指任选被取代的饱和环烃环系统，优选包含1到3个环和每个环为3到7个碳，其可进一步与不饱和C₃-C₇碳环稠合。示例性的基团包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基、环十二烷基和金刚烷基。示例性的取代基包括一或多个如上所述的烷基，或一或多个如上烷基取代基所述的基团。

术语″杂环″、″杂环的″和″杂环基″是指任选被取代的完全饱和或不饱和的芳族或非芳族环基，例如，其为4到7员单环，7到11员二环，或10到15员的三环环系，其在至少一个含碳原子的环中具有至少一个杂原子。包含杂原子的杂环基的每个环可具有1、2或3个选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子，其中氮和硫杂原子也可任选被氧化，氮杂原子也可任选被季铵化。杂环基可连接于任何杂原子或碳原子上。

示例性的单环杂环基包括吡咯烷基、吡咯基、吲哚基、吡唑基、氧杂环丁基、吡唑啉基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、唑基、

唑烷基、异

唑啉基、异

唑基、噻唑基、噻二唑基、噻唑烷基、异噻唑基、异噻唑烷基、呋喃基、四氢呋喃基、噻吩基、

二唑基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、高哌嗪基、2-氧代高哌嗪基、2-氧代吡咯烷基、2-氧杂氮杂基(oxazepinyl)、氮杂

基(azepinyl)、4-哌啶酮基、吡啶基、N-氧代-吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、四氢吡喃基、吗啉基、硫吗啉基、硫吗啉基亚砜(thiamorpholinyl sulfoxide)、硫吗啉基砜(thiamorpholinyl sulfone)、1，3-二氧戊环(dioxolane)和四氢-1，1-二氧代噻吩基、二

烷基、异噻唑烷基、硫杂环丁基(thietanyl)、硫杂环丙烷基(thiiranyl)、三嗪基和三唑基，等等。

示例性的二环杂环基包括2，3-二氢-2-氧代-1H-吲哚基、苯并噻唑基、苯并

唑基、苯并噻吩基、奎宁环基、喹啉基、喹啉基-N-氧化物、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、吲嗪基、苯并呋喃基、色酮基(chromonyl)、香豆素基(coumarinyl)、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基(例如呋喃并[2，3-c]吡啶基、呋喃并[3，1-b]吡啶基]或呋喃并[2，3-b]吡啶基)、二氢异吲哚基、二氢喹唑啉基(例如3，4-二氢-4-氧代-喹唑啉基)、苯并异噻唑基、苯并异

唑基、苯并二嗪基(benzodiazinyl)、苯并呋咱基(benzofurazanyl)、苯并噻喃基、苯并三唑基、苯并吡唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噻喃基、二氢苯并噻喃基砜(dihydrobenzothiopyranyl sulfone)、二氢苯并吡喃基、二氢吲哚基、吲唑基、异色满基(isochromanyl)、异二氢氮杂茚基、1，5-二氮杂萘基(naphthyridinyl)、2，3-二氮杂萘基、胡椒基酰基、嘌呤基、吡啶并吡啶基、喹唑啉基、四氢喹啉基、噻吩并呋喃基、噻吩并吡啶基、噻吩并噻吩基等。

示例性的取代基包括一或多个如上所述的烷基或芳烷基，或一或多个如上所述作为烷基取代基的基团。也包括较小的杂环基，例如环氧化物和氮杂环丙烷。

术语″碳环″是指3至7个碳原子的稳定的饱和或部分不饱和单环烃环例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。术语″任选被取代的″是指文中的″碳环″，其表示该碳环可在一或多个可取代环位置上被一个或多个独立地选自下列的基团所取代：烷基(优选低级烷基)、烷氧基(优选低级烷氧基)、硝基、单烷基氨基(优选低级烷基氨基)、二烷基氨基(优选二[低级]烷基氨基)、氰基、卤基、卤代烷基(优选三氟甲基)、烷酰基、氨基羰基、单烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷基酰氨基(优选低级烷基酰氨基)、烷氧基烷基(优选低级烷氧基[低级]烷基)、烷氧基羰基(优选低级烷氧基羰基)、烷基羰基氧基(优选低级烷基羰基氧基)和芳基(优选苯基)，所述芳基任选被卤基、低级烷基和低级烷氧基所取代。

术语″杂原子″将包括氧、硫和氮。

式I的化合物可形成盐，其也是在本发明的范围内。药学上可接受的(即无毒性的生理上可接受的)盐为优选，虽然其它盐例如在分离或纯化本发明的化合物中也是有用的。

式I化合物可与碱金属例如钠、钾和锂，与碱土金属例如钙和镁，与有机碱例如二环己基胺、三丁胺、吡啶和氨基酸例如精氨酸、赖氨酸等形成盐。这些盐可按照本领域一般技术人员已知的方法形成。

式I化合物可与多种有机和无机酸形成盐。这些盐包括那些与氯化氢、溴化氢、甲磺酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、草酸、顺丁烯二酸、苯磺酸、甲苯磺酸形成的盐和各种其它的盐(例如，硝酸盐、磷酸盐、硼酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、水杨酸盐等)。这些盐可按照本领域一般技术人员已知的方法形成。

此外，可形成两性离子(″内盐″)。

预料本发明化合物的所有立体异构体为混合物或纯的或基本上纯的形式。根据本发明化合物的定义包含所有可能的立体异构体和它们的混合物。其非常特别地包括消旋形式和具有特定活性的单独的旋光异构体。消旋形式可通过物理方法解析(resolved)，例如通过非对映异构衍生物的分步结晶、分离或结晶，或者通过手性柱色谱法的分离。这些单独的旋光异构体可通过常规方法由外消旋物获得，例如，与旋光性的酸形成盐，接着结晶。

式I的化合物也可具有前药形式。任何将在体内被转化以得到生物活性剂(也就是，式I的化合物)的化合物为本发明范围和精神内的前药。

各种形式的前药是本领域已知的。对于这些前药衍生物的实例，参见：

a)Design of Prodrugs，edited by H.Bundgaard，(Elsevier，1985)andMethods in Enzymology，Vol.42，p.309-396，edited by K.Widder，et al.(Acamedic Press，1985)；

b)A Textbook of Drug Design and Development，edited byKrosgaard-Larsen and H.Bundgaard，Chapter 5，“Design and Application ofProdrugs，”by H.Bundgaard，p.113-191(1991)；和

c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，8，1-38(1992).

应进一步理解式I化合物的溶剂合物(例如水合物)也在本发明的范围内。溶剂化作用的方法一般是本领域已知的。

实用性

本发明是基于某些吡咯并三嗪为蛋白激酶的抑制剂的发现。更详细地说，例如那些在本发明中所描述的吡咯并三嗪类抑制受体的HER家族成员的蛋白酪氨酸激酶活性。这些抑制剂将可用于治疗依赖于一种或多种这些受体产生信号的增殖疾病。这些疾病包括牛皮癣、类风湿性关节炎和肺、头和颈、乳房、结肠、卵巢和前列腺的实体瘤。本发明涉及式I化合物、或其药学上可接受的盐或水合物，以及药学上可接受的载体在治疗哺乳动物的过增殖疾病(hyperproliferative disorder)的药物组合物。特别地，该药物组合物被预期抑制与HER1(EGF受体)和HER2有关的原发性和再发性实体瘤的生长，尤其是那些其生长和扩散显著地依赖HER1或HER2的肿瘤，例如包括膀胱、扁平细胞、头、结肠直肠、食管、妇科(例如卵巢)、胰腺、乳房、前列腺、阴门(vulva)、皮肤、脑、生殖泌尿道、淋巴系统(例如甲状腺)、胃、喉和肺的癌症。在另一具体实施方案中，本发明的化合物也可用于非癌疾病例如牛皮癣和类风湿性关节炎的治疗。

因此根据本发明另外的方面，提供了式I的化合物、或其药学上可接受的盐在制造用于在温血动物例如人类中产生抗增殖效果的药物中的用途。

因此根据本发明另外的方面，提供一种在需要该治疗的温血动物(例如人类)中产生抗增殖效果的方法，所述方法包括将有效量的如本文所定义的式I化合物或其药学上可接受的盐给药于所述动物。

由于其抑制HER1、HER2和HER4激酶的能力，本发明的化合物可用于治疗增殖疾病，包括牛皮癣和癌。HER1受体激酶已显示在许多包括头和颈、前列腺、非小细胞肺、结肠直肠和乳癌的实体瘤中被表达和活化。同样地，HER2受体激酶已经显示在乳腺癌、卵巢癌、肺癌和胃癌中过表达。向下调节HER2受体的丰度(abundance)或抑制通过HER1受体的信号的单克隆抗体已显示在临床前和临床研究上具有抗肿瘤功效。因此预期HER1和HER2激酶的抑制剂将具有治疗依赖于来自两个受体的任一的信号的肿瘤的功效。此外，这些化合物将具有抑制依赖HER受体异二聚物信号的肿瘤的功效。这些化合物被预期作为单剂(single agent)或与其它化学治疗剂例如Taxol、多柔比星(adriamycin)和顺铂组合(同时或顺序地)具有功效。因为HER1和HER2信号已显示调节血管生成因子例如血管内皮生长因子(VEGF)和白介素8(IL8)的表达，所以这些化合物被预期具有由于除了肿瘤细胞增殖和存活的抑制作用外的血管发生的抑制作用而产生的抗肿瘤功效。已显示HER2受体涉及类风湿性关节炎中的滑膜细胞的过增生(hyperproliferation)，并可有助于炎性疾病状态的血管发生成分(angiogenic component)。因此描述在本发明中的抑制剂被预期在治疗类风湿性关节炎中是有效的。这些化合物抑制HER1的能力进一步增加了它们作为抗血管发生剂的用途。参见下列的文件和其中所引用的参考文献：Schlessinger J.，“Cell signaling by receptortyrosine kinases”，Cell 103(2)，p.211-225(2000)；Cobleigh，M.A.，Vogel，C.L.，Tripathy，D.，Robert，N.J.，Scholl，S.，Fehrenbacher，L.，Wolter，J.M.，Paton，V.，Shak，S.，Lieberman，G.，and Slamon，D.J.，“Multinational study of theefficacy and safety of humanized anti-HER2 monoclonal antibody in women whohave HER2-overexpressing metastatic breast cancer that has progressed afterchemotherapy for metastatic disease”，J.of Clin.Oncol.17(9)，p.2639-2648(1999)；Baselga，J.，Pfister，D.，Cooper，M.R.，Cohen，R.，Burtness，B.，Bos，M.，D’Andrea，G.，Seidman，A.，Norton，L.，Gunnett，K.，Falcey，J.，Anderson，V.，Waksal，H.，and Mendelsohn，J.，“Phase I studies of anti-epidermal growth factorreceptor chimeric antibody C225 alone and in combination with cisplatin”，J.Clin.Oncol. 18(4)，p.904-914(2000)；Satoh，K.，Kikuchi，S.，Sekimata，M.，Kabuyama，Y.，Homma，M.K.，and Homma Y.，“Involvement of ErbB-2 inrheumatoid synovial cell growth”，Arthritis Rheum.44(2)，p.260-265(2001).

之前在本文所定义的抗增殖治疗可用作单独治疗(sole therapy)或除本发明化合物外，可包括一种或多种其它物质及/或治疗。这种联合治疗(conjointtreatment)可通过治疗的个别成分的同时、顺序(sequential)或分开给药的方式完成。本发明的化合物也可与已知的抗癌剂和细胞毒素剂及治疗包括辐射组合使用。如果配制成固定剂量，这些组合产物(combination products)使用在下述剂量范围内的本发明化合物和其它在其经核准的剂量范围内的药学上的活性剂。当组合制剂不适当时，式I化合物可与已知的抗癌剂和细胞毒素剂及治疗包括辐射顺序地(sequentially)使用。

在医学肿瘤学的领域中一般实践为使用不同形式的治疗的组合以治疗每个癌症病人。在医学肿瘤学中，除了之前在本文所定义的抗增殖治疗外，该联合治疗的其它成分可为：外科手术、放射疗法或化学疗法。这些化学疗法可包括三个主要种类的治疗剂：

(i)通过与上述定义不同的机制作用的抗血管发生剂(例如，利诺胺(linomide)、整联蛋白αvβ3功能的抑制剂、血管他丁(angiostatin)、雷佐生(razoxane))；

(ii)细胞(生长)抑制剂(cytostatic agents)例如抗雌激素药(例如他莫昔芬(tamoxifen)、托瑞米芬(toremifene)、雷洛昔芬(raloxifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、吲哚昔芬(iodoxifene))、孕激素类(progestogens)(例如醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)、芳香酶(aromatase)抑制剂(例如阿那曲唑(anastrozole)、来曲唑(letrozole)、伯拉唑(borazole)、依西美坦(exemestane))、抗激素(antihormones)、抗孕激素(antiprogestogens)、抗雄激素(antiandrogens)(例如氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、醋酸环丙孕酮(cyproterone acetate))、LHRH激动剂和拮抗剂(例如醋酸性瑞林(gosereline acetate)、醋酸亮丙瑞林(leuprolide))、睾酮5α-二氢还原酶的抑制剂(例如非那雄胺(finasteride))、法尼基转移酶抑制剂、抗侵袭素(anti-invasion agents)(例如金属蛋白酶抑制剂如马立马司他(marimastat)和尿激酶纤溶酶原激活物受体功能的抑制剂)和生长因子功能的抑制剂，(这些生长因子包括例如EGF、FGF、血小板衍生的生长因子和肝细胞生长因子，这些抑制剂包括生长因子抗体、生长因子受体抗体例如Avastin

(贝伐单抗(bevacizurnab))和Erbitux(西妥昔单抗(cetuxirnab))；酪氨酸激酶抑制剂和丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂)；和

(iii)抗增殖/抗肿瘤药和其组合(combinations)，如用于医学肿瘤学，例如抗代谢物(例如抗叶酸剂(antifolates)例如甲氨蝶呤(methotrexate)、氟嘧啶类例如5-氟尿嘧啶、嘌呤和腺苷类似物、阿糖胞苷(cytosine arabinoside))；嵌入(intercalating)抗肿瘤抗生素类(例如蒽环类抗生素(anthracyclines)例如阿霉素(doxorubicin)、柔红霉素(daunomycin)、表柔比星(epirubicin)和伊达比星(idarubicin)、丝裂霉素(mitomycin)-C、放线菌素D(dactinomycin)、普卡霉素(mithramycin))；铂衍生物(例如顺铂(cisplatin)、卡铂(Carboplatin))；烷化剂(例如氮芥、美法仑(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、白消安(busulphan)、环磷酰胺、异环磷酰胺、亚硝基脲类(ifosfamide nitrosoureas)、塞替派(thiotepa)；抗(有丝分)裂剂(例如长春花生物碱(vinca alkaloids)像长春新碱(vincristine)、长春瑞滨(vinorelbine)、长春碱(vinblastine)和长春氟宁(vinflunine)和紫杉烷类(taxoids)例如Taxol

(紫杉醇(paclitaxel)、Taxotere(多西紫杉醇(docetaxel))和比较新的微管剂(microbtubule agents)例如epothilone类似物、discodermolide类似物和eleutherobin类似物)；拓扑异构酶(topoisomerase)抑制剂(例如表鬼臼毒素(epipodophyllotoxins)如依托泊苷(etoposide)和替尼泊苷(teniposide)、安吖啶(amsacrine)、托泊替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan))；细胞周期抑制剂(例如flavopyridol)；生物反应调节物和蛋白酶体(proteasome)抑制剂例如Velcade

(bortezomib)。

如上所述，本发明的I式化合物感兴趣的是它们的抗增殖效果。这些本发明的化合物被预期用于广泛的疾病状态，包括癌症、牛皮癣和类风湿性关节炎。

更具体地，式I化合物可用于治疗多种癌症，包括(但不限于)下列：

-癌，包括膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾脏癌、肝癌、肺癌(包括小细胞肺癌)、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌、和皮肤癌包括鳞状细胞癌；

-间充质(Mesenchymal)起源的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；

-中枢神经系统和周围神经系统的肿瘤，包括星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤(schwannomas)；和

-其它的肿瘤，包括黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌和骨肉瘤。

一般由于激酶在细胞增殖调节中的关键作用，抑制剂能够充当可用于治疗任何以异常细胞增生为特征的疾病过程的可逆的细胞生长抑制剂，所述疾病过程例如良性前列腺增生、家族性腺瘤病息肉病(familial adenomatosispolyposis)、神经纤维瘤病、肺纤维化、关节炎、牛皮癣、肾小球肾炎、血管成形术或血管手术后的再狭窄、肥大性瘢痕形成(hypertrophic scar formation)和炎性肠病。

式I的化合物尤其可用于治疗酪氨酸激酶活性具有高度影响的肿瘤，例如结肠、肺和胰腺肿瘤。通过给药本发明化合物的组合物(或组合(combination))，减少肿瘤在哺乳动物宿主体内的发展。

式I的化合物也可用于治疗除癌症以外的、与通过生长因子受体例如HER1(EGF受体)、HER2或HER4起作用的信号转导途径有关的疾病。

包含活性成分的本发明药物组合物可为适合于口服使用的形式，例如，作为片剂、含片(troches)、锭剂、含水或含油悬浮液、分散性粉剂或粒剂、乳剂、硬或软胶囊或糖浆剂或酏剂。意欲口服使用的组合物可根据任何制造药物组合物的领域已知的方法制备，并且这些组合物可包含一种或多种选自甜味剂、调味剂、着色剂及防腐剂的试剂以便提供药学上优雅和美味的制剂。片剂包含与适合于片剂制造的非毒性药学上可接受的赋形剂相混合的活性成分。这些赋形剂可为，例如惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒及崩解剂，例如，微晶纤维素、交联羧甲纤维素钠、玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯胶，及润滑剂，例如，硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。这些片剂可未被包衣(uncoated)或他们可通过已知技术包衣以遮蔽药物的不悦味道或延迟在胃肠道中的崩解和吸收，由此提供较长期间的持续作用。例如，可使用水溶性味道遮蔽材料例如羟丙基-甲基纤维素或羟丙基-纤维素，或时间延迟材料例如乙基纤维素、丁酸乙酸纤维素(cellulose acetate buryrate)。

口服使用的制剂也可以硬明胶胶囊存在，其中活性成分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或作为软明胶胶囊存在，其中活性成分与水溶性载体例如聚乙二醇(polyethyleneglycol)或油介质，例如花生油、液态石蜡或橄榄油混合。

含水悬浮液包含与适合于制造含水悬浮液的赋形剂相混合的活性物质。这些赋形剂为助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基-纤维素、藻酸钠、聚乙烯-吡咯烷酮、西黄蓍胶(gum tragacanth)和阿拉伯胶；分散或湿润剂可为天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或烯烃氧化物与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪族醇的缩合产物，例如十七乙烯-氧基鲸蜡醇(heptadecaethylene-oxycetanol)，或环氧乙烷(ethylene oxide)与衍生自脂肪酸和己醣醇的部分酯例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯的缩合产物，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己醣醇酐的部分酯例如聚乙烯去水山梨糖醇单油酸酯(polyethylene sorbitan monooleate)的缩合产物。含水悬浮液也可包含一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正-丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂和一种或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或天冬甜素。

含油悬浮液可通过将活性成分悬浮在植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油中，或在矿物油例如液态石蜡中来配制。这些含油悬浮液可包含增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或十六醇。可加入甜味剂例如那些上文所述的，和调味剂以得到美味的口服制剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂例如丁基化羟苯甲醚(butylated hydroxyanisol)或α-生育酚防腐。

适合于通过加水制备的含水悬浮液的分散性粉剂和粒剂提供了与分散剂或湿润剂、助悬剂和一种或多种防腐剂相混合的活性成分。示例性的合适分散剂或湿润剂和助悬剂如上所述。也可存在另外的赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸防腐。

本发明的药物组合物也可为水包油型乳液的形式。油相可为植物油，例如橄榄油或花生油，或矿物油，例如液态石蜡或这些的混合物。合适的乳化剂可为天然存在的磷脂例如大豆磷脂，和衍生自脂肪酸和己醣醇酐的酯或部分酯例如去水山梨糖醇单油酸酯，及所述部分酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。这些乳液也可包含甜味剂、调味剂、防腐剂和抗氧化剂。

糖浆剂和酏剂可与甜味剂，例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制。这些制剂还可包含缓和剂、防腐剂、调味剂和着色剂及抗氧化剂。

药物组合物可为无菌注射水溶液的形式。其中可使用的可接受的媒介物和溶剂为水、Ringer氏溶液和等渗氯化钠溶液。

无菌可注射制剂也可为无菌可注射的水包油型微乳液，其中活性成分溶解在油相中。例如，可先将活性成分溶解在大豆油和卵磷脂的混合物中。然后将油溶液引入到水和甘油混合物中，并加工以形成微乳液。

可注射溶液或微乳液可通过局部的快速浓注(bolus injection)引进至病人血流内。或者，以维持本发明化合物的恒定循环浓度的方式给予溶液或微乳液是有利的。为了维持该恒定的浓度，可利用连续静脉内的递送装置。该装置的例子为Deltec CADD-PLUS.TM.型号5400静脉内泵的装置。

这些药物组合物可为肌内和皮下给药的灭菌注射水或油性悬浮液的形式。此悬浮液可依照已知的技术使用上述适当的分散剂或湿润剂和助悬剂配制。灭菌注射制剂也可为在非毒性肠胃外的可接受的稀释剂或溶剂例如1，3-丁二醇溶液中的灭菌注射溶液或悬浮液。此外，常规使用的灭菌非挥发性油类(fixed oils)作为溶剂或悬浮介质。为此目的可使用任何温和的非挥发性油，包括合成的甘油单-或二酯。此外，发现脂肪酸例如油酸可用于制备注射剂。

式I的化合物还可以用于药物直肠给药的栓剂的形式给予。这些组合物可通过混合药物与在常温下为固体但在直肠温度为液体且因此将在直肠熔化释放药物的适当非刺激性赋形剂制备得到。这些材料包括可可脂、甘油明胶、氢化植物油类、各种分子量的聚乙二醇的混合物和聚乙烯二醇类的脂肪酸酯。

对于局部使用，使用包含式I的化合物的乳剂、软膏剂、凝胶剂、溶液或悬浮液等。(为此施用目的，局部施用将包括口洗剂及含漱剂)。

本发明的化合物可通过适当的鼻内媒介物(vehicles)和递送装置的局部使用以鼻内形式，或通过经皮途径，使用本领域一般技术人员所熟知的经皮皮肤贴片的形式给药。为了以经皮递送系统的形式给药，当然，剂量给予在整个剂量服用法中将为连续的而非间断的。本发明的化合物也可以使用基质例如可可脂、甘油明胶、氢化植物油类、各种分子量的聚乙二醇的混合物和聚乙二醇类的脂肪酸酯的栓剂递送。

当将根据本发明的化合物给药于人类患者时，每日剂量将正常地由主治医师依照个别患者的年龄、体重、性别和反应，以及患者症状的严重性而改变的一般通常剂量来决定。

如果配制成固定剂量，这些组合产物(combination products)使用在上述剂量范围内的本发明化合物和在其认可的剂量范围内的其它药学上的活性剂或治疗。当组合制剂(combination formulation)不适当时，也可将式I的化合物与已知的抗癌剂或细胞毒素剂顺续地给药。本发明不限制给药的顺序；式I的化合物可在给予已知的抗癌剂或细胞毒素剂之前或之后给予。

化合物可以在约0.05至200mg/kg/天，优选少于100mg/kg/天的剂量范围内，以单一剂量或2至4个分开剂量给药。

生物学试验

HER1、HER2或HER4激酶试验

将感兴趣的化合物在包含20mM Tris.HCl，pH7.5、10 mM MnCl₂、0.5mM二硫苏糖醇、0.1mg/ml的牛血清白蛋白、0.1mg/ml的聚(glu/tyr，4∶1)，1μM ATP和4μCi/ml的[γ-³³P]ATP的激酶缓冲液中测定。聚(glu/tyr，4∶1)为一种合成聚合物，其用作磷酰基受体，并购自Sigma Chemicals。该激酶反应通过加入酶来启动，并将该反应混合物在26℃下孵育1小时。该反应通过加入EDTA至50mM来终止，并通过加入三氯乙酸至5％来沉淀蛋白。在Packard Unifilter板上过滤回收沉淀的蛋白，并在Topcount闪烁计数器中测量结合的放射性的量。

对于重组体HER1和HER4的制备，受体的细胞质序列在昆虫细胞中表达为GST融合蛋白，其通过亲和色谱法纯化。将HER2的细胞质序列亚克隆(subcloned)至杆状病毒表达载体pBlueBac4(Invitrogen)中，并在昆虫细胞中表达为未标记的蛋白。通过离子交换色谱法部分地纯化重组蛋白质。

本发明化合物具有在0.001到25μM之间的IC₅₀值抑制HER1、HER2和HER4激酶。优选的化合物具有在0.001-5.0μM之间的IC₅₀值。更优选的化合物具有在0.001-1.0μM之间的IC₅₀值。最优选化合物具有在0.001-0.1μM之间的IC₅₀值。

制备方法

通常，某些式I化合物可根据下列方案和本领域一般技术人员的知识制备得到。补充的制备信息还可见于在审的2000年5月18日提交的美国专利申请序号09/573,829和国际公开号WO 00/71129，两者引入本文作为参考。

方案1

其中X＝卤素，Y＝N或O，烷基＝CH₃或nBu

步骤1

方案1的第一个步骤是通过用硫醇例如甲硫醇或丁硫醇或它们的钠盐在无水溶剂例如THF中在惰性气氛例如N₂下处理化合物i(参考WO 03/042172A2)以得到化合物ii而完成的。

步骤2

化合物ii的5-甲基基团的卤化作用是通过用卤化试剂例如N-溴琥珀酰亚胺处理而得到的。该反应在惰性气氛例如Ar气下，在催化剂例如过氧化二苯甲酰或2，2′-偶氮二异丁腈存在下完成，并得到5-卤代甲基-吡咯并三嗪化合物iii。

步骤3

将化合物iii用伯胺或仲胺或醇在碱例如NaHCO₃或三乙胺或二异丙基乙胺存在下，在溶剂例如乙腈或N，N-二甲基甲酰胺中处理，得到中间体化合物iv。

步骤4

将中间体化合物iv用苯胺在HgCl₂存在下，在溶剂例如甲苯中处理，得到4-取代的吡咯并三嗪化合物v。

步骤5

或者可将式iv化合物用合适的氧化剂例如间-氯过苯甲酸在溶剂例如CH₂Cl₂中处理，得到砜vi。

步骤6

通过在惰性溶剂例如CH₂Cl₂中，用伯胺或仲胺或醇处理可将砜vi转化为化合物v。

或者，通式I的化合物可按照方案2所示制备。

方案2

其中X＝卤素，Y＝N或O

步骤1

方案2的第一个步骤是通过用卤化试剂例如N-溴琥珀酰亚胺在惰性气氛例如Ar气下处理化合物i(参考WO 03/042172 A2)而完成。该反应在合适的溶剂例如CCl₄中，在催化剂例如过氧化二苯甲酰或2，2′-偶氮二异丁腈存在下完成，得到二卤代吡咯并三嗪化合物vii。

步骤2

化合物vii可通过在无水溶剂例如THF中用叔碱例如三乙胺处理而转化成铵盐化合物viii。

步骤3

将化合物viii用胺或其阴离子在无水溶剂例如乙腈、氯仿或THF中处理，得到铵盐化合物ix。

步骤4

使化合物ix转化为吡咯并三嗪化合物v可通过在碱例如二异丙基乙胺存在下，在溶剂例如乙腈中用伯胺或仲胺或醇处理化合物ix来完成。

通过上述方法制备的具有方案3中的通式x的化合物，其中5-甲基取代基包含保护基例如叔-丁氧基羰基，可在步骤1中通过用无水HCl的乙醚或1，4-二

烷溶液处理或通过用三氟乙酸处理化合物的CH₂Cl₂溶液除去保护基而进一步改性制备得到游离胺xi。进一步的改性可在步骤2中通过在还原剂例如三乙酰氧基硼氢化钠存在下，在溶剂例如CH₂Cl₂中用羰基化合物例如丙醛处理化合物xi以得到被取代的胺xii而完成。

方案3

更多的化合物可按照方案4所示制备。在步骤1中，可在碱例如二异丙基乙胺存在下于适当溶剂例如乙腈中，将化合物ix用仲胺例如双-(2-氯乙基)胺处理而得到化合物xii。在步骤2中化合物xii可进一步用亲核试剂例如肼处理而得到化合物xiii。

方案4

可根据方案5制备得到另外的5-取代的吡咯并三嗪。

方案5

步骤1

可将化合物i在高温下在溶剂例如CCl₄中用两当量的溴化试剂例如N-溴琥珀酰亚胺处理。可将所得的5-二溴吡咯并三嗪在碱例如NaHCO₃存在下，使用甲醇转化成相应的二甲基乙缩醛(dimethylacetal)，并然后在水存在下用酸例如三氟乙酸处理中间体乙酰醛而转化成醛化合物xiv。

步骤2

将醛化合物xiv用有机金属试剂例如Grignard试剂在无水溶剂例如THF中处理，得到醇xv。

步骤3

可在适当溶剂例如乙腈中，在碱例如NaHCO₃存在下，将醇xv用伯胺或仲胺或醇处理以得到式xvi化合物。

此外，其它的式I化合物可使用本领域一般技术人员通常已知的步骤制备。特别地，下列实施例提供了制备本发明化合物的另外的方法。

本发明现在将通过下列操作实施例进一步描述，其为本发明的优选具体实施方案。所有的温度为摄氏度(℃)，除非另外指出。“HPLC保留时间”为在下列条件下获得的HPLC保留时间：柱类型和长度，梯度时间[除非另外指出，否则所有的梯度都以100％溶剂A(10％MeOH，90％H₂O，0.1％TFA)开始并以100％溶剂B(90％MeOH，10％H₂O，0.1％TFA)结束]，流速(mL/min)。UV检测总是在220nM进行。这些实施例为说明而非限制性的，并且应当理解可有落在如所附权利要求所限定的本发明的精神和范围内的其它具体实施方案。

实施例1

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-(3-氯-4-氟苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺

1A.5-甲基-4-甲硫基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪的制备

在0℃下，将NaSMe(1.85g，26.3mmol)加入到以N₂鼓泡(sparged)的4-氯-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪(4.02g，24.0mmol)(参考WO 03/042172A2)在无水THF(200毫升)中的溶液中。继续鼓泡5分钟。反应混合物然后在室温下搅拌过夜，在真空中浓缩至剩下约50毫升体积。以H₂O(280毫升)稀释并于0℃下搅拌。过滤固体，以冷水洗涤，干燥以得到1A(3.91g，91％)。其具有分析HPLC保留时间＝3.38分钟。(YMC S5 ODS柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％磷酸，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝180。

1B.[1-(4-甲硫基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲基)-哌啶-4-基]-氨基甲酸叔-丁酯的制备

将1A(1.94g，10.8mmol)、过氧化二苯甲酰(0.262g，1.08mmol)、NBS(2.12g，11.90mmol)在CCl₄(100毫升)中的混合物以N₂鼓泡，然后立刻于85℃加热1.5小时。混合物冷却至室温，并过滤掉沉淀物。滤液在真空中浓缩，以二氯乙烷(35毫升)稀释，并加入DIEA(2.24毫升，12.96mmol)和哌啶-4-基-氨基甲酸叔-丁基酯(2.38g，11.90mmol)。反应混合物在室温下搅拌1小时。混合物以饱和NaHCO₃(70毫升)稀释，并用EtOAc(3×100毫升)萃取。合并的EtOAc萃取物以盐水(1×100毫升)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤并在真空中浓缩。残余物通过硅胶快速柱纯化以得到1B(2.87g，70％)(0.1％-2％MeOH-CH₂Cl₂)。其具有分析HPLC保留时间＝2.12分钟。(YMC S5 ODS柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％磷酸，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝378。

1C.5-溴甲基-4-氯-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪的制备

将4-氯-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪(2.0g，11.93mmol)(参考WO03/042172 A2)和AIBN(195mg，1.19mmol)在CCl₄(80毫升)中的混合物在N₂下于100℃加热5分钟，加入NBS(2.55g，14.3mmol)。将反应混合物搅拌10分钟，然后冷却至室温，过滤。CCl₄层以稀NaHCO₃水溶液洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩以得到1C(2.70g，92％)。

1D.(4-氯-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲基)-三乙基-铵溴化物的制备

将1C(2.7g，11mmol)、Et₃N(5毫升，36mmol)在THF(20毫升)中的混合物于室温下搅拌12小时。过滤固体，并以THF及Et₂O冲洗，干燥以得到1D(3.38g，89％)。其具有分析HPLC保留时间＝0.776分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺＝267。

1E.[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲基]-三乙基-铵溴化物盐酸盐的制备

将1C(1.0g，2.2mmol)和3-氯4-氟-苯胺(418mg，2.87mmol)在CHCl₃(10毫升)中的混合物于50℃加热2小时。过滤固体，并以CHCl₃冲洗，干燥以得到1E(1.24g，87.4％)。其具有分析HPLC保留时间＝2.19分钟(ChromolithSpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺＝376。

1 F.{1-[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲基]-哌啶-4-基}-氨基甲酸叔-T酯的制备

方法一：

将1B(30mg，0.08mmol)、3-氯-4-氟-苯胺(1 1mg，0.08mmol)和HgCl₂(24mg，0.088mmol)在甲苯(2毫升)中的混合物加热回流8小时。冷却至室温，以EtOAc(5毫升)稀释并过滤。浓缩滤液，及通过制备型HPLC纯化残余物以得到油1F。

方法二：

在70℃下，将1E(9.1g，18.4mmol)和DIPEA(3.2毫升，18.4mmol)在CH₃CN(40毫升)中的混合物用40分钟的时间逐滴加入到哌啶-4-基-氨基甲酸叔-丁基酯(4.1g，20.3mmol)在CH₃CN(55毫升)中的悬浮液中。反应混合物于70℃下搅拌1小时，然后冷却至室温，之后慢慢地加入H₂O(155毫升)。过滤固体，并以15％CH₃CN/H₂O，然后用H₂O冲洗，并在真空下干燥以得到1F(7.84g，90％)。其具有分析HPLC保留时间＝2.73分钟(ChromolithSpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝475。

1G.5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-(3-氯-4-氟苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺的制备

将化合物1F(得自方法一)于0℃用20％TFA/CH₂Cl₂(3毫升)处理，然后在室温下搅拌2小时。浓缩反应混合物并通过制备型HPLC纯化以得到TFA盐的产物，TFA盐以饱和NaHCO₃处理以得到游离碱1G(两个步骤为4mg，13％)。其具有分析HPLC保留时间＝1.49分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝375。

实施例2

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-4-吡啶基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺

将NaHMDS的THF溶液(722微升，0.722mmol)加入到吡啶-4-基胺(34mg，0.361mmol)在THF(500微升)中的混合物中。混合物冷却到0℃并加入1D(125mg，0.27mmol)在DMF(800微升)中的悬浮液。混合物在此温度下搅拌0.5小时，并将哌啶-4-基-氨基甲酸叔-丁基酯(144mg，0.72mmol)加至冷混合物中。反应混合物于50℃加热10分钟并浓缩以除去THF。加入TFA(1毫升)，搅拌混合物直到保护基被除去(2小时)(过程是通过HPLC监测)。在真空中除去TFA，并加入饱和NaHCO₃。混合物以EtOAc萃取，且干燥合并的萃取物，浓缩，并先用Et₂O一起研磨以得到标题化合物(46mg，53％)。分析HPLC保留时间＝0.51分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝324。

实施例3-37

化合物3-37是使用与实施例2中的化合物相似的方法使用相应的胺制备得到。

实施例38-121

方法一：

化合物(具有HPLC注解(a))是通过下列标准方法制备。

在1打兰(dram)管形瓶中加入1D(55.0mg，0.16mmol)、苯胺(0.16mmol，1.0当量)和CH₃CN(1毫升)。混合物在65℃下振荡过夜。向该混合物中加入哌啶-4-基-氨基甲酸叔-丁基酯(34.9mg，0.17mmol)，接着加入DIEA(28微升，16mmol)。将反应于65℃继续3小时。浓缩混合物；通过制备型HPLC纯化残余物，并收集和浓缩所需的级分(fraction)。所得残余物在高真空下干燥过夜。

将CH₂Cl₂(1.5毫升)和TFA(0.2毫升)加入到上述残余物中，并将反应混合物在室温下振荡2小时。浓缩混合物，且在迅速真空(speed vacuum)中干燥过夜以得到固体产物。只有当固体不纯时，进一步使用制备型HPLC。

方法二：

化合物(具有HPLC符号(b))是通过下列标准方法制备。

将1D(75mg，0.216mmol)和苯胺(1.0当量，0.21 6mmol)在N，N-二甲基乙酰胺(0.5毫升)中的混合物在小管形瓶中于70℃下加热3-5小时直到获得透明溶液。使用HPLC来追踪反应的进展。将反应混合物冷却至室温，并加入哌啶-4-基-氨基甲酸叔-丁基酯(43mg，0.2 1 6mmol)，接着加入N，N-二异丙基乙胺(75微升)。将反应混合物再次于70℃加热过夜。一旦冷却，将反应混合物用CH₂Cl₂(0.5毫升)稀释，并冷却到0℃。加入TFA(1.0毫升)，并将混合物在环境温度下搅拌过夜。在减压(speedVac)下除去溶剂，并将残余物溶于甲醇中，并通过制备型(Prep)HPLC纯化以得到所要的产物。

HPLC条件：

(a)：(YMC S5 ODS柱4.6×50毫米，1 0-90％甲醇水溶液，包含0.2％H₃PO₄，经历4分钟，3毫升/分钟，于220nm监测)

(b)：(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，1 0-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)

注解：实施例97-99、101和1 04因重复已经从表中删除。

实施例122-132

化合物122-132是由化合物1D、3-氯-4-氟苯胺和相应的胺或Boc保护的胺通过类似于制备化合物38-121所使用的途径制备得到。

实施例133

5-[(4-氨基-1-哌嗪基)甲基]-N-(3-氯-4-氟苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺

133A(5-{[双-(2-氯-乙基)-氨基]-甲基}-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-基)-(3-氯-4-氟-苯基)-胺的制备

将化合物1E(50mg，0.1mmol)、双-(2-氯乙基)胺盐酸盐(18mg，0.1mmol)、DIEA(36微升，0.2mmol)在CH₃CN(0.5毫升)中的混合物于60℃加热3小时。将混合物冷却至室温并浓缩以得到化合物133A，其直接用于下一步骤。133A具有分析HPLC保留时间＝2.986分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝416。

将得自最后步骤的粗品133A溶解在纯净无水的N₂H₄(0.5毫升)中，并于100℃加热几个小时。混合物冷却至室温，以H₂O稀释并用CH₂Cl₂萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，中和并萃取(用CH₂Cl₂)之后，得到化合物133(两个步骤为38.8mg，100％)。分析HPLC保留时间＝1.709分钟(Chromolith SpeedROD4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝376。

实施例134

(3-氯-4-氟-苯基)-[5-(吗啉-2-基甲氧基甲基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-基]-胺

134A 2-(4-甲硫基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲氧基甲基)-吗啉-4-羧酸叔-丁酯的制备

将化合物1A(1.0g，5.6mmol)在CCl₄(50毫升)中的溶液用氮气净化一小时。加入过氧化二苯甲酰(270mg，1.12mmol)，并将反应混合物加热到86℃。以一批加入N-溴琥珀酰亚胺(1.04g，5.88mmol)。30分钟之后，将反应冷却到室温并过滤。浓缩滤液，再溶解于甲苯(10毫升)中，并用2-羟基甲基-吗啉-4-羧酸叔-丁酯(1.5g，6.9mmol)处理。将溶液于110℃加热8小时，冷却到室温并浓缩。在二氧化硅(20％EtOAc/己烷)上进行快速色谱法，得到淡黄色油的产物，静置结晶(770mg，32％)。HPLC t_R＝3.783分钟(YMC S5 ODS4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，4分钟梯度，于220nm监测)。LC/MS(M+H)＝178。

134B 2-[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲氧基甲基]-吗啉-4-羧酸叔-丁酯的制备

将2-(4-甲硫基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲氧基甲基)-吗啉-4-羧酸叔-丁酯(60mg，0.15mmol)在CH₂Cl₂(3毫升)中的溶液冷却到0℃，并用mCPBA(56mg，0.32mmol)的CH₂Cl₂(2毫升)溶液处理。将反应于0℃搅拌15分钟然后温热至室温。将3-氯-4-氟苯胺加入到此溶液中，并在室温下搅拌一小时。将所得橙色溶液以CH₂Cl₂稀释，并用饱和NaHCO₃水溶液、然后用饱和NaCl水溶液洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。经制备型反相HPLC，得到所需的化合物(30mg，41％)。HPLC t_R＝4.383分钟(YMC S5ODS 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，4分钟梯度，于220nm监测)。LC/MS(M+H)＝492。

将134B(30mg，0.06mmol)的CH₂Cl₂(3毫升)溶液于0℃下用三氟乙酸(0.3毫升)通过滴加处理。将反应搅拌两个小时，然后以CH₂Cl₂稀释，并以饱和NaHCO₃水溶液洗涤。分离有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗品化合物通过径向色谱法(1毫米板，15％MeOH/CH₂Cl₂至30％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到化合物134(17mg，67％)。HPLC t_R＝2.83分钟(YMC S5 ODS 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，4分钟梯度，于220nm监测)。LC/MS(M+H)＝392。

实施例135

4-氨基-1-[[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]-(3R，4R)-rel-3-哌啶醇

化合物135A：

向1，2，3，6-四氢吡啶(1.66g，20.0mmol)在无水CH₂Cl₂(10毫升)中的溶液中加入三乙胺(3.35毫升，24.0mmol)，随后加入N-(苄氧基羰氧基)琥珀酰亚胺(5.23g，21.0mmol)的无水CH₂Cl₂(10毫升)溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应混合物以CH₂Cl₂(50毫升)稀释，并以10％柠檬酸、饱和NaHCO₃、盐水洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩以得到4.34克的油状物的化合物135A：(100％)。分析HPLC保留时间＝2.996分钟(ChromolithSpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)。

¹H-NMR(CDCl3)：7.20-7.35(m，5H)，5.88(bs，1H)，5.60-5.78(m，1H)，5.18(s，2H)，3.99(t，J＝2.64，2H)，3.59(t，J＝5.69，2H)，2.18(m，2H).

化合物135B

向冷却至0℃的化合物135A(1.1g，5.0mmol)的无水CH₂Cl₂(10毫升)溶液中加入75％m-CPBA(1.38g，6.0mmol)在无水CH₂Cl₂(5毫升)中的溶液。反应混合物于0℃下搅拌15分钟，然后在室温下搅拌3小时。将反应混合物用CH₂Cl₂(20毫升)稀释，并以饱和Na₂S₂O₃、饱和NaHCO₃、盐水洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩以得到1.14克(98％)油状物的化合物135B。分析HPLC保留时间＝2.279分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)。

¹H-NMR(CDCl₃)：7.20-7.36(m，5H)，5.05(s，2H)，3.80-3.96(m，1H)，3.70(m，1H)，3.47(m，1H)，3.22(bs，1H)，3.07-3.20(m，2H)2.00(m，1H)，1.87(m，1H).

化合物135C和135D：

将叠氮化钠(100mg，1.5mmol)在丙酮-水的2∶1混合物(2毫升)中的溶液加入到化合物135B(233mg，1.0mmol)在无水DMF(2毫升)中的溶液。将反应混合物在80℃下加热过夜。在减压下除去溶剂，并将残余物溶解在EtOAc(20毫升)中，用水、10％LiCl和盐水洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩以得到油状物。经硅胶快速色谱法(己烷-乙酸乙酯：8∶2到7∶3)，得到180mg油状物的化合物135C(早先的洗脱液(early eluent)，主要的异构体)和98mg油状物的化合物135D(后面的洗脱液(late eluent)，次要的异构体)。

化合物135C：¹H-NMR(CDCl₃)：7.28-7.40 (m，5H)，5.10(s，2H)，4.14(dd，J1＝4.03，J2＝13.44，1H)，4.02(m，1H)，3.50(m，1H)，3.38(m，1H)，3.00(m，1H)，2.88(m，1H)，2.70和2.40(部份m，1H)，2.00(m，1H)，1.50(m，1H).

化合物135D：¹H-NMR(CDCl₃)：7.20-7.35(m，5H)，5.06(s，2H)，4.25和4.10(部份m，1H)，3.99(d，J＝13.44，1H)，3.50(m，1H)，3.22(m，1H)，2.85(t，J)＝2.69，1H)，2.73(m，1H)，2.40(m，1H)，1.90(m，1H)，1.45(m，1H).

化合物135E

将水(0.05毫升)及三苯基膦(340mg，1.3mmol)加到化合物135C(180mg，0.65mmol)在THF(5毫升)中的溶液中，并将反应混合物加热回流6小时。冷却到室温之后，将EtOAc(20毫升)加至反应混合物中。有机层以1.0N HCl(10毫升×2)萃取，并将合并的水层用EtOAc(5毫升)回洗一次。将1.0N NaOH加至水层以使其成为pH10.0及混合物以EtOAc(20毫升×2)萃取。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩以得到165mg无色油的胺中间体。

将三乙胺(0.11毫升，0.78mmol)，随后Boc₂O(156mg，0.72mmol)加到165mg胺中间体在无水CH₂Cl₂(4毫升)中的溶液中。混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物以CH₂Cl₂稀释，并以饱和NaHCO₃洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。通过硅胶快速色谱法(己烷-EtOAc：9∶1到8∶2)纯化，得到170mg白色固体的化合物135E。分析HPLC保留时间＝2.859分钟(ChromolithSpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254 nm监测)和

a LC/MS M⁺+1＝351⁺.¹H-NMR(CDCl₃)：7.29-7.40(m，5H)，5.10(s，2H)，4.61(bs，1H)，4.32(bs，1H)，3.90-4.30(m，1H)，3.30-3.60(m，2H)，2.80(m，1H)，2.66(m，1H)，1.90(m，1H)，1.45(s，9H)，1.40(m，1H).

化合物135F

将化合物135E(170mg)在包含10mg Pd(OH)₂的5毫升MeOH中的溶液在氢气氛(气瓶(balloon))下搅拌过夜。通过过滤除去催化剂，并以MeOH冲洗。将合并的滤液在减压下浓缩以得到138mg的油状化合物135F。分析HPLC保留时间＝1.270分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝217⁺。

化合物135G

化合物135G是通过与化合物135E相似的步骤由化合物135D制备。分析HPLC保留时间＝2.849分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)。

¹H-NMR(CDCl₃)：7.4O-7.52(m，5H)，5.20(s，2H)，4.30 (m，2H)，3.40(m，1H)，2.95(m，1H)，2.67(m，2H)，2.08(m，1H)，1.45-1.96(m，3H)，1.45(s，9H).

化合物135H

化合物135H是通过与化合物135F相似的步骤由化合物135G制备。分析HPLC保留时间＝1.380分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)。

化合物135

化合物135是通过与实施例1相似的方法使用化合物135F和1E制备。化合物135为一种具有分析HPLC保留时间＝1.666分钟(ChromolithSpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝391⁺的固体。

¹H-NMR(CDCl₃)：11.62(s，1H)，7.94(s，1H)，7.89 dd，J₁＝2.60，J₂＝6.61，1H)，7.48(d，J＝2.60，1H)，7.45(m，1H)，7.15(t，J＝8.72，1H)，6.51(d，J＝2.60，1H)，3.82(AB，J＝13.60，Δv＝26.94，2H)，3.33(m，1H)，3.25(m，1H)，3.08(d，J＝12.09，1H)，2.57(m，1H)，2.22(t，J＝12.03，1H)，2.05(m，1H)，1.97(m，1H)，1.43(m，1H).

或者，化合物135可按照如下所示制备。

化合物135J的制备

化合物135J是根据公开的文献步骤：Jacob Szmuszkovicz等人，Heterocycles，1994，39(1)，163-170制备。

化合物135K的制备：

化合物135K是根据公开的文献步骤：Jacob Szmuszkovicz等人，Heterocycles，1994，39(1)，163-170制备。

化合物135L的制备：

化合物135L以与化合物1C相似的方法由化合物135K制备。分析HPL保留时间＝2.323分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)。

¹H-NMR(CDCl3)：4.11(dd，J1＝3.09，J2＝13.29，1H)，3.95(m，1H)，3.50(m，1H)，3.38(m，1H)，2.90(m，1H)，2.79(dd，J1＝9.27，J2＝13.29，1H)，2.45(m，1H)，2.00(m，1H)，1.55 (m，1H)，1.46(s，9H).

化合物135M的制备：

将三氟乙酸(5毫升)加到化合物135L(0.6g，2.48mmol)在0℃下冷却的无水CH₂Cl₂中的溶液中。反应混合物于0℃下搅拌15分钟，然后加温到室温且搅拌3小时。在减压下除去溶剂和TFA，并将残余物溶解于CH₂Cl₂(2O毫升)中。有机层以饱和NaHCO₃洗涤，并将水层以固体NaCl过饱和，及以EtOAc(15毫升×10)回萃取。将合并的有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩以得到350mg的油状化合物135M。¹H-NMR(CDCl₃+CD₃OD)：3.55(m，1H)，3.43(m，1H)，3.18(dd，J1＝3.95，J2＝12.63，1H)，3.07(d oft，J1＝12.90，J2＝4.78，1H)，2.74 (m，1H)，2.63(dd，J1＝8.28，J2＝12.58，1H)，2.10(m，1H)，1.57(m，1H).

化合物135N的制备：

将化合物135N以与实施例1中的化合物1F(使用方法二)相似的方法由化合物135M和实施例1的1E开始制备。化合物135N为固体且具有分析HPLC保留时间＝2.099分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝417⁺。

将三苯基膦(262mg，1.0mmol)加到上述制备的化合物135N(0.5mmol)在THF(5毫升)和水(0.05毫升)的混合物中的溶液中。将反应混合物加热回流8小时。冷却到室温之后，在减压下蒸发溶剂，并将残余物直接地在硅胶上通过快速色谱法纯化(CH₂Cl₂-MeOH-NH₄OH：95∶5∶0.5)以得到166mg固体的化合物135。

实施例136

3-氨基-1-[[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]-(3 R，4R)-rel-4-哌啶醇

化合物136以与实施例1相似的方法使用化合物135H和1E制备。化合物136为固体，具有分析HPLC保留时间＝1.953分钟(ChromolithSpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝391⁺。

实施例137

4-氨基-1-[[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]-(3R，4R)-(+)-rel-3-哌啶醇

及

实施例138

4-氨基-1-[[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]-(3R，4R)-(-)-rel-3-哌啶醇

外消旋化合物1 3 5是使用正相手性制备型HPLC(Chiralpak AD)使用己烷-异丙醇-二乙胺(80∶20∶0.05)作为流动相进行解析。获得以单一对映异构体具有＞99％ee的化合物137(对映异构体A)和化合物138(对映异构体B)。

实施例139

N-(3-氯-4-氟苯基)-5-[[4-[(2，2-二甲基丙基)氨基]-1-哌啶基]甲基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺

将冰醋酸(0.05毫升)、随后3，3-二甲基丁醛(0.008毫升，0.073mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(25mg，0.12mol)加到实施例1的化合物(19mg，0.05mmol)在CH₂Cl₂(1毫升)中的溶液中。混合物在室温下搅拌30小时。反应混合物以CH₂Cl₂稀释，以水、饱和NaHCO₃、盐水洗涤及经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩接着经硅胶快速色谱法(CH₂Cl₂-MeOH-NH₄OH：98∶2∶0.2到98∶5∶0.5)以得到油状的化合物139。分析HPLC保留时间＝1.976分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝445⁺。

实施例140

N-(3-氯-4-氟苯基)-5-[[4-(丙胺基)-1-哌啶基]甲基]-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺

化合物140以与化合物139相似的方法由化合物1制备。化合物140为固体且具有分析HPLC保留时间＝1.689分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝417⁺。

实施例141

1-[[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]-4-哌啶醇

化合物141以与化合物1相似的方法由实施例1的1E制备。化合物1 41为固体且具有分析HPLC保留时间＝1.803分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝376⁺。

实施例142

反式-4-[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲基]-环己醇

A.4-氯-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-甲醛的制备

将4-氯-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪(1.68g，10 mmole)在CCl₄中的溶液以N₂鼓泡20分钟，然后加入NBS(3.74g，21mmole)接着加入过氧化二苯甲酰(242mg，1mmole)。将反应混合物放进100℃油浴内并回流3小时。在冷却至室温之后，将其过滤及除去溶剂。将残余物悬浮在CH₃OH(100毫升)中并加入固体NaHCO₃(5克)。激烈地搅拌反应混合物1小时，过滤及除去溶剂。将残余油状物再悬浮于DCM中，过滤，并浓缩以得到粗品的二甲基乙缩醛，其以DCM(20毫升)/H₂O(20毫升)/TFA(1毫升)处理。在激烈地搅拌1.5小时之后，将其以饱和NaHCO₃水溶液中和，并用DCM萃取。干燥合并的萃取物(Na₂SO₄)，浓缩，并经色谱法(以DCM洗脱的3×15cm硅胶柱)，得到固体的标题化合物(1.02g，56％)。MS：182(M+H)⁺；HPLC保留时间：0.79分钟(Xterra 3.0×50毫米S7柱，2分钟梯度，5毫升/分钟)；

B.[4-(叔-丁基-二甲基-甲硅烷氧基)-环己基]-(4-氯-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三

嗪-5-基)-甲醇的制备

将反式-4-叔-丁基-二甲基甲硅烷氧基-环己基溴化镁(Bioorg.and Med.Chem.，1996，6，201)在THF(4当量)中的溶液慢慢地加到4-氯-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基)-甲醛(1.05克5.8mmole)在THF(15毫升)中的冰-冷却的溶液中。在1小时之后，加入饱和的NH₄Cl(15毫升)水溶液，并将水层以EtOAc/己烷(1∶1)(50毫升×2)萃取。将合并的有机萃取物通过Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩。将粗物质通过径向色谱法(4毫米硅胶板，以0-15％EtOAc的DCM溶液进行梯度洗脱)纯化以得到标题化合物：189mg的顺式-异构体，496mg的反式-异构体和415mg的混合物(总产率48％，顺式：反式的比为约1∶4)。顺式-异构体：MS：396(M+H)⁺；HPLC保留时间：2.10分钟(Xterra 3.0×50毫米S7柱，2分钟梯度，5毫升/分钟)；反式-异构体：MS：396(M+H)⁺；HPLC保留时间2.08分钟(Xterra 3.0×50毫米S7柱，2分钟梯度，5毫升/分钟)。

C.[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]-[4-(1-甲基-1-三甲基甲硅烷基-乙氧基)-环己基]-甲醇的制备

将反式-[4-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)-环己基]-(4-氯-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基)-甲醇(840mg，2.13mmole)、3-氯-4-氟苯胺(309mg，2.13mmole)和NaHCO₃(536mg，6.39mmole)在CH₃CN(10毫升)中的混合物于70℃下加热过夜。除去溶剂，并将残余物悬浮在DCM中，以水洗涤，并经Na₂SO₄干燥。除去溶剂，随后经径向色谱法(4毫米硅胶板，以0-2％NH₃在MeOH(2N)的DCM溶液中的溶液梯度洗脱)，得到固体的标题化合物(612mg，57％)：MS：506(M+H)⁺；HPLC保留时间：2.29分钟(Xterra 3.0×50毫米S7柱，2分钟梯度，5毫升/分钟)。

D.反式-4-[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲基]-己醇的制备

将[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]-[4-(1-甲基-1-三甲基甲硅烷基-乙氧基)-环己基]-甲醇(448mg，0.887mmole)、三乙基甲硅烷(1.03g，8.87mmole)在TFA(8毫升)中的混合物在耐压瓶中于N₂、75℃下加热过夜。除去溶剂，并将残余物溶解在CH₃OH(10毫升)中并加入固体Na₂CO₃(2.0克)。在激烈搅拌1小时之后，除去溶剂，并将残余物在DCM(200毫升)和H₂O(50毫升)之间分配。分离有机相，通过Na₂SO₄干燥，并除去溶剂。通过径向色谱法(2毫米硅胶板，以0-4％NH₃在MeOH(2N)的DCM溶液中的溶液梯度洗脱)纯化，得到固体的标题化合物(209mg，63％)：MS：375(M+H)⁺；HPLC保留时间：1.49分钟(Xterra 3.0×50毫米S7柱，2分钟梯度，5毫升/分钟)。

实施例143

顺式-4-[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲基]-环己醇

同样地，标题化合物是由顺式-{4-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)-环己基]-(4-氯-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基)-甲醇制备：375(M+H)⁺；HPLC保留时间：1.56分钟(Xterra 3.0×50毫米S7柱，2分钟梯度，5毫升/分钟)。

实施例144

4-[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲基]-环己酮

将顺式-[4-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)-环己基]-(4-氯-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基)-甲醇：(53mg，0.14mmole)、4-甲基吗啉N-氧化物(25mg，0.2 1mmole)、TPAP(5mg，0.1当量)和粉化4A分子筛(1 00mg)在DCM(3毫升)中的溶液在N₂下于RT搅拌。在5小时之后，将此溶液过滤，并除去溶剂。经径向色谱法(1毫米硅胶板，以0-5％NH₃在MeOH(2N)的DCM溶液中的溶液梯度洗脱)，得到固体的标题化合物(25mg，47％)：MS：373(M+H)⁺；HPLC保留时间：1.50分钟(Xterra 3.0×50毫米S7柱，2分钟梯度，5毫升/分钟)。

实施例145

4-氨基-1-[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲基]-环己醇

将粉化3A分子筛(24mg)、(10当量)NH₄OAc(48mg，0.06mmole)和NaCNBH₃(4mg，0.06mmole)加到4-[4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基甲基]-4-羟基-环己酮(24mg，0.06mmole)在无水MeOH(0.5毫升)中的溶液中；将反应在氮气下搅拌12小时。过滤反应混合物，并加入15％NaOH溶液。10分钟之后，将混合物以DCM(50毫升)稀释并以水洗涤。干燥有机相(Na₂SO₄)并除去溶剂。将物质通过制备型HPLC纯化和分离以得到标题化合物(3.5mg，15％)和顺式异构体(7.9mg，32％)。标题化合物：MS：390(M+H)⁺；HPLC保留时间：2.070分钟(XTERRA 4.6×50毫米S5柱，3分钟梯度，4毫升/分钟)。顺式异构体：MS：390(M+H)⁺；HPLC保留时间：2.190分钟(XTERRA 4.6×50毫米S5柱，3分钟梯度，4毫升/分钟)。

实施例146

(3R，4R)-4-氨基-1-[[4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇

化合物146A和146B的制备：

(3R，4R)-4-叠氮基-3-羟基-哌啶-1-羧酸叔-丁酯(146A)：

(3S，4S)-4-叠氮基-3-羟基-哌啶-1-羧酸叔-丁酯(146B)

化合物146A和146B是由化合物135L通过使用正相手性制备型HPLC(Chiralpak AD)使用MeOH-EtOH(50∶50)作为流动相的光学拆分获得的。化合物146A(第一个洗脱液)和化合物146B(第二个洗脱液)作为具有＞99％ee的单一对映异构体的形式获得。化合物146A的绝对立体化学(3R，4R)是通过单一X射线结晶分析确定的。

化合物146C的制备：

将三氟乙酸(10毫升)加到化合物146A(1.76g，7.26mmol)在无水CH₂Cl₂(15毫升)中的于0℃冷却的溶液中。反应混合物于0℃下搅拌15分钟，然后加温到室温且搅拌3小时。在减压下除去溶剂和TFA，并将残余物与CH₂Cl₂共沸蒸发几次，以得到TFA盐形式的化合物146C。

化合物146D的制备：

以与化合物146C相似的方法使用化合物146B制备TFA盐形式的化合物146D。

化合物146E的制备：

化合物146E是通过实施例105(使用方法一)相似的方法，由化合物146C替代哌啶-4-基-氨基甲酸叔-丁酯制备得到的。化合物146E为固体且具有分析HPLC保留时间＝2.019分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝395⁺。

化合物146是通过化合物135相似的方法由化合物146E制备得到的。化合物146为固体，具有分析HPLC保留时间＝1.213分钟(ChromolithSpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝369⁺。化合物146的对映异构体过量(ee)为＞99％(Chiralpak AD，250×4.6毫米1 0微米，EtOH-MeOH-Et₂NH；50∶50∶0.1)。

化合物146的替代性制备

化合物146F的制备：

将固体K₂CO₃(235克)加到1-甲基-1，2，3，6-四氢哌啶HCl盐(227克)在570毫升水中的溶液中，并将混合物在室温下搅拌30分钟。混合物以甲苯(500毫升×3)萃取，并将合并的萃取物经无水MgSO₄干燥。过滤以除去MgSO₄，并将滤液置于3-升三-颈RB烧瓶中。将K₂CO₃(22.7克)加至滤液中，并将混合物加热到温和回流(水浴温度110℃)。通过加料漏斗(additional funnel)经过2.5小时慢慢地加入氯甲酸乙酯(318毫升)(反应急剧放热因此大力地推荐慢慢地加入且磁性搅拌)。一旦加入完成，将混合物再回流2.0小时且冷却到室温。反应混合物以水、盐水洗涤，并经无水MgSO₄干燥。过滤并真空浓缩，得到188.6克(72％)的油状化合物146F。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)。

化合物146G(外消旋)的制备：

于0℃下将固体m-CPBA(386g，1.72mol，77％max)以小份(small portions)加到化合物146F(178.2g，1.15mol)在2升无水CH₂Cl₂中的溶液中。反应混合物于0℃下搅拌1.0小时和然后在室温下过夜。通过过滤除去沉淀物及滤饼以CH₂Cl₂洗涤。合并的滤液和洗涤液以20％Na₂S₂O₃(3升×3)、饱和NaHCO₃(3升×3)洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。过滤接着在真空中浓缩，得到170克油状的化合物146G。此物质直接用于下一个反应步骤中而没有进一步的纯化。

化合物146H(手性)的制备：

将化合物146G(140g，0.818mol)、NaN₃(68.9g，1.06mol)和NH₄Cl(56.7g，1.06mol)在乙醇(600毫升)和水(150毫升)中的混合物在70℃下加热过夜。一旦冷却到室温，通过过滤除去固体并用乙醇冲洗。将合并的滤液在真空中浓缩到小体积(约80毫升)，然后以水(500毫升)稀释且用EtOAc(500毫升×4)萃取。合并的萃取物经无水Na₂SO₄干燥。过滤接着在真空中浓缩，通过硅胶快速色谱法(己烷-EtOAc 7∶3到6∶4)纯化，得到下列级分(fractions)的油状化合物146G：80.7克的第一级分(AP：＞98％)，22.7克的第二级分(AP：92-95％)和15.8克的第三级分(AP：＜60％)。此物质直接用于下一个反应步骤中而没有进一步的纯化。合并第一和第二级分，并使用具有下列条件的手性制备型HPLC进行光学拆分：ChiralpakAD柱，以MeOH-EtOH(1∶1)洗脱。收集第一个洗脱峰(Rt＝5.605分钟)，得到47.52克的化合物146H，具有＞99％ee。

化合物146I(手性)的制备：

将KOH(112g，1.7mol，85％)在240毫升水中的溶液加到化合物146H(36.42g，0.17mol)在480毫升的EtOH中的溶液中。混合物加热回流9.0小时，并通过TLC监测反应进展。一旦冷却到室温，在真空中浓缩混合物以得到浆状物。加入固体NaCl及以EtOAc(500毫升×3)萃取混合物。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥。过滤接着在减压下除去溶剂以得到23克(77％)固体的粗化合物146I。与乙醚(250毫升)一起研磨以得到18.53克固体的化合物146I(AP：99％)。在真空中浓缩母液，加入固体NaCl并进一步以更多的EtOAc(250毫升×4)萃取以得到额外4.2克(AP：＜85％)的粗化合物146I。

化合物146是按照制备化合物146E的步骤由化合物146I制备。

实施例147

(3S，4S)-4-氨基-1-[[4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]3-哌啶-3-醇

化合物147A的制备：

化合物147A是通过实施例105(使用方法一)相似的方法，以化合物130D替代哌啶-4-基-氨基甲酸叔-丁酯制备。化合物147A为固体且具有分析HPLC保留时间＝？分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝395⁺。

化合物147是通过化合物135相似的方法由化合物147A制备。化合物147为固体，具有分析HPLC保留时间＝1.213分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝369⁺。化合物147的对映异构体过量(ee)为＞99％(ChiralpakAD，250×4.6毫米10微米，EtOH-MeOH-Et₂NH：50∶50∶0.1)。

实施例148

(3R，4R)-4-氨基-1-[[4-[(3-甲氧基-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇

化合物148是通过化合物135相似的方法由化合物146C制备。化合物148为固体，具有分析HPLC保留时间＝1.187分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝387⁺。化合物148的对映异构体过量(ee)为＞99％(Chiralpak AD，250×4.6毫米1 0微米，EtOH-MeOH-Et₂NH：50∶50∶0.1)。

实施例149

(3S，4S)-4-氨基-1-[[4-[(3-甲氧基-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]-哌啶-3-醇

化合物149是通过化合物135相似的方法由化合物146D制备。化合物149为固体，具有分析HPLC保留时间＝1.187分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254 nm监测)和LC/MS M⁺+1＝387⁺。化合物149的对映异构体过量(ee)为＞99％(Chiralpak AD，250×4.6毫米1 0微米，EtOH-MeOH-Et₂NH：50∶50∶0.1)。

实施例150-200

化合物150-200(具有HPLC注解(b))如化合物146同样地由146I制备。

^a HPLC的2分钟梯度时间。^bHPLC(Phenom-prime S5 C18 4.6×30毫米柱)的2分钟梯度时间。

实施例201

rac-(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇

201A4-叠氮基-3-氧代哌啶-1-羧酸(±)-叔-丁酯的制备

将无水DMSO(0.28毫升，3.79mmole)于-78℃在氩气下加至乙二酰氯(0.172毫升，1.96mmol)在6毫升无水CH₂Cl₂中的搅拌溶液中。10分钟之后，逐滴加入化合物135L(396mg，1.63mmol)在4.5毫升的无水CH₂Cl₂中的溶液，并将反应混合物于-78℃搅拌30分钟。加入三乙胺(1.38毫升，10.0mmol)且使反应混合物加温到室温。加入2.0毫升的pH 7.0缓冲液及以CH₂Cl₂(x3)萃取混合物。合并的有机层以盐水洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。真空中浓缩以得到油状的粗品201A，其直接用于下一个反应步骤中。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：4.30(d，J＝17.84，1H)，4.05 (m，1H)，3.90-4.00(m 1H)，3.45(m，1H)，2.85 (m，1H)，2.33(m，1H)，1.86(m，1H)，1.47(s，9H).

201B.4-叠氮基-3-羟基哌啶-1-羧酸(±)-叔-丁酯的制备

将L-Selectride(在THF中的1.0M，0.98毫升，0.98mmol)加到上述制备的化合物201A在无水THF(2毫升)中的于-78℃冷却的溶液中。混合物于-78℃搅拌2.0小时。加入饱和NH₄Cl(2毫升)，且使反应混合物加温到室温。混合物以水稀释，并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机层以盐水洗一次并经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩接着通过硅胶快速色谱法(己烷-EtOAc 4∶1)以得到44mg的油状化合物201B。

¹H-NMR(400mHz，CDCl₃)：3.84(m，1H)，3.69(m，1H)，3.58(m，2H)，3.40(m，1H)，3.30(m，1H)，1.96(m，1H)，1.73(m，1H)，1.46(s，9H).201C.(±)-4-叠氮基哌啶-3-醇的制备

将化合物201B(44mg，0.18mmol)以CH₂Cl₂和TFA的混合物(1∶1，2毫升)处理30分钟。在减压下除去挥发性物质，并将残余物与庚烷-CH₂Cl₂一起共沸蒸发三次以得到TFA盐的化合物201C，在没有步骤进一步纯化下将其直接用于下一个反应中。

201D的制备：

化合物201D是通过化合物146E相似的方法由化合物201C制备为固体。其具有分析HPLC保留时间＝1.795分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺＝395。

化合物201以与化合物146相似的方法由化合物201D制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.169分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺＝369。

实施例202A和202B

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇(对映异构体A，手性)

和

(3R，4S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇(对映异构体B，手性)

化合物202A(15mg)和化合物202B(15mg)是通过使用下列方法的化合物201(30mg)的光学拆分获得：使用6.0毫升/分钟流速的梯度的己烷-异丙醇-二乙胺(50∶50∶0.1)洗脱和在220nm检测的Chiralpak AD手性制备型柱。第一个洗脱峰对应于具有ee％≥98％的化合物202A(保留时间＝4.337分钟)；第两个洗脱峰对应于具有ee％≥98％的化合物202B(保留时间＝6.050分钟)。

实施例203

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲基苯基)氨基]吡咯并[2，1-F][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇(手性)

化合物203A和203B(手性)的制备：

和

将196.5毫升的48％HBr通过加料漏斗逐滴加到化合物146G(100g，0.585mol)在2升氯仿中的于-60℃冷却的溶液中，同时保持内部温度在-60℃以下。一旦加入完成，将反应混合物于-60℃再搅拌1.0小时。使反应混合物加温到室温，并以水(1升×2)、盐水(1升)洗涤，并经无水MgSO₄干燥。过滤接着真空中浓缩以得到134.2克(91％)的油状粗品化合物(外消旋混合物203A和203B)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：4.25(m，1H)，4.15(q，J＝7.10，2H)，4.00(m，1H)，3.90(bs，1H)，3.75 (m，1H)，2.85-3.15(m，2H)，2.32(m，1H)，2.00(m，1H)，1.28(t，J＝7.10，3H).

化合物203A和203B是通过正相手性制备型HPLC(Chirlapak AD)使用CH₃CN作为流动相由上述外消旋混合物的光学拆分获得。54.77克的化合物203B(第一个洗脱液，Rt＝5.861分钟)和53.71克的化合物203A(第两个洗脱液，Rt＝8.719分钟)以具有＞99％ee的单一对映异构体获得。化合物203B的绝对立体化学(3R，4S)是根据化合物203的单一X射线结晶分析确定的。

化合物203C(手性)的制备：

将咪唑(21.8g，0.32mol)，接着将叔-丁基二甲基甲硅烷基氯化物(38.5g，0.258mol)于0℃加到化合物203A(53.7g，0.213mol)在250毫升DMF中的溶液中。反应混合物在环境温度下搅拌过夜。于0℃下将乙醚(1升)接着将水(1升)加至反应混合物中。分开有机层。水层以乙醚(1升×2)萃取，并将合并的有机层以10％LiCl(750毫升×3)洗涤，经无水MgSO₄干燥。过滤接着在真空中浓缩以得到油状的粗品化合物203C，其没有进一步纯化而直接使用。

化合物203D(手性)的制备：

化合物203D是通过化合物203C相似的方法由化合物203B制备。

化合物203E(手性)的制备：

将NaN₃(15.3g，0.234mol)加到化合物203C(0.213mol)在300毫升DMSO中的溶液中，并将混合物于85℃下加热12个小时。加入额外NaN₃(15.0g，0.230mol)，并将反应混合物加热过夜。一旦冷却到室温，将冰水加至反应混合物中且以乙醚(1升×3)萃取。合并的有机层以盐水(1升)洗涤一次并经无水MgSO₄干燥。过滤接着在真空中浓缩以得到油状的粗化合物203 E，其没有进一步的纯化而直接使用。

化合物203F(手性)的制备：

化合物203F是通过化合物203E相似的方法由化合物203D制备。

化合物203G(手性)的制备：

将上述制备的化合物203E(0.213mol)和TBAF xH₂O(67g，0.255mol)在200毫升THF中的混合物在室温下搅拌3.0小时。加入乙醚(1升)且混合物以水(IL)洗涤。水相以乙醚(1升×2)萃取。合并的有机层以水(1升)洗涤一次并经无水MgSO₄干燥。真空中浓缩，接着经硅胶快速色谱法(CH₂Cl₂-EtOAc：4∶1)，得到29.8克的油状化合物203G。经第二个硅胶快速色谱法(己烷-EtOAc：6.5∶3.5)以得到20克(44％)的油状化合物203G。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：4.15(q，J＝7.10，2H)，3.86(bs，1H)，3.70(bs，1H)，3.65(m，1H)，3.47(dd，J＝3.20，J＝13.62，1H)，3.35(m，1H)，2.02(m，1H)，1.79(bs，1H)，1.28(t，J＝7.10，3H).

化合物203H(手性)的制备：

化合物203H是通过化合物203G相似的方法由化合物203F制备。

化合物203I(手性)的制备：

化合物203I是通过化合物146I相似的方法由化合物203G制备。化合物203I为一种具有≥99ee％的固体。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：3.80(m，1H)，3.44(m，1H)，3.04(m，2H)，2.72(m，1H)，2.69(m，1H)，1.90(m，1H)，1.75(m，1H).

化合物203J(手性)的制备：

化合物203J是通过化合物146I相似的方法由化合物203H制备。化合物203J为一种具有≥99ee％的固体。

化合物203是通过化合物146相似的方法由化合物1B、间-甲基苯胺和化合物203I制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.278分钟(ChromolithSpeedROD 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝353。

实施例204-211

化合物204-211(具有HPLC注解(b))如化合物146所使用，由化合物1B、相应的苯胺和化合物203I类似地制备。

实施例212-219

化合物212-219(具有HPLC注解(b))如化合物146所使用，由化合物1B、相应的苯胺和化合物203J类似地制备。

实施例220

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]-三嗪-5-基}甲基)-哌啶-3-基氨基甲酸酯

化合物220A(手性)的制备：

将三氯乙酰基异氰酸酯(0.075毫升，0.6mmol)加到化合物146A(121mg，0.5mmol)在1毫升无水CH₂Cl₂中的于0℃冷却的溶液中。反应混合物于0℃下搅拌1.0小时。加入MeOH(0.5毫升)及在真空中浓缩反应混合物以得到泡沫状的粗化合物220A。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：8.35(bs，1H)，4.67(bs，1H)，3.90(m，1H)，3.65(m，2H)，3.25(m，2H)，2.02(m，1H)，1.60(m，1H)，1.38(s，9H).

化合物220B(手性)的制备：

20％K₂CO₃水溶液的溶液(2毫升)加到220A(0.5mmol)在3毫升无水MeOH中的溶液中，并将反应混合物在室温下搅拌2.0小时。加水(15毫升)及通过旋转蒸发除去MeOH。混合物以EtOAc(x2)萃取，并经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩以得到油状的粗220B。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：4.70(bs，2H)，4.50(m，1H)，3.90(bs，1H)，3.68 (m，1H)，3.50(m，1H)，3.03(m，1H)，1.90(m，1H)，1.50(m，1H)，1.38(s，9H).

化合物220C(手性)的制备：

将220B(0.5mmol)在5毫升无水CH₂Cl₂和5毫升TFA中的混合物于0℃搅拌1.0小时。在真空中浓缩混合物，与CH₂Cl₂-MeOH-己烷共沸蒸发几次，并在高真空下干燥以得到油状的粗220C。

化合物220D(手性)的制备：

化合物220D以与化合物146E相似的方法由化合物220C制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.793分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺＝438。

化合物220以与化合物146相似的方法由化合物220D制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.310分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺＝412。

实施例221-227

化合物221-227(具有HPLC注解(b))是如化合物146，由化合物1B、相应的苯胺和化合物220C类似地制备。

实施例229

(3R，4S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基氨基甲酸酯

229A.化合物229A(手性)的制备

化合物229A是通过化合物135E步骤2相似的方法由化合物203I制备。

229B.化合物229B(手性)的制备

化合物229B是通过化合物220A相似的方法由化合物229A制备。

229C.化合物229C(手性)的制备

化合物229C是通过化合物220B相似的方法由化合物229B制备。

229D.化合物229D的制备

化合物229D是通过化合物220C相似的方法由化合物229C制备。

化合物229是通过化合物146相似的方法由化合物229D制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.229分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺＝412。

实施例230-236

化合物230-236(具有HPLC注解(b))是如化合物146，由化合物1B、相应的苯胺和化合物229D类似地制备。

实施例237

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-3-甲基哌啶-3-醇(手性，对映异构体A)

化合物237A(外消旋)的制备：

在室温下将固体NaHCO₃(4.2g，49mmol)、接着将氯甲酸甲酯(9.3毫升，120mmol)通过注射器逐滴加到N-苄基四氢吡啶(100mmol)在150毫升苯中的溶液中。反应混合物加热回流3小时。在冷却到室温之后，在减压下蒸发除去挥发性物质，并将残余物溶解在EtOAc(100毫升)中，并以水(20毫升×2)，0.5M HCl(20毫升)和盐水(20毫升)洗涤，并经无水MgSO₄干燥。在真空中浓缩反应混合物及在高真空下(bp.42-50℃/2毫米汞柱，浴温：75-80℃)进一步除去残余的苄基氯以得到粘稠的浆状物化合物237A。经硅胶快速色谱法(己烷-EtOAc：9.5∶0.5到9∶1)，得到11.77克(产率：76％)油状的化合物237A。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：5.52(bs，1H)，3.78(m，2H)，3.70(s，3H)，3.46(m，2H)，2.08 (m，2H)，1.68(s，3H).

化合物237B(外消旋)制备：

将化合物237A(775mg，5.0mmol)和m-CPBA(1.21g，7.0mmol，77％max)在10毫升无水CH₂Cl₂中的混合物在室温下搅拌过夜。通过过滤除去沉淀物，并将滤液以10％Na₂S₂O₃、饱和NaHCO₃和盐水洗涤，并经无水MgSO₄干燥。在真空中浓缩，得到油状的粗化合物237B。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：3.65-3.75(m，2H)，3.68(s，3H)，3.60(m，1H)，3.33(m，2H)，3.12(m，1H)，2.07(m，1H)，1.92(m，1H)，1.35(s，3H).

化合物237C(外消旋)制备：

将NaN₃(810mg，12.4mmol)在1 0毫升丙酮-H₂O的2∶1混合物中加到化合物237B(5.0mmol)在10毫升DMF中的溶液中，并将混合物于80℃下加热过夜。冷却至室温之后，加入EtOAc及以水，10％LiCl水溶液洗涤混合物且经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩以得到1.09克油状的化合物237C。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：3.70(s，3H)，3.72(m，1H)，3.50(m，2H)，3.35(m，1H)，3.20(bs，1H)，2.03(m，1H)，1.63(m，1H)，1.20(s，3H).

化合物237D(外消旋)制备：

将化合物23 7C(428mg，2.0mmol)和150mg的Pd(OH)₂在10毫升MeOH中的混合物在氢气下(气瓶)搅拌4.0小时。通过过滤除去催化剂及在真空中浓缩滤液以得到粗残余物。

将残余物溶解在5毫升无水CH₂Cl₂中，向其中加入Boc₂O(460mg，2.10mmol)和三乙胺(0.334毫升，2.40mmol)。在室温下搅拌过夜之后，以CH₂Cl₂稀释反应混合物，并以10％柠檬酸、饱和NaHCO₃洗涤并干燥(Na₂SO₄)。在真空中浓缩接着经硅胶快速色谱法(己烷-EtOAc：7∶3到1∶1)以得到330mg油状的237D。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：4.78(m，1H)，3.90-4.40(m，3H)，3.70(s，3H)，3.60(m，1H)，2.70-3.00(m，2H)，1.80(m，1H)，1.45(s，9H)，1.40(m，1H)，1.10(s，3H).化合物237E(外消旋)制备：

化合物237E是通过化合物146I相似的方法由化合物237D制备。

化合物237F(外消旋)制备：

化合物237F是通过化合物1D相似的方法由化合物237E制备。

化合物237G(外消旋)制备：

化合物237G是通过化合物1E相似的方法由化合物237F制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.262分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝383。

化合物237是通过手性制备型HPLC分离(Chiralpak AD，250×4.6毫米，10微米，以EtOH/MeOH/DEA 50∶50∶0.1洗脱)由237G以具有ee％≥99％的第一个峰(Rt＝5.390分钟)获得。其具有分析HPLC保留时间＝1.51分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝383。

实施例238

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-3-甲基哌啶-3-醇(手性，对映异构体B)

化合物238是通过手性制备型HPLC分离(Chiralpak AD，250×4.6毫米，10微米，以EtOH/MeOH/DEA 50∶50∶0.1洗脱)由237G以具有ee％≥99％的第二个峰(Rt＝8.523分钟)获得。其具有分析HPLC保留时间＝1.51分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝383。

实施例239

(3R，4R，5S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3，5-二醇

239A.(±)-乙基3-乙酰氧基-4-溴哌啶-1-羧酸酯的制备

将化合物203A/B(外消旋混合物)(107g，371mmol)和乙酸酐(101毫升)在165毫升的无水吡啶中的混合物在室温下搅拌2.0小时。在减压下除去溶剂，并将残余物以水稀释，并以K₂CO₃碱化。混合物以氯仿萃取(250毫升×3)，并将合并的萃取物以水洗涤，并经无水MgSO₄干燥。在真空中浓缩，得到油状的粗239A。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：4.90(bs，1H)，4.13(q，J＝7.08，2H)，4.10(m，1H)，3.89(m，1H)，3.60(m，1H)，3.50(m，2H)，2.34(m，1H)，2.08(s 3H)，1.93(m，1H)，1.27(t，J＝7.80，3H).

239B.(±)-乙基5-乙酰氧基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸酯的制备

将化合物239A(371mmol)和DBU(92g，604mmol)的混合物于90-110℃加热30分钟。冷却至室温之后，混合物以甲苯稀释，并搅拌额外30分钟。通过过滤除去沉淀物并用甲苯冲洗。合并的滤液以1.0N HCl、水洗涤，并经无水MgSO₄干燥。在真空中浓缩，得到67.56克(产率：85.4％)油状的239B。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：6.00(bs，1H)，5.90(bs，1H)，5.20(m，1H)，4.20(q，J＝7.08，2H)，4.19(m，1H)，3.85(m，1H)，3.80(m，1H)，3.55(m，1H)，2.08(s，3H)，1.28(t，J＝7.08，3H).

239C.(±)-乙基5-羟基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸酯的制备

将0.2N NaOH在EtOH(65毫升)中的溶液加到化合物239B(10.5g，49.2mmol)在30毫升EtOH中的溶液中，并将混合物在0℃下搅拌30分钟。加温到室温之后，反应混合物以冰醋酸中和。在真空中浓缩，得到8.5克油状的239C。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：5.90(m，1H)，5.82(bs，1H)，4.20(bs，1H)，4.18(q，J＝7.08，2H)，4.04(m，1H)，3.85(m，1H)，3.55(m，2H)，1.28(t，J＝7.08，3H).

239D.(±)-乙基5-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)-5，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸酯的制备

将咪唑(9.5g，140.0mmol)和叔-丁基二甲基甲硅烷基氯化物(15.5g，102.8mmol)于0℃加到化合物239C(16g，93.5mmol)在150毫升无水CH₂Cl₂中的溶液中，并将混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物于0℃以乙醚(500毫升)和水(1升)稀释。分离有机相，并以10％LiCl(1 50毫升×3)洗涤，经无水MgSO₄干燥。在真空中浓缩，接着经快速色谱法(己烷-EtOAc：15∶1到10∶1)，得到25.2克(产率：94.4％)油状的239D。

239E.(±)-乙基5-羟基-7-氧杂-3-氮杂-双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸酯的制备

将固体m-CPBA(39.6g，176.6mmol，77％max)于0℃下以小批加到化合物239D(25.2g，88.3mmol)在250毫升CH₂Cl₂中的溶液中，同时使内部温度在加入期间保持在0℃以下。混合物于0℃下搅拌30分钟然后在室温下4.0小时。以小批加入更多固体m-CPBA(39.6g，176.6mmol，77％max)及混合物在室温下搅拌三天。通过过滤除去沉淀物，并将滤液以20％Na₂S₂O₃(500毫升×3)、饱和NaHCO₃(500毫升×3)和盐水(250毫升)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥。通过硅胶快速色谱法(己烷-EtOAc：9.5∶0.5到9∶1)纯化，得到4.33克的油状239E(低Rf)。

239F.(±)-乙基5-(叔-丁基二甲基甲硅烷氧基)-7-氧杂-3-氮杂-双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸酯的制备

化合物239F是通过化合物239E相同的反应由239D制备，为油状物。

239G.(±)-乙基5-羟基-7-氧杂-3-氮杂-双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸酯的制备

将TBAF(17.2毫升，17.2mmol)在THF中的溶液加到化合物239E(4.33g，14.4mmol)在10毫升的无水THF中的溶液中。混合物在室温下搅拌过夜。加水及以EtOAc(100毫升×3)萃取反应混合物。合并的有机层以盐水洗涤，并通过Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩接着经硅胶快速色谱法(己烷-EtOAc：1∶1到1∶2)，得到2.01克(产率：74.5％)油状的239G。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：4.13(q，J＝7.08，2H)，4.05(m，1H)，3.80(m，1H)，3.70(d，J＝10.15，1H)，3.62(m，1H)，3.45(m，2H)，3.13(dd，J＝10.15，J＝7.63，1H)，2.40及2.25(部份，1H)，1.27(t，J＝7.08，3H).

239H.(±)-乙基5-羟基-7-氧杂-3-氮杂-双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸酯的制备

将TBAF(67.6毫升，67.6mmol)在THF中的溶液加到化合物239F(13.6g，45.1mmol)在10毫升无水THF中的溶液中。混合物在室温下搅拌过夜。加水及反应混合物以EtOAc萃取(250毫升×3)。合并的有机层以盐水洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩接着经硅胶快速色谱法(己烷-EtOAc：1∶1到1∶2)，得到6.03克(产率：75％)油状的239H。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：4.15(m，1H)，4.13(q，J＝7.08，2H)，3.35(m，1H)，3.75(m，1H)，3.52(m，1H)，3.32(m，1H)，3.25(m，2H)，3.10及2.55 (部份，1H)，1.27(t，J＝7.08，3H).

239I.(±)-乙基4-叠氮基-3，5-二羟基哌啶-1-羧酸酯制备

将NaN₃(3.5g，53.4mmol)和NH₄Cl(2.3g，42.72mmol)加到化合物239G(2.0g，10.7mmol)在2-甲氧基乙醇(40毫升)中的溶液中。反应混合物在125℃下加热过夜。冷却至室温之后，在减压下除去溶剂及残余物溶解在EtOAc(50毫升)中，以水(10毫升×2)洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩接着经硅胶快速色谱法(己烷-EtOAc：1∶1到1∶2)，得到0.64克的239I(较高Rf)的结晶物质。立体化学是通过单一X-射线结晶测定确认。

239J.(±)-乙基4-叠氮基-3，5-二羟基哌啶-1-羧酸酯的制备

239J是通过化合物239I相似的反应由239H制备，为结晶物质。

239K.(内消旋)-4-叠氮基-3，5-双(甲氧基甲氧基)哌啶的制备

将i-Pr2NEt(5.9毫升33.4mmol)，接着MOMCl(1.69毫升，22.2mmol)加到化合物239I(640mg，2.78mmol)在无水CH₂Cl₂(5毫升)中的溶液中。反应混合物在60℃下加热过夜。冷却至室温之后，反应以CH₂Cl₂稀释，以10％柠檬酸、饱和NaHCO₃和盐水洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩以得到油状的粗中间体，其直接用于下一个反应步骤中而没有进一步的纯化。

将上述制备的中间体和KOH(1.84g，85％)在8毫升的EtOH和4毫升水中的混合物加热到回流过夜。冷却至室温之后，在减压下除去溶剂及残余物以水稀释并用CH₂Cl₂萃取(x2)。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩，得到662mg油状的239K。此物质直接用于下一个反应步骤中而没有进一步纯化。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：4.73(q，J＝6.82Hz，4H)，3.41(s，6H)，3.20-3.40(m 5H)，2.46(m，2H).

239L(±)-(3R，5R)-rel-4-叠氮基-3，5-双(甲氧基甲氧基)-哌啶的制备

化合物239L是通过化合物239K相似的反应由239J制备，为结晶物质。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：4.72(q，J＝6.82 Hz，4H)，3.92(m，1H)，3.79 (m，1H)，3.49(m，1H)，3.42(s，3H)，3.41(s，1H)，3.25(m，1H)，3.03(m，1H)，2.70(m，1H)，2.53(m，1H).

239M(±)-(3S，4R，5R)-rel-4-叠氮基-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)-吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-3，5-双(甲氧基甲氧基)-哌啶的制备

化合物239M是通过化合物146E相同的反应由239K制备，为泡沫状。化合物239M具有分析HPLC保留时间＝2.582分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝502⁺。

239N.(3S，4R，5R)-rel-4-叠氮基-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3，5-二醇的制备

将化合物239M(0.65mmol)和6N HCI(2毫升)在3毫升THF中的混合物于50℃下加热2小时。冷却至室温之后，混合物以NaOH碱化，以EtOAc萃取，并经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩，得到260mg的固体239N。化合物239N具有分析HPLC保留时间＝2.063分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺1＝411⁺。

将化合物239N(260mg，0.633mmol)和Ph₃P(332mg，1.27mmol)在THF(3毫升)和水(0.3毫升)中的混合物于70℃下加热过夜。冷却至室温之后，混合物以水稀释，以2N HCl酸化，并以EtOAc洗涤(2x)。水层以2N NaOH碱化且以EtOAc萃取(2x)。合并的有机层以水洗涤一次并经无水Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩接着与乙醚一起研磨，得到180mg的固体239。化合物239具有分析HPLC保留时间＝1.211分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝385⁺。

实施例240

(3R/S，5R/S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3，5-二醇

化合物240是通过化合物239相似的方法由239L制备。化合物240为固体且具有分析HPLC保留时间＝1.045分钟(Chromolith SpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝384⁺。

实施例241A

(3S，5S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3，5-二醇(对映异构体A，手性)

化合物241A(对映异构体A)是通过手性制备型HPLC分离(使用Chiralpak AD，并用EtOH/DEA：100/0.1洗脱)由240制备，为具有ee≥99％的第一个峰(Rt＝5.827分钟)。

化合物241A为固体且具有分析HPLC保留时间＝1.044分钟(ChromolithSpeedROD柱4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于254nm监测)和LC/MS M⁺+1＝384⁺。

实施例241B

(3R，5R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3，5-二醇(对映异构体B，手性)

化合物241B(对映异构体B)是通过手性制备型HPLC分离(使用Chiralpak AD，并用EtOH/DEA：100/0.1洗脱)由240制备，为具有ee≥96％的第二个峰(Rt＝8.430分钟)。

实施例242-246

化合物242-246(具有HPLC注解(b))是通过化合物239相似的方法由239L制备。

^a手性正相HPLC条件：ChiralpakAD，isocractic，以EtOH-DEA：100/0.1洗脱。

实施例247

rac-5-{[(3R，4R)-4-氨基-3-甲氧基哌啶-1-基]甲基}-N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺

247

247A.(3R，4R)-rel-叔-丁基4-叠氮基-3-甲氧基哌啶-1-羧酸酯制备

将95％NaH(40.0mg，1.58mmol)在氮气、室温下加到146A(320mg，1.32mmol)和碘甲烷(0.25毫升，3.96mmol)在4毫升无水THF中的搅拌混合物中。此混合物在室温下搅拌15小时，并然后通过加入30毫升的水来停止反应。水溶液以EtOAc(2×40毫升)萃取。合并的EtOAc萃取物以盐水(30毫升)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤并在真空中浓缩以得到310mg(产率：92％)的247A。其具有分析HPLC保留时间＝2.86分钟(Phenomenox S5 C18-HC4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+Na＝279。

247B.5-(((3R，4R)-rel-4-叠氮基-3-甲氧基哌啶-1-基)甲基)-N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-4-胺的制备

将TFA(2.00毫升，26.0mmol)在室温下加到247A(310mg，1.21mmol)在2毫升CH₂Cl₂中的搅拌溶液中。将此混合物在室温下搅拌15分钟并在真空中浓缩以得到390mg的(3R，4R)-rel-4-叠氮基-3-甲氧基哌啶的TFA盐。化合物247B是通过146E所述相似的方法由此TFA盐(52.0mg，0.19mmol)制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.97分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝409。

247C.5-(((3R，4R)-4-氨基-3-甲氧基哌啶-1-基)甲基)-N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-4-胺(外消旋)的制备

化合物247C(外消旋)是通过146所述相似的方法由此247B制备。化合物247C通过1克SCX药筒(cartridge)，以MeOH(16毫升)洗脱，接着用在MeOH(16毫升)中的2M NH₃洗脱。洗脱液在真空中浓缩并通过制备型HPLC进一步地纯化以得到26mg(产率：42％)的固体247C。其具有分析HPLC保留时间＝1.51分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝383。

247D.5-(((3R，4R)-4-氨基-3-甲氧基哌啶-1-基)甲基)-N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-4-胺(对映异构体A)的制备

化合物247D是通过手性制备型HPLC分离(Chiralpak AD，10微米，2×5cm柱，220nm，20毫升/分钟，EtOH/MeOH/DEA，50/50/0.1)由化合物247C获得。化合物247D为固体且具有＞99％ee与HPLC保留时间＝6.5分钟(Chiralpak AD，250×4.6毫米，10微米；EtOH/MeOH/DEA：50/50/0.1，0.8毫升/分钟，220nM)。

247E.5-(((3S，4S)-4-氨基-3-甲氧基哌啶-1-基)甲基)N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-4-胺(对映异构体B)的制备

化合物247E是通过手性制备型HPLC分离(Chiralpak AD，10微米，2×5cm柱，220nm，20毫升/分钟，EtOH/MeOH/DEA，50/50/0.1)由化合物247C获得。化合物247E为固体且具有＞99％ee与HPLC保留时间＝8.9分钟(Chiralpak AD，250×4.6毫米，10微米；EtOH/MeOH/DEA：50/50/0.1，0.8毫升/分钟，220nM)。

实施例248

rac-5-{[(3R，4R)-4-氨基-3-甲氧基哌啶-1-基]甲基}-N-(4-氟-3-甲氧基苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺

化合物248是通过化合物247相似的方法由247A制备且具有分析HPLC保留时间＝1.18分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MSM⁺+1＝401。

实施例249

(4aR，8aR)-rel-6-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-六氢-1H-吡啶并[3，4-b][1，4]

嗪-2(3H)-酮

249A.(3R，4R)-rel-叔-丁基4-氨基-3-羟基哌啶-1-羧酸酯的制备

将20％Pd(OH)₂/C(108mg)在N₂下加到15A(540mg，2.23mmol)在10毫升MeOH中的搅拌溶液中。将反应烧瓶以H₂净化几次，并在氢气下搅拌18小时。通过4μM聚碳酸酯膜过滤除去催化剂，并以MeOH(6×30毫升)冲洗。在真空中浓缩滤液以得到453mg(产率：94％)的249A。其具有分析HPLC保留时间＝0.73分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％磷酸，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝217。

249B.(3 R，4R)-rel-叔-丁基4-(2-氯乙酰胺基)-3-羟基哌啶-1-羧酸酯的制备

将氯乙酰氯(0.17毫升，2.08mmol)在N₂下于0℃经5分钟逐滴加到249A(428mg，1.98mmol)和NaOAc(325mg，3.96mmol)在2.5毫升丙酮和0.8毫升水中的搅拌混合物中。将此混合物于0℃下搅拌10分钟，并在室温下25分钟。混合物以160毫升的EtOAc稀释和以水(2×40毫升)、饱和NaHCO₃溶液(1×30毫升)和盐水(1×30毫升)洗涤。将EtOAc层干燥(MgSO₄)，过滤并在真空中浓缩以得到415mg(产率：72％)的249B。其具有分析HPLC保留时间＝1.96分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％磷酸，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和流动注射(flowinjection)MS M^-＝291。

249C.(4aR，8aR)-rel-叔-丁基2-氧代-六氢-1H-吡咯并[3，4-b][1，4]

嗪-6(7H)-羧酸酯的制备

将60％NaH(84.0mg，2.10mmol)在N₂下于室温加到249B(410mg，14.0mmol)在10毫升无水THF中的搅拌混合物中。此混合物在室温下搅拌45分钟且以3毫升饱和NH₄Cl溶液停止反应。在真空中浓缩混合物且用40毫升饱和NaHCO₃溶液稀释。水溶液以EtOAc(3×60毫升)萃取。合并的EtOAc萃取物以盐水(1×30毫升)洗涤。将EtOAc层干燥(MgSO₄)，过滤并在真空中浓缩以得到344mg(产率：96％)的249C。其具有分析HPLC保留时间＝2.01分钟(Chromolith SpeedROD 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％磷酸，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺＝257。

249D.(4aR，8aR)-rel-六氢-1H-吡咯并[3，4-b][1，4]

嗪-2(3H)-酮的制备

在室温下将TFA(2.00毫升，25.9mmol)加到249C(70.0mg，0.0.27mmol)在1毫升CH₂Cl₂中的搅拌混合物中。混合物在室温下搅拌1小时并在真空中浓缩以得到粗249D。此物质和DMA混合以制造2毫升储备溶液，并将其如此用于下一个步骤反应中。

化合物249是通过化合物146相似的方法由249D制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.85分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝409。

实施例250

5-(((4aR，8aR)-rel-六氢-1H-吡啶并[3，4-b][1，4]

嗪-6(7H)-基)甲基)-N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-4-胺

将1M LiAlH₄/乙醚溶液(0.70毫升，0.70mmol)逐滴加到于室温下的化合物249(100mg，0.24mmol)在4毫升无水THF中的搅拌混合物中。此混合物在室温下搅拌70分钟，并以加入200mg的Celite和200mg的脱水硫酸钠停止反应。混合物在室温下搅拌50分钟。过滤不溶解物且以MeOH(3×15毫升)冲洗。在真空中浓缩滤液并通过制备型HPLC纯化以得到78mg(产率：81％)的化合物250。其具有分析HPLC保留时间＝1.68分钟(Phenomenox S5C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝395。

实施例251

N-(4-氟-3-甲氧基苯基)-5-(((4aR，8aR)-rel-六氢-1H-吡啶并[3，4-b][1，4]

嗪-6(7H)-基)甲基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-4-胺

化合物251是通过化合物250相似的方法由249D制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.64分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝413。

实施例252

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-(甲基磺酰基)哌啶-3-甲酰胺

252A.1-叔-丁基3-乙基4-氧代哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

将4-氧代哌啶-3-羧酸乙酯(16.2g，95mmol)在CHCl₃(160毫升)中的溶液以NaHCO₃(9.6g，114mmol)在水(170毫升)中的溶液处理。此二相反应以Boc₂O(20.7g，95mmol)在CHCl₃(60毫升)中的溶液处理。所得反应加热回流18小时，冷却到室温，并分离这些层。水层以CHCl₃(2×100毫升)萃取。干燥(Na₂SO₄)合并的有机层，过滤并浓缩以得到22克(产率：86％)的油状化合物252A。

252B.(R)-1-叔-丁基3-乙基4-(1-苯基乙基氨基)-5，6-二氢-吡啶-1，3(2H)-二羧酸酯的制备

将252A(22g，81mmol)和甲苯(400毫升)的溶液以(R)-1-苯乙胺(12.5毫升，97mmol)和p-TsOH(1.5克)处理。反应混合物使用Dean-Stark阱(trap)加热回流23小时。混合物冷却到室温，以饱和NaHCO₃水溶液(2×200毫升)和盐水(2×200毫升)洗涤。干燥(Na₂SO₄)合并的有机层，过滤并浓缩。将粗物质通过二氧化硅垫过滤(100％CH₂Cl₂)并浓缩以得到14.7克(产率：49％)的油状化合物252B。

252C.(3S，4R)-1-叔-丁基3-乙基4-((R)-1-苯基乙基氨基)-哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

向装备机械搅拌器和加料漏斗的1升3-颈圆底烧瓶中进料252B(14.7g，39mmol)和乙腈(200毫升)和乙酸(100毫升)。溶液冷却到0℃，并用两小时的时间以三批加入Na(OAc)₃BH(33.3g，157mmol)。在最后加入之后反应在此温度下搅拌两小时。混合物然后冷却到-10℃及通过加入1N NaOH(100毫升)、4N NaOH(100毫升)、6N NaOH(100毫升)接着50％NaOH(50毫升)来慢慢地停止反应。使反应加温到室温及分离这些层。水层以CH₂Cl₂(2×250毫升)萃取及干燥(Na₂SO₄)合并的有机层，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶上的快速色谱法(10％到30％EtOAc/己烷梯度)的纯化，得到6.0克(产率：41％)的化合物252C。

252D.(3R，4R)-1-叔-丁基3-乙基4-((R)-1-苯基乙基氨基)-哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

将252C(2.90g，7.71mmol)在乙醇(70毫升)中的溶液以在乙醇(7.5毫升)中的21％NaOEt处理。反应混合物于50℃加热三小时，冷却到室温，然后浓缩。所得油溶解在二氯甲烷(150毫升)中，以20％NH₄Cl(2×50毫升)洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层并浓缩为油状物。通过硅胶上的快速色谱法(10％到25％EtOAc/己烷梯度)的纯化，得到1.20克(产率：41％)油状的化合物252D。

252E.(3R，4R)-1-叔-丁基3-乙基4-氨基哌啶-1，3-二羧酸酯的制备。

252D(1.18g，3.13mmol)在MeOH(31毫升)中的溶液以甲酸铵(1.58g，25.1mmol)和10％Pd/C处理。反应混合物加热回流14小时然后冷却到室温。通过过滤移去所得固体和以MeOH洗涤。干燥(Na₂SO₄)滤液和在减压下浓缩以得到0.82克(产率：96％)油状的化合物252E。

252F.(3R，4R)-1-叔-丁基3-乙基4-氨基哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

252E(0.80g，2.94mmol)在二氯甲烷(29毫升)中的溶液于0℃下以二异丙基乙胺(0.41g，3.23mmol)处理。经过30分钟慢慢地加入烯丙基氯甲酸酯(0.46g，3.83mmol)在二氯甲烷(29毫升)中的溶液。反应混合物于0℃下搅拌16小时，然后慢慢地加温到室温。所得溶液以二氯甲烷稀释。并以饱和NaHCO₃(2×50毫升)洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，并在减压下浓缩。所得油通过硅胶上的快速色谱法(20到25％EtOAc/己烷)纯化以得到0.88克(产率：84％)油状的化合物252F。

252G.(3R，4R)-甲基4-(烯丙氧基羰基)哌啶-3-羧酸酯的制备

252F(0.87g，2.44mmol)在二氯甲烷(12毫升)中的溶液于0℃下以TFA(2.4毫升)处理。反应混合物于0℃下搅拌一个小时然后慢慢地加温到室温。在此温度下继续搅拌五小时，浓缩，并与MeOH和甲苯共沸蒸发。所得油通过硅胶上的快速色谱法(0到2％MeOH/CH₂Cl₂)纯化以得到0.47克(产率：79％)油状的化合物252G。

252H.(3R，4R)-甲基4-(烯丙氧基羰基)-1-((4-(3-甲氧基苯基-氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸酯的制备

将252G(0.21g，0.87mmol)、4-(3-甲氧基苯基氨基)-吡咯并[1，2，4]三嗪-5-基甲基三乙基溴化铵(0.40g，0.87mmol)和二异丙基乙胺(0.11g，0.87mmol)在MeCN(15毫升)中的悬浮液于60℃加热一小时然后在真空中浓缩。所得油通过硅胶上的快速色谱法(2到5％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，以得到0.33克(产率：77％)固体的化合物252H。

252I.(3R，4R)-4-(烯丙氧基羰基)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)-吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸的制备

252H(0.33g，0.67mmol)在MeOH/THF/水(3/3/1/毫升)中的溶液以LiOH单水合物(0.25g，6.7mmol)处理。搅拌反应混合物14小时，以饱和NaHCO₃水溶液中和至pH＝7，然后浓缩到1毫升的体积。所得浆状物溶解在MeOH中并通过制备型HPLC纯化(YMC ODS-A 5微米，20×100毫米，溶剂A 10％MeOH-90％H₂O-0.1％TFA，溶剂B 90％MeOH-10％H₂O-0.1％TFA，梯度0-100％B，12分钟)。合并所需的级分和在减压下浓缩以除去大部份MeOH，以饱和NaHCO₃中和到pH＝7及以EtOAc(2×50毫升)萃取。干燥(Na₂SO₄)合并的有机层并浓缩以得到0.30克(产率：94％)固体的化合物252I。

252J.(3R，4R)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]-三嗪-5-基)甲基)-3-(甲基磺酰基氨基甲酰基)哌啶-4-基氨基甲酸烯丙基酯的制备

252I(0.30g，0.63mmol)在MeCN(6.2毫升)中的溶液以二甲基氨基哌啶(77mg，0.63mmol)、DECI(0.18g，0.94mmol)，接着甲磺酰胺(0.18g，1.88mmol)处理。反应混合物搅拌两小时，以水停止反应，并浓缩。所得浆状物溶解在MeOH中并通过制备型HPLC(YMC ODS-A 5微米，20×100毫米，溶剂A 10％MeOH-90％H₂O-0.1％TFA，溶剂B 90％MeOH-10％H₂O-0.1％TFA，梯度0-100％B，12分钟)纯化。合并所需的级分并在真空中浓缩，以饱和NaHCO₃水溶液中和到pH＝10，和以EtOAc(2×50毫升)萃取。干燥(Na₂SO₄)合并的有机层并浓缩以得到0.22克(产率：62％)固体的化合物252J。

252J(100mg，0.18mmol)在THF(4毫升，以氩气除气)中的溶液以Pd(PPh₃)₄(21mg，0.018mmol)和Et₂NH(33mg，0.45mmol)处理。反应混合物搅拌90分钟然后浓缩。所得固体溶解在MeOH中，通过制备型HPLC(YMCODS-A 5微米，20×100毫米，溶剂A 10％MeOH-90％H₂O-0.1％TFA，溶剂B 90％MeOH-10％H₂O-0.1％TFA，梯度0-100％B，12分钟)纯化。浓缩所需的级分，以饱和NaHCO₃水溶液中和到pH＝10，和以EtOAc(2×50毫升)萃取。干燥(Na₂SO₄)合并的有机层并浓缩以得到36mg(产率：42％)固体的化合物252。其具有分析HPLC保留时间＝1.62分钟(Phenomenex Su C184.6×50毫米柱10-90％甲醇水溶液包含0.2％H₃PO₄，4分钟梯度，于220nm监测)，[M+H]⁺＝474。

实施例253

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-甲基哌啶-3-甲酰胺

253A.(3R，4R)-甲基-4-(烯丙氧基羰基)-1-((4-(3-乙炔基苯基-氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸酯的制备

将252G(0.24g，1.0mmol)、4-(3-乙炔基苯基氨基)-吡咯并[1，2，4]三嗪-5-基甲基三乙基溴化铵(0.43g，1.0mmol)和二异丙基乙基胺(0.13g，1.0mmol)在MeCN(1 5毫升)中的悬浮液于60℃加热一小时，然后在真空中浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法(2到5％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，以得到0.24克(产率：50％)固体的化合物253A。

253B.(3R，4R)-4-(烯丙氧基羰基)-1-((4-(3-乙炔基苯基氨基)-吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸的制备

将253A(0.24g，0.50mmol)在MeOH/THF/水(3/3/1/毫升)中的溶液在室温下以LiOH单水合物(0.21g，5.0mmol)处理。搅拌反应混合物14小时，以饱和NaHCO₃水溶液中和到pH＝7，然后浓缩。所得浆状物溶解在MeOH中并通过制备型HPLC(YMC ODS-A5微米，20×100毫米，溶剂A 10％MeOH-90％H₂O-0.1％TFA，溶剂B 90％MeOH-10％H₂O-0.1％TFA，梯度0-100％B，12分钟)纯化。浓缩所需的级分，以饱和NaHCO₃中和到pH＝7，和以EtOAc(2×50毫升)萃取。干燥(Na₂SO₄)合并的有机层并在真空中浓缩以得到0.22克(产率：93％)固体的化合物253B。

253C.(3R，4R)-1-((4-(3-乙炔基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]-三嗪-5-基)甲基)-3-(甲基氨基甲酰基)哌啶-4-基氨基甲酸烯丙酯的制备

253B(0.22g，0.46mmol)在MeCN(4.6毫升)中的溶液以二异丙基乙胺(59mg，0.46mmol)、苯并三唑-1-基氧基-三(二甲基氨基)

六氟磷酸盐(后文称为″Bop试剂″)(0.36g，0.69mmol)和在THF中的2N甲胺(0.70毫升，1.38mmol)处理。反应混合物搅拌两小时，以水停止反应，并浓缩。所得浆状物溶解在MeOH中，并通过制备型HPLC(YMC ODS-A 5微米，20×100毫米，溶剂A 10％MeOH-90％H₂O-0.1％TFA，溶剂B 90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，梯度0-100％B，12分钟)纯化。浓缩所需的级分，以饱和NaHCO₃水溶液中和到pH＝10，并以EtOAc(2×50毫升)萃取。干燥(Na₂SO₄)合并的有机层并在真空中浓缩以得到0.21克(产率：92％)固体的化合物253C。

253C(100mg，0.20mmol)在THF(5毫升，以氩气除气)中的溶液以Pd(PPh₃)₄(23mg，0.020mmol)和Et₂NH(37mg，0.51mmol)处理。搅拌反应混合物90分钟，然后浓缩。所得固体溶解在MeOH中并通过制备型HPLC(YMCODS-A 5微米，20×100毫米，溶剂A 10％MeOH-90％H₂O-0.1％TFA，溶剂B 90％MeOH-10％H₂O-0.1％TFA，梯度0-100％B，12分钟)纯化。浓缩所需的级分，以饱和NaHCO₃水溶液中和到pH＝10，并以EtOAc(2×50毫升)萃取。干燥(Na₂SO₄)合并的有机层并在真空中浓缩以得到36mg(产率：42％)固体的化合物253。其具有分析HPLC保留时间＝1.96分钟(PhenomenexSu C18 4.6×50毫米柱10-90％甲醇水溶液，包含0.2％H₃PO₄，4分钟梯度，于220nm监测)，[M+H]⁺＝404。

实施例254

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-甲基哌啶-3-甲酰胺

254A.(3R，4R)-1-叔-丁基3-乙基4-(苯甲氧基羰基)哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

252E(180mg，0.66mmol)在CH₂Cl₂(5毫升)中的溶液以苯甲氧基氯甲酸酯(0.1毫升，0.73mmol)和三乙胺(0.12毫升，0.86mmol)处理。反应在室温下搅拌1 8小时，以CH₂Cl₂(10毫升)稀释，并以水(2×10毫升)、0.1N HCl(2×10毫升)、饱和NaHCO₃水溶液(2×10毫升)和盐水(1×10毫升)洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，过滤并浓缩以得到243mg(产率：91％)油状的化合物254A。

254B.(3R，4R)-乙基4-(苯甲氧基羰基)哌啶-3-羧酸酯的制备

在0℃下，将254A(243mg，0.60mmol)在CH₂Cl₂(3毫升)中的溶液以三氟乙酸(0.3毫升)处理。反应在室温下搅拌一小时，然后浓缩为油状物。将粗胺溶解在EtOAc(10毫升)中，以饱和NaHCO₃水溶液洗涤并干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空中浓缩。产物通过快速硅胶色谱法(10％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，以得到95mg(产率：52％)的化合物254B。

254C.(3R，4R)-甲基4-(苯甲氧基羰基)-1-((4-(3-甲氧基苯基-氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸酯

N，N-二乙基-N-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)乙铵(ethanaminium)溴化物(1.7g，3.62mmol)和254B(1.06g，3.6mmol)在乙腈(75毫升)中的悬浮液以DIEA(0.63毫升，3.6mmol)处理，并加温到55℃经12小时。浓缩反应，溶于EtOAc(100毫升)中，并以水(2×100毫升)洗涤。干燥(Na₂SO₄)粗物质，过滤并浓缩以得到1.7克(产率：89％)的化合物254C。

254D.(3R，4R)-4-(苯甲氧基羰基)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)-吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸的制备

254D(1.67g，产率：100％)是通过化合物252I所使用的相似方法由254C(1.7g，3.13mmol)制备。

254E.(3R，4R)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-3-(甲基氨基甲酰基)哌啶-4-基氨基甲酸苯甲酯的制备

化合物254E(790mg，产率：54％)是通过化合物253C所使用的相似方法由254D(1.44g，2.71mmol)制备。

将254E(1.66g，3.13mmol)在MeOH(50毫升)中的溶液以氩气净化30分钟。加入5％Pd/C(300mg)。反应混合物在氢气下搅拌三小时，然后通过Celite垫过滤。在真空中浓缩滤液以得到1.21克(产率：94％)固体的化合物254。其具有分析HPLC保留时间＝1.57分钟(YMC S5 ODS 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％H₃PO₄，4分钟梯度，于220nm监测)，[M+H]⁺＝410。

实施例 255

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-羧酸

化合物255(33mg，产率：89％)是通过化合物254所使用的相似方法由254D(50mg，0.094mmol)制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.54分钟(YMCS5 ODS 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％H₃PO₄，4分钟梯度，于220nm监测)。[M+H]⁺＝397。

实施例256

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-甲酰胺

256A.(3R，4R)-3-((3，4-二甲氧基苄基)氨基甲酰基)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-4-基氨基甲酸苯甲酯的制备

254D(150mg，0.23mmol)在DMF(5毫升)中的溶液以3，4-二甲氧基苯甲胺(77mg，0.46mmol)、DIEA(80微升，0.46mmol)和Bop试剂(132mg，0.25mmol)处理。反应在室温下搅拌四小时，然后倒进EtOAc(25毫升)中。混合物以饱和NaHCO₃水溶液(3×25毫升)洗涤，并干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空中浓缩。粗产物通过硅胶上的快速色谱法(3％MeOH/CH₂Cl₂)纯化以得到174mg(产率：95％)的化合物256A。

256A(50mg，0.06mmol)在TFA(3毫升)中的溶液于室温下搅拌5天。浓缩反应并通过制备型HPLC纯化以得到7mg(产率：30％)固体的化合物256。其具有分析HPLC保留时间＝1.62分钟(YMC S5 ODS 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％H₃PO₄，4分钟梯度，于220nm监测)，[M+H]⁺＝396。

实施例257

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-(甲基磺酰基)哌啶-3-甲酰胺

257A.(3S，4R)-1-叔-丁基3-甲基4-氨基哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

化合物257A(447mg，63％)是通过252E所使用的相似方法制备。

257B.(3S，4R)-1-叔-丁基3-甲基4-(苯甲氧基羰基)哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

将257A(447mg，1.7mmol)在CH₂Cl₂(20毫升)中的溶液于室温下以三乙胺(0.3毫升，2.2mmol)接着氯甲酸苯甲酯(0.27毫升，1.9mmol)处理。将反应混合物搅拌18小时，然后以水(25毫升)洗涤。水层以CH₂Cl₂(25毫升)萃取及合并的有机物以饱和NaHCO₃水溶液、0.1N HCl和盐水洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，过滤并在真空中浓缩为油状物。粗物质通过硅胶上的快速色谱法(30％EtOAc/己烷)纯化以得到411mg(产率：75％)的油状化合物257B。

257C.(3S，4R)-甲基4-(苯甲氧基羰基)哌啶-3-羧酸酯的制备

257B(411mg，1.04mmol)在CH₂Cl₂(5毫升)中的溶液于室温下以TFA(0.5毫升)处理。将反应混合物搅拌5.0小时，然后在真空中浓缩。残余物溶解在EtOAc(10毫升)中，并以饱和NaHCO₃水溶液洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机物，过滤并在真空中浓缩以得到365mg的固体257C。

257D.(3S，4R)-甲基4-(苯甲氧基羰基)-1-((4-(3-甲氧基苯基-氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸酯的制备

257C(292mg，0.62mmol)和N，N-二乙基-N-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)乙铵溴化物(292mg，0.62mmol)在乙腈(10毫升)中的悬浮液在室温下以DIEA(0.2毫升，1.24mmol)处理。反应混合物加温到55℃经3.0小时，然后在真空中浓缩到干。粗残余物通过硅胶上的快速色谱法(30％EtOAc/己烷)纯化以得到269mg(产率：80％)的257D。

257E.(3S，4R)-4-(苯甲氧基羰基)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)-吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸的制备

257D(200mg，0.37mmol)在THF/MeOH(1∶1，4毫升)中的溶液在室温下以在水(1毫升)中的LiOH单水合物(30mg，0.74mmol)处理。反应混合物搅拌八小时，然后浓缩至1毫升。残余物以水(10毫升)稀释，并以EtOAc(3×10毫升)萃取。干燥(Na₂SO₄)有机物，过滤并在真空中浓缩，以得到200mg(产率：100％)固体的化合物257E。

257F.(3S，4R)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-3-(甲基磺酰基氨基甲酰基)哌啶-4-基氨基甲酸酯酸(carbamate acid)的制备

257E(30mg，0.06mmol)在DMF(2毫升)中的溶液以甲磺酰胺(11mg，0.11mmol)、DMAP(7mg，0.06mmol)和EDAC(13mg，0.07mmol)处理。反应混合物在室温下搅拌48小时。所得的悬浮液以EtOAc(10毫升)稀释，以盐水(3×10毫升)、饱和NaHCO₃水溶液(2×10毫升)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空中浓缩以得到35mg的257E，其没有进一步的纯化而使用。

257F(35mg)在MeOH(3毫升)中的溶液以10％Pd/C(15mg)处理，并在室温下、氢气下搅拌三小时。通过尼龙滤器过滤浆状物及浓缩滤液。粗物质通过制备型HPLC纯化以得到12mg的固体化合物257。其具有分析HPLC保留时间＝1.77分钟(YMC S5 ODS 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％H₃PO₄，4分钟梯度，于220nm监测)，[M+H]⁺＝474。

实施例258

(3R，4S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-(甲基磺酰基)哌啶-3-甲酰胺

258A.(3R，4S)-1-叔-丁基3-甲基4-((S)-1-苯基乙基氨基)-哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

化合物258A是通过252C相同的方法使用适当起始物制备。

258B.(3R，4S)-1-叔-丁基3-甲基4-氨基哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

化合物258B是根据实施例257所述的步骤使用适当起始物制备。

化合物258是通过257所述的相同方法由258B制备。化合物258具有分析HPLC保留时间＝1.77分钟(YMC S5 ODS 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％H₃PO₄，4分钟梯度，于220nm监测)，[M+H]⁺＝474。

实施例259

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-甲基哌啶-3-甲酰胺

259A.(3S，4R)-1-叔-丁基3-乙基4-氨基哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

252C(2.6g，6.9mmol)在EtOH(100毫升)中的溶液以甲酸铵(3.5g，55.3mmol)和10％Pd/C(390mg)处理。反应混合物在氮气氛下加热回流三小时。所得悬浮液通过Celite垫过滤并在真空中浓缩以得到1.8克(产率：96％)固体的化合物259A。

259B.((3S，4R)-1-叔-丁基3-乙基4-(烯丙氧基羰基)哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

259A(900mg，3.3mmol)在CH₂Cl₂(20毫升)中的溶液在室温下以三乙胺(0.64毫升，4.62mmol)和烯丙基氯甲酸酯(0.35毫升，3.96mmol)处理。搅拌混合物四小时，然后以0.1N HCl(2×10毫升)、1N NaOH(2×10毫升)和盐水(10毫升)洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，过滤并在真空中浓缩以得到680mg(产率：58％)油状的化合物259B。

259C.(3S，4R)-乙基4-(烯丙氧基羰基)哌啶-3-羧酸酯的制备

259B(680mg，1.9mmol)在CH₂Cl₂(10毫升)中的溶液在室温下以TFA(1毫升)处理。将反应混合物搅拌16小时，然后浓缩。残留物溶解在EtOAc(20毫升)中，并以饱和NaHCO₃(2×20毫升)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空中浓缩以得到170mg的化合物259C。

259D.(3 S，4R)-甲基4-(烯丙氧基羰基)-1-((4-(3-乙炔基苯基氨基)-吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸酯的制备

将259C(50mg，0.2mmol)和N，N-二乙基-N-((4-(3-乙炔基苯基-氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)乙铵溴化物(82mg，0.18mmol)在乙腈(2毫升)中的悬浮液以DIEA(31微升，0.18mmol)处理。混合物于65℃加热6.0小时，冷却到室温并浓缩。粗物质通过径向色谱法(SiO₂，2毫米板，100％CH₂Cl₂到1％MeOH/CH₂Cl₂的梯度)纯化以得到63mg(产率：70％)的化合物259D。

259E.(3S，4R)-4-(烯丙氧基羰基)-1-((4-(3-乙炔基苯基氨基)-吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸的制备

将259D(63mg，0.13mmol)在THF/MeOH(1∶1，4毫升)中的溶液在室温下以LiOH单水合物(17mg，0.39mmol)的溶液处理。反应混合物搅拌18小时，然后浓缩到0.5毫升体积。残留物以水(5毫升)稀释且以饱和NH₄Cl水溶液至pH为6。混合物以EtOAc(2×10毫升)萃取，干燥(Na₂SO₄)有机层，过滤并在真空中浓缩以得到56mg(产率：92％)的化合物259E。

259F.(3S，4R)-1-((4-(3-乙炔基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-3-(甲基氨基甲酰基)哌啶-4-基氨基甲酸烯丙基酯的制备

以甲胺(在THF中的2M，0.12毫升，0.24mmol)、DIEA(0.02毫升，0.12mmol)和Bop试剂(68mg，0.13mmol)连续地处理259E(56mg，0.12mmol)在DMF(3毫升)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌18小时。所得混合物以EtOAc(25毫升)稀释，以盐水(3×15毫升)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空中浓缩。粗259E(71mg)没有进一步的纯化而使用。

将259F(71mg，0.15mmol)在THF(3毫升)中的溶液以氩气除气，并用二乙胺(28mg，0.38mmol)和Pd(PPh₃)₄(17mg，0.02mmol)处理。反应在氩气氛下搅拌2.0小时，然后在真空中浓缩并通过制备型HPLC纯化以得到14mg的化合物259。其具有分析HPLC保留时间＝2.10分钟(YMC S5 ODS 4.6×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％H₃PO₄，4分钟梯度，于220nm监测)，[M+H]⁺＝404。

实施例260

(3S，4S)-4-氨基-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-N-甲基哌啶-3-甲酰胺

260A.(3S，4S)-1-叔-丁基3-甲基4-((S)-1-苯基乙基氨基)-哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

将258A(4.50g，12.4mmol)在甲醇(124毫升)中的溶液在室温下以在甲醇中的25％NaOMe(8.04毫升)处理。此反应混合物于50℃加热3.0小时，冷却到室温，然后在真空中浓缩。将油状残余物溶解在二氯甲烷(200毫升)中且以20％NH₄Cl(2×75毫升)洗涤。有机层通过Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩。残余物通过硅胶上的快速色谱法(10到25％EtOAc/己烷)纯化以得到1.50克(产率：30％)油状的化合物260A。

260B.(3S，4S)-1-叔-丁基3-甲基4-氨基哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

260A(1.10g，3.03mmol)在MeOH(31毫升)中的溶液在室温下以甲酸铵(1.51g，24.3mmol)和10％Pd/C(110mg)处理。反应混合物加热回流14小时，然后冷却到室温。通过过滤除去固体物质，并以MeOH洗涤。在真空中浓缩滤液以得到0.75克(产率：96％)油状的化合物260B。

260C.(3S，4S)-1-叔-丁基3-甲基4-(苯甲氧基羰基)哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

260B(0.75g，2.90mmol)在二氯甲烷(30毫升)中的溶液于0℃以三乙胺(0.35g，3.48mmol)和N-(苯甲氧基羰氧基)琥珀酰亚胺(0.72g，2.90mmol)处理。使反应混合物加温到室温，并搅拌16小时。反应混合物以二氯甲烷稀释，以10％柠檬酸(2×50毫升)，然后饱和NaHCO₃(2×50毫升)洗涤。有机层通过Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩以得到1.01克(产率：89％)的油状化合物260C。没有进一步纯化而将其用于下一个步骤。

260D.4-(苯甲氧基羰基)哌啶-3-羧酸(3S，4S)-甲酯的制备

260C(1.01g，2.58mmol)在二氯甲烷(50毫升)中的溶液于0℃以TFA(5毫升)处理。反应混合物于0℃搅拌1.0小时然后慢慢地加温到室温，并再搅拌2.0小时。浓缩混合物，然后与MeOH和甲苯共沸蒸发。残余物溶解在二氯甲烷中，并以饱和NaHCO₃(2×50毫升)洗涤。有机层通过Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩以得到0.61克(产率：81％)的油状化合物260D。没有进一步纯化而将其用于下一个步骤。

260E.4-(苯甲氧基羰基)-1-((4-(3-甲氧基苯基-氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸(3S，4S)-甲基酯的制备

260D(0.18g，0.61mmol)、4-(3-甲氧基苯基氨基)-吡咯并[1，2，4]三嗪-5-基甲基三乙基溴化铵(0.29g，0.61mmol)和二异丙基乙基胺(79mg，0.61mmol)在MeCN(6毫升)中的反应混合物于55℃加热12小时并在真空中浓缩。残余物溶解在二氯甲烷中，并以水(2×50毫升)洗涤。将二氯甲烷部分通过Na₂SO₄干燥，并在真空中浓缩以得到0.33克(产率：99％)的油状化合物260E。没有进一步纯化而将其用于下一个步骤。(M+H)⁺＝545。

260F.(3S，4S)-4-(苯甲氧基羰基)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)-吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-羧酸的制备

260E(95mg，0.18mmol)在MeOH/THF/水(1/1/0.5毫升)中的溶液在室温下以LiOH单水合物(75mg，1.8mmol)处理。将反应混合物搅拌18小时，以饱和NH₄Cl(5毫升)停止反应，和以EtOAc(3×15毫升)萃取。EtOAc层通过Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩以得到80mg(产率：89％)薄膜状的化合物260F。没有进一步纯化而将其用于下一个步骤。质量(M+H)⁺＝531。

260G.(3S，4S)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-3-(甲基氨基甲酰基)哌啶-4-基氨基甲酸苯甲酯的制备

260F(40mg，0.075mmol)在DMF(0.8毫升)中的溶液在室温下以二异丙基乙胺(10mg，0.075mmol)、Bop试剂(59mg，0.11mmol)、然后在THF中的2N甲胺(0.12毫升，0.23mmol)处理。将反应混合物搅拌16小时，以水停止反应，并浓缩。所得悬浮液溶解在MeOH中且通过制备型HPLC(YMC ODS-A 5微米，20×100毫米，溶剂A 10％MeOH-90％H₂O-0.1％TFA，溶剂B 90％MeOH-10％H₂O-0.1％TFA，梯度0-100％B，12分钟)。浓缩所需的级分以除去大部份MeOH，以饱和NaHCO₃水溶液中和到pH＝10，并以EtOAc(2×50毫升)萃取。合并的有机层通过Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩以得到38mg(产率：93％)的固体260G。质量(M+H)⁺＝544。

260G(38mg，0.070mmol)在MeOH(2毫升)中的溶液在室温下以5％Pd/C(10mg)处理。反应混合物在氢气下搅拌16小时。通过过滤除去催化剂。在真空中浓缩滤液以得到25mg(产率：87％)的固体化合物260。其具有分析HPLC保留时间＝1.71分钟(Phenomenex Su C18 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.2％H₃PO₄，4分钟梯度，于220nm监测)。质量[M+H]⁺＝410。

实施例261

((3R，4R)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-4-((R)-1-苯基乙基氨基)哌啶-3-基)甲醇

261A.(3R，4R)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-((R)-1-苯基乙基氨基)-哌啶-3-羧酸的制备

252D(460mg，1.22mmol)和NaOEt(1.25毫升，在EtOH中的21重量％)在EtOH(10毫升)中的混合物于50℃搅拌3小时，然后在室温下约48小时。在真空中浓缩反应混合物，接着加水。混合物以1N HCl酸化至pH为4-5，并通过过滤收集固体，以水洗涤并干燥以得到300mg(产率：71％)的252A。其具有分析HPLC保留时间＝2.065分钟(Chromolith SpeedROD柱4.5×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)。质量(M+1)⁺＝349。

261B.(3R，4R)-1-叔-丁基3-甲基4-((R)-1-苯基乙基氨基)-哌啶-1，3-二羧酸酯的制备

将TMSCHN₂的溶液(0.82毫升，1.64mmol，在己烷中的2N)加到261A(280mg，0.80mmol)在6毫升的1∶1 CH₂Cl₂/MeOH中的溶液中。混合物在室温下搅拌30分钟，然后在真空中浓缩，并通过快速色谱法在硅胶上纯化(己烷/EtOAc：80∶20)以得到油状化合物261B。其具有分析HPLC保留时间＝2.187分钟(Chromolith SpeedROD柱4.5×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)。质量(M+1)⁺＝363。

261C.((3R，4R)-4-((R)-1-苯基乙基氨基)哌啶-3-基)甲醇的制备

将LiBH₄(15.5mg，0.71mmol)加到261B(270mg，0.75mmol)的溶液中。混合物加热回流1.0小时。HPLC显示仍有一些残余的起始物质。加入更多的LiBH₄(15.5mg，0.71mmol)，并将混合物再加热2.0小时。冷却到室温之后，加冰水，且在真空中浓缩混合物以除去THF。以EtOAc(x3)萃取含水残余物，并干燥(Na₂SO₄)合并的萃取物，并在真空中浓缩。残余物溶解在2毫升CH₂Cl₂中并加入2毫升的TFA。混合物在室温下搅拌30分钟。混合物在真空中浓缩，接着在高真空下干燥过夜以得到油状的261C。其具有分析HPLC保留时间＝0.590分钟(Chromolith SpeedROD柱4.5×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)及LC/MS M⁺+1＝235。此物质直接地用于下一个反应步骤中而没有进一步的纯化。

261D.((3R，4R)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]-三嗪-5-基)甲基)-4-((R)-1-苯基乙基氨基)哌啶-3-基)甲醇的制备

化合物261D是通过化合物146E所使用的相似方法由261C制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.761分钟(Chromolith SpeedROD柱4.5×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)及LC/MS M⁺+1＝487。

261D(160mg，0.33mmol)、10％Pd/C(39mg)和甲酸铵(166mg，2.63mmol)在MeOH(15毫升)中的混合物加热回流1.0小时。冷却到室温之后，通过过滤除去催化剂，并在真空中浓缩滤液。残余物溶解在水中，以NaHCO₃水溶液碱化，并以EtOAc萃取(3x)。干燥(Na₂SO₄)合并的萃取物并在真空中浓缩以得到64mg(产率：51％)固体的化合物261(64mg，51％)。其具有分析HPLC保留时间＝1.137分钟(Chromolith SpeedROD柱4.5×50毫米，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)及LC/MSM⁺+1＝383。

实施例262

rac-(3R，4R)-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3，4-二胺

262A.4-(苯甲氧基羰基)-3-羟基哌啶-1-羧酸(3R，4R)-叔-丁酯的制备

将Et₃N(1.08毫升，7.76mmol)，接着将Cbz-OSu(1.69g，6.80mmol)加到化合物249A(1.40g，6.47mmol)在10毫升CH₂Cl₂中的搅拌混合物中。反应混合物在室温下搅拌16小时，然后以300毫升的EtOAc稀释。有机层以5％柠檬酸溶液(2×40毫升)、5％K₂CO₃溶液(2×40毫升)和盐水(40毫升)洗涤，并干燥(MgSO₄)。过滤残余物并在真空中浓缩以得到2.25克(产率：99％)的化合物262A。其具有分析HPLC保留时间＝3.02分钟(Phenomenox S5C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝351。

262B/C.3-叠氮基-4-(苯甲氧基羰基)哌啶-1-羧酸(3R，4R)-叔-丁酯的制备

262B(顺式)       262C(反式)

非对映异构体A    非对映异构体B

在0℃下在氮气下，用5分钟的时间将甲磺酰氯(0.49毫升，6.36mmol)加到化合物262A(2.23g，6.36mmol)和Et₃N(1.20毫升，0.83mmol)在30毫升CH₂Cl₂中的搅拌溶液中。混合物于0℃下搅拌35分钟然后以40毫升的CH₂Cl₂稀释。混合物以水(2×25毫升)、盐水(20毫升)洗涤，并干燥(MgSO₄)。过滤混合物并在真空中浓缩以得到粗品甲磺酸盐。将NaN₃(1.65g，25.5mmol)加到在20毫升DMSO中的甲磺酸盐中。混合物于90℃加热17小时且冷却到室温。混合物以200毫升EtOAc稀释，并以水(4×200毫升)、饱和NaHCO₃溶液(40毫升)、盐水(40毫升)洗涤和干燥(MgSO₄)。过滤，在真空中浓缩，接着经硅胶快速色谱法(己烷中的15-50％EtOAc)，得到696mg(29％)的262B(非对映异构体A，Rf＝0.65)和262C(非对映异构体B，Rf＝0.70)。262B具有分析HPLC保留时间＝3.51分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝376。262C具有分析HPLC保留时间＝3.51分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝376。

262D.(3R，4R)-3-叠氮基-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-4-基氨基甲酸苄基酯的制备

262D

化合物262D是通过化合物247A所述相似的方法由化合物262B制备。其具有分析HPLC保留时间＝2.96分钟(Phenomenox S5 C18-HC4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝528。

化合物262是通过化合物249A所述相似的方法由化合物262D制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.27分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝368。

实施例263

rac-N-[(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]脲

263A.(3R，4R)-3-氨基-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-4-基氨基甲酸苯甲酯(手性，非对映异构体A)的制备：

化合物263A是通过用于化合物146E所述的相似方法由化合物262C制备。其具有分析HPLC保留时间＝2.71分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝502。

263B.(3R，4R)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-3-脲基哌啶-4-基氨基甲酸苯甲酯的制备

于0℃下，将三氯乙酰异氰酸酯(28.9mg，0.18mmol)加到化合物263A(77.0mg，0.15mmol)在2毫升CH₂Cl₂中的搅拌混合物中。混合物于0℃下搅拌30分钟，并加入1毫升的甲醇。此混合物然后在真空中浓缩以得到粗油。此粗物质溶解在3毫升的甲醇中并加入2毫升的20％K₂CO₃溶液。混合物在室温下搅拌2小时，然后以10毫升的水稀释。其在真空中浓缩以除去甲醇然后以EtOAc(3×15毫升)萃取。合并的EtOAc萃取物以盐水(10毫升)洗涤，并干燥(MgSO₄)。过滤接着在真空中浓缩以得到70mg(产率：84％)的化合物263B。其具有分析HPLC保留时间＝2.51分钟(Phenomenox S5C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝545。

化合物263是通过化合物249A所述相似的方法由化合物263B制备。其具有分析HPLC保留时间＝1.32分钟(Phenomenox S5℃18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝411。

实施例264

rac-N-[(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]甲磺酰胺

264A.7-(甲基磺酰基)-3，7-二氮杂-双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸苯甲酯(外消旋)的制备

将三乙胺(0.74毫升，5.31mmol)，接着将甲磺酰氯(0.18毫升，2.30mmol)加到3，7-二氮杂-双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸苯甲酯(410mg，1.77mmol，如Tetrahedron Letters，43(23)，4289-4293，2002所示制备)在5毫升CH₂Cl₂中的搅拌混合物中。混合物在室温下搅拌2.5小时然后以120毫升EtOAc稀释。此混合物以5％柠檬酸溶液(3×30毫升)、饱和NaHCO₃溶液(30毫升)和盐水(30毫升)洗涤。干燥(MgSO₄)有机层，过滤并在真空中浓缩以得到定量产率的化合物264A。其具有分析HPLC保留时间＝2.56分钟(Phenomenox S5C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+Na＝333。

264B.(3R，4R)-rel-苄基4-叠氮基-3-(甲基磺酰胺基)哌啶-1-羧酸酯的制备：

将NaN₃(458mg，7.08mmol)加到化合物264A(549mg，1.77mmol)在4毫升DMSO中的搅拌混合物中。混合物在室温下搅拌2小时，并以80毫升的EtOAc稀释。混合物以水(3×100毫升)、饱和NaHCO₃溶液(40毫升)和盐水(40毫升)洗涤。干燥(MgSO₄)EtOAc层，过滤并在真空中浓缩，得到530mg(产率：85％)的化合物264B。其具有分析HPLC保留时间＝2.90分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝354。

264C.(3R，4R)-rel-苄基4-氨基-3-(甲基磺酰胺基)哌啶-1-羧酸酯的制备：

将Ph₃P(900mg，3.43mmol)加到化合物264B(530mg，1.50mmol)在6毫升THF和1毫升水中的搅拌混合物中。反应混合物在70℃下加热15小时，并冷却到室温。此混合物在真空中浓缩，以15毫升的2N HCl溶液稀释，然后以CHCl₃(3×20毫升)洗涤。通过加入50％NaOH水溶液碱化到pH12，以NaCl饱和，然后以EtOAc(3×25毫升)萃取。合并的EtOAc萃取物以盐水(15毫升)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤并在真空中浓缩以得到490mg(产率：100％)的化合物264C。其具有分析HPLC保留时间＝1.67分钟(Phenomenox S5C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝328。

264D.(3R，4R)-rel-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-3-(甲基磺酰胺基)哌啶-4-基氨基甲酸叔-丁酯的制备

将Et₃N(0.63毫升，4.50mmol)，接着将二碳酸二-叔丁酯(390mg，1.80mmol)加到化合物264C(490mg，1.50mmol)在6毫升CH₂Cl₂中的搅拌溶液中。反应混合物在室温下搅拌3小时。混合物以60毫升的EtOAc稀释，以饱和NaHCO₃溶液(2×15毫升)和盐水(15毫升)洗涤。干燥(MgSO₄)有机相，过滤并在真空中浓缩以得到粗中间体。将粗中间体通过硅胶上的快速色谱法(己烷-EtOAc)纯化以得到131mg的纯物质。将20％Pd(OH)₂/C(30mg)在氮气下加到在6毫升甲醇中的此中间体中。反应混合物以氢气净化几次，并在氢气下搅拌18小时。通过使用4μM聚碳酸酯膜过滤除去催化剂，并以MeOH(4×10毫升)冲洗。将合并的滤液在真空中浓缩以得到89mg的粗胺中间体。

化合物264D是通过146E所述相似的方法由此中间体制备。其具有分析HPLC保留时间＝2.72分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝546。

将TFA(2.5毫升，32.4mmol)加到化合物264D(120mg，0.22mmol)在3毫升的CH₂Cl₂中的搅拌溶液中。混合物在室温下搅拌40分钟，在真空中浓缩，并通过制备型HPLC纯化以得到71mg(产率：73％)的化合物264。其具有分析HPLC保留时间＝1.54分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝446。

实施例265

N-[(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]甲磺酰胺

化合物265A的制备

化合物265A是通过化合物262D所述相似的方法由化合物262C(手性，区域异构体(regioisomer)B)制备。其具有分析HPLC保留时间＝2.73分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝502。

化合物265B的制备

将甲磺酰氯(15.0mg，0.13mmol)加到化合物265A(60.0mg，0.12mmol)和Et₃N(0.05毫升，0.36mmol)在4毫升的DCM中的搅拌混合物中。此反应混合物在室温下搅拌20小时然后以100毫升的EtOAc稀释。混合物以饱和NaHCO₃溶液(20毫升)和盐水(20毫升)洗涤。将EtOAc层干燥(MgSO₄)，过滤并在真空中浓缩以得到70mg的定量产率的化合物265B。化合物265B具有分析HPLC保留时间＝2.61分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝580。

化合物265是通过化合物249A所述相似的方法由化合物265B(手性，区域异构体B)制备。化合物265的结构是根据将其¹H-NMR与化合物264的¹H-NMR相比较来确定的。该化合物具有分析HPLC保留时间＝1.50分钟(Phenomenox S5 C18-HC 4.6×50毫米柱，10-90％甲醇水溶液，包含0.1％TFA，经历4分钟，4毫升/分钟，于220nm监测)和LC/MS M⁺+1＝446。

实施例266

N-[(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]甲磺酰胺(对映异构体A)

266(对映异构体A)

化合物266是由264通过手性制备型HPLC分离以具有ee≥99％的第一洗脱峰获得。化合物127A具有HPLC保留时间＝6.3分钟(手性Pak，AD250×4.6毫米柱，10微米，220nM，0.8毫升/分钟，EtOH作为洗脱剂)。LC/MSM⁺+1＝446。

实施例267

N-(3S，4S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]甲磺酰胺(对映异构体B)

267(对映异构体B)

化合物267是由264通过手性制备型HPLC分离以具有ee≥99％的第二洗脱峰获得。化合物267具有HPLC保留时间＝7.9分钟(手性Pak，AD250×4.6毫米柱，10微米，220nM，0.8毫升/分钟，EtOH作为洗脱剂)。LC/MSM⁺+1＝446。

Claims (9)

1.下式的化合物或其药学上可接受的盐，

其中

X为-NH-；

R²为芳基或被取代的芳基，其中所述被取代的芳基被一至四个下列取代基所取代：烷基、炔基、卤基或烷氧基，其中所述芳基为苯基；

R⁶、R^6a和R^6b独立地选自一或多个氢、-NH₂、OH、烷氧基、-CONR⁴R⁵、-NR⁴SO₂烷基、-NR⁴SO₂NR⁴R⁵、-OCONR⁴R⁵、-NH烷基和-NHCO烷基；

R³、R⁴和R⁵独立地选自氢和烷基；和

n为1，

其中所述烷基或者所述烷氧基中的烷基部分具有1至7个碳原子，所述炔基具有2至8个碳原子。

2.具有下式的化合物或其药学上可接受的盐

3.选自下列的化合物：

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-(3-氯-4-氟苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-苯基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

5-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-N-(3-乙炔基苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

5-[(4-氨基哌啶-1-基)甲基]-N-(4-氟-3-甲氧基苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

(3R，4R)-4-氨基-1-[[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇，

(3S，4S)-4-氨基-1-[[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-[[4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇，

(3S，4S)-4-氨基-1-[[4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-[[4-[(3-甲氧基-4-氟苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基]甲基]哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)-氨基]吡咯并[2，1-f]-[1，2，4]-三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙氧基苯基)-氨基]-吡咯并[2，1-f]-[1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-醇

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基-4-甲基-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-溴苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]-三嗪-5-基}甲基)-哌啶-3-醇，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-氟-5-甲氧基-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-醇，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇，

(3R，4S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-氯苯基)氨基]-吡咯并[2，1-f][1，2，4]-三嗪-5-基}甲基)-哌啶-3-醇，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-醇，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇，

(3R，4S)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)-氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-醇，

(3R，4S)-4-氨基-1-({4-[(3-氯苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]-三嗪-5-基}甲基)-哌啶-3-醇，

氨基甲酸(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基酯，

氨基甲酸(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)-氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-基酯，

氨基甲酸(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-基酯，

氨基甲酸(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-基酯，

氨基甲酸(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)-氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3-基酯，

(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-3-甲基哌啶-3-醇，

(3R/S，5R/S)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3，5-二醇，

(3S，5S)-4-氨基-1-({4-[(4-氟-3-甲氧基-苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}-甲基)哌啶-3，5-二醇，

(3R，5R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)-氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3，5-二醇，

5-{[(3R，4R)-4-氨基-3-甲氧基哌啶-1-基]甲基}-N-(3-甲氧基苯基)吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-(甲基磺酰基)哌啶-3-甲酰胺，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-乙炔基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-甲基哌啶-3-甲酰胺，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)-N-甲基哌啶-3-甲酰胺，

(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-甲酰胺，

((3R，4R)-1-((4-(3-甲氧基苯基氨基)吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-5-基)甲基)-4-((R)-1-苯基乙基氨基)哌啶-3-基)甲醇，

N-[(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]脲，

N-[(3R，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]甲磺酰胺，和

N-[(3S，4R)-4-氨基-1-({4-[(3-甲氧基苯基)氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-5-基}甲基)哌啶-3-基]甲磺酰胺，

或其药学上可接受的盐。

4.药物组合物，其包含一种或多种权利要求1的化合物和药学上可接受的载体。

5.药物组合物，其包含权利要求2的化合物和药学上可接受的载体。

6.药物组合物，其包含一种或多种权利要求3的化合物和药学上可接受的载体。

7.一种或多种根据权利要求1的化合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。

8.一种或多种根据权利要求1的化合物在制备用于抑制受体酪氨酸激酶活性的药物中的用途。

9.根据权利要求8的用途，其中所述受体酪氨酸激酶选自HER1、HER2和HER4。

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