CN1753682A - 用于前列腺疾病的草药组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了预防或治疗及改善包括前列腺炎、良性前列腺增生及前列腺癌在内的前列腺疾病的方法和组合物。所述方法包括将包含下列草药成分及其它成分的物质组合物进行给药:天冬、独活、天花粉、黄芩、当归、续断、杜仲、灯心草、知母、木通、瞿麦、车前子、黄柏(煎制)、大黄、羌活、乳香、栀子、黄芪、升麻、柴胡、没药、石膏、地黄(生)、石韦、石菖蒲、粉萆薢、乌药、肉苁蓉、赤芍、山药、芡实、牡丹皮、猪苓、熟地黄、通草、薏苡仁、麦芽(茯苓)、制川乌、泽泻、肉桂、细辛、甘草、玉米须、赤小豆L,并可选包含灵芝。
Description
发明背景
发明领域
本发明通常涉及用于预防或治疗前列腺疾病的组合物及方法。更具体地,本发明涉及用于预防或治疗前列腺癌、良性前列腺增生或前列腺炎,以及用于缓解这类前列腺疾病的症状和增强其体征的组合物和方法。
背景技术
目前,通常使用和开方的上千种药物或者源自植物来源或者含有植物化合物的化学模拟物。许多这些药物制剂含有草药成分或草药提取物。从技术的角度讲,草药是小型的非木质(即肉质茎的)、一年生或多年生的种子植物,在每一生长季的末期其所有的地上部分均会枯萎。如该术语广泛使用的及本文所用的含义,草药是具有药用价值的任意植物或植物部分。因此术语草药通常也指可用于治病的种子、叶、茎、花、根、浆果、茎皮或任意其它植物部分。
通常,饮食补充剂指由一种或多种诸如维生素、矿物质和蛋白的基本营养素制成的产品。1994年通过的饮食补充剂保健和教育法案(DSHEA)将该定义扩展到包含用于作为日常饮食的补充剂摄取的任何产品(一些特例除外)。这包括维生素;矿物质;草药、植物性药材及其它植物来源的物质;和氨基酸(构成蛋白的独立单元)及这些物质的浓缩物、代谢物、成分和提取物。饮食补充剂通常为诸如胶囊、片剂、溶液、粉末、软凝胶等的剂型,并且通常不能表示为常规食品或单独作为膳食或日常饮食的食品(1994年饮食补充剂保健和教育法案,第三部分)。
DSHEA的通过确立了新的饮食补充剂的规范框架(饮食补充剂保健和教育法案,公法第103-417,108 Stat.4325(1994))。DSHEA修改了联邦食品药物和化妆品法案,允许补充剂生产商对饮食补充剂的营养支持作用作出某些受限的声明,包括如下的声明:(1)声明对常规营养缺乏疾病的益处,并公开这类疾病在美国的普遍程度;(2)描述营养或饮食成分影响人体的结构或功能的作用;(3)描述营养或饮食成分维持这类结构或功能的作用的已证明的机制特征;或(4)描述食用营养或饮食成分的一般益处(饮食补充剂保健和教育法案,公法第103-417§6,108 Stat.4325,4329(1994))。
饮食补充剂可广泛地从许多商业渠道获得,包括保健食品商店、食品杂货店、药方和邮购。在美国曾经最流行的饮食补充剂类型是多微生物/矿物质片剂或胶囊,其可通过处方或非处方(“over the counter”)形式从药房购得。严格含有草药制剂的补充剂的获得渠道则没有那么广泛。目前在美国,可以得到大批的补充剂产品,其包括微生物、矿物质、其它营养物质和植物补充剂以及动物或植物来源的成分和提取物。
前列腺是胡桃大小的、雄性体内的粘液生成器官,其位于膀胱下方。通常前列腺终生都在生长和增大。已知的前列腺的唯一功能是产生在生殖过程中滋养和保护精子的分泌物。多数哺乳动物中从膀胱排泄尿液的管道-尿道穿过前列腺。然而,随着雄性的年龄增长,这种解剖学特征会产生通常与排尿困难相关的问题。
对于男性,前列腺是包括前列腺炎和良性前列腺增生(BPH)在内的多种常见病的起源,其中前列腺发炎并增大。前列腺炎定义为前列腺的炎症或感染。虽然前列腺可以是急性的,伴随观察到系统性的发热、发冷及僵直,但多数情况下前列腺都是慢性的,并且尽管经过适宜的常规治疗,其还是倾向于相对频繁地复发,因而难以治愈。慢性前列腺炎(前列腺发炎或感染)对所有成年男性是很普遍的。其事实上与所有的前列腺癌病例相关联,并且不考虑其它发现其存在于每一前列腺活组织检查中。在许多男性中,慢性前列腺炎不会引起明显症状,但在其它男性中可以是破坏性的疾病,其严重影响那些患者的生活质量。其难以诊断且更难以治疗。
慢性前列腺炎最常见的症状是骨盆痛,伴随各种排尿症状、阳痿和不育。前列腺炎造成的疼痛通常位于腹股沟、睾丸和阴茎、直肠正上方或膀胱上方的耻骨区域。疼痛经常与射精相关联。由前列腺炎造成的典型排尿症状包括夜晚起床排尿(夜尿症)、尿频尿急、尿不尽、尿线无力、排尿中断和需要按压排尿。阳痿和勃起困难以及男性不育也与前列腺炎相关。
Wheeler的美国专利第6,197,039号公开了前列腺制剂组合物,据称可对前列腺疾病特别是前列腺炎提供全天然非手术的预防或改善效果,并减轻前列腺炎症状以及增强其体征。所述组合物的配方优选包括治疗有效剂量的下列成分:维生素C、维生素B6、维生素E、锌、甘氨酸、L-丙氨酸、谷氨酸、沙巴棕、Pygeum提取物、南瓜子、荨麻属(Stingingnettle)、紫锥花属、大蒜、银杏叶和硒。
根据以上
Wheeler所述,对前列腺炎存在多种治疗方法,但仅有少数在较少百分比的病例中真正有效。没有任何所述常规治疗能增进前列腺的卫生和健康。
在前列腺炎治疗中,医生曾经推荐过各种方法,从什么也不做到抗生素、其它药物和改变生活方式的多种长期过程。那些真正患有可证实的前列腺感染的患者可受益于抗生素。这些治疗需要连续进行至少6-12周,而在某些情况下需要长期或不定期的抗生素抑制治疗。
BPH自然发生于多数50岁以上的男性中。在这一年龄,男性身体开始将睾丸酮(男性性激素)在前列腺内转化为更高水平的二羟基睾丸酮(DHT)。这主要是由于更高水平的还原酶,其引起了睾丸酮到DHT的转化。DHT倾向于与前列腺受体细胞结合,其最终导致前列腺增大。其通常是良性状态,因此某些情况下不需要手术。然而,前列腺增大可导致许多不适及恼人的症状。恶化的症状可能需要前列腺手术。每年约进行400,000例前列腺手术来治疗前列腺增大。很多实验室正在进行研究试图找到治疗BPH的方法。
此外,根据以上
Wheeler所述,用于前列腺疾病的治疗包括α阻滞剂,例如HYTRIN(盐酸特拉唑嗪,Abbott Laboratories,Abbott Park,Illinois)、CARDURA(Roerig Pharmaceuticals,Alexandria,Virginia)及FLOMAX(坦舒洛辛,Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals,Ridgefield,Conn.),其设计用来使前列腺中的肌肉紧张状态放松并改善尿液流动。它们确实有助于改善排尿困难和舒张前列腺中的压力。然而,其价格昂贵,需要不定期的高剂量使用,通常具有明显的副作用,并且不能治疗潜在问题或预防复发。
也有其它治疗前列腺疾病的方法。例如,PROSCAR(非那司提,MerckHuman Health,White House Station,N.J.)能使前列腺组织收缩,但没有证据证明其帮助治疗前列腺炎。基于尿酸结晶可在前列腺中形成并引起炎症的理论,一种降低体内尿酸水平的药物别嘌呤醇(Allopurinol)被用于治疗前列腺炎。对许多患者,诸如布洛芬的抗炎试剂和热坐浴可帮助治疗由于前列腺炎引起的不适,但这些治疗中没有一种能真正治疗该疾病,并且所述效果迅速减弱。
诸如奥昔布宁(DITROPAN Alza Corporation,Palo Alto,Calif)的膀胱松弛剂可减轻刺激性排尿症状,而诸如阿米替林(ELAVIL AstraZeneca,Wilmington,Del.)的抗抑郁药对诸如与抑郁相关的前列腺炎的各种慢性疼痛状态有帮助。生物反馈、行为疗法、转到疼痛门诊及心理治疗均曾被推荐给患有前列腺炎的患者,而有时可使所选择的个体有所缓解。但对多数情况,现有前列腺炎治疗方法通常很令人失望。
使用前列腺按摩法配合抗生素有某些成功的病例。然而,前列腺按摩法的支持者(多数在菲律宾群岛)很少有可再现的数据来支持他们的方法。其它缺点包括在按摩时有强烈的不适/疼痛,需要精确的前列腺液培养物,以及依赖抗生素来最终产生治疗效果。
已知有天然成分对治疗前列腺增大和前列腺炎有益。普遍接受锌对降低前列腺增大具有阳性作用,但研究表明口服的锌剂量不能有效达到前列腺组织。因此,该前列腺剂量不能达到其全部的效果。其它研究表明非洲臀果木(Pygeum africanum)提取物对减小前列腺的尺寸具有一定效果。广泛研究表明沙巴棕(Serenoa repens)有效地降低已经增大的前列腺的尺寸以及恢复其功能。另一已知的对增大的前列腺产生有益效果的天然产物是南瓜子。几个世纪以来,南瓜子被用作民间验方,并且人们认为匈牙利吉普赛人、乌克兰人和特兰西瓦尼亚人不会患上BPH,因为他们从小就食用南瓜子作为其每日的食品。
此外,根据以上
Wheeler所述,中国人使用三种氨基酸——甘氨酸、L-丙氨酸和谷氨酸结合来治疗前列腺疾病。PROSTAMAX(HankintatukkuNatural Products Co.,Helsinki,Finland)是一种市售的前列腺制剂,其每片的配方为维生素C 10mg、维生素B6 10mg、维生素E(琥珀酸盐)5IU、锌螯合物10mg、L-甘氨酸120mg、丙氨酸120mg、沙巴棕106mg、非洲臀果木提取物10mg、草药非洲臀果木20mg、南瓜子200mg、荨麻属叶75mg、紫锥花属25mg、银杏20mg、野生甘薯20mg和熊果10mg。
Gideon的美国专利第5,736,144号描述了由小红萝卜制得的药茶。该茶用作抗菌剂或抗炎试剂,并且据报道对治疗前列腺炎有效。
Juvin的美国专利第4,258,037号描述了据称可用于治疗诸如前列腺疾病和前庭大腺炎的男性和女性泌尿生殖疾病的治疗组合物。该组合物含有Pygeum或其它蔷薇科灌木的提取物,以及诸如甘氨酸、L-谷氨酸或L-丙氨酸的单胺化的氨基酸。
Perez的美国专利第5,543,146号描述了用于缓解与前列腺增大相关的症状的饮食补充剂组合物。该组合物包括南瓜子、锌、镁、维生素E、沙巴棕和非洲臀果木,但不包括荨麻属、锌、大蒜、银杏、谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、紫锥花属和熊果。
前列腺癌是引起男性死亡的主要原因。在美国,最近的估计表明每年有远超过300,000的男性被诊断为前列腺癌。虽然,许多较小的局限性前列腺癌并不威胁生命,但那些扩散到体内其它位置的前列腺癌则几乎都是致命的。常规治疗包括根治性前列腺切除术、神经保护前列腺切除术(nerve-sparing prostatectomy)、外线束辐射、seed辐射、冷冻疗法和激素疗法。这些疗法中每一种都有严重的副作用和其它局限,并且频繁复发。
血清PSA(前列腺特异抗原)是用于检测前列腺癌发展阶段和治疗进程的诊断参数。血清PSA同时检测正常前列腺和前列腺中的癌组织释放的物质。对正常前列腺,PSA读数为0-4。PSA上升(高于5)标志前列腺癌、良性前列腺增生或前列腺炎的信号。PSA读数越高,则肿瘤体积越大。
Chen等的美国专利第5,665,393号公开了用于治疗前列腺疾病状态的草药组合物,包括来自以下草药的物质:三七、菘蓝、灵芝、菊花、光果甘草、黄芩、冬凌草、锯榈果(Serenoa repens)。优选地,来自这类草药中每一种的所述物质为干燥的切下植物部分和人参的醇提取物。所述三七和每种其它物质的干重对干重比为1∶1-6。所述组合物通过口服给药或栓剂给药。
Chen还公开了所述草药组合物的结合给药,包括给予治疗有效剂量的对前列腺癌有效的抗癌化合物或诸如抗生素、抗代谢剂和细胞毒素剂的通常对治疗感染或恶性肿瘤有效的其它试剂,其中所述抗癌化合物例如促黄体激素释放激素、雌激素、抗雄激素物质、促性腺激素释放素及其具有激素活性的合成类似物。
Fan等的美国专利第5,417,979号公开了用于治疗非前列腺癌的其它癌症的组合物,包括草药灵芝、冬凌草和光果甘草剂其它草药。
Lee等的美国专利第5,721,134号公开了灵芝KCCM 10045,其产生具有抗肿瘤免疫效果的蛋白多糖(G009)。
Aburada等的美国专利第4,613,591号公开了用于增强丝裂霉素C和盐酸阿霉素的抗肿瘤活性并降低与其使用相关的副作用的支座(adminiculum),包括黄芪、肉桂、地黄、白芍、日本芎草穷、苍术、当归、人参、茯苓和甘草的粗制剂的水提取物或水性有机溶剂提取物。同时还公开了制备该支座的方法及其使用方法。此外,公开了治疗肿瘤患者的组合物和方法。
Okuda等的美国专利第4,618,495号公开了用于通过改善脂质代谢作用来减少癌症症状和通过抑制毒性激素L的促脂质降解作用来消除或减少肿瘤患者的食欲减退的组合物,包括一种或多种选自以下材料的粗制剂的水提取物或水性有机溶剂提取物:黄芪、肉桂、地黄、白芍、日本芎草穷、苍术、当归、人参、茯苓和甘草。同时还公开了制备该组合物的方法,和使用该组合物减轻癌症症状的方法。
因此需要用于预防和治疗前列腺疾病,特别用于预防或治疗前列腺癌、良性前列腺增生或前列腺炎,用于缓解这类前列腺疾病的症状并增强其体征,以及保持前列腺健康的组合物和方法。
发明概述
本发明的主要目的是提供对预防和治疗包括前列腺炎、良性前列腺增生和前列腺癌在内的前列腺疾病具有有益效果的组合物。
本发明的另一目的是提供对各种前列腺疾病症状具有有益效果的组合物,所述症状包括前列腺特异抗原(PSA)血液水平的提高和诸如夜晚起床排尿(夜尿症)或者尿频尿急的刺激性排尿症状。
本发明的再一目的是提供用于预防和治疗前列腺疾病的全天然成分的组合物,其没有不利的副作用,不与任何药物有相互作用,并可以固体、液体或各种其它形式口服给药。
本发明的再一目的是提供使用本发明组合物预防和治疗前列腺疾病及保持前列腺健康的方法。
本发明通过提供包括草药和真菌或其提取物的组合物满足了这些和其它目的,该组合物可用于预防或治疗前列腺疾病,也可用作保持或增进前列腺健康的饮食补充剂。本发明的草药和真菌及其提取物的组合物可极大改善前列腺疾病患者的疾病状态,并缓解诸如血清PSA水平升高和夜尿症及尿频尿急的症状,所述前列腺疾病包括前列腺炎和前列腺癌。
本发明组合物的一个实施方案包括至少44种特殊草药成分或其它天然成分,或其提取物。优选地,所述组合物还包括灵芝。优选地,得自每种所述草药或真菌的物质是干燥的切下的植物或真菌部分的水提取物。特别优选地,所述草药成分和每种其它物质的相对用量(干重对干重比例)处于本发明的具体范围内。本发明组合物优选制成可吸收的形式,例如粉末、胶囊或片剂。
本发明还提供治疗包括前列腺炎、良性前列腺增生和前列腺癌在内的前列腺疾病的方法。一种这类方法是用于治疗需要治疗前列腺癌的个体,其包括将治疗有效剂量的本发明草药组合物给药。优选地,本发明方法还包括将治疗有效量的对前列腺癌有效的抗癌化合物给药,所述抗癌化合物选自促黄体激素释放激素、雌激素、抗雄激素物质、促性腺激素释放素及其具有激素活性的合成类似物。优选地,本发明也提供还包括将治疗有效量的选自抗生素、抗代谢剂和细胞毒素剂的化合物给药的方法。
因此,本发明的一方面涉及包括如下草药成分和其它成分的组合物:天冬(Radix Asparagi)、独活(Radix Angelicae Pubescentis)、天花粉(RadixTrichosanthis)、黄芩(Radix Scuttellariae)、当归(Radix Angelicae Sinensis)、续断(Radix Dipsaci)、杜仲(Cortex Eucommiae)、灯心草(Medulla Junci)、知母(Rhizoma Anemarrhenae)、木通(Caulis Akebiae)、瞿麦(Herba Dianthi)、车前子(Semen Plantaginis)、黄柏(煎制)(Cortex Phellodendri)、大黄(Radixet Rhizoma Rhei)、羌活(Rhizoma seu Radix Notopterygii)、乳香(Olibanum)、栀子(Fructus Gardeniae)、黄芪(Radix Astragali seu Hedysari)、升麻(Rhizoma Cimicifugae)、柴胡(Radix Bupleuri)、没药(Myrrha)、石膏、地黄(生)(Radix Rehamanniae)、石韦(Folium Pyrrosiae)、石菖蒲(RhizomaAcori Graminei)、粉萆(Rhizoma Dioscoreae Hypoglaucae)、乌药(RadixLinderae)、肉苁蓉(Herba Cistanche)、赤芍(Radix Paeoniae Rubra)、山药(Rhizoma Dioscoreae)、芡实(Semen Euryales)、牡丹皮(Cortex Mouton)、猪苓(Polyporus Umbellatus)、熟地黄(Radix Rehmanniae Praeparata)、通草(Medulla Tetrapanacis)、薏苡仁(Semen Coicis)、麦芽(茯苓)(Fructus HorediGerminatus(Poria))、制川乌(Radix Aconiti Praeparata)、泽泻(RhizomaAlismatis)、肉桂(Cortex Cinnamomi)、细辛(Herb Asari)、甘草(RadixGlycyrrhizae)、玉米须(Stigma Maydis)及赤小豆L(Phaseolus Radiatus L.)。在优选实施方案中,该组合物还包括灵芝(Ganoderma Lucidum)。
本发明组合物的另一实施方案包括上述组合物,还包括至少一种选自以下成分的草药或其它成分:百合(Bulbus Lilii)、橘皮(Citri ReticulataeViride)、牡丹根皮(Cortex Moutan Radicis)、地骨皮(Cortex Lycii Radicis)、五灵脂(Faecs Trogropterori)、金银花(Flos Lonicerae)、益智(Fructus AlpiniaeOxyphyllae)、枳实(Fructus Aurantii Immaturus)、蛇床子(Fructus Cnidii)、山茱萸(Fructus Corni)、五味子(Fructus Schisandrae)、牛蒡子(FructusArctii)、锁阳(Herba Cynomorii)、淫羊藿(Herba Epimedii)、益母草(HerbaLeonuri)、扁蓄(Herba Polygoni Avicularis)、牛膝(Radix AchyranthisBidentatae)、草乌(Radix Aconiti Kusnezoffii)、白芷(Radix AngelicaeDahuricae)、木香(Radix Aucklandiae)、威灵仙(Radix Clematidis)、党参(Radix Codonopsis Pilosulae)、秦艽(Radix Gentianae Macrophyllae)、麦冬(Radix Ophiopogonis)、白芍(Radix Paeoniae Alba)、远志(Radix Polygalae)、汉防己(Radix Stephaniae Tetrandrae)、桂枝(Ramulus Cinnamomi)、苍术(Rhizoma Atractylodis)、射干(Rhizoma Belamcandae)、延胡索(RhizomaCorydalis)、川芎(Rhizoma Ligustici Chuanxiong)、羌活(Rhizoma seu RadixNototerygii)、生姜(Rhizoma Zingiberis Recens)、柏子仁(Semen Biotae)、菟丝子(Semen Cuscutae)、白扁豆(Semen Dolichoris Album)、牵牛子(SemenPharbitidis)、桃仁(Semen Persicae)、夏枯草(Spica Prunellae)及玉米须(Stigma Maydis)。
优选地,本发明组合物包括每种所述指定草药成分的水提取物、醇提取物或醇-水混合提取物。然而,所述指定成分的其它形式也可考虑,包括所述指定天然成分的干燥形式的混合物,例如整株干燥植物或植物部分,或研磨的干燥植物或部分的粉末,或植物和其它成分的提取物或煎剂的粉末。
在特别优选的实施方案中,本发明组合物包括特定比例的以下草药成分及其它成分的水提取物:天冬(6∶1)、独活(6∶1)、天花粉(9∶1)、黄芩(4∶1)、当归(1∶1)、续断(1∶1)、杜仲(1∶1)、灯心草(1∶1)、知母(4∶1)、木通(8∶1)、瞿麦(8∶1)、车前子(6∶1)、黄柏(煎制)(8∶1)、大黄(4∶1)、羌活(1∶1)、乳香(1∶1)、栀子(7∶1)、黄芪(15∶1)、升麻(4∶1)、柴胡(4∶1)、没药(1∶1)、石膏(18∶1)、地黄(生)(15∶1)、石韦(9∶1)、石菖蒲(6∶1)、粉萆(6∶1)、乌药(6∶1)、肉苁蓉(1∶1)、赤芍(6∶1)、山药(9∶1)、芡实(6∶1)、牡丹皮(1∶1)、猪苓(6∶1)、熟地黄(1∶1)、通草(6∶1)、薏苡仁(8∶1)、麦芽(茯苓)(9∶1)、制川乌(6∶1)、泽泻(6∶1)、肉桂(3∶1)、细辛(4∶1)、甘草(3∶1)、玉米须(18∶1)、赤小豆L(31∶1)及灵芝(1∶1),其中所述比例为其干重与含量最少的成分的干重的比值(如以上表2所列)。
本发明组合物特别是包括所述指定的成分提取物的组合物,可选进一步包括药物可接受的载体、稀释剂或添加剂,以用作药物组合物。另一方面,本发明提供包括本发明组合物的饮食添加剂。
本发明组合物的优选实施方案提供包括表2所列的草药成分和其它成分的混合物的物质组合物,其中所述混合物中各成分的含量使得该混合物能有效预防或治疗哺乳动物的前列腺疾病,包括前列腺炎、良性前列腺增生和前列腺癌。优选地,该组合物可对其产生效果的哺乳动物是怀疑有或患有前列腺疾病的人。特别地,这类混合物可有效地降低血清中已经上升到高于正常值的前列腺特异抗原(PSA)水平,以及减少前列腺炎的刺激性排尿症状。
在本发明组合物的优选实施方案中,所述混合物可有效缓解患有前列腺癌的人或其它哺乳动物的至少一种癌症表现。缓解前列腺癌表现包括但不限于降低该肿瘤的生长速率或质量。
另一方面,本发明提供预防或治疗哺乳动物的诸如前列腺炎、良性前列腺增生和前列腺癌在内的前列腺疾病的方法,包括将本发明的物质组合物对所述哺乳动物定期给药一段足够预防或治疗该哺乳动物的前列腺疾病的时间。在本发明方法的一个实施方案中,所述疾病是前列腺癌,而所述给药在手术去除所述肿瘤之前进行,以减小所述肿瘤尺寸,并使该肿瘤与周围正常组织的分离更加容易。优选地,本发明组合物的定期给药是每天给药一次或两次,或者每周给药三次或四次。
任意地,所述治疗前列腺癌的方法还包括将有效剂量的对前列腺癌有效的抗癌化合物或选自抗生素、抗代谢剂和细胞毒素剂的化合物给药,所述抗癌化合物选自促黄体激素释放激素、雌激素、抗雄激素物质、促性腺激素释放素及其具有激素活性的合成类似物。使用每种这些试剂来治疗前列腺癌、前列腺炎或其它前列腺疾病状态的方法是本领域公知的。
本发明的再一方面提供改善与哺乳动物的包括前列腺炎、良性前列腺增生和前列腺癌在内的前列腺疾病相关的症状的方法,所述哺乳动物优选患有这类疾病的人类。该方法包括将本发明的物质组合物对所述哺乳动物定期给药一段足够产生所需改善效果的时间。
附图的简要说明
图1显示了六周的研究时间内,与对照组相比,三组给食不同量的本发明草药提取物的注射了人前列腺(DU145)肿瘤细胞的小鼠的周平均肿瘤体积降低效果。
图2显示了草药提取物对接种人前列腺肿瘤细胞后的小鼠的肿瘤发生率的影响。
图3显示了草药提取物对每一治疗组移出的肿瘤重量的分布的影响。
图4用散布范围显示了每一治疗组移出的肿瘤重量的平均值。
图5显示了经总体照片检测,草药提取物对移出时的肿瘤体积的影响。
图6显示了不同批次和剂量的草药提取物对肿瘤发生率的影响。
图7显示了给食不同批次和剂量的草药提取物的各组和对照组的小鼠的周平均肿瘤体积。
图8显示了所选的移出的肿瘤的照片,其直观地说明了用所述草药提取物治疗的动物的肿瘤尺寸减小效果。
图9显示了草药提取物对各种批次和剂量的提取物的外殖块的平均肿瘤重量的影响。
图10显示了草药提取物对肿瘤细胞增殖的影响,通过增殖细胞核抗原(PCNA)检测作为细胞增殖速率的指标。
图11显示了用于PCNA的所选染色肿瘤切片的照片,说明了各种草药提取物剂量的典型可视区。
图12显示了草药提取物对给食不同批次和剂量的草药提取物的各组和对照组的小鼠的周平均肿瘤体积的影响。
图13显示了草药提取物对图12中所用的相同小鼠的移出时的平均肿瘤重量的影响。
图14显示了包括在图13所示的平均值中的各小鼠的肿瘤重量。
图15显示了草药提取物对用两种不同批次提取物进行的第三次试验的所选动物组的肿瘤细胞增殖的影响,其通过PCNA检测作为细胞增殖速率的指标。
发明的详细说明
本发明部分基于如下发现,即选自下面表1所列的成分的各种组合的水性提取物粗制剂对包括前列腺炎、良性前列腺增生和前列腺癌在内的前列腺疾病具有有益效果。在长期前列腺疾病研究过程中,本发明人配制了多种以草药、动物和矿物为基础的组合物,并评定了其对人类个体和/或动物模型的刺激性排尿症状、升高的血清PSA水平以及前列腺细胞肿瘤的治疗效果。
根据众多使用各种草药为基础的组合物治疗前列腺疾病症状的临床评估的结果开发了本发明的组合物。如本文所述,本发明组合物可用于替代常规药物或作为补充来控制或减轻处于活跃阶段的前列腺疾病状态的症状,并在其变活跃前预防前列腺疾病状态。本发明人的初步研究发现了包括下面表1所列的成分的各种组合的有效组合物。本发明人的后续实验发现了包括下面表2所述的成分的优选组合物。
本发明的草药组合物包括来自下面表1所列的多个属的植物物种的成分。本发明组合物还可包括各种附加成分,例如矿物质(如硫酸钙)、动物产品或药物可接受的载体和/或填充剂。下面对所述组合物的各成分及其提取物进行更详细的描述。
本发明组合物的提取物可通过对选自表1所列的成分的“粗制剂”进行提取来制备。本发明所用的粗制剂可通过商业渠道或中草药领域公知的方法得到。大多数本发明组合物所用的草药成分和其它成分的品质标准在例如中国药典(Chinese Pharmacopeia,1990)中有规定。
通常,本发明的草药组合物从多种特定植物类型的叶和/或根和/或皮部分制得,通过相互结合对预防和治疗前列腺疾病状态有明显和显著的效果。测试了各种草药制剂和提取物,包括表1所列成分中的大多数或全部。实验后,得到表2所列的优选的成分混合物。以下实施例提供了详细的科学结果,本领域所属技术人员可用其制备和给予本发明的组合物。
本发明的粗制剂通常从纯天然中草药制备,将其分别洗涤、干燥并研磨成细粉。其后用例如药用离子交换水(和/或醇或醇-水溶液)分别提取,然后混合在一起。可选择地,提取前可将所述草药和其它成分混合,或用一体积或多体积的溶剂对所述成分依次进行提取。对任何情况,通常所得混合物都要干燥、粉碎、筛选,随后与任意附加成分混合。如本发明举例说明的,最终组合物可结合入任何方便给药的方式,其中口服摄取是优选的给药方法。
更具体地,可将诸如防己的干燥草药成分研磨成细粉来得到粗制剂。可选择地,草药可用水煎(即熬浓)例如两次,首先使用所述草药总重的十倍重量的水,然后使用所述草药总重的八倍重量的水。每次水煮步骤的时间优选为约1到约12小时,更优选为约2小时。然后将水煮所得的材料混合并过滤(如果需要,通过例如蒸发或冻干进行浓缩),进而将滤液浓缩为浓稠的糊状。然后,如果需要向钙浓稠的糊中加入其它成分,随后将所得产物混合、干燥、粉碎、过筛,并再次混合直到达到所需的均匀程度。将所得粉末放入容器或胶囊中用于对患者口服给药。
本发明的提取物也可通过对一种或多种上述粗制剂的混合物进行提取或将每种粗制剂的提取物混合得到。例如,可仅用水或用含5-50v/v%有机溶剂的水对一种或多种粗制剂进行提取,过滤所得溶液,并任意地通过常规干燥装置干燥,其中所述有机溶剂可与水混溶,例如醇,优选乙醇,所述干燥装置例如喷雾干燥器、冷冻干燥器或浓缩干燥器。可在室温或加热条件下进行提取,优选加热至80°-100℃。可将液态提取物本身,或将其与常规辅剂或添加剂混合制成粉末、颗粒、片剂或胶囊。任意地,可通过诸如透析或色谱的常规方式对所述提取物或其中的活性成分进行纯化。以下实施例1示例性地描述了制备本发明提取物的优选方法。
本发明组合物可具体用作治疗某些通常与各种前列腺疾病状态和疾病特别是前列腺炎和良性前列腺增生(BPH)以及前列腺癌相关的症状的饮食补充剂。然而,本发明组合物可用于治疗前列腺炎样症状,不管该疾病状态的实际诱因是什么,也不管所述组合物被划归美国食品和药品管理局(FDA)目录中的哪一类。应用本发明提供的结果,本领域所属技术人员可很容易地实践和开发本发明和所附权利要求定义的食品和治疗方法。
可包括在本发明组合物中的中草药成分以其药材名称和常用及植物来源的名称罗列在下面表1中,同时列出的还有两种非草药成分(石膏及五灵脂,其所列的来源分别为矿物(硫酸钙)和动物(鼯鼠粪)。
表1.草药成分及其它成分和来源 | |
药材名称 | 常用来源名称(植物来源名称) |
百合 | Lilly球茎(百合,细叶百合,卷丹) |
木通 | 铁线莲茎(三叶木通,木通,关木通,毛莨科) |
橘皮 | 果实或果皮(橘,芸香科) |
牡丹根皮 | 牡丹(根)皮(牡丹(毛莨科)) |
肉桂 | 桂皮 |
杜仲 | 硬橡胶树的干燥树皮(杜仲,杜仲科) |
地骨皮 | 枸杞茎皮(枸杞或宁夏枸杞) |
黄柏(煎制) | 黄柏(黄檗或黄皮树,芸香科) |
五灵脂 | Rhizoma Trogopterorum;五灵脂;鼯鼠粪(橙足鼯鼠Milne-Edwards,鼯鼠科) |
金银花 | 金银花;Lonicera flower(忍冬L;红腺忍冬;山银花;Lonicera dsystyla Rehd) |
石韦 | 石韦叶(石韦,相似石韦和有柄石韦;水龙骨科) |
益智 | 黑豆蔻,苦豆蔻(益智) |
枳实 | 未成熟的苦的橙果实(酸橙;甜橙) |
蛇床子 | 日本芎草穷果实(蛇床) |
山茱萸 | 山茱萸果实,北美山茱萸果实(山茱萸) |
栀子 | 栀子果实 |
麦芽(茯苓) | 麦芽(麦芽) |
五味子 | Schisandra fruit(五味子;华中五味子) |
牛蒡子 | Arctium fruit,牛蒡(Arctium lappa L.) |
灵芝 | 灵芝,Royal Gano(reishi、lingzhi、biladi top、young ji、担子菌纲、lamellaless fungus,多孔菌科) |
石膏 | 硫酸钙 |
细辛 | (细辛)满洲细辛;干燥的草药(北细辛,汉城细辛或华细辛,马兜铃科) |
肉苁蓉 | 沙漠生长的肉苁蓉的带鳞屑的干燥的新鲜茎(肉苁蓉,列当科) |
锁阳 | 锁阳的干燥的新鲜茎(锁阳,锁阳科) |
瞿麦 | Pink Dianthus的全植株(瞿麦;石竹) |
淫羊藿 | 干燥的淫羊藿(淫羊藿,箭叶淫羊藿,柔毛淫羊藿,巫山淫羊藿或朝鲜淫羊藿,小檗科)地上部分 |
益母草 | 干燥的益母草(Leonurus heterophyllus Sweet,唇形科)地上部分 |
扁蓄 | 常见扁蓄(蓄,蓼科)的全植株 |
灯心草 | 常见灯心草 |
通草 | 通草 |
没药 | 没药 |
乳香 | 乳香 |
赤小豆L | 绿豆 |
猪苓 | 猪苓(可食用蘑菇,Polyporus umbellatus)的地下块茎样生长体(sclerotia) |
牛膝 | 二齿怀牛膝根(Achyrantes bidentata B1.,苋科) |
草乌 | 草乌根(北乌头,毛莨科) |
制川乌 | 川乌头(Axial)(乌头,毛莨科) |
白芷 | 白芷(杭白芷,伞形科) |
独活 | 白芷属的根(重齿毛当归,伞形科) |
当归 | 当归 |
天冬 | 天冬 |
黄芪 | 黄芪/Mongolian Milkyetch Root |
木香 | 常见木香(Aucklandia lappa Decne.,菊科) |
柴胡 | 柴胡/紫胡 |
成灵仙 | 成灵仙的根和根茎(威灵仙,棉团铁线莲或东北铁线莲,毛莨科) |
党参 | Pilose Asiabell Root/Moderate Asiabell Root/SzechwonTangshen Root |
续断 | 续断,Teasel root(Dipsacus asper Wall.) |
大黄 | 干燥的大黄属根和根茎(掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄,蓼科) |
秦艽 | 大叶龙胆根(秦艽、麻花秦艽、粗茎秦艽或小秦艽;龙胆科) |
甘草 | 甘草,Liquoric Root |
乌药 | 乌药 |
麦冬 | 麦冬(Ophiopogon japonicus Thunb.,Ker-Gawl,百合科) |
白芍 | 白芍 |
赤芍 | 赤芍 |
远志 | 远志(Polygala tenuifolia Willd.或卵叶远志,远志科) |
地黄(生) | 干燥的有块茎的地黄根(地黄或怀庆地黄) |
熟地黄 | 预制的地黄根(地黄) |
黄芩 | 黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi,唇形科) |
汉防己 | 防己(粉防己,防己科) |
天花粉 | 天花粉(栝楼或同属的几种物种,葫芦科) |
桂枝 | 干燥的桂枝嫩茎(肉桂,樟科) |
石菖蒲 | 石菖蒲(Acorus gramineus Soland.,天南星科) |
泽泻 | 泽泻的块茎(Alismataci orientale(Sam.)Juzep.,泽泻科) |
知母 | 常见知母 |
苍术 | 大头苍术(白术,菊科) |
射干 | 射干(Belamcanda chinensis(L.)DC,鸢尾科) |
升麻 | 升麻 |
延胡索 | 延胡索的干燥块茎(齿瓣延胡索,罂粟科) |
山药 | 山药的根茎,薯蓣属(薯蓣) |
粉萆 | Tokoro;粉萆(粉背薯蓣和同属的多种其它物种,薯蓣科,或菝葜属的某些物种,百合科) |
川芎 | 干燥藁本根茎和根(藁本或辽藁本,伞形科) |
羌活 | 羌活根和/或根茎(羌活或宽叶羌活,伞形科) |
生姜 | 新鲜的姜根茎(Zingiber officinale(Willd.)Rosc.,姜科) |
柏子仁 | 柏子仁,侧柏种子(Biota orientalis(L.)Endl.) |
薏苡仁 | 薏苡属的种子(薏苡) |
菟丝子 | Dadder seed,菟丝子(Cuscuta chinensis Lam.;Cuscutajaponica Choisy) |
白扁豆 | 白扁豆 |
芡实 | 芡实 |
牵牛子 | 牵牛子(裂叶牵牛或圆叶牵牛,旋花科) |
车前子 | 干燥的成熟车前草的种子(车前和同属的其它物种,车前 |
草科) | |
桃仁 | 桃仁,桃树种子(桃;山桃) |
夏枯草 | Prunella spike;Selfheal spike(夏枯草,唇形科) |
玉米须 | 玉米花柱和柱头;玉米须(Zea mays L.,禾本科) |
在优选实施方案中,所述草药组合物至少包括下面表2中所列的前44种成分,其选自表1。更优选地,所述提取物还包括表2中的组分45,即灵芝。
表2.优选实施方案的成分 | ||||
Nr | 成分 | 含量(gm) | 与含量最少成分的比例 | 百分比(w/w) |
1 | 天冬 | 640 | 6 | 2.34% |
2 | 独活 | 640 | 6 | 2.34% |
3 | 天花粉 | 860 | 9 | 3.14% |
4 | 黄芩 | 384 | 4 | 1.40% |
5 | 当归 | 100 | 1 | 0.37% |
6 | 续断 | 100 | 1 | 0.37% |
7 | 杜仲 | 100 | 1 | 0.37% |
8 | 灯心草 | 100 | 1 | 0.37% |
9 | 知母 | 384 | 4 | 1.40% |
10 | 木通 | 768 | 8 | 2.81% |
11 | 瞿麦 | 768 | 8 | 2.81% |
12 | 车前子 | 640 | 6 | 2.34% |
13 | 黄柏(煎制) | 768 | 8 | 2.81% |
14 | 大黄 | 384 | 4 | 1.40% |
15 | 羌活 | 100 | 1 | 0.37% |
16 | 乳香 | 100 | 1 | 0.37% |
17 | 栀子 | 668 | 7 | 2.44% |
18 | 黄芪 | 1500 | 15 | 5.48% |
19 | 升麻 | 384 | 4 | 1.40% | |
20 | 柴胡 | 384 | 4 | 1.40% | |
21 | 没药 | 100 | 1 | 0.37% | |
22 | 石膏 | 1820 | 18 | 6.65% | |
23 | 地黄(生) | 1500 | 15 | 5.48% | |
24 | 石韦 | 860 | 9 | 3.14% | |
25 | 石菖蒲 | 640 | 6 | 2.34% | |
26 | 粉萆 | 640 | 6 | 2.34% | |
27 | 乌药 | 640 | 6 | 2.34% | |
28 | 肉苁蓉 | 100 | 1 | 0.37% | |
29 | 赤芍 | 640 | 6 | 2.34% | |
30 | 山药 | 860 | 9 | 3.14% | |
31 | 芡实 | 640 | 6 | 2.34% | |
32 | 牡丹皮 | 100 | 1 | 0.37% | |
33 | 猪苓 | 640 | 6 | 2.34% | |
34 | 熟地黄 | 100 | 1 | 0.37% | |
35 | 通草 | 640 | 6 | 2.34% | |
36 | 薏苡仁 | 768 | 8 | 2.81% | |
37 | 麦芽(茯苓) | 860 | 9 | 3.14% | |
38 | 制川乌 | 640 | 6 | 2.34% | |
39 | 泽泻 | 640 | 6 | 2.34% | |
40 | 肉桂 | 320 | 3 | 1.17% | |
41 | 细辛 | 384 | 4 | 1.40% | |
42 | 甘草 | 320 | 3 | 1.17% | |
43 | 玉米须 | 1820 | 18 | 6.65% | |
44 | 赤小豆L | 3100 | 31 | 11.33% | |
45 | 灵芝 | 96 | 1 | 0.35% | |
总数 | 28,640 | 100% |
所述组合物中中草药与其它成分的确切比例需依据在每一成分中发现的天然活性成分的浓度。使用本文提供的指导以及药物制剂和药理学的基本技术,本领域所属技术人员可容易地调整所述组合物各成分的比例,从而得到具有所论述的及本发明实施例显示的治疗效果的组合物。以下涉及所述组合物中各成分比例的论述只是以示例方式提供的,并没有以任何方式限制本发明的范围,因而本发明范围包括所公开草药成分和非草药成分的具有预期的减轻与本文所述前列腺疾病状态相关症状的效果的任意新组合物。特别地,表2所述的本发明特别优选的组合物的各成分含量可根据各成分的品质改变,例如减半或加倍。
在如表2所述的特别优选的实施方案中,本发明的草药组合物包括从表2的45种成分中的每一种制得的提取物,其相对于含量最低的成分的含量(粗制剂的w/w比例)如本文所示。从表2所示的所述相对量的天然干草药成分制得的提取物混合物干粉的收率约为5-6%。例如,一示例性的制备方法从10kg表2指定的干草药和其它成分开始,如实施例1中所述进行制备,得到548gm提取物干粉(收率约5.5%)。
上述特别优选的实施方案对人的推荐日剂量优选为约12-24gm每日一次或两次,更优选12-18gm每日两次,最短持续时间为一周到约30天。本发明给药方案的连续性以及适当平衡的饮食可持续缓解包括前列腺炎、良性前列腺增生和前列腺恶性肿瘤在内的前列腺疾病状态。此外,该给药方案适于用作手术治疗的准备,帮助实体肿瘤相对于周围组织被分离和包被,从而更利于被取出。该给药方案还适用于对没有前列腺炎和良性前列腺增生症状(BHP)的老年人周期性使用,以预防这类症状的出现,所述症状包括骨盆痛(在腹股沟、睾丸和阴茎中)、和/或排尿症状,以及与前列腺炎有关的阳痿或勃起困难和男性不育,其中所述排尿症状包括夜晚起床排尿(夜尿症)、尿频尿急、尿不尽、尿线无力、排尿中断和需要按压排尿。对任何情况,都必须强调所述给药方案必须包括充足的饮食,从而保证所述个体能产生所需的抗病反应。
本发明的草药组合物及其提取物优选口服给药,并可通过本领域公知的方法制成具有可接受的味道和质地的食品。所述草药组合物和提取物还可以饮食补充剂形式使用,或用作药物制剂如含有本发明组合物的固体、半固体或液体形式,或作为提取物或纯活性成分单独使用,或与适合于外部、肠内或非肠道应用的有机或无机载体或赋形剂混合使用。所述活性成分可与例如常规无毒药物可接受的载体混合制成片剂、药丸、胶囊、栓剂、溶液、乳剂、悬浮液和其它适于使用的形式。本发明制剂包括那些含有诸如滑石、水、葡萄糖、乳糖、阿拉伯胶、明胶、甘露醇、淀粉糊、三硅酸镁、玉米淀粉、角蛋白、胶体硅、马铃薯淀粉、尿素和其它适用于生产固体、半固体或液体形式的制剂的载体。此外,可使用辅剂、稳定剂、增稠剂和着色剂及香料。
为制备诸如片剂或胶囊的固体组合物,将所述提取物或主要活性成分与药物载体(例如常规压片成分,如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨醇、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、磷酸二钙或树胶)和其它药物稀释剂(如水)混合,得到固体处方设计组合物,其含有本发明组合物或其无毒的药物可接受的盐的基本均匀的混合物。当提到基本均匀的处方设计的组合物时,其指所述活性成分均匀分散在整个组合物中,从而可很容易地将该组合物细分为具有同等效果的单位剂量形式,例如片剂、药丸和胶囊。然后将该固体处方设计组合物细分成本领域公知的单位剂量形式,优选为胶囊。可对所述新组合物的片剂或药丸进行包被或复合,从而提供具有作用时间长的优点的剂量形式。例如,所述片剂或药丸可包括内部剂量和外部成分,后者以外壳的形式覆盖在前者上。
本发明新组合物可采用的用于口服或注射给药的液体形式包括水溶液、适当调味的糖浆、水或油悬浮液及含有诸如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油的可食用油以及酏剂和类似的药物载体的调味的乳剂。适用于水悬浮液的分散或悬浮剂包括合成天然树胶,例如黄芪胶、阿拉伯胶、藻酸盐、葡聚糖、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或明胶。用于口服给药的液体制剂可为使用前用水或其它适合载体重组的干产物。这类液体制剂可通过常规装置用药物可接受的添加剂制备,所述添加剂例如悬浮剂(如山梨醇糖浆、甲基纤维素或氢化的可食用脂肪)、乳化剂(如卵磷脂或阿拉伯胶)、非水载体(例如杏仁油、油性酯或乙醇)、防腐剂(如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)和人造或天然着色剂和/或甜味剂。对口腔给药,所述组合物可制成常规方式组方的片剂或锭剂形式。本发明组合物也可通过常规栓剂技术组方和给药。
所述提取物或其活性化合物可组方用于通过注射进行肠道外给药,所述注射包括使用常规导管插入技术或输注。用于注射的制剂可加入防腐剂,且可为单位剂量形式置于如安瓿或多剂量容器中。所述组合物可采用诸如在油性或水性载体中的悬浮液、溶液或乳液形式,并可含有组方试剂,如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。可选择地,所述活性成分可为使用前用适合载体重组的粉末形式,所述载体如无菌的不含热原的水。
实施例1
降低Scid小鼠中的前列腺肿瘤发展
材料:
提取物:通过将由上表2所列的45种药物成分制得的水提取物(“茶”)冻干法来制备本研究使用的提取物,其中通过用一份处于沸点或接近沸点的热水对每一所述成分进行依次提取和/或溶解来制备所述水提取物(通常每100gm总起始物100cc水)。在对最后的成分进行提取后,使溶液冷却至室温,并通过纸滤器(如Whatman#1)过滤以除去不溶物质。
动物食物:
对照食物 Purina 5001大鼠食物(Purina TestDiet,Richmond,IN)
测试食物#1 含240mg/kg草药提取物的Purina 5001大鼠食物
测试食物#2 含480mg/kg草药提取物的Purina 5001大鼠食物
测试食物#3 含720mg/kg草药提取物的Purina 5001大鼠食物
所有测试食物由Purina TestDiet,Richmond,IN制备,并由Purina消毒后(γ辐射)提供。日剂量根据小鼠体重由人使用水平按比例换算得到。然后将该剂量加入小鼠日平均消耗量的所述食物中。
实验设计:
A.
动物:
物种:小鼠
菌株:重症联合免疫缺陷(Scid)小鼠
来源:Universlty of Arizona,Arizona Cancer Center,Tucson,AZ 85724
体重:20-25克
数量/性别:32/雄性或雌性
B.
饲养管理:
笼养:将所述动物每笼两只在微隔离器(micro-isolator)笼中于木材锯末上进行饲养。
食物:每只动物
可无限制地取食Tech-Lad 4%Mouse/Rat Diet。所述生产商分析了该食物中特定重金属、黄曲霉毒素、氯代烃、PCBs、有机磷酸酯及特定营养物质的浓度。将肿瘤细胞注射入所述小鼠中后,给测试动物给食混入Purina 5001基本食物的所述草药提取物食物,而对照组给食不含所述提取物的Purina 5001。
水:
无限制地供应自来水。在回顾原则上对该自来水进行特定微生物、杀虫剂、重金属、碱度和卤素的常规分析。
环境:根据国立卫生研究所实验动物保护和使用准则(NIH Guide forthe Care and Use of Laboratory Animals)将室内温度控制在74°F±10°F,湿度控制在50%±20%。
C.
方法:
通用:用衍生自前列腺癌细胞系DU145的细胞(1×105细胞/小鼠)对SCID小鼠组进行皮下注射(
Carter et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,93,749-753(1996))。对所有4个组注射肿瘤细胞后,立即根据对各组的指定给食不同的食物。所述的4个组如下:1)保持给食常规Purina 5001大鼠食物对照组;2)给食含240mg/kg剂量的草药提取物的Purina 5001大鼠食物的测试组;3)给食含480mg/kg剂量的草药提取物的Purina 5001大鼠食物的测试组;4)给食含720mg/kg剂量的草药提取物的Purina 5001大鼠食物的测试组。
无限制地提供所述食物。
使用测径器(caliper)每周三次定量测定肿瘤尺寸并记录。5-6周时将小鼠处死,采集肿瘤并处理用于组织学评估。对小鼠进行麻醉,使肿瘤暴露,拍摄总体照片并将样本移出。将所述样本放置在Histochoice固定剂中,并处理用于光学显微镜检查(SOP A14-006)。对所述样本进行切片,置于载玻片上,并用H&E(SOP A14-003a)染色。此外,对每一样本用GS-1(SOP A13-004)和增殖细胞核抗原(PCNA)进行免疫组织化学染色,以测定细胞的增殖速率。
实验#1:用7×105DU145肿瘤细胞对30只小鼠进行注射。将小鼠分组,立刻
无限制地用Purina 5001啮齿动物食物进行喂养,其含草药提取物如下:
组1:0.024%(w/w)
组2:0.048%(w/w)
组3:0.072%(w/w)
组4:对照,无提取物
一旦肿瘤建立,即每周3次对肿瘤进行检测并记录。第6周将所有的肿瘤分离。拍摄总体照片,对所有肿瘤进行检测和称重。将肿瘤进行如下分配:2/3用Histochoice固定,而1/3用置于液氮的异戊烷冷冻。
结果:
图1显示了六周的研究时间内,与对照组相比,三组给食不同量的本发明草药提取物的注射了人前列腺(DU145)肿瘤细胞的小鼠的周平均肿瘤体积的降低效果。接种肿瘤细胞约4-5周时,所述对照动物的平均肿瘤体积达到了约0.35-0.40cm3的峰值。每一测试剂量的草药提取物以剂量依赖的方式减小所述平均肿瘤体积。因此,在其它组的肿瘤体积达到峰值之后,给食0.024%(w/w)草药提取物的动物的平均肿瘤体积达到约0.20cm3的峰值,而那些给食0.048%(w/w)草药提取物的动物达到约0.15cm3的峰值,而那些给食0.072%(w/w)草药提取物的动物在本研究末期达到约0.09cm3的最高水平。
图2显示了草药提取物对接种人前列腺肿瘤细胞后的小鼠的肿瘤发生率的影响。在接种肿瘤细胞2-3周时,对照组中带有可触知肿瘤的小鼠的百分比达到90%的高水平。只有最高测试剂量的草药提取物(0.072%(w/w))延迟了可触知肿瘤的发生,仅在第6周出现100%的发生率。
图3和图4显示了草药提取物对移出时的(即研究末期,第6周)肿瘤重量的影响。图3显示了每组移出的肿瘤重量的分布,而图4用散布范围显示了所述平均值。同样,只有最高测试剂量的草药提取物(0.072%(w/w))使移出的肿瘤的重量明显降低,平均值从对照组约0.098克降至约0.042克,降低系数约为2。
图5显示了草药提取物对从总体照片检测的移出时的肿瘤体积的影响。肿瘤体积通常与肿瘤重量成正比,同样,只有最高测试剂量的草药提取物(0.072%(w/w))使移出的肿瘤的体积明显减小。
实施例2
实验#2.评估更大的肿瘤接种物和第二批次的草药提取物
如同实施例1(使用7×105细胞),用1×106DU145肿瘤细胞对30只小鼠进行注射,将其划分为小组,并立即
无限制地给食Purina 5001啮齿动物食物,其含有如下较宽剂量范围的草药提取物:
组1:0.0072%(w/w)(“老”提取物#1=与实施例1同一批次)
组2:0.0072%(w/w)(“新”提取物批次#2,如实施例1中制备)
组3:0.024%(w/w)(“老”提取物#1=与实施例1同一批次)
组3:0.024%(w/w)(“老”提取物#1=与实施例1同一批次)
组4:0.024%(w/w)(“新”提取物批次#2,如实施例1中制备)
组5:0.048%(w/w)(“老”提取物#1=与实施例1同一批次)
组6:0.048%(w/w)(“新”提取物批次#2,如实施例1中制备)
组7:0.072%(w/w)(“老”提取物#1=与实施例1同一批次)
组8:0.072%(w/w)(“新”提取物批次#2,如实施例1中制备)
组9:0.72%(w/w)(“老”提取物#1=与实施例1同一批次)
组10:0.72%(w/w)(“新”提取物批次#2,如实施例1中制备)
组11:对照,无提取物
每周3次检测肿瘤并记录,第6周将肿瘤移出并如以上实施例1所述进行处理。
结果:
图6显示了不同批次和剂量的草药提取物对肿瘤发生率的影响。接种肿瘤细胞2周后,对照组中没有可触知肿瘤的小鼠的百分比开始下降,并在约第4周达到0%。最高测试剂量(0.72%(w/w))的两个批次(#1和#2)的草药提取物均能明显使可触知肿瘤的出现推迟约1-2周,仅在第5周时无肿瘤小鼠的比例达到0%。
图7显示了研究期间给食不同批次和剂量的草药提取物的各组和对照组的小鼠的周平均肿瘤体积。接种肿瘤细胞后第5周,对照组动物的平均肿瘤体积达到约2.0cm3。每一测试剂量的草药提取物均使平均肿瘤体积减小,但没有按照严格的剂量依赖方法。因而,无论使用老(#1)或新(#2)批次,给食0.72%(w/w)的草药提取物的动物的平均肿瘤体积在第5周均达到约0.4cm3,而每一其它剂量在第5周的平均体积为约0.8-1.5cm3。图8显示了所选的移出肿瘤的照片,其直观地说明了用所述草药提取物治疗的动物的肿瘤尺寸减小效果。
图9显示了草药提取物对移出时(即研究末期,第6周)的肿瘤平均重量的影响,显示两种批次的所有测试剂量的草药提取物均可显著降低移出的肿瘤重量,从约750gm降至约200-500gm,降低率约30-70%。
图10和图11显示了草药提取物对肿瘤细胞增殖的影响,其通过增殖细胞核抗原(PCNA)检测作为细胞增殖速率的指标。如图10所示,与对照组相比,除了一组(0.048%的提取物#1)外,进行PCNA测定的剂量(处于最高剂量的动物的肿瘤未检测PCNA)普遍使细胞增殖速率降低,但这些降低并没有显示出明显的剂量依赖性。图11显示了用于PCNA的所选染色肿瘤切片的照片,说明了各种草药提取物剂量的典型可视区。
实施例3
实验#3.再次测试两个批次和剂量
如实施例1所述,用1×106DU145肿瘤细胞对30只小鼠进行注射,将其划分为小组,并立即
无限制地给食Purina 5001啮齿动物食物,其含有如下高剂量或低剂量的草药提取物:
组1:0.072%(w/w)(“老”提取物#1=与实施例1同一批次)
组2:0.072%(w/w)(“新”提取物批次#2,如实施例1中制备)
组3:0.72%(w/w)(“老”提取物#1=与实施例1同一批次)
组4:0.72%(w/w)(“新”提取物批次#2,如实施例1中制备)
组5:对照,无提取物
每周3次检测肿瘤并记录,第6周将肿瘤移出并如以上实施例1所述进行处理。
结果:
图12显示了研究期间草药提取物对给食草药提取物的各组和对照组的小鼠的周平均肿瘤体积的影响。接种肿瘤细胞后第5周,对照组动物的平均肿瘤体积达到约2.8cm3。与未接受提取物的对照动物相比,仅所述0.72%(w/w)剂量的草药提取物#1和0.072%(w/w)剂量的草药提取物#2使所述平均肿瘤体积降至约同等的水平。因而,与对照动物的约2.8cm3的数值相比,第5周时给食0.72%(w/w)草药提取物#1或0.072%(w/w)草药提取物#2的动物的平均肿瘤体积均为约1.3cm3(图12)。图13显示了草药提取物对移出时(即本研究末期,第6周)的肿瘤平均重量的影响,显示当时所有测试剂量的两种批次的草药提取物(除0.72%(w/w)的草药提取物#2)均可显著降低移出的肿瘤重量,从约1.149克降至约0.691-0.500gm,降低率约40-56%。图14显示了这些平均值中包括的各小鼠的肿瘤重量。在实施例2中还观察到与更低剂量的相同提取物相比,0.72%(w/w)的草药提取物#2减小肿瘤体积和重量的效率更低(参见图7和图9),这一点仍无法解释。
图15显示了草药提取物对所选动物组的肿瘤细胞增殖的影响,通过增殖细胞核抗原(PCNA)检测作为细胞增殖速率的指标。因而,用两批次0.072%(w/w)草药提取物得到的PCNA阳性细胞比例的降低效果大致与相同剂量的这两种提取物对肿瘤重量的降低效果成正比(对#1和#2PCNA的降低率分别为60%和50%,相应地,平均肿瘤重量的降低率为45%和40%;图14)。
实施例4
在人类个体中测试
下列病例示例性地说明了菲律宾、台湾和柬埔寨的使用本发明草药提取物的许多其它患者的体验。
病例1:菲律宾的男性患者A的血液测试表明其前列腺特异抗原(PSA)水平为6.1。用表2所示的优选实施方案(除了其中不含Ganodum(灵芝提取物))对他每天给药12gm两次。一周后,他的PSA水平降至5.1。将包含Ganodum的与上述相同的提取物(如表1所示)以相同剂量对他继续给药一周,在这之后他的PSA读数为3.4。这些结果表明将灵芝与所述草药提取物一起使用增强了对PSA水平的药效。
病例2:菲律宾的男性患者B的血液测试显示其PSA水平为5.2。如以上病例1中所述,将含有Ganodum的提取物对其给药,而他的PSA降至3.4。
病例3:菲律宾的男性患者C的血液测试显示其PSA水平为11.2。使用较大剂量的包含Ganodum的提取物对他进行给药(18gm每天两次)。一周后,其PSA水平降至10.6,两周后降至9.8。然后对该患者停止所述提取物给药。停止给药提取物一个月后,其PSA水平上升至10.7。后续给药所述提取物的效果降低(PSA水平保持较高水平)。因而,将所述提取物额外给药约两个月后,所述PSA水平再次逐渐降低至仅9.8。该病例表明所述提取物应当连续给药,直至升高的PSA水平降至正常。
案例4:台湾的男性患者D晚上有频繁尿急(夜尿症)。例如,通常一晚上其至少有5次尿急。其在台湾、日本和大陆用多种药物进行过治疗,但状况没有改善。但其得知本发明的草药提取物后,其持续一个月使用与病例2相同剂量(表2所示的包括Ganodum的优选实施方案,12gm每天两次)。在该月末,其尿急的频率降低至每晚仅约两次。对该个体没有PSA测试结果。
本文将所有涉及的专利、专利申请和出版物全文引入作为参考。
虽然为了清楚说明和便于理解的目的对本发明的某些细节进行了描述,但本领域所属技术人员应当理解,通过阅读本文公开的内容可在不脱离本发明和所附权利要求的范围的条件下对其形式和细节作出各种改变。
Claims (17)
1.含有如下草药成分和其它成分的组合物:
天冬、独活、天花粉、黄芩、当归、续断、杜仲、灯心草、知母、木通、瞿麦、车前子、黄柏(煎制)、大黄、羌活、乳香、栀子、黄芪、升麻、柴胡、没药、石膏、地黄(生)、石韦、石菖蒲、粉萆、乌药、肉苁蓉、赤芍、山药、芡实、牡丹皮、猪苓、熟地黄、通草、薏苡仁、麦芽(茯苓)、制川乌、泽泻、肉桂、细辛、甘草、玉米须及赤小豆L。
2.如权利要求1所述的组合物,还含有灵芝。
3.如权利要求1所述的组合物,还含有选自以下成分的至少一种草药成分或其它成分:
百合、橘皮、牡丹根皮、地骨皮、五灵脂、金银花、益智、枳实、蛇床子、山茱萸、五味子、牛蒡子、锁阳、淫羊藿、益母草、扁蓄、牛膝、草乌、白芷、木香、威灵仙、党参、秦艽、麦冬、白芍、远志、汉防己、桂枝、苍术、射干、延胡索、川芎、羌活、生姜、柏子仁、菟丝子、白扁豆、牵牛子、桃仁、夏枯草及玉米须。
4.如权利要求1所述的组合物,包括每种所含草药成分的水提取物、醇提取物或醇-水混合提取物。
5.如权利要求4所述的组合物,包括特定比例的以下草药成分及其它成分的水提取物,所述比例为其干重与含量最少的成分的干重的比值:
天冬(6∶1)、独活(6∶1)、天花粉(9∶1)、黄芩(4∶1)、当归(1∶1)、续断(1∶1)、杜仲(1∶1)、灯心草(1∶1)、知母(4∶1)、木通(8∶1)、瞿麦(8∶1)、车前子(6∶1)、黄柏(煎制)(8∶1)、大黄(4∶1)、羌活(1∶1)、乳香(1∶1)、栀子(7∶1)、黄芪(15∶1)、升麻(4∶1)、柴胡(4∶1)、没药(1∶1)、石膏(18∶1)、地黄(生)(15∶1)、石韦(9∶1)、石菖蒲(6∶1)、粉萆(6∶1)、乌药(6∶1)、肉苁蓉(1∶1)、赤芍(6∶1)、山药(9∶1)、芡实(6∶1)、牡丹皮(1∶1)、猪苓(6∶1)、熟地黄(1∶1)、通草(6∶1)、薏苡仁(8∶1)、麦芽(茯苓)(9∶1)、制川乌(6∶1)、泽泻(6∶1)、肉桂(3∶1)、细辛(4∶1)、甘草(3∶1)、玉米须(18∶1)、赤小豆L(31∶1)及灵芝(1∶1)。
6.如权利要求4所述的组合物,还包括药物可接受的载体、稀释剂或添加剂。
7.包括权利要求1所述的组合物的饮食补充剂。
8.含有以下草药成分及其它成分的混合物的物质组合物:
天冬、独活、天花粉、黄芩、当归、续断、杜仲、灯心草、知母、木通、瞿麦、车前子、黄柏(煎制)、大黄、羌活、乳香、栀子、黄芪、升麻、柴胡、没药、石膏、地黄(生)、石韦、石菖蒲、粉萆、乌药、肉苁蓉、赤芍、山药、芡实、牡丹皮、猪苓、熟地黄、通草、薏苡仁、麦芽(茯苓)、制川乌、泽泻、肉桂、细辛、甘草、玉米须、赤小豆L及灵芝,
其中所述混合物中所述成分的含量满足使所述混合物在哺乳动物体内有效预防或治疗包括前列腺炎、良性前列腺增生及前列腺癌在内的前列腺疾病。
9.如权利要求8所述的组合物,其中所述哺乳动物为人类。
10.如权利要求9所述的组合物,其中所述混合物能有效降低血清中高于正常的前列腺特异抗原(PSA)水平以及降低前列腺炎的刺激性排尿症状。
11.如权利要求8所述的组合物,其中所述混合物能有效改善患有前列腺癌的哺乳动物的至少一种前列腺癌表现。
12.如权利要求11所述的组合物,其中所述改善至少一种前列腺癌表现包括降低所述癌瘤的生长速度和瘤块大小。
13.预防或治疗哺乳动物的前列腺疾病的方法,包括将权利要求8所述的物质组合物对所述哺乳动物定期给药一段足以治疗或预防所述疾病状态的时间,其中所述前列腺疾病包括前列腺炎、良性前列腺增生及前列腺癌。
14.如权利要求13所述的方法,其中所述疾病和前列腺癌及所述给药在手术去除所述肿瘤之前进行。
15.如权利要求13所述的方法,其中所述定期给药是每天给药一次或两次,或者每周给药三次或四次。
16.如权利要求13所述的方法,还包括将有效剂量的对前列腺癌有效的抗癌化合物或选自抗生素、抗代谢剂和细胞毒素剂的化合物给药,所述抗癌化合物选自促黄体激素释放激素、雌激素、抗雄激素物质、促性腺激素释放素及其具有激素活性的合成类似物。
17.改善哺乳动物中前列腺疾病相关症状的方法,包括将权利要求8所述的物质组合物对所述哺乳动物定期给药一段足够产生所需改善效果的时间,所述前列腺疾病包括前列腺炎、良性前列腺增生及前列腺癌。
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