CN1329453C - 提纯的胭脂虫红色料和生产它的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供胭脂虫红色料，含有该胭脂虫红色料的着色剂产品和它的生产方法，其中胭脂虫红色料不含有来源于原料林氏胭脂虫昆虫的属于变应原的蛋白质和污染物，并能够安全地添加到被嘴摄取的产品如食品、药剂等中。本发明涉及基本上不含分子量不少于6000的蛋白质的胭脂虫红色料。本发明还涉及生产胭脂虫红色料的方法，它包括让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解，然后进行选自以下这些的至少一种处理：吸附处理，离子交换处理，酸处理，抽提处理和膜处理。

Description

提纯的胭脂虫红色料和生产它的方法
技术领域
本发明涉及胭脂虫红色料，其特征在于它是如此的纯以致于基本上没有变态反应原，和涉及包括该色料的着色组合物。此外，本发明涉及生产高纯度和没有变态反应原的胭脂虫红色料的方法。
背景技术
胭脂虫红广泛地用作着色剂，例如在药品和食品中，它来源于林氏胭脂虫(Coccus cacti L.)的雌性昆虫体中存在的红色着色物质，该昆虫生长在墨西哥和中南美洲的沙漠地区栽植的仙人掌科(Cactaceae)的胭脂仙人掌(Nopalea coccinellifera)和其它植物上。原来，胭脂虫红是通过用水或醇抽提它的干燥体来从该昆虫提取的。
最近已经报道，作为昆虫衍生物质，胭脂虫红含有变应原的杂质蛋白质并且本身是变态反应病中的发病因子(Ann Allergy Asthma，84卷(5)，549-552，2000)。
此外，由普通方法生产的胭脂虫红的使用具有以下问题：产品的类型和应用，色料的应用浓度受到限制，这归因于可能由上述原料引起的气味。还指出另一问题：普通的胭脂虫红色料随时间的推移而趋向于形成沉降物，因为它们含有来源于上述原料的蛋白质和类似污染物。
本发明的公开
本发明的发明者进行了深入的研究来克服普通胭脂虫红色料的上述变应原性问题并开发出下面所定义的胭脂虫红色料。
因此，本发明涉及下列提纯的胭脂虫红色料(1)和(2)。
(1)提纯的胭脂虫红色料，特征在于它基本上不含林氏胭脂虫昆虫来源的变态反应原。
(2)在段落(1)中定义的提纯胭脂虫红色料，进一步体现特征于它基本上不含分子量不少于6000的蛋白质。
本发明进一步涉及下列色料组合物和相关的着色剂产品(3)-(5)。
(3)色料组合物，它包括在段落(1)中定义的提纯的胭脂虫红色料和食品卫生或药物学上可接受的载体或添加剂。
(4)在段落(3)中定义的色料组合物，其中胭脂虫红色料是选自胭脂红酸，胭脂红酸铝色淀，胭脂红酸钙色淀，以及胭脂红酸铝色淀或胭脂红酸钙色淀的聚合物当中的至少一种。
(5)应用于食品、药物制剂、准药物制剂或化妆品制品的着色剂产品，它包括在段落(3)中定义的色料组合物。
本发明进一步涉及用于生产胭脂虫红色料的下列方法(6)-(16)。
(6)生产胭脂虫红色料的方法，它包括让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解和除去分子量不少于6000的级分。
(7)生产胭脂虫红色料的方法，它包括让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解，然后进行选自以下这些的至少一种处理：吸附处理，离子交换处理，酸处理和膜处理。
(8)生产胭脂虫红色料的方法，它包括让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解和吸附处理，然后进行选自以下这些的至少一种处理：吸附处理，离子交换处理，酸处理和膜处理。
(9)在段落(6)中定义的生产胭脂虫红色料的方法，其中胭脂虫提取物溶液是利用含水的醇从林氏胭脂虫昆虫获得的提取产品。
(10)在段落(6)中定义的生产胭脂虫红色料的方法，其中胭脂虫提取物溶液在酸性条件下进行蛋白质水解。
(11)在段落(7)或(8)中定义的生产胭脂虫红色料的方法，其中吸附处理在酸性条件下进行。
(12)在段落(7)或(8)中定义的生产胭脂虫红色料的方法，其中吸附处理包括在酸性条件下将胭脂虫红色料吸附在吸附剂上和在pH7～9的条件下用含水的醇来使之解吸附。
(13)在段落(7)或(8)中定义的生产胭脂虫红色料的方法，其中酸处理用作为食品添加剂的酸来进行。
(14)在段落(7)或(8)中定义的生产胭脂虫红色料的方法，其中膜处理是选自以下这些的至少一种处理：反渗透膜处理，毫微量过滤(nanofiltration)膜处理，超滤膜处理和微量过滤膜处理。
(15)在段落(7)或(8)中定义的生产胭脂虫红色料的方法，其中膜处理是选自以下这些的至少一种处理：反渗透(RO)膜处理，膜滤器(MF)处理，超滤(UF)膜处理和毫微量过滤(NF)膜处理。
(16)在段落(7)或(8)中定义的生产胭脂虫红色料的方法，其中膜处理是使用具有2000-8000的截取分子量的膜来进行的。
(17)在段落(7)或(8)中定义的生产胭脂虫红色料的方法，其中分子量不少于6000的级分是通过膜处理来除去。
附图简述
图1是在各个生产阶段中料液的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图(SDS-PAGE)。泳道，从左至右，表示①分子量标记(16950Da，14410Da，10704Da，8167Da，6217Da，2512Da)，②胭脂虫提取物溶液，③蛋白质水解产物，④吸附处理的溶液，⑤MF滤液，和⑥NF滤液。
实施本发明的最佳模式
本发明涉及从林氏胭脂虫获得的胭脂虫红色料并以基本上不含变态反应原为特征。
胭脂虫红通常是红色着色物质，它主要由属于蒽醌色料的胭脂红酸组成并且如上所述，通过用林氏胭脂虫起始的方法生产的。
为了实现以上特征，本发明的胭脂虫红色料被提纯到基本上不含有分子量不少于6000的蛋白质的程度。
本发明的胭脂虫红色料本身可通过一种技术来生产，该技术包括使用由合适的溶剂抽提胭脂虫昆虫躯体所获得的胭脂虫提取物溶液，让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解，然后进行合适的提纯处理如离子交换处理和/或膜处理以从胭脂虫提取物中除去分子量不少于6000的级分。
更具体地说，根据本发明的高度纯化的胭脂虫红色料能够通过将在胭脂虫提取物溶液蛋白质水解之后的料液进行吸附处理、离子交换处理、酸处理或膜处理中的任何一种或这些处理中任何两种或多种的任意组合来生产和获取。
用于本发明的胭脂虫提取物溶液能够通过将干燥的林氏胭脂虫昆虫躯体充分粉碎和用水、醇或含水的醇抽提该粉末来获得。该醇包括含有1-4个碳原子的低级醇，如甲醇，乙醇，丙醇，异丙醇和丁醇。优选的是乙醇。
提取方法可以是常常用于抽提的一种方法。如此，那提取法包括但是不是局限于：包括利用冷提取技术或温热提取技术将林氏胭脂虫躯体的干粉浸泡在该溶剂的一种方法，包括在加热和搅拌条件下抽提该粉末和然后过滤的一种方法，以及渗滤法。优选的技术包括将林氏胭脂虫昆虫躯体的干粉在溶剂(该溶剂优选预先温热)中浸泡几分钟至几个小时，优选数十分钟。抽提溶剂的pH没有特别限制，但优选是中性至碱性，具体地说pH6-8，优选pH7-8，更优选约pH7.5。用于将提取溶剂碱化的碱性化合物能够选自可在食品中使用的大范围的化合物，并且另外没有特别限制。作为典型的例子，能够提及氢氧化钠，碳酸钠，碳酸氢钠和柠檬酸钠。
按以上方式获得的胭脂虫提取物溶液被过滤、共沉淀或离心处理以除去固体级分，这根据需要来定，然后，原样或在浓缩之后进行蛋白质水解。蛋白质水解一般利用酶来进行。
用于蛋白质水解的酶没有特别限制，只要它能够消化蛋白质或肽就行。方便地，能够使用作为蛋白酶类或肽酶购买到的酶制剂。酶促蛋白质水解能够在适合于各酶的特定条件下进行。对于在酸性条件下的酶促处理，例如，胭脂虫提取物溶液优选使用无机酸如盐酸，硫酸或磷酸或有机酸如柠檬酸，苹果酸，酒石酸，乳酸，乙酸或富马酸被调节至pH3-5，优选pH3.5-4.5。蛋白质水解的温度没有特别限制，但一般可以是在30-60℃范围内。
如此获得的蛋白质水解物进行过滤、共沉淀或离心处理以除去所形成的沉淀物，这根据需要来定，以及直接或在浓缩之后进一步进行吸附处理，离子交换处理，酸处理或膜处理。优选的是膜处理。
除去在本发明的方法中的各个阶段中形成的沉淀物(包括以上刚刚提及的沉淀物)的过滤程序能够在助滤剂比如硅藻土存在下进行，助滤剂的使用使得能够除去不易滤除的微粒。
吸附处理能够按常规方式进行。例如，它可以是使用诸如活性炭、硅胶或多孔陶瓷材料之类的吸附剂的吸附处理或使用如下吸附树脂的吸附处理：例如，苯乙烯型吸附树脂如Duolite S-861(TM，DiamondShamrock，U.S.A.；下面也是如此)，Duolite S-862，Duolite S863和DuoliteS-866；芳族吸附树脂如Sepabeads SSP700(TM，Mitsubishi Chemical；下面电是如此)，Sepabeads SP825，Diaion HP10(TM，MitsubishiChemical；下面也是如此)，Diaion HP20，Diaion HP21，Diaion HP40和Diaion HP50等；以及Amberlite XAD-4(TM，Organo；下面也是如此)，Amberlite XAD-7和Amberlite XAD-2000等。
吸附处理优选，然而并非基本上，在酸性条件下进行。具体地说，被吸附的样品优选用所述无机酸或有机酸调节至pH高于2-4，更优选pH大约3。
吸附在吸附剂上的胭脂虫红色料能够通过用合适的溶剂如含水的醇进行解吸附(洗脱)来回收。优选，在洗脱之前，吸附剂用不会引起胭脂虫红色料的解吸附作用的合适溶剂如水洗涤。优选的含水的醇通常包含10-60％(按体积)，更优选20-80％(按体积)的醇。该醇包括具有1-4个碳原子的低级醇，如甲醇，乙醇，丙醇，异丙醇和丁醇。优选的醇是乙醇。
在这种情况下，解吸附剂或洗脱剂优选是中性-碱性，即pH7-9，优选pH8-9，调节至这一pH水平能够使用柠檬酸钠，氢氧化钠，碳酸钠，碳酸氢钠等进行。
在胭脂虫提取物溶液的吸附处理获得的料液能够进行另外的吸附处理或进行各种其它处理如离子交换处理、膜处理和酸处理中的任何一种。
这一吸附处理可以是与以上所述相同的处理。
离子交换处理不是特别限制的，但包括使用普通的离子交换树脂的常规的阳离子交换或阴离子交换处理。阳离子交换树脂，例如，包括但不限于强阳离子交换树脂和弱阳离子交换树脂，如Diaion SK1B(TM，Mitsubishi Chemical；下面也是如此)，Diaion SK102，DiaionSK116，Diaion PK208，Diaion WK10和Diaion SK20等。阴离子交换树脂没有特别限制，但包括Diaion SA10A(TM，Mitsubishi Chemical；下而也是如此)，Diaion SA12A，Diaion SA20A，Diaion PA306，DiaionWA10，和Diaion WA20等。
在本发明中所述的膜处理是指使用膜的各种过滤处理，因此包括用膜滤器(MF)、官能化高聚物膜如超滤器(UF)、毫微量过滤器(NF)、反渗透(RO)过滤器或电渗析膜进行的处理。
已知的膜处理技术不仅包括UF和RO膜方法，而且包括利用在离子选择膜两侧的浓度梯度进行的透析处理和使用离子交换膜并施加电压的电渗析处理等等。工业上，NF膜过滤方法是优选的。用于膜过滤方法的膜材料可以天然、合成或半合成的，并包括纤维素，纤维素二醋酸酯或三醋酸酯，聚酰胺，聚砜类，聚苯乙烯，聚酰亚胺和聚丙烯腈等等。
根据本发明的膜处理包括利用具有例如10000-1000000的截取分子量的膜来除去高分子化合物的处理，和利用具有大约2000-8000、优选大约6000、更优选大约3000的截取分子量的膜除去低分子量化合物的处理。
前一技术具体地包括使用NTU-3150膜，NTU-3250膜，NTU-3550膜和NTU-3800 UF膜(全部购自Nitto Denko Corporation)；Cefilt-UF(Nippon NGK Insulators，Ltd.的产品)；AHP-2013膜，AHP-3013膜和AHP-1010膜(全部购自Asahi Chemical Industry)等中的任何一种的UF膜技术。后一技术包括使用NTR-7250膜，NTR-7410膜，NTR-7430膜和NTR-7450膜(全部购自Nitto Denko Corporation)；AIP-3013膜；ACP-3013膜，ACP-2013膜，AIP-2013膜和AIO-1010膜(全部购自AsahiChemical Industry)等中的任何一种的反渗透膜(NF膜；截取分子量约3000)技术。这些膜能够各自独立地或以合适的组合方式来使用。
酸处理能够通过如下方式进行：调节胭脂虫提取物溶液的蛋白质水解产物或经历上述各种处理的料液到pH1-6，优选pH1.5-4，从而使料液处于酸性环境。酸处理能够方便地通过将酸加入到该料液中来进行。所使用的酸没有特别限制，只要其通常用作食品添加剂就行，并且能够从这些酸中任意选择。例如，有机酸如柠檬酸，乙酸，苹果酸，乳酸等，和无机酸如硫酸，盐酸，磷酸，硝酸等都可以使用。优选的是使用通常用作食品添加剂的无机酸进行的处理。
该酸处理的温度条件没有特别限制，但通常能够从5-100℃范围内随意选择。例如，可以使用20-100℃的范围或40-100℃的范围。酸处理的时间没有特别限制，但通常能够从1-300分钟范围内任意选择。一般而言，在高处理温度下较短的处理时间就足够，在这种意义上讲，在40-100℃下的处理时间例如可以从5-60分钟的范围中选择。在这一处理中，该处理负载料液任选加以搅拌，但不必遵循特殊的规则。
作为一种供选择的处理，二氧化碳气，乙烯，丙烷等可以在气密体系中在超临界温度与压力条件下与胭脂虫提取物溶液的蛋白质水解产物或在吸附处理之后的料液进行接触。
可以进行上述处理中的仅仅一种或按任意顺序以任选的组合方式进行这些处理当中的两种或多种。或在相同或不同条件下重复进行同一种处理。
优选的处理方法，虽然没有特别限制，包括让蛋白水解处理之后的胭脂虫提取物进行吸附处理和让从吸附剂上解吸附所获得的粒料进行膜处理。此外，在必要时，离子交换处理可以在吸附处理之后进行。以上提及的膜处理优选是MF、UF或NF膜处理，更优选MF或NF膜处理。此外，这一膜处理优选使用具有2000-8000、优选大约6000、更优选大约3000的截取分子量的膜来进行，因此除去高分子化合物，优选分子量在6000以上、更优选在3000以上的那些化合物。
如此获得的本发明的胭脂虫红色料已经有效地被除去了各种污染物，其中包括属于变应原或潜在变应原的林氏胭脂虫昆虫来源的蛋白质。因此可以提供胭脂虫红色料，当配制在食品、药物、准药剂或化妆品中时，它们可以或易于被嘴摄取，不会引发变态反应。此外，由本发明的上述方法获得的胭脂虫红色料几乎不会随时间推移而形成沉淀物，因此有良好的贮藏期限。
顺便说一下，术语“胭脂虫红色料”一般是指胭脂红酸，但在本发明的上下文中胭脂虫红色料不仅包括胭脂红酸，而且包括胭脂红，后者是由金属离子如铝或钙离子与胭脂红酸配合所形成的颜料(包括它的配合物和它们的聚合物)。作为胭脂红，能够提及诸如胭脂红酸与铝离子的配合物，包括它的聚合物(铝色淀)，和胭脂红酸与钙离子的配合物，包括它的聚合物(钙色淀)之类的物质。
以上述方式获得的本发明的胭脂虫红色料能够与从食品卫生观点看可接受或药物学上可接受的载体和/或附加剂一起配制并以色料组合物形式提供。这一色料组合物能够理想地用于为了着色食品(包括饮料)、药物产品、准药剂或化妆品(尤其是希望由嘴摄取或易于由嘴摄取的那些产品)的目的所添加的着色剂产品。
着色剂产品的剂型没有特别限制，但可以是胭脂虫红色料在介质如水、醇(例如乙醇)或合适的其它溶剂(例如丙二醇、甘油等)中的溶液或分散体，或是通过将胭脂虫红色料配制在载体(赋形剂)如糊精、乳糖、干燥的淀粉糖浆等中并将混合物模塑成粉剂、粒剂、片剂或丸剂所制备的干燥(固体)产品。
被配制在着色剂产品中的添加剂没有特别限制，但包括一般在色料和着色剂产品中使用的那些食品添加剂，如防腐剂(乙酸钠，鱼精蛋白等)，稳定剂(阿拉伯树胶，洁冷胶，角叉菜胶，海藻糖，水溶性半纤维素，磷酸钠，偏磷酸钠等)，乳化剂(卵磷脂，脂肪酸糖酯，聚脂肪酸甘油酯等)，抗氧化剂(茶叶提取物，生咖啡提取物，向日葵籽提取物，杨梅提取物，芦丁提取物，迷迭香提取物，酶处理的芦丁，芦丁的分解产物(槲皮素)，酶处理的异槲皮苷，生育酚，抗坏血酸化合物等)。
如以下给出的实施例3中所示，由本发明的方法制备了显著除臭的胭脂虫红色料。生产本发明的胭脂虫红色料的方法可被理解为使胭脂虫红色料除臭的方法。因此，本发明包括下列模式。
(a).使胭脂虫红色料除臭的方法，它包括让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解和除去分子量不少于6000的级分。
(b).使胭脂虫红色料除臭的方法，它包括让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解，然后进行选自以下这些的至少一种处理：吸附处理，离子交换处理，酸处理和膜处理。
(c).使胭脂虫红色料除臭的方法，它包括让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解和吸附，然后进行选自以下这些的至少一种处理：吸附处理，离子交换处理，酸处理和膜处理。
(d).在段落(a)中定义的使胭脂虫红色料除臭的方法，其中胭脂虫提取物溶液是利用含水的醇从林氏胭脂虫昆虫获得的提取产品。
(e).在段落(a)中定义的使胭脂虫红色料除臭的方法，其中胭脂虫提取物溶液在酸性条件下进行蛋白质水解。
(f).在段落(b)或(c)中定义的使胭脂虫红色料除臭的方法，其中吸附处理在酸性条件下进行。
(g).在段落(b)或(c)中定义的使胭脂虫红色料除臭的方法，其中吸附处理包括在酸性条件下将胭脂虫红色料吸附在吸附剂上和在pH7～9的条件下用含水的醇来使之解吸附。
(h).在段落(b)或(c)中定义的使胭脂虫红色料除臭的方法，其中酸处理用作为食品添加剂的酸来进行。
(i).在段落(b)或(c)中定义的使胭脂虫红色料除臭的方法，其中膜处理是选自以下这些的至少一种处理：反渗透膜处理，膜滤器处理，超滤膜处理和毫微量过滤膜处理。
(j).在段落(b)或(c)中定义的使胭脂虫红色料除臭的方法，其中膜处理是使用具有2000-8000的截取分子量的膜来进行的。
(k).在段落(b)或(c)中定义的使胭脂虫红色料除臭的方法，其中分子量不少于6000的级分是通过膜处理来除去。
实施例
下列的实施例用于详细说明本发明。然而，应该理解的是，本发明的范围绝不由这些实施例来定义。
实施例1
(1)胭脂虫红色料和着色剂产品的制备
向35kg的林氏胭脂虫昆虫的干燥粉中添加已用氢氧化钠调节至pH7.5的800升水，在搅拌下于90-100℃下提取胭脂虫红色料达20-30分钟。让提取物溶液流过用于固液分离的60-目金属筛，液相(胭脂虫提取物溶液)用柠檬酸调节至pH4并冷却至大约50℃。在这一阶段中，添加0.1％的蛋白酶，混合物在该温度下搅拌3小时。然后，所获得的蛋白质水解产物用柠檬酸调节至pH3，与助滤剂和硅藻土混合，并且经滤纸过滤来回收约250L的蛋白质水解物。让这一胭脂虫红蛋白质水解产物流过装填了吸附剂树脂Amberlite XAD-7(150L)的柱以吸附胭脂虫红色料。在树脂柱用8倍体积的水洗涤之后，用130L的50％乙醇水溶液(pH7.5)洗脱出胭脂虫红色料，来收集82L的洗脱液。然后，这一吸附处理的流体用MF膜(陶瓷过滤器，0.2μm；NGK绝热体)在2kg/cm2和20℃下处理以回收82L的MF滤液。
此外，使用NF膜的处理(CF30-S，截取分子量＝6000；Nitto Denko)在3kg/cm2和20℃下进行，得到80L的NF滤液。这一NF滤液在减压下浓缩，得到20kg具有E10％ 1cm＝200的色值的显著提纯的色料溶液。向20kg这一色料溶液中添加32.4kg的水，13kg的乙醇和600g的柠檬酸(晶体)，得到66kg具有E10％ 1cm＝60的色值的胭脂虫红着色剂产品。
以上提及的色值(E10％ 1cm)是通过测量在可见光谱区的最大吸收波长(大约410nm)下目标胭脂虫红色料的溶液(0.1N HCl)的吸光度，然后将吸光度值换算成10w/v％溶液的吸光度所获得的值。
(2)利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的分析
如果在每一生产阶段中获得的处理溶液(胭脂虫提取物溶液，蛋白质水解产物，吸附处理的溶液，MF滤液或NF滤液)直接进行电泳分析，由于在胭脂虫红色料中存在的色素、盐类等的影响，几乎不能进行蛋白质分析。所以，使用液相色谱仪，蛋白质独自选择性地从各处理溶液中分离，然后由电泳分析。因此，5μl的具有E10％ 1cm＝80的色值的各溶液在下列条件下流过Symmetry C18：ODS柱(φ0.46mm×250mm)：展开溶剂为70％甲醇，流速为1ml/min.，检测波长为280nm，从而将色素和盐类与蛋白质分离，并收集单独的蛋白质级分。这一处理重复进行10次并且蛋白质级分被积累下来，浓缩至干燥，溶于100μl的水中来制备样品，并进行电泳。根据Laemmli方法(Nature，227，680(1970))进行电泳，凝胶按常规方式进行银染色。通过将105μl的以上样品与10μl的2-巯基乙醇，25μl的0.5M Tris-HCl(pH 6.8)，40μl的10wt％SDS和20μl的70wt％甘油混合并将混合物煮沸3分钟来制备供电泳用的样品。
SDS-PAGE的条件如下。
·分析用的样品：10μl/泳道
·缓冲液：Tris-甘氨酸(pH6.8)，0.1％SDS。
电泳的结果示于图1中。在图1中，从左至右的泳道分别表示①分子量标记(16950Da，14410Da，10704Da，8167Da，6217Da，2512Da)，②胭脂虫提取物溶液，③蛋白质水解产物，④吸附处理的溶液，⑤MF滤液，和⑥NF滤液。
最近，M.T.Lizaso等人已报道，在胭脂虫红色料中存在的变态反应原是分子量为17000，28000和50000的蛋白质(Ann Allergy Asthma，84卷(5)，549-552(2000))。一般知道诱导变态反应的蛋白质是具有超过10000的分子量的较大蛋白质，但也报道过蛋白质可偶联到另一成分上变成变态反应原。
从表1中示出的结果能够看出，根据本发明的生产技术，不仅分子量为17000、28000和50000的蛋白质，而且分子量≥6000的蛋白质(它是潜在的变态反应原)能够被减少到不再由银染色法可检测出的程度(低于大约100ppb)。此外，根据本发明的生产技术，在NF处理之后的样品早已是如此的纯净，以致于基本上检测不到蛋白质，表明能够获得具有极高安全率的胭脂虫红色料。
实施例2
向24kg的在实施例1中制得的具有E10％ 1cm＝60的色值的胭脂虫红着色剂产品中添加156kg水，将8kg酒石酸、9.3kg的焦明矾和0.6kg的消石灰(氢氧化钙)溶于所获得的色料液(色素溶液)中。然后，在搅拌下，该温度升高至80℃并在这一水平下保持5小时，据此获得了水不溶性的胭脂虫红铝色淀(胭脂红)。这一胭脂红的水悬浮液用压滤机(YabutaCo.)过滤回收胭脂红滤饼，然后在50℃真空干燥并加以破碎来制备胭脂红粉。
按照与实施例1中相同的电泳方法对这一胭脂红进行蛋白质分析，没有显示有蛋白质的证据。所以，很清楚的是，基本上不含作为潜在变态反应原的蛋白质的胭脂红能够通过在实施例1中描述的方法制备。
就此而论，根据本发明的发明者获得的调查结果，当使胭脂红酸铝色淀或钙色淀(胭脂红)形成聚合物时，有一种趋势即当低分子量蛋白质允许存在时，获得了更纯净的色淀并有增强的红色强度。所以，通过添加不会变成针对上述无变态反应原的色料溶液的变态反应原的较低分子量蛋白质，可以制得具有更高强度的红色和市场价值增加的胭脂虫色料(胭脂红)。
实施例3
对于实施例1中制得的具有E10％ 1cm＝60的色值的胭脂虫红着色剂产品检测气味的存在。更具体地说，5g的胭脂虫色料产品用水稀释，因此制备1L具有E10％ 1cm＝0.3的色值的溶液。所获得的溶液被加热至50℃的温度，然后根据由10位高等级专业培训的专家组成的小组的评判，评价气味。作为评价用的对比样品，使用按照实施例1的程序由水提取法从林氏胭脂虫昆虫的干燥粉获得的胭脂虫提取物(pH7.5)(对比色料1)，进一步让水提取法获得的胭脂虫提取物进行树脂吸附处理所制备的胭脂虫红色料(对比色料2)。对比样品在按照与以上所述相同的方式稀释成具有E10％ 1cm＝0.3的色值的溶液和随后加热至50℃温度之后被用来评价气味。结果示于表1中。
[表1]
    评价   提纯的胭脂虫红色料产品    对比色料1    对比色料2
    +++   0    7    3
    ++   0    3    6
    +   0    0    1
    ±   2    0    0
    -   8    0    0
(在表1中各个数字显示了根据下面的“评价标准”选择各等级的专家小组人员的数目。)
<评价标准>
+++：强烈地感觉到来源于林氏胭脂虫昆虫的气味。
++：感觉到来源于林氏胭脂虫昆虫的气味。
+：微弱地感觉到来源于林氏胭脂虫昆虫的气味。
±：几乎感觉不到来源于林氏胭脂虫昆虫的气味。
-：没有感觉到来源于林氏胭脂虫昆虫的气味。
从这些结果可以清楚地看出，本发明的胭脂虫红色料是无臭味的或几乎感觉不到气味的，由本发明的方法能够制备显著除臭的胭脂虫红色料。
实施例4
对于实施例1中制得的具有E10％ 1cm＝60的色值的胭脂虫红着色剂产品检查沉降物随时间推移的形成。具体地说，胭脂虫红着色剂产品以溶解状态在5℃的温度下保存6个月，然后肉眼检查沉降。结果，本发明的着色剂产品没有形成沉降物并且长时间保持稳定。
结果显示，在长期贮存过程中被显著抑制沉降的胭脂虫红色料能够通过本发明的方法制备。
工业实用性
根据本发明的胭脂虫红色料是基本上无变态反应原的、安全的色料，它已经高度提纯，除去了来源于原料林氏胭脂虫昆虫的蛋白质和其它污染物。所以，根据本发明的这一色料和含有该色料的着色剂产品能够不必担心变态反应的危险而作为着色物质用于被嘴摄取或倾向于被嘴摄取的产品，如饮料和其它食品，药物产品，准药剂和化妆产品。
此外，本发明的胭脂虫红色料被显著除臭到几乎感觉不到的程度，这样该色料能够用于着色产品诸如食品、化妆品等之类，这些产品的商业价值受它们的气味的影响。
此外，根据本发明的胭脂虫红色料不易随时间的推移而形成沉淀物，因此它能够均匀地着色各种产品，如饮料，食品(包括糖果在内)等，无需预先过滤。

Claims (11)

1.生产胭脂虫红色料的方法，它包括让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解和除去分子量不少于6000的级分。
2.权利要求1的生产胭脂虫红色料的方法，包括让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解以及选自以下这些处理中的至少一种处理：吸附处理、离子交换处理、酸处理和膜处理，并且除去分子量不小于6000的级分。
3.权利要求1的生产胭脂虫红色料的方法，包括让胭脂虫提取物溶液进行蛋白质水解和吸附处理，以及选自以下这些处理中的至少一种处理：离子交换处理、酸处理和膜处理，并且除去分子量不小于6000的级分。
4.根据权利要求1的生产胭脂虫红色料的方法，其中胭脂虫提取物溶液是利用含水的醇抽提林氏胭脂虫昆虫躯体所获得的提取产物。
5.根据权利要求1的生产胭脂虫红色料的方法，其中胭脂虫提取物溶液在酸性条件下进行蛋白质水解。
6.根据权利要求2或3的生产胭脂虫红色料的方法，其中吸附处理在酸性条件下进行。
7.根据权利要求2或3的生产胭脂虫红色料的方法，其中吸附处理包括在酸性条件下促使胭脂虫红色料吸附在吸附剂上，然后在pH7～9的条件下用含水的醇来使之解吸附。
8.根据权利要求2或3的生产胭脂虫红色料的方法，其中酸处理是用作为食品添加剂的酸来进行的。
9.根据权利要求2或3的生产胭脂虫红色料的方法，其中膜处理是选自以下这些处理中的至少一种处理：反渗透膜处理、膜滤器处理、超滤膜处理和毫微量过滤膜处理。
10.根据权利要求2或3的生产胭脂虫红色料的方法，其中膜处理是使用具有2000-8000的截取分子量的膜进行的处理。
11.根据权利要求2或3的生产胭脂虫红色料的方法，其中通过膜处理来除去分子量不少于6000的级分。
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