JPS6033807B2 - スタビア葉の有効成分の抽出分離法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 この発明はスタビア築の有効成分の抽出分離法に関する
。

この発明の原料であるスタビア葉は、中南米パラグアイ
で主に産するキク科のステビアレバウジアナ バトニー
（ＳｔｅｖｉａＲｅ鼠ｕｄｉａｈａＢｅれｏｎｉ）なる
滋木の葉を意味する。

このスタビア葉中には、天然の甘味剤として署名となり
つ〉あるステビオサィドが含まれていることが知られて
いる。又このステビオサィド‘ま血糖降下作用を有し糖
尿病に有効であるとの報告があり、医薬品としても注目
されている。この発明の発明者は、か）るスタビア葉の
成分であるステビオサィドの研究を重ねた結果、ステピ
オサィドと他の有効成分を工業的に有利に分離抽出する
ことに成功した。

この発明の目的の一つは、ステビオサィド以外の文献末
記載の新規物の分離抽出する方法を提供するものである
。

その他の目的及びこの発明の特徴は以下の説明で明らか
にされるであろう。かくして、この発明はスタビア葉の
水及び脂肪族低級アルコール可溶分をクロマトグラフィ
ーに付して、ａ，，ａ２，ａ３，ａ４，亀，熱，ａ７及
びａ８物質の少なくとも一種を分離することよりなるス
タビア葉の有効成分の抽出分離法が提供される。この発
明の原料は、この発明者らが見出して次のごとき方法で
得るのが好ましい。

まずスタビア葉は「葉の形状のま）のものあるいは粉末
状にしたも）何れでも原料として用いられる。

このスタビア葉を好ましくは約ＩＱ著量（重量）の水で
常温で約２岬時間をかけて抽出処理される。この抽出処
理は、２回位行うのが望まれる。この水処理に先だち、
予め脂肪族低級アルコール（例えばメタノール、エタノ
ール、ブロバノール、ブタノール）でその約５〜１Ｑ者
量（重量）を用いて２〜３回熱時抽出処理し、その抽出
物を蒸発乾溜し、それを水処理に付してももよい。次に
この水抽出液は、なるべく低温で濃縮して水分を除去し
、得られる残留物を前述の如き脂肪族低級アルコールに
溶解する。この際アルコールの使用量は、通常約ＩＱ著
量（重量）が用いられる。こ）で得られるアルコール溶
液を約半量乃至４分の１程度に濃縮しそのま）放置する
か又はジオキサンをアルコールの約４分の１程度加えて
放置する。これによってステビオサィドが析出する。又
上記の水抽出液から得られる濃縮残留物の処理に、脂肪
族低級アルコールとしてブタノールを使用した場合は、
通常飽和含水ブタノールに濃縮物を熱時溶解し、得られ
る溶液を濃縮乾適する。

そして再び他のアルコールとしてメタノールやエタノー
ルを用い、これに乾溜物を再溶解し、上記と同様に濃縮
放置するのが好ましい。それによってステビオサィドが
分離できる。この発明では、このようにしてステピオサ
イドを分離したアルコール液を原料と用いることができ
る。

またこの残りのアルコール液は、減圧下なるべく低温、
例えば６０ｑｏ以下で濃縮すると乾燥エキスとなり、こ
の乾燥エキスを用いるのが好ましい。この乾燥エキスは
、通常黄色乃至蓋褐色の粉末で水に溶解してｐＨ４〜４
．５を呈する。

水に易溶ホルム、エーテル、ベンゾールに不溶である。
又濃硫酸で赤褐色、塩化第二鉄試薬で階緑色を呈する。
銀鏡反応及びフューリング試薬に共に陽性である。更に
上記エキスの水溶液は酢酸鉛試液で黄色沈澱を生ずる。
次いで、この発明では、かようにして得ることができる
スタビア葉からの水及び低級脂肪族アルコール可溶分は
クロマトグラフィーことにカラムクロマトグラフィーに
付して各成分に分別することができる。

カラムクロマトグラフィーの１例としては、充填剤とし
てシリカ、展開剤としてベンゼン：酢酸エチル：メタノ
ール＝３：１：１を用いて分別することができる。勿論
展開剤の溶剤の組合せ、使用比は上記に特に限定される
ものではない。ｎープロパノールー水−酢酸エチルの組
合せが他の例である。かような物理化学的手段の一つを
用いることによって、スタビア葉中のステビオサィド以
外の他の有効成分としては８種類含有している二とが見
出された。

即ち、シリカゲル−Ｇ（メルク社製）を担体とし、ｎー
プロパノールと水（２：１）：酢酸エチル＝３５：６５
の展開溶剤、１％硫酸セリウム−１０％硫酸を検出剤と
しての薄層クロマトグラフイ‐では、ａ，（Ｒｆ＝０．
０５）、ａ２（Ｒｆ＝０．１）、ａ３（Ｒｆ＝０．４）
、ａ４（Ｒｆ＝０．６５）、雀（Ｒｆ＝０．７）、念（
Ｒｆ＝０．８）、ａ７（Ｒｆ＝０．９）、及びａ８（Ｒ
ｆ＝０．９５）に分離される。これらは全て文献未知の
化合物で、驚くべきことは、ａ，物質とａ３物質は緑膿
菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｍｇｎｏｓａ）、ブ
ロテウス菌（Ｐｒｏｔｅｕｓｖｕｌ鱗ｒｉｓ）、枯草菌
（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓ肋ｔｉｌｉｓ）のごときグラム陰
性菌、黄色ブドウ状球菌（ＳはＰｈｙｌｃｃＭｃ瓜ａｕ
ｒｅｕｓ）のごときグラム陽性菌に強い抗菌性を示した
。

ことに緑膿菌やプロテウス菌に強い抗菌力を有すること
は興味あることである。なお、ａ，〜ａ８の各成分の性
状は次の通りである。

ａ，物質 無色針状晶で融点２７９〜２８１００である。

比旋光度：〔Ｑ〕奪−２２．００（ｃ＝１．０，メ々ノ
ール）紫外部に特異吸収を認めない。赤外線吸収スペク
トル（ＫＢｒ，抑‐１）：私００，１７３０，１６４０
，１２３ふ １３５０。

ピリジン易溶、水、アセトン、アルコールに可溶、エー
テル、クロロホルム、ベンゼンに不溶。濃硫酸で黄色に
呈色し、リーベルマン反応、銀鏡反応及びフェーリング
談液に陽・性で塩化第二鉄謎液に陰性である。アントロ
ン硫酸謎液を加え加熱すると緑色を呈する。水溶液は中
性である。酸加水分解によって水可溶部よりグルコーゼ
、水不溶部よりィソステビオール（Ｃ２。日の０３，融
点２雌℃）の生成が確認できる。元素分析：分子量 １
１２９．１７ 推定分子式：Ｃ５虹８。

０２８ 実測値：Ｃ，５３．１９％：日，７．１４％：○，６９
．６７％理論値：Ｃ，５３．２１％：日，７．１０％；
○，３９．６９％ａよ勿質 無色のサィコロ状結晶 融点１９蟹０ 紫外部吸収（エタノール）：吸収を認めず。

赤外部吸収スペクトル（ヌジョール仇‐１：３３００（
ｂｒ）１６９０ １６６リ１２４０ １０７５ １０４
０。ピリジンに可溶、水やァセトンに可溶、ベンゾール
やエーテルに不溶。濃硫酸で黄色に呈色、リーベルマン
反応、酢酸鉛議液、フェーリング教液及び銀鏡反応は共
に腸性で、塩化第二鉄試液には陰性。

水溶液は中性で甘味を有する。ａぷ蜜質 無色板状結晶で融点２３７〜２４０ｑｏ。

比旋光度〔Ｑ〕色５＝−７４ｏ（ｃ＝０．６、ピリジン
）。

紫外部に特異吸収を認めず。

赤外部吸収スペクトル（ヌジョール、瓜‐１）：３３５
０（ｂｒ）、１７２５１６３ふ１２３い１０３０（ｂｒ
）。

ピリジンに易溶、水に可溶、アルコールやアセトンに僅
溶、ベンゾール、クロロホルム及びエーテルに不溶。
夕濃硫酸で淡黄色に呈
色、リーベルマン反応、銀鏡反応及びフェーリング試液
に腸性で、塩化第二鉄試液及び酢酸鉛試液には陰性。水
溶液は中性で甘味を有する。アントロン硫酸試液を加え
、加熱すると緑色をＺ呈する。

茂糠等価希釈試験法により甘味があることを確認した。
元素分析：分子量 ９６７．０４ 推定分子式 Ｃ４４日７。

０２３ 実測値：Ｃ，５４．５６％：日，７．３４％：○，３８
．１０１％理論値：Ｃ，弘．６５％：日，７．３０％：
○，総，０５％核磁気スペクトル（９ｍＭ、６ｄ５ーピ
リジン）：１．２２（ＱＨ，Ｓ）、１．２７（３日，Ｓ
）、４．１２、４．３４、２４．９んａ４物質 無色針状結晶で融点１９３〜１９４℃ 比旋光度〔Ｑ〕客＝−４４．８０（ｃ：１．０ メタノ
ール）。

２紫外部に特異吸収を
認めず。赤外部吸収スペクトル（ヌジョール、仇‐１）
：３４００、１６鮪、１２４５、１０７６、１０７０、
１０３５、９９５、８９んピリジンに易溶、水やアルコ
ールに可溶、ベンゼーン、クロロホルム及びエーテルに
不落。

濃硫酸で淡黄色に呈色、ｌｊーベルマン反応、銀鏡反応
及びフェーリング試液に腸性で、塩化第二鉄試液及び酢
酸鉛試液に陰性、水溶液は中性。茂糖等価希釈試験法に
より甘味があることを確認した。元素分析：分子量８０
４．９０ 推定分子式Ｃ３３日６ぬ，８ 実測値：Ｃ，５６．６９％：日，７．５３％：○，３５
．７８％理論値：Ｃ，５６．７１％：日，７．５１％：
○，３５．７８％鷺物質 無色板状晶で融点 １９２〜１９４ｑｏ 比旋光度：〔Ｑ〕奪−４５．が（ｃ二１．０，メタノー
ル）紫外部に特異吸収を認めない。

赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ，抑‐１）：３４００、
１７３リ１Ｍ２、１２４０１乳ふ１０４止 ９９７。

ピリジンに易溶、水、アルコール、アセトンに可溶、ベ
ンゼン、エーテル、クロロホルムに不溶。濃硫酸で淡黄
色に呈色、リーベルマン反応、銀鏡反応及びフェーＩＪ
ング謙液に腸性で、塩化第二鉄謎液に陰性である。

ァントロン硫酸試液を加えて加熱すると緑色を呈する。
水溶液は中性である。甘味を有する。酸加水分解によっ
て水可溶部よりグリコーゼ、ラムノーゼ、水不溶部より
グリコーゼ、ラムノーゼ、水不溶部よりィソステビオー
ル（融点２０８℃、Ｃ２虹３ｏ０３）の生成が確認でき
る。

元素分析：分子量７雛．斑推定分子式Ｃ３８日６ぬ７ 実測値：Ｃ，５７．８６％；日，７．６７％；０，３４
．４７％理論値：Ｃ，５７．８０％：日，７．６５％；
○，３４．５５％公物費 無色針状晶で融点１斑℃ 比旋光度：〔Ｑ〕色５＝−１９７ｏ（ｃ＝０．０ ピリ
ジン）紫外部に特異吸収を認めず。

赤外部吸収スペクトル（ヌジョール、仇‐１）：３４０
０（ｂｒ）、１６９０１６６０１２４い１０４０。

ピリジンに易溶、水に可溶、アセトン及びアルコールに
値熔、ベンゼン及びエーテルに不溶。濃硫酸で淡黄色に
呈色、リーベルマン反応、フェーリング謙液及び銀鏡反
応には陽性で、塩化第二鉄試液及び酢酸鉛試液は陰性。
水溶液は中性で甘味を有する。ａ７物質 無色針状晶で融点１８７〜１８ぴ０ 比旋光度：〔Ｑ〕客＝−３４．５０（ｃ＝１．０，ジオ
キサン）紫外部に特異吸収を認めない。

赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ，弧‐１）：乳５０、２９
５以 １７００、１２５０ １０７０、１０４０。

ピリジンに易溶、水、アセトン、アルコールに可溶、ベ
ンゼン、ク。ロホルムに不溶。濃硫酸で淡黄色に呈色す
る。

リーベルマン反応銀鏡反応及びフェーリング試液に腸性
で塩化第二鉄試液に陰性である。又アントロン硫酸謙液
を加え加熱するとき美麗な緑色を呈する。水溶液は中性
であって、甘味を呈する。

駿加水分解によって水可溶部よりグルコーゼ、水不溶部
よりィソステビオール（Ｃ２ｏＨ桝０３融点２０８ｑｏ
）の生成が確認される。

元素分析：分子量６７８．７７ 推定分子式Ｃ３２日５ぬ，３．がぬ 実測値：Ｃ，５６．７０％：日，８．２９％：０，３５
．０１％理論値：Ｃ，５６，６２％；日，８．０２％；
○，３５．３０％ａぷ物質 融点１班〜１９５℃の無色板状晶である。

紫外部に吸収を認めない 核磁気スペクトル（９皿Ｍ、ＣＤＣそ３ ）：４．９６
（ＩＨＳ−ｌｉｋｅ），４．７９（ＩＨ−ＳＩｉＫｅ）
、１．２４（２日，ｓ），ｏ．９７（知日，Ｓ），２．
１３、１．８３、１．６９、１．５４、０．６＆メタノ
ール、エタノール、酷酸エチルに可溶、水にや）灘溶、
水溶液は中性で甘味を有しない。

本物質は損体：シリカゲルＧ（メルク社），展開溶媒，
クロロホルム．メタノール（１５：１），展開距離：１
０肌、検出：１％硫酸セリウム−１０％硫酸を階霧後１
０５ｏｏで５分加熱、の条件で薄層クロマトグラフィー
に付すときＲｆ約０．４の位置に単一のかつ色のスポッ
トとして出現する。本物質は前述の如く、グラム陽性菌
に対し強い抗菌力を有する。

この発明の成分の内、ａ，及びａ８物質は抗菌剤として
有用である。

また、この発明の各成分は、従来スタピア葉から抽出物
としてスタビオサィド共存下に甘味剤として用いられて
きたものであるが、ａ，及びａ８以外の各成分は何れも
甘味を呈しそれぞれ甘味剤としての有用性をも有する。
次にこの発明を実施例によって説明する。

実施例 １ スタビア築ｌｋ９を９９％メタノール１０そで３時間ず
つ、３回約７０ｑｏで抽出処理した。

この抽出液を約２夕まで濃縮した。濃縮物を６その水中
に投入し、葉緑素等の不落物を炉別し、炉液を減圧下に
蒸発乾濁した。ここで得られる乾洞物を９９％メタノー
ル２のこ溶解し、１夕まで濃縮し室温で放鷹するとステ
ビオサンドが析出した。炉過によってステビオサィドを
５雌得た。炉液を６０こ０以下で濃縮して、黄色の粉末
１１雌（１１％）を得た。

シリカ３０雌を充填したカラム（直径７仇、長さ５比ネ
）に展開溶媒としてベンゼン：酢酸エチル：：メタノー
ル＝３：１：１を用い、上記の黄色粉末１．礎を展開し
た。

これにより、ａ４〜ａ８物質の５つの成分を分離した。
次いで展開溶媒のベンゼン、酢酸エチル、メタノールを
５：２．５：２．５に変え、ａ，〜ａ３の３つの成分を
分離した。各成分を含有する溶液はは、薄層クロマトグ
ラフィー〔ｎープロパノールと水（２．１）：酢酸エチ
ル＝３５：６ふシリカゲル−Ｇ〕について別に行った薄
層クロマトグラフィーでの各成分のＲｆ値と比較し確認
した。更に各成分を含有する溶液は溶媒を除去し、残留
物を通常例えばメタノールで再結晶することにより純品
に導くことができる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ スタビア葉の水及び脂肪族低級アルコール可溶分を
   クロマトグラフイーに付して、ａ＿１，ａ＿２，ａ＿３
   ，ａ＿４，ａ＿５，ａ＿６，ａ＿７及びａ＿８物質の少
   なくとも一種を分離することを特徴とするスタビア葉の
   有効成分の抽出分離法。