CN1164192A - 多相催化蛋白酶的抑制剂 - Google Patents
多相催化蛋白酶的抑制剂 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1164192A CN1164192A CN95196204A CN95196204A CN1164192A CN 1164192 A CN1164192 A CN 1164192A CN 95196204 A CN95196204 A CN 95196204A CN 95196204 A CN95196204 A CN 95196204A CN 1164192 A CN1164192 A CN 1164192A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- carbon atoms
- arginyl
- alkyl
- cyclopentyl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 title claims description 6
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 title description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 124
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 93
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 69
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims abstract 11
- 102000008221 Superoxide Dismutase-1 Human genes 0.000 claims description 56
- 108010021188 Superoxide Dismutase-1 Proteins 0.000 claims description 56
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 49
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 43
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims description 38
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 32
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 26
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 24
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 21
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims description 18
- 206010028289 Muscle atrophy Diseases 0.000 claims description 17
- 201000000585 muscular atrophy Diseases 0.000 claims description 17
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 17
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims description 16
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 16
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 claims description 15
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 claims description 14
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 13
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 13
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 claims description 13
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 12
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims description 12
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 12
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 12
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 11
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 claims description 10
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 8
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 8
- JNCMHMUGTWEVOZ-UHFFFAOYSA-N F[CH]F Chemical compound F[CH]F JNCMHMUGTWEVOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 claims description 7
- AOJDZKCUAATBGE-UHFFFAOYSA-N bromomethane Chemical compound Br[CH2] AOJDZKCUAATBGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- WBLIXGSTEMXDSM-UHFFFAOYSA-N chloromethane Chemical compound Cl[CH2] WBLIXGSTEMXDSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- VUWZPRWSIVNGKG-UHFFFAOYSA-N fluoromethane Chemical compound F[CH2] VUWZPRWSIVNGKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 7
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 6
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 claims description 6
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 claims description 6
- 201000006938 muscular dystrophy Diseases 0.000 claims description 6
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 claims description 6
- 208000005368 osteomalacia Diseases 0.000 claims description 6
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 claims description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 4
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 4
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 3
- 230000008733 trauma Effects 0.000 claims description 3
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 claims description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 2
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims description 2
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 claims description 2
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 claims 1
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 claims 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 abstract description 4
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 106
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 96
- 101710121996 Hexon protein p72 Proteins 0.000 description 84
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 84
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 79
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 66
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 63
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 55
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 54
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 51
- 239000000047 product Substances 0.000 description 49
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 47
- -1 phenyl) Chemical class 0.000 description 45
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 42
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 39
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 37
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 34
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 34
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 33
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- RROBIDXNTUAHFW-UHFFFAOYSA-N benzotriazol-1-yloxy-tris(dimethylamino)phosphanium Chemical compound C1=CC=C2N(O[P+](N(C)C)(N(C)C)N(C)C)N=NC2=C1 RROBIDXNTUAHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 24
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 22
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 22
- VVWPSAPZUZXYCM-UHFFFAOYSA-N 9-methoxy-9-oxononanoic acid Chemical compound COC(=O)CCCCCCCC(O)=O VVWPSAPZUZXYCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 20
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 19
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 18
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 18
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 17
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 17
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 17
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 17
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 17
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 16
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 15
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 15
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 15
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 15
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 15
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 14
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 14
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 14
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 14
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 14
- DVBUCBXGDWWXNY-SFHVURJKSA-N (2s)-5-(diaminomethylideneamino)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 DVBUCBXGDWWXNY-SFHVURJKSA-N 0.000 description 13
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 13
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 13
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 13
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 12
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 12
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 12
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 12
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 11
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 102000008934 Muscle Proteins Human genes 0.000 description 10
- 108010074084 Muscle Proteins Proteins 0.000 description 10
- 239000002585 base Substances 0.000 description 10
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 10
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 10
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 10
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 10
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 10
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 9
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 9
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 9
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 9
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 9
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 9
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 9
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 9
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 8
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- SMNRFWMNPDABKZ-WVALLCKVSA-N [[(2R,3S,4R,5S)-5-(2,6-dioxo-3H-pyridin-3-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [[[(2R,3S,4S,5R,6R)-4-fluoro-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-hydroxyphosphoryl]oxy-hydroxyphosphoryl] hydrogen phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@H]2O[C@H]([C@H](O)[C@@H]2O)C2C=CC(=O)NC2=O)[C@H](O)[C@@H](F)[C@@H]1O SMNRFWMNPDABKZ-WVALLCKVSA-N 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 7
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 238000011160 research Methods 0.000 description 7
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 description 6
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 6
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 6
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 6
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 6
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 6
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 6
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 6
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- HKIPCXRNASWFRU-UHFFFAOYSA-N 1,3-difluoropropan-2-one Chemical group FCC(=O)CF HKIPCXRNASWFRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 5
- 102000007590 Calpain Human genes 0.000 description 5
- 108010032088 Calpain Proteins 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 5
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 5
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 5
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 5
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 5
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 5
- 229940125810 compound 20 Drugs 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N geneticin Natural products O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(C)O)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N 0.000 description 5
- JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N gtpl8555 Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)N[C@H](B1O[C@@]2(C)[C@H]3C[C@H](C3(C)C)C[C@H]2O1)CCC1=CC=C(F)C=C1 JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- IUWBSFNPVBZGGJ-UHFFFAOYSA-N 10-cyano-2-cyclopentyldecanoic acid Chemical compound N#CCCCCCCCCC(C(=O)O)C1CCCC1 IUWBSFNPVBZGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IXUQUIRLZCRJHA-UHFFFAOYSA-N 2-cyclopentyl-10-methoxy-10-oxodecanoic acid Chemical compound COC(=O)CCCCCCCC(C(O)=O)C1CCCC1 IXUQUIRLZCRJHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100025566 Chymotrypsin-like protease CTRL-1 Human genes 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000856199 Homo sapiens Chymotrypsin-like protease CTRL-1 Proteins 0.000 description 4
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 4
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 4
- RKOTXQYWCBGZLP-UHFFFAOYSA-N N-[(2,4-difluorophenyl)methyl]-2-ethyl-9-hydroxy-3-methoxy-1,8-dioxospiro[3H-pyrido[1,2-a]pyrazine-4,3'-oxolane]-7-carboxamide Chemical compound CCN1C(OC)C2(CCOC2)N2C=C(C(=O)NCC3=C(F)C=C(F)C=C3)C(=O)C(O)=C2C1=O RKOTXQYWCBGZLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 4
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 4
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 4
- 150000002440 hydroxy compounds Chemical class 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 4
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 4
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 4
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 4
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 4
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 4
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000001889 triflyl group Chemical group FC(F)(F)S(*)(=O)=O 0.000 description 4
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 3
- LQQKDSXCDXHLLF-UHFFFAOYSA-N 1,3-dibromopropan-2-one Chemical group BrCC(=O)CBr LQQKDSXCDXHLLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZYJSTSMEUKNCEV-UHFFFAOYSA-N 3-diazo-1-diazonioprop-1-en-2-olate Chemical group [N-]=[N+]=CC(=O)C=[N+]=[N-] ZYJSTSMEUKNCEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 3
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 3
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YASYEJJMZJALEJ-UHFFFAOYSA-N Citric acid monohydrate Chemical compound O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O YASYEJJMZJALEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010013801 Duchenne Muscular Dystrophy Diseases 0.000 description 3
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 3
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 3
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 3
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 3
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- BULLHNJGPPOUOX-UHFFFAOYSA-N chloroacetone Chemical group CC(=O)CCl BULLHNJGPPOUOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000002638 denervation Effects 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N diisopropylamine Chemical compound CC(C)NC(C)C UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 3
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 3
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 150000007659 semicarbazones Chemical class 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N thioacetazone Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(\C=N\NC(N)=S)C=C1 SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N 0.000 description 3
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003656 tris buffered saline Substances 0.000 description 3
- 230000001810 trypsinlike Effects 0.000 description 3
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 3
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 3
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 3
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 3
- JHMUQIZIPLJEHW-SANMLTNESA-N (2s)-5-[[amino-[(2,4,6-trimethylphenyl)sulfonylamino]methylidene]amino]-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanoic acid Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 JHMUQIZIPLJEHW-SANMLTNESA-N 0.000 description 2
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SUNMBRGCANLOEG-UHFFFAOYSA-N 1,3-dichloroacetone Chemical class ClCC(=O)CCl SUNMBRGCANLOEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BMIBJCFFZPYJHF-UHFFFAOYSA-N 2-methoxy-5-methyl-3-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyridine Chemical compound COC1=NC=C(C)C=C1B1OC(C)(C)C(C)(C)O1 BMIBJCFFZPYJHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XAWCLWKTUKMCMO-UHFFFAOYSA-N 2-nitroethylbenzene Chemical compound [O-][N+](=O)CCC1=CC=CC=C1 XAWCLWKTUKMCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUINQVUTGQDCGQ-UHFFFAOYSA-N 3-amino-1-fluoro-4-phenylbutan-2-ol Chemical compound FCC(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 JUINQVUTGQDCGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GZLMFCWSEKVVGO-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxy-5-methylhexanoate Chemical compound CC(C)CC(N)C(O)C(O)=O GZLMFCWSEKVVGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZRCNMBGHBUBALZ-UHFFFAOYSA-N 6-cyanohexane-1-sulfonyl chloride Chemical compound ClS(=O)(=O)CCCCCCC#N ZRCNMBGHBUBALZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UJTTUOLQLCQZEA-UHFFFAOYSA-N 9h-fluoren-9-ylmethyl n-(4-hydroxybutyl)carbamate Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)NCCCCO)C3=CC=CC=C3C2=C1 UJTTUOLQLCQZEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical group CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- PGGUOGKHUUUWAF-ROUUACIJSA-N Calpeptin Chemical compound CCCC[C@@H](C=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 PGGUOGKHUUUWAF-ROUUACIJSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YVHAIVPPUIZFBA-UHFFFAOYSA-N Cyclopentylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1CCCC1 YVHAIVPPUIZFBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002271 DEAE-Sepharose Polymers 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 2
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 2
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine hydrochloride Chemical compound Cl.ON WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008930 Low Back Pain Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 101100366159 Mus musculus Sod1 gene Proteins 0.000 description 2
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000708 Proteasome Endopeptidase Complex Proteins 0.000 description 2
- 102000004245 Proteasome Endopeptidase Complex Human genes 0.000 description 2
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 2
- 206010001584 alcohol abuse Diseases 0.000 description 2
- 208000025746 alcohol use disease Diseases 0.000 description 2
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 2
- SEWLQRPKYMZHDM-ZDUSSCGKSA-N benzyl n-[(2s)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]carbamate Chemical compound CC(C)C[C@@H](C=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 SEWLQRPKYMZHDM-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 108010082989 calpeptin Proteins 0.000 description 2
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000037012 chymotrypsin-like activity Effects 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- YPHMISFOHDHNIV-FSZOTQKASA-N cycloheximide Chemical compound C1[C@@H](C)C[C@H](C)C(=O)[C@@H]1[C@H](O)CC1CC(=O)NC(=O)C1 YPHMISFOHDHNIV-FSZOTQKASA-N 0.000 description 2
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- NKLCNNUWBJBICK-UHFFFAOYSA-N dess–martin periodinane Chemical compound C1=CC=C2I(OC(=O)C)(OC(C)=O)(OC(C)=O)OC(=O)C2=C1 NKLCNNUWBJBICK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 238000010410 dusting Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- AMANDCZTVNQSNB-UHFFFAOYSA-N glyoxamide Chemical compound NC(=O)C=O AMANDCZTVNQSNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- VBZWSGALLODQNC-UHFFFAOYSA-N hexafluoroacetone Chemical group FC(F)(F)C(=O)C(F)(F)F VBZWSGALLODQNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011539 homogenization buffer Substances 0.000 description 2
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine hydrate Chemical compound O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- ZCSHNCUQKCANBX-UHFFFAOYSA-N lithium diisopropylamide Chemical compound [Li+].CC(C)[N-]C(C)C ZCSHNCUQKCANBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N n-[(2s,3r,4r,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-(4-methyl-2-oxochromen-7-yl)oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]acetamide Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](NC(C)=O)[C@H](OC=2C=C3OC(=O)C=C(C)C3=CC=2)O[C@@H]1CO UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N 0.000 description 2
- BDJRBEYXGGNYIS-UHFFFAOYSA-N nonanedioic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCCC(O)=O BDJRBEYXGGNYIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N oxidanium;4-methylbenzenesulfonate Chemical compound O.CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 2
- 238000007427 paired t-test Methods 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M potassium bisulfate Chemical compound [K+].OS([O-])(=O)=O CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229910000343 potassium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 101150062190 sod1 gene Proteins 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N (1R,9R,10S,11R,12R,15S,18S,21R)-10,11,21-trihydroxy-8,8-dimethyl-14-methylidene-4-(prop-2-enylamino)-20-oxa-5-thia-3-azahexacyclo[9.7.2.112,15.01,9.02,6.012,18]henicosa-2(6),3-dien-13-one Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](O)[C@@]23C(C1=C)=O)C[C@H]2[C@]12C(N=C(NCC=C)S4)=C4CC(C)(C)[C@H]1[C@H](O)[C@]3(O)OC2 UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N 0.000 description 1
- ABJSOROVZZKJGI-OCYUSGCXSA-N (1r,2r,4r)-2-(4-bromophenyl)-n-[(4-chlorophenyl)-(2-fluoropyridin-4-yl)methyl]-4-morpholin-4-ylcyclohexane-1-carboxamide Chemical compound C1=NC(F)=CC(C(NC(=O)[C@H]2[C@@H](C[C@@H](CC2)N2CCOCC2)C=2C=CC(Br)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1 ABJSOROVZZKJGI-OCYUSGCXSA-N 0.000 description 1
- GLGNXYJARSMNGJ-VKTIVEEGSA-N (1s,2s,3r,4r)-3-[[5-chloro-2-[(1-ethyl-6-methoxy-2-oxo-4,5-dihydro-3h-1-benzazepin-7-yl)amino]pyrimidin-4-yl]amino]bicyclo[2.2.1]hept-5-ene-2-carboxamide Chemical compound CCN1C(=O)CCCC2=C(OC)C(NC=3N=C(C(=CN=3)Cl)N[C@H]3[C@H]([C@@]4([H])C[C@@]3(C=C4)[H])C(N)=O)=CC=C21 GLGNXYJARSMNGJ-VKTIVEEGSA-N 0.000 description 1
- IUSARDYWEPUTPN-OZBXUNDUSA-N (2r)-n-[(2s,3r)-4-[[(4s)-6-(2,2-dimethylpropyl)spiro[3,4-dihydropyrano[2,3-b]pyridine-2,1'-cyclobutane]-4-yl]amino]-3-hydroxy-1-[3-(1,3-thiazol-2-yl)phenyl]butan-2-yl]-2-methoxypropanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](C)OC)[C@H](O)CN[C@@H]1C2=CC(CC(C)(C)C)=CN=C2OC2(CCC2)C1)C(C=1)=CC=CC=1C1=NC=CS1 IUSARDYWEPUTPN-OZBXUNDUSA-N 0.000 description 1
- WXSTZZVBULFWJM-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-(cyclohexa-1,3-dien-1-ylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1=CC=CCC1 WXSTZZVBULFWJM-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 1
- QTWZCODKTSUZJN-LJAQVGFWSA-N (2s)-5-[[amino-[(2,2,5,7,8-pentamethyl-3,4-dihydrochromen-6-yl)sulfonylamino]methylidene]amino]-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)NS(=O)(=O)C(C(C)=C1C)=C(C)C2=C1OC(C)(C)CC2 QTWZCODKTSUZJN-LJAQVGFWSA-N 0.000 description 1
- STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N (2s)-n-[(3s,4s)-5-acetyl-7-cyano-4-methyl-1-[(2-methylnaphthalen-1-yl)methyl]-2-oxo-3,4-dihydro-1,5-benzodiazepin-3-yl]-2-(methylamino)propanamide Chemical compound O=C1[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC)[C@H](C)N(C(C)=O)C2=CC(C#N)=CC=C2N1CC1=C(C)C=CC2=CC=CC=C12 STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N 0.000 description 1
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 1
- QLIMAARBRDAYGQ-UHFFFAOYSA-N 1,6-diiodohexane Chemical compound ICCCCCCI QLIMAARBRDAYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZDTZHQLABJVLE-UHFFFAOYSA-N 1,8-diiodooctane Chemical compound ICCCCCCCCI KZDTZHQLABJVLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 1-[(1R)-1-(2,4-dichlorophenyl)ethyl]-6-[(4S,5R)-4-[(2S)-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]-5-methylcyclohexen-1-yl]pyrazolo[3,4-b]pyrazine-3-carbonitrile Chemical compound ClC1=C(C=CC(=C1)Cl)[C@@H](C)N1N=C(C=2C1=NC(=CN=2)C1=CC[C@@H]([C@@H](C1)C)N1[C@@H](CCC1)CO)C#N KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 0.000 description 1
- WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 1-[(3s,4s)-4-[8-(2-chloro-4-pyrimidin-2-yloxyphenyl)-7-fluoro-2-methylimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-3-fluoropiperidin-1-yl]-2-hydroxyethanone Chemical compound CC1=NC2=CN=C3C=C(F)C(C=4C(=CC(OC=5N=CC=CN=5)=CC=4)Cl)=CC3=C2N1[C@H]1CCN(C(=O)CO)C[C@@H]1F WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 0.000 description 1
- JDMJTVYLKDAEMS-UHFFFAOYSA-N 1-aminocyclopentane-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(N)CCCC1.OC(=O)C1(N)CCCC1 JDMJTVYLKDAEMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPLCHTDCGSUFBC-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-3-nitro-4-phenylbutan-2-ol Chemical compound FCC(O)C([N+]([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 WPLCHTDCGSUFBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KUKYLJLXQBXLFT-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-cyclopentyl-10-(trifluoromethylsulfonyl)decanoic acid Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)CCCCCCCCC(N)(C(O)=O)C1CCCC1 KUKYLJLXQBXLFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 2-amino-9-[(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-8-(6-aminopurin-9-yl)-9,18-difluoro-3,12-dihydroxy-3,12-bis(sulfanylidene)-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3lambda5,12lambda5-diphosphatricyclo[13.2.1.06,10]octadecan-17-yl]-1H-purin-6-one Chemical compound NC1=NC2=C(N=CN2[C@@H]2O[C@@H]3COP(S)(=O)O[C@@H]4[C@@H](COP(S)(=O)O[C@@H]2[C@@H]3F)O[C@H]([C@H]4F)N2C=NC3=C2N=CN=C3N)C(=O)N1 YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 0.000 description 1
- QIJFGHFJFJBBHG-UHFFFAOYSA-N 2-cyclopentyl-10-(trifluoromethylsulfonylamino)decanoic acid Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)NCCCCCCCCC(C(=O)O)C1CCCC1 QIJFGHFJFJBBHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GGDYAKVUZMZKRV-UHFFFAOYSA-N 2-fluoroethanol Chemical compound OCCF GGDYAKVUZMZKRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WGTASENVNYJZBK-UHFFFAOYSA-N 3,4,5-trimethoxyamphetamine Chemical compound COC1=CC(CC(C)N)=CC(OC)=C1OC WGTASENVNYJZBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 3-[(1r)-1-[(2r,6s)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]ethyl]-n-[6-methyl-3-(1h-pyrazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyrazin-8-yl]-1,2-thiazol-5-amine Chemical compound N1([C@H](C)C2=NSC(NC=3C4=NC=C(N4C=C(C)N=3)C3=CNN=C3)=C2)C[C@H](C)O[C@H](C)C1 QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 0.000 description 1
- RHVLBJPNWATWIM-UHFFFAOYSA-N 3-amino-1,1-difluoropropan-2-ol Chemical compound NCC(O)C(F)F RHVLBJPNWATWIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100039217 3-ketoacyl-CoA thiolase, peroxisomal Human genes 0.000 description 1
- HVVQSKCGHAPHMV-UHFFFAOYSA-N 7-bromoheptanenitrile Chemical compound BrCCCCCCC#N HVVQSKCGHAPHMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 108010022579 ATP dependent 26S protease Proteins 0.000 description 1
- 102000007566 ATP-Dependent Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010071550 ATP-Dependent Proteases Proteins 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 241000024188 Andala Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- KWTQSFXGGICVPE-WCCKRBBISA-N Arginine hydrochloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N KWTQSFXGGICVPE-WCCKRBBISA-N 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 208000008035 Back Pain Diseases 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- BQXUPNKLZNSUMC-YUQWMIPFSA-N CCN(CCCCCOCC(=O)N[C@H](C(=O)N1C[C@H](O)C[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)c1ccc(cc1)-c1scnc1C)C(C)(C)C)CCOc1ccc(cc1)C(=O)c1c(sc2cc(O)ccc12)-c1ccc(O)cc1 Chemical compound CCN(CCCCCOCC(=O)N[C@H](C(=O)N1C[C@H](O)C[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)c1ccc(cc1)-c1scnc1C)C(C)(C)C)CCOc1ccc(cc1)C(=O)c1c(sc2cc(O)ccc12)-c1ccc(O)cc1 BQXUPNKLZNSUMC-YUQWMIPFSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006956 Calcium deficiency Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 229940126639 Compound 33 Drugs 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 102000005927 Cysteine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010005843 Cysteine Proteases Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 1
- YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N Diazomethane Chemical compound C=[N+]=[N-] YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 1
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101100153048 Homo sapiens ACAA1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000961414 Homo sapiens Membrane cofactor protein Proteins 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- MRAUNPAHJZDYCK-BYPYZUCNSA-N L-nitroarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(=N)N[N+]([O-])=O MRAUNPAHJZDYCK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 208000010428 Muscle Weakness Diseases 0.000 description 1
- 208000029549 Muscle injury Diseases 0.000 description 1
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 1
- 108010021466 Mutant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008300 Mutant Proteins Human genes 0.000 description 1
- USPFMEKVPDBMCG-LBPRGKRZSA-N N-benzyloxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 USPFMEKVPDBMCG-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N N-{[3-(2-benzamido-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)-pyrazol-5-yl]carbonyl}-G-dR-G-dD-dD-dD-NH2 Chemical compound S1C(C=2NN=C(C=2)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(N)=O)=C(C)N=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N 0.000 description 1
- FZRKAZHKEDOPNN-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide anion Chemical compound O=[N-] FZRKAZHKEDOPNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 108010019759 OVA 323-339 Proteins 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241000168036 Populus alba Species 0.000 description 1
- 208000003286 Protein-Energy Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 239000007868 Raney catalyst Substances 0.000 description 1
- NPXOKRUENSOPAO-UHFFFAOYSA-N Raney nickel Chemical compound [Al].[Ni] NPXOKRUENSOPAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000564 Raney nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000037656 Respiratory Sounds Diseases 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 241000566107 Scolopax Species 0.000 description 1
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 description 1
- PNUZDKCDAWUEGK-CYZMBNFOSA-N Sitafloxacin Chemical compound C([C@H]1N)N(C=2C(=C3C(C(C(C(O)=O)=CN3[C@H]3[C@H](C3)F)=O)=CC=2F)Cl)CC11CC1 PNUZDKCDAWUEGK-CYZMBNFOSA-N 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 201000008754 Tenosynovial giant cell tumor Diseases 0.000 description 1
- 108091005501 Threonine proteases Proteins 0.000 description 1
- 102000035100 Threonine proteases Human genes 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 206010047626 Vitamin D Deficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010047924 Wheezing Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N [(1s,3r,4ar,7s,8s,8as)-3-hydroxy-8-[2-[(4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-7-methyl-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahydronaphthalen-1-yl] (2s)-2-methylbutanoate Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=C[C@H]2C[C@@H](O)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)CC1C[C@@H](O)CC(=O)O1 LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N 0.000 description 1
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- PMZXXNPJQYDFJX-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound CC#N.OC(=O)C(F)(F)F PMZXXNPJQYDFJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000004716 alpha keto acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 108010058966 bacteriophage T7 induced DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- DEFQOUMSQROPKZ-UHFFFAOYSA-N benzyl 10-cyano-2-cyclopentyldecanoate Chemical compound C1CCCC1C(CCCCCCCCC#N)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 DEFQOUMSQROPKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPRCTKXDMIBVSF-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-cyclopentyl-10-(trifluoromethylsulfonylamino)decanoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1COC(=O)C(CCCCCCCCNS(=O)(=O)C(F)(F)F)C1CCCC1 WPRCTKXDMIBVSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YGCTUJBBGTXEIM-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-cyclopentyl-10-iododecanoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1COC(=O)C(CCCCCCCCI)C1CCCC1 YGCTUJBBGTXEIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBMXKZIDIGILNB-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-cyclopentylacetate Chemical compound C=1C=CC=CC=1COC(=O)CC1CCCC1 QBMXKZIDIGILNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N benzyl n-[(2r)-1-[(2s,4r)-2-[[(2s)-6-amino-1-(1,3-benzoxazol-2-yl)-1,1-dihydroxyhexan-2-yl]carbamoyl]-4-[(4-methylphenyl)methoxy]pyrrolidin-1-yl]-1-oxo-4-phenylbutan-2-yl]carbamate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CO[C@H]1CN(C(=O)[C@@H](CCC=2C=CC=CC=2)NC(=O)OCC=2C=CC=CC=2)[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)(O)C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C1 KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 1
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 125000005620 boronic acid group Chemical class 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003123 bronchiole Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960004424 carbon dioxide Drugs 0.000 description 1
- IYRWEQXVUNLMAY-UHFFFAOYSA-N carbonyl fluoride Chemical compound FC(F)=O IYRWEQXVUNLMAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000006652 catabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004640 cellular pathway Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940125758 compound 15 Drugs 0.000 description 1
- 229940126086 compound 21 Drugs 0.000 description 1
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 1
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 1
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 1
- 229940127204 compound 29 Drugs 0.000 description 1
- 229940125877 compound 31 Drugs 0.000 description 1
- 229940125878 compound 36 Drugs 0.000 description 1
- 229940125807 compound 37 Drugs 0.000 description 1
- 229940127573 compound 38 Drugs 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001916 cyano esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035647 diffuse type tenosynovial giant cell tumor Diseases 0.000 description 1
- 229940043279 diisopropylamine Drugs 0.000 description 1
- MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N diphenylphosphoryl azide Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(=O)(N=[N+]=[N-])C1=CC=CC=C1 MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- RMEDXOLNCUSCGS-UHFFFAOYSA-N droperidol Chemical compound C1=CC(F)=CC=C1C(=O)CCCN1CC=C(N2C(NC3=CC=CC=C32)=O)CC1 RMEDXOLNCUSCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001516 effect on protein Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical class CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 125000005519 fluorenylmethyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 210000005224 forefinger Anatomy 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000009760 functional impairment Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N hexamethylphosphoric triamide Chemical compound CN(C)P(=O)(N(C)C)N(C)C GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 102000044446 human CD46 Human genes 0.000 description 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 1
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- USZLCYNVCCDPLQ-UHFFFAOYSA-N hydron;n-methoxymethanamine;chloride Chemical compound Cl.CNOC USZLCYNVCCDPLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNXVOSBNFZWHBV-UHFFFAOYSA-N hydron;o-methylhydroxylamine;chloride Chemical compound Cl.CON XNXVOSBNFZWHBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000013383 initial experiment Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 239000012280 lithium aluminium hydride Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000004199 lung function Effects 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- XBRFNEKTALUYGC-UHFFFAOYSA-L magnesium;2-fluoro-3-oxo-3-phenylmethoxypropanoate Chemical compound [Mg+2].[O-]C(=O)C(F)C(=O)OCC1=CC=CC=C1.[O-]C(=O)C(F)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 XBRFNEKTALUYGC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 210000002161 motor neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000020763 muscle atrophy Effects 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 210000001087 myotubule Anatomy 0.000 description 1
- XNLBCXGRQWUJLU-UHFFFAOYSA-N naphthalene-2-carbonyl chloride Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C(=O)Cl)=CC=C21 XNLBCXGRQWUJLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007857 nested PCR Methods 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 230000000626 neurodegenerative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001272 neurogenic effect Effects 0.000 description 1
- 208000018360 neuromuscular disease Diseases 0.000 description 1
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 230000008518 non respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 208000030212 nutrition disease Diseases 0.000 description 1
- 208000019180 nutritional disease Diseases 0.000 description 1
- HYDZPXNVHXJHBG-UHFFFAOYSA-N o-benzylhydroxylamine;hydron;chloride Chemical compound Cl.NOCC1=CC=CC=C1 HYDZPXNVHXJHBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PIDFDZJZLOTZTM-KHVQSSSXSA-N ombitasvir Chemical compound COC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NC1=CC=C([C@H]2N([C@@H](CC2)C=2C=CC(NC(=O)[C@H]3N(CCC3)C(=O)[C@@H](NC(=O)OC)C(C)C)=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)C(C)(C)C)C=C1 PIDFDZJZLOTZTM-KHVQSSSXSA-N 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000001769 paralizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005544 phthalimido group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- FYRHIOVKTDQVFC-UHFFFAOYSA-M potassium phthalimide Chemical compound [K+].C1=CC=C2C(=O)[N-]C(=O)C2=C1 FYRHIOVKTDQVFC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 208000026526 progressive weakness Diseases 0.000 description 1
- 230000004844 protein turnover Effects 0.000 description 1
- 235000020826 protein-energy malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 210000003456 pulmonary alveoli Anatomy 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 210000001995 reticulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000007442 rickets Diseases 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- MNWBNISUBARLIT-UHFFFAOYSA-N sodium cyanide Chemical compound [Na+].N#[C-] MNWBNISUBARLIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- KKCBUQHMOMHUOY-UHFFFAOYSA-N sodium oxide Chemical compound [O-2].[Na+].[Na+] KKCBUQHMOMHUOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001948 sodium oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000013223 sprague-dawley female rat Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000037351 starvation Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012134 supernatant fraction Substances 0.000 description 1
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- QWCFTRJAAHAHPA-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 8-iodooctanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CCCCCCCI QWCFTRJAAHAHPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WMOVHXAZOJBABW-UHFFFAOYSA-N tert-butyl acetate Chemical compound CC(=O)OC(C)(C)C WMOVHXAZOJBABW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 208000002918 testicular germ cell tumor Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000002345 thrombinlike Effects 0.000 description 1
- 210000003813 thumb Anatomy 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- 210000003371 toe Anatomy 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N triethyl orthoformate Chemical compound CCOC(OCC)OCC GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRGCWBWNLSTIEN-UHFFFAOYSA-N trifluoromethanesulfonyl chloride Chemical compound FC(F)(F)S(Cl)(=O)=O GRGCWBWNLSTIEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
- C07D209/44—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles
- C07D209/48—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles with oxygen atoms in positions 1 and 3, e.g. phthalimide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
- A61K31/18—Sulfonamides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
- A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
- A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
- A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
- A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/275—Nitriles; Isonitriles
- A61K31/277—Nitriles; Isonitriles having a ring, e.g. verapamil
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline
- A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
- A61K31/4035—Isoindoles, e.g. phthalimide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
- C07C279/30—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to nitro or nitroso groups
- C07C279/32—N-nitroguanidines
- C07C279/36—Substituted N-nitroguanidines
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
- C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
- C07C311/02—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
- C07C311/09—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by at least two halogen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
- C07C311/30—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
- C07C311/45—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups at least one of the singly-bound nitrogen atoms being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom, e.g. N-acylaminosulfonamides
- C07C311/47—Y being a hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
- C07C311/50—Compounds containing any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
- C07C311/52—Y being a hetero atom
- C07C311/64—X and Y being nitrogen atoms, e.g. N-sulfonylguanidine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C337/00—Derivatives of thiocarbonic acids containing functional groups covered by groups C07C333/00 or C07C335/00 in which at least one nitrogen atom of these functional groups is further bound to another nitrogen atom not being part of a nitro or nitroso group
- C07C337/06—Compounds containing any of the groups, e.g. thiosemicarbazides
- C07C337/08—Compounds containing any of the groups, e.g. thiosemicarbazides the other nitrogen atom being further doubly-bound to a carbon atom, e.g. thiosemicarbazones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
- C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
- C07D311/70—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with two hydrocarbon radicals attached in position 2 and elements other than carbon and hydrogen in position 6
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table
- C07F5/02—Boron compounds
- C07F5/025—Boronic and borinic acid compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0207—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)4-C(=0), e.g. 'isosters', replacing two amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06086—Dipeptides with the first amino acid being basic
- C07K5/06095—Arg-amino acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
- C07C2601/06—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring
- C07C2601/08—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring the ring being saturated
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Neurology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Macromonomer-Based Addition Polymer (AREA)
- Pyrane Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本文公开了由通式(I)所表示的多相催化蛋白酶的抑制剂。还公开了组成成员及优选的组成成员。制备和使用所披露化合物的方法也在本文中公开。
Description
相关申请的相互参考
本申请是1995年6月5日申请、申请序号为464,398的美国申请的部分后续申请,而后一申请又是1994年11月14日申请、申请序号为337,795的美国申请的部分后续申请。
发明领域
本发明涉及多相催化蛋白酶抑制剂、包括这些抑制剂的组合物和用MCP抑制剂,例如,阻抑在各种生理状态发生的肌肉物质损失的方法。
发明背景
真核细胞经常降解,而且细胞内的蛋白质也经常置换。这使细胞可选择性地和快速地去除具有异常构相的蛋白质和肽,通过调节调控肽的量来控制代谢途径,以及在必要时,如在饥饿时,为供能而提供氨基酸。参见Goldberg,A.L.&St.John,A.C.Annu.Rev.Biochem.(年度生化回顾)45:747-803(1976)。哺乳动物的细胞机制使蛋白质降解有多条途径。这些途径中的一些需要三磷酸腺苷(ATP)形式能量的输入。参见Goldberg,A.L.&St.John,期卷同上文。
多相催化蛋白酶(MCP,一般也被称为蛋白酶体(proteasome)、多相催化蛋白酶复合体、多相内肽酶复合体、20S蛋白酶体和ingensin)是大分子量(700kD)的真核非溶酶体蛋白酶复合体,它至少在将蛋白质降解为肽和氨基酸的两条细胞途径中起作用。参见Orlowski,M.Biochemistry(生物化学)29(45)10289-10297(1990)。该复合体具有至少三个不同的水解活性类型:(1)胰蛋白酶样活性类型,其中的肽键在碱性氨基酸的羧基端断裂;(2)胰凝乳蛋白酶样活性类型,其中的肽键在疏水氨基酸的羧基端断裂;以及(3)其中的肽键在谷氨酸的羧基端断裂的活性类型。参见Rivertt,A.J.J.Biol.Chem.(生物学化学期刊)264:2112215-12219(1989)和Orlowski,期卷同上文。
涉及MCP的蛋白质水解的一条途径也涉及多肽″遍在蛋白质″。Hershko,A. & Crechavh,A.Annu.Rev.Biochem.(年度生化回顾)51:335-364(1982)。需要MCP、ATP和遍在蛋白质的该途径在生长的成纤维细胞和成熟网状细胞中负责高度异常的蛋白质、某些短寿命的正常蛋白质和蛋白质本体的降解。参见Driscoll,J.and Goldberg,A.L.Proc.Nat.Acad.Sci.U.S.A.(美国自然科学进展)86:787-791(1989)。被该途径降解的蛋白质以依赖ATP的方式通过其赖氨酸的氨基与遍在蛋白质共价结合。然后,遍在蛋白质结合的蛋白质通过ATP依赖的蛋白酶复合体,被26S蛋白酶体降解成小肽,所述26S蛋白酶体含有作为其蛋白水解核心的MCP。Goldberg,A.L. & Rock,K.L.Nature 357:375-379(1992)。
还描述了需要MCP和ATP而不需要遍在蛋白质的第二种途径。参见Driscoll,J.and Goldberg,A.L.,期卷同上文。在该过程中,MCP以依赖ATP的方式降解蛋白质。参见Driscoll,J.and Goldberg,A.L.,期卷同上文。该过程已在骨骼肌中观察到。参见Driscoll,J.and Goldberg,A.L.,期卷同上文。然而,还有人建议,在肌肉中MCP与另外的蛋白酶multipain协同作用,因此导致肌肉蛋白质的加速降解。参见Goldberg&Rock,期卷同上文。
已有报道说MCP通过蛋白水解机制起作用,该机制的活性位点亲核物质是N-末端的苏氨酸残基的羟基。因此,MCP是已知的苏氨酸蛋白酶的第一个例子。参见Seemuller,et al.,Science(科学)(1995)268579-582;Goldberg,A.L.,Science(科学)(1985)268 522-523。
细胞蛋白质合成和降解途径的相对活性决定了蛋白质是积累下来还是被损失掉了。蛋白质物质的异常损失与数种疾病状态如肌肉营养不良、心性恶病质、肺气肿、麻风病、营养不良、骨软化、幼儿急性白血病和癌恶病质有关。在老年化、长期住院或长期卧病在床和慢性背下部疼痛的患者中也观察到肌肉物质的损失。
由于去神经或废用,骨骼肌将快速萎缩,导致其大小、蛋白质含量和收缩力的显著下降。该萎缩是人类许多神经肌肉疾病的重要组成。蛋白质降解的增多被看做是去神经萎缩中的肌肉消耗的主要原因。Furono,K.et al.J.Biochem.(生化期刊)265/15:8550-8557(1990)。虽然还未鉴定出涉及肌肉中的蛋白质水解的特定过程,已有证据表明MCP与肌肉蛋白质的加速降解相关。参见,例如,Furono,期卷同上文,和PCT公开申请WO 92/20804(公开日为1992年11月26日)。
数种疾病状态涉及MCP活性。例如,已有报道在人白血病细胞系中有异常高的MCP表达。Kumatori,A.et al.PNAS 87:7071(1990)。还报道在患全身性红斑狼疮(SLE)的患者体中有抗MCP的自身抗体。Arribas,J.et al.J.Exp.Med.(医学实验期刊)173:423-427(1990)。
需要能抑制MCP复合体的试剂;所述试剂为进行例如MCP活性和医学领域的研究人员提供了有价值的工具,以便例如控制异常MCP活性的有害作用。本发明正是针对这些重要目的的。
发明概述
本发明针对新颖的多相催化蛋白酶(″MCP″)抑制剂。本发明的主题还包括抑制与MCP有关的某些紊乱(包括治疗肌肉消耗性疾病)的方法。
本发明的一方面提供具有下列通式的化合物:
组成成员以及优选的组成成员在下文定义。
本发明的化合物可用于各种应用。例如,为在机制上理解MCP途径和通过I类主要组织相容性抗原复合体(MHCI)途径显现肽抗原,可用该化合物来研究以进一步细化和发展体内和体外的模型。
在临床应用方面,可用含有要求被保护化合物的组合物来抑制MCP活性、减少肌肉物质的损失、治疗肌肉消耗性疾病、减少过氧化物歧化酶的降解和治疗特征在于过氧化物歧化酶活性减低的紊乱。
还公开了制备本发明化合物的方法。
随着本发明的继续公开,该化合物的这些和其它特征将进一步地显现出来。
附图的简要说明
图1显示本文公开的MCP抑制剂对M12.B6细胞加工电穿孔的OVA的作用效果。
图2显示OVA的浓度对本发明实施方案加工过程的抑制效果。
图3显示OVA的浓度对本发明实施方案加工过程的抑制效果。
图4显示了定义SOD-1基因以及FALS突变、限制性位点和PCR引物位置的物理图谱。
图5显示与5μM本发明的MCP抑制剂温育后对瞬间转染的293细胞内的SOD-1含量的定量。
图6显示各种SOD-1的同型物对本发明实施方案的剂量反应。
图7显示SOD-1的产量是MCP活性的函数。
优选实施方案的详细说明
本发明提供MCP抑制剂、包括这些抑制剂的组合物以及使用这些抑制剂的方法。本发明的MCP抑制剂,例如,由下列通式代表:其中,
R1选自-C≡N、-C(=O)OR9、苯二甲酰亚氨基、-NH-SO2R9和-NH-J;
R2选自H、羟基、具有1至10个碳原子的烷基和具有3至7个碳原子的环烷基;
R3选自-(CH2)m-NH-C(=N-R5)-NH2、-R6-NO2、-R6-J和-R6-CN;
R4为-CH(CH2-R7)-Q;
Q选自-CH-R8、-C(=O)CH3、-C(=O)CH2Cl、-C(=O)CH2Br、-C(=O)CH2F、-C(=O)CHF2、-C(=O)CF3、-C(=O)C(=O)R7、-C(=O)C(=O)NH-R7、-C(=O)CO2-R7、-C(=O)CO2H、-B(OH)2、和
其中p和q独立地为2或3;
w为环烷基;
R5选自-NO2、-CN、和-J;
R6为-(CH2)m-NH-C(=NH)-NH-;
R7选自苯基、具有1至8个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基、或杂芳基任意取代;
R8选自=O、=N-NHC(=O)-NH2、=N-OH、=N-OCH3、=N-O-CH2-C6H5、=NNH-C(=S)-NH2、和=N-NH-J;
R9选自氢、和具有1至6个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
J为保护基团;
n为3至10的整数;以及
m为2至5的整数。
在一些优选的实施方案中,R1是-C≡N、-C(=O)OCH3、苯二甲酰亚氨基、或-NH-SO2CF3;以及在其它优选的实施方案中,R2是氢和环戊烷基。
R3优选为-(CH2)3-NH-C(=N-R5)-NH2。
R5优选为-NO2、-CN、-PMC、-MTR、-MTS或Tos。
R7优选为-CH(CH3)2、-(CH2)2-CH3、-CH2-CH3、或-C6H5。
R8优选为=O、=N-OH、=N-OCH3、=N-O-CH2-C6H5、=NNH-C(=O)-NH2、=NNH-C(=S)-NH2。
在一些优选的实施方案中,R1为-C(=O)OCH3、苯二甲酰亚氨基或-NH-SO2CF3;R2为环戊烷基;R3为-(CH2)3-NH-C(=N-NO2)-NH2;R7为-CH(CH3)2;以及R8为=O。
在其它优选的实施方案中,R1为-C≡N;R2为环戊烷基;R3为-(CH2)3-NH-C(=N-NO2)-NH2或-(CH2)3-NH-C(=N-J)-NH2;R7为-CH(CH3)2;以及R8为=O。
在进一步优选的实施方案中,R1为C≡N;R2为环戊烷基;R3为-(CH2)3-NH-C(=N-NO2)-NH2或-(CH2)3-NH-C(=N-J)-NH2;R7为-CH(CH3)2;Q为CH-R8;R8为=N-NHC(=O)-NH2、=N-OH、=N-OCH3、或=N-O-CH2-C6H5。
本文所用的术语“烷基”,包括直链、支链和环状烃基如乙基、异丙基和环戊烷基。取代的烷基是其中的一个或多个氢原子被卤素、其它烃基(例如,苯基)、杂芳基、或一个或多个碳原子被氧原子打断的基团所置换的烷基。优选的烷基具有1至约8个碳原子。本文所用的术语″卤素″具有其通常的涵义,包括氟、氯、溴和碘,其中氟是优选的卤素。本发明所用的术语符号″Arg″具有其正常的涵义,它是精氨酸的缩写符号。
本发明的一些实施方案的化合物包含保护基团。本发明所用的术语“保护基团”具有广泛的意义。人们知道保护基团本身是指可选择性地附着到被保护的官能基团(如羟基、氨基和羧基)上并可从其上移去的化学官能团。这些基团存在于化合物中,使所述的被保护的官能基团在该化合物所暴露的化学反应条件下是惰性的。各种各样的保护基团均可用于本发明。一个这样的保护基团是苯二甲酰亚氨基。根据本发明,其它优选的保护基团具有下列通式:
可在Green,T.W.和Wuts,P.G.M.,″Protective Groups in OrganicSynthesis″(第二版,Wily & Son出版,1991)中找到适用于本发明实际操作更具代表性的保护基团,将该文献所公开的全部内容引入本文作参考。
正如以前所指出的,MCP活性与各种紊乱和疾病有关。因为本文所公开的化合物可用于抑制MCP的活性,以及因为该化合物可用于研究和治疗应用,因此通过使MCP与本发明的化合物接触来抑制MCP活性的方法包括将该化合物作为药物或药剂供给包括人在内的哺乳动物。
本文所用的术语″接触″是指将要接触的部分直接或间接地放置在一起,以使所述要接触的部分彼此物理接触。因此接触包括物理行为如将所述要接触的部分一起置于容器中,或用所要接触的部分对患者给药。因此,例如,对表现患有与MCP活性异常相关疾病或紊乱(MCP与这些疾病或紊乱有关)的病人施用本发明的化合物,即在术语″接触″所定义的范围内。
在优选的实施方案中,对患有与MCP异常相关的紊乱(即异常身体状态)、疾病或病理生理壮态的患者施用根据本发明的药物组合物。被施用本发明组合物的紊乱优选是那些直接或间接地产生肌肉物质消耗(即损失)的紊乱,也就是肌肉消耗性疾病。这些紊乱包括肌肉营养不良、心性恶病质、肺气肿、麻风病、营养不良、骨软化、幼儿急性白血病、AIDS恶病质和癌恶病质。
在本发明的上下文中,“施用药物”意味着将药物组合物引入患者体内。优选的施用药物的方法包括静脉内、皮下和肌肉内给药。优选以药物组合物的形式施用该化合物,所述药物组合物含有该化合物和药物学上可接受的载体如生理盐水。其它适当的载体可在Remington’sPharmaceutical Sciences(药物科学),(Mark Pub.Co.,Easton,PA,1980)中找到。
本文所述的化合物在药物组合物中的浓度的变化取决于许多因素,所述因素包括药物施给的剂量、所用的化合物的性质(即疏水性)和给药的途径。总的说来,可使生理缓冲水溶液中含有约0.1-10%(重量/体积)的本发明的化合物,以用于肠胃外给药。通常的剂量范围是约1ug-1g/kg体重/天;优选的剂量范围是约0.01mg-1g/kg体重/天。优选的给药剂量可能依赖于下列可变因素:疾病发展的类型和程度、特定患者的整体健康状况、所选化合物的相对生物学效能、化合物赋形剂的配方和药物的给药途径。本文所用的术语“患者”是指任何类型的脊椎动物。优选的患者是人。
肌营养不良是遗传病,其特征是肌肉纤维的进行性无力和变性,而没有神经退化的征象。患杜兴氏肌营养不良(DMD)的患者显示肌肉物质平均减少67%;在肌强直营养不良的患者中显示部分肌肉蛋白质的合成平均下降了28%,而没有任何非肌肉蛋白质合成的相应降低(可能是由于终末器对同化激素或底物的应答受损害)。已表明在DMD患者的肌肉中有被加速的蛋白质分解。
严重的充血性心力衰竭(CHF)的特征是心性恶病质,即,心肌和骨骼肌均发生肌肉蛋白质消耗,并伴有平均19%的体重减轻。心性恶病质是由肌原纤维蛋白降解速率的增加引起的。
肺气肿是慢性阻塞性肺病,其定义为远离终末非呼吸性细支气管的气体空腔扩大,并伴有肺泡壁的破坏性变化。肺功能降低的临床表现是咳嗽、喘鸣、反复呼吸系统感染、水肿和功能性损害以及寿命缩短。在肺气肿患者中,酪氨酸的流出增加了47%。而且,全身的亮氨酸流保持正常,全身的亮氨酸氧化增加,全身的蛋白质合成却降低。结果是肌肉蛋白质合成减少,并伴随全身蛋白质更新和骨骼肌物质的减少。该减少随着病情的发展和长期的恶化变得日益明显。
在糖尿病中,有手小肌肉的一般性消耗,这是由于慢性部分去神经(神经病)引起的。这在长期疾病的发展过程中变得最为明显,且病情更加严重。
麻风病与发生在拇指和食指的掌骨间的肌肉消耗有关。严重的营养不良的特征是,尤其是严重的肌肉消耗。
骨软化是由维生素D和钙缺乏引起的营养性紊乱。它在儿童中被称为“佝偻病”,在成人中被称为骨软化。它的标志是骨头变软(由于矿化作用受损害、并有类骨质的过量积累)、疼痛、触痛、肌肉消耗和无力、厌食和总体重减轻。该病可由营养不良、反复怀孕和哺乳(消耗贮备的维生素D和钙或使之耗尽)和维生素D抗性引起。
在幼儿急性白血病中,有蛋白质能量营养不良,该营养不良导致骨骼肌消耗。已有研究表明,某些儿童甚至在诊断出白血病之前就表现出肌肉消耗,其肌肉物质平均减少了27%。同时也有33-37%的脂肪组织增多,从而导致相对体重和四肢周缘没有变化。
癌性恶病质是一种复杂的综合症,它发生在各种患有肿瘤和血液学恶性病的患者中。在临床上,癌性恶病质表现为体重减轻、脂肪组织和无脂肪肌肉组织的大量消耗,而且该病是由癌所导致的死亡的一个原因。癌性恶病质患者存活时间较短,对化疗的反应减弱。除了由肌肉消耗引起的紊乱之外,看来另一些情况和条件也以某种方式与肌肉物质的减少相关。所述情况和条件包括由慢性背疼引起的肌肉消耗、年纪过大、因生病或受伤而长期住院、酗酒和皮质类固醇疗法。
已有研究表明,在慢性下背疼痛严重的病例中有脊柱旁(paraspinal)肌肉消耗。脊柱旁肌肉消耗的减少可解除疼痛并使功能改善。
人们还认为老年人的总体虚弱是由肌肉消耗引起。在老化过程中,骨骼肌逐渐被纤维组织代替。结果是肌肉力量显著下降,但无脂肪物质仅边缘减小。
已有研究表明,在遭受外伤或患慢性病以及长期住院的患者中,存在长期持续性的单侧肌肉消耗,肌肉物质平均减少了31%。研究还表明,这可通过加强生理治疗而得到纠正。然而,对于多数的患者而言,用药物治疗来实现改善能更有效。
在酗酒者中,存在前胫骨肌肉的消耗。这近似于肌肉损害,该损害是由神经原性损害引起的,也就是说,由糖酵解和磷酸酶的酶活性受损引起的。酒精滥用持续时间越长,损害变得明显和加剧。用经皮质类固醇治疗的患者表现出肌肉物质的损失。
已经表明MCP可活化炎症的细胞内介质,被称作NFkappa B。参见Baeuerle,P.A.和Henkel,T.(1994)Annu.Rev.Immunol.(免疫学回顾年刊),12,141-179。因此,MCP抑制剂可能具有可用来治疗自身免疫和炎症疾病的用途。
可用本发明的化合物来减轻由前述情形以及其它情形引起的肌肉物质损失。另外,本发明的MCP抑制剂可用在兽医和动物饲养应用方面,以抵御动物的体重减轻,或促进生长。
MCP参与经由I类主要组织相容性复合体(MHC I)途径的肽抗原呈递。参见(Goldberg和Rock,期卷同上文;还参见Rock等,Cell(细胞),78:761-771(1994)(下文称之为“Rock等”)。因此,MCP抑制剂可用作研究试剂,在所述研究中MCHI途径的抑制是人们所希望的;以及用于减轻与异常MHC-I抗原加工有关的疾病和紊乱。因为大多数被呈递到MHC-I分子上的肽的精确来源至今还不清楚,并且因为最近积累了一些证据,这些证据说明MCP可能在MHC-I呈递作用中起作用(参见Rock等,期卷同上文),所以本文公开的阻断MHC-I呈递中抗原的蛋白水解加工的MCP抑制剂将在解析该途径的重要性方面发挥作用。
令人惊奇提已经发现本发明的MCP抑制剂了可用以增强Cu/Zn过氧化物岐化酶-1(“SOD-1”)酶的活性。因此,可将这些化合物用于研究领域以研究SOD-1缺乏体系,以及用于治疗特征在于SOD-1酶活性减低的神经退化性或其它疾病(即其中所述的减低可能是紊乱的发病机理)。这些情况包括涉及氧化性应激的疾病如帕金森氏病、阿耳茨海默氏病、杭廷顿氏舞蹈病、中风(stroke)、创伤和局部缺血。
SOD-1是同型二聚体含金属酶,该酶催化有毒性的过氧化物阴离子O2 -歧化变成O2和H2O2。SOD-1是自由基的清道夫,因此它是过氧化物自由基去毒作用的第一道防线,所述过氧化物自由基是需氧代谢的正常副产物。最初发现SOD-1存在于真核生物中,而且在所有类型的细胞的细胞质中均发现了它。SOD-1是生理应答氧毒性的必需的酶,并已被作为与氧化性应激有关的病理状态的治疗剂加以研究。参见Bannister等,CRC Crit.Rev.Biochem.22:111-180(1987);Halliwell等,Methods in Enzymol.(酶学方法),186:1-75(1990);Greenwald,Free Rad.Biol.Med.(自由基生物医学)8:201-209(1990)。
阻碍SOD-1用作治疗剂的特征是当它被外源供给时很难进入细胞内,以及它在血清中的半衰期极短。因此,增强细胞内的SOD-1活性的化合物将使SOD-1治疗有显著的进步。
ALS是由脊髓和脑的大运动神经元变性引起的进行性麻痹性紊乱。大约5-10%的ALS病例是家族性的(FALS),且以常染色体显性方式遗传。最近,在一些患有FALS的家族中已鉴定出16个不同的错义突变,且这些突变发生在编码SOD-1的基因内。参见kosen,D.R.等,Science(科学)261:1047-1051(1993);Deng,H.-X.,等,Nature(自然)362:59-62(1993)。这些突变导致SOD-1活性在红细胞和脑组织中减低,并且已经表明这些突些使SOD-1蛋白质失去稳定,从而导致酶更新增加。参见Bowling,A.C.,等,J.Neurochem.(神经化学期刊)61:2322-2325(1993);Borchelt,D.R.,等,Proc.Natl.Acad.Sci(国家科学院进展)91:8292-8296(1994)。因此,对基于SOD-1和ALS关系的ALS转基因小鼠模型已有描述。Brown,R.H.331/16 NEJM 1901(1994)。
我们已经发现,我们的MCP抑制剂是SOD-1的强有力的阳性效应物。优选的MCP抑制剂(本文称之为化合物14)以剂量依赖的方式特异地使野生型和突变型SOD-1的降解减少。化合物编号基于实施例的编号,所述实施例公开了该化合物的合成,例如化合物14的合成列于实施例14,见下文。正如本文所用的,SOD-1降解的减少是指SOD-1蛋白质分解代谢的速率受到阻抑。
以下面实施例的方式对本发明做进一步的阐述。这些实施例是对本发明的进一步说明,而不是对所附权利要求范围的限制。实施例1:从人体组织中分离多相催化蛋白酶
用自尸体中得到的人肝和脑样品,通过离子交换层析、硫酸铵沉淀、以及凝胶过滤来分离和部分纯化MCP(例如,Driscoll和Goldberg,Proc.Natl.Acad.Sci(国家科学院进展)86,787-791(1989);Yamamoto等,Biochim,Biophys.Acta 882,297-304(1986))。对于每种原料,用10倍体积的含20%甘油的20mM Tris-HCl(pH 7.5)匀浆。在40,000×g离心30分钟后,测定上清液中的MCP的胰凝乳蛋白酶样组分的蛋白水解活性(参见下文)。将上清液在DEAE-Sepharose Fast Flow(DEAE-琼脂糖快速流式)柱上分级分离,所述柱子是以匀化的缓冲液平衡过的。每升上清液用250ml的树脂。上样后,柱子用10体积的匀化缓冲液洗涤,而蛋白质用自0-400mM线性梯度的NaCl洗脱(对于250ml树脂需2升的洗脱液)。测定级分的MCP活性,合并有活性的级分并以80%饱和的(NH4)2SO4沉淀之。离心收集沉淀出的蛋白质,将之重新悬浮于匀化的缓冲液中,并上样到已用牛血清白蛋白(68kDa)标准化过的SephacrylS300HR柱(500ml)树脂体积)中。洗脱出分子量为约650kDa的MCP活性的单个峰。该制备物无其它可测出的蛋白水解活性,而且在4℃下贮存6个月以上仍能维持其MCP活性。将该制备物用于大多数的实验。将该制备物在羟基磷灰石-Ultrogel柱(Yamamoto等,期卷号同上)上进一步分级分离,得到更纯的酶,根据变性的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,该酶由M1在20-35kDa间10个以上的亚单位构成。实施例2:MCP的胰凝乳蛋白酶样和凝蛋白酶样活性的检测
上文所述的MPC的分离步骤产生酶复合体,该复合体的蛋白水解活性是潜在的,但它可通过加入低浓度(0.02-0.05%)的SDS而被活化(Yamainoto等,期卷号同上文)。胰凝乳蛋白酶样活性的检测采取下列步骤:在96孔的微滴定板上,用含0.04%SDS的匀化缓冲液将入MCP稀释4-10倍。加入从Bachem Bioscience Inc.,King of Prussia,Pennsylvania购得的比色底物MeOSuc-EVKM-对-硝基-N-酰苯胺(甲氧基琥珀酰基-Gul-Val-Lys-Met-对-硝基-N-酰苯胺),至其终浓度为100μM,所述比色底物来自其浓度为10mM、溶剂为二甲亚砜的贮备溶液。反应体积为每孔200μl。在37℃温育不同的时间后,游离的对-硝基苯胺的浓度用Biotech EL-340微板读数器测定,读取其在490mn的光吸收值。在底物的水解随时间而线性增加以及吸光度的变化与游离对硝基苯胺的浓度成比例的条件下,测定蛋白酶的活性。或者,使用产荧光的底物甲氧基琥珀酰基-Phe-Leu-Phe-氨基甲基香豆素(Enzyme SystemsProducts,Dublin,CA),并在390nm激发、460nm发光的条件下监测荧光的变化。
按上文所述并加以下列改进,检测人MCP的胰蛋白酶样活性。在补加了1mM的2-硫基乙醇的Tris-甘油缓冲液(pH 9.5)中进行反应,底物是发荧光底物苄氧基羰基-Phe-Arg-AMC(100μM)。
在37℃温育不同的时间后,用带有390nm激发滤器和460nm发光滤器的Fluoroskan II分光荧光计测定游离AMC的浓度。在底物的水解随时间而线性增加以及荧光度的变化与游离AMC的浓度成比例的条件下,测定蛋白酶的活性。实施例3:MCP抑制剂的IC50值的测定
IC50值通常定义为产生50%的酶活性抑制时所需的化合物的浓度(在本申请中,所述化合物指的是本文公开的MCP抑制剂)。IC50值对于化合物的指定用途而言是表征该化合物活性的有用指标。本发明的抑制剂优选具有小于约10μM的IC50值。
在加入底物之前,通过使酶与各种浓度的推测抑制剂于37℃温育15分钟,来测定MCP的胰凝乳蛋白酶样或胰蛋白酶样活性的抑制。每种试验条件的估测重复三次,对于本文公开的抑制剂均进行重复试验。实施例4:抑制细胞肌肉降解的证明:幼年大鼠的不受重(unweighting)萎缩的抑制
测定了几种抑制剂对幼年大鼠的比目鱼肌的不受重萎缩的作用效果。关于该过程的总体讨论请参见Tischler,M.E.(1990)Metabolism(代谢作用)39/7:756-763(下文称该文献为“Tischler-1990”)。
如Jaspers,S.R.和Tischler,M.E.,(1984)J.Appl.Physiol.(应用生理学期刊)57:1472-1479中所述,将幼年雌性Sprague-Dawley大鼠(80-90g)的尾巴除去,将其后肢悬起。使动物的后肢高于笼子的底面,每只动物占一个笼子。动物可以自由采食食物和水,在后肢被悬吊起时和终止时对动物称重。在悬吊期间,每天对动物进行检查,以保证其脚趾不触及笼子的底面,并保证尾巴不因被去除而有任何肿胀。A、试验设计--第1部分
各试验以悬吊起20只大鼠开始,将这20只大鼠随机地分成4组,每组5只。对A组仅悬吊2天,用之提供基线数据,以比较悬吊较长时间的其它动物的比目鱼肌的大小。在研究开始时,比较各组的平均体重,并用作身体大小差异的校正因子。B组是第二对照组,在未受重2天后,一条后肢的比目鱼肌用汞撒利的水溶液处理,以示在未受重期间减慢肌肉萎缩的能力。以前已有人研究过汞撒利,并被证明它在基本上如本文所述的体内模型中可防止萎缩。参见Trischler-1990。在不受重开始后的第2天,将汞撒利的水溶液(200nM;4μl/100g起始体重)注射到一条肢的比目鱼肌中(如前文所述)。对侧肢的肌肉注射类似体积的0.9%的盐水(“载体”)。在原位注射步骤期间,用Innovar-vet(10μl/100g体重)使动物保持安静。注射后,将动物再悬吊24小时,并取出比目鱼肌。各试验的C组和D组用于试验两个不同的本文公开的化合物的实施方案。除了将溶于二甲亚砜中的1mM的MCP抑制剂注射到一条腿的比目鱼肌中而仅将DMSO注射到对侧的比目鱼肌中外,如B组一样对动物进行处理。因此,每个试验由2个对照组和测验本发明MCP抑制剂的试验组组成。用不同组对的抑制剂完成5个这样的试验,提供了n值为10的各MCP抑制剂的试验,各MCP抑制剂均用2批不同的动物进行式。B、比目鱼肌的处理--第1部分
将动物处死后,切取比目鱼肌,剔掉脂肪和结缔组织,并仔细称重。然后,将该肌肉在10%的三氯乙酸(TCA)中匀浆化,离心沉淀沉淀出蛋白质。然后用10%的TCA洗涤沉淀物一次,并用1∶1的乙醇∶乙醚洗涤一次。将最终的沉淀物溶解于4ml 1N的NaOH中。然后以白蛋白作标准物,以双缩脲法分析样品的蛋白质含量。C、数据分析--第1部分
通过与未处理的对侧肌肉配对地比较,初步检查MCP抑制剂对总肌肉蛋白质含量的作用效果。计算含量的比值,然后通过方差分析(“ANOVA”)进行统计分析。左腿通常是处理过的腿,以便蛋白质的含量比值可与未被处理的对照动物做比较。这样,通过比较两条腿的蛋白质含量以及受试MCP抑制剂的相对有效性就可显示出显著差异。为评价各个独立处理的效果还进行了配对t检验。也可用未处理对照的数据来估计第2天的蛋白质含量。这使B、C和D各组在处理24小时后的蛋白质变化得以近似估计。D、试验设计--第2部分
每个试验由10只动物组成,每种抑制剂用5只动物测试,测试其对蛋白质合成的抑制作用。该研究的这方面不需要对照动物,因为可用对侧DMSO处理的肌肉作为抑制剂处理的肌肉的相应对照。如同第1部分中的C组和D组所描述的一样,对各组进行注射。原位处理24小时后,对两块比目鱼肌的蛋白质合成的分数速率进行分析。对各肌肉注射含3H-苯丙氨酸(50mM;1μci/μl)的0.9%盐水溶液(3.5μl/100g最终体重)。15分钟后,将占肌肉三分之二的中段切出,并对肌肉按下文所述进行处理。E、比目鱼肌的处理--第2部分
首先将肌肉在含0.5mM放线菌酮(以终止蛋白质的合成)和20mM环亮氨酸(cycloleucine)(以俘获细胞内的苯丙氨酸)的0.84%盐水内洗涤10分钟。然后将肌肉在2.5ml 2%的冰冷高氯酸中匀浆化。离心使沉淀出的蛋白质成团。取一等分的上清液进行液闪计数,使另一等分的上清液进行苯丙氨酸到苯乙胺的转化,以荧光法测定可溶苯丙氨酸的浓度。参见Garlick,P.J.等,Biochem.J.(生化期刊),192 719-723(1980)和Munoz,K.M.等,1993 Meatbolism(代谢),付印中。这些数值提供了细胞内的特异活性。通过在6N HCl中加热使蛋白质水解后,测定苯丙氨酸在肌肉蛋白质中的特异活性。将释放出的氨基酸溶解在缓冲液中。取一等分进行闪烁计数,另一等分用于上清液部分的苯丙氨酸分析。如下计算蛋白质合成的分数速率:蛋白质的特异活性/细胞内的特异活性×时间。F、数据分析--第2部分
在配对的基础上对各MCP抑制剂进行蛋白质合成分析。以配对t检验比较对侧肌肉,确定抑制剂对蛋白质的合成是否有任何作用效果。蛋白质的降被近似地计算为蛋白质合成的分数率(来自第2部分)加上蛋白质增加的分数率(来自第1部分),其中蛋白质损失使蛋白质增加的值变成负数。
MCP抑制剂定性地减缓蛋白质损失而不影响蛋白质合成的能力表明蛋白质降解的减缓。G、结果
表1表示MCP抑制剂对对照肌肉缺乏作用。
表2表示在未受重的第3天内的蛋白质含量的变化。
表3表示MCP抑制剂对未受重肌肉蛋白质的作用效果。
表4表示MCP抑制剂对未受重肌肉合成的作用效果。
在这些表中,化合物的号码指的是实例的编号,在所述实例中列出了该化合物的合成途径。
表1
MCP抑制剂对对照肌肉缺乏作用
处理 | 蛋白质(mg/肌肉) | |
载体 | 处理 | |
DMSO | 5.9 | 6.7 |
化合物34 | 6.1 | 6.3 |
化合物14 | 6.0 | 6.1 |
化合物20 | 5.7 | 5.9 |
表2
在未受重的第3天蛋白质含量的变化
*显著值
处理 | 蛋白质(mg/肌肉)开始 结果 | 效果(%) | P |
盐水 | 6.5 | 5.7 | -12 | <0.001 |
DMSO | 6.5 | 5.9 | -10 | <0.001 |
汞撒利 | 6.4 | 6.6 | +3 | <0.05 |
化合物34 | 6.3 | 6.6 | +5 | <0.05 |
化合物14 | 6.8 | 6.4 | 0 | >0.1 |
化合物20 | 6.5 | 6.2 | -4 | <0.07* |
化合物16 | 6.3 | 6.0 | -5 | <0.07* |
表3
MCP抑制剂对未受重肌肉蛋白质的作用效果
*显著值
处理 | 蛋白质(mg/肌肉)载体 处理 | 效果(%) | P | |
汞撒利 | 5.7 | 6.6 | 14 | <0.001 |
化合物34 | 5.9 | 6.6 | 12 | <0.001 |
化合物14 | 6.0 | 6.4 | 7 | <0.06* |
化合物20 | 5.9 | 6.2 | 5 | <0.05 |
化合物16 | 5.9 | 6.0 | 0 | >0.1 |
表4MCP抑制剂对未受重肌肉的合成缺乏作用
处理 | 蛋白质(mg/肌肉)载体 MCP抑制剂 | |
化合物34 | 14.5 | 13.3 |
化合物14 | 13.1 | 13.8 |
化合物20 | 14.1 | 14.6 |
实施例5用MHC-1加工显示MCP抑制
测试本发明化合物抑制I类主要组织相容性途径(MHC-1)加工外源OVA抗原的能力。将MCP抑制剂用于功能性抗原加工系统(该系统使抑制剂在抗原加工细胞接触抗原期间被包裹在细胞内),然后固定加工细胞。在不存在抑制剂的情况下,向加工细胞中加入T细胞杂交瘤,以确定肽-MHC-I复合体的表达,该复合体的表达反映在固定前的抗原加工上。
A.细胞培养
将细胞于37℃在维持5%CO2的湿化环境下培养于标准培养基中,该标准培养基为含10%胎牛血清(Hyclone,Logan UT)、5×10-5M 2-巯基乙醇、抗生素和下列添加剂:L-精氨酸HCl(116mg/L)、L-天冬氨酸(36mg/L)、NaHCO3(2g/L)、丙酮酸钠(1mM)的DMEM(Gibco,St.Louis,MO)。请再次参见Harding,C.V.,(1992)Eur.J.Immunol.(欧洲免疫学杂志)22:1865-1869。用M12.B6细胞(由Osami Kanagawa,WashingtonUniversity,ST.Louis,MO慷慨馈赠)进行抗原的呈递;它们是通过将M12.C3鼠源B淋巴瘤细胞和LPS刺激的来源于C57BL/6小鼠的脾细胞(B淋巴母细胞的来源)融合而制得的。因此,它们表达H-2b抗原。DOWBT杂交瘤对于结合了I-Ab或I-Ad的OVA(323-339)肽具有特异性。参见Yewdell等,Science(科学)1988 239:637。B3.1 T杂交瘤细胞对OVA(258-276)-Kb产生应答。
B、电穿孔和抗原加工研究
为了被MHC-1途径加工和呈递,外源抗原(卵清蛋白,OVA)必须渗入到加工细胞的胞液中。通过电穿孔方式将OVA引入到加工细胞(M12.B6)的胞液中。
用具有0.4cm窄缝杯室的Gibco BEL电穿孔器进行电穿孔。电容为800μF,电压为50-300V。于4℃在OVA存在下,在不含血清的RPMI或PMEM(Gibco)中对1.5×107M 12.B6细胞/ml(0.5×107-4.0×107的范围)进行电穿孔。将细胞立即置于冰上。然后加入各种抑制剂,并将细胞移至18℃或37℃。最后用1%的多聚甲醛将细胞轻轻固定约10分钟,并于37℃充分洗涤,防止进一步的加工。以M12.B6细胞刺激B3.1或DOBW T杂交瘤细胞分泌IL-2的能力来确定加工的程度(即,特异性的肽-MHC复合体表达的水平)。用0.2ml的M12.B6细胞(如果固定过,2×105个细胞;如果为活细胞,5×104个细胞)于37℃在102室内对T细胞(105)铺板。两种T杂交瘤均对抗原的刺激产生应答,分泌IL-2(通过IL-2-依赖性CTLL细胞增殖和[H3]胸腺嘧啶的掺入来测定上清液中的IL-2,参见Allen等,J.Imunol(免疫学杂志)132:1077)。
这些研究的结果示于图1-3。图1显示化合物14和16对M12.B6细胞加工电穿孔的OVA的作用效果。图2和图3显示化合物14和20对MHC-1OVA加工的作用效果。两种化合物均能有效地抑OVA的加工。这些资料为本发明化合物的MCP抑制性作用提供了额外的支持。人们接受了经典的MHC-1途径涉及蛋白酶体对抗原的降解。参见Goldberg等,期卷号同上文。因此,这些化合物可用于抗原水解加工重要性的进一步研究。
实施例6
A. Cn/Zn过氧化物歧化酶(SOD-1)降解的减少
I.第1部分--克隆和诱变
小鼠SOD-l cDNA克隆来自Jim Mahaffey(North Carolina StateUniversity,Raleigh,NC)。用聚合酶链式反应(PCR)方法对该克隆进行修饰,以便1)在紧接ATG起始密码子的上游引入Kozak转译起始共同信号(即,5′-GCCGCCACC-3′),2)引入该共同信号至5′端的Hind III限制位点,3)在此cDNA的3′末端引入XhoI限制位点。用于PCR步骤的寡聚核苷酸引物是:5′引物(EH87)=5′-TCG ATCGAAGCTTGCCGCCACCATGGCGATGAAAGC-3′(SEQ ID NO:1),3’引物(EH88)=5’-AGCTAGCCTCGAGCAGATTACAGTTTAATG-3′(SEQ ID NO:2)。将所得的PCR产物用限制酶Hind III和Xho I消化,并将之克隆到Hind III+Xho I消化过的载体pBluescript II SK+(Stratagene Cloning Systems,LaJolla,CA)中,得到pSK-HX2。
用Ho等在Gene(基因)77:51-59(1989)中描述的重叠延伸PCR诱变步骤,将第4位氨基酸(Ala4→Val)(GCG--GTG)和第113位氨基酸(Ile13→Thr)的FALS点突变引入SOD-1 cDNA克隆pSK-HX2中。Ile13→Thr的突变体的构建如下:用5′引物EH78和3′引物EH84来产生5′PCR片段;其中EH78的核苷酸序列为5′-TTAATCCTCACTCTAAGAAAC-3′(SEQ ID NO:3)(SOD-1 cDNA的第193至213位的核苷酸,其中的#1是ATG起始密码子中的A),EH84的核苷酸序列为5′-TTGTACGGCCAGTGATGGAATGCT-3′(SEQ ID NO:4)(第351-328位的核苷酸)。用5′引物EH83和3′引物EH42来构建3′PCR片段;其中EH83的核苷酸序列为5′-AGCATTCCATCACTGGCCGTACAA-3′(SEQ IDNO:5)(第328-351位的核苷酸),EH42的核苷酸序列为5′-TAATACGACTCACTATAGGG-3′(SEQ ID NO:6)(pBluescript II SK+的第625至645位的核苷酸)。在第二步的PCR反应中将50ng的5′和3′PCR片段结合起来,并用引物EH78和EH42扩增。用Bal I和Xho I消化该PCR产物,并克隆到已被Bal I+Xho I消化过的pSK-HX2中。由此,天然的255bp的Bal I/Xho I片段被FALS突变片段所置换(克隆pSK-113)。
Ala4→Val的突变的构建如下:用5′引物EH105和3′引物EH41产生5′PCR片段;其中EH105的核苷酸序列为5′-GCACACCACTTTCATCGCCATGGTGGCGGCAAGCTTCGATC-3′(SEQ ID NO:7)(第+21至-20位的核苷酸),EH41的核苷酸序列为5′-ATTAACCCTCACTAAAGGGA-3′(SEQ ID NO:8)(pBluescript II SK+的第792至773位的核苷酸)。用5′引物EH104和3′引物EH103来产生3′PCR片段;其中EH104的核苷酸序列为5′GATCGAAGCTTGCCGCCACCATGGCGATGAAAGTGGTGTGC-3′(SEQ ID NO:9)(第-20至+21位的核苷酸),EH103的核苷酸序列为5′-CTTCAGTTAATCCTGTAA-3′(SEQID NO:10)(第123至106位的核苷酸)。如上文所述,在第二步的PCR反应中,将50ng的5′和3′PCR片段结合起来,并用引物EH41和EH103扩增。用Hind III和Rsr II消化该PCR产物,将之克隆到Hind III+Rsr II消化过的PSK-HX2中,由此,天然的51bp的Hind III/Rsr II片段被FALS突变片段所置换(克隆PSK-A4V)。用Sequenase方法(USBiochemical,Cleveland,OH)对上文所述的所有PCR产物进行测序,以证实突变的存在并且没有任何的PCR错误。对SOD-1基因的描述被示于图4,图中显示了突变、引物和限制性位点的位置。
通过用Hind III和Xho I消化野生型(PSK-HX2)和突变构建体(pSK-113和pSK-AV4)来构建SOD-1 cDNA表达载体。将含有SOD-1cDNA序列的所得的546bp的三个片段分别克隆到Hind III+Xho I消化的pcDNA I/Neo(Invitrogen Corp.,San Diego,CA)中,以分别产生pCMV-HX5(野生型SOD)、pCMV-113(Ile113→Thr)、和pCMV-A4V(Ala4→Val)。
II、第2部分
进行初始的试验以确定FALS突变的SOD-1蛋白质的稳定性减低是否是由MCP介导的蛋白水解降解引起的。被定名为293的人肾细胞系(人293细胞或293细胞)得自于美国典型培养物保藏中心(ATCC)12301 Parklawn Drive,Rockville,Maryland,20852(ATCC#CRL 1573),并将之培养于Dulbeccos改良的Eagle氏培养基中,该培养基中含有4.6g/L葡萄糖、10%热天活的马血清(Gibco/Life Technologies Inc.Gaithersbury,MD)。使人293细胞于37℃维持在5%的CO2气中。用磷酸钙方法(Chen,C.等,Biotechniques 6:632(1988)),瞬间转染该293细胞。将pCMV-113SOD-1表达载体引入239细胞,24小时后,将该细胞分别与浓度为5μM的化合物34、化合物14或者化合物24一起温育24小时。将已知的MCP或其它蛋白酶的抑制性化合物溶解于二甲亚砜(DMSO)中。其它的293细胞培养物与特体积的DMSO一起温育,或将之留在培养基中仅作为阴性对照之用。
在接受试验化合物约48小时前,将5×105个293细胞接种于36mm培养皿中,并在37℃5%的CO2气中维持。细胞与MCP抑制剂(化合物34、14或24)或者与作为阴性对照的DMSO一起温育24小时。通过冻融循环,在约75μl的磷酸盐缓冲液(PBS)中裂解细胞,来制备细胞溶胞产物。用BCA方法(Pierce,Rockford,IL)测定细胞溶胞产物中的蛋白质浓度;用Tris/甘氨酸/SDS(25mM Tris/192mM甘氨酸/0.1%SDS)缓冲系统,在4--20%的聚丙稀酰胺凝胶(Novex,San Diego,CA)上对2--2.5μg的各样品进行电泳。以电洗脱将蛋白质转移到硝酸纤维素滤膜上,通过在布劳托(blotto)溶液(溶于25mM Tris缓冲盐水(1xTBS)的5%干牛奶)中温育30分钟而使滤膜封闭。将滤膜转移到第一抗体溶液(在布劳托溶液中作1∶10,000的稀释),并温育2--18小时。这些研究所用的第一抗体为抗由E.Coli产生的纯化的小鼠SOD-1的多克隆兔抗血清(HazeltonResearch Products,Denver,PA)。用1×TBS将滤膜洗3次,每次5分钟,并使滤膜在第二抗体溶液(在布劳托溶液中作1∶2,000的稀释)中温育2小时。所述的第二抗体是与碱性磷酸酶(Bio-Rad,Richmond,CA)相连的羊抗兔IgG。用1×TBS将滤膜洗3次,每次5分钟,并将滤膜在市售购得的碱性磷酸酶检测试剂(Bio-Rad,Richmond,CA)中温育5-60分钟,染色显示碱性磷酸酶的活性。用DocuGel V图像分析系统和RFLPscan软件(Scanalytics,Billerica,MA)定量分析对应于SOD-1蛋白质的染色带。SOD-1的量以相对于阴性对照的感应单位(即,测试出的单位数除以对照的单位数)表示。细胞溶胞产物的免疫印迹分析显示:与MCP抑制剂一起温育的3个样品的SOD-1水平与对照的SOD-1水平相比都有一定程度的提高(图5)。这些结果表明MCP被本发明的化合物抑制导致SOD-1蛋白质在Ile113→Thr突变体中的积累增多,因而暗示着MCP引起SOD-1在含有FALS突变的细胞中的含量减少。
III、第3部分
为进一步显示MCP活性与SOD-1的含量有直接关系,用稳定地产生野生型小鼠SOD-1或FALS突变蛋白质(即,Val取代了Ala4以及Thr取代了Ile113)的细胞进行了研究。以SOD-1 cDNA表达构建体(上文所述)通过磷酸钙转染(Chen,C.等,Biotechniques 6:632(1988))法转染293细胞,接下来使细胞生长于含1mg/ml G418(GeneticinTM,Gibco/Life Technologies,Inc.,Gaithersburg,MD)的培养基中选择新霉素抗性,来产生上文所提到的表达小鼠天然SOD-1和两个FALS突变的SOD-1蛋白质的细胞系。将细胞维持在G418选择培养基中3周,3周时去掉药物选择,收集起各转化的细胞型的G418-抗性菌落以使之进一步生长。在这些研究中使用化合物14。
将表达所述的SOD-1同型的细胞系与不同浓度的化合物14温育24小时,24小时时通过对免疫印迹的密度扫描测定SOD-1的水平。SOD-1的水平以相对于阴性对照的感应单位数(如上文所述)表示,各数据是三个试验的平均值。化合物14的剂量应答分析表明:转化细胞与该MCP抑制剂一起温育导致SOD-1蛋白质的明显积累,最大的累积量发生在与约20μM浓度的化合物14一起温育的那些细胞中(图6)。而且,SOD-1的累积量与各种SOD蛋白质的估测半衰期有关;野生型SOD-1是最稳定的,而Ala4→Val是最不稳定的(Borchelt D.R.等,Proc.Natl.Acad.Sci(国家科学院进展)91:8292--9296(1994))。这些数据与下列假设一致:FALS突变使SOD-1蛋白不稳定,这可能起因于错折叠(misfolding),并且是由于突变是这些蛋白质被MCP降解的目标而导致其结构变化的结果。这些结果还显示化合物14还具有令人满意的使野生型SOD-1蛋白质更新的明显效果,进一步支持了MCP在SOD-1降解中的作用。
IV.第4部分
进行试验,以进一步显示MCP活性在SOD-1更新中的特异性(并排除可能涉及其它主要的蛋白水解途径如钙活化的蛋白酶钙蛋白酶(Calpain)和溶酶体蛋白酶的可能性)。在这些试验中,两个转化的细胞系(如上文所述,一个产生野生型蛋白质,而另一个产生具有Ala4→Val突变的SOD-1蛋白质)与各种蛋白酶抑制剂一起温育,每种抑制剂对独特的蛋白水解活性具特异性:化合物14抑制MCP;“钙肽素(Calpeptin)”(Novabiochem USA,La Jolla,CA,催化酶编号为03-34-0051;CBZ-Leu-Nle-乙醛,Biochem.Biophys.Res.Comm.(生物化学生物物理研究通讯)(1988)153:1201),一种穿透细胞的钙蛋白酶(钙蛋白酶是半胱氨酸蛋白酶)抑制剂;以及DK-3(Enzyme Systems Products,Dublin,CA CBZ-Phe-Ala-CHN2)抑制溶酶体蛋白酶活性。另外,将细胞与化合物16一起温育。化合物16与特别优选的本发明化合物(即,化合物14)相比,是一种有较小潜力的MCP抑制剂。将表达所述的SOD-1同型的细胞系与下列蛋白酶抑制剂一起温育24小时:化合物14,20μM;钙肽素,10μM;DK-3,5μM;化合物16,20μM;或者与作为阴性对照的DMSO一起温育。与抑制剂温育24小时后,通过对免疫印迹的密度扫描来测定SOD-1的含量。如上文所述,SOD-1的水平以相对于未处理样品的感应单位数来表示。各数据点均为来自三个试验结果的平均值。
结果示于图7。可以看出,Ala4→Val的突变SOD-1的含量是MCP活性的函数,并且仅仅是被优选化合物14的特异性抑制才导致SOD-1蛋白质积累的明显增多(3倍)。与钙蛋白酶或溶酶体蛋白酶一起温育,对于SOD-1的含量没有可觉察的作用效果。而且,以化合物14处理导致野生型SOD-1积累略有增加,这是以前在剂量应答研究中也观察到的一个结果。综上所述,这些研究表明,MCP活性在转化的293细胞系中对于SOD-1的含量是至关重要的,而且化合物14对MCP的抑制导致SOD-1蛋白质在该细胞中增多。
抑制剂的合成
下文提供制备本发明化合物的示例性的合成途径。一旦掌握了本文公开的内容,其它的合成方案以及对下列合成方案的改进,对于本领域的技术人员而言是显而易见的。
可用人们熟知的合成步骤,使用在Gross等编著,Academic Press出版的The peptides:Analysis,Synthesis,Biology(肽:分析、合成、生物学),第1卷(1979)中描述的溶液-相技术,将酰胺键引入本发明的化合物,这些步骤和技术描述于下文的这施例8-11。
如实施例14-38所述,可通过独立地合成并偶合片段R1-(CH2)n-CH(R2)-COOH和H2N-CH(R3)-CONH-R4(第1偶合方法)来制备抑制剂。
或者,如实施例39-42所述,可通过独立地合成并偶合片段R1-(CH2)n-CH(R2)-CONH-CH(R3)-COOH和H2N-R4(第II偶合方法)来制备它们。
当取代基Q含有醛基(即,H2N-R4是自氨基酸如H2N-CH(CH2R7)-CHO衍生的氨基醛)时,可如Gacek等在Tetrahedron(四面体),30,4233(1974)所述的或通过实施例12所述的步骤来合成所需的缩醛保护的氨基醛。偶合完成后(通过第I或II偶合方法),如实施例11(方法E)所述,可去掉保护基以释放自由醛基。
当Q是甲基酮或重氮基-、溴或氯甲基酮时(即,当H2N-R4是α-氨基取代的甲基酮或自氨基酸衍生的α-重氮基-、溴或氯甲基酮时),第II偶合方法特别方便。可自市场购得的酮的氢氯酸盐(Bachem BioscienceInc.,King of Prussia,Pennsylvania)或者通过将Boc-保护的氨基酸转化为混合的碳酸酐,然后再与重氮基甲烷反应来生成重氮基甲基酮来制备酮的氢氯酸盐。如Kettner等在Arch.Biochem.Biophys.(考古学、生物化学、生物物理学)162,56(1974);Fittkau在J.Prakt.Chem.(实验化学期刊)315,1037(1973)或Zimmeran等在1995年6月15日公开的PCT WO95/15749中所描述的,可通过使重氮基甲基酮与溴化氢或氯化氢反应来制备溴甲基酮和氯甲基酮。
如Ketmer等在美国专利4,652,552中所描述的,通过使氯甲基酮氢解而制备相应的甲基酮。
当Q是α-二氟甲基甲酮时,可通过第II偶合方法制备并偶合相应的1-氨基-3,3-二氟-2-丙醇,并且可通过Trainor和Stein在美国专利4,923,890中所述的步骤将所得的二氟代醇氧化成二氟代酮。
当Q是三氟甲基酮(即,H2N-R4是氨基酸衍生的三氟甲基酮,例如H2N-CH(CH2-R7)-COCF3)时,可通过Imperiali和Abeles在Biochemistry(生物化学)25,3760及其增补页(1986)中所述的方法,制备所需的酮。
当Q是自氨基酸衍生的单氟甲基酮(即,H2N-R4含有氟甲基酮基,例如H2N-CH(CH2-R7)-COCH2F)时,可通过Palmer在欧洲专利申请EP442,754中所述的步骤,用Boc-保护的氨基酸和苄基氟丙二酸镁,来制备所需的酮。去掉Boc保护基后,可用第II偶合方法使胺偶合。或者,如实施例42所述,通过使相应的醇氧化来制备单氟甲基酮。
当Q是硼代氨基酸衍生物(即,Q=-B(OH)2或其环酯)时,可用如Shenvi的美国专利4,537,773所述的方法来基本上制备环酯,在以第II偶合方法偶合后,如Shenvi和Kettner在美国专利4,499,082和5,187,157以及J.Biol.Chem.(生物学化学杂志)259,15106(1984)中所述的,该环酯可选择性地被转化成游离肽硼酸。
当Q是α-二酮或α-酮酯(即,Q=-C(=O)C(=O)R7或-C(=O)CO2R7)时,可用Angelastro等在J.Med.Chem.(医学化学期刊)33,13(1990)及其参考文献中所述的方法来制备所需的氨基二酮。可将α-酮酯水解或酰胺化,生成相应的α-酮酸或酰胺。也可对Harbeson等在J.Med.Chem.(医学化学期刊)37,2918-2929(1994)描述的方法加以改进,以市售购得的Boc-保护的氨基酸来制备α-酮酰胺。在极为有用的后一方法中,所述的Boc-保护的氨基酸被连续地转化为N,O-二甲基羟基酰胺、醛、氰醇、α-羟基羧酸和α-羟基羧酰胺: 其中R1=Boc-NH-CH(CH2R7)-。
在酸性条件下将Boc基去掉,中和后,如第II偶合方法部分所述,将自由氨基残基偶合来产生α-羟基羧酰胺,然后使后者氧化得到α-酮羧酰胺抑制剂:
IBCFX-AA1-COOH+H2N-AA2-Y ---------> X-AA1-AA2-Y
NMM
X=芴基甲基氧羰基(Fmoc)-或叔丁氧基羰基(Boc)-;Y=乙缩醛或保护氨基醛的其它保护基;
AA1=氨基酸
AA2=氨基醛
将N-甲基吗啉(NMM)(1当量)加入到被保护氨基酸的四氢呋喃(THF)的搅拌过的溶液中。使混合物冷却到-15℃,用氯甲酸异丁酯(IBCF)(1.1当量)处理,并使它们反应10分钟。随后加入游离碱形式的氨基醛组分,接下来加入NMM(1.1当量,如果是其酸式盐则加入2.2当量)。在-15℃搅拌30分钟,然后在室温下搅拌3-4小时。将反应混合物溶解于150-200ml的乙酸乙酯(EtOAc)中。所得的溶液相继地用水、5%的碳酸氢钠(NaHCO3)、2%的柠檬酸水溶液洗涤,最后用水洗涤。以无水硫酸钠(Na2SO4)或硫酸镁(MgSO4)干燥有机层,在减压下除去溶剂,由此得到的产物用石油醚研制。将由此得到的固体肽过滤使之干燥并进行特征分析。实施例8方法B:Fmoc-基脱保护步骤:方案:
Fmoc-HN-AA1-AA2-Y→H2N-AA1-AA2-Y
在室温下,用50-60倍过量的二乙胺(DEA)将在30%二甲基甲酰胺(DMF)的乙酸乙酯(EtOAc)溶液混合物中的Fmoc-保护的肽(0.2-4mmol)处理2小时。在减压下于30℃将溶剂蒸发,向残留物中加入石油醚。当有沉淀形成时,将它过滤出来并干燥。在其它情况下,用石油醚对所得的胶状物进行反复研制,并将胶状物贮存于真空中。实施例9方法C:对肽进行封端基团或氨基酸的加成:方案:
将封端基团(游离羧酸形式)或被保护的氨基酸(1当量)、六氟磷酸苯并三唑-1-基氧-三(二甲氨基)-磷嗡(BOP)(1.1当量)和1-羟基苯并三唑(HOBt)(1当量)溶于5ml的DMF中,然后加入NMM(2.2当量)。5分钟后,加入去保护的碱性肽组分或羧基保护的氨基酸,将pH调至8,并搅拌混合物3-4小时。然后用150-300ml的EtOAc稀释该混合物,并相继地用水、2%NaHCO3、水、2%柠檬酸和水萃取。蒸发至干,得到封端或N-被保护的肽。实施例10方法D:苄氧羰基(CBZ-)去除步骤:
将CBZ-保护的肽或氨基酸衍生物(1g)的乙酸乙酯(15ml)溶液与炭上的0.2g的Pd/C(炭上的10%Pd含有50%(重量)的水)混合,并在40磅/平方英寸的压力下使之氢化4小时。用Celite(硅藻土)过滤溶液,使溶液蒸发至干,得到未被保护的肽或氨基酸衍生物。实施例11方法E:乙缩醛向醛的转化
将溶于3ml THF的肽乙缩醛(1当量)溶液与3ml盐酸(2M)混合,并搅拌0.5-2小时。蒸发除去溶剂,最终残留物用水稀释,并冷冻干燥之,得到肽醛。实施例12方法F:亮氨醛缩二乙醇的制备
第1步:将NMM(10ml)加入CBZ-Leu-OH(25g,93mmol)的THF(250ml)溶液中。将该溶液冷却至-15℃,并用13ml的氯甲酸异丁酯(IBCF)处理,使之反应10分钟。随后加入N,O-二甲基羟胺的氢氯酸盐(9.36g,96mmol)的DMF(40ml)悬浮液和10ml的NMM。搅拌4小时后,混合物用400ml的EtOAc稀释,并且相继地用水、5%NaHCO3溶液、水、2%柠檬酸和水洗涤该溶液。有机层用MgSO4干燥并蒸发有机层,得到19.0g的无色油。
第2步:将第1步的油(19g)溶于200ml的乙醚中,并将该溶液冷却到-78℃。在45分钟内逐滴加入氢化铝锂的乙醚溶液(1.0M)120ml。搅拌该溶液30分钟,在氮气氛下逐滴加入1M的硫酸氢钾(KHSO4)200ml。分离出有机层,用KHSO4(1M)溶液洗涤,以MgSO4干燥,并蒸发得到无色液体(CBZ-Leu-H)。
第3步:在30分钟的时间内,向CBZ-Leu-H(12g)和对-甲苯磺酸(0.9g)的无水乙醇(EtOH)(100ml)溶液中加入原甲酸三乙酯104ml。对混合物搅拌30分钟,然后蒸发之,并用500ml的乙醚稀释。乙醚层相继地用饱和的NaHCO3溶液和氯化钠溶液洗涤。棕黄色的半固体以冷己烷重结晶,得到了接近于白色的针状CBZ-亮氨醛缩二乙醇。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:7.28(m,5H),5.03(s,2H),4.77(d,1H),4.27(d,1H),3.8(m,1H),3.63(m,2H),3.43(m,2H),1.6(dd,2H),1.30(m,2H),1.12(m,6H),0.83(d,6H)。
第4步:用方法D,以2.5g的Pd/C将第3步得到的产物(14.8g)氢化,得到4.09g的亮氨醛缩二乙醇(油状物)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:4.16(d,1H),3.70(m,3H),3.75(m,2H),2.87(m,1H),1.78(m,1H),1.33(m,2H),1.23(m,6H),0.935(dd,6H)。实施例13方法G:P3 mimics(要得知其命名法,请参见Schechter,I.和Burger,A.(1967)Biochem.Biophys.Res.Commun.(生物化学生物物理研究通讯)27:157-162)的合成(第3步和第5步,R=-CN;第4步和第6步,
第1步:环戊烷乙酸苄酯的制备:
用Dean-Stark水分离器,将溶于苯(60ml)中的环戊基乙酸(10.02g,78.2mmol)、苄醇(8.45g,78.2mmol)和一水合对甲苯磺酸(1.48g,7.82mmol)回流2小时。冷却后,除去苯,用乙醚(50ml)稀释该混合物,并相继地用饱和的NaHCO3溶液、饱和的盐水洗涤,干燥并蒸发该混合物,得到油状的化合物(15.40g);1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.35(m,5H),5.10(s,2H),2.40(d,j=8Hz,2H),2.26(m,1H),1.81(m,2H),1.6(m,4H),1.18(m,2H)。
第2步:2-环戊基-10-碘代癸酸苄酯的制备:
向溶于THF(20ml)和己烷(8ml)混合物的二异丙基酰胺化锂(20mmol)(从相应的二异丙基胺和正丁基锂就地制得)的溶液中慢慢地加入第1步得到的化合物(3.96g,18mmol)的无水THF(10ml)溶液。对该混合物搅拌30分钟,并加入1,8-二碘辛烷(7.19g,20mmol)的六甲基磷酰胺(3.50g,20mmol)溶液。在-78℃,对混合物搅拌30分钟,在2小时内使之慢慢地冷却到0℃,并小心地加入50ml 12%的氯化钠水溶液而使反应终止。该混合物用乙醚萃取、用盐水洗涤,使之干燥并使溶剂蒸发。纯化粗产物以得到油状物(3.23g)。用己烷到1%EtOAc的己烷溶液作洗脱液,在硅胶柱上对所得的油状物进行快速色谱分析。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.35(m,5H),5.15(s,2H),3.20(t,8Hz,2H),2.20(m,1H),2.0(m,1H),1.2-1.8(m,22H)。
第3步:10-氰基-2-环戊基癸酸苄酯的制备:
将溶于15ml无水DMSO中的得自第2步的碘代酯(3.99g,8.7mmol)和氰化钠(0.47g,9.6mmol)的混合物在70-75℃加热30分钟。冷却后,将反应混合物倾倒在冰(约40g)上,萃取进乙醚,并相继地用水和饱和的盐水洗涤。浓缩有机层,得到油状物(2.89g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.35(m,5H),5.15(s,2H),2.30(t,8Hz,2H),2.20(m,1H),2.00(m,1H),1.3-1.8(m,22H)。
第四步:10-N-苯二甲酰亚氨基-2-环戊基癸酸苄酯的制备:
将溶于8ml DMF中的得自第2步的化合物(1.21g,2.6mmol)和苯邻二甲酰亚胺化钾(0.536g,3mmol)的混合物于70-75℃加热30分钟。冷却后,将反应混合物倾至冰(约40g)上,并萃取进60ml的乙醚中。合并的有机层用水和饱和的食盐水洗涤,并将之浓缩至无色的油状物(1.24g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.85(m,2H),7.70(m,2H),7.35(m,5H),5.10(s,2H),3.65(t,8Hz,2H),2.20(m,1H),2.00(m,1H),1.22-1.18(m,22H)。
第5步:10-氰基-2-环戊基癸酸的制备:
将得自第3步的氰基酯(2.89g,8mmol)和10%Pd/C(0.6g,DeGussa,含水量为50%)的混合物在无水甲醇(MeOH)(35ml)中氢化2小时(42-26磅/平方英寸)。使反应混合物过滤通过Celite垫,并将其浓缩为无色的油状物(2.02g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:2.35(t,8Hz,2H),2.20(m,1H),2.00(m,1H),1.3-1.9(m,22H)。
第6步:2-环戊基-10-N-苯二甲酰亚氨基-癸酸的制备:
按照第5步的步骤,将第4步制得的产物(0.41g)转化成题述化合物(0.31g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.85(m,2H),7.70(m,2H),3.70(t,8Hz,2H),2.15(m,1H),1.95(m,1H),1.10-1.85(m,22H)。
第7步:10-三氟甲基磺酰氨基-2-环戊基-癸酸苄酯的制备:将溶在甲醇(8ml)中的得自第4步的酯(0.847g,1.7mmol)和一水合肼(0.425g,0.41ml,8.5mmol)的混合物边回流边加热30分钟,使其浓缩,并用乙醚研制残留物,得到白色沉淀,将沉淀过滤出来。浓缩滤液以得到油状物(0.540g)。将该油状物溶解于CH2Cl2(8ml)中,冷却到-10℃,并向其中加入三乙胺(0.324ml),然后加入三氟甲基磺酰氯(0.25ml)。在1小时内使温度缓慢升至室温。然后用水、2%HCl、水和饱和的盐水洗涤该反应混合物。浓缩有机层至油状,用10%EtOAc的己烷溶液作洗脱剂,用硅胶柱以快速色谱法纯化之,得到油状的10-三氟甲基磺酰氨基-2-环戊基-癸酸苄酯(0.25g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.35(m,5H),5.15(s,宽峰,1H),5.10(s,2H),3.25(m,1H),2.20(m,1H),2.00(m,1H),1.10-1.7(m,22H)。
第8步:2-环戊基-10-(三氟甲基磺酰氨基)-癸酸的制备:
按照与在第5步中所述的相同的步骤,将第7步制得的化合物(0.25g)转化成题述化合物(0.20g)(油状物)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:6.60-5.60(b,1H),3.30(d,8Hz,2H),2.15(m,1H),1.90(m,1H),1.1-1.8(m,22H)。
第9步:8-碘辛酸叔丁酯的制备:
按照制备第2步化合物所述的步骤,以乙酸叔丁酯(1.16g)和1,6-二碘己烷(4.06g)合成题述化合物(油状物)(2.13g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:3.20(t,8Hz,2H),2.20(t,8Hz,2H),1.75-1.85(m,2H),1.55-1.65(m,2H),1.45(s,9H),1.25-1.43(m,6H)。
第10步:2-环戊基癸-1,10-二酸-1-苄酯-10-叔丁酯的制备:
用在第2步中所述的步骤,使第1步制得的酯(6.92g)和自第9步制得的碘代酯(11.37g)反应,生成油状的题述化合物(7.44g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.35(m,5H),5.10(s,2H),2.20(m,3H),2.00(m,1H),1.45(s,9H),1.0-1.9(m,20H)。
第11步:2-环戊基癸-1,10-二酸-1-苄酯-10-甲酯的制备:
第10步制得的二酯(2.86g,7mmol)的CH2Cl2(30ml)溶液和10ml 90%的TFA一起搅拌30分钟。将蒸发后得到的产物溶解于CH2Cl2(10ml)和MeOH(6ml)的混合物中。在-20℃下搅拌溶液,在2小时内向该溶液中缓慢加入亚硫酰氯(6ml)。将溶剂蒸发掉,并将残留物溶解于乙醚(20ml)中。有机层相继地用饱和的NaHCO3溶液、水和盐水洗涤,使之干燥、蒸发,并用硅胶柱(洗脱液为2%EtOAC-己烷)以快速色谱纯化,得到油状的产物(2.05g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.35(m,5H),5.10(s,2H),3.65(s,3H),2.30(t,8Hz,2H),2.20(m,1H),2.00(m,1H),1.10-1.90(m,10H)。
第12步:2-环戊基癸-1,10-二酸-10-甲酯的制备:
用第5步所述的步骤,将第11步制得的化合物(4.96g)转化成油状的题述化合物(3.66g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:3.65(s,3H),2.30(t,8Hz,2H),2.15(m,1H),2.00(m,1H),1.10-1.19(m,20H)。
第13步:6-氰基己烷-1-磺酸钠的制备:
向装有水冷凝器、机械搅拌器和滴液漏斗的三颈瓶中,装入溶于75ml95%乙醇(EtOH)的1-溴-6-氰基己烷(8.04,42.3mmol)溶液。将混合物加热至回流,并在30分钟内向其中缓慢加入溶于50ml水的亚硫酸钠(8.00g,63.5mmol)的溶液。将混合物加热2小时,然后在减压下浓缩之。将残留物溶解于95%的EtOH(200ml)中,加热至沸腾并过滤之。将滤液浓缩并在冰浴上冷却。过滤收集沉淀物,使沉淀物干燥得到白色固体3.00g。对母液进一步浓缩,产生另一批产物2.2g。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:2.50(t,j=8Hz,2H),2.40(t,8Hz,2H),1.55(m,4H),1.3(m,4H)。
第14步:6-氰基己烷-1-磺酰氯的制备:
将自第13步制得的产物(0.340g,1.6mmol)、亚硫酰氯(0.95g,8mmol)和一滴DMF的混合物在75-80℃下加热30分钟。冷却后,除去溶剂,残留物用冰水(5ml)处理。将有机层萃取进30ml的乙醚中,混合的有机层用3%NaHCO3溶液和水洗涤,以MgSO4干燥并过滤。用活性炭(Darco)处理滤液,将之过滤并浓缩,以得到无色的油(0.240g),该油无需进一步的纯化而可直接使用。
实施例14-38描述了表5中所列的MCP抑制剂的合成。相应的纯化条件列于表6。
表5(续)
32 | MeOOC- | 6 | H | MTR | (CH3)2CH- | N-NHCONH2 | 220 |
33 | MeOOC- | 6 | H | MTR | (CH3)2CH- | N-NHCSNH2 | 700 |
34 | MeOOC- | 6 | H | MTR | (CH3)2CH | O | 80 |
35 | MeOOC- | 6 | H | MTS | (CH3)2CH | 0 | 40 |
表6
实施例号 | 化合物 | HPLC梯度(收集峰的保留时间) | 分析保留时间(分钟) | 分子量 | (M+H)′ |
14 | 10-氰基-2-环戊基癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 45-75%B(10.63) | 22.5 | 563.75 | 564 |
15 | 10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 43-100%B(22.0) | 31.7 | 785.2 | 786 |
16 | 10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩氨基脲 | 30-35%B60分钟(A=30.0,B=32.0) | 22.222.7 | 621 | 621 |
17 | 10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛肟 | 45-65%B(12.3) | 24.8 | 578.7 | 579 |
18 | 10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛-O-甲基肟 | 55-75%B(A=8.9,B=10.12) | 27.7 | 592.7 | 593 |
19 | 10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛-O-苄肟 | 65-75%B(A=8.3,B=9.5) | 31.3 | 668.7 | 669 |
20 | 9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氰吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 60-100%B(14.1) | 32.0 | 804.11 | 805 |
21 | 9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲基-苯-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 40-60%B(29.9) | 28.9 | 749 | 750 |
22 | 9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-正亮氨醛 | 60-70%B(18.8) | 32.2 | 804 | 804 |
表6(续)
23 | 9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 40-70%B(13.98) | 23.6 | 582.34 | 583 |
24 | 2-环戊基-10-N-苯二甲酰亚氨基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 50-80%B(12.66) | 27.89 | 683.86 | 684 |
25 | 10-(三氟甲基磺酰基)氨基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 50-70%B(A=12.1,B=12.9) | 27.2027.46 | 686.02 | 686 |
26 | 单甲基酯壬二酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 30-100%B(8.14) | 17.06 | 501 | 501 |
27 | 单甲基酯壬二酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-苯丙氨醛 | 10-100%B(16.9) | 17.3 | 534 | 535 |
28 | 单甲酯壬二酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 10-100%B(11.7) | 26.5 | 722 | 723 |
29 | 单甲酯壬二酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-D-精氨酰基-L-亮氨醛 | 40-70%B(16.2) | 26.3 | 722 | 723 |
30 | 单甲酯基壬二酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-正亮氨醛 | 50-60%B(14.0) | 26.2 | 722 | 723 |
31 | 单甲酯壬二酰基-Ng-(对甲苯磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 40-50%B(19.6) | 21.3 | 610 | 610 |
32 | 单甲酯壬二酰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩氨基脲 | - | 13.2 | 724 | 725 |
表6(续)
HPLC条件:溶剂A:含0.1%TFA的水溶剂B:含0.1%TFA乙腈检测:215nmHPLC梯度在40分钟内完成(除非另有说明)柱型:Zorbax Rx-C8尺寸:4.6mm×250mm孔径大小:80A°颗粒大小:5μm
33 | 单甲酯壬二酰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩氨基硫脲 | - | 23.4 | 741 | 741 |
34 | 单甲酯壬二酰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 40-44%B(60分钟)(16.9) | 23.3 | 668 | 669 |
35 | 甲氧基壬二酰基-Ng-(2,4,6-三甲基苯-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 40-60%B(14.1) | 32.0 | 638 | 638 |
36 | 6-氰基-己烷-1-磺酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯开二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 45-75%B(13.74) | 24.94 | 710.9 | 711 |
37 | 2-萘甲酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 35-55%B(9.16) | 18.10 | 470.51 | 471 |
38 | CBZ-7-氨基庚酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛 | 30-60%B(A=13.3,B=13.9) | 19.1 | 577 | 578 |
实施例1410-氰基-2-环戊基癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛
第1步:芴基甲氧基羰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
用1.29ml的IBCF,2.2ml的NMM和10ml的THF(代替实施例7方法A中的DMF),按照方法A(实施例7),将Fmoc-Arg(NO2)-OH(4.41g,10mmol)与Leu-乙缩醛(1.89g,10mmol)偶合。得到的粗产物肽是无定形的固体。1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.75(d,2H),7.55(d,2H),7.4(m,2H),7.29(m,2H),6.21(d,1H),5.91(d,1H),4.30(m,5H),3.66(m,3H),3.63(d,2H),3.32(m,2H),1.72(m,4H),1.29(m,2H),1.17(b,6H),0.89(m,6H)。
第2步:Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
用去保护方法B(实施例8),将第1步制得的产物(3.5g)的Fmoc基团除去。得到半固体状的游离的碱(2.5g)。1H NMR(300MHz,DMSO-D6),δ8.6(b,1H),7.61(d,1H),4.27(d,1H),3.90(m,1H),3.59(m,1H),3.45(m,4H),3.14(m,2H),1.54(m,4H),1.33(m,3H),1.10(tt,6H),0.83(dd,6H)。
第3步:10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用BOP(3.34g,7.5mmol)和HOBt(1.01g,7.5mmol),处理第2步的产物(2.15g,5.5mmol)和溶在16ml DMF中的10-氰基-2-环戊基-癸酸(得自方法G)(2g,7.5mmol),得到淡黄色固体的粗肽。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ 8.31(bd,1H),8.0(bd,1H),7.83(d,1H),4.34(m,1H),4.24(d,1H),3.91(m,1H),3.56(m,4H),3.43(m,2H),3.16(m,2H),2.47(t,3H),2.03(m,1H),1.76(m,2H),1.15-2.0(m,25H),1.07(m,6H),0.81(d,6H)。
第4步:将第3步制得的产物(0.2g)溶在含30%TFA的10ml乙腈(ACN)中,搅拌该溶液1小时,并使溶剂蒸发掉,用乙醚沉淀出化合物14。HPLC纯化的条件列于表6。1H NMR(300MHz,DMSO-d6),δ9.38(s,1H),8.56(b,1H),8.3(d,1H),7.99(dd,1H),4.38(m,1H),4.17(m,1H),3.37(m,4H),3.17(m,2H),2.26(t,3H),1.0-2.0(m,27H),0.86(dd,6H)。
实施例15
第1步:10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),将10-氰基-2-环戊基-癸酸(2mmol,得自实施例13方法G的第5步)与Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇(1.8mmol,得自化合物14的第2步)偶合,得到该固体化合物。
第2步:10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛
按照方法E(实施例11),将第1步制得的产物(0.3g)转化成化合物15,并以HPLC纯化之。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),8.23(d,1H),7.8(s,1H),7.72(d,1H),7.49(t,1H),7.48(s,1H),4.34(m,1H),4.14(m,1H),3.05(m,2H),2.60(t,2H),2.50(s,3H),2.46(s,3H),2.25(m,4H),2.00(s,3H),1.74(t,2H),1.6-1.0(m,25H),1.13(s,6H),0.82(dd,6H)。
实施例1610-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩氨基脲
将氢氯酸氨基脲(0.20mmol)、乙酸钠(0.3mmol)和水(0.5ml)加入化合物14(0.050g,0.089mmol)的乙醇(4.5ml)溶液中,在室温搅拌过夜。除去溶剂,如表6所示,以HPLC对所得的化合物16进行纯化。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ 9.91(s,1H),8.51(s,2H),8.04(d,1H),7.95(d,1H),7.40(s,1H),7.09(d,1H),6.29(s,2H),4.44(m,1H),4.33(m,1H),3.16(s,2H),2.08-1.00(m,33H),0.87(dd,6H)。
实施例17
室温下,将氢氯酸胲(0.037g,0.534mmol)加入实施例14的第4步产物(0.05g,0.089mmol)的嘧啶(0.174g,2.2mmol)溶液中,然后于80℃加热30分钟。如表6所示,产物以HPLC分离。
实施例18
按照实施例17的步骤,用氢氯酸O-甲基胲(0.03g,0.38mmol)制备化合物18,如表6所示,它是以HPLC的两个峰的混合物形式而被分离出来的。
实施例1910-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛-O-苄肟
按照实施例17的制备步骤,用化合物14(0.05g,0.089mmol)、氢氯酸O-苄基胲(0.043g,0.267mmol)和嘧啶(0.092ml,1.14mmol)制备化合物19。在以HPLC纯化时,该化合物以两个峰而被分离出来。
实施例20
第1步:Fmoc-N-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用溶在12ml DMF中的BOP(2.21g,5mmol)、HOBt(0.67g,5mmol)和NMM(0.7ml),将Fmoc-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酸(3.31g,5mmol)与L-亮氨醛缩二乙醇(0.85g,得自方法F,实施例12)偶合,得到二肽乙缩醛(3.24g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.89(s,1H)7.78(d,2H),7.6(d,2H),7.4(t,2H),7.31(t,3H),6.4(d,2H),5.92(d,1H)4.58(m,1H),4.43(m,1H),4.35(m,3H),3.69(m,2H),3.53(m,2H),3.30(m,2H),2.6(t,2H),2.58(s,6H),2.12(s,3H),1.80(tt,2H),1.64(m,3H),1.32(m,10H),1.18(q,6H),0.89(t,6H)。
第2步:Ng-(2,2,5,7,8)-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛
按照方法B(实施例8),除去第1步产物(1.6g)的Fmoc基团,产生半固体(1.3g)。1H NMR(300MHz,DMS0-d6)δ7.6(d,1H),6.76(b,1H),6.46(B,1H),4.27(d,1H),3.9(m,1H),3.58(m,1H),3.44(m,4H),3.11(t,1H),3.01(m,2H),2.58(t,2H),2.47(s,6H),2.03(s,3H),1.77(t,2H),1.5(m,5H),1.26(s,6H),1.09(m,6H),0.83(dd,6H)。
第3步:9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用溶在5ml DMF中的BOP(0.66g,1.5mmol)、和NMM(2.2ml,2mmol),将9-甲基氧羰基-2-环戊基-壬酸(0.56g)与Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇(0.7g,1.1mmol)偶合得到固体产物(1.8g)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:7.5-8.0(m,2H),6.66(m,1H),6.4(m,1H),4.32(m,1H),4.24(d,1H),3.93(m,1H),3.57(m,6H),3.44(m,4H),3.04(m,2H),2.59(t,2H),2.48(s,6H),2.28(m,3H),2.03(s,3H),1.77(t,2H),1.48(m,22H),1.26(s,6H),1.1(tt,9H),0.81(dd,6H)。
第4步:9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛
根据方法E(实例11),将第1步的产物(0.2g)转化成化合物20,并以HPLC直接纯化之。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.37(s,1H),8.2-7.4(m,2H),6.69(drm,1H),6.4(brm,1H),4.3(m,2H),3.58(s,3H),3.03(m,2H),2.60(t,2H),2.48(s,6H),2.26(m,4H),2.03(s,3H),1.77(t,2H),1.47(brm,28H),1.24(s,3H),0.80(dd,6H)。
实施例21
第1步:9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),将9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酸(1.2mmol,得自方法G的第12步)与Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇(1.0mmol)偶合,得到固态的肽。
第2步:按照方法E(实施例11),将得自第1步的乙缩醛转化成化合物21,并以HPLC纯化。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.42(s,1H),8.25(d,1H),7.92(d,1H),7.84(s,1H),6.4(m,2H),4.40(m,1H),4.20(m,1H),3.80(s,3H),3.57(s,3H),3.26(m,2H),2.64(s,3H),2.55(s,3H),2.36(m,2H),2.07(s,3H),1.8-1.0(m,30H),0.87(dd,6H)
实施例22
第1步:9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-正亮氨醛缩二乙醇
采用方法C(实施例9),用溶在5ml DMF中的BOP(1mmol)、HOBt(1mmol)和NMM(2.5mmol),将9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酸(1mmol)与Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-正亮氨醛缩二乙醇(0.69mmol,得自按照方法B的实施例30的第1步)偶合。将反应混合物搅拌4.5小时,并将肽分离出来(0.37g,0.42mmol)。
第2步:9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-正亮氨醛
根据方法E(实例11),将第1步的产物(0.37g,0.42mmol)转化成化合物22(0.33g),并以HPLC纯化之。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.29(s,1H),7.79(d,1H),7.89(d,1H),7.31(t,1H),7.26(s,2H),4.17(m,1H),3.94(m,1H),3.49(s,3H),2.94(m,2H),2.74(t,2H),2.51(t,2H),2.37(s,6H),2.20(m,4H),1.94(s,3H),1.14(s,6H),1.0-1.8(m,3H),0.74(t,3H)。
实施例23
9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛
第1步:9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用溶在7ml DMF中的BOP(0.146g,0.33mmol)、HOBt(0.0449g,0.33mmol)和NMM(0.105ml,0.95mmol),将9-甲氧基羰基-2-环戊基-壬酸(0.66g,0.33mmol)与实施例14中的第2步产物(0.109g,0.28mmol)偶合,得到第1步的题述产物(0.124g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.31(m,2H),6.69(br d,1H),6.15(br d,1H),4.5(m,1H),4.33(m,1H),4.18(m,1H),3.67(s,3H),3.53(m,4H),3.32(m,2H),2.68(m,2H),2.29(t,3H),2.0-1.0(bm,34H),0.90(dd,6H)。
第2步:按照方法E(实施例11),将该肽(得自第1步,0.124g)转化成化合物23(0.106g)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.39(s,1H),8.54(m,1H),8.31(d,1H),7.99(brd,2H),4.36(m,1H),4.15(m,1H),3.33(s,3H),3.16(m,2H),2.27(t,2H),2.03(m,2H),1.0-1.7(m,28H),0.83(dd,6H)。
实施例24
2-环戊基-10-N-苯二甲酰亚氨基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛
第1步:2-环戊基-10-N-苯二甲酰亚氨基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用溶在5ml DMF中的BOP(0.288g,0.65mmol)、HOBt(0.088g,0.65mmol)和NMM(0.130ml,0.130mmol),将方法G(实施例13)中的第6步的产物(0.25g,0.65mmol)与实施例14的第2步的产物(0.195g,0.5mmol)偶合,得到固态的题述化合物(0.557g)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.57(br m,1H),7.91(d,1H),7.85(br d,4H),7.55(d,1H),4.32(m,1H),4.23(dd,1H),3.90(m,1H),3.55(t,3H),3.43(m,4H),3.14(m,2H),2.0(br m,1H),1.74(br m,2H),2.0-1.15(2br m,28H),1.09(tt,6H),0.79(dd,6H)。
第2步:2-环戊基-10-N-苯二甲酰亚氨基-癸酰基-Ng-硝基-精氨酰基-L-亮氨醛
采用方法E(实施例11),将第1步的产物(0.45g)转化成化合物24(0.32g)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.38(s,1H),8.31(d,1H),8.00(d,1H),7.85(m,4H),4.38(m,1H),4.15(1,1H),3.57(tt,3H),3.15(m,2H),2.00(m,1H),1.9-1.0(br m,30H),0.86(dd,6H)。
实施例25
10-(三氟甲基磺酰基)氨基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛
第1步:(三氟甲基磺酰基)10-氨基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
采用方法C(实施例9),用溶在5ml DMF中的BOP(0.22g,0.51mmol)、HOBt(0.069g,0.51mmol)和NMM(0.052ml,0.47mmol),将10-(三氟甲基磺酰基)-氨基-2-环戊基-癸酸(0.199g,0.51mmol)与实施例14的第2步产物(0.175g,0.45mml)偶合。得到的乙缩醛为固体(0.42g)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:6.06(br m,1H),5.81(m,1H),4.53(m,1H),4.32(d,1H),4.13(m,1H),3.73(q,4H),3.53(m,2H),3.30(q,3H),2.0-1.0(2br m,36H),0.9(dd,6H)。
第2步:10-(三氟甲基磺酰基)氨基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛
按照方法E(实施例11),将第1步的产物(0.35g)转化成化合物25(0.17g)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.27(s,1H),8.46(br m,1H),4.30(m,1H),3.87(m,1H),3.09(m,5H),2.8-1.0(2br m,30H),0.78(dd,6H)。
实施例26
第1步:单甲基酯壬二酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇:
按照方法C(实施例9),用溶在12ml DMF中的壬二酸单甲基酯(0.708g,3.5mmol)、BOP(1.55g,3.5mmol)、HOBt(0.47g,3.5mmol)、NMM(0.38ml,3.5mmol)、Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇(得自按照方法B(实施例8)的实施例14的第2步)(1.306g,3.5mmol),制备题述化合物。所得的肽为无定形固体(2.17g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:6.58(d,1H),6.04(d,1H),4.47(m,1H),4.30(d,1H),4.17(m,1H),3.67(s,3H),3.53(m,2H),3.2-3.4(t,d,2H),2.3(m,3H),2.2(t,1H),1.83(m,1H),1.2-1.8(m,24H),1.2(m,3H),0.9(d,3H)。
第2步:单甲基酯壬二酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛:
采用方法E(实施例11),将肽乙缩醛(得自第1步)(250mg)转化成化合物26(0.22g)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.38(s,1H),7.73(d,1H),4.30(m,1H),4.09(m,1H),3.57(s,3H),3.15(m,2H),3.01(q,1H),2.75(m,1H),2.24(m,7H),1.50(m,12H),1.24(b,14H),0.86(m,6H)
实施例27
单甲基酯壬二酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-苯丙氨醛
第1步:苯丙氨醛缩二乙醇
按照制备亮氨醛缩二乙醇(方法F,实施例12)所用的同样的步骤,将CBZ-Phe-OH(6.0g,2mmol)转化成苯丙氨醛缩二乙醇。
第2步:Fmoc-Arg(NO2)-OH
向芴基甲基氧羰基-N-羟基丁二酰亚氨基酯(32mmol)的THF(60ml)溶液中加入搅拌过的Ng-硝基-L-精氨酸(35mmol)和NaHCO3(70mmol)的水(70ml)溶液。1小时后,该乳白色溶液变得澄清,用固体柠檬酸酸化该溶液,使其pH为2-3,并用300ml EtOAc萃取。有机层用水洗涤一次,并蒸发,得到白色固体化合物(26.8mmol)。
第3步:Fmoc-Arg(NO2)-树脂
将9-芴基甲基氧羰基-Ng-硝基-L-精氨酸(得自第2步,26.8mmol)、BOP(30mmol)、HOBt(30mmol)和NMM(55mmol)的DMF(40ml)溶液与10g PAC树脂(连接到聚苯乙烯-1%二乙烯基苯的α-甲基苯甲酰甲基接头,取代率为0.97mmol/g,由Bachem Bioscience,Inc.,King of Prussia,PA供给)混合,并搅拌4小时。将树脂过滤,用DMF、DCM和MeOH洗涤,并使之干燥,产生终产物Fmoc-Arg(NO2)-树脂(11.1g)。该树脂Fmoc-Arg(NO2)-树脂(11.1g)用含哌啶(30%)、DMF(35%)和甲苯(35%)的溶液处理,并搅拌2.5小时。将去掉Fmoc的树脂过滤出来,并相继地用DCM/DMF(50∶50)和MeOH洗涤,以得到产物(9.2g)。
第4步:MeOAz:Arg(NO2)-树脂
将壬二酸单甲酯(MeOAz)(20mmol)加入到Arg(NO2)树脂(9.2g)、BOP(20mmol)、HOBt(20mmol)和NMM(pH调节至8)的搅拌过的浆糊中。过夜搅拌后,加入壬二酸单甲酯(10mmol)、BOP(10mmol)、HOBt(10mmol)和NMM(20mmol)的混合物,并搅拌24小时。用DMF、DCM和甲醇洗涤该树脂,得到10.56g树脂。
第5步:单甲酯壬二酰基-Ng-硝基-L-精氨酸
将第4步的产物(10.56g)在100ml的67%DCM(30%)TFA和3%苯甲醚溶液中搅拌5小时。过滤该浆状物,蒸发掉溶剂,并用乙醚研制,得到该肽(1.11g,2.75mmol)。
第6步:单甲酯壬二酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-苯丙氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用BOP(1.3mmol)、HOBt(1.3mmol)和NMM(将pH调节至8),将甲氧基壬二酰基-Ng-硝基-L-精氨酸(1mmol)与L-苯丙氨醛缩二乙醇(1.3mmol)偶合,得到题述的肽(0.82mmol)。
第7步:单甲酯壬二酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-苯丙氨醛
采用方法E(实施例11),将第6步制得的产物(0.82mmol)转化成题述的化合物(0.81mmol)。1H NMR(300MHz,DMSO-CDCl3)δ:9.59(s,1H),8.36(s,1H),7.49(s,1H),7.3 1-7.09(m,7H),6.71(d,1H),4.69(m,1H),4.60(m,1H),3.66(s,3H),3.41(m,2H),3.27(m,2H),2.31(t,2H),2.2(t,2H),1.80-1.2(m,14H)。
实施例28
第1步:单甲酯壬二酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用各7.0mmol的BOP、HOBt和NMM,将壬二酸单甲酯(1.42g,7.0mmol)与Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇(3.06g,5.0mmol,得自实施例20的第2步)偶合,得到固态的该化合物(3.43g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:6.58(d,1H),6.04(d,1H),5.4(br,1H),5.06(br,1H),4.47(m,1H),4.30(d,1H),4.17(m,1H),3.67(s,3H),3.53(m,4H),3.23(d,1H),3.19(t,2H),2.30(m,2H),2.2(tt,2H),2.0-1.25(2br m,17H),1.20(tt,6H),0.90(dd,6H)。
第2步:单甲酯壬二酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛
采用方法E(实施例11),将第1步制得的产物(0.30g)转化成化合物28(0.22g)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.38(s,1H),8.5(br,1H),4.30(m,1H),4.09(m,1H),3.57(s,3H),3.15(m,2H),3.00(t,2H),2.75(m,2H),2.12(t,2H),1.8-1.20(2br m,17H),0.86(dd,6H)
实施例29
单甲酯壬二酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-D-精氨酰基-L-亮氨醛
第1步:9-芴基甲氧羰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-D-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用溶在5ml DMF中的BOP(3mmol)、HOBt(3mmol)和NMM(5mmol),将9-芴基甲氧羰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-D-精氨酸(3mmol)与亮氨醛缩二乙醇(2.5mmol)偶合,得到固态的该肽(1.72g,2mmol)。
第2步:MeOAz-D-Arg(PMC)-亮氨醛缩二乙醇
采用方法C(实施例9),用溶在5ml DMF中的BOP(1mmol)、HBOt(1mmol)和NMM(3mmol),将壬二酸单甲酯(1.0mmol)与Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-D-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇(0.54g,0.88mmol,得自按照方法B(实施例18)的第1步产物)偶合,得到该产物(0.735g)。
第3步:单甲酯壬二酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-D-精氨酰基-L-亮氨醛
采用方法E(实施例11),将第2步制得的产物(0.1g)转化成化合物29,并以HPLC纯化之。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.49(s,1H),7.74(t,1H),7.43(d,1H),6.43(d,1H),6.43(s,2H),4.60(m,1H),4.51(s,3H),4.54(s,3H),4.37(m,1H),3.66(s,3H),3.31(m,2H),2.63(t,2H),2.26(m,4H),2.09(s,3H),1.80(t,2H),1.57(m,7H),1.26(m,16H),0.90(dd,6H)。
实施例30
单甲酯基壬二酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-正亮氨醛
第1步:Fmoc-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-正亮氨醛
按照方法C(实施例9),用溶在6ml DMF中的BOP(2mmol)、HOBt(2mmol)和NMM(6mmol),将Fmoc-Arg(PMC)-OH(2mmol)与正亮氨醛缩二乙醇(2mmol,按照制备Leu-乙缩醛的步骤,从CBZ-Nle-OH制得)偶合,得到该肽(1.37g,1.64mmol)。
第2步:MeOAz-Arg(PMC)-L-正亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用BOP(2mmol)、HOBt(2mmol)和NMM(6mmol),将壬二酸单甲酯(2mmol)与Arg(PMC)-正亮氨醛缩二乙醇(1.39mmol,得自按照方法B(实施例8)的第1步)偶合,并搅拌过夜。第二天,加入各1mmol的壬二酸单甲酯、BOP、HOBt和NMM,并搅拌4小时。如同方法C(实施例9)如述,对反应混合物进行处理,得到该肽(0.37g,0.84mmol)。
第3步:按照方法E(实施例11),将第2步制得的产物(0.94g,0.84mmol)转化成化合物30(0.58g)1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.54(s,1H),7.49(t,1H),6.74(d,1H),6.26(s,2H),6.23(d,1H),4.58(m,1H),4.31(m,1H),3.66(s,3H),3.34(m,2H),2.63(t,2H),2.58(s,3H),2.56(s,3H),2.29(t,2H),2.23(t,2H),1.9-1.5(m,22H),1.30(s,6H),0.86(t,3H)。
实施例31
第1步:Fmoc-Ng-(对甲苯磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
采用方法C(实施例9),用溶在15ml DMF中的HBTU(5.5mmol)、HOBt(5.5mmol)和NMM(11mmol),将Fmoc-Ng-(对甲苯磺酰基)-L-精氨酸(5mmol)与亮氨醛缩二乙醇(5.5mmol)偶合。分离出的该肽为固体(2.86g,3.96mmol)。
第2步:单甲酯壬二酰基-Ng-(对甲苯磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用溶在15ml DMF中的六氟磷酸1-苯并三唑-1-基-1,1,3,3-四甲基脲翁(tetramethyluronium)(HBTU)(6mmol)、HOBt(6mmol)和NMM(12mmol),将壬二酸单甲酯(6mmol)与Ng-(对甲苯磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇(2.7g,4.7mmol,采用方法B(实施例8)的第1步制得)偶合并搅拌过夜。加入壬二酸单甲酯(3mmol)和二苯基磷酰基叠氮化物(3mmol)以增加反应的产率,并搅拌4小时,得到固体的该肽(1.92g)。
第3步:单甲酯壬二酰基-Ng-(对甲苯磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛
根据方法E(实施例11),第2步制得的产物(1.92g,2.8mmol)转化成化合物31(1.64g)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.37(s,1H),8.97(d,1H),8.37(d,1H),7.66(d,2H),7.37(m,1H),7.29(d,2H),7.03(s,1H),6.63(s,1H),4.09(m,1H),3.57(s,3H),3.44(m,1H),3.04(m,2H),2.26(s,3H),2.33(t,2H),2.13(t,2H),2.80-1.09(m,7H),0.86(dd,6H)。
实施例32
单甲酯壬二酰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩氨基脲
参见Basak,A.等,Int.J.Peptide Protein Res.(国际肽、蛋白质研究杂志),36,7-17(1990)。将溶在3ml 95%乙醇中的MeOAz-Arg(MTR)-Leu-H(实施例34)(67mg,0.10mmol)、氢氯酸氨基脲(11mg,0.1mmol)和乙酸钠(9mg,0.11mmol)的混合物加热到70℃,维持18小时。将反应混合物浓缩,得到淡黄色固体(化合物32),如表6所示,然后以HPLC对该固体产物进行纯化。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.91(t,1H),7.09(d,1H),6.68(s,1H),6.22(s,1H),4.37-4.46(m,1H),4.2-4.3(m,1H),4.04(d,1H),3.7(s,3H),3.58(s,3H),2.6(s,3H),2.27(dd,2H),2.05,2.12(s,3H),1.2-1.64(m,12H),0.85(t,6H)。
实施例33
单甲酯壬二酰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩氨基硫脲
按照与实例32相同的步骤,用溶在2ml 90%乙醇中的化合物34(51mg,0.07mmol)和缩氨基硫脲(7mg,0.07mmol)制备化合物33。
实施例34
第1步:按照方法C(实施例9),用9-芴基甲氧羰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯-1-磺酰基)-L-精氨酸和L-亮氨醛缩二乙醇来制备9-芴基-甲氧羰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇。
第2步:单甲酯壬二酰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛
按照方法C(实施例9),将壬二酸单甲酯(6mmol)与Ng-(4-甲氧基-2,5,6-三甲基苯-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇(5mmol,采用方法B(实施例8)自第1步制得)偶合,该肽以无定形的固体(3.3g)而被分离出来。
第3步:甲氧基壬二酰基-Ng-(4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛
按照方法E(实施例11),将第2步制得的产物(0.5g)转化成化合物34。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.54(s,1H),7.51(s,1H),6.74(d,1H),6.57(s,1H),6.40(s,2H),6.31(s,1H),4.66(m,1H),4.41(m,1H),3.87(s,3H),3.70(s,3H),3.33(m,2H),2.73(s,3H),2.66(s,3H),2.33(t,2H),2.26(t,2H),2.17(s,3H),2.00-1.26(m,17H),0.96(dd,6H)。
实施例35
第1步:Fmoc-Ng-(2,4,6-三甲基苯-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
将4M HCl的二恶烷(10ml)溶液加入到BOc-Arg(MTS)-OH(6mmol)的二恶烷(10ml)溶液中。30分钟后,除去溶剂,并加入乙醚,收集沉淀并使之干燥(3.21g,9mmol)。按照制备甲苯磺酰衍生物(实施例31)所述的步骤,将氢氯酸Arg-MTS-OH转化为Fmoc-Arg(MTS)-OH,得到白色固态的题述化合物(2.09g)。
第2步:Fmoc-Arg(MTS)-Leu-乙缩醛
按照方法C(实例9),用溶在15ml DMF中的HBTU(4mmol)、HOBt(4mmol)和NMM(10mmol),将Fmoc-Arg(MTS)-OH(3.361mmol)与亮氨醛缩二乙醇(4mmol)偶合,得到题述的肽(1.05g)。
第3步:MeOAz-Arg(MTS)-Leu-乙缩醛
采用方法C,用溶在3ml DMF中的BOP(1.2mmol)、HOBt(1.2mmol)和NMM(3.6mmol),将壬二酸单甲酯(1.2mmol)与Arg(MTS)-Leu-乙缩醛(0.85mmol,按照方法B(实施例8)自第2步制得)偶合,并过夜搅拌,得到半固体的题述肽(0.59g)。
第4步:甲氧基壬二酰基-Ng-(2,4,6-三甲基苯-1-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛
根据方法E(实施例11),将第3步的产物(0.59g)转化成化合物35(0.54g),并以HPLC纯化之。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.49(s,1H),7.53(s,1H),6.90(s,2H),6.81(d,1H),6.40(bs,3H),4.61(m,1H),4.38(m,1H),3.67(s,3H),2.67(s,6H),2.29(t,2H),2.20(t,2H),2.0-1.20(m,19H),0.91(dd,6H)
实施例36
第1步:6-氰基-己烷-1-磺酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
将方法G(实施例13)中的第14步制得的6-氰基-己烷-1-磺酰氯(0.19g,0.89mmol)加入到实施例20的第2步制得的产物(0.55g,0.899mmol)的DMF(1ml)溶液中,并用NMM将溶液的pH调节至8。搅拌4个小时后,按方法A(实例7)所述对反应混合物进行处理,以得到题述的化合物(0.466g)。
第2步:6-氰基-己烷-1-磺酰基-Ng-(2,2,5,7,8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基)-L-精氨酰基-L-亮氨醛
采用方法E(实施例11),将第1步制得的产物转化成化合物36(0.22g),并如表6所示,以HPLC纯化之。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.37(s,1H),6.83(b,1H),6.43(b,1H),3.88(m,1H),3.77(m,1H),3.01(m,2H),2.80(m,2H),2.55(t,2H),2.46(s,6H),2.0(s,3H),1.75(m,5H),1.6-1.3(m,15H),1.23(s,6H),0.84(dd,6H)
实施例37
2-萘甲酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛
第1步:2-萘甲酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
将2-萘甲酰氯(0.104g,0.55mmol)加入到实施例14的第2步所制得的产物的DMF(2ml)和NMM(0.18ml)的溶液中,得到固态的题述化合物(0.22g)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.92(b,1H),8.0-7.91(mm,10H),6.93(d,1H),5.07(m,1H),4.37(d,1H),4.17(m,1H),3.69(m,3H),3.53(m,3H),3.38(m,2H),1.77,1.58,1.4(mm,5H),0.83(dd,6H)。
第2步:2-萘甲酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛
采用方法E(实施例11),将第1步制得的产物(0.1g)转化成化合物37(60mg)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.43(s,1H),8.72(d,1H),8.53(m,2H),8.0(m,6H),7.6(m,2H),6.20(m,1H),4.57(m,1H),4.14(m,1H),3.92(m,1H),3.2(m,2H),3.0(d,1H),1.77(m,5H),0.86(m,6H)。
实施例38
CBZ-7-氨基庚酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛
第1步:CBZ-7-氨基庚酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛缩二乙醇
按照方法C(实施例9),用BOP(1.1g,2.5mmol)、HOBt(0.34g,2.5mmol)和NMM(0.253ml,2.5mmol),将CBZ-7-氨基庚酸(0.7g,2.5mmol)与实施例14的第2步产物(0.78g,2.0mmol)偶合,得到半固体状的肽,该肽直接用于下一步骤。
第2步:CBZ-7-氨基庚酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨醛
按照方法E(实施例11),在搅拌反应混合物5小时后,将第1步制得的乙缩醛转化成化合物38(0.8g)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:9.30(s,1H),8.47(s,1H),8.46(s,1H),8.29(d,1H),8.11(t,1H),7.80(s,1H),7.64(d,1H),7.31(s,1H),7.23(s,5H),4.91(s,2H),4.23(m,1H),4.00(m,1H),3.51(q,2H),3.27(m,2H),2.89(q,2H),2.11(t,2H),2.03(t,2H),1.7-1.00(m,10H),0.77(dd,6H)。
实施例39-42描述了列于表7中的MCP抑制剂的合成。
表7实施例编号 抑制率(%) IC50nM
(1μm)39(异构体a) 31 >100039(异构体b) 21 >100040 100 841(异构体a) 99 2241(异构体b) 98 1342 15 >1000
实施例39
在本实例以及下文的三个实施例中,本发明的抑制剂均通过第II偶合方法制备。在各实施例中,如此处所述,将制备的10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酸偶合到有酶活性的氨基酸衍生物上,来产生抑制剂。得到的这些抑制剂是两个或多个非对映异构体的混合物,在某些情况下,这些非对映异构体可以通过HPLC来分离。
A)10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酸甲酯
按照方法C(实施例9)的步骤,将得自实例13第5步的10-氰基-2-环戊基-癸酸(2.4g;11mmol)与二盐酸-Ng-硝基-L-精氨酸甲酯(2.86g,11mmol)、BOP(6.6g,15mmol)、HOBt(1.62g,12mmol)和3.6ml的NMM(33mmol)一起搅拌,得到泡沫样固体,4.8g的甲基酯。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.75(bs,1H),7.81(bs,2H),6.42(d,1H),4.67(t,1H),3.82(s,3H),3.75(m,1H),3.32(m,1H),2.15(t,2H),2.05-1.12(m,28H)。
B)10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酸
将“A”步制得的甲基酯5.5g溶在30ml的甲醇中,用1.00N的氢氧化钠水溶液处理该溶液。2小时后,加入2%的碳酸氢钠水溶液100ml,所得的溶液用100ml的乙醚萃取。分离出水层,以3%的柠檬酸水溶液酸化,并用250ml的乙酸乙酯萃取。分离出所得的有机层,以无水MgSO4干燥,蒸发,得到无色的胶状物,用石油醚研制固化物,得到4.4g白色的极细粉末。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:10.6(bs,1H),8.75(bs,1H),7.82(bs,2H),6.41(d,1H),4.67(t,1H),3.71(m,1H),3.32(m,1H),2.15(t,2H),2.04-1.12(m,30H)。
C)10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨氯甲基酮
用0.33ml(3mmol)的NMM处理上文“B”步的产物467mg(1.0mmol)和270mg氢氯酸亮氨氯甲基酮(Bachem Biosciences,Inc.,King ofPrussia,Pennsylvania)、440mg(1.0mmol)的BOP以及(135mg(1mmol)的HOBt的混合物(溶在4.0ml的DMF中)。4小时后,该混合物以75ml的乙酸乙酯稀释,用2%的NaHCO3水溶液、水、3%的柠檬酸水溶液洗涤,最后再用水洗涤一次。分离有机层,以MgSO4干燥,最后蒸发,得到淡黄色的粘稠的油。采用快速色谱法,用乙酸乙酯洗脱,使该化合物通过9×1/2英寸的硅胶60-H柱而纯化之。蒸发所得的溶液,得到无色的胶状物,用1∶1的乙酸乙酯/乙醚使该胶状物固化,得到198mg的无色固体氯甲基酮。HPLC表明有两个非对映异构体存在,以制备性RP-HPLC分离该两个异构体。在水-乙腈溶剂梯度(30-80%的乙腈,40分钟内)中,在22.58分钟(非对映异构体a)和23.7分钟(非对映异构体b)时分离出洗脱峰。
非对映异构体a:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.53(bs,1H),7.61(bs,2H),7.31(bs,1H),6.69(d,1H),4.73(m,1H),4.65(m,1H),4.28(q,2H),3.53(m,1H),3.31(t,1H),2.32(t,2H),1.90-1.1l(m,31H),0.93(q,6H)。
非对映异构体b:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.53(bs,1H),7.61(bs,2H),7.31(bs,1H),6.79(d,1H),4.73(m,1H),4.65(m,1H),4.28(q,2H),3.53(m,1H),3.31(t,1H),2.32(t,2H),1.90-1.11(m,31H),0.93(q,6H)。
实施例40
将467mg(1.0ml)的10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酸(上文的实施例39,“B”步)、由Shenvi的美国专利4,577,773方法制备的264mg(1.0mmol)的氢氰酸亮氨硼酸频哪醇酯、4.40mg(1.0mmol)的BOP和135mg(1.0mmol)的HOBt溶在5.0ml的DMF中,该溶液用0.33ml(3mmol)的NMM处理。2小时后,该混合物用75ml的乙酸乙酯稀释,用2%的NaHCO3水溶液和水洗涤,分离有机层,以MgSO4干燥并蒸发,得到410mg的浅棕色粉末。该固体用氯仿洗涤,得到290mg白色的固体产物,该产物在HPLC中表现为单一的峰。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.53(bs,1H),7.65(bs,2H),6.71(t,1H),4.61(m,1H),3.52(m,1H),3.31(m,2H),3.05(m,1H),2.82(m,1H),2.38(t,2H),2.06-1.42(m,28H),1.22(s,12H),1.15(m,2H),0.92(m,6H)。
实施例41
10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨(酸)α-酮乙酰胺
A)10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-(1-乙基氨基羰基-1-羟基-4-甲基)-2-戊酰胺
467mg(1.0mmol)的10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酸和225mg氢氯酸3-氨基-2-羟基-5-甲基-己酸N-乙酰胺(由Harbeson等在J.Med.Chem.37,2918-29(1994)中公开的方法制备)的DMF(5.0ml)溶液用440mg(1mmol)的BOP、135mg(1mmol)的HOBt和0.33ml(3mmol)的NMM处理。搅拌2小时后,该溶液用75ml的乙酸乙酯稀释,并用2%的NaHCO3水溶液、水、3%的柠檬酸水溶液、水洗涤,以MgSO4干燥,蒸发后得到540mg浅白色的固体羟基化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.53(bs,1H),7.73(bs,2H),7.04(bs,1H),6.83(t,1H),4.52(m,1H),4.19(m,1H),4.11(q,2H),3.46(q,2H),3.26(m,2H),2.35(t,2H),1.91(m,2H),1.83(m,2H),1.8-1.2(m,28H),1.13(t,3H),0.88(m,6H)。
B)10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-L-亮氨(酸)α-酮乙酰胺
将上文“A”制得的羟基化合物250mg溶在6.0ml的无水二氯甲烷中,将该溶液冷却到0℃,并将之与225mg约(0.5mmol)的Dess-Martin试剂(D.B.Dess和J.C.Martin,J.Org.Chem(有机化学杂志)48,4156-4158(1983))一起搅拌。
使该反应混合物温热到室温,并搅拌2小时。以50ml的乙酸乙酯稀释该混浊的悬浮液,并使之过滤通过精细烧结的玻璃滤器。滤液先用10%的Na2S2O3水溶液洗涤,然后再用饱和的NaCl洗涤。以MgSO4干燥,并使之蒸发,得到180mg白色固态的酮酰胺产物。采用水-乙腈梯度系统(40-70%乙腈,40分钟),以制备性的RP-HPLC纯化该产物。在18.07分钟(非对映异构体a)和19.54分钟(非对映异构体b)收集到吸收峰。
非对映异构体a:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.45(bs,1H),7.58(bs,2H),7.04(bm,2H),6.57(t,1H),5.33(t,1H),4.60(m,1H),3.51(m,1H),3.33(m,3H),2.35(t,2H),1.91-1.11(m,34H),0.94(m,6H)。
非对映异构体b:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.45(bs,1H),7.48(bs,2H),7.25(m,1H),7.04(t,1H),6.85(m,1H),6,62(d,1H),5,32(t,1H),4.81(m,1H),4.58(m,1H),3.51(m,1H),3.35(m,3H),2.35(t,2H),1.95-1.11(m,32H),0.98(m,6H)。
实施例42
A)1-硝基-2-苯基乙烷的合成
在45分钟内,于室温,边搅拌边向反式-β-苯乙烯(5.25g,0.035mol)和硅胶(10g,230-400筛目)的混合物(溶在400ml氯仿和75ml的异丙醇中)中,慢慢地加入氢硼化钠(5.50g,0.145mol)。对该反应物再搅拌15分钟,然后小心地加入10%的盐酸(20ml)而使反应终止。过滤并用氯仿(50ml)洗涤分离出的固体。合并滤液,以水(1×20ml)、盐水(1×20ml)洗涤,并用无水硫酸钠干燥。在减压下蒸发溶剂,得到粗产物,以快速色谱(硅胶,8%乙酸乙酯-己烷)纯化该粗产物,得到无色油状有辛辣气味的1-硝基-2-苯基乙烷2.86g;Rf(10%乙酸乙酯的己烷溶液):0.40;1H NMR(300MHz,CDCL3)7.40-7.20(m,5H),4.60(t,2H),3.30(t,2H)。
B)1-氟-2-羟基-3-硝基-4-苯基丁烷的合成
向冷的(-78℃)2M草酰氯的二氯甲烷(11.60ml,0.0232mol)溶液中缓慢地加入二甲亚砜(3.65g,3.32ml,0.0467mol)。搅拌该反应混合物15分钟。然后将2-氟乙醇(1.16g,0.0181mol)的二氯甲烷(10mol)溶液慢慢地加入到反应烧瓶中。继续搅拌15分钟后,以无水二氯甲烷(180ml)稀释该反应混合物,并向其中加入三乙胺(9.20g,12.63ml,0.090mol)。继续搅拌2小时,此时温度已升至室温。此时,将1-硝基-2-苯基乙烷(2.74g,0.0181mol)的无水二氯甲烷(10ml)溶液加入到该反应混合物中,继续搅拌过液。然后,用水(1×30ml)、4%盐酸(3×20ml)、水(1×20ml)、饱和的碳酸氢钠溶液(2×20ml)和盐水(1×20ml)洗涤该混合物。以无水硫酸钠干燥,使溶剂蒸发掉,得到粗产物。以快速色谱法(硅胶,25%乙酸乙酯-己烷)纯化,得到叠同(erythro)异构体和对映(threo)异构体的产物。总产率为3.01g。该过程的总体性描述可在Imperiali,B.等,Tetrahedron lett.(四面体通信)27(2),135(1986)和Revesz,L.等,Tetrahedron Lett.(四面体通信)35(52),9693(1994)中找到。
异构体a为白色固体,mp 71-73℃;Rf(30%乙酸乙酯的己烷溶液):0.46;1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.40-7.10(m,5H),4.90(m,1H),4.60(m,1H),4.50-4.30(m,2H),3.45-3.25(m,2H),2.70(d,1H)。
异构体b为无色的油,Rf(30%乙酸乙酯的己烷溶液):0.42;1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.40-7.15(m,5H),4.90(m,1H),4.65(m,1H),4.50(m,1H),4.20(m,1H),3.40-3.30(m,2H),2.90(d,1H)。
C)3-氨基-1-氟-2-羟基-4-苯基丁烷的合成
使上述异构体a(0.48g,2.25mmol)、绝对乙醇(20ml)和兰尼镍(催化量)的混合物在Parr仪器中氢化(60磅/平方英寸)5小时。通过硅藻土垫过滤并使溶剂蒸发,得到410mg的胺异构体a。对上述异构体b(800mg,3.75mmol)做类似的处理,得到了510mg的胺异构体b。
胺异体体a是白色固体,mp 64-67℃;1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.40-7.10(m,5H),4.70(d,1H),4.50(d,1H),3.90-3.70(m,1H),3.30-3.10(m,1H),2.95(dd,1H),2.60-2.45(q,1H),2.20-1.70(宽峰,3H)。
胺异构体b是白色固体,mp67-70℃;1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.40-7.10(m,5H),4.70-(d,1H),4.55(d,1H),3.70-3.50(m,1H),3.20-3.00(m,1H),2.95(dd,1H),2.60-2.45(q,1H),2.20-1.65(宽峰,3H)。
D)10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-(4-氟-3-羟基-1-苯基)-2-丁酰胺
用440mg(1.0mmol)的BOP、135mg(1.0mmol)的HOBt和0.33ml(3mmol)的NMM处理溶于5ml DMF中的10-氰基-2-环戊基-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酸(467mg,1.0mmol)和3-氨基-1-氟-2-羟基-4-苯基-丁烷(183mg,1.0mmol)的溶液。搅拌2小时后,该溶液以75ml的乙酸乙酯稀释,并以2%的NaHCO3水溶液、水、3%的柠檬酸水溶液、水洗涤,以MgSO4干燥,蒸发后得到浅白色的固体状的羟基化合物480mg。1HNMR(300MHz,CDCl3+d6-DMSO)δ:8.15(bs,1H),7.82(bs,2H),7.21(m,6H),5.05(t,1H),4.51(m,1H),4.22(m,1H),3.82(m,1H),3.75(m,2H),2.95(q,2H),2.35(t,2H),2.04-1.13(m,31H)。
E)10-氰基-2-环戊基-1-癸酰基-Ng-硝基-L-精氨酰基-苯丙氨(酸)氟甲基酮
将上文“C”步制得的羟基化合物250mg溶在6.0ml的无水二氯甲烷中,将该溶液冷却到0℃,并使之与225mg(约0.5mmol)的Dess-Martin试剂一起搅拌。使反应混合物温热到室温,并搅拌2小时。用50ml乙酸乙酯稀释该混浊的悬浮液,用精细烧结的玻璃滤器过滤。滤液用10%的Na2S2O3洗涤,然后用饱和NaCl洗涤。以MgSO4干燥之,蒸发溶剂,得到180mg的白色固体。HPLC纯化后,得到了42mg的纯氟甲基酮产物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.56(bs,1H),7.62(bs,2H),7.42(t,1H),7.21(m,5H),6.63(m,1H),5.05-4.53(m,4H),3.46(m,1H),3.18(m,2H),2.98(q,2H),2.33(t,2H),2.04-1.13(m,27H)。
将在本说明书中提到的各篇公开文献的全文内容引入本文作参考。
本领域的那些技术人员应认识到,可对本发明的优选实施方案进行变化和修改,而且可在不背离本发明精神的前提下完成这些变化和修改。因此,所附的权利要求覆盖了落入本发明实质和范围内的所有等价的变化。
序列表(1)一般信息:(i)申请人:穆罕默德·伊克巴尔
桑卡尔·查特吉
詹姆斯·L·迪博尔德
詹姆斯·C·考尔
罗伯特·西曼(ii)发明名称:多相催化蛋白酶的抑制剂(iii)序列数:10(iv)通讯地址:
(A)收信人:Woodcock Washburn Kurtz Mackiewicz和Norris
(B)街道:One Liberty Place-46th Floor
(C)城市:费城
(D)州:宾西法尼亚州
(E)国家:美国
(F)邮编:19103(v)计算机可读形式:
(A)介质类型:3.5英寸软盘,720Kb
(B)计算机:IBM PC兼容机
(C)操作系统:PC-DOS/MS-DOS
(D)软件:Word Perfect 5.1(vi)本申请数据:
(A)申请号:无
(B)申请日:今日
(C)分类号:无(viii)代理人信息:
(A)姓名:米歇尔·P·斯特拉赫
(B)登记号:38,325
(C)案卷/卷宗号:CEPH-0148(ix)电讯信息:
(A)电话:215-568-3100
(B)传真:215-568-3439(2)SEQ ID NO:1的信息 (i)序列特征:
(A)长度:36对碱基
(B)类型:核酸
(C)链型:单链
(D)拓扑学:线性(xi)序列描述:SEQ ID NO:1:TCGATCGAAG CTTGCCGCCA CCATGGCGAT GAAAGC 36(2)SEQ ID NO:2的信息(i)序列特征:
(A)长度:30对碱基
(B)类型:核酸
(C)链型:单链
(D)拓扑学:线性(xi)序列描述:SEQ ID NO:2:AGCTAGCCTC GAGCAGATTA CAGTTTAATG 30(2)SEQ ID NO:3的信息(i)序列特征:
(A)长度:21对碱基
(B)类型:核酸
(C)链型:单链
(D)拓扑学:线性(xi)序列描述:SEQ ID NO:3:TTAATCCTCA CTCTAAGAAA C 21(2)SEQ ID NO:4的信息(i)序列特征:
(A)长度:24对碱基
(B)类型:核酸
(C)链型:单链
(D)拓扑学:线性(xi)序列描述:SEQ ID NO:4:TTGTACGGCC AGTGATGGAA TGCT 24(2)SEQ ID NO:5的信息
(i)序列特征:
(A)长度:24对碱基
(B)类型:核酸
(C)链型:单链
(D)拓扑学:线性
(xi)序列描述:SEQ ID NO:5:AGCATTCCAT CACTGGCCGT ACAA 24(2)SEQ ID NO:6的信息
(i)序列特征:
(A)长度:20对碱基
(B)类型:核酸
(C)链型:单链
(D)拓扑学:线性
(xi)序列描述:SEQ ID NO:6:TAATACGACT CACTATAGGG 20(2)SEQ ID NO:7的信息
(i)序列特征:
(A)长度:41对碱基
(B)类型:核酸
(C)链型:单链
(D)拓扑学:线性
(xi)序列描述:SEQ ID NO:7:GCACACCACT TTCATCGCCA TGGTGGCGGC AAGCTTCGAT C 41(2)SEQ ID NO:8的信息
(i)序列特征:
(A)长度:20对碱基
(B)类型:核酸
(C)链型:单链
(D)拓扑学:线性
(xi)序列描述:SEQ ID NO:8:
ATTAACCCTC ACTAAAGGGA 20
(2)SEQ ID NO:9的信息
(i)序列特征:
(A)长度:41对碱基
(B)类型:核酸
(C)链型:单链
(D)拓扑学:线性
(xi)序列描述:SEQ ID NO:9:GATCGAAGCT TGCCGCCACC ATGGCGATGA AAGTGGTGTG C 41
(2)SEQ ID NO:10的信息
(i)序列特征:
(A)长度:18对碱基
(B)类型:核酸
(C)链型:单链
(D)拓扑学:线性
(xi)序列描述:SEQ ID NO:10:
CTTCAGTTAA TCCTGTAA 18
Claims (31)
其中,
R1选自-C≡N、-C(=O)OR9、苯二甲酰亚氨基、-NH-SO2R9和-NH-J;
R2选自H、羟基、具有1至10个碳原子的烷基和具有3至7个碳原子的环烷基;
R3选自-(CH2)m-NH-C(=N-R5)-NH2、-R6-NO2、-R6-J和-R6-CN;
R4为-CH(CH2-R7)-Q;
Q选自-CH-R8、-C(=O)CH3、-C(=O)CH2Cl、-C(=O)CH2Br、-C(=O)CH2F、-C(=O)CHF2、-C(=O)CF3、-C(=O)C(=O)R7、-C(=O)C(=O)NH-R7、-C(=O)CO2-R7、-C(=O)CO2H、-B(OH)2、
其中p和q独立地为2或3;
w为环烷基;
R5选自-NO2、-CN和-J;
R6为-(CH2)m-NH-C(=NH)-NH-;
R7选自苯基和具有1至8个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
R8选自=O、=N-NHC(=O)-NH2、=N-OH、=N-OCH3、=N-O-CH2-C6H5、=NNH-C(=S)-NH2和=N-NH-J;
R9选自氢和具有1至6个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
J为保护基团;
n为3至10的整数;以及
m为2至5的整数。
2.权利要求1的化合物,其特征在于R1选自-C≡N、-C(=O)OCH3、苯二甲酰亚氨基和-NH-SO2CF3。
3.权利要求1的化合物,其特征在于R2选自氢和环戊烷基。
4.权利要求1的化合物,其特征在于R3为-(CH2)3-NH-C(=N-R5)-NH2。
5.权利要求4的化合物,其特征在于R5选自-NO2、CN、-PMC、-MTR、-MTS和Tos。
6.权利要求1的化合物,其特征在于R7选自-CH(CH3)2、-(CH2)2-CH3和-C6H5。
7.权利要求1的化合物,其特征在于Q为-CH-R8。
9.权利要求7的化合物,其特征在于Q选自-CH-R8、-B(OH)2、-C(=O)C(=O)NH-R7、
和
10.权利要求7的化合物,其特征在于R8选自=O、=N-NHC(=O)-NH2、=N-OH、=N-OCH3、=N-O-CH2-C6H5和=NNH-C(=S)-NH2。
11.权利要求1的化合物,其特征在于R1选自-C(=O)OCH3、苯二甲酰亚氨基和-NHSO2CF3;R2为环戊烷基;R3为-(CH2)3-NH-C(=N-NO2)-NH2;Q为-CH-R8;R7为-CH(CH3)2;以及R8为=O。
12.权利要求1的化合物,其特征在于R1为-C≡N;R2为环戊烷基;R3选自-(CH2)3-NH-C(=N-NO2)-NH2和-(CH2)3-NH-C(=N-J)-NH2;Q为-CH-R8;R7为-CH(CH3)2;以及R8为=O。
14.权利要求1的化合物,其特征在于R1为-C≡N;R2为环戊烷基;R3选自-(CH2)3-NH-C(=N-NO2)-NH2和-(CH2)3-NH-C(=N-J)-NH2;Q为-CH-R8;R7为-CH(CH3)2;以及R8选自=N-NHC(=O)-NH2、=N-OH、=N-OCH3和=N-O-CH2-C6H5。
15.抑制多相催化蛋白酶的组合物,含有权利要求1的化合物和药物学上可接受的载体。
16.减少肌肉物质损失的组合物,含有权利要求1的化合物和药物学上可接受的载体。
17.用于治疗肌肉消耗性疾病的组合物,含有权利要求1的化合物和药物学上可接受的载体。
18.权利要求17的组合物,其特征在于所述的疾病是肌营养不良、心性恶病质、肺气肿、糖尿病、麻风病、营养不良、骨软化或癌性恶病质。
19.减少Cu/Zn过氧化物歧化酶-1降解的组合物,含有多相催化蛋白酶的抑制剂和药物学上可接受的载体。
其中,
R1选自-C≡N、-C(=O)OR9、苯二甲酰亚氨基、-NH-SO2R9和-NH-J;
R2选自H、羟基、具有1至10个碳原子的烷基和具有3至7个碳原子的环烷基;
R3选自-(CH2)m-NH-C(=N-R5)-NH2、-R6-NO2、-R6-J和-R6-CN;
R4为-CH(CH2-R7)-Q;
Q选自-CH-R8、-C(=O)CH3、-C(=O)CH2Cl、-C(=O)CH2Br、-C(=O)CH2F、-C(=O)CHF2、-C(=O)CF3、-C(=O)C(=O)R7、-C(=O)C(=O)NH-R7、-C(=O)CO2-R7、-C(=O)CO2H、-B(OH)2、和
其中p和q独立地为2或3;
w为环烷基;
R5选自-NO2、-CN和-J;
R6为-(CH2)m-NH-C(=NH)-NH-;
R7选自苯基和具有1至8个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
R8选自=O、=N-NHC(=O)-NH2、=N-OH、=N-OCH3、=N-O-CH2-C6H5、=NNH-C(=S)-NH2和=N-NH-J;
R9选自氢和具有1至6个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
J为保护基团;
n为3至10的整数;以及
m为2至5的整数。
21.治疗其特征为Cu/Zn过氧化物歧化酶-1活性降低性疾病的组合物,包含多相催化蛋白酶的抑制剂和药物学上可接受的载体。
其中,
R1选自-C≡N、-C(=O)OR9、苯二甲酰亚氨基、-NH-SO2R9和-NH-J;
R2选自H、羟基、具有1至10个碳原子的烷基和具有3至7个碳原子的环烷基;
R3选自-(CH2)m-NH-C(=N-R5)-NH2、-R6-NO2、-R6-J和-R6-CN;
R4为-CH(CH2-R7)-Q;
Q选自-CH-R8、-C(=O)CH3、-C(=O)CH2Cl、-C(=O)CH2Br、-C(=O)CH2F、-C(=O)CHF2、-C(=O)CF3、-C(=O)C(=O)R7、-C(=O)C(=O)NH-R7、-C(=O)CO2-R7、-C(=O)CO2H、-B(OH)2、和
其中p和q独立地为2或3;
w为环烷基;
R5选自-NO2、-CN和-J;
R6为-(CH2)m-NH-C(=NH)-NH-;
R7选自苯基和具有1至8个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
R8选自=O、=N-NHC(=O)-NH2、=N-OH、=N-OCH3、=N-O-CH2-C6H5、=NNH-C(=S)-NH2和=N-NH-J;
R9选自氢和具有1至6个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
J为保护基团;
n为3至10的整数;以及
m为2至5的整数。
23.权利要求21的组合物,其特征在于所述的疾病是肌萎缩性脊髓侧索性硬化、帕金森氏病、阿耳茨海默氏病、杭廷顿氏舞蹈病、中风、创伤和局部缺血。
24.抑制多相催化蛋白酶的方法,包括使多相催化蛋白酶与抑制量的权利要求1的化合物接触。
25.减少肌肉物质损失的方法,包括对患者施用治疗有效量的权利要求1的化合物。
26.治疗肌肉消耗性疾病的方法,包括对患者施用治疗有效量的权利要求1的化合物。
27.权利要求26的方法,其特征在于所述的疾病是肌营养不良、心性恶病质、肺气肿、糖尿病、麻风病、营养不良、骨软化或癌性恶病质。
28.使Cu/Zn过氧化物歧化酶-1在哺乳动物中的降解作用减低的方法,包括对患者施用治疗有效量的多相催化蛋白酶的抑制剂,其中所述的降解与由所述的降解引起的疾病或紊乱有关。
29.权利要求28的方法,其特征在于多相催化蛋白酶的抑制剂是通式如下的化合物:
其中,
R1选自-C≡N、-C(=O)OR9、苯二甲酰亚氨基、-NH-SO2R9和-NH-J;
R2选自H、羟基、具有1至10个碳原子的烷基和具有3至7个碳原子的环烷基;
R3选自-(CH2)m-NH-C(=N-R5)-NH2、-R6-NO2、-R6-J和-R6-CN;
R4为-CH(CH2-R7)-Q;
Q选自-CH-R8、-C(=O)CH3、-C(=O)CH2Cl、-C(=O)CH2Br、-C(=O)CH2F、-C(=O)CHF2、-C(=O)CF3、-C(=O)C(=O)R7、-C(=O)C(=O)NH-R7、-C(=O)CO2-R7、-C(=O)CO2H、-B(OH)2、和
其中p和q独立地为2或3;
w为环烷基;
R5选自-NO2、-CN和-J;
R6为-(CH2)m-NH-C(=NH)-NH-;
R7选自苯基和具有1至8个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
R8选自=O、=N-NHC(=O)-NH2、=N-OH、=N-OCH3、=N-O-CH2-C6H5、=NNH-C(=S)-NH2和=N-NH-J;
R9选自氢和具有1至6个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
J为保护基团;
n为3至10的整数;以及
m为2至5的整数。
30.治疗其特征在于Cu/Zn过氧化物歧化酶-1的活性减低的疾病的方法,包括对患者施用多相催化蛋白酶的抑制剂。
其中,
R1选自-C≡N、-C(=O)OR9、苯二甲酰亚氨基、-NH-SO2R9和-NH-J;
R2选自H、羟基、具有1至10个碳原子的烷基和具有3至7个碳原子的环烷基;
R3选自-(CH2)m-NH-C(=N-R5)-NH2、-R6-NO2、-R6-J和-R6-CN;
R4为-CH(CH2-R7)-Q;
Q选自-CH-R8、-C(=O)CH3、-C(=O)CH2Cl、-C(=O)CH2Br、-C(=O)CH2F、-C(=O)CHF2、-C(=O)CF3、-C(=O)C(=O)R7、-C(=O)C(=O)NH-R7、-C(=O)CO2-R7、-C(=O)CO2H、-B(OH)2、和
其中p和q独立地为2或3;
w为环烷基;
R5选自-NO2、-CN和-J;
R6为-(CH2)m-NH-C(=NH)-NH-;
R7选自苯基和具有1至8个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
R8选自=O、=N-NHC(=O)-NH2、=N-OH、=N-OCH3、=N-O-CH2-C6H5、=NNH-C(=S)-NH2和=N-NH-J;
R9选自氢和具有1至6个碳原子的烷基,所述烷基可被一个或多个卤原子、芳基或杂芳基任意取代;
J为保护基团;
n为3至10的整数;以及
m为2至5的整数。
Applications Claiming Priority (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US08/337,795 | 1994-11-14 | ||
US08/337,795 US5550262A (en) | 1994-11-14 | 1994-11-14 | Multicatalytic protease inhibitors |
US46439895A | 1995-06-05 | 1995-06-05 | |
US08/464,398 | 1995-06-05 | ||
US08/552,794 US5614649A (en) | 1994-11-14 | 1995-11-03 | Multicatalytic protease inhibitors |
US08/552,794 | 1995-11-03 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1164192A true CN1164192A (zh) | 1997-11-05 |
CN1166403C CN1166403C (zh) | 2004-09-15 |
Family
ID=27407222
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNB951962043A Expired - Fee Related CN1166403C (zh) | 1994-11-14 | 1995-11-14 | 多相催化蛋白酶的抑制剂 |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US5614649A (zh) |
EP (1) | EP0789578B1 (zh) |
JP (2) | JP3056258B2 (zh) |
KR (1) | KR100420774B1 (zh) |
CN (1) | CN1166403C (zh) |
AT (1) | ATE241998T1 (zh) |
BR (1) | BR9509665A (zh) |
CA (1) | CA2202760A1 (zh) |
DE (1) | DE69530993T2 (zh) |
DK (1) | DK0789578T3 (zh) |
ES (1) | ES2200010T3 (zh) |
FI (1) | FI118325B (zh) |
HK (1) | HK1004638A1 (zh) |
MX (1) | MX9703564A (zh) |
NO (1) | NO324066B1 (zh) |
NZ (1) | NZ296479A (zh) |
PT (1) | PT789578E (zh) |
WO (1) | WO1996014857A1 (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1839139B (zh) * | 2003-08-14 | 2012-05-02 | 赛福伦公司 | 蛋白酶体抑制剂及其使用方法 |
CN102603781A (zh) * | 2003-08-14 | 2012-07-25 | 赛福伦公司 | 蛋白酶体抑制剂及其使用方法 |
Families Citing this family (38)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6083903A (en) * | 1994-10-28 | 2000-07-04 | Leukosite, Inc. | Boronic ester and acid compounds, synthesis and uses |
US5614649A (en) * | 1994-11-14 | 1997-03-25 | Cephalon, Inc. | Multicatalytic protease inhibitors |
ATE230389T1 (de) | 1995-10-25 | 2003-01-15 | Senju Pharma Co | Angiogenese inhibitoren |
US6214800B1 (en) | 1995-10-25 | 2001-04-10 | Senju Pharmaceutical Co., Ltd. | Angiogenesis inhibitor |
US6184248B1 (en) * | 1996-09-05 | 2001-02-06 | Robert K. K. Lee | Compositions and methods for treatment of neurological disorders and neurodegenerative diseases |
EP1006798A4 (en) * | 1996-09-05 | 2003-03-05 | Massachusetts Inst Technology | COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING NEUROLOGICAL DISORDERS AND NEURODEGENERATIVE DISEASES |
US5939581A (en) * | 1997-08-20 | 1999-08-17 | First Chemical Corporation | Processes for preparing hydrocinnamic acid |
US6096778A (en) * | 1997-10-07 | 2000-08-01 | Cephalon, Inc. | α-ketoamide multicatalytic protease inhibitors |
US6150378A (en) * | 1997-10-07 | 2000-11-21 | Cephalon, Inc. | Peptidyl-containing α-ketoamide cysteine and serine protease inhibitors |
US6083944A (en) * | 1997-10-07 | 2000-07-04 | Cephalon, Inc. | Quinoline-containing α-ketoamide cysteine and serine protease inhibitors |
GB9723407D0 (en) * | 1997-11-05 | 1998-01-07 | Ciba Geigy Ag | Organic compounds |
CA2314259A1 (en) * | 1997-12-16 | 1999-06-24 | Robert Siman | Multicatalytic protease inhibitors for use as anti-tumor agents |
EP2574336A1 (en) * | 1998-02-02 | 2013-04-03 | Trustees Of Tufts College | Use of dipeptidylpeptidase inhibitors to regulate glucose metabolism |
US6096711A (en) * | 1998-02-25 | 2000-08-01 | Sherman; Michael | Hsp72 induction and applications |
CA2347275C (en) | 1998-10-20 | 2010-03-09 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Method for monitoring proteasome inhibitor drug action |
US20030054977A1 (en) * | 1999-10-12 | 2003-03-20 | Cell Therapeutics, Inc. | Manufacture of polyglutamate-therapeutic agent conjugates |
US6358928B1 (en) | 1999-11-22 | 2002-03-19 | Enzyme Systems Products | Peptidyl sulfonyl imidazolides as selective inhibitors of serine proteases |
GB0003111D0 (en) * | 2000-02-10 | 2000-03-29 | Novartis Ag | Organic compounds |
EP3078667B1 (en) * | 2001-01-25 | 2018-11-21 | The United States of America, represented by the Secretary, Department of Health and Human Services | Formulation of boronic acid compounds |
CN100415770C (zh) * | 2001-05-30 | 2008-09-03 | 诺瓦提斯公司 | 2-{[n-(2-氨基-3-(杂芳基或芳基)丙酰基)-氨基酰基]-氨基}-烷基硼酸衍生物 |
EP2769715A3 (en) | 2001-11-26 | 2014-09-17 | Trustees Of Tufts College | Methods for treating autoimmune disorders, and reagents related thereto |
CA2837936A1 (en) | 2001-11-26 | 2003-06-05 | Trustees Of Tufts College | Peptidomimetic inhibitors of post-proline cleaving enzymes |
US7468383B2 (en) * | 2005-02-11 | 2008-12-23 | Cephalon, Inc. | Proteasome inhibitors and methods of using the same |
FR2914920B1 (fr) | 2007-04-11 | 2011-09-09 | Clariant Specialty Fine Chem F | Procede de deacetalisation d'alpha-aminoacetals. |
SI2494993T1 (sl) * | 2007-05-04 | 2019-01-31 | Marina Biotech, Inc. | Aminokislinski lipidi in njihove uporabe |
FR2916441B1 (fr) | 2007-05-22 | 2009-08-28 | Clariant Specialty Fine Chem | Procede de racemisation d'alpha-aminoacetals optiquement actifs. |
US7442830B1 (en) | 2007-08-06 | 2008-10-28 | Millenium Pharmaceuticals, Inc. | Proteasome inhibitors |
FR2927900B1 (fr) | 2008-02-27 | 2010-09-17 | Clariant Specialty Fine Chem | Procede de preparation d'alpha-aminoacetals optiquement actifs. |
ES2585114T3 (es) | 2008-06-17 | 2016-10-03 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Compuestos de ésteres boronato y composiciones farmacéuticas de los mismos |
WO2010019553A2 (en) * | 2008-08-11 | 2010-02-18 | Banyan Biomarkers, Inc. | Biomarker detection process and assay of neurological condition |
AR075090A1 (es) | 2008-09-29 | 2011-03-09 | Millennium Pharm Inc | Derivados de acido 1-amino-2-ciclobutiletilboronico inhibidores de proteosoma,utiles como agentes anticancerigenos, y composiciones farmaceuticas que los comprenden. |
JP2013506687A (ja) | 2009-09-30 | 2013-02-28 | プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバード カレッジ | オートファジー促進遺伝子産物の変調によりオートファジーを変調する方法 |
JP5783659B2 (ja) | 2009-12-22 | 2015-09-24 | セファロン、インク. | プロテアソーム阻害剤およびその調製、精製および使用のための方法 |
US8354548B2 (en) * | 2010-02-19 | 2013-01-15 | Bristol-Myers Squibb Company | Glycine chroman-6-sulfonamides for use as inhibitors of diacylglycerol lipase |
AU2011235227B2 (en) | 2010-03-31 | 2016-09-08 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Derivatives of 1-amino-2-cyclopropylethylboronic acid |
UY36132A (es) | 2014-05-20 | 2015-11-30 | Millennium Pharm Inc | Métodos para terapia de cáncer |
EP3157909B1 (en) | 2014-06-20 | 2021-04-07 | Principia Biopharma Inc. | Lmp7 inhibitors |
CN110366558A (zh) | 2016-10-28 | 2019-10-22 | 班扬生物标记公司 | 针对泛素c末端水解酶l1(uch-l1)和胶质纤维酸性蛋白(gfap)的抗体及相关方法 |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5754157A (en) * | 1980-09-19 | 1982-03-31 | Nippon Kayaku Co Ltd | L-argininal derivative and its preparation |
US4518528A (en) * | 1983-05-19 | 1985-05-21 | Rasnick David W | α Amino fluoro ketones |
US4537773A (en) * | 1983-12-05 | 1985-08-27 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | α-Aminoboronic acid derivatives |
US4499082A (en) * | 1983-12-05 | 1985-02-12 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | α-Aminoboronic acid peptides |
US4636492A (en) * | 1984-08-29 | 1987-01-13 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Inhibition of viral protease activity by peptide halomethyl ketones |
US4652552A (en) * | 1984-09-10 | 1987-03-24 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Tetrapeptide methyl ketone inhibitors of viral proteases |
NZ222755A (en) * | 1986-12-23 | 1989-11-28 | Warner Lambert Co | Renin inhibiting acyl peptide derivatives containing two to four amino acid residues, and pharmaceutical compositions |
US5024994A (en) * | 1986-12-23 | 1991-06-18 | Warner-Lambert Company | Renin inhibitors IV |
US5169932A (en) * | 1989-10-30 | 1992-12-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Gnrh analogs |
US5296468A (en) * | 1989-10-30 | 1994-03-22 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH analogs |
EP0732399A3 (en) * | 1990-03-05 | 1997-03-12 | Cephalon Inc | Chymotrypsin-like proteases and their inhibitors |
JPH04202170A (ja) * | 1990-11-29 | 1992-07-22 | Taisho Pharmaceut Co Ltd | トリペプチド誘導体 |
US5340736A (en) * | 1991-05-13 | 1994-08-23 | The President & Fellows Of Harvard College | ATP-dependent protease and use of inhibitors for same in the treatment of cachexia and muscle wasting |
US5614649A (en) * | 1994-11-14 | 1997-03-25 | Cephalon, Inc. | Multicatalytic protease inhibitors |
US5550262A (en) * | 1994-11-14 | 1996-08-27 | Cephalon, Inc. | Multicatalytic protease inhibitors |
-
1995
- 1995-11-03 US US08/552,794 patent/US5614649A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-11-14 DE DE69530993T patent/DE69530993T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-11-14 NZ NZ296479A patent/NZ296479A/xx not_active IP Right Cessation
- 1995-11-14 CN CNB951962043A patent/CN1166403C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1995-11-14 ES ES95939165T patent/ES2200010T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-11-14 CA CA002202760A patent/CA2202760A1/en not_active Abandoned
- 1995-11-14 AT AT95939165T patent/ATE241998T1/de not_active IP Right Cessation
- 1995-11-14 EP EP95939165A patent/EP0789578B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-11-14 DK DK95939165T patent/DK0789578T3/da active
- 1995-11-14 MX MX9703564A patent/MX9703564A/es not_active IP Right Cessation
- 1995-11-14 JP JP8516336A patent/JP3056258B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1995-11-14 WO PCT/US1995/014921 patent/WO1996014857A1/en active IP Right Grant
- 1995-11-14 PT PT95939165T patent/PT789578E/pt unknown
- 1995-11-14 BR BR9509665A patent/BR9509665A/pt not_active IP Right Cessation
- 1995-11-14 KR KR1019970703228A patent/KR100420774B1/ko not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-12-04 US US08/760,638 patent/US5830870A/en not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-03-13 US US08/816,510 patent/US5990083A/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-05-07 NO NO19972104A patent/NO324066B1/no not_active IP Right Cessation
- 1997-05-13 FI FI972029A patent/FI118325B/fi not_active IP Right Cessation
-
1998
- 1998-05-05 HK HK98103858A patent/HK1004638A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-01-11 JP JP2000002705A patent/JP2000290197A/ja active Pending
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1839139B (zh) * | 2003-08-14 | 2012-05-02 | 赛福伦公司 | 蛋白酶体抑制剂及其使用方法 |
CN102603781A (zh) * | 2003-08-14 | 2012-07-25 | 赛福伦公司 | 蛋白酶体抑制剂及其使用方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ES2200010T3 (es) | 2004-03-01 |
JP2000290197A (ja) | 2000-10-17 |
NO972104L (no) | 1997-06-13 |
EP0789578B1 (en) | 2003-06-04 |
NO324066B1 (no) | 2007-08-06 |
DE69530993D1 (de) | 2003-07-10 |
FI118325B (fi) | 2007-10-15 |
DK0789578T3 (da) | 2003-09-22 |
EP0789578A1 (en) | 1997-08-20 |
NO972104D0 (no) | 1997-05-07 |
BR9509665A (pt) | 1997-10-28 |
WO1996014857A1 (en) | 1996-05-23 |
ATE241998T1 (de) | 2003-06-15 |
PT789578E (pt) | 2003-10-31 |
MX9703564A (es) | 1997-08-30 |
CA2202760A1 (en) | 1996-05-23 |
US5830870A (en) | 1998-11-03 |
US5614649A (en) | 1997-03-25 |
AU710437B2 (en) | 1999-09-23 |
NZ296479A (en) | 1999-06-29 |
AU4110496A (en) | 1996-06-06 |
JPH10507465A (ja) | 1998-07-21 |
FI972029A0 (fi) | 1997-05-13 |
US5990083A (en) | 1999-11-23 |
DE69530993T2 (de) | 2004-05-19 |
JP3056258B2 (ja) | 2000-06-26 |
KR100420774B1 (ko) | 2004-07-05 |
FI972029A (fi) | 1997-05-13 |
HK1004638A1 (en) | 1998-11-13 |
EP0789578A4 (en) | 2000-09-20 |
CN1166403C (zh) | 2004-09-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN1164192A (zh) | 多相催化蛋白酶的抑制剂 | |
CN1159289C (zh) | 作为ICE/ced-3族半胱氨酸蛋白酶抑制剂的C端修饰的草氨酰二肽 | |
CN1152048C (zh) | 弹性蛋白酶的全氟烷基酮抑制剂及其制备方法 | |
CN1058013C (zh) | 新的巯基乙酰基酰胺衍生物的制备方法 | |
CN1225471C (zh) | 具有生长激素释放特性的化合物 | |
CN1177861C (zh) | 可有效对抗c型肝炎病毒的巨环肽 | |
CN1207056C (zh) | 含肽的α-酮酰胺半胱氨酸和丝氨酸蛋白酶抑制剂 | |
CN1044249C (zh) | 基质金属蛋白酶抑制剂 | |
CN1041950A (zh) | 新型肽酶抑制剂 | |
CN1107839A (zh) | 甲酰胺类化合物 | |
CN1268116A (zh) | 3-脒基苯胺衍生物,活化血凝固因子x抑制剂和制备这些物质的中间体 | |
CN1076199A (zh) | 新的肽衍生物 | |
CN1147205A (zh) | 抗血栓形成剂 | |
CN1298299A (zh) | 抗菌剂 | |
CN1121068A (zh) | 脯氨酰胺衍生物 | |
CN1050198A (zh) | 新的肽酶和异构酶抑制剂 | |
CN1175953A (zh) | 作为凝血酶抑制剂的新的二肽脒类 | |
CN1345332A (zh) | 用作ice/ced-3族半胱氨酸蛋白酶抑制剂的c-端修饰的(n-取代)-2-吲哚基二肽 | |
CN1066150C (zh) | 作为基质金属蛋白酶抑制剂的桥式吲哚 | |
CN1351609A (zh) | 低分子量补体蛋白酶抑制剂 | |
CN1040211C (zh) | 基质金属蛋白酶抑制剂 | |
CN1058019C (zh) | 环状氨基酸衍生物 | |
CN1319987C (zh) | γ-分泌酶抑制剂 | |
CN1209368C (zh) | 新的乙酰胺衍生物及其用途 | |
CN1187360C (zh) | 有羧基肽酶b抑制活性的膦酸衍生物 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: GR Ref document number: 1004638 Country of ref document: HK |
|
C17 | Cessation of patent right | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20040915 Termination date: 20101114 |