具体实施方式
实施例:
式I化合物的制备方法和含有它们的制剂在下列实施例中将得到进一步的说明,但这些实施例不构成限制。
化合物的结构由元素分析(MA)、核磁共振(NMR)或质谱(MS)确证。NMR位移(δ)用百万分数表示(ppm),而且仅给出了所选择峰的位移。mp为熔点,以℃表示。柱层析用W.C.Still等《有机化学杂志》1978,43,2923-2925中描述的方法在Merck硅胶60(Art9385)上进行。用作起始物的化合物要么是已知化合物,要么易于由本身已知的方法制备。
缩写:
TLC:薄层层析
DMSO:二甲基亚砜
min:分钟
h:小时
ESMS:电子喷射质谱
PDMS:离子对吸收质谱
HPLC分析:
方法a.
用Lichrosorp RP-18 5μm柱以1ml/分钟的速度洗脱,在254nm处紫外检测进行RP-HPLC分析。使用了两种溶剂系统:
溶剂系统I:乙腈中0.1%三氟乙酸
溶剂系统II:水中0.1%三氟乙酸
用由20%溶剂系统I和80%溶剂系统II组成的混合物平衡柱子。注射样品后,溶剂系统I在溶剂系统II中从20%到80%的梯度进行30分钟。然后在5分钟内梯度扩张到100%的溶剂系统I,接下来用100%该系统等梯度洗脱6分钟。
方法b.
在214、254、276和301nm处紫外检测,在218 TP54 4.6mm×250mm5μC-18硅胶柱(分离组,Hesperia)上42℃下以1ml/分速度洗脱来进行RP分析。用4M硫酸调至pH2.5的0.1M硫酸铵缓冲液中的5%乙腈平衡柱子。注射样品后用50分钟内相同缓冲液中5%-60%乙腈的梯度洗脱。
实施例1
(3R)-哌啶-3-羧酸[(1R)-1-((1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基]酰胺:
按照方法E制备
(R)-[1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基]氨基甲酸叔丁基酯:
将1,3-二环己基碳化二亚胺(10.1g,49mmol)溶解在二氯甲烷(100ml)中,加入到0-5℃(R)-叔丁氧羰基-苯丙氨酸(10.0g,37.7mmol)的二氯甲烷(250ml)溶液中。加热反应混合物至20℃,在此温度下搅拌1小时。将乙酰胺肟(3.63g,49mmol)悬浮在吡啶(200ml)和N,N-二甲基甲酰胺(40ml)中,加入到反应混合物中。蒸去二氯甲烷,在回流温度下加热反应混合物18小时。冷却至0℃,过滤。滤液用乙酸乙酯(100ml)稀释,用柠檬酸水溶液(10%,3×50ml)和水(3×50ml)洗涤。用硫酸镁干燥后真空浓缩溶液,从乙酸乙酯和庚烷中结晶,得到5.48g(R)-(1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基]氨基甲酸叔丁基酯。
mp 94-98℃
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30(s,9H);2.32(s,3H);4.90-5.10(m,1H);7.15-7.30(m,5H).
HPLC:Rt=26.7min(方法a)
(R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基胺盐酸盐:
将(R)-[1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.4g,7.9mmol)溶解在氯化氢的饱合乙酸乙酯溶液(40ml)中。20℃下5小时后,真空浓缩反应混合物。残余物在乙酸乙酯中结晶,得2.05g(R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙胺盐酸盐。
m.p.144-148℃.
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.35(s,3H);3.21(dd,1H);3.49(dd,1H);5.05(dd,1H);7.13-7.35(m,5H).
HPLC:Rt=9.2min(方法a)
{(1R)-1[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯:
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(6.3g,32.9mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(5.0g,32.9mmol)加入到(R)N-叔丁氧羰基-3-(2-萘基)-丙氨酸(10.4g,32.9mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(140ml)溶液中。 20℃下1小时后加入N,N-二甲基甲酰胺(100ml)中的1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙胺盐酸盐(5.6g,23.5mmol)和三乙胺(2.37g,23.5mmol)的混合物。20℃下18小时后将反应混合物倾入水中,用乙酸乙酯萃取数次(总体积1.4L)。合并有机相,用柠檬酸(10%,200ml)、饱合碳酸氢钠溶液(200ml)和水(3×200ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,从乙酸乙酯和庚烷中结晶,得9.45g{(1R)-1-(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酸叔丁酯。
m.p.148-150℃.
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.25(s,9H);2.29(s,3H);4.25-4.35(m,1H);5.25-5.35(s,1H);7.15-7.85(m,12H).
HPLC:Rt=29.6min(方法a)
计算值:C29H32N4O4:
C,69.58;H,6.44;N,11.19%;实测值:
C,69,40;H,6.65;N,10.93%.
(2R)-2-氨基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺盐酸盐:
将{(1R)-1-{(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酸叔丁酯(4.5g,8.99mmol)悬浮在乙酸乙酯(50ml)中,加入氯化氢在乙酸乙酯(45ml)中的饱合混合物。20℃下3小时后,过滤混合物,得到3.17g(2R)-2-氨基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺盐酸盐
mp 197-199℃.
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.28(s,3H);3.15-3.35(m,4H);4.15(t,1H);5.35(q,1H);7.20-7.90(m,12H).
HPLC:Rt=18.5min(方法a)
计算值:C24H24N4O2,HCl:
C,65.97;H,5.77;N,12.82%;实测值:
C,66,20;H,5.90;N,12.57%.
(3R)-3-{(1R)-1-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯:
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.42g,2.18mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.33g,2.18mmol)加入到(R)-N-叔丁氧羰基-3-哌啶羧酸(0.50g,2.18mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(7ml)溶液中。 20℃下30分钟后加入(2R)-2-氨基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺盐酸盐(0.68g,1.56mmol)和三乙胺(0.16g,1.56mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(8ml)中的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入冰水(90ml)中,用乙酸乙酯(共90ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,15ml)、碳酸氢钠饱和溶液(3×15ml)和水(3×15ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(90g)上快速层析纯化,乙酸乙酯和庚烷(3∶2)洗脱,得到0.83g(3R)-3-{(1R)-1-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(s,9H);2.30(s,3H);4.60-4.70(m,1H);5.25-5.35(m,1H);7.15-7.85(m,12H).
HPLC:Rt=31.6min(方法a)
将3-{(1R)-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.80g,1.31mmol)溶解在乙酸乙酯(20ml)中,加入氯化氢的饱和乙酸乙酯(20ml)溶液。20℃下2小时后,真空浓缩反应混合物,在甲醇和乙酸乙酯的混合物中结晶,得到0.66g标题化合物。
m.p.198-200℃
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.10-1.80(m,4H);2.30(s,3H);4.60-4.70(m,1H);5.25-5.35(m,1H);7.20-7.90(m,12H).
HPLC:Rt=20.9min(方法a)
计算值:C30H33N5O5,HCl:
C,65.74;H,6.25;N,12.78%;实测值:
C,65,57;H,6.35;N,12.46%.
实施例2
4-氨基-4-甲基-戊-2-烯酸[(1R)-1-{(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]酰胺
按方法E制备
N-2-羟基-1,1-二甲基乙基氨基甲酸叔丁酯:
将2-氨基-2-甲基-丙-1-醇(10.0g,112mmol)溶解在四氢呋喃(100ml)中,加入1N氢氧化钠水溶液(112ml,112mmol)。15分钟内加入二碳酸二叔丁酯(29.3g,134mmol)的四氢呋喃(100ml)溶液。20℃下搅拌16小时,加入水(100ml),分离各相。水相用乙酸乙酯(3×150ml)萃取,合并有机相,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,粗产物在硅胶(180g)上用乙酸乙酯/庚烷1∶1洗脱,层析得到19.6gN-2-羟基-1,1-二甲基乙基氨基甲酸叔丁酯。
mp 53℃
1H-NMR (CDCl3):δ1.22(s,6H);1.45(s,9H);3.58(d,2H);4.05(br,1H);4.65(br,1H).
2-叔丁氧羰基氨基-2-甲基丙醛:
将DMSO(12.4ml,174.4mmol)溶解在二氯甲烷(240ml)中,并将溶液冷却至-78℃,滴加入草酰氯(76ml,87mmol)。-78℃下搅拌15分钟。滴加N-2-羟基-1,1-二甲基乙基氨基甲酸叔丁酯的二氯甲烷(30ml)溶液,-78℃下搅拌30分钟。慢慢加入三乙胺(55.23ml,396.3mmol)。-78℃下5分钟后将溶液温热至20℃,用二氯甲烷(300ml)稀释,用1N盐酸(3×200ml)洗涤。水相合并后用二氯甲烷(2×200ml)萃取。合并有机相,用饱和碳酸氢钠溶液(2×200ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,粗产品在硅胶(180g)上用乙酸乙酯/庚烷1∶4洗脱,层析得到13.4g 2-叔丁氧羰基氨基-2-甲基丙醛。
mp 84-85℃
1H-NMR(CDCl3)δ1.35(s,6H);1.45(s,9H);5.00(br,1H);9.45(s,1H).
(2E)-4-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊-2-烯酸乙酯:
将二氧磷基乙酸三乙酯(9.6ml,48mmol)慢慢加入到叔丁醇钾(5.39g,48mmol)的四氢呋喃(100ml)悬液中。20℃下30分钟后加入2-叔丁氧羰基氨基-2-甲基丙醛(5.0g,26mmol)。 20℃下2.5小时后,慢慢加入1N盐酸(80ml)。用乙酸乙酯(120ml,2×50ml)萃取该混合物,合并的有机相用饱和碳酸氢钠(100ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空蒸去溶剂,粗产品在硅胶(100g)上用乙酸乙酯/庚烷(1∶4)洗脱,层析得到5.7g(2E)-4-叔丁氧羰基氨基-4-甲基-戊-2-烯酸乙酯。
mp 40-41℃(庚烷)
1H-NMR (CDCl3):δ1.29(t,3H);1.41(s,6H);1.43(s,9H);4.19(q,2H);4.65(br,1H);5.84(d,J=15.9Hz,1H);6.99(d,J=16.0Hz,1H).
(2E)-4-叔丁氧羰基氨基-4-甲基-戊-2-烯酸:
将(2E)-4-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊-2-烯酸乙酯(5.0g,19.4mmol)溶解在二噁烷(50ml)中,加入氢氧化锂(0.61g,25.3mmol)水(25ml)溶液。20℃下搅拌16小时,加入乙酸乙酯(75ml)和水(20ml),分离各相。水相用乙酸乙酯(20ml)萃取,合并的有机相用1N氢氧化钠溶液(30ml)萃取。合并的水相用1N硫酸氢钠溶液酸化至pH=2。再用乙酸乙酯(2×50ml)萃取水相。合并的有机相用硫酸镁干燥,真空除去溶剂。粗产品(2E)-4-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊-2-烯酸用于进一步合成。
1H-NMR(CDCl3):δ1.39(s,6H);1.43(s,9H);4.79(br,1H);5.75(d,1H);7.12(d,1H);9.50-11.50(br,1H).
{1,1-二甲基-3-[(1R)-1((1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基]烯丙基}氨基甲酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.42g,2.18mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.33g,2.18mmol)加入到4-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊-2-烯酸(0.50g,2.18mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(7ml)溶液中。 20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(8ml)中的(2R)-2-氨基-N-[(1 R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺盐酸盐(0.68g,1.56mmol)和三乙胺(0.16g,1.56mmol)的混合物。 20℃下18小时后,将反应混合物倾入冰水(90ml)中,用乙酸乙酯(共90ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,15ml),饱合碳酸氢钠溶液(3×15ml)和水(3×15ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(95g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶1)洗脱进行快速层析。得到0.90g{1,1-二甲基-3-[(1R)-1-((1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基]烯丙基}氨基甲酸叔丁酯。
1H-NMR (DMSO-d6)δ1.22(s,3H);2.28(s,3H);4.70-4.80(m,1H);5.72-5.82(m,1H);5.89(d,1H);6.72(d,1H);7.15-7.85(m,12H).
HPLC:Rt=30.3min(方法a)
将{1,1-二甲基-3-[(1R)-1-((1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基]烯丙基}氨基甲酸叔丁酯(0.90g,1.47mmol)溶解在乙酸乙酯(10ml)中,加入氯化氢的饱和乙酸乙酯(20ml)溶液。20℃下3小时后,真空浓缩反应混合物,得到0.70g标题化合物。
mp 161-167℃
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.32(s,3H);1.34(s,3H);2.28(s,3H);4.75-4.83(m,1H);5.23-5.33(m,1H);6.12(d,1H);6.61(d,1H);7.15-7.88(m,12H).
HPLC:Rt=20.6min(方法a)
计算值:C30H33N5O5,HCl,0.75H2O:
C,64.16;H,6.45;N,12.47%;实测值:
C,64,42;H,6.43;N,12.03%.
实施例3
3-氨基甲基-N-[(1R)-1-{(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]苯甲酰胺:
按方法E制备:
(3-{(1R)-1-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基}苄基)氨基甲酸叔丁酯:
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.92g,4.82mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.74g,4.83mmol)加入到N-叔丁氧羰基-3-氨基苯甲酸(1.21g,4.82mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(15ml)中。20℃下1小时后,加入N,N-二甲基甲酰胺(15ml)中的(2R)-2-氨基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺盐酸盐(1.50g,3.43mmol)和三乙胺(0.35g,3.46mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入冰水(180ml)中,用二氧甲烷(共180ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,25ml)、饱和碳酸氢钠溶液(3×25ml)和水(3×25ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,从乙酸乙酯中分离,得到1.80g(3-{(1R)-1-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲基酰)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基}苄基)氨基甲酸叔丁酯。
mp=176-178℃
1H-NMR (DMSO-d6)δ1.39(s,9H);2.30(s,3H);4.70-4.80(m,1H);5.29-5.39(m,1H);7.15-7.85(m,17H).
HPLC:Rt=31.4min(方法a)
计算值:C37H39N5O5:
C,70.12;H,6.20;N,11.05%;实测值:
C,70.20;H,6.34;N,10.86%.
将(3-{(1R)-1-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基}苄基)氨基甲酸叔丁酯(5.51g,2.38mmol)悬浮在乙酸乙酯(20ml)中,加入氯化氢的饱和乙酸乙酯(30ml)溶液。20℃下4小时后,真空浓缩反应混合物,从乙酸乙酯中结晶得到1.26g标题化合物。
mp.240-241℃
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.31(s,3H);4.03(s,2H);4.75-4.85(m,1H);5.38-5.48(m,1H);7.15-7.90(m,16H).
HPLC:Rt=24.6min(方法a)
计算值:C32H32N5O3,HCl:
C,67.42;H,5.66;N,12.28%;实测值:
C,67.26;H,5.76;N,12.00%.
实施例4:
哌啶-4-羧酸N-[(1R)-1-{(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]酰胺:
按方法E制备:
4-{(1R)-1-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]恶二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲基酰]-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.92g,4.82mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.74g,4.83mmol)加入到4-叔丁氧羰基-4-哌啶羧酸(1.10g,4.80mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(15ml)中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(15ml)中的(2R)-2-氨基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]恶二唑-5-基)-2-苯乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺盐酸盐(1.50g,3.43mmol)和三乙胺(0.35g,3.46mmol)的混合物。 20℃下18小时后,将反应混合物倾入冰水(180ml)中,用乙酸乙酯(共180ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,25ml)、饱和碳酸氢钠溶液(3×25ml)和水(3×25ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,从乙酸乙酯中结晶,得到1.84g 4-{(1R)-1-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]恶二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲基酰)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯。
mp 152-155℃
1H-NMR (DMSO-d6)δ1.35(s,9H);2.29(s,3H);4.60-4.70(m,1H);5.25-5.35(m,1H);7.15-7.85(m,12H).
HPLC:Rt=31.3min(方法a)
计算值:C35H41N5O5:
C,68.72;H,6.76;N,11.45%;实测值:
C,68.65;H,6.95;N,11.34%.
将4-{(1R)-1-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基氨基甲基酰基]-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.57g,2.57mmol)溶解在乙酸乙酯(20ml)中,加入氯化氢的饱和乙酸乙酯(30ml)溶液。20℃下4小时后,过滤反应混合物,得到1.34标题化合物。
mp 238-241℃
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.30(s,3H);4.60-4.70(m,1H);5.25-5.35(m,1H);7.20-7.85(m,12H).
HPLC:Rt=23.7min(方法a)
计算值:C30H33N5O5,HCl:
C,64.74;H,6.25;N,12.78%;实测值:
C,65,91;H,6.39;N,12.42%.
实施例5:
5-{(1R)-1-[(2R)-2-(3-氨基甲基苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酰氨基]-2-苯乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯,三氟乙酸盐。
按方法E制备。
(R)-5-(1-叔丁氧羰基氨基-2-苯乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯
将1,3-二环己基碳化二亚胺(2.1g,10mmol)溶解在二氯甲烷(25ml)中,0-5℃下加入到(R)N-叔丁氧羰基苯丙氨酸(2.2g,10mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中。加热反应混合物至20℃,在此温度下搅拌30分钟。将2-氨基-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯(1.3g,10mmol)溶解在吡啶(50ml)中,并加入到反应混合物中。蒸去二氯甲烷,在回流温度下加热反应混合物18小时。将反应混合物冷却至0℃,过滤。滤液用乙酸乙酯(2.5ml)稀释,并用柠檬酸水溶液(10%,3×15ml)和水(3×15ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(90g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶1)洗脱,快速层析得到1.68g(R)-5-(1-叔丁氧羰基氨基-2-苯乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯。
mp 72-76℃
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30(s,9H);1.32(t,3H);3.10-3.30(m,2H);4.41(q,2H);5.10(q,1H);7.20-7.50(m,5H).
(R)5-(1-氨基-2-苯乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐:
将(R)-5-(1-叔丁氧羰基氨基-2-苯乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯(1.5g,4.2mmol)溶解在氯化氢的乙酸乙酯(40ml)饱和溶液中。20℃下5小时后,真空浓缩反应混合物,得到1.2g(R)-5-(1-氨基-2-苯乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.32(t,3H);4.41(q,2H),5.20(dd,1H);7.10-7.30(m,5H).
5-[(1R)-1-{(2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰氨基}-2-苯乙基][1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.77g,4.03mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.62g,32.9mmol)加入到(R)-N-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙氨酸(1.27g,4.03mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(20ml)中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(8ml)中的(R)-5-(1-氨基-2-苯乙基)-[1,2,4]恶二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐(1.20g,4.03mmol)溶液。50℃下3小时后,将反应混合物倾入水(400ml)中,用二氯甲烷(共350ml)萃取几次。合并有机相,用饱和碳酸氢钠溶液(2×50ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(40g)上用乙酸乙酯和庚烷(3∶7)洗脱进行快速层析,得到0.41g 5-[(1R)-1-{(2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰氨基}-2-苯乙基]-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.23(s,9H);1.32(t,3H);4.25-4.35(m,1H),4.38-4.45(q,2H);5.38-5.48(m,1H);7.20-7.85(m,12H).
5-[(1R)-1-{(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰基}氨基-2-苯乙基]-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐:
将5-[(1R)-1-{(2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰氨基}-2-苯乙基-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯(0.41g,0.7mmol)悬浮在氢化氢的乙酸乙酯(10ml)饱和混合物中。20℃下18小时后,过滤反应混合物,得到0.39g 5-[(1R)-1-{(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰氨基}-2-苯乙基]-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.32(t,3H);4.10-4.20(m,1H);4.40-4.45(m,2H);5.40-5.50(m,1H).
5-[(1R)-1-{(2R)-2-((3-叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酰氨基}-2-苯乙基]-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯:
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.23g,1.20mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.18g,1.2mmol)加入到3-(叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酸(0.30g,1.2mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(8ml)中。20℃下1小时后,加入N,N-二甲基甲酰胺(2ml)中的5-[(1R)-{(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰氨基}-2-苯乙基]-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐(0.39g,0.79mmol)和三乙胺(0.08g,0.79mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(70ml)中,用乙酸乙酯(共80ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,15ml)、饱和碳酸氢钠溶液(10ml)和水(3×10ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,从乙酸乙酯和庚烷中结晶,得到0.44g 5-[(1R)-{(2R)-2-(3-叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酰氨基}-2-苯乙基]-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯。
mp=170-176℃
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30-1.40(m,12H);4.42(q,2H),4.80-4.90(m,1H);5.40-5.50(m,1H).
将5-[(1R)-1-{(2R)-2-((3-叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酰氨基}-2-苯乙基]-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯(0.40g,0.58mmol)悬浮在氯化氢的饱和乙酸乙酯(10ml)溶液中。20℃下5小时后,真空浓缩反应混合物,在硅胶(40g)上用二氯甲烷和10%氨/乙醇(9∶1)的混合物洗涤,层析得到0.14g标题化合物。该化合物再经半制备性HPLC纯化三次,柱子为25mm×250mm柱,内装7μC-18硅胶,柱子用0.5M硫酸铵溶液(用4M硫酸调节至pH2.5)中的30%乙腈预平衡,用0.5M硫酸铵(pH2.5)中24%-50%乙腈梯度40℃下以10ml/min的流速洗脱47分钟,收集主峰流份,用三倍体积的水稀释,上样于Sep-Pak C-18柱上(Waters part#WAT036915)。用0.1%TFA预平衡后,用70%TFA从Sep-Pak柱上洗脱,从洗脱液中冷冰干燥分离到化合物。
1H-NMR (DMSO-d6)δ1.35(t,3H);4.40(q,2H);4.85-4.95(m,1H);5.35-5.45(m,1H);7.10-7.85(m,16H).
HPLC:Rt=28.4min(方法:0-90%0.1%TFA/乙腈,50分钟)
计算值:C34H33N5O5,TFA,1.5H2O:
C,59.01;H,5.09;N,9.56%;实测值:
C,68,89;H,5.10;N,9.74%.
实施例6:
5-{1-[2-(3-氨基甲基苯甲酰基氨基)-3-(2-萘基)丙酰基-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯:
按方法E制备。
(R)-3-(2-萘基)丙氨酸甲酯
将亚硫酰氯(5ml)在35℃下15分钟内滴加到(R)-3-(2-萘基)丙氨酸(5.0g)的甲醇(50ml)悬液中。加入后,60℃下加热反应混合物1小时,冷却并真空除去溶剂。加入水(75ml)和乙酸乙酯(125ml),用碳酸钠调节pH至8.5。分离有机相,用硫酸镁干燥后得到4.86g(R)-3-(2-萘基)丙氨酸甲酯。
1H-NMR (CDCl3)d1.50(s(br),2H);3.03(dd,1H);3.27(dd,1H);3.71(s,3H);3.84(dd,1H);7.30-7.82(m,7H).
(R)-2-(3-(叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酸甲酯:
将3-(叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酸(5.32g,21.2mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(20ml)中。加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(4.06g,21.2mmol),搅拌反应混合物20分钟。加入(R)-3-(2-萘基)丙氨酸甲酯(4.85g,21.2mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20ml)溶液和三乙胺(4.4ml),继续搅拌18小时。用乙酸乙酯(400mmol)稀释混合物,有机相用水(200ml)、10%硫酸氢钠水溶液(50ml)、5%碳酸氢钠水溶液(100ml)和水(100ml)洗涤。分离各相,干燥(硫酸镁)有机相,真空除去溶剂,得到8.9g(R)-2-(3-(叔丁氧羰基氨基甲基)-3-(2-萘基)丙酸甲酯。
1H-NMR(CDCl3)δ1.44(s,9H);3.40(t,2H);3.76(s,3H)4.28(d,2H);5.00(s(br),1H);5.18(q,1H);6.75(d,1H);7.20-7.80(m,11H)
(R)-2-(3-(叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酸:
将(R)-2-(3-叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酸甲酯(8.8g,19.1mmol)溶解在甲醇(100ml)中,加入氢氧化锂(0.55g,22.2mmol)。2小时后,加入二氯甲烷(200ml)、水(200ml)和3M硫酸氢钠(50ml)。分离有机相,用水(100ml)洗涤。干燥(硫酸镁)有机相,真空除去溶剂,得到7.9g(R)-2-(3-(叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酸。
1H-NMR(DMSO)δ1.38,1.39(两个s,9H);3.30(m,2H);4.12(d,2H);4.71(m,1H);6.10(s(br),1H);7.30-7.90(m,11H);8.75(d,1H);12.80(s(br),1H).
(R)-5-(1-(N-甲基-叔丁氧羰基氨基)-2-(2-萘基)乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯:
将1,3-二环己基碳化二亚胺(1.88g,9.1mmol)溶解在二氯甲烷(25ml)中,0-5℃下加入到(R)-N-叔丁氧羰基-(2-萘基)丙氨酸(3.0g,9.1mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中。加热反应混合物至20℃,在此温度下搅拌30分钟。将2-氨基-2-羟基亚氨基)乙酸乙酯(1.2g,9.1mmol)溶解在吡啶(50ml)中,并加入到反应混合物中。蒸发二氯甲烷后,反应混合物在回流温度下加热18小时。冷却至0℃,过滤。真空浓缩滤液,重溶于乙酸乙酯(25ml)中,用柠檬酸水溶液(10%,3×15ml)和水(3×15ml)洗涤。干燥(硫酸镁)后,真空浓缩溶液,在硅胶(90g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶4)进行快速层析纯化,得到1.59g (R)-5-(1-(N-甲基叔丁氧羰基氨基)-2-(2-萘基)乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30-1.40(m,3H);4.40-4.50(m,2H);5.70-5.90(m,1H);7.45-7.90(m,7H).
(R)-5-(1-甲基氨基-2-(2-萘基)乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐:
将(R)5-(1-(N-甲基叔丁氧羰基氨基)-2-(2-萘基))乙基-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯(0.77g,1.8mmol)溶解在氯化氢的饱和乙酸乙酯(15ml)溶液中。20℃下5小时后,真空浓缩反应混合物,得到0.72g(R)5-(1-甲基氨基-2-(2-萘基)乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.32(t,3H);2.71(s,3H);4.40(q,2H);5.45(q,1H);7.30-7.90(m,7H).
HPLC:Rt=19.7min(方法a)
5-{1-[2-(3-叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酰基-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯:
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.51g,2.6mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.36g,2.6mmol)加入到2-(3-叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酸(1.18g,2.6mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(15ml)溶液中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(10ml)中的(R)-5-(1-甲基氨基-2-(2-萘基)乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐(0.69g,1.9mmol)和三乙胺(0.19g,1.9mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(175ml)中,用乙酸乙酯(共175ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,20ml)、饱和碳酸氢钠溶液(25ml)和水(3×25ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(80g)上用乙酸乙酯和庚烷(2∶3)洗脱进行快速层析,得到0.8g 5-{1-[2-(3-叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酰-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯两个非对映异构体的1∶1混合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30-1.42(m,12H),4.40-4.48(m,2H);4.90-5.20(m,1H);6.00-6.10(m,1H).
HPLC:非对映异构体I;Rt=25.6min(方法a)
非对映异构体II;Rt=30.81min(方法a)
将5-{1-[2-(3-(叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酰氨基)-3-(2-萘基)丙酰-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯(0.34g,0.5mmol)悬浮在三氟乙酸和二氯甲烷(1∶1,20ml)的混合物中。20℃下10分钟后,真空浓缩反应混合物,在硅胶(40g)上用二氯甲烷和氨/甲醇10%混合物(85∶15)洗脱进行快速层析纯化,得到0.14g标题化合物两个非对映异构体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.35-1.50(m,3H);4.40-4.50(m,2H);5.00-5.20(m,1H);5.98-6.13(m,1H).
HPLC: 非对映异构体I;Rt=26.9min(方法a)
非对映异构体II;Rt=37.7min(方法a)
计算值:C39H37N5O5:
C,71.43;H,5.69;N,10.68%;实测值:
C,71.05;H,5.54;N,10.41%.
实施例7
5-{(1R)-1-[(2R)-2-(哌啶-4-羰基氨基)-3-(2-萘基)丙酰-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯:
按照方法E制备。
5-{(1R)-1-[(2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯:
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.54g,2.8mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.38g,2.8mmol)加入到(R)-N-叔丁氧羰基-3-(2-萘基)丙氨酸(0.88g,2.8mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(15ml)溶液中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(15ml)中的(R)-5-(1-甲基氨基-2-(2-萘基)乙基)[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐(0.7g,2.0mmol)溶液。 50℃下3小时后,将反应混合物倾入水(180ml)中,用乙酸乙酯(共200ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,25ml)、饱和碳酸氢钠溶液(30ml)和水(3×30ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,得到1.3g 5-{(1R)-1-[(2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.00-1.40(m,12H);4.45(q,2H);5.90-6.20(m,1H).
5-{(1R)-1-[(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰基-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯:
将5-{(1R)-1-[(2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯(1.3g,2.0mmol)悬浮在三氟乙酸和二氯甲烷的饱和混合物(1∶1,50ml)中。20℃下10分钟后,真空浓缩反应混合物,在硅胶(100g)上用二氯甲烷和10%氨/乙醇混合物(95∶5)洗脱进行快速层析纯化,得到0.9g 5-{(1R)-1-[(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.35(i,3H);4.45(q,2H);5.88-6.20(m,1H).4-((1R)-1-{[(1R)-1-(3-乙氧羰基-[1,2,4]恶二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)-乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯:
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.40g,2.1mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物((0.32g,2.1mmol)加入到N-叔丁氧羰基-4-哌啶羧酸(0.48g,2.1mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10ml)溶液中。20℃下1小时后,加入N,N-二甲基甲酰胺(2ml)中的5-{(1R)-1-[(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰)-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]恶二唑-3-羧酸乙酯(0.73g,1.4mmol)的溶液。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(120ml)中,用乙酸乙酯(共140ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,15ml)、饱和碳酸氢钠溶液(15ml)和水(3×20ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(40g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶1)洗脱进行快速层析,得到0.90g 4-((1R)-1-{[(1R)-1-(3-乙氧羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲基酰)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30-1.45(m,9H);6.00-6.15(m,1H).
HPLC:Rt=33.9min(方法a)
将4-((1R)-1{[(1R)-1-(3-乙氧羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.21g,0.29mmol)溶解在三氟乙酸和二氯甲烷的混合物(1∶1,12ml)中。20℃下10分钟后,真空浓缩反应混合物。在硅胶(40g)上用二氯甲烷和10%氨/乙醇混合物(4∶1)洗脱进行快速层析纯化,得到0.12g标题化合物。
1H-NMR (DMSO-d6)δ1.30-1.40(m,3H);2.80-2.90(2s,3H),4.40-4.50(m,2H);5.98-6.20(m,1H).
HPLC:Rt=25.0min(方法a)
计算值:C37H39N5O5,H2O:
C,68.19;H,6.34;N,10.75%;实测值:
C,68,23;H,6.25;N,10.60%.
实施例8
哌啶-4-羧酸(1-{[1-(3-氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基乙基)酰胺:
按方法E制备。
4-(1-{[1-(3-氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将4-((1R)-1-{[(1R)-1-(3-乙氧羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.67g,0.91mmol)悬浮在1atm下回流的液氨中。18小时后真空浓缩反应混合物,得到0.58g 4-(1-{[1-(3-氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯两个非对映异构体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30-1.40(m,9H);4.80-4.95(m,1H);6.00-6.13(m,1H).
HPLC:非对映异构体I:Rt=28.9min(方法a)
非对映异构体II:Rt=29.4min(方法a)
将4-(1-{1-(3-氨基甲酰基[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基)甲基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.58g,0.29mmol)的非对映体混合物溶解在三氟乙酸和二氯甲烷的混合物(1∶1,12ml)中。 20℃下5分钟后真空浓缩反应混合物。在硅胶(80g)上用二氯甲烷和10%氨/乙醇的混合物(7∶3)洗脱进行快速层析纯化,得到0.44g标题化合物的两个非对映异构体。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.88-2.92(2s,3H);4.79-5.00(m,1H);6.00-6.13(m,1H).
HPLC:非对映异构体I:Rt=21.2min(方法a)
非对映异构体II:Rt=22.1min(方法a)
实施例9:
3-氨基甲基-N-((1R,2E)-4-(羟甲基)-1-((2-萘基)甲基-5-苯基戊-2-烯基)苯甲酰胺:
按方法A制备。
((1R,2E)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-1-(2-萘基)甲基-5-苯基戊-2-烯基)氨基甲酸叔丁酯
将二异丁基氢化铝(17.9ml 25%甲苯溶液;26.6mmol)置于氮气下用冰浴冷却,再用无水甲醇(1.1ml,26.6mmol)慢慢处理制得二异丙基铝甲醇盐溶液。((1R)-1-苯磺酰基甲基-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.14g;5.0mmol)(用Spaltenstein等《有机化学杂志》,52,3759-66,1987的方法制备)在无水四氢呋喃(250ml)中回流。冷却反应混合物至-70℃,在10分钟内加入正丁基锂(3.92ml;己烷中2.5M,9.8mmol),搅拌溶液30分钟。将外消旋2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-3-苯基丙醛(2.1g;7.6mmol)(按Jenmalm等《有机化学杂志》,59,1139-48,1994的方法制备)在无水四氢呋喃(10ml)中的溶液在氮气下冷却至-70℃,用前述制备的二异丙基铝甲醇盐溶液(5.4ml,7.6mmol)处理。加完后立即向此砜-阴离子溶液中通过套管加入铝复合物。维持冷却30分钟,加入氯化铵水溶液(40ml,10%)、水(200ml)和二氯甲烷(200ml)。分离各相,干燥(硫酸镁)有机相,真空除去溶剂,得到5.50g油。将该油悬浮在甲醇(150ml)中沉淀出固体,过滤并弃去沉淀。向甲醇溶液中加入磷酸氢二钠(1.7g),冷却至5℃用钠汞齐(150g,2%)处理。20℃下4小时后真空除去溶剂,残余物在硅胶(80g)上用乙醚/庚烷(1∶6)洗脱进行层析,得到0.85g((1R,2E)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-1-(2-萘基)甲基-5-苯基戊-2-烯基)氨基甲酸叔丁酯异构体混合物,不经进一步纯化用于下步。
1H-NMR(CDCl3)δ-0.02-0.08(四个s,6H);0.85-0.90(四个s,9H);1.40-1.45(四个s,9H);2.40-3.60(m,7H);4.45(s(br),2H);5.20-5.46(m,2H);7.02-7.82(m,12H).
Rf:0.2乙醚/庚烷(1∶6)
((1R,2E)-4-羟基甲基-1-(2-萘基)甲基-5-苯基戊-2-烯基)氨基甲酸叔丁酯
将((1R,2E)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-1-(2-萘基)甲基-5-苯基戊-2-烯基)氨基甲酸叔丁酯(0.75g,1.38mmol)溶解在2%氟化氢/乙腈(50ml)中,室温下搅拌3小时。真空除去溶剂,残余物在硅胶(80g)上用二氯甲烷/庚烷/甲醇(4/10/1)洗脱进行层析。分离到含有Rf0.1-0.2的化合物的三种流份。真空浓缩主要流份(第二个被洗脱),得到0.35g((1R,2E)-4-羟基甲基-1-(2-萘基)甲基-5-苯基戊-2-烯基)氨基甲酸叔丁酯非对映异构体混合物。
1H-NMR(CDCl3).d1.38,1.40(两个s,9H);2.46-3.55(m,7H);4.35(m,1H);4.55(s(br),1H);5.28-5.43(m,2H);7.01-7.82(m,12H).(3E,5R)-5-氨基-2-苄基-6-(2-萘基)己-3-烯-1-醇
将((1R,2E)-4-羟基甲基-1-(2-萘基)甲基-5-苯基戊-2-烯基)氨基甲酸叔丁酯(350mg,0.81mmol)溶解在二氯甲烷中,加入三氟乙酸(5ml)。 90分钟后真空除去溶剂,残余物溶解在二氯甲烷(5ml)中再蒸发。最后将混合物在用4M HCl(2ml)酸化的水中冷冻干燥,得到0.3g(3E,5R)-5-氨基-2-苄基-6-(2-萘基)己-3-烯-1-醇盐酸盐,不经进一步纯化用于下步反应。
1H-NMR (CDCl3)d1.8(s(br),2H);2.45-3.70(m,7H);4.35(m,1H);5.32-5.60(m,2H);7.03-7.72(m,12H).
将3-(叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酸(407mg)溶解在二氯甲烷(6ml),然后与N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(155mg)搅拌10分钟转变为对称酸酐。向此混合物中加入(3E,5R)-5-氨基-2-苄基-6-(2-萘基)己-3-烯-1-醇盐酸盐(149mg)和N,N-二异丙基乙基胺(70μl)的二氯甲烷(3ml)溶液,然后在20℃下反应20小时。将反应混合物浓缩成油,重溶于乙酸乙酯(50ml)中。用5%碳酸氢钠(100ml)和水(2×100ml)连续萃取该溶液。合并有机层,用硫酸钠干燥,真空浓缩成油。将该油溶解在二氯甲烷/三氟乙酸1∶1(6ml)中,搅拌10分钟。用氮气流浓缩该混合物,形成的油重溶于乙酸(1ml),然后加入水(40ml)和乙腈(12ml)。在填有7μC-18硅胶的25mm×250mm柱上分五次以半制备HPLC纯化标题化合物粗品溶液。该柱用0.05M硫酸铵(用4M硫酸调至pH2.5)中30%乙腈预平衡。40℃下以10ml/min的流速用0.05M硫酸铵(pH2.5,用4M硫酸调)中的30%-45%乙腈梯度洗脱47分钟,收集相应于两主组分的流份,用3倍体积的水稀释,上样于两个串联Sep-PakC18柱(Waters part.#:51910)上,该柱用1%三氟乙酸预平衡。用70%乙腈/0.1%三氟乙酸从Sep-Pak柱上洗脱化合物,用水稀释后冷冻干燥从洗脱液中分离化合物。
用分析型RP-HPLC(保留时间)和离子对吸收质谱(分子量)鉴定所得最终产物。测得异构体I和异构体II的分子量分别为464.1和464.5,这在该方法的试验误差范围(±0.9amu)内与预期结构相符。
用214nm处紫外检测和Vydac 218Tp54 4.6mm×250mm5μC18硅胶柱(“分离组”,Hesperia)进行RP-HPLC,用两种不同的洗脱条件在42℃下以1ml/分洗脱:
A1:用0.1M硫酸铵缓冲液(用4M硫酸调至pH2.5)中5%乙腈预平衡,用相同缓中液中5%-60%乙腈梯度洗脱50分钟。
B1:用5%乙腈/0.1%三氟乙酸/水预平衡,用5%乙腈/0.1%三氟乙酸/水到60%的乙腈/0.1%三氟乙酸/水梯度洗涤50分钟。
洗涤条件A1和B1下的保留时间分别为:异构体I 32.97分和34.52分,异构体II33.67分和33.67分。
实施例10
(3R)哌啶-3-羧酸((1R,2E)-4-羟基甲基-1-(2-萘基)甲基-5-苯基戊-2-烯基)酰胺
按方法A制备。
用与实施例10中相似的方法步骤制备和鉴定(3R)哌啶-3-羧酸((1R,2E)-4-羟基甲基-1-(2-萘基)甲基-5-苯基戊-2-烯基)酰胺。测得异构体I和异构体II的分子量分别为442.6和442.5,这与所预期结构在实验误差范围内(±0.9amu)是一致的。
在洗脱条件A1和B1下的RP-HPLC保留时间分别为:异构体I30.02分和31.30分,异构体II30.56分和31.95分。
实施例11:
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸{(1R)-1-[N-甲基-N-((1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基}酰胺
按方法E制备。
3-羟基-1,1-二甲基丙基氨基甲酸叔丁酯:
0℃下将氯代甲酸乙酯(1.10ml,11.5mmol)滴加到3-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酸(2.50g,11.5mmol)和三乙胺(1.92ml,13.8mmol)在THF(10ml)中的溶液中。0℃下搅拌40分钟,滤去形成的沉淀,用THF(20ml)洗涤。将液体立即冷却至0℃,滴加2M硼氢化锂的THF溶液(14.4ml,28.8mmol)。0℃下搅拌2小时,然后在4小时内温热至室温。冷却至0℃,小心加入甲醇(5ml),加入1N盐酸(100ml)。用乙酸乙酯(2×100ml,3×50ml)萃取该溶液,合并有机层,用饱合碳酸氢钠溶液(100ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,粗产品在硅胶(110g)上用乙酸乙酯/庚烷(1∶2)洗脱,得到1.84g
3-羟基-1,1-二甲基丙基氨基甲酸叔丁酯。
400MHz-1H-NMR(CDCl3):1.33(s,6H);1.44(s,9H);1.88(t,2H);1.94(br,1H);3.75(q,2H);4.98(br,1H).
3-(叔丁氧羰基氨基)-3-甲基丁醛:
-78℃下向草酰氯(1.1ml,12.9mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中加入DMSO(1.22ml,17.2mmol)。-78℃下搅拌15分钟,于15分钟内滴加3-羟基-1,1-二甲基丙基氨基甲酸叔丁酯(1.75g,8.6mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液。-78℃下再搅拌15分钟,加入三乙胺(6.0ml,43mmol)。-78℃搅拌5分钟后温热至室温。用二氯甲烷(100ml)稀释溶液,用1N盐酸(100ml)萃取。水层用二氯甲烷萃取(50ml)。合并有机层,用饱和碳酸氢钠溶液洗涤,用无水硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物在硅胶(140g)上用乙酸乙酯/庚烷(1∶3)洗脱进行层析纯化,得到1.10g 3-(叔丁氧羰基氨基)-3-甲基丁醛。
400MHz-1H-NMR(CDCl3):d=1.39(s,6H);1.45(s,9H);2.85(d,2H);4.73(br.1H);9.80(t,1H).
(2E)-5-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸乙酯:
将膦酰基乙酸三乙酯(19.6ml,9.8mmol)溶解在THF(30ml)中,加入叔丁醇钾(1.10g,9.8mmol)。室温下搅拌40分钟,慢慢加入3-(叔丁氧羰基氨基)-3-甲基丁醛(1.10g,5.5mmol)的THF(6ml)溶液。室温下搅拌75分钟,用乙酸乙酯(100ml)和1N盐酸(100ml)稀释。水层用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。合并有机层,用饱合碳酸氢钠溶液(60ml)洗涤,用无水硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物在硅胶(90g)上用乙酸乙酯/庚烷(1∶4)洗脱进行柱层析纯化,得到1.27g(2E)-5-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸乙酯。
200MHz-1H-NMR(CDCl3):δ=1.30(s,6H);1.30(t,3H);1.46(s,9H);2.62(d,2H);4.27(q,2H);4.42(br,1H);5.88(d,1H);6.94(td,1H).
(2E)-5-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸:
将(2E)-5-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸乙酯(1.233g,4.54mmol)溶解在二噁烷(20ml)中。加入固体氢氧化锂(0.120g,5.00mmol)。加入水(10ml),室温下搅拌16小时。用水(70ml)稀释该溶液,用叔丁基甲基醚(2×100ml)萃取。水层用1N硫酸氢钠溶液(pH=1)酸化,用叔丁基甲基醚(3×70ml)萃取。合并这些有机层,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,得到1.05g(2E)-5-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸。该粗品用于下步合成中。
400MHz-1H-NMR(DMSO d6):δ=1.15(s,6H);1.35(s,9H);2.53(d,2H);5.75(d,1H);6.57(br,1H);6.75(td,1H);12.15(s,1H).
(R)N-甲基-N-[1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
-20℃下向(R)N-甲基-N-叔丁氧羰基-3-(2-萘基)丙氨酸(3.0g,9mmol)和N-甲基吗啉(0.91g,9.0mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液中滴加氯代甲酸异丁酯(1.22g,9.0mmol)。-20℃下15分钟后,加入acetamidoxim(1.33g,18mmol),再加入N-甲基-吗啉(0.91g,9mmol)。-20℃下30分钟后,加热反应混合物至20℃,用N,N-二甲基甲酰胺(40ml)稀释。真空蒸去溶剂,120℃下加热反应混合物16小时。将反应混合物倾入水(120ml)中,用乙酸乙酯(共180ml)萃取。收集有机相,用水(40ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空浓缩溶液,得到3.5g(R)N-甲基-N-[1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酸叔丁酯粗品,不经进一步纯化直接使用。
(R)N-甲基-N-{1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基}胺盐酸盐
将(R)N-甲基-N-[1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.3g,9.0mmol)溶解在氯化氢的饱和乙酸乙酯溶液(75ml)中。20℃下3小时后过滤混合物,得到1.52g(R)N-甲基-N-{1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]胺盐酸盐。
m.p. 198-202℃.
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.35(s,3H);2.68(s,3H);3.43(dd,1H);3.80(dd,1H);5.29(dd,1H);7.30(d,1H);7.45-7.90(m,7H).
HPLC:Rt=16.3min(方法a)
计算值:C16H17N3O1,HCl:
C,63.26;H,5.97;N,13.83%;实测值:
C,63,37;H,6.11;N,13.53%.
{(1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.12g,5.85mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.8g,5.85mmol)加入到(R)N-叔丁氧羰基-3-(2-萘基)丙氨酸(1.84g,5.85mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(45ml)溶液中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(15ml)中的(R)N-甲基-N-{1-(3-甲基-[1,2,4]恶二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基}胺盐酸盐(1.27g,4.18mmol)和三乙胺(0.42g,4.18mmol)的溶液。20℃下18小时后,将反应混合倾入水(200ml)中,用乙酸乙酯(共110ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,40ml)、饱和碳酸氢钠溶液(3×40ml)和水(3×40ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,得到2.4g{(1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酸叔丁酯,不经进一步纯化用于下步反应。
(2R)-2-氨基-N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸
20℃下将{(1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.4g,4.2mmol)溶解在三氟乙酸(40ml)和二氯甲烷(40ml)的混合物中。10分钟后真空浓缩反应混合物,与二氯甲烷(80ml)共蒸发。残余物在乙酸乙酯中结晶,得到1.19g(2R)-2-氨基-N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸。
mp.190-191℃
1H-NMR(DNSO-d6)δ2.33(s,3H);2.88(s,3H);3.00-3.15(m,2H);3.45(dd,1H);3.65(dd,1H);4.71(t,1H);7.25-7.95(m,14H)
HPLC:Rt=24.3min(方法a)
计算值:C29H28N4O2,CF3COOH:
C,64.35;H,5.05;N,9.68%;实测值:
C,64,30;H,5.13;N,9.44%.
[1,1-二甲基-4-((1R)-1-{N-甲基-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)丁-3-烯基]氨基甲酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.28g,1.48mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.23g,1.48mmol)加入到(2E)-5-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.36g,1.48mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(5ml)中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(7ml)中的(2R)-2-氨基-N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸(0.61g,1.06mmol)和三乙胺(0.11g,1.06mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(80ml)中,用乙酸乙酯(共40ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,15ml)、饱和碳酸氢钠溶液(3×15ml)和水(3×15ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,得到0.71g [1,1-二甲基-4-((1R)-1-{N-甲基[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)丁-3-烯基]氨基甲酸叔丁酯粗品,不经进一步纯化用于下步反应。
HPLC:Rt=34.9分钟(方法a)
将[1,1-二甲基-4-((1R)-1-{N-甲基[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)丁-3-烯基]氨基甲酸叔丁酯(0.71g,1.03mmol)溶解在三氟乙酸(10ml)和二氯甲烷(10ml)的混合物中。 20℃下10分钟后真空浓缩反应混合物。在硅胶(80g)上用10%氨/乙醇混合物和二氯甲烷(9∶91)洗脱进行层析,得到0.44g标题化合物。
HPLC:Rt=23.6min(方法a)
计算值:C36H39N5O3,0.75H2O:
C,71.68;H,6.77;N,11.61%;实测值:
C,71.76;H,6.73;N,11.12%.
实施例12:
4-氨基-4-甲基戊-2-烯酸[(1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)
-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]酰胺
按方法E制备。
{1,1-二甲基-4-((1R)-1-{N-甲基-{(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基]烯丙基}氨基甲酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.26g,1.38mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.21g,1.38mmol)加入到N-叔丁氧羰基-4-氨基-4-甲基戊-2-烯酸(0.32g,1.38mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(5ml)溶液中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(6ml)中的(2R)-2-氨基-N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸(0.57g,0.99mmol)和三乙胺(0.10g,0.99mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(75ml)中,用乙酸乙酯(共30ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,15ml)、饱和碳酸氢钠溶液(3×15ml)和水(3×15ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,得到0.68g{1,1-二甲基-4-((1R)-1-{N-甲基-{(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基]烯丙基}氨基甲酸叔丁酯粗品,不经进一步纯化用于下步反应。
HPLC:Rt=33.4分钟(方法a)
将{1,1-二甲基-4-((1R)-1-{N-甲基-{(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基]烯丙基}氨基甲酸叔丁酯(0.68g,1.01mmol)溶解在三氟乙酸(10ml)和二氯甲烷(10ml)的混合物中。20℃下10分钟后真空浓缩反应混合物,在硅胶(80g)上用10%氨/乙醇混合物和二氯甲烷(1∶9)洗脱进行层析,得到标题化合物0.48g。
HPLC:Rt=23.3分(方法a)。
计算值:C35H37N5O3,0.5H2O:
C,71.90;H,6.55;N,11.98%;实测值:
C,71.82;H,6.55;N,11.71%.
实施例13:
(2E)-4-氨基-4-甲基戊-2-烯酸N-[(1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基酰胺
按方法E制备。
N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.34g,7.0mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.95g,7.0mmol)加入到(R)N-叔丁氧羰基-3-(2-萘基)丙氨酸(2.31g,7.0mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(50ml)溶液中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(10ml)中的(R)-N-甲基-N-{1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基}胺盐酸盐(1.52g,5.0mmol)和三乙胺(0.51g,5.0mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(250ml)中,用乙酸乙酯(共130ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,15ml)、饱和碳酸氢钠溶液(3×50ml)和水(3×50ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(110g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶1)洗脱进行层析,得到2.4g N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
HPLC:Rt-36.5分(方法a)
(2R)-2-甲基氨基-N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸
20℃下将N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.4g,4.2mmol)溶解在三氟乙酸(40ml)和二氯甲烷(40ml)的混合物中。10分钟后真空浓缩反应混合物,与二氯甲烷(80ml)共蒸发。残余物在乙酸乙酯中结晶,得到1.9g (2R)-2-甲基氨基-N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸。
mp 184-188℃.
1H-NMR (DMSO-d6)δ1.53(s,3H);2.34(s,3H);2.63(s,3H);3.05(dd,1H);3.21(dd,1H);3.40(dd,1H);3.55(dd,1H);4.60(t,1H);6.35(dd,1H);7.25(d,1H);7.40-7.90(m,14H).
HPLC:Rt=24.9min(方法a)
计算值:C30H30N4O2,CF3COOH:
C,64.86;H,5.27;N,9.45%;实测值:
C,65,01;H,5.35;N,9.32%.
(2E)-{1,1-二甲基-3-[N-((1R)-1-{N-甲基-N-{(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]烯丙基}氨基甲酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.31g,1.6mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.22g,1.6mmol)加入到(2E)-4-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊-2-烯酸(0.37g,1.6mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(5ml)中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(5ml)中的(2R)-2-甲基氨基-N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸(0.68g,1.2ml)和三乙胺(0.12g,1.2mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(80ml)中,用乙酸乙酯(共55ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,15ml)、饱和碳酸氢钠溶液(3×15ml)和水(3×15ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(80g)上用乙酸乙酯和庚烷(7∶3)洗脱进行层析,得到0.75g{(2E)-{1,1-二甲基-3-[N-((1R)-1-{N-甲基-N-{(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]烯丙基}氨基甲酸叔丁酯。
HPLC:Rt=33.8分钟(方法a)
将{(2E)-{1,1-二甲基-3-[N-((1R)-1-{N-甲基-{(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]烯丙基}氨基甲酸叔丁酯(0.62g,1.9mmol)溶解在三氟乙酸(9ml)和二氯甲烷(9ml)的混合物中。20℃下10分钟后真空浓缩反应混合物,在硅胶(80g)上用10%氨/乙醇混合物和二氯甲烷(5∶95)洗脱进行层析,得到0.44g标题化合物。
HPLC:Rt=26.4min(方法a)
计算值:C36H39N5O,0.75H2O:
C,71.68;H,6.77;N,11.61%;实测值:
C,71.81;H,6.72;N,11.17%.
实施例14
3-氨基甲基-N-((1R)-1-{N-[(1R)-1-(((二甲基氨基甲酰基)甲氧基)甲基)-2-苯基乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基苯甲酰胺
按方法G制备。
(2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙-1-醇
按类似于M.J.Mckennon和A.I.Meyers,K.Drauz和M.Schwarm《有机化学杂志》1993(58),3568-3571的方法制备(2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙-1-醇。
m.p.69-69℃(文献值:M.J.Mckenon,A.I.Meyers,K.Drauz和M.Schwarm,有机化学杂志,1993(58),3568-3571:71-74℃;A.Karim,A.Mortreux,F.Petit,G.Buono,G.Peiffer,C.Siv,有机金属化学杂志,1986,317,93:(2S)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙-1-醇的值68℃)。
(N-((1R)-1-羟基甲基-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
将(2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙-1-醇(6.00g,36.3mmol)溶解在THF(80ml)中,加入1N氢氧化钠溶液(36.3ml,36.3mmol)。室温下慢慢加入二碳酸二叔丁基酯(9.50g,43,6mmol)的THF(60ml)溶液。室温下搅拌16小时,加入水(200ml)和乙酸乙酯(200ml)。分离各相,水相用乙酸乙酯(2×100ml)洗涤。合并有机层,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,产物在硅胶(170g)上用乙酸乙酯/庚烷(1∶1)纯化,得到7.85g(N-((1R)-1-羟基甲基-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯。
1H-NMR (CDCl3):δ1.32-1.40(br,9H);2.55-2.95(m,5H);3.65-3.67(br,2H);4.10-4.35(br,1H);7.05-7.35(m,5H).
((2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙氧基)乙酸乙酯
将(N-((1R)-1-羟基甲基-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酸(3.98g,15.0mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(150ml)中。加热溶液至75-80℃。加入乙酸铑(II)(0.1g,0.4mmol)。在6小时内加入重氮基乙酸乙酯(2.4ml,22.5ml)的二氯甲烷(100ml)溶液。3小时后加入另一部分乙酸铑(II)(0.1g,0.4mmol)。加入全部重氮基乙酸乙酯后,冷却该溶液至室温。通过硅澡土过滤。真空除去溶剂,粗产品在硅胶(100g)上层析,得到1.53g((2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙氧基)乙酸乙酯。
1H-NMR(CDCl3):δ1.28(m,3H);1.39和1.48(两个.s,共9H);2.65-2.95(m,9H);3.58(m,1H);3.67(br,1H);3.98-4.27(m,4H);4.35-4.55(br,1H);7.10-7.30(m,5H).
((2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙氧基)乙酸
将((2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙氧基)乙酸乙酯(0.60g,1.71mmol)溶解在二噁烷(5ml)中,加入氢氧化锂(0.05g,2.20mmol)的水(2ml)溶液。室温下搅拌溶液56小时,加入乙酸乙酯(10ml)和水(2ml)。分离各相,水相用乙酸乙酯(10ml)萃取。合并有机相,用1N氢氧化钠(20ml)萃取。合并水相,用1M硫酸氢钠溶液(pH=2)酸化,用乙酸乙酯(2×20ml)萃取。合并这些乙酸乙酯层,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,得到0.38g((2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙氧基)乙酸粗品,用于下步反应。
1H-NMR(DMSO d6):δ1.15和1.27(两个s,共9H);2.55-2.70(m,5H);3.45-3.65(m,2H);4.00-4.10(m,2H);4.30-4.50(m,1H);7.15-7.35(m,5H);13.60(br,1H).
N,N-二甲基-2-((2R)-2-甲基氨基)-3-苯基丙氧基)乙酰胺
将((2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙氧基)乙酸(0.37g,1.14mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.26g,1.14mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(7ml)中。加入N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(0.26g,1.37mmol)。搅拌溶液30分钟,加入33%的二甲基胺的乙醇溶液(0.33ml,1.26mmol)。搅拌过夜,加入水(20ml)和乙酸乙酯(15ml)。有机相用1M硫酸氢钠溶液(30ml)和饱和碳酸氢钠溶液(30ml)洗涤。用硫酸镁干燥,真空除去溶剂,粗产品在硅胶(15g)上用乙酸乙酯和二氯甲烷(1∶1)洗脱进行层析纯化。将此产品溶解在二氯甲烷(3ml)中,冷却至0℃,加入三氟乙酸(1ml)。0℃下搅拌此溶液20分钟。真空除去溶剂,残余物溶解在二氯甲烷(10ml)和1N氢氧化钠(10ml)溶液中。分离各相,水相用二氯甲烷(4×10ml)萃取。合并有机层,用无水硫酸镁干燥。真空除去溶剂,得到140mg N,N-二甲基-2-((2R)-2-甲基氨基)-3-苯基丙氧基)乙酰胺粗品用于下步合成。
1H-NMR(CDCl3):δ2.25(s,1H);2,45(s,3H);2.60-3.10(m,3H);3.94(s,1H);3.99(s,3H);3.35-3.55(m,2H);4.15(s,2H);7.10-7.40(m,5H).
HPLC:Rt=12.18min(方法b).
N-((1R)-1-{N-[(1R)-1-(((二甲基氨基甲酰基)甲氧基)甲基)-2-苯基乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
将N,N-二甲基-2-((2R)-2-甲基氨基)-3-苯基丙氧基)乙酰胺(126mg,0.50mmol),(2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(250mg,0.75mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(103mg,0.76mmol)溶解在二氯甲烷(6ml)和N,N-二甲基甲酰胺(5ml)中,然后在0℃下与N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(146mg)搅拌30分钟。加入二异丙基乙基胺(87μl),0℃下继续搅拌1小时。然后用氮气流从混合物中蒸去二氯甲烷,加入乙酸乙酯(25ml)。该混合物连续用5%碳酸氢钠水溶液(2×25ml)、5%硫酸氢钾水溶液(2×25ml)和水(25ml)洗涤,有机相用硫酸镁干燥,真空浓缩,得到265mg N-((1R)-1-{N-[(1R)-1-(((二甲基氨基甲酰基)甲氧基)甲基)-2-苯基乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯粗品。
3-氨基甲基-N-((1R)-1-{N-[(1R)-1-(((二甲基氨基甲酰基)甲氧基)甲基)-2-苯基乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基苯甲酰胺
将N-((1R)-1-{N-[(1R)-1-(((二甲基氨基甲酰基)甲氧基)甲基)-2-苯基乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯粗品(132mg,0.23mmol)的一半溶解在二氯甲烷和三氟乙酸(1∶1,2ml)的混合物中,搅拌10分钟。用氮气流浓缩混合物,生成的油重溶于1ml 1N盐酸中,用水稀释至50ml,冷冻干燥。将此冻干品溶解在二氯甲烷(5ml)中,加入二异丙基乙基胺(171μl)。向此混合物中加入3-叔丁氧羰基氨基甲基苯甲酸(503mg,2.0mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液,在临加入前该溶液与N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐(191.6mg,1.0mmol)搅拌15分钟转变为对称酸酐。将反应混合物浓缩成油,重溶在乙酸乙酯(25ml)中。该混合物相继用5%碳酸氢钠水溶液(50ml)、5%硫酸氢钾水溶液(50ml)和水(50ml)萃取,有机相用硫酸钠干燥,用氮气流浓缩至干。将产物溶解在二氯甲烷和三氟乙酸1∶1混合物(4ml)中。10分钟后,用氮气流浓缩混合物,形成的油重溶于5ml 70%乙腈/0.1%三氟乙酸中,用水稀释至50ml。该标题化合物粗产品在25mm×250mm填有7μC-18硅胶柱上分四次进行半制备性HPLC纯化,用0.05M硫酸铵(用4M硫酸调至pH2.5)中29%乙腈预平衡。40℃下以10ml/min的流速用0.05M硫酸铵(pH2.5,用4M硫酸调)中的29%-39%乙腈梯度洗脱47分钟,收集含肽流份,用3倍体积的水稀释,上样于一Sep-PakC18柱(Wa-ters Part,:#51910)上,该柱用0.1%三氟乙酸预平衡。用70%乙腈/0.1%三氟乙酸从Sep-Pak柱上洗脱肽,用水稀释后冷冻干燥从洗脱液中分离肽。
用分析型PP-HPLC(保留时间)和离子对吸收质谱(分子量)鉴定所得最终产物。发现分子量(MH+:592.9amu)在该方法的试验误差范围内与预期结构相符(理论值,MH+:593.4amu)。
用214nm处紫外检测和Vydac 218Tp54 4.6mm×250mm 5μC-18硅胶柱(“分离组”,Hesperia)进行RP-HPLC,用两种不同的洗脱条件在42℃下以1ml/分洗脱:
A1:用0.1M硫酸铵缓冲液(用4M硫酸调至pH2.5)中5%乙腈预平衡,用相同缓冲液中5%-60%乙腈梯度洗脱50分钟。
B1:用5%乙腈/0.1%三氟乙酸/水预平衡,用5%乙腈/0.1%三氟乙酸/水到60%的乙腈/0.1%三氟乙酸/水梯度洗涤50分钟。
洗涤条件A1和B1下的保留时间分别为:30.92分和35.15分。
实施例15
5-((1R)-1-(((2R)-2-(((2E)-4-氨基-4-甲基戊-2-烯酰基)甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰基)甲基氨基-2-苯乙基)-[1,3,4]噁二唑-2-羧酸酰胺
(2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙酸乙酯
将(2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙酸(4.0g,14.27mmol)溶解在二氯甲烷(5ml)和乙醇(0.95ml,16.27mmol)中。加入4-二甲氨基吡啶(0.19g,1.57mmol)。冷却至0℃,加入N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(2.98g,15.55mmol)。0℃下搅拌反应混合物2小时,室温下16小时。真空除去溶剂,残余物溶解在乙酸乙酯/水(30ml/30ml)中。有机相用碳酸氢钠饱和溶液和水洗涤,用硫酸镁干燥。粗产物在硅胶(180g)上用乙酸乙酯/庚烷1∶2进行快速层析纯化,得到1.95g (2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙酸乙酯。
1H-NMR (CDCl3):δ1.15-1.50(m,12H);2.71(m,3H);3.00(m,1H);3.80(m,1H);4.20(br q,2H);4.55和4.90(两个br dd,共1H);7.10-7.40(m,5H).
((1R)-1-肼基羰基-2-苯乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯
将(2R)-2((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙酸乙酯(1.9g,6.16mmol)溶解在无水乙醇(15ml)中,滴加水合肼(3.0ml,61.6mmol)。室温下搅拌过夜。真空除去溶剂,残余物溶解在乙酸乙酯(40ml)中,用水(40ml)洗。有机相用硫酸镁干燥,真空除去溶剂,得到1.40g((1R)-1-肼基羰基-2-苯乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯粗品用于下步合成。
1H-NMR(CDCl3):δ1.20-1.50(m,9H);2.76(s,3H);3.00(m,1H);3.35(m,1H);3.85(br,2H);4.75和4.85(两个m,共1H);7.10-7.40(m,5H);7.45(br,1H).
1-((2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙酰基)-2-乙氧羰基甲酰基肼
将((1R)-1-肼基羰基-2-苯乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯(1.4g,4.76mmol)溶解在二氯甲烷(40ml)中,加入三乙胺(0.8ml,5.71mmol),冷却溶液至-15℃。滴加乙基草酰氯(0.59ml,5.24mmol)。-15℃下搅拌该溶液15分钟,温热至室温,用水(2×20ml)和5%柠檬酸(30ml)萃取,用碳酸氢钠饱和溶液洗涤。用硫酸镁干燥有机层,真空除去溶剂,粗产物在硅胶(140g)上用乙酸乙酯/二氯甲烷1∶3进行快速层析纯化,得到1.40g 1-((2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙酰基)-2-乙氧羰基甲酰基肼。
1H-NMR (CDCl3):δ1.30-1.50(m,12H);2.80(br,3H);3.05(m,1H);3.35(m,1H);4.37(br m,2H);4.82和4.95(br和brt,共1H);7.05-7.35(m,5H);8.60,8.95,9.15,9.45(均为br,共2H).
5-((1R)-1-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-2-苯基乙基)-[1,3,4]噁二唑-2-羧酸乙酯
将1-((2R)-2-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-苯基丙酰基)-2-乙氧羰基甲酰基肼(1.4g,3.55mmol)溶解在醚(25ml)和THF(10ml)中。加入吡啶(1.44ml,17.75mmol),冷却溶液至0℃。滴加亚硫酰氯(0.3ml,3.90mmol),0℃下搅拌反应混合物2小时。过滤沉淀,加热真空除去溶剂,残余物溶解在甲苯(25ml)中,加热回流2小时。真空除去溶剂,粗产品在硅胶(70g)上用乙酸乙酯/二氯甲烷1∶2进行快速层析纯化,得到721mg 5-((1R)-1-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-2-苯基乙基)-[1,3,4]噁二唑-2-羧酸乙酯。
1H-NMR(CDCl3):δ1.35(br d,9H);1.47(t,3H);2.70(br,3H);3.30(br,1H);3.50(br,1H);4.52(br,2H);5.55和5.88(两个br,共1H);7.15-7.40(m,5H).
((1R)-1-(5-氨基甲酰基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-2-苯乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯
将5-((1R)-1-((叔丁氧羰基)甲基氨基)-2-苯基乙基)-[1,3,4]噁二唑-2-羧酸乙酯(600mg,1.6mmol)溶解在THF(4ml)中,加入到回流氨中。搅拌该溶液3小时,用氮流除去氨。残余物溶解在乙酸乙酯/10%硫酸氢钠溶液(20ml/20ml)中。分离各相,有机相用饱合碳酸氢钠溶液洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,粗产品在硅胶(40g)上用乙酸乙酯/庚烷2∶1快速层析纯化,得到383mg((1R)-1-(5-氨基甲酰基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-2-苯乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯。
1H-NMR(CDCl3):δ1.30(br,9H);2.75(brd,3H);3.30(dd,1H);3.50(br,1H);5.55和5.85(两个br,共1H);6.27(br,1H);7.10(br,1H);7.20-7.40(m,5H).
5-((1R)-1-甲基氨基)-2-苯基乙基)-[1,3,4]噁二唑-2-羧酸酰胺
将((1R)-1-(5-氨基甲酰基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-2-苯乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯(350mg,1.01mmol)溶解在二氯甲烷(6ml)中,冷却至0℃。滴加三氟乙酸(2ml)。搅拌30分钟,真空除去溶剂。残余物溶解在二氯甲烷(6ml)中,真空除去溶剂。再将残余物溶解在二氯甲烷(6ml)中,真空除去溶剂。将残余物溶解在二氯甲烷(10ml)中,用水洗涤。水层冷冻干燥,得到247mg 5-((1R)-1-甲基氨基)-2-苯基乙基)-[1,3,4]噁二唑-2-羧酸酰胺粗品,用于下步合成中。
1H-NMR(DMSO d6):δ2.65(s,3H);3.35(dd,1H);3.62(dd,1H);5.20(dd,1H);7.10-7.40(m,5H);8.35(s,1H);8.68(s,1H).
((1R)-1-(((1R)-1-(5-氨基甲酰基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-2-苯乙基)甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯
将5-((1R)-1-甲基氨基)-2-苯基乙基)-[1,3,4]噁二唑-2-羧酸酰胺(240mg,0.98mmol),(R)-2-(叔丁氧羰基)甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(320mg,0.98mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(133mg,0.98mmol)溶解在二氯甲烷(8ml)和DMF(4ml)中。冷却至0℃,加入N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(230g,1.18mmol)。10分钟后加入三乙胺(0.35ml,2.46mmol)。0℃搅拌1小时,然后室温搅拌16小时。用乙酸乙酯(30ml)和水(20ml)稀释溶液。分离各相,水相用乙酸乙酯(20ml)萃取。合并有机层,用饱合碳酸氢钠溶液(30ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,粗产物在硅胶(50g)上用乙酸乙酯快速层析纯化,得到301mg((1R)-1-(((1R)-1-(5-氨基甲酰基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-2-苯乙基)甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯。
1H-NMR(CDCl3):δ0.84,0.95,1.07,1.25(均为s,共9H);2.05,2.15,2.42,2.75,2.76,2.77,2.87,3.98(均为s,共6H);6.90-7.90(m,12H).
5-((1R)-1-(甲基((2R)-2-甲基氨基-3-(2-萘基)丙酰基)氨基)-2-苯基乙基)-[1,3,4]噁二唑-2-羧酸酰胺:
将((1R)-1-(((1R)-1-(5-氨基甲酰基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-2-苯乙基)甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)甲基氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.55mmol)溶解在二氯甲烷(3ml)中,冷却至0℃。滴加三氟乙酸(3ml),0℃下搅拌5分钟,真空除去溶剂。残余物溶解在乙酸乙酯(5ml)中,真空除去溶剂。残余物溶解在乙酸乙酯(5ml)中,真空除去溶剂。将残余物溶解在3M氯化氢/乙酸乙酯(5ml)中,真空除去溶剂,残余物溶解在3M氯化氢/乙酸乙酯(5ml)中,真空除去溶剂,得到238mg 5-((1R)-1-甲基((2R)-2-甲基氨基-3-(2-萘基)丙酰基)氨基)-2-苯基乙基)-[1,3,4]噁二唑-2-羧酸酰胺粗品,用于下步合成中。
1H-NMR(CDCl3):δ2.40(s,3H);2.55-4.40(m,9H);7.10-7.90(m,9H).
((E)-3-(((1R)-1-(((1R)-1-(5-氨基甲酰基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-2-苯乙基)甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基乙基)甲基氨基甲酰基)-1,1-二甲基烯丙基)氨基甲酸叔丁酯
将(2E)-4-叔丁氧羰基氨基-4-甲基戊-2-烯酸(143mg,0.62mmol)溶解在二氯甲烷(4ml)中,加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(85mg,0.62mmol),再加入N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(119mg,0.62mmol)。室温下搅拌15分钟,加入5-((1R)-1-(甲基((2R)-2-甲基氨基-3-(2-萘基)丙酰基)氨基)-2-苯基乙基)-[1,3,4]噁二唑-2-羧酸酰胺(230mg,0.52mmol)。搅拌溶液5分钟,向反应混合物中加入乙基二异丙基胺(0.11ml,0.62mmol)。室温下搅拌16小时,用乙酸乙酯(20ml)稀释,用水(20ml)萃取。分离各相,水相用乙酸乙酯(2×10ml)萃取。合并有机相,用碳酸氢钠饱和溶液洗涤,用硫酸镁干燥。粗品在硅胶(40g)上用二氯甲烷/乙酸乙酯1∶1进行快速层析,得到126mg((E)-3-(((1R)-1-(((1R)-1-(5-氨基甲酰基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-2-苯乙基)甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基乙基)甲基氨基甲酰基)-1,1-二甲基烯丙基)氨基甲酸叔丁酯。
1H-NMR(CDCl3):δ1.1-1.5(m,15H);2.6-3.7(m,12H).HPLC(方法b):Rt=44.95min.
PDMS:668.8([M]+)
将((E)-3-(((1R)-1-(((1R)-1-(5-氨基甲酰基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-2-苯乙基)甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基乙基)甲基氨基甲酰基)-1,1-二甲基烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.18mmol)溶解在二氯甲烷(3ml)中。冷却至0℃,,滴加三氟乙酸(3ml)。0℃下搅拌反应混合物5分钟。加热下真空除去溶剂,残余物溶解在二氯甲烷(5ml)中,真空除去溶剂。重复两次该步骤。残余物溶解在水(5ml)中,加入1N盐酸(1ml,1mmol)。真空除去溶剂,残余物溶于3M氯化氢/乙酸乙酯(3ml)中,真空除去溶剂。重复这一步骤。粗产物在25mm×250mm5μC18硅胶柱上用0.1M硫酸铵缓冲液(用4M硫酸调至pH2.5)中28%到38%乙腈梯度进行HPLC层析纯化,得到64mg标题化合物。
HPLC(方法b):Rt=30.133分
PDMS:569.6([M+H]+)
实施例16
哌啶-4-羧酸N-甲基-N-{1-(甲基-[1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基}酰胺
按方法E制备。
N-甲基-N-{(1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.34g,7.0mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.95g,7.0mmol)加入到N-甲基-N-叔丁氧羰基-3-(2-萘基)丙氨酸(2.31g,7.0mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(50ml)中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(10ml)中的(R)-N-甲基-N-{1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基}胺盐酸盐(1.52g,5.0mmol)和三乙胺(0.51g,5.0mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(250ml)中,用乙酸乙酯(共130ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,50ml)、饱和碳酸氢钠溶液(50ml)和水(3×50ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(110g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶1)洗脱进行层析,得到2.4g N-甲基-N-{(1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酸叔丁酯,泡沫状。
HPLC:Rt=36.5分(方法a)
(2R)-2-甲基氨基-N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸
20℃下将N-甲基-N-{(1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酸叔丁酯(2.4g,4.2mmol)溶解在三氟乙酸(40ml)和二氯甲烷(40ml)的混合物中。10分钟后真空浓缩反应混合物,与庚烷(80ml)和二氯甲烷(80ml)共蒸发。残余物在乙酸乙酯中结晶,得到1.12g (2R)-2-甲基氨基-N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸。
mp 184-188℃.
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.52(s,3H);2.32(s,3H);2.68(s,3H);3.03(dd,1H);3.22(dd,1H);3.55(dd,1H);4.62(t,1H);6.35(dd,1H);7.25-7.95(m,14H).
HPLC:Rt=24.9min(方法a)
计算值:C30H30N4O2,CF3COOH,0.25EtOAc:
C,64.49;H,5.41;N,9.12%;实测值:
C,65.01;H,5.35;N,9.32%.
4-{N-甲基-N-{(1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.37g,1.91mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.26g,1.91mmol)加入到N-叔丁氧羰基-4-哌啶酸(0.44g,1.91mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(5ml)溶液中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(10ml)中的(2R)-2-甲基氨基-N-甲基-N-[(1 R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸(0.81g,1.37mmol)和三乙胺(0.19g,1.37mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(100ml)中,用乙酸乙酯(共70ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,20ml)、饱和碳酸氢钠溶液(20ml)和水(3×20ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,残余物在硅胶(80g)上用乙酸乙酯和庚烷(3∶2)洗脱进行层析,得到0.88g4-{N-甲基-N-{(1R)-1-[N-甲基-N-((1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯。
HPLC:Rt=36.1分(方法a)
将4-{N-甲基-N-{(1R)-1-[N-甲基-N-((1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基)氯基甲酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.88g,1.28mmol)溶解在三氟乙酸(12ml)和二氯甲烷(12ml)的混合物中。20℃下10分钟后真空浓缩混合物。该化合物在硅胶(75g)上用10%氨/乙醇混合物和二氯甲烷(1∶9)洗脱进行层析,得到0.56g标题化合物的两个异构体。
HPLC:非对映异构体I:Rt=25.24min(方法a)
非对映异构体II:Rt=25.26min(方法a)
计算值:C30H39N5O3,H2O:
C,71.15;H,6.80;N,11.52%;实测值:
C,71.27;H,6.68;N,11.28%.
实施例17
哌啶-4-羧酸N-{1-(N-[甲基-N-[1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基}酰胺
按方法E制备。
4-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基哌啶-1-羧酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.42g,2.2mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.34g,2.2mmol)加入N-叔丁氧羰基-4-哌啶羧酸(0.50g,2.2mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(5ml)中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(10ml)中的(2R)-2-氨基-N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸(0.9g,1.54mmol)和三乙胺(0.16g,1.54mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(85ml)中,用乙酸乙酯(共90ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,15ml)、饱合碳酸氢钠溶液(15ml)和水(3×15ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,残余物在硅胶(110g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶1)洗脱进行层析,得到0.50g 4-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基哌啶-1-羧酸叔丁酯
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.40(s,3H);2.95(s,3H);3.45(dd,1H);3.60(dd,1H);4.85(m,1H);6.08(m,1H);7.10(d,1H);7.40-7.90(m,13H).
HPLC:Rt=34.0分(方法a)
将4-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酰基哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.50g,0.74mmol)溶解在三氟乙酸(10ml)和二氯甲烷(10ml)的混合物中。20℃下10分钟后真空浓缩反应混合物,残余物在硅胶(38g)上用10%氨/乙醇混合物和二氯甲烷(3∶7)洗脱进行层析,得到0.26g标题化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.45(dd,1H);3.61(dd,1H);4.7 2(m,1H);6.10(dd,1H);7.20(d,1H);7.40-8.00(m,14H).
HPLC:Rt=24.8min(方法a)
计算值:C35H37N5O3,0.5H2O:
C,71.90;H,6.55;N,11.98%;实测值:
C,71.77;H,6.52;N,12.09%.
实施例18:
5-{1-[N-(2-(哌啶-4-羰基氨基)-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸(2-丙基)酯
(R)5-(1-甲基氨基-2-(2-萘基)乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸(2-丙基)酯
将(R)5-(1-甲基氨基-2-(2-萘基)乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯盐酸盐(1.64g,4.5mmol)悬浮在2-丙醇(35ml)中。加入钛酸四异丙酯(1.3g,4.5mmol)后,回流反应混合物18小时。加入盐酸(1N,30ml),反应混合物用乙酸乙酯(150ml)萃取。有机相用碳酸氢钠饱和水溶液(50ml)和水(3×50ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩该溶液,得到1.3g(R)5-(1-甲基氨基-2-(2-萘基)乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸(2-丙基)酯,不经进一步纯化用于下步反应。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.31(d,6H);2.21(d,3H);3.3(m,2H);4.40(t,1H);5.72(m,1H);7.35-7.95(m,7H).
HPLC:Rt=20.5min(方法a)
5-{(1R)-1-[N-((2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸(2-丙基)酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(2.15g,6.8mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.93g,6.8mmol)加入到(R)N-叔丁氧羰基-3-(2-萘基)丙氨酸(2.15g,6.8mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(50ml)溶液中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(15ml)中的(R)5-(1-甲基氨基-2-(2-萘基)乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸(2-丙基)酯(1.65g,4.9mmol)溶液。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(500ml)中,用乙酸乙酯(共450ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,75ml)、饱和碳酸氢钠溶液(75ml)和水(3×75ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,残余物在硅胶(160g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶2)洗脱进行层析,得到2.4g 5-{(1R)-1-[N-((2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸(2-丙基)酯。
HPLC:Rt=36.5分(方法a)
5-{(1R)-1-[N-((2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸(2-丙基)酯,三氟乙酸
将5-{(1R)-1-[N-((2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸(2-丙基)酯(2.1g,3.3mmol)悬浮在三氟乙酸和二氯甲烷的饱合混合物(1∶1,60ml)中。20℃下10分钟后,真空浓缩反应混合物,得到2.2g 5-{(1R)-1-[N-(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸(2-丙基)酯,三氟乙酸盐,不经进一步纯化用于下步合成。
4-((1R)-1-{N-[(1R)-1-(3-(2-丙氧基)羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.22g,6.35mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.97g,6.35mmol)加入到N-叔丁氧羰基氨基-4-哌啶竣酸(1.46g,6.35mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20ml)溶液中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(20ml)中的5-{(1R)-1-[N-((2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸(2-丙基)酯(2.95g,4.53mmol)和三乙胺(0.47g,4.53mmol)的溶液。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(240ml)中,用乙酸乙酯(共240ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,35ml)、饱和碳酸氢钠溶液(35ml)和水(3×35ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(110g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶1)洗脱进动快速层析,得到2.6g 4-((1R)-1-{N-[(1R)-1-(3-(2-丙氧基)羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
1H-NMR(DMSOd6)δ
HPLC:Rt=35.9分(方法a)
将4-((1R)-1-{N-[(1R)-1-(3-(2-丙氧基)羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g,1.34mmol)溶解在三氟乙酸和二氯甲烷的混合物(1∶1,25ml)中。20℃下10分钟后真空浓缩反应混合物。残余物在硅胶(75g)上用二氯甲烷和10%氨/乙醇的混合物(9∶1)洗涤进行快速层析纯化,得到0.77g标题化合物。
1H-NMR(DMSO d6)δ
实施例19:
5-{1-[N-(2-哌啶-4-羰基氨基)-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基]-2-(2-萘基)乙基}-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸,三氟乙酸
按方法E制备。
4-(1-{[1-(3-羧基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将4-((1R)-1-{[(1R)-1-(3-乙氧羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.79g,1.06mmol)溶解在二噁烷(5.5ml)中,加入水(3ml)和固体氢氧化锂(0.03g)。20℃下18小时后,用水(15ml)稀释反应混合物,用叔丁基甲基醚(2×10ml)萃取。水层用1N磷酸氢钠水溶液(2.5ml)酸化,用叔丁基甲基醚(3×40ml)萃取。合并有机相,用硫酸镁干燥,真空浓缩。残余物在硅胶(60g)上用二氯甲烷和10%氨/乙醇混合物(4∶1)洗脱进行层析,得到0.41g 4-(1-{[1-(3-羧基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。
1H-NMR(DMSO-d6)δ
将4-(1-{[1-(3-羧基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.41g,0.58mmol)溶解在三氟乙酸和二氯甲烷的混合物(1∶1,12ml)中。20℃下10分钟后,真空浓缩反应混合物,得到0.4g标题化合物粗产物。
PDMS:(理论值:MH+=606.7;实测值:MH+=605.9)
实施例20:
哌啶-4-羧酸(1-{N-[1-(3-甲基氨基羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺
按方法E制备。
4-(1-{N-[1-(3-甲基氨基羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将4-((1R)-1-{[(1R)-1-(3-丙氧羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.80g,1.07mmol)溶解在33%甲基胺/乙醇中,在一密闭反应器中90℃下搅拌18小时。真空浓缩反应混合物,残余物在硅胶(60g)上用乙酸乙酯和庚烷(7∶3)洗脱进行层析,得到0.15g 4-(1-{N-[1-(3-甲基氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。
HPLC:Rt=31.5分(方法a)
将4-(1-{N-[1-(3-甲基氨基羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-(2-萘基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.15g,0.21mmol)溶解在三氟乙酸和二氯甲烷的混合物(1∶1,4ml)中。20℃下5分钟后真空浓缩反应混合物。在硅胶(40g)上用二氯甲烷和10%氨/乙醇的混合物(9∶1)洗脱,进行快速层析纯化,得到0.08g标题化合物。
HPLC:Rt=20.9分钟(方法a)。
实施例21:
(2E)-5-氨基-甲基己-2-烯酸{1-[N-(1-(3-苄基氨基羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯基乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基}酰胺
(R)5-(1-甲基氨基-2-苯基乙基]-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸苄酰胺
将(R)5-(1-甲基氨基-2-苯基乙基)-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸乙酯(3.3g,9.0mmol)溶解在乙醇(30ml)中,加入苄胺(3ml),20℃下搅拌反应混合物18小时。真空浓缩反应混合物,残余物在乙醇中结晶,得到2.07g (R)5-(1-甲基氨基-2-苯基乙基]-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸苄酰胺。
m.p.128-128.5℃
1H-NMR (DMSO-d6)δ2.22(s,3H);3.08(dd,1H);3.18(dd,1H);4.26(t,1H);4.45(d,2H);7.10-7.45(m,1H);9.50(t,1H).
HPLC:Rt=17.3min(方法a)
计算值:C19H20N4O2,0.25EtOH:
C,67.32;H,6.23;N,16.10%;实测值:
C,67.35;H,6.03;N,16.25%.
{(1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-苄基氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯基乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.64g,8.57mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(1.17g,8.57mmmol)加入到(R)-N-叔丁氧羰基-3-(2-萘基)丙氨酸(2.70g,8.57mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(40ml)中。20℃下20分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(40ml)中的(R)5-(1-甲基氨基-2-苯基乙基]-[1,2,4]噁二唑-3-羧酸苄酰胺(2.06g,6.12mmol)溶液,20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(250ml)中,用乙酸乙酯(共200ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,50ml)、饱和碳酸氢钠溶液(3×50ml)和水(3×50ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,在硅胶(150g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶1)洗脱进行层析,得到3.9g {(1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-苄基氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯基乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酸叔丁酯。
2-氨基-N-甲基-N-[1-(3-苄基氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯基乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸
将{(1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-1-(3-苄基氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯基乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基}氨基甲酸叔丁酯(3.9g,6.15mmol)溶解在三氟乙酸(40ml)和二氯甲烷(40ml)的混合物中。20℃下10分钟后真空浓缩反应混合物,与庚烷然后与二氯甲烷共蒸发,得到4g 2-氨基-N-甲基-N-[1-(3-苄基氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯基乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸盐粗品的两种异构体,不经进一步纯化用于下步反应。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.88(s);3.21(s);3.32(m);3.55(m);4.52(m);5.95(m);6.21(m).
HPLC:异构体I:Rt=24.2min(方法a)
异构体II:Rt=25.4min(方法a)
[(2E)-1,1-二甲基-4-(1-{N-甲基-N-[1-(3-苄基氨基羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯基乙基]氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)丁-3-烯基]氨基甲酸叔丁酯
将N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.40g,2.1mmol)和1-羟基苯并三唑单水合物(0.32g,2.1mmol)加入到(2E)-5-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.51g,2.1mmol)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(5ml)中。20℃下30分钟后,加入N,N-二甲基甲酰胺(12ml)中的2-氨基-N-甲基-N-[1-(3-苄基氨基甲酰基-[1,2,4]恶二唑-5-基)-2-苯基乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺,三氟乙酸(1.0g,1.5mmol)和三乙胺(0.15g,1.5mmol)的混合物。20℃下18小时后,将反应混合物倾入水(100ml)中,用乙酸乙酯(共65ml)萃取几次。合并有机相,用柠檬酸(10%,20ml)、饱合碳酸氢钠溶液(20ml)和水(3×20ml)洗涤。用硫酸镁干燥后,真空浓缩溶液,残余物在硅胶(85g)上用乙酸乙酯和庚烷(1∶1)洗脱进行快速层析,得到0.77g[(2E)-1,1-二甲基-4-(1-{N-甲基-N-[1-(3-苄基氨基羰基-[1,2,4]恶二唑-5-基)-2-苯基乙基]氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)丁-3-烯基]氨基甲酸叔丁酯的两种异构体。
HPLC:异构体I:Rt=34.1分(方法a)
异构体II:Rt=34.4分(方法a)
将[(2E)-1,1-二甲基-4-(1-{N-甲基-N-[1-(3-苄基氨基羰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯基乙基]氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)丁-3-烯基]氨基甲酸叔丁酯(0.77g,1.0mmol)溶解在三氟乙酸(2ml)和二氯甲烷(2ml)的混合物中。20℃下10分钟后用二氯甲烷(25ml)稀释反应混合物,用碳酸氢钠饱和水溶液中和。用硫酸镁干燥有机相,真空浓缩,得到标题化合物的两种异构体0.7g。
HPLC:异构体I:Rt=24.5分(方法a)
异构体II:Rt=25.3分(方法a)
实施例22:
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-1-[N-(1R)-1-苄基-2,5-二羟基戊基)-N-甲基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基}-N-甲基酰胺
按方法J制备。
N-((1R)-1-甲酰基-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
草酰氯(4.24ml,48.61mmol)溶解在二氯甲烷(30ml)中。冷却至-63℃,滴加DMSO(4.6ml,64.81mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液。搅拌5分钟,在30分钟内滴加N-((1R)-1-(羟基甲基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(8.6g,32.41mmol)的二氯甲烷(200ml)溶液。-63℃下搅拌反应混合物20分钟。25分钟内加入三乙胺(18.07ml,129.62mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液。溶液温热至-35℃,立即再冷却至-63℃。在此温度下搅拌1小时,加入乙酸(8.15ml,142.58mmol)。让反应混合物温热至10℃,用水(2×200ml)和碳酸氢钠饱和溶液(150ml)洗涤。用硫酸镁干燥有机相,真空除去溶剂,得到7.536g N-((1R)-1-甲酰基-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯。
1H-NMR(CDCl3):δ=1.40和1.44(两个s,共9H);2.52和2.58(两个s,共3H);2.90和3.00(两个dd,共1H);3.81(dd,1H);4.00和4.20(两个dd,共1H);7.10-7.35(m,5H).
N-((1R)-1-苄基-2-羟基戊-4-烯基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
将N-((1R)-1-甲酰基-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(6.0g,20.0mmol)溶于醚(150ml)中,冷却至-78℃,滴加烯丙基溴化镁(1.0M醚溶液22ml,22mmol)。加完后让溶液温热至室温。加入到10%氯化铵水溶液(200ml)中。分离各相,水相用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。合并有机层,用饱和碳酸氢钠溶液(100ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,粗品在硅胶(260g)上用乙酸乙酯/庚烷1∶1进行快速层析纯化,得到4.00g N-((1R)-1-苄基-2-羟基戊-4-烯基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯。
1H-NMR(CDCl3):δ=1.10-1.50(m,9H);1.90-3.40(m,8H);3.50-4.10(m,2H);5.00-5.30(m,2H);5.90(m,1H);7.10-7.40(m,5H).
((1R)-1-苄基-2,5-二羟基戊基)甲基氨基甲酸叔丁酯
将N-((1R)-1-苄基-2-羟基戊-4-烯基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(3.95g,11.60mmol)溶解在THF(90ml)中,加入到9-硼杂双环[3,3,1]壬烷(46.64ml的0.5M THF溶液,23.32mmol)的THF(90ml)溶液中。加热回流该溶液16小时。冷却混合物至室温,滴加乙醇(22ml)。慢慢加入6N氢氧化钠水溶液(6.6ml,39.44mmol),然后加过氧化氢(35%的水溶液)。加热回流反应混合物1小时,冷却至室温。加入到1N氢氧化钠溶液(200ml)中,分离各相。水相用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。合并有机层,用37%硫酸氢钠溶液(150ml)洗涤。用硫酸镁干燥。再用37%硫酸氢钠溶液(200ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂。将残余物溶解在乙酸乙酯(200ml)中,用37%硫酸氢钠(200ml)洗涤,用硫酸镁干燥。粗产品在硅胶(180g)上用乙酸乙酯层析,再在硅胶(100g)上用二氯甲烷/甲醇/25%氨水100∶10∶1层析,得到586mg((1R)-1-苄基-2,5-二羟基戊基)甲基氨基甲酸叔丁酯。
MS(EI):365(20%;[M+1]+)
1H-NMR(CDCl3):δ=1.22和1.40(两个s,共9H);1.60-1.90(m,5H);2.50,2.60,和2.73(均为s,共3H);2.80-4.00(m,7H);7.10-7.35(m,5H).
(5R)-4-羟基-5-(甲基氨基)-6-苯基己基乙酸酯
将((1R)-1-苄基-2,5-二羟基戊基)甲基氨基甲酸叔丁酯(560mg,1.52mmol)溶解在乙酸乙酯(10ml)中,加入3M氯化氢/乙酸乙酯(2.0ml,6.08mmol)。室温下搅拌该溶液1小时。用乙酸乙酯(10ml)稀释,用1N氢氧化钠溶液(30ml)萃取。水相用乙酸乙酯(3×10ml)萃取,合并有机相,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物溶于二氯甲烷(5ml)中。冷却溶液至0℃,加入三氟乙酸(5ml)。室温下搅拌溶液5分钟,真空除去溶剂。残余物溶于乙酸乙酯(10ml),用1N氢氧化钠(10ml)萃取。水相用乙酸乙酯(2×5ml)萃取。合并有机相,用硫酸镁干燥,真空除去溶剂。粗产品在硅胶(40g)上用二氯甲烷/甲醇/25%氨水100∶10∶1快速层析纯化,得到136mg(5R)-4-羟基-5-(甲基氨基)-6-苯基己基乙酸脂。
1H-NMR(CDCl3):δ=1.50-2.05(m,4H);2.07(s,3H);2.30(s,3H);2.55(dd,1H);2.65(td,1H);2.82(dd,1H);3.75(td,1H);4.15(m,2H);7.15-7.35(m,5H).
HPLC(方法B):17.87分(85%)
(5R)-5-({(2R)-2-[((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基}甲基氨基-4-羟基-6-苯基己基乙酸酯
0℃下将(5R)-4-羟基-5-(甲基氨基)-6-苯基己基乙酸酯(126mg,0.475mmol),(2R)-2-(叔丁氧羰基甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(313mg,0.95mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(65mg,0.475mmol)溶解在二氯甲烷/二甲基甲酰胺2∶1(9ml)中。加入N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(91mg,0.475mmol),0℃下搅拌混合物然后室温下搅拌48小时。用氮气流从混合物中蒸发二氯甲烷,加入乙酸乙酯。形成的溶液相继用5%碳酸氢钠水溶液(50ml)、水(50ml)、5%硫酸氢钾水溶液(50ml)和水(50ml)萃取。有机相用硫酸钠干燥,用旋转蒸发仪真空浓缩至干。将此干物质溶解在二氯甲烷(2ml)和三氟乙酸(2ml)中,反应10分钟,然后用氮气流浓缩成油状,将此油溶解在70%乙腈(1ml)中。加入1N盐酸(3ml)和水(47ml),立即冻结该混合物并冷冻干燥。将此冻干品溶于二氯甲烷/二甲基甲酰胺2∶1(9ml)中,加入(2E)-5-叔丁氧羰基氨基-5-甲基己-2-烯酸(231mg,0.95mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(129mg,0.95mmol)。将混合物冷却至0℃,加入N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(91mg)和二异丙基乙基胺(81μl,0.475mmol),0℃搅拌混合物1小时,然后室温下18小时。用氮气流从混合物中蒸发二氯甲烷,加入乙酸乙酯。形成的溶液相继用5%碳酸氢钠水溶液(50ml)、水(50ml)、5%硫酸氢钾水溶液(50ml)和水(50ml)萃取。有机相用硫酸钠干燥,用旋转蒸发仪真空浓缩至干。将此干物质溶解在二氯甲烷(2ml)和三氟乙酸(2ml)中,反应10分钟,然后用氮气流浓缩成油状,将此油溶解在70%乙腈(5ml)和水(45ml)中。
将(5R)-5-({(2R)-2-[((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基}甲基氨基-4-羟基-6-苯基己基乙酸酯粗品的15ml溶液冷却至0℃,搅拌下滴加1M氢氧化钠(15ml)。0℃下搅拌10分钟后,加入乙酸(2ml)和水(50ml)。在25mm×250mm 7μC-18硅胶柱上进行半制备性HPLC,从溶液中分离产物,柱子用0.05M硫酸铵(用4M硫酸调至pH2.5)中28%乙腈预平衡。40℃下以10ml/min的流速用0.05M硫酸铵(pH2.5,用4M硫酸调)中的28%-38%乙腈梯度洗脱47分钟,收集含肽流份,用3倍体积的水稀释,上样于一Sep-PakC18柱(Waters part.#:51910)上,该柱用0.1%三氟乙酸预平衡。用70%乙腈/0.1%三氟乙酸从Sep-Pak柱上洗脱肽,用水稀释后冷冻干燥从洗脱液中分离肽。
用分析型RP-HPLC(保留时间)和离子对吸收质谱(分子量)鉴定所得最终产物。用Bio-lon 20飞行时间质谱仪进行质谱测定。结果与预期结构相符(测得M+H+=560.2理论值,MH+=560.8)。
用214nm处紫外检测和Vydac 218TP54 4.6mm×250mm 5μC-18硅胶柱(“分离组”,Hesperia)进行RP-HPLC,用两种不同的洗脱条件在42℃下以1ml/分洗脱:
A1:用0.1M硫酸铵缓冲液(用4M硫酸调至pH2.5)中5%乙腈预平衡,用相同缓冲液中5%-60%乙腈梯度洗脱50分钟。
B1:用5%乙腈/0.1%三氟乙酸/水预平衡,用5%乙腈/0.1%三氟乙酸/水到60%的乙腈/0.1%三氟乙酸/水梯度洗脱50分钟。
洗脱条件A1和B1下的保留时间分别为:30.08分和31.78分。
实施例23:
3-氨基甲基-N-((1R)-1-{N-[(1R)-1-(2-羟基乙氧基甲基)-2-苯基乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基苯甲酰基
按方法K制备。
N-((1R)-1-(2-羟基乙氧基甲基)-2-苯基乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
将((2R)-2-(叔丁氧羰基甲基氨基)-3-苯基丙氧基)乙酸乙酯(0.50g,1.42mmol)溶于THF(4ml),滴加硼氢化锂(1.56ml,2.0M THF溶液,3.13mmol)。加入乙醇(8ml),室温下搅拌反应混合物16小时。用10%柠檬酸酸化该溶液至pH=4。真空除去溶剂,残余物溶于水(50ml)。用二氯甲烷(3×40ml)萃取溶液,合并有机相,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,粗产品在硅胶(30g)上用二氯甲烷/乙酸乙酯1∶1洗脱进行快速层析纯化,得到0.29g N-((1R)-1-(2-羟基乙氧基甲基)-2-苯基乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯。
1H-NMR(CDCl3):δ=1.32和1.41(两个s,共9H);2.50-2.85(m,5H);3.40-3.80(m,6H);4.40和4.60(两个br,共1H);7.10-7.35(m,5H).
2-((2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙氧基)乙醇
将N-((1R)-1-(2-羟基乙氧基甲基)-2-苯基乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.29g,0.90mmol)溶于二氯甲烷(3ml),加入三氟乙酸(1ml)。0℃下搅拌15分钟,真空除去溶剂。残余物溶解在二氯甲烷(10ml),用1N氢氧化钠(10ml)萃取。用硫酸镁干燥有机相。真空除去溶剂,得到0.11g 2-((2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙氧基)乙醇粗品,用于下步合成中。
HPLC(方法b):9.10分。
1H-NMR(CDCl3):δ=2.48(s,3H);2.75 (dd,1H);2.80-3.00(m,2H);3.40(dd,1H);3.45-3.65(m,3H);3.65-3.80(m,2H);7.15-7.35(m,5H).
将2-((2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙氧基)乙醇(91mg,0.435mmol)、(2R)-2-(叔丁氧羰基甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(215mg,0.653mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(HOAT)(89mg,0.653mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)和N,N-二甲基甲酰胺(5ml)中。冷却至0℃后,加入N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(125mg,0.653mmol),0℃下搅拌30分钟后,加入二异丙基乙基胺(75μl,0.435mmol)。室温下搅拌后,用氮气流除去二氯甲烷,加入乙酸乙酯(25ml)。用5%碳酸氢钠(2×25ml)、5%硫酸氢钾和水(25ml)洗涤该混合物。用硫酸镁干燥有机相,真空浓缩得到干燥残余物N-((1R)-1-N-((1R)-1-(2-羟基乙氧基甲基)-2-苯基乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(240mg)。将此N-((1R)-1-N-((1R)-1-(2-羟基乙氧基甲基)-2-苯基乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯的一半(120mg,0.230mmol)溶解在二氯甲烷(1ml)和三氟乙酸(1ml)中,反应10分钟,然后用氮气流浓缩成油状,将此油溶于70%乙腈(1ml)中。加入1N盐酸(1ml)和水(50ml),立即冻结该混合物并冷冻干燥。
将此冻干品溶于二氯甲烷(5ml),加入3-(叔丁氧羰基氨基甲基)苯甲酸(503mg,2.0mmol)和N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(192mg,1mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液,加入前该溶液已在0℃下反应了15分钟。最后,加入二异丙基乙基胺(171μl,1.0mmol),室温下搅拌72小时。用氮气流从混合物中蒸去二氯甲烷,加入乙酸乙酯(25ml)。形成的溶液相继用5%碳酸氢钠水溶液(2×25ml),水(25ml),5%硫酸氢钾水溶液(25ml)和水(25ml)萃取。有机相用硫酸钠干燥,在旋转蒸发仪上真空浓缩至干。将此干物质溶于二氯甲烷(2ml)和三氟乙酸(2ml),反应10分钟后,用氮气流浓缩成油。将此油溶于70%乙腈(5ml)和水(400ml)中。
用条件A1进行的分析型HPLC显示两个主峰:28.82分和35.67分,及一个小峰:29.98分。用Bio-lon20飞行时间质谱仪(Bio-lon Nordic AB,Uppsela,瑞典)进行离子对吸收质谱,结果显示该小成分是目标产物。质谱结果与预期结构相符(实测M+H=553.0,理论M+H=554.7)。其他两个产物来自合成过程中未保护羟基的酰化。
在填有7μC-18硅胶的25mm×250mm柱上分4次进行半制备性HPLC,分离这三个化合物,柱子用0.05M硫酸铵(用4M硫酸调至pH2.5)中37%乙腈预平衡40℃下以10ml/min的流速用0.05M硫酸铵(pH2.5,用4M硫酸调)中的37%-44%乙腈梯度洗脱47分钟,收集各化合物流份,用3倍体积的水稀释,上样于一Sep-PakC-18柱上(Waters part#51910)上,该柱用1%三氟乙酸预平衡。用70%乙腈/0.1%三氟乙酸从Sep-Pak柱上洗脱产物,用水稀释后冷冻干燥从洗脱液中分离产物。
将相应于两主峰的化合物皂化除去不必要的酰化,以提高目标化合物的收率。将这些化合物溶于0.066N氢氧化钠1.5ml中,15分钟后用1N盐酸中和。然后用与上述相似的方法经半制备HPLC分离目标化合物。
用分析型RP-HPLC(保留时间)鉴定所得最终产物。用214nm处紫外检测和Vydac 218TP544.6mm×250mm 5μC-18硅胶柱(“分离组”,Hesperia)进行RP-HPLC分析,用两种不同的洗脱条件在42℃下以1ml/分洗脱:
A1:用0.1M硫酸铵缓冲液(用4M硫酸调至pH2.5)中5%乙腈预平衡,用相同缓冲液中5%-60%乙腈梯度洗脱50分钟。
B1:用5%乙腈/0.1%三氟乙酸/水预平衡,用5%乙腈/0.1%三氟乙酸/水到60%的乙腈/0.1%三氟乙酸/水梯度洗脱50分钟。
洗脱条件A1和B1下的保留时间分别为:29.87分和34.28分。
实施例24:
哌啶-4-羧酸((1R,2E)-4-羟基甲基-5-(2-萘基)-1-((2-萘基)甲基)戊-2-烯基)酰胺
((1R)-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-1-((2-萘基)甲基)-5-(2-萘基)戊-2-烯基)氨基甲酸叔丁酯
按实施例9制备该化合物。用((1R)-1-苯磺酰基甲基-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.71g,8.74mmol)和2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-3-(2-萘基)丙醛(4.3g,13.11mmol)作为起始物。在硅胶(5×25cm)上用乙醚/庚烷1∶3洗脱进行层析,得到2.20g((1R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-1-((2-萘基)甲基)-5-(2-萘基)戊-2-烯基)氨基甲酸叔丁酯异构体混合物。
1H-NMR(CDCl3)(选择的峰)δ0.0-0.05(四个s,6H),0.85-0.95(四个s,9H),1.30-1.40(三个s,9H),5.2-5.5(m,2H)(3E,5R)-5-氨基-6-(2-萘基)-2-((2-萘基)甲基)己-3-烯-1-醇
将((1R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-1-((2-萘基)甲基)-5-(2-萘基)戊-2-烯基)氨基甲酸叔丁酯(2.20g,3.60mmol)溶于乙腈(100ml)和氟化氢水溶液(48%,4.5ml)的混合物中。搅拌3小时后,加入乙酸乙酯(200ml)和碳酸钠水溶液(10%,200ml)的混合物。分离各相,有机相用硫酸镁干燥,真空蒸发。残余物在硅胶(4×38cm)上用乙酸乙酯(85%)、乙醇(14%)和浓氨水(1%)的混合物进行层析。这样分离了两个紧邻的斑点。先洗脱的点在HPLC上为单峰,而后洗脱的点含有几个异构体。第一成分为E-型,220mg(3E,5R)-5-氨基-6-(2-萘基)-2-((2-萘基)甲基)己-3-烯-1-醇用于下步反应。
1H-NMR(CDCl3)δ1.45(s(br),3H);2.55-2.92(m,5H);3.35-3.68(m,3H);5.37(dd,ABX系统的一部分.,J1=15Hz,J2=7Hz,1H),5.52(dd,ABX系统的一部分,J1=15Hz,J2=5Hz,1H),7.15-7.84(m,14H).(N-叔丁氧羰基-哌啶-4-羧酸((1R,2E)(4-羟基甲基)-5-(2-萘基)-1-(2-萘基)甲基)戊-2-烯基)酰胺
将N-叔丁氧羰基哌啶-4-羧酸(378mg,0.991mmol)和EDAC(198mg,1.038mmol)溶于二氯甲烷(15ml),搅拌15分钟。加入(3E,5R)-5-氨基-6-(2-萘基)-2-((2-萘基)甲基)己-3-烯-1-醇(180mg,0.472mmol),搅拌混合物6小时。用硫酸氢钠(10%,10ml)和碳酸氢钠(饱和,15ml)洗涤有机相,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物在硅胶(30×2.5cm)上用乙酸乙酯/庚烷1∶1洗脱进行层析,得到220mg N-叔丁氧羰基-哌啶-4-羧酸((1R,2E)-4-(羟基甲基)-5-(2-萘基)-1-((2-萘基)甲基)戊-2-烯基)酰胺。
1H-NMR(CDCl3):δ:1.35-1.55(m,(sat1.45);15H);1.93-2.01(m,1H);2.55-2.68(m,4H);2.70-2.90(m,2H);3.01(dd,1H);3.38(dd,1H);3.55(d(br),1H);4.67(p,1H);5.18(d,1H);5.31(dd,1H),5.37(dd,1H),7.15-7.79(m,14H).
将(N-叔丁氧羰基-哌啶-4-羧酸((1R,2E)-4-(羟基甲基)-5-(2-萘基)-1-((2-萘基)甲基)戊-2-烯基)酰胺(220mg,0.371mmol)溶于二氯甲烷(5ml)和三氟乙酸(5ml)中,搅拌90分钟。真空除去挥发性物质,加入二氯甲烷(20ml)并真空除去,重复3次,得到170mg标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)(选择的峰)δ4.60(1H);5.43(m,2H);7.00-7.77(14H),8.7和9.05(s(br),2H).
ESMS:(M+H)+:493.2
HPLC(A1):Rt=36.15min.
实施例25
哌啶-4-羧酸((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基氨基甲酰基)乙基)酰胺
((1R)-2-(2-萘基)-1-(苯乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
将D-叔丁氧羰基-(2-萘基)丙氨酸(5.0g,15.85mmol)溶于无水二氯甲烷(80ml),加入HOBT(2.14g,15.85mmol)和EDAC(3.34;17.43mmol),搅拌15分钟。加入苯乙胺(2.0ml,15.85mmol),室温下搅拌24小时。加入二氯甲烷(200ml),有机层用水(100ml)和碳酸氢钠(饱和,100ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物在硅胶(3.5×40cm)上用二氯甲烷/乙酸乙酯(6∶1)洗脱进行层析,得到4.95g((1R)-2-(2-萘基)-1-(苯乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。
H-NMR(CDCl3):δ:1.39(s,9H);2,52(m,1H);2.64(m,1H);3.15(dd,1H);3.23(dd,1H);3.36(m;1H);3.45(m,1H);4.31(dd,1H);5.08(s(br);1H);5.62(s(br);1H);6.85-7.82(12芳氢.)((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
将((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.20g,5.26mmol)溶于无水THF(50ml)中。加入三苯膦(2.76g,10.52mmol)、偶氮二羧酸二乙酯(1.66g,10.52mmol)和三甲基甲硅烷基叠氮化物(1.22g,10.52mmol)。室温下搅拌反应混合物过夜。硝酸铈铵(23.06g;21.04mmol)溶于水(400ml),滴加到反应混合物中。加入THF(120ml),用二氯甲烷(3×300ml)萃取反应混合物。用硫酸镁干燥有机层,真空除去溶剂。残余物在硅胶(5×40cm)上用乙酸乙酯/庚烷(1∶1)作为洗脱剂进行层析,得到0.30g((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。
H-NMR(CDCl3)δ1.32(s,9H);2.72(m,1H);2.98(m,1H);3.13(dd;1H);3.41(dd,1H);4.42(t,2H);4.99(dd;1H);5.12(d,1H);6.82-7.80(12芳香.H)
(1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基胺
将((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.30g,0.68mmol)溶于二氯甲烷(20ml),加入三氟乙酸(2ml)。室温下搅拌该混合物3小时。真空除去溶剂,残余物溶于二氯甲烷(50ml),用碳酸氢钠(10%,30ml)洗涤。用硫酸镁干燥有机相,真空蒸发溶剂。残余物在硅胶(2.5×15cm)上用乙酸乙酯作为洗脱剂进行层析,得到170mg(1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基胺。
H-NMR(CDCl3)δ1.75(s(br);2H);3.00(m 2H);3.09(d,2H);3.92(t,1H);4.25(m,2H);6.85-7.85(12芳香.H).
((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
D-叔丁氧羰基-(2-萘基)丙氨酸(0.129g,0.408mmol)溶于二氯甲烷(10ml),加入HOBT(55mg,0.408mmol)和EDAC(86mg;0.449mmol),室温搅拌该混合物15分钟。加入(1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基胺(141mg,0.408mmol),搅拌混合物过夜。加入二氯甲烷(25ml),有机相用碳酸氢钠(10%,25ml)、硫酸氢钠(10%;25ml)和水(25ml)洗涤。用硫酸镁干燥有机相,真空除去溶剂,得到237mg((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
H-NMR(CDCl3)δ1.30(s,9H);2.75(m,1H);2.95(m,4H);3.33(dd,1H);4.15(m,2H);4.30(m,1H);4.65(d(br),1H);5.18(dd,1H);6.60-7.85(19芳香.H).
(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基)丙酰胺
将((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(215mg,0.34mmol)溶于二氯甲烷(4ml)和三氟乙酸(2ml)的混合物中,室温下搅拌30分钟。真空除去溶剂,残余物溶于乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液(10%,10ml)中。分离各相,用硫酸镁干燥有机相,真空除去溶剂。残余物在硅胶(3×20cm)上用乙酸乙酯洗脱进行层析,得到152mg(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1 H-四唑-5-基)乙基)丙酰胺
H-NMR(CDCl3)δ2.16(dd,1H);2.80-3.15(m,4H);3.35-3.55(m,2H);4.48(dd,2H);5.19(dd,1H);6.90-8.02(21H)
4-((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基氨甲酰基)乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
N-叔丁氧羰基哌啶-4-羧酸(68mg,0.296mmol)溶于二氯甲烷(7ml),加入HOBT(40mg,0.296mmol)和EDAC(62mg;0.326mmol),室温下搅拌混合物15分钟。加入(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基)丙酰胺(152mg;0.296mmol),继续搅拌过夜。加入二氯甲烷,有机相用碳酸氢钠水溶液(25ml)、硫酸氢钠水溶液(10%,25ml)和水(25ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,得到170mg 4-((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基基氨甲酰基)乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。
H-NMR(CDCl3)δ1.25-1.52(m和s,13H);1.79(m,1H);2.58(m,2H);2.75(m,1H);2.86(dd,1H);2.96(dd,1H);3.05(d,2H);3.27(dd,1H);3.98(m,2H);4.15(m,2H);4.57(dd,1H);5.04(dd,1H);5.72(d(br);1H);6.53(d(br);1H);6.71-7.80(19芳香.H)
将4-((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-(1-苯乙基-1H-四唑-5-基)乙基氨基甲酰基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(164mg,0.218mmol)溶于二氯甲烷(6ml)和三氟乙酸(3ml)中,室温下搅拌20分钟。真空除去溶剂,加入二氯甲烷(10ml),有机相用碳酸氢钠水溶液(10%,10ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物溶于乙酸乙酯(5ml)中,加入氯化氢/乙酸乙酯(3M,2ml)。真空除去溶剂,残余物溶于甲醇(5ml)并蒸发,用二氯甲烷重复3次,得到110mg标题化合物盐酸盐。
H-NMR(CDCl3)(选择的峰)δ2.50(m,2H);2.73(m,1H);2.89-3.09(m,7H);3.31(dd,1H);4.21(m,2H);4.68(dd,1H);5.10(dd,1H);6.70-7.75(19芳香.H)
HPLC:Rt=38.07min(A1)
实施例26:
哌啶-4-羧酸N-甲基-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基氨基甲酰基)乙基)酰胺
(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸甲酯
将(2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酸(10.0g,32.79mmol)溶于无水DMF(100ml)中。加入碘甲烷(12.25ml,196.72mmol)和氧化银(26.6g,114.75mmol)。室温下搅拌反应混合物12小时,过滤,向滤液中加入二氯甲烷(400ml)。有机相用氰化钾水溶液(5%;2×100ml)和水(3×150ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,得到10.9g(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸甲酯。
H-NMR(CDCl3)δ(旋光异构体混合物)1.30,1.35(两个s,9H);2.71,2.74(两个s,3H);3.45,3.19(两个m,2H);3.72,3.74(两个s,3H);4.65,5.06(两个dd,1H);7.30-7.80(7芳香.H)
(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸
将(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸甲酯(15.0g,43.73mmol)溶于二噁烷(150ml)中,在冰浴上冷却。加入水(115ml)和氢氧化锂(1.15g,48.10mmol)。室温下搅拌反应混合物4小时,加入乙酸乙酯(300ml)和水(200ml)。加入硫酸氢钠直至酸性(pH=2.5)。有机相用水(200ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,得到13.5g(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸。
H-NMR(CDCl3)δ(旋光异构体混合物)1.30,1.47(两个s,9H);2.66,2.78(两个s,3H);3.21,3.38(两个dd,1H);3.48,3.51(两个d,1H);4.75,4.83(两个dd,1H);7.31-7.82(7芳香.H).((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基)氨基甲酸叔丁酯
将(2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酸酰胺(1.058g,3.36mmol)和2,4-二(4-甲氧基苯基)-1,3-二硫杂-2,4-二磷杂丁环-2,4-二硫化物(Lawesson’s试剂)(0.71g,1.76mmol)溶于二恶烷(6ml)。60℃下加热反应混合物30分钟,室温下搅拌12小时。真空除去溶剂,向残余物中加入水/碳酸氢钠混合物(1∶1,15ml),室温下搅拌30分钟。过滤该混合物,固体用水(2×5ml)洗涤,在硅胶(2×15cm)上用乙酸乙酯/庚烷(2∶1)层析,得到0.914g((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基)氨基甲酸叔丁酯。
H-NMR(CDCl3)δ1.44(s,9H);3.28(m,2H);4.74(dd,1H);4.94(d(br),1H);7.35-7.79(7芳香.H).
(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)硫代丙酰胺
将((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.45g,1.36mmol)溶于二氯甲烷(1.5ml)和三氟乙酸(1.5ml)中。室温下搅拌反应混合物40分钟。真空除去溶剂,残余物溶于二氯甲烷中。加入碳酸氢钠水溶液直至碱性,水相用二氯甲烷(3×15ml)萃取。合并有机相,用硫酸镁干燥,真空除去溶剂,得到0.311g(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)硫代丙酰胺。
1H-NMR(CDCl3)δ2.36(dd,1H);3.79(dd,1H);4.19(dd,1H);7.40-7.85(7芳香.H).
N-甲基-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
将(2R)-2-氨基-3-(2-萘基)硫代丙酰胺(0.290g,1.2mmol)、(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(0.436g,1.3mmol)、HOBT(0.176g,1.3mmol)和EDAC(0.267g,1.4mmol)溶于二氯甲烷(20ml),室温下搅拌12小时。加入二氯甲烷(40ml),有机相用硫酸氢钠水溶液(10%,40ml)、碳酸氢钠水溶液(饱和,40ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,得到0.53g
N-甲基-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。
H-NMR(CDCl3)δ(旋光异构体混合物,选择的峰)1.28(s,9H);2.45,2.51(两个s,3H);4.90(m,1H);5.12,5.20(两个m,1H).(2R)-2-甲基氨基-3-(2-萘基)-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基)丙酰胺
将N-甲基-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.25g,0.462mmol)溶于二氯甲烷(1.5ml)中,加入三氟乙酸(1.5ml)。室温下搅拌反应混合物1小时。真空除去溶剂,残余物溶于二氯甲烷(5ml)中,用碳酸氢钠水溶液(5ml)洗涤。用硫酸镁干燥有机相,真空除去溶剂,得到0.201g(2R)-2-甲基氨基-3-(2-萘基)-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基)丙酰胺。
H-NMR(CDCl3)δ2.16(s,3H);2.46(dd,1H);3.07(dd,1H);3.20-3.41(m,4H);5.09(dd,1H);7.12-8.13(m,16H)
4-(N-甲基-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将N-叔丁氧羰基哌啶-4-羧酸(97mg,0.424mmol)溶于二氯甲烷(2ml),加入HOAT(58mg,0.424mmol)和EDAC(85mg,0.444mmol)。室温下搅拌反应混合物15分钟。加入溶于2ml二氯甲烷的(2R)-2-甲基氨基-3-(2-萘基)-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基)丙酰胺(17mg,0.386mmol)。加入二异丙基乙基胺(0.073ml,0424mmol),室温下搅拌反应混合物12小时。加入叔丁基甲基醚(25ml),反应混合物用水(25ml)、碳酸氢钠水溶液(15ml)、硫酸氢钠水溶液(10%;15ml)、水(15ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物在硅胶(3.5×30cm)上层析乙酸乙酯/庚烷(1∶1)到乙酸乙酯/庚烷(2∶1)的梯度洗脱,得到0.190g
4-(N-甲基-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。
H-NMR(CDCl3)δ(旋光异构体混合物,选择的峰):1.40,1.42(两个s,9H);2.49,2.70(两个s,3H);3.10(dd,1H);3.48(dd,1H);5.00,5.09(两个dd,1H)
将4-(N-甲基-N-((1R)-2-(2-萘基)-1-((1R)-2-(2-萘基)-1-硫代氨基甲酰基乙基氨基甲酰基)乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.190g,0.291mmol)溶于二氯甲烷(5ml)。加入三氟乙酸(5ml),室温下搅拌反应混合物15分钟。真空除去溶剂,残余物溶于二氯甲烷中再蒸发(2×5ml)。残余物在硅胶(2×30cm)上层析,用25%氨水/乙醇/二氯甲烷(1∶9∶90)洗脱,得到57mg标题化合物。
ESMS:(M+H)+:553.2
HPLC(A1):Rt=29.4分钟。
实施例27:
哌啶-4-羧酸((1R)-1-((1R)-1-(4-氨基甲酰基-5-苯基-1,3-噻唑-2-基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
2-氨基-3-氧代-3-苯基丙酸甲酯
将无水四氢呋喃(250ml)冷却至-78℃,加入溶于无水THF(100ml)中的叔丁醇钾(6.37g,56.72mmol)。加入(二苯亚甲基氨基)乙酸 甲酯(14.35g,56.72mmol),-78℃下搅拌反应混合物30分钟。滴加苯甲酰氯(6.59g,56.72mmol),-78℃下搅拌30分钟。滴加盐酸(1.0M,175ml),加热反应混合物至室温,真空除去2/3的溶剂。加入水(700ml),反应混合物用乙醚(400ml)洗涤。真空蒸发水相,残余物溶于甲醇并蒸发(2×150ml)。加入甲醇(80ml),过滤混合物,真空蒸发滤液。残余物在四氢呋喃/乙醚中重结晶,得到8.86g 2-氨基-3-氧代-3-苯基丙酸甲酯盐酸盐。
H-NMR(DMSO)δ3.66(s,3H);6.25(s,1H);7.57-8.17(5芳香.H);9.20(s(br);3H).
2-((2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰基氨基)-3-氧代-3-苯基丙酸甲酯
将(2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酸(5.49g,17.42mmol)溶于无水四氢呋喃(200ml)中,加入N-甲基吗啉(1.92ml,17.42mmol)。冷却反应混合物至-20℃,搅拌15分钟。将氯代甲酸异丁酯(2.27ml,17.42mmol)溶于无水四氢呋喃(3ml),-20℃下滴加到反应混合物中。加入N-甲基吗啉(1.92ml,17.42mmol)和2-氨基-3-氧代-3-苯基丙酸甲酯(4.0g,17.42mmol),-20℃下搅拌混合物30分钟。加热反应混合物至室温,真空除去溶剂。残余物溶于二氯甲烷(200ml),用水(200ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物在硅胶(5×45cm)上层析,用庚烷/乙酸乙酯/二氯甲烷(2∶1∶1)洗脱,得到6.19g 2-((2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰基氨基)-3-氧代-3-苯基丙酸甲酯非对映异构体混合物。
H-NMR (CDCl3)δ1.48(s,9H);3.28(m,2H);3.59,3.67(两个s,3H);4.58(s(br),1H);5.00,5.03(两个m,1H);6.13,6.17(两个d,1H);7.28-8.12(m,13H).
2-((1R)-1-叔丁氧羰基氨基-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸甲酯
将2-((2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酰基氨基)-3-氧代-3-苯基丙酸甲酯(2.2g,4.069mmol)和2,4-二(4-甲氧苯基)-1,3-二硫杂-2,4-二磷杂丁环-2,4-二硫化物(Lawesson’s试剂)(4.1g,10.17mmol)在50ml THF中回流6小时。真空除去溶剂,残余物在硅胶(4×40cm)上层析,用乙酸乙酯/庚烷(1∶1)洗脱,残余物在乙酸乙酯/庚烷(1∶1;50ml)中重结晶,得到1.45g 2-((1R)-1-叔丁氧羰基氨基-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸甲酯。
H-NMR(CDCl3)δ1.39(s,9H);3.48(dd(br);1H);3.55(dd,1H);3.85(s,3H);5.26(s(br),1H);5.38(m,1H);7.24-7.81(12芳香H).
2-((1R)-1-叔丁氧羰基氨基-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-
1.3噻唑-4-羧酸
将2-((1R)-1-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸甲酯(0.35g,0.716mmol)溶于乙醇(99%,40ml),加入氢氧化锂(0.122g,4.654mmol)。室温下搅拌反应混合物12小时。真空除去溶剂,残余物溶于水(50ml)和乙醚(50ml)。用硫酸氢钠(10%)酸化该溶液,用硫酸镁干燥有机相。真空除去溶剂,得到0.185g 2-((1R)-1-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸
H-NMR(DMSO)δ1.24(s,9H);3.20(dd,1H);3.55(dd,1H);5.11(m,1H);7.48-7.93(12芳香.H)
2-((1R)-1-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸酰胺
将2-((1R)-1-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸(0.17g,0.362mmol)溶于二氯甲烷(8ml)中。加入1-羟基苯并三唑(0.049g,0.362mmol)和N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.083g,0.434mmol)。室温下搅拌反应混合物15分钟。加入碳酸氢铵(0.057g,0.724mmol),室温下搅拌反应混合物12小时。加入二氯甲烷(20ml),反应混合物用碳酸氢钠(10%,10ml)、硫酸氢钠(5%,2×10ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物在硅胶(2×15cm)上层析,用乙酸乙酯/庚烷(1∶1)洗脱,得到0.155g 2-((1R)-1-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸酰胺
1H-NMR(CDCl3)δ1.38(s,9H);3.39-3.52(m,2H);5.17(d(br),1H);5.35(m,1H);5.52(s(br);1H);7.15(s(br);7.22-7.82(12芳香.H).
2-((1R)-1-氨基-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸酰胺
将2-((1R)-1-叔丁氧羰基氨基-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸酰胺(0.155g,0.327mmol)溶于二氯甲烷(4ml),加入三氟乙酸(4ml)。室温下搅拌反应混合物1小时,真空除去溶剂。将残余物溶于二氯甲烷并蒸发(2×2ml)。残余物溶于乙醚中,加入盐酸(1N,3ml)和甲醇(10ml)。真空除去溶剂,得到0.106g 2-((1R)-1-氨基-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸酰胺
1H-NMR(CDCl3)(选择的峰)δ3.45-3.60(m,2H);5.28(m,1H).((1R)-1-((1R)-1-(4-氨基甲酰基-5-苯基-1,3-噻唑-2-基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
将(2R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酸(0.107g,0.341mmol)溶于二氯甲烷/二甲基甲酰胺(5∶1,20ml)中。加入1-羟基苯并三唑(0.046g,0.341mmol)和N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.071g,0.369mmol)。室温下搅拌反应混合物15分钟,加入2-((1R)-1-氨基-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸酰胺(0.106g,0.284mmol)。室温下搅拌反应混合物12小时,用水(20ml)、硫酸氢钠(10%,20ml)、碳酸氢钠(饱和,20ml)、水(20ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物在硅胶(2×15cm)上层析,乙酸乙酯/庚烷(2∶1)洗脱,得到0.22g((1R)-1-((1R)-1-(4-氨基甲酰基-5-苯基-1,3-噻唑-2-基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。
1H-NMR(CDCl3)(选择的峰)δ1.32(s,9H);3.13-3.41(m,4H);4.42(dd,1H);5.56(dd,1H).
2-((1R)-1-((2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰基氨基)-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸酰胺
将((1R)-1-((1R)-1-(4-氨基甲酰基-5-苯基-1,3-噻唑-2-基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.22g,0.328mmol)溶于二氯甲烷(2.5ml),加入三氟乙酸(2.5ml)。室温下搅拌反应混合物1小时,真空除去溶剂。将残余物溶解在二氯甲烷中并蒸发(2×5ml)。残余物溶于二氯甲烷(10ml),用碳酸氢钠(饱和,10ml),水(10ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,得到0.155g 2-((1R)-1-((2R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酰基氨基)-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸酰胺
H-NMR (CDCl3)δ2.55(dd,1H);3.22(dd,1H);3.40(dd,1H);3.52(dd,1H);3.69(dd,1H);5.53(s(br),1H);5.67(dd,1H);7.13-8.12(m,22H).
4-(((1R)-1-((1R)-1-(4-氨基甲酰基-5-苯基-1,3-噻唑-2-基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将N-叔丁氧羰基哌啶-4-羧酸(0.140g,0.612mmol)溶于二氯甲烷(5ml),加入N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.058g,0.306mmol)。室温下搅拌反应混合物15分钟。将2-((1R)-1-((2R)-2-(氨基-3-(2-萘基)丙酰基氨基)-2-(2-萘基)乙基)-5-苯基-1,3-噻唑-4-羧酸酰胺(0.155g,0.278mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中,并加入到反应混合物中。室温下搅拌8小时,用水(20ml)、碳酸氢钠(饱和,20ml)洗涤,用硫酸镁干燥。真空除去溶剂,残余物在硅胶(2.5×30cm)上层析,用乙酸乙酯洗脱,得到0.171g 4-(((1R)-1-((1R)-1-(4-氨基甲酰基-5-苯基-1,3-噻唑-2-基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。
1H-NMR(CDCl3)(选择的峰)δ1.44(s,9H);2.81(t,1H);3.12(m,2H);3.42(dd,1H);3.85-4.02(m,4H);4.88(dd,1H);5.52(dd,1H);
将4-(((1R)-1-((1R)-1-(4-氨基甲酰基-5-苯基-1,3-噻唑-2-基)-2-(2-萘基)乙基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.171g,0.219mmol)溶于二氯甲烷/三氟乙酸(1∶1,10ml)中,室温下搅拌20分钟。真空除去溶剂,残余物溶于二氯甲烷并真空蒸发计三次(3×5ml),得到0.175g标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)(选择的峰)δ3.37(m,2H);3.44(dd;1H);4.80(m,1H);5.55(dd,1H).
ESMS:(M+H)+:682.4
HPLC:(方法B):Rt=35.08min.
按实施例21的相同方法,用甲基胺代替苄基胺,可制备下述化合物:
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸{1-[N-(1-(3-甲基氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基}酰胺
按实施例21的相同方法,用二甲基胺代替苄基胺,可制备下述化合物:
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸{1-[N-(1-(3-二甲基氨基甲酰基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基}酰胺
按实施例K的方法,类似于实施例23但用(2E)-5-叔丁氧羰基氨基-5-甲基己-2-酸代替3-叔丁氧羰基氨基甲基苯甲酸,可制备下述化合物:
(2E)-5-氨基-5-甲基-N-((1R)-1-(N-((1R)-1-(2-羟基乙氧基甲基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基己-2-烯酸酰胺
类似于实施例23,但用甲基溴化镁代替硼氢化锂、用(2E)-5-叔丁氧羰基氨基-5-甲基己-2-酸代替3-叔丁氧羰基氨基甲基苯甲酸,可制备下述化合物:
(2E)-5-氨基-5-甲基-N-((1R)-1-(N-((1R)-1-(2-羟基-2-羟基丙氧基甲基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基己-2-烯酸