CN111499673A

CN111499673A - 一种松果菊苷的制备方法

Info

Publication number: CN111499673A
Application number: CN201910092654.4A
Authority: CN
Inventors: 田军; 易斌; 姜海燕; 肖艳皎; 刘月帅; 颜凡莉; 罗丽莲
Original assignee: Jianchangbang Pharmacy Co ltd
Current assignee: Jianchangbang Pharmacy Co ltd
Priority date: 2019-01-30
Filing date: 2019-01-30
Publication date: 2020-08-07
Anticipated expiration: 2039-01-30
Also published as: CN111499673B

Abstract

本发明涉及中药技术领域，特别涉及一种松果菊苷的制备方法。该制备方法包括：将管花肉苁蓉粗粉用提取溶剂进行提取，得到滤液和药渣；将药渣用提取溶剂提取2次，合并滤液，浓缩，加水得到粗提物水溶液；将粗提物水溶液加入大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应后，用16％～60％的乙醇水溶液洗脱并收集洗脱液，取松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，浓缩至在80℃条件下相对密度为1.0～1.25，1～15℃条件下放置0.5～72h，析出结晶，减压干燥后得到松果菊苷。本发明所制得的松果菊苷转移率及纯度较高。即便肉苁蓉药材中松果菊苷的含量较低的情况下，也能够获得较高的转移率和纯度，对肉苁蓉药材的要求低。

Description

一种松果菊苷的制备方法

技术领域

本发明涉及中药技术领域，特别涉及一种松果菊苷的制备方法。

背景技术

松果菊苷(Echinacoside)，别名松果菊甙、海胆苷，分子式为C₃₅H₄₆O₂₀，结构式如式I，CAS登记号82854-37-3，其为管花肉苁蓉提取物之一。主要功效：补肾阳；益精血；润肠道。主肾阳虚衰；精血不足之阳痿；遗精；白浊；尿频余沥；腰痛脚弱；耳鸣目花；月经衍期；宫寒不孕；肠燥便秘。松果菊苷为一种天然化合物，具有许多生物学效应，如神经保护作用、肝脏保护作用、抗肿瘤、抗凋亡、抗衰老、免疫调节和促进生殖的作用，同时还有降糖、降脂、促进骨骼形成及预防动脉硬化的作用等。

松果菊苷主要以管花肉苁蓉为原材料，经过加工、提取和精制而得到。申请号为CN200410069054.X的发明提供了一种从肉苁蓉药材中提取、分离松果菊苷的方法，该方法为将干净的肉苁蓉药材粉碎，用水或/和有机溶剂溶剂进行提取。提取液浓缩后，经大孔吸附树脂柱分离，先用水洗脱除去部分杂质，再用5-15％(V/V)甲醇水溶液或乙醇水溶液洗脱除去部分杂质，最后用20-35％(V/V)甲醇水溶液或乙醇水溶液进行洗脱。在洗脱的过程中用HPLC进行监控，当有效成分松果菊苷的纯度降到85％以下时，停止洗脱，合并高浓度的洗脱液，浓缩、干燥，即制得其有效成分松果菊苷。但该种方法对肉苁蓉药材中松果菊苷的含量要求比较高，并且所得松果菊苷纯度不高，转移率较低。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种松果菊苷的制备方法。本发明所制得的松果菊苷转移率及纯度较高。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种松果菊苷的制备方法，包括如下步骤：

步骤1：将管花肉苁蓉药材粉碎，所得粗粉用提取溶剂进行提取，得到滤液和药渣；提取溶剂为水或乙醇水溶液；

步骤2：将药渣用提取溶剂提取2次，提取溶剂为水或乙醇水溶液；合并滤液，减压回收乙醇并浓缩至在70℃条件下相对密度为1.05～1.30，加水得到粗提物水溶液；

步骤3：将粗提物水溶液加入大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应后，用体积百分含量为5％～15％的乙醇水溶液洗脱2～4个柱床体积，再用16％～60％的乙醇水溶液洗脱并收集洗脱液，取松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至在80℃条件下相对密度为1.0～1.25，1～15℃条件下放置0.5～72h，析出结晶，减压干燥后得到松果菊苷。

作为优选，步骤1中粗粉与提取溶剂的体积比为1：(4～10)，提取的次数为1次，提取的温度为80～110℃，提取时间为0.5～2h；所述大孔吸附树脂型号为X-5、AB-8、NK-2、NKA-2、NK-9、WLD、D3520、D101、D201、D301、D113、D001、D203、D296、D354、D213、SP70、D101B、XDA-1、XDA-1B、XDA-7、H-10、H-20、H-30、H-40、H-50、H-60、DA-201、Dm-301、HPD-100、HPD-400、Dm130、H-103中的一种或几种。

优选地，步骤1中粗粉与提取溶剂的体积比为1：6，提取的次数为1次，提取的温度为100℃，提取时间为1h。

作为优选，步骤2中药渣与提取溶剂的体积比为1：(3～10)，提取的次数为2次，提取的温度为80～110℃，提取时间为0.5～2h。

优选地，步骤2中药渣与提取溶剂的体积比为1：4，提取的次数为2次，提取的温度为100℃，提取时间为1h。

作为优选，步骤2中减压回收乙醇并浓缩至在70℃条件下相对密度为1.10～1.30。

作为优选，步骤1和/或步骤2的提取溶剂为乙醇水溶液，合并滤液与浓缩之间还包括减压回收乙醇的步骤。

作为优选，步骤1中乙醇水溶液的体积百分含量为70％～90％。

作为优选，步骤2中乙醇水溶液的体积百分含量为70％～90％。

优选地，步骤1中乙醇水溶液的体积百分含量为80％，

优选地，步骤2中乙醇水溶液的体积百分含量为80％。

作为优选，粗提物水溶液的浓度为0.1～3.0g药材/mL。

优选地，粗提物水溶液的浓度为0.6g药材/mL。

作为优选，用体积百分含量为5％～15％的乙醇水溶液洗脱2～4个柱床体积为：用体积百分含量为10％的乙醇水溶液洗脱2～4个柱床体积。

更优选地，用体积百分含量为5％～15％的乙醇水溶液洗脱2～4个柱床体积为：用体积百分含量为10％的乙醇水溶液洗脱3个柱床体积。

作为优选，用16％～60％的乙醇水溶液洗脱为：用22％的乙醇水溶液洗脱。

作为优选，析出结晶与减压干燥之间还包括纯化的步骤，纯化为1～15℃水冲洗滤饼，或者为加40～100℃水溶解后重结晶。

优选地，析出结晶与减压干燥之间还包括纯化的步骤，纯化为4℃水冲洗滤饼，或者为加60℃水溶解后重结晶。

作为优选，粗粉的粒径0.1～3.0cm。

优选地，粗粉的粒径0.5～1.5cm。

作为优选，步骤3中减压干燥的温度为40～100℃。

优选地，步骤3中减压干燥的温度为50℃。

本发明提供了一种松果菊苷的制备方法。该制备方法包括：将管花肉苁蓉药材粉碎，所得粗粉用提取溶剂进行提取，得到滤液和药渣；提取溶剂为水或乙醇水溶液；将药渣用提取溶剂提取2次，提取溶剂为水或乙醇水溶液；合并滤液，减压回收乙醇并浓缩至在70℃条件下相对密度为1.05～1.30，加水得到粗提物水溶液；将粗提物水溶液加入大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应后，用体积百分含量为5％～15％的乙醇水溶液洗脱2～4个柱床体积，再用16％～60％的乙醇水溶液洗脱并收集洗脱液，取松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至在80℃条件下相对密度为1.0～1.25，1～15℃条件下放置0.5～72h，析出结晶，减压干燥后得到松果菊苷。本发明具有的技术效果为：

本发明所提供的松果菊苷的制备方法，所制得的松果菊苷转移率及纯度较高。即便肉苁蓉药材中松果菊苷的含量较低的情况下，也能够获得较高的转移率和纯度，对肉苁蓉药材的要求低。

具体实施方式

本发明公开了一种松果菊苷的制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明提供的松果菊苷的制备方法中所用原料药或试剂、耗材均可由市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1

取松果菊苷含量为15％的管花肉苁蓉药材1kg，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用6倍生药量的80％乙醇提取1小时，滤过，滤液备用。药渣再加4倍药材量80％乙醇提取2次，每次1小时，滤过。合并3次滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.13(70℃)，加水使其成浓度为0.6g药材/ml，徐徐注入已处理好的AB-8大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用10％乙醇洗脱3个柱床体积，再用22％乙醇洗脱并收集洗脱液，取HPLC测得松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.04(80℃)，4℃冷藏12小时，析出结晶，抽滤，4℃冷水冲洗滤饼，弃去滤液，滤饼50℃减压干燥，粉碎，得松果菊苷转移率58.2％，纯度为99.2％。

比较例1-1

取松果菊苷含量为15％的管花肉苁蓉药材1kg，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用6倍生药量的80％乙醇提取1小时，滤过，滤液备用。药渣再加4倍药材量80％乙醇提取2次，每次1小时，滤过。合并3次滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.12(70℃)，加水使其成浓度为0.6g药材/ml，徐徐注入已处理好的AB-8大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用10％乙醇洗脱3个柱床体积，再用22％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.02(80℃)，喷雾干燥(进口温度：185℃，出口温度：90℃)，得松果菊苷转移率51.3％，纯度为81.2％。

比较例1-2

取松果菊苷含量为15％的管花肉苁蓉药材，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用6倍生药量的80％乙醇提取1小时，滤过，滤液备用。药渣再加4倍药材量80％乙醇提取2次，每次1小时，滤过。合并3次滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.15(70℃)，加水使其成浓度为0.6g药材/ml，徐徐注入已处理好的AB-8大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用10％乙醇洗脱3个柱床体积，再用22％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷含量大于85％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05(80℃)，喷雾干燥(进口温度：185℃，出口温度：90℃)，得松果菊苷转移率17.5％，纯度为93.1％。

通过对比实施例1与比较例1-1及比较例1-2可知，本发明经过将4℃冷藏过夜，再重结晶，所制得的松果菊苷转移率及纯度较高。

实施例2

取松果菊苷含量为1％的管花肉苁蓉药材，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用6倍生药量的80％乙醇提取1小时，滤过，滤液备用。药渣再加4倍药材量80％乙醇提取2次，每次1小时，滤过。合并3次滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10(70℃)，加水使其成浓度为0.6g药材/ml，徐徐注入已处理好的AB-8大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用10％乙醇洗脱3个柱床体积，再用22％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.03(80℃)，4℃冷藏12小时，析出结晶，抽滤，4℃冷水冲洗滤饼，弃去滤液，滤饼50℃减压干燥，粉碎，得松果菊苷转移率53.1％，纯度为96.7％。

比较例2-1

取松果菊苷含量为1％的管花肉苁蓉药材，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用6倍生药量的80％乙醇提取1小时，滤过，滤液备用。药渣再加4倍药材量80％乙醇提取2次，每次1小时，滤过。合并3次滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.13(70℃)，加水使其成浓度为0.6g药材/ml，徐徐注入已处理好的AB-8大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用10％乙醇洗脱3个柱床体积，再用22％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.04(80℃)，喷雾干燥(进口温度：185℃，出口温度：90℃)，得松果菊苷转移率47.3％，纯度为72.6％。

比较例2-2

取松果菊苷含量为1％的管花肉苁蓉药材，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用6倍生药量的80％乙醇提取1小时，滤过，滤液备用。药渣再加4倍药材量80％乙醇提取2次，每次1小时，滤过。合并3次滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.12(70℃)，加水使其成浓度为0.6g药材/ml，徐徐注入已处理好的AB-8大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用10％乙醇洗脱3个柱床体积，再用22％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷含量大于85％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.03(80℃)，喷雾干燥(进口温度：185℃，出口温度：90℃)，得松果菊苷转移率6.8％，纯度为79.4％。

比较例2-3

取松果菊苷含量为1％的管花肉苁蓉药材1kg，粉碎，加入3L乙酸乙酯溶液，加热回流1小时，提取3次，收集合并提取液，加入80g针剂类医药用活性炭脱色1小时，过滤后回收试剂，浸膏加去离子水溶解后加入HZ806大孔树脂柱饱和吸附，先用8BV水洗，再用4BV 20％乙醇，最后用5BV 50％乙醇洗脱松果菊苷，收集有效成分加入短粗铝柱(1kg氧化铝)去杂质，下柱液减压浓缩。得松果菊苷转移率35.8％，纯度为88.9％。

通过对比实施例2与比较例2-1、比较例2-2及比较例2-3可知，本发明在管花肉苁蓉药材中松果菊苷含量较低的情况下，仍可以获得转移率及纯度较高的松果菊苷，使得松果菊苷的制备对肉苁蓉药材的要求不高，材料易得，大大降低成本。

实施例3

取松果菊苷含量为15％的管花肉苁蓉药材，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用6倍生药量的80％乙醇提取1小时，滤过，滤液备用。药渣再加4倍药材量80％乙醇提取2次，每次1小时，滤过。合并3次滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.14(70℃)，加水使其成浓度为0.6g药材/ml，徐徐注入已处理好的AB-8大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用10％乙醇洗脱3个柱床体积，再用22％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.25(80℃)，15℃冷藏72小时，析出结晶，抽滤，15℃冷水冲洗滤饼，弃去滤液，滤饼50℃减压干燥，粉碎，得松果菊苷转移率45.7％，纯度为97.3％。

实施例4

取松果菊苷含量为15％的管花肉苁蓉药材，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用6倍生药量的80％乙醇提取1小时，滤过，滤液备用。药渣再加4倍药材量80％乙醇提取2次，每次1小时，滤过。合并3次滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.13(70℃)，加水使其成浓度为0.6g药材/ml，徐徐注入已处理好的XDA-1大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用10％乙醇洗脱3个柱床体积，再用22％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.01(80℃)，1℃冷藏8小时，析出结晶，抽滤，1℃冷水冲洗滤饼，弃去滤液，滤饼50℃减压干燥，粉碎，得松果菊苷转移率48.2％，纯度为96.8％。

实施例5

取松果菊苷含量为15％的管花肉苁蓉药材，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用4倍生药量的90％乙醇提取0.5小时，滤过，滤液备用。药渣再加10倍药材量90％乙醇提取2次，每次2小时，滤过。合并3次滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.30(70℃)，加水使其成浓度为3.0g药材/ml，徐徐注入已处理好的D101大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用15％乙醇洗脱2个柱床体积，再用60％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.06(80℃)，4℃冷藏12小时，析出结晶，抽滤，4℃冷水冲洗滤饼，弃去滤液，滤饼40℃减压干燥，粉碎，得松果菊苷转移率52.3％，纯度为98.7％。

实施例6

取松果菊苷含量为15％的管花肉苁蓉药材，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用10倍生药量的70％乙醇提取2小时，滤过，滤液备用。药渣再加3倍药材量的70％乙醇提取2次，每次2小时，滤过。合并3次滤液，减压回收并浓缩至相对密度为1.12(70℃)，加水使其成浓度为0.1g药材/ml，徐徐注入已处理好的NK-2大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用5％乙醇洗脱4个柱床体积，再用16％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷的含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.04(80℃)，4℃冷藏12小时，析出结晶，抽滤，4℃冷水冲洗滤饼，弃去滤液，滤饼100℃减压干燥，粉碎，得松果菊苷转移率51.2％，纯度为98.3％。

实施例7

取松果菊苷含量为15％的管花肉苁蓉药材，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用10倍生药量的水提取2小时，滤过，滤液备用。药渣再加3倍药材量的水提取2次，每次2小时，滤过。合并3次滤液，减压回收并浓缩至相对密度为1.06(70℃)，加水使其成浓度为0.1g药材/ml，徐徐注入已处理好的H-10大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用5％乙醇洗脱4个柱床体积，再用16％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.00(80℃)，1℃冷藏0.5小时，析出结晶，抽滤，1℃冷水冲洗滤饼，弃去滤液，滤饼50℃减压干燥，粉碎，得松果菊苷转移率45.8％，纯度为97.3％。

比较例3

取松果菊苷含量为15％的管花肉苁蓉药材，粉碎成粗粉(粒径0.5～1.5cm)，用15倍生药量的水提取2小时，滤过，滤液备用。药渣再加15倍药材量的水提取2次，每次2小时，滤过。合并3次滤液，减压回收并浓缩至相对密度为1.04(70℃)，加水使其成浓度为0.1g药材/ml，徐徐注入已处理好的AB-8大孔吸附树脂柱内，先用水洗脱至无糖反应，改用5％乙醇洗脱4个柱床体积，再用10％乙醇洗脱并收集洗脱液，取用HPLC测得松果菊苷含量大于60％的洗脱液合并，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.03(80℃)，18℃放置30小时，无晶体析出。

将比较例3与实施例1、3、4、5、6、7进行比较，得到的松果菊苷转移率及纯度剧降，表明在本发明所主张参数条件下，得到的松果菊苷转移率及纯度较高。进一步对比实施例1、3、4、5、6、7可知，在管花肉苁蓉药材的松果菊苷含量一致的情况下，在重结晶阶段，浓缩至相对密度为1.02～1.06(80℃)，4℃冷藏12小时，析出结晶，抽滤，4℃冷水冲洗滤饼，弃去滤液，滤饼、减压干燥，粉碎，得到的松果菊苷转移率及纯度较高，而且实施例1效果最好。

比较例4

参照公开号为CN 105111255 A专利实施例4中方法提取松果菊苷，具体如下：

50kg肉从蓉粗粉中加入500kg 75％乙醇，用多功能超声波提取罐于45℃超声提取1.5小时，以上方法重复提取3次，合并三次提取液，于70℃以下减压浓缩至无乙醇，该溶液用超滤设备过滤至澄清，澄清液上大孔树脂柱(AB-8大孔吸附树脂)进行吸附，首先用纯化水洗脱至流出液无色澄清，再用55％乙醇洗脱，收集全部55％乙醇洗脱液，用外循环真空浓缩器进行浓缩，浓缩液喷雾干燥即得肉从蓉提取物，松果菊苷转移率41.8％，纯度为25.6％。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种松果菊苷的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：将管花肉苁蓉药材粉碎，所得粗粉用提取溶剂进行提取，得到滤液和药渣；所述提取溶剂为水或乙醇水溶液；

步骤2：将药渣用提取溶剂提取2次，所述提取溶剂为水或乙醇水溶液；合并滤液，浓缩至在70℃条件下相对密度为1.05～1.30，加水得到粗提物水溶液；

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中所述粗粉与所述提取溶剂的体积比为1：(4～10)，所述提取的次数为1次，所述提取的温度为80～110℃，所述提取时间为0.5～2h；所述大孔吸附树脂型号为X-5、AB-8、NK-2、NKA-2、NK-9、WLD、D3520、D101、D201、D301、D113、D001、D203、D296、D354、D213、SP70、D101B、XDA-1、XDA-1B、XDA-7、H-10、H-20、H-30、H-40、H-50、H-60、DA-201、Dm-301、HPD-100、HPD-400、Dm130、H-103中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中所述粗粉与所述提取溶剂的体积比为1：6，所述提取的次数为1次，所述提取的温度为100℃，所述提取时间为1h。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2中所述药渣与所述提取溶剂的体积比为1：(3～10)，所述提取的次数为2次，所述提取的温度为80～110℃，所述提取时间为0.5～2h。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2中所述药渣与所述提取溶剂的体积比为1：4，所述提取的次数为2次，所述提取的温度为100℃，所述提取时间为1h。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中所述乙醇水溶液的体积百分含量为70％～90％，步骤2中所述乙醇水溶液的体积百分含量为70％～90％。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述粗提物水溶液的浓度为0.1～3.0g药材/mL。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述用体积百分含量为5％～15％的乙醇水溶液洗脱2～4个柱床体积为：用体积百分含量为10％的乙醇水溶液洗脱2～4个柱床体积。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述用16％～60％的乙醇水溶液洗脱为：用22％的乙醇水溶液洗脱。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述析出结晶与所述减压干燥之间还包括纯化的步骤，所述纯化为1～15℃水冲洗滤饼，或者为加40～100℃水溶解后重结晶。