CN111732622B - 从枳实中提取橙皮苷的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种从枳实中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：脱脂，酶解，除杂，渗漉，硅藻土吸附，两步法调节pH，最终得到枳实橙皮苷。本发明方法提供了一种从枳实中提取高质量橙皮苷的方法，工艺连贯、简单，可操作性强，酸、碱的用量少，污水排放少，生产成本低，不使用有毒有害化工溶剂，安全环保，且橙皮苷的含量高、收率高，适合工业化生产。此外，本发明生产的橙皮苷产品中，含量高，且不含异柚皮苷。使用本发明方法制备的橙皮苷用于合成地奥司明，由于没有异柚皮苷的干扰，以其为原料制备地奥司明的产品纯度高、药效好。

Description

从枳实中提取橙皮苷的方法

技术领域

本发明涉及天然产物的分离提取，具体涉及一种从枳实中提取橙皮苷的方法。

背景技术

枳实，芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种或甜橙Citrussinensis Osbeck的干燥幼果。酸橙主产于江西、四川、湖北、湖南、浙江、江苏、福建、贵州等地；甜橙在江苏、浙江、江西、四川、贵州、福建、台湾、广东、广西、云南等地均有栽培。

在传统中医领域，枳实辛散苦降，气锐力猛，为破气除痞，消积导滞之要药，用治积滞内停，痞满胀痛，泻痢后重，大便不通等证，常作为主药。药理学研究发现，枳实具有以下多种药用用途：对胃肠道运动及子宫平滑肌有抑制和兴奋双重作用；有强心、增加心输血量和收缩血管作用；抗炎；抗菌、抗病毒；抗变态反应；抗氧化；镇痛；中枢抑制；解热；治疗毛细血管脆性增加的出血性紫癜等等。

枳实中的一种主要成分橙皮苷有多种的生理功能，有报道其对心脑血管，抗炎，抑菌，抗氧化都有一定的生物活性。橙皮苷的一个主要用途是用于半合成地奥司明(Diosmin)，这是一种市场需求量极大的增强静脉张力药物和血管保护剂。橙皮苷成品中如果存在的异柚皮苷，将极大的影响半合成产品中地奥司明的纯度和药物的疗效。因此，对于橙皮苷的纯度也提出了很高的要求。

现有技术中对橙皮苷提取过程中，但还存在一些缺陷：

CN200710034378.3公开了冷去杂一步法提取高纯度橙皮苷制备工艺，是以枳实、枳壳、青皮、柚皮、陈皮为原料，经破碎、氢氧化钠溶液去杂、氢氧化钙溶液提取、加热酸化、结晶等步骤，得到橙皮苷产品。该方法在去杂步骤使用的是强碱，部分橙皮苷可能会被浸出，易造成橙皮苷的收率偏低。

CN200910155907.4公开了一种从陈皮中提取橙皮苷的方法，是以陈皮为原料，经破碎、碱液混合研磨、加水、离心、调酸等步骤，得到橙皮苷产品。该方法得到的橙皮苷产品含量偏低，最高含量仅91％。

CN201110103032.0公开了一种从陈皮中提取陈皮油树脂和橙皮苷的方法，是以陈皮粉为原料，经乙醇连续微波提取、真空抽滤、浓缩等步骤得到陈皮油树脂；提取渣经氢氧化钙和还原剂连续微波提取、真空抽滤、调节pH等步骤，得到橙皮苷产品。该方法由于氢氧化钙碱性不足的原因，无法将原料中的橙皮苷充分、彻底浸出，导致橙皮苷的收率偏低。

CN201610725509.1公开了一种从芸香科植物枳实中提取橙皮苷的方法，是以枳实为原料，经粉碎、水煮除杂、碳酸钠溶液二次除杂、氢氧化钠和氢氧化钙混合溶液提取、酸化、碱醇钠溶解、调酸结晶等步骤，得到纯度为92％的橙皮苷产品。该方法仅针对橙皮苷含量大于25％的高含量枳实原料，且所得到的产品中橙皮苷的含量偏低。

此外，以上公开文件对橙皮苷的分离纯化过程中，都没有对一种同样来源于枳实原料、溶解性和理化性质与橙皮苷极为相识、难以轻易去除、橙皮苷成品中普遍存在的杂质——异柚皮苷——做针对性的研究、去除和检测。这也是目前市场上橙皮苷成品的含量规格普遍在85％至95％之间的原因。

研究发现，地奥司明药典标准中规定的“杂质C”的来源，与异柚皮苷有密切的关系。橙皮苷半合成地奥司明的反应式如下：

如果橙皮苷中混有少量异柚皮苷，在半合成反应过程中，异柚皮苷同样会参与碘化和脱氢的反应，反应的产物就是地奥司明药典标准中规定的“杂质C”，反应式如下：

由此可见，橙皮苷成品中如果存在的异柚皮苷，将极大的影响半合成产品中地奥司明的纯度和药物的疗效。因此，对于橙皮苷的纯度也提出了很高的要求。

因此，目前亟需一种制备提取高纯度橙皮苷，不含异柚皮苷的工业化生产方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种橙皮苷产品收率和纯度都很高，且不含异柚皮苷的工业化生产方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从枳实中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

(1)脱脂：将枳实原料破碎，用亲脂性有机溶剂加热回流提取，过滤得提取渣；

(2)酶解：将步骤(1)中的提取渣中有机溶剂蒸除干净，加入水，调节pH值为弱酸性，加入纤维素酶进行酶解；

(3)除杂、离心过滤：将步骤(2)酶解后的物料加热，搅拌提取，冷却，离心过滤，得离心渣；

(4)橙皮苷的提取和分离：将步骤(3)所得离心渣，加入碱液，循环提取渗漉，直至离心渣中橙皮苷提取完全，收集渗漉液；加入硅藻土，粗过滤，超滤膜过滤，超滤滤液用稀酸调节pH值8～9，加热，保温，再用酸调节pH值6～7，静置析晶过夜，离心，水洗，干燥，得枳实橙皮苷。

优选的，步骤(1)中，所述亲脂性有机溶剂是指乙醚、石油醚、正己烷、环己烷、乙酸乙酯、6#溶剂油、120#溶剂油中的至少一种。

优选地，步骤(1)中，所述加热回流提取，为两次以上提取，亲脂性有机溶剂总的体积用量枳实原料重量的12～20倍(L/kg)。每次提取的溶剂用量依次减少30～50％。提取总时间为3～8小时，每次提取的时间依次减少30～60％。

比如，如果为两次提取，所用亲脂性有机溶剂的用量依次为枳实原料重量的8～10倍、5～8倍(L/kg)，回流提取的时间依次为2～3小时、1～2小时。使用亲脂性有机溶剂多次提取的目的，是利用枳实精油易溶于亲脂性有机溶剂的原理，将枳实原料中的枳实精油充分浸出，达到脱脂的目的；第二是将枳实原料中的枳实精油等脂溶性成分充分浸出后，即有利于后续步骤中水渗透入原料细胞组织中，也有利于酶解。

优选的，步骤(2)中，所述水的用量为枳实原料重量的8～10倍(L/kg)，所述调节pH值为弱酸性是指调节pH值为4.5～6.0。

所述酶解，是在室温下搅拌均匀，酶解时间为4～6小时。优选地，还可以加入原果胶酶，在室温下搅拌均匀，酶解时间为4～6小时。

维素酶和/或原果胶酶的用量为枳实原料重量的1‰～5‰，优选为1‰～3‰。加入纤维素酶的目的，是将枳实细胞组织中的细胞壁主要成分纤维素酶解，从而有利于后续水溶性杂质充分浸出。加入原果胶酶的目的，是将枳实原料中不溶于水的原果胶酶解为可溶于水的小分子果胶，有利于热水将果胶充分浸出，从而防止果胶溶于后续的碱水中，降低后续橙皮苷分离纯化的难度。

本发明中，步骤1)的脱脂和步骤2)的酶解，顺序不能颠倒，如果先酶解，再脱脂，原料酶解膨胀以后，亲脂性有机溶剂无法渗入湿的原料中，导致枳实原料中脂溶性杂质去除不彻底，造成碱水浸出物中含有脂溶性杂质(或油脂皂化产物)，最终造成橙皮苷的含量偏低。

优选的，步骤(3)中，所述加热的温度为80～95℃，搅拌提取的时间为2～3小时。加热、搅拌提取的目的，第一是灭酶，第二是将酶解后的枳实原料中易溶于水的果胶、多糖、辛弗林以及水溶性黄酮等水溶性杂质充分浸出，从而减少后续碱水提取步骤中非橙皮苷成分浸出，降低橙皮苷分离纯化的难度。

优选的，步骤(4)中，所述的碱液为氢氧化钙，氢氧化钠，氢氧化钾中的至少一种的溶液，所述碱液的用量为枳实原料重量的5～6倍(L/kg)。

优选地，使用氢氧化钙和氢氧化钠(钾)的混合物的液碱溶液。

更为优选地，液碱溶液中，氢氧化钙的质量百分比的浓度为0.1％～0.15％，氢氧化钠/氢氧化钾的质量百分比的浓度为0.5％～1％。加入氢氧化钠/氢氧化钾的目的是将步骤(3)离心渣中的橙皮苷充分浸出。加入氢氧化钙的目的，是因为步骤(3)离心渣中如果残留少量的果胶，势必会和橙皮苷一起被碱液浸出，钙离子的存在将使果胶凝聚，该部分可能存在的果胶杂质将在后续的过滤步骤除去，从而达到提高并确保调酸前碱性物料中橙皮苷的纯度。

优选的，步骤(4)中，所述的渗漉没有特别的限定，可以为正向渗漉或反向渗漉。正向渗漉即传统的渗漉方式，液体物料从渗漉器顶部进入，再从渗漉器底部流出；反向渗漉则相反，液体物料从渗漉器底部进入，再从渗漉器顶部流出。所述渗漉的流速为5～20BV/小时，所述渗漉的时间为4～6小时。使用循环提取渗漉方式的目的是，将用量有限的碱液，在短时间内反复与原料接触、快速完成传质和渗透，从而达到提取完全的最终目的。

优选的，步骤(4)中，所述硅藻土的用量为枳实原料重量的1％～3％，所述室温搅拌的时间为2～3小时。加入硅藻土、室温搅拌的目的，第一是除去存在于原料中、且性质与橙皮苷极为接近、与橙皮苷一同被碱液浸出的异柚皮苷，第二是脱色，从而提高橙皮苷的纯度或含量。

发明人发现，硅藻土对异柚皮苷具有很高的吸附效果，同时却不会吸附本发明的目标产物橙皮苷。因此通过简单的物理吸附，即可达到除去异柚皮苷，并且不损失橙皮苷的目的。

优选的，步骤(4)中，所述超滤膜的截留分子量为1000～2000Da，超滤的压力为0.1～0.3Mpa。超滤的目的是使溶解于碱液的橙皮苷透过超滤膜，并除去细微的不溶物颗粒(原料粉末、絮凝物或细小的硅藻土等)，从而提高物料的澄清度和产品的纯度。

优选的，步骤(4)中，所述加热的温度为50～65℃，保温的时间为0.5～2小时。

优选地，步骤(4)中，所述稀酸为5～10wt％盐酸或硫酸。本发明先用酸调节pH值8～9、加热、保温、再用酸调节pH值6～7，而不是如传统工艺一般、直接将pH值调至酸性。本发明分为两步调节pH的目的在于：橙皮苷在碱性条件下，其黄酮结构开环生成易溶于水的橙皮苷查尔酮(因此橙皮苷易溶解于碱液中)，橙皮苷查尔酮遇酸则黄酮结构闭环，分子结构恢复为水溶性极差的橙皮苷(从而从酸水中析出)。发明人研究发现，溶有橙皮苷的碱液用酸调节pH值8～9时，虽然此时溶液中的分子形态仍然为开环的橙皮苷查尔酮，但是选择适宜的温度加热和保温，即可以确保橙皮苷查尔酮不发生高温水解，又可以使橙皮苷查尔酮利用水分子(H₂O)电离出的氢原子(H⁺)生成部分橙皮苷，提高了橙皮苷的收率，并且减少了酸的用量，减少污水的排放，综合极大降低了橙皮苷的生产成本，以较高收率制得产品纯度高，质量好的橙皮苷。

本发明中，1BV＝1个硅胶柱或原料填装体积。

本发明方法的原理是：

枳实原料粉碎后，先用亲脂性有机溶剂可以将脂溶性的物质充分浸出，之后剩下的提取渣酶解后，果胶、多糖、水溶性黄酮和辛弗林等水溶性成分，都可以被热水浸出，最终存在于热水提取渣中的橙皮苷被碱水浸出，杂质极少，最难分离的杂质——异柚皮苷——可以在碱液中用硅藻土吸附并除去，从而得到高含量、高纯度的橙皮苷。

本发明方法的有益效果如下：

(1)本发明方法提供了一种从枳实中提取高质量橙皮苷的方法，工艺连贯、简单，可操作性强，酸、碱的用量少，污水排放少，生产成本低，不使用有毒有害化工溶剂，安全环保，且各种活性成分的含量高、收率高，适合工业化生产。

(2)本发明生产的橙皮苷产品中，含量高，且不含异柚皮苷。使用本发明方法制备的橙皮苷用于合成地奥司明，由于没有异柚皮苷的干扰，以其为原料制备地奥司明的产品纯度高、药效好。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

本发明实施例所使用的枳实原料购于益阳沅江，橙皮苷的含量为18.67wt％，异柚皮苷的含量为1.74wt％；本发明实施例所使用的辅料或化学试剂，如无特殊说明，均通过常规商业途径获得。

本发明实施例中，采用高效液相色谱(HPLC)外标法检测橙皮苷和异柚皮苷的含量。

实施例1

(1)脱脂：取枳实原料100kg，破碎至粒径为1～1.5mm，投入提取罐中，加入石油醚，加热回流提取两次(第一次900L，提取时间2小时；第二次600L，提取时间2小时)，过滤，得提取渣。

(2)酶解：将步骤(1)中的提取渣用水蒸汽将其中残留的有机溶剂蒸馏干净，加入900L纯水，调节pH值5.0，并加入0.2kg纤维素酶和0.2kg原果胶酶，混合均匀，室温搅拌酶解6小时。

(3)除杂、离心分离：将步骤(2)酶解后的物料加热至85℃，搅拌提取3小时，冷却至室温，离心过滤，得离心渣。

(4)橙皮苷的提取和分离：将步骤(3)离心渣，投入渗漉器中，加入600L碱液(氢氧化钙的质量百分比的浓度为0.12％，氢氧化钠的质量百分比的浓度为0.5％)，开始正向渗漉，渗漉的流速为10BV/小时，将渗漉液当作提取用的碱液，再次输入渗漉器中，如此快速渗漉、循环提取，渗漉提取5小时，直至离心渣中橙皮苷提取完全，停止渗漉，用压缩空气从渗漉器顶部加压，将渗漉器中的液体充分挤压干净，收集最终的渗漉液。往渗漉液中加入3kg硅藻土，室温搅拌3小时，粗过滤除去硅藻土，再用截留分子量为1000Da的超滤膜过滤(超滤的压力为0.3Mpa)，收集超滤膜滤液，用10wt％HCl调节pH值8，加热至60℃，保温1小时，再用10wt％HCl调节pH值6，静置析晶过夜，离心，用纯水淋洗滤饼，干燥至恒重，得枳实橙皮苷18.51kg。

经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，本实施例所得橙皮苷的含量为99.06％，橙皮苷的收率为98.21％；该橙皮苷产品中，异柚皮苷的含量为0。

实施例2

(1)脱脂：取枳实原料100kg，破碎至粒径为1～1.5mm，投入提取罐中，加入6#溶剂油，加热回流提取两次(第一次1000L，提取时间2小时；第二次600L，提取时间1.5小时)，过滤，得提取渣待用。

(2)酶解：将步骤(1)中的提取渣用水蒸汽将其中残留的有机溶剂蒸馏干净，加入800L纯水，调节pH值5.5，并加入0.1kg纤维素酶和0.2kg原果胶酶，混合均匀，室温搅拌酶解5小时。

(3)除杂、离心分离：将步骤(2)酶解后的物料加热至90℃，搅拌提取3小时，冷却至室温，离心过滤，得离心渣。

(4)橙皮苷的提取和分离：将步骤(3)离心渣，投入渗漉器中，加入500L碱液(氢氧化钙的质量百分比的浓度为0.15％，氢氧化钾的质量百分比的浓度为0.5％)，开始正向渗漉，渗漉的流速为8BV/小时，将渗漉液当作提取用的碱液，再次输入渗漉器中，如此快速渗漉、循环提取，渗漉提取4小时，直至离心渣中橙皮苷提取完全，停止渗漉，用压缩空气从渗漉器顶部加压，将渗漉器中的液体充分挤压干净，收集最终的渗漉液。往渗漉液中加入2kg硅藻土，室温搅拌2小时，粗过滤除去硅藻土，再用截留分子量为2000Da的超滤膜过滤(超滤的压力为0.3Mpa)，收集超滤膜滤液，用10wt％HCl调节pH值为8.5，加热至60℃，保温2小时，再用10wt％HCl调节pH值为7，静置析晶过夜，离心，用纯水淋洗滤饼，干燥至恒重，得枳实橙皮苷18.39kg。

经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，本实施例所得橙皮苷的含量为98.63％，橙皮苷的收率为97.15％；该橙皮苷产品中，异柚皮苷的含量为0。

实施例3

(1)脱脂：取枳实原料100kg，破碎至粒径为1～1.5mm，投入提取罐中，加入环己烷，加热回流提取两次(第一次800L，提取时间3小时；第二次700L，提取时间2小时)，过滤，得提取渣。

(2)酶解：将步骤(1)中的提取渣用水蒸汽将其中残留的有机溶剂蒸馏干净，加入1000L纯水，调节pH值6.0，并加入0.3kg纤维素酶和0.2kg原果胶酶，混合均匀，室温搅拌酶解4.5小时。

(3)除杂、离心分离：将步骤(2)酶解后的物料加热至95℃，搅拌提取2小时，冷却至室温，离心过滤，得离心渣。

(4)橙皮苷的提取和分离：将步骤(3)离心渣，投入渗漉器中，加入600L碱液(氢氧化钙的质量百分比的浓度为0.1％，氢氧化钾的质量百分比的浓度为0.8％)，开始反向渗漉，渗漉的流速为12BV/小时，将渗漉液当作提取用的碱液，再次输入渗漉器中，如此快速渗漉、循环提取，渗漉提取4小时，直至离心渣中橙皮苷提取完全，停止渗漉，用压缩空气从渗漉器顶部加压，将渗漉器中的液体充分挤压干净，收集最终的渗漉液。往渗漉液中加入2.5kg硅藻土，室温搅拌3小时，粗过滤除去硅藻土，再用截留分子量为2000Da的超滤膜过滤(超滤的压力为0.2Mpa)，收集超滤膜滤液，用10wt％HCl调节pH值为9，加热至50℃，保温1小时，再用10wt％HCl调节pH值为6，静置析晶过夜，离心，用纯水淋洗滤饼，干燥至恒重，得枳实橙皮苷18.52kg。

经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，本实施例所得橙皮苷的含量为98.21％，橙皮苷的收率为97.42％；该橙皮苷产品中，异柚皮苷的含量为0。

实施例4

其他步骤和条件和实施例1相同，区别在于步骤7)中得到渗漉液中硅藻土的加入量为1kg，经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，本实施例所得橙皮苷的含量为96.42％，橙皮苷的收率为95.17％；该橙皮苷产品中，异柚皮苷的含量为1.24％。

实施例5

其他步骤和条件和实施例1相同，区别在于步骤2)中不加入原果胶酶，经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，本实施例所得橙皮苷的含量为94.12％，橙皮苷的收率为96.41％；该橙皮苷产品中，异柚皮苷的含量为0。

实施例6

其他步骤和条件和实施例1相同，区别在于步骤7)中600L碱液中为1wt％的氢氧化钠溶液，不含氢氧化钙。经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，本实施例所得橙皮苷的含量为96.83％，橙皮苷的收率为97.58％；该橙皮苷产品中，异柚皮苷的含量为0。

实施例7

其他步骤和条件和实施例1相同，区别在于步骤7)中600L碱液中为0.3wt％的氢氧化钙溶液，不含氢氧化钠。经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，本实施例所得橙皮苷的含量为98.67％，橙皮苷的收率为83.41％；该橙皮苷产品中，异柚皮苷的含量为0。

对比例1

其他步骤和条件和实施例1相同，区别在于步骤7)中得到渗漉液中不加入硅藻土，经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，所得橙皮苷的含量为94.28％，橙皮苷的收率为91.53％；该橙皮苷产品中，异柚皮苷的含量为3.85％。

对比例2

其他步骤和条件和实施例1相同，区别在于步骤7)中直接用10wt％HCl调节pH值为6，经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，所得橙皮苷的含量为96.58％，橙皮苷的收率为95.42％；该橙皮苷产品中，异柚皮苷的含量为0。

对比例3

其他步骤和条件和实施例1相同，区别在于步骤7)中粗过滤除去硅藻土后，不进行超滤。经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，所得橙皮苷的含量为94.31％，橙皮苷的收率为96.40％；该橙皮苷产品中，异柚皮苷的含量为0。

应用例1

往干净干燥的反应瓶内投入实施例1所得橙皮苷产品100g(橙皮苷的含量为99.06％、异柚皮苷含量为0)，加入吡啶550g，升温至70℃，搅拌，使橙皮苷全溶，快速加入42g碘。搅拌下，控制温度90～95℃，保温反应10小时(2小时后开始有固体析出)，反应完全。反应毕，真空减压浓缩至无吡啶。浓干后析出固体，往反应瓶内加入250g水，搅拌分散，降温至20℃，抽滤。将抽滤所得滤饼用纯水洗至无气味，溶解于5％氢氧化钠溶液300ml，室温搅拌溶解，加入5g活性炭，搅拌2小时，精密过滤，用5％的盐酸调节PH值为6～7，析出大量固体，抽滤。抽滤所得滤饼用温水洗涤，烘干，得地奥司明成品96.19g。

经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，本应用例所得地奥司明成品的含量为98.25％，地奥司明合成的重量收率为95.40％；经高效液相色谱(HPLC)归一法测定，该地奥司明成品中，杂质C的含量为0。

应用例2

往干净干燥的反应瓶内投入对比例1所得橙皮苷产品100g(橙皮苷的含量为94.28％、异柚皮苷含量为3.85)，加入吡啶550g，升温至70℃，搅拌，使橙皮苷全溶，快速加入42g碘。搅拌下，控制温度90～95℃，保温反应10小时(2小时后开始有固体析出)，反应完全。反应毕，真空减压浓缩至无吡啶。浓干后析出固体，往反应瓶内加入250g水，搅拌分散，降温至20℃，抽滤。将抽滤所得滤饼用纯水洗至无气味，溶解于5％氢氧化钠溶液300ml，室温搅拌溶解，加入5g活性炭，搅拌2小时，精密过滤，用5％的盐酸调节PH值为6～7，析出大量固体，抽滤。抽滤所得滤饼用温水洗涤，烘干，得地奥司明成品93.81g。

经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，本应用例所得地奥司明成品的含量为93.19％，地奥司明合成的重量收率为92.73％；经高效液相色谱(HPLC)归一法测定，该地奥司明成品中，杂质C的含量为3.22％。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种从枳实中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

（1）脱脂：将枳实原料破碎，用亲脂性有机溶剂加热回流提取，过滤得提取渣；

（2）酶解：将步骤（1）中的提取渣中有机溶剂蒸除干净，加入水，调节pH值为弱酸性，加入纤维素酶和原果胶酶进行酶解，所述酶解，是在室温下搅拌均匀，酶解时间为4-6小时，纤维素酶的用量为枳实原料重量的1‰～3‰，原果胶酶的用量为枳实原料重量的1‰～3‰；

（3）除杂、离心过滤：将步骤（2）酶解后的物料加热，搅拌提取，冷却，离心过滤，得离心渣；

（4）橙皮苷的提取和分离：将步骤（3）所得离心渣，加入碱液，循环提取渗漉，直至离心渣中橙皮苷提取完全，收集渗漉液；加入硅藻土室温搅拌，粗过滤，超滤膜过滤，超滤滤液用稀酸调节pH值8～9，加热，保温，再用酸调节pH值6～7，静置析晶过夜，离心，水洗，干燥，得枳实橙皮苷；所述碱液是氢氧化钙和氢氧化钠/氢氧化钾的混合物的液碱溶液，液碱溶液氢氧化钙的质量百分比的浓度为0.1%～0.15%，氢氧化钠/氢氧化钾的质量百分比的浓度为0.5%～1%；所述硅藻土的用量为枳实原料重量的1%～3%，所述室温搅拌的时间为2～3小时。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述亲脂性有机溶剂是指乙醚、石油醚、正己烷、环己烷、乙酸乙酯、6#溶剂油、120#溶剂油中的至少一种。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述加热回流提取，为两次以上提取，亲脂性有机溶剂总的体积用量为枳实原料重量的12～20倍，单位是L/kg。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述水的用量为枳实原料重量的8～10倍，单位是L/kg，所述调节pH值为弱酸性是指调节pH值为4.5～6.0。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）中，所述碱液的用量为枳实原料重量的5～6倍，单位是L/kg。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）中，所述超滤膜的截留分子量为1000～2000Da，超滤的压力为0.1～0.3Mpa。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）中，所述加热的温度为50～65℃，保温的时间为0.5～2小时。