CN109758498B - 一种油橄榄叶提取物的制备方法 - Google Patents

Abstract

一种油橄榄叶提取物的制备方法，包括以下步骤：（1）油橄榄叶原料超微粉碎，连续逆流超声提取；（2）提取液处理，得到离心清液和离心渣；（3）将离心渣溶解，树脂吸附，洗脱，浓缩、干燥，得木犀草苷产品；（4）取步骤（2）离心清液，加入乙醇溶液，静置、过滤，回收乙醇后加水稀释，溶液经大孔树脂吸附，洗脱，收集乙醇洗脱液浓缩、干燥，得到羟基酪醇产品、橄榄苦甙产品、毛蕊花糖苷产品。本发明原料利用率高，环境友好；工艺简单、工业化生产易实现。通过本方法制备的产品色泽浅、气味淡，水溶性可控，在营养保健和日用化工领域有良好的市场前景。

Description

一种油橄榄叶提取物的制备方法

技术领域

本发明涉及油橄榄叶植物中活性成分的提取、分离工艺，具体涉及一种油橄榄叶提取物的制备方法。

背景技术

油橄榄，拉丁学名（Olea europaea Linn.），木犀科木犀榄属植物，又称木犀榄、齐墩果，为著名亚热带果树和重要经济林木，主要分布于地中海国家，希腊、意大利、突尼斯、西班牙为集中产地。

文献“橄榄叶化学成分及药理作用研究概况[J].武警后勤学院学报，2013，22（4）:337-340”中报道了油橄榄叶中主要含有黄酮类、萜类及其衍生物、酚酸类化合物、脂肪族化合物四大类化学成分。其中木犀草苷属于黄酮类，羟基酪醇、毛蕊花糖苷可归为酚类化合物，橄榄苦苷属于萜类。

文献“橄榄苦苷提取分离和药理活性的研究进展[J].承德医学院学报，2010，27（1）：69-72”综述了橄榄苦苷具有抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、抑菌、降血糖等药理作用。文献“羟基酪醇药理作用研究进展[J].广东药学院学报，2012,28（6）：684-688”综述了羟基酪醇具有抗癌、抗血栓调血脂和抗动脉硬化、抗病原微生物、防治视网膜黄斑性病变、保护软骨和抗骨质疏松等药理作用。文献“木犀草苷的药理作用研究进展[J].中国野生植物资源，2014,33（1）：1-3”综述了木犀草苷具有止咳祛痰平喘、保护心血管系统、镇痛、解热、抗炎和抗病毒等药理作用。文献“地黄毛蕊花糖苷功能分析[J].科技经济与资源环境，2018,26（14）：113”综述了毛蕊花糖苷具有神经系统保护、抗极性肺损伤、调节肠胃促进消化、治疗生殖系统疾病等药理作用。

由此可知，油橄榄叶的主要药理作用有抗氧化、抑菌、降血糖、保护心血管、抗癌、抗炎、抗病毒等作用，可应用于营养保健、日用化工等领域。

目前，油橄榄叶提取物的制备工艺研究是植提行业的热点，如CN 200610098344.6公开了一种富含高纯度橄榄苦苷的油橄榄叶提取物的制备方法。所述方法包括以下步骤：（1）用极性溶剂对油橄榄叶进行提取，其中极性溶剂与油橄榄叶的质量比例为（1-30）：1，提取温度为20℃-90℃，提取时间为0.5h-72h；（2）离心沉降：将提取液浓缩至比重为1.01-1.14，调节pH至8-9，将其离心沉降，获得离心清液和沉淀物；（3）膜藕合分离：将离心清液依次通过陶瓷膜、超滤膜及纳滤膜处理，最后得到通过纳滤膜的浓缩液，其中陶瓷膜平均孔径为0.1-0.5 µm，超滤膜截留分子量为10000-50000道尔顿，纳滤膜截留分子量200-1000道尔顿，物料膜通量1-10 m³/m²·h·MPa；（4）介质吸附：用氧化铝、大孔吸附树脂、聚酰胺中的一种或两种以上的混合介质为填料对纳滤膜的浓缩液进行选择性吸附，吸附介质与上述通过纳滤膜的浓缩液体积比为1：（5-20），再对吸附介质进行洗脱得到洗脱液，洗脱用的淋洗剂为醇类水溶液。（5）干燥：将上述洗脱液真空浓缩至比重为1.03-1.14，进行真空冷冻干燥或喷雾干燥，获得橄榄苦甙含量大于50%的富含高纯度橄榄苦苷的油橄榄叶提取物。该工艺中以油橄榄叶为原料，仅制备得到橄榄苦苷一种产品，原料未得到充分的利用，在一定程度上造成资源的浪费。同时，工艺过程使用酸碱调节pH值，环境污染较大。

CN201010523056.7 公开了一种油橄榄叶提取物的制备方法，所述方法包括以下步骤：（a）将油橄榄干叶投料到极性溶剂中进行提取；（b）提取液回收溶剂后，加水和辅料水沉，均匀、静置、压滤，合并滤液；（c）采用大孔树脂柱层析法纯化，步骤（b）的滤液经大孔树脂吸附、乙醇水混合液解吸附后，收集解吸液；（d）解吸液回收溶剂后真空浓缩，干燥，得到油橄榄叶提取物。该工艺简单易行，但仅得到橄榄苦苷一种产品，原料未得到充分的利用，在一定程度上造成资源的浪费。

CN201710195462.7 公开了一种从橄榄叶中提取羟基酪醇的方法，所述方法包括以下步骤：（a）取橄榄叶，除杂洗净，烘干，粉碎；（b）向粉碎的橄榄叶中加入水，在50-70 MPa和30-40 ℃下高压微射流超微粉碎进行处理，得到膏状浆液；（c）再向膏状浆液中加入同等重量的乙醇溶液，在350-550 w功率下微波提取12-24min，得到提取液；（d）提取液进大孔吸附树脂柱层析，以乙酸乙酯溶液为洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液；（e）将洗脱液过截留分子量为16-28万的中空纤维膜，得到浓缩液。（6）干燥，得到羟基酪醇。该工艺采用高压微射流超微粉碎和微波提取相结合，有效成分提取较完全，但同样存在原料利用率低的问题。

CN201610883391.5 公开了一种橄榄叶羟基酪醇的提取工艺, 所述方法包括以下步骤：（1）将橄榄叶粉碎为粗粉状，过60目筛，按1:1的重量比加入80%乙醇密闭发胀2h，将充分膨胀好的橄榄叶粗粉加80%的乙醇溶剂进行渗漉提取，制得提取液；（2）将步骤（1）中的提取液通过D101大孔树脂吸附，经60%乙醇洗脱，制得洗脱液，所得洗脱液通过浓缩、干燥，制得45-55%的橄榄苦甙；（3）将步骤（2）中的橄榄苦甙产品通过氢氧化钠溶液进行水解，加酸中和后，沉淀离心，所得离心液通过D101大孔树脂吸附后，经60%的乙醇在60-65℃下洗脱，制得洗脱液；（4）将步骤（3）中的洗脱液浓缩后，利用等量的乙酸乙酯反复萃取4次，将乙酸乙酯层液进行浓缩、干燥，制得80-90%的羟基酪醇；该工艺以强碱溶液水解橄榄苦苷制备羟基酪醇，最终只收获一种产品，原料利用率偏低。同时，工艺过程使用酸碱调节pH值，环境污染较大。

总的来说，现有橄榄叶提取物的制备方法均是针对一种活性成分设计，橄榄叶原料存在利用不充分的情况。同样，羟基酪醇的制备方法多以橄榄苦苷水解而得，工艺中存在酸碱和乙酸乙酯、石油醚等有机溶剂的使用，环境危害大。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，克服现有技术的不足，提供一种工艺简单的油橄榄叶提取物的制备方法，能使油橄榄叶原料得到充分利用，制备的产品成本较低，且对环境更加友好。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是，一种油橄榄叶提取物的制备方法，包含如下步骤：

（1）将干燥的油橄榄叶原料，超微粉碎至粒径为80-120目，进行连续逆流超声提取，得提取液；

（2）将步骤（1）所得提取液经离心、浓缩，得浓缩液（浓缩后有沉淀析出），将浓缩液冷藏（使沉淀更好的析出）、然后离心，得到离心清液和离心渣；

（3）将步骤（2）所得离心渣，加入热水溶解，固液分离得到溶液，将溶液经D101大孔树脂吸附，再依次用纯化水、体积浓度为65-75%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，洗脱液通过浓缩、干燥，得到质量含量＞50%的木犀草苷产品；

（4）取步骤（2）所得离心清液，加入体积浓度＞90%的乙醇溶液，搅拌均匀，然后静置、过滤，滤液回收乙醇后加水稀释，所得溶液经大孔树脂吸附，分别以纯化水、体积浓度为30±5%的乙醇溶液、体积浓度为50±5%的乙醇溶液、体积浓度为70±5%的乙醇溶液洗脱，分别收集不同浓度的乙醇洗脱液，洗脱液分别通过浓缩、干燥，分别得到质量含量＞40%的羟基酪醇产品、含量＞80%的橄榄苦甙产品、含量＞40%的毛蕊花糖苷产品。

进一步，步骤（1）中，连续逆流超声提取所用溶剂为纯化水，溶剂与原料重量比为15-25:1，提取时间为30-45 min，温度为60±5℃，超声频率为30-45（K HZ）。

进一步，步骤（2）中，离心方式为管式离心或碟式离心。浓缩方式为减压浓缩。浓缩液冷藏温度为4-10℃，冷藏时间为2-4小时。

进一步，步骤（2）中，离心转速＞4000转/分钟。浓缩至溶液为Brix值为20-30。

进一步，步骤（3）中，加入热水的量为离心渣重量的5-8倍，热水温度为60±5℃。

进一步，步骤（3）中，溶液经D101大孔树脂吸附后，依次以2-3 BV纯化水、2-3 BV体积浓度为65-75%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液。

进一步，步骤（4）中，加入体积浓度＞90%的乙醇溶液的量为离心清液体积的3-5倍。搅拌时间为10 -15min。静置时间为1-2小时。过滤方式为板框过滤。

进一步，步骤（4）中，滤液回收乙醇的方式为减压浓缩。加水稀释时，加纯化水稀释至溶液brix值为10-15。

进一步，步骤（4）中，大孔树脂为D101大孔树脂。

进一步，步骤（4）中，溶液经大孔树脂吸附后，依次以2-3 BV纯化水、2-3 BV体积浓度为30±5%的乙醇溶液、2-3 BV体积浓度为50±5%的乙醇溶液、2-3 BV体积浓度为70±5%的乙醇溶液洗脱。以纯化水洗涤的目的是除杂。

进一步，步骤（3）和步骤（4）中，所用干燥方式为真空干燥、冷冻干燥、或喷雾干燥。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

1、本发明原料利用率高，活性成分提取较完全；生产实施过程可将油橄榄叶原料中的木犀草苷、羟基酪醇、毛蕊花糖苷、橄榄苦苷四类产品一一收集；步骤（4）中过滤后所得醇沉沉淀，主要成分为蛋白质、多糖类成分，可作为动物饲料使用。

2、本发明采用超微粉碎与连续逆流超声提取技术，活性成分提取率高。

3、本发明采用纯化水作为提取溶剂，整个生产过程无酸碱、未使用乙醇之外的其他有机溶剂，环境友好，且得到的产品颜色浅、气味淡、水溶性可控，具有更好的应用属性。

具体实施方式

下面以具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明不受下述实施例的限定。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本说明书中，除另有说明的外，其余百分比均指质量百分比。

实施例1

本实施例之油橄榄叶提取物的制备方法，包括以下步骤：

（1）将干燥的油橄榄叶原料，超微粉碎至粒径为80-120目，取500kg粉末（原料中木犀草苷、毛蕊花糖苷、羟基酪醇、橄榄苦甙的质量含量分别为0.53%、0.41%、0.82%、6.33%），进行连续逆流超声提取：加入相当于油橄榄叶原料质量20倍的纯化水，超声提取时间为30min，温度为60℃，超声频率为30K HZ，得提取液；

（2）将步骤（1）所得提取液过管式离心，离心液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液Brix值25.6，得浓缩液，浓缩液重量为895kg，将浓缩液在10℃条件下冷藏3小时，蝶式离心，得到离心清液和离心渣；本步骤离心转速为5000转/分钟；

（3）将步骤（2）所得离心渣，加入相当于离心渣重量6倍的 60℃的纯化水，搅拌30min溶解，离心后，得到上清液，即为溶液，将溶液经D101大孔树脂吸附，再依次用3 BV纯化水、3 BV体积浓度为70%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，洗脱液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液Brix值为27.9，浓缩液重量为20.5 kg，真空干燥得到5.0 kg木犀草苷产品（HPLC含量检测为50.87wt%，转移率为95.98%）。

（4）取步骤（2）所得离心清液，加入相当于离心清液体积3倍的体积浓度为95%的乙醇溶液，搅拌均匀后，静置2小时，板框过滤；滤液于65-75℃减压浓缩回收乙醇，浓缩至溶液无醇味，浓缩液Brix值24.3，重量为432kg；然后将浓缩液加400L纯化水稀释至Brix值为12.6，所得溶液经大孔树脂吸附，分别以3 BV纯化水、3 BV体积浓度为30%的乙醇溶液、3 BV体积浓度为50%的乙醇溶液、3 BV体积浓度为70%的乙醇溶液洗脱，分别收集30%乙醇洗脱液、50%乙醇洗脱液、70%乙醇洗脱液，洗脱液分别于65-75℃减压浓缩；分别得到羟基酪醇产品、橄榄苦甙产品、毛蕊花糖苷产品。

羟基酪醇产品采用冷冻干燥，得到8.8 kg产品（HPLC含量检测为43.50%，转移率为93.37%）。

毛蕊花糖苷产品采用真空干燥，得到4.6 kg毛蕊花糖苷产品（HPLC含量检测为42.37%，转移率为95.07%）。

橄榄苦苷产品采用喷雾干燥，得到37.5 kg橄榄苦苷产品（HPLC含量检测为81.22%，转移率为96.23%）。

实施例2

本实施例之油橄榄叶提取物的制备方法，包含如下步骤：

（1）将干燥的油橄榄叶原料，超微粉碎至粒径为80-120目，取500kg粉末（原料中木犀草苷、毛蕊花糖苷、羟基酪醇、橄榄苦甙的质量含量分别为0.49%、0.45%、0.81%、5.98%），进行连续逆流超声提取：加入相当于油橄榄叶原料15倍重量的纯化水，超声提取时间为40min，温度为65℃，超声频率为45K HZ，得提取液；

（2）将步骤（1）所得提取液经过管式离心，离心液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液Brix值24.3，得浓缩液（浓缩后有沉淀析出），浓缩液重量为910kg；将浓缩液在10℃条件下冷藏4小时，蝶式离心，得到离心清液和离心渣；

本步骤中，离心转速为4500转/分钟；

（3）将步骤（2）所得离心渣，加入相当于离心渣重量5倍的 65℃的纯化水，搅拌30min溶解，离心，将所得上清液经D101大孔树脂吸附，依次用3 BV纯化水、3 BV体积浓度为70%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液。洗脱液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液Brix值26.6，浓缩液重量为19.6 kg，真空干燥得到4.58 kg木犀草苷产品（HPLC含量检测为51.07%，转移率为95.47%）；

（4）取步骤（2）所得离心清液，加入相当于离心清液体积4倍的体积浓度为95%的乙醇溶液，搅拌均匀后，静置1.5小时，板框过滤。滤液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液无醇味，浓缩液Brix值24.9，重量为407kg。浓缩液加450L纯化水稀释至Brix值为11.8，溶液经大孔树脂吸附，分别以3 BV纯化水、3 BV体积浓度为30%乙醇溶液、3 BV体积浓度为50%乙醇溶液、3 BV体积浓度为70%乙醇溶液洗脱，分别收集30%乙醇洗脱液、50%乙醇洗脱液、70%乙醇洗脱液，洗脱液分别于65-75℃减压浓缩；分别得到羟基酪醇产品、橄榄苦甙产品、毛蕊花糖苷产品；

羟基酪醇产品采用冷冻干燥，得到8.6 kg产品（HPLC含量检测为44.07%，转移率为93.58%）。

毛蕊花糖苷产品采用真空干燥，得到5.15 kg毛蕊花糖苷产品（HPLC含量检测为41.62%，转移率为95.26%）。

橄榄苦苷产品采用喷雾干燥，得到35.4 kg橄榄苦苷产品（HPLC含量检测为80.35%，转移率为95.13%）。

实施例3

本实施例之油橄榄叶提取物的制备方法，包含如下步骤：

（1）将干燥的油橄榄叶原料，超微粉碎至粒径为80-120目，取500kg粉末（原料中木犀草苷、毛蕊花糖苷、羟基酪醇、橄榄苦甙的含量分别为0.58%、0.42%、0.75%、6.12%），进行连续逆流超声提取：加入相当于油橄榄叶原料重量25倍的纯化水，超声提取时间为45 min，温度为55℃，超声频率为45K HZ；

（2）将步骤（1）所得提取液过管式离心，离心液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液Brix值25.8，浓缩液重量为920kg。4℃条件下冷藏3小时，蝶式离心，得到离心清液和离心渣；

本步骤中，离心转速为4200转/分钟；

（3）将步骤（2）所得离心渣，加入相当于离心渣重量8倍的 55℃纯化水，搅拌30min，离心，将上清液经D101大孔树脂吸附，依次用3 BV纯化水、3 BV体积浓度为70%的乙醇溶液洗脱，收集70%乙醇洗脱液；洗脱液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液Brix值26.8，浓缩液重量为22.9 kg，真空干燥得到5.39 kg木犀草苷产品（HPLC含量检测为50.46%，转移率为93.79%）；

（4）取步骤（2）所得离心清液，加入相当于离心清液体积5倍的体积浓度为95%的乙醇溶液，搅拌均匀后，静置1小时，板框过滤；滤液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液无醇味，浓缩液Brix值24.1，重量为456kg。浓缩液加300L纯化水稀释Brix值14.5，溶液经大孔树脂吸附，分别以3 BV纯化水、3 BV体积浓度为30%的乙醇溶液、3 BV体积浓度为50%的乙醇溶液、3 BV体积浓度为70%的乙醇溶液洗脱，分别收集30%乙醇洗脱液、50%乙醇洗脱液、70%乙醇洗脱液，洗脱液分别于65-75℃减压浓缩；分别得到羟基酪醇产品、橄榄苦甙产品、毛蕊花糖苷产品。

羟基酪醇产品采用冷冻干燥，得到8.24 kg产品（HPLC含量检测为42.25%，转移率为92.84%）。

毛蕊花糖苷产品采用真空干燥，得到4.69 kg毛蕊花糖苷产品（HPLC含量检测为42.51%，转移率为94.94%）。

橄榄苦苷产品采用喷雾干燥，得到35.78 kg橄榄苦苷产品（HPLC含量检测为81.33%，转移率为95.10%）。

实施例4

本实施例之油橄榄叶提取物的制备方法，包含如下步骤：

（1）将干燥的油橄榄叶原料，超微粉碎至粒径为80-120目，取300kg粉末（原料中木犀草苷、毛蕊花糖苷、羟基酪醇、橄榄苦甙的含量分别为0.56%、0.38%、0.71%、5.98%），进行连续逆流超声提取：加入相当于油橄榄叶原料20倍重量的纯化水，超声提取时间为30 min，温度为60℃，超声频率为30K HZ；

（2）将步骤（1）所得提取液过管式离心，离心液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液Brix值27.1，浓缩液重量为520kg；4℃条件下冷藏2小时，蝶式离心，得到离心清液和离心渣；

本步骤中，离心转速为4200转/分钟；

（3）将步骤（2）所得离心渣，加入相当于离心渣重量7倍的 60℃的纯化水，搅拌30min溶解，离心，将上清液经D101大孔树脂吸附，依次用2 BV纯化水、2 BV体积浓度为70%的乙醇溶液洗脱，收集70%乙醇洗脱液；将洗脱液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液Brix值23.5，浓缩液重量为15.3 kg，真空干燥得到3.16 kg木犀草苷产品（HPLC含量检测为51.03%，转移率为95.99%）；

（4）取步骤（2）所得离心清液，加入相当于离心清液体积5倍的体积浓度为95%的乙醇溶液，搅拌均匀后，静置2小时，板框过滤；滤液于65-75℃减压浓缩，浓缩至溶液无醇味，浓缩液Brix值25.7，重量为250kg。浓缩液加390L纯化水稀释至Brix值10.0，溶液经大孔树脂吸附，分别以2 BV纯化水、2 BV体积浓度为30%的乙醇溶液、2 BV体积浓度为50%的乙醇溶液、2 BV体积浓度为70%的乙醇溶液洗脱，分别收集30%乙醇洗脱液、50%乙醇洗脱液、70%乙醇洗脱液，洗脱液于65-75℃减压浓缩；分别得到羟基酪醇产品、橄榄苦甙产品、毛蕊花糖苷产品。

羟基酪醇产品采用冷冻干燥，得到4.9 kg产品（HPLC含量检测为40.92%，转移率为94.14%）。

毛蕊花糖苷产品采用真空干燥，得到2.66 kg毛蕊花糖苷产品（HPLC含量检测为40.99%，转移率为95.64%）。

橄榄苦苷产品采用喷雾干燥，得到21.23kg橄榄苦苷产品（HPLC含量检测为81.19%，转移率为96.08%）。

Claims (10)

1.一种油橄榄叶提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将干燥的油橄榄叶原料，超微粉碎至粒径为80-120目，进行连续逆流超声提取，得提取液；连续逆流超声提取所用溶剂为纯化水，提取温度为60±5℃；

（2）将步骤（1）所得提取液经离心、浓缩，得浓缩液，将浓缩液冷藏、然后离心，得到离心清液和离心渣；浓缩液冷藏温度为4-10℃；

（3）将步骤（2）所得离心渣，加入热水溶解，固液分离得到溶液，将溶液经D101大孔树脂吸附，再依次用纯化水、体积浓度为65-75%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，洗脱液通过浓缩、干燥，得到质量含量＞50%的木犀草苷产品；热水温度为60±5℃；

（4）取步骤（2）所得离心清液，加入体积浓度＞90%的乙醇溶液，搅拌均匀，然后静置、过滤，滤液回收乙醇后加水稀释，所得溶液经大孔树脂吸附，分别以纯化水、体积浓度为30±5%的乙醇溶液、体积浓度为50±5%的乙醇溶液、体积浓度为70±5%的乙醇溶液洗脱，分别收集不同浓度的乙醇洗脱液，洗脱液分别通过浓缩、干燥，分别得到质量含量＞40%的羟基酪醇产品、质量含量＞80%的橄榄苦甙产品、质量含量＞40%的毛蕊花糖苷产品。

2.根据权利要求1所述的油橄榄叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，溶剂与原料重量比为15-25:1，提取时间为30-45 min，超声频率为30-45 K HZ。

3.根据权利要求1或2所述的油橄榄叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，离心方式为管式离心或碟式离心；浓缩方式为减压浓缩；浓缩液冷藏时间为2-4小时。

4.根据权利要求1或2所述的油橄榄叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，离心转速＞4000转/分钟；浓缩至溶液为Brix值为20-30。

5.根据权利要求1或2所述的油橄榄叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，加入热水的量为离心渣重量的5-8倍；

步骤（3）中，溶液经D101大孔树脂吸附后，依次以2-3 BV纯化水、2-3 BV体积浓度为65-75%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液。

6.根据权利要求1或2所述的油橄榄叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，加入体积浓度＞90%的乙醇溶液的量为离心清液体积的3-5倍；搅拌时间为10 -15min；静置时间为1-2小时；过滤方式为板框过滤。

7.根据权利要求1或2所述的油橄榄叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，滤液回收乙醇的方式为减压浓缩；加水稀释时，加纯化水稀释至溶液brix值为10-15。

8.根据权利要求1或2所述的油橄榄叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，大孔树脂为D101大孔树脂。

9.根据权利要求1或2所述的油橄榄叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，溶液经大孔树脂吸附后，依次以2-3 BV纯化水、2-3 BV体积浓度为30±5%的乙醇溶液、2-3 BV体积浓度为50±5%的乙醇溶液、2-3 BV体积浓度为70±5%的乙醇溶液洗脱。

10.根据权利要求1或2所述的油橄榄叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（3）和步骤（4）中，所用干燥方式为真空干燥、冷冻干燥、或喷雾干燥。