CN113876846B - 一种甜茶多酚的提取方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种甜茶多酚的提取方法及其应用，提取方法包括，从甜茶中提取甜茶苷后获得的甜茶多酚原液为原料，调节pH后用大孔树脂柱进行两次纯化，第一次纯化时收集的水洗脱液进行第二次纯化，随后将两次纯化时收集的乙醇洗脱液合并，去醇并稀释后过滤，上聚酰胺树脂柱并先后用水和乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液并后处理即可。本发明采用大孔树脂柱进行两次纯化，可大大提高其回收率，操作简单且成本低；用pH 8‑9的乙醇溶液洗脱解析可减少甜茶多酚在聚酰胺树脂上的吸附，提高回收率和产品纯度；在过聚酰胺树脂柱之前依次用微孔滤膜和超滤膜过滤，使后续分离纯化更加简便；本发明的方法可有效实现资源的充分利用，应用前景广阔。

Description

一种甜茶多酚的提取方法及其应用

技术领域

本发明涉及植物有效成分的提取技术领域，更具体地，涉及一种甜茶多酚的提取方法及其应用。

背景技术

广西甜茶(Rubus Suavissimus S.Lee)属蔷薇科悬钩子属植物，其主要的有效成分包括甜茶苷、甜茶多酚和甜茶黄酮。

甜茶苷是甜茶的主要成分，具体为一种萜类成分，由于其不含热量且甜度为蔗糖的300倍，而备受亚健康人群尤其是肥胖人群青睐，以甜茶苷类天然甜味剂作为食品添加剂应用非常广泛，因此，甜茶苷提取物也成为了该行业的热门产品。

甜茶多酚大都属于缩合单宁，又称鞣质，水溶性较好，甜茶多酚在甜茶干叶中含量高达18％；其中，茶多酚是多酚类化合物的重要组成部分，茶多酚有儿茶素类(黄烷醇类)、黄酮醇类、花青素类和酚酸类、缩酚酸类及聚合酚类等，是一种天然的抗氧化剂，其还具有抗菌抗病毒和提高人体免疫力的作用，因此，甜茶多酚具有良好的市场前景。

目前，有关甜茶中的甜茶苷和甜茶多酚等成分的提取和纯化的相关报道较多；现有技术中，对甜茶多酚的提取工艺大多是将大孔树脂柱流出液和低浓度乙醇洗脱液合并进行甜茶多酚的初步制备，在后续进一步纯化时使用反复萃取和凝胶树脂富集等方式，并使用丙酮等有机试剂，在放大生产时步骤较为繁琐，且有机试剂的使用受限，不适用于工业化生产。

申请号为CN201510700707.8的中国发明专利申请公开了一种同时制备甜茶甙和甜茶总多酚的工艺，通过将甜茶粉末使用水提取，提取液通过大孔树脂柱，收集流出液及低浓度乙醇洗脱液并合并两者，再次过大孔树脂柱，再收集40％乙醇洗脱液，制得的多酚纯度≥60％，即该工艺制得的多酚纯度偏低，且产率较低(10％左右)。

申请号为CN201810688181.X的中国发明专利申请公开了一种从甜茶中提取茶氨酸以及同时提取甜茶苷和茶多酚的方法，该方法具体为，收集大孔树脂柱流出液，使用聚酰胺树脂进行富集纯化，收集高浓度乙醇干燥制得，但其回收率未知。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

针对现有技术所存在的不足，本发明提供了一种甜茶多酚的提取方法及其应用。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种甜茶多酚的提取方法，包括：

从甜茶中提取甜茶苷后，以获得的副产物甜茶多酚原液为原料，调节pH小于5后，采用大孔树脂柱进行两次纯化，且两次纯化分别用水和35-60v％乙醇水溶液先后洗脱，将第一次纯化时收集的水洗脱液进行第二次纯化，随后将两次纯化时收集的乙醇洗脱液合并，经去醇和加水稀释得到甜茶多酚提取液后，将其过滤并上活化后的聚酰胺树脂柱，用水和20-60v％乙醇水溶液先后洗脱，收集聚酰胺树脂柱的乙醇洗脱液并进行后处理，即得甜茶多酚。

在上述技术方案中，在所述两次纯化的过程中，所采用的大孔树脂柱可相同也可不同，分别为非极性大孔树脂柱或弱极性大孔树脂柱中的一种。

在本发明的具体实施方式中，在所述两次纯化的过程中，所采用的大孔树脂柱分别为AB-8型、D101型、H-10型、XAD1600型和DA型大孔树脂柱中的任意一种。

在本发明的一个优选实施方式中，在所述两次纯化的过程中，所采用的大孔树脂柱的径高比为1∶5-10，进一步优选为1∶6-8。

在上述技术方案中，在采用大孔树脂柱进行两次纯化前，所述甜茶多酚原液中甜茶多酚的含量为1-10mg/ml。

在上述技术方案中，在采用大孔树脂柱进行两次纯化前，用5-10wt％的冰醋酸水溶液将所述甜茶多酚原液的pH调节至3-4。

进一步地，在上述技术方案中，所述甜茶多酚原液的上样流速和上样量分别为0.5-2BV/h和3-5BV。

进一步地，在上述技术方案中，第一次纯化时，所述水和35-60v％乙醇水溶液的洗脱流速分别为1-3BV/h和1-3BV/h，所述水和35-60v％乙醇水溶液的洗脱用量分别为2-3BV和1-3BV。

进一步地，在上述技术方案中，第二次纯化时，所述水和35-60v％乙醇水溶液的洗脱流速分别为1-2BV/h和1-2BV/h，所述水和35-60v％乙醇水溶液的洗脱用量分别为1-2BV和1-3BV。

在上述技术方案中，过滤后的所述甜茶多酚提取液以0.8-2.0BV/h的流速通过聚酰胺树脂柱。

在上述技术方案中，依次用2-3BV的水以1-3BV/h的洗脱流速和1-2BV的pH 8-9、20-60v％乙醇水溶液以0.5-2BV/h的洗脱流速洗脱聚酰胺树脂柱。

在本发明的具体实施方式中，所述聚酰胺树脂柱的活化流程如下：

将聚酰胺树脂用95v％乙醇水溶液浸泡24h后上柱，用水洗至无醇味后，用2BV的5wt％氢氧化钠水溶液以1BV/h的流速洗脱并浸泡4h，再用水洗至pH为7，随后使用2BV10wt％冰醋酸水溶液以1BV/h的流速洗脱并浸泡4h，最后用水洗脱至pH为6-7即可。

又进一步地，在上述技术方案中，所述聚酰胺树脂柱的乙醇洗脱液的后处理包括，加入pH调节剂调节pH至5-6后，去醇干燥。

在本发明的一个优选实施方式中，所述pH调节剂为氨水、1-5wt％碳酸钠水溶液和1-5wt％碳酸氢钠水溶液中的一种或多种。

又进一步地，在上述技术方案中，将两次纯化收集得到的乙醇洗脱液合并后，在45-65℃和真空度≤0.1MPa的条件下浓缩至其乙醇含量小于20v％，加水稀释得到甜茶多酚的含量为5-20mg/ml甜茶多酚提取液，再依次经微孔滤膜和超滤膜过滤。

在本发明的一个优选实施方式中，所述微孔滤膜的孔径为0.2-1μm，所述超滤膜为截留分子量5-10万、孔径50-100nm的超滤膜。

还进一步地，在上述技术方案中，以甜茶提取甜茶苷并获得甜茶多酚原液的过程如下：

将粉末状甜茶用水回流提取后，将收集得到的水提液离心后过板框过滤器，再以2-3BV/h的流速上D101大孔树脂柱并收集柱流出液，随后依次用水和60-85v％乙醇水溶液先后洗脱，收集D101醇洗脱液即为甜茶苷原液，将柱流出液和收集得到的D101水洗脱液合并，即为甜茶多酚原液。

在本发明的一个优选实施方式中，所述粉末状甜茶的粒径为24-100目。

在本发明的另一个优选实施方式中，所述回流提取的的工艺条件为，控制粉末状甜茶与水的重量比为1∶6-10，回流温度为90-100℃，提取时间为1-2h，提取次数为2-4次。

在本发明的又一个优选实施方式中，所述离心的转速为3500-4800rpm。

在本发明的再一个优选实施方式中，所述板框过滤器为规格300目的板框过滤器。

在本发明的还一个优选实施方式中，所述水和60-85v％乙醇水溶液洗脱D101大孔树脂柱的流速分别为1-3BV/h和1-3BV/h，所述水和60-85v％乙醇水溶液洗脱D101大孔树脂柱的用量分别为2-3BV和2-3BV。

本发明另一方面还提供了上述方法在综合提取甜茶中的甜茶苷和甜茶多酚中的应用。

本发明与现有技术相比，具有以下优点：

(1)本发明所提供的方法通过采用大孔树脂柱对甜茶多酚原液进行两次纯化，将甜茶多酚的回收率提高至大于70％，且将大孔树脂柱串联使用操作简单，洗脱液易于收集获取，且产生的废液少，一次纯化后的水洗脱液可直接进行二次纯化，可减少一次重新上柱，节约人力成本；

(2)本发明所提供的方法通过使用pH 8-9的20-60v％乙醇水溶液进行洗脱解析，可最大程度减少甜茶多酚在聚酰胺树脂上的吸附，提高甜茶多酚的回收率，大大减少甜茶多酚的损失，并能达到制备高纯度甜茶多酚的目的，经检测，本发明所提供的方法的甜茶多酚的回收率高达70-90％，产品纯度可达80-90％；

(3)本发明所提供的方法通过在过聚酰胺树脂柱之前，依次使用微孔滤膜和超滤膜进行过滤，既可有效去除树脂和蛋白质等大分子杂质，又能避免滤液上柱时造成聚酰胺树脂柱的堵塞，使后续分离纯化更加简便；

(4)本发明所提供的方法以甜茶提取甜茶苷后的副产物甜茶多酚原液为原料，可有效实现资源的充分利用，使得资源利用最大化，减少浪费，实际应用前景广阔。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。

应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例中，如无特别说明，所用手段均为本领域常规的手段。

本文中所用的术语“包含”、“包括”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。

例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。

此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

本发明实施例所用的试剂和仪器均为市售产品。

本发明实施例所用的甜茶多酚原液的含量为24.14wt％，检测方法参照中国药典2020版四部通则2202鞣质含量测定法。

实施例1

本发明实施例提供了一种甜茶多酚的提取方法，具体包括以下步骤：

S1、称取干燥后粉碎过100目筛的粉末状甜茶20g，加水回流提取3次，控制其料液比分别为1∶10、1∶8和1∶8，提取温度为90℃，将其合并后得到水提液，以4000r/min转速离心除杂后，过300目的板框过滤器，随后以2BV/h的流速通过径高比为1∶5的D101大孔树脂柱，上样量为2BV，吸附完成后，分别使用2BV水、2BV 70v％乙醇以1BV/h流速洗脱，收集各段洗脱液，将柱流出液和水洗脱液合并得到甜茶多酚原液，70v％醇洗脱液即为甜茶苷原液；

S2、将S1中的甜茶多酚原液用5wt％的冰醋酸水溶液调节pH至3-4，以1BV/h流速通过AB-8大孔树脂，上柱量为3BV，吸附完成后，分别使用2BV水和1.5BV 50v％乙醇水溶液以1BV/h的流速洗脱，分别收集水洗脱液和50v％乙醇洗脱液；

S3、将S2中的水洗脱液以0.5BV/h流速通过AB-8大孔树脂柱后，分别使用2BV水和1BV 50v％乙醇水溶液以1BV/h的流速洗脱，收集50v％乙醇洗脱液并与步骤S2中的50v％乙醇洗脱液合并，在50℃和真空度≤0.1MPa的条件下浓缩至其乙醇含量小于20v％，加水稀释得到甜茶多酚的含量为5mg/ml甜茶多酚提取液；

S4、将S3中的甜茶多酚提取液依次通过孔径为0.2μm的微孔滤膜和50nm的超滤膜后，以0.8BV/h的流速通过聚酰胺树脂柱，上样量为3BV，吸附完成后，依次使用2BV水和1BVpH 8-9(使用浓氨水调节)的20v％乙醇水溶液进行洗脱，收集20v％乙醇洗脱液，使用5wt％碳酸钠水溶液调节pH为5-6，浓缩干燥后得到甜茶多酚。

经紫外检测可知，所制备得到的甜茶多酚的纯度为85.5wt％，称量计算后得知其回收率为81.4％。

实施例2

本发明实施例提供了一种甜茶多酚的提取方法，具体包括以下步骤：

S1、称取干燥后粉碎过50目筛的粉末状甜茶5kg，加水回流提取3次，控制其料液比分别为1∶8、1∶6和1∶6，提取温度为95℃，将其合并后得到水提液，以4000r/min转速离心除杂后，过300目的板框过滤器，随后以3BV/h的流速通过径高比为1∶8的D101大孔树脂柱，上样量为2BV，吸附完成后，分别使用3BV水、2BV 70v％乙醇以2BV/h流速洗脱，收集各段洗脱液，将柱流出液和水洗脱液合并得到甜茶多酚原液，70v％醇洗脱液即为甜茶苷原液；

S2、将S1中的甜茶多酚原液用5wt％的冰醋酸水溶液调节pH至3-4，以1BV/h流速通过H-10大孔树脂，上柱量为5BV，吸附完成后，分别使用2BV水和1.5BV 50v％乙醇水溶液以2BV/h的流速洗脱，分别收集水洗脱液和50v％乙醇洗脱液；

S3、将S2中的水洗脱液以1BV/h流速通过AB-8大孔树脂柱后，分别使用2BV水和1.5BV 50v％乙醇水溶液以1BV/h的流速洗脱，收集50v％乙醇洗脱液并与步骤S2中的50v％乙醇洗脱液合并，在50℃和真空度≤0.1MPa的条件下浓缩至其乙醇含量小于20v％，加水稀释得到甜茶多酚的含量为10mg/ml甜茶多酚提取液；

S4、将S3中的甜茶多酚提取液依次通过孔径为0.5μm的微孔滤膜和100nm的超滤膜后，以1.5BV/h的流速通过聚酰胺树脂柱，上样量为4BV，吸附完成后，依次使用3BV水和1BVpH 8-9(使用浓氨水调节)的20v％乙醇水溶液进行洗脱，收集20v％乙醇洗脱液，使用5wt％碳酸氢钠水溶液调节pH为5-6，浓缩干燥后得到甜茶多酚。

经紫外检测可知，所制备得到的甜茶多酚的纯度为89.47wt％，称量计算后得知其回收率为85.7％。

实施例3

本发明实施例提供了一种甜茶多酚的提取方法，具体包括以下步骤：

S1、称取干燥后粉碎过24目筛的粉末状甜茶500kg，加水回流提取3次，控制其料液比分别为1∶8、1∶6和1∶5，提取温度为100℃，将其合并后得到水提液，以4000r/min转速离心除杂后，过300目的板框过滤器，随后以2BV/h的流速通过径高比为1∶10的D101大孔树脂柱，上样量为4BV，吸附完成后，分别使用3BV水、2BV 70v％乙醇以1BV/h流速洗脱，收集各段洗脱液，将柱流出液和水洗脱液合并得到甜茶多酚原液，70v％醇洗脱液即为甜茶苷原液；

S2、将S1中的甜茶多酚原液用5wt％的冰醋酸水溶液调节pH至3-4，以1BV/h流速通过XAD1600大孔树脂，上柱量为3BV，吸附完成后，分别使用2BV水和2BV 50v％乙醇水溶液以1.5BV/h的流速洗脱，分别收集水洗脱液和50v％乙醇洗脱液；

S3、将S2中的水洗脱液以1BV/h流速通过XAD1600大孔树脂柱后，分别使用2BV水和2BV 50v％乙醇水溶液以1BV/h的流速洗脱，收集50v％乙醇洗脱液并与步骤S2中的50v％乙醇洗脱液合并，在50℃和真空度≤0.1MPa的条件下浓缩至其乙醇含量小于20v％，加水稀释得到甜茶多酚的含量为8mg/ml甜茶多酚提取液；

S4、将S3中的甜茶多酚提取液依次通过孔径为1μm的微孔滤膜和80nm的超滤膜后，以1.5BV/h的流速通过聚酰胺树脂柱，上样量为3BV，吸附完成后，依次使用2BV水和1.5BVpH 8-9(使用浓氨水调节)的60v％乙醇水溶液进行洗脱，收集60v％乙醇洗脱液，使用5wt％碳酸氢钠水溶液调节pH为5-6，浓缩干燥后得到甜茶多酚。

经紫外检测可知，所制备得到的甜茶多酚的纯度为88.27wt％，称量计算后得知其回收率为80.56％。

实施例4

本发明实施例提供了一种甜茶多酚的提取方法，具体包括以下步骤：

S1、称取干燥后粉碎过24目筛的粉末状甜茶200kg，加水回流提取3次，控制其料液比分别为1∶8、1∶6和1∶5，提取温度为100℃，将其合并后得到水提液，以4000r/min转速离心除杂后，过300目的板框过滤器，随后以3BV/h的流速通过径高比为1∶7的D101大孔树脂柱，上样量为5BV，吸附完成后，分别使用2BV水、2BV 70v％乙醇以2BV/h流速洗脱，收集各段洗脱液，将柱流出液和水洗脱液合并得到甜茶多酚原液，70v％醇洗脱液即为甜茶苷原液；

S2、将S1中的甜茶多酚原液用5wt％的冰醋酸水溶液调节pH至3-4，以2BV/h流速通过DA大孔树脂，上柱量为3.5BV，吸附完成后，分别使用2.5BV水和1.5BV 50v％乙醇水溶液以1BV/h的流速洗脱，分别收集水洗脱液和50v％乙醇洗脱液；

S3、将S2中的水洗脱液以1BV/h流速通过DA大孔树脂柱后，分别使用2BV水和3BV50v％乙醇水溶液以1BV/h的流速洗脱，收集50v％乙醇洗脱液并与步骤S2中的50v％乙醇洗脱液合并，在50℃和真空度≤0.1MPa的条件下浓缩至其乙醇含量小于20v％，加水稀释得到甜茶多酚的含量为20mg/ml甜茶多酚提取液；

S4、将S3中的甜茶多酚提取液依次通过孔径为0.8μm的微孔滤膜和70nm的超滤膜后，以2BV/h的流速通过聚酰胺树脂柱，上样量为3BV，吸附完成后，依次使用2BV水和1.5BVpH 8-9(使用浓氨水调节)的60v％乙醇水溶液进行洗脱，收集60v％乙醇洗脱液，使用5wt％氨水调节pH为5-6，浓缩干燥后得到甜茶多酚。

经紫外检测可知，所制备得到的甜茶多酚的纯度为86.54wt％，称量计算后得知其回收率为78.24％。

对比例1

本发明对比例提供了一种甜茶多酚的提取方法，其具体工艺与实施例1类似，区别仅在于，在步骤S4中，用于洗脱聚酰胺树脂柱的20v％乙醇水溶液的pH为7(即并未调节)，其它工艺条件均与实施例1相同。

经紫外检测可知，所制备得到的甜茶多酚的纯度为78.64wt％，称量计算后得知其回收率为64.21％。

分析实施例1-4和对比例1的结果，可以看出：

(1)本发明实施例通过采用大孔树脂柱对甜茶多酚原液进行两次纯化，将甜茶多酚的回收率提高至大于70％，在实际生产中，将大孔树脂柱串联使用操作简单，洗脱液易于收集获取，且产生的废液少，一次纯化后的水洗脱液可直接进行二次纯化，可减少一次重新上柱，节约人力成本；

(2)本发明实施例通过使用pH 8-9的20-60v％乙醇水溶液进行洗脱解析，可最大程度减少甜茶多酚在聚酰胺树脂上的吸附，提高甜茶多酚的回收率，大大减少甜茶多酚的损失，并能达到制备高纯度甜茶多酚的目的，经检测，本发明所提供的方法的甜茶多酚的回收率高达70-90％，产品纯度可达80-90％；

(3)本发明实施例通过在过聚酰胺树脂柱之前，依次使用微孔滤膜和超滤膜进行过滤，既可有效去除树脂和蛋白质等大分子杂质，又能避免滤液上柱时造成聚酰胺树脂柱的堵塞，使后续分离纯化更加简便；

(4)本发明实施例以甜茶提取甜茶苷后的副产物甜茶多酚原液为原料，可有效实现资源的充分利用，使得资源利用最大化，减少浪费，实际应用前景广阔。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。

应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (14)

1.一种甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

从甜茶中提取甜茶苷后，以获得的副产物甜茶多酚原液为原料，调节pH小于5后，采用大孔树脂柱进行两次纯化，且两次纯化分别用水和35-60 v%乙醇水溶液先后洗脱，将第一次纯化时收集的水洗脱液进行第二次纯化，随后将两次纯化时收集的乙醇洗脱液合并，经去醇和加水稀释得到甜茶多酚提取液后，将其过滤并上活化后的聚酰胺树脂柱，用水和pH8-9、20-60 v%乙醇水溶液先后洗脱，收集聚酰胺树脂柱的乙醇洗脱液并进行后处理，即得甜茶多酚；

其中，以甜茶提取甜茶苷并获得甜茶多酚原液的过程如下：

将粉末状甜茶用水回流提取后，将收集得到的水提液离心后过板框过滤器，再以2-3BV/h的流速上D101大孔树脂柱并收集柱流出液，随后依次用水和60-85 v%乙醇水溶液先后洗脱，收集D101醇洗脱液即为甜茶苷原液，将柱流出液和收集得到的D101水洗脱液合并，即为甜茶多酚原液。

2.根据权利要求1所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

在所述两次纯化的过程中，所采用的大孔树脂柱分别为AB-8型、D101型、H-10型、XAD1600型和DA型大孔树脂柱中的一种。

3.根据权利要求2所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

在所述两次纯化的过程中，所采用的大孔树脂柱的径高比为1：5-10。

4.根据权利要求1所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

在采用大孔树脂柱进行两次纯化前，所述甜茶多酚原液中甜茶多酚的含量为1-10 mg/ml。

5.根据权利要求1所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

在采用大孔树脂柱进行两次纯化前，用5-10 wt%的冰醋酸水溶液将所述甜茶多酚原液的pH调节至3-4。

6.根据权利要求1-5任一项所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

所述甜茶多酚原液的上样流速和上样量分别为0.5-2 BV/h和3-5 BV；

第一次纯化时，所述水和35-60 v%乙醇水溶液的洗脱流速分别为1-3 BV/h和1-3 BV/h，所述水和35-60 v%乙醇水溶液的洗脱用量分别为2-3 BV和1-3 BV；

第二次纯化时，所述水和35-60 v%乙醇水溶液的洗脱流速分别为1-2 BV/h和1-2 BV/h，所述水和35-60 v%乙醇水溶液的洗脱用量分别为1-2 BV和1-3 BV。

7.根据权利要求1所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

过滤后的所述甜茶多酚提取液以0.8-2.0 BV/h的流速通过聚酰胺树脂柱；随后依次用2-3 BV的水以1-3 BV/h的洗脱流速和1-2 BV的pH 8-9、20-60 v%乙醇水溶液以0.5-2 BV/h的洗脱流速洗脱聚酰胺树脂柱。

8.根据权利要求1或7所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

所述聚酰胺树脂柱的活化流程如下：

将聚酰胺树脂用95 v%乙醇水溶液浸泡24 h后上柱，用水洗至无醇味后，用2 BV的5wt%氢氧化钠水溶液以1 BV/h的流速洗脱并浸泡4 h，再用水洗至pH为7，随后使用2 BV 10wt%冰醋酸水溶液以1 BV/h的流速洗脱并浸泡4 h，最后用水洗脱至pH为6-7即可。

9.根据权利要求1所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

所述聚酰胺树脂柱的乙醇洗脱液的后处理包括，加入pH调节剂调节pH至5-6后，去醇干燥。

10.根据权利要求9所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，所述pH调节剂为氨水、1-5 wt%碳酸钠水溶液和1-5 wt%碳酸氢钠水溶液中的一种或多种。

11.根据权利要求1所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

将两次纯化收集得到的乙醇洗脱液合并后，在45-65 ℃和真空度≤0.1 MPa的条件下浓缩至其乙醇含量小于20 v%，加水稀释得到甜茶多酚的含量为5-20 mg/ml甜茶多酚提取液，再依次经微孔滤膜和超滤膜过滤。

12.根据权利要求11所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

所述微孔滤膜的孔径为0.2-1 μm，所述超滤膜为截留分子量5-10万、孔径50-100 nm的超滤膜。

13.根据权利要求1所述的甜茶多酚的提取方法，其特征在于，

以甜茶提取甜茶苷并获得甜茶多酚原液的过程中，

所述粉末状甜茶的粒径为24-100 目；

所述回流提取的工艺条件为，控制粉末状甜茶与水的重量比为1：6-10，回流温度为90-100 ℃，提取时间为1-2 h，提取次数为2-4 次；

所述离心的转速为3500-4800 rpm；

所述板框过滤器为规格300目的板框过滤器；

所述水和60-85 v%乙醇水溶液洗脱D101大孔树脂柱的流速分别为1-3 BV/h和1-3 BV/h，所述水和60-85 v%乙醇水溶液洗脱D101大孔树脂柱的用量分别为2-3 BV和2-3 BV。

14.权利要求1-13任一项所述的方法在综合提取甜茶中的甜茶苷和甜茶多酚中的应用。