CN110105458A - 从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和d-甘露醇的方法 - Google Patents

Abstract

从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D‑甘露醇的方法，包括以下步骤：（1）将罗汉果甜苷提取废液煮沸，保温，灭菌，冷却，超滤，加水赶洗，透过液上阴离子交换树脂柱，收集流出液，水洗，收集水洗液，浓缩；（2）上凝胶树脂柱，等度洗脱，分段收集目标洗脱液，浓缩；（3）在罗汉果多糖粗品浓缩液中，加入醇溶液，搅拌，静置，过滤，干燥，得罗汉果多糖产品；将滤液浓缩与D‑甘露醇粗品浓缩液混合，结晶，过滤，醇洗，干燥，得D‑甘露醇产品。本发明方法所得罗汉果多糖的质量含量≥95%，收率≥92%；所得D‑甘露醇的质量含量≥98%，收率≥92%，质量稳定；本发明方法简单，提取时间短，成本低，废液排放少，可实现大规模生产。

Description

从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法

技术领域

本发明涉及一种提取多糖和D-甘露醇的方法，具体涉及一种从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法。

背景技术

罗汉果为葫芦科罗汉果属多年生藤本植物，主产于广西桂林地区。罗汉果果实为药食同源，具有较高营养价值、药用价值，营养成分主要含罗汉果甜苷类、糖类、蛋白质、黄酮类、氨基酸、维生素和矿质元素等，其性凉，味甘、酸，有清热解毒、润肺平喘、生津止咳、润肠排毒等功效。

罗汉果甜苷类主要成分为罗汉果苷Ⅲ、罗汉果苷Ⅳ、罗汉果苷Ⅴ、罗汉果苷ⅡE、罗汉果苷ⅢE等，其中，罗汉果苷Ⅴ在罗汉果中的含量和甜度较高，甜度约为蔗糖的300倍，因其甜度高、热值低特性，在饮料、糖果、糕点等行业，用作蔗糖的替代品。

罗汉果糖类主要成分为葡萄糖、果糖、D-甘露醇、果胶及多糖等，其中，多糖一般分子量较大，有较强水溶性，药理表明多糖具有提高人体免疫力的生物活性，而且多糖能水解成单糖，营养价值较高，可作为保健品的原料。D-甘露醇为无色或白色结晶粉末，略带蔗糖甜味，易溶于热水，呈酸性，在低温下溶解度降低，易析出晶体，可以用作甜味剂、防黏剂、赋形剂、营养补充剂、品质改良剂及保湿剂，在医药上可制成注射液，作为高渗降压药，是临床抢救特别是脑部疾患者抢救常用的一种药，用于降低颅内压、眼内压，还可作为利尿剂，治疗急性肾功能衰竭。

目前，罗汉果提取罗汉果甜苷加工主要工艺是将鲜果破碎，加水提取，提取液离心过滤后，经大孔吸附树脂富集，乙醇洗脱，回收乙醇，离子交换树脂脱色，减压浓缩，干燥。罗汉果甜苷能够通过大孔吸附树脂的范德华力和分子筛作用，被吸附富集，而罗汉果中的多糖和D-甘露醇则会随流出液分离排除，通常这部分都被当成废液直接排掉，既浪费资源，又污染环境。通常这部分废液有机物含量较高，即COD含量较高，必须加以处理，才能正常排放，处理成本较高。如果能将吸附柱流出液回收利用，既能节约资源，提高产品的附加值，又能减少污水排放，减低生产的成本。

但现有方法对废液中的多糖和D-甘露醇的提取鲜有研究。

CN103145869A公开了一种含有罗汉果多糖的提取物的制备方法，其基本工艺流程为：纯净水提取，浓缩，柱层析脱色脱臭，回收液酶解，脱色，板框过滤，微滤，纳滤，干燥。虽然该方法实现了吸附柱的流出液回收利用，但所得罗汉果多糖纯度较低，且不能同时提取D-甘露醇。

CN101289517A公开了一种罗汉果多糖的提取方法，其基本工艺流程为：破碎，提取，过滤，大孔树脂柱层析，漏出液膜分离，乙醇沉淀。但是，该方法的缺点是多糖的回收率偏低，且不能同时提取D-甘露醇。

CN1375499A公开了一种从罗汉果中分离多种成分的方法，是将鲜果破碎水提，提取渣碱水提取，合并提取液，减压浓缩，脂肪醇沉淀，得沉淀物（Ⅰ）和溶解液（Ⅱ），沉淀物（Ⅰ）经阴离子交换树脂纯化，脂肪醇沉淀，得罗汉果多糖，溶解液（Ⅱ）去除脂肪醇后，经聚酰胺、大孔吸附树脂纯化，得罗汉果甜苷，聚酰胺树脂经碱性脂肪醇洗脱，得罗汉果黄酮。虽然该方法可分离多种罗汉果成分，但是，缺点是纯度、收率低，且不能同时提取D-甘露醇。

CN109320400A公开了一种从罗汉果甜苷生产废液中提取天然甘露醇的方法，是将罗汉果甜苷废液经纳滤，填料脱色，减压浓缩，低碳醇结晶，重结晶，得甘露醇。但是，该方法不能同时提取罗汉果多糖。

CN102675399A公开了一种从罗汉果中提取罗汉果苷V和甘露醇的方法，是将罗汉果干果破壳压碎，乙醇回流提取，过滤，减压浓缩，乙酸乙酯萃取，阳离子树脂交换，减压浓缩，结晶，重结晶，得甘露醇。但是，该方法使用易燃易爆的乙酸乙酯，不仅溶剂用量大，而且回收困难，对生产设备条件要求较高，成本较高，且不能同时提取罗汉果多糖。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种产品的质量含量和收率高、质量稳定，操作工艺简单，提取时间短，能耗、成本低，生产效率高，废液排放少，可实现连续大规模生产的从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，包括以下步骤：

（1）超滤、脱色：将罗汉果甜苷提取废液煮沸，保温，灭菌，冷却至常温后，超滤，加水赶洗陶瓷膜上的滤渣至透过液无色透明且糖度为0，透过液上阴离子交换树脂柱，收集流出液，水洗至糖度为0，收集水洗液，减压浓缩，得脱色浓缩液；

（2）凝胶柱层析：将步骤（1）所得脱色浓缩液上凝胶树脂柱，再以水为流动相进行等度洗脱，分段收集目标洗脱液，减压浓缩，分别得罗汉果多糖粗品浓缩液和D-甘露醇粗品浓缩液；

（3）醇沉、结晶：在步骤（2）所得罗汉果多糖粗品浓缩液中，加入醇溶液，搅拌均匀后，静置，离心过滤，将沉淀物冷冻干燥，得罗汉果多糖产品；将过滤的滤液减压浓缩，与步骤（2）所得D-甘露醇粗品浓缩液混合，静置冷冻结晶，过滤，醇洗至纯白色，真空干燥，得D-甘露醇产品。

优选地，步骤（1）中，所述罗汉果甜苷提取废液中多糖的质量含量为0.30～0.70%，D-甘露醇的质量含量为0.05～0.35%。本发明所使用的罗汉果甜苷提取废液来源于大孔吸附树脂上柱后流出的废液。

优选地，步骤（1）中，所述煮沸的温度为90～100℃。

优选地，步骤（1）中，所述保温的时间为30～120min。煮沸保温的目的是利用高温变性使废液中的高分子蛋白、果胶等物质析出，便于去除。

优选地，步骤（1）中，所述灭菌为UHT灭菌。

优选地，步骤（1）中，所述灭菌的温度为100～140℃，压力为0.1～0.8MPa，时间为5～60s。

优选地，步骤（1）中，用于超滤的超滤膜为陶瓷膜或高分子材料有机超滤膜。超滤的目的是去除高温煮沸而变性的高分子蛋白、果胶等物质，以保证物料的澄清度，从而增强后续脱色效果。

优选地，所述陶瓷膜的孔径为0.2～10.0μm（更优选0.3～1.0μm）。

优选地，所述高分子材料有机超滤膜的截留分子量为1～10万道尔顿。

优选地，步骤（1）中，上柱的流速为0.2～2.0BV/h。

优选地，步骤（1）中，所述阴离子交换树脂柱的装柱径高比为1:2～8（更优选1:4～6）。

优选地，步骤（1）中，透过液中的固含量与阴离子交换树脂的质量体积比（kg/L）为1:5～20（更优选1:6～10）。

优选地，步骤（1）中，所述阴离子交换树脂为弱碱性或强碱性阴离子交换树脂。废液中的色素成分多为黄酮类物质，能够跟阴离子交换树脂中的基团快速进行交换，从而起着良好的脱色效果。

优选地，步骤（1）中，所述阴离子交换树脂的型号为D-280型、LSA-700型、D-285型、D-941型或D-296型等中的一种或几种。

优选地，步骤（1）中，所述水洗的流速为0.2～2.0BV/h。

优选地，步骤（1）中，所述减压浓缩的温度为50～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，浓缩至固含量为20～60%。

优选地，步骤（1）中，在所述阴离子交换树脂使用前，先用1.5～2.5BV，体积分数85～99%的乙醇溶液浸泡20～30h，再用体积分数85～99%的乙醇溶液洗至流出液无色、无异味，水洗至无醇味，再用3～5BV质量浓度4～6%的氢氧化钠溶液碱洗，再水洗至中性，然后用3～5BV质量浓度4～6%的盐酸溶液酸洗，再水洗至中性，最后再用3～5BV质量浓度4～6%的氢氧化钠溶液碱洗，再水洗至中性，即成。

优选地，步骤（2）中，上柱的流速为0.2～2.0BV/h。

优选地，步骤（2）中，所述凝胶树脂柱的装柱径高比为1:10～50。

优选地，步骤（2）中，所述脱色浓缩液中的固含量与凝胶树脂的质量体积比（kg/L）为1:8～50（更优选1:10～20）。

优选地，步骤（2）中，所述凝胶树脂为Sephadex G-100型、Sephadex G-150型或Sephadex G-200型葡聚糖凝胶树脂等中一种或几种。由于罗汉果多糖的分子量较大，一般达到10万道尔顿以上，而D-甘露醇分子量较小，仅仅182.7道尔顿，两种组分相对分子量差异较大，通过凝胶柱层析的分子筛作用，多糖会优先于D-甘露醇洗脱下来，通过分段收集目标组分。采用凝胶树脂分离，不仅可以达到良好的分离纯化效果，而且生产成本更低、效率更高。

优选地，步骤（2）中，所述等度洗脱的流速为5～10BV/h。上柱流速较小，主要为了保证物料能均匀填充到凝胶填料中，而洗脱流速较大，可在保证分离效果的前提下，缩短分离时间，提高生产效率，减低生产成本。

优选地，步骤（2）中，所述分段收集目标洗脱液是指：通过凝胶色谱系统蒸发光散射检测器信号显示屏上的峰型分布，根据先后出现多糖和D-甘露醇两个独立峰及保留时间，分段收集目标洗脱液。

优选地，步骤（2）中，所述减压浓缩的温度为20～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，浓缩至固含量为40～60%。

优选地，步骤（2）中，在所述凝胶树脂使用前，先用沸水溶胀2～4h后，湿法均匀地填充到树脂柱中，排除气泡，用洗脱剂洗脱，即成。

优选地，所述洗脱剂的用量为6～10BV。

优选地，步骤（3）中，提取罗汉果多糖产品时，所述罗汉果多糖粗品浓缩液与醇溶液的质量体积比（kg/L）为1:2～6。

优选地，步骤（3）中，提取罗汉果多糖产品时，所述醇溶液的体积分数为60～95%。罗汉果多糖极易溶于水，难溶于有机溶剂，通过醇沉的纯化方式能够有效将多糖与醇溶性杂质分离开来。

优选地，步骤（3）中，提取罗汉果多糖产品时，所述醇溶液为甲醇溶液、乙醇溶液或丙醇溶液等中的一种或几种。本发明方法所使用的醇溶液优选食品级。

优选地，步骤（3）中，提取罗汉果多糖产品时，所述静置的时间为2～4h。

优选地，步骤（3）中，提取罗汉果多糖产品时，所述冷冻干燥的温度为-40～50℃，真空度为-0.10～-0.08MPa，时间为24～48h。

优选地，步骤（3）中，提取D-甘露醇产品时，所述减压浓缩的温度为20～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，浓缩至固含量为40～60%。

优选地，步骤（3）中，提取D-甘露醇产品时，所述静置冷冻结晶的温度为5～15℃，时间为12～48h。由于D-甘露醇在加热状态下，溶解度较大，遇冷，则会很快析出大量晶体，从而实现提纯效果。

优选地，步骤（3）中，提取D-甘露醇产品时，所述醇洗的醇溶液的体积分数为80～100%。

优选地，步骤（3）中，提取D-甘露醇产品时，所述醇溶液为甲醇溶液、乙醇溶液或丙醇溶液等中的一种或几种。本发明方法所使用的醇溶液优选食品级。

优选地，步骤（3）中，提取D-甘露醇产品时，所述真空干燥的温度为50～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，时间为4～12h。

本发明方法中所述冷却均优选板式冷却。

本发明方法中多糖的质量含量用硫酸-蒽酮法检测，D-甘露醇的质量含量用高效液相色谱外标法检测。

本发明方法的有益效果如下：

（1）本发明方法所得罗汉果多糖产品为白色或淡黄色，多糖的质量含量≥95%，收率≥92%；所得D-甘露醇产品为纯白色，D-甘露醇的质量含量≥98%，收率≥92%，产品质量含量和收率高、质量稳定；

（2）本发明方法操作工艺简单，提取时间短，能耗、成本低，生产效率高，废液排放少，既实现了废液的回收利用，又提高了罗汉果的附加值，可实现连续大规模生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

本发明实施例所使用的罗汉果甜苷提取废液来源于大孔吸附树脂上柱后流出的废液，其中，多糖的质量含量为0.43%，D-甘露醇的质量含量为0.10%；本发明实施例所使用的0.3μm、0.5μm孔径的陶瓷膜，截留分子量为5万道尔顿的高分子材料有机超滤膜均购于江苏久安源环保科技有限公司；本发明实施例所使用的D-941型、LSA-700型阴离子交换树脂，均购于西安蓝晓科技新材料股份有限公司；本发明实施例所使用的D-280型阴离子交换树脂购于天津南开和成科技有限公司；本发明实施例所使用的Sephadex G-100型、SephadexG-150型、Sephadex G-200型葡聚糖凝胶树脂，均购于西安蓝晓科技新材料股份有限公司；本发明方法所使用的醇溶液均为食品级；本发明实施例所使用的凝胶色谱系统购于上海科哲生化科技有限公司；本发明实施例所使用的原料和添加剂，如无特殊说明，均通过常规商业途径获得。

本发明实施例中多糖的质量含量用硫酸-蒽酮法检测，D-甘露醇的质量含量用高效液相色谱外标法检测。

参考例1

本发明实施例阴离子交换树脂使用前，先用2BV，体积分数95%的乙醇溶液浸泡24h，再用体积分数95%的乙醇溶液洗至流出液无色、无异味，水洗至无醇味，再用4BV质量浓度5%的氢氧化钠溶液碱洗，再水洗至中性，然后用4BV质量浓度5%的盐酸溶液酸洗，再水洗至中性，最后再用4BV质量浓度5%的氢氧化钠溶液碱洗，再水洗至中性，即成。

参考例2

本发明实施例凝胶树脂使用前，先用沸水溶胀3h后，湿法均匀地填充到树脂柱中，排除气泡，用8BV的水洗脱，即成。

实施例1

（1）超滤、脱色：将24t罗汉果甜苷提取废液煮沸至95℃，保温30min，在120℃，0.5MPa下，用UHT灭菌15s，板式冷却至常温后，将23.5t灭菌液用孔径0.3μm的陶瓷膜进行超滤，加水赶洗陶瓷膜上的滤渣至透过液无色透明且糖度为0，28.5t透过液（固含量为2.0%）以流速0.5BV/h，上D-941型阴离子交换树脂柱（装柱径高比为1:4，D-941型阴离子交换树脂的体积为4000L），收集流出液，再以流速0.5BV/h，水洗至糖度为0，收集水洗液，在70℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为20%，得脱色浓缩液2.35t；

（2）凝胶柱层析：将步骤（1）所得2.35t脱色浓缩液以0.25BV/h的流速，上Sephadex G-100型葡聚糖凝胶树脂柱（装柱径高比为1:20，Sephadex G-100型葡聚糖凝胶树脂的体积为5000L），再以纯水为流动相，以5.0BV/h的流速进行等度洗脱，通过凝胶色谱系统蒸发光散射检测器信号显示屏上的峰型分布，根据先后出现多糖和D-甘露醇两个独立峰及保留时间，分段收集目标洗脱液，在40℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为50%，分别得罗汉果多糖粗品浓缩液218.74kg和D-甘露醇粗品浓缩液39.56kg；

（3）醇沉、结晶：在步骤（2）所得 218.74kg罗汉果多糖粗品浓缩液中，加入800L质量分数95%的乙醇溶液，搅拌均匀后，静置2h，三足离心机离心过滤，将沉淀物在-40℃，-0.08MPa下，冷冻干燥48h，得罗汉果多糖产品99.94kg；将过滤的滤液在50℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为55%，与步骤（2）所得39.56kg D-甘露醇粗品浓缩液混合，在5℃下，静置冷冻结晶30h，过滤，用质量分数95%的乙醇溶液醇洗至纯白色，在60℃，-0.08MPa下，真空干燥8h，得D-甘露醇产品22.63kg。

经检测，本发明实施例所得罗汉果多糖产品为淡黄色，质量含量为95.0%，回收率为92.0%；所得D-甘露醇产品为纯白色，质量含量为98.6%，收率为93.0%。

实施例2

（1）超滤、脱色：将24t罗汉果甜苷提取废液煮沸至98℃，保温60min，在130℃，0.5MPa下，用UHT灭菌10s，板式冷却至常温后，将23.5t灭菌液用孔径0.5μm的陶瓷膜进行超滤，加水赶洗陶瓷膜上的滤渣至透过液无色透明且糖度为0，28.5t透过液（固含量为2.0%）以流速1.0BV/h，上D-280型阴离子交换树脂柱（装柱径高比为1:6，D-280型阴离子交换树脂的体积为5000L），收集流出液，再以流速1.0BV/h，水洗至糖度为0，收集水洗液，在65℃，-0.09MPa下，减压浓缩至固含量为30%，得脱色浓缩液1.57t；

（2）凝胶柱层析：将步骤（1）所得1.57t脱色浓缩液以0.5BV/h的流速，上Sephadex G-150型葡聚糖凝胶树脂柱（装柱径高比为1:30，Sephadex G-150型葡聚糖凝胶树脂的体积为5500L），再以纯水为流动相，以8.0BV/h的流速进行等度洗脱，通过凝胶色谱系统蒸发光散射检测器信号显示屏上的峰型分布，根据先后出现多糖和D-甘露醇两个独立峰及保留时间，分段收集目标洗脱液，在55℃，-0.09MPa下，减压浓缩至固含量为55%，分别得罗汉果多糖粗品浓缩液192.32kg和D-甘露醇粗品浓缩液32.89kg；

（3）醇沉、结晶：在步骤（2）所得 192.32罗汉果多糖粗品浓缩液中，加入900L质量分数90%的乙醇溶液，搅拌均匀后，静置3h，三足离心机离心过滤，将沉淀物在-35℃，-0.09MPa下，冷冻干燥36h，得罗汉果多糖产品101.16kg；将过滤的滤液在60℃，-0.09MPa下，减压浓缩至固含量为50%，与步骤（2）所得32.89kg D-甘露醇粗品浓缩液混合，在6℃下，静置冷冻结晶24h，过滤，用质量分数90%的乙醇溶液醇洗至纯白色，在70℃，-0.095MPa下，真空干燥10h，得D-甘露醇产品22.76kg。

经检测，本发明实施例所得罗汉果多糖产品为淡黄色，质量含量为96.2%，回收率为94.3%；所得D-甘露醇产品为纯白色，质量含量为99.3%，收率为94.2%。

实施例3

（1）超滤、脱色：将24t罗汉果甜苷提取废液煮沸至100℃，保温80min，在140℃，0.8MPa下，用UHT灭菌5s，板式冷却至常温后，将23.5t灭菌液用截留分子量为5万道尔顿的高分子材料有机超滤膜进行超滤，加水赶洗超滤膜上的滤渣至透过液无色透明且糖度为0，29.0t透过液（固含量为2.0%）以流速1.5BV/h，上LSA-700型阴离子交换树脂柱（装柱径高比为1:5，LSA-700型阴离子交换树脂的体积为4000L），收集流出液，再以流速1.5BV/h，水洗至糖度为0，收集水洗液，在60℃，-0.10MPa下，减压浓缩至固含量为25%，得脱色浓缩液1.88t；

（2）凝胶柱层析：将步骤（1）所得1.88t脱色浓缩液以0.75BV/h的流速，上Sephadex G-200葡聚糖凝胶树脂柱（装柱径高比为1:40，Sephadex G-200型葡聚糖凝胶树脂的体积为6000L），再以纯水为流动相，以10.0BV/h的流速进行等度洗脱，通过凝胶色谱系统蒸发光散射检测器信号显示屏上的峰型分布，根据先后出现多糖和D-甘露醇两个独立峰及保留时间，分段收集目标洗脱液，在70℃，-0.10MPa下，减压浓缩至固含量为45%，分别得罗汉果多糖粗品浓缩液248.24kg和D-甘露醇粗品浓缩液42.37kg；

（3）醇沉、结晶：在步骤（2）所得 248.24kg罗汉果多糖粗品浓缩液中，加入1000L质量分数85%的丙醇溶液，搅拌均匀后，静置4h，三足离心机离心过滤，将沉淀物在-30℃，-0.10MPa下，冷冻干燥24h，得罗汉果多糖产品99.88kg；将过滤的滤液在70℃，-0.10MPa下，减压浓缩至固含量为45%，与步骤（2）所得42.37kg D-甘露醇粗品浓缩液混合，在8℃下，静置冷冻结晶20h，过滤，用质量分数85%的丙醇溶液醇洗至纯白色，在75℃，-0.10MPa下，真空干燥12h，得D-甘露醇产品22.63kg。

经检测，本发明实施例所得罗汉果多糖产品为淡黄色，质量含量为96.4%，回收率为93.3%；所得D-甘露醇产品为纯白色，质量含量为98.2%，收率为92.6%。

Claims (9)

1.一种从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）超滤、脱色：将罗汉果甜苷提取废液煮沸，保温，灭菌，冷却至常温后，超滤，加水赶洗陶瓷膜上的滤渣至透过液无色透明且糖度为0，透过液上阴离子交换树脂柱，收集流出液，水洗至糖度为0，收集水洗液，减压浓缩，得脱色浓缩液；

（2）凝胶柱层析：将步骤（1）所得脱色浓缩液上凝胶树脂柱，再以水为流动相进行等度洗脱，分段收集目标洗脱液，减压浓缩，分别得罗汉果多糖粗品浓缩液和D-甘露醇粗品浓缩液；

（3）醇沉、结晶：在步骤（2）所得罗汉果多糖粗品浓缩液中，加入醇溶液，搅拌均匀后，静置，离心过滤，将沉淀物冷冻干燥，得罗汉果多糖产品；将过滤的滤液减压浓缩，与步骤（2）所得D-甘露醇粗品浓缩液混合，静置冷冻结晶，过滤，醇洗至纯白色，真空干燥，得D-甘露醇产品。

2.根据权利要求1所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述罗汉果甜苷提取废液中多糖的质量含量为0.30～0.70%，D-甘露醇的质量含量为0.05～0.35%；所述煮沸的温度为90～100℃；所述保温的时间为30～120min；所述灭菌的温度为100～140℃，压力为0.1～0.8MPa，时间为5～60s。

3.根据权利要求1或2所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（1）中，用于超滤的超滤膜为陶瓷膜或高分子材料有机超滤膜；所述陶瓷膜的孔径为0.2～10.0μm；所述高分子材料有机超滤膜的截留分子量为1～10万道尔顿。

4.根据权利要求1～3之一所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（1）中，上柱的流速为0.2～2.0BV/h；所述阴离子交换树脂柱的装柱径高比为1:2～8；透过液中的固含量与阴离子交换树脂的质量体积比为1:5～20；所述阴离子交换树脂为弱碱性或强碱性阴离子交换树脂；所述阴离子交换树脂的型号为D-280型、LSA-700型、D-285型、D-941型或D-296型中的一种或几种；所述水洗的流速为0.2～2.0BV/h；所述减压浓缩的温度为50～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，浓缩至固含量为20～60%。

5.根据权利要求1～4之一所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（1）中，在所述阴离子交换树脂使用前，先用1.5～2.5BV，体积分数85～99%的乙醇溶液浸泡20～30h，再用体积分数85～99%的乙醇溶液洗至流出液无色、无异味，水洗至无醇味，再用3～5BV质量浓度4～6%的氢氧化钠溶液碱洗，再水洗至中性，然后用3～5BV质量浓度4～6%的盐酸溶液酸洗，再水洗至中性，最后再用3～5BV质量浓度4～6%的氢氧化钠溶液碱洗，再水洗至中性，即成。

6.根据权利要求1～5之一所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（2）中，上柱的流速为0.2～2.0BV/h；所述凝胶树脂柱的装柱径高比为1:10～50；所述脱色浓缩液中的固含量与凝胶树脂的质量体积比为1:8～50；所述凝胶树脂为Sephadex G-100型、Sephadex G-150型或Sephadex G-200型葡聚糖凝胶树脂中一种或几种；所述等度洗脱的流速为5～10BV/h；所述减压浓缩的温度为20～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，浓缩至固含量为40～60%。

7.根据权利要求1～6之一所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（2）中，在所述凝胶树脂使用前，先用沸水溶胀2～4h后，湿法均匀地填充到树脂柱中，排除气泡，用洗脱剂洗脱，即成；所述洗脱剂的用量为6～10BV。

8.根据权利要求1～7之一所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（3）中，提取罗汉果多糖产品时，所述罗汉果多糖粗品浓缩液与醇溶液的质量体积比为1:2～6；所述醇溶液的体积分数为60～95%；所述醇溶液为甲醇溶液、乙醇溶液或丙醇溶液中的一种或几种；所述静置的时间为2～4h；所述冷冻干燥的温度为-40～50℃，真空度为-0.10～-0.08MPa，时间为24～48h。

9.根据权利要求1～8之一所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（3）中，提取D-甘露醇产品时，所述减压浓缩的温度为20～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，浓缩至固含量为40～60%；所述静置冷冻结晶的温度为5～15℃，时间为12～48h；所述醇洗的醇溶液的体积分数为80～100%；所述醇溶液为甲醇溶液、乙醇溶液或丙醇溶液中的一种或几种；所述真空干燥的温度为50～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，时间为4～12h。