CN108516996A - 罗汉果益生元的提取方法及同时提取罗汉果甜苷v的方法 - Google Patents

罗汉果益生元的提取方法及同时提取罗汉果甜苷v的方法 Download PDF

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Abstract

罗汉果益生元的提取方法及同时提取罗汉果甜苷V的方法,所述罗汉果益生元的提取方法为:(1)将罗汉果碾碎,冰水提取,过滤;(2)调pH值至碱性,过滤;(3)上大孔吸附树脂柱,收集流出液;(4)纳滤膜过滤,收集纳滤膜截留液,上脱色树脂柱,收集流出液,浓缩,干燥,得罗汉果益生元。所述提取罗汉果甜苷V的方法是将上柱后的大孔吸附树脂柱,水洗至中性,洗脱,浓缩;上反相硅胶柱,洗脱,收集目标洗脱液,浓缩,干燥,得罗汉果甜苷V。本发明方法所得罗汉果益生元的含量高达97.3%,收率高达89.67%;所得罗汉果甜苷V的含量高达99.5%,收率高达97.20%;本发明方法简单,成本低,零污染,适于工业化生产。

Description

罗汉果益生元的提取方法及同时提取罗汉果甜苷V的方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种益生元的提取方法及同时提取甜味剂的方法,具体涉及一种罗汉 果益生元的提取方法及同时提取罗汉果甜苷V的方法。
背景技术
[0002] 罗汉果产自我国广西,是我国传统的清热解毒、化痰止咳、清肺润肠和生津止渴药 用保健食品,是国家首批批准的药食两用材料之一。罗汉果在保健功能上效果突出,能对现 代人的免疫系统、肝脏、血糖方面都起到积极的改善和调节作用,满足消费者的健康要求。
[0003] 益生元(Prebiotics)是一种膳食补充剂,通过选择性的刺激一种或少数种菌落中 的细菌的生长与活性而对寄主产生有益的影响,从而改善寄主健康的不可被消化的食品成 分,它只是刺激有益菌群的生长,而不是有潜在致病性或腐败活性的有害细菌。益生元主要 包括各种寡糖类物质、低聚糖(由2〜10个分子单糖组成)、膳食纤维等。据检测,罗汉果鲜果 中益生元的含量可高达8〜11%,益生元因其具有优良的加工性能和生理功能,已广泛应用 于食品、医药和饲料行业中。在食品中,主要应用于早餐谷物食品、婴幼儿食品、各种保健食 品以及饮料、糖果、糕点、面包中;在医药中,主要应用于对胃肠道病人的治疗;在饲料中,益 生元作为一种天然的绿色饲料添加剂使用。目前,国内市场上关于罗汉果益生元的应用正 在推广,已开发出添加了罗汉果益生元的婴幼儿清火产品。
[0004] 近年来,罗汉果甜苷在欧美地区从罕为人知,到被食品饮料行业广泛接受,因罗汉 果甜度强(甜度是蔗糖的300倍)、无热量、纯天然、口感好等属性,成为了理想的天然、健康 代糖甜味剂。且相较目前传统的天然甜味剂甜菊糖而言,罗汉果甜苷口感更接近于蔗糖,甜 味特征曲线几乎与蔗糖重叠,这是其它任何甜味剂都无法比拟的。
[0005] 益生元的提取方法主要可以分为5类:(1)超滤法提取;(2)通过微生物酶以及微生 物酶转移反应制取;(3)微生物发酵法生产;(4)碱水解或酸转化法;(5)微波辅助提取法。
[0006] CN104939082A公开了一种复合益生元及其制备方法,该方法通过粉碎和混合、提 取、浓缩、脱色、浓缩、过滤、干燥等步骤得到复合益生元。但是,由于该方法没有针对性的工 艺步骤,无法去除水或乙醇提取液中益生元以外的蛋白质、淀粉、油脂、无机盐等杂质,因 此,所得益生元含量不高。还必须指出的是,现有方法中,还没有从罗汉果中提取益生元的 方法。
[0007] 罗汉果提取物的提取方法主要有水提、醇提、层析等。
[0008] CN106176887A公开了一种罗汉果的提取方法,是通过晒干、水煎煮、浓缩、醇沉、过 滤、浓缩、硅胶精制、反相硅胶处理、制粒等步骤,得到罗汉果颗粒。但是,该方法步骤繁琐, 成本极高,且并未提及罗汉果甜苷V的含量。
[0009] CN103923152A公开了 一种罗汉果甙V的提取方法,是通过糖化、提取和浓缩、沉降 离心、大孔吸附、离子交换、硅胶精制、喷雾等步骤得到罗汉果甙V。但是,该方法获得的罗汉 果甜甙的最高含量仅62%。
[0010] CN1706861A公开了一种高含量罗汉果甜苷V的制备方法和用途,是通过粉碎、乙醇 回流提取、大孔吸附、洗脱、正相硅胶柱分离、反相硅胶分离,得到含量在90〜98%之间的罗 汉果甜苷V。但是,该方法成本高昂,且使用了有毒有害的氯仿、甲醇等溶剂,不适宜工业化 生产。
[0011] 上述现有技术均未提及罗汉果益生元的提取,这是因为有利于罗汉果甜苷v提取 的工艺,并不一定适于罗汉果益生元的同时提取,而在提取罗汉果苷v的同时提取益生元最 大的技术障碍是,益生元在常温下易被环境中的微生物发酵、酸败。
[0012] 目前,对于罗汉果的应用,大多还是停留在药用或者提取天然甜味剂一一罗汉果 甜苷上,罗汉果中丰富的益生元一直被忽略,有限的罗汉果资源没有得以充分利用,亟待找 到一种罗汉果益生元的提取方法及同时提取罗汉果甜苷V的方法。
发明内容
[0013] 本发明所要解决的技术问题是,克服现有技术存在的上述缺陷,提供一种可将罗 汉果资源综合利用,益生元提取率高,工艺过程可操作性强,成本低,零污染,适宜于工业化 生产的罗汉果益生元的提取方法。
[0014] 本发明进一步要解决的技术问题是,克服现有技术存在的上述缺陷,提供一种可 将罗汉果资源综合利用,罗汉果甜苷V含量、提取率高,工艺过程可操作性强,成本低,零污 染,适宜于工业化生产的提取罗汉果甜苷V的方法。
[0015] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下:罗汉果益生元的提取方法,包括 以下步骤: (1) 冰水提取:将罗汉果鲜果碾碎,用冰水搅拌提取,粗过滤,得冰水提取液; (2) 碱化:调节步骤(1)所得冰水提取液的pH值至碱性,过滤,得碱化滤液; (3) 大孔吸附树脂层析:将步骤(2)所得碱化滤液,上大孔吸附树脂层析柱,并收集流出 液; (4) 纳滤、脱色、浓缩、干燥:将步骤(3)所得流出液,用纳滤膜过滤,收集纳滤膜截留液, 上脱色树脂层析柱,收集流出液,减压浓缩,将浓缩液干燥,得罗汉果益生元。
[0016] 优选地,步骤(1)中,所述罗汉果鲜果中益生元的质量含量为8〜11%,罗汉果苷V的 质量含量为4〜7%〇。
[0017]优选地,步骤(1)中,所述冰水的用量为罗汉果鲜果质量的1〜5倍。冰水提取的目 的:一是,防止鲜果中的益生元成分,在提取过程中因微生物污染而酸败、损失;二是,减少 罗汉果中蛋白质、淀粉、油脂、色素等杂质的浸出。
[0018] 优选地,步骤(1)中,所述冰水的温度为0〜1 (TC。
[0019] 优选地,步骤(1)中,所述搅拌提取的时间为30〜60min。若冰水的用量过少或搅拌 提取的时间过短,都将导致罗汉果甜苷V提取不充分而降低收率;若冰水的用量过多或搅拌 提取的时间过长,都将造成能源的浪费,且将增加杂质的浸出量。
[0020] 优选地,步骤(2)中,调节冰水提取液的pH值至8〜10。调节pH值至碱性的目的:一 是,使冰水提取液中少量蛋白质在等电点pH值下析出,从而可通过过滤得以除去;二是,有 利于后续大孔吸附树脂层析柱吸附更少的杂质,可提高大孔树脂洗脱液的含量,减小后续 反相硅胶层析分离罗汉果甜苷V的负担。若pH值过高或过低,都难以达到蛋白质的等电点, 难以使蛋白质析出。
[0021] 优选地,步骤(2)中,用碱液调节冰水提取液的pH值,所述碱液为氢氧化钠、氢氧化 钾或氢氧化钙等中的一种或几种的饱和水溶液。
[0022] 优选地,步骤(3)中,上柱的流速为0.5〜2.OBV/h。大孔吸附树脂层析的目的是将 罗汉果甜苷V吸附于大孔吸附树脂中,由于益生元无法被大孔吸附树脂吸附,从而实现二者 的分离。
[0023] 优选地,步骤(3)中,所述大孔吸附树脂的用量为罗汉果鲜果质量的4〜10%。
[0024]优选地,步骤(3)中,所述大孔吸附树脂层析柱的高径比为1〜4:1。若大孔吸附树 脂层析柱的流速过快或高径比过小,罗汉果甜苷V都将难以充分吸附;若大孔吸附树脂层析 柱的流速过慢或高径比过大,都将延长生产的周期并增加生产的成本。
[0025] 优选地,步骤(3)中,所述大孔吸附树脂的型号为D101、AB-8、LX-28或DM-130等中 的一种或几种。
[0026] 优选地,步骤(4)中,所述纳滤膜的截留分子量为100〜500Da(更优选200〜 300Da),过滤的压力为1 •0〜3.0MPa。纳滤的目的是除去流出液中的盐和碱。
[0027] 优选地,步骤(4)中,上柱的流速为0.5〜2. OBV/h。
[0028]优选地,步骤⑷中,所述脱色树脂的用量为罗汉果鲜果质量的0.5〜5.0%。
[0029]优选地,步骤(4)中,所述脱色树脂层析柱的高径比为1〜4:1。若上脱色树脂的流 速过快或脱色树脂的用量过少、层析柱的高径比过小,都将导致脱色不彻底,从而影响益生 元产品的外观;若上脱色树脂的流速过慢或脱色树脂的用量过多、层析柱的高径比过大,都 将增加生产的成本。
[0030] 优选地,步骤(4)中,所述脱色树脂的型号为LX-700B、D945或D941等中的一种或几 种。
[0031] 优选地,步骤(4)中,所述减压浓缩的真空度为-0.07〜-0.09MPa,温度为60〜80 。(:,浓缩至固含量为25〜50% (更优选30〜40%)。
[0032] 优选地,步骤(4)中,所述干燥为带式干燥,第一段干燥区的温度为80〜90°C,第二 段干燥区的温度为50〜60°C,第三段干燥区的温度为10〜15°C。带式干燥具有真空度、蒸发 作用面积大,高温接触时间短,有利于益生元干燥的优点。所述三个干燥区温度分别对应高 温段、保温段和降温段,这样既能快速干燥,又能减少益生元在高温下的破坏。
[0033] 优选地,所述带式干燥的真空度为-0.08〜-0.09MPa。
[0034] 优选地,所述带式干燥的时间为1〜2h。
[0035]本发明进一步解决其技术问题所采用的技术方案如下:提取罗汉果甜苷V的方法, 先将罗汉果益生元的提取方法步骤(3)中上柱后的大孔吸附树脂层析柱,水洗至中性,再用 乙醇溶液洗脱,洗脱液减压浓缩至无醇,得浓缩液;再将所得浓缩液上反相硅胶层析柱,用 乙醇溶液洗脱,收集目标馏分段的洗脱液,浓缩,干燥,得罗汉果甜苷V。
[0036]本发明方法中,以薄层检测的方法确定目标馏分段。
[0037]优选地,洗脱大孔吸附树脂层析柱的流速为1〜2BV/h。若洗脱流速过慢,则洗脱效 率低下,耗时长;若洗脱流速过快,则将造成罗汉果甜苷类物质洗脱不彻底,洗脱剂用量大 增。
[0038]优选地,用于洗脱大孔吸附树脂层析柱的乙醇溶液的用量为丨〜邪乂,乙醇溶液的 体积浓度为50〜70%。若乙醇溶液的用量过少或浓度过低,都将导致罗汉果甜苷V难以充分 洗脱,从而降低收率;若乙醇溶液的用量过多或浓度过高,都将增加生产的成本。
[0039] 优选地,上柱的流速为1〜10BV/h(更优选2〜8BV/h)。反相硅胶层析的目的是进一 步提高甜苷V的含量。
[0040] 优选地,所述反相硅胶的用量为浓缩液固含量的10〜30倍。
[0041]优选地,所述反相硅胶层析柱的高径比为1〜4:1。若反相硅胶的用量过少或高径 比过小,都将导致甜苷V难以被充分吸附;若反相硅胶的用量过多或高径比过大,都将增加 生产的成本。
[0042] 优选地,所述反相硅胶的型号为(:18、(:12、08、06或04等中的一种或几种。
[0043] 优选地,洗脱反相硅胶层析柱的流速为5〜15BV/h。若洗脱流速过慢,则洗脱效率 低下,耗时长;若洗脱流速过快,则将造成洗脱不彻底、洗脱剂用量大增。
[0044] 优选地,用于洗脱反相硅胶层析柱的乙醇溶液的用量为20〜40BV,乙醇溶液的体 积浓度为20〜50%(更优选25〜40%)。若乙醇溶液的用量过少或浓度过低,都将导致罗汉果 甜苷V难以充分洗脱,从而降低收率;若乙醇溶液的用量过多或浓度过高,都将增加生产的 成本。
[0045] 本发明方法的原理:罗汉果鲜果用冰水提取,减少了杂质的浸出,提取液中的含量 要高于常规提取方法;提取液中少量浸出的植物蛋白在碱性的等电点下析出,进一步提高 了目标产物的含量;再经过大孔吸附树脂层析,罗汉果甜苷V被富集于树脂中,益生元由于 不吸附而存在于大孔吸附树脂层析流出液中,得到分离。将大孔吸附树脂上洗脱下来的罗 汉果甜苷V中间体,再经过反相硅胶的处理,含量得到进一步的提升,从而得到高含量的罗 汉果甜苷V。
[0046]本发明方法的有益效果如下: (1) 按照本发明方法所得罗汉果益生元的含量高达97 • 3%,收率高达89 • 67%;仅经大孔 树脂吸附后,可得到罗汉果甜苷V折干含量高达66%的中间体;最终所得罗汉果甜苷V的含量 局达99.5%,总收率尚达97.20%; (2) 本发明方法可将罗汉果资源综合利用,工艺过程可操作性强,成本低,零污染,适宜 于工业化生产。
具体实施方式
[0047]下面结合实施例对本发明作进一步说明。
[0048]本发明实施例所使用的罗汉果鲜果购于广西桂林,其中,罗汉果益生元的质量含 量为10.2%,罗汉果甜苷V的质量含量为5.2%。;本发明实施例所使用的大孔吸附树脂、脱色 树脂和反相硅胶均购于西安蓝晓科技新材料股份有限公司;本发明实施例所使用的带式干 燥设备购于上海敏杰制药机械有限公司;本发明实施例所使用的原料或化学试剂,如无特 殊说明,均通过常规商业途径获得。
[0049]本发明实施例中,采用LC-MS方法测定益生元的含量,采用高效液相色谱外标法检 测罗汉果甜苷V的含量。
[0050] 实施例1 (1)冰水提取:将l〇〇kg罗汉果鲜果碾碎,用400kg,5 °C的冰水搅拌提取60min,粗过滤, 得冰水提取液; (2) 碱化:用氢氧化钙的饱和水溶液,调节步骤(1)所得冰水提取液的ph值至9,过滤,得 碱化滤液; (3) 大孔吸附树脂层析:将步骤(2)所得碱化滤液,以流速〇 • 5BV/h,上LX-28型大孔吸附 树脂层析柱(LX-28型树脂的用量为5kg,层析柱的高径比为2:1),并收集流出液; (4) 纳滤、脱色、浓缩、干燥:将步骤(3)所得流出液,用截留分子量为2〇〇Da的纳滤膜过 滤,过滤的压力为3 • 0 MPa,收集纳滤膜截留液,以流速lBV/h,上D945型脱色树脂层析柱 ①945型树脂的用量为2kg,层析柱的高径比为4:1),收集流出液,在65°C,-0.09MPa下,将流 出液减压浓缩至固含量为30%,将浓缩液在带式干燥机上进行带式干燥lh,带式干燥机第一 段干燥区的温度为90 °C,第二段干燥区的温度为50°C,第三段干燥区的温度为15°C,带式干 燥的真空度为-〇. 〇9MPa,得罗汉果益生元9.2kg。
[0051] 经检测,所得罗汉果益生元的含量为96.3%,收率为86.86%。
[0052] 进一步同时提取罗汉果甜苷V: 先将步骤(3)上柱后的大孔吸附树脂层析柱,水洗至中性,再用2BV,体积浓度为60%的 乙醇溶液,以流速1 BV/h洗脱大孔吸附树脂层析柱,洗脱液减压浓缩至无醇,得2.57kg浓缩 液(固含量为30 • 5%,罗汉果甜苷V的质量含量为19 • 83%,罗汉果甜苷V的折干含量为65%,罗 汉果甜苷V的收率为9S%);再将所得浓缩液,以流速4BV/h上C18型反相硅胶层析柱(C18型反 相硅胶的用量为12kg,层析柱的高径比为2:1),用27BV,体积浓度为25%的乙醇溶液,以流速 10BV/h洗脱反相硅胶层析柱,经薄层检测,收集目标馏分段第20〜第26个BV的洗脱液,浓 缩,干燥,得〇. 508kg罗汉果甜苷V。
[0053]经检测,所得罗汉果甜苷V的含量为99.5%,提取罗汉果甜苷V步骤的收率为 99 • 18%,总收率为 97 • 20%。
[0054] 实施例2 (1) 冰水提取:将150kg罗汉果鲜果碾碎,用750kg,10°C的冰水搅拌提取40min,粗过滤, 得冰水提取液; (2) 碱化:用氢氧化钠的饱和水溶液,调节步骤(1)所得冰水提取液的pH值至10,过滤, 得碱化滤液; (3) 大孔吸附树脂层析:将步骤(2)所得碱化滤液,以流速lBV/h,上DM-130型大孔吸附 树脂层析柱(DM-130型树脂的用量为12kg,层析柱的高径比为4:1),并收集流出液; (4) 纳滤、脱色、浓缩、干燥:将步骤(3)所得流出液,用截留分子量为300Da的纳滤膜过 滤,过滤的压力为2 • 5MPa,收集纳滤膜截留液,以流速0 • 5BV/h,上D941型脱色树脂层析柱 ①941型树脂的用量为4 • 5kg,层析柱的高径比为3:1),收集流出液,在70°C,-0 • 08MPa下,将 流出液减压浓缩至固含量为35%,将浓缩液在带式干燥机上进行带式干燥1.5h,带式干燥机 第一段干燥区的温度为85°C,第二段干燥区的温度为6(TC,第三段干燥区的温度为10°C,带 式干燥的真空度为. 〇9MPa,得罗汉果益生元13.6kg。
[0055] 经检测,所得罗汉果益生元的含量为95.5%,收率为84 • 89%。
[0056] 进一步同时提取罗汉果甜苷V: 先将步骤(3)上柱后的大孔吸附树脂层析柱,水洗至中性,再用2 • 5BV,体积浓度为65% 的乙醇溶液,以流速1.5BV/h洗脱大孔吸附树脂层析柱,洗脱液减压浓缩至无醇,得4.03kg 浓缩液(固含量为28 • 6%,罗汉果甜苷V的质量含量为18.87%,罗汉果甜苷V的折干含量为 66%,罗汉果甜苷V的收率为97.5%);再将所得浓缩液,以流速2BV/h上C8型反相硅胶层析柱 (C8型反相硅胶的用量为12kg,层析柱的高径比为2.5:1),用31BV,体积浓度为30%的乙醇溶 液,以流速8BV/h洗脱反相硅胶层析柱,经薄层检测,收集目标馏分段第22〜第30个BV的洗 脱液,浓缩,干燥,得〇. 75kg罗汉果甜苷V。
[0057] 经检测,所得罗汉果甜苷V的含量为99.1%,提取罗汉果甜苷V步骤的收率为 97.74%,总收率为95.29%。
[0058] 实施例3 (1) 冰水提取:将50kg罗汉果鲜果碾碎,用150kg,6 °C的冰水搅拌提取60min,粗过滤,得 冰水提取液; (2) 碱化:用氢氧化钾的饱和水溶液,调节步骤(1)所得冰水提取液的pH值至8,过滤,得 碱化滤液; (3) 大孔吸附树脂层析:将步骤⑵所得碱化滤液,以流速1.5BV/h,上AB-8型大孔吸附 树脂层析柱(AB-8型树脂的用量为2kg,层析柱的高径比为4:1),并收集流出液; (4) 纳滤、脱色、浓缩、干燥:将步骤(3)所得流出液,用截留分子量为250Da的纳滤膜过 滤,过滤的压力为3 • OMPa,收集纳滤膜截留液,以流速1.5BV/h,上LX-700B型脱色树脂层析 柱(LX_7〇OB型树脂的用量为2 • 5kg,层析柱的高径比为3:1),收集流出液,在65°C,-0.09MPa 下,将流出液减压浓缩至固含量为30%,将浓缩液在带式千燥机上进行带式干燥1.5h,带式 干燥机第一段干燥区的温度为80°C,第二段干燥区的温度为60°C,第三段干燥区的温度为 15 °C,带式干燥的真空度为-0 • 08MPa,得罗汉果益生元4.7kg。
[0059] 经检测,所得罗汉果益生元的含量为97.3%,收率为89.67%。
[0060]进一步同时提取罗汉果甜苷V: 先将步骤(3)上柱后的大孔吸附树脂层析柱,水洗至中性,再用3BV,体积浓度为55%的 乙醇溶液,以流速lBV/h洗脱大孔吸附树脂层析柱,洗脱液减压浓缩至无醇,得1. lkg浓缩液 (固含量为35%,罗汉果甜苷V的质量含量为22 • 93%,罗汉果甜苷V的折干含量为65.5%,罗汉 果甜苷V的收率为97%);再将所得浓缩液,以流速6BV/h上C12型反相硅胶层析柱(C12型反相 硅胶的用量为8 • 5kg,层析柱的高径比为4:1),用33BV,体积浓度为32%的乙醇溶液,以流速 5BV/h洗脱反相硅胶层析柱,经薄层检测,收集目标馏分段第25〜第32个BV的洗脱液,浓缩, 干燥,得0.249kg罗汉果甜苷V。
[0061]经检测,所得罗汉果甜苷V的含量为99.0%,提取罗汉果甜苷V步骤的收率为 97.73%,总收率为 94.81%。

Claims (9)

1. 一种罗汉果益生元的提取方法,其特征在于,包括以下步骤: (1) 冰水提取:将罗汉果鲜果碾碎,用冰水搅拌提取,粗过滤,得冰水提取液; (2) 碱化:调节步骤(1)所得冰水提取液的pH值至碱性,过滤,得碱化滤液; (3) 大孔吸附树脂层析:将步骤(2)所得碱化滤液,上大孔吸附树脂层析柱,并收集流出 液; (4) 纳滤、脱色、浓缩、干燥:将步骤(3)所得流出液,用纳滤膜过滤,收集纳滤膜截留液, 上脱色树脂层析柱,收集流出液,减压浓缩,将浓缩液干燥,得罗汉果益生元。
2. 根据权利要求1所述罗汉果益生元的提取方法,其特征在于:步骤(1)中,所述冰水的 用量为罗汉果鲜果质量的1〜5倍;所述冰水的温度为〇〜1(TC;所述搅拌提取的时间为30〜 60min〇
3. 根据权利要求1或2所述罗汉果益生元的提取方法,其特征在于:步骤(2)中,调节冰 水提取液的pH值至8〜10;用碱液调节冰水提取液的pH值,所述碱液为氢氧化钠、氢氧化钾 或氢氧化钙中的一种或几种的饱和水溶液。
4. 根据权利要求1〜3之一所述罗汉果益生元的提取方法,其特征在于:步骤(3)中,上 柱的流速为0 • 5〜2 • OBV/h;所述大孔吸附树脂的用量为罗汉果鲜果质量的4〜10%;所述大 孔吸附树脂层析柱的高径比为1〜4:1;所述大孔吸附树脂的型号为D101、AB-8、LX-28或DM-130中的一种或几种。
5.根据权利要求1〜4之一所述罗汉果益生元的提取方法,其特征在于:步骤(4)中,所 述纳滤膜的截留分子量为100〜500Da,过滤的压力为1.0〜3. OMPa;上柱的流速为0.5〜 2 • OBV/h;所述脱色树脂的用量为罗汉果鲜果质量的〇. 5〜5.0%;所述脱色树脂层析柱的高 径比为1〜4:1;所述脱色树脂的型号为LX-700B、D945或D941中的一种或几种。
6.根据权利要求1〜5之一所述罗汉果益生元的提取方法,其特征在于:步骤(4)中,所 述减压浓缩的真空度为-0.07〜-〇.〇9MPa,温度为㈤〜80 °C,浓缩至固含量为25〜50%;所述 干燥为带式干燥,第一段干燥区的温度为8〇〜90°C,第二段干燥区的温度为50〜60°C,第三 段干燥区的温度为10〜15°C;所述带式干燥的真空度为-0.08〜-0.09MPa;所述带式干燥的 时间为1〜2h。
7. —种在权利要求1〜6之一所述罗汉果益生元的提取方法的基础上,同时提取罗汉果 甜苷V的方法,其特征在于:先将罗汉果益生元的提取方法步骤(3)中上柱后的大孔吸附树 脂层析柱,水洗至中性,再用乙醇溶液洗脱,洗脱液减压浓缩至无醇,得浓缩液;再将所得浓 缩液上反相硅胶层析柱,用乙醇溶液洗脱,收集目标馏分段的洗脱液,浓缩,干燥,得罗汉果 甜苷V。
8. 根据权利要求7所述提取罗汉果甜苷V的方法,其特征在于:洗脱大孔吸附树脂层析 柱的流速为1〜2BV/h;用于洗脱大孔吸附树脂层析柱的乙醇溶液的用量为1〜3BV,乙醇溶 液的体积浓度为50〜70%。
9. 根据权利要求7或8所述提取罗汉果甜苷V的方法,其特征在于:上柱的流速为1〜 10BV/h;所述反相硅胶的用量为浓缩液固含量的10〜30倍;所述反相硅胶层析柱的高径比 为1〜4:1;所述反相硅胶的型号为(:18、(:12、(:8、06或04中的一种或几种;洗脱反相硅胶层析 柱的流速为5〜15BV/h;用于洗脱反相娃胶层析柱的乙醇溶液的用量为20〜40BV,乙醇溶液 的体积浓度为20〜50%。
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Pledgee: CITIC Bank Changsha branch

Pledgor: HUNAN HUACHENG BIOTECH, Inc.

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