CN111848708A - 从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法 - Google Patents
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Abstract
从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法。本发明方法首先采用碱性低碳醇/水溶液对罗汉果提取渣进行粗提,然后将粗提物经硅胶拌样后进行超临界萃取,分离出角鲨烯和经超临界萃取的粗提物拌样硅胶;进一步,柱层析经超临界萃取的粗提物拌样硅胶,依次分离出其中的谷甾醇和罗汉果黄素,并分别进行纯化后,获得谷甾醇成品和罗汉果黄素成品。本发明方法同时提取角鲨烯、谷甾醇和罗汉果黄素三种活性成分,可将罗汉果提取渣资源综合利用,工艺连贯,可操作性强,生产成本低,适合工业化生产,且各种活性成分的含量高、收率高。
Description
技术领域
本发明涉及罗汉果活性成分的分离方法,具体涉及从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法。
背景技术
罗汉果是桂林名贵的土特产,主产于永福县和龙胜县,也是国家首批批准的“药食两用”材料之一。罗汉果甜苷是罗汉果中特有的天然高倍甜味剂,其甜度为蔗糖的300倍,其热量为零,具有清热润肺镇咳、润肠通便之功效,对肥胖、便秘、糖尿病等具有防治作用。罗汉果甜苷作为食品是安全无毒的,在国家强制标准《GB2760食品添加剂使用标准》中规定,罗汉果甜苷可不限量用于各类食品。
但是目前的生产实际中,对罗汉果的工业化生产利用,主要集中在对罗汉果果实中甜苷的提取和分离,对提取甜苷之后的罗汉果提取渣(主要是罗汉果果籽和罗汉果果壳)直接当成废弃物处理,并未加以利用。由于罗汉果种植和生产加工的规模日益增大,每年都有大量的罗汉果提取渣被废弃。研究发现,罗汉果果籽和罗汉果果壳中存在丰富的天然活性成分,包括角鲨烯、谷甾醇和罗汉果黄素等。
角鲨烯又称三十碳六烯或鱼肝油烯,一种有规则支链的多不饱和烯烃,属于三萜烯类化合物,是一种脂质不皂化物。角鲨烯最初是从鲨鱼的肝油中发现的,具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能。
谷甾醇有降胆固醇、止咳、祛痰及抑制肿瘤和修复组织作用,常用于II型高脂血症、动脉粥样硬化症和慢性气管炎,亦用于早期子宫颈癌及皮肤溃疡等疾病的治疗。
罗汉果黄素为罗汉果中主要、特征性黄酮类成分,仅分布在罗汉果的成熟果实中。近代科学研究表明,罗汉果黄素具有良好的抗补体、抗菌、抗氧化活性。
因此,研发出从罗汉果提取渣中提取和分离各种天然活性成分的方法,实现资源综合利用,变废为宝,对于促进环境保护、提升罗汉果产业附加值都具有重要的现实意义。
CN200410022116.1公开了植物角鲨烯及其制备方法,是以罗汉果的种仁或种籽为原料,经破碎、脂溶性有机溶剂提取、浓缩、硅胶柱层析、洗脱等步骤得到罗汉果角鲨烯精品。由于用到了弱极性及非极性溶剂加热提取,所以该方法只适用于干燥的罗汉果的种仁或种籽,然而在种仁或种籽干燥和加热提取的过程中,角鲨烯极易氧化、分解,所以该方法获得的角鲨烯收率偏低;此外,该方法只提取了角鲨烯一种活性成分,没有对罗汉果的种仁或种籽中其他的活性成分加以利用,没有实现资源的综合利用。
CN201210526367.8公开了罗汉果黄素的优化提纯制备方法,是以罗汉果为原料,经粉碎、水煮、大孔树脂吸附、Sephadex LH-20层析柱重复层析洗脱等步骤,得到罗汉果黄素精品。该方法以完整的罗汉果为原料,仅仅获得了一种价值相对较低的成分——罗汉果黄素,反而把最具有价值的罗汉果甜苷置之不顾,显然没有实现资源的合理、综合利用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是,克服现有技术的不足,提供一种可同时提取多种活性成分,可将罗汉果提取渣资源综合利用,工艺连贯,可操作性强,生产成本低,适合工业化生产,且各种活性成分的含量高、收率高的从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下:
从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,包括以下步骤:
(1)碱性低碳醇提取:将罗汉果提取渣破碎,加入碱性低碳醇/水溶液,室温避光搅拌提取,过滤,得提取滤液;
(2)粗提物的干燥:将提取滤液用酸中和,减压浓缩至无醇,往浓缩液中加入层析硅胶,搅拌均匀,真空干燥至恒重,得粗提物拌样硅胶;
(3)角鲨烯的分离和纯化:将步骤(2)所得粗提物拌样硅胶投入二氧化碳超临界萃取器中,通入含有夹带剂的二氧化碳气体进行萃取,萃取结束后,降温减压至常温常压,得初萃物;初萃物先用有机溶剂稀释溶解,再用碱水反萃取,将有机溶剂层用水洗至中性,分液,有机层加入硅藻土,搅拌,过滤,减压浓缩至无溶剂,得角鲨烯成品。经超临界萃取后的拌样硅胶收集待用;
(4)硅胶柱分离:取步骤(3)经超临界萃取后的拌样硅胶,投入硅胶层析柱中,依次用洗脱剂I和洗脱剂II对硅胶柱进行洗脱,分别收集洗脱液I和洗脱液II;
(5)谷甾醇的分离和纯化:将洗脱液I减压浓缩至无溶剂,干燥,得谷甾醇粗品;将谷甾醇粗品用脂溶性有机溶剂溶解,加入硅藻土,搅拌回流,趁热过滤,浓缩,将浓缩液冷却,搅拌析晶,抽滤,滤饼干燥,得谷甾醇成品;
(6)罗汉果黄素的分离和纯化:将洗脱液II加入中性氧化铝,搅拌回流,趁热过滤,浓缩,干燥,得罗汉果黄素成品。
优选地,步骤(1)中,所述的罗汉果提取渣,是指罗汉果鲜果或干果用水提取罗汉果甜苷之后的废渣,包括罗汉果果籽和罗汉果果壳。
优选地,步骤(1)中,所述碱性低碳醇/水溶液中的低碳醇为甲醇、乙醇和异丙醇中的一种或几种,低碳醇的体积分数为40%~99%;每1kg罗汉果提取渣(湿重)加入5~10L碱性低碳醇/水溶液。
优选地,步骤(1)中,所述碱性低碳醇/水溶液中的碱为氢氧化钠或氢氧化钾,所述碱性低碳醇中碱的质量百分比浓度为0.5%~2%,所述室温搅拌提取的时间为6~8小时。使用碱性低碳醇,室温避光搅拌提取的目的,第一是利用各自溶解性的特点,将三种目标成分充分浸出;第二是罗汉果提取渣中易皂化的油脂类物质,不会被碱性低碳醇浸出,从而降低了后续分离、纯化的难度;第三是提取条件温和,可防止角鲨烯氧化分解。
优选地,步骤(2)中,所述的酸为无机酸,具体为盐酸、硫酸。
优选地,步骤(2)中,每1kg罗汉果提取渣(湿重)加入0.1~0.2L层析硅胶。将粗提物拌入层析硅胶并干燥的目的,第一是层析硅胶可作为填充剂,角鲨烯均匀分布在疏松、干燥的拌样硅胶中,有利于超临界萃取充分的将角鲨烯分离出来;第二是层析硅胶可作为填料载体,超临界萃取出角鲨烯之后,拌样硅胶中剩余的谷甾醇和罗汉果黄素两种目标成分,可以用不同的洗脱剂将两者分离。
优选地,步骤(3)中,所述超临界萃取的温度为35~45℃,压力为20~28MPa,时间为1~2小时。若超临界萃取的温度过低或压力过低,都会导致角鲨烯提取不完全;若超临界萃取的温度过高或压力过高,都将造成能源或物料的浪费。
优选地,步骤(3)中,所述夹带剂为甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚、环己烷、正己烷和水中的一种或几种,所述夹带剂的加入量为罗汉果提取渣(湿重)的0.01%~0.1%。
优选地,步骤(3)中,所述有机溶剂为石油醚、乙醚、正己烷、环己烷、6#溶剂油、120#溶剂油、乙酸乙酯中的一种或几种,每千克罗汉果提取渣(湿重)中加入的0.05~2L有机溶剂。将初萃物用有机溶剂稀释溶解、再用碱水反萃取的目的,是将萃取物溶于脂溶性溶剂后,再用碱水除去其中绝大部分的杂质,达到提纯的目的。
优选地,步骤(3)中,所述硅藻土的用量为罗汉果提取渣(湿重)的1‰~5‰。加入硅藻土并搅拌的目的,是除去有机溶液中少量的色素和杂质。
优选地,步骤(4)中,所述硅胶柱的高径比为5~10:1。
优选地,步骤(4)中,所述洗脱剂I是体积比为9~10:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶液,洗脱剂I的用量为3~5BV,使用洗脱剂I洗脱的流速为0.5~1.0 BV/小时。
优选地,步骤(4)中,所述洗脱剂II是体积比为6~8:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶液,洗脱剂II的用量为3~5BV,使用洗脱剂II洗脱的流速为0.5~2.0 BV/小时。依次用洗脱剂I和洗脱剂II对硅胶柱进行洗脱的目的,是利用谷甾醇和罗汉果黄素极性的差异,以及两者在硅胶柱洗脱过程中停留时间的不同,将两者依次洗脱,达到分离的目的。
优选的,步骤(5)中,所述脂溶性有机溶剂为石油醚、乙醚、正己烷、环己烷、6#溶剂油、120#溶剂油、乙酸乙酯中的一种或几种,每千克罗汉果提取渣中加入0.1~0.5L脂溶性有机溶剂。
优选的,步骤(5)中,所述浓缩液的固形物浓度为10%~20%,所述冷却的温度为5~10℃,所述搅拌的速度为20~60 r/min,所述析晶的时间为8~24小时。冷却、搅拌析晶的目的是,使谷甾醇最大限度的析出,并限制杂质的析出,提高谷甾醇晶体的收率和含量。若浓缩液的固形物浓度过高、冷却的温度过低、搅拌的速度过慢或析晶的时间过长,都将导致杂质大量析出,造成谷甾醇晶体的含量偏低;若浓缩液的固形物浓度过低、冷却的温度过高、搅拌的速度过快或析晶的时间过短,都将导致谷甾醇析出不完全,造成谷甾醇的收率偏低。
优选的,步骤(6)中,所述中性氧化铝的用量为罗汉果提取渣(湿重)的1‰~5‰。加入中性氧化铝、搅拌回流的目的,是除去洗脱液II中的色素及其它杂质,提高罗汉果黄素的含量。
本发明方法中,1 BV=1个柱体积。
本发明有益效果在于:(1)本发明方法所得的罗汉果角鲨烯的含量高达98.73%,收率高达89.10%;罗汉果谷甾醇的含量高达97.59%,收率高达91.38%;罗汉果黄素的含量高达97.17%,收率高达95.53%。
(2)本发明方法提供了一种全新的可同时提取多种活性成分,可将罗汉果提取渣资源综合利用,工艺连贯,可操作性强,生产成本低,适合工业化生产。
(3)本发明采用避光、低温提取的方式,降低了角鲨烯提取过程中氧化、分解的风险,可以把角鲨烯从含量极低的罗汉果提取渣原料中充分浸出,并提纯至很高的含量,且保持了较高的收率,大大提高了罗汉果资源的产品附加值。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明,这些实施例不得用于解释对本发明保护范围的限制。
本发明实施例所使用的罗汉果提取渣购于湖南华诚生物资源股份有限公司罗汉果提取生产车间,系罗汉果鲜果用热水提取甜苷之后剩余的果籽和果壳(含水量60.3%),其中角鲨烯的含量为0.16%,谷甾醇的含量为0.55%,罗汉果黄素的含量为0.89%;本发明实施例所使用的辅料或化学试剂,如无特殊说明,均通过常规商业途径获得。
本发明实施例中,采用气相色谱-质谱联用仪检测角鲨烯的含量,采用高效液相色谱(HPLC)外标法检测谷甾醇和罗汉果黄素的含量。
实施例1
本实施例包括以下步骤:
(1)碱性低碳醇提取:取罗汉果提取渣200kg,破碎至粒径1.0~2.5mm,加入1200L碱性甲醇/水溶液(甲醇的体积分数为80%;其中氢氧化钠的质量百分比浓度为1%),室温避光搅拌提取7小时,过滤,得提取滤液。
(2)粗提物的干燥:将提取滤液用盐酸中和,减压浓缩至无醇,往浓缩液中加入35kg层析硅胶,搅拌均匀,真空干燥至恒重,得粗提物拌样硅胶。
(3)角鲨烯的分离和纯化:将步骤(2)粗提物拌样硅胶投入二氧化碳超临界萃取器中,通入含有夹带剂(乙酸乙酯,用量0.04L)的二氧化碳气体进行萃取,控制温度38℃,压力25MPa,萃取2小时;萃取结束后,降温减压至常温常压,得初萃物。初萃物先用30L石油醚稀释溶解,再用30L质量百分比浓度为1.5%的氢氧化钠水溶液反萃取,将石油醚层用水洗至中性,分液,往石油醚层加入0.4kg硅藻土,搅拌,过滤,减压浓缩至无溶剂,得角鲨烯成品0.28kg。经超临界萃取后的拌样硅胶收集待用。
(4)硅胶柱分离:取步骤(3)经超临界萃取后的拌样硅胶,投入高径比为8:1的硅胶层析柱中,依次用4BV洗脱剂I(二氯甲烷:甲醇=10:1,V/V)和4.5BV洗脱剂II(二氯甲烷:甲醇=8:1,V/V)对硅胶柱进行洗脱,洗脱的流速依次为1.0 BV/小时、1.5BV/小时,分别收集洗脱液I和洗脱液II;
(5)谷甾醇的分离和纯化:将洗脱液I减压浓缩至无溶剂,干燥,得谷甾醇粗品。将谷甾醇粗品用20L环己烷溶解,加入硅藻土,搅拌回流,趁热过滤,浓缩至固形物浓度为10%,冷却至10℃,以20 r/min的搅拌速度,析晶20小时,抽滤,滤饼干燥,得谷甾醇成品1.03kg。
(6)罗汉果黄素的分离和纯化:将洗脱液II加入1kg中性氧化铝,搅拌回流,趁热过滤,浓缩,干燥,得罗汉果黄素成品1.72kg。
经气相色谱-质谱联用仪测定,本发明实施例所得角鲨烯的含量为98.73%,角鲨烯的收率为86.39%;经高效液相色谱(HPLC)外标法测定,本发明实施例所得谷甾醇的含量为97.59%,谷甾醇的收率为91.38%;经高效液相色谱(HPLC)外标法测定,本发明实施例所得罗汉果黄素的含量为96.28%,罗汉果黄素的收率为93.03%。
实施例2
本实施例包括以下步骤:
(1)碱性低碳醇提取:取罗汉果提取渣200kg,破碎至粒径1.0~2.5mm,加入1000L碱性乙醇/水溶液(乙醇的体积分数为75%;其中氢氧化钾的质量百分比浓度为1.2%),室温避光搅拌提取8小时,过滤,得提取滤液。
(2)粗提物的干燥:将提取滤液用盐酸中和,减压浓缩至无醇,往浓缩液中加入30kg层析硅胶,搅拌均匀,真空干燥至恒重,得粗提物拌样硅胶。
(3)角鲨烯的分离和纯化:将步骤(2)粗提物拌样硅胶投入二氧化碳超临界萃取器中,通入含有夹带剂(丙酮,用量0.06L)的二氧化碳气体进行萃取,控制温度42℃,压力23MPa,萃取1.5小时;萃取结束后,降温减压至常温常压,得初萃物。初萃物先用20L环己烷稀释溶解,再用25L质量百分比浓度为0.8%的氢氧化钾水溶液反萃取,将环己烷层用水洗至中性,分液,往环己烷层加入0.5kg硅藻土,搅拌,过滤,减压浓缩至无溶剂,得角鲨烯成品0.275kg。经超临界萃取后的拌样硅胶收集待用。
(4)硅胶柱分离:取步骤(3)经超临界萃取后的拌样硅胶,投入高径比为6:1的硅胶层析柱中,依次用3.5BV洗脱剂I(二氯甲烷:甲醇=9.5:1,V/V)和4BV洗脱剂II(二氯甲烷:甲醇=7:1,V/V)对硅胶柱进行洗脱,洗脱的流速依次为0.8BV/小时、1.0 BV/小时,分别收集洗脱液I和洗脱液II;
(5)谷甾醇的分离和纯化:将洗脱液I减压浓缩至无溶剂,干燥,得谷甾醇粗品。将谷甾醇粗品用40L石油醚溶解,加入硅藻土,搅拌回流,趁热过滤,浓缩至固形物浓度为12%,冷却至8℃,以30 r/min的搅拌速度,析晶24小时,抽滤,滤饼干燥,得谷甾醇成品0.99kg。
(6)罗汉果黄素的分离和纯化:将洗脱液II加入1kg中性氧化铝,搅拌回流,趁热过滤,浓缩,干燥,得罗汉果黄素成品1.75kg。
经气相色谱-质谱联用仪测定,本发明实施例所得角鲨烯的含量为97.65%,角鲨烯的收率为83.92%;经高效液相色谱(HPLC)外标法测定,本发明实施例所得谷甾醇的含量为97.02%,谷甾醇的收率为87.32%;经高效液相色谱(HPLC)外标法测定,本发明实施例所得罗汉果黄素的含量为97.17%,罗汉果黄素的收率为95.53%。
实施例3
本实施例包括以下步骤:
(1)碱性低碳醇提取:取罗汉果提取渣200kg,破碎至粒径1.0~2.5mm,加入1500L碱性异丙醇/水溶液(异丙醇的体积分数为75%;其中氢氧化钠的质量百分比浓度为0.8%),室温避光搅拌提取6小时,过滤,得提取滤液。
(2)粗提物的干燥:将提取滤液用硫酸中和,减压浓缩至无醇,往浓缩液中加入40kg层析硅胶,搅拌均匀,真空干燥至恒重,得粗提物拌样硅胶。
(3)角鲨烯的分离和纯化:将步骤(2)粗提物拌样硅胶投入二氧化碳超临界萃取器中,通入含有夹带剂(正丁醇,用量0.1L)的二氧化碳气体进行萃取,控制温度40℃,压力20MPa,萃取1.5小时;萃取结束后,降温减压至常温常压,得初萃物。初萃物先用35L 6#溶剂油稀释溶解,再用35L质量百分比浓度为1%的氢氧化钠水溶液反萃取,将6#溶剂油层用水洗至中性,分液,往6#溶剂油层加入0.3kg硅藻土,搅拌,过滤,减压浓缩至无溶剂,得角鲨烯成品0.29kg。经超临界萃取后的拌样硅胶收集待用。
(4)硅胶柱分离:取步骤(3)经超临界萃取后的拌样硅胶,投入高径比为9:1的硅胶层析柱中,依次用3BV洗脱剂I(二氯甲烷:甲醇=9:1,V/V)和3.5BV洗脱剂II(二氯甲烷:甲醇=6.5:1,V/V)对硅胶柱进行洗脱,洗脱的流速依次为0.5 BV/小时、0.8BV/小时,分别收集洗脱液I和洗脱液II;
(5)谷甾醇的分离和纯化:将洗脱液I减压浓缩至无溶剂,干燥,得谷甾醇粗品。将谷甾醇粗品用50L乙酸乙酯溶解,加入硅藻土,搅拌回流,趁热过滤,浓缩至固形物浓度为15%,冷却至10℃,以20 r/min的搅拌速度,析晶18小时,抽滤,滤饼干燥,得谷甾醇成品1.01kg。
(6)罗汉果黄素的分离和纯化:将洗脱液II加入0.8kg中性氧化铝,搅拌回流,趁热过滤,浓缩,干燥,得罗汉果黄素成品1.7kg。
经气相色谱-质谱联用仪测定,本发明实施例所得角鲨烯的含量为98.32%,角鲨烯的收率为89.10%;经高效液相色谱(HPLC)外标法测定,本发明实施例所得谷甾醇的含量为96.74%,谷甾醇的收率为88.82%;经高效液相色谱(HPLC)外标法测定,本发明实施例所得罗汉果黄素的含量为96.98%,罗汉果黄素的收率为92.62%。
以上详细描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内,可以对本发明的技术方案进行多种简单变型,包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合,这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容,均属于本发明的保护范围。
Claims (10)
1.从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)碱性低碳醇提取:将罗汉果提取渣破碎,加入碱性加入碱性低碳醇/水溶液,室温避光搅拌提取,过滤,得提取滤液;
(2)粗提物的干燥:将步骤(1)所得提取滤液用酸中和,减压浓缩至无醇,往浓缩液中加入层析硅胶,搅拌均匀,真空干燥至恒重,得粗提物拌样硅胶;
(3)角鲨烯的分离和纯化:将步骤(2)所得粗提物拌样硅胶投入二氧化碳超临界萃取器中,通入含有夹带剂的二氧化碳气体进行萃取,萃取结束后,降温减压至常温常压,得初萃物;初萃物先用有机溶剂稀释溶解,再用碱水反萃取,将有机溶剂层用水洗至中性,分液,有机层加入硅藻土,搅拌,过滤,减压浓缩至无溶剂,得角鲨烯成品和经超临界萃取后的拌样硅胶;
(4)硅胶柱分离:取步骤(3)经超临界萃取后的拌样硅胶,投入硅胶层析柱中,依次用洗脱剂I和洗脱剂II对硅胶柱进行洗脱,分别收集洗脱液I和洗脱液II;
(5)谷甾醇的分离和纯化:将洗脱液I减压浓缩至无溶剂,干燥,得谷甾醇粗品;将谷甾醇粗品用脂溶性有机溶剂溶解,加入硅藻土,搅拌回流,趁热过滤,浓缩,将浓缩液冷却,搅拌析晶,抽滤,滤饼干燥,得谷甾醇成品;
(6)罗汉果黄素的分离和纯化:将洗脱液II加入中性氧化铝,搅拌回流,趁热过滤,浓缩,干燥,得罗汉果黄素成品。
2.根据权利要求1所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述罗汉果提取渣,是指罗汉果鲜果或干果用水提取罗汉果甜苷之后的废渣,包括罗汉果果籽和罗汉果果壳。
3.根据权利要求1或2所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述碱性低碳醇/水溶液中的低碳醇为甲醇、乙醇和异丙醇中的一种或几种,低碳醇的体积分数为40%~99%;每1kg罗汉果提取渣加入5~10L碱性低碳醇/水溶液。
4.根据权利要求1~3任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述碱性低碳醇中的碱为氢氧化钠或氢氧化钾,所述碱性低碳醇中碱的质量百分比浓度为0.5%~2%,所述室温搅拌提取的时间为6~8小时;优选地,步骤(2)中,所述的酸为无机酸,具体为盐酸、硫酸。
5.根据权利要求1~4任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,其特征在于,步骤(2)中,每1kg罗汉果提取渣加入0.1~0.2L层析硅胶。
6.根据权利要求1~5任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述超临界萃取的温度为35~45℃,压力为20~28MPa,时间为1~2小时;优选的,所述夹带剂为甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚、环己烷、正己烷和水中的一种或几种,所述夹带剂的加入量为罗汉果提取渣的0.01%~0.1%。
7.根据权利要求1~6任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述有机溶剂为石油醚、乙醚、正己烷、环己烷、6#溶剂油、120#溶剂油、乙酸乙酯中的一种或几种,每千克罗汉果提取渣(湿重)中加入的0.05~2L有机溶剂;优选地,步骤(3)中,所述硅藻土的用量为罗汉果提取渣(湿重)的1‰~5‰。
8.根据权利要求1~7任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述硅胶柱的高径比为5~10:1;优选地,步骤(4)中,所述洗脱剂I是体积比为9~10:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶液,洗脱剂I的用量为3~5BV,使用洗脱剂I洗脱的流速为0.5~1.0 BV/小时;优选地,步骤(4)中,所述洗脱剂II是体积比为6~8:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶液,洗脱剂II的用量为3~5BV,使用洗脱剂II洗脱的流速为0.5~2.0 BV/小时。
9.根据权利要求1~8任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,其特征在于,步骤(5)中,所述脂溶性有机溶剂为石油醚、乙醚、正己烷、环己烷、6#溶剂油、120#溶剂油、乙酸乙酯中的一种或几种,每千克罗汉果提取渣中加入0.1~0.5L脂溶性有机溶剂;优选的,步骤(5)中,所述浓缩液的固形物浓度为10%~20%,所述冷却的温度为5~10℃,所述搅拌的速度为20~60 r/min,所述析晶的时间为8~24小时。
10.根据权利要求1~9任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法,其特征在于,步骤(6)中,所述中性氧化铝的用量为罗汉果提取渣(湿重)的1‰~5‰。
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