CN108473497B

CN108473497B - Ep4拮抗剂

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Publication number: CN108473497B
Application number: CN201680073562.6A
Authority: CN
Inventors: 郑完俊; 朱潇杰; 杜宏; 马登·波斯特马; 蒋益民; 李静; 罗伯特·于; 崔亨旭; 李在文; 方家范; 丹尼尔·喀斯特
Original assignee: Eisai R&D Management Co Ltd
Current assignee: Eisai R&D Management Co Ltd
Priority date: 2015-10-16
Filing date: 2016-10-14
Publication date: 2021-09-10
Anticipated expiration: 2036-10-14
Also published as: BR112018007664A2; KR20180083863A; AU2016338679A1; CN108473497A; JP7090770B2; WO2017066633A1; AU2016338679B2; CA3002144C; JP6860559B2; US11434246B2; US10941148B2; MX2018004664A; US20190315754A1; IL258737A; US10316040B2; EP3362454B1; CA3002144A1; BR112018007664B1; JP2021100969A; US20210347779A1

Abstract

我们提供了由图3所示的式I给出的化合物或其药学上可接受的盐、以及其制剂，和使用这些化合物和制剂治疗癌症的方法。

Description

EP4拮抗剂

对相关申请的交叉引用

本申请要求2015年10月16日提交的美国临时专利申请号62/242,734和2015年10月16日提交的美国临时专利申请号62/242,748的优先权。那些申请以引用的方式并入本文。

背景技术

前列腺素E2(PGE₂)是炎症的主要介质。严重地是，PGE₂有利于促炎性免疫应答；但是，肿瘤微环境中持续的水平促进多种免疫抑制细胞(包括肿瘤相关巨噬细胞(TAM)、Treg细胞、以及髓源性抑制细胞(MDSC))的积聚并且增强它们的活性，从而促进肿瘤免疫逃逸(Kaidi A等,Direct transcriptional up-regulation of cyclooxygenase-2byhypoxia-inducible factor(HIF)-1promotes colorectal tumor cell survival andenhances HIF-1transcriptional activity during hypoxia(缺氧诱导因子(HIF)-1对环加氧酶-2的直接转录上调在缺氧期间促进结肠直肠肿瘤细胞存活并且增强HIF-1转录活性),Cancer Res,2006,66:6683-6691；Nakanishi Y等,COX-2inhibition alters thephenotype of tumor-associated macrophages from M2to M1in APCmin/+mouse polyps(COX-2抑制将APCmin/+小鼠息肉中肿瘤相关巨噬细胞的表型从M2变为M1),Carcinogenesis,2011,32:1333-1339；Mahic M等,FOXP3+CD4+CD25+adaptive regulatoryT cells express cyclooxygenase-2and suppress effector T cells by aprostaglandin E2-dependent mechanism(FOXP3+CD4+CD25+适应性调节性T细胞表达环加氧酶-2并且通过前列腺素E2依赖性机制抑制效应T细胞),J Immunol,2011,177:246-254；Adams JL等,Big opportunities for small molecules in immune-oncology(小分子在免疫肿瘤学中的巨大机会),Nat Rev Drug Disc,2015,dol:10.1038/nrd4596)。

PGE₂的信号转导是由一组四种EP受体(EP₁、EP₂、EP₃以及EP₄)介导的，它们在不同的细胞谱系中与不同的信号转导通路偶联。越来越多的证据已经证实，经由EP₄升高的cAMP水平是在免疫细胞中引起免疫抑制的主要信号(Yokoyama U等,The prostanoidEP4receptor and its signaling pathway(前列腺素类EP4受体和它的信号转导通路),Pharmacol Rev,2013,65:1010-1052)。在APC^min突变的背景下，与野生型动物相比，在小鼠中敲除EP₄的显示出延迟的肿瘤发生，这表明了PGE₂-EP₄信号转导在宿主免疫细胞中的促肿瘤活性(Mutoh M等,Involvment of prostaglandin E receptor subtype EP(4)in coloncarcinogenesis(前列腺素E受体亚型EP(4)参与结肠癌发生),Cancer Res,2002,62:28-32)。一直以来，选择性EP₄受体拮抗剂已经被证实在各种临床前肿瘤模型中减缓肿瘤进展而在体外不影响癌细胞增殖(Yang等,Host and direct anti-tumor effects ofprofound reduction in tumor metastasis with selective EP4receptor antagonism(在选择性EP4受体拮抗作用下肿瘤转移显著减少的宿主和直接抗肿瘤作用),Cancer Res,2006,66:9665-9672；Mao Y等,Inhibition of tumor-derived prostaglandin e2-blocksthe induction of myeloid-derived suppressor cells and recovers natural killercell activity(抑制肿瘤衍生的前列腺素e2阻断对髓源性抑制细胞的诱导并且恢复自然杀伤细胞活性),Clin Cancer Res,2014,20:4096-4106)。

这些结果表明，抑制PGE2/EP4信号转导在癌症和其它慢性炎症性疾病，如多发性硬化症和类风湿性关节炎中可具有治疗价值。因此，需要能够抑制PGE2/EP4信号转导的新型化合物。

发明内容

本文描述了新型EP₄拮抗剂。本文所述的EP₄拮抗剂可以适用于进一步开发以治疗EP₄信号转导相关疾病，包括癌症或慢性炎症性疾病，如多发性硬化症和类风湿性关节炎。

举例来说而非限制，本文所述的化合物可以用于靶向肿瘤微环境中的宿主免疫抑制细胞的癌症免疫治疗，所述宿主免疫抑制细胞可以是髓系或淋巴谱系的。在一个实施方案中，本文所述的化合物可以用于治疗患有多种肿瘤类型的患者，包括携带高水平的骨髓浸润的那些患者。这样的骨髓浸润水平可以例如基于癌症和肿瘤基因组图谱(CancerGenome Atlas，TCGA)和其它来源来鉴定。这样的肿瘤类型也可以基于蛋白质或遗传(例如mRNA)表达分析来鉴定。

肿瘤类型可以包括但不限于胰腺癌、肾透明细胞癌、头颈部鳞状细胞癌(SCCHN)、非小细胞肺癌(NSCLC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、浆液性上皮性卵巢癌、宫颈癌、膀胱移行细胞癌(transitional cell bladder cancer)、以及三阴性乳腺癌(TNBC)。一个实施方案包括由式(I)给出的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中

R₁是-CH₃、-CF₃、-CH₂CH₃、-CH₂F、CF₂CH₂OH、-CHF₂、-CH＝CH₂、-CH₂OH、或苯基；

R₂是-H、-CH₂OH、或-CH₃；

R₃是-H；

或R₂和R₃一起与它们所连接的碳一起形成环丙基；

R₄是-H、-F、或-CH₃；

R₅是-C(O)OH、-C(O)OCH₃、-CH₂C(O)OH、环丙基、-C(O)NHCN、

其中R₆是苯基、-CH₃、环丙基、

n是0-1；

m是1-2；

R₇是-H、-CH₃，或在n是0时不存在；

R₈是-CF₃、-H、-Cl、-F、-CH₂CH₃、-OCH₃、-CH₃、-SCH₃、-CH₂OH、-CH₂F、-CH₂Cl、-I、-Br、-NH₂、-CH₂OCH₂CH₂F、-OCH₂CH₂F、-CH₂CH₂CH₂F、-OH、-OCF₃、-N(CH₃)₂、-CF₂CH₂OH、

或连接R8和环A的键是双键并且R₈是CH₂；

R₉是-H、-Cl、或-CF₃；

R₁₀是-H、-CH₃、-CH₂F、-CH₂OH、或-CH₂OCH₂-苯基；

X₁和X₂这两者都是C，或一个是C并且另一个是N；

表示单键或双键；并且

环A是苯基或环己基。

一个实施方案包括由式(II)给出的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中R₁是-CH₃、-CF₃、-CH₂CH₃、或苯基；

R₂是-H、或-CH₃；

R₃是-H；

或R₂和R₃一起与它们所连接的碳一起形成环丙基；

R₄是-H、-F、或-CH₃；

R₅是-C(O)OH、-C(O)OCH₃、-CH₂C(O)OH、环丙基、-C(O)NHCN、

其中R₆是苯基、-CH₃、环丙基、或

m是1-2；

n是0-1；

R₇是-H、-CH₃，或在n是0时不存在；

R₈是-CF₃、-H、-Cl、-F、-CH₂CH₃、-OCH₃、-CH₃、或-OCF₃；

R₉是-H、-Cl、或-CF₃；并且

X₁和X₂这两者都是C，或一个是C并且另一个是N。

在一些实施方案中，R₁是-CF₃。在一些实施方案中，m是1。在另外的实施方案中，R₂是甲基并且R₃是-H。在再另外的实施方案中，X₁和X₂这两者都是C。在一些实施方案中，R₄是-H。在一些实施方案中，n是1。在一些实施方案中，R₇是-H。在一些实施方案中，R₉是-H。在另外的实施方案中，R₈是-CF₃。在一些实施方案中，R₅是-C(O)OH。在再另外的实施方案中，R₄是-F。在另外的实施方案中，R₈是-Cl。在一些实施方案中，

表示单键。在另外的实施方案中，R₁₀是-H。在再另外的实施方案中，环A是苯基。在另外的实施方案中，X₁和X₂这两者都是碳。

在一些实施方案中，R₅是-C(O)OH、-C(O)OCH₃、-CH₂C(O)OH、-C(O)NHCN、

在一些实施方案中，m是2，并且其中R₈和R₉在存在时处于间位或对位。在一个实施方案中，所述化合物是(S)-4-(1-(1-(3-氯-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸。在另一个实施方案中，所述化合物是(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸。

实施方案可以提供一种药物组合物，所述药物组合物包含如上文所描述的化合物和药学上可接受的赋形剂。实施方案可以提供一种治疗癌症的方法，所述方法包括向患者施用本文所描述的药物组合物。在一些实施方案中，所述癌症是胰腺癌、肾细胞癌、头颈部鳞状细胞癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、肝细胞癌、卵巢癌、宫颈癌、膀胱癌或乳腺癌。在一些实施方案中，所述乳腺癌是三阴性乳腺癌。

实施方案可以提供本文所描述的化合物用于制造用于治疗癌症的药物的用途。在一些实施方案中，所述癌症是胰腺癌、肾细胞癌、头颈部鳞状细胞癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、肝细胞癌、卵巢癌、宫颈癌、膀胱癌或乳腺癌。

某些实施方案可以提供一种选自下组的化合物：

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯；

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(2-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3,5-双(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-氯-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3,5-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3,4-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(2-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(2-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-乙基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-2-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-3-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-3-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-2-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-2-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯；

(S)-2-(4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯基)乙酸；

(S)-2-(4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯基)乙酸；

4-(1-(6-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸；

4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸；

4-(1-(1-(4-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-氯苯甲基)-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

4-((1-(4-氯苯甲基)-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)甲基)苯甲酸；

(R)-4-(1-(6-甲基-1-(1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸；

4-((S)-1-(6-甲基-1-((R)-1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-N-(1-(4-(2H-四唑-5-基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-N-(1-(4-(2H-四唑-5-基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-5-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)吡啶甲酸；

(S)-6-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)烟酸；

(S)-4-(1-(4-(4-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(4-(3-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(4-(2-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(2-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-N-(1-(4-(氰基氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-N-(1-(4-(((3,4-二氟苯基)磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-N-(1-(4-((苯磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-1-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-N-(1-(4-((甲磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-N-(1-(4-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-N-(1-(4-(呋喃-3-基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-N-(1-(4-环丙基苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-N-(1-(3-甲基-4-(2H-四唑-5-基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-4-(1-(6-乙基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(2-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(6-苯基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(甲硫基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

4,4'-((1S,1'S)-((1,1'-(1,3-亚苯基双(亚甲基))双(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二基-7-羰基))双(氮烷二基))双(乙烷-1,1-二基))二苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-碘-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-苯甲基-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-N-(1-(4-(((4-硝基苯基)磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-4-(1-(1-(4-氨基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-N-(1-(4-(((4-氨基苯基)磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

(S)-4-(1-(1-(3-((2-氟乙氧基)甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(2-氟乙氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

7-(((S)-1-(4-羧基苯基)乙基)氨甲酰基)-1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑1-氧化物；

(S)-4-(1-(1-(3-羟基-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-氟-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-((4-(氟甲基)环己基)甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-((4-亚甲基环己基)甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(3-氟丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-(3-氟丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(3-氟丙基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-(3-氟丙基)-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(6-(氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(3-甲基-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

4-((S)-1-((S)-3-(氟甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-羟基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(R)-4-(2-羟基-1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(4-(二甲氨基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(二甲氨基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(二甲氨基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(6-(1,1-二氟-2-羟乙基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-N-(1-(4-((1-氰基环丙基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺；

4-((S)-1-((S)-3-(羟甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

4-((S)-1-((S)-3-((苄氧基)甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-溴-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(6-(二氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-6-乙烯基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(6-(羟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；

(S)-4-(1-(1-(3-(1,1-二氟-2-羟乙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸；以及

(S)-4-(1-(1-(2-氟苯甲酰基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯。

附图说明

图1A和图1B示出了化合物1在放射性配体与EP₄的结合中的抑制。对³H标记的PGE₂与表达人类EP₄(图1A)和小鼠EP₄(图1B)的细胞膜级分的结合的剂量依赖性抑制。指示了Ki值。

图2A和图2B分别示出了化合物1在小鼠4T1同系肿瘤中的抗肿瘤作用以及对动物体重的影响。图2A示出了肿瘤生长曲线。数据表示平均值±SEM。在用25mg/kg和150mg/kg的化合物1处理之后，在注射肿瘤细胞之后第27天时，观测到对肿瘤生长的统计学显著性抑制。图2B示出了动物体重曲线。NS，没有显著性；**，p<0.01；****，p<0.0001，单因素方差分析。

图3示出了式(I)。

具体实施方式

本文描述了新型EP4拮抗剂。这些化合物可以用于治疗癌症。

一个实施方案包括由式(I)给出的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中

R₂是-H、-CH₂OH、或-CH₃；

R₃是-H；

或R₂和R₃一起与它们所连接的碳一起形成环丙基；

R₄是-H、-F、或-CH₃；

R₅是-C(O)OH、-C(O)OCH₃、-CH₂C(O)OH、环丙基、-C(O)NHCN、

其中R₆是苯基、-CH₃、环丙基、

n是0-1；

m是1-2；

R₇是-H、-CH₃、或在n是0时不存在；

R₈是-CF₃、-H、-Cl、-F、-CH₂CH₃、-OCH₃、-CH₃、-SCH₃、-CH₂OH、-CH₂F、-CH₂Cl、-I、-Br、-NH₂、-CH₂OCH₂CH₂F、-OCH₂CH₂F、-CH₂CH₂CH₂F、-OH、-OCF₃、-N(CH₃)₂、-CF₂CH₂OH、或

或连接R₈和环A的键是双键并且R₈是CH₂；

R₉是-H、-Cl、或-CF₃；

R₁₀是-H、-CH₃、-CH₂F、-CH₂OH、或-CH₂OCH₂-苯基；

X₁和X₂这两者都是C，或一个是C并且另一个是N；

表示单键或双键；并且

环A是苯基或环己基。

在另一个实施方案中，提供了具有式II中所示的结构的化合物：

或其药学上可接受的盐。在典型的实施方案中，R₁是-CH₃、-CF₃、-CH₂CH₃、或苯基；R₂是-H或-CH₃；R₃是-H；或R₂和R₃一起与它们所连接的碳一起形成环丙基；R₄是-H、-F、或-CH₃；R₅是-C(O)OH、-C(O)OCH₃、-CH₂C(O)OH、环丙基、-C(O)NHCN、

或

其中R₆是苯基、-CH₃、环丙基、或

m是1-2；n是0-1；R₇是-H、-CH₃，或在n是0时不存在；

R₈是-CF₃、-Cl、-F、-CH₂CH₃、-OCH₃、-CH₃、或-OCF₃；R₉是-H、-Cl、或-CF₃；并且X₁和X₂这两者都是C，或一个是C并且另一个是N。

实施方案包括具有式V中所示的结构的化合物：

或其药学上可接受的盐。在典型的实施方案中，R₁是-CF₃、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、氰基、芳基、芳氧基、氨基、C₁-C₆烷氨基、羰基、或苯基；R₂和R₃独立地选自-H、-CH₃、或-CH_3- _zF_z，其中z是1至3；或R₂和R₃一起与它们所连接的碳一起形成环丙基或环丁基；R₄是-H、卤素、-CF₃、任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基、或C₁-C₃烷氧基；R₅是-C(O)OH、-C(O)OCH₃、-CH₂C(O)OH、环丙基、-C(O)NHCN、

其中R₆是苯基、-CH₃、环丙基、或

m是1-3；n是0-5；R₇是-H、-CH₃，或在n是0时不存在；

R₈和R₉独立地选自-H、-CF₃、卤素、氨基、OCH₃、任选地被一个或多个氟取代的C₁-C₆烷氧基、或C₁-C₆烷基，任选地被至少一个氟取代并且其中所述C₁-C₆烷基的至少一个碳任选地被O或N置换；并且X₁、X₂、X₃、X₄、以及X₅是C或N，其中X₁、X₂、X₃、X₄、以及X₅中的0个、1个或2个同时是N；其中X₆、X₇、X₈、X₉、以及X₁₀是C或N，其中X₆、X₇、X₈、X₉、以及X₁₀中的0个、1个或2个同时是N；其中R₁₀是任选地被一个或多个氟取代的C₁-C₃烷基，并且其中p是0-3。

如本文所用的“烷基”、“C₁烷基、C₂烷基、C₃烷基、C₄烷基、C₅烷基或C₆烷基”或“C₁-C₆烷基”意图包括C₁、C₂、C₃、C₄、C₅或C₆直链(straight chain/linear)饱和脂族烃基以及C₃、C₄、C₅或C₆支链饱和脂族烃基。举例来说，C₁-C₆烷基意图包括C₁烷基、C₂烷基、C₃烷基、C₄烷基、C₅烷基以及C₆烷基。烷基的实例包括具有1个至6个碳原子的部分，诸如但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基或正己基。

在某些实施方案中，直链或支链烷基具有6个或更少的碳原子(例如C₁-C₆(对于直链)、C₃-C₆(对于支链))，并且在另一个实施方案中，直链或支链烷基具有4个或更少的碳原子。

如本文所用的术语“环烷基”指的是具有3个至7个碳原子(例如C₃-C₇)的饱和或不饱和非芳族烃环。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环戊烯基、环己烯基、以及环庚烯基。

除非另有说明，否则术语“杂环烷基”指的是具有一个或多个杂原子(如O、N或S)的饱和的或不饱和的非芳族3-8元单环、7-10元稠合双环。杂环烷基的实例包括但不限于哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、二

烷基、四氢呋喃基、异吲哚啉基(isoindolinyl)、吲哚啉基、咪唑烷基、吡唑烷基、

唑烷基、异

唑烷基、三唑烷基、环氧乙烷基、氮杂环丁基、氧杂环丁基(oxetanyl)、硫杂环丁基(thietanyl)、1,2,3,6-四氢吡啶基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、二氢吡喃基、吡喃基、吗啉基、1,4-二氮杂环庚基、1,4-氧氮杂环庚基(1,4-oxazepanyl)等。

杂环烷基的另外的实例包括但不限于吖啶基、吖辛因基(azocinyl)、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并噻吩基、苯并

唑基、苯并

唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异

唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、苯并二氢吡喃基(chromanyl)、苯并吡喃基(chromenyl)、噌啉基、十氢喹啉基、2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、二氢呋喃并[2,3-b]四氢呋喃基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、吲哚烯基(indolenyl)、吲哚啉基、吲嗪基(indolizinyl)、吲哚基、3H-吲哚基、靛红酰基(isatinoyl)、异苯并呋喃基、异苯并二氢吡喃基、异吲唑基、异吲哚啉基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异

唑基、亚甲基二氧苯基、吗啉基、萘啶基、八氢异喹啉基、

二唑基、1,2,3-

二唑基、1,2,4-

二唑基、1,2,5-

二唑基、1,3,4-

二唑基、1,2,4-

二唑-5-(4H)-酮、

唑烷基、

唑基、羟吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩

噻基、吩

嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并

唑、吡啶并咪唑、吡啶并噻唑、吡啶基(pyridinyl)、吡啶基(pyridyl)、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基、6H-1,2,5-噻二嗪基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并

唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、1,3,4-三唑基以及呫吨基。

术语“任选取代的烷基”指的是未取代的烷基或具有置换烃主链的一个或多个碳上的一个或多个氢原子的指定取代基的烷基。这样的取代基可以包括例如烷基、烯基、炔基、卤素、羟基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸酯(carboxylate)、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷基硫代羰基、烷氧基、磷酸酯(phosphate)、膦酰基、亚膦酰基(phosphinyl)、氨基(包括烷氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基以及烷基芳基氨基)、酰氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨甲酰基以及脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳基硫基、硫代羧酸酯、硫酸酯、烷基亚磺酰基、磺酰基、氨磺酰基、磺酰胺基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基、或芳族或杂芳族部分。

“芳基烷基”或“芳烷基”部分是被芳基取代的烷基(例如苯基甲基(苯甲基))。“烷基芳基”部分是被烷基取代的芳基(例如甲基苯基)。

“烯基”包括在长度和可能的取代上类似于上述烷基，但是含有至少一个双键的不饱和脂族基团。举例来说，术语“烯基”包括直链烯基(例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基)和支链烯基。在某些实施方案中，直链或支链烯基在它的主链中具有6个或更少的碳原子(例如C₂-C₆(对于直链)、C₃-C₆(对于支链))。术语“C₂-C₆”包括含有2个至6个碳原子的烯基。术语“C₃-C₆”包括含有3个至6个碳原子的烯基。

术语“任选取代的烯基”指的是未取代的烯基或具有置换一个或多个烃主链碳原子上的一个或多个氢原子的指定取代基的烯基。这样的取代基可以包括例如烷基、烯基、炔基、卤素、羟基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸酯、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷基硫代羰基、烷氧基、磷酸酯、膦酰基、亚膦酰基、氨基(包括烷氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基以及烷基芳基氨基)、酰氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨甲酰基以及脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳基硫基、硫代羧酸酯、硫酸酯、烷基亚磺酰基、磺酰基、氨磺酰基、磺酰胺基、硝基、三氟甲基、氰基、杂环基、烷基芳基、或芳族或杂芳族部分。

“炔基”包括在长度和可能的取代上类似于上述烷基，但是含有至少一个三键的不饱和脂族基团。举例来说，“炔基”包括直链炔基(例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基)和支链炔基。在某些实施方案中，直链或支链炔基在它的主链中具有6个或更少的碳原子(例如C₂-C₆(对于直链)、C₃-C₆(对于支链))。术语“C₂-C₆”包括含有2个至6个碳原子的炔基。术语“C₃-C₆”包括含有3个至6个碳原子的炔基。

术语“任选取代的炔基”指的是未取代的炔基或具有置换一个或多个烃主链碳原子上的一个或多个氢原子的指定取代基的炔基。这样的取代基可以包括例如烷基、烯基、炔基、卤素、羟基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸酯、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷基硫代羰基、烷氧基、磷酸酯、膦酰基、亚膦酰基、氨基(包括烷氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基以及烷基芳基氨基)、酰氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨甲酰基以及脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳基硫基、硫代羧酸酯、硫酸酯、烷基亚磺酰基、磺酰基、氨磺酰基、磺酰胺基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基、或芳族或杂芳族部分。

其它任选取代的部分(如任选取代的环烷基、杂环烷基、芳基、或杂芳基)包括未取代的部分和具有指定取代基中的一个或多个的部分这两者。举例来说，取代的杂环烷基包括被一个或多个烷基取代的那些，如2,2,6,6-四甲基-哌啶基和2,2,6,6-四甲基-1,2,3,6-四氢吡啶基。

“芳基”包括具有芳香性的基团，包括具有至少一个芳环并且在环结构中不含任何杂原子的“共轭”或多环系。实例包括苯基、苯甲基、1,2,3,4-四氢萘基等。

“杂芳基”是如上文所定义的芳基，除了在环结构中具有1个至4个杂原子以外，因此也可以被称为“芳基杂环”或“杂芳族化合物”。如本文所用的，术语“杂芳基”意图包括稳定的5元、6元、或7元单环或7元、8元、9元、10元、11元或12元双环芳族杂环，其由碳原子和一个或多个杂原子(例如1个或1个-2个或1个-3个或1个-4个或1个-5个或1个-6个杂原子，或例如1个、2个、3个、4个、5个、或6个杂原子)组成，所述杂原子独立地选自由氮、氧以及硫组成的组。氮原子可以是取代的或未取代的(即N或NR'，其中R'是H或如所定义的其它取代基)。氮杂原子和硫杂原子可以任选地被氧化(即N→O和S(O)_p，其中p＝1或2)。需要注意的是，芳族杂环中S原子和O原子的总数不多于1。

杂芳基的实例包括吡咯、呋喃、噻吩、噻唑、异噻唑、咪唑、三唑、四唑、吡唑、

唑、异

唑、吡啶、吡嗪、哒嗪、嘧啶等。

此外，术语“芳基”和“杂芳基”包括多环(例如双环)芳基和杂芳基。这样的芳基的非限制性实例包括例如萘、苯并

唑、苯并二

唑、苯并噻唑、苯并咪唑、苯并噻吩、亚甲基二氧苯基、喹啉、异喹啉、萘啶、吲哚、苯并呋喃、嘌呤、苯并呋喃、脱氮嘌呤、吲嗪。

在多环芳环的情况下，所述环中只有一个必须是芳族的(例如2,3-二氢吲哚)，尽管所有环都可以是芳族的(例如喹啉)。

环烷基、杂环烷基、芳基、或杂芳基环可以在一个或多个环位置(例如成环碳或杂原子，如N)处被如上文所述的取代基取代，所述取代基例如烷基、烯基、炔基、卤素、羟基、烷氧基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸酯、烷基羰基、烷基氨基羰基、芳烷基氨基羰基、烯基氨基羰基、烷基羰基、芳基羰基、芳烷基羰基、烯基羰基、烷氧基羰基、氨羰基、烷基硫代羰基、磷酸酯、膦酰基、亚膦酰基、氨基(包括烷氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基以及烷基芳基氨基)、酰氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨甲酰基以及脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳基硫基、硫代羧酸酯、硫酸酯、烷基亚磺酰基、磺酰基、氨磺酰基、磺酰胺基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基、或芳族或杂芳族部分。芳基和杂芳基也可以与不是芳族的脂环或杂环稠合以形成多环系(例如萘满、亚甲基二氧苯基)。

当与取代基的键被显示为穿过连接环中两个原子的键(如由以下具有取代基R的实例所示)时，则这样的取代基可以与环中的任何原子键合。

当任何变量(例如R₁)在化合物的任何构成要素或化学式中不止一次出现时，它在每次出现时的定义与它在其它每次出现时的定义无关。因此，例如，如果基团被显示为被0个-2个R₁部分取代，则所述基团可以任选地被最多两个R₁部分取代并且R₁在每次出现时独立地选自R₁的定义。

术语“羟基(hydroxy)”或“羟基(hydroxyl)”包括具有-OH或-O^-的基团。

如本文所用的“卤代”或“卤素”指的是氟、氯、溴以及碘。术语“全卤代”一般指的是其中所有氢原子均被卤素原子置换的部分。术语“卤代烷基”或“卤代烷氧基”指的是被一个或多个卤素原子取代的烷基或烷氧基。

“烷氧基烷基”、“烷基氨基烷基”以及“硫代烷氧基烷基”包括如上文所述的烷基，其中氧原子、氮原子、或硫原子置换一个或多个烃主链碳原子。

术语“烷氧基(alkoxy)”或“烷氧基(alkoxyl)”包括与氧原子共价连接的取代和未取代的烷基、烯基以及炔基。烷氧基(alkoxy group)或烷氧基(alkoxyl radical)的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、异丙氧基、丙氧基、丁氧基以及戊氧基。取代的烷氧基的实例包括卤代烷氧基。烷氧基可以被诸如以下的基团取代：烯基、炔基、卤素、羟基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸酯、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷基硫代羰基、烷氧基、磷酸酯、膦酰基、亚膦酰基、氨基(包括烷氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、以及烷基芳基氨基)、酰氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨甲酰基以及脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳基硫基、硫代羧酸酯、硫酸酯、烷基亚磺酰基、磺酰基、氨磺酰基、磺酰胺基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基、或芳族或杂芳族部分。卤素取代的烷氧基的实例包括但不限于氟代甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、氯代甲氧基、二氯甲氧基以及三氯甲氧基。

“同分异构(isomerism)”意指具有相同的分子式，但是在其原子的键合顺序或其原子在空间中的排列方面不同的化合物。其原子在空间中的排列不同的异构体被称作“立体异构体(stereoisomer)”。彼此不是镜像的立体异构体被称作“非对映异构体(diastereoisomer)”并且彼此是不可重叠镜像的立体异构体被称作“对映体(enantiomer)”或有时被称作光学异构体。含有等量的具有相反手性的单对映体形式的混合物被称作“外消旋混合物(racemic mixture)”。

与四个不同取代基键合的碳原子被称作“手性中心”。

“手性异构体(chiral isomer)”意指具有至少一个手性中心的化合物。具有多于一个手性中心的化合物可以作为单独的非对映体存在或作为被称作“非对映体混合物(diastereomeric mixture)”的非对映体的混合物而存在。当存在一个手性中心时，立体异构体可以通过该手性中心的绝对构型(R或S)来表征。绝对构型指的是与手性中心连接的取代基在空间中的排列。与所考虑的手性中心连接的取代基是根据Cahn、Ingold以及Prelog的顺序法则排序的。(Calm等,Angew.Chem.Inter.Edit.1966,5,385；勘误表511；Cahn等,Angew.Chem.1966,78,413；Cahn和Ingold,J.Chem.Soc.1951(伦敦),612；Calm等,Experientia 1956,12,81；Cahn,J.Chem.Educ.1964,41,116)。

在本说明书中，结构式内手性中心的每一次出现，如在此所示的非限制性实例：

意在描绘所有可能的立体异构体。相反，以影线和楔形绘制的手性中心，如在此所示的非限制性实例：

意在描绘如所示的立体异构体(在此，在该sp³杂化碳手性中心中，R₃和R₄处于纸平面中，R₁在纸平面上方，并且R₂在纸平面后方)。

“几何异构体(geometric isomer)”意指这样的非对映体，所述非对映体的存在归因于围绕双键或环烷基连接基团(例如1,3-环丁基)的旋转受阻。根据Cahn-Ingold-Prelog法则，这些构型是通过前缀顺式(cis)和反式(trans)或Z和E而在它们的名称中区分的，这些前缀表明了所述基团是处于分子中双键的同侧还是对侧上。

在本说明书中，包括如所示与双键相邻的波浪线的结构式或以全部直键绘制的结构式内的每一次出现：

意在描绘两种几何异构体。相反，没有用波浪线绘制的这样的结构意在描绘具有如所绘制的几何构型的化合物。

“互变异构体(tautomer)”是在平衡状态下存在的两种或更多种结构异构体之一，其容易从一种异构体形式转化成另一种异构体形式。这种转化引起氢原子的形式迁移(formal migration)，伴有相邻共轭双键的转换。互变异构体在溶液中作为互变异构体组的混合物存在。在其中互变异构可能发生的溶液中，将达到互变异构体的化学平衡。互变异构体的确切比率取决于几个因素，包括温度、溶剂以及pH值。可通过互变异构相互转化的互变异构体的概念被称作互变异构现象(tautomerism)。

在本说明书描绘了易于互变异构的化合物，但是仅描绘了互变异构体之一的情况下，应当了解的是，所有互变异构体都被包括作为所描绘的化学物质的含义的一部分。应当了解的是，本公开的化合物可以被描绘成不同的互变异构体。还应当了解的是，当化合物具有互变异构形式时，所有互变异构形式都意图被包括在本公开的范围内，并且所述化合物的命名不排除任何互变异构体形式。

在可能的各种类型的互变异构现象中，通常观测到两种。在酮-烯醇互变异构现象中，发生电子和氢原子的同时移动。环-链互变异构现象是由于糖链分子中的醛基(--CHO)与同一分子中的羟基(--OH)之一反应以使其具有如由葡萄糖所表现出的环状(环形)形式而发生。

常见的互变异构对是：酮-烯醇、酰胺-腈、内酰胺-内酰亚胺、杂环中(例如核碱基，如鸟嘌呤、胸腺嘧啶以及胞嘧啶中)的酰胺-亚胺酸互变异构现象、亚胺-烯胺以及烯胺-烯胺。

此外，本公开中所论述的结构和其它化合物包括其所有的阻转异构体，应当了解的是，并非所有的阻转异构体都可以具有相同水平的活性。“阻转异构体(atropicisomer)”是其中两种异构体的原子在空间中排列不同的一种类型的立体异构体。阻转异构体的存在归因于大基团围绕中心键的旋转受阻所引起的限制性旋转。这样的阻转异构体通常作为混合物存在，然而，由于色谱技术的最新进展，在选择的情况下已经有可能分离两种阻转异构体的混合物。

术语“晶体多晶型物(crystal polymorph)”、“多晶型物(polymorph)”或“晶形(crystal form)”意指其中化合物(或其盐或溶剂化物)可以不同的晶体堆积排列结晶的晶体结构，其全部都具有相同的元素组成。不同的晶形通常具有不同的X射线衍射图、红外光谱、熔点、密度、硬度、晶体形状、光学和电学特性、稳定性、以及溶解度。重结晶溶剂、结晶速率、储存温度、以及其它因素可以使得一种晶形占优势。化合物的晶体多晶型物可以通过在不同的条件下结晶来制备。应当了解的是，本公开的化合物可以结晶形式、晶形混合物、或其酐或水合物的形式存在。

本文所公开的化合物包括化合物本身以及它们的盐和溶剂化物(如果适用的话)。盐例如可以在阴离子与芳基或杂芳基取代的苯化合物上的带正电荷的基团(例如氨基)之间形成。合适的阴离子包括氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、硫酸氢根、氨基磺酸根、硝酸根、磷酸根、柠檬酸根、甲磺酸根、三氟乙酸根、谷氨酸根、葡萄糖醛酸根、戊二酸根、苹果酸根、马来酸根、琥珀酸根、富马酸根、酒石酸根、甲苯磺酸根、水杨酸根、乳酸根、萘磺酸根、以及乙酸根(例如三氟乙酸根)。术语“药学上可接受的阴离子”指的是适用于形成药学上可接受的盐的阴离子。同样，盐也可以在阳离子与芳基或杂芳基取代的苯化合物上的带负电荷的基团(例如羧基(carboxylate))之间形成。合适的阳离子包括钠离子、钾离子、镁离子、钙离子、以及铵阳离子，如四甲基铵离子。芳基或杂芳基取代的苯化合物还包括含有季氮原子的那些盐。

此外，本公开的化合物，例如化合物的盐可以水合形式或未水合(无水)形式或作为与其它溶剂分子的溶剂化物存在。水合物的非限制性实例包括一水合物、二水合物等。溶剂化物的非限制性实例包括乙醇溶剂化物、丙酮溶剂化物等。

如本文所用的，“药学上可接受的盐”指的是如本文所描述的化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸盐或碱盐而被修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基诸如胺的无机或有机酸盐，酸性残基诸如羧酸的碱性或有机盐等。药学上可接受的盐包括例如由无毒的无机酸或有机酸形成的母体化合物的常规的无毒盐或季铵盐。举例来说，这样的常规的无毒盐包括但不限于由无机酸和有机酸衍生的那些，所述无机酸和有机酸选自：2-乙酰氧基苯甲酸、2-羟基乙磺酸、乙酸、抗坏血酸、苯磺酸、苯甲酸、重碳酸、碳酸、柠檬酸、依地酸、乙二磺酸、1,2-乙磺酸、富马酸、葡庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、乙醇酰基对氨基苯胂酸(glycollyarsanilic)、己基间苯二酚酸(hexylresorcinic)、海巴明酸(hydrabamic)、氢溴酸、盐酸、氢碘酸、羟基马来酸、羟基萘甲酸、羟乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂基磺酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、萘磺酸(napsylic)、硝酸、草酸、双羟萘酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、聚半乳糖醛酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、碱式乙酸、琥珀酸、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、硫酸、鞣酸、酒石酸、甲苯磺酸、以及通常存在的氨基酸，例如甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、精氨酸等。

药学上可接受的盐的其它实例包括己酸盐、环戊烷丙酸盐、丙酮酸盐、丙二酸盐、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸盐、肉桂酸盐、4-氯苯磺酸盐、2-萘磺酸盐、4-甲苯磺酸盐、樟脑磺酸盐、4-甲基双环-[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸盐、3-苯基丙酸盐、三甲基乙酸盐、叔丁基乙酸盐、粘康酸盐等。本公开还涵盖了当母体化合物中存在的酸性质子被金属离子(例如碱金属离子、碱土金属离子、或铝离子)置换；或与有机碱配位时所形成的盐，所述有机碱诸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。在盐形式中，应当了解的是，所述化合物与盐的阳离子或阴离子的比率可以是1:1，或除1:1以外的任何比率，例如3:1、2:1、1:2或1:3。

应当了解的是，所有对药学上可接受的盐的提及包括相同盐的如本文所定义的溶剂加成形式(溶剂化物)或晶形(多晶型物)。

“溶剂化物”意指含有化学计量或非化学计量的溶剂的溶剂加成形式。一些化合物倾向于将固定摩尔比的溶剂分子截留在结晶固态中，从而形成溶剂化物。如果所述溶剂是水，那么所形成的溶剂化物是水合物；而如果所述溶剂是醇，那么所形成的溶剂化物是醇化物。水合物是由一个或多个水分子与物质的一个分子的组合形成的，其中水保持它作为H₂O的分子状态。

所命名或描绘的化学物质意图包括本发明的化合物中存在的原子的所有天然存在的同位素。同位素包括具有相同的原子序数，但是具有不同的质量数的那些原子。作为一般实例而不限制，¹H氢的同位素包括氚和氘，并且¹²C碳的同位素包括¹³C和¹⁴C。

本发明的化合物也可以被制备成用于正电子发射断层摄影术(PET)的放射性示踪剂。这样的PET示踪剂可以并入放射性同位素，如¹¹C、¹³N、¹⁵O，或优选地¹⁸F。这样的放射性同位素可以取代已经存在于所述化合物中的相应的非放射性同位素C、N、O或F原子，或可以取代所述化合物中的氢原子。

应当了解的是，本公开的一些化合物以及其异构体、盐、溶剂化物和多晶型物可以比其它化合物表现出更大的体内活性或体外活性。还将了解的是，使用本公开的化合物、以及其异构体、盐、溶剂化物和多晶型物可以比其它化合物更有效地治疗一些疾病或病况。

如本文所用的，“治疗”意指向受试者施用药物组合物以改善、减少或减轻疾病的症状。如本文所用的“治疗(treating)”或“治疗(treat)”描述了对受试者进行管理和护理以实现对抗疾病、病况或病症的目的，并且包括施用本公开的化合物、或其药学上可接受的盐、多晶型物或溶剂化物，以缓解疾病、病况或病症的症状或并发症，或消除所述疾病、病况或病症。术语“治疗”还可以包括对体外细胞或动物模型的处理。

治疗癌症可以导致肿瘤尺寸的减小。肿瘤尺寸的减小也可以被称为“肿瘤消退”。优选的是，在治疗之后，肿瘤尺寸相对于它在治疗之前的尺寸减小了5％或更大；更优选地，肿瘤尺寸减小了10％或更大；更优选地，减小了20％或更大；更优选地，减小了30％或更大；更优选地，减小了40％或更大；甚至更优选地，减小了50％或更大；并且最优选地，减小了大于75％或更大。肿瘤的尺寸可以通过任何可再现的测量手段来测量。肿瘤的尺寸可以作为肿瘤的直径来测量。

治疗癌症可以导致肿瘤体积的减小。优选的是，在治疗之后，肿瘤体积相对于它在治疗之前的尺寸减小了5％或更大；更优选地，肿瘤体积减小了10％或更大；更优选地，减小了20％或更大；更优选地，减小了30％或更大；更优选地，减小了40％或更大；甚至更优选地，减小了50％或更大；并且最优选地，减小了大于75％或更大。肿瘤体积可以通过任何可再现的测量手段来测量。

治疗癌症可以导致肿瘤数量的减少。优选的是，在治疗之后，肿瘤数量相对于在治疗之前的数量减少了5％或更大；更优选地，肿瘤数量减少了10％或更大；更优选地，减少了20％或更大；更优选地，减少了30％或更大；更优选地，减少了40％或更大；甚至更优选地，减少了50％或更大；并且最优选地，减少了大于75％。肿瘤的数量可以通过任何可再现的测量手段来测量。肿瘤的数量可以通过计数肉眼可见的肿瘤或在指定的放大倍数下可见的肿瘤来测量。优选的是，所述指定的放大倍数是2×、3×、4×、5×、10×、或50×。

治疗癌症可以导致远离原发肿瘤部位的其它组织或器官中转移性病变的数量减少。优选的是，在治疗之后，转移性病变的数量相对于在治疗之前的数量减少了5％或更大；更优选地，转移性病变的数量减少了10％或更大；更优选地，减少了20％或更大；更优选地，减少了30％或更大；更优选地，减少了40％或更大；甚至更优选地，减少了50％或更大；并且最优选地，减少了大于75％。转移性病变的数量可以通过任何可再现的测量手段来测量。转移性病变的数量可以通过计数肉眼可见的转移性病变或在指定的放大倍数下可见的转移性病变来测量。优选的是，所述指定的放大倍数是2×、3×、4×、5×、10×、或50×。

如本文所用的“一个受试者”或“多个受试者”指的是任何动物，如哺乳动物，包括啮齿类动物(例如小鼠或大鼠)、狗、灵长类动物、狐猴或人类。

治疗癌症可以导致接受治疗的受试者的群体的平均存活时间与仅仅接受载体的群体相比延长。优选的是，平均存活时间延长了多于30天；更优选地，延长了多于60天；更优选地，延长了多于90天；并且最优选地，延长了多于120天。群体的平均存活时间的延长可以通过任何可再现的手段来测量。群体的平均存活时间的延长可以例如通过在开始用活性化合物治疗之后计算群体的平均存活时间长度来测量。群体的平均存活时间的延长还可以例如通过在用活性化合物完成第一轮治疗之后计算群体的平均存活时间长度来测量。

治疗癌症可以导致接受治疗的受试者的群体的平均存活时间与未接受治疗的受试者的群体相比延长。优选的是，平均存活时间延长了多于30天；更优选地，延长了多于60天；更优选地，延长了多于90天；并且最优选地，延长了多于120天。群体的平均存活时间的延长可以通过任何可再现的手段来测量。群体的平均存活时间的延长可以例如通过在开始用活性化合物治疗之后计算群体的平均存活时间长度来测量。群体的平均存活时间的延长还可以例如通过在用活性化合物完成第一轮治疗之后计算群体的平均存活时间长度来测量。

治疗癌症可以导致接受治疗的受试者的群体的平均存活时间与接受不是本公开的化合物或其药学上可接受的盐的药物的单药治疗的群体相比延长。优选的是，平均存活时间延长了多于30天；更优选地，延长了多于60天；更优选地，延长了多于90天；并且最优选地，延长了多于120天。群体的平均存活时间的延长可以通过任何可再现的手段来测量。群体的平均存活时间的延长可以例如通过在开始用活性化合物治疗之后计算群体的平均存活时间长度来测量。群体的平均存活时间的延长还可以例如通过在用活性化合物完成第一轮治疗之后计算群体的平均存活时间长度来测量。

治疗癌症可以导致接受治疗的受试者的群体的死亡率与仅接受载体的群体相比降低。治疗癌症可以导致接受治疗的受试者的群体的死亡率与未接受治疗的群体相比降低。治疗癌症可以导致接受治疗的受试者的群体的死亡率与接受不是本公开的化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物、类似物或衍生物的药物的单药治疗的群体相比降低。优选的是，死亡率降低了多于2％；更优选地，降低了多于5％；更优选地，降低了多于10％；并且最优选地，降低了多于25％。接受治疗的受试者的群体的死亡率的降低可以通过任何可再现的手段来测量。群体的死亡率的降低可以例如通过在开始用活性化合物治疗之后计算群体的每单位时间的平均疾病相关死亡数来测量。群体的死亡率的降低还可以例如通过在用活性化合物完成第一轮治疗之后计算群体的每单位时间平均疾病相关死亡数来测量。

治疗癌症可以导致肿瘤生长速率降低。优选的是，在治疗之后，肿瘤生长速率相对于治疗之前的数字降低了至少5％；更优选地，肿瘤生长速率降低了至少10％；更优选地，降低了至少20％；更优选地，降低了至少30％；更优选地，降低了至少40％；更优选地，降低了至少50％；甚至更优选地，降低了至少50％；并且最优选地，降低了至少75％。肿瘤生长速率可以通过任何可再现的测量手段来测量。肿瘤生长速率可以根据每单位时间肿瘤直径的变化来测量。

治疗癌症可以导致肿瘤再生长减少，例如在试图通过手术将它去除之后。优选的是，在治疗之后，肿瘤再生长少于5％；更优选地，肿瘤再生长少于10％；更优选地，少于20％；更优选地，少于30％；更优选地，少于40％；更优选地，少于50％；甚至更优选地，少于50％；并且最优选地，少于75％。肿瘤再生长可以通过任何可再现的测量手段来测量。肿瘤再生长例如通过测量在治疗之后较早的肿瘤缩小之后肿瘤直径的增加来测量。肿瘤再生长减少是通过在已经停止治疗之后肿瘤不能复发来指示的。

治疗或预防细胞增殖性病症可以导致细胞增殖速率的降低。优选的是，在治疗之后，细胞增殖速率降低了至少5％；更优选地，降低了至少10％；更优选地，降低了至少20％；更优选地，降低了至少30％；更优选地，降低了至少40％；更优选地，降低了至少50％；甚至更优选地，降低了至少50％；并且最优选地，降低了至少75％。细胞增殖速率可以通过任何可再现的测量手段来测量。细胞增殖速率例如通过测量每单位时间组织样品中分裂细胞的数量来测量。

治疗或预防细胞增殖性病症可以导致增殖细胞的比例降低。优选的是，在治疗之后，增殖细胞的比例降低了至少5％；更优选地，降低了至少10％；更优选地，降低了至少20％；更优选地，降低了至少30％；更优选地，降低了至少40％；更优选地，降低了至少50％；甚至更优选地，降低了至少50％；并且最优选地，降低了至少75％。增殖细胞的比例可以通过任何可再现的测量手段来测量。优选的是，增殖细胞的比例例如通过定量组织样品中相对于非分裂细胞的数量分裂细胞的数量来测量。增殖细胞的比例可以等同于有丝分裂指数。

治疗或预防细胞增殖性病症可以导致细胞增殖的范围或区域的尺寸减小。优选的是，在治疗之后，细胞增殖的范围或区域的尺寸相对于它在治疗之前的尺寸减小了至少5％；更优选地，减小了至少10％；更优选地，减小了至少20％；更优选地，减小了至少30％；更优选地，减小了至少40％；更优选地，减小了至少50％；甚至更优选地，减小了至少50％；并且最优选地，减小了至少75％。细胞增殖的范围或区域的尺寸可以通过任何可再现的测量手段来测量。细胞增殖的范围或区域的尺寸可以被测量为细胞增殖的范围或区域的直径或宽度。

治疗或预防细胞增殖性病症可以导致具有异常外观或形态的细胞的数量或比例减少。优选的是，在治疗之后，具有异常形态的细胞的数量相对于它在治疗之前的数目减少了至少5％；更优选地，减少了至少10％；更优选地，减少了至少20％；更优选地，减少了至少30％；更优选地，减少了至少40％；更优选地，减少了至少50％；甚至更优选地，减少了至少50％；并且最优选地，减少了至少75％。异常细胞外观或形态可以通过任何可再现的测量手段来测量。异常细胞形态可以通过显微镜术来测量，例如使用倒置组织培养显微镜。异常细胞形态可以采用核多态性的形式。

如本文所用的术语“缓解”意在描述病症的体征或症状的严重程度降低的过程。重要的是，体征或症状可以被缓解而没有被消除。在一个优选的实施方案中，施用本公开的药物组合物引起体征或症状的消除，然而，消除不是必要的。有效剂量预期降低体征或症状的严重程度。举例来说，如果在多个位置中的至少一个位置中癌症的严重程度降低，那么可能在多个位置发生的诸如癌症的病症的体征或症状得到缓解。

如本文所用的术语“严重程度”意在描述癌症从癌前状态或良性状态转变成恶性状态的潜力。作为另外一种选择或除此之外，严重程度意在描述癌症分期，例如根据TNM系统(被国际抗癌联盟(International Union Against Cancer，UICC)和美国癌症联合会(American Joint Committee on Cancer，AJCC)所接受)或通过其它本领域公认的方法。癌症分期指的是基于诸如原发肿瘤的位置、肿瘤尺寸、肿瘤数量、以及淋巴结受累(癌症扩散到淋巴结中)的因素，癌症的程度或严重程度。作为另外一种选择或除此之外，严重程度意在通过本领域公认的方法(参见国家癌症研究所(National Cancer Institute)，www.cancer.gov)描述肿瘤分级(tumor grade)。肿瘤分级是一种用于根据癌细胞在显微镜下看起来的异常程度和肿瘤可能生长和扩散的快速程度来对癌细胞进行分类的系统。当确定肿瘤分级时，考虑许多因素，包括细胞的结构和生长模式。用于确定肿瘤分级的特定因素随每一种类型的癌症而变。严重程度还描述了组织学分级(histologic grade)，也被称作分化，它指的是肿瘤细胞与相同组织类型的正常细胞的相似程度(参见国家癌症研究所，www.cancer.gov)。此外，严重程度描述了核分级，它指的是肿瘤细胞中核的尺寸和形状以及正在分裂的肿瘤细胞的百分比(参见国家癌症研究所，www.cancer.gov)。

在如本文所描述的另一个方面，严重程度描述了肿瘤已经分泌的生长因子、降解的细胞外基质、变成血管化的、丧失对并置组织的粘附、或转移的程度。此外，严重程度描述了原发肿瘤已经转移的位置的数量。最后，严重程度包括治疗不同类型和位置的肿瘤的难度。举例来说，不能手术的肿瘤、有更大的机会进入多个身体系统的那些癌症(血液系统肿瘤和免疫系统肿瘤)、以及对传统治疗最具抗性的那些被认为是最严重的。在这些情况下，延长受试者的预期寿命和/或减轻疼痛、降低癌细胞的比例或将细胞限制于一个系统、以及改善癌症分期/肿瘤分级/组织学分级/核分级被认为是缓解癌症的体征或症状。

如本文所用的术语“症状”被定义为疾病、病痛、损伤、或身体不适之类的适应症。症状是由遭受所述症状的个体感受或注意到的，但是可能不容易由非医疗保健专业人员注意到。

“药物组合物”是含有本公开的化合物(呈适用于向受试者施用的形式)的制剂。在一个实施方案中，所述药物组合物是散装的或呈单位剂型。单位剂型是多种形式中的任一种，包括例如胶囊、静脉输液袋、片剂、气溶胶吸入器上的单个泵或小瓶。单位剂量的组合物中活性成分(例如所公开的化合物或其盐、水合物、溶剂化物或异构体的制剂)的量是有效量，其根据所涉及的具体治疗而变化。本领域技术人员将了解的是，有时需要对剂量进行常规的变化，这取决于患者的年龄和状况。剂量还将取决于施用途径。考虑了多种途径，包括口服、肺部、经直肠、肠胃外、透皮、皮下、静脉内、肌内、腹膜内、吸入、颊面、舌下、胸膜内、鞘内、鼻内等。用于局部或透皮施用本公开的化合物的剂型包括粉剂、喷雾剂、软膏剂、糊剂、乳膏剂、洗剂、凝胶剂、溶液、贴剂以及吸入剂。在一个实施方案中，在无菌条件下将活性化合物与药学上可接受的载体以及与所需的任何防腐剂、缓冲剂、或推进剂混合。

如本文所用的，短语“药学上可接受的”指的是在合理的医学判断的范围内适用于与人类和动物的组织接触而没有过度的毒性、刺激性、过敏反应、或其它问题或并发症，与合理的效益/风险比相称的那些化合物、阴离子、阳离子、材料、组合物、载体、和/或剂型。

“药学上可接受的赋形剂”意指可用于制备药物组合物的通常安全、无毒的并且既非在生物学上不合需要也非在其它方面不合需要的赋形剂，其包括可为兽医学使用以及人类药物使用所接受的赋形剂。如本说明书和权利要求书中所用的“药学上可接受的赋形剂”包括一种和多于一种这样的赋形剂。

本文所描述的实施方案可以提供药物组合物，所述药物组合物包含本文所公开的任何化合物与至少一种药学上可接受的赋形剂或载体的组合。

如本文所描述的药物组合物通常被配制成与它的预期施用途径相容。施用途径的实例包括肠胃外施用，例如静脉内施用、真皮内施用、皮下施用、口服施用(例如吸入施用)、透皮施用(局部施用)、以及经粘膜施用。用于肠胃外、真皮内、或皮下施用的溶液或悬浮液可以包括以下组分：无菌稀释剂，如注射用水、盐水溶液、不挥发性油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶剂；抗细菌剂，如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂，如乙二胺四乙酸；缓冲剂，如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐；以及用于调节张力的试剂，如氯化钠或右旋糖。可以用酸或碱，如盐酸或氢氧化钠调节pH值。肠胃外制剂可以被封装在由玻璃或塑料制成的安瓿、一次性注射器或多剂量小瓶中。

化合物或药物组合物可以通过目前用于化疗治疗的许多公知的方法来向受试者施用。举例来说，为了治疗癌症，可以将如本文所描述的化合物直接注射到肿瘤中、注射到血流或体腔中或口服或用贴剂经由皮肤施用。所选择的剂量应当足以构成有效的治疗，但是不会过高以致引起不可接受的副作用。优选地在治疗期间以及在治疗之后一段合理的时间内，应当密切监测患者的疾病状况(例如癌症、癌前期等)的状态和健康情况。

如本文所用的术语“治疗有效量”指的是药剂治疗、改善、或预防所鉴定的疾病或病况、或表现出可检测的治疗作用或抑制作用的量。所述作用可以通过本领域已知的任何测定方法来检测。用于受试者的精确有效量将取决于受试者的体重、体格大小(size)、以及健康情况；病况的性质和程度；以及选用于施用的治疗剂或治疗剂的组合。用于给定情况的治疗有效量可以通过在临床医生的技能和判断范围内的常规实验来确定。在一个优选的方面，待治疗的疾病或病况是癌症。在另一个方面，待治疗的疾病或病况是细胞增殖性病症。

对于任何化合物，治疗有效量最初可以在细胞培养测定(例如赘生性细胞的细胞培养测定)中或在动物模型中估计，所述动物模型通常是大鼠、小鼠、兔、狗、或猪。也可以使用动物模型来确定适当的浓度范围和施用途径。然后可以使用这样的信息来确定在人类中有用的剂量和施用途径。治疗/预防功效和毒性可以在细胞培养物或实验动物中通过标准药学程序来确定，例如ED₅₀(在50％的群体中具有治疗有效性的剂量)和LD₅₀(对50％的群体致死的剂量)。毒性作用与治疗作用之间的剂量比是治疗指数，并且它可以被表示为比率LD₅₀/ED₅₀。表现出大的治疗指数的药物组合物是优选的。所述剂量可以在该范围内变化，这取决于所使用的剂型、患者的敏感性、以及施用途径。

调整剂量和施用以提供足够水平的一种或多种活性剂或维持所期望的作用。可以被考虑在内的因素包括疾病状态的严重程度、受试者的一般健康情况、受试者的年龄、体重、和性别、饮食、施用时间和频率、一种或多种药物组合、反应敏感性、以及对治疗的耐受性/响应。长效药物组合物可以每3天至4天施用一次、每周施用一次、或每两周施用一次，这取决于具体制剂的半衰期和清除率。

含有如本文所描述的活性化合物的药物组合物可以以通常已知的方式来制造，例如借助于常规的混合工艺、溶解工艺、造粒工艺、糖衣丸制备工艺、磨碎工艺、乳化工艺、封装工艺、包封(entrapping)工艺、或冻干工艺。药物组合物可以以常规的方式，使用一种或多种药学上可接受的载体来配制，所述载体包括有助于将活性化合物加工成可以在药学上使用的制剂的赋形剂和/或辅剂。当然，适当的制剂取决于所选择的施用途径。

适合于注射使用的药物组合物包括无菌水溶液(在具有水溶性的情况下)或分散体以及用于临时制备无菌注射溶液或分散体的无菌粉末。对于静脉内施用，合适的载体包括生理盐水、抑菌水、Cremophor EL^TM(新泽西州帕西帕尼的巴斯夫公司(BASF,Parsippany,N.J.))或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。在所有情况下，所述组合物必须是无菌的并且应当是流动的，以达到存在易注射性的程度。它在制造和储存的条件下必须是稳定的，并且必须被保存以防止微生物(如细菌和真菌)的污染作用。所述载体可以是含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇以及液体聚乙二醇等)以及其合适的混合物的溶剂或分散介质。可以例如通过使用如卵磷脂的包衣、在分散体的情况下通过维持所需的粒度、以及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。可以通过各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞等来实现对微生物作用的预防。在很多情况下，优选在组合物中包含等渗剂，例如糖、多元醇(如甘露糖醇和山梨糖醇)、以及氯化钠。可以通过在组合物中包含延迟吸收剂(例如单硬脂酸铝和明胶)来使可注射组合物的吸收延长。

通过将所需量的活性化合物，根据需要连同上文所列举的成分中的一种或其组合一起并入到适当的溶剂中，继而过滤灭菌，可以制备无菌可注射溶液。一般来说，通过将活性化合物并入到含有基本分散介质和上文所列举的那些成分中的所需的其它成分的无菌媒介物中来制备分散体。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，制备方法是真空干燥和冷冻干燥，其从其先前无菌过滤的溶液产生活性成分加上任何另外的所期望的成分的粉末。

口服组合物一般包含惰性稀释剂或可食用的药学上可接受的载体。它们可以被包封在明胶胶囊中或压制成片剂。为了口服治疗施用，可以将活性化合物与赋形剂结合并且以片剂、锭剂、或胶囊的形式使用。口服组合物也可以使用流体载体来制备以用作漱口水，其中流体载体中的化合物被口服施用并且漱口(swished)，然后吐出或吞咽。可以包含药学上相容的粘合剂和/或佐剂材料作为组合物的一部分。片剂、丸剂、胶囊、锭剂等可以含有以下成分中的任一种或具有类似性质的化合物：粘合剂，如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，如淀粉或乳糖；崩解剂，如藻酸、

品牌的交联羧甲基化马铃薯淀粉、或玉米淀粉；润滑剂，如硬脂酸镁或Sterotes；助流剂，如胶态二氧化硅；甜味剂，如蔗糖或糖精；或调味剂，如胡椒薄荷、水杨酸甲酯、或橙味调味剂。

对于通过吸入施用，所述化合物是以来自容纳合适的推进剂，例如气体(如二氧化碳)的加压容器或分配器、或雾化器的气溶胶喷雾剂的形式递送的。

全身施用还可以通过经粘膜或透皮方式来进行。对于经粘膜或透皮施用，在制剂中使用适合待被渗透的屏障的渗透剂。这样的渗透剂一般是本领域已知的，并且对于经粘膜施用，其包括例如洗涤剂、胆汁盐以及羧链孢酸衍生物。经粘膜施用可以经由使用喷鼻剂或栓剂来实现。对于透皮施用，将活性化合物配制成软膏剂、油膏剂、凝胶剂、或乳膏剂，如本领域一般已知的那样。

活性化合物可以与保护所述化合物防止从身体中快速消除的药学上可接受的载体一起制备，如缓释制剂，包括植入物和微封装递送系统。可以使用可生物降解的生物相容性聚合物，如乙烯-乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯、以及聚乳酸。用于制备这样的制剂的方法对本领域技术人员来说是显而易见的。

通常有利的是，将口服或肠胃外组合物配制成剂量单位形式以易于施用和剂量的均匀性。如本文所用的剂量单位形式指的是适合作为单位剂量用于待治疗的受试者的物理上离散的单位；每一个单位含有经过计算以产生所期望的治疗作用的预定量的活性化合物联同所需的药物载体。如本文所描述的剂量单位形式的规格是由以下各项决定的并且直接取决于以下各项：活性化合物的独特特征和待实现的具体治疗作用。

在治疗应用中，根据本文所描述的实施方案使用的药物组合物的剂量根据药剂、接受患者的年龄、体重、和临床病况、以及施用治疗的临床医生或专业人员的经验和判断、以及影响所选择的剂量的其它因素而变化。一般来说，剂量应当足以引起肿瘤生长减慢，优选消退，并且还优选引起癌症完全消退。剂量可以在每天约0.01mg/kg至每天约5000mg/kg的范围。在优选的方面，剂量可以在每天约1mg/kg至每天约1000mg/kg的范围。在一个方面，所述剂量的范围为：约0.1毫克/天至约50克/天；约0.1毫克/天至约25克/天；约0.1毫克/天至约10克/天；约0.1毫克/天至约3克/天；或约0.1毫克/天至约1克/天，其为单次剂量、分次剂量、或连续剂量(可以针对患者的体重(kg)、体表面积(m²)以及年龄(岁)来调整所述剂量)。药剂的有效量是提供如由临床医生或其它有资格的观测人员所注意到的可客观鉴定的改善的量。举例来说，患者的肿瘤的消退可以参考肿瘤的直径来测量。肿瘤直径的减小表明消退。也通过在已经停止治疗之后肿瘤不能复发来指示消退。如本文所用的，术语“剂量有效方式”指的是活性化合物在受试者或细胞中产生所期望的生物作用的量。

所述药物组合物可以连同施用说明书一起被包括在容器、包装或分配器中。

用于配制和施用所公开的化合物的技术可以见于Remington:the Science andPractice of Pharmacy(《雷明顿：药学技术和实践》),第19(19.sup.th edition)版,宾夕法尼亚州伊斯顿的麦克出版公司(Mack Publishing Co.,Easton,Pa.)(1995)中。在一个实施方案中，本文所述的化合物和其药学上可接受的盐可以与药学上可接受的载体或稀释剂联合用于药物制剂中。合适的药学上可接受的载体包括惰性固体填充剂或稀释剂和无菌水溶液或有机溶液。所述化合物将以足以提供本文所述的范围的期望剂量的量存在于这样的药物组合物中。

举例来说而非限制，本文所述的化合物可以用于靶向肿瘤微环境中的宿主免疫抑制细胞的癌症免疫治疗，所述细胞可以是髓系或淋巴谱系的。可以使用本公开的一种或多种化合物治疗的示例性癌症包括但不限于基于肿瘤基因组图谱(TCGA)携带高水平的骨髓浸润的肿瘤类型。肿瘤类型可以包括胰腺癌、肾透明细胞癌、头颈部鳞状细胞癌(SCCHN)、非小细胞肺癌(NSCLC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、浆液性上皮性卵巢癌、宫颈癌、膀胱移行细胞癌、以及三阴性乳腺癌(TNBC)。

待治疗的癌症可以根据美国癌症联合会(AJCC)TNM分类系统来分期，其中肿瘤(T)已经被指定为TX期、T1期、T1mic期、T1a期、T1b期、T1c期、T2期、T3期、T4期、T4a期、T4b期、T4c期、或T4d期；并且其中区域淋巴结(N)已经被指定为NX期、N0期、N1期、N2期、N2a期、N2b期、N3期、N3a期、N3b期、或N3c期；并且其中远处转移(M)可以被指定为MX期、M0期、或M1期。待治疗的癌症可以根据美国癌症联合会(AJCC)分类被分期为I期、IIA期、IIB期、IIIA期、IIIB期、IIIC期、或IV期。待治疗的癌症可以根据AJCC分类被指定为如GX级(例如不能评估分级)、1级、2级、3级或4级的分级。待治疗的癌症可以根据以下各项的AJCC病理分类(pN)来分期：pNX、pN0、PN0(I-)、PN0(I+)、PN0(mol-)、PN0(mol+)、PN1、PN1(mi)、PN1a、PN1b、PN1c、pN2、pN2a、pN2b、pN3、pN3a、pN3b、或pN3c。

待治疗的癌症可以包括已经被测定为具有小于或等于约2厘米的直径的肿瘤。待治疗的癌症可以包括已经被测定为具有约2厘米至约5厘米的直径的肿瘤。待治疗的癌症可以包括已经被测定为具有大于或等于约3厘米的直径的肿瘤。待治疗的癌症可以包括已经被测定为具有大于5厘米的直径的肿瘤。待治疗的癌症可以通过微观外观被分类为分化良好的、中度分化的、低分化的或未分化的。待治疗的癌症可以通过微观外观根据有丝分裂计数(例如细胞分裂量)或核多态性(例如细胞变化)来分类。待治疗的癌症可以通过微观外观被分类为与坏死区域(例如垂死或变性的细胞的区域)有关。待治疗的癌症可以被分类为具有异常的核型、具有异常的染色体数目、或具有在外观上异常的一条或多条染色体。待治疗的癌症可以被分类为是非整倍体、三倍体、四倍体、或具有改变的倍性。待治疗的癌症可以被分类为具有染色体易位、或整个染色体的缺失或重复、或染色体的一部分的缺失、重复或扩增的区域。

口服、经鼻、透皮、肺部、吸入、颊面、舌下、腹膜内、皮下、肌内、静脉内、经直肠、胸膜内、鞘内以及肠胃外施用所述化合物或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，口服施用所述化合物。本领域技术人员将认识到某些施用途径的优势。

利用所述化合物的给药方案是根据多种因素来选择的，所述因素包括患者的类型、物种、年龄、体重、性别以及医疗状况；待治疗的病况的严重程度；施用途径；患者的肾功能和肝功能；以及所使用的具体化合物或其盐。普通的有技术的医生或兽医可以容易地确定和指定预防、对抗、或阻止所述病况进展所需的药物的有效量。

举例来说而非限制，本文所述的化合物可以用于靶向肿瘤微环境中的宿主免疫抑制细胞的癌症免疫治疗，所述细胞可以是髓系或淋巴谱系的。

肿瘤类型可以包括胰腺癌、肾透明细胞癌、头颈部鳞状细胞癌(SCCHN)、非小细胞肺癌(NSCLC)、结肠直肠癌(CRC)、肝细胞癌(HCC)、浆液性上皮性卵巢癌、宫颈癌、膀胱移行细胞癌、以及三阴性乳腺癌(TNBC)。

实施例

实施例I-LXV

总则：

使用Biotage Emrys Liberator或Initiator微波进行微波加热。使用BiotageSP4进行柱色谱法。使用Büchii旋转蒸发器或Genevac离心蒸发器进行溶剂去除。使用Waters自动纯化器和19×100mm XTerra 5微米MS C18柱在酸性流动相条件下进行制备型LC/MS。使用Varian 400MHz光谱仪记录NMR谱。

当使用术语“惰性的(inerted)”来描述反应器(例如反应容器、烧瓶、玻璃反应器等)时，它意指反应器中的空气已经被基本上无水分或干燥的惰性气体(如氮气、氩气等)替换。

用于制备本发明的化合物的一般方法和实验阐述于下文中。在某些情况下，通过举例描述具体的化合物。然而，应当了解的是，在每种情况下，根据下文所述的方案和实验制备一系列本发明的化合物。

一般实验方法：

在实验程序中使用以下缩写。

NMR：除非另有说明，否则使用CDCl₃来获取¹H NMR谱，并且使用Varian仪器在400MHz或500MHz进行记录。所示的多重性是s＝单峰；d＝双峰；t＝三重峰；q＝四重峰；quint＝五重峰；sxt＝六重峰；m＝多重峰；dd＝双二重峰；dt＝双三重峰；b＝宽信号。质谱：Waters Acquity Ultra Performance LC。

实施例I

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)

(E)-3-氰基-1,1,1-三氟-4-甲氧基-4-氧代丁-2-烯-2-醇三乙铵(203)：

在0℃向2-氰基乙酸甲酯(201)(35.5mL，404mmol)和2,2,2-三氟乙酸酐(202)(61.7mL，444mmol)于DCM(519mL)中的溶液中缓慢添加TEA(121mL，868mmol)以使得内部反应温度保持在低于18℃。去除冷却浴并且将红色透明溶液在室温搅拌过夜。TLC(70％E/H)在R_f＝0.1和0.2处显示出两个强UV活性斑点。如果将样品稀释并且在TLC上点样，那么仅存在R_f＝0.2处的一个斑点。LCMS仅在负离子模式下显示出所期望的[M-H]＝194。通过添加饱和NaHCO₃(400mL)淬灭反应并且将分离的水相用6×150mL DCM萃取直到TLC不再显示出产物为止。将合并的有机相干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩，得到红色透明粘性油状物作为所期望的产物(120g，100％产率)。该粗产物不经进一步纯化而用于下一步。¹HNMR(400MHz):δppm 3.65(s,3H),3.18(q,J＝7.4Hz,6H),1.29(t,J＝7.4Hz,9H)。LCMS(ES)(M-H)＝194.1。

5-氨基-1-(2-羟乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯(206):

在0℃向2-肼基乙醇(205)(46.2g，608mmol)于1,4-二

烷(200mL)中的溶液中逐滴添加甲磺酸(47.3mL，729mmol)(放热)，继而添加TFA(62.4mL，810mmol)。在去除冷却浴之后，将混合物搅拌10分钟，然后添加(E)-3-氰基-1,1,1-三氟-4-甲氧基-4-氧代丁-2-烯-2-醇三乙铵(203)(120g，405mmol)，同时用1,4-二

烷(280mL)冲洗。将所得混合物在室温搅拌10分钟，升温到80℃并且搅拌1小时。TLC(70％E/H)主要显示出R_f＝0.25处的痕量的SM以及R_f＝0.45和0.7处的新斑点(非常小)。LCMS显示出[M+H]＝254的所期望的峰。并且LCMS的负离子模式没有显示出起始材料。将混合物冷却到室温、浓缩、冷却到0℃、小心地用饱和NaHCO₃淬灭直到不再有气泡和pH约8为止。然后用5×150mL EtOAc萃取它直到通过TLC不再检测到产物为止。将合并的有机相干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩，得到黄色油状物。硅胶色谱纯化(20％至50％，然后50％等度(isocratic))得到呈淡黄色固体状的所期望的产物(12.2g，12％产率)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 4.08(t,J＝5.1Hz,2H),3.86(t,J＝5.1Hz,2H),3.79(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝254.0。

5-氨基-1-(2-((甲磺酰基)氧基)乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯(207)：

在0℃向5-氨基-1-(2-羟乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯(206)(14.8g，58.5mmol)和TEA(16.3mL，117mmol)于DCM(100mL)和THF(100mL)中的溶液中，在10分钟期间逐滴添加甲磺酰氯(5.02mL，64.5mmol)，并且搅拌15分钟。TLC(50％E/H)没有显示出起始材料与产物之间的Rf差异。LCMS显示反应完成，如通过[M+H]＝332以及没有[M+H]＝254的起始材料峰所示。将反应通过添加饱和NaHCO₃淬灭，用3×50mL EtOAc萃取、干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩，得到黄色油状物。硅胶色谱纯化(20％至50％，然后50％等度)得到所期望的产物(18.1g，93％产率)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 4.55(t,J＝5.3Hz,2H),4.32(t,J＝5.3Hz,2H),3.79(s,3H),2.98(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝332.0。

6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)：

将5-氨基-1-(2-((甲磺酰基)氧基)乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯(207)(2.10g，6.33mmol)和碳酸钾(2.63g，19.0mmol)于DMF(103mL)中的无水悬浮液搅拌并且升温到140℃，并且在140℃搅拌30分钟。LCMS显示反应完成，如由只有[M+H]＝236以及332(M+H)的痕量SM峰所示。TLC(70％E/H)显示出R_f＝0.4处的新斑点和R_f＝0.42处的痕量起始材料斑点(几乎重叠，但是共同斑点(co-spot)显示出差异)。将混合物冷却到0℃、通过添加150mL饱和NaHCO₃淬灭、用7×80mL EtOA:乙醚(2:1)萃取，然后用3×50mL 10％MeOH/EtOAc萃取直到TLC不显示产物为止。将合并的有机相干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩，得到粗油状物。硅胶色谱纯化(10％至30％E/H，然后30％等度)得到所期望的产物(1.31g，88％产率)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 4.20(bm,2H),4.07(ddd,J＝9.0,1.6,0.8Hz,2H),3.75(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝236.1。

2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(212)：

遵循用于制备6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)的相同的程序，从(E)-3-氰基-1,1,1-三氟-4-甲氧基-4-氧代丁-2-烯-2-醇三乙铵(203)和3-肼基丙-1-醇(209)制备化合物212。

5-氨基-1-(3-羟基丙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯(210)：¹HNMR(400MHz):δppm 5.78(bs,2H),4.14(dd,J＝6.4,6.0Hz,2H),3.85(s,3H),3.63(t,J＝5.6Hz,2H),2.04(m,2H)。

5-氨基-1-(3-((甲磺酰基)氧基)丙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯(211)：¹HNMR(400MHz):δppm 5.71(bs,2H),4.27(dd,J＝5.2,6.0Hz,2H),4.12(m,2H),3.83(s,3H),3.07(s,3H),2.30(m,2H)。

2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(212)：¹HNMR(400MHz):6.07(bs,1H),4.12(dd,J＝6.0,6.4Hz,2H),3.82(s,3H),3.45(m,2H),2.20(m,2H)。

6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(213)：

在室温向6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)(580mg，2.47mmol)和1-(氯甲基)-3-(三氟甲基)苯(214)(554mg，2.85mmol)于DMF(15mL)中的溶液中添加碳酸钾(1.02g，7.40mmol)，并且将所得悬浮液在室温搅拌过夜。然后将混合物放入预热的140℃的油浴中并且搅拌25分钟，然后反应完成，如由LCMS通过只有[M+H]＝394的所期望的峰所示。TLC(50％E/H)在R_f＝0.65处显示出一个新斑点。将混合物冷却到室温、用饱和NaHCO₃(50mL)稀释、用3×50mL萃取、干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩，得到油状物，在通过硅胶色谱法(10％至20％，然后20％等度)纯化之后，得到呈白色固体状的所期望的产物(821mg，85％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 7.60-7.45(m,4H),4.99(s,2H),4.20(dd,J＝9.0,8.2Hz,2H),3.81(dd,J＝9.7,7.4Hz,2H),3.81(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝393.9。

6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)：

在室温向6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(213)(821mg，2.09mmol)于甲醇(4mL)和THF(1mL)中的溶液中添加氢氧化锂(500mg，20.9mmol)于水(6mL)中的溶液，并且将混合物搅拌并且在45℃加热过夜，然后TLC(30％E/H)显示反应完成。将反应混合物冷却到0℃、通过添加1M HCl(20.9mL，20.9mmol)中和到pH约5、用3×30mL EtOAc萃取、干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩，得到作为粗制物的所期望的白色固体产物(781mg，99％产率)。该粗产物不经进一步纯化而直接用于下一步。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.70-7.50(m,4H),5.01(s,2H),4.18(dd,J＝9.0,8.2Hz,2H),3.85(dd,J＝8.2,7.1Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝380.2。

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(217)：

在室温向6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)(781mg，2.06mmol)、(S)-4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯(216)(443mg，2.47mmol)以及HATU(1.18g，3.09mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加TEA(4.31mL，30.9mmol)，并且将所得溶液搅拌过夜。LCMS显示反应完成，如由只有[M+H]＝541的所期望的峰所示。TLC(50％E/H)在R_f＝0.45处显示出新主斑点。将反应混合物浓缩并且将残余物直接通过硅胶色谱法(用DCM溶液对柱进行上样，并且庚烷夹在中间，10％至20％E/H，然后20％等度)纯化，得到呈白色固体状的所期望的产物(1.05g，94％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 7.98(d,J＝8.2Hz,2H),7.56-7.40(m,4H),7.39(d,J＝8.2Hz,2H),6.26(bs,1H),5.23(dq,J＝7.0,7.0Hz,1H),4.87(d,J＝14.8Hz,1H),4.80(d,J＝14.8Hz,1H),4.17(dd,J＝8.6,8.6Hz,2H),3.90(s,3H),3.76(dd,J＝8.6,8.2Hz,2H),1.53(J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541.2。

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)：

在室温向(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(217)(950mg，1.76mmol)于THF(10mL)、甲醇(10mL)以及水(10mL)中的溶液中添加氢氧化锂(808mg，33.7mmol)，并且将所得混合物在室温搅拌2.5小时。LCMS仅显示出[M+H]＝527的所期望的峰。TLC(50％E/H)显示在R_f＝0.50处没有SM并且只有R_f＝0.05处的一个新斑点。TLC(5％MeOH/EtOAc)显示只有R_f＝0.75处的一个斑点。将反应物通过添加1M HCl溶液(33.7mL，33.7mmol)中和，并且浓缩以去除有机溶剂。将残余物通过3×50mL EtOAc萃取直到通过TLC不再检测到产物为止。将合并的有机相干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩。将油状无色残余物通过硅胶色谱法(EtOAc，然后5％MeOH/EtOAc等度)纯化，得到呈无色玻璃状固体的所期望的产物(925mg，100％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 8.04(d,J＝8.2Hz,2H),7.58-7.40(m,4H),7.42(d,J＝8.2Hz,2H),6.30(bm,1H),5.24(dq,J＝7.0,7.0Hz,1H),4.88(d,J＝14.8Hz,1H),4.81(d,J＝14.8Hz,1H),4.18(dd,J＝8.6,8.2Hz,2H),3.77(dd,J＝9.0,8.2Hz,2H),1.54(J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝527.2。

实施例II

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(化合物2)和(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物3)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和1-(氯甲基)-3-(三氟甲基)苯(214)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，类似地从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和1-(氯甲基)-4-(三氟甲基)苯(218)制备化合物2和化合物3。

6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(219)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.62(J＝8.0Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),5.00(s,2H),4.19(t,J＝8.0Hz,2H),3.80(t,J＝8.0Hz,2H),3.80(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝394。

6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(220)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.66(J＝8.0Hz,2H),7.56(d,J＝8.0Hz,2H),5.03(s,2H),4.18(t,J＝8.0Hz,2H),3.86(t,J＝8.0Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝380。

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(化合物2)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.99(d,J＝8.0Hz,2H),7.56(d,J＝8.0Hz,2H),7.38(d,J＝8.0Hz,4H),6.26(bs,1H),5.22(m,1H),4.86(d,J＝15.0Hz,1H),4.81(d,J＝15.0Hz,1H),4.17(t,J＝8.0Hz,2H),3.90(s,3H),3.77(t,J＝8.0Hz,2H),1.53(d,J＝8.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541。

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物3)：¹HNMR(400MHz):δppm8.07(d,J＝8.0Hz,2H),7.58(d,J＝8.0Hz,2H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H),6.31(bs,1H),5.26(m,1H),4.88(dd,J＝15.0Hz,1H),4.84(dd,J＝15.0Hz,1H),4.19(t,J＝8.0Hz,2H),3.78(t,J＝8.0Hz,2H),1.56(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝527。

****************

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和1-(氯甲基)-3-(三氟甲基)苯(214)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，类似地从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和相应的经取代的苄基卤制备化合物4-20。

实施例III

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(2-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物4)

6-(三氟甲基)-1-(2-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(221)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.62(m,3H),7.41(m,1H),5.08(s,2H),4.18(t,J＝8.0Hz,2H),3.85(dd,J＝7.2,9.2Hz,2H),3.57(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝394.3。

6-(三氟甲基)-1-(2-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(222)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.65(d,J＝7.6Hz,2H),7.57(t,J＝7.6Hz,1H),7.40(t,J＝7.6Hz,1H),5.13(s,2H),4.16(t,J＝8.0Hz,2H),3.82(dd,J＝7.2,9.2Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝380.2。

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(2-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(223)：¹HNMR(400MHz):δppm7.90(d,J＝8.0Hz,2H),7.58(t,J＝7.2Hz,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(m,3H),6.17(bd,J＝4.8Hz,1H),5.16(m,1H),4.96(d,J＝16.0Hz,1H),4.89(d,J＝16.0Hz,1H),4.10(t,J＝8.4Hz,2H),3.83(s,3H),3.67(t,J＝8.4Hz,2H),1.45(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541.4。

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(2-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物4)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.69(d,J＝8.4Hz,2H),7.61(d,J＝8.0Hz,2H),7.53(t,J＝7.6Hz,1H),7.39(t,J＝7.6Hz,1H),7.24(t,J＝8.4Hz,2H),5.02(m,1H),4.54(d,J＝16.0Hz,1H),4.46(d,J＝16.0Hz,1H),4.15(m,2H),3.71(m,2H),1.35(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝527.3。

实施例IV

(S)-4-(1-(1-(3,5-双(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物5)

1-(3,5-双(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(224)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.77(s,3H),5.01(s,2H),4.19(t,J＝8.4Hz,2H),3.77(t,J＝8.0Hz,2H),3.74(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝462.2。

1-(3,5-双(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(225)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.95(s,2H),7.85(s,1H),5.02(s,2H),4.16(t,J＝8.4Hz,2H),3.84(dd,J＝6.8,8.8Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝448.2。

(S)-4-(1-(1-(3,5-双(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(226)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.93(d,J＝8.8Hz,2H),7.75(s,1H),7.73(s,2H),7.31(d,J＝8.0Hz,1H),6.25(bd,J＝4.0Hz,1H),5.14(m,1H),4.97(d,J＝14.8Hz,1H),4.80(d,J＝15.2Hz,1H),4.16(t,J＝8.8Hz,2H),3.84(s,3H),3.72(t,J＝8.8Hz,2H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝609.3。

(S)-4-(1-(1-(3,5-双(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物5)：

¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.84(s,2H),7.81(s,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,2H),7.29(d,J＝8.4Hz,2H),5.06(m,1H),4.44(d,J＝15.2Hz,1H),4.35(d,J＝15.2Hz,1H),4.16(m,2H),3.74(m,2H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝595.3。

实施例V

(S)-4-(1-(1-(3-氯-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物6)

1-(3-氯-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(227)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.50(bs,1H),7.49(bs,1H),7.42(bs,1H),4.92(s,2H),4.17(t,J＝8.4Hz,2H),3.76(t,J＝8.8Hz,2H),3.74(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝428.2。

1-(3-氯-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(228)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.64(bs,1H),7.58(bs,2H),4.94(s,2H),4.15(t,J＝8.0Hz,2H),3.82(t,J＝8.0Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝414.2。

(S)-4-(1-(1-(3-氯-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(229)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.47(bs,1H),7.45(bs,1H),7.38(bs,1H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),6.23(bd,J＝3.6Hz,1H),5.15(m,1H),4.84(d,J＝15.2Hz,1H),4.73(d,J＝14.8Hz,1H),4.17(t,J＝8.4Hz,2H),3.84(s,3H),3.72(t,J＝8.4Hz,2H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝577.2。

(S)-4-(1-(1-(3-氯-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物6)：

¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.76(d,J＝8.0Hz,2H),7.54(bs,1H),7.51(bs,1H),7.49(bs,1H),7.31(d,J＝8.0Hz,2H),5.07(m,1H),4.38(d,J＝15.2Hz,1H),4.26(d,J＝15.6Hz,1H),4.20(m,2H),3.73(m,2H),1.41(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝561.2。

实施例VI

(S)-4-(1-(1-(3,5-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物7)

1-(3,5-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(230)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.25(t,J＝2.0Hz,1H),7.17(d,J＝2.0Hz,2H),4.84(s,2H),4.16(t,J＝8.4Hz,2H),3.76(t,J＝8.4Hz,2H),3.75(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝394.1。

1-(3,5-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(231)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.31(m,3H),4.86(s,2H),4.14(t,J＝7.6Hz,2H),3.81(t,J＝8.0Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝380.1。

(S)-4-(1-(1-(3,5-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(232)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(t,J＝1.6Hz,1H),7.12(d,J＝1.6Hz,2H),6.21(bs,1H),5.16(m,1H),4.72(d,J＝14.8,Hz,1H),4.65(d,J＝14.8,Hz,1H),4.13(t,J＝8.4Hz,2H),3.84(s,3H),3.72(t,J＝8.4Hz,2H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541.2。

(S)-4-(1-(1-(3,5-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物7)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.32(d,J＝8.4Hz,2H),7.27(s,1H),7.17(bs,2H),5.06(m,1H),4.30(d,J＝15.2Hz,1H),4.16(m,3H),3.75(m,2H),1.41(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝527.2。

实施例VII

(S)-4-(1-(1-(4-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物8)

1-(4-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(233)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.19(d,J＝8.4Hz,2H),6.84(d,J＝8.8Hz,2H),4.77(d,J＝7.2Hz,2H),4.06(t,J＝8.4Hz,2H),3.75(t,J＝8.4Hz,2H),3.72(s,3H),3.71(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝356.2。

1-(4-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(234)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 7.15(t,J＝8.8Hz,2H),6.82(dd,J＝8.8,22.0,2H),4.72(s,2H),4.32(d,J＝5.2Hz,1H),4.06(t,J＝8.4Hz,2H),3.67(t,J＝8.8Hz,2H),3.65(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝342.3。

(S)-4-(1-(1-(4-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(235)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.93(d,J＝8.0Hz,2H),7.35(d,J＝8.4Hz,2H),7.08(d,J＝8.8Hz,2H),6.74(d,J＝8.8Hz,2H),6.18(bs,1H),5.20(m,1H),4.63(d,J＝14.4Hz,1H),4.56(d,J＝14.4Hz,1H),4.04(t,J＝8.4Hz,2H),3.84(s,3H),3.72(s,3H),3.68(t,J＝8.4Hz,2H),1.46(bs,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝503.4。

(S)-4-(1-(1-(4-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物8)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.81(d,J＝8.4Hz,2H),7.36(d,J＝8.4Hz,2H),7.04(d,J＝8.8Hz,2H),6.76(dd,J＝2.0,6.4Hz,2H),5.11(m,1H),4.27(d,J＝14.8Hz,1H),4.12(d,J＝14.8Hz,1H),4.06(m,2H),3.71(s,3H),3.66(m,2H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝489.3。

实施例VIII

(S)-4-(1-(1-(3-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物9)

1-(3-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(236)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.18(m,1H),6.83(m,3H),7.08(m,2H),4.80(s,2H),4.08(t,J＝8.0Hz,2H),3.78(t,J＝8.4Hz,2H),3.70(s,3H),3.69(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝356.2。

1-(3-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(237)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.18(m,1H),6.84(m,2H),6.77(m,1H),4.83(s,2H),4.08(t,J＝8.4Hz,2H),3.77(t,J＝8.0Hz,2H),3.70(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝342.3。

(S)-4-(1-(1-(3-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(238)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.92(d,J＝8.4Hz,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.14(m,1H),6.75(m,3H),6.18(bd,J＝5.2Hz,1H),5.19(m,1H),4.68(d,J＝15.2Hz,1H),4.63(d,J＝14.4Hz,1H),4.07(t,J＝8.4Hz,2H),3.84(s,3H),3.72(t,J＝8.8Hz,2H),3.69(s,3H),1.47(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝503.4。

(S)-4-(1-(1-(3-甲氧基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物9)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.78(d,J＝8.4Hz,2H),7.33(d,J＝8.0Hz,2H),7.15(m,2H),6.75(m,3H),5.08(m,1H),4.31(d,J＝14.8Hz,1H),4.18(d,J＝14.8Hz,1H),4.10(m,2H),3.72(m,2H),3.70(s,3H),1.42(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝489.3。

实施例IX

(S)-4-(1-(1-(4-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物10)

1-(4-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(239)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.30(d,J＝8.8Hz,2H),7.15(d,J＝7.6Hz,2H),4.88(s,2H),4.12(t,J＝8.4Hz,2H),3.75(s,3H),3.74(t,J＝8.0Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝410.3。

1-(4-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(240)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.41(dd,J＝2.0,6.8Hz,2H),7.21(d,J＝8.0,2H),4.91(s,2H),4.11(t,J＝8.4Hz,2H),3.67(dd,J＝6.8,7.2Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝395.3。

(S)-4-(1-(1-(4-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(241)：¹HNMR(400MHz):δppm7.89(d,J＝8.0Hz,2H),7.29(d,J＝8.4Hz,2H),7.18(d,J＝8.4Hz,2H),7.03(d,J＝7.6Hz,2H),6.16(bs,1H),5.13(m,1H),4.69(d,J＝14.8Hz,1H),4.63(d,J＝14.4Hz,1H),4.06(t,J＝8.0Hz,2H),3.80(s,3H),3.66(t,J＝8.4Hz,2H),1.43(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝556.4。

(S)-4-(1-(1-(4-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物10)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.80(d,J＝8.4Hz,2H),7.35(d,J＝8.0Hz,2H),7.25(d,J＝8.8Hz,2H),7.13(d,J＝8.0Hz,2H),5.08(m,1H),4.35(d,J＝14.8Hz,1H),4.23(d,J＝14.8Hz,1H),4.13(m,2H),3.71(m,2H),1.41(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝543.3。

实施例X

(S)-4-(1-(1-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物11)

1-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(242)：¹HNMR(400MHz,):δppm 7.33(t,J＝8.0Hz,1H),7.20(d,J＝8.4Hz,1H),7.13(bs,2H),4.89(s,2H),4.13(t,J＝8.8Hz,2H),3.76(t,J＝8.8Hz,2H),3.75(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝410.2。

1-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(243)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.40(t,J＝8.0Hz,1H),7.32(d,J＝7.6Hz,1H),7.25(s,1H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),4.92(s,2H),4.12(t,J＝8.0Hz,2H),3.81(t,J＝8.0Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝395.3。

(S)-4-(1-(1-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(244)：¹HNMR(400MHz):δppm7.93(m,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.26(m,1H),7.17(bd,J＝8.0Hz,1H),7.07(bd,J＝6.0Hz,2H),6.20(bs,1H),5.16(m,1H),4.76(d,J＝14.8,Hz,1H),4.70(d,J＝15.2,Hz,1H),4.11(t,J＝8.0Hz,2H),3.84(s,3H),3.71(t,J＝8.4Hz,2H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝556.3。

(S)-4-(1-(1-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物11)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),7.36(m,1H),7.15(m,3H),5.07(m,1H),4.36(d,J＝15.2Hz,1H),4.27(d,J＝15.2Hz,1H),4.12(m,2H),3.71(m,2H),1.41(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝543.3。

实施例XI

(S)-4-(1-(1-(3-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物12)

1-(3-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(245)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.25(m,4H),4.83(s,2H),4.12(t,J＝8.4Hz,2H),3.80(t,J＝8.4Hz,2H),3.69(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝360.2。

1-(3-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(246)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 7.30(m,3H),7.23(m,1H),4.81(s,2H),4.12(t,J＝8.0Hz,2H),3.74(t,J＝8.0Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝346.2。

(S)-4-(1-(1-(3-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(247)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.93(dd,J＝2.0,6.8Hz,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.18(m,3H),7.07(bd,J＝4.8Hz,1H),6.19(bs,1H),5.17(m,1H),4.68(s,2H),4.10(t,J＝8.0Hz,2H),3.84(s,3H),3.70(t,J＝8.0Hz,2H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝507.3。

(S)-4-(1-(1-(3-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物12)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.80(d,J＝8.4Hz,2H),7.34(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(m,3H),7.09(m,1H),5.08(m,1H),4.32(d,J＝14.8Hz,1H),4.21(d,J＝15.2Hz,1H),4.11(m,2H),3.71(m,2H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝493.3。

实施例XII

(S)-4-(1-(1-(3,4-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物13)

1-(3,4-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(248)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.38(m,2H),7.12(m,1H),4.84(s,2H),4.14(t,J＝8.0Hz,2H),3.74(t,J＝8.0Hz,2H),3.75(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝394.1。

1-(3,4-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(249)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.45(m,2H),7.21(ddd,J＝2.0,8.4,22.0Hz,1H),4.85(s,2H),4.11(t,J＝8.4Hz,2H),3.79(t,J＝8.4Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝380.1。

(S)-4-(1-(1-(3,4-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(250)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.85(d,J＝8.0Hz,2H),7.23(m,4H),6.97(dd,J＝2.0,8.4Hz,1H),6.12(bs,1H),5.08(m,1H),4.59(s,2H),4.03(t,J＝8.0Hz,2H),3.76(s,3H),3.62(t,J＝8.0Hz,2H),1.39(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541.2。

(S)-4-(1-(1-(3,4-二氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物13)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.34(m,4H),7.06(dd,J＝3.0,8.4Hz,1H),5.06(m,1H),4.28(d,J＝14.8Hz,1H),4.16(d,J＝15.2Hz,1H),4.12(m,2H),3.71(m,2H),1.41(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝527.2。

实施例XIII

(S)-4-(1-(1-(4-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物14)

1-(4-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(251)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.30(m,2H),7.01(m,2H),4.80(d,J＝17.2Hz,2H),4.10(t,J＝8.0Hz,2H),3.78(t,J＝8.0Hz,2H),3.70(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝344.2。

1-(4-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(252)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 7.29(dd,J＝5.6,8.8Hz,2H),7.13(t,J＝8.8Hz,2H),4.79(s,2H),4.10(t,J＝8.0Hz,2H),3.71(t,J＝8.4Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝330.2。

(S)-4-(1-(1-(4-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(253)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.94(d,J＝8.0Hz,2H),7.34(d,J＝8.4Hz,2H),7.18(dd,J＝5.6,8.8Hz,2H),6.93(t,J＝8.8Hz,2H),6.20(bd,J＝4.4Hz,1H),5.19(m,1H),4.68(d,J＝14.4Hz,1H),4.64(d,J＝14.4Hz,1H),4.08(t,J＝8.4Hz,2H),3.85(s,3H),3.68(t,J＝8.4Hz,2H),1.48(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝491.4。

(S)-4-(1-(1-(4-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物14)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.82(d,J＝7.6Hz,2H),7.37(d,J＝8.4Hz,2H),7.19(t,J＝6.0Hz,2H),6.97(t,J＝8.4Hz,2H),5.11(m,1H),4.31(d,J＝14.8Hz,1H),4.19(d,J＝14.4Hz,1H),4.11(m,2H),3.68(m,2H),1.44(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝477.3。

实施例XIV

(S)-4-(1-(1-(3-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物15)

1-(3-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(254)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.30(m,1H),7.10(bd,J＝7.2Hz,1H),7.04(bd,J＝10.0Hz,1H),6.96(ddd,J＝2.4,8.4,17.2Hz,1H),4.78(s,2H),4.17(t,J＝8.8Hz,2H),3.81(t,J＝9.6Hz,2H),3.68(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝344.2。

1-(3-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(255)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppmδppm 7.30(m,1H),7.11(bd,J＝8.0Hz,1H),7.06(bd,J＝9.6Hz,1H),6.96(ddd,J＝2.8,8.4,16.8Hz,1H),4.79(s,2H),4.11(t,J＝8.4Hz,2H),3.79(t,J＝8.4Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝326.2。

(S)-4-(1-(1-(3-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(256)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.92(dd,J＝2.0,6.8Hz,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.20(m,1H),6.93(m,3H),6.19(bd,J＝4.4Hz,1H),5.17(m,1H),4.70(s,2H),4.09(t,J＝8.0Hz,2H),3.83(s,3H),3.71(t,J＝8.0Hz,2H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝491.4。

(S)-4-(1-(1-(3-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物15)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.78(d,J＝8.0Hz,2H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),7.24(m,1H),6.95(m,3H),5.07(m,1H),4.33(d,J＝15.2Hz,1H),4.22(d,J＝15.2Hz,1H),4.12(m,2H),3.67(m,2H),1.41(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝477.3。

实施例XV

(S)-4-(1-(1-(2-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物16)

1-(2-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(257)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.36(m,1H),7.27(m,1H),7.08(m,2H),4.95(s,2H),4.11(t,J＝8.4Hz,2H),3.83(t,J＝8.4Hz,2H),3.69(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝344.2。

1-(2-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(258)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 7.31(m,2H),7.13(m,2H),4.90(s,2H),4.10(t,J＝8.0Hz,2H),3.73(t,J＝8.0Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝330.2。

(S)-4-(1-(1-(2-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(259)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.35(d,J＝8.0Hz,2H),7.21(m,2H),6.96(m,2H),6.19(bs,1H),5.21(m,1H),4.81(d,J＝15.2Hz,1H),4.74(d,J＝14.8Hz,1H),4.06(t,J＝8.0Hz,2H),3.84(s,3H),3.75(t,J＝8.0Hz,2H),1.48(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝491.4。

(S)-4-(1-(1-(2-氟苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物16)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.82(d,J＝8.4Hz,2H),7.36(d,J＝8.4Hz,2H),7.22(m,2H),7.02(m,2H),5.10(m,1H),4.43(d,J＝15.2Hz,1H),4.37(d,J＝15.2Hz,1H),4.11(m,2H),3.75(m,2H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝477.3。

实施例XVI

(S)-4-(1-(1-(4-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物17)

1-(4-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(260)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.15(d,J＝8.4Hz,2H),7.10(d,J＝8.0Hz,2H),4.79(d,J＝2.8Hz,2H),4.08(t,J＝8.4Hz,2H),3.77(t,J＝8.0Hz,2H),3.71(s,3H),2.26(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝340.2。

1-(4-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(261)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 7.12(d,J＝8.0Hz,2H),7.09(d,J＝8.4Hz,2H),4.75(s,2H),4.08(t,J＝8.8Hz,2H),3.69(t,J＝8.8Hz,2H),2.21(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝326.2。

(S)-4-(1-(1-(4-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(262)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.92(d,J＝8.0Hz,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.05(d,J＝9.6Hz,2H),7.02(d,J＝9.6Hz,2H),6.16(bd,J＝5.6Hz,1H),5.19(m,1H),4.65(d,J＝14.4Hz,1H),4.59(d,J＝14.4Hz,1H),4.04(t,J＝8.4Hz,2H),3.83(s,3H),3.68(t,J＝8.4Hz,2H),2.26(s,3H),1.47(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝487.4。

(S)-4-(1-(1-(4-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物17)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.78(d,J＝8.8Hz,2H),7.34(d,J＝8.0Hz,2H),7.05(d,J＝8.8Hz,2H),7.02(d,J＝8.4Hz,2H),5.09(m,1H),4.29(d,J＝14.4Hz,1H),4.13(d,J＝14.4Hz,1H),4.06(m,2H),3.67(m,2H),2.25(s,3H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝473.4。

实施例XVII

(S)-4-(1-(1-(3-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物18)

1-(3-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(263)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.15(m,2H),7.06(m,3H),4.78(d,J＝6.0Hz,2H),4.08(t,J＝8.0Hz,2H),3.77(t,J＝8.8Hz,2H),3.70(s,3H),2.26(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝340.2。

1-(3-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(264)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 7.10(m,5H),4.83(s,2H),4.49(s,1H),4.07(t,J＝8.4Hz,2H),3.75(t,J＝8.4Hz,2H),2.26(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝326.2。

(S)-4-(1-(1-(3-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(265)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.91(d,J＝8.4Hz,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.12(t,J＝7.6Hz,1H),7.00(m,2H),6.20(bd,J＝5.2Hz,1H),5.19(m,1H),4.63(s,2H),4.06(t,J＝8.0Hz,2H),3.83(s,3H),3.69(t,J＝8.4Hz,2H),2.24(s,3H),1.47(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝487.4。

(S)-4-(1-(1-(3-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物18)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.77(d,J＝8.0Hz,2H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),7.12(t,J＝8.0Hz,2H),6.97(t,J＝8.0Hz,2H),5.09(m,1H),4.28(d,J＝15.2Hz,1H),4.13(d,J＝14.4Hz,1H),4.09(m,2H),3.68(m,2H),2.24(s,3H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝473.4。

实施例XVIII

(S)-4-(1-(1-(2-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物19)

1-(2-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(266)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.20(d,J＝6.8Hz,1H),7.11(m,3H),4.88(s,2H),4.09(t,J＝8.4Hz,2H),3.69(t,J＝8.0Hz,2H),3.66(s,3H),2.31(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝340.2。

1-(2-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(267)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.17(d,J＝30.0Hz,1H),7.11(m,3H),4.93(s,2H),4.09(t,J＝8.0Hz,2H),3.67(t,J＝8.4Hz,2H),2.32(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝326.2。

(S)-4-(1-(1-(2-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(268)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.91(d,J＝8.0Hz,2H),7.29(d,J＝8.4Hz,2H),7.10(m,4H),6.13(bd,J＝5.6Hz,1H),5.16(m,1H),4.69(s,2H),4.07(t,J＝8.4Hz,2H),3.83(s,3H),3.61(t,J＝8.0Hz,2H),2.25(s,3H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝487.4。

(S)-4-(1-(1-(2-甲基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物19)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.78(d,J＝8.4Hz,2H),7.30(d,J＝8.0Hz,2H),7.21(d,J＝8.0Hz,1H),7.10(m,3H),5.06(m,1H),4.32(d,J＝14.8Hz,1H),4.27(d,J＝14.8Hz,1H),4.12(t,J＝8.4Hz,2H),3.66(m,2H),2.11(s,3H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝473.4。

实施例XIX

(S)-4-(1-(1-(4-乙基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物20)

1-(4-乙基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(269)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.17(d,J＝8.0Hz,2H),7.13(d,J＝8.0Hz,2H),4.79(d,J＝6.4Hz,2H),4.07(t,J＝8.4Hz,2H),3.76(t,J＝8.0Hz,2H),3.70(s,3H),2.56(q,J＝8.0Hz,2H),1.15(t,J＝8.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝354.3。

1-(4-乙基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(270)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 7.13(m,4H),4.76(s,2H),4.09(t,J＝8.4Hz,2H),3.70(t,J＝9.2Hz,2H),2.49(q,J＝7.6Hz,2H),1.09(t,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝340.3。

(S)-4-(1-(1-(4-乙基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(271)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.93(dd,J＝2.0,6.8Hz,2H),7.34(bt,J＝8.8Hz,4H),6.17(bd,J＝4.8Hz,1H),5.19(m,1H),4.66(d,J＝14.4Hz,1H),4.60(d,J＝14.4Hz,1H),4.05(t,J＝8.0Hz,2H),3.84(s,3H),3.70(t,J＝8.0Hz,2H),2.56(q,J＝7.6Hz,2H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H),1.15(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝501.4。

(S)-4-(1-(1-(4-乙基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物20)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.35(d,J＝8.0Hz,2H),7.07(d,J＝8.8Hz,2H),7.05(d,J＝8.8Hz,2H),5.10(m,1H),4.31(d,J＝14.4Hz,1H),4.11(d,J＝14.4Hz,1H),4.08(m,2H),3.68(m,2H),2.56(q,J＝7.6Hz,2H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H),1.15(t,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝487.3。

实施例XX

(S)-2-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物21)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的程序，从6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(220)和(S)-4-(1-氨基乙基)-2-氟苯甲酸甲酯盐酸盐(272)制备化合物21。

(S)-2-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(273)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.89(dd,J＝7.8,7.4Hz,1H),7.57(d,J＝7.8Hz,2H),7.39(d,J＝7.8Hz,2H),7.15(dd,J＝8.2,1.5Hz1H),7.09(dd,J＝11.8,1.5Hz,1H),6.25(bs,1H),5.17(dq,J＝7.0,7.0Hz,1H),4.84(s,2H),4.18(dd,J＝8.6,8.2Hz,2H),3.91(s,3H),3.77(dd,J＝9.0,8.2Hz,2H),1.52(J＝7.1Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝559.2。

(S)-2-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物21)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.89(dd,J＝7.8,7.4Hz,1H),7.56(d,J＝7.4Hz,2H),7.39(d,J＝7.4Hz,2H),7.14(dd,J＝8.9,1.5Hz,1H),7.08(dd,J＝11.5,1.5Hz,1H),6.27(bs,1H),5.15(dq,J＝7.0,7.0Hz,1H),4.88(d,J＝15.0,1H),4.78(d,J＝15.0Hz,1H),4.17(dd,J＝9.4,7.8Hz,2H),3.75(dd,J＝8.4,8.2Hz,2H),1.50(J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝543.3。

实施例XXI

(S)-3-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物22)

(S)-4-(1-氨基乙基)-3-氟苯甲酸甲酯盐酸盐(275)

将(S)-4-(1-氨基乙基)-3-氟苯甲酸盐酸盐(274)(500mg，2.28mmol)于甲醇(20mL，494mmol)和4M盐酸于1,4-二

烷(2.5mL，10.0mmol)中的溶液在回流下加热1.5小时。在1小时之后LCMS显示反应完成，如由[M-NH₃+H]＝181的强峰和[M+H]＝198的小峰所示。将混合物浓缩成粉红色胶状残余物。然后将它溶解在EtOAc中并且浓缩成玻璃状固体。将该操作重复两次，其产生呈粉红色固体的所期望的产物(538mg，100％产率)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.93(dd,,dd,J＝7.8,1.4Hz,1H),7.81(dd,J＝11.0,1.5Hz,1H),7.63(dd,J＝7.8,7.8Hz,1H),4.78(q,J＝7.0Hz,1H),3.93(s,3H),1.66(d,J＝6.6Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝198.0和(M-NH₃+H)＝181.0。

遵循如实施例1中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的程序，从6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(220)和(S)-4-(1-氨基乙基)-3-氟苯甲酸甲酯盐酸盐(275)制备化合物22。

(S)-3-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(276)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.62(dd,J＝8.2,1.3Hz,1H),7.59(d,J＝7.8Hz,2H),7.52(dd,J＝10.9,1.5Hz 1H),7.45-7.40(m,3H),5.33(q,J＝7.0Hz,1H),4.53(d,J＝14.8Hz,1H),4.36(d,J＝14.8Hz,1H),4.20(dd,J＝7.8,7.8Hz,2H),3.87(s,3H),3.79(m 2H),1.46(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝559.0。

(S)-3-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物22)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 8.36(bd,J＝7.9Hz,1H),7.65(dd,J＝7.8,1.5Hz,1H),7.60(d,J＝8.2Hz,2H),7.53(dd,J＝10.9,1.5Hz 1H),7.43(J＝8.2Hz,2H),7.42(dd,J＝7.8,7.8Hz 1H),5.34(dq,J＝7.4,7.1Hz,1H),4.53(d,J＝15.8Hz,1H),4.39(d,J＝15.8Hz,1H),4.19(m,2H),3.80(m,2H),1.46(J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝545.2。

实施例XXII

(S)-3-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物23)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的程序，从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)和(S)-4-(1-氨基乙基)-3-氟苯甲酸甲酯盐酸盐(275)制备化合物23。

(S)-3-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(277)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.64-7.56(m,3H),7.55-7.47(m,3H),7.43(dd,J＝7.9,7.4Hz 1H),5.34(q,J＝7.0Hz,1H),4.49(d,J＝14.8Hz,1H),4.36(d,J＝14.8Hz,1H),4.20(ddd,J＝8.6,8.2,,7.4Hz,2H),3.87(s,3H),3.77(ddd,J＝9.4,9.0,,8.2Hz,2H),1.47(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝558.9。

(S)-3-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物23)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 8.42(d,J＝7.9Hz,1H),7.66-7.56(m,3H),7.55-7.47(m,3H),7.42(dd,J＝7.8,7.8Hz,1H),5.35(dq,J＝7.5,7.0Hz,1H),4.50(d,J＝15.1Hz,1H),4.39(d,J＝15.1Hz,1H),4.20(ddd,J＝8.2,7.1,7.0Hz,2H),3.78(m,2H),1.47(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝543.3。

实施例XXIII

(S)-2-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(化合物24)和(S)-2-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物25)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的程序，从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)和(S)-4-(1-氨基乙基)-2-氟苯甲酸甲酯(278)制备化合物24和化合物25。

(S)-2-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(化合物24)：¹HNMR(400MHz,):δppm 7.89(t,J＝7.8Hz,1H),7.55(d,J＝9.8Hz,2H),7.49(d,J＝9.8Hz,1H),7.45(d,J＝7.4Hz,1H),7.16(dd,J＝6.64,1.6Hz,1H),7.09(dd,J＝10.2,1.6Hz,1H),6.26(bs,1H),5.21-5.14(m,1H),4.88(d,J＝14.9Hz,1H),4.80(d,J＝14.9Hz,1H),4.18(t,J＝8.6Hz,2H),3.91(s,3H),3.76(dd,J＝7.4,7.8Hz,2H),1.52(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝559。

(S)-2-氟-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物25)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.95(dd,J＝7.4,7.0Hz,1H),7.54(d,J＝9.0Hz,2H),7.49(d,J＝7.4Hz,1H),7.45(d,J＝7.4Hz,1H),7.18(d,J＝7.8Hz,1H),7.11(d,J＝11.3Hz,1H),6.28(bs,1H),5.22-5.15(m,1H),4.88(d,J＝14.9Hz,1H),4.80(d,J＝14.9Hz,1H),4.19(t,J＝9.0Hz,2H),3.77(t,J＝8.2Hz,2H),1.52(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝545。

实施例XXIV

(S)-2-(4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯基)乙酸(化合物26)

(S)-2-(4-(1-氨基乙基)苯基)乙酸甲酯(284)：

(S)-(1-(4-溴苯基)乙基)氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯(280)：在20℃向N-(9-芴基甲氧羰基氧基)-琥珀酰亚胺(1.69g，5.00mmol)和(S)-1-(4-溴苯基)乙胺(279)(1.00g，5.00mmol)于乙腈(52.2mL)中的溶液中添加水(18.0mL)和碳酸氢钠(1.01g，12.0mmol)。将混合物搅拌1小时。TLC(50％H/E)表明反应完成。将悬浮液反应混合物经由滤纸过滤。将滤饼用水洗涤并且在真空下干燥，得到所期望的产物(2.10g，99％产率)。¹HNMR(500MHz):δppm 7.77(d,J＝7.5Hz,2H),7.58(bs,2H),7.46(d,J＝7.5Hz,2H),7.41(t,J＝8.0Hz,2H),7.31(bs,2H),7.16(bs,2H),4.98(bs,1H),4.80(bs,1H),4.44(bs,2H),4.20(bs,1H),1.46(bs,3H)。

(S)-(1-(4-烯丙基苯基)乙基)氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯(281)：在20℃向Pd(PPh₃)₄(0.58g，0.50mmol)和(S)-(1-(4-溴苯基)乙基)氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯(280)(2.10g，4.97mmol)于甲苯(63.6mL)中的混合物中添加烯丙基三正丁基锡(3.08mL，9.95mmol)。在110℃将混合物搅拌16小时。TLC(50％H/E)和LCMS表明反应完成。将反应用饱和NaHCO₃和盐水淬灭并且用EtAOc萃取。将有机层干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩。将残余物用硅胶柱色谱法(E/H 0％至40％，然后40％等度)纯化，得到所期望的产物(1.10g，58％产率)。¹HNMR(500MHz):δppm 7.79(J＝7.5Hz,2H),7.61(bs,2H),7.42(t,J＝8.0Hz,2H),7.32(bs,2H),7.25(bs,2H),7.19(d,J＝7.5Hz,2H),6.03-5.95(m,1H),5.15-5.09(m,2H),5.06(bs,1H),4.88(bs,1H),4.44(d,J＝6.5,2H),4.23(t,J＝7.0,1H),3.41(d,J＝7.0,2H),1.51(bs,3H)。

(S)-(1-(4-(2-氧代乙基)苯基)乙基)氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯(282)：在-78℃向(S)-(1-(4-烯丙基苯基)乙基)氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯(281)(1.00g，2.61mmol)于DCM(101mL)中的溶液中，经由O₃鼓泡直到它变成蓝色为止。将混合物在-78℃搅拌10分钟，之后添加三苯基膦(1.37g，5.22mmol)。使反应升温到室温。TLC(33％E/H)和LCMS表明反应完成。将反应混合物浓缩并且将残余物用硅胶柱色谱法(E/H 0％至40％，然后40％等度)纯化，得到所期望的产物(950mg，95％产率)。¹HNMR(500MHz):δppm 9.76(t,J＝2.5,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,2H),7.59(bs,2H),7.41(t,J＝7.5,2H),7.31(bs,4H),7.20(d,J＝8.0Hz,2H),5.04(bs,1H),4.87(bs,1H),4.43(d,J＝6.5Hz,2H),4.21(bs,1H),3.69(d,J＝2.5,2H),1.49(bs,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝386。

(S)-2-(4-(1-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)乙基)苯基)乙酸(283)：在20℃向(S)-(1-(4-(2-氧代乙基)苯基)乙基)氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯(282)(1.10g，2.85mmol)于THF(19.6mL)和叔丁醇(98mL)中的溶液中添加高锰酸钾(0.451g，2.85mmol)于水(47.6mL)中的溶液。将混合物在20℃搅拌1小时。TLC(EtOAc)和LCMS表明反应完成。将反应物用饱和Na₂S₂O₃和盐水稀释并且用EtAOc萃取。将有机层经过(Na₂SO₄)干燥、过滤并且浓缩。将残余物用硅胶柱色谱法(E/H 0％至100％，然后MeOH/DCM＝1:9)纯化，得到所期望的产物(1.14g，100％产率)。LCMS(ES)(M+H)＝402。

(S)-2-(4-(1-氨基乙基)苯基)乙酸甲酯(284)：在20℃向(S)-2-(4-(1-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)乙基)苯基)乙酸(283)(1.00g，2.49mmol)于甲醇(40.3mL)和甲苯(37.1mL)中的溶液中添加2.0M三甲基甲硅烷基重氮甲烷的己烷溶液(3.74mL，7.47mmol)。在20℃将混合物搅拌5小时。TLC(50％E/H)和LCMS表明反应完成。将反应混合物浓缩并且将残余物用硅胶柱色谱法(E/H 10％至50％，然后50％等度，然后DCM/MeOH/Et₃N＝6:1:0.1)纯化，得到所期望的产物(420mg，87％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 7.29(d,J＝8.2Hz,2H),7.22(d,J＝8.2Hz,2H),4.08(q＝6.8Hz,1H),3.66(s,3H),3.59(s,2H),2.21(bs,2H),1.36(d,J＝6.6Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝194。

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的程序，从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)和(S)-2-(4-(1-氨基乙基)苯基)乙酸甲酯(284)制备化合物26。

(S)-2-(4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯基)乙酸甲酯(285)：¹HNMR(500MHz):δppm 7.57(s,1H),7.56(d,J＝6.9Hz,1H),7.52(d,J＝7.8Hz,1H),7.45(t,J＝7.3Hz,1H),7.30(d,J＝8.3Hz,2H),7.25(d,J＝8.3Hz,2H),6.26(bd,J＝4.9Hz,1H),5.24-5.18(m,1H),4.90(d,J＝14.7Hz,1H),4.82(d,J＝14.7Hz,1H),4.17(t,J＝8.8Hz,2H),3.76(dt,J＝7.8,2.5Hz,2H),3.69(s,3H),3.61(s,2H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝555。

(S)-2-(4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯基)乙酸(化合物26)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.54(s,1H),7.53(d,J＝6.3Hz,1H),7.48(d,J＝7.8Hz,1H),7.41(t,J＝8.2Hz,1H),7.28(d,J＝8.2Hz,2H),7.23(d,J＝8.2Hz,2H),6.26(bd,J＝5.5,1H),5.22-5.15(m,1H),4.86(d,J＝14.9Hz,1H),4.78(d,J＝14.9Hz,1H),4.15(t,J＝8.2Hz,2H),3.74(dt,J＝8.6,2.0Hz,2H),3.60(s,2H),1.51(d,J＝6.6Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541。

实施例XXV

(S)-2-(4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯基)乙酸(化合物27)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的程序，从6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(220)和(S)-2-(4-(1-氨基乙基)苯基)乙酸甲酯(284)制备化合物27。

(S)-2-(4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯基)乙酸甲酯(286)：¹HNMR(500MHz):δppm 7.58(d,J＝8.3Hz,2H),7.42(d,J＝8.3Hz,2H),7.30(d,J＝8.3Hz,2H),7.25(d,J＝8.3Hz,2H),6.25(bd,J＝5.4Hz,1H),5.24-5.18(m,1H),4.88(d,J＝15.2Hz,1H),4.85(d,J＝15.2Hz,1H),4.18(t,J＝8.3Hz,2H),3.78(td,J＝8.3,2.0Hz,2H),3.69(s,3H),3.61(s,2H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝555。

(S)-2-(4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯基)乙酸(化合物27)：¹HNMR(500MHz):δppm 7.57(d,J＝7.8Hz,2H),7.41(d,J＝7.8Hz,2H),7.30(d,J＝8.3Hz,2H),7.26(d,J＝8.3Hz,2H),6.25(bd,J＝5.4Hz,1H),5.24-5.18(m,1H),4.86(s,2H),4.18(t,J＝8.3Hz,2H),3.78(td,J＝8.8,2.5Hz,2H),3.63(s,2H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541。

实施例XXVI

4-(1-(6-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(化合物28)

5-氨基-1-(2-羟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(289)：

将(E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(500mg，2.73mmol)和2-羟乙基肼(288)(0.24mL，3.51mmol)于乙醇(4mL)中的溶液在微波下在120℃加热20分钟。将混合物冷却到室温、倒入水中并且用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤、干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩，得到呈白色固体的所期望的产物(483mg，83％产率)。该固体不经进一步纯化而用于下一步反应。¹HNMR(400MHz):δppm 5.33(bs,2H),4.26(q,J＝6.8Hz,2H),3.97(s,4H),2.31(s,3H),1.33(t,J＝6.8Hz,3H)。

5-氨基-3-甲基-1-(2-((甲磺酰基)氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(290)：

在0℃向5-氨基-1-(2-羟乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(289)(483mg，2.27mmol)和TEA(0.51mL，3.66mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加甲磺酰氯(0.21mL，2.71mmol)并且搅拌1小时。将反应混合物倒入冰水中。将分离的有机层用1N HCl和盐水洗涤、干燥(MgSO₄)、过滤并且浓缩，得到呈浅黄色固体的所期望的化合物(358mg，54％产率)。该固体不经进一步纯化而用于下一步反应。¹HNMR(400MHz):δppm 5.30(bs,2H),4.57(t,J＝4.8Hz,2H),4.26(q,J＝7.2Hz,2H),4.18(t,J＝4.8Hz,2H),2.95(s,3H),2.32(s,3H),1.33(t,J＝7.0Hz,3H)。

5-甲酰胺基-3-甲基-1-(2-((甲磺酰基)氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(291)：

将乙酸酐(0.21mL，2.18mmol)和蚁酸(0.10mL，2.65mmol)的混合物在室温搅拌30分钟，然后冷却到0℃。然后将该冷混合物添加到5-氨基-3-甲基-1-(2-((甲磺酰基)氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(290)(302mg，1.04mmol)中，并且将所得混合物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌过周末。然后将混合物浓缩并且将所得固体用MTBE洗涤，在真空下干燥，得到呈白色固体的所期望的化合物(227mg，69％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm8.66(bs,1H),8.34(s,1H),4.62(t,J＝5.6Hz,2H),4.42(t,J＝5.6Hz,2H),4.29(q,J＝7.0Hz,2H),2.95(s,3H),2.38(s,3H),1.35(t,J＝7.0Hz,3H)。

1-甲酰基-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(292)：

在0℃向5-甲酰胺基-3-甲基-1-(2-((甲磺酰基)氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(291)(227mg，0.71mmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加NaH(28.4mg，0.71mmol，60％于矿物油中)并且将所得混合物搅拌3小时。将反应通过添加饱和NH₄Cl淬灭，升温到室温并且用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤、干燥(MgSO₄)、过滤并且浓缩。将残余物用硅胶色谱法(E/H 10％至80％)纯化，得到所期望的化合物(103mg，65％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 9.75(s,1H),4.48(dd,J＝8.8,7.6Hz,2H),4.32-4.25(m,4H),2.42(s,3H),1.35(t,J＝7.2Hz,3H)。

6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(293)：

在0℃向1-甲酰基-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(292)(103mg，0.46mmol)于甲醇(2mL)和THF(2mL)中的溶液中添加12M HCl的水溶液(0.082mL)，并且将所得混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物倒入10mL冰/水中并且用饱和NaHCO₃中和。将混合物浓缩到约5mL并且用EtOAc萃取两次。将合并的有机相用盐水洗涤、干燥(MgSO₄)、过滤并且浓缩，得到呈白色固体的所期望的化合物(81mg，90％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 4.52(bs,1H),4.22(q,J＝7.2,Hz,2H),4.13(m,2H),4.04(m,2H),2.38(s,3H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。

6-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(295)：

遵循用于制备6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(220)的相似的程序，从6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(293)制备化合物295。

6-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(294)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.57(d,J＝8.0,Hz,2H),7.42(d,J＝8.0,Hz,2H),4.95(s,2H),4.22(q,J＝7.2,Hz,2H),4.04(dd,J＝8.8,8.0,Hz,2H),3.67(dd,J＝8.8,8.0,Hz,2H),2.39(s,3H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。

6-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(295)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.57(d,J＝8.0,Hz,2H),7.45(d,J＝8.0,Hz,2H),4.96(s,2H),4.05(dd,J＝8.8,8.0,Hz,2H),3.70(dd,J＝8.4,8.4,Hz,2H),2.40(s,3H)。

4-(1-(6-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(化合物28)：

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，从6-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(295)和4-(1-氨基环丙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(296)制备化合物28。化合物28：¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.82(d,J＝8.4Hz,2H),7.58(d,J＝8.4Hz,2H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),7.23(d,J＝8.4Hz,2H),4.69(s,2H),4.01(dd,J＝8.4,8.0Hz,2H),3.73(dd,J＝8.8,7.2Hz,2H),2.33(s,3H),1.33(m,4H)。

实施例XXVII

4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(化合物29)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，从6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(220)和4-(1-氨基环丙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(296)制备化合物29。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.75(d,J＝8.4Hz,2H),7.62(d,J＝8.0Hz,2H),7.47(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(d,J＝8.4Hz,2H),4.53(s,2H),4.20(dd,J＝8.8,8.4Hz,2H),3.82(dd,J＝8.8,7.6Hz,2H),1.30(ddd,J＝8.4,6.0,4.4Hz,2H),1.19(ddd,J＝8.4,6.4,4.4Hz,2H)。

实施例XXVIII

4-(1-(1-(4-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(化合物30)

1-(4-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(301)：

遵循用于制备6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)的相似的程序，从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和1-氯-4-(氯甲基)苯(299)制备化合物301。

1-(4-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(300)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.32(d,J＝8.4Hz,2H),7.25(d,J＝8.4Hz,2H),4.88(s,2H),4.15(dd,J＝8.8,8.0Hz,2H),3.80(s,3H),3.77(dd,J＝8.8,8.4Hz,2H)。

1-(4-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(301)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.35(d,J＝8.4Hz,4H),4.92(s,2H),4.15(dd,J＝8.8,8.0Hz,2H),3.82(dd,J＝8.8,8.4Hz,2H)。

4-(1-(1-(4-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(化合物30)：

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，从1-(4-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(301)和4-(1-氨基环丙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(296)制备化合物30。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.81(d,J＝8.0Hz,2H),7.56(d,J＝8.0Hz,2H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.36(d,J＝8.0Hz,2H),4.90(s,2H),4.15(dd,J＝8.8,8.0Hz,2H),3.82(dd,J＝8.8,8.4Hz,2H),1.30(ddd,J＝8.4,6.0,4.4Hz,2H),1.19(ddd,J＝8.4,6.4,4.4Hz,2H)。

实施例XXIX

(S)-4-(1-(1-(4-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物31)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，从1-(4-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(301)和(S)-4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(216)制备化合物31。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.83(d,J＝8.0Hz,2H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.26(d,J＝8.4Hz,2H),7.17(d,J＝8.4Hz,2H),5.10(dq,J＝7.6,7.2Hz,1H),4.33(d,J＝15.0Hz,1H),4.21(d,J＝15.0Hz,1H),4.14(ddd,J＝8.8,8.0,4.8Hz,2H),3.72(ddd,J＝8.8,8.4,2.4Hz,2H),1.44(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例XXX

(S)-4-(1-(1-(4-氯苯甲基)-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物32)

1-(4-氯苯甲基)-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(305)：

遵循用于制备6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)的相似的程序，从6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(293)和1-氯-4-(氯甲基)苯(299)制备化合物305。

1-(4-氯苯甲基)-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(304)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.29(d,J＝8.0Hz,2H),7.25(d,J＝8.0Hz,2H),4.86(s,2H),4.23(q,J＝7.2Hz,2H),4.01(dd,J＝8.8,7.6Hz,2H),3.65(ddd,J＝8.8,7.6,1.6Hz,2H),2.38(s,3H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H)。

1-(4-氯苯甲基)-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(305)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.29(d,J＝8.0Hz,2H),7.23(d,J＝8.0Hz,2H),4.86(s,2H),4.02(dd,J＝8.8,8.0Hz,2H),3.67(dd,J＝8.8,7.6Hz,2H),2.39(s,3H)。

(S)-4-(1-(1-(4-氯苯甲基)-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物32)：

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，从1-(4-氯苯甲基)-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(305)和(S)-4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(216)制备化合物32。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.89(d,J＝8.8Hz,2H),7.41(d,J＝8.8Hz,2H),7.23(d,J＝8.4Hz,2H),7.18(d,J＝8.4Hz,2H),5.13(q,J＝7.4Hz,1H),4.53(d,J＝14.8Hz,1H),4.38(d,J＝14.8Hz,1H),3.96(ddd,J＝8.0,7.2,1.8Hz,2H),3.66(dd,J＝9.2,8.0Hz,2H),2.30(s,3H),1.49(d,J＝7.0Hz,3H)。

实施例XXXI

4-((1-(4-氯苯甲基)-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)甲基)苯甲酸(化合物33)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，从1-(4-氯苯甲基)-6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(305)和4-(氨基甲基)苯甲酸甲酯盐酸盐(307)制备化合物33。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.98(bt,J＝6.4Hz,1H),7.89(d,J＝8.0Hz,2H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.25(d,J＝8.4Hz,4H),4.56(s,2H),4.52(d,J＝6.4Hz,2H),3.97(dd,J＝8.8,7.6Hz,2H),3.67(ddd,J＝8.4,8.0,2.0Hz,2H),2.31(s,3H)。

实施例XXXII

(R)-4-(1-(6-甲基-1-(1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(化合物34)

甲磺酸(S)-1-(4-(三氟甲基)苯基)乙酯(309)：

在0℃向(S)-1-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-醇(308)(100mg，0.53mmol)和TEA(0.15mL，xx mmol)于DCM(2mL)中的溶液中逐滴添加甲磺酰氯(0.53mL，xx mmol)并且将所得混合物搅拌3小时。将反应通过添加水淬灭并且用DCM萃取。将有机层依次用1N HCl、10％NaHCO₃以及盐水洗涤、干燥(MgSO₄)、过滤并且浓缩，得到呈浅棕色油状的所期望的产物(125mg)。该粗材料不经进一步纯化而用于下一步反应。

(R)-6-甲基-1-(1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(312)：

(R)-6-甲基-1-(1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(311)：在室温向6-甲基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(293)(77mg，0.39mmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加NaH(20.4mg，0.51mmol，60％于矿物油中)并且搅拌30分钟。然后将反应混合物冷却到0℃并且逐滴引入甲磺酸(S)-1-(4-(三氟甲基)苯基)乙酯(309)(125mg)于1mL DMF中的溶液。去除冷却浴并且将反应混合物在室温搅拌2小时。将反应通过添加饱和NH₄Cl淬灭并且用EtOAc萃取。将有机层用盐水(×2)洗涤、干燥(MgSO₄)、过滤并且浓缩。将油状残余物通过硅胶柱(20％至80％E/H)纯化，得到呈白色固体的所期望的化合物(110mg，76％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 7.59(d,J＝8.4Hz,2H),7.47(d,J＝8.4Hz,2H),6.35(q,J＝6.8Hz,1H),4.26(q,J＝7.2Hz,2H),4.00(ddd,J＝7.6,7.2,2.4Hz,1H),3.93(ddd,J＝7.2,6.8,2.0Hz,1H),3.79(ddd,J＝9.2,7.2,2.4Hz,1H),3.37(ddd,J＝9.2,7.6,2.0Hz,1H),2.39(s,3H),1.58(d,J＝6.8Hz,3H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)。

(R)-6-甲基-1-(1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(312)：遵循用于从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)制备6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)的相似的程序，但是使用微波在140℃反应1.5小时，来制备化合物312。所期望的化合物是作为粗物质的浅粉红色固体(45mg，44％产率)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.62(d,J＝8.4Hz,2H),7.57(d,J＝8.4Hz,2H),6.35(q,J＝7.2Hz,1H),3.94-3.82(m,3H),3.40(ddd,J＝7.6,7.2,2.4Hz,1H),2.30(s,3H),1.57(d,J＝7.6Hz,3H)。

(R)-4-(1-(6-甲基-1-(1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(化合物34)：

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，从(R)-6-甲基-1-(1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(312)和4-(1-氨基环丙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(296)制备化合物34。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.86(d,J＝8.4Hz,2H),7.57(d,J＝8.4Hz,2H),7.47(d,J＝8.4Hz,2H),7.28(d,J＝8.4Hz,2H),5.63(q,J＝7.6Hz,1H),3.95-3.84(m,3H),3.49(ddd,J＝9.6,7.2,6.8Hz,1H),2.31(s,3H),1.54(d,J＝7.6Hz,3H),1.40-1.28(m,4H)。

实施例XXXIII

4-((S)-1-(6-甲基-1-((R)-1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物35)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，从(R)-6-甲基-1-(1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(312)和(S)-4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(216)制备化合物35。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.90(d,J＝8.0Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,4H),7.31(d,J＝8.0Hz,2H),5.41(q,J＝7.2Hz,1H),5.15(ddd,J＝8.0,8.0,7.2Hz,1H),3.94-3.82(m,3H),3.50(ddd,J＝8.8,8.0,8.0Hz,1H),2.30(s,3H),1.52(d,J＝7.2Hz,3H),1.49(d,J＝7.2Hz,3H)。

实施例XXXIV

(S)-N-(1-(4-(2H-四唑-5-基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物36)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的程序，从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)和(S)-1-(4-(2H-四唑-5-基)苯基)乙-1-胺(315)制备化合物36。¹HNMR(500MHz,CD₃OD):δppm 7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.60(bs,1H),7.52(d,J＝7.83Hz,2H),7.51(d,J＝7.83Hz,2H),7.45(t,J＝7.83Hz,1H),5.17(q,J＝7.0Hz,1H),4.46(d,J＝15.2Hz,1H),4.39(d,J＝15.2Hz,1H),4.24-4.16(m,2H),3.81-3.73(m,2H),1.51(d,J＝7.3Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝551。

实施例XXXV

(S)-N-(1-(4-(2H-四唑-5-基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物37)

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的程序，从6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(220)和(S)-1-(4-(2H-四唑-5-基)苯基)乙-1-胺(315)制备化合物37。¹HNMR(500MHz,CD₃OD):δppm 7.93(d,J＝8.3Hz,2H),7.53(d,J＝8.3Hz,2H),7.50(d,J＝8.3Hz,2H),7.40(d,J＝8.3Hz,2H),5.20-5.15(m,1H),4.62(d,J＝14.7Hz,1H),4.57(d,J＝14.7Hz,1H),4.22-4.14(m,2H),3.81(t,J＝8.3Hz,2H),1.52(d,J＝7.3Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝551。

实施例XXXVI

(S)-5-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并

[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)吡啶甲酸(化合物38)

(S)-5-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)吡啶甲酸甲酯(317)：在室温向6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)(30mg，0.079mmol)和(S)-5-(1-氨基乙基)吡啶甲酸甲酯盐酸盐(316)于DMF(1.07mL)中的溶液中添加DIPEA(69.1μL，0.40mmol)和HATU(40.6mg，0.107mmol)。将反应物搅拌过夜。将反应混合物浓缩以去除DMF并且将残余物用PTLC(E/H 65％)纯化，得到所期望的化合物(26.9mg，63％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 8.73(s,1H),8.08(d,J＝8.0Hz,1H),7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.56-7.50(m,2H),7.50-7.36(m,2H),6.29(bs,1H),5.25(dq,J＝7.2,6.4,6.4Hz,1H),4.87(d,J＝15.0Hz,1H),4.75(d,J＝15.0Hz,1H),4.17(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),3.98(s,3H),3.76(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),1.56(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝542.3。

(S)-5-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)吡啶甲酸(化合物38)：在室温向在甲醇(822μL)中的(S)-5-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)吡啶甲酸甲酯(317)(22mg，0.041mmol)中添加1M LiOH(406μL，0.406mmol)。将反应混合物搅拌4小时。将反应用1M HCl中和并且用EtOAc(3×15mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩。将残余物用PTLC(8％MeOH/EtOAc)纯化，得到所期望的化合物(18.2mg，85％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 8.08(d,J＝8.0Hz,1H),7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.56＝7.50(m,3H),7.50-7.36(m,2H),6.29(bs,1H),5.25(dq,J＝7.2,6.4Hz,1H),5.00(d,J＝15.0Hz,1H),4.42(d,J＝15.0Hz,1H),4.07(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),3.63(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),1.25(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝528.1。

实施例XXXVII

(S)-6-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)烟酸(化合物39)

遵循如实施例XXXVI中所述的用于制备(S)-5-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)吡啶甲酸(化合物38)的程序，从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)和(S)-6-(1-氨基乙基)烟酸甲酯盐酸盐(318)制备化合物39。

(S)-6-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)烟酸甲酯(319)：¹HNMR(400MHz):δppm9.13(s,1H),8.27(d,J＝8.0Hz,1H),7.60-7.30(m,5H),5.31(dq,J＝7.2,6.8Hz,1H),4.82(d,J＝14.8Hz,1H),4.76(d,J＝14.8Hz,1H),4.17(dd,J＝8.2,8.2Hz,2H),3.94(s,3H),3.76(dd,J＝8.4,8.2Hz,2H),1.55(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝542.2。

(S)-6-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)烟酸(化合物39)：¹HNMR(400MHz):δppm8.92(s,1H),8.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.60-7.30(m,5H),5.36(dq,J＝7.2,6.8Hz,1H),4.82(d,J＝14.8Hz,1H),4.50(d,J＝14.8Hz,1H),4.06(dd,J＝8.2,8.2Hz,2H),3.62(dd,J＝8.4,8.2Hz,2H),1.55(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝528.1。

实施例XXXVIII

(S)-N-(1-(4-(呋喃-3-基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物40)

(S)-N-(1-(4-溴苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(321)

遵循用于制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，从6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(220)和(S)-1-(4-溴苯基)乙-1-胺(320)制备化合物321。¹HNMR(400MHz):δppm 7.57(d,J＝7.8Hz,2H),7.43(d,J＝7.8Hz,2H),7.39(d,J＝7.8Hz,2H),7.19(d,J＝7.8Hz,2H),6.22(bs,1H),5.16-5.09(m,1H),4.84(s,2H),4.16(t,J＝8.6Hz,2H),3.76(t,J＝8.2Hz,2H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝561/563。

向容纳呋喃-3-基硼酸(1.3当量)的反应管中添加(S)-N-(1-(4-溴苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(321)(20mg，0.036mmol)于1,4-二

烷(0.5mL)中的溶液、Pd(PPh₃)₄(0.1当量)于1,4-二

烷(0.5mL)中的溶液以及Na₂CO₃(4当量)于水(0.5mL)中的溶液。将反应混合物通过用N₂鼓泡来脱气并且密封。将反应在80℃加热20小时。在冷却到室温之后，将反应混合物浓缩并且将残余物通过PTLC(50％AcOEt/庚烷)纯化，得到化合物40(17.2mg，88％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 7.70(s,1H),7.56(d,J＝8.4Hz,2H),7.47-7.20(m,3H),7.39(d,J＝8.0Hz,2H),7.33(d,J＝8.0Hz,2H),6.67(dd,J＝1.6和0.8Hz,1H),6.26(bd,J＝5.2Hz,1H),5.20(dt,J＝7.2和6.8Hz,1H),4.88(d,J＝14.8Hz,1H),4.82(d,J＝14.8Hz,1H),4.16(t,J＝8.6Hz,2H),3.77(t,J＝8.6Hz,2H),1.54(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝549.3。

实施例XXXIX

(S)-4-(1-(4-(4-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物41)

遵循先前在实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和1-(氯甲基)-3-(三氟甲基)苯(214)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，类似地从2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(212)和1-氯-4-(氯甲基)苯制备化合物41。

4-(4-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(323)作为粗物质用于下一步水解成4-(4-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(324)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.31(d,J＝8.6Hz,2H),7.26(d,J＝8.6Hz,2H),4.64(s,2H),4.01(dd,J＝6.0,5.6Hz,2H),3.10(dd,J＝5.2,5.6Hz,2H),2.00(m,2H)。

(S)-4-(1-(4-(4-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(325)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.84(d,J＝8.8Hz,2H),7.20(d,J＝8.0Hz,2H),7.17(d,J＝8.8Hz,2H),7.04(d,J＝8.8Hz,2H),5.99(bd,J＝8.0Hz,1H),5.10(m,1H),4.50(d,J＝16.0Hz,1H),4.34(d,J＝16.0Hz,1H),4.05(m,2H),3.84(s,3H),3.11(m,2H),2.05(m,2H),1.38(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝521.2。

(S)-4-(1-(4-(4-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物41)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.74(d,J＝8.4Hz,2H),7.24(d,J＝8.0Hz,2H),7.19(d,J＝8.4Hz,2H),7.07(d,J＝8.4Hz,2H),4.97(m,1H),4.25(d,J＝16.0Hz,1H),4.16(d,J＝16.4Hz,1H),4.02(m,2H),3.06(m,2H),2.04(m,2H),1.31(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝507.2。

***************

遵循上文在实施例XXXIX中所述的用于从2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(212)和1-氯-4-(氯甲基)苯制备(S)-4-(1-(4-(4-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物41)的相似的程序，类似地从2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(212)和相应的经取代的苯甲基氯或苯甲基溴制备化合物42和44-46。

实施例XL

(S)-4-(1-(4-(3-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物42)

4-(3-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(327)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.2-7.45(m,4H,m),4.70(s,2H),4.14(dd,J＝6.0,6.0Hz,2H),3.18(dd,J＝5.2,5.6Hz,2H),2.09(m,2H)。

(S)-4-(1-(4-(3-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(328)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.84(d,J＝8.8Hz,2H),7.20(d,J＝8.0Hz,2H),7.14(m,3H),6.99(d,J＝7.2Hz,2H),5.99(bd,J＝3.6Hz,1H),5.09(m,1H),4.52(d,J＝16.0Hz,1H),4.39(d,J＝16.0Hz,1H),4.05(m,2H),3.84(s,3H),3.13(m,2H),2.06(m,2H),1.37(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝521.3。

(S)-4-(1-(4-(3-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物42)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.73(d,J＝8.4Hz,2H),7.24(d,J＝8.8Hz,2H),7.18(m,2H),7.14(s,1H),7.03(m,1H),4.96(m,1H),4.25(d,J＝16.0Hz,1H),4.18(d,J＝16.0Hz,1H),4.02(t,J＝6.0Hz,2H),3.04(m,2H),2.03(m,2H),1.29(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝507.2。

实施例XLI

(S)-4-(1-(1-(2-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物43)

1-(2-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(329)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.39(dd,J＝7.6,16.0Hz,1H),7.25(m,3H),5.00(s,2H),4.15(t,J＝8.8Hz,2H),3.87(t,J＝8.0Hz,2H),3.61(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝360.2。

1-(2-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(330)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 7.39(d,J＝7.2Hz,1H),7.27(m,3H),4.96(s,2H),4.15(t,J＝8.0Hz,2H),3.78(t,J＝8.4Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝346.2。

(S)-4-(1-(1-(2-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(331)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.92(d,J＝8.8Hz,2H),7.31(m,3H),7.14(m,3H),6.17(bd,J＝5.2Hz,1H),5.19(m,1H),4.90(d,J＝14.8Hz,1H),4.84(d,J＝14.8Hz,1H),4.09(t,J＝8.0Hz,2H),3.84(s,3H),3.74(t,J＝8.4Hz,2H),1.46(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝507.3。

(S)-4-(1-(1-(2-氯苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物43)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.78(d,J＝8.4Hz,2H),7.33(m,2H),7.29(d,J＝8.8Hz,2H),7.22(m,2H),5.05(m,1H),4.47(d,J＝15.2Hz,1H),4.43(d,J＝15.2Hz,1H),4.15(t,J＝8.8Hz,2H),3.77(m,2H),1.38(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝493.3。

实施例XLII

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物44)

2-(三氟甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(335)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.63(s,1H),7.55(m,2H),7.46(m,1H),4.75(s,2H),4.15(dd,J＝6.0,6.0Hz,2H),3.17(dd,J＝5.6,5.2Hz,2H),2.11(2H,dd,J＝6.0,4.8Hz,2H)。

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(336)：¹HNMR(400MHz):δppm7.81(d,J＝8.4Hz,2H),7.45(m,1H),7.38(s,1H),7.34(m,2H),7.19(m,2H),6.00(bd,J＝7.6Hz,1H),5.07(m,1H),4.55(d,J＝16.0Hz,1H),4.48(d,J＝15.6Hz,1H),4.06(m,2H),3.82(s,3H),3.11(m,2H),2.06(m,2H),1.35(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝555.3。

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物44)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.69(d,J＝8.0Hz,2H),7.48(d,J＝6.8Hz,1H),7.44(s,1H),7.38(m,2H),7.23(d,J＝8.4Hz,2H),4.95(m,1H),4.31(d,J＝16.0Hz,1H),4.26(d,J＝15.6Hz,1H),4.02(m,2H),3.04(m,2H),2.05(m,2H),1.27(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541.2。

实施例XLIII

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物45)

2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(337)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.63(d,J＝8.0Hz,2H),7.51(d,J＝8.0Hz,2H),4.76(s,2H),4.15(t,J＝6.0Hz,2H),3.73(s,3H),3.16(dd,J＝5.6,5.2Hz,2H),2.12(m,2H)。

2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(338)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.60(d,J＝8.0Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),4.78(s,2H),4.15(dd,J＝6.4,5.6Hz,2H),3.18(dd,J＝5.4,6.0Hz,2H),2.11(dd,J＝6.0,6.0Hz,2H)。

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(339)：¹HNMR(400MHz):δppm7.82(d,J＝8.0Hz,2H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),7.23(d,J＝8.0Hz,2H),7.19(d,J＝8.0Hz,2H),5.99(bd,J＝7.2Hz,1H),5.07(m,1H),4.61(d,J＝16.0Hz,1H),4.44(d,J＝16.0Hz,1H),4.05(m,2H),3.83(s,3H),3.13(m,2H),2.08(m,2H),1.36(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝555.3。

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物45)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.71(d,J＝8.4Hz,2H),7.49(d,J＝8.0Hz,2H),7.27(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),4.93(m,1H),4.35(d,J＝16.4Hz,1H),4.27(d,J＝16.4Hz,1H),4.03(m,2H),3.06(m,2H),2.06(m,2H),1.26(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541.2。

实施例XLIV

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(2-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物46)

2-(三氟甲基)-4-(2-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(341)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.72(d,J＝8.0Hz,1H),7.66(d,J＝8.0Hz,1H),7.53(dd,J＝8.0,8.0Hz,1H),7.32(dd,J＝8.0,8.0Hz,1H),4.88(s,2H),4.18(dd,J＝5.6,6.0Hz,2H),3.18(dd,J＝5.2,5.6Hz,2H),2.16(m,2H)。

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(2-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(342)：¹HNMR(400MHz):δppm7.79(d,J＝8.0Hz,2H),7.56(d,J＝8.0Hz,1H),7.48(d,J＝7.6Hz,1H),7.42(t,J＝7.6Hz,1H),7.29(t,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝8.0Hz,2H),5.96(bd,J＝8.0Hz,1H),5.07(m,1H),4.68(d,J＝16.8Hz,1H),4.55(d,J＝16.8Hz,1H),4.06(m,2H),3.82(s,3H),3.05(m,2H),2.06(m,2H),1.32(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝555.3。

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(2-(三氟甲基)苯甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物46)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.66(d,J＝8.8Hz,2H),7.58(d,J＝8.0Hz,1H),7.48(m,2H),7.35(m,1H),7.13(d,J＝8.4Hz,2H),4.89(m,1H),4.54(d,J＝17.2Hz,1H),4.44(d,J＝17.2Hz,1H),4.05(m,2H),3.08(m,2H),2.09(m,2H),1.17(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541.2。

实施例XLV

以下实施例XLVI-L中所用的中间体6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(344)：

在氮气气氛下，在微波小瓶(50mL)中加入6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)(2.13mmol)、1-碘-4-(三氟甲基)苯(343)(1.4当量)以及28mL的无水甲苯。然后添加Pd₂(dba)₃(65mg)和DPPF(225mg)，继而添加叔丁醇钠(300mg，1.6当量)。将反应混合物加盖并且在120℃加热30分钟。将反应混合物冷却到室温并且过滤。将滤液浓缩并且通过柱色谱法纯化，得到化合物344(180mg，22％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm7.61(d,J＝9.0Hz,2H),7.14(d,J＝9.0Hz,2H),4.59(dd,J＝8.0,8.8Hz,2H),4.44(dd,J＝8.8,7.6Hz,2H),3.58(s,3H)。

遵循用于制备6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(344)的相同的程序，从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和相应的芳基碘(aryl iodide)制备以下化合物。

6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(346)：

¹HNMR(400MHz):δppm 7.48-7.32(m,4H),4.58-4.43(m,4H),3.52(s,3H)。

1-(3-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(348)：

¹HNMR(400MHz):δppm 7.28(dd,J＝8.0,7.6Hz,1H),7.19-7.17(m,1H),7.09(dd,J＝2.4,2.0Hz,1H),7.00-6.97(m,1H),4.53-4.48(m,2H),4.43-4.39(m,2H),3.54(s,3H)。

1-(4-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(350)：

¹HNMR(400MHz):δppm 7.33(d,J＝8.6Hz,2H),7.05(d,J＝8.6Hz,2H),4.48-4.40(m 4H),3.52(s,3H)。

遵循用于制备6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(344)的相同的程序，从2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(212)和1-碘-4-(三氟甲基)苯(343)制备以下化合物。

2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(351)：

¹HNMR(400MHz):δppm 7.58(d,J＝8.2Hz,2H),7.20(d,J＝8.2Hz,2H),4.31(dd,J＝6.4,6.0Hz,2H),3.87(dd,J＝5.6,5.2Hz,2H),3.36(s,3H),2.27(m,2H)。

遵循用于将6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(213)水解成6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)的相同的程序，制备以下化合物。

6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(352)：

¹HNMR(400MHz):δppm 7.58(d,J＝8.8Hz,2H),7.14(d,J＝8.8Hz,2H),4.60(m,2H),4.47(m,2H)。

6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(353)：

¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.62-7.48(m,4H),4.95(s,2H),4.12(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),3.79(dd,J＝9.2,8.0Hz,2H)。

1-(3-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(354)：

¹HNMR(400MHz):δppm 7.24(d,J＝8.0Hz,1H),7.16(d,J＝8.0Hz,1H),7.08(dd,J＝2.0,2.0Hz,1H),6.97(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),4.52(dd,J＝1.6,7.2Hz,2H),4.41(dd,J＝9.2,1.6Hz,2H)。

1-(4-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(355)：

¹HNMR(400MHz):δppm 7.29(d,J＝8.8Hz,2H),7.03(d,J＝8.8Hz,2H),4.41-4.5(m,4H)。

2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(356)：

¹HNMR(400MHz):δppm 7.56(d,J＝8.8Hz,2H),7.19(d,J＝8.8Hz,2H),4.31(dd,J＝6.4,6.0Hz,2H),3.87(dd,J＝6.0,5.6Hz,2H),2.26(m,2H)。

***********

遵循实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的程序，根据相应的反应方案中的每一种制备化合物47-51。

实施例XLVI

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物47)

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(357)：¹HNMR(400MHz):δppm7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.29(d,J＝8.8Hz,2H),7.25(d,J＝8.0Hz,2H),6.87(d,J＝8.4Hz,2H),6.01(bd,J＝7.2Hz,1H),5.09(m,1H),4.58(m,1H),4.38(m,3H),3.86(s,3H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝527.2。

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物47)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.83(d,J＝8.4Hz,2H),7.27(d,J＝8.4Hz,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),6.99(d,J＝8.8Hz,2H),5.96(m,1H),4.56(m,1H),4.46(m,1H),4.37(m,2H),1.20(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝513.2。

实施例XLVII

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物48)

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(358)：¹HNMR(400MHz):δppm7.83(d,J＝8.4Hz,2H),7.15(m,4H),7.07(bs,1H),6.98(d,J＝7.6Hz,1H),5.89(bd,J＝7.2Hz,1H),5.00(m,1H),4.41(m,2H),4.28(t,J＝8.0Hz,2H),3.78(s,3H),1.29(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝527.2。

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物48)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.27(m,2H),7.20(m,2H),7.13(d,J＝8.4Hz,2H),4.89(m,1H),4.52(m,2H),4.37(t,J＝8.4Hz,2H),1.10(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝513.2。

实施例XLVIII

(S)-4-(1-(1-(3-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物49)

(S)-4-(1-(1-(3-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(359)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.89(d,J＝8.0Hz,2H),7.19(d,J＝8.0Hz,2H),7.06(t,J＝8.0Hz,1H),6.98(d,J＝8.0Hz,1H),6.93(bd,J＝4.0Hz,1H),6.80(dd,J＝1.2,8.0Hz,1H),5.82(bd,J＝7.2Hz,1H),5.09(m,1H),4.43(m,2H),4.34(m,2H),3.85(s,3H),1.34(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝493.2。

(S)-4-(1-(1-(3-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物49)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.81(d,J＝7.6Hz,2H),7.16(d,J＝8.0Hz,2H),7.06(t,J＝8.0Hz,1H),7.04(bs,1H),6.91(d,J＝8.4Hz,2H),4.94(m,1H),4.47(t,J＝9.2Hz,2H),4.35(t,J＝8.8Hz,2H),1.17(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝479.2。

实施例XLIX

(S)-4-(1-(1-(4-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物50)

(S)-4-(1-(1-(4-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(360)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.90(d,J＝8.0Hz,2H),7.16(d,J＝8.0Hz,2H),7.06(d,J＝8.8Hz,2H),6.83(d,J＝8.8Hz,2H),5.77(bd,J＝7.2Hz,1H),5.06(m,1H),4.38(m,2H),4.34(m,2H),3.85(s,3H),1.31(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝493.2。

(S)-4-(1-(1-(4-氯苯基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物50)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.83(d,J＝8.4Hz,2H),7.16(d,J＝8.4Hz,2H),7.02(d,J＝8.4Hz,2H),6.92(d,J＝9.2Hz,2H),4.92(m,1H),4.42(m,2H),4.33(t,J＝8.4Hz,2H),1.17(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝479.2。

实施例L

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物51)

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(361)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.85(d,J＝8.0Hz,2H),7.39(d,J＝8.8Hz,2H),7.04(dd,J＝6.0,8.4Hz,4H),5.87(bd,J＝7.6Hz,1H),4.84(m,1H),4.21(t,J＝6.4Hz,2H),3.84(s,3H),3.76(m,2H),2.15(m,2H),1.14(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝541.3。

(S)-4-(1-(2-(三氟甲基)-4-(4-(三氟甲基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物51)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.83(d,J＝8.8Hz,2H),7.43(d,J＝8.4Hz,2H),7.21(d,J＝8.4Hz,2H),7.10(d,J＝8.0Hz,2H),4.58(m,1H),4.20(t,J＝6.4Hz,2H),3.81(m,2H),2.20(m,2H),1.01(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝527.2。

实施例LI

(S)-N-(1-(4-(氰基氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物52)

在室温向(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)(22.0mg，0.042mmol)和氰胺(3.5mg，0.084mmol)于DCM中的溶液中添加DMAP(10.2mg，0.084mmol)，继而添加EDC(16.0mg，0.084mmol)，将所得混合物在室温搅拌1小时。LCMS显示反应完成。将反应混合物浓缩并且将残余物通过HPLC(0.1％蚁酸，80％至100％CH₃CN-H₂O)纯化，得到无色玻璃状固体(15.8mg，69％产率)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.73(d,J＝8.0Hz,2H),7.57(bs,1H),7.52(m,1H),7.43(m,2H),7.30(d,J＝8.0Hz,2H),5.06(m,1H),4.36(d,J＝2.0Hz,2H),4.13(t,J＝8.0Hz,2H),3.70(t,J＝8.0Hz,2H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝551.2。

实施例LII

(S)-N-(1-(4-(((3,4-二氟苯基)磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物53)

在室温向(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)(22.4mg，0.043mmol)和3,4-二氟苯磺酰胺(16.4mg，0.085mmol)于DCM中的溶液中添加DMAP(10.4mg，0.085mmol)，继而添加EDC(16.3mg，0.085mmol)，将所得混合物在室温搅拌24小时。LCMS显示反应完成。将反应混合物浓缩并且将残余物通过硅胶制备型(prep)TLC(1％AcOH-EtOAc)纯化，得到无色玻璃状固体(24.4mg，82％产率)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.89(t,J＝8.4Hz,1H),7.79(bd,J＝8.8Hz,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.55(s,1H),7.37(d,J＝4.8Hz,1H),7.38(m,3H),7.28(d,J＝8.4Hz,2H),5.04(m,1H),4.37(d,J＝14.8Hz,1H),4.32(d,J＝14.8Hz,1H),4.12(t,J＝8.4Hz,2H),3.70(t,J＝8.4Hz,2H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝702.2。

实施例LIII

(S)-N-(1-(4-((苯磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-1-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物54)

类似于实施例LII中所述的(S)-N-(1-(4-(((3,4-二氟苯基)磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物53)的合成的程序。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.99(d,J＝7.6Hz,2H),7.65(d,J＝8.4Hz,2H),7.57(m,1H),7.49(m,2H),7.29(m,2H),7.25(d,J＝8.4Hz,1H),7.17(s,1H),7.09(dd,J＝7.6,16.4Hz,2H),5.04(m,1H),4.33(d,J＝15.2Hz,1H),4.27(d,J＝15.2Hz,1H),4.12(m,2H),3.70(m,2H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝682.6。

实施例LIV

(S)-N-(1-(4-((甲磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物55)

类似于实施例LII中所述的(S)-N-(1-(4-(((3,4-二氟苯基)磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物53)的合成的程序。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.71(d,J＝8.4Hz,2H),7.58(s,1H),7.54(m,1H),7.44(m,2H),7.35(d,J＝8.0Hz,2H),5.06(m,1H),4.39(d,J＝16.0Hz,1H),4.34(d,J＝16.0Hz,1H),4.13(t,J＝8.0Hz,2H),3.71(t,J＝8.0Hz,2H),3.22(s,3H),1.39(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝605.2。

实施例LV

(S)-N-(1-(4-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物56)

在室温向(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(22.6mg，0.043mmol)和环丙烷磺酰胺(365)(10.4mg，0.086mmol)于DCM中的溶液中添加DMAP(10.5mg，0.086mmol)，继而添加EDC(16.5mg，0.086mmol)。将所得混合物在室温搅拌17小时。将反应混合物直接上样到PTLC上，用1％AcOH-EtOAc展开，将主要条带用20％MeOH-DCM萃取并且浓缩，得到呈无色油状的化合物56(26.1mg，97％产率)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.70(d,J＝8.0Hz,2H),7.58(bs,1H),7.53(m,1H),7.45(m,2H),7.36(d,J＝8.0Hz,2H),5.06(m,1H),4.37(dd,J＝15.2,21.6Hz,2H),4.13(t,J＝8.4Hz,2H),3.70(t,J＝8.0Hz,2H),3.04(m,1H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H),1.20(m,2H),1.01(m,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝630.3。

实施例LVI

(S)-N-(1-(4-环丙基苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物57)

向容纳环丙基硼酸(1.3当量)的反应管中添加(S)-N-(1-(4-溴苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(321)(20mg，0.036mmol)于1,4-二

烷(0.5mL)中的溶液、Pd(PPh₃)₄(0.1当量)于1,4-二

烷(0.5mL)中的溶液以及Na₂CO₃(4当量)于水(0.5mL)中的溶液。将反应混合物通过用N₂鼓泡来脱气并且密封。将反应在80℃加热20小时。在冷却到室温之后，将反应混合物浓缩并且将残余物通过PTLC(50％AcOEt/庚烷)纯化，得到化合物57(9.0mg，48％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 7.55(d,J＝8.0Hz,2H),7.38(d,J＝8.0Hz,2H),7.21(d,J＝8.4Hz,2H),7.02(d,J＝8.0Hz,2H),6.22(bd,J＝5.6Hz,1H),5.16(dt,J＝7.2和6.8Hz,1H),4.88(d,J＝14.8Hz,1H),4.84(d,J＝14.8Hz,1H),4.16(t,J＝8.4Hz,2H),3.76(t,J＝8.2Hz,2H),1.86(m,1H),1.53(m,1H),1.51(d,J＝6.8Hz,3H),1.24(m,1H),0.94(m,1H),0.65(m,1H)。LCMS(ES)[M+H]＝523.3。

实施例LVII

(S)-N-(1-(3-甲基-4-(2H-四唑-5-基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物58)

在室温向在DMF(4.3mL，55.1mmol)中的6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(220)(120mg，0.32mmol)和(S)-4-(1-氨基乙基)-2-甲基苯甲腈(366)(60.8mg，0.38mmol)中添加许尼希碱(Hunig's base)(276μL，1.6mmol)和HATU(162mg，0.43mmol)。将反应混合物浓缩并且将残余物通过制备型PTLC(50％AcOEt/庚烷)纯化，得到(S)-N-(1-(4-氰基-3-甲基苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(367)(134mg，81％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 7.57(d,J＝7.2Hz,2H),7.54(d,J＝8.4Hz,1H),7.41(s 1H),7.40(d,J＝7.2Hz,2H),7.21(d,J＝8.4Hz,1H),6.26(bs,1H),5.13(dt,J＝7.2和6.8Hz,1H),4.87(d,J＝14.8Hz,1H),4.81(,J＝14.8Hz,1H),4.18(dd,J＝8.8和8.0Hz,2H),3.77(t,J＝8.4Hz,2H),2.51(s,3H),1.49(d,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(ES)[M+Na]＝522.3。

将(S)-N-(1-(4-氰基-3-甲基苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(367)(50mg，0.10mmol)、叠氮化钠(59.2mg，0.91mmol)以及氯化铵(48.7mg，0.91mmol)于DMF(0.9mL)中的溶液在120℃加热89小时。将反应混合物冷却到室温、过滤并且用DMSO(2×0.5mL)冲洗。将残余物用HPLC纯化，得到化合物58(30mg，55％产率)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.56(d,J＝7.8Hz,2H),7.49(d,J＝8.2Hz,1H),7.44(d,J＝7.8Hz,2H),7.37(s,1H),7.31(d,J＝8.2Hz,1H),5.11(dt,J＝7.2和6.8Hz,1H),4.48(d,J＝15.2Hz,1H),4.40(d,J＝15.2Hz,1H),4.19(t,J＝8.4Hz,2H),3.78(t,J＝8.4Hz,2H),2.38(s,3H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)[M+Na]＝565.3。

实施例LVII

(S)-4-(1-(6-乙基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物59)

将(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(368)(100mg，0.51mmol)、2-肼基乙醇(205)(46.3mg，0.61mmol)以及TEA(0.353mL，2.5mmol)于甲醇(3mL，74.2mmol)中的溶液在回流下加热4小时。将混合物浓缩并且进行色谱(EtOAc/庚烷，50％至85％)纯化，得到5-氨基-3-乙基-1-(2-羟乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(369)(62mg，54％产率)。¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm4.19(q,J＝7.2Hz,2H),3.90(t,J＝5.5Hz,2H),3.75(dd,J＝5.5和5.0Hz,2H),2.65(q,J＝7.6Hz,2H),1.27(t,J＝7.0Hz,3H),1.12(t,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝228.3。

5-氨基-3-乙基-1-(2-((甲磺酰基)氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(370)：¹HNMR(400MHz):δppm 5.26(bs,1H),4.52(t,J＝4.9Hz,2H),4.22(q,J＝7.2Hz,2H),4.14(t,J＝4.9Hz,2H),2.88(s,3H),2.69(q,J＝7.6Hz,2H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H),1.15(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝306.1。

6-乙基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(371)：¹HNMR(400MHz):δppm 4.24(q,J＝7.2Hz,2H),4.12(m,2H),4.06(dt,J＝7.0和2.3Hz,2H),2.83(q,J＝7.4Hz,2H),1.32(t,J＝7.0Hz,3H),1.26(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝210.1。

6-乙基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(372)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.53(s,1H),7.48(d,J＝7.8Hz,2H),7.40(t,J＝7.6Hz,1H),4.88(s,2H),4.16(q,J＝7.2Hz,2H),3.99(t,J＝8.6Hz,2H),3.61(t,J＝7.8Hz,2H),2.75(t,J＝7.1Hz,3H),1.18(t,J＝7.5Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝368.2。

6-乙基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(373)：所述材料作为粗物质用于下一步反应。LCMS(ES)[M+H]＝340.4。

(S)-4-(1-(6-乙基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(374)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.81(d,J＝8.2Hz,2H),7.56(s,1H),7.54-7.40(m,3H),7.38(d,J＝7.4Hz,2H),5.11(q,J＝7.0Hz,1H),4.52(d,J＝15.2Hz,1H),4.41(d,J＝15.2Hz,1H),3.98(m,2H),3.82(s,3H),3.64(m,2H),2.70(q,J＝7.6Hz,2H),1.44(d,J＝7.0Hz,3H),1.13(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝501.1。

(S)-4-(1-(6-乙基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物59)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.77(d,J＝8.2Hz,2H),7.53(s,1H),7.47(d,J＝7.1Hz,1H),7.40(m,2H),7.30(d,J＝8.6Hz,2H),5.07(q,m,1H),4.47(d,J＝15.2Hz,1H),4.40(d,J＝15.2Hz,1H),3.92(t,J＝7.5Hz,2H),3.59(t,J＝7.6Hz,2H),2.65(q,J＝7.6Hz,2H),1.39(d,J＝7.0Hz,3H),1.13(t,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝486.9。

实施例LIX

(S)-4-(1-(6-苯基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物60)

(E)-2-氰基-3-甲氧基-3-苯基丙烯酸乙酯(376)：

在室温向(E)-2-氰基-3-羟基-3-苯基丙烯酸乙酯(375)(950mg，4.27mmol)于甲苯(15mL)和甲醇(5mL)中的溶液中添加三甲基甲硅烷基重氮甲烷(383)(0.276mL，0.552mmol)(2M己烷溶液)。在1小时反应时间之后，TLC(70％E/H)和LCMS都显示反应完成。将混合物浓缩并且粗(E)-2-氰基-3-甲氧基-3-苯基丙烯酸乙酯(376)直接用于下一步。LCMS(ES)[M+H]＝232.1。

遵循用于从(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(368)和2-肼基乙醇(205)制备(S)-4-(1-(6-乙基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物59)的相同的程序(如实施例LIX中)，从(E)-2-氰基-3-甲氧基-3-苯基丙烯酸乙酯和2-肼基乙醇制备化合物60。

5-氨基-1-(2-羟乙基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(377)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.48(m,2H),7.30(m,3H),4.08(q,J＝7.0Hz,2H),4.02(t,J＝5.1Hz,2H),3.83(t,J＝5.5和5.0Hz,2H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝276.0。

5-氨基-1-(2-((甲磺酰基)氧基)乙基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(378)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.45(m,2H),7.28(m,3H),4.50(dd,J＝5.5和5.0Hz,2H),4.24(dd,J＝5.5和5.0Hz,2H),4.06(q,J＝7.2Hz,2H),2.90(s,3H),1.06(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝354.4。

6-苯基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(379)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.71(m,2H),7.30(m,3H),4.15(m,4H),4.01(dd,J＝8.1和7.8Hz,2H),1.20(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝258.1。

6-苯基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(380)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.56-7.30(m,5H),4.92(s,2H),4.10(dd,J＝8.4和7.1Hz,2H),4.02(q,J＝7.2Hz,2H),3.69(t,J＝8.2Hz,2H),0.96(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝416.0。

6-苯基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(381)：所述材料作为粗物质用于下一步反应。LCMS(ES)[M+H]＝388.1。

(S)-4-(1-(6-苯基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(382)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.79(d,J＝8.2Hz,2H),7.62(s,1H),7.58-7.43(m,5H),7.37-7.30(m,3H),7.18(d,J＝8.2Hz,2H),5.03(m,1H),4.66(d,J＝15.2Hz,1H),4.60(d,J＝15.2Hz,1H),4.08(dd,J＝8.2和7.3Hz,2H),3.83(s,3H),3.71(dd,J＝8.6和7.9Hz,2H),1.23(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝549.2。

(S)-4-(1-(6-苯基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物60)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.78(d,J＝8.2Hz,2H),7.61(s,1H),7.52(m,2H),7.47-7.38(m,3H),7.36-7.28(m,3H),7.13(d,J＝8.6Hz,2H),5.00(m,1H),4.66(d,J＝14.8Hz,1H),4.60(d,J＝14.8Hz,1H),4.09(dd,J＝8.6和7.8Hz,2H),3.70(dd,J＝8.6和7.9Hz,2H),1.20(d,J＝7.7Hz,3H)。LCMS(ES)[M+H]＝535.0。

实施例LX

(S)-4-(1-(4-(2-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物61)

遵循先前在实施例I中所述的用于从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和1-(氯甲基)-3-(三氟甲基)苯(214)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，类似地从2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(212)和1-氯-2-(氯甲基)苯制备化合物61。

4-(2-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(化合物383)：4-(2-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯作为粗物质用于下一步水解成4-(2-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(化合物384)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.45(dd,J＝7.6和1.2Hz,1H),7.31(dd,J＝7.2和1.4Hz,1H),7.23(dt,J＝7.2和1.6Hz,1H),7.18(dt,J＝7.6和1.6Hz,1H),4.79(s,2H),4.04(dd,J＝6.4和6.0Hz,2H),3.15(dd,J＝5.6和5.6Hz,2H),2.04(m,2H)。LCMS(ES)[M+H]＝360.07。

(S)-4-(1-(4-(2-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(化合物385)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.84(d,J＝8.8Hz,2H),7.18(m,4H),7.04(d,J＝8.8Hz,2H),5.99(bd,J＝8.0Hz,1H),5.10(m,1H),4.50(d,J＝16.0Hz,1H),4.34(d,J＝16.0Hz,1H),4.06(m,2H),3.84(s,3H),3.11(m,2H),2.05(m,2H),1.38(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝521.2。

(S)-4-(1-(4-(2-氯苯甲基)-2-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物61)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.73(d,J＝8.0Hz,2H),7.28(m,2H),7.20(m,4H),4.90(m,1H),4.40(s,2H),4.05(m,2H),3.12(m,2H),2.10(m,2H),1.20(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝507.2。

实施例LXI

(S)-4-(1-(1-(3-(甲硫基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物62)

将(S)-4-(1-(1-(3-溴-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(5mg，8.26μmol)与穴醚222(Cryptand 222)(9.33mg，0.025mmol)在DMSO(1ml)中混合。添加CsF(12.55mg，0.083mmol)。将所得悬浮液用微波照射加热到200℃，持续2小时。将所得粗材料通过制备型HPLC纯化，得到化合物62(3mg，63.4％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.03-8.01(m,3H),7.39-7.36(m,4H),6.3(br s,1H),5.20(t,J＝6.8Hz,1H),4.88(d,J＝15.6Hz,1H),4.75(d,J＝14.8Hz,1H),4.18(t,J＝8.8Hz,2H),3.76(t,J＝8.4Hz,2H),2.46(s,3H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝573。

实施例LXII

(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)

将6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)(0.79g，3.359mmol)溶解在THF(3.95ml)、MeOH(3.95ml)以及水(3.95ml)的混合物中。向该溶液中添加一水合氢氧化锂(0.705g，16.797mmol)并且将混合物加热到45℃，持续20小时直到反应完成为止。将混合物冷却到室温并且用1N HCl(16.80ml，16.797mmol)酸化到pH 4-5，然后用EtOAc(3×20ml)萃取。将有机层合并、经过MgSO₄干燥并且在真空中浓缩。将粗材料与(S)-4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯(216)(0.723g，4.032mmol)在CH₂Cl₂(14.86ml)中混合，并且将混合物用Et₃N(1.873ml，13.44mmol)和HATU(1.661g，4.368mmol)处理。将反应混合物在室温搅拌17小时直到反应完成为止。添加水(7.43ml)以淬灭反应。将有机层分离并且将水层用EtOAc(3×15ml)萃取。将有机层合并、经过Na₂SO₄干燥并且在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱法纯化，得到呈无色油状的(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)(1.4g，100％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δppm 7.98(t,J＝8.4Hz,2H),7.35(t,J＝8.4Hz,2H),6.21(br s,1H),5.16(t,J＝6.4Hz,1H),4.18(dd,J＝8.0,8.4Hz,2H),4.08(q,J＝7.2Hz,2H),4.01(dd,J＝8.0,8.4Hz,2H),1.51(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝383。

(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(390)：将(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)(238mg，0.52mmol)和4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基溴(389)(172mg，0.63mmol)于DMF(2ml)中的混合物用碳酸铯(511mg，1.57mmol)处理并且在100℃搅拌30分钟。在冷却到室温之后，将混合物用水(4ml)稀释并且用乙酸乙酯(4ml)萃取两次。将有机层合并、用盐水(2ml)洗涤并且在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱法(正庚烷中的乙酸乙酯＝10％至40％)纯化，得到(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(390)(182mg，61％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.01(d,2H),7.61(s,1H),7.38-7.45(m,4H),6.28(m,1H),5.21(m,1H),4.82(d,1H),4.78(d,2H),4.19(m,2H),3.91(s,3H),3.76(m,2H),1.56(d,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝575。

(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物63)：将(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(390)(0.16g，0.28mmol)于THF(1.3ml)、MeOH(1.3ml)以及水(1.3ml)的混合物中的溶液用LiOH(35mg，1.5mmol)处理，并且在室温搅拌7小时。将反应混合物用1N HCl(1.5ml，1.5mmol)酸化并且用乙酸乙酯(8ml)萃取三次。将有机层合并、经过MgSO₄干燥并且在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱法(庚烷中的乙酸乙酯＝10％至70％)纯化，得到(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸，即化合物63(102mg，65％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.04(d,2H),7.61(s,1H),7.40-7.43(m,4H),6.32(m,1H),5.23(m,1H),4.86(d,J＝14.8Hz,1H),4.75(d,J＝14.8Hz,1H),4.19(m,2H),4.12(q,J＝7.2Hz,1H),3.75(m,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝561。

(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)苯基)甲醇

将1,3-亚苯基二甲醇(2.18g，15.778mmol)溶解在DMF(21.80ml)中并且冷却到0℃，添加咪唑(2.148g，31.557mmol)，继而添加叔丁基二甲基氯硅烷(2.378g，15.778mmol)。将混合物在0℃搅拌1小时并且升温到室温并且搅拌过夜。在反应完成后，将混合物用饱和NH₄Cl水溶液(10ml)淬灭，用EtOAc(2×100ml)萃取。将有机层用饱和NaHCO₃水溶液(10ml)洗涤、过Na₂SO₄干燥并且浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)苯基)甲醇(393)(1.73g，43.4％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δppm 7.35-7.23(m,4H),4.75(s,2H),4.68(d,J＝5.6Hz,2H),0.95(s,9H),0.12(s,6H)。

((3-(溴甲基)苯甲基)氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(395)：

将(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)苯基)甲醇(393)(0.293g，1.161mmol)溶解在DCM(6.0ml)中并且与CBr₄(0.385g，1.161mmol)混合。在室温添加Ph₃P(0.304g，1.161mmol)并且将混合物在室温继续搅拌2小时直到反应完成为止。将反应混合物直接上样到硅胶柱上并且通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的((3-(溴甲基)苯甲基)氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(395)(319mg，87％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.37-7.26(m,4H),4.76(s,2H),4.51(s,2H),0.98(s,9H),0.13(s,6H)。

(S)-4-(1-(1-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(396)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(390)的相同的程序，从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和((3-(溴甲基)苯甲基)氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(395)制备化合物396(208mg，64.5％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm7.98(d,J＝8.0Hz,2H),7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.28-7.21(m,3H),7.11(d,J＝6.4Hz,1H),6.24(d,J＝5.2Hz,1H),5.24(t,J＝7.2Hz,1H),4.75(s,2H),4.70(s,2H),4.11(t,J＝8.4Hz,2H),3.89(s,3H),3.74(t,J＝8.4Hz,1H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H),0.90(s,9H),0.07(s,6H)。LCMS(ES)(M+Na)＝639。

实施例LXIII

(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(397)

将(S)-4-(1-(1-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(396)(0.208g，0.337mmol)溶解在THF(4.16ml)中并且添加TBAF(0.506ml，0.506mmol)。将所得溶液在室温搅拌0.5小时。在反应完成后，将混合物用NH₄Cl(5ml)淬灭，用EtOAc(50ml)萃取。将有机层用盐水(10ml)洗涤、经过Na₂SO₄干燥并且浓缩。将粗材料通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物397(154mg，91％产率)。¹HNMR(500MHz,CDCl₃):δppm7.95(d,J＝8.5Hz,2H),7.37(d,J＝8.5Hz,2H),7.29-7.25(m,3H),7.16(dd,J＝2.0,3.5Hz,1H),6.25(d,J＝5.0Hz,1H),5.23(t,J＝7.5Hz,1H),4.76(d,J＝14.5Hz,2H),4.68(d,J＝14.5Hz,2H),4.64(s,3H),4.12(dd,J＝8.0,12.0Hz,2H),3.89(s,3H),3.75(dd,J＝8.0,9.5Hz,2H),1.53(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+Na)＝525。

(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)

将(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(397)(10mg，0.02mmol)溶解在叔戊醇(1ml)中并且添加3M NaOH溶液(66.3μl，0.199mmol)。然后将混合物在90℃搅拌1小时直到反应完成为止。将混合物冷却到室温并且添加1N HCl溶液(259μl，0.259mmol)以使pH值<4。将反应混合物用EtOAc(3×15ml)萃取。将有机层浓缩并且通过快速色谱法纯化，得到呈白色固体状的化合物64(8.4mg，86％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.99(d,J＝8.0Hz,2H),7.39(d,J＝8.0Hz,2H),7.30-7.24(m,3H),7.14(d,J＝6.4Hz,1H),6.30(d,J＝4.8Hz,1H),5.24(t,J＝7.2Hz,1H),4.78(d,J＝14.8Hz,1H),4.68(d,J＝16.4Hz,1H),4.64(m,3H),4.16-4.10(m,2H),3.76(dd,J＝7.6,9.2Hz,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝489。

实施例LXIV

以下实施例LXV-LXVI中所用的中间体

(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(399)和4,4'-((1S,1'S)-((1,1'-(1,3-亚苯基双(亚甲基))双(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二基-7-羰基))双(氮烷二基))双(乙烷-1,1-二基))二苯甲酸二甲酯(400)：

将(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)(0.048g，0.105mmol)和1,3-双(氯甲基)苯(398)(0.037g，0.211mmol)在DMF(0.8ml)中混合，并且在N₂下向该混合物中添加K₂CO₃(0.044g，0.316mmol)。将所得悬浮液在100℃搅拌20分钟直到SM完全耗尽为止。将混合物冷却到室温、用NaHCO₃溶液(5ml)淬灭、用EtOAc(2×50ml)萃取。将有机层用水(2×10ml)、盐水(2×10ml)洗涤、干燥并且浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈白色固体的(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸酯(399)(37mg，67.4％产率)和呈白色固体的4,4'-((1S,1'S)-((1,1'-(1,3-亚苯基双(亚甲基))双(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二基-7-羰基))双(氮烷二基))双(乙烷-1,1-二基))二苯甲酸二甲酯(400)(9.8mg，10.7％产率)。

(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸酯(399)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.39(d,J＝8.0Hz,2H),7.31-7.26(m,3H),7.22-7.20(m,1H),6.26(d,J＝4.8Hz,1H),5.24(t,J＝7.2Hz,1H),4.76(s,2H),4.54(s,2H),4.15(dd,J＝8.0,8.8Hz,2H),3.90(s,3H),3.76(dd,J＝8.0,8.8Hz,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝521。

4,4'-((1S,1'S)-((1,1'-(1,3-亚苯基双(亚甲基))双(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二基-7-羰基))双(氮烷二基))双(乙烷-1,1-二基))二苯甲酸二甲酯(400)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.97(d,J＝8.4Hz,4H),7.38(d,J＝8.0Hz,4H),7.25-7.16(m,4H),6.32(d,J＝4.4Hz,2H),5.22(t,J＝7.2Hz,2H),4.67(s,4H),4.10(dd,J＝8.0,8.8Hz,4H),3.89(s,6H),3.69(dd,J＝8.0,8.8Hz,4H),1.51(d,J＝7.2Hz,6H)。LCMS(ES)(M+H)＝867。

实施例LXV

(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物65)：

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸酯(399)制备化合物65(8.3mg，32.8％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.04(d,J＝8.0Hz,2H),7.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.31-7.29(m,3H),7.22-7.20(m,1H),6.29(d,J＝4.8Hz,1H),5.26(t,J＝7.2Hz,1H),4.76(s,2H),4.54(s,2H),4.16(dd,J＝8.0,8.8Hz,2H),3.77(dd,J＝8.0,8.8Hz,2H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝507。

实施例LXVI

4,4'-((1S,1'S)-((1,1'-(1,3-亚苯基双(亚甲基))双(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二基-7-羰基))双(氮烷二基))双(乙烷-1,1-二基))二苯甲酸(化合物66)：

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从4,4'-((1S,1'S)-((1,1'-(1,3-亚苯基双(亚甲基))双(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二基-7-羰基))双(氮烷二基))双(乙烷-1,1-二基))二苯甲酸二甲酯(400)制备化合物66(7.9mg，42.5％产率)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.89(d,J＝8.0Hz,4H),7.30(d,J＝8.0Hz,4H),7.19-7.09(m,4H),6.48(d,J＝6.8Hz,2H),5.14(t,J＝7.2Hz,2H),4.55(d,J＝14.4Hz,2H),4.50(d,J＝14.8Hz,2H),4.06(dd,J＝8.0,8.8Hz,4H),3.63(dd,J＝8.0,8.8Hz,4H),1.45(d,J＝7.2Hz,6H)。LCMS(ES)(M+Na)＝861。

实施例LXVII

(S)-4-(1-(1-(3-(氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(401)

将(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(399)(6mg，0.012mmol)溶解在叔戊醇(300μl)中并且添加1M TBAF的THF溶液(57.6μl)。然后将混合物在150℃搅拌10分钟直到反应完成为止。将混合物冷却到室温，用EtOAc(3×10ml)萃取，用水(5ml)、盐水(5ml)洗涤，将有机层干燥并且浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈白色固体的化合物401(5.4mg，93％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.01-7.98(m,2H),7.41-7.26(m,6H),6.26(d,J＝4.8Hz,1H),5.34(d,J＝47.6Hz,2H),5.25(t,J＝6.8Hz,1H),4.78(s,2H),4.15(dd,J＝8.0,8.8Hz,2H),3.90(s,3H),3.76(dd,J＝8.0,8.8Hz,2H),1.54(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+Na)＝527。

(S)-4-(1-(1-(3-(氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物67)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从(S)-4-(1-(1-(3-(氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(401)制备化合物67(54mg，79％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.04(d,J＝8.4Hz,2H),7.42(d,J＝8.4Hz,2H),7.33-7.24(m,4H),6.30(d,J＝4.8Hz,1H),5.33(d,J＝47.6Hz,2H),5.28-5.24(m,1H),4.77(s,2H),4.17-4.09(m,2H),3.76(dd,J＝8.0,8.8Hz,2H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝491。

实施例LXVIII

(S)-4-(1-(1-(4-碘-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(403)和(S)-4-(1-(1-(4-碘-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物68)

遵循实施例LXV中所述的用于从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和1,3-双(氯甲基)苯(398)制备(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物65)的相似的程序，类似地从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和4-(溴甲基)-1-碘-2-(三氟甲基)苯(402)制备化合物403和化合物68。

(S)-4-(1-(1-(4-碘-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(403)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.02-7.93(m,3H),7.57(s,1H),7.38(d,J＝8.4Hz,2H),7.13(d,J＝8.4Hz,1H),6.29(d,J＝4.0Hz,1H),5.21(t,J＝6.8Hz,1H),4.82(d,J＝14.8Hz,1H),4.75(d,J＝14.8Hz,1H),4.18(dd,J＝8.0,8.8Hz,2H),3.91(s,3H),3.76(dd,J＝8.0,8.8Hz,2H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝667。

(S)-4-(1-(1-(4-碘-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物68)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.04(d,J＝8.4Hz,2H),7.94(d,J＝7.6Hz,1H),7.56(s,1H),7.39(d,J＝8.0Hz,2H),7.15(d,J＝7.2Hz,1H),6.34(br s,1H),5.21(t,J＝6.8Hz,1H),4.85(d,J＝14.8Hz,1H),4.72(d,J＝14.8Hz,1H),4.18(t,J＝8.4Hz,2H),3.79(t,J＝8.4Hz,2H),1.53(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝653。

实施例LXIX

(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(405)和(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物69)

遵循实施例LXV中所述的用于从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和1,3-双(氯甲基)苯(398)制备(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物65)的相似的程序，类似地从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和1-(溴甲基)-3-碘苯(404)制备化合物405(265mg，85％)和化合物69(33mg，67％)。

(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(405)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.04(d,J＝8.4Hz,2H),7.62(d,J＝8.0Hz,2H),7.41(d,J＝8.4Hz,2H),7.26-7.05(m,2H),6.28(br s,1H),5.23(t,J＝6.8Hz,1H),4.72(m,2H),4.18(t,J＝8.4Hz,2H),3.92(s,3H),3.76(t,J＝8.4Hz,2H),1.57(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝599。

(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物69)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.57-7.52(m,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),6.98(dd,J＝7.2,7.6Hz,1H),6.35(br s,1H),5.15(t,J＝6.8Hz,1H),4.59(d,J＝14.8Hz,1H),4.58(d,J＝14.8Hz,1H),4.10(t,J＝8.4Hz,2H),3.71(t,J＝8.4Hz,2H),1.47(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝585。

实施例LXX

(S)-4-(1-(1-苯甲基-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(407)和(S)-4-(1-(1-苯甲基-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物70)

遵循实施例LXV中所述的用于从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和1,3-双(氯甲基)苯(398)制备(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物65)的相似的程序，类似地从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和(溴甲基)苯(406)制备化合物407(53mg，86％)和化合物70(36mg，84％)。

(S)-4-(1-(1-苯甲基-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(407)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.00(d,J＝8.4Hz,2H),7.40(d,J＝8.4Hz,2H),7.31-7.23(m,5H),6.25(d,J＝4.8Hz,1H),5.25(t,J＝7.2Hz,1H),4.77(d,J＝14.8Hz,1H),4.72(d,J＝14.8Hz,1H),4.13(t,J＝8.4Hz,2H),3.90(s,3H),3.76(t,J＝8.4Hz,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝473。

(S)-4-(1-(1-苯甲基-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物70)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.05(d,J＝8.4Hz,2H),7.42(d,J＝8.4Hz,2H),7.26-6.97(m,5H),6.30(br s,1H),5.27(t,J＝6.8Hz,1H),4.76(s,2H),4.17-4.11(m,2H),3.80-3.76(m,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝459。

实施例LXXI

(S)-N-(1-(4-(((4-硝基苯基)磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物71)

将(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)(100mg，0.19mmol)溶解在DCM(2ml)中并且与4-硝基苯磺酰胺(409)(77mg，0.38mmol)和DMAP(46.4mg，0.38mmol)混合。向该混合物中添加EDC(72.8mg，0.38mmol)并且将混合物在室温搅拌20小时直到反应完成为止。将反应用水(2ml)淬灭，用DCM(2×30ml)萃取。将有机层用盐水(5ml)洗涤、干燥并且浓缩，将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈白色固体的化合物71(93mg，68.9％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.20-8.10(m,4H),7.57-7.26(m,7H),7.19(d,J＝8.4Hz,2H),6.33(br s,1H),5.11(t,J＝6.8Hz,1H),4.86-4.83(m,1H),4.72(d,J＝14.8Hz,1H),4.21-4.10(m,2H),3.75(t,J＝8.4Hz,2H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝711。

实施例LXXII

(S)-N-(1-(4-(((4-氨基苯基)磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物72)

将(S)-N-(1-(4-(((4-硝基苯基)磺酰基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物71)(0.046g，0.065mmol)溶解在MeOH(2.3ml)中并且在N₂气氛下与Pd-C(6.89mg，6.473μmol)混合。将烧瓶用H₂吹扫(flush)并且将反应混合物在H₂气氛下搅拌1小时直到反应完成为止。将混合物经由硅藻土垫过滤并且将滤液浓缩，得到呈白色固体的化合物72(41mg，93％产率)。(400MHz,CDCl₃):δppm 7.77(d,J＝7.6Hz,2H),7.63(d,J＝7.6Hz,2H),7.50-7.36(m,4H),7.22(d,J＝7.2Hz,2H),6.54(d,J＝5.2Hz,2H),6.28(d,J＝3.6Hz,1H),5.11(t,J＝6.4Hz,1H),4.83-4.71(m,2H),4.32(br s,1H),4.14(t,J＝8.3Hz,2H),3.73(t,J＝8.4Hz,2H),1.43(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝681。

实施例LXXIII

(S)-4-(1-(1-(4-硝基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(411)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(390)的相同的程序，从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和1-(溴甲基)-4-硝基苯(410)制备化合物411(14mg，51.7％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.15(d,J＝8.4Hz,2H),7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),7.37(d,J＝8.4Hz,2H),6.30(d,J＝4.4Hz,1H),5.20(t,J＝6.8Hz,1H),4.93(d,J＝14.8Hz,1H),4.88(d,J＝14.8Hz,1H),4.20(t,J＝8.4Hz,2H),3.91(s,3H),3.79(t,J＝8.4Hz,2H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝518。

(S)-4-(1-(1-(4-氨基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物73)

将(S)-4-(1-(1-(4-硝基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(411)(7mg，0.014mmol)溶解在MeOH(1.4ml)中并且在N₂气氛下与Pd-C(1.440mg，1.353μmol)混合。将烧瓶用H₂吹扫并且将反应混合物在H₂气氛下搅拌30分钟直到反应完成为止。将混合物经由硅藻土垫过滤，用MeOH(3×1ml)冲洗。将滤液浓缩并且再溶解在叔戊醇(659μl)中，添加3N NaOH溶液(45.1μl，0.135mmol)。然后将混合物在90℃搅拌30分钟直到反应完成为止。然后将混合物冷却到室温并且添加1N HCl(176μl，0.176mmol)以使pH值<4。对所述材料进行制备型HPLC纯化，得到呈淡黄色油状的化合物73(3.5mg，54.7％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.95-7.85(m,2H),7.32-7.24(m,2H),6.98-6.84(m.2H),6.60-6.24(m,3H),5.18-5.09(m,1H),4.62(br s.,1H),4.38(br s,1H),4.14(br s,1H),4.03(s,2H),3.69(t,J＝8.4Hz,2H),3.40-3.22(m,2H),1.47(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+Na)＝496。

实施例LXXIV

(S)-4-(1-(1-(3-((2-羟基乙氧基)甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(412)

将(S)-4-(1-(1-(3-(氯甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物65)(0.2g，0.395mmol)溶解在聚乙二醇(1.0ml)和甲苯(2.0ml)中。添加KOH(0.221g，3.946mmol)并且将所得混合物回流30分钟直到反应完成为止。将混合物冷却到室温，用3N HCl(1.558ml，5.129mmol)中和到pH值＝4并且用DCM(3×20ml)萃取。将有机层浓缩并且在室温将粗产物溶解在MeOH(2ml)中，然后与甲苯(3ml)混合，向该混合物中添加三甲基甲硅烷基重氮甲烷(0.986ml，1.972mmol)(2M己烷溶液)直到黄色持续存在为止。然后将混合物在室温搅拌1小时，之后浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈淡黄色油状的化合物412(146mg，67.7％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.97(d,J＝8.4Hz,2H),7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.31-7.24(m,3H),7.17(d,J＝6.8Hz,1H),6.30(d,J＝4.2Hz,1H),5.24(t,J＝6.8Hz,1H),4.76(d,J＝14.4Hz,1H),4.70(d,J＝14.8Hz,1H),4.51(s,2H),4.14-4.09(m,2H),3.89(s,3H),3.78-3.58(m,4H),3.56(d,J＝6.4Hz,2H),1.53(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+Na)＝569。

(S)-4-(1-(1-(3-((2-((甲磺酰基)氧基)乙氧基)甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(413)

将(S)-4-(1-(1-(3-((2-羟基乙氧基)甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(412)(0.125g，0.229mmol)溶解在DCM(2.84ml)中，冷却到-10℃，添加Et₃N(0.080ml，0.572mmol)，继而缓慢添加MsCl(0.027ml，0.343mmol)。将混合物在-5℃搅拌30分钟直到反应完成为止。将反应用NaHCO₃(1ml)淬灭、用DCM(2×20ml)萃取、用盐水(3ml)洗涤。将有机层用Na₂SO₄干燥、浓缩并且通过快速色谱法纯化，得到呈白色泡沫状的化合物413(134mg，94％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.97(d,J＝8.2Hz,2H),7.39(d,J＝8.2Hz,2H),7.31-7.23(m,3H),7.18(d,J＝7.2Hz,1H),6.29(d,J＝4.2Hz,1H),5.23(t,J＝7.2Hz,1H),4.76(d,J＝14.4Hz,1H),4.70(d,J＝14.8Hz,1H),4.53(s,2H),4.35(dd,J＝4.4,8.8Hz,2H),4.16-4.10(m,2H),3.89(s,3H),3.77-3.71(m,4H),3.00(s,3H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝625。

(S)-4-(1-(1-(3-((2-氟乙氧基)甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物74)

将(S)-4-(1-(1-(3-((2-((甲磺酰基)氧基)乙氧基)甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(413)(37mg，0.059mmol)与穴醚222(44.6mg，0.118mmol)和CsF(18.00mg，0.118mmol)在叔戊醇(1.8ml)中混合。将所得悬浮液在120℃搅拌20分钟直到反应完成为止。将混合物冷却到90℃，与3NNaOH(197μl，0.592mmol)混合并且在90℃继续搅拌20分钟。将混合物冷却到室温、用1N HCl(889μl，0.889mmol)淬灭直到pH 4为止。将混合物通过DCM(3×10ml)萃取，用盐水(3ml)洗涤。将有机层干燥并且浓缩，然后将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物74(29.8mg，94％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.04(d,J＝8.0Hz,2H),7.43(d,J＝8.4Hz,2H),7.32-7.26(m,3H),7.18(d,J＝7.2Hz,1H),6.29(d,J＝4.8Hz,1H),5.26(t,J＝7.2Hz,1H),4.78(d,J＝14.8Hz,1H),4.72(d,J＝14.8Hz,1H),4.63(dd,J＝4.0,4.4Hz,1H),4.55(s,2H),4.51(dd,J＝4.0,4.4Hz,1H),4.16-4.10(m,2H),3.79-3.73(m,3H),3.67(t,J＝4.0Hz,1H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝535。

实施例LXXV

(S)-4-(1-(1-(3-(2-((甲磺酰基)氧基)乙氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(416)

(S)-4-(1-(1-(3-(2-羟基乙氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(415)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(390)的相同的程序，从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和2-(3-(溴甲基)苯氧基)乙-1-醇(414)制备化合物(415)(128mg，92％产率)。LCMS(ES)(M+H)＝533。

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(3-((2-((甲磺酰基)氧基)乙氧基)甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(413)的相同的程序，从(S)-4-(1-(1-(3-(2-羟基乙氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(415)制备化合物416(140mg，94％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.38(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(t,J＝8.4Hz,1H),7.20-6.85(m,2H),6.80(dd,J＝3.6,8.0Hz,1H),6.28(d,J＝4.8Hz,1H),5.22(t,J＝7.2Hz,1H),4.72(d,J＝14.8Hz,1H),4.66(d,J＝14.8Hz,1H),4.52(dd,J＝4.8,6.0Hz,2H),4.19-4.11(m,4H),3.88(s,3H),3.75(t,J＝8.8Hz,2H),3.04(s,3H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝611。

(S)-4-(1-(1-(3-(2-氟乙氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物75)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(3-((2-氟乙氧基)甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物74)的相同的程序，从(S)-4-(1-(1-(3-(2-((甲磺酰基)氧基)乙氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(416)制备化合物75(30mg，88％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.03(d,J＝8.0Hz,2H),7.41(d,J＝7.6Hz,2H),7.23-7.20(m,1H),6.85-6.82(m,3H),6.28(br s,1H),5.27(t,J＝7.2Hz,1H),4.74(d,J＝12.4Hz,2H),4.68(d,J＝12.0Hz,2H),4.19-4.12(m,4H),3.79-3.75(m,2H),1.54(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝521。

实施例LXXVI

1-(3-碘苯甲基)-7-(((S)-1-(4-(甲氧羰基)苯基)乙基)氨甲酰基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑1-氧化物(417)

将(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(405)(10mg，0.017mmol)溶解在乙酸(200μl)中并且与四水合过硼酸钠(25.7mg，0.167mmol)混合。将混合物在50℃搅拌2小时，之后用NaHCO₃溶液(pH 7)淬灭它。将混合物用DCM(3×10ml)萃取，用盐水(5ml)洗涤，将有机层浓缩并且通过快速色谱法纯化，得到呈淡黄色油状的化合物417(6.5mg，64％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 10.8(d,J＝11.2Hz,1H),8.00(d,J＝8.4Hz,2H),7.78(d,J＝7.6Hz,1H),7.66-7.55(m,2H),7.42(d,J＝8.4Hz,1H),7.13(br s,1H),7.02(t,J＝8.0Hz,1H),5.30-5.25(m,1H),5.00-4.83(m,2H),4.74-4.58(m,2H),4.38-4.31(m,1H),3.89(s,3H),3.35-3.26(m,1H),1.59(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝615。

7-(((S)-1-(4-羧基苯基)乙基)氨甲酰基)-1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑1-氧化物(化合物76)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从1-(3-碘苯甲基)-7-(((S)-1-(4-(甲氧羰基)苯基)乙基)氨甲酰基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑1-氧化物(417)制备化合物76(4.5mg，70.8％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.05(d,J＝8.4Hz,2H),7.68(br s,2H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),7.26-7.23(m,1H),7.07(t,J＝8.0Hz,1H),6.57(d,J＝7.2Hz,1H),5.37(t,J＝6.8Hz,1H),4.88(d,J＝11.2Hz,1H),4.84(d,J＝11.6Hz,1H),4.23-4.19(m,2H),3.99(dd,J＝7.2,8.0Hz,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+Na)＝623。

实施例LXXVII

3-(苄氧基)-5-(三氟甲基)苯甲酸苯甲酯(419)

将3-羟基-5-(三氟甲基)苯甲酸(418)(0.5g，2.426mmol)溶解在DMF(5.00ml)中并且与苯甲基溴(1.154ml，9.703mmol)和碳酸铯(7.90g，24.258mmol)混合。将混合物在50℃搅拌4小时。在反应完成后，将混合物冷却到室温、用NH₄Cl(10ml)淬灭、用EtOAc(2×30ml)萃取、用盐水(10ml)洗涤，将有机层浓缩并且通过快速色谱法纯化，得到呈白色固体的化合物419(724mg，77％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.98(br s,1H),7.86(br s,1H),7.50-7.38(m,11H),5.42(s,2H),5.15(s,2H)。

(3-(苄氧基)-5-(三氟甲基)苯基)甲醇(420)

将3-(苄氧基)-5-(三氟甲基)苯甲酸苯甲酯(419)(0.72g，1.864mmol)溶解在THF(14ml)中并且在N₂下冷却到0℃。缓慢添加硼氢化锂(0.932ml，3.727mmol)，然后将混合物在室温搅拌18小时。在反应完成后，将混合物通过逐滴添加NH₄Cl(5ml)淬灭、将混合物用EtOAc(2×30ml)萃取、用NaHCO₃(5ml)、盐水(5ml)洗涤，将有机层浓缩并且通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物420(524mg，定量产量)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.45-7.34(m,5H),7.22(s,1H),7.17(s,1H),7.14(s,1H),5.09(s,2H),4.70(d,J＝6.0Hz,2H),1.82(t,J＝6.0Hz,1H)。LCMS(ES)(M+Na)＝306。

1-(苄氧基)-3-(溴甲基)-5-(三氟甲基)苯(421)

将(3-(苄氧基)-5-(三氟甲基)苯基)甲醇(420)(0.205g，0.726mmol)溶解在DCM(4.10ml)中并且与CBr₄(0.265g，0.799mmol)混合。在室温添加Ph₃P(0.210g，0.799mmol)并且将混合物在室温搅拌2小时直到反应完成为止。将混合物直接上样到柱上并且通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物421(155mg，61.8％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm7.45-7.31(m,5H),7.22(s,1H),7.18(s,1H),7.16(s,1H),5.10(s,2H),4.46(s,2H)。

(S)-4-(1-(1-(3-(苄氧基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(422)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(390)的相同的程序，从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和1-(苄氧基)-3-(溴甲基)-5-(三氟甲基)苯(421)制备化合物422(210mg，49.7％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.99-7.97(m,2H),7.41-7.25(m,6H),7.14(s,1H),7.11(s,2H),6.26(br s,1H),5.22(t,J＝6.8Hz,1H),5.20(s,2H),4.83(d,J＝14.8Hz,1H),4.75(d,J＝14.8Hz,1H),4.74(d,J＝5.2Hz,1H),4.16-4.12(m,2H),3.90(s,3H),3.71(t,J＝8.0Hz,2H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝647。

(S)-4-(1-(1-(3-羟基-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(423)

将(S)-4-(1-(1-(3-(苄氧基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(422)(0.21g，0.325mmol)溶解在MeOH(21.00ml)中并且在N₂气氛下与10％Pd/C(0.035g，0.032mmol)混合。进行H₂气体交换并且在H₂气氛下将所得悬浮液在室温搅拌30分钟。在反应完成后，将混合物经由硅藻土垫过滤，用MeOH(3×2ml)冲洗。将滤液浓缩并且通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物423(155mg，86％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),6.94(s,1H),6.90(s,1H),6.85(s,1H),6.82(s,1H),6.37(d,J＝4.0Hz,1H),5.18(t,J＝7.2Hz,1H),4.63-4.60(m,2H),4.19-4.13(m,2H),3.89(s,3H),3.76-3.72(m,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝557。

(S)-4-(1-(1-(3-羟基-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物77)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从(S)-4-(1-(1-(3-羟基-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(423)制备化合物77(11mg，81％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm7.86(d,J＝4.0Hz,2H),7.38(d,J＝4.0Hz,2H),6.95(s,1H),6.85(s,2H),6.41(br s,1H),5.17(br s,1H),4.65(d,J＝12.0Hz,1H),4.55(d,J＝12.0Hz,1H),4.19-4.11(m,3H),3.76(br s,2H),1.54(br s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝543。

实施例LXXVIII

(S)-4-(1-(1-((4-(溴甲基)环己基)甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(425)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(390)的相同的程序，从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和1,4-双(溴甲基)环己烷(424)制备化合物425(27.5mg，36.8％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.01(d,J＝8.4Hz,2H),7.41(d,J＝8.4Hz,2H),6.15(d,J＝5.6Hz,1H),5.23(d,J＝7.2Hz,1H),4.17(t,J＝8.4Hz,2H),3.91(s,3H),3.89-3.82(m,2H),3.44(dd,J＝7.6,13.6Hz,2H),3.24(dd,J＝6.4,12.4Hz,2H),1.86-1.66(m,4H),1.52(s,3H),1.56-1.42(m,2H),0.99-0.88(m,4H)。LCMS(ES)(M+H)＝571/573。

(S)-4-(1-(1-((4-(氟甲基)环己基)甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物78)和(S)-4-(1-(1-((4-亚甲基环己基)甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物79)

在小瓶中将(S)-4-(1-(1-((4-(溴甲基)环己基)甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(425)(27mg，0.047mmol)与穴醚222(89mg，0.236mmol)和KF(13.73mg，0.236mmol)在叔戊醇(1.4ml)中混合。将所得悬浮液在120℃搅拌1.5小时直到SM完全耗尽为止。向该混合物中添加3N NaOH溶液(162μl，0.486mmol)并且将混合物在120℃继续搅拌5分钟直到酯完全水解为止。在反应完成后，将混合物冷却到室温、用1N HCl溶液(709μl，0.709mmol)淬灭、用EtOAc(2×10ml)萃取、用盐水(5ml)洗涤。将有机层干燥并且浓缩，然后将残余物通过制备型TLC纯化，得到(S)-4-(1-(1-((4-(氟甲基)环己基)甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物78)(10.5mg，44.7％产率)和(S)-4-(1-(1-((4-亚甲基环己基)甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物79)(1.1mg，4.9％产率)。

(S)-4-(1-(1-((4-(氟甲基)环己基)甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物78)：LCMS(ES)(M+H)＝497。

(S)-4-(1-(1-((4-亚甲基环己基)甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物79)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.07(d,J＝8.0Hz,2H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),6.15(d,J＝5.2Hz,1H),5.25(t,J＝7.2Hz,1H),4.61(s,2H),4.19(t,J＝8.4Hz,2H),3.90(t,J＝8.8Hz,2H),3.43(dd,J＝7.6,13.6Hz,1H),3.31(dd,J＝7.2,13.6Hz,1H),2.31-2.24(m,2H),2.04-1.90(m,2H),1.71-1.66(m,3H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H),1.10-0.98(m,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝477。

实施例LXXVIII

(R)-(3-(苄氧基)-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯(429)

将(R)-2-((苄氧基)甲基)环氧乙烷(428)(10g，60.901mmol)溶解在2-丙醇(750ml)中并且与氢氧化铵(750ml，19260.511mmol)混合。将混合物在室温搅拌过夜直到环氧化物开环完成为止。在减压下蒸发有机溶剂，将残余物(约15ml)用DCM(2×30ml)萃取。将合并的有机层浓缩，得到粗材料(11.9g)，将其与Et₃N(12.69ml，91.044mmol)在DCM(220ml)中混合。在0℃在N₂气氛下添加Boc₂O(18.32ml，78.905mmol)并且使所得混合物升温到室温并且搅拌过夜。在反应完成后，将反应用饱和NH₄Cl水溶液(15ml)淬灭，用DCM(100ml)萃取。将有机层用盐水(10ml)洗涤、干燥并且浓缩，然后将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物429(13.3g，78％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.29-7.20(m,5H),5.12(br s,1H),4.46(s,2H),3.81(br s,1H),3.42(dd,J＝4.0,9.6Hz,1H),3.35(dd,J＝4.0,9.6Hz,1H),3.37-3.32(m,1H),3.29-3.25(m,1H),3.09-3.03(m,1H),1.37(s,9H)。LCMS(ES)(M+Na)＝304。

4-甲基苯磺酸(R)-1-(苄氧基)-3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基酯(430)

将(R)-(3-(苄氧基)-2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯(429)(5g，17.772mmol)与Et₃N(12.39ml，88.858mmol)和DMAP(0.217g，1.777mmol)在DCM(100ml)中混合并且冷却到0℃。在N₂下添加对甲苯磺酰氯(3.56g，18.66mmol)。将混合物在室温搅拌3小时直到反应完成为止。将反应用饱和NaHCO₃水溶液(10ml)淬灭，用EtOAc(2×50ml)萃取。将有机层用水(10ml)、盐水(10ml)洗涤、干燥并且浓缩，然后将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈白色固体的化合物430(5.5g，71％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.78(d,J＝8.0Hz,2H),7.34-7.26(m,5H),7.21(d,J＝8.0Hz,2H),4.79(br s,1H),4.69(br s,1H),4.41(d,J＝11.6Hz,1H),4.37(d,J＝11.6Hz,1H),3.54-3.31(m,4H),3.42(s,3H),1.42(s,9H)。LCMS(ES)(M+Na)＝458。

(S)-3-((苄氧基)甲基)-6-溴-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二甲酸1-(叔丁酯)7-乙酯(432)

将4-甲基苯磺酸(R)-1-(苄氧基)-3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基酯(430)(5.47g，12.553mmol)与3,5-二溴-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(431)(3.4g，11.412mmol)在DMF(68.0ml)中混合。添加Cs₂CO₃(4.46g，13.694mmol)并且将所得悬浮液在100℃搅拌2小时直到4-甲基苯磺酸(R)-1-(苄氧基)-3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基酯(430)完全耗尽为止。将粗材料冷却到室温并且经由短棉塞(cotton plot)过滤，用DMF(3×1ml)冲洗。向滤液中添加Cs₂CO₃(4.46g，13.694mmol)并且将所得混合物在120℃搅拌1小时直到中间体完全转化成所期望的产物为止。然后将反应混合物冷却到室温、用水(10ml)淬灭、用EtOAc(2×100ml)萃取。将有机层用水(20ml)、盐水(20ml)洗涤、干燥并且浓缩，然后将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物432(1.9g，34.7％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm7.40-7.23(m,5H),4.60-4.57(m,1H),4.51(s,2H),4.47(d,J＝10.8Hz,2H),4.35(d,J＝7.2Hz,2H),3.83(d,J＝10.0Hz,1H),3.78(d,J＝10.0Hz,1H),1.51(s,9H),1.39(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+Na)＝502/504。

(S)-3-((苄氧基)甲基)-6-溴-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(433)

将(S)-3-((苄氧基)甲基)-6-溴-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二甲酸1-叔丁酯7-乙酯(432)(1.9g，3.955mmol)溶解在DCM(9.50ml)中，然后与TFA(6.09ml，79.109mmol)混合。将混合物在室温搅拌10分钟。在反应完成后，通过蒸发去除溶剂并且将残余物用EtOAc(100ml)稀释，用饱和NaHCO₃水溶液(10ml)洗涤。将水层用EtOAc(2×30ml)反萃取。将合并的有机层用盐水(10ml)洗涤、干燥并且浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物433(1.15g，76％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.34-7.23(m,5H),4.69(m,1H),4.58-4.53(m,1H),4.51(s,2H),4.30-4.21(m,2H),4.10(t,J＝9.6Hz,1H),4.01(dd,J＝6.0,9.2Hz,1H),3.75(dd,J＝7.6,10.0Hz,2H),1.32(t,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝380/382。

(S)-3-((苄氧基)甲基)-6-溴-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(435)

将(S)-3-((苄氧基)甲基)-6-溴-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(433)(1.612g，4.239mmol)与3-三氟甲基苯甲基溴(434)(0.777ml，5.087mmol)在DMF(16ml)中混合并且添加Cs₂CO₃(4.14g，12.718mmol)。将所得悬浮液在100℃搅拌30分钟直到反应完成为止。将反应用饱和NH₄Cl水溶液(10mL)淬灭，用EtOAc(2×30ml)萃取、用盐水(5mL)洗涤。将有机层干燥并且浓缩，然后将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物435(2.22g，97％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.57-7.20(m,9H),4.97(d,J＝15.6Hz,1H),4.89(d,J＝15.2Hz,1H),4.48(s,2H),4.51-4.47(m,1H),4.26(dd,J＝6.8,14.4Hz,2H),3.83(t,J＝10.0Hz,1H),3.77-3.68(m,3H),1.26(t,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝538/540。

(S)-3-((苄氧基)甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(437)

将(S)-3-((苄氧基)甲基)-6-溴-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(435)(2.22g，4.124mmol)溶解在1,4-二

烷(44.4ml)中，在N₂下添加NaI(1.545g，10.309mmol)、反式-1,2-双(甲基氨基)环己烷(0.130ml，0.825mmol)以及CuI(0.314g，1.649mmol)。将混合物在100℃搅拌以使溴化物基质碘化。在3小时之后，将反应物用水(10mL)淬灭，用EtOAc(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)洗涤，经过MgSO₄干燥并且浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，得到碘化中间体(436)，将其与CuI(0.696g，3.656mmol)在DMF(64.2ml)中混合。添加2,6-二甲基吡啶(2,6-LUTIDINE)(0.085ml，0.731mmol)，继而添加氟磺酰基二氟乙酸甲酯(0.931ml，7.312mmol)。然后将所得混合物在100℃搅拌1小时直到碘化中间体(436)完全耗尽为止。将材料冷却到室温、用饱和NaHCO₃水溶液(20ml)淬灭、用EtOAc(2×100ml)萃取。将合并的有机层用水(2×20ml)、盐水(20ml)洗涤，经过Na₂SO₄干燥并且浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物437(705mg，35％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.58-7.18(m,9H),5.01(d,J＝15.2Hz,1H),4.95(d,J＝15.2Hz,1H),4.54(br s,1H),4.49(s,2H),4.26(dd,J＝7.2,14.4Hz,2H),3.90(t,J＝10.0Hz,1H),3.81-3.76(m,2H),3.70(dd,J＝3.6,10.0Hz,1H),1.29(t,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝528。

4-((S)-1-((S)-3-((苄氧基)甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(439)

将(S)-3-((苄氧基)甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(437)(0.705g，1.337mmol)溶解在叔戊醇(3.53ml)和MeOH(7.05ml)中并且与3N NaOH溶液(4.46ml，13.366mmol)混合。将所得溶液在90℃搅拌1小时直到水解完成为止。将混合物冷却到室温，用10％HCl(4.87ml，16.039mmol)淬灭直到pH值<4为止，用EtOAc(2×50ml)萃取。将合并的有机层用水(5mL)、盐水(5mL)洗涤、经过Na₂SO₄干燥并且浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，得到酸(438)(680mg，定量产量)。将酸(438)与(S)-4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯(216)(0.313g，1.744mmol)在DMF(6.70ml，86.53mmol)中混合并且用Et₃N(0.748ml，5.366mmol)和HATU(0.765g，2.012mmol)处理。将所得混合物在室温搅拌过夜直到反应完成为止。然后将反应用饱和NH₄Cl水溶液(10ml)淬灭，用EtOAc(2×50ml)萃取。将合并的有机层用水(10ml)、盐水(10ml)洗涤，经过Na₂SO₄干燥并且浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，得到呈白色固体的化合物439(735mg，83％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.98(d,J＝8.4Hz,2H),7.53(d,J＝5.6Hz,2H),7.47-7.19(m,9H),6.25(d,J＝4.8Hz,1H),5.22(t,J＝6.8Hz,1H),4.87(d,J＝14.8Hz,1H),4.75(d,J＝15.6Hz,1H),4.55-4.52(m,1H),4.45(s,2H),3.89(s,3H),3.90-3.79(m,1H),3.77-3.69(m,3H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝661。

4-((S)-1-((S)-3-((苄氧基)甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物80)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从4-((S)-1-((S)-3-((苄氧基)甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(439)制备化合物80(9.8mg，66.8％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.04(d,J＝8.4Hz,2H),7.54-7.18(m,11H),6.27(d,J＝4.0Hz,1H),5.24(t,J＝6.8Hz,1H),4.88(d,J＝14.8Hz,1H),4.75(d,J＝14.8Hz,1H),4.56-4.53(m,1H),4.48(s,2H),3.88(t,J＝10.0Hz,1H),3.79-3.69(m,3H),1.54(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝647。

实施例LXXIX

4-((S)-1-((S)-3-(羟甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(440)：将4-((S)-1-((S)-3-((苄氧基)甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(439)(16mg，24μmol)于乙酸乙酯(3mL)中的溶液用5％Pd-C(5.2mg，1.2μmol)(Evonik E107MA/W，64％水)处理并且在氢气(气球)下搅拌17小时。添加另外的Pd-C(10.4mg，2.4μmol)并且在氢气下再继续搅拌8小时。将混合物经由硅藻土垫过滤并且用乙酸乙酯冲洗。将滤液在真空中浓缩，得到化合物440(14mg，定量)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.98(d,2H),7.4-7.6(m,4H),7.30(d,2H),6.27(m,1H),5.21(m,1H),4.96(d,1H),4.66(d,1H),4.50(m,1H),4.04(dd,1H),3.88(s,3H),3.87(dd,1H),3.76(dd,1H),3.69(dd,1H),1.52(d,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝571。

4-((S)-1-((S)-3-(((甲磺酰基)氧基)甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(441)：将4-((S)-1-((S)-3-(羟甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(440)(14mg，25μmol)于THF(1mL)中的溶液冷却到0℃并且用MsCl(13μL，172μmol)和Et₃N(68μL，491μmol)处理。将混合物在0℃搅拌30分钟并且用水(1.4mL)淬灭。将混合物用乙酸乙酯(1.4mL)萃取三次。将有机层合并、经过MgSO₄干燥并且在真空中浓缩，得到化合物441。产物不经进一步纯化而用于下一步。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.96(d,2H),7.4-7.6(m,4H),7.36(d,2H),6.28(m,1H),5.20(m,1H),4.90(d,J＝14.8Hz,1H),4.76(d,J＝14.8Hz,1H),4.69(m,1H),4.49(dd,J＝4.0,11.2Hz,1H),4.40(dd,J＝4.0,11.2Hz,1H),3.96(dd,J＝9.6,10.0Hz,1H),3.87(s,3H),3.72(dd,J＝6.4,10.0Hz,1H),2.93(s,3H),1.51(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝649。

4-((S)-1-((S)-3-(氟甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(442)：将上述产物(441)溶解在叔戊醇(1mL)中并且用1M TBAF的THF溶液(74μL，74μmol)处理。将混合物加热到60℃，持续30分钟，并且加热到80℃，持续30分钟。添加另外的1M TBAF的THF溶液(49μL，49μmol)并且在80℃再继续搅拌30分钟。在冷却到室温之后，将混合物用水(1.4mL)处理并且用MTBE(1.4mL)萃取三次。将有机层合并、经过MgSO₄干燥并且在真空中浓缩，得到作为与(S)-4-(1-(3-甲基-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(443)的混合物的化合物442。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.98(d,2H),7.4-7.6(m,4H),7.37(d,2H),6.28(m,1H),5.22(m,1H),4.95(d,J＝14.8Hz,1H),4.82(ddd,J＝3.6,10.4,47.6Hz,1H),4.72(d,J＝14.8Hz,1H),4.60(m,1H),4.55(ddd,J＝2.8,10.4,47.6Hz,1H),3.95(t,J＝9.2Hz,1H),3.90(s,3H),3.76(dd,J＝5.6,9.6Hz,1H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝573。

4-((S)-1-((S)-3-(氟甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物81)和(S)-4-(1-(3-甲基-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物82)：将包含化合物442和化合物443的上述混合物溶解在THF(1mL)、甲醇(1mL)以及水(1mL)的混合物中，用LiOH-H₂O(5.1mg，122μmol)处理，并且在室温搅拌17小时。添加另外的LiOH-H₂O(5.1mg，122μmol)并且在室温再继续搅拌22小时。将反应混合物用1N HCl(245μL，245μmol)酸化并且用乙酸乙酯(2.8mL)萃取三次。将有机层合并、经过MgSO₄干燥并且在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，得到化合物81(4.1mg，30％)和(S)-4-(1-(3-甲基-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物82)与(S)-4-(1-(3-亚甲基-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(444)的2:1混合物(2.4mg，18％)。

化合物81：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.01(d,2H),7.4-7.6(m,4H),7.39(d,2H),6.27(m,1H),5.22(m,1H),4.95(d,J＝14.8Hz,1H),4.85(ddd,J＝3.6,10.4,47.2Hz,1H),4.85(ddd,J＝2.8,10.4,47.2Hz,1H),4.72(d,J＝14.8Hz,1H),4.60(m,1H),3.95(t,J＝10.0Hz,1H),3.75(dd,J＝7.2,10.0Hz,1H),1.53(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝559。

(S)-4-(1-(3-甲基-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物82)与(S)-4-(1-(3-亚甲基-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(444)的混合物：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ8.04(d,2H),7.41(d,2H),7.3-7.6(m,4H),6.59(d,J＝1.6Hz,0.7H),6.39(m,0.7H),6.29(m,0.3H),5.66(d,J＝14.4Hz,0.7H),5.58(d,J＝14.4Hz,0.7H),5.23(m,1.3H),4.94(d,J＝14.4Hz,0.3H),4.88(d,J＝14.4Hz,0.3H),4.59(m,0.3H),4.39(m,0.6H),1.54(d,J＝6.4Hz,2.1H)。LCMS(ES)(M+H)＝539。

实施例LXXX

4-((S)-1-((S)-3-(羟甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物83)

遵循用于制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从4-((S)-1-((S)-3-(羟甲基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(440)制备化合物83(13.3mg，87％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.03(d,J＝8.0Hz,2H),7.54-7.39(m,6H),6.30(d,J＝4.4Hz,1H),5.23(t,J＝7.2Hz,1H),4.98(d,J＝15.2Hz,1H),4.68(d,J＝14.8Hz,1H),4.53-4.50(m,1H),4.06(dd,J＝3.6,12.4Hz,1H),3.89(t,J＝10.0Hz,1H),3.78(dd,J＝4.0,12.0Hz,1H),3.70(dd,J＝7.2,9.6Hz,1H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝557。

实施例LXXXI

(S)-4-(1-(1-(3-氟-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物84)

遵循先前所述的用于从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和1-(氯甲基)-3-(三氟甲基)苯(214)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，类似地从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和1-(溴甲基)-3-氟-5-(三氟甲基)苯(445)制备化合物84。

1-(3-氟-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(446)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.40(s,1H),7.30(s,1H),7.28(s,1H),5.00(s,2H),4.23(t,J＝8.8Hz,2H),3.83(t,J＝8.8Hz,2H),3.81(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝412。

1-(3-氟-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(447)：LCMS(ES)(M+H)＝398。

(S)-4-(1-(1-(3-氟-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(448)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.38(d,J＝8.4Hz,2H),7.34(s,1H),7.26(s,1H),7.24(s,1H),6.29(bs,1H),5.21(m,1H),4.86(d,J＝15.3Hz,1H),4.81(d,J＝15.0Hz,1H),4.20(t,J＝8.4Hz,2H),3.90(s,3H),3.79(t,J＝8.4Hz,2H),1.53(d,J＝8.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝559。

(S)-4-(1-(1-(3-氟-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物84)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.83(d,J＝8.2Hz,2H),7.44(s,1H),7.37(d,J＝8.2Hz,2H),7.33(s,1H),7.30(s,1H),5.12(m,1H),4.44(d,J＝15.4Hz,1H),4.34(d,J＝15.4Hz,1H),4.22(m,2H),3.79(m,2H),1.46(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝545。

实施例LXXXII

(S)-4-(1-(1-(3-溴-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物85)

遵循先前所述的用于从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和1-(氯甲基)-3-(三氟甲基)苯(214)制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)的相似的程序，类似地从6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(208)和1-溴-3-(溴甲基)-5-(三氟甲基)苯制备化合物85。

1-(3-溴-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸甲酯(449)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.72(s,1H),7.71(s,1H),7.54(s,1H),4.98(s,2H),4.24(dd,J＝8.2和9.0Hz,2H),3.82(dd,J＝8.2和9.0Hz,2H),3.81(s,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝472/474。

1-(3-溴-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(450)：¹HNMR(400MHz):δppm 7.71(s,1H),7.68(s,1H),7.52(s,1H),4.95(s,2H),4.24(dd,J＝8.2和9.0Hz,2H),3.83(dd,J＝8.2和9.0Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝458/460。

(S)-4-(1-(1-(3-溴-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(451)：¹HNMR(400MHz):δppm 8.00(d,J＝8.4Hz,2H),7.69(s,1),7.67(s,1H),7.49(s,1H),7.38(d,J＝8.4Hz,2H),6.29(bs,1H),5.21(m,1H),4.90(d,J＝15.0Hz,1H),4.78(d,J＝15.0Hz,1H),4.21(dd,J＝8.3和8.6Hz,2H),3.90(s,3H),3.78(dd,J＝8.3和8.6Hz,2H),1.53(d,J＝8.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝619/621。

(S)-4-(1-(1-(3-溴-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物85)：¹HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm 7.82(d,J＝8.4Hz,2H),7.73(s,2H),7.58(s,1H),7.37(d,J＝8.4Hz,2H),5.11(m,1H),4.42(d,J＝15.6Hz,1H),4.32(d,J＝15.6Hz,1H),4.22(m,2H),3.80(m,2H),1.46(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝605/607。

实施例LXXXIII

(S)-4-(1-(1-(4-(苄氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(452)

向(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)(82.0mg，0.214mmol)和1-(苄氧基)-4-(溴甲基)-苯(71.3mg，0.257mmol)于DMF(0.83mL)中的溶液中添加碳酸铯(210mg，0.643mmol)并且将悬浮液在室温搅拌3.0小时。LCMS仅显示出[M+H]＝579.3的所期望的峰。将反应物在真空中浓缩以去除有机溶剂。将白色固体通过硅胶色谱法(10％至70％E/H，然后70％等度E/H)纯化，得到呈白色固体的化合物452(86.6mg，70％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm8.00(d,J＝8.2Hz,2H),7.43-7.32(m,7H),7.14(d,J＝8,6Hz,2H),6.88(d,J＝8.6Hz,2H),6.25(bm,1H),5.26(dq,J＝7.0Hz,1H),5.03(s,2H),4.66(dd,J＝14.5,14.5Hz,2H),4.10(dd,J＝8.2,8.2Hz,2H),3.83(s,3H),3.74(dd,J＝8.6,8.6Hz,2H),1.54(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝579.3。

(S)-4-(1-(1-(4-羟基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(453)

将(S)-4-(1-(1-(4-(苄氧基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(452)(800mg，1.38mmol)溶解在EtOAc(18mL)和甲醇(15mL)中，在N₂下添加10％Pd/碳。然后将H₂气体吹扫15分钟并且将混合物在H₂气氛下搅拌3.0小时。LCMS仅显示出[M+H]＝489.3的所期望的峰。将反应物经由硅藻土过滤并且用EtOAc洗脱，然后浓缩以去除有机溶剂。将白色固体通过硅胶色谱法(20％至80％E/H，然后80％等度E/H)纯化，得到呈白色固体的所期望的产物(453)(500mg，74％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 7.98(d,J＝8.4Hz,2H),7.39(d,J＝8.0Hz,2H),7.00(d,J＝8.4Hz,2H),6.67(d,J＝8.4Hz,2H),6.30(bm,1H),5.23(dq,J＝6.8,6.8Hz,1H),4.65(d,J＝14.8Hz,1H),4.50(d,J＝14.8Hz,1H),4.10(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),3.89(s,3H),3.72(dd,J＝9.2,7.6Hz,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝489.36。

(S)-4-(1-(1-(4-羟基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物86)

遵循用于使用上述方案中所示的反应物制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从(S)-4-(1-(1-(4-羟基苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(453)制备化合物86(22.0mg，60％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 8.02(d,J＝8.0Hz,2H),7.42(d,J＝8.4Hz,2H),7.04(d,J＝8.8Hz,2H),6.70(d,J＝8.4Hz,2H),6.28(bm,1H),5.25(dq,J＝8.8,8.8Hz,1H),4.71(d,J＝14.4Hz,1H),4.52(d,J＝14.4Hz,1H),4.12(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),3.75(app dt,J＝7.6,1.6Hz,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝475.3。

实施例LXXXIV

(R)-4-(2-羟基-1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(455)

遵循用于使用上文所示的反应物制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(217)的相同的程序，从6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(215)制备呈白色固体状的化合物455(57.0mg，86％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm8.01(d,J＝8.4Hz,2H),7.56-7.39(m,6H),6.86(bm,1H),5.24-5.20(bm,1H),4.84(s,2H),4.19(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),3.99-3.90(m,2H),3.90(s,3H),3.77(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝557.3。

(R)-4-(2-羟基-1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物87)

遵循用于使用上文所示的反应物制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从(R)-4-(2-羟基-1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(455)制备呈白色固体的化合物87(11.5mg，37％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm8.05(d,J＝8.4Hz,2H),7.56-7.42(m,6H),6.90(bm,1H),5.26-5.22(bm,1H),4.84(s,2H),4.18(dd,J＝8.0,8.0Hz,2H),3.95(ddd,J＝26.8,11.1,4.0Hz,2H),3.77(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝543.3。

实施例LXXXV

(S)-4-(1-(1-(4-(二甲氨基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(456)

遵循用于使用上文所示的反应物制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(217)的相同的程序，从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)制备呈白色固体的化合物456(103.0mg，76％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 8.00(d,J＝8.4Hz,2H),7.42(d,J＝8,4Hz,2H),7.0(bm,2H),6.62(bm,2H),6.26(bm,1H),5.28(dq,J＝8.8Hz,1H),4.66(d,J＝13.6Hz,1H),5.55(d,J＝15.2Hz,1H),4.09(dd,J＝8.0,8.0Hz,2H),3.89(s,3H),3.75(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),2.93(s,6H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝516.1。

(S)-4-(1-(1-(4-(二甲氨基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物88)

遵循用于使用上文所示的反应物制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从(S)-4-(1-(1-(4-(二甲氨基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(456)制备呈白色固体的(化合物88)(15.0mg，38％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm8.06(d,J＝8.0Hz,2H),7.45(d,J＝8,0Hz,2H),7.06(d,J＝14.4Hz,1H),6.65(bd,J＝7.2Hz,2H),6.26(bm,1H),5.29(dq,J＝6.8Hz,1H),4.66(d,J＝14.4Hz,1H),4.52(d,J＝14.4Hz,1H),4.09(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),3.76(app dt,J＝7.6,1.2Hz,2H),2.93(s,6H),1.55(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝502.7。

实施例LXXXVI

(S)-4-(1-(1-(3-(二甲氨基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(457)

遵循用于使用上文所示的反应物制备(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(390)的相同的程序，从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)制备呈白色固体的化合物457(103.0mg，76％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 7.97(d,J＝8.0Hz,2H),7.38(d,J＝8,4Hz,2H),7.15(dd,J＝8.4,8.4Hz,1H),6.65-6.55(m,3H),6.23(bm,1H),5.25(dq,J＝8.8Hz,1H),4.68(s,2H),4.11(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),3.90(s,6H),3.79(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),2.89(s,3H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+2H)＝517.6。

(S)-4-(1-(1-(3-(二甲氨基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物89)

遵循用于使用上文所示的反应物制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从(S)-4-(1-(1-(3-(二甲氨基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(457)制备呈白色固体的化合物89(20.0mg，56％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 8.02(d,J＝8.4Hz,2H),7.40(d,J＝8,0Hz,2H),7.17(dd,J＝7.6,7.6Hz,1H),6.65(bm,3H),6.25(bm,1H),5.26(dq,J＝7.2Hz,1H),4.68(dd,J＝14.8,14.8Hz,2H),4.11(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),3.79(dd,J＝9.2,9.2Hz,2H),2.90(s,6H),1.53(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+2H)＝503.4。

实施例LXXXVII

(S)-4-(1-(1-(3-(二甲氨基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(458)

遵循用于使用上文所示的反应物制备(S)-4-(1-(1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(390)的相同的程序，从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)制备呈白色固体的化合物458(20.5mg，84％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 7.97(d,J＝8.0Hz,2H),7.38(d,J＝8,4Hz,2H),6.81-6.76(m,3H),6.25(bm,1H),5.23(dq,J＝7.2Hz,1H),4.73(dd,J＝14.8,14.8Hz,2H),4.15(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),3.90(s,3H),3.77(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),2.93(s,6H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+2H)＝585.6。

(S)-4-(1-(1-(3-(二甲氨基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物90)

遵循用于使用上文所示的反应物制备(S)-4-(1-(1-(3-(羟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物64)的相同的程序，从(S)-4-(1-(1-(3-(二甲氨基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(458)制备呈白色固体的(化合物90)(30.0mg，58％产率)。¹HNMR(400MHz):δppm 8.03(d,J＝8.0Hz,2H),7.40(d,J＝8,0Hz,2H),6.84-6.82(m,3H),6.28(bm,1H),5.24(dq,J＝6.8Hz,1H),4.74(s,3H),4.16(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),3.78(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),2.94(s,6H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+2H)＝571.4。

实施例LXXXVIII

以下实施例LXXXIX-XCII中所用的中间体

6-溴-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二甲酸1-叔丁酯7-乙酯

在室温将3,5-二溴-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(431)(10.0g，33.6mmol)和(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(9.78g，43.6mmol)于DMF(150mL)中的溶液用Cs₂CO₃(13.1g，40.3mmol，粉末)在80℃处理1.5小时；在冷却到室温之后，在N₂气氛下将无机盐经过沙(用乙腈预洗)过滤。将滤饼用无水DMF(5mL)冲洗。然后，将滤液用Cs₂CO₃(13.1g，40.3mmol)处理，并且在120℃老化2小时。在冷却到室温之后，将所得反应混合物用乙酸乙酯(250mL)和水(200mL)稀释。在相分离之后，将水层用乙酸乙酯(150mL)反萃取。将合并的有机层依次用水(150mL)、饱和氯化铵水溶液(200mL)以及盐水(200mL)洗涤。在相切割之后，将有机相干燥(MgSO₄)、过滤并且浓缩。将油状无色残余物通过Biotage色谱法(正庚烷-EtOAc)纯化，得到呈固体的所期望的产物(8.6g，71％产率)。纯化的产物(459)凝固成固体(在静置时)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 4.33(dd,J＝9.7,7.8Hz,2H),4.20(q,J＝7.1Hz,2H),4.15(dd,J＝8.9,7.8Hz,2H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝359.99。

6-溴-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(460)

在环境温度向6-溴-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二甲酸1-(叔丁酯)7-乙酯(459)(1.60g，4.44mmol)于DCM(32mL)中的溶液中添加三氟乙酸(6.40mL)。在环境温度搅拌3小时之后，LCMS显示反应完成。将反应溶液浓缩。将固体残余物与EtOAc(100mL)和饱和NaHCO₃溶液(80mL)混合。分离各层。将水层再次用EtOAc(80mL)萃取。将合并的有机层经过MgSO₄干燥。将干燥的溶液过滤并且浓缩，得到所期望的产物(460)(1.12g，97％)，其不经进一步纯化而用于下一步。LCMS(ES)(M+H)＝260.2。

6-溴-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(461)

在环境温度向6-溴-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(460)(1.11g，4.27mmol)和1-(溴甲基)-3-(三氟甲基)苯(0.78mL，5.12mmol)于DMF(11mL)中的混合物中添加碳酸铯(4.17g，12.80mmol)。将反应烧瓶在油浴中在100℃加热。在1小时之后，添加另外的1-(溴甲基)-3-(三氟甲基)苯(0.10mL，0.66mmol)。在20分钟之后，去除加热浴并且将反应混合物冷却到23℃。将混合物用饱和NaHCO₃(20mL)稀释并且在水(20mL)与MTBE/EtOAc(25mL/35mL)之间分配。将水层再次用MTBE/EtOAc(25mL/15mL)萃取。将合并的有机层用18％NaCl水溶液(30mL)洗涤。将洗涤过的溶液浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(5％至30％庚烷中的EtOAc，然后30％等度)纯化，得到呈白色固体的所期望的产物(461)(1.46g，82％产率)。LCMS(ES)(M+H)＝418.2。

1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-6-乙烯基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(462)

将容纳6-溴-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(461)(1.46g，3.49mmol)于甲苯(36.5mL)中的溶液的反应烧瓶在真空下抽真空并且用氮气回填(两次)。在环境温度，添加Pd(PPh3)4(0.24g，0.21mmol)和三丁基(乙烯基)锡烷(1.22ml，4.19mmol)。将所得混合物在100℃油浴中搅拌。在搅拌17小时之后，添加另外的Pd(PPh₃)₄(0.24g，0.21mmol)和三丁基(乙烯基)锡烷(1.22ml，4.19mmol)。在再过17小时之后，去除加热浴并且将反应混合物冷却到23℃。通过浓缩将反应体积减小到约3mL。将残余物通过硅胶色谱法(5％至30％庚烷中的EtOAc，然后30％等度)纯化，得到呈白色固体的所期望的产物(462)(891mg，70％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.57(s,1H),7.55-7.51(m,2H),7.45(dd,J＝8.0,8.0Hz,1H),7.14(dd,J＝18,11Hz,1H),5.97(dd,J＝18,2.4Hz,1H),5.28(dd,J＝11,2.0Hz,1H),4.93(s,2H),4.24(q,J＝7.6Hz,2H),4.11(t,J＝7.6Hz,2H),3.70(t,J＝8.0Hz,2H),1.26(t,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝366.3。

1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-6-乙烯基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸

在环境温度向1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-6-乙烯基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸乙酯(462)(880mg，2.41mmol)于甲醇(5.3mL)和THF(5.3mL)中的溶液中添加一水合氢氧化锂(505mg，12.0mmol)于水(5.3mL)中的溶液。将反应混合物在60℃油浴中搅拌。在3小时之后，添加另外的一水合氢氧化锂(250mg，6.0mmol)于水(2.5mL)中的溶液。在17小时之后，去除加热浴并且将反应混合物冷却到23℃。将混合物用水(30mL)稀释并且用1NHCl(25mL)酸化。将酸化的溶液用EtOAc(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩，得到呈白色固体的粗制的所期望的产物(463)(815mg，99％产率)，其不经进一步纯化而用于下一步。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δppm 12.2(br s,1H),7.69(s,1H),7.66-7.57(m,3H),7.09(dd,J＝18,11Hz,1H),5.81(dd,J＝18,2.4Hz,1H),5.17(dd,J＝11,2.4Hz,1H),4.92(s,2H),4.07(t,J＝8.0Hz,2H),3.72(t,J＝8.0Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝339.2。

(S)-4-(1-(1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-6-乙烯基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(465)

向1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-6-乙烯基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(463)(412mg，1.22mmol)和(S)-4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯(216)(443mg，2.47mmol)于DCM(12mL)中的悬浮液中添加TEA(0.68mL，4.87mmol)和HATU(604mg，1.59mmol)。将所得混合物在环境温度搅拌过夜。在16小时之后，通过添加水(4mL)淬灭反应。将反应混合物在10％NaCl水溶液(70mL)与EtOAc(100mL)之间分配。将有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(30％至70％EtOAc/庚烷，然后70％等度)纯化，得到呈白色固体的所期望的产物(465)(495mg，81％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.52-7.37(m,4H),7.35(d,J＝8.0Hz,2H),6.73(dd,J＝18,12Hz,1H),5.96(br d,J＝8.0Hz,1H),5.88(dd,J＝18,1.6Hz,1H),5.43(dd,J＝11,1.6Hz,1H),5.25(dq,J＝7.2,7.2Hz,1H),4.85(d,J＝14.8Hz,1H),4.81(d,J＝14.8Hz,1H),4.09(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),3.88(s,3H),3.66(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),1.51(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝500.3。

(S)-4-(1-(6-甲酰基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(466)

在环境温度向(S)-4-(1-(1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-6-乙烯基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(465)(250mg，0.50mmol)于THF(3.8mL)和水(3.8mL)中的溶液中添加4重量％的四氧化锇水溶液(48μL，7.52μmol)。在搅拌15分钟之后，添加高碘酸钠(215mg，1.00mmol)。将所得混合物在环境温度搅拌过夜。在16小时之后，将反应混合物在水(40mL)与EtOAc(50mL)之间分配。将水层再次用EtOAc(50mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩，得到呈暗色油状的粗制的所期望的产物(466)(251mg，99％产率)，其不经进一步纯化而用于下一步。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 9.85(br d,J＝7.2Hz,1H),9.69(s,1H),7.98(d,J＝8.0Hz,2H),7.54-7.39(m,4H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),5.24(d,J＝14.4Hz,1H),5.22(m,1H),5.09(d,J＝15Hz,1H),4.24(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),3.88(s,3H),3.80(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),1.56(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝501.3。

(S)-4-(1-(6-(羟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(467)

在-5℃向(S)-4-(1-(6-甲酰基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(466)(83mg，0.17mmol)于MeOH(2.5mL)中的溶液中添加硼氢化钠(12.6mg，0.33mmol)。在该温度搅拌2小时之后，反应完成(通过TLC监测)，然后通过添加6重量％的柠檬酸水溶液淬灭反应。将淬灭的混合物在18重量％NaCl水溶液(20mL)与EtOAc(30mL)之间分配。将水层再次用EtOAc(30mL)萃取。将合并的有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(30％至70％EtOAc/庚烷，然后70％等度)纯化，得到呈油状的所期望的产物(467)(81mg，97％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.22(br d,J＝8.0Hz,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,2H),7.55-7.48(m,3H),7.43-7.39(m,2H),5.25(dq,J＝7.2,7.2Hz,1H),4.96(dd,J＝14.8,14.8Hz,1H),4.92(dd,J＝14.8,14.8Hz,1H),4.70(d,J＝16Hz,1H),4.67(d,J＝16Hz,1H),4.05(dd,J＝8.0,8.0Hz,2H),3.89(s,3H),3.67(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),1.51(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝503.2。

实施例LXXXIX

(S)-4-(1-(6-(氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(468)

在环境温度向(S)-4-(1-(6-(羟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(467)(17mg，0.034mmol)于甲苯(0.6mL)中的混合物中添加2-吡啶磺酰氟(PyFluor)(7.1mg，0.044mmol)和7-甲基-1,5,7-三氮杂双环[4.4.0]癸-5-烯(MTBD)(7.29μL，0.051mmol)。在搅拌3小时之后，反应完成(通过LCMS监测)并且通过添加MeOH(0.3mL)淬灭反应。将淬灭的混合物在水(15mL)与EtOAc(20mL)之间分配。将水层再次用EtOAc(20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤、干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(5％至30％EtOAc/庚烷，30％等度，30％至70％EtOAc/庚烷，然后70％等度)纯化，得到所期望的产物(468)(8.6mg，50％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.01-7.97(m,2H),7.55-7.48(m,3H),7.43-7.38(m,3H),6.83(dd,J＝12.8,7.6Hz,1H),5.48(dd,J＝16,11Hz,1H),5.36(dd,J＝16,11Hz,1H),5.25(m,1H),4.94(d,J＝15Hz,1H),4.88(d,J＝15Hz,1H),4.14-4.08(m,2H),3.89(s,3H),3.70(dd,J＝8.8,8.8Hz,2H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝505.3。

(S)-4-(1-(6-(氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物91)

在环境温度向(S)-4-(1-(6-(氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(468)(8.6mg，0.017mmol)于甲醇(0.5mL)和THF(0.5mL)中的溶液中添加一水合氢氧化锂(7.2mg，0.17mmol)于水(0.5mL)中的溶液。将反应混合物在60℃油浴中搅拌。在2小时之后，去除加热浴并且将反应混合物冷却到23℃。将混合物用1N HCl(0.26mL)酸化。将酸化的溶液在水(15mL)与CH₂Cl₂(20mL)之间分配。将水层再次用CH₂Cl₂(20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤、干燥(Na₂SO₄)、过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(50％至80％EtOAc/庚烷，80％等度，2％MeOH/EtOAc等度)纯化，得到所期望的产物(化合物91)(3.5mg，41％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.05(d,J＝8.4Hz,2H),7.56-7.49(m,3H),7.45-7.40(m,3H),6.86(dd,J＝12.8,7.6Hz,1H),5.51(dd,J＝15,11Hz,1H),5.39(dd,J＝15,11Hz,1H),5.27(m,1H),4.96(d,J＝15Hz,1H),4.89(d,J＝15Hz,1H),4.15-4.09(m,2H),3.71(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝491.3。

实施例XC

(S)-4-(1-(1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-6-乙烯基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物92)

在环境温度向(S)-4-(1-(1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-6-乙烯基-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(465)(50mg，0.10mmol)于甲醇(1.5mL)和THF(1.5mL)中的溶液中添加一水合氢氧化锂(21.1mg，0.50mmol)于水(1.5mL)中的溶液。将反应混合物在环境温度搅拌。在16小时之后，将混合物用水(5mL)稀释并且用1N HCl(0.7mL)酸化。将酸化的溶液在水(5mL)与EtOAc(20mL)之间分配。将水层再次用EtOAc(20mL)萃取。将合并的有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(50％至100％EtOAc/庚烷，100％等度)纯化，得到呈白色固体的所期望的产物(化合物92)(32mg，66％产率)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δppm 8.27(d,J＝7.6Hz,1H),7.84(d,J＝8.0Hz,2H),7.60(s,1H),7.54(m,1H),7.47-7.43(m,2H),7.38(d,J＝8.0Hz,2H),6.70(dd,J＝18,11Hz,1H),5.80(dd,J＝18,1.6Hz,1H),5.28(dd,J＝11,1.6Hz,1H),5.14(m,1H),4.53(d,J＝15Hz,1H),4.43(d,J＝15Hz,1H),4.12-4.02(m,2H),3.73-3.63(m,2H),1.46(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝485.3。

实施例XCI

(S)-4-(1-(6-(羟基甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物93)

在环境温度向(S)-4-(1-(6-(羟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(467)(50mg，0.10mmol)于甲醇(1.5mL)和THF(1.5mL)中的溶液中添加一水合氢氧化锂(21.1mg，0.50mmol)于水(1.5mL)中的溶液。将反应混合物在环境温度搅拌。在16小时之后，将混合物用水(5mL)稀释并且用1N HCl(0.7mL)酸化。将酸化的溶液在水(5mL)与EtOAc(20mL)之间分配。将水层再次用EtOAc(20mL)萃取。将合并的有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(50％至100％EtOAc/庚烷，100％等度)纯化，得到呈白色半固体的所期望的产物(化合物93)(35mg，72％产率)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δppm 9.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.99-7.95(m,2H),7.64(s,1H),7.58-7.54(m,2H),7.50-7.44(m,3H),5.15(m,1H),4.94-4.80(m,2H),4.63(d,J＝15Hz,1H),4.60(d,J＝15Hz,1H),4.07-4.02(m,2H),3.74-3.69(m,2H),1.51(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝489.3。

实施例XCII

(S)-4-(1-(6-(二氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(469)

在环境温度向(S)-4-(1-(6-甲酰基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(466)(83mg，0.17mmol)于CH₂Cl₂(1.7mL)中的溶液中添加1M DAST的CH₂Cl₂溶液(0.37mL，0.37mmol)。在搅拌2小时之后，添加另外的DAST的CH₂Cl₂溶液(0.37mL，0.37mmol)。在16小时之后，LCMS显示约60％转化。添加另外的DAST的CH₂Cl₂溶液(0.37mL，0.37mmol)。将反应烧瓶置于40℃油浴中。在40℃搅拌7小时之后，添加另外的DAST的CH₂Cl₂溶液(0.37mL，0.37mmol)。在再过16小时之后，去除加热浴并且将反应混合物冷却到23℃。小心地通过添加饱和NaHCO₃淬灭反应。将淬灭的混合物在5重量％NaHCO₃水溶液(20mL)与EtOAc(30mL)之间分配。将水层再次用EtOAc(30mL)萃取。将合并的有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(10％至30％EtOAc/庚烷，30％等度，30％至50％EtOAc/庚烷)纯化，得到所期望的产物(469)(57mg，65％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.00-7.97(m,2H),7.54-7.48(m,3H),7.43-7.39(m,3H),6.73(m,1H),6.60(t,J＝54Hz,1H),5.22(m,1H),4.98(d,J＝15Hz,1H),4.89(d,J＝15Hz,1H),4.14-4.09(m,2H),3.88(s,3H),3.75-3.70(m,2H),1.52(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝523.3。

(S)-4-(1-(6-(二氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物94)

在环境温度向(S)-4-(1-(6-(二氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(469)(56mg，0.11mmol)于甲醇(1.6mL)和THF(1.6mL)中的溶液中添加一水合氢氧化锂(22.5mg，0.54mmol)于水(1.6mL)中的溶液。将反应混合物在环境温度搅拌。在16小时之后，将混合物用水(5mL)稀释并且用1NHCl(0.7mL)酸化。将酸化的溶液在水(5mL)与EtOAc(20mL)之间分配。将水层再次用EtOAc(20mL)萃取。将合并的有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(30％至66％EtOAc/庚烷，66％等度，66％至80％)纯化，得到呈白色半固体的所期望的产物(化合物94)(53mg，96％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.04(d,J＝8.4Hz,2H),7.54-7.39(m,6H),6.76(m,1H),6.62(t,J＝54Hz,1H),5.23(m,1H),4.99(d,J＝15Hz,1H),4.89(d,J＝15Hz,1H),4.15-4.10(m,2H),3.75-3.71(m,2H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝509.3。

实施例XCIII

(S)-4-(1-(1-(3-(2-乙氧基-1,1-二氟-2-氧代乙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(471)

在环境温度向(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(405)(200mg，0.33mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(470)(0.22mL，1.67mmol)于DMSO(6.0mL)中的溶液中添加Cu/Sn合金(106mg)。将反应烧瓶置于90℃油浴中。在90℃搅拌16小时之后，去除加热浴并且将反应混合物冷却到23℃。通过添加半饱和NH₄Cl水溶液(50mL)淬灭反应。将淬灭的混合物用EtOAc(50mL)萃取。将水层再次用EtOAc(50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤并且将洗涤过的有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(10％至30％EtOAc/庚烷，30％等度，30％至50％EtOAc/庚烷)纯化，得到呈白色固体的所期望的产物(471)(144mg，72％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.54-7.50(m,2H),7.44-7.38(m,4H),6.29(m,1H),5.23(m,1H),4.86(d,J＝15Hz,1H),4.78(d,J＝15Hz,1H),4.27(q,J＝7.2Hz,2H),4.16(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),3.90(s,3H),3.75(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝595.3。

(S)-4-(1-(1-(3-(1,1-二氟-2-羟乙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(472)

在-5℃向(S)-4-(1-(1-(3-(2-乙氧基-1,1-二氟-2-氧代乙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(471)(110mg，0.19mmol)于MeOH(6.6mL)中的溶液中分三等份添加硼氢化钠(56mg，1.48mmol)。在该温度搅拌2小时之后，添加另外的硼氢化钠(30mg，0.79mmol)。在2小时之后，反应完成(通过LCMS监测)并且通过添加6重量％柠檬酸水溶液(6mL)淬灭反应。将淬灭的混合物在水(20mL)与EtOAc(25mL)之间分配。将水层再次用EtOAc(25mL)萃取。将合并的有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(30％至50％EtOAc/庚烷，然后50％等度)纯化，得到呈油状的所期望的产物(472)(95mg，93％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.43-7.33(m,6H),6.24(m,1H),5.19(m,1H),4.81(d,J＝15Hz,1H),4.72(d,J＝15Hz,1H),4.16-4.12(m,2H),3.94-3.88(m,2H),3.88(s,3H),3.77-3.73(m,2H),1.51(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝553.3。

(S)-4-(1-(1-(3-(1,1-二氟-2-羟乙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物95)

在环境温度向(S)-4-(1-(1-(3-(1,1-二氟-2-羟乙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(472)(23mg，0.042mmol)于甲醇(0.70mL)和THF(0.70mL)中的溶液中添加一水合氢氧化锂(8.7mg，0.21mmol)于水(0.70mL)中的溶液。将反应混合物在环境温度搅拌。在16小时之后，将混合物用水(5mL)稀释并且用1N HCl(0.7mL)酸化。将酸化的溶液在水(5mL)与EtOAc(20mL)之间分配。将水层再次用EtOAc(20mL)萃取。将合并的有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(50％至100％EtOAc/庚烷，100％EtOAc等度)纯化，得到呈油状的所期望的产物(化合物95)(9.8mg，44％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm8.00(d,J＝8.4Hz,2H),7.42-7.32(m,6H),6.28(m,1H),5.20(m,1H),4.80(d,J＝15Hz,1H),4.72(d,J＝15Hz,1H),4.17-4.12(m,2H),3.89(t,J＝13.2Hz,2H),3.77-3.73(m,2H),1.52(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝539.3。

实施例XCIV

(S)-4-(1-(1-(3-(3-氧代丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(475)

向反应烧瓶中加入(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(405)(60mg，0.10mmol)、四正丁基氯化铵(474)(31mg，0.11mmol)、碳酸氢钠(21mg，0.25mmol)、以及甲苯(2.4mL)。将反应混合物抽真空并且用氮气回填(两次)。添加烯丙醇(11μL，0.15mmol)和乙酸钯(II)(2.3mg，10μmol)。将反应烧瓶置于80℃油浴中。在80℃搅拌16小时之后，去除加热浴并且将反应混合物冷却到23℃。通过浓缩将反应体积减小到约1mL。将残余物通过硅胶色谱法(30％至50％EtOAc/庚烷，50％等度EtOAc/庚烷)纯化，得到所期望的产物(475)(52mg，98％产率)，其被副产物(约10％)污染。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 9.77(d,J＝1.2Hz,1H),8.00-7.97(m,2H),7.41-7.38(m,2H),7.23(m,1H),7.11-7.07(m,3H),6.28(m,1H),5.25(m,1H),4.73(d,J＝15Hz,1H),4.69(d,J＝15Hz,1H),4.19-4.12(m,2H),3.90(s,3H),3.77-3.73(m,2H),2.91(t,J＝7.6Hz,2H),2.74(t,J＝7.6Hz,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝529.2。

(S)-4-(1-(1-(3-(3-羟基丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(476)

在0℃向(S)-4-(1-(1-(3-(3-氧代丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(475)(49mg，0.093mmol)于MeOH(2.0mL)中的溶液中添加硼氢化钠(5.3mg，0.14mmol)。在该温度搅拌2小时之后，反应完成(通过TLC监测)，然后通过添加10重量％柠檬酸水溶液(0.6mL)淬灭反应。将淬灭的混合物在水(15mL)与EtOAc(25mL)之间分配。将水层再次用EtOAc(25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤并且浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(50％至70％EtOAc/庚烷，然后70％等度)纯化，得到呈白色固体的所期望的产物(476)(31mg，63％产率(来自碘代化合物))。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.98(d,J＝8.0Hz,2H),7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.22(dd,J＝8.0,8.0Hz,1H),7.12-7.05(m,3H),6.29(m,1H),5.25(m,1H),4.72(d,J＝14.4Hz,1H),4.66(d,J＝14.4Hz,1H),4.12(dd,J＝8.8,7.6Hz,2H),3.89(s,3H),3.75(dd,J＝8.8,8.4Hz,2H),3.63-3.60(m,2H),2.66(t,J＝7.6Hz,2H),1.86-1.80(m,2H),1.53(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝531.2。

(S)-4-(1-(1-(3-(3-((甲磺酰基)氧基)丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(477)

在0℃向(S)-4-(1-(1-(3-(3-羟基丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(476)(37mg，0.070mmol)于CH₂Cl₂(1.5mL)中的溶液中添加Et₃N(0.03mL，0.21mmol)，继而添加甲磺酰氯(8.2μL，0.105mmol)于CH₂Cl₂(0.19mL)中的溶液。在该温度搅拌1小时之后，反应完成(通过LCMS监测)，然后通过添加饱和NaHCO₃水溶液(1.0mL)淬灭反应。将淬灭的混合物在5重量％NaHCO₃水溶液(15mL)与CH₂Cl₂(20mL)之间分配。将水层再次用CH₂Cl₂(20mL)萃取。将合并的有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(50％至70％EtOAc/庚烷，然后70％等度)纯化，得到呈白色固体的所期望的产物(477)(29mg，68％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.98(d,J＝8.0Hz,2H),7.39(d,J＝8.0Hz,2H),7.23(m,1H),7.11-7.08(m,3H),6.27(m,1H),5.25(m,1H),4.74(d,J＝14.4Hz,1H),4.69(d,J＝14.8Hz,1H),4.19-4.12(m,4H),3.89(s,3H),3.75(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),2.97(s,3H),2.71(t,J＝7.6Hz,2H),2.07-2.00(m,2H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝609.1。

(S)-4-(1-(1-(3-(3-氟丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物96)

在环境温度向(S)-4-(1-(1-(3-(3-((甲磺酰基)氧基)丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(477)(8mg，0.013mmol)于叔戊醇(0.8mL)中的混合物中添加TBAF水合物(18mg，0.066mmol)。将反应小瓶置于110℃-120℃油浴中。在该温度搅拌10分钟-15分钟之后，将加热浴温度调节到90℃。添加3M NaOH水溶液(48μL，0.14mmol)。在90℃加热15分钟至20分钟之后，去除加热浴并且将反应混合物冷却到23℃。通过添加1M HCl水溶液(0.2mL，0.20mmol)淬灭反应。将淬灭的混合物在水(5mL)与CH₂Cl₂(5mL)之间分配。将水层再次用CH₂Cl₂(2×5mL)萃取。将合并的有机层浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(50％至80％EtOAc/庚烷，80％等度，0％至5％MeOH/EtOAc，5％等度)纯化，得到呈白色固体的所期望的产物(化合物96)(4.5mg，66％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.04(d,J＝8.8Hz,2H),7.43(d,J＝8.4Hz,2H),7.23(m,1H),7.13-7.07(m,3H),6.28(m,1H),5.27(m,1H),4.72(s,2H),4.41(ddd,J＝6.0,6.0,47Hz,2H),4.16-4.11(m,2H),3.76(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),2.70(t,J＝8.0Hz,2H),2.03-1.89(m,2H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝519.1。

实施例XCV

(S)-4-(1-(1-(4-(3-氟丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物97)

遵循实施例XCIV中所述的用于从(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(405)制备(S)-4-(1-(1-(3-(3-氟丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物96)的相似的程序，类似地从(S)-4-(1-(1-(4-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(480)制备化合物97，(S)-4-(1-(1-(4-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(480)是遵循实施例LXIX中所述的用于制备(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(405)的相似的程序从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和1-(溴甲基)-4-碘苯(479)制备的。

(S)-4-(1-(1-(4-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(480)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm8.00(d,J＝8.4Hz,2H),7.62(d,J＝8.0Hz,2H),7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.00(d,J＝8.4Hz,2H),6.25(m,1H),5.23(m,1H),4.72(d,J＝14.8Hz,1H),4.67(d,J＝14.8Hz,1H),4.14(dd,J＝8.8,8.0Hz,2H),3.91(s,3H),3.74(dd,J＝8.8,8.0Hz,2H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝599.4。

(S)-4-(1-(1-(4-(3-氧代丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(481)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 9.81(s,1H),7.99(d,J＝8.0Hz,2H),7.40(d,J＝8.0Hz,2H),7.15(d,J＝7.6Hz,2H),7.11(d,J＝7.6Hz,2H),6.24(m,1H),5.25(m,1H),4.74(d,J＝14.4Hz,1H),4.67(d,J＝14.4Hz,1H),4.12(dd,J＝8.8,8.4Hz,2H),3.90(s,3H),3.75(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),2.76(t,J＝7.6Hz,2H),1.54(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝529.2。

(S)-4-(1-(1-(4-(3-羟基丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(482)：LCMS(ES)(M+H)＝531.2。

(S)-4-(1-(1-(4-(3-((甲磺酰基)氧基)丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(483)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm7.99(d,J＝8.0Hz,2H),7.40(d,J＝8.0Hz,2H),7.17(d,J＝8.0Hz,2H),7.11(d,J＝8.0Hz,2H),6.25(m,1H),5.25(m,1H),4.74(d,J＝14.4Hz,1H),4.68(d,J＝14.4Hz,1H),4.21(t,J＝6.8Hz,2H),4.13(dd,J＝8.8,8.0Hz,2H),3.89(s,3H),3.76(dd,J＝8.4,8.4Hz,2H),3.00(s,3H),2.73(t,J＝6.8Hz,2H),2.09-2.02(m,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝609.1。

(S)-4-(1-(1-(4-(3-氟丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物97)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.05(d,J＝7.6Hz,2H),7.43(d,J＝8.0Hz,2H),7.15-7.12(m,4H),6.26(m,1H),5.27(m,1H),4.75(d,J＝14.4Hz,1H),4.67(d,J＝14.4Hz,1H),4.44(ddd,J＝6.0,6.0,47Hz,2H),4.15-4.11(m,2H),3.79-3.74(m,2H),2.72(t,J＝7.6Hz,2H),2.04-1.93(m,2H),1.55(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝519.1。

实施例XCVI

(S)-4-(1-(1-(4-(3-氟丙基)-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物98)

遵循实施例XCIV中所述的用于从(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(405)制备(S)-4-(1-(1-(3-(3-氟丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物96)的相似的程序，类似地从(S)-4-(1-(1-(4-碘-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(403)制备化合物98。

(S)-4-(1-(1-(4-(3-氧代丙基)-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(484)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 9.82(s,1H),7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.53(s,1H),7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.27-7.24(m,2H),6.29(m,1H),5.22(m,1H),4.82(d,J＝14.8Hz,1H),4.76(d,J＝14.8Hz,1H),4.20-4.14(m,2H),3.90(s,3H),3.78-3.73(m,2H),3.10(t,J＝7.2Hz,2H),2.77(t,J＝7.6Hz,2H),1.54(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝597.2。

(S)-4-(1-(1-(4-(3-羟基丙基)-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(485)：LCMS(ES)(M+H)＝599.2。

(S)-4-(1-(1-(4-(3-((甲磺酰基)氧基)丙基)-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(486)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.53(s,1H),7.42-7.38(m,3H),7.27(m,1H),6.28(m,1H),5.23(m,1H),4.82(d,J＝14.8Hz,1H),4.76(d,J＝14.8Hz,1H),4.27(t,J＝6.4Hz,2H),4.19-4.14(m,2H),3.90(s,3H),3.78-3.74(m,2H),2.89(t,J＝8.0Hz,2H),2.08-2.02(m,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝677.2。

(S)-4-(1-(1-(4-(3-氟丙基)-3-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物98)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.05(d,J＝8.4Hz,2H),7.52(s,1H),7.44-7.38(m,3H),7.27(m,1H),6.30(m,1H),5.24(m,1H),4.82(d,J＝14.8Hz,1H),4.76(d,J＝14.8Hz,1H),4.48(ddd,J＝6.0,6.0,48Hz,2H),4.19-4.15(m,2H),3.78-3.74(m,2H),2.89(t,J＝8.4Hz,2H),2.05-1.92(m,2H),1.55(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝587.3。

实施例XCVI

(S)-4-(1-(1-(3-(3-氟丙基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物99)

遵循实施例XCIV中所述的用于从(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(405)制备(S)-4-(1-(1-(3-(3-氟丙基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物96)的相似的程序，类似地从(S)-4-(1-(1-(3-碘-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(488)制备化合物99，(S)-4-(1-(1-(3-碘-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(488)是遵循实施例LXIX中所述的用于制备(S)-4-(1-(1-(3-碘苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(405)的相似的程序从(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)和1-(溴甲基)-3-碘-5-(三氟甲基)苯(487)制备的。

(S)-4-(1-(1-(3-碘-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(488)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.00(d,J＝8.4Hz,2H),7.87-7.86(m,2H),7.52(s,1H),7.38(d,J＝8.4Hz,2H),6.29(m,1H),5.21(m,1H),4.88(d,J＝14.8Hz,1H),4.75(d,J＝14.8Hz,1H),4.23-4.18(m,2H),3.90(s,3H),3.79-3.75(m,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝677.3。

(S)-4-(1-(1-(3-(3-氧代丙基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(489)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 9.78(s,1H),7.98(d,J＝8.0Hz,2H),7.40-7.34(m,5H),6.31(m,1H),5.23(m,1H),4.84(d,J＝14.8Hz,1H),4.76(d,J＝14.8Hz,1H),4.20-4.16(m,2H),3.90(s,3H),3.77-3.73(m,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.79(t,J＝7.2Hz,2H),1.54(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝597.2。

(S)-4-(1-(1-(3-(3-羟基丙基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(490)：LCMS(ES)(M+H)＝599.3。

(S)-4-(1-(1-(3-(3-((甲磺酰基)氧基)丙基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(491)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.00-7.96(m,2H),7.39-7.34(m,5H),6.29(m,1H),5.21(m,1H),4.83(d,J＝14.8Hz,1H),4.76(d,J＝14.8Hz,1H),4.20-4.14(m,4H),3.89(s,3H),3.77-3.73(m,2H),2.80(s,3H),2.78(t,J＝7.6Hz,2H),2.08-2.01(m,2H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝677.3。

(S)-4-(1-(1-(3-(3-氟丙基)-5-(三氟甲基)苯甲基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物99)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.05(d,J＝8.4Hz,2H),7.42(d,J＝8.8Hz,2H),7.38-7.32(m,3H),6.32(m,1H),5.24(m,1H),4.86(d,J＝14.8Hz,1H),4.76(d,J＝14.8Hz,1H),4.42(ddd,J＝6.0,6.0,48Hz,2H),4.20-4.16(m,2H),3.78-3.74(m,2H),2.77(t,J＝7.6Hz,2H),2.04-1.91(m,2H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝587.2。

实施例XCVII

6-(2-乙氧基-1,1-二氟-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二甲酸1-叔丁酯7-乙酯(493)

将Cu粉(0.88g，13.88mmol)于DMSO(20mL)中的非均相溶液在室温脱气(真空-N₂吹扫，3次)并且在80℃老化30分钟。然后，添加6-溴-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二甲酸1-叔丁酯7-乙酯(459)(1.0g，2.78mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(470)(1.5mL，11.7mmol)。

在脱气之后，将所得反应物在该温度老化6小时。在冷却到室温之后，通过添加饱和氯化铵水溶液(10mL)淬灭反应。在用乙酸乙酯(50mL)和饱和氯化铵水溶液-28％氢氧化铵的4:1(体积/体积)混合物(25mL)稀释之后，分离各相。在反萃取水层之后，将合并的有机相干燥(MgSO₄)、过滤并且浓缩。将所得粗产物通过Biotage色谱法(正庚烷-EtOAc)纯化，得到呈油状的所期望的产物(493)(1.2g，86％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm4.5～4.4(m,2H),4.4～4.1(m,6H),1.5(br s,9H),1.4～1.2(m,6H)。LCMS(ES)(M+H)＝404.15。

6-(1,1-二氟-2-羟乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二甲酸1-叔丁酯7-乙酯(494)

在室温向经过搅拌的6-(2-乙氧基-1,1-二氟-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二甲酸1-叔丁酯7-乙酯(493)(0.2g，0.59mmol)于10:1THF-MeOH(5mL-0.5mL)溶液中的溶液中添加NaBH₄(75mg，1.98mmol，颗粒)。将所得溶液老化4小时。此时，将反应用饱和氯化铵水溶液(2mL)淬灭并且用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤并且经过MgSO₄干燥。在过滤之后，将滤液浓缩并且将残余物直接通过Biotage(用DCM溶液对柱进行上样并且用10％至50％E/H洗脱)纯化，得到呈油状的所期望的产物(494)(160mg，89％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 4.50～4.40(m,2H),4.35～4.25(d,4H),4.2～4.10(m,3H),1.50(br s.9H),1.4～1.3(m,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝362.12。

1-(叔丁氧羰基)-6-(1,1-二氟-2-羟乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(495)

向经过搅拌的6-(1,1-二氟-2-羟乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1,7-二甲酸1-叔丁酯7-乙酯(494)(0.2g，1.24mmol)于MeOH-THF-H₂O(1:1:1，各2mL)中的溶液中添加LiOH(53mg，2.21mmol)。在室温老化13小时之后，使反应升温到40℃并且再老化6小时。将反应物用乙酸乙酯(20mL)稀释，并且用1N HCl将pH值调节到4。在相分离之后，将水层用乙酸乙酯(2×15mL)反萃取。将合并的有机层经过MgSO₄干燥、浓缩并且用乙腈(2×)共沸(azeotropically)干燥。粗产物不经进一步纯化而用于接下来的反应(175mg作为粗物质，95％产率(在没有纯度调整的情况下))。

将共沸干燥的1-(叔丁氧基羰基)-6-(1,1-二氟-2-羟乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(495)(170mg，0.51mmol)溶解在DMF(6mL)中并且在5℃用TBSCl(200mg，1.31mmol)和咪唑(107mg，1.57mmol)处理。使反应升温到室温并且在该温度老化15小时。在反应结束时，通过添加碳酸氢钠水溶液(5mL)淬灭反应。在用碳酸氢钠水溶液稀释之后，将反应产物(495)用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。在用MgSO₄干燥之后，将合并的有机层蒸发，得到粗产物(200mg)。将所得的粗双-TBS酯醚再溶解在THF(6mL)中，并且用NaOH(0.63mL，0.63mmol)处理。在室温老化8小时之后，将反应物用乙酸乙酯(15mL)稀释，并且通过添加1N HCl将pH值调节到4。用乙酸乙酯(2×20mL)进行萃取处理(extractive workup)，继而干燥(MgSO₄)、过滤并且浓缩有机层，得到粗产物。经过硅胶塞过滤并且用乙酸乙酯洗脱，得到产物(495)(200mg，80％总产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm4.55～4.45(m,2H),4.354.20(m,4H),1.55(br s,9H),0.85(br s,9H),0.0(s,6H)。LCMS(ES)(M+H)＝448.22。

(S)-4-(1-(6-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1,1-二氟乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(496)

将经过搅拌的于DMF(5mL)中的1-(叔丁氧基羰基)-6-(1,1-二氟-2-((2-(三甲基甲硅烷基)丙-2-基)氧基)乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(495)(350mg，0.78mmol)用(S)-4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯(216)(250mg，1.39mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(300mg，1.56mmol)、TEA(0.27mL，1.95mmol)、以及催化量的DMAP(19mg，0.16mmol)处理。

在室温老化14小时之后，将反应物用氯化铵水溶液(10mL)和乙酸乙酯(20mL)稀释。在相分离之后，将有机层用乙酸乙酯(15mL)反萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤并且经过MgSO₄干燥。在过滤之后，将滤液浓缩，得到呈油状的粗产物。该粗材料不经进一步纯化而用于下一步。

向经过搅拌的(S)-6-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1,1-二氟乙基)-7-((1-(4-(甲氧羰基)苯基)乙基)氨甲酰基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-1-甲酸叔丁酯(492)(400mg)于二氯甲烷(3mL)中的溶液，并且在0℃用TFA(1.5mL)处理，然后升温到室温。在室温老化16小时之后，在减压下去除有机溶剂，并且将残余物用二氯甲烷(20mL)稀释。在用饱和NaHCO₃水溶液(15mL)萃取之后，将水层用二氯甲烷反萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经过MgSO₄干燥。去除溶剂并且经过小硅胶垫塞过滤，继而用乙酸乙酯洗涤，得到氨基醇。使用在DMF(6mL)中的TBSCl(300mg，0.91mmol)、咪唑(150mg，2.2mmol)使所得的TBS脱保护的醇经受先前所述的条件。在反应结束时，添加饱和氯化铵水溶液(15mL)。然后，将反应物用乙酸乙酯(15mL)稀释。在萃取处理之后，将有机层经过MgSO₄干燥，并且浓缩。将粗产物经过Biotage纯化，得到呈油状的所期望的产物(496)(260mg，65％总产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.10-7.90(m,2H),7.40-7.0(m,3H),5.25-5.10(m,1H),4.20-4.00(m,3H),3.90(s,3H),3.84-3.74(m,2H),2.94-2.76(m,1H),1.50-1.40(m,3H),0.90(br s,9H).0.10(br s,6H)。LCMS(ES)(M+H)＝509.33。

(S)-4-(1-(6-(1,1-二氟-2-羟乙基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物100)

在室温向经过搅拌的(S)-4-(1-(6-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1,1-二氟乙基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(496)(110mg，0.222mmol)于DMF(3mL)中的溶液中添加1-(氯甲基)-3-(三氟甲基)苯(214)(43mg，0.238mmol)和碳酸铯(106mg，0.324mmol)。在室温老化15小时之后，将所得反应物通过添加饱和氯化铵水溶液(3mL)和乙酸乙酯(20mL)淬灭。在用乙酸乙酯(2×20mL)萃取之后，将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤并且经过MgSO₄干燥。在过滤之后，将滤液浓缩到干燥(粗物质，150mg)。

将一部分粗酯(20mg，0.039mmol)用在THF(2mL)中的1N NaOH水溶液(0.4mL，0.4mmol)处理。在室温老化16小时之后，用1N HCl将反应物的pH值调节到pH 4，将反应混合物直接通过反相HPLC纯化，得到所期望的产物(化合物100)(0.4mg，3％产率，100％纯度)。¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δppm 7.89(br s,2H),7.52-7.06(m,6H),5.37-5.35(m,1H),5.12(br s,1H),4.91(m,1H),4.70-4.68(br s,1H),4.15-4.04(m,3H),3.65(br s,2H),3.54-3.52(m,1H).2.95-2.93(m,1H),1.32-1.25(m,3H)。LCMS(ES)(M+H)＝529.2。

实施例XCVIII

(S)-N-(1-(4-((1-氰基环丙基)氨甲酰基)苯基)乙基)-6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(化合物101)

在室温向经过搅拌的6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酸(化合物1)(25mg，0.047mmol)、1-氨基环丙烷甲腈盐酸盐(12.9mg，0.11mmol)以及4-乙基吗啉(20μL，0.166mmol)于乙腈(3mL)中的溶液中添加1-丙烷膦酸环酐(85μL，0.142mmol，50％乙酸乙酯溶液)。在室温将所得溶液老化14小时。此时，通过添加饱和NaHCO₃水溶液(2mL)淬灭反应。将粗产物用乙酸乙酯(2×10mL)萃取，并且将有机层经过MgSO₄干燥。在过滤之后，将滤液浓缩并且直接通过反相HPLC纯化，得到所期望的产物(化合物101)(10mg，35％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.59(d,J＝8.1Hz,2H),7.46(m,2H),7.39-7.27(m,4H),5.55(br s,1H),6.18(d,J＝3.9Hz,1H),5.10(dd,J＝13.1,7.1Hz,1H),4.73(m,2H),4.10(dd,J＝8.5,7.3Hz,2H),3.76(dd,J＝8.5,8.2Hz,2H),1.54-1.41(m,5H),1.23(m,J＝7.2Hz,2H)。LCMS(ES)(M+H)＝591.21。

实施例XCIX

(S)-4-(1-(1-(2-氟苯甲酰基)-6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(化合物105)

将(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸甲酯(387)(30mg，0.078mmol)溶解在THF(0.6ml)中并且冷却到0℃。添加Et₃N(32.8μl，0.235mmol)，继而添加2-氟苯甲酰氯(14.05μl，0.118mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。在反应完成后，用NaHCO₃溶液(5ml)淬灭它、用DCM(30ml)萃取、用盐水(5ml)洗涤。将有机层浓缩并且通过快速色谱法纯化，得到呈无色油状的化合物105(35.2mg，89％产率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.97(d,J＝8.8Hz,2H),7.60(d,J＝8.8Hz,1H),7.59-7.52(m,1H),7.43(d,J＝8.0Hz,2H),7.31(t,J＝6.4Hz,1H),7.18(t,J＝9.2Hz,1H),7.06(br s,1H),5.25(t,J＝7.2Hz,1H),4.56-4.50m,2H),4.37(t,J＝8.0Hz,2H),3.90(s,3H),1.54(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ES)(M+Na)＝527。

实施例C

遵循用于制备(S)-4-(1-(6-(三氟甲基)-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物1)或(S)-4-(1-(6-乙基-1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺基)乙基)苯甲酸(化合物59)的相似的程序，一般化合物结构F可以从合适的化合物A和化合物B，使用适当取代(R₈和R₉)的芳族或苄基卤化物和适当取代(R₄和R₅)的(杂)芳族酸衍生物或(杂)芳族酸前体或(杂)芳族四唑(在此，n＝0-1)来制备。需要注意的是，“(杂)芳族((hetero)aromatic)”表示在芳环中任选地具有一个或多个杂原子取代的芳族基团。

在一些实施方案中，可以选择取代基，其中R₁是-CH₃、-CF₃、-CH₂CH₃、或苯基；R₂是-H、或-CH₃；R₃是-H；或R₂和R₃一起与它们所连接的碳一起形成环丙基；R₄是-H、-F、或-CH₃；R₅是-C(O)OH、-C(O)OCH₃、-CH₂C(O)OH、环丙基、-C(O)NHCN、

其中R₆是苯基、-CH₃、环丙基、或

m是1-2；n是0-1；R₇是-H、-CH₃，或在n是0时不存在；R₈是-CF₃、-H、-Cl、-F、-CH₂CH₃、-OCH₃、-CH₃、或-OCF₃；R₉是-H、-Cl、或-CF₃；并且X₁和X₂这两者都是C，或一个是C而另一个是N。

实施例CI

遵循用于制备化合物F的相似的程序，一般化合物结构I可以从合适的化合物A和化合物B，使用适当取代(R₈和R₉)的杂芳族、芳族、苄基或杂苄基卤化物和适当取代(R₄和R₅)的杂芳族酸衍生物、芳族酸衍生物、杂芳族酸前体、芳族酸前体、芳族四唑、或杂芳族四唑(在此，n＝0-2)来制备。需要注意的是，在实施例CIII的反应方案中，“(杂)Ar”表示芳基或任选地，杂芳基。

在典型的实施方案中，R₁是-CF₃、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、氰基、芳基、芳氧基、氨基、C₁-C₆烷氨基、羰基、或苯基；R₂和R₃独立地选自-H、-CH₃、或-CH_3-zF_z，其中z是1至3；或R₂和R₃一起与它们所连接的碳一起形成环丙基或环丁基；R₄是-H、卤素、-CF₃、任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基、或C₁-C₃烷氧基；R₅是-C(O)OH、-C(O)OCH₃、-CH₂C(O)OH、环丙基、-C(O)NHCN、

其中R₆是苯基、-CH₃、环丙基、或

m是1-3；n是0-5；R₇是-H、-CH₃，或在n是0时不存在；

R₈和R₉独立地选自-H、-CF₃、卤素、氨基、OCH₃、任选地被一个或多个氟取代的C₁-C₆烷氧基、或C₁-C₆烷基，任选地被至少一个氟取代并且其中所述C₁-C₆烷基的至少一个碳任选地被O或N置换；并且(杂)Ar1和(杂)Ar2是芳基或任选地，杂芳基；其中R₁₀是任选地被一个或多个氟取代的C₁-C₃烷基，并且其中p是0-3。

实施例CII

除非另有说明，否则本文所述的实验中所用的试剂、细胞以及动物如下。

PGE₂和[³H]标记的PGE₂分别购自开曼化学品公司(Cayman Chemical)(密歇根州的安娜堡(Ann Arbor,MI))和珀金埃尔默公司(Perkin Elmer)(马萨诸塞州的沃尔瑟姆(Waltham,MA))。小鼠乳腺4T1细胞(CRL-2539)是从美国组织培养物保藏中心(AmericanTissue Culture Collection)获得的。SE302细胞系是含有在被激活时驱动胎盘样碱性磷酸酶(PLAP)分泌的cAMP响应元件(CRE)启动子的HEK293细胞的克隆。HEK293细胞表达内源性EP₄并且响应于PGE₂激动剂和EP₄激动剂，显示出对PLAP的诱导，但是不响应于EP1激动剂、EP2激动剂或EP3激动剂(Chen Q,Muramoto K,Masaaki N,Ding Y,Yang H,Mackey M,Li W,Inoue Y,Ackermann K,Shrota H,Matsumoto I,Spyvee M,Schiller S,Sumida T,Gusovsky F以及Lamphier M.A novel antagonist of the prostaglandinE2EP4receptor inhibits Th1differentiation and Th17expansion and is orallyactive in arthritis models(前列腺素E2EP4受体的新型拮抗剂抑制Th1分化和Th17扩增并且在关节炎模型中具有口服活性),British J Pharmacol,2010,160:292-310)。7周-8周大的BalB/C雌性小鼠购自杰克逊实验室公司(Jackson Laboratory)(缅因州的巴尔港(BarHarbor,ME))。将小鼠维持在无特定病原体条件下。

通过CRE-PLAP报告基因测定来测定EP₄拮抗作用：将SE302细胞维持在补充有10％FBS(Tissue Culture Biologicals公司)加上青霉素/链霉素的DMEM/F12(50:50)(MediaTech公司)中。当用于测定时，将细胞在无血清测定培养基(补充有0.1％BSA加上青霉素/链霉素的DMEM/F12)中以2×10⁴个细胞/100μL/孔平板接种到96孔板中并且孵育4小时-6小时。然后在存在或不存在各种浓度的测试化合物的情况下，用3ng/mL的PGE₂刺激细胞过夜，并且通过在新的96孔黑色板中将15μL的培养上清液与75μL的Lumi-phos(Lumigen公司)和60μL的在0.1mol/L碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液(pH 11)中含有8mmol/L的MgSO₄的测定缓冲液混合并且在室温孵育2小时来测量PLAP活性。使用Envision 2101多标记读数器(Multilabel Reader)来定量反映了上清液中PLAP的活性的发光强度。在PGE₂存在下从DMSO处理的样品获得的值被定义为对照的100％，而在不存在PGE₂的情况下从DMSO处理的样品获得的值被定义为对照的0％。化合物处理的样品相对于对照的％如下计算：(实际读数-对照的0％)/(对照的100％-对照的0％)×100。使用GraphPad Prism 6.02(加利福尼亚州的森林湖(Lake Forest,CA))以相对于对照值的％计算每一次单独的实验的IC₅₀值。

根据如上文所述的方法测定本发明的化合物，并且可以是单一测定值或多重测定平均值的IC₅₀值汇总于表1中。被标有“ABS”的化合物显示出绝对立体化学。

表1

实施例CV

竞争性放射性配体EP₄受体结合测定：所述测定使用来自密理博公司(Millipore)的使用Chem-1细胞的ChemiScreen重组人类EP₄受体膜制品以及来自金斯瑞公司(Genscript)的使用U2OS克隆的小鼠EP₄受体膜制品，根据制造商的说明书来进行。对于人类EP₄结合，在非结合96孔板中，在结合缓冲液(50mM HEPES(pH 7.4)、5mM MgCl₂、1mMCaCl₂、0.2％BSA)中将过表达人类EP₄cDNA的10μg Chem-1细胞膜与12nM[³H]-PGE₂和5μmol/L未标记的PGE₂或0.1％DMSO在存在或不存在各种浓度的测试化合物的情况下混合，并且在室温孵育2小时。对于小鼠EP₄结合，在相同的条件下使用60μg的U2OS膜。在过滤之前，将GF/C 96孔滤板用0.33％聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50mM HEPES(pH 7.4)、0.5％BSA洗涤。将结合反应物转移到滤板中，并且用测定洗涤缓冲液(50mM HEPES(pH7.4)、500mM NaCl、0.1％BSA)洗涤3次。将板干燥并且对放射性进行计数。使用PRISM软件处理数据，并且使用相同的软件计算IC₅₀值和Ki值。

化合物1与EP₄受体的竞争性结合：在体外进一步评价化合物1在放射性标记的PGE₂与过表达人类EP₄或小鼠EP₄的细胞膜级分的结合中的抑制活性。如图1A和图1B中所示，测试化合物以剂量依赖性方式抑制放射性标记的PGE₂与人类EP₄或小鼠EP₄的结合。抑制人类EP₄和小鼠EP₄的Ki值分别是4.2nM和26.3nM。

实施例CVI

体内抗肿瘤药理学：将4T1细胞在37℃和5％CO₂气氛下维持在补充有10％FBS的RPMI 1640培养基中。使用标准胰蛋白酶消化方法获得细胞分离，使用NC-200自动化细胞计数器定量细胞数和活力信息。通过在4℃超声处理15分钟将化合物1充分悬浮在0.5％甲基纤维素(MC)中，之后向动物经口施用(p.o.)。向BALB/c小鼠皮下(s.c.)注射活的1×10⁵个4T1细胞。小鼠在5天内产生约36mm³的肿瘤。将荷有4T1肿瘤的小鼠随机化并且对应(mapped)到各有10只小鼠的5组中：组A接受媒介物(0.5％MC)；组B接受0.1mg/kg的化合物1；组C接受1mg/kg的化合物1；组D接受25mg/kg的化合物1；并且组E接受150mg/kg的化合物1。所有处理都是每天p.o.给予一次，连续持续21天。每周两次测量肿瘤体积和体重。在肿瘤细胞注射之后27天终止研究。肿瘤体积被表示为平均值±SEM。通过单因素方差分析，继而通过图凯氏检验(Tukey's test)分析在第27天处理小鼠组之间的肿瘤体积差异。P≤0.05值被认为具有显著性。

体内抗肿瘤活性：如上文所述，使用小鼠乳腺4T1同系肿瘤模型研究化合物1在肿瘤生长中的活性。一般在0.1mg/kg-150mg/kg的范围内，每天经口施用化合物以剂量依赖性方式抑制肿瘤生长(图2A)。在所测试的两个较低的剂量(0.1mg/kg和1.0mg/kg)，观测到一定的抑制作用，但是没有统计显著性。另一方面，对于25mg/kg和150mg/kg的剂量检测到显著的和相当的抗肿瘤活性，这表明在实验环境中，最佳的有效剂量通过25mg/kg来达到。所测试的剂量均没有显示出根据动物体重和整体动物行为所判断的总体毒性(图2B)，这表明在所测试的动物物种中的优良耐受性。

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