CN107636010A - 酰化胰高血糖素类似物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了用于治疗肥胖和超重、糖尿病及其他相关代谢疾病的材料和方法。特别地，本发明提供了在这样的方法中有效的新的酰化胰高血糖素类似物肽。所述肽可通过具有与人胰高血糖素相比提高的对GLP‑1受体的选择性来介导其作用。

Description

酰化胰高血糖素类似物
技术领域
本发明涉及酰化胰高血糖素类似物及其例如在治疗肥胖和超重、糖尿病及其他代谢疾病中的医疗用途。
背景技术
前胰高血糖素原(pre-proglucagon)是158个氨基酸的前体多肽，其在组织中被差异性加工而形成大量结构上相关的胰高血糖素原衍生肽，包括胰高血糖素(glucagon，Glu)、胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1，GLP-1)、胰高血糖素样肽-2(glucagon-like peptide-2，GLP-2)和胃泌酸调节素(oxyntomodulin，OXM)。这些分子参与广泛的多种生理功能，包括葡萄糖内稳态、胰岛素分泌、胃排空和肠生长，以及食物摄取调节。
胰高血糖素是29个氨基酸的肽，其对应于前胰高血糖素原的53位至81位氨基酸。胃泌酸调节素(OXM)是37个氨基酸的肽，其包含胰高血糖素的全部29个氨基酸序列和八肽羧基端延伸(前胰高血糖素原的82位至89位氨基酸，被称为“间插肽1(interveningpeptide 1)”或IP-1)。GLP-1的主要生物学活性片段以30个氨基酸产生，其是对应于前胰高血糖素原的98位至127位氨基酸的C端酰胺化肽。
胰高血糖素帮助维持血液中的葡萄糖水平，这通过与肝细胞上的胰高血糖素受体结合并经由糖原分解而使肝释放以糖原形式储存的葡萄糖来实现。随着这些储存的耗尽，胰高血糖素刺激肝通过糖异生作用合成额外的葡萄糖。这些葡萄糖释放到血液中，从而防止发生低血糖。
GLP-1通过提高葡萄糖刺激的胰岛素分泌来降低升高的血糖水平，并且主要通过降低食物摄取来促进体重减轻。
OXM响应于食物摄入并且与膳食的卡路里含量成比例地释放到血液中。已显示OXM在人中抑制食欲并抑制食物摄取(Cohen等，Journal of Endocrinology and Metabolism，88，4696-4701，2003；WO 2003/022304)。除与GLP-1类似的那些食欲抑制作用以外，OXM还必定通过另外的机制来影响体重，因为经胃泌酸调节素处理的大鼠与经对饲(pair-fed)的大鼠相比显示出更低的体重增长(Bloom，Endocrinology 2004，145，2687)。用OXM处理肥胖的啮齿类动物还提高其葡萄糖耐量(Parlevliet等，Am J Physiol Endocrinol Metab，294，E142-7，2008)并抑制体重增长(WO2003/022304)。
OXM活化胰高血糖素受体和GLP-1受体二者，其对于胰高血糖素受体具有比GLP-1受体高两倍的效力，但是比天然胰高血糖素和GLP-1对于其各自受体的效力低。人胰高血糖素也能够活化这两种受体，但对胰高血糖素受体比GLP-1受体有更强的偏好。另一方面，GLP-1不能活化胰高血糖素受体。胃泌酸调节素的作用机制还不是很清楚。特别是不知道该激素的一些肝外作用是通过GLP-1受体和胰高血糖素受体介导，还是通过一种或更多种尚未鉴定出的受体介导。
已显示，另一些肽结合并活化胰高血糖素受体和GLP-1受体二者(Hjort等，Journal of Biological Chemistry，269，30121-30124，1994)，并且抑制体重增长和减少食物摄取(参见，例如WO 2006/134340、WO2007/100535、WO 2008/10101、WO 2008/152403、WO 2009/155257、WO2009/155258、WO2010/070252、WO2010/070253、WO2010/070255、WO2010/070251、WO2011/006497、WO2011/160630、WO2011/160633、WO2013/092703、WO2014/041195、PCT/EP2014/072294和PCT/EP2014/072293)。
肥胖是日益增多的全球性健康问题，其与多种疾病相关，特别是心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)、2型糖尿病、阻塞性睡眠呼吸暂停、某些类型的癌症和骨关节炎。因此，已发现肥胖降低预期寿命。根据世界卫生组织(World HealthOrganization)的2005预测，全世界有4亿成人(年龄＞15)被归类为肥胖。在美国，目前认为肥胖是仅次于吸烟的可预防性死亡(preventable death)的第二主要原因。
肥胖的增多驱使糖尿病增多，并且约90％患有2型糖尿病的人可被归类为肥胖。全世界有2.46亿人患有糖尿病，到2025年，估计将会有3.8亿人患糖尿病。许多人还有另外的心血管风险因素，包括高/异常LDL和甘油三酯以及低HDL。
发明内容
本发明提供了具有下式的化合物，或者其可药用盐或溶剂合物：
R1-H-Aib-QGTFTSDYSKYLDERAAKDFIEWLE-K([17-羧基-十七烷酰基]-异Glu-GSGSGG)-A-R2
其中
R1是H(氢)、C1-4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；并且
R2是OH或NH2。
所述化合物可以是：
H-H-Aib-QGTFTSDYSKYLDERAAKDFIEWLE-K([17-羧基-十七烷酰基]-异Glu-GSGSGG)-A-NH2。
本发明的化合物可被认为是胰高血糖素类似物。除非上下文另有要求，否则本文中提及胰高血糖素类似物肽应当解释为提及本发明的化合物。
除非上下文另外说明或排除，否则提及本发明的化合物时应认为包括其任何可药用盐(例如，乙酸盐或氯化物盐)或溶剂合物。
本发明提供了组合物，其包含与载体混合的本文中限定的本发明化合物(包括其可药用盐或溶剂合物，如已经描述的)。在一些优选实施方案中，所述组合物是药物组合物并且所述载体是可药用载体。所述组合物可以是可药用盐的形式。
本文中描述的化合物尤其可用于预防体重增长或促进体重减轻。“预防”意指与不进行治疗相比抑制或降低体重增长但不一定意味着暗示体重增长完全停止。所述肽可引起食物摄入减少和/或能量消耗增加，导致可观察到的对体重的作用。不依赖于其对体重的作用，本发明的化合物可对葡萄糖控制和/或循环胆固醇水平具有有益作用，能够降低循环LDL水平和提高HDL/LDL比值。因此，本发明的化合物可用于由体重超重引起或以其为特征的任何病症的直接或间接治疗，例如治疗和/或预防肥胖、病态肥胖、肥胖相关炎症、肥胖相关胆囊疾病、肥胖诱发的睡眠呼吸暂停。其还可用于改善血糖控制或者用于预防或治疗由以下引起或以其为特征的病症：葡萄糖控制不当或血脂异常(dyslipodaemia)(例如，升高的LDL水平或降低的HDL/LDL比值)、糖尿病(尤其是2型糖尿病)、代谢综合征、高血压、致动脉粥样化血脂异常、动脉粥样硬化、动脉硬化、冠心病、外周动脉疾病、卒中或微血管疾病。本发明化合物对这些疾病的作用可归因于其对体重的作用或与所述作用相关，或者可不依赖于所述作用。
本发明还提供了本发明化合物，其用于医学治疗方法，特别用于治疗上述病症的方法。
本发明还提供了本发明的化合物在制备用于治疗上述病症的药物中的用途。
本发明的化合物可作为联合治疗的一部分与用于治疗糖尿病、肥胖、血脂异常或高血压的药剂一起施用。
在这样的情况下，两种活性剂可一起或分开给予，并且可作为同一药物制剂的一部分或作为分开的制剂来给与。
因此，本发明的化合物可与抗糖尿病剂组合使用，所述抗糖尿病剂包括但不限于：双胍类(例如，二甲双胍)、磺酰脲类、美格列奈类(meglitinide)或格列奈类(例如，那格列奈)、DPP-IV抑制剂、SGLT2抑制剂、格列酮类、GLP-1受体激动剂、SGLT2抑制剂(即钠-葡萄糖转运抑制剂，例如格列净类(gliflozin)，如恩格列净(empagliflozin)、卡格列净(canagliflozin)、达格列净(dapagliflozin)或伊格列净(ipragliflozin))、GPR40激动剂(FFAR1/FFA1激动剂，例如fasiglifam)、或者胰岛素或胰岛素类似物。
所述化合物还可与抗肥胖剂组合使用，所述抗肥胖剂包括但不限于：GLP-1受体激动剂、肽YY或其类似物、神经肽Y(neuropeptide Y，NPY)或其类似物、大麻素受体1拮抗剂(cannabinoid receptor 1antagonist)、脂肪酶抑制剂、人前胰岛肽(Human proIsletPeptide，HIP)、黑皮质素受体4激动剂(melanocortin receptor 4 agonist)、黑色素浓集激素受体1拮抗剂(melanin concentrating hormone receptor 1 antagonist)、芬特明(phentermine)(单独或与托吡酯组合)、去甲肾上腺素/多巴胺再摄取抑制剂与阿片样受体拮抗剂的组合(例如，安非他酮和纳曲酮的组合)、OrlistatTM、SibutramineTM、CCK、胰淀素(amylin)、普兰林肽和瘦素及其类似物、或血清素能剂(serotonergic agent)(例如，氯卡色林(lorcaserin))。
所述化合物还可与抗高血压剂组合使用，所述抗高血压剂包括但不限于：血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素II受体阻断剂、利尿剂、β-阻断剂或钙通道阻断剂。
所述化合物可与抗血脂异常剂组合使用，所述抗血脂异常剂包括但不限于：他汀类、贝特类(fibrate)、烟酸类、PSCK9(前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型，proprotein convertase subtilisin/kexin type 9)抑制剂和/或胆固醇吸收抑制剂。
因此，本发明还提供了包含本发明化合物和例如上述抗糖尿病剂、抗肥胖剂、抗高血压剂或抗血脂异常剂的组合物或治疗性药盒(therapeutic kit)。还提供了这样的组合物或治疗性药盒，其用于医学治疗方法，特别用于治疗上述病症的方法。
本发明的化合物还可通过合成化学来制备。因此，本发明提供了合成本发明化合物的方法。
本发明也可通过重组和合成方法的组合来制备。所述方法可包括表达前体肽序列，任选地纯化由此产生的化合物，以及添加或修饰一个或更多个氨基酸以产生本发明的化合物。修饰步骤可包括引入Aib残基(例如，通过前体残基的修饰)，在残基28的侧链处引入取代基[17-羧基-十七烷酰基]-异Glu-GSGSGG，和/或修饰一个或两个末端基团R1和R2，例如，通过在游离C端处引入酰胺基团R2。
所述前体肽可在包含编码所述前体肽之核酸的细胞或无细胞表达系统中由这样的核酸表达。
具体实施方式
在整个说明书中，使用天然存在氨基酸的常规单字母和三字母代码以及其他氨基酸的被普遍接受的缩写，包括Aib(α-氨基异丁酸)。
胰高血糖素是29个氨基酸的肽，其对应于前胰高血糖素原的第53至81位氨基酸并且具有序列His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr.。胃泌酸调节素(OXM)是37个氨基酸的肽，其包含胰高血糖素的全部29个氨基酸序列和八肽羧基端延伸(前胰高血糖素原的第82至89位氨基酸，具有序列Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala，并且被称为“间插肽1”或IP-1)；因此人胃泌酸调节素的全长序列是His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala)。GLP-1的主要生物学活性片段以30个氨基酸产生，其是对应于前胰高血糖素原的第98至127位氨基酸的C端酰胺化肽。
因此，术语“天然胰高血糖素”指具有以下序列的天然人胰高血糖素：H-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-OH。
在本发明化合物的线性序列内的氨基酸可以被认为是在常规N端至C端方向上从1至29连续编号的。提及“位置”应相应地解释为提及天然人胰高血糖素和其他分子内的位置。
28位处的残基是赖氨酸残基(Lys)，其通过酰胺键经由其ε氨基与亲脂性取代基缀合。不希望受到任何特定理论的束缚，认为取代基与血流中的血浆蛋白(例如白蛋白)结合，从而保护本发明的化合物不被酶促降解，并因此提高所述化合物的半衰期。其还可调节化合物例如针对胰高血糖素受体和/或GLP-1受体的效力。
所述取代基具有以下结构：
在本文中取代基由速记符号[17-羧基-十七烷酰基]-异Glu-GSGSGG表示。这表明其从命名上可以被认为是由17-羧基-十七烷酰基单元和具有序列甘氨酸-丝氨酸-甘氨酸-丝氨酸-甘氨酸-甘氨酸的六肽间隔区构成，其通过“异(iso)”构型的谷氨酸残基连接(即，经由其α氨基与17-羧基-十七烷酰基单元连接且经由其γ羧基与所述六肽间隔区的N末端连接)。
认为在脂肪链的末端存在酸基团提高化合物的药代动力学特性，例如，通过增加半衰期和/或平均停留时间并降低清除率。接头还可有助于这些药代动力学特性。包含多于一个氨基酸单元的接头(或者类似大小的部分)与仅由一个氨基酸单元组成的接头等相比可改善药代动力学特性。这些特性可使得化合物能够以低于具有相同肽骨架但未经修饰或经不同修饰(例如，具有缺少极性基团和/或具有更短接头部分的脂肪族脂肪链的取代基)的等同化合物的频率施用。
在此使用术语“缀合”来描述一个可识别化学部分与另一个可识别化学部分的物理连接，以及这样的部分之间的结构关系。其不应被认为是暗示任何特定的合成方法。
技术人员读者将充分了解可用于使用例如“Comprehensive OrganicTransformations，A Guide to Functional Group Preparations”，第2版，Larock，R.C；Wiley-VCH：New York，1999中列出的一般性合成方法进行偶联反应的合适技术。这样的转化可发生在合成过程中的任何合适阶段。
肽合成
本发明的化合物可通过标准合成方法、重组表达系统或任何其他现有技术方法制造。因此，胰高血糖素类似物可以以多种方式合成，包括例如包括以下的方法：
(a)通过固相或液相方法逐步或通过片段组装来合成肽，并分离和纯化最终肽产物；或者
(b)由编码前体肽的核酸构建体表达所述前体肽序列，回收表达产物，并修饰所述前体肽以产生本发明的化合物。
表达通常由编码所述前体肽的核酸进行，所述表达可在包含这样的核酸的细胞或无细胞表达系统中进行。
优选通过固相或液相肽合成来合成本发明的类似物。在这方面，参考WO 98/11125，尤其是在Synthetic Peptides(第2版)中的Fields，GB等，2002，“Principles andpractice of solid-phase peptide synthesis”，以及本文中的实施例。
对于重组表达，通常将编码前体肽的核酸片段插入到合适的载体中以形成克隆或表达载体。根据应用目的和类型，载体可以是质粒、噬菌体、黏粒、微型染色体或病毒的形式，而且仅在某些细胞中瞬时表达的裸DNA也是重要的载体。优选的克隆和表达载体(质粒载体)能够自主复制，从而能够产生用于高水平表达或用于后续克隆的高水平复制的高拷贝数。
总体上，表达载体包含5’→3’方向上的且有效连接的以下特征：用于驱动核酸片段表达的启动子，任选编码能进行分泌(分泌到胞外相或适当时分泌到周质(periplasma)中)的前导肽的核酸序列，编码前体肽的核酸片段以及任选编码终止子的核酸序列。它们可包含另外的特征，例如可选择标志物和复制起点。当对生产菌株或细胞系中的表达载体进行操作时，优选所述载体能够整合到宿主细胞基因组中。技术人员对合适的载体非常熟悉，并且能够根据其特定要求来设计载体。
本发明的载体用于转化宿主细胞以产生前体肽。这样的经转化细胞可以是用于扩增核酸片段和载体，和/或用于重组产生所述前体肽的培养细胞或细胞系。
优选的经转化细胞是微生物，例如细菌(例如以下物种：埃希氏菌属(Escherichia)(例如大肠杆菌(E.coli))、芽孢杆菌属(Bacillus)(例如枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis))、沙门氏菌属(Salmonella)或分支杆菌属(Mycobacterium)(优选非致病性的，例如牛分枝杆菌(M.bovis)BCG))、酵母(例如，酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)和巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris))和原生动物。或者，经转化细胞可来源于多细胞生物，即，其可为真菌细胞、昆虫细胞、藻类细胞、植物细胞或动物细胞例如哺乳动物细胞。为了克隆和/或优化表达的目的，优选经转化细胞能够复制本发明的核酸片段。表达所述核酸片段的细胞可以用于小规模或大规模制备本发明的肽。
当通过经转化细胞来产生前体肽时，将表达产物分泌到培养基中是方便的，尽管并不必要。
效力
相关化合物与GLP-1或胰高血糖素(Glu)受体的结合可用作激动剂活性的指示，但通常优选使用生物学测定，其测量由化合物与相关受体的结合引起的细胞内信号传导。例如，通过胰高血糖素激动剂活化胰高血糖素受体将刺激细胞环AMP(cAMP)形成。类似地，通过GLP-1激动剂活化GLP-1受体将刺激细胞cAMP形成。因此，在表达这两种受体中的一种的合适细胞中产生cAMP可以用于监测相关受体活性。因此，可使用合适的细胞类型对(每种表达一种受体而不表达另一种受体)来确定针对这两种类型受体的激动剂活性。
技术人员将知晓合适的测定方式，并在下文中提供了实例。GLP-1受体和/或胰高血糖素受体可具有如实施例中描述的受体序列。例如，测定可采用具有原始登录号GI：4503947的人胰高血糖素受体(胰高血糖素-R)和/或具有原始登录号GI：166795283的人胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)。(在提及前体蛋白的序列的情况下，显然应该理解的是，测定可使用缺少信号序列的成熟蛋白质)。
EC50值可用作激动剂对给定受体效力的数值量度。EC50值是在特定测定中达到化合物最大活性的一半所需的化合物浓度的量度。因此，例如，在特定测定中，EC50[GLP-1]低于胰高血糖素的EC50[GLP-1]的化合物可被认为是与胰高血糖素相比具有更高的GLP-1受体激动剂效力。
在本说明书中描述的化合物通常是GluGLP-1双重激动剂，如其对于胰高血糖素受体和GLP-1受体二者均能够刺激cAMP形成的观察结果所确定的。每种受体的刺激可以在独立测定中进行测量，然后彼此进行比较。
通过将给定化合物对GLP-1受体的EC50值(EC50[GLP-1-R])与对胰高血糖素受体的EC50值(EC50[胰高血糖素R])相比较，可如下计算相对GLP-1R选择性：
相对GLP-1R选择性[化合物]＝(EC50[GLP-1R])/(EC50[胰高血糖素-R])。
术语“EC50”代表通常对特定受体或者用于受体功能的特定标志物的水平的半数最大有效浓度，并且根据特定的生物化学环境，可以指抑制或拮抗活性。
不希望受到任何特定理论的束缚，化合物的相对选择性可允许直接比较其对GLP-1或胰高血糖素受体的作用与其对其他受体的作用。例如，化合物的相对GLP-1选择性越高，与胰高血糖素受体相比，化合物对GLP-1受体可越有效。通常，将来自同一物种的胰高血糖素受体和GLP-1受体(例如人胰高血糖素受体和GLP-1受体，或者鼠胰高血糖素受体和GLP-1受体)的结果进行比较。
对于特定的胰高血糖素-R激动剂活性水平，本发明的化合物可具有比人胰高血糖素更高的相对GLP-1R选择性，所述化合物可显示出比胰高血糖素更高水平的GLP-1R激动剂活性(即，对GLP-1受体效力更大)。应当理解，只要实现合适的相对GLP-1R选择性，则特定化合物对胰高血糖素受体和GLP-1受体的绝对效力可高于、低于、或约等于天然人胰高血糖素的绝对效力。
然而，本发明的化合物可具有比人胰高血糖素更低的EC50[GLP-1R]。所述化合物可具有比胰高血糖素更低的EC50[GLP-1-R]，同时保持其EC50[胰高血糖素-R]与人胰高血糖素的EC50[胰高血糖素-R]相比高小于100倍、高小于50倍，或高小于10倍。
本发明化合物的EC50[胰高血糖素-R]可小于人胰高血糖素的EC50[胰高血糖素-R]的100倍。所述化合物的EC50[胰高血糖素-R]可小于人胰高血糖素的EC50[胰高血糖素-R]的100倍(例如，小于50倍)，并且其EC50[GLP-1R]小于人胰高血糖素的EC50[GLP-1R]的一半，小于人胰高血糖素的EC50[GLP-1R]的五分之一，小于人胰高血糖素的EC50[GLP-1R]的十分之一，或者小于人胰高血糖素的EC50[GLP-1R]的百分之一，例如为胰高血糖素的EC50[GLP-1R]的0.01倍至0.1倍，例如为人胰高血糖素的EC50[GLP-1R]的0.01倍至0.05倍。
所述化合物的相对GLP-1R选择性可为0.05至20。例如，所述化合物的相对选择性可为0.05-0.20、0.1-0.30、0.2-0.5、0.3-0.7或0.5-1.0；1.0-2.0、1.5-3.0、2.0-4.0或2.5-5.0；或者0.05-20、0.075-15、0.1-10、0.15-5、0.75-2.5或0.9-1.1。
在某些实施方案中，可期望任何给定化合物对胰高血糖素-R或GLP-1R(例如，对人胰高血糖素或GLP-1受体)的EC50应小于1nM。特别地，可期望对GLP-1R(例如，对人GLP-1受体)的EC50应小于1nM。
治疗用途
如下文中所讨论的，本发明的化合物可为尤其是肥胖和代谢疾病(包括糖尿病)提供有吸引力的治疗和/或预防选择。
糖尿病包括一组代谢疾病，其特征是由胰岛素分泌、胰岛素作用的缺陷或这两者导致的高血糖。糖尿病的急性病征包括尿产生过多、所导致的补偿性口渴和流体摄入增多、视力模糊、不明原因的体重减轻、嗜睡和能量代谢改变。糖尿病的长期高血糖与多种器官(特别是眼、肾、神经、心脏和血管)的长期损伤、功能紊乱和衰竭有关。基于致病特征将糖尿病分为1型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病。
1型糖尿病占所有糖尿病病例的5％至10％，其由分泌胰岛素的胰腺β细胞的自身免疫性破坏引起。
2型糖尿病占糖尿病病例的90％至95％，其由一系列复杂代谢紊乱引起。2型糖尿病是内源性胰岛素产生不足以维持血浆葡萄糖水平低于诊断阈值的结果。
妊娠糖尿病指在妊娠期间鉴定出的任何程度的葡萄糖不耐受。
前驱糖尿病包括空腹葡萄糖受损和葡萄糖耐量受损，并且是指当血糖水平升高但仍低于确立的糖尿病临床诊断水平时发生的那些状态。
由于额外的代谢风险因素的高度流行，一大部分2型糖尿病和前驱糖尿病的患者的发病和死亡风险升高，所述代谢风险因素包括：腹部肥胖(腹部内部器官周围脂肪组织过多)、致动脉粥样化血脂异常(血脂肪紊乱，包括高甘油三酯、低HDL胆固醇和/或高LDL胆固醇，其促使斑块在动脉壁中积聚))、血压升高(高血压)、血栓前状态(例如，血液中高纤维蛋白原或纤溶酶原活化物抑制剂1)和促炎性状态(例如，血液中C反应蛋白升高)。
相反地，肥胖导致前驱糖尿病、2型糖尿病以及例如某些类型的癌症、阻塞性睡眠呼吸暂停和胆囊疾病的发病风险升高。
血脂异常与心血管疾病的风险升高有关。由于血浆HDL浓度与动脉粥样硬化性疾病风险之间存在负相关性，故高密度脂蛋白(High Density Lipoprotein，HDL)具有临床重要性。存储在动脉粥样硬化斑块中的大多数胆固醇来源于LDL，并因此浓度提高的低密度脂蛋白(Low Density Lipoproteins，LDL)与动脉粥样硬化密切相关。HDL/LDL比值是动脉粥样硬化(特别是冠状动脉粥样硬化)的临床风险指标。
代谢综合征的特征在于个体中的一组代谢风险因素。其包括腹部肥胖(腹部内部器官周围脂肪组织过多)、致动脉粥样化血脂异常(血脂紊乱，包括高甘油三酯、低HDL胆固醇和/或高LDL胆固醇，其促使斑块在动脉壁中积聚)、血压升高(高血压)、胰岛素抗性和葡萄糖不耐受、血栓前状态(例如，血液中高纤维蛋白原或纤溶酶原活化物抑制剂1)和促炎性状态(例如，血液中C反应蛋白升高)。
患有代谢综合征的个体患冠心病以及与动脉硬化的其他表现相关的其他疾病(例如，卒中和外周血管疾病)的风险提高。该综合征的主要潜在风险因素似乎是腹部肥胖。
不希望受到任何特定理论的束缚，认为本发明的化合物充当人胰高血糖素受体和人GLP-1受体的双重激动剂，在此缩写为双重GluGLP-1激动剂。所述双重激动剂可将胰高血糖素对例如脂肪代谢的作用与GLP-1对例如血糖水平和食物摄入的作用组合。因此，其可加速消除过多脂肪组织，诱导可持续的体重减轻以及改善血糖控制。双重GluGLP-1激动剂还可降低心血管风险因素，例如高胆固醇、高LDL-胆固醇或低HDL/LDL胆固醇比值。
因此，本发明的化合物可作为药剂用于在有此需要的对象中预防体重增长、促进体重减轻、减轻体重过重或治疗肥胖(例如，通过控制食欲、进食、食物摄入、卡路里摄入和/或能量消耗)，包括病态肥胖以及相关疾病和健康状况，包括但不限于肥胖相关炎症、肥胖相关胆囊疾病和肥胖诱发的睡眠呼吸暂停。
所述化合物可用于在患有特征在于食欲控制不足或进食过多的病症(例如暴食症(binge-eating disorder)和普拉德-威利综合征(Prader-Willi syndrome))的对象中促进体重减轻或预防体重增长。
所述化合物可用于在患有相关病症或风险因素(例如糖尿病、血脂异常、高血压和睡眠呼吸暂停)的对象中促进体重减轻或预防体重增长。
本发明的化合物还可用于在有此需要的对象中改善血糖控制和预防或治疗由葡萄糖控制受损引起或与之相关的病症，包括代谢综合征、胰岛素抗性、葡萄糖不耐受、前驱糖尿病、空腹葡萄糖升高、2型糖尿病、高血压、动脉粥样硬化、动脉硬化、冠心病、外周动脉疾病和卒中。这些病症中的一些可与肥胖相关。然而，本发明的化合物对这些病症的作用可全部或部分地通过对体重的作用来介导，或者可不依赖于对体重的作用。
双重GluGLP-1激动剂的协同作用也可导致心血管风险因素(例如高胆固醇和LDL)降低，这可完全不依赖于其对体重的作用。
因此，本发明提供了本发明的化合物在有此需要的个体中治疗如上所述病症的用途。
本发明还提供了本发明的化合物，其用于医学治疗方法，特别是用于如上所述病症的治疗方法。
本发明还提供了本发明的化合物在制备用于治疗如上所述病症的方法的药物中的用途。
在一个优选的方面，所描述的化合物可用于治疗糖尿病，尤其是2型糖尿病。
在一个具体的实施方案中，本发明包括化合物用于在有此需要的个体中治疗糖尿病(尤其是2型糖尿病)的用途。
在一个同样优选的方面，所描述的化合物可用于预防体重增长或促进体重减轻。
在一个具体的实施方案中，本发明包括化合物在有此需要的个体中预防体重增长或促进体重减轻的用途。
在一个具体的实施方案中，本发明包括化合物在治疗由体重超重引起或以其为特征的病症的方法中的用途，例如在有此需要的个体中治疗和/或预防肥胖、病态肥胖、术前病态肥胖、肥胖相关炎症、肥胖相关胆囊疾病、肥胖诱发的睡眠呼吸暂停、前驱糖尿病、糖尿病(尤其是2型糖尿病)、高血压、致动脉粥样化血脂异常、动脉粥样硬化、动脉硬化、冠心病、外周动脉疾病、卒中或微血管疾病。
在另一个方面，所描述的化合物可用于降低循环LDL水平和/或提高HDL/LDL比值的方法中。
在一个具体的实施方案中，本发明包括化合物在有此需要的个体中降低循环LDL水平和/或提高HDL/LDL比值的方法中的用途。
在另一个方面，所描述的化合物可用于降低循环甘油三酯水平的方法中。
药物组合物
本发明的化合物可配制成准备用于储存或施用的药物组合物。这样的组合物通常包含可药用载体中合适形式的治疗有效量的本发明化合物。
本发明化合物的治疗有效量将取决于施用途径、被治疗的哺乳动物的类型和所考虑的具体哺乳动物的身体特征。确定此量的这些因素及其关系是医学领域技术人员公知的。可调整该量和施用方法以实现最佳效力，并且可取决于医学领域技术人员公知的因素，例如体重、饮食、同时用药及其他因素。最适合于人使用的剂量大小和给药方案可由通过本发明所获得的结果来指导，并且可在适当设计的临床试验中加以确认。本发明的化合物可特别用于治疗人。
有效剂量和治疗方案可通过常规方法来确定，在实验室动物中从低剂量开始，然后在提高剂量的同时监测效果，并且还系统地改变给药方案。当为给定对象确定最佳剂量时，临床医生会考虑到许多因素。这样的考虑是技术人员已知的。
术语“可药用载体”包括任何标准药物载体。用于治疗用途的可药用载体是制药领域公知的，并且描述于例如Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack PublishingCo.(A.R.Gennaro编辑.1985)中。例如，可使用微酸性或生理pH的无菌盐水和磷酸盐缓冲盐水。pH缓冲剂可为磷酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷(TRIS)、N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸(TAPS)、碳酸氢铵、二乙醇胺、组氨酸(其是优选的缓冲剂)、精氨酸、赖氨酸或乙酸盐、或其混合物。该术语还涵盖在美国药典中列出的用于动物(包括人)的任何药剂。
术语“可药用盐”是指任一种本发明化合物的盐。盐包括可药用盐，例如酸加成盐和碱式盐。酸加成盐的实例包括盐酸盐、柠檬酸盐和乙酸盐。碱式盐的实例包括其中阳离子选自碱金属(例如钠和钾)、碱土金属(例如钙)和铵离子+N(R3)3(R4)的盐，其中R3和R4独立地表示任选地经取代的C1-6烷基、任选地经取代的C2-6烯基、任选地经取代的芳基或任选地经取代的杂芳基。在“Remington’s Pharmaceutical Sciences”，第17版.Alfonso R.Gennaro(编辑)，Mark Publishing Company，Easton，PA，U.S.A.，1985年和更近的版本以及Encyclopaedia of Pharmaceutical Technology中描述了可药用盐的另一些实例。
“治疗”是用于获得有益或期望的临床结果的方法。对于本发明的目的而言，有益或期望的临床结果包括但不限于缓和症状、减轻疾病程度、稳定(即，不恶化)疾病状态、延迟或减缓疾病进展、改善或减轻疾病状态以及缓解(无论是部分还是全部)，无论是可检测的还是不可检测的。“治疗”还可以意指与不接受治疗的预期存活相比延长存活。“治疗”是以防止病症发生或改变病症的病理状况为目的而进行的介入。因此，在某些实施方案中，“治疗”是指治疗性处理和预防性或防范性措施。需要治疗的对象包括已患有病症的对象和待预防病症发生的对象。治疗意指与未治疗相比时抑制或减轻病理状况或症状(例如，体重增长、高血糖)的增加，并且不必然地意味着暗示相关病症的完全终止。
药物组合物可以是单位剂型。在这样的形式中，组合物被分成含有合适量的活性组分的单位剂量。单位剂型可以是经包装的制剂，所述包装包含分离量的制剂，例如，包装的片剂、胶囊剂以及小瓶或安瓿中的粉末。单位剂型本身也可以是胶囊剂、扁囊剂(cachet)或片剂，或者其可以是合适数量的任何这些包装形式。其可以以单剂量可注射形式提供，例如以笔(pen)的形式。在某些实施方案中，包装形式包括带有使用说明书的标签或插页。组合物可被配制成用于任何合适的施用途径和方法。可药用载体或稀释剂包括适于经口、经直肠、经鼻、表面(包括口含和舌下)、经阴道或肠胃外(包括皮下、肌肉、静脉内、皮内和经皮)施用的制剂中使用的那些。制剂可方便地以单位剂型存在，并且可通过药学领域中公知的任何方法来制备。
皮下或经皮的施用方式可特别适于本文中所描述的化合物。
通过例如共价、疏水和静电相互作用，本发明的组合物可进一步配混在药物载体、药物递送系统和高级药物递送系统中或与其附着，以进一步提高化合物的稳定性、提高生物利用度、提高溶解度、降低不良作用、实现本领域技术人员公知的时间治疗(chronotherapy)，以及提高患者依从性、或其任意组合。载体、药物递送系统和高级药物递送系统的实例包括但不限于：聚合物，例如纤维素及衍生物；多糖，例如，葡聚糖及衍生物、淀粉及衍生物；聚(乙烯醇)、丙烯酸和甲基丙烯酸聚合物、聚乳酸和聚乙醇酸及其嵌段共聚物、聚乙二醇；载体蛋白，例如白蛋白；凝胶，例如热凝胶化系统，例如本领域技术人员公知的嵌段共聚物系统；胶束、脂质体、微球、纳米颗粒、液晶及其分散体；脂质-水系统的相行为领域中技术人员公知的L2相及其分散体；聚合物胶束、复合乳剂、自乳化剂、自微乳化剂、环糊精及其衍生物，以及树状聚合物。
联合治疗
本发明的化合物或组合物可作为联合治疗的一部分与用于治疗肥胖、高血压、血脂异常或糖尿病的药剂一起施用。
在这种情况下，两种活性药剂可作为同一药物制剂的一部分或作为单独的制剂一起或分开给予。
因此，本发明的化合物或组合物还可以与抗肥胖剂组合使用，所述抗肥胖剂包括但不限于：GLP-1(胰高血糖素样肽1)受体激动剂(例如，如下所述)、肽YY或其类似物、神经肽Y(NPY)或其类似物、大麻素受体1拮抗剂、脂肪酶抑制剂、人前胰岛肽(HIP)、黑皮质素受体4激动剂、黑色素浓集激素受体1拮抗剂、芬特明(单独或与托吡酯组合)、去甲肾上腺素/多巴胺再摄取抑制剂与阿片样受体拮抗剂的组合(例如，安非他酮和纳曲酮的组合)、OrlistatTM、SibutramineTM、CCK、胰淀素、普兰林肽和瘦素，以及其类似物、或血清素能剂(例如氯卡色林)。
本发明的化合物或组合物可以与抗高血压剂组合使用，所述抗高血压剂包括但不限于：血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素II受体阻断剂、利尿剂、β-阻断剂或钙通道阻断剂。
本发明的化合物或组合物可以与血脂异常剂组合使用，所述血脂异常剂包括但不限于：他汀类、贝特类、烟酸类、PSCK9(前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型)抑制剂和/或胆固醇吸收抑制剂。
另外，本发明的化合物或组合物可以与抗糖尿病剂组合使用，所述抗糖尿病剂包括但不限于：双胍类(例如二甲双胍)、磺酰脲类、美格列奈类或格列奈类(例如那格列奈)、DPP-IV抑制剂、SGLT2抑制剂、格列酮类、GLP-1受体激动剂(其与本发明的化合物不同)、SGLT2抑制剂(即钠-葡萄糖转运抑制剂，例如格列净类，如恩格列净、卡格列净、达格列净或伊格列净)、GPR40激动剂(FFAR1/FFA1激动剂，例如fasiglifam)、或者胰岛素或胰岛素类似物。
GLP-1受体激动剂的实例包括GLP-1和GLP-1类似物、毒蜥外泌肽-4(exendin-4)和毒蜥外泌肽-4类似物、利拉鲁肽(liraglutide)(SaxendaTM、VictozaTM)、艾塞那肽(exenatide)(ByettaTM和BydureonTM)、Byetta LARTM、利西那肽(lixisenatide)(LyxumiaTM)、度拉糖肽(Dulaglutide)和阿必鲁肽(Albiglutide)。
胰岛素类似物的实例包括但不限于：LantusTM、NovorapidTM、HumalogTM、NovomixTM、ActraphaneTM HM、LevemirTM DegludecTM和ApidraTM。
实施例
实施例1：胰高血糖素类似物的一般性合成
在微波辅助合成器上，使用标准Fmoc策略，在聚苯乙烯树脂(TentaGel S Ram)上的NMP中进行固相肽合成(SPPS)。使用HATU作为偶联试剂，DIPEA作为碱。使用哌啶(在NMP中20％)用于脱保护。在适用情况下使用假脯氨酸：Fmoc-Phe-Thr(psiMe，Mepro)-OH(购自NovaBiochem)。
所使用的缩写如下：
Boc：叔丁氧基羰基
ivDde：1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)3-甲基-丁基
Dde：1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-乙基
DCM：二氯甲烷
DMF：N，N-二甲基甲酰胺
DIPEA：二异丙基乙胺
EDT：1，2-乙二硫醇
EtOH：乙醇
Et2O：乙醚
HATU：N-[(二甲基氨基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲铵六氟磷酸盐N-氧化物
MeCN：乙腈
NMP：N-甲基吡咯烷酮
TFA：三氟乙酸
TIS：三异丙基硅烷
切割:
在室温(r.t.)下通过用95/2.5/2.5％(v/v)TFA/TIS/水处理2小时，将粗制肽从树脂上切割下来。在减压下除去大部分的TFA，使粗制肽沉淀并用乙醚洗涤，并使其在环境温度下干燥至恒重。
化合物1：
H-H-Aib-QGTFTSDYSKYLDERAAKDFIEWLE-K([17-羧基-十七烷酰基]-异Glu-GSGSGG)-A-NH2
使用索马鲁肽(Semaglutide)和利拉鲁肽作为参照化合物。
实施例2：胰高血糖素受体和GLP-1受体效力测定
合成编码人胰高血糖素受体(胰高血糖素-R)(原始登录号P47871)或人胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)(原始登录号P43220)的cDNA并将其克隆到含有吉欧霉素(Zeocin)抗性标志物的哺乳动物表达载体中。
通过Attractene法将编码胰高血糖素-R或GLP-1-R的哺乳动物表达载体转染到中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中。在对选择压力有抗性的细胞进行有限稀释之后，通过吉欧霉素选择(250μg/mL)获得稳定表达的克隆。挑选表达胰高血糖素-R和GLP-1-R的细胞克隆，使其增殖并在如下所述的胰高血糖素-R和GLP-1-R效力测定中进行测试。选择一个表达胰高血糖素-R的克隆和一个表达GLP-1-R的克隆用于化合物分析(profiling)。
在测定前24小时，将表达人胰高血糖素-R或人GLP-1-R的CHO细胞以5000个细胞/孔接种到384孔微量滴定板中，并在50μl生长培养基中培养。在分析当天，除去生长培养基并将细胞用100μl测定缓冲液(Krebs-Ringer缓冲液；KRBH)洗涤一次。除去缓冲液，将细胞在含有浓度递增的受试肽的去离子水中的10μl KRBH(KRBH+10mM HEPES，5mM NaHCO3，0.1％(v/v)BSA)和0.1mM IBMX中于室温下孵育15分钟。通过添加裂解缓冲液(0.1％w/vBSA，5mM HEPES，0.3％v/v Tween-20)使反应终止。在细胞于室温下裂解10分钟后，添加如在AlphaScreenTM cAMP功能测定试剂盒中含有的10μl受体/供体珠混合物。在暗处于室温下孵育2小时后，使用来自Perkin-Elmer的AlphaScreenTM cAMP功能测定试剂盒根据制造商说明书测定cAMP含量。应用计算机辅助曲线拟合计算与参照化合物(胰高血糖素和GLP-1)相比的相对效力和EC50。如先前所定义来计算GLP-1/胰高血糖素比值。参见表1。
表1
实施例3：对内源性GLP-1受体的激动剂活性
使用鼠胰岛瘤细胞系测定受试化合物对内源性GLP-1受体的激动剂活性。使用细胞内cAMP作为受体活化的指标。
将细胞以10,000个细胞/孔的密度在384孔板中培养24小时。除去培养基，在26℃的温度下经15分钟向孔添加含有受试化合物或GLP-1(从0.1pM至100nM的递增浓度)或者溶剂对照(0.1％(v/v)DMSO)的10μL KRBH缓冲液(NaCl 130mM、KCl 3.6mM、NaH2PO40.5mM、MgSO40.5mM、CaCl2 1.5mM)。
使用AlphaScreen cAMP功能测定试剂盒(Perkin Elmer)测量细胞的cAMP含量。使用Envision(PerkinElmer)根据制造商的建议进行测量。
使用在含有0.1％(v/v)DMSO的KRBH缓冲液中作出的cAMP标准曲线将结果转化成cAMP浓度。将所得的cAMP曲线绘制成相对于log(受试化合物浓度)的绝对cAMP浓度(nM)，并使用曲线拟合程序XLfit进行分析。
将EC50计算为导致cAMP水平半数最大升高的受试化合物的浓度，从而反映受试化合物的效力。参见表2。
表2.
化合物 EC50[nM]
1 0.54nM
实施例4：对内源性胰高血糖素受体的激动剂活性
通过测量受试化合物对原代大鼠肝细胞中的糖原合成速率的作用来确定其对内源性胰高血糖素受体的激动剂活性。在胰高血糖素受体活化之后，预期胰高血糖素合成速率将被抑制。通过对确定时间段内并入细胞糖原储存物中的放射性标记的葡萄糖的量进行计数来确定糖原合成速率。
在37℃和5％CO2下，将原代大鼠肝细胞以40,000个细胞/孔的密度在24孔板中培养24小时。
弃去培养基并用PBS洗涤细胞。然后向孔添加含有0.1％BSA和浓度22.5mM葡萄糖之180μL基于KRBH的缓冲液，随后添加受试化合物和40μCi/ml D-[U14C]葡萄糖(各20μL)。继续孵育3小时。
在孵育期结束时，抽出孵育缓冲液并将细胞用冰冷PBS洗涤一次，之后通过在室温下用100μL 1mol/L NaOH孵育30分钟来裂解。
将细胞裂解物转移到96孔滤板，并通过将滤板在4℃下孵育120分钟随后用冰冷乙醇(70％)洗涤滤板4次来使糖原沉淀。将所得沉淀物过滤至干燥，并通过使用Topcount闪烁计数器根据制造商的建议测定并入的14C-葡萄糖的量。
包括具有载剂对照(KRBH缓冲液中0.1％(v/v)DMSO)的孔作为未抑制糖原合成(100％CTL)的参照。包括未添加D-[U14C]葡萄糖的孔作为非特异性背景信号(从所有值中减去)的对照。使用内源性胰高血糖素肽作为阳性对照。
所有处理至少一式两份地进行。
描述每种受试化合物对内源性胰高血糖素受体的效力和激动剂活性二者的所计算参数是pEC50和％CTL。
减去背景CPM/孔之后通过计算在受试化合物存在下的CPM/孔与载剂对照的CPM/孔相比的百分比来确定％CTL：
[CPM/孔(基线)-CPM/孔(样品)]＊100/[CPM/孔(基线)-CPM/孔(对照)]。
胰高血糖素受体的活化剂将导致糖原合成速率被抑制，并且将产生0％CTL(完全抑制)与100％CTL(没有可观察到的抑制)之间的％CTL值。
将所得活性曲线绘制为相对于log(受试化合物浓度)的绝对计数(单位：cpm/样品)，并使用曲线拟合程序XLfit进行分析。
将EC50计算为受试化合物效力的量度并且示于表3中。
表3.
化合物 EC50[nM]
1 5.6nM
与GLP-1R活化相关而引用的术语EC50和pEC50可等同地视为与糖原合成相关的IC50和pIC50。
实施例5：药代动力学参数的估计
在向Han/Wistar大鼠静脉内施用之后确定受试化合物的药代动力学参数。出于比较目的，还测试了酰化GLP-1类似物索马鲁肽。
雄性Wistar大鼠从Charles River(德国)获得，在到达测试设施时称量其为约180g至210g。在12小时黑暗和12小时光照的光周期下，将大鼠关在IV型欧洲标准大鼠笼中。在研究中，将大鼠圈养在III型标准大鼠笼中，在整个实验期间，饮食Altromin 1324(Altromin，德国)和水随意施用。将动物圈养在测试设施中至少4天以确保适当的环境适应。
首先将化合物溶解在0.1％氨水中至2mg/ml的标称浓度，然后在含有25mM磷酸盐缓冲液的无菌PBS(pH 7.4)中稀释至期望的给药浓度(10μM)。通过侧尾静脉给予对应于20nmol/kg的静脉内注射。
在给药后0.08、0.25、0.5、1、2、4、8、24、32和48小时的时间点从眶周丛(periorbital plexus)采集血液样品(200μl)到K3EDTA管中并在取样20分钟内在4℃下离心5分钟。将血浆样品(＞100μl)转移到96孔PCR板，立即冷冻并保持在-20℃下直至使用LC-MS/MS分析各GLP-1胰高血糖素化合物的血浆浓度。使用ToxKinTM 3.2版(Unilog ITServices)通过非房室(non-compartmental)方法分析各血浆浓度-时间谱，并确定所得的药代动力学参数。参见表4。
表4.
实施例6：口服葡萄糖耐量测试
通过7-8周龄雄性C57BL6/J小鼠(从德国Charles River Laboratories获得)中的口服葡萄糖耐量测试(OGTT)来确定受试化合物对血糖控制的作用。在12小时光循环下，将动物分组圈养在单独通风的笼(Tecniplast green line)中。它们可随意获得标准啮齿类动物饮食(Provimi Kliba 3438)和水。在OGTT之前，将动物圈养在测试设施中至少一周。关于实验室动物使用的所有实验方案都由联邦伦理委员会(federal Ethics Committee)审查并得到政府部门的批准。
首先将化合物溶解在0.1％氨水中至2mg/mL的标称浓度，然后在含有25mM磷酸盐缓冲液的无菌PBS(pH 7.4)中稀释至期望的给药浓度。在早晨以30nmoL/kg的剂量和5ml/kg的体积通过皮下注射施用化合物。对照动物仅接受载剂注射。出于比较目的，测试GLP-1类似物利拉鲁肽。组大小是每组5只动物。
在化合物施用后24小时或48小时进行OGTT。在OGTT之前使动物禁食10小时但仍可随意获得水。在禁食过夜后，通过尾部采血获得基线血液样品(0分钟)，并用血糖仪测量血糖。然后通过管饲法用作为溶液(5ml/kg)给予的口服葡萄糖负荷(2g/kg)来攻击动物。通过在葡萄糖负荷后的连续时间点(15、30、60、90和120分钟)处尾部采血来获得用于葡萄糖测量的额外血液样品。
通过计算0分钟至120分钟之间的血糖-时间曲线下的总面积(AUC)来量化葡萄糖偏移(glucose excursion)。AUC的计算是通过梯形规则进行的而不需要基线校正。数据表示为对照的平均值％(％CTL)。100％CTL的值表明没有可观察到的作用，并且低于100％CTL的统计学上显著的值显示出葡萄糖耐量的改善。参见表5。
表5.
序列表
<110> Zealand Pharma A/S
Boehringer Ingelheim International GmbH
<120> 酰化胰高血糖素类似物
<130> GRF/FP7192412
<150> EP 15163903.6
<151> 2015-04-16
<160> 5
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 29
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的化合物
<220>
<221> MOD_RES
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> SITE
<222> (28)..(28)
<223> Lys([17-羧基-十七烷酰基]-异Glu-GSGSGG)
<400> 1
His Ala Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Arg Ala Ala Lys Asp Phe Ile Glu Trp Leu Glu Lys Ala
20 25
<210> 2
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的六肽间隔区
<400> 2
Gly Ser Gly Ser Gly Gly
1 5
<210> 3
<211> 29
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 3
His Ser Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Ser
1 5 10 15
Arg Arg Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Met Asn Thr
20 25
<210> 4
<211> 8
<212> PRT
<213> 智人
<400> 4
Lys Arg Asn Arg Asn Asn Ile Ala
1 5
<210> 5
<211> 37
<212> PRT
<213> 智人
<400> 5
His Ser Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Ser
1 5 10 15
Arg Arg Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Met Asn Thr Lys Arg Asn
20 25 30
Arg Asn Asn Ile Ala
35

Claims (17)

1.具有下式的化合物，或者其可药用盐或溶剂合物：
R1-H-Aib-QGTFTSDYSKYLDERAAKDFIEWLE-K([17-羧基-十七烷酰基]-异Glu-GSGSGG)-A-R2
其中
R1是H(氢)、C1-4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；并且
R2是OH或NH2。
2.根据权利要求1所述的化合物，其是
H-H-Aib-QGTFTSDYSKYLDERAAKDFIEWLE-K([17-羧基-十七烷酰基]-异Glu-GSGSGG)-A-NH2
或者其可药用盐或溶剂合物。
3.组合物，其包含与载体混合的根据权利要求1或权利要求2所述的化合物。
4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述组合物是药物组合物，并且所述载体是可药用载体。
5.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物，其用于医学治疗方法。
6.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物，其用于在有此需要的个体中预防体重增长或促进体重减轻的方法。
7.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物，其用于在有此需要的个体中降低循环LDL水平和/或提高HDL/LDL比值的方法。
8.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物，其用于治疗由体重超重引起或以其为特征的病症的方法。
9.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物，其用于改善血糖控制或者预防或治疗以下的方法：肥胖、病态肥胖、术前病态肥胖、肥胖相关炎症、肥胖相关胆囊疾病、肥胖诱发的睡眠呼吸暂停、糖尿病、代谢综合征、高血压、致动脉粥样化血脂异常、动脉粥样硬化、动脉硬化、冠心病、外周动脉疾病、卒中或微血管疾病。
10.根据权利要求6至9中任一项所述应用的化合物，其中所述化合物作为联合治疗的一部分与用于治疗糖尿病、肥胖、血脂异常或高血压的药剂一起施用。
11.根据权利要求10所述应用的化合物，其中所述用于治疗糖尿病的药剂是双胍类、磺酰脲类、美格列奈类或格列奈类、DPP-IV抑制剂、SGLT2抑制剂、格列酮类、GLP-1受体激动剂、SGLT2抑制剂、GPR40激动剂、或者胰岛素或胰岛素类似物。
12.根据权利要求10所述应用的化合物，其中所述用于治疗肥胖的药剂是GLP-1受体激动剂、肽YY或其类似物、神经肽Y(NPY)或其类似物、大麻素受体1拮抗剂、脂肪酶抑制剂、人前胰岛肽(HIP)、黑皮质素受体4激动剂、黑色素浓集激素受体1拮抗剂、芬特明(单独或与托吡酯组合)、去甲肾上腺素/多巴胺再摄取抑制剂与阿片样受体拮抗剂的组合、OrlistatTM、SibutramineTM、CCK、胰淀素、普兰林肽和瘦素及其类似物、或血清素能剂。
13.根据权利要求10所述应用的化合物，其中所述用于治疗高血压的药剂是血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素II受体阻断剂、利尿剂、β-阻断剂或钙通道阻断剂。
14.根据权利要求10所述应用的化合物，其中所述用于治疗血脂异常的药剂是他汀类、贝特类、烟酸类、PSCK9(前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型)抑制剂和/或胆固醇吸收抑制剂。
15.治疗性药盒，其包含根据权利要求1或权利要求2所述的化合物或者根据权利要求3或权利要求4所述的组合物。
16.合成根据权利要求1或权利要求2所述的化合物的方法。
17.产生根据权利要求1或权利要求2所述的化合物的方法，所述方法包括从编码前体肽的核酸构建体表达所述前体肽序列，回收表达产物，以及修饰所述前体肽以产生根据权利要求1或权利要求2所述的化合物。
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