CN106109537A - 一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物及其制备方法,具原料包括蝙蝠蛾拟青霉菌粉、灵芝提取物、红景天提取物、西洋参提取物及药物制剂辅料制成相应剂型,本发明本发明根据肺肾两虚、气阴不足的机理,我们结合中医药理论,以及现代药理研究,以“扶正固本、益气养血、补益肝肾”为治则,选用蝙蝠蛾拟青霉菌粉、灵芝提取物、红景天提取物、西洋参提取物为原料,制成本品,以达到补肺肾,益气阴的作用。
Description
技术领域
本发明涉及中药领域,具体为一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物及其制备方法。
背景技术
随着人们工作、生活节奏地加快,人们的健康正在受到各种因素的威胁,肺肾两虚、气阴不足等是其健康受到影响的主要表现。中医理论认为,肺肾两虚、气阴不足均属“虚症”范畴,主要是由于机体元气虚损,脏腑亏虚,阴阳平衡失调所致,导致气短,腰膝酸痛,神疲乏力,潮热,烦渴等症状,为此,肺和肾的功能起着至关重要的作用。
蝙蝠蛾拟青霉菌粉,是新鲜冬虫夏草标本中分离得到的麦角菌科真菌蝙蝠蛾拟青霉菌株,经液体深层发酵所得菌丝体的干燥粉末,又称发酵虫草菌粉,是冬虫夏草的人工替代品。从人工虫草菌丝体中分离提取的虫草多糖能显著地增加小鼠碳粒廓清指数及吞噬指数,增强氢化可的松诱导的免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能;在迟发型变态反应实验中,虫草多糖剂量组能显著地增加小鼠耳肿胀度,提示虫草多糖可增强环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠迟发性变态反应;虫草多糖剂量组能显著提高小鼠溶血素水平,提示虫草多糖可增强环磷酰胺诱导免疫功能低下小鼠的特异性体液免疫功能,以上试验结果说明人工虫草多糖对免疫功能低下小鼠非特异性和特异性免疫功能具有一定增强作用。
灵芝提取物,为多孔菌科真菌赤芝的干燥子实体的提取物。味甘,性平。具有补气安神,止咳平喘之效。灵芝作为一种名贵中药用于临床已有悠久的历史,《神农本草经》认为“益心气”、“安精魂”、“补肝益气”、“坚筋骨”等并列为上品;《本草纲目》也记载“滋补强壮”、“延年益寿”,久服使人“好颜色”等。灵芝的主要活性成分为灵芝多糖、灵芝酸、腺苷等,其具有提高机体细胞免疫和体液免疫的能力,能促进淋巴细胞的增生,增强巨噬细胞的吞噬能力,提高小鼠自然杀伤细胞(NK细胞)的活性,提高激活状态下巨噬细胞产生白介素-1(IL-1)和肝细胞产生白介素-2(IL-2)的能力,能促进巨噬细胞产生肿瘤坏死因子(TNF),提高溶血素量等。邢国庆等研究了灵芝多糖口服液对免疫抑制剂环磷酰胺所致小鼠免疫功能的影响,结果显示灵芝多糖口服液能使免疫抑制模型小鼠脾指数、胸腺指数、吞噬细胞的吞噬功能及脾细胞增殖指数接近正常,说明灵芝多糖口服液具有增强机体免疫功能的作用。
红景天提取物,为景天科植物大花红景天的干燥根及干根茎的提取物,具有益气活血之功效。《神农本草经》列为上品,研究指出,红景天具有类似人参“扶正固本”的“适应原样”作用。红景天对小鼠炎症早期血管通透性增加、渗出和水肿有明显的抑制作用,小鼠血清溶血素试验抗体积数结果表明,红景天可以提高小鼠血清素水平,且各剂量组与样品溶剂对照组比较,有显著性差异,表明红景天具有明显的增强小鼠细胞免疫和体液免疫功能;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验结果表明,各剂量组吞噬百分率、吞噬指数与对照组比较有显著性差异,说明红景天具有明显增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的作用;小鼠NK细胞活性试验中,高剂量组的NK细胞活性与溶剂对照组比较有显著性差异,说明红景天具有增强小鼠NK细胞活性的作用。
西洋参提取物,为五加科植物西洋参的干燥根的提取物,具有补气养阴,清热生津之效。主要用于气虚阴亏,虚热烦倦等症。西洋参皂苷能明显增强肿瘤病人免疫功能,提高外周血中自然杀伤细胞及淋巴因子活化细胞的活性。三七洋参胶囊由三七、西洋参组成,动物实验表明,0.90g/kg和0.45g/kg的灌胃剂量能增强小鼠体力和提高耐缺氧能力,通过抑制环磷酰胺所致免疫器官的萎缩,提升碳廓清速率和吞噬指数来提高免疫功能。研究发现,西洋参皂苷能使TB淋巴细胞转化率显著提高,促进ConA诱导IL-2产生,显著提高脾脏T细胞百分率及B细胞的抗体产生水平,说明西洋参皂苷具有显著的增强免疫力的作用。西洋参含片和原粒茶能提高动物血清溶血素体积数、吞噬指数,提高NK细胞活性,提高ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化。西洋参等药组成的扶正排毒片可显著提高环磷酰胺所致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,同时促进溶血素、溶血空斑的形成与外周血淋巴细胞的转化。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物及其制剂,本发明组成的药物组合物诸药相互配伍,具有相使互补,补气培元,益精生血。
本发明是通过以下技术方案实现的:
一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物,所述的原料包括蝙蝠蛾拟青霉菌粉200-300份、灵芝提取物25-75份、红景天提取物25-75份、西洋参提取物20-60份。
上述的一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物,所述的原料重量份为蝙蝠蛾拟青霉菌粉260份、灵芝提取物50份、红景天提取物50份、西洋参提取物40份。
上述的一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物,所述中药组合物的剂型为丸剂、片剂或胶囊制剂。
上述的一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物胶囊剂的制备方法为:
(1)、将选定配方比例的灵芝提取物、红景天提取物和西洋参提取物混合30分钟,混合均匀,再与选定配方比例的蝙蝠蛾拟青霉菌粉混合30min,混合均匀后用85%乙醇制成软材;
(2)、将制好的软材以16目筛制粒;
(3)、制好的湿颗粒用烘盘接成均匀厚度为3~5cm的湿粒,放入烘箱55~60℃条件下鼓风、排湿干燥,干燥4-6小时;
(4)、烘干后的颗粒过14目筛整粒,即得半成品颗粒,装入0号胶囊既得。
本发明的优点在于:根据肺肾两虚、气阴不足的机理,我们结合中医药理论,以及现代药理研究,以“扶正固本、益气养血、补益肝肾”为治则,选用蝙蝠蛾拟青霉菌粉、灵芝提取物、红景天提取物、西洋参提取物为原料,制成本品,以达到补肺肾,益气阴的作用。
具体实施例
实施例一成型工艺研究
1、混合工艺参数的确定
为了确定混合工艺的具体参数,按配方量,称取蝙蝠蛾拟青霉菌粉260g、灵芝提取物50g、红景天提取物50g、西洋参提取物40g,共计400g。我们先将灵芝提取物、红景天提取物和西洋参提取物混合30min,混匀后,再与蝙蝠蛾拟青霉菌粉分别混合10、20、30分钟,于不同时间点从混合机的不同部位取混合细粉5份,置光滑纸上,平铺约5cm2,将其表面压平,在明亮处观察其外观情况。同时为了进一步确保其混合均匀,以总皂苷含量为考察指标,分别测其总皂苷含量,测定结果见下表1。
表1混合工艺参数考察
以上结果表明,混合30分钟后,从混合机不同部位所取样品色泽均匀,无花纹与色斑,并且总皂苷含量相对接近,RSD值为2.28%,说明混合30分钟,细粉可混合均匀,故选择混合30分钟。
2、润湿剂的选择
取本品混合好的细粉(蝙蝠蛾拟青霉菌粉、灵芝提取物、红景天提取物、西洋参提取物)3份,每份200g,分别以等量75%、85%、95%乙醇制粒(16目筛),55~60℃干燥,过14目筛整粒,对颗粒成型的难易及干颗粒的硬度等进行比较,结果见表2。
表2不同浓度乙醇制粒考察结果
试验结果证明,用85%乙醇制粒,颗粒成型好,硬度适中,颗粒大小较均匀,制粒质量较好,故确定以85%乙醇为润湿剂。
3、干颗粒流动性的测定
颗粒流动性的大小,会直接影响到胶囊填充机分装时装量差异的大小。相对而言,流动性大时装量差异会小,反之则大。颗粒流动性可用休止角来表示。休止角越大,流动性就越差。采用固定漏斗法,对休止角进行测定,以堆高度与堆底面半径的函数值来表示。通过试验测定,结果见表3。
表3干颗粒流动性考察结果
经测定,干颗粒平均休止角为37.1度,表明干颗粒的流动性良好。
4、胶囊装量确定
配方中蝙蝠蛾拟青霉菌粉260g、灵芝提取物50g、红景天提取物50g、西洋参提取物40g,全方总量为400g,共制成胶囊1000粒,每粒应装0.4g。
5、空心胶囊型号的选择
空心胶囊型号根据制备的胶囊内容物(即药物干颗粒)堆密度与胶囊的容积来确定。堆密度的测定采用体积重量比法进行,试验结果见表4。
表4药物干颗粒堆密度测定结果
表4结果表明:本品颗粒堆密度为0.6025g/ml,装量为0.4g/粒,因此确定空心胶囊容积V=m/ρ=0.4g/0.6025g/mL=0.664mL,0号胶囊容积为0.67ml,再结合多次试装结果,能满足填充要求,因此选择0号胶囊,每粒胶囊装0.4g。
实施例二本发明药物制剂具体实施例
2.1胶囊剂的制备
处方:蝙蝠蛾拟青霉菌粉260g、灵芝提取物50g、红景天提取物50g、西洋参提取物40g
制法:(1)、将选定配方比例的灵芝提取物、红景天提取物和西洋参提取物混合30分钟,混合均匀,再与选定配方比例的蝙蝠蛾拟青霉菌粉混合30min,混合均匀后用85%乙醇制成软材;
(2)、将制好的软材以16目筛制粒;
(3)、制好的湿颗粒用烘盘接成均匀厚度为3~5cm的湿粒,放入烘箱55~60℃条件下鼓风、排湿干燥,干燥4-6小时;
(4)、烘干后的颗粒过14目筛整粒,即得半成品颗粒,装入0号胶囊既得。
2.2片剂的制备
处方:蝙蝠蛾拟青霉菌粉200g、灵芝提取物75g、红景天提取物25g、西洋参提取物60g
制法:(1)、将选定配方比例的灵芝提取物、红景天提取物和西洋参提取物混合30分钟,混合均匀,再与选定配方比例的蝙蝠蛾拟青霉菌粉混合30min,混合均匀后用85%乙醇制成软材;
(2)、将制好的软材以16目筛制粒;
(3)、制好的湿颗粒用烘盘接成均匀厚度为3~5cm的湿粒,放入烘箱55℃条件下鼓风、排湿干燥,干燥4-6小时;
(4)、烘干后的颗粒过14目筛整粒,即得半成品颗粒,压片既得。
2.3颗粒剂的制备
处方:蝙蝠蛾拟青霉菌粉300g、灵芝提取物25g、红景天提取物75g、西洋参提取物20g
制法:(1)、将选定配方比例的灵芝提取物、红景天提取物和西洋参提取物混合30分钟,混合均匀,再与选定配方比例的蝙蝠蛾拟青霉菌粉混合30min,混合均匀后用85%乙醇制成软材;
(2)、将制好的软材以16目筛制粒;
(3)、制好的湿颗粒用烘盘接成均匀厚度为3~5cm的湿粒,放入烘箱65条件下鼓风、排湿干燥,干燥4-6小时;
(4)、烘干后的颗粒过14目筛整粒,即得半成品颗粒,分装颗粒既得。
实施例三本发明药物制剂对肺肾两虚型COPD大鼠病理及免疫功能的研究
3.1材料
3.1.1实验用动物8周龄大鼠72只,健康雄性,体重为(200±20)g;清洁级,全部动物自由摄食、饮水,饲料为混合标准颗粒饲料,使用消毒垫料且定期更换。饲养室温度20~23℃,湿度50~60%,光照每天l2h。
3.1.2药物和试剂指定品牌香烟;脂多糖(美国Sigma公司);戊巴比妥钠(中国医药集团);IL-4、IL-8、TNF-α放射性免疫试剂盒,购于解放军总医院科技开发中心放免所;IFN-γELISA试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司。
3.1.3主要仪器AE200电子分析天平、FAS-CO型全自动血液流变快测仪、GMJ型全自动放射免疫γ计数器、DDL-5冷冻离心机、γBRIO型全自动酶标仪、日立H-800扫描电子显微镜等。
3.2方法
3.2.1动物分组及模型将实验动物随机分为以下两组:对照组24只,COPD肺肾两虚模型组24只,COPD肺肾两虚治疗组24只。造模组模型复制“采用慢性阻塞性肺病大鼠模型的建立”方法并加以改良建立大鼠肺肾两虚型COPD模型,即在室温环境中,第1、14天大鼠麻醉后气管内滴脂多糖,第2~28天给予大鼠每天两次香烟烟熏,每次点燃烟丝的重量为9.03g(每支烟烟丝重量为0.645g),持续时间大约1小时。二次造模:第22天起大鼠背部皮下注射浓度为25mg/ml的醋酸氢化可的松0.3ml.只.d–1,连续8d。空白对照组不做任何干预,相同室内环境下自由饮食饮水。实验前后分别称重,计算体重增长指数=(实验后体重-实验前体重)/实验前体重。
3.2.2给药方法第30天起肺肾两虚治疗组灌本发明药物制剂的混悬液;每天灌服2ml(浓度15g.ml–1.d-1,相当于成人剂量的10倍),连续30天。
3.2.3观察指标及方法
3.2.3.1气管超微结构观察暴露气管,取隆突上气管1~1.5cm,迅速置于4℃2%戊二醛中固定,4℃冰箱保存,2小时后PBS缓冲液充分漂洗,再用四氧化锇固定30~60min,双蒸水洗3次。固定过程温度保持在4℃;固定后用递增浓度的酒精脱水,临界点干燥,用导电胶将样本粘敷在金属样品台上,金属镀膜,行扫描电子显微镜观察超微结构。
3.2.3.2肺组织标本处理及HE染色取左肺上叶置于10%中性福尔马林溶液中固定。以混合固定液(酒精、福尔马林各半)固定2小时;酒精梯度脱水后二甲苯透明标本,浸蜡(时间>3h),包埋,切片(厚5um);常规HE染色,光学显微镜下观察肺组织形态学改变。
3.2.3.3动脉血气分析用10%水和氯醛(350mg/kg)腹腔注射将大鼠麻醉,然后将大鼠固定于手术台上,迅速打开腹腔,从腹主动脉取血1ml(肝素抗凝),动脉血迅速送化验室进行血气分析。
2.3.4肺组织匀浆测IL-4、IL-8、TNF-α、IFN-γ含量取右肺组织,洗净称重后,冰盘上剪碎,每克肺组织加入10ml生理盐水,用玻璃匀浆器在冰浴中匀浆20次左右,取匀浆液置离心管中,4℃15000r/min离心20min,取上清液,保存于-80℃超低温中。放射免疫法测肺组织匀浆IL-4、IL-8、TNF-α含量,酶联免疫法测肺组织匀浆IFN-γ含量。
2.4统计学方法采用SPSS11.5统计软件处理,计量资料采用方差分析,数据以x±s表示。
3.3结果
3.3.1一般情况比较对照组大鼠活泼好动,毛发有光泽,体重逐渐增加,呼吸平稳,无任何特殊表现;模型组大鼠于造模开始第1天即出现明显的咳嗽,之后不吸烟时也出现咳嗽,声音减小,渐转为慢性咳嗽,分泌物较多。活动量减少,拱背蜷卧,体重增幅减轻,食量减少,行动迟缓。造模28天后,出现气急,部分可闻及哮鸣音。经二次造模后,模型组呼吸浅急,喜扎堆而卧,行动迟缓,精神倦怠。治疗组经喂药症状明显减轻。模型组大鼠死亡1只,治疗组大鼠死亡2只。
3.3.2大鼠体重增长指数比较与对照组比较,模型组及治疗组大鼠体重增长指数显著下降;与模型组比较,治疗组大鼠体重增长指数显著上升。(均P<0.01)
3.3.3肺组织外观对照组大鼠两肺大小适中,淡粉肉色,外表光滑柔和,弹性好;模型组大鼠两肺体积明显增大,暗红偏紫伴点状苍白,外表粗糙略硬,弹性差。支气管黏膜红肿,腔中有较多粘液性分泌物;治疗组外观较模型组明显改善。
3.3.4大鼠肺组织病理学变化HE染色:对照组中,小支气管黏膜上皮细胞排列整齐,未见嗜酸细胞浸润。纤毛无损伤脱落;肺泡结构连续,肺泡壁完整,肺泡间隔无充血水肿,肺泡腔无扩大,且未见明显渗出;模型组小气道2~3级上皮细胞变性坏死糜烂脱落,可见不同程度的慢性炎性细胞浸润,纤毛倒伏、脱落,变性坏死;肺泡扩大融合,肺泡数量减少,肺泡毛细血管床减少;治疗组各级气道上皮细胞变性坏死明显减轻,慢性炎性细胞浸润程度较模型组减轻,纤毛倒伏、脱落减少,肺大泡数量减少。
电镜下可见:模型组纤毛不同程度倒伏、粘连、缺失,管腔内可见炎性分泌物;治疗组明显好转。
3.3.5动脉血气分析表5示,与对照组比较,模型组、治疗组PaO2均明显降低(P<0.01),PaCO2均明显升高(P<0.05~0.01);与模型组比较,治疗组PaO 2显著升高(P<0.05),PaCO2显著降低(P<0.05);模型组pH值较对照组明显降低(P<0.05),模型组与治疗组动脉血pH值无显著差异(P>0.01)。
表5各组大鼠动脉血PH、PaO2、PaCO2比较结果(x±s)
注:与对照比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型组比较,ΔP<0.05
3.3.4肺组织匀浆测IL-4、IL-8、TNF-α、IFN-γ含量及比较表6示,与对照组比较,模型组、治疗组IL-4、IL-8、TNF-α水平均明显升高(P<0.05~0.01),IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值下降明显下降(P<0.05~0.01);与模型组比较,治疗组IL-4、IL-8、TNF-α水平均明显下降(P<0.05~0.01),IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值明显升高(P<0.01)。
表6肺组织匀浆测IL-8、IL-4、TNF-α、IFN-γ含量变化及比较(x±s)
注:与对照比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型组比较,ΔP<0.05
3.4结论
本研究表明肺肾两虚型COPD大鼠小气道2~3级上皮细胞变性坏死糜烂脱落,可见不同程度的慢性炎性细胞浸润,气道纤毛粘连、倒伏、缺失、变性坏死,肺泡扩大融合,肺泡数量减少,肺泡毛细血管床减少,大鼠动脉血PaO2降低、PaCO2升高,经本发明药物治疗后,各级气道上皮细胞变性坏死明显减轻,慢性炎性细胞浸润程度较模型组减轻,纤毛倒伏、脱落减少,肺大泡数量减少,大鼠动脉血PaO2升高、PaCO2降低,提示本发明药物制剂能明显改善管腔阻塞,降低气道高反应性,促进气道的修复。本研究还表明肺肾两虚型COPD大鼠肺组织匀浆IL-4水平及IL-8、TNF-α水平均明显增高,IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值显著降低,提示存在气道的慢性炎症和反复感染的情况;经本发明药物治疗后,IL-4水平及IL-8、TNF-α水平显著下降,IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值显著升高,提示小青龙汤具有纠正Th1/Th 2比值的失衡,抑制炎症介质的产生,增强机体对病原菌的清除功能,对于因肺肾两虚、气阴不足的导致的病症能够产生积极的效果,尤其是具有解热、抗炎、平喘、镇咳和抗过敏作用。
Claims (4)
1.一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物,其特征在于:所述的原料包括蝙蝠蛾拟青霉菌粉200-300份、灵芝提取物25-75份、红景天提取物25-75份、西洋参提取物20-60份。
2.根据权利要求1所述的一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物,其特征在于:所述的原料重量份为蝙蝠蛾拟青霉菌粉260份、灵芝提取物50份、红景天提取物50份、西洋参提取物40份。
3.权利要求1或2所述的一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物,其特征在于:所述中药组合物的剂型为颗粒剂、片剂或胶囊制剂。
4.根据权利要求3所述的所述的一种用于肺肾两虚、气阴不足的中药组合物胶囊剂的制备方法为:
(1)、将选定配方比例的灵芝提取物、红景天提取物和西洋参提取物混合30分钟,混合均匀,再与选定配方比例的蝙蝠蛾拟青霉菌粉混合30min,混合均匀后用85%乙醇制成软材;
(2)、将制好的软材以16目筛制粒;
(3)、制好的湿颗粒用烘盘接成均匀厚度为3~5cm的湿粒,放入烘箱55~65℃条件下鼓风、排湿干燥,干燥4-5小时;
(4)、烘干后的颗粒过14目筛整粒,即得半成品颗粒,装入0号胶囊既得。
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