CN102727558A - 一种火把花根提取物、双层缓释片及其应用 - Google Patents

Abstract

为解决传统火把花根片存在的副作用明显的问题本发明提供了一种降低药物峰值血药浓度的双层缓释片剂，所述一种火把花根提取物，所述为火把花根全部、火把花根皮或火把花根去皮根芯中任意一种的提取物；火把花提取物双层缓释片具有不良反应小，使用方便、安全等特点，同时，药-时曲线平稳，血药浓度波动小，半衰期延长；采用去皮仅保留根芯的火把花根提取物缓释双层片剂对哮喘、红斑狼疮、肾炎和类风湿关节炎具有良好的治疗作用。

Description

一种火把花根提取物、双层缓释片及其应用

技术领域

本发明涉及一种中药提取物片剂，更具体地说涉及一种火把花根提取物、双层缓释片及其应用。

技术背景

火把花学名昆明山海棠(Tripterygium Hypoglaucum Hutch，THH)，又名粉背火把花、金刚藤等，是卫茅科雷公藤属落叶披散或蔓状灌木植物。我国昆明山海棠资源丰富，多集中于云南楚红、红河、玉溪、昆明等地。火把花一名始载于《本草纲目》，李时珍集解日：“生滇南者花红，呼为火把花。”关于火把花的药用部位还有许多争议，但上海市药品检验所1990年的调查表明，主要药用部位为根、根皮及茎枝。火把花的化学成份非常复杂，其中有的成分与雷公藤相似，仅含量有差别，而有的仅见于火把花。其中主要有：①生物碱类：包括雷公藤扶碱、雷公藤春碱及雷公藤吉碱。其生物碱含量与雷公藤相似，同种药材中，根皮含量大于根芯。②二萜类：已分离到近10个单体化合物，主要成分是环氧二萜内酯化合物，如雷酚内酯、雷公藤内酯酮、雷公藤内酯醇；近年来又分离到雷酚二萜酸、雷藤二萜酸、山海棠二萜内酯、雷酚萜醇及雷藤二萜醌、雷藤内酯三醇。③三萜类：火把花三萜类化合物中根芯含量大于根皮，除以往所知的β-谷甾醇、雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙以外，首次火把花根中分离得到3个乌索烷型化合物，分别称为山海棠内酯、雷公藤三萜酸C及黑蔓酮酯甲；还分离到山海棠萜酸、雷公藤三萜酸A、齐墩果酸乙酸酯、齐墩果酸及3-epikatonic aeid。此外，尚分离到3-β-22α-二羟基-△-乌索烯-30-羧酸甲酯及3-氧-木栓烷-29-羧酸甲酯。④其他：如β-谷甾醇葡萄糖甙、雷公藤红素，表-儿茶素，及新近从醚溶性提取物中得到的化合物，如对-羟基苯甲酸，3，4-乙羟基苯甲酸，3-甲氧基-4-羟基苯甲酸等。

临床上常用的火把花根片是从火把花根提取出来的中成药，具有祛风除湿、舒筋活络、清热解毒的作用，目前临床上已广泛用于治疗类风湿性关节炎、各种慢性肾病、红斑狼疮等多种疾病。目前，市售的火把花根片为将火把花根全部粉碎提取，并用提取物制片得到火把花根片（又名：昆明山海棠片）。中国专利申请（200910138310.9）公开了一种昆明山海棠薄膜衣片及其制备方法，其特征为将昆明山海棠制成0.8～1.2cm的片基，表面喷涂一层0.1～0.3mm的包衣；发明的目的在于提高药片主药性质的稳定性，有利于提高药品质量，保证药片药效。申请人在2005年申请的专利（200510057081.X）公开了一种中药制剂昆明山海棠水煎醇沉的制备方法，将切片的昆明山海棠、淀粉、滑石粉、硬脂酸镁按重量比500-1278:58:2:1的比例称取药材，将昆明山海棠加水煎煮2～5次，合并滤液，加热浓缩为密度1.05～1.07的清膏；向清膏中加入乙醇，调乙醇浓度至50～80%；静置，沉淀过滤；回收乙醇至无醇味，稠膏的密度为1.30～1.35，减压回收的温度为40～60℃。在稠膏中加入淀粉、滑石粉、硬脂酸镁，混匀，干燥，制备成为不同的剂型。但是昆明山海棠药物也存在一定的毒副作用，据报道，昆明山海棠片(昆明市医药公司制药厂生产)后胸闷不适、恶心、呕吐等胃肠道副反应。徐氏等报道1例服用昆明山海棠片(云南植物药厂生产)后，出现全身红色丘疹并逐渐增多、奇痒。赵氏报道1例服用火把花根片7d后出现了口唇及胸腹部皮肤麻木，且出现恶心、胸闷、心悸、双目视物不清、尿少等不良反应。于氏等报道火把花根治疗银屑病中出现眼眶色素沉着，停用并服用银迪片后色素沉着斑消失。

发明内容

为解决传统火把花根片存在的副作用明显的问题本发明提供了一种降低药物峰值血药浓度的双层缓释片剂，所述一种火把花根提取物，所述为火把花根全部、火把花根皮或火把花根去皮根芯中任意一种的提取物。

所述火把花根提取物为采用水提醇沉工艺提取火把花根去皮根芯得到的火把花根提取物。

一种火把花根提取物双层缓释片，所述片剂分别由含有上述的火把花根提取物的速释层和缓释层构成。

所述速释层和缓释层中火把花根提取物的含量比为2～4:6～8。

所述缓释层的配方为火把花根提取物、PEG、环糊精、HPMC K4M、硬脂酸镁。

所述HPMC K4M的用量为缓释层总质量的15%～45%。

所述速释层的配方为淀粉、碳酸钙、HPC。

所述双层片压片的力为3～7kg·cm^-2。

上述任一所述的火把花根提取物双层缓释片在制备治疗哮喘的药物中的应用。

上述任一所述的火把花根提取物双层缓释片在制备系统性红斑狼疮药物中的应用。

上述任一所述的火把花根提取物双层缓释片在制备治疗肾炎的药物中的应用。

上述任一所述的火把花根提取物双层缓释片在制备治疗类风湿关节炎的药物中的应用。

本发明的有益技术效果是：火把花提取物双层缓释片具有不良反应小，使用方便、安全等特点，同时，药-时曲线平稳，血药浓度波动小，半衰期延长；采用去皮仅保留根芯的火把花根提取物缓释双层片剂对哮喘、红斑狼疮、肾炎和类风湿关节炎具有良好的治疗作用。

附图说明

图1血药浓度-时间曲线。

具体实施方式

实施例1火把花根提取物双层缓释片的制备方法

将火把花根药材切片，加水煎煮2～5次，合并滤液，加热浓缩为密度1.05～1.07的清膏；向清膏中加入乙醇，调乙醇浓度至50～80%；静置，沉淀过滤；温度为40～60℃减压回收，回收乙醇至无醇味，稠膏的密度为1.30～1.35。得到火把花根提取物。将火把花根药材去皮，切片，按上述方法，得到去皮火把花根提取物。

缓释层辅料的预选以HPMC K4M（羟丙甲纤维素K4M）为骨架材料，将火把花根提取物与PEG（聚乙二醇）、环糊精、HPMC K4M等辅料以溶剂-溶融法制备固体分散体，制粒，压片；考察辅料对成型性及缓释性的影响。

体外溶出测定方法为：按中国药典2010版二部溶出度测定第二法，量取经脱气处理的溶出介质（10%异丙醇的人工胃液）900ml，注入每个溶出杯中，温度（37±0.5）℃，转速50r·min^-1，在每个杯中投入已精密称重的火把花提取物双层缓释片2片，立即记时，2h更换为肠溶介质（10%异丙醇的pH7.2磷酸盐缓冲液），按一定时间吸取溶出液（取样后即补充同体积介质），每次取样10ml，于具塞试管内，加醋酸乙酯10ml，振摇。待静置分层，吸取上层溶液9ml，水浴加热蒸干，用70%乙醇0.5ml将残留物溶解作为供试溶液。另取同批样品研碎，精密称取约2片量，用人工胃液900ml回流4h，使充分溶出，静置，待温度降至（37±0.5）℃，补足损失的溶剂，精密吸取溶出液10ml，按供试溶液相同方法处理，作为对照溶液，分别加显色剂显色，并测定吸收度，计算二萜内酯化合物的累积溶出度：

结果，浸膏:PEG6000:环糊精:HPMC K4M（1:0.5:1.5:0.30，w/w）适合粉碎、制粒、压片，片剂在人工胃液、肠溶介质中完全溶蚀约7.5～10.0h。

速释层辅料选择考察稀释剂、崩解剂、黏合剂等辅料种类及用量对成型性和崩解性的影响，结果，以淀粉-碳酸钙为稀释剂、崩解剂（碳酸钙用量10mg/片），3%HPC作黏合剂，适合制粒、压片。片剂在1～3min崩解，呈粉末状。

正交试验法优化处方组成及工艺（1）溶出度评价标准。以2，5，10h药物溶出分别达到30%，50%，95%为双层片的理想溶出度，制订评分标准为：100×（1-∣样品溶出度～理想溶出度∣/理想溶出度）；（2）因素水平的设定。拟通过L9（34）正交试验，考察缓释与速释部分药物比例、缓释部分HPMC K4M用量、及制片压力对药物溶出度的影响，因素水平如表1所示。

表1试验因素水平

（3）正交试验及结果分析结果如表2、3所示。优选工艺为A₂B₂C₁（或C₂），即缓释与速释药物比例为7:3，缓释部分浸膏与HPMC K4M（1:0.30，w/w），压片力3～5kg·cm^-2。

表2正交试验结果及计算

表3方差分析表

双层片与普通片等剂量比格犬灌胃给药，同位素法测定用药后雷公藤甲素血药浓度。血药浓度-时间曲线见图1所示。由图可见，双层片达峰时间延长，峰浓度降低，血药浓度平稳，达到缓释制剂的基本要求。

火把花提取物双层缓释片速释部分以淀粉及碳酸钙为辅料，HPC为黏合剂制备速释层颗粒；缓释部分以PEG 6000、环糊精、HPMC K4M制备成颗粒；缓释与速释层药物比例7:3，HPMCK4M用量10.5g，制片压力3～5kg·cm^-2等条件，适于火把花提取物双层缓释片的制备。双层片速释层在酸性介质能快速崩散、释放药物，缓释层则在肠道缓慢溶蚀。药理、毒理试验、药动试验及临床验证表明，研制的双层片具有不良反应降低，用药更加安全，方便的特点。本实验以环糊精替代糖粉的新方法可克服干燥，粉碎，制粒及压片等成型工艺中的问题。

实施例2火把花提取物双层缓释片制备

称取实施例1提供的火把花根提取物15g，淀粉适量，碳酸钙10g；缓释部分：火把花根提取物35g，PEG 6000 17.5g，环糊精52.5g，HPMC K4M 10.5g。

按实施例1优选的缓释部分处方，取火把花根提取物10.5g，加适量乙醇加热溶解，依次加入PEG 6000，环糊精及HPMC K4M的醇溶液，混匀，蒸发溶剂，干燥，粉碎，过筛，以水润湿制粒，干燥，整粒，备用。按实施例1优选的速释部分处方，取火把花根提取物4.5g，加适量乙醇溶解，依次加入药用淀粉，碳酸钙，混匀，干燥，粉碎，过筛，以3%HPC湿法制粒，干燥，整粒，备用。将缓释颗粒及速释颗粒中各拌人适量硬脂酸镁，分别装于多功能旋转式压片机的2个加料斗中，调节压力约5kg·cm^-2压片，共压制双层片1000片，片重0.27g。得到实验组I。

称取实施例1提供的去皮火把花根提取物15g，淀粉适量，碳酸钙10g；缓释部分：火把花根提取物35g，PEG 6000 17.5g，环糊精52.5g，HPMC K4M 10.5g。按上述方得到实验组Ⅱ。

实施例3火把花根提取物对哮喘的活性考察

健康雄性豚鼠45只，体重390～500g,随机分为5组。购买重庆市中药研究院制药厂产品火把花根片作为火把花普通片（昆明山海棠片）组。实验方法将45只豚鼠随机分为5组，A组：为实验组I给药组，B组：为实验组Ⅱ给药组，C组：为火把花普通片组，D组：为地塞米松给药组，E组：为哮喘对照组。

建立豚鼠哮喘模型，即腹腔注射10％卵蛋白生理盐水1ml/只以致敏，第l4天让豚鼠在雾化箱内吸人超声雾化的1％卵蛋白5min激发哮喘发作.此后每隔2天吸人1％卵蛋白1次，每次持续1min，共7次（21天）。激发哮喘第1天始A、B、C组和C组每天分别按片剂中火把花根浸膏所需原药材量0.26g/kg体重（每天分2次）给药、地塞米松片按地塞米松药物净重1.6mg/kg体重和生理盐水2ml，A、B、C和D组各自溶于2ml生理盐水中。末次激发24小时后击昏豚鼠，切开气管，用4℃生理盐水进行支气管肺泡灌洗，每次灌人1.5ml共3次，收集支气管肺泡灌洗液（BALF）。将BALF轻轻摇匀，取lml作细胞计数，余下部分离心取上清液用全自动生化分析仪测定蛋白浓度。一律剪取右上肺组织置于10％福尔马林中固定作石蜡切片，常规HE染色，光镜观察。

统计学处理计量资料

表示，采用非配对资料t检验。

BALF细胞计数及蛋白定量如表4所示，与E组比较，A、B、C和D组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞数量及蛋白浓度均下降，其差异有统计学意义（P<0.05，<0.01），其中B组降幅最为显著（P<0.01）。

表4五组豚鼠BALF细胞计数和蛋白浓度比较

注：与E组比较，*P＜0.05 **P＜0.01

通过镜检发现，E组肺组织病理学改变可见支气管粘膜和牯膜下组织有大量嗜酸性粒细胞浸润，支气管壁增厚，管腔狭窄，腔内有上皮细胞脱落及粘液等典型的哮喘气道炎症改变。与E组比较，A、B、C和D组上述表现均明显减轻。

本实验结果显示，火把花根提取物对豚鼠BALF中以嗜酸性粒细胞为主的炎性细胞数量、蛋白浓度均较哮喘对照组均有明显下降，提示火把花根提取物均能显著抑制哮喘的气道慢性炎症。尤其是B组对于抑制哮喘的气道慢性炎症的作用尤其明显，根据B组是采用火把花根芯提取制备得到这一结果，其作用机制火把花根芯中富含的的火把花三萜类化合物抑制了以嗜酸性粒细胞为主的炎性细胞的活化迁移及浸润，使毛细血管通透性增加，减轻了微血管渗漏及气道水肿，从而对哮喘发挥治疗作用。

实施例4火把花根提取物对类风湿关节炎的活性考察

健康Wistar大鼠，二级，体重(220±10)g，雌雄各半。按常规方法进行，Ⅱ型胶原用0.1moL乙酸溶解，按每4mg加1ml,Freund’s完全佐剂制成乳化剂（含Ⅱ型胶原1mg/ml）。给每只大鼠（除正常对照组）右后足跖皮下注射上述乳化后的混合抗原0.1ml（含0.1mgⅡ型胶原），正常对照组每只大鼠右盾足趾皮下注射生理盐水0.1ml。1周后以相同剂量于每只大鼠尾部加强注射1次，每天1次，连续2周。

将大鼠随机分为6组，每组10只，分别为A组：为空白模型组，给予10ml/kg蒸馏水；B组：给药5mg/kg醋酸泼尼松；C组：给药5g/kg热痹颗粒；D组：给药0.2g/kg火把花根普通片；E组：给药0.2g/kg实验组I；F组：给药0.2g/kg实验组Ⅱ。每日1次，连14天，灌胃。

给药10天后，A、B、C、D、E、F组动物以2％绵羊红细胞腹腔注射，每只0.2ml。

大鼠股静脉取血，分离血清后混合。将1ml压积绵羊红细胞加入到5ml血清中。4℃放置30min。经常振荡，离心取血清，分装保存于-70℃条件下。用时用PBS 1:10稀释。

大鼠断颈处死，PBS中匀浆，调整细胞浓度至2×10/ml，PBS洗一遍。ml脾细胞悬液，1ml0.2％绵羊红细胞，1ml体混合，置37℃1小时。离心取上清于波长540nm测OD值。

除空白模型组外，各鼠腹部去毛，范围约3cm×3cm大小，并将1％DNFB溶液均匀涂抹于上，于次日再涂抹一次。致敏第5天，将1%DNFD溶液10μl均匀涂抹于小鼠右耳（两面）进行攻击，正常对照组同样涂耳但未致敏。攻击24小时，颈椎脱臼处死大鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8mm的耳片，称重。同时取大鼠胸腺及脾脏称重。以左右耳片重量之差为肿胀度；分别以每克大鼠的胸腺重(mg)和脾重(mg)作为胸腺重量指数和脾重量指数。火把花根提取物缓释双层片对大鼠脾细胞抗体产生的影响如表5所示，火把花根提取物缓释双层片对二硝基氟苯诱导的大鼠迟发型变态反应的影响如表6所示。

表5火把花根提取物缓释双层片对大鼠脾细胞产生的影响

与模型组比较*P＜0.05，**与模型组比较P＜0.01。

细胞负责体液免疫，B细胞受抗原刺激后，可行分裂增殖并分化成熟为抗体生成细胞，且分泌相应的抗体，因此通过检测抗体的水平可判断B细胞的功能。实验动物抗体形成的原理是由于脾细胞内的抗体生成细胞可释放抗绵羊红细胞抗体，使其周围的绵羊红细胞致敏，并在补体参与下导致绵羊红细胞溶血，经离心后取上清液测OD值，表示抗体生成细胞产生抗体的多少，反映特异性抗体应答反应的程度。从表5结果可见，F组去皮火把花根提取物缓释双层片各药物组光密度值均较模型组低，与西药对照组作用一致，说明去皮火把花根提取物缓释双层片降低了Ⅱ型胶原诱发关节炎大鼠细胞免疫水平。优于C、D组。本实验表明去皮火把花根提取物缓释双层片能明显降低绵羊红细胞致敏的大鼠脾细胞抗体产生量，即对特异性体液免疫反应有明显的抑制作B用。

表6火把花根提取物缓释双层片对二硝基氟苯诱导的大鼠迟发型变态反应的影响

与模型组比较*P＜0.05，**与模型组比较P＜0.01。

迟发型超敏反应的发生与效应T细胞和吞噬细胞及其产生的细胞因子或细胞毒性介质有关。是由效应T细胞与相应抗原作用后，引起的以单个核细胞浸润和组织细胞损伤为主要特征的炎症反应。由表6可见，模型组大鼠耳肿胀值明显高于正常组，说明大鼠产生了由二硝基氟苯诱导的大鼠迟发型变态反应，其胸腺指数和脾脏指数也明显高于正常组。与模型组比较，去皮火把花根提取物缓释双层片组（E组）耳肿胀值明显降低，以上结果说明F组去皮火把花根提取物缓释双层片对二硝基氟苯诱导的大鼠迟发型变态反应有明显的抑制作用。实验结果表明，去皮火把花根提取物缓释双层片对二硝基氟苯诱导的大鼠迟发型变态反应有明显的抑制作用，即对特异性细胞免疫有抑制作用。另外，去皮火把花根提取物缓释双层片治疗后滑膜组织充血水肿明显减轻，滑膜细胞增生缓解，浸润炎细胞显著减少，血管增生缓解，血管翳形成大大减少。

实施例5火把花根提取物对系统性红斑狼疮的活性考察

选用健康家兔，随机分为5组，每组8只。按《药理实验方法学》，每只家兔每周肌肉注射lml卵白蛋白-Freund’s完全佐剂一次致敏，连续四周。末次致敏当日，家兔随机分为5组，即A组：生理盐水组(模型组)；B组：环磷酰胺组，环磷酰胺组(5200μg.kg^-1)腹腔注射给药；C组：给药0.2g/kg火把花根普通片（昆明山海棠片）；D组：给药0.2g/kg实验组I的；E组：给药0.2g/kg实验组Ⅱ。每组8只。各组按设置剂量于末次致敏当日给药或生理盐水，连续lOd。第1Od家兔背部皮内注射1%卵白蛋白(抗原攻击)，每点注射量为0.2ml。观测下列指标：抗原攻击后2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h观察每点局部皮肤红肿的直径；抗原攻击24h各组家兔股动脉取血，按聚乙二醇法测定血清循环免疫复合物的含量并分别按IL-2、IL-6检测试剂盒说明书操作方法用放射免疫分析(RIA)法测定家兔血清IL-2、IL-6水平；T细胞亚群的检测：用流式细胞仪检测CD₃ ⁺(全T细胞)、CD₄ ⁺(Th)、CD₈ ⁺(Ts)，将兔抗凝血2ml，用荧光标记相应的单克隆抗体(McAb)染色，FACS分析。数据以

表示，成组比较用方差分析。抗原攻击2h后，模型组家兔背部皮肤出现充血、出血，表明家兔Arthus反应模型已形成。

C组于抗原攻击8h以后，D组及E组于抗原攻击2h不同时间点其家兔背部皮肤红肿直径较模型组有显著差异(P<0.05)，表明火把花根双层片于家兔Arthus反应模型形成后不同时间点均可抑制家兔Arthus反应。E组（家兔背部皮肤红肿直径同环磷酰胺组比较，无显著统计学差异(P>0.05)，结果如表7所示。C、D、E组家兔血清循环免疫复合物含量显著低于模型组(P<0.05)，结果如表8所示。C、D、E各组火把花提取物片剂组家兔血清IL-2、IL-6水平较模型组显著下降(P<0.05)；E组同环磷酰胺组比较，家兔血清循环免疫复合物含量、血清IL-2、IL-6水平无显著统计学差异(P>0.05)，结果如表9所示。同时E组与环磷酰胺组均可明显提高家兔Ts%，显著降低Th%(P<0.05)结果如表10所示。

表7各组用药后对途Arthus反应的影响

同A组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01；同B组比较^△P＜0.05，^△△P＜0.01。

表8各组用药后片对Arthus反应兔血清免疫复合物的影响

同A组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01；

表9各组用药后片对Arthus反应兔血清IL-2、IL-6的影响

同A组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01；同B组比较^△P＜0.05，^△△P＜0.01。

表10各组用药后片对Arthus反应T细胞亚群的影响

同A组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01；同B组比较P＜0.05，^△△P＜0.01。

以上研究结果表明，火把花根提取物对Ⅲ型变态反应有显著的抑制作用，同时循环免疫复合物的检测显示火把花根提取物可显著降低家兔循环免疫复合物含量。由于Ⅲ型变态反应有免疫复合物形成和补体参与，提示火把花根提取物对Ⅲ型变态反应产生抑制作用的机理与其影响循环免疫复合物的形成，抑制补体活性有关。

大量实验证明，系统性红斑狼疮活动期Th细胞功能增强，出现各型细胞因子表达异常，Th细胞因子合成增多，特别是IL-2、IL-6合成增多，从而导致B淋巴细胞高度活化。火把花根是一种免疫抑制剂已为大家所公认，动物实验表明，火把花根对小鼠以溶血素为指标的初次和再次免疫反应均有抑制作用，能抑制T细胞的增殖反应、Th细胞的IL-2产生以及IL-2R的表达。故认为火把花根是主要作用于T细胞而间接抑制体液免疫的。本研究结果显示：火把花根使T细胞减少，Ts细胞增加，使Ⅲ型变态反应家兔血清IL-2、IL-6水平显著下降，这表明火把花根提取物可通过降低Th细胞的高反应性，降低Th类细胞因子如IL-2、IL-6水平，从而抑制B细胞的增殖和分化，使抗体产生减少，导致血清循环免疫复合物含量减少，产生显著抑制Ⅲ型变态反应的作用，这是其抗系统性红斑狼疮的作用机理之一，同时也证明火把花根提取物对系统性红斑狼疮具有活性,尤其以去皮火把花根提取物作用最为显著。

实施例6火把花根提取物双层缓释片对肾炎大鼠尿蛋白的影响

健康Wistar大鼠，二级，体重(220±10)g，雌雄各半。采用阿霉素肾病模型的制作方法。分3次大鼠尾静脉注射阿霉素，第一次按阿霉素40m/kg体重给药，7d后按3.5mg/kg体重给药1次，第14d再按3.5mg/kg体重给药，第21d后留取尿液，查24h尿蛋白定量。

随机将45只大鼠分为5组，即A组：正常对照组；B组：生理盐水组(模型组)；C组：给药0.2g/kg火把花根普通片（昆明山海棠片）；D组：给药0.2g/kg实验组I；E组：给药0.2g/kg实验组Ⅱ。连续灌胃28d，留取24h尿液及血样。于治疗前及治疗结束后，以代谢笼收集各组大鼠24h尿液，磺基水杨酸比浊法测定尿蛋白含量，治疗结束后取血样检测血脂、白蛋白等。尿蛋白含量变化测定结果如表11所示。

表11大鼠尿蛋白变化（mg/24h

）

*与正常对照组相比P<0.01

上述结果表明，经火把花根提取物制备的片剂治疗后的肾炎大鼠尿蛋白含量明显降低(P<0.01)，以E组最为明显，而且未经治疗的模型对照组的尿蛋白仍有增加趋势，但P>0.05。经火把花根提取物制备的片剂治疗后大鼠的血白蛋白及血脂变化，如表12所示。

表12治疗后大鼠血蛋白及血脂变化

△与正常对照组相比P值>0.05，*与正常对照组相比P值<0.05，◇与模型对照组相比P值<0.05。

本研究结果表明，经火把花根提取物治疗后的肾炎大鼠尿蛋白含量明显下降(P<0.01)，但仍未达到正常对照组的水平，且血中胆固醇有所下降(P<0.05)，血浆白蛋白有所上升(P<0.05)，也仍未达到正常对照组水平。说明单纯用火把花根提取物治疗肾炎虽然有使其蛋白尿减轻的作用，但并不能使其完全缓解，可能仍需配合使用肾上腺皮质激素等达到完全缓解。火把花根提取物降低蛋白尿的作用，可能通过阻止或修复肾小球滤过膜涎蛋白的破坏作用，从而维持其电荷屏障的完整性，减少了尿蛋白的滤出，也可能通过抑制免疫及炎症反应，降低了肾小球滤过膜的通透性，从而减少了尿蛋白的滤出。因此火把花根提取物为肾小球肾炎的治疗提供了一种新途径。

Claims (12)

1.一种火把花根提取物，其特征在于：所述为火把花根全部、火把花根皮或火把花根去皮根芯中任意一种的提取物。

2.根据权利要求1所述的火把花根提取物，其特征在于：所述火把花根提取物为采用水提醇沉工艺提取火把花根去皮根芯得到的火把花根提取物。

3.一种火把花根提取物双层缓释片，其特征在于：所述片剂分别由含有权利要求1或2所述的火把花根提取物的速释层和缓释层构成。

4.根据权利要求3所述的火把花根提取物双层缓释片，其特征在于：所述速释层和缓释层中火把花提取物的含量比为2～4:6～8。

5.根据权利要求4所述的火把花根提取物双层缓释片，其特征在于：所述缓释层的配方为火把花根提取物、PEG、环糊精、HPMC K4M、硬脂酸镁。

6.根据权利要求5所述的火把花根提取物双层缓释片，其特征在于：所述HPMC K4M的用量为缓释层总质量的15%～45%。

7.根据权利要求4所述的火把花根提取物双层缓释片，其特征在于：所述速释层的配方为淀粉、碳酸钙、HPC。

8.根据权利要求1-7任一所述的火把花根提取物双层缓释片，其特征在于：所述双层片压片的力为3～7kg·cm^-2。

9. 权利要求1-8任一所述的火把花根提取物双层缓释片在制备治疗哮喘的药物中的应用。

10.权利要求1-8任一所述的火把花根提取物双层缓释片在制备系统性红斑狼疮药物中的应用。

11.权利要求1-8任一所述的火把花根提取物双层缓释片在制备治疗肾炎的药物中的应用。

12.权利要求1-8任一所述的火把花根提取物双层缓释片在制备治疗类风湿关节炎的药物中的应用。

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