CN105250348A - 一种用于消肿止痛的火把花根外用制剂、制备方法及其应用 - Google Patents

一种用于消肿止痛的火把花根外用制剂、制备方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种用于消肿止痛的火把花根外用制剂、制备方法及其应用，其中的活性成分为火把花根的去皮根芯的乙醇提取物。本发明提供了的火把花根提取的外用制剂，作为外用制剂可以有效的降低火把花根提取物的细胞毒性。并且以火把花根的根芯入药，并采用低醇浓度的除杂方法，也更加进一步的降低了火把花根外用制剂的毒性。

Description

一种用于消肿止痛的火把花根外用制剂、制备方法及其应用
技术领域
本发明提供了一种中药外用制剂，更具体的说涉及一种用于消肿止痛的火把花根外用制剂、制备方法及其应用。
技术背景
昆明山海棠[Tripterygiumhypoglaucum(Level)Hutch，简称THH]又名粉背雷公藤、火把花、金刚藤，属卫矛科雷公藤属植物，含有二萜类及生物碱类等活性成分。产于黔东南州，尤其是雷山县雷公山一带，药用部位主要是根部；因此，也被成为火把花根。昆明山海棠与雷公藤同属卫矛科雷公藤属植物，二者在化学结构及药理作用方而相似，具有抗炎、调节免疫、抗肿瘤等作用。但是昆明山海棠属于有毒中药，中医认为“有大毒”，所含总生物碱是其主要毒性成分，并显示出肯定的细胞毒性。近年来研究发现昆明山海棠有抗生育、诱导染色体畸变、诱导细胞凋亡等作用。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了一种火把花根外用制剂中的活性成分为火把花根的去皮根芯的乙醇提取物。
所述提取火把花根去皮根芯的乙醇浓度为50-60％。
上述所述的用于消肿止痛的火把花根外用制剂的制备方法，所述用于制备外用制剂的火把花根根芯浸膏的制备方法包括以下步骤：
1)将火把花根去皮，保留根芯，将根芯粉碎，得到提取原料；
2)将提取原料用50-60％的乙醇提取，得到乙醇提取液；
3)回收乙醇提取液中的乙醇，将乙醇提取液的乙醇浓度降低到5-10％；
4)将步骤3得到的乙醇提取液，在低于10℃条件下，静置超过12h，上清液过滤，浓缩，得到火把花根根芯浸膏；
5)称取0.93g火把花根根芯浸膏，加入20mL蒸馏水，不断搅拌使其溶解，制成含药基质；
6)向含药基质中缓慢加入5mL1，2-丙二醇，0.3g苯甲酸钠，0.5g吐温-80，0.3g冰片，搅拌混匀后，用80％乙醇定容至100mL。过滤，分装，灌装入喷雾剂瓶中，即得用于消肿止痛的火把花根外用制剂。
所述的用于消肿止痛的火把花根外用制剂在制备镇痛外用制剂药物中的应用。
本发明的有益技术效果是：本发明提供了的火把花根提取的外用制剂，作为外用制剂可以有效的降低火把花根提取物的细胞毒性。并且以火把花根的根芯入药，并采用低醇浓度的除杂方法，也更加进一步的降低了火把花根外用制剂的毒性。
实施例1火把花根提取方法方法的考察
1.将火把花根去皮，保留根芯，称取去皮的火把花根根芯10kg，将根芯粉碎，得到提取原料；将提取原料用3倍以上提取原料重量的50-60％的乙醇提取3次以上，得到乙醇提取液；在低于10℃条件下，静置超过12h，上清液过滤，浓缩上清液，得到火把花根根芯浸膏1。
2.将火把花根去皮，保留根芯，称取去皮的火把花根根芯10kg，将根芯粉碎，得到提取原料；将提取原料用3倍以上提取原料重量的50-60％的乙醇提取3次以上，得到乙醇提取液；回收乙醇提取液中的乙醇，将乙醇提取液的乙醇浓度降低到5-10％；在低于10℃条件下，静置超过12h，上清液过滤，浓缩上清液，得到火把花根根芯浸膏2。
3.将火把花根去皮，保留根芯，称取去皮的火把花根根芯10kg，将根芯粉碎，得到提取原料；将提取原料用3倍以上提取原料重量的50-60％的乙醇提取3次以，得到乙醇提取液；回收乙醇提取液中的乙醇至无醇味，加水至原体积；在低于10℃条件下，静置超过12h，上清液过滤，浓缩上清液，得到火把花根根芯浸膏3。
4.称取火把花根10kg，将火把花根粉碎，得到提取原料；将提取原料用3倍以上提取原料重量的50-60％的乙醇提取3次以上，得到乙醇提取液；回收乙醇提取液中的乙醇，将乙醇提取液在低于10℃条件下，静置超过12h，上清液过滤，浓缩上清液，得到火把花根浸膏4。
以雷公藤甲素为指标对上述三组火把花根根芯浸膏进行质量检测，具体如表1所示。
表1不同火把花根提取物的质量比较
分组 干膏收率％ 雷公藤甲素转移率％ 外观
浸膏1 12.26 101.4％ 色泽棕褐色，粘稠，含有大量树脂，油脂含量高
浸膏2 7.93 98.7％ 色泽黄褐色，粘稠，树脂含量少，较少的油脂
浸膏3 5.48 46.9％ 色泽黄褐色，粘稠，树脂含量少，较少的油脂
浸膏4 14.93 99.4％ 色泽深褐色，粘稠，含有大量树脂，油脂含量高
对上述三组浸膏进行急性毒理检测，实验动物为体重20±2g的小鼠。具体如表2所示。
表2不同火把花根提取物急毒考察
分组 LD50(生药g/kg)
浸膏1 61.53
浸膏2 77.95
浸膏3 80.14
浸膏4 38.44
由此可知，采用火把花根芯的乙醇提取物并对乙醇提取物采用醇浓度降低到5-10％静置除杂，不仅能够降低杂质率，不影响活性成分含量，而且浸膏的色素含量大幅度的降低，有利于制剂。并且浸膏的毒性大幅度的降低。
实施例2火把花根外用制剂的制备
将实施例1中的四种浸膏，分别称取0.93g火把花根根芯浸膏，加入20mL蒸馏水，不断搅拌使其溶解，制成含药基质；向含药基质中缓慢加入5mL1，2-丙二醇，0.3g苯甲酸钠，0.5g吐温-80，0.3g冰片，搅拌混匀后，用80％乙醇定容至100mL。过滤，分装，灌装入喷雾剂瓶中，分别制得火把花根喷雾剂1、火把花根喷雾剂2、火把花根喷雾剂3、火把花根喷雾剂4。
综合比较火把花根喷雾剂1、火把花根喷雾剂2、火把花根喷雾剂3、火把花根喷雾剂4四种制剂，发现火把花根喷雾剂1和火把花根喷雾剂4制剂粘稠，颜色较深，喷雾到人体的皮肤上有油腻不适感。
实施例3火把花根外用制剂对热板法所致小鼠疼痛的影响
取雌性小鼠60只随机分6组，即空白对照组、阳性对照组(法斯通凝胶)、火把花根喷雾剂1、火把花根喷雾剂2、火把花根喷雾剂3和火把花根喷雾剂4组，各组小鼠腹部剃毛约2×2.5cm2，空白组外涂卡波姆基质0.1g/只，阳性对照组外涂法斯通凝胶0.1g/只，其余给药组外涂火把花根喷雾剂0.3ml/只，每天涂药1次于剃毛皮肤上，连续7天，末次涂药后30、60、90min各把小鼠放在预热至50℃的智能热板仪上，以小鼠舔后足反应的潜伏期为痛闭指标，比较各组差异。实验前筛选动物，将反应潜伏期小于5s或大于30s的动物剔除。以SPSS13.0完成统计。
表3火把花根喷雾剂对小鼠痛反应潜伏期(s)的影响的动态变化(n＝10)
分组 药后30min 药后60min 药后90min
空白对照组 13.83±2.12 11.55±2.25 11.03±2.28
阳性对照组 18.77±3.76* 15.22±4.33 14.95±3.38
火把花根喷雾剂1 24.83±4.39* 23.68±5.58**# 16.52±6.77*
火把花根喷雾剂2 23.62±5.75** 23.22±6.48**# 17.46±6.32*
火把花根喷雾剂3 16.03±5.68 15.74±5.45 12.73±3.54
火把花根喷雾剂4 23.22±5.71** 18.33±5.42* 13.94±3.97
注:*P<0.05，**P<0.01，与空白对照组比较；#P<0.01，与阳性对照组比较。
表4火把花根喷雾剂对小鼠痛反应潜伏期(s)的影响(n＝10)
痛反应潜伏期(S}
空白对照组 12.14±0.45
阳性对照组 15.63±0.76*
火把花根喷雾剂1 20.70±1.31*
火把花根喷雾剂2 21.11±1.20*#
火把花根喷雾剂3 13.16±1.24*
火把花根喷雾剂4 17.70±1.24*
注:*P<0.01，与空白对照组比较；#P<0.01，与阳性对照组比较。
由表2可知，药后60min，火把花根喷雾剂1和火把花根喷雾剂2组小鼠痛反应潜伏期显著高于空白组(P<0.01)，也显著高于阳性对照组(P<0.01)，阳性对照组、3％和12}蟾酥软膏组与空白组比较无显著性差异(P>0.05)；药后90min，火把花根喷雾剂3和火把花根喷雾剂4与空白组比较无显著性差异(P>0.05)。
取大鼠60只随机分6组，即空白对照组、阳性对照组(法斯通凝胶)、火把花根喷雾剂1、2、3、4组。先用足趾容积测量仪测量大鼠后肢足趾容积，然后每天足趾部涂药1次，空白组外涂卡波姆基质1g/只，阳性对照组外涂法斯通凝胶1留只，其余给药组外涂各浓度蟾酥软膏1留只，连续7天。末次涂药后1h每鼠右后足踢皮下注射新鲜蛋清0.2m1，分别于1，2，3，4h测量大鼠后肢足趾容积各一次，计算足趾肿胀程度，比较各组差异。
肿胀程度＝致炎后同侧足趾容积-致炎前同侧足趾容积
表5火把花根喷雾剂对蛋清所致大鼠足肿胀的影响(n＝10)
分组 右后足趾肿胀度
空白对照组 0.772±0.040
阳性对照组 0.635±0.040*
火把花根喷雾剂1 0.652±0.040*
火把花根喷雾剂2 0.604±0.040**
火把花根喷雾剂3 0.665±0.040*
火把花根喷雾剂4 0.658±0.040*
注：*P<0.05，**P<0.01，与空白对照组比较。
由表5可知，火把花根喷雾剂2组大鼠右足趾肿胀度显著低于空白组(P<0.01)；另外，阳性对照组、火把花根喷雾剂1、火把花根喷雾剂3、火把花根喷雾剂4组右足趾肿胀度均显著低于空白组(P<0.05)。

Claims (5)

1.一种用于消肿止痛的火把花根外用制剂，其特征在于：所述火把花根外用制剂中的活性成分为火把花根的去皮根芯的乙醇提取物。
2.根据权利要求1所述的用于消肿止痛的火把花根外用制剂，其特征在于：所述提取火把花根去皮根芯的乙醇浓度为50-60%。
3.根据权利要求2所述的用于消肿止痛的火把花根外用制剂的制备方法，其特征在于：所述用于制备外用制剂的火把花根根芯浸膏的制备方法包括以下步骤：
1）将火把花根去皮，保留根芯，将根芯粉碎，得到提取原料；
2）将提取原料用50-60%的乙醇提取，得到乙醇提取液；
3）回收乙醇提取液中的乙醇，将乙醇提取液的乙醇浓度降低到5-10%；
4）将步骤3得到的乙醇提取液，在低于10℃条件下，静置超过12h，上清液过滤，浓缩，得到火把花根根芯浸膏。
4.根据权利要求2所述的用于消肿止痛的火把花根外用制剂的制备方法，其特征在于：所述制剂的制备方法包括以下步骤：
1）称取0.93g火把花根根芯浸膏，加入20mL蒸馏水，不断搅拌使其溶解，制成含药基质；
2）向含药基质中缓慢加入5mL1，2-丙二醇，0.3g苯甲酸钠，0.5g吐温-80，0.3g冰片，搅拌混匀后，用80%乙醇定容至100mL；
过滤，分装，灌装入喷雾剂瓶中，即得用于消肿止痛的火把花根外用制剂。
5.权利要求1、2所述的用于消肿止痛的火把花根外用制剂在制备消肿止痛外用制剂药物中的应用。
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