CN1275639C - 一种治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病的药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病的药物,其配方由下列重量比的原料组成:黄芪9%~12%,党参9%~12%,白术5%~8%,续断5%~8%,杜仲9%~12%,白芍3%~5%,补骨脂5%~8%,当归3%~4%,山药10%~16%,大枣5%~8%,砂仁3%~4%,蔗糖16%~20%,原料总和为100%,并另加入微量的苯甲酸钠作为添加剂;其制法是将上述配方中的原料除蔗糖外,粉碎成粗粉,加水煎煮三次,合并煎液,滤过,滤液在60℃浓缩至相对密度为1.05的清膏,放冷,加乙醇使含醇量达75%,搅匀,静置,滤过,滤液在20℃浓缩至相对密度为1.05~1.15清膏,加蔗糖和微量苯甲酸钠,加水至规定量,搅匀,静置,滤过,灌封,灭菌,即得。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物,特别是一种治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病的药物。
背景技术
习惯性流产和先兆性流产是临床上常见的妇产科疾病,中医称为“滑胎,胎漏、胎动不安”。二者的发生率约占自然流产的10%。临床表现是以流产妊娠期有腰酸腹痛或下腹坠胀,或伴有少量阴道出血为主要症状。习惯性、先兆性流产的基本病理是胚胎及胎儿先死亡,底蜕膜出血,或胎盘后出血,形成胎盘后血肿,刺激子宫,使之收缩排出胚胎及胎儿。现代医学认为,习惯性、先兆性流产的发生与遗传因素、外界有毒物质影响、母体的疾病、免疫因素造成的排斥及母儿血型不合等有关。治疗上一般使用镇静药物、激素替代疗法或补充维生素等。中医药理论认为习惯性、先兆性流产的基本病机为脾肾不足,最终导致冲任气血不调,胎儿不固以致发生胎动不安,在治疗上应补脾肾,益气血。
目前常见的治疗药物有镇静药、激素类、维生素。其中较为常用的化学药有催眠镇静药如安定、雌激素如黄体酮、维生素E,但长期应用产生很大的不良反应。如早期妊娠时持续用镇静药,存在有可引起小儿唇腭裂的危险,孕妇长期服用大剂量镇静药,会影响胎儿的智力发展。妊娠期前3个月的妇女如果应用雌激素有可能使胎儿异性化;妊娠3个月以后服用雌激素,可使胎儿生殖器官暂时性增大。大量维生素E可使激素代谢紊乱,如闭经或月经过多、乳房增大肿痛,还可使血中胆固醇和甘油三酯升高,免疫功能减退。常用的中药则缺乏公认有效的制剂,普遍疗效不确切,临床疗效观察多,动物实验少。且在治疗上忽视脾肾不足这一基本病机,往往单纯补虚,缺乏对气血的调理,效果不好。因此在习惯性、先兆性流产的治疗上,尚缺乏疗效好、副作用小的理想药物。
发明内容
本发明的目的在于,提供一种治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病的药物,该药物经动物实验研究和药效、药理学试验证明,该药物具有健脾养血,补肾安胎功效,对习惯性流产和先兆性流产疾病有很好的治疗作用。
本发明的治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病的药物包含下列重量比的原料:黄芪9%~13%,党参9%~13%,白术5%~9%,续断5%~9%,杜仲9%~13%,白芍3%~6%,补骨脂5%~9%,当归3%~5%,山药10%~17%,大枣5%~9%,砂仁5%~9%,蔗糖16%~20%,原料的总和为100%,并另加入微量的苯甲酸钠作为添加剂。
上述药物的制备方法是,将上述配方中的原料除蔗糖外,粉碎成粗粉,加水煎煮三次,第一次2.5小时,第二、第三次各2小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.05(60℃)的清膏,放冷,加乙醇使含醇量达75%,搅匀,静置24小时,滤过,滤液在20℃浓缩至相对密度为1.05~1.15的清膏,加蔗糖和微量辅料苯甲酸钠,加水至规定量,搅匀,静置,滤过,灌封,灭菌,即得。
本发明制备的治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病的药物为棕褐色的液体;气微,味甜,具有健脾养血,补肾安胎功效,适用于脾肾两虚所致的先兆流产、习惯性流产症状。
具体实施方式
以下结合实施例和药效、药理试验对本发明作进一步的详细说明。
实施例1:
处方:黄芪112.5g,党参112.5g,白术75g,续断75g,杜仲112.5g,白芍45g,补骨脂75g,当归37.5g,山药150g,大枣75g,砂仁37.5g,蔗糖200g,苯甲酸钠0.3g;制成1000ml。
制法:上述配方中的原料除蔗糖外,粉碎成粗粉,加水煎煮三次,第一次2.5小时,第二、第三次各2小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.05(60℃)的清膏,放冷,加乙醇使含醇量达75%,搅匀,静置24小时,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.05~1.15(20℃)的清膏,加辅料苯甲酸钠和蔗糖,加水至规定量,搅匀,静置,滤过,灌封,灭菌,即得。
性状:本品为棕褐色的液体;气微,味甜。
鉴别方法:
(1)取本品30ml,用水饱和的正丁醇振摇提取4次,每次30ml,合并正丁醇液,用氨试液洗涤2次,每次20ml,合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验,吸取上述供试品溶液10ul、对照品溶液5μl,分别点子同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;置紫外光灯(365nm)下检视,显相同的橙黄色荧光斑点。
(2)取本品30ml,用水饱和的正丁醇振摇提取4次,每次30ml,合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取芍药苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(3)取本品30ml,用乙醚振摇提取2次,每次30ml,合并乙醚液,挥干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取阿魏酸对照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验,吸取上述供试品溶液5μl、对照品溶液3μl,分别点于同一以羟甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以苯-醋酸乙酯-甲酸(8∶2∶0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
检查项目:
相对密度应不低于1.05(中国药典2000年版一部附录VII A)。
PH值应为4.0~6.5(中国药典2000年版一部附录VII G)。
其他应符合合剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版一部附录I J)
正丁醇提取物:精密量取本品20ml,用水饱和的正丁醇振摇提取5次,每次30ml,合并正丁醇液,置已干燥至恒重的蒸发皿中,蒸干,于105℃干燥3小时,移至干燥容器中,冷却30分钟,迅速精密称定重量,计算,即得。
本品含正丁醇提取物不得少于3.0%。
含量测定 照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-醋酸(25∶75∶0.2)为流动相;检测波波长为313nm。理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量,置棕色量瓶中,加甲醇-冰醋酸(5∶1)混合溶液,制成每1ml含0.2mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 精密量取装量项下的本品30ml,加乙醚振摇提取4次,每次20ml,合并乙醚液,用5%的碳酸钠溶液振摇提取3次,每次20ml,合并碱液,用盐酸调节PH值至1~2,用乙醚振摇提取3次,每次30ml,合并乙醚液,用无水硫酸钠脱水,滤过,滤液挥干,残渣加甲醇-冰醋酸(5∶1)混合溶液溶解,转移至5ml棕色量瓶中并稀释至刻度,摇匀,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
规格 每支装10ml,每支含当归以阿魏酸(C10H10O4)计,不得少于12μg。
功能主治 健脾养血,补肾安胎,用于脾肾两虚所致的先兆流产、习惯性流产。
用法用量 口服,一次10ml,一日3次。
禁忌 难产、异位妊娠者禁用。服药期间防止剧烈运动。
实施例2:
处方:黄芪100g,党参100g,白术70g,续断75g,杜仲100g,白芍40g,补骨脂75g,当归40g,山药175g,大枣85g,砂仁37.5g,蔗糖210g,苯甲酸钠0.3g;制成1000ml。
其它均同实施例1。
需要说明的是,上述实施例可以例举许多,由于本申请采用的多为补药,因此在上述原料的范围均可以实现本发明的目的。在此不一一例举。
药方分析:
本发明的处方是申请人的科研从员根据多年临床经验结合中医理论基础及现代中医药理论研究而成。该方组方合理,疗效显著,无毒副作用,是治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病较理想的药物。该方由黄芪、党参、白术、续断等十一味中药组成,其中以黄芪、党参、白术为君药,共奏补中益气、养血健脾之功,以达到气行血行,五胎安和,冲任通盛之目的;续断,为疏通气血筋骨之要药,具补而不滞、行而不泄之特点,能补肝肾、益冲任;杜仲、补骨脂为妇科安胎之常用药,四者共为方中臣药;同时佐以当归以补血活血,山药以健脾固肾,进而达到调理血脉、补肾安胎之目的;以大枣、砂仁为使药,共奏健脾益气、滋阴养血之功。
砂仁:为姜科植物阳春砂、绿壳砂或海南砂的干燥成熟果实。阳春砂主产于广东、广西、云南、福建等地,绿壳砂主产于广东、云南等地;海南砂主产于海南及雷州半岛等地。于夏、秋间果实成熟时采收,晒干或低温干燥。用时打碎生用。药性辛、温。归脾、胃、肾经,其功效为化湿行气,温中止泻,安胎。
1、湿阻中焦及脾胃气滞证:本品辛散温通,气味芬芳,其化湿醒脾,行气温中之效均佳,古人曰其:“为醒脾调胃要药。”故凡湿阻或气滞所致之脘腹胀痛等脾胃不和诸证常用,尤其是寒湿气滞者最为适宜。若湿阻中焦者,常与厚朴、陈皮、枳实等同用。若脾胃气滞,可与木香、枳实同用,如香砂枳术丸(《景岳全书》);若脾胃虚弱之证,可配健脾益气之党参、白术、茯苓等。如香砂六君子汤(《和剂局方》)。
2.脾胃虚寒吐泻:本品善能温中暖胃以达止呕泻之功,但其重在温脾。可单用研末吞服,或与干姜、附子等药同用。
3.气滞妊娠恶阻及胎动不安:本品能行气和中而止呕安胎。若妊娠呕逆不能食,可单用,如缩砂散(《济生方》),或与苏梗、白术等配伍同用;若气血不足,胎动不安者,可与人参、白术、熟地等配伍,以益气养血安胎,如泰山磐石散(《古今医统》)。
白芍:为毛茛科植物芍药的根。主产于浙江、安徽、四川等地。夏秋季采挖,去净泥和支根,去皮,沸水浸或略煮至受热均匀,晒干。用时润透切片。一般生用或酒炒或清炒用。药性苦、酸,微寒。归肝、脾经,其功效为养血敛阴,柔肝止痛,平抑肝阳。
1.肝血亏虚,月经不调:本品味酸,收敛肝阴以养血,常于熟地、当归等同用,用治肝血亏虚,面色苍白,眩晕心悸,或月经不调,崩中漏下,如四物汤(《和剂局方》)。若血虚有热,月经不调,可配伍黄芩、黄柏、续断等药,如保阴煎(《景岳全书》);若崩漏,可与阿胶、艾叶等同用。
2.肝脾不和,胸胁脘腹疼痛,四肢挛急疼痛:本品酸敛肝阴,养血柔肝而止痛,常配柴胡、当归等,治疗血虚肝郁,胁肋疼痛,如逍遥散(《和剂局方》);也可以本品调肝理脾,柔肝止痛,与白术、防风、陈皮同用,治疗脾虚肝旺,腹痛泄泻,如痛泻要方(《景岳全书》);若与木香,黄连等同用,可治痢疾腹痛,如芍药汤(《素问病机气宜保命集》);若阴血虚筋脉失养而致手足挛急作痛,常配甘草缓急止痛,即芍药甘草汤(《伤寒论》)。
3.肝阴上亢,头痛眩晕:以本品养血敛阴、平抑肝阳,常配牛膝、代赭石、龙骨、牡蛎等,如镇肝息风汤、建瓴汤(《医学衷中参西录》)。
当归:为伞形科植物当归的根。主产于甘肃省东南部的岷县,产量多,质量好。其次,陕西、四川、云南、湖北等省也有栽培。秋末采挖,除尽芦头、须根,待水分稍行蒸发后按大小粗细分别捆成小把,用微火缓缓熏干或用硫磺烟熏,防蛀防霉切片生用,或经酒拌、酒炒用。药性甘辛温。归肝、心、脾经。功效为补血调经,活血止痛,润畅通便。
1.血虚诸证:本品甘温质润,长于补血,为补血之圣药。若气血两虚,常配黄芪、人参补气生血,如当归补血汤(《兰室秘藏》)、人参养荣汤(《温疫论》);若血虚萎黄、心悸失眠,常于熟地黄、白芍、川芎配伍,如四物汤(《和剂局方》)。
2.血虚血瘀,月经不调,经闭,痛经:常以本品补血活血,调经止痛,常与补血调经药同用,如《和剂局方》四物汤,既为补血之要剂,又为妇科调经的基础方;若兼气虚者,可配人参、黄芪;若兼气滞者,可配香附、延胡索;若兼血热者,可配黄芩、黄连或牡丹皮、地骨皮;若血瘀经闭不通者,可配桃仁、红花;若血虚寒滞者,可配阿胶、艾叶等。
3.虚寒性腹痛,跌打损伤,痈疽疮疡,风寒痹痛:本品辛行温通,为活血行气之要药。本品补血活气、散寒止痛,配桂枝、芍药、生姜等同用,治疗血虚血瘀寒凝之腹痛,如当归生姜羊肉汤、当归建中汤;本品活血止痛,与乳香、没药桃仁、红花等同用,治疗跌打损伤瘀血作痛,
4.血虚肠燥便秘:本品补血以润肠通便,用治血虚肠燥便秘。常与肉苁蓉、牛膝、升麻等同用,如济川煎。
山药:为薯蓣科植物薯蓣的根茎。主产于河南省,湖南、江西等地亦产。习惯认为河南所产者品质最佳,故有“怀山药”之称霜降后采挖,刮去粗皮,晒干后烘干,为“毛山药”;或再加工为“光山药”。润透,切厚片,生用或麸炒用。药性甘、平。归脾、肺、肾经。功效为补脾养胃,生津益肺,补肾涩精。
1.脾虚证:本品性味甘平,能补脾益气,滋养脾阴。多用于脾气虚弱或气阴两虚,消瘦乏力,食少,便溏;或脾虚不运,湿浊下注之妇女带下。
2.肺虚证:本品又能补肺气,兼能滋肺阴。其补肺之力虽较和缓,但对肺脾气阴俱虚者,补土亦有助于生金,治肺虚咳喘,可与脾肺双补之太子参、南沙参等品同用,共奏补肺定喘之效。
3.身虚证:本品还能补肾气,兼能滋养肾阴,对肾脾俱虚者,其补后天亦有助于充养先天。适用于肾气虚之腰膝酸软,夜尿频多或遗尿,滑精早泄,女子带下清稀及肾阴虚之形体消瘦,腰膝酸软,遗精等症。历代不少补肾名方,如肾气丸、六味地黄丸中均配有本品。
大枣:为鼠李科植物枣的成熟果实。主产于河北、河南、山东等地。秋季果实成熟时采收,晒干,生用。药性甘、温。归脾、胃心经;功效为补中益气,养血安神;
1.脾虚证:本品甘温,能补脾益气,适用于脾气虚弱,消瘦、倦怠乏力、便溏等症。单用有效。若气虚乏力较甚,宜于人参、白术等补脾益气药配伍。
2.脏躁,失眠证:本品能养心安神,为治疗心失充养,心神无主而脏燥的要药。单用有效,如《证治准绳》治脏躁自悲自哭自笑,以红枣烧存性,米饮调下。因其证多与心阴不足,心火亢盛有关,且往往心气亦不足,故常与浮小麦、甘草配伍,如甘麦大枣汤(《金匮要略》)。《千金方》还用本品治疗虚劳烦闷不得眠者。
此外,本品与部分药性均烈或有毒的药物同用,有保护胃气,缓和气毒烈药性之效,如十枣汤(《伤寒论》),即用以缓和甘遂、大戟、芫花的烈性与毒性。
补骨脂:为豆科植物补骨脂的成熟果实。主产于陕西、河南、山西、江西、安徽、广东、四川、云南等地。栽培或野生,以河南、四川等地较多。秋季果实成熟时采收,晒干。生用,炒或盐水炒用。药性苦、辛,温。归肾、脾经。功效为补肾壮阳,固精缩尿,温脾止泄,纳气平喘。
1.肾虚阳痿,腰膝酸软:本品苦辛味燥,善壮肾阳,暖水脏,常与菟丝子、胡桃肉、沉香等同用,治肾虚阳痿,如补骨脂丸(《和剂局方》);与杜仲、胡桃肉同用,治肾虚阳衰,风冷侵袭之腰膝冷痛等,如青蛾丸(《和剂局方》)。
2.肾虚遗精,遗尿,尿频:本品兼有涩性,善补肾助阳,固精缩尿,单用有效,亦可随证配伍它药。如治滑精,以补骨脂、青盐等分同炒为末服(《三因方》);单用本品炒,为末服,治小儿遗尿,如破故纸散(《补要袖珍小儿方论》);与小茴香等分为丸,治肾气虚冷,小便无度,如破故纸丸(《魏氏家藏方》)。
3.脾肾阳虚,五更泄泻:本品能壮肾阳、暖脾阳以止泄,与肉豆蔻、生姜、大枣为丸,如二神丸(《本事方》);或上方加吴茱萸、五味子,治五更泻,如四神丸(《政治准绳》)。
4.肾不纳气,虚寒喘咳:本品补肾助阳,纳气平喘,多配伍胡桃肉、蜂蜜等,可治虚寒性喘咳,如治喘方(《医方论》)。或配人参、木香等用治虚喘痨嗽,如劳嗽方(《是斋医方》)。
黄芪:为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根。主产于内蒙、山西、黑龙江等地。春秋二季采挖。除去须根及根头,晒干,切片,生用或蜜炙用。药性甘,微温。归脾、肺经。功效为健脾补中,升阳举陷,益卫固表,利尿,托毒生肌。
1.脾气虚证:本品甘温,善入脾胃,为补中益气要药。脾气虚弱,倦怠乏力,食少便溏者,可单用熬膏服,或与党参、白术等补气健脾药配伍。因其能升阳举陷,故长于治疗脾虚中气下陷之久泻脱肛,内脏下垂。常与人参、升麻、柴胡等品同用,如补中益气汤(《脾胃论》)。若脾虚水湿失运,以致乳肿尿少者,本品既能补脾益气,又能利尿消肿,标本兼治,为治气虚水肿之要药,常与白术、茯苓等利水消肿之品配伍。本品又能补气生血,治血虚证亦常与补血药配伍,如当归补血汤(《兰室秘藏》)以之与当归同用。对脾虚不能统血所致失血证,本品尚可补气以摄血,常与人参、白术等品同用,如归脾汤(《济生方》)。对脾虚不能布津之消渴,本品能补气生津,促进津液的生成与输布而有止渴之效,常与天花粉、葛根等品同用,如玉液汤(《医学衷中参西录》).
2.肺气虚证:本品入肺又能补益肺气,可用于肺气虚弱,咳喘日久,气短神疲者,常与紫菀、款冬花、杏仁等祛痰止咳平喘之品配伍。
1、气虚自汗:脾肺气虚之人往往卫气不固,表虚自汗。本品能补脾肺之气,益卫固表,常与牡蛎、麻黄根等止汗之品同用,如牡蛎散(《合剂局方》)。若因卫气不固,表虚自汗而易感凤邪者,宜于白术、防风等品同用,如玉屏风散(《丹溪心法》)。
党参:药性甘、苦,温。归脾、胃经。功效为健脾益气,澡湿利尿,止汗,安胎。
1、肺气虚证:本品性味甘平,主归脾肺二经,以补脾肺之气为主要作用。用于中气不足的体虚倦怠,食少便溏等症,常与补气健脾除湿的白术、茯苓等同用;
2、气血两须证:本品既能补气,又能补血,常用于气虚不能生血,或血虚无以化气,而见面色苍白或萎黄、乏力、头晕、心悸之气血两虚证。常配伍黄芪、白术、当归、熟地等品,以增强其补气补血效果。
3.气津两伤证:本品对热伤气津之气短口渴,亦有补气生津作用,适用于气津脸上的轻证,宜于麦冬、五味子等养阴生津之品同用。此外,本品亦常与解表药、攻下药等驱邪药配伍,用于气虚外感或里实热而气血亏虚等邪实正虚之证,以扶正祛邪,使功邪而正气不伤。
白术:药性苦、辛,归肝、肾经。功效为补益肝肾,强筋健骨,止血安胎,疗伤续折。
1、脾气虚证:本品甘苦性温,主归脾胃经,以健脾、澡湿为主要作用,被前人誉之为“脾脏补气健脾第一要药”。脾主运化因脾气不足,运化失健,往往水湿内生,引起食少、便溏或泄泻、痰饮、水肿、带下诸证。本品既能长于补气以复脾运,又能澡湿、利尿以除湿邪。治脾虚有湿,食少便溏或泄泻,常与人参、茯苓等品同用,如四君子汤(《和剂局方》)。治脾虚中阳不振,痰饮内停者,宜于温阳化气、利水渗湿之品配伍,如苓桂术汤(《金匮要略》)。治脾虚水肿,可与茯苓、归置等药同用。治脾虚湿浊下注,带下清稀者,可与健脾澡湿之品同用。
2、气虚自汗:本品善治脾气虚弱,卫气不固,表虚自汗者,其作用与黄芪相似而力稍逊,亦能补脾益气,固表止汗。《千金方》单用本品治汗出不止。脾肺气虚,卫气不固,表虚自汗,易感风邪者,宜于黄芪、防风等补益脾肺、祛风之品配伍,以固表御邪,如玉屏风散(《丹溪心法》)
3、胎动不安:本品还能益气安胎。用于脾虚胎儿失养者,本品可补气健脾,促进水谷运化以养胎,宜于人参、阿胶等补益气血之品配伍;治脾虚失运,湿浊中阻之妊娠恶阻,呕恶不食,四肢沉重者,本品可补气健脾澡湿,宜于人参、茯苓、陈皮等补气健脾除湿之品配伍;治脾虚妊娠水肿,本品既能补气健脾,又能利水消肿,亦常与健脾利水之品配伍使用。
1.阳痿不举,遗精遗尿:本品甘温助阳,辛温散寒,用治肾阳不足,下元虚冷之阳痿不举、遗精滑泄、遗尿尿频等症。常与鹿茸、肉苁蓉、菟丝子等壮阳起痿之品配伍,如鹿茸续断散(《鸡峰普济方》)或与远志、蛇床子、山药等壮阳宜阴,交通心肾之品同用,如远志丸(《外台秘要》);亦可与龙骨、茯苓同用,用治滑泄不禁之症,如锁精丸(《和剂局方》)。
2.腰膝酸痛,寒湿痹痛:本品甘温助阳,辛以散瘀,兼有补益肝肾,强筋壮骨,通利血脉之功,可与草薄、杜仲、牛膝等同用,治肝肾不足,腰膝酸痛,如续断丹(《证治准绳》);亦可与防风、川乌等配伍,用治肝肾不足兼寒湿痹痛,如续断丸(《和剂局方》)。
3.崩漏下血,胎动不安:本品补益肝肾,调理冲任,有固本安胎之功。可用于肝肾不足之崩漏下血,胎动不安等症。配伍侧柏炭,当归,艾叶等止血活血,温经养血之品,用治崩中下血不止者(《永类钤方》)。
杜仲:药性甘,温。归肝、肾经。功效为补肝肾,强筋骨,安胎。
1.肾虚腰痛及各种腰痛:以其补肝肾、强筋骨,肾虚腰痛尤宜。其它腰痛用之,均有扶正固本之效。常与胡桃肉、补骨脂同用,治肾虚腰痛或足膝痿弱,如青娥丸(《和剂局方》);与独活、桑寄生、细辛等同用,治风湿腰痛冷重,如独活寄生汤(《千金方》);与川芎、桂心、单身等同用,治妇女经期腰痛;与鹿茸、山茱萸、菟丝子等同用,治疗肾虚阳痿,精冷不固,小便频数,如十补丸(《鲍氏验方》)。
2.胎动不安,习惯性堕胎:常以本品补肝肾、固冲任安胎,单用有效,亦可与桑寄生、续断、阿胶、菟丝子等同用。如《圣济总录》杜仲丸,单用本品为末,枣肉为丸,治胎动不安;《简便单方》以之与续断、山药同用,治习惯性堕胎。
主要药效学试验
特别说明:以下文中出现的乐孕宁口服液,均指本发明的治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病的药物。
1、对动物实验性流产的防治作用
SD大白鼠80只(雌鼠60只,雄鼠20只)。体重220±20g。动物购买后适应性饲养1周开始实验。择动情前期以1∶1比例,与雄鼠单笼交配。以涂片中见到精子为妊娠第1天。并将雄鼠取出。妊娠雌鼠随机分至模型对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、中药对照组及空白对照组中。
模型对照组 制备大鼠肾虚流产模型。妊娠第3天始至第12天灌服羟基脲蒸馏水溶液。妊娠第12天灌服米非司酮1次。(羟基脲:济南制药厂生产。动物给药量为每天每百克体重20mg。研粉溶于蒸馏水中备用。米非司酮:北京第3制药厂生产。每片25mg。动物给药量为每天每百克体重3.75mg。研粉溶于蒸馏水中备用。)
高、中、低剂量组 除同模型对照组给药外,另同时给予乐孕宁口服液(每毫升含生药0.9克)高剂量11.67g/kg中剂量5.83g/kg、低剂量2.92g/kg灌胃(分2次灌胃)。
寿胎丸对照组 寿胎丸为张锡纯《医学衷中参西录》中方剂。方由菟丝子、桑寄生、续断、阿胶组成。按比例称取各药,水煎、过滤,至每毫升溶液中含生药0.17。动物给药量为每天每百克体重2.4ml,分2次灌胃。
空白对照组 每日灌服同体积蒸馏水。
观察指标 观察所有造模大鼠的一般情况,如体重、被毛、活动情况等。所有雌鼠于妊娠第15天处死。观察活胎数、流产数、流产率的变化以及对血清抗滋养细胞抗体和IL-2的作用等(抗滋养细胞抗体试剂盒购自上海贝西科技生物公司,IL-2试剂盒购自北京东雅生物技术研究所)。
结果 大鼠的一般情况 羟基腺给药1周左右大鼠出现体重增加缓慢、被毛蓬松、拱背少动等类似肾虚证候;模型对照组还见体重减轻、畏寒肢冷等症;孕12天予米非司酮后,孕12或14天均见阴道出血现象;解剖时发现造模各组动物流产情况不一。
1.1各组活胎数、流产数、流产率变化情况见表1
表1 各组活胎数、流产数、流产率变化比较
组别 | 样本数(n) | 活胎数(n) | 流产数(n) | 流产率(%) |
空白对照组模型对照组乐孕宁高剂量组乐孕宁中剂量组乐孕宁低剂量组寿胎丸对照组 | 777777 | 6.581±1.5210.867±0.910**1.867±1.355#4.724±1.37##3.867±2.025##2.581±1.262# | 0.141±0.3685.153±1.763**3.581±0.786#2.153±0.68##2.581±0.786##3±1# | 0.023±0.05485.924±14.231**57.324±15.857##32.481±14.131##43.2±17.890##62.062±13.625## |
**:与空白对照组比较P<0.01。*:与空白对照组比较P<0.05。
##:与模型对照组比较P<0.01。#:与模型对照组比较P<0.05。
表1结果显示,模型对照组较空白对照组活胎数显着下降,P<0.01。各治疗组均有明显的保胎效果,与模型对照组比较分别为P<0.05、P<0.01、P<0.01、P<0.05。乐孕宁中剂量组明显优于高剂量组和对照组,P<0.05。模型对照组流产数显着高于空白对照组,P<0.01。各治疗组与模型对照组比较均有显着差异,分别为P<0.05、P<0.01、P<0.01、P<0.05。乐孕宁中、低剂量组疗效高于对照组,分别为P<0.01和P<0.05,高于高剂量组,均P<0.05。与空白对照组比较,模型对照组流产率显着上升,P<0.01。乐孕宁各组治疗后较模型对照组流产率显着下降,统计结果均为P<0.01。乐孕宁中、低剂量组保胎效果优于高剂量组和对照组,分别为P<0.01、P<0.05。
1.2血清抗滋养细胞抗体检测结果见表2。
表2 各组血清抗滋养细胞抗体检验结果比较
组别 | 样本数(n) | 抗滋养细胞抗体(ng/ml) |
空白对照组模型对照组乐孕宁高剂量组乐孕宁中剂量组乐孕宁低剂量组寿胎丸对照组 | 667878 | 0.728±0.5421.496±0.926*1.364±0.8680.851±0.6441.338±1.1640.849±0.543 |
*:与空白对照组比较P<0.05
模型对照组血清抗滋养细胞抗体含量明显升高,P<0.05。乐孕宁高、中、低剂量组疗后血清抗滋养细胞抗体均为正常水平,与空白对照组无差异,P>0.05。其余各组间均无统计学差异。
1.3血清IL-2检测结果见表3。
表3 各组血清IL-2检测结果比较
组别 | 样本数(n) | IL-2(ng/ml) |
空白对照组模型对照组乐孕宁高剂量组乐孕宁中剂量组乐孕宁低剂量组寿胎丸对照组 | 786879 | 1.77±0.7342.561±0.467*1.894±0.582#1.986±0.595#1.982±0.455#1.984±0.579# |
*:与空白对照组比较P<0.05。#:与模型对照组比较P<0.05。
表3显示,与空白对照组比较,模型对照组IL-2水平显着升高,P<0.05。乐孕宁高、中、低剂量治疗后使模型升高的IL-2含量下降至正常,与空白组比较P>0.05。
2、对流产大鼠组织形态学的影响
给药及造模方法同前。实验动物处死后,立即取下卵巢、妊娠子宫、肝脏、肾脏,以10%福尔马林固定。系列酒精脱水,透明,石蜡包埋,切片,HE染色。光镜下观察各组织的形态学变化。
2.1子宫、卵巢肉眼观察:①正常非妊娠子宫:子宫细小。②正常妊娠子宫:粗大如串珠状,解剖后见胚胎完好。③部分流产:宫腔内见胚胎不完整。④完全流产:宫腔内未见胚胎或明显瘀血征象。光镜观察:①子宫:正常对照组显示蜕膜组织完整,未见出血,胚胎发育正常;模型对照组表现胚胎消失,蜕膜细胞退变,可见出血及炎细胞渗出;中药高剂量组的蜕膜完整,局部蜕膜细胞退变,胚胎发育成熟;中药中剂量组蜕膜完整,部分细胞退变;低剂量组的蜕膜细胞部分退变,可见存活胚胎;寿胎丸组蜕膜细胞部分退变,局部瘀血。②卵巢:正常对照组显示黄体体积较大,细胞胞浆丰富,深染,部分退变;模型对照组则表现部分黄体萎缩、退变;乐孕宁高剂量组的黄体体积较大,细胞胞浆丰富;中剂量组黄体体积较大,胞浆丰富,深染;低剂量组黄体体积较大,局部细胞退变;寿胎丸组黄体体积大小不一,部分黄体退变。
2.2肝脏、肾脏各组大鼠肝脏和肾脏组织的光镜下观察显示均无明显改变。提示本实验模型及乐孕宁不同剂量灌胃治疗均未对大鼠肝脏和肾脏组织产生明显影响。
2.3妊娠大鼠及其子代的大体观察
各中药组随机保留1只妊娠大鼠至生产,追踪观察妊娠大鼠及其子代(至2月龄):妊娠大鼠无异常;子代大体观察无畸形,体重、被毛、活动等与正常产鼠无差异。初步表明了乐孕宁口服液无明显毒副作用。
3、对实验动物离体子宫平滑肌的影响
对大鼠离体子宫的作用 雌性未孕Wistar大鼠,体重200±20g,制备离体子宫标本,置于离体器官测定仪浴槽内,稳定后,加入乐孕宁使浴液药浓度分别为5.65×10-3、11.3×10-3、22.6×10-3g/ml,子宫均呈明显的抑制作用,给药前后的数值见表3,药效与剂量有明显的依赖关系。
表4 乐孕宁对大鼠离体子宫收缩活动的影响
组别 | 子宫标本(条) | 幅度(cm) | 张力(cm) | 频率(次/min) |
IIIIII | 药前8药后8药前10药后10药前10药后10 | 2.28±0.841.31±1.09**2.90±1.130.38±0.43**3.16±0.35**0.35±0.35** | 0.78±0.580.38±0.26*0.40±0.280.23±0.09*1.12±1.070.27±0.34* | 0.99±0.210.76±0.330.84±0.310.39±0.33**0.97±0.310.43±0.33** |
注:I组:NYN5.65(×10-3g/ml),II组:NYN11.3,III组:NYN22.6;与给药前比较,*P<0.05;**P<0.01
此外,乐孕宁口服液还能非常显着地拮缩宫素(Oxy)和乙酰胆碱(Ach)对子宫的兴奋作用。乐孕宁5.65×10-3、11.3×10-3、22.6×10-3g/ml的浴液对Oxy(2.5×10-3u/ml)兴奋子宫的抑制作用分别为幅度差1.58±0.22cm,2.12±37cm,4.01±0.52cm(P<0.01),小于正常的子宫收缩幅度;张力差为1.90±0.51cm,2.32±0.47cm,30.01±0.52cm(P<0.01).乐孕宁11.3×10-3g/ml浴液对Ach(5×10-5g/ml)的拮抗幅度差4.24±1.20cm;张力差4.79±0.76cm(P<0.05)。
二、乐孕宁口服液毒性试验
1、急性毒性试验
昆明种小鼠40只,18~22g,雌雄各半,用等体积灌胃(0.2mL/10g,最高剂量为23.24g/kg),24h内2次灌胃,连续观察2周,记录中毒表现及死亡情况。
SD大鼠40只,180~220g,雌雄各半,等体积灌胃,最高剂量为23.24g/kg,24h内行2次等体积灌胃(2mL/10g),连续观察2周,记录中毒表现及死亡情况。
结果:在24h内等体积灌胃给2次乐孕宁口服液,连续观察2周,各组大鼠、小鼠在急性毒性实验期间生长情况良好,均未见异常反应,无死亡发生。受试动物大鼠、小鼠经口LD50雌、雄性均大于23.24g/kg,根据急性毒性分级标准,乐孕宁口服液属无毒物。
2、长期毒性试验
取SD种大白鼠80只,体重188±15g,雌雄各半,随机分为四组,每组20只,大剂量组(11.67g/kg),相当于成人临床用量的30倍,中剂量组(5.83g/kg),相当于成人临床用量的15倍,小剂量组(2.92g/kg)和水对照组(10mlk/kg)。每日灌胃给药一次,连续给药一个月。每周称体重一次,每日观察其食量、外观、行为、分泌物、粪便等。一个月后,断头处死,取血进行有关检验,对主要脏器称湿重,求脏体比并进行病理学检查。
(1)一般状况的观察:
给大鼠灌胃给药后,大、中、小剂量组大鼠,毛发有光泽,活动自如,体态正常,摄食、粪便等均未见异常,体重逐渐增加,与对照组相比,无明显变化(P>0.05)。
(2)血液学检查:
一个月将大鼠断头,立即采血检查红血球(RBC),白血球(WBC)计数,血红蛋白(HB)测定和白血球分类。结果表明,各项指标大、中、小剂量,与对照组相比,无明显异常(均P>0.05)。
(3)对血液生化指标的影响:
a.肝功的测定:包SGPT、SGOT、总蛋白、白蛋白。试验结果见表5。
表5 对大鼠SGPT的影响 X±SD
组别 | 动物数 | SGPT(U) | SGOT(U) | 总蛋白(g/L) | 白蛋白(g/L) |
对照组 | 20 | 84±15 | 65±24 | 69±24 | 37±16 |
小剂量组 | 20 | 89±17 | 77±19 | 73±13 | 33±13 |
中剂量组 | 20 | 97±23 | 69±17 | 78±15 | 41±11 |
大剂量组 | 20 | 98±24 | 73±25 | 63±19 | 43±23 |
实验结果表明:大、中、小剂量组与对照组相比较,对肝功无明显影响(均P>0.05)。
b.肾功能测定:包括尿素氮、肌酐、实验结果见表6。
表6 对血浆尿素氮和肌酐含量的影响
组别 | 动物数 | 血浆尿素氮含量mg% | 肌酐含量mg% |
对照组 | 20 | 12.5±3.6 | 1.3±0.7 |
小剂量组 | 20 | 9.5±2.5 | 1.5±0.5 |
中剂量组 | 20 | 9.8±3.3 | 1.1±0.4 |
大剂量组 | 20 | 9.8±3.3 | 1.0±0.5 |
实验结果表明:大、中、小剂量组与对照组相比较,尿素氮及肌酐均无明显变化(均P>0.05),对肾功能无明显影响。
(4)脏体比观察:
断头处死大白鼠后,迅速取出心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、睾丸,滤纸上除去血液,称其湿重,求其脏体比。
实验结果表明:各组大鼠心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、睾丸体比,与对照组相比教,均无明显变化(均P>0.05),对主要脏器系数无明显影响。
(5)病理学检查:
实验结束后,处理动物时,行肉眼尸检,结果各组大鼠的心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、睾丸、子宫、胃、肠、胸腔及腹腔,均未见有颜色、形态异常,无活动性病变。遂取心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、小肠、肠系膜淋巴结、胸骨骨髓、肾上腺、胸腺、甲状腺组织,用10%甲醛固定,石蜡包埋,切片HE染色,镜下进行病理观察。结果,同对照组比较,各给药组动物以上组织细胞结构清晰,未发现与给药有关的病理学改变。
3、致畸试验
取符合要求的Wister大鼠,每日晚上8点按雌、雄2∶1合笼交配,次日晨取出雄鼠,雌鼠阴道涂片检查精子。将孕鼠按受孕时间先后,随机分为5组,每组受孕鼠12~15只,3个受试物剂量组分别为31.1、15.6和7.8g/(kg·d),最高剂量相当于临床拟用量的80倍,另设溶剂对照组(蒸馏水)和阳性对照组(维生素A)。各试验组孕鼠检出精子的当天作为受孕第0天,孕鼠在妊娠第6~15天(组织分化和器官形成期)1次/d经口灌胃给药,每3d称体重1次,并按体重变化调整给药剂量,同时观察记录动物活动及摄食状况。乐孕宁口服液各剂量组用蒸馏水配制所需浓度的水溶液,维生素A用色拉油配制。孕鼠于孕期第20天断头处死,剖腹检查,称子宫连胎重,记录着床数、胎仔数、活胎、死胎、早期和晚期吸收胎数、卵巢黄体数;称孕鼠各脏器重,计算脏器系数〔脏器重(g)/体重(g)×100〕;取出胎仔及胎盘称重,检查胎仔外观畸形,测量每只胎鼠的身长、尾长和胸围,检查活胎的外观。将每窝50%活胎仔放入Bouin液中固定,作徒手切片,检查内脏畸形(腭、鼻、眼、脑、心、肺、肝、脾、胃肠、肾、生殖器);另50%活胎仔经体积分数为95%的乙醇固定,透明和茜素红染色后,作骨骼畸形检查。
所得数据以EXCEL建立数据库,计算各指标的算术均数和标准差,用SPSS软件进行方差检查分析体重、脏器系数的组间差异,x2检验分析异常率和畸形率。
3.1乐孕宁口服液对孕鼠体重和脏器系数的影响 高、中剂量组孕鼠体重增长较阴性组慢,且有随给药剂量增加体重减轻的趋势,但各组孕鼠体重增长差异均无显着性(P>0.05),妊娠第20天各组孕鼠各脏器系数差异亦无显着性(P>0.05)。
3.2乐孕宁口服液对孕鼠胚胎发育的影响 由表1可见,各剂量组与阴性对照组比较,活胎率、吸收胎率差异均无显着性(P>0.05)。
表7 乐孕宁口服液对孕鼠胚胎发育的影响
组别 | 着术数 | 黄体数 | 窝平均活胎数 | 活胎数% | 死胎数% | 吸收胎数% |
高剂量组 | 70 | 75 | 14 | 70 100.00 | 0 0.00 | 0 0.00 |
中剂量组 | 129 | 141 | 14 | 124 96.12 | 0 0.00 | 5 3.88 |
低剂量组 | 133 | 150 | 12 | 128 96.24 | 0 0.00 | 5 3.76 |
阴性组 | 104 | 135 | 10 | 100 96.15 | 2 1.92 | 2 1.92 |
阳性组 | 144 | 170 | 14 | 135 93.75 | 7 4.86 | 2 1.39 |
3.3乐孕宁口服液对胎鼠一般发育状况的影响 由表2可见,各剂量组胎鼠平均体重、胎盘重、身长、尾长和胸围都比阴性对照组低,但经统计学分析,差异均无显着性(P>0.05)。
表8 胎鼠各组平均体重、胎盘重、身长、尾长、胸围(
x±s)
组别 | 胎鼠数 | 平均体重(g) | 胎盘重(g) | 身长(cm) | 尾长(cm) | 胸围(cm) |
高剂量组 | 70 | 4.01±1.31 | 0.55±0.07 | 3.69±0.58 | 1.39±0.11 | 3.62±0.48 |
中剂量组低剂量组阴性组阳性组 | 129133104144 | 3.99±0.353.68±0.984.55±1.063.90±0.99 | 0.56±0.110.54±0.140.58±0.160.51±0.09 | 3.60±0.123.43±0.493.75±0.423.49±0.28 | 1.35±0.031.33±0.131.42±0.131.36±0.14 | 3.57±0.123.44±0.393.75±0.413.78±0.43 |
3.4乐孕宁口服液对胎鼠外观和内脏的影响 胎鼠内脏用徒手切片法检查,给药组除高剂量出现1例脑室增大外,其它各剂量组均未见明显畸形,但阳性对照组出现多种畸形,总畸形率为60%,畸形类型主要为脑室增大、眼异常和心脏增大,分别为12.7%、14.3%和14.3%,其次为肝脏扩大、巨型胃、多囊肾和舌分叉等。
3.5乐孕宁口服液对胎鼠骨骼发育的影响 试验组均可见胸骨缺失或骨化迟缓,除阳性对照组出现1例胸骨全缺失以外,其它均表现为第2、5胸骨的缺失或骨化迟缓,各剂量组与阴性对照组比较,差异均无显着性,而阳性对照组与阴性对照组比较,差异则有极显着性(P<0.01),各组都未见其它骨骼畸形。
结论:结果表明各剂量组与阴性对照组比较,胎鼠平均体重、身长、尾长和胸围差异均无显着性,说明该药没有发育毒性。3个剂量组间胎鼠的外观、骨骼和内脏畸形发生差异均无显着性(P>0.05),说明该药在本试验条件下未见明显致畸作用。
Claims (2)
1.一种治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病的药物,其特征在于,该药物由下列重量比的原料组成:黄芪9%~13%,党参9%~13%,白术5%~9%,续断5%~9%,杜仲9%~13%,白芍3%~6%,补骨脂5%~9%,当归3%~5%,山药10%~17%,大枣5%~9%,砂仁5%~9%,蔗糖16%~20%,原料的总和为100%,并另加入微量的苯甲酸钠作为添加剂。
2.治疗妇科习惯性流产和先兆性流产疾病的药物的制备方法,其特征在于,按下列步骤制备:
1)配方由下列重量比的原料组成:
黄芪9%~13%,党参9%~13%,白术5%~9%,续断5%~9%,杜仲9%~13%,白芍3%~6%,补骨脂5%~9%,当归3%~5%,山药10%~17%,大枣5%~9%,砂仁5%~9%,蔗糖16%~20%,原料的总和为100%,并另加入微量的苯甲酸钠作为添加剂。
2)将上述配方中的原料除蔗糖外,粉碎成粗粉,加水煎煮三次,第一次2.5小时,第二、第三次各2小时,合并煎液,滤过,滤液在60℃温度下浓缩至相对密度为1.05的清膏,放冷,加乙醇使含醇量达75%,搅匀,静置24小时,滤过,滤液在20℃浓缩至相对密度为1.05~1.15的清膏,加蔗糖和微量辅料苯甲酸钠,加水至规定量,搅匀,静置,滤过,灌封,灭菌,即得。
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