CN102000303B - 一种抑制肿瘤的中药复方制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种抑制肿瘤的中药复方制剂，该制剂是由下述原料药制成：西洋参90～100g、鹿茸45～50g、醋莪术180～200g、重楼90～100g、半枝莲90～100g、山慈菇90～100g、积雪草45～50g、壁虎90～100g、蛤蚧45～50g、蕲蛇45～50g、百合90～100g。同时本发明还公开该制剂的制备方法。本发明在民间验方的基础上历经数年，运用现代中医药理论，通过君、臣、佐、使配伍，达到抑制肿瘤的生长，增殖以及迁移的作用，从而控制肿瘤的转移及其转化，消肿散结的效果很好，有助于减少肿瘤病人的疼痛，增加癌症患者的寿命。

Description

一种抑制肿瘤的中药复方制剂

技术领域

本发明涉及一种中药复方制剂，尤其涉及一种抑制肿瘤的中药复方制剂。

背景技术

肿瘤(tumor)是细胞产生的赘生物细胞群，可以是良性的，也可以是恶性的，其中恶性肿瘤称之为癌症。在我国，癌症是人死亡的第二大因素，仅次于心血管疾病，尽管人类平均寿命延长，恶性肿瘤对人类的威胁日益显得突出，随着疾病谱的改变，肿瘤已成为目前死亡常见原因之一，世界的癌症发病率每年都递增，全世界每年约760万人死于癌症，有1010余万人患恶性肿瘤。恶性肿瘤为男性第二位死因，女性第三位主要死因。我国每年约新发病例200万，死亡约150余万人，其中60％以上为消化系统癌症。我国最常见的恶性肿瘤，在城市依次为肺癌、胃癌、肝癌、肠癌与乳癌。在农村为胃癌、肝癌、肺癌、食管癌、肠癌。每年新增的肿瘤患者约为160～170万人，流行病学研究提示，我国不仅肿瘤发病率和死亡率呈明显的上升趋势，目前癌症的死亡率也增加，如果不加以控制，20年内我国癌症的死亡人数将在原来的基础上增加一倍，这将增加人民的心理负担，给美好的生活蒙上一层阴影，癌症就像魔鬼一般成为人民的精神枷锁。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种利用中医中药理论达到抑制肿瘤生长、增殖、迁移的抑制肿瘤的中药复方制剂。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供该中药复方制剂的制备工艺。

为解决上述问题，本发明所述的一种抑制肿瘤的中药复方制剂，其特征在于：该制剂是由下述原料药制成：西洋参90～100g、鹿茸45～50g、醋莪术180～200g、重楼90～100g、半枝莲90～100g、山慈菇90～100g、积雪草45～50g、壁虎90～100g、蛤蚧45～50g、蕲蛇45～50g、百合90～100g。

该制剂剂型为胶囊剂。

如上所述的一种抑制肿瘤的中药复方制剂的制备工艺，包括以下步骤：

(1)按配方量取各组分；并分别将蕲蛇、积雪草、壁虎、蛤蚧、西洋参、鹿茸研磨成粒径为150±6.6μm的粉末状；

(2)从醋莪术中提取醋莪术挥发油，并将该挥发油用β-环糊精包合，得到蒸馏后的水溶液、醋莪术药渣和挥发油β-环糊精包合物；

(3)将蕲蛇粉末、蛤蚧粉末、壁虎粉末分别进行醇提，得到蕲蛇提取液、蛤蚧提取液、壁虎提取液；将所述蕲蛇提取液、蛤蚧提取液、壁虎提取液混合后，经过滤、浓缩后得到相对密度为1.201～1.299的浸膏；

(4)将西洋参粉末、重楼、半枝莲、山慈菇、百合混合后，经煎煮、过滤、浓缩后，得到相对密度为1.150～1.299的浸膏；

(5)将鹿茸粉末、积雪草粉末与所述步骤(3)所得的浸膏、所述步骤(4)所得的浸膏、所述步骤(2)所得的挥发油β-环糊精包合物混匀，加入辅料，经制粒、干燥、整粒、装囊即得。

所述步骤(2)中的醋莪术挥发油是指将醋莪术粉碎至10～60目后，按1∶10～1∶15的料液重量比采用水蒸汽蒸馏法提取时间8h后所提取的挥发油。

所述步骤(3)中的醇提是指依次采用质量浓度为75％、65％的乙醇各提取一次，每次1.5小时。

所述步骤(4)中的煎煮条件是指料液重量比为1∶10～1∶20，煎煮三次，每次2小时。

所述步骤(5)中的辅料为糊精。

本发明方药中西洋参甘苦性凉，入心、肺、肾经，益气补虚，益肺阴、清虚火；《医学衷中参西录》称西洋参：“能补助气分，并能补益血分。”莪术苦辛性温，行气破血，消肿止痛。《本草通玄》言莪术：“专走肝家，破积聚恶血，疏痰食作痛。”《药品化义》也有：“蓬术味辛性烈，专攻气中之血，主破积消坚，去积聚癖块，经闭血瘀，扑损疼痛。”两药合而为君，消补兼施，扶正祛邪。以鹿茸甘咸性温，温元阳、补气血、益精髓、强体质。《本经逢原》云：“鹿茸功用，专主伤中劳绝，腰痛羸瘦，取其补火助阳，生精益髓，强筋壮骨，固精摄便，下元虚人，头旋眼黑，皆宜用之。”配西洋参益气温阳，肺脾肾并补；山慈菇甘辛性寒，半枝莲辛苦性寒，重楼苦而微寒，三味相合，清热解毒，化痰散结，消肿止痛之力尤捷，共为臣药。取蛤蚧味咸性平，入肺肾经，能补肺益肾。《本草备要》称其能“补肺润肾，益精助阳，治渴，定喘止嗽，肺萎咯血，气虚血竭。”蕲蛇甘咸性温，壁虎咸寒，此皆为虫药，能“入络搜邪”，祛风、通络、散结；积雪草性味苦辛而寒，能清热利湿，解毒消肿；共为佐药。以百合味甘苦性平，入心、肺经，能润肺止咳、清心安神。《本草述》言：“百合之功，在益气而兼之利气，在养正而更能去邪，故李氏谓其为渗利和中之美药也。”《日华子本草》有：百合“安心，定胆，益智，养五脏。”合洋参、鹿茸之类，气阴双补，阴阳并补，为佐、使药。

诸药相合，既可益气温阳，又可养阴润燥，寒温相宜，补而不燥；重在补益肺肾，兼可条补心脾，五脏并补。同时清热解毒以消肿毒，破血散结、利湿化痰以消坚瘤，行气活血以消癌痛。如此消补兼施，标本兼顾，扶正祛邪，共奏补虚固本，解毒散结，活血止痛之功。

功能主治：主治正虚不足，瘀毒内结的肺癌，及胃癌、食道癌、直肠癌等消化道肿瘤。也可作为肿瘤放化疗辅助用药。

用法用量：口服，一日三次，一次四粒。

本发明与现有技术相比具有以下优点：

1、由于本发明使用包合技术把醋莪术中提取出的易挥发的气体—莪术油转变成粉末状，因此，实现了稳定药物药效的目的。

2、本发明方药西蕲胶囊对H22小鼠实体瘤抑瘤及免疫镇痛作用的实验。

试验药物：

西蕲胶囊，临用时以蒸馏水配置留于4℃冰箱保存备用。实验设计中，西蕲胶囊小鼠的高、中、低剂量相当于成人临床剂量的20倍、10倍和5倍，即40g/kg，20g/kg、10g/kg灌胃给药0.2ml/10g；共14天。

主要试剂：

肝癌H22瘤株，由甘肃省肿瘤医院提供，小鼠腹腔传代；EDTA-K₂抗凝剂(天津市科密欧化学试剂开发中心，批号：20080218)；Mouse CD4⁺试剂盒、MouseCD8⁺试剂盒(Invitrogen，Carisbad，CA9200 U.S.A)；Mouse CD3⁺试剂盒(西安舟鼎国生物技术有限公司，批号：20081217)；戊巴比妥钠(中国医药集团上海化学试剂公司，批号：20030816)。

试验器材：

旋转蒸发仪(瑞士，BUCHI)；生物显微镜(OLYMPUS，BX60)；分析天平(北京Sartorius BL121SS)热板测痛仪(GJ-8402，浙江海宁白石电学医药仪器厂)；低速冷冻离心机(KDC-2044，科大创新股份有限公司中佳分公司)；流式细胞仪(XL，BECKMAN，U.S.A)。

试验动物：

KM小鼠，SPF级，雌雄兼用，体重18～22g，由甘肃中医学院科研实验中心提供，实验设施使用证SYXK(甘)2004～0006，实验动物质量合格证SCXK(甘)2004～0006，发证单位甘肃省科技厅。

动物按性别分笼饲养，食固体饲料，食水自由，饲料由甘肃中医学院实验动物中心提供。室温20～25℃，相对湿度45％～52％。

统计处理：

采用SPSS13.0数理统计软件进行组间比较单因素方差分析。

试验方法及结果：

(1)对H22小鼠实体瘤模型的抑瘤作用及提高免疫作用。

动物模型的复制：在超净工作台上无菌操作，取荷肝癌(H22)小鼠腹水，用0.9％生理盐水稀释至含瘤细胞2×10⁶个/ml，每鼠右腋皮下接种0.2ml，复制肿瘤模型。

分组及处理：实验前将KM小鼠50只，随机分为5组，即空白组、模型组、药物组高、中、低剂量组。空白组灌服生理盐水，模型组灌服生理盐水并接种瘤株；药物组灌服相应剂量药物，每日灌胃剂量为0.2ml/10g，每日1次，治疗14天后，停药次日，摘取眼球取血，全血采用EDTA-K₂抗凝，用流式细胞仪以试剂盒说明进行CD3+、CD4⁺、CD8⁺检测，实验结果见表4；断颈处死小鼠，观察不同处理方法对H22荷瘤小鼠体重、胸腺指数、脾脏指数、瘤质量、抑瘤率的影响，实验结果见表1、2、3。

抑瘤率(％)＝[(模型组平均瘤重-实验组平均瘤重)/模型组平均瘤重)]×100％

脏器指数＝脏器质量(mg)/小鼠体重(g)

表1 对H22实体瘤小鼠体重的影响

组别	动物数(n)	剂量(g/kg)	开始体重(g)	结束体重(g)
					模型组	10	——	19.1±1.34	24.4±1.6
空白组	10	——	19.6±1.4	27.5±2.7※※
					高剂量组	10	40	19.8±1.5	25.9±2.1※
中剂量组	10	20	20.1±1.5	25.9±1.4※
					低剂量组	10	10	19.6±1.3	25.4±1.5

注：与模型组比较^※P＜0.05，^※※P＜0.01。

实验结果表明：实体瘤小鼠的体重明显下降(P＜0.01)，药物各组较模型组的体重均有所增加，其中药物高剂量组低剂量组与模型组比较，差异具有统计学意义(P＜0.01)。

表2 对H22实体瘤小鼠瘤质量与抑制率的比较

组别	动物数(n)	剂量(g/kg)	瘤质量(g)	抑瘤率(％)
					模型组	10	——	1.07±0.20	——
空白组	10	——	——	——
					高剂量组	10	40	0.63±0.12※	41.1
中剂量组	10	20	0.83±0.11※	22.4
					低剂量组	10	10	0.95±0.16	11.2

注：与模型组比较^※P＜0.01。

三个治疗组实体瘤的质量均低于模型组，说明各治疗组均有一定的抑瘤作用，其中药物高剂量组、低剂量组的瘤质量与模型组比较差异具有统计学意义(P＜0.01)，三组的抑瘤率分别为41.1％、22.4％、11.2％。

表3 对H22实体瘤小鼠脾脏及胸腺指数的影响

组别	动物数(n)	剂量(g/kg)	脾脏指数(mg/g)	胸腺指数(mg/g)
					模型组	10	——	3.86±0.32	2.41±0.43
空白组	10	——	5.58±0.65※※	3.66±0.57※※
					高剂量组	10	40	5.19±0.47※※	3.27±0.33※※
中剂量组	10	20	4.65±0.51※	3.41±0.50※※
					低剂量组	10	10	4.08±0.57	2.80±0.39

注：与模型组比较^※P＜0.05，^※※P＜0.01。

结果表明，H22实体瘤小鼠脾脏及胸腺指数较空白组比较均明显下降，三个治疗组小鼠的脾脏及胸腺指数均有所升高，其中药物高剂量组与中剂量组脾脏和胸腺指数较模型组比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。

(2)对荷瘤小鼠外周血T细胞亚群的影响(参见表4)。

表4 对H22实体瘤小鼠外周血T细胞亚群的影响

组别	剂量(g/kg)	CD3+	CD4+	CD8+	CD4+/CD8+
						模型组	——	6.8±1.1	3.9±0.8	2.6±0.5	1.50±0.23
空白组	——	12.6±3.9※	7.6±2.2※	4.2±1.2※	1.84±0.27※
						高剂量组	40	11.9±3.2※	7.7±2.1※	4.2±1.1※	1.83±0.06※
中剂量组	20	11.1±2.7※	6.8±1.4※	4.1±1.5※	1.78±0.41
						低剂量组	10	8.0±3.081	4.5±1.9	3.4±1.3	1.30±0.21

注：与模型组比较^※P＜0.01。

对荷瘤小鼠外周血T细胞亚群的影响实验结果表明：与正常组比较，模型组外周血总T淋巴细胞(CD3⁺T淋巴细胞)、CD4⁺T淋巴细胞亚群、CD8⁺T淋巴细胞亚群比例下降，CD4⁺/CD8⁺明显下降。与模型组相比，差异均具有统计学意义(P＜0.01)，其中药物组可使外周血中总T淋巴细胞、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞亚群比例升高，使CD4⁺/CD8⁺上升。与模型组相比，对于CD4⁺、CD8⁺及CD3⁺的影响具有极显著性差异(P＜0.01)，对于CD4⁺/CD8⁺的影响，药物组高剂量组与模型组比较差异具有统计学意义(P＜0.01)。

(3)西蕲胶囊的镇痛作用(热板法)：

调节热板测痛仪温度在55±0.5℃，每次取雌性小鼠一只，放入热板测痛仪外罩内，记录从放入热板测痛仪外罩至出现舔后足所需时间，作为该小鼠的痛阈值，30秒内不出现舔足者，5秒内出现舔足者或跳跃者弃之不用，取预选合格的SPF级昆明种雌性小鼠40只，每组10只，随机分为4组，重新测痛阈一次，将两次痛阈的平均值作为该鼠给药前的痛阈值。4组分别为空白组、药物高、中、低剂量组。空白组灌服生理盐水不接种瘤株；药物组，灌服相应剂量药物14天，最后一次治疗后30分钟，测定小鼠痛阈值；若小鼠在热板上60秒仍无痛觉反应，应立即取出按60秒计记，然后计算痛阈提高百分率，试验结果见表5。

痛阈提高百分率＝[(用药后平均痛阈值-用药前平均痛阈值)/用药前平均痛阈值]×100％

表5 对痛阈及痛阈提高百分率的影响

组别	动物数(n)	剂量(g/kg)	药前痛阈(s)	药后痛阈(s)	痛阈提高百分率(％)
						空白组	10		22.60±3.37	22.39±3.11	——
高剂量组	10	40	21.57±4.13	33.65±16.64※◇	56.0
						中剂量组	10	20	22.21±2.07	26.27±7.66※◇	18.3
低剂量组	10	10	20.21±3.38	23.76±10.19	17.6

注：与给药前比较^※P＜0.01；与空白组比较^◇P＜0.01。

结果表明，药物组能够不同程度提高小鼠的痛阈和痛阈提高百分率，其中药物高、中剂量组与空白组和给药前的痛阈比较均具有统计学意义(P＜0.01)。

实验结论：

实验结果表明，治疗各组小鼠的体重较H22实体瘤模型组的体重均有所增加，药物各组均能减小瘤质量，能够升高H22实体瘤小鼠脾脏及胸腺指数；药物高低剂量均能增加小鼠的痛阈值及提高痛阈百分率。

机体的抗肿瘤免疫主要依靠T淋巴细胞介导的细胞免疫。成熟的T淋巴细胞分为CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞两个亚群。本实验中对荷瘤小鼠外周血T细胞亚群影响的实验结果表明，模型组外周血总T淋巴细胞(CD3⁺T淋巴细胞)、CD4⁺T淋巴细胞亚群、CD8⁺T淋巴细胞亚群比例下降，CD4⁺/CD8⁺明显下降。药物可使外周血中总T淋巴细胞、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞亚群比例升高，使CD4⁺/CD8⁺上升。

综上所述，本发明西蕲胶囊具有抑制肿瘤生长、调节机体免疫及镇痛的功能。

3、本发明方药西蕲胶囊的急性毒性实验。

试验动物：

昆明种小白鼠，由甘肃中医学院实验动物中心提供，SPF级，雌雄兼用，体重18～22g，动物实验设施合格证SYXK(甘)2004-006，实验动物质量合格证SCXK(甘)2004-0006，发证单位甘肃省科技厅；动物按性别分笼饲养，食固体饲料，食水自由，饲料由甘肃中医学院实验动物中心提供。室温20～25℃，相对湿度45％～52％。

试验方法及结果：

(1)试验预试：小鼠18只，♀♂各半，随机分为3组，每组6只，禁食12小时后，分别灌胃给予21％、42％、84％西蕲胶囊0.4ml/10g，一日2次，间隔6h。观察14天，结果无小鼠死亡，提示测不出LD₅₀，故测定小鼠一日最大给药量。

(2)正式试验：另取小鼠20只，♀♂各半，禁食12小时后，灌胃给84％(最大浓度)西蕲胶囊0.4ml/10g，一日2次，间隔6h。对动物的体重变化结果用统计软件SPSS13.0进行单因素方差分析处理(参见表6)。饮食、外观、行为、分泌物、排泄物、死亡情况见表7。

表6 西蕲胶囊急性毒性试验小鼠体重变化(单位：g，n＝10，X±SD)

注：与对照组比较，P＞0.05。

结果表明，西蕲胶囊给药组与对照组小鼠体重增长方面总体均数没有差异。

表7 西蕲胶囊日最大给药量试验小鼠反应情况

(注：—代表正常)

结果表明，观察期间小鼠毛发光泽，活动自如，进食及大、小便正常，未发现有其他毒性反应。14天内动物体重增加，由试验前20.2±1.1g增加到30.4±1.8g，无一只死亡。实验结束时颈椎脱臼处死小鼠，解剖肉眼观察主要脏器颜色及形态学改变，结果心、肝、脾、肺、肾、胃、肠等主要脏器未见异常改变。据此，西蕲胶囊小鼠灌胃给药一日最大给药量为67.2g/kg(84g/100ml×40ml/kg×2次/日)，相当于临床成人每日用量(3粒/次×3次/日×0.32g/粒÷60kg＝0.048g/kg)的1400倍，未见明显急性毒性反应。

4、本发明在民间验方的基础上历经数年，运用现代中医药理论，通过君、臣、佐、使配伍，达到抑制肿瘤的生长，增殖以及迁移的作用，从而控制肿瘤的转移及其转化，消肿散结的效果很好，有助于减少肿瘤病人的疼痛，增加癌症患者的寿命。

具体实施方式

实施例1 一种抑制肿瘤的中药复方制剂，剂型为胶囊剂。该制剂是由下述原料药制成：西洋参90g、鹿茸45g、醋莪术180g、重楼90g、半枝莲90g、山慈菇90g、积雪草45g、壁虎90g、蛤蚧45g、蕲蛇45g、百合90g。

该中药复方制剂的制备工艺，包括以下步骤：

(1)按配方量取各组分；并分别将蕲蛇、积雪草、壁虎、蛤蚧、西洋参、鹿茸研磨成粒径为150±6.6μm的粉末状。

(2)从醋莪术中提取醋莪术挥发油，并将该挥发油用β-环糊精包合，得到蒸馏后的水溶液、醋莪术药渣和挥发油β-环糊精包合物。

其中：醋莪术挥发油是指将醋莪术粉碎至10～60目后，按1∶10～1∶15的料液重量比采用水蒸汽蒸馏法提取时间8h后所提取的挥发油。

(3)将蕲蛇粉末、蛤蚧粉末、壁虎粉末分别进行醇提，得到蕲蛇提取液、蛤蚧提取液、壁虎提取液；将蕲蛇提取液、蛤蚧提取液、壁虎提取液混合后，经过滤、浓缩后得到相对密度为1.201～1.299的浸膏。

其中醇提是指依次采用质量浓度为75％、65％的乙醇各提取一次，每次1.5小时。

(4)将西洋参粉末、重楼、半枝莲、山慈菇、百合混合后，按料液重量比为1∶10～1∶20在中药煎煮设备中煎煮三次，每次2小时，得煎煮液；将煎煮液经离心机离心过滤，再经真空浓缩锅浓缩后，得到相对密度为1.150～1.299的浸膏。

(5)将鹿茸粉末、积雪草粉末与步骤(3)所得的浸膏、步骤(4)所得的浸膏、步骤(2)所得的挥发油β-环糊精包合物混匀，加入辅料糊精，经制粒、干燥、整粒、装囊即得。

实施例2 一种抑制肿瘤的中药复方制剂，剂型为胶囊剂。该制剂是由下述原料药制成：西洋参100g、鹿茸50g、醋莪术200g、重楼100g、半枝莲100g、山慈菇100g、积雪草50g、壁虎100g、蛤蚧50g、蕲蛇50g、百合100g。

该中药复方制剂的制备工艺同实施例1。

实施例3 一种抑制肿瘤的中药复方制剂，剂型为胶囊剂。该制剂是由下述原料药制成：西洋参95g、鹿茸48g、醋莪术190g、重楼95g、半枝莲95g、山慈菇95g、积雪草48g、壁虎95g、蛤蚧48g、蕲蛇48g、百合95g。

该中药复方制剂的制备工艺同实施例1。

Claims (6)

1.一种抑制肿瘤的中药复方制剂，其特征在于：该制剂是由下述原料药制成：西洋参90～100g、鹿茸45～50g、醋莪术180～200g、重楼90～100g、半枝莲90～100g、山慈菇90～100g、积雪草45～50g、壁虎90～100g、蛤蚧45～50g、蕲蛇45～50g、百合90～100g。

2.如权利要求1所述的一种抑制肿瘤的中药复方制剂，其特征在于：该制剂剂型为胶囊剂。

3.如权利要求2所述的一种抑制肿瘤的中药复方制剂的制备工艺，包括以下步骤：

(1)按配方量取各组分；并分别将蕲蛇、积雪草、壁虎、蛤蚧、西洋参、鹿茸研磨成粒径为150±6.6μm的粉末状；

(2)从醋莪术中提取醋莪术挥发油，并将该挥发油用β-环糊精包合，得到蒸馏后的水溶液、醋莪术药渣和挥发油β-环糊精包合物；

(3)将蕲蛇粉末、蛤蚧粉末、壁虎粉末分别进行醇提，得到蕲蛇提取液、蛤蚧提取液、壁虎提取液；将所述蕲蛇提取液、蛤蚧提取液、壁虎提取液混合后，经过滤、浓缩后得到相对密度为1.201～1.299的浸膏；所述醇提是指依次采用质量浓度为75％、65％的乙醇各提取一次，每次1.5小时；

(4)将西洋参粉末、重楼、半枝莲、山慈菇、百合混合后，经煎煮、过滤、浓缩后，得到相对密度为1.150～1.299的浸膏；

(5)将鹿茸粉末、积雪草粉末与所述步骤(3)所得的浸膏、所述步骤(4)所得的浸膏、所述步骤(2)所得的挥发油β-环糊精包合物混匀，加入辅料，经制粒、干燥、整粒、装囊即得。

4.如权利要求3所述的一种抑制肿瘤的中药复方制剂的制备工艺，其特征在于：所述步骤(2)中的醋莪术挥发油是指将醋莪术粉碎至10～60目后，按1∶10～1∶15的料液重量比采用水蒸汽蒸馏法提取时间8h后所提取的挥发油。

5.如权利要求3所述的一种抑制肿瘤的中药复方制剂的制备工艺，其特征在于：所述步骤(4)中的煎煮条件是指料液重量比为1∶10～1∶20，煎煮三次，每次2小时。

6.如权利要求3所述的一种抑制肿瘤的中药复方制剂的制备工艺，其特征在于：所述步骤(5)中的辅料为糊精。