CN105659151B - 数码显微系统与方法 - Google Patents

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CN105659151B CN201480057669.2A CN201480057669A CN105659151B CN 105659151 B CN105659151 B CN 105659151B CN 201480057669 A CN201480057669 A CN 201480057669A CN 105659151 B CN105659151 B CN 105659151B
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Abstract

本发明揭露了关于数码显微的多个方法、系统与计算机程式产品。一数码显微方法会包括撷取一样本的多个交迭图像,其中当所述样本与一焦平面沿着一光轴以大于零的一速度相对移动时,所述多个图像之至少一者之撷取会被执行;以及使用一参考标准去处理所述多个图像,以判断所述焦平面与所述样本沿着所述光轴的一参考相对排列。

Description

数码显微系统与方法
技术领域
本发明是关于数码显微的领域。
背景技术
在使用一数码显微镜系统去检查一样本时,需要尽可能的缩短所述检查时间。举例来说,减少所述检查时间能允许一给定的数码显微镜有一较高的处理量,以及/或是相比于当处理量较低时,能允许使用较少的数码显微镜来检查一预定数量的样本,。
当所述样本包括一寄生物,且所述样本的检查会允许一寄生感染的诊断,像是疟疾,或巴贝斯虫病的感染,可贵在于缩短的检查时间能带来更快速的诊断。寄生物被估计会感染三分之一的世界人口,且寄生物所促使的疾病被估计会促使世界上百万人口的死亡、广大的痛苦、以及经济损失。
发明内容
依据本发明所揭露的主体,提供一数码显微方法,包括:撷取一样本的多个交迭图像,当所述样本与一焦平面沿着一光轴以大于零的一速度相对移动时,所述多个图像之至少一者之撷取会被执行。以及使用一参考标准去处理所述多个图像,以判断所述焦平面与所述样本沿着所述光轴的一参考相对排列。
在所述方法的一些实施例中,所述交迭图像完全地交迭。
在所述方法的一些实施例中,所述多个图像特征在于沿着所述光轴的不同图像撷取密度。
在一些实施例中,所述方法包括改变所述相对移动的一速度。
在一些实施例中,所述方法包括提供一估计相对排列,改变所述速度包括减速以在所述焦平面与所述样本的一相对排列对应于,或近似于所估计的相对排列时,提供相对移动的一减低速度。
在所述方法的一些实施例中,当所述焦平面与所述样本的一相对排列对应于,或近似于所估计的相对排列时,所述相对移动的所述速度是处于一最小值。
在所述方法的一些实施例中,当所述焦平面与所述样本的一相对排列对应于,或近似于所估计的相对排列时,所述相对移动的所述速度为零。
在一些实施例中,所述方法包括提供一估计相对排列,改变所述速度包括加速以在所述焦平面与所述样本的所述相对排列对应于一相对排列而非所估计的相对排列时,提供相对移动的一增高速度。
在一些实施例中,所述方法包括提供一估计相对排列,改变所述速度包括在所述焦平面与所述样本的所述相对排列对应于所估计的相对排列之前减速,在所述焦平面与所述样本的所述相对排列对应于所估计的相对排列之后加速。
在一些实施例中,所述方法包括提供一估计相对排列,改变所述速度包括在所述焦平面与所述样本的所述相对排列更接近所估计的相对排列时减速,在所述焦平面与所述样本的所述相对排列更远离所估计的相对排列时加速。
在所述方法的一些实施例中,所述撷取包括改变图像撷取的一速率。
在一些实施例中,所述方法包括提供一估计相对排列,改变图像撷取的所述速率包括增加图像撷取的一速率以在所述焦平面与所述样本的一相对排列对应于,或近似于所估计的相对排列时,提供一增高速率。
在一些实施例中,所述方法包括提供一估计相对排列,改变图像撷取的所述速率包括减少图像撷取的一速率以在所述焦平面与所述样本的一相对排列对应于一相对排列而非所述估计相对排列时,提供一减低速率。
在一些实施例中,所述方法包括提供一估计相对排列,改变图像撷取的所述速率包括在所述焦平面与所述样本的所述相对排列对应于所估计相对排列前增加图像撷取的一速率,以及在所述焦平面与所述样本的所述相对排列对应于所述估计相对排列后减少图像撷取的一速率。
在一些实施例中,所述方法包括提供一估计相对排列,改变图像撷取的所述速率包括在所述焦平面与所述样本的所述相对排列更接近所估计的相对排列时,增加图像撷取的一速率,以及在所述焦平面与所述样本的所述相对排列更远离所估计的相对排列时,减少图像撷取的一速率。
在所述方法的一些实施例中,在所述相对移动的一速度大于10μm/s时,所述多个图像中至少一个被撷取。
在所述方法的一些实施例中,相对移动至少部分是通过变动一焦距所实现。在所述方法的一些实施例中,相对移动至少部分是通过移动一样本盛器所实现。
在所述方法的一些实施例中,相对移动至少部分是通过移动一光学模块或其一部分所实现。
在所述方法的一些实施例中,所述参考标准包括图像对比中的一下降。
在一些实施例中,所述方法包括当沿着所述光轴的所述焦平面与所述样本的一相对排列对应于一调查相对排列时,撷取一样本的至少一图像,其中,所述调查相对排列系至少部份基于所述参考相对排列来被定义。
在所述方法的一些实施例中,所述调查相对排列被定义为关于所述参考相对排列转移的一相对排列。
依据本发明所揭露的主体,提供了一数码显微镜系统,包括:一成像模块,包括一传感器模块,被设置来撷取一样本的多个交迭图像,当所述样本与一焦平面沿着一光轴以大于零的一速度相对移动时,所述多个图像之至少一者之撷取会被执行;一载子模块,被设置来载送、支持、包括、或在其内整合,所述样本盛器是被设置来容纳所述样本;一控制模块,被设置来实现所述相对移动;以及一处理模块,被设置来使用一参考标准去处理所述多个图像,以判断所述焦平面与所述样本沿着所述光轴的一参考相对排列。
在所述系统的一些实施例中,所述控制模块被设置来改变所述相对移动的一速度。
在所述系统的一些实施例中,所述控制模块被设置来改变图像撷取的一速率。
在所述系统的一些实施例中,所述成像模块包括一光学模块,且所述相对移动是通过所述控制模块执行下述至少一者来被至少部分实施:相关于所述光学模块改变一焦距、或移动所述光学模块、或移动所述光学模块之一部分。
在所述系统的一些实施例中,所述相对移动系通过所述控制模块藉由移动所述样本盛器来至少部分地实现。
在一些实施例中,所述系统包括一光源模块。
在一些实施例中,所述系统包括一输入模块,被设置来从一操作器与一控制器装置其中任一接收输入,以让所述处理模块与控制模块其中至少一个所使用。
在一些实施例中,所述系统包括一输出模块,被设置来提供输出至关于所述系统的操作的一操作器与控制装置的其中任一个。
依据本发明所揭露的主体,提供了一计算机程序产品,包括一计算机可用媒体,具有计算机可读程序代码内嵌于内,用于执行一数码显微方法,所述计算机程序产品包括:一计算机可读程序代码,用于促使一计算机去撷取一样本的多个交迭图像,当所述样本与一焦平面沿着一光轴以大于零的一速度相对移动时,所述多个图像之至少一者之撷取会被执行;以及另一计算机可读程序代码,用于促使一计算机去使用一参考标准去处理所述多个图像,以判断所述焦平面与所述样本沿着所述光轴的一参考相对排列。
在一些实施例中,所述计算机程序产品包括计算机可读程序代码,用于促使一计算机去改变所述相对移动的一速度。
在一些实施例中,所述计算机程序产品包括计算机可读程序代码,用于促使一计算机去改变图像撷取的一速率。
附图说明
本发明在本文中的描述仅作为示例,并参照附图所示,其中:
图1是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的一数码显微镜系统的一方块图;
图2A是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的数码显微的一方法的一流程图;
图2B是依据本发明所揭露的主体的一些实施例显示在沿着一光轴的多个相对排列的图像撷取的所述时程的一示意图;
图3A是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的一样本与一焦平面的不同相对排列的示意图;
图3B是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的一样本与一焦平面的不同相对排列的示意图;
图4是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的一些场域与具体位置;
图5是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的检查一样本的一方法的流程图;
图6是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的所述内容中的一红血球;以及
图7是依据本发明所揭露的主体的一些实施例,代表图像对比函数的值的深度等级函式的一曲线。
具体实施方式
以下结合附图对本发明的技术方案进行详细说明。在此需要注意的是,不同的图标中,相同的组件符号表示相同或相似的组件。以下所提及的附加图式的面方向定义为垂直于所述平面的法向量。在此,使用的方向用语是用以说明及理解本发明,而非用以限制本发明。
图1是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的一数码显微镜系统的一方块图。在一特定实施例中,被叙述为被包括在数码显微镜系统100中的每一模块可以是由执行所述实施例中所述模块的函数的硬件、软件、以及/或是韧体的任一组合所组成。系统100的所述模块是可集中于一位置或是分散在多个位置。
在所述实施例中,数码显微镜系统100会包括一或多个载子模块120、一或多个成像模块130、一或多个控制模块140,以及一或多个处理模块150。为求叙述与图示简洁,所述单数形式被用于参照模块120、130、140以及150中的每一个,且应被诠释为包括多个实施例,当中有着这些模块中的一个或任意几个。
载子模块120会包括习知技术(例如一显微镜台)中所知的任何载子,被设置来载送、支持、包括或已整合在其中之一或多个样本盛器125,所述样本盛器125被设置来容纳一或多个样本。为求叙述与图示的简洁,所述单数形式是用于参照所述样本的每个模块125,且应被诠释为包括多个实施例,当中有着一模块125或多个模块125,相关于载子模块120,以及多个实施例,当中有相关于样本盛器125的一或多个样本。任何样本盛器125的例子,会包括一载子滑道、实验室容器、碟子、盘子、多井盘、试管(例如是有平底或没平底)、微流体细胞与墨盒、上述的组合等等。容纳所述样本的样本盛器125的表面会为多样或是不变的。所述样本会是任何种类的样本,例如一生物样本。
在所图标的实施例中,成像模块130包括一或多个传感器模块134,被设置来撷取所述样本的多个图像,以及一或多个光学模块132。为求叙述与图示的简洁,所述单数形式是用于个别参照模块132与134,且应被诠释为包括多个实施例,当中有着这些模块中的一个或任意几个。
传感器模块134会包括习之技术中所知的任何图像传感器,用于撷取一图像,例如一电荷耦合元件(charge coupled device,CCD)、互补金属氧化物半导体(complementarymetal-oxide-semiconductor,CMOS)传感器、矩阵传感器等等。光学模块132会包括一或多个光学组件(例如,不同放大等级的镜片、二向色滤光片、激发滤光片以及/或是发射滤光片),特别是被设置来放大,这样传感器模块132所撷取的所述样本的一图像会相对于所述样本被放大。所述光学模块132会被设置来依需要调整。举例来说,所述光学模块132的整体放大可被改变,例如通过替换一显微镜镜片。另外地或替代地,举例来说,相关于光学模块132的一焦距会被改变,以及/或是光学模块132或其一部分(例如,一或多个光学组件)会被移动,例如为了改变沿着一光轴的一焦平面的所述位置。
处理模块150可被设置为处理传感器模块134所撷取的图像。所撷取的图像不需要被从成像模块130转移至处理模块150。举例来说,所撷取的图像可能是被储存于一计算机可读媒体中,且能被加载/下载给处理模块150处理。另外地或替代地,处理模块150会至少部分地被放置于相同于成像模块130的一位置,以及/或是可至少部分地被放置于远离成像模块130的一位置中。可以理解的是,当在此叙述处理模块150是被设置于处理图像时,处理模块150可被设置来处理关于所述图像的任何数据,例如在撷取所述图像时,传感器模块134所收集的全部所述资料,在撷取所述图像时,传感器模块134所收集的所述数据的部分,传感器模块134所收集的数据所衍生的数据,以及/或是所收集的数据与所衍生的数据的一组合。可选择地,数据是从多个传感器模块134所收集。处理模块150可被设置于处理图像,使用至少一参考标准,以决定一参考相对排列(如以下说明)以及/或是用于任何其他目的。为求说明简洁,所述单数形式是用于参照一参考标准,且应被诠释为包括多个实施例,当中有一或多个标准。
控制模块140会被设置于控制数码显微镜系统100的任何模块的所述操作。控制模块140会包括机械以及/或是电机/电子组件,用于控制操作。举例来说,控制模块140会被设置于实现沿着所述光轴的一样本与一焦平面的相对移动。在多个实施例中,当中控制模块140实现相对移动,以实现所述相对移动,控制模块140会被设置于改变相关于光学模块132的一焦距,以移动光学模块132或其一部分(例如,一或多个光学组件),以及/或是用于移动容纳一样本的样本盛器125(例如,通过移动以及/或是调整载子模块120)。举例来说,载子模块120会被以多个不同的设置调整,这会允许移动样本盛器125时不需移动载子模块或其一部分(例如,当载子模块120包括一可延伸部件)。
控制模块140会被设置于控制关于光学模块132的一或多个参数,传感器模块134,以及/或是载子模块120(除了被设置于实现相对移动之外或是其他的用途)像是:控制相对移动的一速度;控制图像撷取的开始以及/或是结束;控制图像撷取的一速率;控制相对排列的范围;以及/或是控制相对排列,假如有的话,关于减速、加速、增加图像撷取的速率以及/或是减少图像撷取的速率;控制相对排列以对应调查相对排列;以及/或是控制放大等级等等。
可选择地,数码显微镜系统100会包括一或多个光源模块110以及/或是光可通过系统100外部的一组件所提供。为求叙述与图示简洁,所述单数形式被用于参照模块110,且应被诠释为包括多个实施例,当中有一或多个模块110。光源模块110会提供习知技术所知的任何种类的光,且会被放置以从任何有用光照方向提供所述光(例如,沿着所述光轴的所述样本的上方以及/或是下方),如习知技术所知。举例来说,在一些实施例中,从沿着所述光轴的所述样本的上方提供光照,且光学模块132会被放置于沿着相同轴的所述样本的下方。可选择地,光照可从沿着所述光轴的所述样本的同侧,其中,光学模块132系被放置于所述光轴处。可选择地,光照可被提供,且系依须要光学模块132位在所述样本的两侧。
在多个例子中,当中光源模块110被包括于数码显微镜系统100中,控制模块140,例如依照所述光的种类,是可以或是可不控制光源模块110。举例来说,控制模块140会控制光源模块110以提供不同光照情形,用于不同的成像目的,像是不同波长以及/或是不同带宽,以及/或是不同光照方向。可选择地,用于亮场成像的光照可从沿着所述光轴的所述样本的同侧,与光学模块132相同放置,而荧光则可被提供来横越过所述样本。
可选择地,数码显微镜系统100会包括一输入模块160,用于从一操作器以及/或是处理模块150所使用的一控制器装置,以及/或是控制模块140接收输入。当输入模块160被包括时,会包括任何适合的输入组件,像是用于从一控制器装置接收有线,以及/或是无线通信的键盘、鼠标、麦克风、接口等等。可选择地,数码显微镜系统110会包括一输出模块170,用于提供输出至关于系统110的操作的一操作器以及/或是一控制器装置,所述输出像是传感器134所撷取的图像,以及/或是指出这样图像的数据,以及/或是从这样的数据所衍生的数据,以及/或是通过处理模块150所处理的结果。当输出模块170被包括时,会包括任何适合的组件,像是显示器、喇叭、打印机、用于有线传输以及/或是无线传输至一控制器装置的接口等等。当同时被包括时,输入模块150与输出模块170,或其部分,举例来说,可被结合或不结合在一触控屏幕显示器、一结合接口等等中。
在一些例子中,至少在数码显微镜系统100的例子,会包括以及/或是被包括于一或多个计算机中,特别是为所述需要的目的而被建构的计算机。另外地或替代地,在一些例子中,至少部分的数码显微镜系统100会包括以及/或是被包括于一或多个计算机中,特别是被程序代码设置用于所述需要的目的计算机。在这些例子中的任一个,这样的计算机会包括至少一些硬件。举例来说,至少部分的控制模块140以及/或是至少部分的处理模块150会包括,以及/或是被包括于计算机中。所述用语“计算机”应被诠释为涵盖具有数据处理能力的任何种类装置。
可选择地,数码显微镜系统100会包括相比于图1中所示较少、较多以及/或是不同的模块。在一些实施例中,系统100的所述功能会被不同地区分于所述模块之间。有时候,在此描述的系统100的所述功能会被区分为相比于图1中所示较少、较多以及/或是不同的模块,以及/或是系统100会在一些实施例中包括比在此所描述的为较多的、较少的,以及/或是不同的功能。举例来说,控制模块140或其中的任何部分可被整合入或与系统100中的一或多个其他模块像是成像模块130、光源模块110、载子模块120、输入模块160、输出模块170以及/或是处理模块150等等一同整合。
使用一数码显微镜系统像是系统100的检查会包括至少一聚焦阶段与至少一调查阶段。为求描述简洁,所述单数形式是用于参照所述聚焦阶段与所述调查阶段,且应被诠释为包括多个实施例,当中有这些阶段的其中一个或多个,或同时有这些阶段。所述聚焦阶段会被用于定义沿着所述光轴之所述焦平面以及所述样品的至少一调查相对排列,以在所述调查阶段时段撷取一或多个图像。因而接下来,一较长聚焦阶段可能会延后所述调查阶段,以及/或是加长所述检查的时段,而一较短聚焦阶段会提前所述调查阶段,以及/或是缩短所述检查的时段。
为求简洁,假设在下述一些例子中,所述样本实际上是位于一x-y平面中,所述光轴是一z轴,而所述焦平面是一x-y平面,但在一些其他例子中,加以适当修正后,所述光轴可以是一不同轴(例如,x、y),垂直于所述样本的平面,而所述焦平面可平行于所述样本的平面。
图2A是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的数码显微镜的一方法200的一流程图。方法200或其中一部分会被通过一数码显微镜系统,像是系统100,来执行。方法200或其中一部分会被包括在样本检查的一聚焦阶段。
在阶段210中的所述多个实施例中,可得到关于沿着一光轴之一焦平面与一样本的一相对排列之一参考标准。举例来说,所述参考标准可通过处理模块150得到,例如通过输入模块160从一操作器以及/或是控制器装置得到,以及/或是基于来自方法200的一先前循环的一储存数值。所述参考标准会是任何参考标准,像是图像对比中的下降、最大对比,以及/或是最大清晰度等等。数码显微镜中图像对比中的下降的一些例子被叙述做参考,所述例子揭露于在2014年5月14日申请的国际编号PCT/IL2014/050423,标题为“用于成像一细胞样本的方法与系统”的申请中专利案件。这些例子会参考图5于下述说明。阶段210会在所述参考标准被用于阶段250中之前的任何时间发生,且不必要与图2A中所说明的相同。
在所述多个实施例中,在可选择的阶段220中,会接收一开始指示。举例来说控制模块140会从一操作器以及/或是一控制器装置接收一开始指示。在此例子中,控制模块140会接着允许转移至阶段230,从而控制所述图像撷取的开始。或者,不先运行阶段220而直接运行阶段230。在阶段230中,所述样本的多个交迭图像会被撷取,举例来说,通过一传感器模块,像是传感器模块134。被撷取的所述样本的多个图像不必要是全部样本的,因此所述多个图像会是所述全部样本的,以及/或是所述样本的一部分。所述交迭图像会完全地交迭(例如,如果每个图像完全是相同聚焦场域或特定位置的)以及/或是部分地交迭。举例来说,一组多个交迭图像中每个图像所涵盖的场域至少50%会交迭。可选择地,一组多个交迭图像中每个图像所涵盖的场域至少95%会交迭。在所述焦平面与样本沿着所述光轴的相对移动速度大于零时,会对所述多个图像中至少一个执行撷取。举例来说,在所述焦平面移动时,例如由于焦距改变以及/或是一光学模块,像是光学模块132或其一部分的所述移动,所述多个图像的一或多个会被撷取。另外地或替代地,举例来说,当所述样本移动时,例如由于一样本盛器,像是样本盛器125的所述移动(举例来说,藉由移动以及/或是调整一相关载子模块,像是载子模块120),一或多个图像会被撷取。虽然以大于零的速度相对移动可以是任何大于零的速度,在一些实施例中,在阶段230中,当所述相对移动的速度大于,一数码显微镜系统,像是系统100,所得到的最大速度的一预定百分比,例如1μm/s、10μm/s、50μm/s、100μm/s等等时,至少一图像才会被撷取。假如在所述相对移动期间,会有一或多个时间是所述焦平面与样本是静止的,在所述焦平面与样本都是静止时,所述交迭图像的至少一个可能会被撷取或可能不会被撷取。
在此,当参照一焦平面与一样本的相对移动时,被参照的所述焦平面是相关于一特定成像模块(例如,成像模块130)的所述焦平面,其中,所述成像模块包括一特定传感器模块(例如,传感器模块134),被设置于撷取所述样本的多个交迭图像,当中,当所述样本与所述焦平面沿着一光轴的相对移动速度大于零时,所述多个图像的至少一个的撷取会被执行。可注意到,一般在所述聚焦阶段期间,在检查一样本时,沿着所述光轴的所述焦平面的位置,以及/或是所述样本的位置会逐步改变。在每一步骤之后,当所述焦平面以及样本是静止时,一图像会是被撷取的所述样本。相较之下,在当前的方法200中,当所述焦平面以及样本沿着所述光轴的相对移动速度大于零时,其中至少一图像被撷取,如此,相较于一传统聚焦阶段,本发明所述聚焦阶段系可能被有利地缩短一些。此聚焦阶段在多个实施例中可被进一步地缩短,当中,当所述焦平面以及样本沿着所述光轴的相对移动速度大于零时,多个不同图像系被撷取。
在所述相对移动期间,假设至少所述焦平面沿着所述光轴移动,所述焦平面,举例来说,会沿着所述光轴在一个方向或同时两个方向移动。在所述相对移动期间,假设所述样本,另外地或替代地,沿着所述光轴移动,所述样本,举例来说,沿着所述光轴在一个方向或同时两个方向移动。因此,所述相对移动会让所述焦平面与样本沿着所述光轴的相对排列改变。举例来说,所述相对移动所涵盖的相对排列的范围(包括开始以及结束相对排列)会包括任何相对排列,其中所述样本的一特定点以及所述焦平面沿着所述光轴在一特定方向之间的距离小于或等于所述相对移动所涵盖的任何相对排列的最大距离,以及/或是任何相对排列,当中所述样本的特定点以及所述焦平面之间沿着所述光轴相反方向的距离,是小于或等于所述相对移动所涵盖的任何相对排列的最大距离。每个方向中的最大距离可能对应或不对应于分别位在所述相对移动的开始,或结束的所述相对排列。所述焦平面以及样本会被以一特定顺序或任何顺序排列在所述相对移动所涵盖的所述相对排列的范围中。
所述相对移动所涵盖的相对排列的范围会改变。举例来说,假如所述焦平面在移动,所述焦平面沿着所述光轴的两相离最远的位置会改变。另外地或替代地,假如所述样本正在移动,举例来说,所述样本沿着所述光轴的两相离最远的位置会改变。举例来说,所述焦平面以及所述样本之间的距离会是,举例来说,从大约5到100微米至1000微米、从大约150到250微米间隔、小于大约50微米间隔、从大约10到30微米间隔等等。
所述焦平面以及样本沿着所述光轴的一相对排列会被用任何方法量化。举例来说,所述相对排列会被量化为所述样本上的一点(例如,垂直中点)以及所述焦平面沿着所述光轴之间的距离,以及一方向的指示,像是所述焦平面以及所述样本上的所述点哪一个较靠近成像模块130。另外地或替代地,举例来说,一相对排列会被量化为所述样本上的一点以及一特定固定点(例如,光源模块110的点)在沿着所述光轴的一方向之间的距离,以及所述焦平面以及所述相同特定固定点在沿着所述光轴的一方向(同向或反向)之间的距离。在所述后者例子中,假如所述焦平面以及所述样本都可以移动,那么所述相对排列会有多个相等距离组合(沿着所述光轴的一方向中的样本点/固定点之间的距离,例如k、k–c、k+c,等等;在沿着所述光轴的一方向中的焦平面/固定点之间的距离,例如l、l–c、l+c,等等,其中k、l、c可以是所述相对排列之任何值。
所述焦平面以及样本会被用任何特定相对排列进行唯一一次排列,从所述相对移动开始的时间,直到所述相对移动结束的时间(包括),或被用任何特定相对排列进行一或多次排列,从所述相对移动开始到结束。可选择地,从所述相对移动开始的时间直到所述相对移动结束的时间,相对移动中会有一或多个暂停。一相对排列会被达成一次以上,举例来说,假如所述焦平面以及/或是样本回到沿着所述光轴的相同位置(每个位置具有与先前相同,距离所述固定点沿着相同方向的相同距离),以及/或是,举例来说,假如所述焦平面以及/或是样本沿着所述光轴移动至等效但不同的位置(对应所述样本上的一点以及所述焦平面之间在沿着所述光轴的相同方向中,跟先前有相同距离的每个位置)。
图像会被用任何顺序撷取,以及因此被连续撷取的两图像不需要比非连续撷取的两图像对应更靠近的相对排列。可选择地,图像会被连续地沿着所述动作路径撷取。纵使被连续撷取的图像比起非连续撷取的两图像对应更靠近的排列,在任两被连续撷取图像之间的相对排列中可以有或没有一固定偏差,举例来说,视是否有着一均匀图像撷取密度(其中密度是指光轴单位长度的图像数目)。如在此所用的,在任两被撷取图像之间的所述相对排列中的一偏差代表所述相对排列之间在个别被撷取的两图像的差异。举例来说,这可能是关于所述焦平面以及/或是所述样本的个别位置之间的距离。可选择地,每个相对排列会被以所述焦平面以及样本之间的距离来定义,以及所述偏差会被以这些距离之间的差异来定义。
可选择地,针对任何特定相对排列的没有图像会被撷取,针对任何特定相对排列只有一个图像会被撷取,或是针对任何特定相对排列一或多个图像会被撷取。举例来说,一个以上的图像会针对一特定相对排列被撷取,假如一个以上的图像被撷取,当所述焦平面以及样本保留在固定的相对位置时(例如,相对移动速度为零),假如额外(多个)图像被撷取,当所述焦平面以及/或是样本沿着所述光轴回到相同的(多个)位置(例如,在相同方向具有离与先前相同的一固定点相同距离的每个位置),以及/或是假如额外的(多个)图像被撷取在所述焦平面以及/或是样本沿着所述光轴移动至等效但不同的(多个)位置(例如,对应所述样本上一点以及所述焦平面之间在沿着所述光轴的相同方向中的相同距离的每个位置)。
现在参照图3A以及3B,是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的一样本与一焦平面的不同相对排列的示意图。在图3A以及3B中都图标了所述样本以及所述焦平面的相对移动。在图3A,所述焦平面被显示为沿着所述光轴相对于一静止样本移动,在来自成像模块130的一方向(从焦平面被注意到的位置1到焦平面的被注意到的位置5)。在图3B中,所述样本被显示为沿着所述光轴相对于一静止焦平面移动,在朝向所述光学模块的一方向中(从样本被注意到的位置1到样本被注意到的位置5)。为求简洁,相对排列“u”会被认为相关于位置“u”(例如,在图3A中的所述焦平面或在图3B中的所述样本)。图3A或图3B中的虚线指示从相对排列1到相对排列5中包括的沿着所述光轴的相对排列的范围,当中在图3A中所述样本的位置被图标为静止,以及所述焦平面的位置可以位于任何被注意到的位置,以及/或是在任两被注意到的位置之间,以及在图3B中,所述焦平面的位置被图标为静止,以及所述样本的位置可以位于任何被注意到的位置,以及/或是在任两被注意到的位置之间。所图标的被注意到位置之间的距离不必要是代表其间的真实距离,所述真实距离是会改变。
图3A以及3B也图示一“所估计的相对排列”,其相关于本发明所揭露的主体的一些例子。在这些例子中,假设在运行阶段230前,会估计所述焦平面以及样本的一参考相对排列(在此称为“所估计的相对排列”)。举例来说,所估计的相对排列可通过一输入模块,像是输入模块160以及/或是一处理模块,像是处理模块150,到一控制模块,像是控制模块140。举例来说,参照图3A,所估计的相对排列被图示为对应所述焦平面被注意到的位置2。举例来说,参照图3B,所估计的相对排列被图标为对应所述样本被注意到的位置2。
图3A与3B中所图示的相对移动不必要是彼此独立,在一些其他例子中,所述焦平面以及所述样本都会在所述相对移动期间移动(依序地以及/或是并行地),伴随共同移动,举例来说此二者在反方向或同方向移动。可能的是在一些例子中,任何所述焦平面或样本的移动可以是在相反方向,而不是像图3A或3B个别所揭示一般,所述焦平面的移动可包括所述焦平面在相反方向的移动,以及/或是所述样本的移动可包括所述样本在相反方向的移动。
如上所述,所述相对移动所涵盖的相对排列的范围会改变。在一些实施例中,相较于一聚焦阶段中会有相对排列的较宽范围,通过窄化所述相对移动所涵盖的相对排列的范围,所述聚焦阶段会被有利地缩短。举例来说,相对排列的一范围会被至少部份基于的一估计的相对排列(如果有提供)来定义,以及此定义范围会是相较于一可能(较宽)范围为一较窄范围,例如,相较于一数码显微镜系统,像是显微镜系统100所允许的一范围。继续以此例子来看,假设所述估计的相对排列将所述焦平面量化为距一固定点(例如,光源模块110)有一距离x,以及量化所述样本的一垂直中点为具所述固定点(例如,光源模块110)有一距离y,其中,二者都在远离所述固定点(例如,光源模块110)的相同特定方向中。在此例子中,至少部份基于所述估计的相对排列,以及假设所述焦平面正在移动且所述样本是静止的相对排列的一范围,其是会被举例来说有下述条件之相对排列所界定,在一特定方向中,所述焦平面以及所述固定点(例如,光源模块110)之间有着x-a以及x+b的距离。参照图3A,以及假设以此例子来看,图3A反射相对排列的一范围,至少部份基于的所述估计的相对排列,x-a会对应位置5,以及x+b会对应位置1。变量x、y、a、b不被此揭露所限制,且可以是任何数值,不必要是彼此相同或相异。举例来说,x会等于或不等于y,且a会等于或不等于b。在一些情况中,a以及/或是b会等于5微米,然而在其他例子中,a以及/或是b会等于其他数值。另外地或替代地,举例来说,相对排列的一范围会至少部份基于经验所定义。
至少部分基于一估计的相对排列,或是经验的相对排列的一范围在此被称作“预期参考范围”。
然而在其他实施例中,相对排列的所述范围可能不会至少部分基于一估计的相对排列以及/或是经验。
在所述多个实施例中,在可选择阶段240中,当撷取所述图像,以及/或是图像撷取的一速率在撷取所述图像的时候改变时,所述相对移动的一速度会改变。
在阶段240的一些实施例中,改变一速度会包括,举例来说,当所述焦平面与所述样本的一相对排列对应所述估计的相对排列,或近似所述估计的相对排列时,减速以提供相对移动的一减低速度。举例来说一相对排列会被认为近似于所述估计的相对排列,当其相隔不多于焦点的一深度(有时候也被认作“场域的深度”)时。纵使不必要如此,在一些例子中,在所述焦平面以及所述样本之间的所述相对移动的速度会位于一最小值,当所述焦平面以及所述样本的所述相对排列对应于,或近似于所述估计的相对排列。一最小值会只是一区域最小值或也是一全局最小值。所减低的速度可以是零、趋近于零、或任何被减低的值。可选择地,所述焦平面以及样本会同时是静止的。参照图3A,当所述焦平面是位于或在位置2的附近(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列)时,会有所述焦平面的一减低或甚至最低速度,而参照图3B,当所述样本是位于或在位置2的附近(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列),当中会有所述样本的一减低的或甚至最小的速度。假如所述被减低的速度是零,当位于或在位置2的附近时,图3A的所述焦平面会停止,而当位于或在位置2的附近时,图3B的所述样本会停止。
另外地或替代地,在阶段240的一些实施例中,当所述焦平面与所述样本的所述相对排列对应于一相对排列而非所估计的相对排列时,改变一速度会包括,举例来说,加速以提供相对移动的一增高速度(例如,最高速度)。一最大值会只是一区域最大值或也是一全局最大值。参照图3A,当所述焦平面是位于位置2以外的一位置(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列)时,会有所述焦平面的一增高或甚至最高速度,而参照图3B,当所述样本是位于位置2以外的一位置(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列)时,会有所述样本的一增高或甚至最高速度。
另外地或替代地,在阶段240的一些实施例中,当所述焦平面与所述样本的所述相对排列更接近所估计的相对排列时,以及/或是在所述相对排列对应所述估计的相对排列之前时,改变一速度会包括,举例来说,减速。另外地或替代地,在阶段240的一些实施例中,当所述焦平面与所述样本的所述相对排列更远离所估计的相对排列时,以及/或是在所述相对排列对应所述估计的相对排列之后时,改变一速度会包括,举例来说,加速。参照图3A,在所述焦平面是位于位置2之前(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列),以及/或是当所述焦平面更靠近位置2时,当中会有所述焦平面的一减速,以及在所述焦平面是位于位置2之后(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列),以及/或是当所述焦平面远离位置2时,当中会有所述焦平面的一加速。参照图3B,在所述样本是位于位置2之前(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列),以及/或是当所述样本靠近位置2时,当中会有所述样本的一减速,以及当所述焦平面是位于位置2之后,当中所述相对排列对应所述估计的相对排列),以及/或是当所述样本远离位置2,当中会有所述样本的一加速。
可选择地,相关于减速(例如,关于所述减速的开始)的所述相对排列,以及/或是相关于加速(例如,关于所述加速的开始)的所述相对排列可以是或不是在减速以及/或是加速之前就被决定的。举例来说,相关于减速以及/或是加速的所述相对排列已经被基于来自所述估计的相对排列的预定偏差(零以及/或是非零)而决定。举例来说,相关于减速的一相对排列特征在于,会被通过所述估计的相对排列之前的所述相对移动而达成,以及具有来自所述估计的相对排列的一预定偏差。另外地或替代地,相关于加速的一相对排列特征在于,会被通过位于或近似于所述估计的相对排列的所述相对移动来达成,以及具有来自所述估计的相对排列的一预定偏差。当两者可能同时相关时,针对相关于减速的所述相对排列的预订偏差,以及针对相关于加速的所述相对排列的预订偏差可以是或可以不是相等的。
参照图3A,相关于减速的所述相对排列会对应于,举例来说,位在被注意到位置1中的所述焦平面,以及/或是相关于加速的所述相对排列会对应于,举例来说,位在被注意到位置3中的所述焦平面。参照图3B,相关于减速的所述相对排列会对应于,举例来说,位在被注意到位置1中的所述样本,以及/或是相关于加速的所述相对排列会对应于,举例来说,位在被注意到位置3中的所述样本。可选择地,在图3A以及/或是图3B中,加速会开始于位置2处或附近。举例来说,当所述焦平面以及/或是样本是在沿着所述光轴的任何位置,接连于达到一被增加值(可以是或不是一最大值)的所述移动时,减速会开始。举例来说,当所述焦平面以及/或是样本是在沿着所述光轴的任何位置,接连于达到一被减低值,当所述被减低值是或不是零(被停止),且可以是或不是一最小值的所述移动时,加速会开始。
在一些实施例中,当中相关于减速的所述相对排列,以及/或是相关于加速的所述相对排列不是已经在先前被决定的,所述减速以及/或是加速会随机地发生,以及/或是发生在时间中的(多个)预定点,举例来说,从所述相对移动的开始被量测。
另外地或替代地,在阶段240的一些实施例中,当所述焦平面与所述样本的一相对排列对应于或是近似于(例如,相隔不多于一个焦点深度)所述估计的相对排列时,改变图像撷取的一速率会包括,举例来说,增加图像撷取的一速率以提供一被增高的速率(例如,一最大速率)。参照图3A,当所述焦平面是位于或近似于位置2(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列)时,图像撷取的所述速率会在一被增高的或甚至最大速率,而参照图3B,当所述样本是位于或近似于位置2(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列)时,图像撷取的所述速率会位于一被增高的或甚至最大速率。一最大值可以只是一区域最大值或是一全局最大值。
另外地或替代地,在阶段240的一些实施例中,改变图像撷取的一速率会包括,举例来说,当所述焦平面与所述样本的所述相对排列对应于一相对排列而非所估计的相对排列时,减少图像撷取的一速率以提供一被减低的速率(例如,最小速率)。参照图3A,当所述焦平面是位于位置2之外的一位置(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列)时,当中会有图像撷取的一减低的或甚至最小速率,而参照图3B,当所述样本是位于位置2之外的一位置(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列)时,当中会有图像撷取的一减低的或甚至最小速率。一最小值可以只是一区域最小值或是一全局最小值。
另外地或替代地,在阶段240的一些实施例中,当所述焦平面与所述样本的所述相对排列更接近所估计的相对排列时,以及/或是在所述相对排列对应所述估计的相对排列之前时,改变图像撷取的一速率会包括,举例来说,增加图像撷取的一速率。另外地或替代地,在阶段240的一些实施例中,当所述焦平面与所述样本的所述相对排列更远离所估计的相对排列时,以及/或是在所述相对排列对应所述估计的相对排列之后时,改变图像撷取的一速率会包括,举例来说减少图像撷取的一速率。参照图3A,在所述焦平面是位于位置2之前(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列),以及/或是当所述焦平面靠近位置2时,当中速率会有所增加,以及在所述焦平面是位于位置2之后(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列),以及/或是当所述焦平面远离位置2时,当中速率会有所减低。参照图3B,在所述样本是位于位置2之前(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列),以及/或是当所述样本靠近位置2时,当中速率会有所增高,以及在所述样本是位于位置2之后(当中所述相对排列对应所述估计的相对排列),以及/或是当所述样本远离位置2时,当中速率会有减低。
可选择地,假如图像撷取的所述速率是被改变的,相关于增加图像撷取的所述速率的(多个)所述相对排列(例如,相关于所述增加的开始),以及/或是相关于减少图像撷取的所述速率的(多个)所述相对排列(例如,相关于所述减少的开始)可以是或不是在所述增加以及/或是减少之前就被决定。举例来说,相关于增加撷取速率,以及/或是减少撷取速率的(多个)所述相对排列会被基于来自所述估计的相对排列的预定的(多个)偏差(零以及/或是非零)来决定。举例来说,相关于增加所述撷取速率的一相对排列特征会在于,会被通过所述估计的相对排列之前的所述相对移动而达成,以及具有来自所述估计的相对排列的一预定偏差。另外地或替代地,相关于减少所述撷取速率的一相对排列特征会在于,会被通过位于或近似于所述估计的相对排列的所述相对移动而达成,以及具有来自所述估计的相对排列的一预定偏差。当两者可能同时相关时,针对相关于增加所述撷取速率的所述相对排列的预订偏差,以及针对相关于减少所述撷取速率的所述相对排列的预订偏差可以是或不是相等的。
参照图3A,相关于增加所述撷取速率的所述相对排列会对应于,举例来说,位在被注意到位置1中的所述焦平面,以及/或是相关于减少所述撷取速率的所述相对排列会对应于,举例来说,位在被注意到位置3中的所述焦平面。参照图3B,相关于增加所述撷取速率的所述相对排列会对应于,举例来说,位在被注意到位置1中的所述样本,以及/或是相关于减少所述撷取速率的所述相对排列会对应于,举例来说,位在被注意到位置3中的所述样本。可选择地,在图3A以及/或是图3B中,减少会发生于位置2处或其附近。举例来说,所述增加会发生在所述焦平面以及/或是样本,位于沿着所述光轴的任何位置,接连于达到一被减低数值的所述撷取速率,当中所述被减低的数值可以是或不是零,以及可以是或不是一最小值。举例来说,所述减少会发生在所述焦平面以及/或是样本是位于沿着所述光轴的任一位置,接连于达到一被增高数值的所述撷取速率,当中所述被增高的数值可以是或不是一最大值。
在一些实施例中,当中相关于增加所述撷取速率的所述相对排列,以及/或是相关于减少所述撷取速率的所述相对排列可不是已在先前被决定的,所述撷取速率的增加,以及/或是所述撷取速率的减少会随机发生,以及/或是发生在时间中的(多个)预定点,举例来说,从所述相对移动的开始被量测。
阶段240可不必要被执行于所有实施例中。所述相对移动的速度可以被维持在一不变速度或是可变的,产生一可变速度。举例来说,所述相对移动会发生于一不变速度或一可变的速度。另外地或替代地,图像撷取的所述速率会被维持于一不变的速率或是可变的,造成一可变的速率。可选择地,加速以及/或是减速的所述速率会是固定的或可变的,以及彼此会是或不是相等(相反)的。可选择地,所述撷取速率的增加以及/或是减少的所述速率可以是固定的,或是可变的,以及可以是或不是彼此相同(相反)的。
在一些实施例中,改变相对移动的所述速度以及/或是改变图像撷取的所述速率,当撷取所述图像时,会造成沿着所述光轴的不同图像撷取密度。然而,在其他实施例中,当中会有沿着所述光轴的一均匀图像撷取密度。
一控制模块,像是控制模块140,举例来说,依据在方法200之前及/或期间所提供的来自一输入模块,像是输入模块160,以及/或一处理模块,像是处理模块150的资料,其是可以或不可以包含于阶段230以及/或是240中。举例来说,一控制模块会或不会执行以下任何关于阶段230以及/或是240的步骤:实现所述相对移动(举例来说,通过改变相关于一光学模块,像是光学模块130的所述焦距,移动光学模块132或其中一部分[例如,一或多个光学组件],以及/或是移动一样本盛器,像是样本盛器125,用于容纳一样本[例如,通过移动以及/或是调整一相关载子模块像是载子模块120]等等);控制相对排列的一范围,控制相对移动的一速度(例如,保持速度、改变速度等等。);控制图像撷取的一速率(例如,保持图像撷取的速率、速率图像撷取的改变等等。);控制所述相对排列,假如有的话,相关于所述减速(例如,相关于减速的开始)、增加图像撷取的所述速率(例如,相关于增加的开始)、加速(例如,相关于加速的开始),以及/或是所述速率图像撷取的减少;控制在阶段230以及/或是240会结束(例如,图像撷取的控制结束)等等。
在阶段250中的所述多个实施例中,所述多个图像会被使用在阶段210中所得到的所述参考标准来处理,以决定所述焦平面以及样本沿着所述光轴的一参考相对排列。举例来说,一处理模块像是处理模块150会处理所述图像。在一些例子中,满足或最满足所述参考标准的所述相对排列会被定义为所述参考相对排列。在一些例子中,所述参考相对排列不必要是对应于一撷取图像的一相对排列。举例来说,一内插的以及/或是外插的相对排列会被允许被定义在这些相同例子中的所述参考相对排列。
所述撷取图像会被提供于实时处理(例如,当每个图像被撷取或在一些或全部图像已被撷取之后),或会被储存以及提供(例如,被加载/下载)来处理。阶段250会在时间上交迭,部份地或完全地,与方法200的任何其他阶段或其他阶段的部分,或会被执行在方法200的所述其他阶段被完成之后。
在一些实施例中,方法200或其中一部分会被重复一次以上。举例来说,方法200会被重复,假如被决定于阶段250中的所述参考相对排列是不被接受的。举例来说,假设有一预定准确度范围,亦即阶段250中所决定的所述参考相对排列应该在所述估计的相对排列的一预定准确度范围内。假如阶段250中所决定的所述参考相对排列被发现是在此准确度范围之外,方法200或其中一部分会被重复。
纵使不必要如此,在一些例子中所述预定的准确度范围会窄于所述相对移动所涵盖的所述相对排列范围。假设在此例子中,所述准确度范围会被至少部分基于所述估计的相对排列所定义,以及所述估计的相对排列将所述焦平面量化为距一固定点(例如,光源模块110)有一距离x,以及量化所述样本的一垂直中点为具所述固定点(例如,光源模块110)有一距离y,都在远离所述固定点(例如,光源模块110)的相同特定方向中。另假设所述焦平面正在移动且所述样本是静止,会被相对排列所包围,所述相对排列相关于,举例来说,在一特定方向中,所述焦平面以及所述固定点(例如,光源模块110)之间有着x-i以及x+j的距离。变量x、y、i、j不被此揭露所限制,且可以是任何数值,不必要是彼此相同或相异。举例来说,x会等于或不等于y,且会等于或不等于j。在一些情况中,当中相对排列的所述范围会具有a以及/或是b会等于5微米,以及/或是j会等于2.5微米,而在其他例子中(不论a以及/或是b的数值),i以及/或是j会等于其他(多个)数值。在此例子中,有这样一预定的准确度范围,假如所述参考相对排列是相关于所述焦平面以及所述固定点(例如,光源模块110)之间的一距离,具有在x-i到x+j范围中的数值,以及也相关于所述样本与所述固定点(例如,光源模块110)的一距离为y,则所述参考相对排列会被接受,否则方法200或其中一部分会被重复。在一些例子中,当中方法200或其中一部分会被重复,当中在所述方法的重复期间,相较于先前执行所述方法时,会有一所述相对移动所涵盖的所述相对排列的一较宽范围。在这些例子中的一部分中,在所述较宽范围下会更容易决定出一可接受的参考相对排列。在这些例子中的一部分中,初始使用一较窄范围的所述选择可能会允许一较短的聚焦阶段,与方法200或其中一部分的重复的一机率相耦接,当必要时,也会提供时间以及准确度之间的一平衡。
在一些实施例中,方法200所决定的所述参考相对排列会被使用,举例来说,以决定所述焦平面以及样本沿着所述光轴的一调查相对排列,至少部分基于所述参考相对排列。所述调查相对排列会被决定,举例来说,通过一处理模块150。在一调查阶段期间,一或多个(完全地以及/或是部份地)交迭图像会被撷取,当中所述焦平面以及样本的所述相对排列对应于所决定的调查相对排列。举例来说,控制模块140会从处理模块150接收所述调查相对排列,以及会控制光学模块132(例如,改变焦距、移动光学模块132或其一部分),以及/或是载子模块120以及相关的样本盛器125(例如,通过移动以及/或是调整相关载子模块120来移动样本盛器125),以达到对应所述调查相对排列的一相对排列。所述调查相对排列会是,举例来说,等效于(例如,相同于)所述参考相对排列或者,举例来说,相对于所述参考相对排列被转移。可注意到的是,假如所述参考相对排列被用一特定方法量化,一调查相对排列,等效于所述参考相对排列,会被达到,其被用相同方式量化,或是等效地量化。举例来说,假如所述参考相对排列被量化为所述样本上的一特定点以及与一焦平面之间在一特定方向上的距离,接着所述调查相对排列会被量化为相同方向中的相同距离。另外地或替代地,假如所述参考相对排列被量化为,举例来说,所述焦平面以及一固定点在所述光轴上沿着一特定方向的距离k,以及一样本点以及所述固定点之间在相同方向上的距离I,接着所述调查相对排列也会被量化为所述焦平面以及所述样本,以及所述固定点之间在特定方向中的距离k、l,以及/或是会被量化为像是k+c、l+c、或k-c、l-c等等,所述焦平面以及所述样本以及所述固定点之间在特定方向中的距离,当中k、l、c,不被本揭露所限制,且可以是任何(多个)数值,不必要彼此相同或不相同。
在一些实施例中,可能的是,在针对一给定样本的一聚焦阶段期间,图像会被针对所述样本上的一或多个特定位置,以及/或是一或多个聚焦场域来撷取。在这些实施例的一部分中,方法200或其中一部分会针对一或多个特定位置,以及/或是每个所述(多个)聚焦场域而被重复。方法200或其中一部分会针对每个聚焦场域,以及/或是每个所述一或多个特定位置被只执行一次,或针对任何场域以及/或是特定位置被执行一或多次。
针对一聚焦场域所决定的所述参考相对排列不必要等同于,针对其他聚焦场域而被决定的所述参考相对排列,纵使所述场域是相邻的。举例来说,当中一样本盛器的内表面会有不同(所述样本被放置于上),像是样本盛器125,可能会让针对不同聚焦场域以及/或是特定位置的不同参考相对排列被决定。所述样本盛器内表面的不同,举例来说,会促使所述样本盛器表面倾斜、不平均,以及/或是不平滑,以及/或是促使所述样本盛器被放置成让所述样本盛器表面是不垂直于所述光轴。因此,所述聚焦会需要被重复(当作一单一阶段或多个阶段期间的一部份),例如,针对每个聚焦场域以及/或是特定位置,以及假如被重复,当中会有样本检查的所述时段上的一累积效应。因此会接着具有一更快的聚焦阶段,会是甚至更有益处的,当聚焦场域以及/或是特定位置的数量增加,以及/或是会允许在一给定时间区段内,扫描一较大表面区域,因此能有增加准确度的潜能。在一些例子中,具有多个聚焦场域,针对一特定场域的所述估计的相对排列,以及/或是相对排列的预期范围会至少部分基于所述参考相对排列,以及/或是可能会相邻所述特定场域的一或多个其他聚焦场域的相对排列的范围(例如,当中针对其他聚焦场域的所述参考相对排列会通过一处理模块,像是处理模块150,针对其他场域使用方法200或其中一部分的循环,在先前就被决定)。在一些例子中,可以预测的是,相同载子模块上的多个聚焦场域的多个所述参考相对排列会位于一线性平面中。在一些例子中,两个相邻的聚焦场域不会相邻(相反地,当中所述相邻的聚焦场域之间会有一距离),然而,在一些其他例子中,两相邻的聚焦场域会相邻以及/或是部分地交迭。
举例来说,参照图4,图4是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的一些场域与具体位置。所述主体不限制特定位置的数量,聚焦场域的数量以及/或是调查场域的数量,其会是每样本的成像,以及每个图4所显示的所述数量是为求图示简洁而选用,且不必要是具代表性的。所述箭头是图示针对所述场域的一可能的扫描形式。假设场域1、场域2,以及场域3是相邻的调查场域,沿着一轴(例如,y轴)垂直于所述光轴。场域a、场域b,以及场域c会是(相邻)对应于聚焦场域,沿着所述轴(例如,y轴),垂直于所述光轴。可注意到的是,在图4中,所述调查场域被显示为正方形,而所述聚焦场域以及特定场域被显示为圆形,也可使用其他图形。举例来说,一正方形调查场域会被使用,具有一长方形聚焦场域从所述正方形的一部份的一侧跨越至另一侧。假如针对聚焦场域b的所述参考相对排列具有的所述焦平面,比起针对聚焦场域a,与所述样本(在朝向成像模块130的方向中)的垂直中点距离更远一微米,接着针对聚焦场域c的所述估计的相对排列会包括,具有所述焦平面,且比起针对聚焦场域b,与所述样本(在朝向成像模块130的方向中)的垂直中点距离更远一微米。另外地或替代地,所述估计的相对排列会被至少部分地基于所述样本盛器内表面沿着所述光轴的导向所定义,例如,一样本盛器125会被以平面来大约地建模,以及垂直于所述光轴。
假如一预期的参考范围是被针对一聚焦场域所定义,针对所述聚焦场域的所述预期的参考范围会被定义,举例来说,至少部分地基于针对该聚焦场域的所述估计的相对排列。参照上述例子,关于至少部分地基于所述估计的相对排列的一范围的定义。
另外地或替代地,针对一聚焦场域的所述预期的参考范围可被定义,举例来说,至少部分地基于经验。举例来说,所述预期的参考范围会被定义,至少部分地基于所述参考相对排列,被发现于所述聚焦阶段针对一或多个其他聚焦场域的所述聚焦阶段期间,其会是以及/或是不会相邻于所述聚焦场域,所述参考相对排列,被发现于针对一或多个其他聚焦场域的所述聚焦阶段期间,其为相邻于所述聚焦场域,所述参考相对排列被发现于针对一或多个特定位置的所述聚焦阶段等等。参照图4,举例来说,针对聚焦场域g的所述预期的范围会是至少部分地基于,针对聚焦场域a、b、c,以及g的所述参考相对排列。举例来说,所述预期的参考范围会跨越至少一范围,所述范围涵盖每个a、b、c,以及g的全部所述参考排列。
可注意到的是,针对至少部分地基于所述估计的相对排列所定义的任何范围,所述定义基础是针对一聚焦场域,不必要相同于其他场域。举例来说,假设相似例子包括,j、a、b如上所讨论,以及/或是j,针对一预定的准确度范围以及/或是,a以及/或是b,针对一预期的参考范围,不必要是针对每个聚焦场域相等。
在一些实施例中,只有一相对小的(聚焦)场域会被成像于所述聚焦阶段期间,而一较大的(调查)场域会被成像于所述调查阶段期间。可选择地,被成像于所述调查阶段的所述调查场域会大于成像于所述聚焦阶段的所述聚焦场域(也就是说,所述聚焦场域会只包括所述调查场域的一部份)。举例来说,在图4中,场域1是大于场域a。可选择地,相同场域会被同时撷取于所述聚焦阶段以及所述调查阶段期间,但一所撷取场域的一较小部分会被处理于所述聚焦阶段中,而不是处理于所述调查阶段中。可选择地,相同场域会被撷取,且被分析,都在所述聚焦阶段以及所述调查阶段期间。
所述聚焦阶段的所述时段可能会被有利地缩短,假如成像于所述聚焦阶段的所述聚焦场域只代表一对应调查场域的一部份,以及/或是假如所述成像场域的一较小部分是被处理在所述聚焦阶段中而非所述调查阶段中。举例来说,这会减少方法200所需的时间,通过减少处理以及/或是资料转移所需的时间。可选择地,所述调查场域会完全地或部分地与成像于所述聚焦阶段的所述聚焦场域交迭。可选择地,一或多个调查场域会对应于相同聚焦场域,举例来说,具有多个调查场域,每个部分地或完全地交迭一特定聚焦场域。可注意到的是,在图4中,调查场域被描述为相邻的,非交迭的正方形场域。然而,任两个相邻的调查场域会是相邻或不相邻的(例如,会被分开一距离)。任两个相邻的调查场域会或不会部分地交迭。任一调查场域会是任何形状,且不必要是正方形(例如,可以是圆形或长方形)。任一调查场域可以是任一大小。在图4中,聚焦场域是被图示为圆形场域,但任一聚焦场域可以是任何形状,且不必要是圆形(例如,会是正方形或长方形)。任一聚焦场域会是任一大小。
可选择地,图2A中显示的被连续执行的两个或更多阶段,在一些实施例中会被平行执行。可选择地,方法200在一些实施例中,相较于图2A所图示,会包括更多、更少以及/或是不同的阶段。可选择地,图2A所显示的阶段,在一些实施例中,会被以不同于图2A中的顺序执行。
方法200的一些实施例的一例子是被叙述于图2B中。图2B是依据本发明所揭露的主体的一些实施例显示在沿着一光轴的多个相对排列的图像撷取的所述时程的一示意图。在此特定例子中,在样本盛器125沿着所述光轴,在所述光学模块132的方向中,以一变化速度移动时,而光学模块132会被维持静止。
所述移动的速度被以虚线310图示,对于所述时间以及速度轴作图。在此特定例子中,移动开始于点311,而一固定速率的加速会持续到点312上的最大速度。这速度被维持直到在点313开始减速。一固定速率的减速会持续到点314上的一区域最小值(例如,瞬间停止)。此点314对应所述估计的相对排列沿着所述光轴的所述位置,针对所给定的聚焦场域。在停止于此点后,会加速来恢复移动,接着通过一不变速度以及一减速阶段直到点321上的所述移动的终点处的完全停止。可注意到的是。在此例子中,减速以及加速速率被叙述为不变以及相等(但相反),这些会替代地被执行于变化的速率,以及/或是彼此不相等。要更所注意的是,当在此例子中,相同速度形式被镜像对称于上方与下方(也就是说,之前与之后)达到所述估计的相对排列(点320),这些形式会替代地不同。
样本盛器125在此移动期间的不同时间点的多个位置,对着时间与光轴作图为线330,具有多个点,当被撷取图像被显示为灰点。如图所示,每个灰点对应所述时间轴上的一时间点,以及沿着所述光轴的一位置。举例来说,图像撷取点331对应时间点332(当移动正在加速)以及所述光轴上的位置333。如所述时间轴上所示,所述图像被撷取于一不变速率。然而,移动速度中的改变会造成,图像撷取密度在所述光轴上的所述估计的相对排列点320附近被增大。
可注意到的是,当在此例子中,图像是被撷取在点311以及312之间的所述加速时段期间,以及趋于点321的减速时段期间,会造成在这些时段期间图像撷取的一增大密度,在一些实施例中,图像撷取会只发生于,举例来说,到达最大速度(点312)之后,以及停止在开始减速的点322。
可选择地,针对所述光轴的至少一部份的所述图像撷取密度会被定义,相关于所述图像的聚焦深度(depth of focus,DOF)。聚焦深度被得知为一景象(或一样本)中最接近以及最远的对象(在一图像中显现出可接受的锐利度)之间的距离。聚焦深度大多是一显微镜的透镜以及所述放大的一特性,所述后者会被所要的分辨率所决定。
可选择地,所述图像撷取密度会针对所述光轴的至少一部份,让每两个相邻的图像被分开不超过3聚焦深度单位。举例来说,假如聚焦深度是在5μm的范围中,两相邻的图像之间的所述距离会是15μm或小于所述光轴的至少一部份。可选择地,所述光轴的此部分会跨越±10聚焦深度单位之间,或小于沿着所述光轴一焦平面相关于所述估计的相对排列的一位置。可选择地,每两个相邻的图像会被分开不超过单个聚焦深度单位(例如,0.1-0.25聚焦深度单位),跨越±5聚焦深度单位之间(或甚至是±2聚焦深度单位之间)沿着所述光轴的一部份,围绕沿着一焦平面相关于所述估计的相对排列的一位置的所述光轴。如此处所使用,沿着所述光轴的两相邻图像,是不被沿着所述光轴的其他图像分开的两图像。
为了更好的发挥方法200,现在叙述包括方法200或其一部分的一方法500。可以看出的是,方法200会是一独立方法或可以是任何方法的部分,且至少部分的方法200不必要被包括于方法500中。
图5是依据本发明所揭露的主体的一些实施例的检查一样本的一方法的流程图。
假设针对一给定样本,所撷取的图像会对应于多个调查场域(例如,300个调查场域)。所述调查场域针对所述样本被成像,可以会或不会涵盖所述全部样本。举例来说所述样本会是一血液样本,被稀释并允许于设置为一载子滑道上的一单层,当中所述细胞的至少80%或甚至至少90%会直接接触直接盛放所述细胞样本的所述表面。所述血液会被赫斯特(Hoechst)以及/或是吖啶橙(Acridine O范围)所染色。
在所述多个实施例中,在阶段510中,一放大等级以及/或是光的一种类会被控制(例如,通过一控制模块,像是控制模块140,可能是在从一输入模块,像是输入模块160,接收选择之后)。当在方法500中必要时会运行时间510,而在一开始是不必要的,在阶段510的开始是不必要的。举例来说,针对一聚焦阶段,任一合适的放大等级会被使用,举例来说,100x、50x、20x、10x,等等。在一些例子中,可允许的最小放大等级会至少部分地受限于所述染色技术。在一些例子中,使用低放大率是有益的,当低放大可能会允许一较简单以及/或是较快的聚焦阶段,以及/或是一较低的聚焦深度(例如,允许较便宜的低敏感透镜,以及/或是控制模块马达,假如有的话)。举例来说,针对一聚焦阶段,会使用任何合适种类的光。举例来说,所述光会来自于一光源模块,像是光源模块110。在一些例子中,所述聚焦阶段会被执行于明亮场域中,以及/或是使用光在不会激发所述样本中的荧光染料的一频率,以在执行方法200时减少或防止光漂白(photo-bleaching)。另外,荧光图像会需要比明亮场域更长的曝光时段。
可注意到的是,在一完整血液样本的明亮场域照明中,所述最可见的充足对象一般是红血球。健康的红血球特征会是一独特的双凹形,如图6所示,其中在本揭露主体的一些实施例的内容中描述了一血液细胞25。血液细胞25特征在于具有一中间平面27。
在阶段520中的所述多个实施例中,会得到垂直于所述光轴(例如,X-Y位置)的一位置。举例来说,样本盛器125在其表面上会具有两个或更多个定位/校准标记。这样的标记会被用于辨识样本盛器125关于成像模块130或其一部分的所述X-Y位置。
在所述多个实施例中,在阶段530中,所述样本的至少一特定位置,以及/或是位于所述区域待被成像,会被沿着所述光轴扫描,使用相对排列的最大范围。此扫描可被执行,举例来说,靠近所述区域的一或多个所述末端(例如,一四边形区域的转角或周长,或圆形区域的所述周长,等等)要被成像,靠近其一中点,以及/或是位于任何其他位置。可选择地,多个特定位置会被扫描(例如,靠近以及/或是位于长方形区域的一转角的四区域要被成像)。最大范围会或不会等于一给定数位显微镜系统(例如,数码显微镜系统100)所允许的最大范围。在一些例子中,在阶段530中,最大范围会等于一给定数位显微镜系统所允许的最大范围,且接着会基于一载子范围被重新定义,如以下将会进一步说明。针对每个特定位置,多个图像会被撷取(例如,40个图像、80个图像,等等)。所述图像会或不会被撷取,使得连续图像必要地对应于彼此有一固定偏差的相对排列(举例来说,假如所述焦平面o或是样本是移动于沿着所述光轴的一方向中,那么连续图像会彼此沿着所述光轴距离一单一距离被撷取,可能会造成沿着所述光轴的单一图像撷取密度)。针对每一特定位置可决定一参考相对排列,以及假如两个或更多的特定位置被扫瞄,那么彼此差异最大的所述两参考相对排列会被选择。这些两参考相对排列会被用于定义一载子范围,至少部分地基于这些两参考相对排列,以及/或是用于推断所述导向上的信息,以及/或是样本盛器125在垂直于所述光轴的平面中的几何(例如,x-y平面垂直于z轴)。举例来说,所述载子范围会被定义为这些两参考相对排列之间的所述范围,或是会被定义成为一最小范围(例如,100微米或更多),会包括这些两参考相对排列(例如,至少在个别最高以及最低值的上方以及下方25μm)。
可选择地,任何所述特定位置的所述参考相对排列会被重新定义,以及/或是通过沿着所述光轴执行一额外扫描来确认。可选择地,此会包括定义所述参考相对排列,被发现于相同特定位置的先前扫描以成为所述估计的相对排列,以及必要地依据方法500的阶段540、550以及560来进行。可选择地,此会包括位于或靠近所述估计的相对排列具有被减低的速度(例如,速度0),以及/或是提高位于或靠近所述估计的相对排列的图像撷取的速率。
可选择地,一特定位置的一第二扫描会包括使用一特定位置的一先前扫描的一参考相对排列当作所述估计的相对排列(或多个特定位置的先前扫描的所述参考相对排列的一函数),以及具有被减低的速度(例如,速度0)位于或靠近所述估计的相对排列,以及/或是位于或是靠近所述估计的相对排列的图像撷取的被增高的速率。
可选择地,所述特定位置的任何扫描会依据方法200或其一部分,包括至少一所撷取的图像,当所述样本以及一焦平面沿着一光轴以大于零的一速度相对移动。
关于样本盛器125的表面几何的信息会使用至少两参考相对排列来导出,所述至少两参考相对排列是针对特定场域所推断出来。基于一对特定位置会定义一线段,所述线段代表样本盛器125的所述表面的倾斜。基于三个或以上的特定位置,会定义一平面,所述平面代表样本盛器125的表面。举例来说,再次参照图4,假设三个或以上的可能特定位置α、β、γ、δ被扫描。假如α的所述相对排列特征在于,所述样本以及所述焦平面之间的距离比β的所述相对排列大,以及γ的所述相对排列特征在于,所述样本以及所述焦平面之间的距离比δ的所述相对排列大,那么可假设样本盛器125的平面是倾斜的,使得所述场域1、8以及9高于4以及5。假如α的所述相对排列特征在于,所述样本以及所述焦平面之间的距离与δ的所述相对排列相同,但大于γ的所述相对排列,以及γ的所述相对排列特征在所述样本以及所述焦平面之间的距离与β的所述相对排列相同,接着可推断样本盛器125的表面具有一特有的几何。
关于样本盛器125的所述表面所导出的信息会被用于定义针对任何场域的一估计的相对排列。举例来说,此信息会被包括于一或多个相邻的场域的所述参考相对排列。可选择地,关于所述表面几何的所述信息,使用两获更多个特定位置的所述参考相对排列会被微调,使用针对所述样本中的其他聚焦场域所找到的一或多个参考相对排列。
可选择地,任一所述特定位置扫描会接着通过在一场域的一调查相对排列撷取一或多个图像,其交迭在至少部分的所述特定位置(例如,当作阶段500的部分)。举例来说,参照图4,假如以对γ做一扫描,则在交迭场域9会取得一或更多个图像。可选择地,任一所述特定位置与调查场域可以会或不会交迭。可选择地,任一所述特定位置与聚焦场域可以会或不会交迭。可选择地,任一特定位置会是任何形状,以及/或是大小,且不必要与图4所示相同。
可选择地,最大范围会被重新定义,基于所述载子范围,举例来说,通过延伸所述载子范围以包括额外相对排列。继续用此例子,假如假设只有所述焦平面或样本在移动,所述焦平面或样本会被允许在最大范围内,距离一固定点较近以及/或是较远,以高达25微米的差距,例如,一光源模块,像是光源模块110,相较于所述载子范围所允许。在此例子中,重新定义的最大范围会因此包括所述载子范围内的相对排列以及额外的相对排列。以第一聚焦场域(阶段535)开始,在阶段540中的所述多个实施例中,针对沿着所述光轴的相对移动,针对所述场域会定义一估计的相对排列、一准确度范围,以及一相对排列范围。举例来说,这些值会被通过一处理模块,像是处理模块150来定义。所述相对排列范围会等于,举例来说,最大范围、所述载子范围、或所述预期的参考范围。一预期的参考范围可能会被允许为比所述载子范围或最大范围窄的范围,因为所述预期的参考范围会至少部分地基于所述估计的相对排列,以及/或是经验所定义。一预期的参考范围会因此可能有益地致能如上所述的一较短的聚焦阶段。所述估计的相对排列会被定义,举例来说,至少部分地基于针对其他聚焦场域的参考相对排列,以及/或是基于所导出的信息,关于样本盛器125的表面的几何,如上所述。所述准确度范围会被定义,举例来说,至少部分地基于所述估计的相对排列,如上所述。
在所述多个实施例中,在阶段550中,针对所述聚焦场域,方法200或其中一部分会被执行。假如,举例来说,所述相对排列范围,被初始使地用于阶段550中,会等于所述预期的相对排列范围。在此例子中,假如所决定的参考相对排列不位于所述准确度范围内,则阶段550会被重复于一较宽的相对排列范围,例如,相等于最大范围。可能在此例子中,假如所述重复的数量是大于n(n≥1),会输出一错误信息,举例来说,通过一输出模块,像是输出模块170,以及方法500会结束或方法500会循环返至阶段540,针对一其他聚焦场域。一旦一参考相对排列已被决定(在阶段550的一或多个循环后),在所述多个实施例中,方法500会继续至阶段560。
在一些例子中,依据一参考标准决定所述参考相对排列的处理会包括至少部分地基于最大对比以及/或是锐利度的一参考标准。数个函数中的任一个,会被用作一图像区域的标准偏差、与一平均值的绝对值偏差、熵值、微分值(梯度或拉普拉斯(Laplacian))等等,其中所述函数会被预期在一最大值,当所述图像达到锐利度或对比度的一最高等级时。
在一些例子中,依据一参考标准决定所述参考相对排列的处理会,另外地或替代地,包括图像对比的下降。关于图像对比的下降的例子在上述国际申请号PCT/IL2014/050423的专利申请案中有叙述。在上述共同申请中的专利申请案的一些例子中,叙述了一参考如何被决定,其对应图像对比的一下降。举例来说,在上述共同申请中的专利申请案的一些例子中,沿着所述光轴使用所述多个图像,举例来说,依据所述方法200,一曲线会被产生,代表一图像对比函数的数值(举例来说,图像变异)当作沿着所述光轴的深度等级的一函数。在上述共同申请中的专利申请案的一些例子中,当中图像I包括像素密度Iγ,δ的α*β个像素(α、β是正整数),其中1≤γ≤α以及1≤δ≤β,所述图像变异会被表示为:Var(I)=Ε[(Ιγ,δ-Ε(Ι)2,其中E(I)是所述像素密度Iγ,δ在所述图像例子上的一平均值。在上述共同申请中的专利申请案的一些例子中,所述曲线上的多个补充点会被内插的以及/或是外插,但在一些其他例子中,补充点不会是内插或是外插的。在上述共同申请中的专利申请案的一些例子中,会定义对应于图像对比的下降的一参考,举例来说,通过定出所述曲线中的两最大值以及找寻所述曲线上在这两最大值之间的最低点(最小值,也被参照为所述曲线中的“井”)。在上述共同申请中的专利申请案的一些例子中,一曲线不必要被产生,且所述最大与最小值的定义会被以数学方法执行。在这些例子中,点的内插以及/或是外插被包括于所述数学处理,可以会或不会被执行。
在上述共同申请中的专利申请案的一些例子中,会确认所述参考,是否所述一井的所述深度是在一预定门坎值之上。在上述共同申请中的专利申请案的一些例子中,应用基于对比的函数以及/或是基于锐利度的函数至一样本的明亮场域的显微镜(举例来说,一样本大多包括红血球,像是一血液样本)会产出定性上相似于图7中所示的图。图7是依据本发明所揭露的主体的一些实施例,代表图像对比函数的值的深度等级函式的一曲线。所述曲线明显包括一井37,被包围于两最大值38、39之间(在此例子中的鞍点,一区域最小值,但不是一绝对(全局)最小值)。在上述共同申请中的专利申请案的一些例子中,一深度等级的值会是量化一焦平面以及样本沿着所述光轴的一相对排列的一值的例子,且因此图7也会被认为是依据本揭露主体的一些实施例。然而,量化相对排列的数值不会被本揭露主体所限制。因此,依据本揭露主体的一些实施例,一图像对比函数的数值会被作图,以及/或是数学处理为相对排列的任何可量化数值的一函数(且不必要是深度等级),假如需要定义对应图像对比的一下降的一参考相对排列。
在所述多个实施例中,在阶段560中,一调查相对排列会被针对一或多个对应调查场域决定,举例来说,通过处理模块150。一对应调查场域会是一场域,所述场域至少部分交迭于所述聚焦场域。举例来说,在图4中,针对聚焦场域a显示的唯一交迭调查场域是调查场域1,其会完全涵盖聚焦场域a。然而,如上所述,可能的是一对应调查场域不会完全地涵盖所述聚焦场域,以及/或是当中会有一个以上的对应调查场域。所述调查相对排列会被定义至少部分地基于所述参考相对排列。举例来说,在一些情况中,所述调查相对排列会等效于所述参考相对排列。在一些其他情况中,所述调查相对排列会被定义为关于所述参考相对排列的一所转移的相对排列。举例来说,所述转移会在0.2-3微米、或大约1-2微米、或大约1.5微米的范围内。决定所述转移的方法不被所述主体限制,且会被执行于任何合理自动的、手动的、或半手动的。举例来说,所述转移可能会被至少部分地基于不同光种类下的所撷取图像的眼部的一比较所决定。在这些情况中的一部分,所述调查相对排列会被转移,假如所述参考相对排列被决定,使用图像对比中的下降当作一参考标准,以在所述调查阶段期间增加所述对比以及/或是所撷取图像的锐利度。
在所述多个实施例中,在阶段570中,所述对应的调查场域会被成像,当中一或多个图像会被撷取,藉由对应于所决定的调查相对排列的所述焦平面,以及所述样本沿着所述光轴的所述相对排列。举例来说,一控制模块像是控制模块140会控制所述相对排列,以对应被决定于阶段560中的所述调查相对排列,举例来说,通过改变一焦距,移动光学模块132或其中一部分以及/或是移动样本盛器125(例如,通过移动以及/或是调整相关的载子模块120),假如是必要的。可能的是,针对所述焦平面的沿着所述光轴的一个以上的等效位置,以及/或是针对所述样本的沿着所述光轴的多于一个地等效位置会对应于所述调查相对排列,假设所述样本上的所述焦平面以及一点被放置于适当距离,以及彼此沿着所述光轴的方向。另外地或替代地,阶段510可以被执行于阶段570之前,以及/或是阶段570期间,通过一控制模块,像是控制模块140,举例来说,控制一光源模块,像是光源模块110,举例来说,以允许图像被取得于不同光中(例如,一图像在每个明亮场域,与赫斯特中,以及两图像在荧光的光中)。另外地或替代地,假如所述放大等级是要被改变的,一控制模块像是控制模块140,举例来说,会控制光学模块132去改变所述放大等级(例如,100x、50x、20、10x等等)。阶段570中图像撷取的所述速率不会被本揭露所限制。可选择地,多个调查场域会被成像于所述调查阶段,基于被针对一给定扫描场域所定义的一参考相对排列。假如多个调查场域被成像,所述多个调查场域的每一个会交迭,至少部分地,所述聚焦场域被部分地或全部地用于定义所述参考相对排列。
可选择地,移动方向会被执行,通过比较连续撷取的两荧光图像。所述比较会允许所述静止寄生虫以及潜在假阳性能动组件(例如,血小板)之间的不同。
在所述实施例中,在阶段580中,会决定是否所述最后调查场域,其被认为会针对所述样本所成像,已经被成像。假如不是,则在所述多个实施例中,针对所述下个聚焦场域(阶段590)方法500的循环会返回阶段540。可选择地,阶段510会被执行去控制放大以及/或是光,当必要的时候。假如,相反地,所述最后调查场域,其被认为会被成像,且已经确实被成像,则在所述多个实施例中,方法500会结束。本揭露不会限制所述方法500中多个场域会被操作的顺序。
在一些实施例中,方法500可能会有益地允许血液的一全部滑道(例如,反射的血液)以被用远少于传统状况下的时间来扫描(例如,少于5分钟,相较于传统的40分钟)。
可选择地,图5中所示的被连续执行的两个或更多的阶段,在一些实施例中,会被平行地执行。可选择地,方法500,在一些实施例中,相较于图5中所示,会包括更多、更少以及/或是不同的阶段。可选择地,在一些实施例中,多个阶段被用不同于图5中所示的顺序来执行。举例来说,阶段540以及550(以及可选择地,阶段560)会被执行,针对多个(或甚至全部)聚焦场域,在针对对应的调查场域进行到阶段560或570之前。
可以理解的是,所揭露的主体是设想此所揭露的一系统或其部分,举例来说,会包括一计算机以及/或是被包括于一计算机中。同样地,本主体包括,举例来说,被一计算机读取的一计算机程序,用于执行此所揭露的一方法或一方法的部分。本主体另设想,举例来说,一计算机可读媒体明确地实施一计算机可读程序代码,用于执行此所揭露的一方法或一方法的部分。
所述用语“非暂存的”是用于排除暂存的、传递的信号,但包括任何但以其他方式包括适用于本申请的任何挥发性或非挥发性计算机内存技术。举例来说,一计算机程序产品会包括一非暂存计算机可用媒体。
尽管已经参照多个例证性的实施例描述了实施例,但是应该理解的是,可以由本领域技术人员设计的许多其它改进和实施例将落入本公开的原理的精神和范围内。更具体地,在本公开、附图和所述权利要求的范围内,在主题合并设置的部件和/或设置内的多种变化和改进是可能的。除了在部件和/或设置中的变化和改进,可选的使用对本领域技术人员来说也将变得明显。

Claims (25)

1.一种数码显微方法,其特征在于,包括:
撷取一样本的多个交迭图像,其中当所述样本与一焦平面沿着一光轴以大于零的一速度相对移动时,所述多个交迭图像之至少一者之撷取会被执行,且执行所述多个交迭图像的所述撷取以产生沿着所述光轴的不同图像撷取密度;
提供所述焦平面与所述样本沿着所述光轴的一估计的相对排列;
改变所述速度包括在所述焦平面与所述样本的一当前的相对排列更接近所述估计的相对排列时减速,在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列更远离所述估计的相对排列时加速;以及
使用一参考标准去处理所述多个交迭图像,以判断所述焦平面与所述样本沿着所述光轴的一参考相对排列。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述交迭图像完全地交迭。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,当所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列对应于所述估计的相对排列时,所述相对移动的所述速度是处于一最小值。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,当所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列对应于所述估计的相对排列时,所述相对移动的所述速度为零。
5.如权利要求3-4其中任一所述的方法,其特征在于,改变所述速度包括加速以在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列对应于一相对排列而非所述估计的相对排列时,提供相对移动的一增高速度。
6.如权利要求3所述的方法,其特征在于,改变所述速度包括在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列对应于所述估计的相对排列之前减速,在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列对应于所述估计的相对排列之后加速。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述撷取包括改变图像撷取的一速率。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,改变图像撷取的所述速率包括增加图像撷取的一速率以在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列对应于所述估计的相对排列时,提供一增高速率。
9.如权利要求7所述的方法,其特征在于,改变图像撷取的所述速率包括减少图像撷取的一速率以在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列对应于一相对排列而非所述估计的相对排列时,提供一减低速率。
10.如权利要求7所述的方法,其特征在于,改变图像撷取的所述速率包括在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列对应于所述估计的相对排列前增加图像撷取的一速率,以及在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列对应于所述估计的相对排列后减少图像撷取的一速率。
11.如权利要求7所述的方法,其特征在于,改变图像撷取的所述速率包括在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列更接近所述估计的相对排列时,增加图像撷取的一速率,以及在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列更远离所述估计的相对排列时,减少图像撷取的一速率。
12.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述相对移动的一速度大于10μm/s时,所述多个交迭图像中至少一个被撷取。
13.如权利要求1所述的方法,其特征在于,相对移动至少部分是通过变动一焦距所实现。
14.如权利要求1所述的方法,其特征在于,相对移动至少部分是通过移动一样本盛器所实现。
15.如权利要求1所述的方法,其特征在于,相对移动至少部分是通过移动一光学模块或其一部分所实现。
16.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述参考标准包括图像对比中的一下降。
17.如权利要求1所述的方法,其特征在于,包括当沿着所述光轴的所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列对应于一调查相对排列时,撷取一样本的至少一图像,其中,所述调查相对排列是至少部份基于所述参考相对排列来被定义。
18.如权利要求17所述的方法,其特征在于,所述调查相对排列被定义为关于所述参考相对排列转移的一相对排列。
19.一种数码显微镜系统,其特征在于,包括:
一成像模块,包括一传感器模块,被设置来撷取一样本的多个交迭图像,其中当所述样本与一焦平面沿着一光轴以大于零的一速度相对移动时,所述多个交迭图像之至少一者之撷取会被执行;
一载子模块,被设置来载送、支持、包括、或在其内整合一样本盛器,所述样本盛器是被设置来容纳所述样本;
一控制模块,被设置来:
实现所述相对移动,
改变所述速度包括在所述焦平面与所述样本的一当前的相对排列更接近所述焦平面与所述样本沿着所述光轴的一估计的相对排列时减速,在所述焦平面与所述样本的所述当前的相对排列更远离所述估计的相对排列时加速,以及
驱使所述成像模块撷取所述多个交迭图像以产生沿着所述光轴的不同图像撷取密度;以及
一处理模块,被设置来使用一参考标准去处理所述多个交迭图像,以判断所述焦平面与所述样本沿着所述光轴的一参考相对排列。
20.如权利要求19所述的系统,其特征在于,所述控制模块被设置来驱使所述成像模块改变图像撷取的一速率。
21.如权利要求19所述的系统,其特征在于,所述成像模块包括一光学模块,且其中所述相对移动是通过所述控制模块执行下述至少一者来被至少部分实施:相关于所述光学模块改变一焦距、或移动所述光学模块、或移动所述光学模块之一部分。
22.如权利要求19或20-21其中任一所述的系统,其特征在于,所述相对移动是通过所述控制模块藉由移动所述样本盛器来至少部分地实现。
23.如权利要求19所述的系统,其特征在于,包括一光源模块。
24.如权利要求19所述的系统,其特征在于,包括一输入模块,被设置来从一操作器与一控制器装置其中任一接收输入,以让所述处理模块与控制模块其中至少一个所使用。
25.如权利要求19所述的系统,其特征在于,包括一输出模块,被设置来提供输出至关于所述系统的操作的一操作器与控制装置的其中任一个。
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