CN105167072A - 一种功能性枸杞酵素及其制品的生产方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种功能性枸杞酵素及其制品的生产方法，包括枸杞打浆、酶解、调整固形物含量及pH值，灭菌，接种益生菌发酵，离心分离，浓浆干燥得枸杞酵素粉，清汁继续接种益生菌发酵得枸杞酵素原液，经后熟得枸杞酵素，以此可以制得其它枸杞酵素制品，包括枸杞酵素饮料、枸杞酵素粉、泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。本发明产品具有清热、解毒、补血、明目、降脂减肥、提高机体抗氧化能力，调节肠道菌群平衡，增强免疫、增进美容、促进睡眠、延缓衰老的功效。

Description

一种功能性枸杞酵素及其制品的生产方法
技术领域
本发明属于食品加工领域，具体地说是涉及一种功能性枸杞酵素、酵素饮料及其生产方法。
背景技术
枸杞子是国家卫生部公布的既是药品又是食品的物品，《中华人民共和国药典》明确规定：“药用枸杞子为宁夏枸杞的干燥成熟果实”，中宁县是宁夏枸杞的主产地，也是世界枸杞的发祥地和正宗原产地。截止到2011年，国家食品药品监督管理局审查批准的1万多个保健品中，组方用到枸杞的有1800多个频次，居所有药食原料的首位。这足以说明枸杞保健功能之强大，已为全国公认，可以毫不夸张的将枸杞称之为“中国保健食品之王”。枸杞子强大而广泛的保健功能，使其成为生产各类养生保健品的最佳原料之一，因此，生产保健食品也就成为枸杞深加工的发展方向。
枸杞中所含有的VA、VB、VC和VE都有较强的抗氧化能力，特别是水相中的VC和脂相中的VE，已成为相应的抗氧化作用的标准物质。在枸杞中含有的β-胡萝卜素和叶黄素、玉米黄素、隐黄质等，这些物质的抗氧化能力都很强，都具有消除单线态氧(102)的作用，虽然消除能力各不相同，但都比VE的消除能力大数十倍，均能有效的灭杀自由基，而且对人体组织受氧化伤害有很好的防御作用和治疗恢复作用。枸杞中还含有丰富的黄酮类物质，而黄酮类物质对生物膜中脂质过氧化有较强的抑制作用。
难得的是枸杞果实中还含有其它植物很少含有的牛磺酸，达果实干重的0.7％，高于动物及海产品中的含量；牛磺酸是一种含硫的非蛋白氨基酸，人体内神经和心肌细胞中含量最多，是婴幼儿生长发育必须的一种氨基酸；具有保护心肌，防止动脉硬化、改善记忆、调节糖代谢和增强视力预防白内障的功能。枸杞中含有超氧化物歧化酶，即SOD，这种酶在人体中分布于细胞的胞浆和体液中，这是一种内源性抗氧化物。
枸杞中甜菜碱含量很丰富，约为果实干重的0.98-1.12％，甜菜碱属季胺类化合物，枸杞中最主要的生物碱，在人体内是最好的细胞液渗透压调节剂，具有促进生长、抗肿瘤的功能，作为甲基供给体，可以促进脂肪分解以及抗脂肪肝的作用；许多学者认为，枸杞的保肝功能是甜菜碱作用的体现。
枸杞中还富集有人体必需微量元素硒，硒是人体红细胞中谷胱甘肽过氧化物酶的必需组成部分，在细胞和体液中，通过含硒抗氧化酶或蛋白，消除脂质过氧化物，阻断活性氧和自由基的致病作用，延缓衰老；硒在人体中，能修复细胞畸变所带来的分子损伤，有预防抑制肿瘤的作用；硒能刺激机体产生较多的免疫球蛋白IgM和IgG，从而提高机体免疫力；枸杞中含硒量为0.15mg/100g是目前已知植物中最高的(除枸杞外植物中含硒最高的小麦胚芽中含硒量为0.11mg/100g，人体内总共也仅有14-20mg硒)。至于枸杞中枸杞多糖(鲜果含量为5.8-7.8％，干果含量为21.8％)增强免疫功能、抗疲劳、延缓衰老及抗氧化作用，已经是众所周知了。由于枸杞中含有大量不同种类的抗氧化因子，所以枸杞就具有很强的抗氧化能力，成为最典型的最有效的外源性抗氧化物质，也就表现出了延缓衰老、提高免疫力、抗疲劳、降血脂、抑血糖、强肾、保肝、明目、防肿瘤、抑制动脉硬化等一系列的功能。
软儿梨，又称香水梨、化心梨、冻梨属秋子梨系，为我国古老而优良的地方品种，栽培历史悠久。属区域化特别明显的特色农产品。该品种主产于甘肃、宁夏中卫香山故名香山软梨子。软梨子的果实近圆形，平均果重在125克左右，秋风后成熟，熟果期持续到立冬之后。据测定分析，香水梨含18种氨基酸，24种微量元素，每千克中维生素含量200毫克以上，香水梨入秋成色，清黄鲜亮，果味微酸，熟后摘下冻藏，肉质变成褐色，解冻后汁液较多，营养丰富，食如甘蜜，有清肺醒酒之功效。
香水梨的特点是色变而味愈佳，宜久存不易腐烂，不怕严寒冷冻。摘下来后，可随便置放，少则置于箱篓瓦罐之中，多则堆放在室内空地之上。入冬后，或入箱存于冷室，或在院内、房上打麦草盛装。食用时拿出置于冷水之中，浸泡30分钟，果外褪出一层厚厚的冰壳，打碎冰壳果子解冻即可食用。到春天冰雪融化之时，冻硬的香水梨开始融化，其颜色转为棕黑色，果瓤全化成了果汁，只留下一些果皮和残核。存放时必须放进缸或盆罐里。这时的香水梨最好吃不过，喝一口果汁，甘凉透心，可润肺止咳、清胃泻火，亦能醒酒，滋身祛疾是馈赠亲友的珍品。
宁夏中卫香山乡香水梨梨树树龄多在百年以上，最高的达400年以上，据考证，此地果树系大辽灭西夏后拓跋部落的幸存者到此避难时所种。最大的树3人合抱不过来，树冠达300平方米，每棵树年产梨2500多斤。每年的软梨的产量为750万斤，而它的市场现在只限于果品的出售。市场每年的消耗量为70万公斤，走出外部市场也就有10万斤，以果品形式每年也就100万斤，由于不好储藏保管，其余的个头略小的直接落到了树下腐烂。
由于受到冷链销售的限制，软梨子仅限于宁夏中卫及周边地区，就是在银川也很少见到，使这种珍稀果品不能面对更多的消费者，严重制约了香山软梨子的发展。另一方面是缺乏宣传，上百年的古树，稀缺的果品资源，深藏在原始的黄河谷地而不被外人所知。
目前，没有见有关软儿梨的酵素报道。以枸杞及其他果蔬为原料制备酵素类产品的公开专利文献较多，比如：申请号为201410326646.9的中国专利公开了一种枸杞酵素的制备方法，以枸杞残次品为原料，经分离取汁、酶解、降糖发酵、乳酸菌发酵、超声低温浓缩、调配、干燥、粉碎而制得，添加剂少，无残留，实现了枸杞酵素产品中活性物质含量的提升。申请号为201110038192.1的中国专利公开了一种具有滋补气血功效的醋饮料及其生产方法，各材料的质量组成比为：中药固体颗粒1～5，红枣果肉5～15，枸杞子5～15，糖10～20、食醋10～20；人参、党参、山药经过浸泡、熬煮、过滤、蒸发提取得到中药固体颗粒，再和切块的红枣果肉、枸杞子、糖、食醋进行发酵提取而得到，具有滋补气血的功效，有效率在85％以上。申请号为201010624400.1的中国专利公开了一种金丝小枣酵素的制备方法，以金丝小枣为原料经枣泥制备、一次酶解、二次酶解、调配消毒、发酵、冷冻干燥而制得，制备的金丝小枣酵素含有丰富的蛋白酶、脂肪酶、超氧化歧化酶、淀粉酶、维生素、矿物质及酚类、黄酮类等次生代谢产物。申请号为201410432581.6的中国专利公开了一种环保酵素的制作方法，采用原料为：苹果、香菇、胡萝卜、山楂、枸杞子、柠檬和白砂糖；经原料清洗、密闭自然发酵、取滤液、纯种发酵、后熟制得，该环保酵素的制作方法，改变了传统的酵素生产使用诸多添加剂等，制取的酵素不仅对于人体吸收有益，而且在养生保健等方面有明显作用。申请号为201210406990.X的中国专利公开了一种苹果酵素，以质量份数计，其组成为：党参40-60份，北芪15-25份，红枣30-60份，枸杞子30-80份，青苹果400-600份，寡糖粉80-100份，花蜜200-300份；制备方法是利用纯天然的植物和水果通过自然发酵产生酵素，具有补益强身、提升免疫系统功能，促进血液循环，清血整肠，加速新陈代谢，保持机体健壮等显著功效。如申请号201310546788.1的“一种果蔬酵素及其制备方法”的发明专利，公开了以苹果、香蕉、枣子、葡萄、芒果、山楂、菠萝、蜜桔、草莓、熟白果、洋葱为原料，经清洗、捣碎，入坛自然发酵180天而成，有活性物质，但是不宜无保。申请号201110151867的“益生植物本草发酵饮料”的发明专利，该专利公开了益生植物本草发酵饮料及其制备方法，该饮料以红枣、枸杞子、决明子为原料制成提取液，在提取液中调配砂糖、低聚糖，并接种植物乳杆菌、乳酸片球菌两种乳酸菌发酵，得饮料；其中，每1000kg饮料中，有以折光度计≥10％的红枣、枸杞子、决明子提取液400kg，饮料pH为3.5，乳酸菌总数为4.9×108/ml。
上述已经公开的专利主要研究方向集中在原料及发酵方式的变化上，主要存在以下几点缺陷：1)自然发酵周期长、成本高、发酵污染风险大；2)发酵方式采用传统自然菌群发酵、现代复配纯种发酵或二者的结合，过于传统，无创新；3)酵素生物活性及稳定性差，保质期短；4)口感和风味适应性差、食欲性低；5)以提取液进行发酵，损失了原料的营养成分。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术的不足，提供一种生物活性高、稳定性强、口感和风味好，保健效果显著的功能性酵素及其制品的生产方法。
本发明的技术方案是：一种功能性枸杞酵素及其制品的生产方法，其包含以下步骤：
1)枸杞清洗后加入5-10倍的水进行复水，打浆，然后用果胶酶和纤维素酶在45-50℃酶解2小时；
2)将步骤1)得到的枸杞汁，进行微细化处理，调整混合浆液浓度，使上述混合浆液的可溶性固形物含量达到2-6％，调pH值7-8；
3)将步骤2)得到的浆液灭菌，降温至30-40℃，接种益生菌进行通氧保温发酵，发酵期间适时补充果葡糖浆，维持可溶性固形物稳定，发酵20-60小时后以4000-8000转/分钟的转速将发酵液离心分离得清液和浓缩液，浓缩液经低温干燥制得枸杞酵素粉；
4)清液继续接种益生菌进行密闭发酵，当发酵液ph值达到3.0-4.0时终止发酵，得枸杞酵素原液，室温后熟0-180天后经调配即得枸杞酵素；枸杞酵素原液或枸杞酵素经浓缩、干燥也可制得枸杞酵素粉；
5)取步骤4)得到的枸杞酵素原液1-30份，取叶黄素0.1-1份、牛磺酸0.1-1份、低聚糖0.1-1份、其他辅料适量，纯净水适量，经调配、均质、脱气、杀菌、灌装而成枸杞酵素饮料；
6)取步骤3)或步骤4)得到的枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
所述的益生菌为青春双歧杆菌、动物双歧杆菌(乳双歧杆菌)、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、凝结芽孢杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种(保加利亚乳杆菌)、蜡样芽孢杆菌、德氏乳杆菌乳亚种、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、约氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、枯草芽孢杆菌、唾液乳杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌、副干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、肠膜明串珠菌肠膜亚种、马克斯克鲁维酵母、乳酸片球菌、戊糖片球菌中的一种或几种。
所述的枸杞可以是软儿梨等其他单一或复合原料。
所述功能性枸杞酵素，由固、液两部分组成，固体部分为枸杞酵素粉，液体部分为枸杞酵素，一个液体包装配备若干个固体小包装组成一个完整的枸杞酵素包装，食用时将一定量的液体稀释后加入一个小包装的固体混匀后饮用。
益生菌均为国家批准可用于食品或药品的不产生毒素的菌株。
将枸杞、软儿梨等打浆，经成分调整、杀菌、真空浓缩，再接种益生菌发酵后干燥而制成的含大量益生菌体及其代谢产物的混合粉状物，属功能型性枸杞酵素制品，富含益生菌素，可作保健食品或食品添加剂。
干燥采用微波干燥，真空干燥、真空冷冻干燥等。
另外的，新鲜枸杞、软儿梨经清洗、灭酶或不灭酶，破碎，保持果核完整，加入果胶酶和纤维素酶保温酶解，期间持续挤压搅拌，酶解结束时，加入1-2倍的水搅拌均匀后静置30分钟，加入其它原料，混合后调整可溶性固形物含量和pH值后，经过灭菌，接种益生菌进行发酵，发酵结束后即可分离出枸杞酵素原汁。
另外的，新鲜软儿梨经清洗、灭酶或不灭酶、挤压破碎果肉，保持果核不被破碎，加糖拌匀自然发酵，发酵结束后分离得酵素原汁。
可以通过加入果葡糖浆或白砂糖将枸杞酵素原液的可溶性固形物调整至50-70％，通过高渗透压和益生菌产生的益生菌素抑制微生物活性，使枸杞酵素得以长期保存。
原料打浆、微细化处理、调整可溶性固形物含量和Ph值后灭菌，接种凝结芽孢杆菌等益生菌发酵，发酵20-40天后，经过调配，然后用砂糖或果葡糖浆将发酵液可溶性固形物含量调整至60％左右，装瓶即为枸杞酵素。枸杞酵素原液也可以灭菌保存。
本发明达到了以下几个效果：
由于枸杞子含有丰富的胡萝卜素、玉米黄质、酸浆果红素、维生素A1、B1、B2、C等钙、铁等健康眼睛的必需营养，故擅长明目，所以俗称“明眼子”。联合枸杞中的花青素，叶黄素、牛磺酸，能够起到很好的明目功能。
益生菌在发酵过程中，由于微生物促进原料代谢产生大量的初级、次级代谢产物如氨基酸、维生素、有机酸、各种酶、芳香族化合物、糖醇、多酚、多糖、小分子肽以及大量的低聚糖等有机活性成分外，而且还产生大量的益生菌细胞、超氧化物岐化酶(SOD)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)及黄酮类化合物等对人类具有保健作用的诸多宝贵因子。枸杞酵素在乳酸菌发酵过程产生大量的乳酸菌素等小分子功能成分和原料自身所含的大量营养及功能成分，这些有益成分极大的促进肠道有益菌群的增值，抑制有害菌，从而减少腐败物质和有毒物质的产生，在起到功能性同时，还起到调节肠道菌群平衡，增强免疫、增进美容、促进睡眠、延缓衰老的作用。
本发明由于原料酶解处理及多菌种发酵的生化反应，使枸杞原料中的玉米黄质及其酯类与果肉纤维分离，呈游离状态，有利于人体更好的吸收，明目功能更好。
本发明采用多菌种联合发酵而成，产生大量的原料代谢产物和菌体自溶物和大量的菌体细胞，对提高机体免疫力具有重要作用。
本发明的含有丰富的可溶性膳食纤维，低聚糖，含有大量的益生菌，使产品具有整肠通便，清除体内毒素的良好功效，长期食用可达到降脂减肥、排毒养颜、防治大肠癌、防治心脏疾病的医疗价值和保健作用。
本发明含有丰富钙、磷、钾、镁、铁、锌、维生素C、B族维生素等营养元素，对维持机体正常功能具有重要作用。
本发明还含有丰富的多酚、黄酮、玉米黄质、β-胡萝卜素、多糖等特殊成分，对软化血管、改善微循环，提高机体抗氧化能力，延缓衰老、缓解视疲劳具有积极作用。
本发明的酵素及其制品都保留了枸杞的香气，产品口感和功能都得到提升。
下面以具体实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
具体实施方式
实施例1
一种功能性枸杞酵素及其制品的生产方法，其包含以下步骤：
1)枸杞清洗后加入5-10倍的水进行复水，打浆，然后用果胶酶和纤维素酶在45-50℃酶解2小时；
2)将步骤1)得到的枸杞汁，进行微细化处理，调整混合浆液浓度，使上述混合浆液的可溶性固形物含量达到2-6％，调pH值7-8；
3)将步骤2)得到的浆液灭菌，降温至30-40℃，接种长双歧杆菌、凝结芽孢杆菌、干酪乳杆菌，菌种比例为1:1:1，接种量为百分之五，进行通氧保温发酵，发酵期间适时补充果葡糖浆，维持可溶性固形物稳定，发酵20-60小时后以4000-8000转/分钟的转速将发酵液离心分离得清液和浓缩液，浓缩液经低温干燥制得枸杞酵素粉；枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
4)清液继续接种植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、短双歧杆菌进行密闭发酵，菌种比例为1:1:1，接种量为千分之五，当发酵液ph值达到3.0-4.0时终止发酵，得枸杞酵素原液，室温后熟0-30天后调可溶性固形物含量为60％即得枸杞酵素；枸杞酵素原液或枸杞酵素经浓缩、干燥也可制得枸杞酵素粉，枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
5)取步骤4)得到的枸杞酵素原液1-30份，取叶黄素0.1-1份、牛磺酸0.1-1份、低聚糖0.1-1份、其他辅料适量，纯净水适量，经调配、均质、脱气、杀菌、灌装而成枸杞酵素饮料。
一种功能性枸杞酵素，由固、液两部分组成，固体部分为步骤3)或步骤4)制得的枸杞酵素粉，液体部分为步骤4)得到的枸杞酵素，一个液体包装配备若干个固体小包装组成一个完整的枸杞酵素包装，食用时将一定量的液体稀释后加入一个小包装的固体混匀后饮用。
实施例2
一种功能性枸杞酵素及其制品的生产方法，其包含以下步骤：
1)枸杞清洗后加入10倍的水进行复水，打浆，然后用果胶酶和纤维素酶在45-50℃酶解2小时；
2)将步骤1)得到的枸杞汁，进行微细化处理，调整混合浆液浓度，使上述混合浆液的可溶性固形物含量达到6％，调pH值8；
3)将步骤2)得到的浆液灭菌，降温至40℃，接种两歧双歧杆菌、植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌、乳酸片球菌，菌种比例为1:1:2:1，接种量为百分之五，进行通氧保温发酵，发酵期间适时补充果葡糖浆，维持可溶性固形物稳定，发酵60小时后以8000转/分钟的转速将发酵液离心分离得清液和浓缩液，浓缩液经低温干燥制得枸杞酵素粉；枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
4)清液继续接种植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌、短双歧杆菌进行密闭发酵，菌种比例为1:1:1，接种量为千分之五，当发酵液ph值达到4.0时终止发酵，得枸杞酵素原液，室温后熟180天后调可溶性固形物含量为60％即得枸杞酵素；枸杞酵素原液或枸杞酵素经浓缩、干燥也可制得枸杞酵素粉，枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
5)取步骤4)得到的枸杞酵素原液1份，取叶黄素0.1份、牛磺酸0.1份、低聚糖0.1份、其他辅料适量，纯净水适量，经调配、均质、脱气、杀菌、灌装而成枸杞酵素饮料。
一种功能性枸杞酵素，由固、液两部分组成，固体部分为步骤3)或步骤4)制得的枸杞酵素粉，液体部分为步骤4)得到的枸杞酵素，一个液体包装配备若干个固体小包装组成一个完整的枸杞酵素包装，食用时将一定量的液体稀释后加入一个小包装的固体混匀后饮用。
实施例3
一种功能性枸杞酵素及其制品的生产方法，其包含以下步骤：
1)枸杞清洗后加入7倍的水进行复水，打浆，然后用果胶酶和纤维素酶在45-50℃酶解2小时；
2)将步骤1)得到的枸杞汁，进行微细化处理，调整混合浆液浓度，使上述混合浆液的可溶性固形物含量达到4％，调pH值7.5；
3)将步骤2)得到的浆液灭菌，降温至37℃，接种凝结芽孢杆菌，接种量为百分之五，进行通氧保温发酵，发酵期间适时补充果葡糖浆，维持可溶性固形物稳定，发酵40小时后以6000转/分钟的转速将发酵液离心分离得清液和浓缩液，浓缩液经低温干燥制得枸杞酵素粉；枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
4)清液继续接种鼠李糖乳杆菌、肠膜明串珠菌肠膜亚种、青春双歧杆菌进行密闭发酵，菌种比例为1:1:1，接种量为千分之五，当发酵液ph值达到3.5时终止发酵，得枸杞酵素原液，室温后熟90天后调可溶性固形物含量为60％即得枸杞酵素；枸杞酵素原液或枸杞酵素经浓缩、干燥也可制得枸杞酵素粉，枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
5)取步骤4)得到的枸杞酵素原液30份，取叶黄素1份、牛磺酸0.3份、低聚糖0.5份、其他辅料适量，纯净水适量，经调配、均质、脱气、杀菌、灌装而成枸杞酵素饮料。
一种功能性枸杞酵素，由固、液两部分组成，固体部分为步骤3)或步骤4)制得的枸杞酵素粉，液体部分为步骤4)得到的枸杞酵素，一个液体包装配备若干个固体小包装组成一个完整的枸杞酵素包装，食用时将一定量的液体稀释后加入一个小包装的固体混匀后饮用。
实施例4
一种功能性枸杞酵素及其制品的生产方法，其包含以下步骤：
1)枸杞清洗后加入7倍的水进行复水，打浆，然后用果胶酶和纤维素酶在45-50℃酶解2小时；
2)将步骤1)得到的枸杞汁，进行微细化处理，调整混合浆液浓度，使上述混合浆液的可溶性固形物含量达到2％，调pH值7.5；
3)将步骤2)得到的浆液灭菌，降温至37℃，接种凝结芽孢杆菌，接种量为百分之五，进行通氧保温发酵，发酵期间适时补充果葡糖浆，维持可溶性固形物稳定，发酵30小时后，以6000转/分钟的转速将发酵液离心分离得清液和浓缩液，浓缩液经低温干燥制得枸杞酵素粉；枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
4)清液继续接种蜡样芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、青春双歧杆菌进行密闭发酵，菌种比例为2:2:1，接种量为千分之五，当发酵液ph值达到3.5时终止发酵，得枸杞酵素原液，调可溶性固形物含量为60％即得枸杞酵素；枸杞酵素原液或枸杞酵素经浓缩、干燥也可制得枸杞酵素粉，枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
5)取步骤4)得到的枸杞酵素原液30份，其他辅料适量，纯净水适量，经调配、均质、脱气、杀菌、灌装而成枸杞酵素饮料。
一种功能性枸杞酵素，由固、液两部分组成，固体部分为步骤3)或步骤4)制得的枸杞酵素粉，液体部分为步骤4)得到的枸杞酵素，一个液体包装配备若干个固体小包装组成一个完整的枸杞酵素包装，食用时将一定量的液体稀释后加入一个小包装的固体混匀后饮用。
实施例5
一种功能性枸杞酵素及其制品的生产方法，其包含以下步骤：
1)枸杞清洗后加入8倍的水进行复水，打浆，然后用果胶酶和纤维素酶在45-50℃酶解2小时；
2)将步骤1)得到的枸杞汁，进行微细化处理，调整混合浆液浓度，使上述混合浆液的可溶性固形物含量达到3％，调pH值7.5；
3)将步骤2)得到的浆液灭菌，降温至38℃，接种凝结芽孢杆菌，接种量为百分之五，进行通氧保温发酵，发酵期间适时补充果葡糖浆，维持可溶性固形物稳定，发酵25小时后，以6000转/分钟的转速将发酵液离心分离得清液和浓缩液，浓缩液经低温干燥制得枸杞酵素粉；枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
4)清液无菌调整可溶性固形物含量为6％，继续接种蜡样芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌进行通氧密闭发酵，菌种比例为1:1:1，接种量为千分之五，当发酵液ph值达到3.5时终止发酵，得枸杞酵素原液，调可溶性固形物含量为62％即得枸杞酵素；枸杞酵素原液或枸杞酵素经浓缩、干燥也可制得枸杞酵素粉，枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
5)取步骤4)得到的枸杞酵素原液30份，其他辅料适量，纯净水适量，经调配、均质、脱气、杀菌、灌装而成枸杞酵素饮料。
一种功能性枸杞酵素，由固、液两部分组成，固体部分为步骤3)或步骤4)制得的枸杞酵素粉，液体部分为步骤4)得到的枸杞酵素，一个液体包装配备若干个固体小包装组成一个完整的枸杞酵素包装，食用时将一定量的液体稀释后加入一个小包装的固体混匀后饮用。
实施例6
一种功能性软儿梨酵素及其制品的生产方法，其包含以下步骤：
1)软儿梨清洗后打浆，然后用果胶酶和纤维素酶在45-50℃酶解2小时；
2)将步骤1)得到的梨汁，调整梨汁浓度，使可溶性固形物含量达到2％，调pH值7.5；
3)将步骤2)得到的浆液灭菌，降温至37℃，接种长双歧杆菌、凝结芽孢杆菌，菌种比例为1:2，接种量为百分之五，进行通氧保温发酵，发酵期间适时补充果葡糖浆，维持可溶性固形物稳定，发酵25小时后以6000转/分钟的转速将发酵液离心分离得清液和浓缩液，浓缩液经低温干燥制得软儿梨酵素粉；酵素粉可进一步加工成其它软儿梨酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
4)清液继续接种植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、短双歧杆菌进行密闭发酵，菌种比例为1:1:1，接种量为千分之五，当发酵液ph值达到3.5时终止发酵，得软儿梨酵素原液，室温后熟90天后调可溶性固形物含量为63％即得软儿梨酵素；软儿梨酵素原液或软儿梨酵素经浓缩、干燥也可制得软儿梨酵素粉，软儿梨酵素粉可进一步加工成其它酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
5)取步骤4)得到的软儿梨酵素原液30份，取牛磺酸1份、低聚木糖1份、其他辅料适量，纯净水适量，经调配、均质、脱气、杀菌、灌装而成枸杞酵素饮料。
一种功能性软儿梨酵素，由固、液两部分组成，固体部分为步骤3)或步骤4)制得的软儿梨酵素粉，液体部分为步骤4)得到的软儿梨酵素，一个液体包装配备若干个固体小包装组成一个完整的枸杞酵素包装，食用时将一定量的液体稀释后加入一个小包装的固体混匀后饮用。
实施例7
一种功能性软儿梨酵素及其制品的生产方法，其包含以下步骤：
1)软儿梨清洗后打浆，然后用果胶酶和纤维素酶在45-50℃酶解2小时；
2)将步骤1)得到的梨汁，调整梨汁浓度，使可溶性固形物含量达到5％，调pH值7.5；
3)将步骤2)得到的浆液灭菌，降温至37℃，接种凝结芽孢杆菌，接种量为百分之五，进行通氧保温发酵，发酵期间适时补充果葡糖浆，维持可溶性固形物稳定，发酵25小时后以6000转/分钟的转速将发酵液离心分离得清液和浓缩液，浓缩液经低温干燥制得软儿梨酵素粉；酵素粉可进一步加工成其它软儿梨酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
4)清液继续接种凝结芽孢杆菌进行密闭发酵，接种量为千分之五，密闭通氧，37℃保温发酵，当发酵液ph值达到3.5时终止发酵，得软儿梨酵素原液，调可溶性固形物含量为63％即得软儿梨酵素；软儿梨酵素原液或软儿梨酵素经浓缩、干燥也可制得软儿梨酵素粉，软儿梨酵素粉可进一步加工成其它酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
5)取步骤4)得到的软儿梨酵素原液30份，取牛磺酸1份、低聚木糖1份、其他辅料适量，纯净水适量，经调配、均质、脱气、杀菌、灌装而成枸杞酵素饮料。
一种功能性软儿梨酵素，由固、液两部分组成，固体部分为步骤3)或步骤4)制得的软儿梨酵素粉，液体部分为步骤4)得到的软儿梨酵素，一个液体包装配备若干个固体小包装组成一个完整的枸杞酵素包装，食用时将一定量的液体稀释后加入一个小包装的固体混匀后饮用。
实施例8
对实施例1所得的枸杞酵素进行检测，检测结果如下表所示：
指标 玉米黄质(mg/100g) 叶黄素(mg/100g) β-胡萝卜素(mg/100g)
检测结果 24.6 16.2 14.5
其他实施例检测结果与实施例1的检测结果相差不大。
1985年美国学者波恩(Bone)等人证明人体视网膜黄斑部所存在的色素为叶黄素和玉米黄素的混合物，并未检测出其它的类胡萝卜素。后来另外的科技工作者对眼球晶状体中的类胡萝卜素进行分析，证明晶状体中也只检测出玉米黄质，也未检测出其它的类胡萝卜素。
大量的研究报告了通过叶黄素和玉米黄质膳食补充剂的摄入，血液中相应成分的浓度会升高，视网膜黄斑区的叶黄素和玉米黄质浓度也会增加，即黄斑色素密度(MPOD)升高。所以，人体所需的叶黄素和玉米黄质可以通过膳食来补充。多项研究也表明，人体叶黄素和玉米黄质的营养状况与年龄相关性眼病(如AMD)风险之间存在负相关性，从而明确了叶黄素和玉米黄质起着视力保护成分的作用,进一步证实了提高叶黄素和玉米黄质的摄入量能有效降低AMD等眼病的发展风险，其中最受到广泛关注的研究是由美国国家眼科研究所(NEI)于2006起开展的为期5年的年龄相关性眼病研究2(Age-relatedeyediseasestudy2，AREDS2)。该研究是横跨全美、在80多个地点进行的一项随机试验，其受试者超过4000名，年纪介于50-85岁，且大多数受试者都患有中度AMD。AREDS2是截止到目前为止针对AMD人群测试叶黄素、玉米黄质的有效性的最大型的临床试验研究，目的在于分析补充叶黄素和玉米黄质对于进一步降低AMD和白内障风险的效果，其中叶黄素和玉米黄质的补充摄入量分别为10mg/天和2mg/天。枸杞酵素中玉米黄质和叶黄素的含量达到了18.6mg/100g和33.4mg/100g，可作为名目功能成分的有效膳食补充源。
实施例9本发明枸杞酵素粉益生性试验
将本发明实施例1制备的枸杞酵素粉，用无菌水制备成活菌数为2×1010CFU/mL的益生菌溶液，于4℃保存备用；
1、取保存好的10mL益生菌溶液注入到试管1中，采用十倍逐级稀释至10-8，取1mL稀释液在平板上，将灭菌后冷却至45℃的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌)上，迅速摇匀。再将装有10mL益生菌溶液的试管2置于70-80℃水浴锅中加热15-25min，取加热后的益生菌溶液进行十倍逐级稀释至10-8，取1mL稀释液在平板上，将灭菌后冷却至45℃的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌)上并迅速摇匀。最后将加热前和加热后的平板均在35℃条件下培养24h，计算加热前后的数量。
结果表明，活菌存活率达到了98％。
2、模拟胃液及肠液的耐受试验：取100g/L的盐酸16.4mL加蒸馏水稀释，使pH值分别为1.5、2.5和3.5，取100mL稀盐酸溶液，分别加入1g胃蛋白酶，使其充分溶解，得模拟胃液，微孔滤膜除菌(0.22μm)备用。取磷酸二氢钾6.8g，加水500mL使溶解，用0.1moL/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰蛋白酶10g，加水100mL使溶解，将两液混合后，加水稀释至1000ml，得模拟肠液，微孔滤膜除菌(0.22μm)备用。取1mL保存好的益生菌溶液加入到9mL的模拟胃液中(即十倍逐级稀释)，并迅速在振荡器上充分混匀，然后置于30-45℃静置培养2-4h。分别在1h、2h、3h、4h的时候取出培养液并立即计数残存活菌数，与原活菌数进行比较，结果表明，活菌存活率为98％。然后取在人工胃液中消化不同时间的培养液各1mL，分别接种于9mLpH值为6.8的人工肠液中，置于30-45℃静置培养2-4h，并分别在0、3、6、24h取样，测定其活菌数，与原活菌数进行比较，结果表明活菌存活率为99％。
3、模拟胆盐的耐受试验：用胰液素制成1g/L的溶液，并在溶液中加入0.8％的猪胆盐，用10％的NaOH调整pH为8.0，然后用0.45μm微滤膜过滤并除菌。将0.5mL保存好的益生菌溶液接种到4.5mL模拟胆盐中，培养24h后得到培养液，计数残存的活菌数。将培养液在灭菌生理盐水中十倍逐级稀释至10-8，并用MRS倾注，然后置于35℃静置培养24h。结果表明活菌存活率为99％。
以上试验结果表明，本发明枸杞酵素粉中的益生菌益生性(耐热性、耐pH性、耐胆盐)较强，非常适合人体胃肠环境，在模拟胃肠环境中存活率大，可有效改善胃肠功能。
需要说明的是：本发明实施例2-5制备的枸杞酵素粉、实施例6-7制备的软儿梨酵素粉及其固体同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
实施例10本发明枸杞酵素对机体免疫力的影响
1实验目的
通过运动耐力测试(小鼠游泳试验)，验证本发明枸杞酵素的提高免疫力、抗疲劳作用。
2实验材料与试剂
2.1供试样品试样：
市售酵素(G1)；市售水果酵素(G2)；本发明实施例1-5制备的枸杞酵素(G3-G7)，本发明实施例6-7制备的软儿梨酵素(G8-G9)。
2.2试剂：
肝/肌糖原测试盒，购自南京建成生物制品研究所；浓硫酸(AR)，南京化学试剂有限公司；生理盐水，山东长富洁晶药业有限公司。
3.实验动物
ICR小鼠，♂，清洁级，体重18-22g，由宁夏医科大学比较医学中心提供，实验期间小鼠自由饮食。
4.主要仪器
铝制游泳箱(50cm×50cm×40cm)，铅丝，低温高速离心机：5804R型，Eppendrof公司；水浴锅：DK-S26型，上海精宏实验设备有限公司；电子称：BS224S型，Sartorius公司；秒表，温度计
5.实验分组
5.1剂量分组及受试样品给予时间：随机将小鼠分为9组，每组10只，第1组至第9组分别给G1～G9的样品试样，第10组为空白对照组，给予等体积的双蒸水，每组每日均灌胃1次，灌胃体积为0.2ml/10g，连续给予受试样品30天。
5.2样品配制：第1组至第9组：称取2.25g样品试样样品，用蒸馏水配至150ml；空白对照组(第10组)：双蒸水150ml。
6.实验方法
6.1负重游泳实验末次给药30min后，置小鼠于游泳箱中，水深不少于30cm，水温25±1℃，鼠尾根部负荷5％体重的铅皮，记录小鼠游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。
6.2小鼠血清尿素测定末次给药30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后摘眼球采血0.5mL(不加抗凝剂),置4℃冰箱3h,血凝固后2000r/min离心15min,取血清送宁夏医科大学附属医院检验科检测。
6.3肝糖原的测定末次给药30min后，在温度为25±1℃的水中不负重游泳90min，颈椎脱臼处死小鼠，用生理盐水洗净，并用滤纸吸干水分后，准确称取肝脏100mg，肝糖原检测试剂盒检测小鼠肝糖原含量。
6.4血乳酸的测定末次给药30min后采血，然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止。乳酸仪测定方法：分别在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20μL加入40μL破膜液中，立即充分振荡破碎细胞用乳酸仪测定。(血乳酸曲线下面积＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min的血乳酸值+2×游泳后20min的血乳酸值)
7.观察指标负重游泳时间，血乳酸、尿素、肝糖原值
8.统计方法实验数据用表示，采用t检验进行组间比较
9.实验结果
9.1本发明枸杞酵素对小鼠负重游泳时间的影响
经口给予小鼠G1～G9样品试样后，G1～G2样品试样与空白对照组比较，可以明显延长小鼠负重游泳时间，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明枸杞酵素G3～G7样品试样、本发明枸杞酵素G8～G9样品试样与空白对照组比较，可以显著延长小鼠负重游泳时间，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2样品试样。结果详见表2。
表2酵素对小鼠负重游泳时间的影响
“*”p<0.05vs空白对照；
“**”p<0.01vs空白对照；
9.2本发明枸杞酵素对小鼠运动前后血乳酸的影响
经口给予小鼠本发明的枸杞酵素后，本发明枸杞酵素G3～G7样品试样对小鼠运动后血乳酸曲线下面积与对照组比较有统计学差异(P＜0.05)，G1～G2样品试样组小鼠血乳酸曲线下面积与对照组比较虽有所降低，但并无统计学差异(P＞0.05)。结果见表3。
表3本发明枸杞酵素对小鼠运动前后血乳酸水平的影响
“*”p<0.05vs空白对照；
9.3本发明枸杞酵素对小鼠肝糖原的影响
经口给予小鼠G1～G7样品试样后，G1～G2样品试样与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明枸杞酵素G3～G7样品试样与与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2样品试样。结果详见表4。
表4本发明枸杞酵素对小鼠肝糖原含量的影响
“*”p<0.05vs空白对照；
“**”p<0.01vs空白对照；
9.4本发明枸杞酵素对小鼠血清尿素的影响
经口给予小鼠G1～G12样品试样后，G1～G2样品试样组与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明枸杞酵素G3～G7样品试样与与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2样品试样。结果详见表5。
表5本发明枸杞酵素对小鼠血清尿素含量的影响
“*”p<0.05vs空白对照；
“**”p<0.01vs空白对照；
10.实验结论
本实验主要通过小鼠负重游泳实验，同时检测小鼠肝糖原的储备来观察本发明枸杞酵素提高免疫力、抗疲劳的效果。初步研究结果显示如下：
1、本发明G3～G7枸杞酵素均能延长小鼠负重游泳时间(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的枸杞酵素。
2、生化检测方面显示，本发明G3～G7枸杞酵素各剂量组均能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)，而其它G1～G2的酵素虽然也能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，但与对照组比较，无统计学差异(P＞0.05)；
3、本发明G3～G7枸杞酵素各剂量组均能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的枸杞酵素；
4、高尿酸模型发现，本发明G3～G7枸杞酵素能显著降低小鼠游泳后血清中尿素的含量(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2市售酵素；
11.结论
上述实验证明本发明枸杞酵素能显著提高机体免疫力，提高小鼠的体力和耐力，降低小鼠运动后血清中尿素及乳酸的含量，且能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备，有助于缓解运动负荷引起的疲劳；能延长小鼠负重游泳至力竭的时间。
实施例11本发明枸杞酵素小鼠肠道性能试验
用本发明实施例2制备的枸杞酵素进行试验，实验前对样品进行稀释5倍。
选取普通昆明小白鼠60只，雌雄各半，18-20g，常规词养。从中随机挑选40只，每天早晨9:00灌胃盐酸林可霉素0.2mL(20mg)/只，其它作为对照组，每天同一时间灌胃等量灭菌生理盐水，连续一周，制备肠道菌群失调的小鼠模型。模型组小鼠饮食下降，未出现死亡和明显的腹泻现象，排软粪，外形正常含水分较多，垫料潮湿。将40只肠道菌群失调小鼠，随机分为2组，一组20只作为治疗组，每天灌胃保存好的益生菌溶液0.5ml(2×1010cfu/ml)/只，另20只作为自然恢复组，每天同一时间灌胃等量灭菌生理盐水，连续两周。整个试验期21天，每天观察小白鼠的生长和排便情况，于第8、21天对枸杞酵素治疗组和自然恢复组的小鼠进行称重，计算各组体重平均增长率，结果如表2；每5天测各组小鼠粪便大肠杆菌数量，计算平均数，结果如表3。取小鼠粪便约0.1g，于无菌操作台内加入3粒玻璃珠(以0.1g粪样加0.5mL稀释液)，稀释并接种麦康凯琼脂培养基，计算每克湿便中的大肠杆菌数。
表2小鼠增重情况
分组 平均始重(g/只) 平均末重(g/只) 平均增长率(％)
自然恢复组 18.98±1.62 25.47±1.57 34.19a
治疗组 18.84±1.58 33.96±1.64 80.25b
表3小鼠粪便中大肠杆菌数的情况
枸杞酵素治疗组小鼠体重平均增长率50.25％，显著高于自然恢复组(34.19％)；饲喂溶液后肠道大肠杆菌数量显著下降，降低81.02％，显著高于自然恢复组(24.89％)，表明本发明枸杞酵素中的益生菌在小白鼠肠道内迅速定植，形成优势菌群，并有效抑制大肠杆菌等病原菌的生长繁殖，并且定植时间长，持续、有效改善了肠道性能。
需要说明的是：本发明实施例1-5制备的枸杞酵素、酵素饮料、酵素粉及其其他酵素制品，实施例6-7制备的软儿梨酵素及其酵素制品同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

Claims (4)

1.一种功能性枸杞酵素及其制品的生产方法，其包含以下步骤：
1)枸杞清洗后加入5-10倍的水进行复水，打浆，然后用果胶酶和纤维素酶在45-50℃酶解2小时；
2)将步骤1)得到的枸杞汁，进行微细化处理，调整混合浆液浓度，使上述混合浆液的可溶性固形物含量达到2-6％，调pH值7-8；
3)将步骤2)得到的浆液灭菌，降温至30-40℃，接种益生菌进行通氧保温发酵，发酵期间适时补充果葡糖浆，维持可溶性固形物稳定，发酵20-60小时后离心分离得清液和浓缩液，浓缩液经低温干燥制得枸杞酵素粉；
4)清液继续接种益生菌进行密闭发酵，当发酵液ph值达到3.0-4.0时终止发酵，得枸杞酵素原液，室温后熟0-180天后经调配即得枸杞酵素；枸杞酵素原液或枸杞酵素经浓缩、干燥也可制得枸杞酵素粉；
5)取步骤4)得到的枸杞酵素原液1-30份，取叶黄素0.1-1份、牛磺酸0.1-1份、低聚糖0.1-1份、其他辅料适量，纯净水适量，经调配、均质、脱气、杀菌、灌装而成枸杞酵素饮料；
6)取步骤3)或步骤4)得到的枸杞酵素粉可进一步加工成其它枸杞酵素制品，包括泡腾片、咀嚼片、含片、颗粒冲剂、胶囊等。
2.根据权利要求1所述的功能性枸杞酵素及其制品的生产方法，其特征在于所述的枸杞可以是软儿梨等其他单一或复合原料。
3.根据权利要求1所述的功能性枸杞酵素及其制品的生产方法，其特征在于所述的益生菌为青春双歧杆菌、动物双歧杆菌(乳双歧杆菌)、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、凝结芽孢杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种(保加利亚乳杆菌)、蜡样芽孢杆菌、德氏乳杆菌乳亚种、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、约氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、枯草芽孢杆菌、唾液乳杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌、副干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、肠膜明串珠菌肠膜亚种、马克斯克鲁维酵母、乳酸片球菌、戊糖片球菌中的一种或几种。
4.一种功能性枸杞酵素，其特征在于由固、液两部分组成，固体部分为权利要求1的步骤3)或步骤4)制得的枸杞酵素粉，液体部分为权利要求1的步骤4)得到的枸杞酵素，一个液体包装配备若干个固体小包装组成一个完整的枸杞酵素包装，食用时将一定量的液体稀释后加入一个小包装的固体混匀后饮用。
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