CN105028646A

CN105028646A - 一种冻干片及其制备方法

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Publication number: CN105028646A
Application number: CN201510449240.4A
Authority: CN
Inventors: 邵素英
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2015-07-28
Filing date: 2015-07-28
Publication date: 2015-11-11

Abstract

本发明公开了一种冻干片及其制备方法，在酸奶发酵过程添加功能性发酵剂和发芽糙米、具有抗冷热应激性的中草药提取物、可有效增强稳定性的稳定剂；变温酸奶发酵工艺可使乳酸菌增殖达到最大化、提高乳酸菌的抗冷热应激能力；采用非热加工技术对酸奶和果浆进行预处理，以防止过程杂菌感染、提高果汁出汁率和增加果浆的可溶性纤维素的含量，防止果浆褐变；并且在果浆与酸奶混合时添加了科学复配的抗冷冻效果较好的冷冻保护剂。最终制得一种口感细腻、质地均一、状态稳定、活菌数量高、功能性强、保质期长的冻干片，其活菌含量为1.55×10¹¹-2.52×10¹¹CFU/g，常温下，保质期30-36个月。

Description

一种冻干片及其制备方法

技术领域

本发明涉及酸奶食品，具体涉及一种冻干片及其制备方法。

背景技术

酸奶是以新鲜的牛奶为原料，经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌发酵，再经冷却灌装的一种牛奶制品。酸奶不但保留了牛奶的丰富营养等优点，而且经过加工还能扬长避短，成为更加适合于人需要的营养保健品。酸奶除了营养丰富外，还含有乳酸菌，所以具有良好的保健作用。乳酸菌维护肠道菌群生态平衡，形成生物屏障，抑制有害菌对肠道的入侵。乳酸菌通过产生大量短链脂肪酸促进肠道蠕动及菌体的大量生长，改变渗透压预防便秘。酸奶含有多种酶，能够促进肠道消化吸收。乳酸菌通过抑制腐生菌在肠道的生长，抑制腐败所产生的毒素，使肝脏和大脑免受危害。乳酸菌通过抑制腐生菌和某些菌在肠道的生长。也抑制了这些菌产生的致癌因子，达到防癌的目的。乳酸菌还能产生一些增强免疫功能的物质，提高人体免疫功能。美国农业部人类营养学研究中心研究员吉恩迈尔表示，酸奶不仅可以改善肠道环境，还能够提高机体免疫力。台湾的一项研究也发现，酸奶提高了某些消炎药的治疗效果。美国哈佛大学公共卫生学院流行病学研究员艾尔瓦罗·阿良索博士研究发现，每天饮2-3份或更多酸奶的人群中高血压的发病危险比那些不喝的人降低50％。

搅拌型果蔬酸奶是以乳与乳制品为原料，添加稳定剂，添加乳酸菌发酵剂形成凝乳，通过搅拌，添加果蔬汁等原料而制成的发酵乳制品。果蔬汁含有丰富的营养，能有效为人体补充维生素，与酸奶配合，不仅可使酸奶具有果蔬汁特有的风味，而且果蔬汁与酸奶营养成分相互补充，使酸奶营养保健作用大大提高。

但是传统的酸奶保质期短，存储不方便，不便于长途运输；另外，随着人们生活水平的提高和保健意识的增强，进一步开发保健品成为食品企业一大课题。冻干片(freeze-driedtablets)是指将主料和辅料混合，定量分装在一定模具中，冻干去水，制得的高孔隙率固体制剂。目前，已有的口崩片技术有冻干法、压膜法、直接压片法、湿法压片法和湿法制粒压片法等，在欧美上市的口腔崩解片主要采用冻干法和直接压片法。冻干片有崩解速度快、口感好、可通过粘膜转运实现胃前吸收、稳定性好、利于热敏性物料加工等优势。

目前，国内在各种类型的酸奶片中，采用冻干法制片的极少，包括医药技术领域的中、西药片剂，大多采用的都是冻干法以外的其它制片方法，而对于对活菌数量有极高要求的乳酸菌片剂或益生菌片剂来说，冻干法无疑是一种提高活菌数量的有效方法，同时，还可最大限度地保留原料天然的色泽、风味、口感和营养物质含量，对于果蔬酸奶尤为重要。中国专利CN102450322A公开了一种冻干水果酸奶，由冻干水果和酸奶基料组成，冻干水果与酸奶基料分别盛装，食用前混合冻干水果与酸奶基料得到冻干水果酸奶。中国专利CN103099140B公开了一种桑椹果浆冻干片及工艺，采用桑椹鲜果等原料，经洗果、打浆、调配、均质、灌装、冻结、冻干、充氮密封等制得桑椹果浆冻干片，以二级高压均质细化均一桑椹果浆组分，采用冻干技术保留除水外的几乎全部桑椹源花青素、氨基酸、矿物质、维生素等营养物质，添加低热代糖营养性甜味剂等，制备的桑椹泡腾片具低糖、低热、酸甜适口、果香浓郁、保存与便携性好等特点，可直接食用或以水冲调饮用。中国专利CN103109930B一种添加丝胶抗冻肽的果味益生菌酸奶片，其原料由以下按重量份数的组分组成：脱脂奶粉10～14份、蔗糖2～5份、丝胶肽1～3份、果料1～4份、冻干的活性益生菌0.1～0.6份和硬脂酸镁0.1～0.4份，该发明还提供了产品的制备方法，主要工艺流程包括：脱脂乳食品级培养基的制备、益生菌的发酵、丝胶抗冻肽的添加、发酵乳的真空冷冻干燥、粉末压片等工艺，益生菌酸奶片中添加了丝胶抗冻肽和富含B族维生素的水果冻干粉，不仅使酸奶片中益生菌活菌数高，菌活性保存时间较长，而且提高了其口感风味。戚永明对近年来冻干片技术发展和临床优势进行简要总结，并对Zydis技术存在的问题进行分析，同时对冻干片最新研究进展进行介绍，主要论述了冻干技术在国际及国内医药领域的历史、现状和发展趋势，冻干技术存在的缺陷和需要解决的技术问题(戚永明.冻干片制剂研究新进展.JournalofChinaPrescriptionDrug2012.10(4).57-59)。

上述已经公开的专利及技术文献乳酸菌或益生菌活菌含量仍然较低、发酵菌种过于传统功能性较差、单独冻干果蔬和酸奶耗时能源消耗大、果蔬和酸奶预处理过程热力和剪切力致使营养物质损失大、果浆的传统加工使得可溶性纤维素含量较低、稳定性差保质期短。

因此，制备一种活菌数量高、营养丰富、品质天然、保质期长的冻干片对本领域技术人员是一种新的挑战。

发明内容

本发明所解决的技术问题是克服现有果浆酸奶及其制备方法的缺陷，在酸奶发酵过程添加了含有功能性植物乳杆菌的发酵剂、具有抗冷热应激性的中草药提取物、可有效防止酸奶与果浆混合后出现质地稀薄、分层及乳清析出的稳定剂和含有多种酶系和功能性、生物活性物质的发芽糙米，改进酸奶发酵工艺以使乳酸菌增殖达到最大化、提高乳酸菌的抗冷热应激能力，以获得高质量、高活菌含量的多功能酸奶；并采用非热加工技术对原料奶和果汁进行预处理，以防止过程杂菌感染、提高果汁出汁率和增加果浆的可溶性纤维素的含量，防止果浆褐变；并且在果浆与酸奶混合时添加了科学复配的抗冷冻效果较好的冷冻保护剂，以降低冷冻干燥过程造成的乳酸菌活菌含量的损失，提高成品活菌含量。最终制得一种活菌数量高、营养丰富、品质天然、功能性强、保质期长的冻干片。

本发明首要目的是提供一种口感细腻、质地均一、状态稳定、活菌数量高、营养丰富、品质天然、功能性强、保质期长的冻干片。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种冻干片，主要由以下重量份数的原料制得：

牛乳80-100份，水果30-50份，蔗糖10-15份，发芽糙米10-15份，中草药提取液5-7份，发酵剂7-9份，益生因子4-6份，保护剂3-5份，稳定剂0.1-0.3份；

所述牛乳为鲜牛乳，酸度不大于18°T，干物质含量不低于11.6％。

进一步地，所述水果由一种或几种新鲜水果单独或者组合而成；

优选地，所述水果为下列一种或几种水果单独或组合而成：草莓、红莓、蓝莓、树莓、黄桃、樱桃、猕猴桃、桃、苹果、梨、菠萝、香蕉、荔枝、芒果、葡萄、海棠、沙果、西瓜、哈密瓜、香瓜、椰果、橙、桑葚。

进一步地，所述发芽糙米是以糙米为原料，经浸泡、发芽、干燥而制备的一种功能性较强的食品原料，含有多种酶系和功能性、生物活性物质；

优选地，所述发芽糙米的制备方法，包括如下步骤：将糙米放在装有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中室温、功率200-400W、频率20-30KHz超声清洗5-10min，漂洗、沥干，置12-15℃水中浸泡6-8h，每隔10-20min通风一次，通风压力0.10-0.13MPa，同时于电场强度20-40kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率100-300Hz进行高压脉冲电场处理，直至糙米水分含量为35-38％；浸泡后的糙米沥干，在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持20-24℃，暗发芽时间为12-14h，期间喷洒水至糙米水分含量为42-44％；然后置温度为35-45℃的水中浸泡10-15min进行杀胚，直至糙米水分含量至43-45％；再浸泡后的糙米在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持23-25℃，暗发芽时间为18-22h；经再发芽后的糙米于频率2450MHz、功率3000W、温度50-60℃、料层厚度2-4cm条件微波辐照干燥，其中微波辐照10s，间隔10s，干燥至水分含量为12-14％，密封包装即得发芽糙米；

进一步地，所述中草药提取液是以显著提高乳酸菌抗冷、热应激性、抗病性和免疫力的中草药为原料而制备；

优选地，所述中草药提取液的制备方法，包括如下步骤：按重量份数计，称取黄芪15-17份，鱼腥草15-17份，淫羊藿13-16份，山楂12-15份，金银花12-15份，川芎8-12份，葛根6-10份，当归6-10份，党参6-10份，胖大海5-8份，女贞子3-7份；置盛有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗10-15min，沥干，将上述中草药粉碎至粒径为2mm以下，置容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水，得混合物料，控制温度70℃-90℃保持2-4h，接着降温至40-50℃，用乳酸调节pH值为3.5-4.5，在功率150-300W条件下进行微波提取10-15min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；然后加入混合物料总重量0.5-1.5％的复合酶进行酶解，用乳酸调节pH值为5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的质量比为1:1-3，控制温度至60℃-78℃保持3-4h，过滤，得第一滤液；添加滤渣1-3倍重量的水，控制温度85℃-95℃保持1-3h，然后降温至25-35℃，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤液按照质量比2-4:1-3合并,均匀混合即得中草药提取液；

所述复合酶为葡聚糖酶、木聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比3-5:2-4:1-3:1-3均匀混合。

进一步地，所述发酵剂包括以下益生菌粉剂中的任意一种或多种：例如：植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、两歧双歧杆菌(Bifidobacteriumbifidum)、婴儿双歧杆菌(B.infantis)、长双歧杆菌(B.longum)、短双歧杆菌(B.breve)、青春双歧杆菌(B.adolescentis)、乳双歧杆菌(Bifidobacteriumlactis)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus.Bulgaricus)、嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)；

优选地，所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成：植物乳杆菌30-40份，两歧双歧杆菌25-35份，乳双歧杆菌15-25份，嗜热链球菌15-25份，长双歧杆菌15-20份，婴儿双歧杆菌15-20份，青春双歧杆菌13-18份，保加利亚乳杆菌12-15份，嗜酸乳杆菌10-15份，干酪乳杆菌8-10份，鼠李糖乳杆菌5-8份；

优选地，所述植物乳杆菌粉剂是以中国专利CN101974467A中所公开的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)QZ-5为出发菌按常规方法制备的，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.4200。该菌种可以产生对多种病原菌和腐败菌具有抑制作用的细菌素，并且该细菌素具有很好的热稳定性和酸稳定性，并且对蛋白酶敏感，抑菌谱广；

优选地，所述植物乳杆菌粉剂是以中国专利CN104531578A中所公开的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)FM-LP1-1为出发菌按常规方法制备的，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNO.9488。该菌株不仅具有高效降解亚硝酸盐能力、强产酸能力、较高的耐胆盐能力，并且该菌具有优良的发酵性能和耐渗透压性能，在含有200mg/LNaN0₂的MRS培养液中，接种该菌的菌体密度为1.01×10⁷-1.54×10⁷cfu/ml，25℃条件下培养24h，NaN0₂的降解率达到97.5％以上，培养48h，NaN0₂的降解率达到99.1％以上；在MRS培养液中培养24h，培养液的pH值达到3.51；

更优选地，所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂以任意比例混合；

更优选地，所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂按质量比1-3:4-6均匀混合。

进一步地，所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖20-30份，低聚半乳糖20-30份，低聚果糖15-25份，低聚木糖15-25份，水苏糖10-15份，大豆低聚糖10-15份，棉子糖10-15份，低聚麦芽糖8-12份；

进一步地，所述稳定剂为改性膳食纤维、银耳多糖、明胶、果胶中的任意一种或几种以任意比例混合，可有效防止酸奶与果浆混合后出现质地稀薄、分层及乳清析出现象，最终可使冻干片质地、状态与口感均一、稳定、细腻；

优选地，所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成：改性膳食纤维10-15份，银耳多糖6-10份，明胶3-5份，果胶3-5份；

所述改性膳食纤维是将膳食纤维经物理、化学或生物的方法处理而得到的可溶性纤维素含量高、生物活性强、对人体益生菌群有重要的、积极作用的纤维素，与普通膳食纤维相比，其生物活性作用更强大；

优选地，所述改性纤维是由菊粉、苹果纤维、小麦纤维、燕麦纤维中的一种或多种经生物酶酶解而得到的；

更优选地，所述改性膳食纤维的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、小麦纤维、燕麦纤维按质量比4-6:4-6:3-5:2-4均匀混合，加入其质量3-7倍的水，室温200-300W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm，脉冲时间400-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min；用乳酸调节pH值为4.5-6.5，加入混合物质量0.1-0.3％的生物酶，于45-55℃酶解20-48min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得改性膳食纤维；

所述生物酶为纤维素酶、木聚糖酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比2-4:2-4:1-3:1-3:1-2均匀混合。

进一步地，所述保护剂为以含有抗冻蛋白的动物或植物为原料，经高压脉冲电场提取、超声波辅助微波提取和生物酶解而制得的，可有效提高果浆酸奶中的乳酸菌在冷冻干燥过程乳酸菌存活率，显著提高冻干片的活菌含量；

优选地，所述保护剂的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙冬青、唐古特红景天叶、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干，按质量比7-9:6-8:2-4:1-3均匀混合，加入混合物料质量0.1-1倍的pH值为3.8-4.5的乳酸润湿3-8h,于-18--22℃冷冻1-2h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3-5cm，粉碎物粒径0.5-3mm,接着加入粉碎物质量10-20倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5，于室温下在电场强度25-35kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理20-30min；然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提取15-20min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量3-5％的混合酶，于45-55℃酶解30-50min；酶解液过滤、滤液浓缩、干燥、粉碎即得保护剂；

所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比5-7:3-5:2-4:1-3:1-2均匀混合；

更优选地，所述微波辐照提取为间歇式提取，即微波辐照10s，间隔20s。

本发明另一目的是提供所述冻干片的制备方法，包括如下步骤：

1)酸奶制备：牛乳经净乳后室温下于电场强度30-40kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率300-500Hz进行高压脉冲电场杀菌10-20min，发芽糙米粉碎至粒径0.1-0.3mm与蔗糖、稳定剂和中草药提取液依次加入杀菌牛乳中，充分搅拌溶解后在60-70℃、18-22MPa下均质，然后降温至32-35℃于电场强度20-30kV/cm，脉冲时间200-400μs,脉冲频率200-400Hz进行高压脉冲电场杀菌5-10min，调整pH值为6.0-7.0，加入发酵剂质量的20-30％恒温发酵0.5-1h，接着以0.8-1.0℃/min的速率升温至40-45℃,加入发酵剂质量的70-80％恒温发酵2-4h，最后以0.6-0.8℃/min的速率升温至50-55℃,继续发酵至酸奶pH值为3.5-4.5终止发酵即得成品酸奶；

2)果浆制备：将水果放入盛有0.3-0.5％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中，于室温下200-400W、35-45KHz清洗5-10min，沥干，预处理、破碎，室温下于电场强度35-45kV/cm、脉冲时间800-1000μs、脉冲频率200-300Hz高压脉冲电场处理5-10min，胶磨，使出口果浆粒径达到100-200μm，然后室温下于电场强度20-30kV/cm、脉冲时间400-600μs、脉冲频率200-400Hz高压脉冲电场处理3-5min，真空脱气得原果浆；向其中加入纤维素酶、果胶酶、单宁酶和蛋白酶，使其含量分别为100-120ppm、70-90ppm、60-80ppm和30-50ppm，于45-55℃酶解1-3h，升温至90-100℃保温3-5min,立即降温至70-80℃，边搅拌边加入益生因子，充分溶解后，立即降温至室温，80-100目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至30％以上即得果浆；

3)混合、灌装：将步骤1)得到的酸奶、步骤2)得到的果浆和保护剂均匀混合，定量灌装入模具容器中；

4)冻结：将已灌装果浆酸奶的模具于-30℃至-50℃的低温下完全冻结并于-30℃保存6-18h；

5)冻干：以冻结存放规定时间的果浆酸奶在冻干设备中按-25℃/4-8h、-15℃/4-6h、-5℃/2-4h、5℃/2-6h和20℃/4-8h的工艺进行冻干处理，经16-32h结束；

6)出模、分装：以洁净、无菌、干燥的氮气破坏真空并在洁净卫生的操作间取出干燥冻干片，在无菌条件下，采用充氮及铝塑复合膜对冻干片单独包装密封即得成品冻干片。

上述方法制备的酸奶乳酸菌活菌含量为7×10¹¹-9×10¹¹CFU/ml，冻干片的乳酸菌活菌含量为1.55×10¹¹-2.52×10¹¹CFU/g，常温下，保质期30-36个月。

有益效果：

本发明冻干片在酸奶发酵过程科学复配的发酵剂含有可以产生对多种病原菌和腐败菌具有抑制作用的细菌素的植物乳杆菌CGMCCNo.4200和具有高效降解亚硝酸盐能力、强产酸能力、较高的耐胆盐能力的植物乳杆菌CGMCCNO.9488，可显著提高乳酸菌在肠道内的增殖、定植和解毒排毒能力，有效提高了人体免疫力和胃肠功能，相对于现有的发酵剂益生性、功能性更强；本发明在酸奶制备过程采用高压脉冲电场非热杀菌技术代替了传统的巴氏杀菌，最大限度地保留了新鲜牛乳中的热敏性营养物质，有效防止了加工过程的杂菌污染，稳定和提高了酸奶的风味和口感，节省了能源；具有抗冷热应激性的中草药提取物、可有效防止酸奶与果浆混合后出现质地稀薄、分层及乳清析出的稳定剂和含有多种酶系和功能性、生物活性物质的发芽糙米，变温酸奶发酵工艺可使乳酸菌增殖达到最大化、提高乳酸菌的抗冷热应激能力，可获得口感细腻、质地均一、状态稳定、活菌含量高的多功能酸奶；并采用非热加工技术对果汁进行预处理，以防止过程杂菌感染、提高果汁出汁率和增加果浆的可溶性纤维素的含量，防止果浆褐变；并且在果浆与酸奶混合时添加了科学复配的抗冷冻效果较好的冷冻保护剂，以降低冷冻干燥过程造成的乳酸菌活菌含量的损失，提高成品活菌含量。最终制得一种口感细腻、质地均一、状态稳定、活菌数量高、营养丰富、品质天然、功能性强、保质期长的冻干片。冻干片的乳酸菌活菌含量为1.55×10¹¹-2.52×10¹¹CFU/g，常温下，保质期30-36个月。具体试验效果见实施例7-12；

具体技术原理如下：

1.本发明的发酵剂科学复配多种乳酸菌剂，种类多，功能全，益生性强，特别是植物乳杆菌CGMCCNo.4200可以产生对多种病原菌和腐败菌具有抑制作用的细菌素，并且该细菌素具有很好的热稳定性和酸稳定性，并且对蛋白酶敏感，抑菌谱广；植物乳杆菌CGMCCNO.9488不仅具有高效降解亚硝酸盐能力、强产酸能力、较高的耐胆盐能力，并且该菌具有优良的发酵性能和耐渗透压性能；相对于现有的酸奶发酵剂发酵力、益生性、功能性更强。

2.本发明的稳定剂是经多年潜心研究，通过大量的科学实验复配而成，不含具有任何毒副作用的化学添加剂，不会对人体产生任何潜在的危害，无添加量限制，主要为天然植物原料，食品安全性强，效果好，可有效防止酸奶与果浆混合后出现质地稀薄、分层及乳清析出现象，最终可使冻干片质地、状态与口感均一、稳定、细腻。其中的改性膳食纤维将超声提取、高压脉冲电场提取和生物酶解科学结合，所得改性膳食纤维可溶性纤维素含量高，更容易被益生菌利用，提高益生菌在人体肠道的生长及繁殖能力，增加益生菌菌群的种类和数量，降低人体肠道pH值，改善人体肠道微生态环境；吸附能力强，经改性后，纤维素的比表面积增大，网格结构丰富，吸附力增强，螯合、吸附胆固醇和胆汁酸类的有机分子能力更强、抑制人体对他们的吸收；离子交换能力增强，对金属元素，特别是重金属元素吸附效果更强，有效防止了人体重金属中毒；持水性、膨胀性、增稠性更强且不受酸、碱、盐的影响。调节和维持肠道菌群的定植时间，增强肠道的消化和吸收能力，提高机体免疫力；有效促进胃肠蠕动，减缓并消除胃胀、腹胀等不良反应；强大的包埋作用可防止环境(氧气、温度、光照、水分活度等)因素对产品品质的影响，稳定了冻干片的生物活性，延长了冻干片的保质期。

3.本发明的保护剂以含有抗冻蛋白的动物或植物为原料，经高压脉冲电场提取、超声波辅助微波提取和生物酶解而制得的，有效成分损失少、提取率高、效果明显，可有效提高果浆酸奶中的乳酸菌在冷冻干燥过程乳酸菌存活率，显著提高冻干片的活菌含量；且原料单一、成分简单，最主要的是不含化学物质，食品安全性强。

4.本发明的发芽糙米含有丰富的生物活性物质和功能性物质，可为乳酸菌提供丰富的营养物质，其中含有的多种酶系(蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、磷酸酯酶等)一方面可以将自身的大分子物质：淀粉、蛋白质、脂肪、纤维素转变为小分子物质，更为重要的是可将酸奶中的蛋白质部分适度降解，提高酸奶稳定性，有效防止乳酸菌在发酵后期产酸过度，影响酸奶风味和口感；发芽糙米发芽率达97％以上，芽长0.4-0.6mm,长度均一，发芽损失仅为1-2％，比现有发芽工艺损失降低5-7％，功能性物质含量高，其中γ-氨基丁酸含量为303.8-315.8mg/100g，谷胱甘肽17.2-18.6mg/100g，六磷酸肌醇(IP₆)460.8-484.4mg/100g，膳食纤维3.4-3.7mg/100g，增加了酸奶的功能性、稳定性和适口性。

5.本发明制备的中草药提取液科学复配显著提高乳酸菌抗冷、热应激性、抗病性和免疫力的中草药为原料，经超声清洗、低温酶解、水提醇提和超声波辅助微波提取而制备的，提取液有效成分含量高，成本低，可有效增强乳酸菌抗低温和高温的能力，适应温度变化环境，为适应变温发酵及冷冻干燥环境奠定了坚实的基础，有效提高冻干片活菌含量，同时可抑制乳酸菌后发酵，防止酸奶过酸以保持酸奶风味及口感协调，还可防止冻干片杂菌侵害，延长产品的保质期。

6.本发明果浆制备过程采用超声清洗，可有效降低加工过程农药残留及重金属离子的引入，提高果汁的食品安全性；经破碎和胶磨后的室温下经高压脉冲电场处理后其品质更加天然，榨汁率高、钝酶效果好、杂菌含量极低，显著优于商品果汁的质量指标；采用脱气工艺，有效降低了果汁生产过程中的溶解氧含量，有效提高了果汁的液相稳定性；将胶磨和生物酶解有机结合，在一定粒度范围内的果汁经科学复配后的复合酶酶解，果汁色素附着性更强、溶出量更大、分散力更强、色素的液相更加稳定；将多种非热加工技术结合处理果汁，有效防止过程杂菌感染、提高果汁出汁率和增加果浆的可溶性纤维素的含量，防止果浆褐变，保持果汁天然品质。

7.本发明的益生因子不仅为乳酸菌提供了丰富的营养物质，而且将其科学复配于果浆，与保护剂协同起到抗冷冻的作用。

8.本发明冻干片的制备方法采用非热加工技术，工作效率高，能源消耗少，对环境友好，无污染，减少了食品添加剂和化学助剂的引入，有效提高了食品安全性，提高了产品质量和降低了生产成本，实现了低碳生产目标，可规模化、产业化发展。全程采用低温加工技术，优化了发酵菌种和工艺、添加了功能性原料，制备的冻干片口感细腻、质地均一、状态稳定、活菌数量高、营养丰富、品质天然、功能性强、保质期长、生物活性高、口感和风味及食欲性强、食品安全性高，可提高人体免疫力、抗病能力、耐力和抗疲劳能力、改善肠胃功能，需要说明的是该冻干片的食用效果是各组分相互协同、相互作用的结果，并非简单的原料功能的叠加，各原料组分的科学复配和提取，产生的效果远远超过各单一组份功能和效果的叠加，具有较好的先进性和实用性。

具体实施方式

下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。

实施例1原料制备

1.发芽糙米的制备：

所述发芽糙米的制备方法，包括如下步骤：将糙米放在装有0.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中室温、功率300W、频率25KHz超声清洗8min，漂洗、沥干，置13℃水中浸泡7h，每隔15min通风一次，通风压力0.12MPa，同时于电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率200Hz进行高压脉冲电场处理，直至糙米水分含量为36％；浸泡后的糙米沥干，在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持22℃，暗发芽时间为13h，期间喷洒水至糙米水分含量为43％；然后置温度为40℃的水中浸泡12min进行杀胚，直至糙米水分含量至44％；再浸泡后的糙米在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持24℃，暗发芽时间为20h；经再发芽后的糙米于频率2450MHz、功率3000W、温度55℃、料层厚度3cm条件微波辐照干燥，其中微波辐照10s，间隔10s，干燥至水分含量为13％，密封包装即得发芽糙米；

经上述方法制备的发芽糙米发芽率达99％以上，芽长0.5mm,长度均一，发芽损失仅为1％，比现有发芽工艺损失降低7％，功能性物质含量高，其中γ-氨基丁酸含量为315.8mg/100g，谷胱甘肽18.6mg/100g，六磷酸肌醇(IP₆)484.4mg/100g，膳食纤维3.7mg/100g。

2.中草药提取液的制备：

所述中草药提取液的制备方法，包括如下步骤：按重量份数计，称取黄芪16份，鱼腥草16份，淫羊藿15份，山楂14份，金银花13份，川芎10份，葛根8份，当归8份，党参8份，胖大海6份，女贞子5份；置盛有0.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗12min，沥干，将上述中草药粉碎至粒径为2mm以下，置容器中均匀混合并添加5倍重量的水，得混合物料，控制温度80℃保持3h，接着降温至45℃，用乳酸调节pH值为4.0，在功率200W条件下进行微波提取15min，同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；然后加入混合物料总重量1.0％的复合酶进行酶解，用乳酸调节pH值为6.2，酶解3h，最后添加混合物料1.7倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的质量比为1:2，控制温度至70℃保持3.5h，过滤，得第一滤液；添加滤渣2倍重量的水，控制温度90℃保持2h，然后降温至30℃，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤液按照质量比3:2合并,均匀混合即得中草药提取液；

所述复合酶为葡聚糖酶、木聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比4:3:2:2均匀混合。

3.改性膳食纤维的制备：

所述改性膳食纤维的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、小麦纤维、燕麦纤维按质量比5:5:5:3均匀混合，加入其质量5倍的水，室温300W、40KHz条件超声提取12min,然后在电场强度30kV/cm，脉冲时间450μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理12min；用乳酸调节pH值为5.5，加入混合物质量0.2％的生物酶，于50℃酶解35min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.2mm即得改性膳食纤维；

所述生物酶为纤维素酶、木聚糖酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比3:3:2:2:1.5均匀混合。

以下实施例2-6中所使用的发芽糙米、中草药提取液和改性膳食纤维均为实施例1制备，其它为市购商品。

实施例2

一种蓝莓酸奶冻干片，主要由以下重量份数的原料制得：

牛乳90份，蓝莓40份，蔗糖12份，发芽糙米12份，中草药提取液6份，发酵剂8份，益生因子5份，保护剂4份，稳定剂0.2份；

所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成：植物乳杆菌35份，两歧双歧杆菌30份，乳双歧杆菌20份，嗜热链球菌20份，长双歧杆菌18份，婴儿双歧杆菌18份，青春双歧杆菌15份，保加利亚乳杆菌13份，嗜酸乳杆菌12份，干酪乳杆菌9份，鼠李糖乳杆菌6份；

所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂按质量比2:5均匀混合。

所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖25份，低聚半乳糖25份，低聚果糖20份，低聚木糖20份，水苏糖12份，大豆低聚糖12份，棉子糖12份，低聚麦芽糖10份。

所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成：改性膳食纤维12份，银耳多糖8份，明胶4份，果胶4份。

所述保护剂的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙冬青、唐古特红景天叶、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干，按质量比8:7:3:2均匀混合，加入混合物料质量0.5倍的pH值为4.1的乳酸润湿5h,于-20℃冷冻1.5h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度4cm，粉碎物粒径2mm,接着加入粉碎物质量15倍的水，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场处理25min；然后于室温在功率200W条件下进行微波辐照提取18min，同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量4％的混合酶，于50℃酶解40min；酶解液过滤、滤液浓缩、干燥、粉碎即得保护剂；

所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比6:4:3:2:1.5均匀混合；

所述微波辐照提取为间歇式提取，即微波辐照10s，间隔20s。

制备方法，包括如下步骤：

1)酸奶制备：牛乳经净乳后室温下于电场强度35kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率400Hz进行高压脉冲电场杀菌15min，发芽糙米粉碎至粒径0.2mm与蔗糖、稳定剂和中草药提取液依次加入杀菌牛乳中，充分搅拌溶解后在65℃、20MPa下均质，然后降温至33℃于电场强度25kV/cm，脉冲时间300μs,脉冲频率300Hz进行高压脉冲电场杀菌8min，调整pH值为6.5，加入发酵剂质量的25％恒温发酵45min，接着以0.9℃/min的速率升温至42℃,加入发酵剂质量的75％恒温发酵3h，最后以0.7℃/min的速率升温至53℃,继续发酵至酸奶pH值为4.0终止发酵即得成品酸奶；

2)蓝莓浆制备：将蓝莓放入盛有0.4％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中，于室温下300W、40KHz清洗8min，沥干、破碎，室温下于电场强度40kV/cm、脉冲时间900μs、脉冲频率250Hz高压脉冲电场处理8min，胶磨，使出口果浆粒径达到150μm，然后室温下于电场强度25kV/cm、脉冲时间500μs、脉冲频率300Hz高压脉冲电场处理4min，真空脱气得原果浆；向其中加入纤维素酶、果胶酶、单宁酶和蛋白酶，使其含量分别为110ppm、80ppm、70ppm和40ppm，于50℃酶解2h，升温至95℃保温4min,立即降温至75℃，边搅拌边加入益生因子，充分溶解后，立即降温至室温，90目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至30％以上即得蓝莓浆；

3)混合、灌装：将步骤1)得到的酸奶、步骤2)得到的蓝莓浆和保护剂均匀混合，定量灌装入模具容器中；

4)冻结：将已灌装蓝莓浆酸奶的模具于-40℃的低温下完全冻结并于-30℃保存12h；

5)冻干：以冻结存放规定时间的果浆酸奶在冻干设备中按-25℃/6h、-15℃/5h、-5℃/3h、5℃/4h和20℃/6h的工艺进行冻干处理，经21h结束；

6)出模、分装：以洁净、无菌、干燥的氮气破坏真空并在洁净卫生的操作间取出干燥蓝莓冻干片，在无菌条件下，采用充氮及铝塑复合膜对蓝莓酸奶冻干片单独包装密封即得成品蓝莓酸奶冻干片。

上述方法制备的酸奶乳酸菌活菌含量为9×10¹¹CFU/ml，蓝莓酸奶冻干片的乳酸菌活菌含量为2.52×10¹¹CFU/g，常温下，保质期为36个月。

实施例3

一种黄桃、苹果、香蕉冻干片，主要由以下重量份数的原料制得：

牛乳80份，黄桃10份，苹果10份，香蕉10份，蔗糖10份，发芽糙米10份，中草药提取液5份，发酵剂7份，益生因子4份，保护剂3份，稳定剂0.1份；

所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成：植物乳杆菌30份，两歧双歧杆菌25份，乳双歧杆菌15份，嗜热链球菌15份，长双歧杆菌15份，婴儿双歧杆菌15份，青春双歧杆菌13份，保加利亚乳杆菌12份，嗜酸乳杆菌10份，干酪乳杆菌8份，鼠李糖乳杆菌5份；

所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂按质量比1:4均匀混合。

所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖20份，低聚半乳糖20份，低聚果糖15份，低聚木糖15份，水苏糖10份，大豆低聚糖10份，棉子糖10份，低聚麦芽糖8份。

所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成：改性膳食纤维10份，银耳多糖6份，明胶3份，果胶3份。

所述保护剂的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙冬青、唐古特红景天叶、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干，按质量比7:6:2:1均匀混合，加入混合物料质量0.1倍的pH值为3.8的乳酸润湿3h,于-18℃冷冻1h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3cm，粉碎物粒径0.5mm,接着加入粉碎物质量10倍的水，用乳酸调节pH值为3.5，于室温下在电场强度25kV/cm，脉冲时间300μs,脉冲频率200Hz条件下进行高压脉冲电场处理20min；然后于室温在功率150W条件下进行微波辐照提取15min，同时在功率200W,频率30KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量3％的混合酶，于45℃酶解30min；酶解液过滤、滤液浓缩、干燥、粉碎即得保护剂；

所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比5:3:2:1:1均匀混合。

制备方法，包括如下步骤：

1)酸奶制备：牛乳经净乳后室温下于电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率300Hz进行高压脉冲电场杀菌10min，发芽糙米粉碎至粒径0.1mm与蔗糖、稳定剂和中草药提取液依次加入杀菌牛乳中，充分搅拌溶解后在60℃、18MPa下均质，然后降温至32℃于电场强度20kV/cm，脉冲时间200μs,脉冲频率200Hz进行高压脉冲电场杀菌5min，调整pH值为6.0，加入发酵剂质量的20％恒温发酵0.5h，接着以0.8℃/min的速率升温至40℃,加入发酵剂质量的80％恒温发酵2h，最后以0.6℃/min的速率升温至50℃,继续发酵至酸奶pH值为4.5终止发酵即得成品酸奶；

2)果浆制备：将黄桃、苹果和香蕉放入盛有0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中，于室温下200W、35KHz清洗5min，沥干，黄桃、苹果去核，香蕉去皮，分别切分，均匀混合，破碎，室温下于电场强度35kV/cm、脉冲时间800μs、脉冲频率200Hz高压脉冲电场处理5min，胶磨，使出口果浆粒径达到100μm，然后室温下于电场强度20kV/cm、脉冲时间400μs、脉冲频率200Hz高压脉冲电场处理3min，真空脱气得原果浆；向其中加入纤维素酶、果胶酶、单宁酶和蛋白酶，使其含量分别为100ppm、70ppm、60ppm和30ppm，于45℃酶解1h，升温至90℃保温3min,立即降温至70℃，边搅拌边加入益生因子，充分溶解后，立即降温至室温，80目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至30％以上即得果浆；

4)冻结：将已灌装黄桃、苹果、香蕉酸奶的模具于-30℃的低温下完全冻结并于-30℃保存6h；

5)冻干：以冻结存放规定时间的黄桃、苹果、香蕉酸奶在冻干设备中按-25℃/4h、-15℃/4h、-5℃/2h、5℃/2h和20℃/4h的工艺进行冻干处理，经16h结束；

6)出模、分装：以洁净、无菌、干燥的氮气破坏真空并在洁净卫生的操作间取出干燥黄桃、苹果、香蕉酸奶冻干片，在无菌条件下，采用充氮及铝塑复合膜对黄桃、苹果、香蕉酸奶冻干片单独包装密封即得成品黄桃、苹果、香蕉冻干片。

上述方法制备的酸奶乳酸菌活菌含量为7×10¹¹CFU/ml，黄桃、苹果、香蕉冻干片的乳酸菌活菌含量为1.55×10¹¹CFU/g，常温下，保质期33个月。

实施例4

一种桑葚、西瓜冻干片，主要由以下重量份数的原料制得：

牛乳100份，桑葚25份，西瓜25份，蔗糖15份，发芽糙米15份，中草药提取液7份，发酵剂9份，益生因子6份，保护剂5份，稳定剂0.3份；

所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成：植物乳杆菌40份，两歧双歧杆菌35份，乳双歧杆菌25份，嗜热链球菌25份，长双歧杆菌20份，婴儿双歧杆菌20份，青春双歧杆菌18份，保加利亚乳杆菌15份，嗜酸乳杆菌15份，干酪乳杆菌10份，鼠李糖乳杆菌8份；

所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂按质量比3:6均匀混合。

所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖30份，低聚半乳糖30份，低聚果糖25份，低聚木糖25份，水苏糖15份，大豆低聚糖15份，棉子糖15份，低聚麦芽糖12份。

所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成：改性膳食纤维15份，银耳多糖10份，明胶5份，果胶5份。

所述保护剂的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙冬青、唐古特红景天叶、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干，按质量比9:8:4:3均匀混合，加入混合物料质量1倍的pH值为4.5的乳酸润湿8h,于-22℃冷冻2h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度5cm，粉碎物粒径3mm,接着加入粉碎物质量20倍的水，用乳酸调节pH值为5.5，于室温下在电场强度35kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理30min；然后于室温在功率300W条件下进行微波辐照提取20min，同时在功率300W,频率40KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量5％的混合酶，于55℃酶解50min；酶解液过滤、滤液浓缩、干燥、粉碎即得保护剂；

所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比7:5:4:3:2均匀混合。

制备方法，包括如下步骤：

1)酸奶制备：牛乳经净乳后室温下于电场强度40kV/cm，脉冲时间600μs,脉冲频率500Hz进行高压脉冲电场杀菌20min，发芽糙米粉碎至粒径0.3mm与蔗糖、稳定剂和中草药提取液依次加入杀菌牛乳中，充分搅拌溶解后在70℃、22MPa下均质，然后降温至35℃于电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率400Hz进行高压脉冲电场杀菌10min，调整pH值为7.0，加入发酵剂质量的30％恒温发酵1h，接着以1.0℃/min的速率升温至45℃,加入发酵剂质量的80％恒温发酵4h，最后以0.8℃/min的速率升温至55℃,继续发酵至酸奶pH值为3.5终止发酵即得成品酸奶；

2)果浆制备：将桑葚、西瓜放入盛有0.5％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中，于室温下400W、45KHz清洗10min，沥干，西瓜去皮、去籽、取瓤与桑葚均匀混合，破碎，室温下于电场强度45kV/cm、脉冲时间1000μs、脉冲频率300Hz高压脉冲电场处理10min，胶磨，使出口果浆粒径达到200μm，然后室温下于电场强度30kV/cm、脉冲时间600μs、脉冲频率400Hz高压脉冲电场处理5min，真空脱气得原果浆；向其中加入纤维素酶、果胶酶、单宁酶和蛋白酶，使其含量分别为120ppm、90ppm、80ppm和50ppm，于55℃酶解3h，升温至100℃保温5min,立即降温至80℃，边搅拌边加入益生因子，充分溶解后，立即降温至室温，100目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至30％以上即得果浆；

4)冻结：将已灌装桑葚、西瓜酸奶的模具于-50℃的低温下完全冻结并于-30℃保存18h；

5)冻干：以冻结存放规定时间的桑葚、西瓜酸奶在冻干设备中按-25℃/8h、-15℃/6h、-5℃/4h、5℃/6h和20℃/8h的工艺进行冻干处理，经32h结束；

6)出模、分装：以洁净、无菌、干燥的氮气破坏真空并在洁净卫生的操作间取出干燥桑葚、西瓜酸奶冻干片，在无菌条件下，采用充氮及铝塑复合膜对桑葚、西瓜酸奶冻干片单独包装密封即得成品桑葚、西瓜冻干片。

上述方法制备的酸奶乳酸菌活菌含量为8×10¹¹CFU/ml，桑葚、西瓜冻干片的乳酸菌活菌含量为2.12×10¹¹CFU/g，常温下，保质期30个月。

实施例5

一种葡萄冻干片，主要由以下重量份数的原料制得：

牛乳80份，葡萄50份，蔗糖10份，发芽糙米15份，中草药提取液5份，发酵剂9份，益生因子4份，保护剂5份，稳定剂0.1份；

所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成：植物乳杆菌30-40份，两歧双歧杆菌25-35份，乳双歧杆菌15-25份，嗜热链球菌15-25份，长双歧杆菌15-20份，婴儿双歧杆菌15-20份，青春双歧杆菌13-18份，保加利亚乳杆菌12-15份，嗜酸乳杆菌10-15份，干酪乳杆菌8-10份，鼠李糖乳杆菌5-8份；

所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200按常规方法制备的粉剂。

所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖20份，低聚半乳糖30份，低聚果糖15份，低聚木糖25份，水苏糖10份，大豆低聚糖15份，棉子糖10份，低聚麦芽糖12份。

所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成：改性膳食纤维10份，银耳多糖10份，明胶3份，果胶5份。

所述保护剂的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙冬青、唐古特红景天叶、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干，按质量比7:8:2:3均匀混合，加入混合物料质量0.1倍的pH值为4.5的乳酸润湿3h,于-22℃冷冻1h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3cm，粉碎物粒径3mm,接着加入粉碎物质量10倍的水，用乳酸调节pH值为5.5，于室温下在电场强度25kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率200Hz条件下进行高压脉冲电场处理20min；然后于室温在功率300W条件下进行微波辐照提取15min，同时在功率300W,频率40KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量5％的混合酶，于45℃酶解50min；酶解液过滤、滤液浓缩、干燥、粉碎即得保护剂；

所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比5:5:2:3:1均匀混合。

制备方法，除了葡萄进行带皮、带籽破碎外其它工艺步骤同实施例2；

上述方法制备的酸奶乳酸菌活菌含量为7×10¹¹-9×10¹¹CFU/ml，葡萄冻干片的乳酸菌活菌含量为2.48×10¹¹CFU/g，常温下，保质期32个月。

实施例6

一种菠萝、芒果冻干片，主要由以下重量份数的原料制得：

牛乳100份，菠萝15份，芒果15份，蔗糖15份，发芽糙米10份，中草药提取液7份，发酵剂7份，益生因子6份，保护剂3份，稳定剂0.3份；

所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂。

所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖30份，低聚半乳糖20份，低聚果糖25份，低聚木糖15份，水苏糖15份，大豆低聚糖10份，棉子糖15份，低聚麦芽糖8份。

所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成：改性膳食纤维15份，银耳多糖6份，明胶5份，果胶3份。

所述保护剂的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙冬青、唐古特红景天叶、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干，按质量比9:6:4:1均匀混合，加入混合物料质量1倍的pH值为3.8的乳酸润湿8h,于-18℃冷冻2h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度5cm，粉碎物粒径0.5mm,接着加入粉碎物质量20倍的水，用乳酸调节pH值为3.5，于室温下在电场强度35kV/cm，脉冲时间300μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理20min；然后于室温在功率300W条件下进行微波辐照提取15min，同时在功率300W,频率30KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量5％的混合酶，于45℃酶解50min；酶解液过滤、滤液浓缩、干燥、粉碎即得保护剂；

所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比7:3:4:1:2均匀混合。

制备方法，除了菠萝去皮、切分，芒果去核，混合破碎外，其它工艺步骤同实施例3；

上述方法制备的酸奶乳酸菌活菌含量为7×10¹¹-9×10¹¹CFU/ml，菠萝、芒果冻干片的乳酸菌活菌含量为1.86×10¹¹CFU/g，常温下，保质期35个月。

实施例7本发明保护剂效果试验

以本发明实施例2为试验组，在其它原料及组份、工艺等条件完全相同的条件下，仅仅保护剂种类不同，形成空白组(不添加保护剂)和对照组(丝胶肽为保护剂)，测定冻干前和最终冻干片的活菌含量，结果如表1：

表1：不同组别活菌含量

项目	冻干前	空白组	对照组	试验组
					活菌含量(CFU/g)	2.81×10¹¹	6.84×10⁹	1.94×10¹⁰	2.52×10¹¹
活菌损失率(％)	0	98	93	10

以上结果表明，使用本发明的保护剂作为冷冻保护剂，可显著提高冻干片的活菌含量，同样条件下，经冷干燥后试验组活菌含量是对照组的近13倍，是空白组的36倍，活菌损失率与对照组、空白组相比分别降低83％和88％，具有非常好抗冷冻效果。

需要说明的是：本发明实施例3-6同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

实施例8本发明冻干片的感官品评试验

邀请24名人员对本发明实施例2制备的冻干片与市售两种同类相同生产日期的冻干片进行品评，感官打分，其中专业和非专业人员各12名，专业人员青年、中年、老年各4名，男女各半，非专业人员少年、青年、中年、老年各3名，男女各半；打分包括外观(20分)、质地(25分)、风味(30分)、口感(25分)四个方面，打分人员独立进行，互不影响，以保证品评结果准确。对品评结果进行了统计，均分值取近似值，保留整数，具体见表2：

表2感官品评统计结果

注：同一行内标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，标不同大写字母表示差异极显著(P＜0.01)，标有相同字母表示差异不显著(P＞0.05)。

以上结果表明，本发明制备的冻干片从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明显优于市售冻干片，特别是外观、风味和口感极好，同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者食用。

需要说明的是：本发明实施例3-6制备的冻干片同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

实施例9果汁感官、卫生、理化质量指标及酶活性对比试验

以西瓜为原料，以本发明实施例2步骤2)方法制得的西瓜原汁为试验组，以采用现有的热力护色、钝酶工艺制备的西瓜汁为对照组，分别对试验组和对照组的西瓜汁进行感官、理化及卫生指标(按果蔬汁饮料卫生标准GB19297-2003中低温复原果浆检测菌落总数、大肠杆菌、致病菌、霉菌、酵母、残留农药、重金属等卫生指标，)、多酚氧化酶酶活性下降率进行检测，结果如表3：

表3

以上结果表明：本发明制备的西瓜原汁(试验组)与现有技术(对照组)相比可最大限度地保留西瓜天然色泽和风味，与西瓜的天然色泽、口感和风味基本接近，不添加任何香精和色素，可溶性固形物含量较高，具有较高的榨汁率；本发明制备的西瓜原汁污染杂菌种类少，含量低，过程污染风险小，对照组菌落总数和大肠菌群虽然合格，但微生物种类多、含量较高，如不热力杀菌，存在后期益生菌发酵失败的风险；本发明果汁制备过程对原料采用了超声清洗，有效降低了农残、毒素及重金属离子的含量，现有技术制备的西瓜原汁虽然合格，但存在较大的食品安全隐患，长期食用会对人体造成积累性严重危害；本发明制备的西瓜原汁多酚氧化酶活性低，有效防止了后序加工过程的酶促褐变。

经检测，本发明实施例3-6制备的果汁与实施例2感官、理化及卫生指标、酶活性下降率检测结果无显著性差异，同样具有优良的食品安全性、非生物稳定性和微生物稳定性。

实施例10本发明冻干片益生性试验

将本发明实施例2制备的冻干片，用无菌水制备成活菌数为2×10¹⁰CFU/mL的益生菌溶液，于4℃保存备用；

1、取保存好的10mL益生菌溶液注入到试管1中，采用十倍逐级稀释至10^-8，取1mL稀释液在平板上，将灭菌后冷却至45℃的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌)上，迅速摇匀。再将装有10mL益生菌溶液的试管2置于80-90℃水浴锅中加热15-25min，取加热后的益生菌溶液进行十倍逐级稀释至10^-8，取1mL稀释液在平板上，将灭菌后冷却至45℃的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌)上并迅速摇匀。最后将加热前和加热后的平板均在35℃条件下培养24h，计算加热前后的数量。

结果表明，活菌存活率达到了88％以上。

2、模拟胃液及肠液的耐受试验：取100g/L的盐酸16.4mL加蒸馏水稀释，使pH值分别为1.5、2.5和3.5，取100mL稀盐酸溶液，分别加入1g胃蛋白酶，使其充分溶解，得模拟胃液，微孔滤膜除菌(0.22μm)备用。取磷酸二氢钾6.8g，加水500mL使溶解，用0.1moL/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰蛋白酶10g，加水100mL使溶解，将两液混合后，加水稀释至1000ml，得模拟肠液，微孔滤膜除菌(0.22μm)备用。取1mL保存好的益生菌溶液加入到9mL的模拟胃液中(即十倍逐级稀释)，并迅速在振荡器上充分混匀，然后置于30-45℃静置培养2-4h。分别在1h、2h、3h、4h的时候取出培养液并立即计数残存活菌数，与原活菌数进行比较，结果表明，活菌存活率为98％。然后取在人工胃液中消化不同时间的培养液各1mL，分别接种于9mLpH值为6.8的人工肠液中，置于30-45℃静置培养2-4h，并分别在0、3、6、24h取样，测定其活菌数，与原活菌数进行比较，结果表明活菌存活率为99％。

3、模拟胆盐的耐受试验：用胰液素制成1g/L的溶液，并在溶液中加入0.8％的猪胆盐，用10％的NaOH调整pH为8.0，然后用0.45μm微滤膜过滤并除菌。将0.5mL保存好的益生菌溶液接种到4.5mL模拟胆盐中，培养24h后得到培养液，计数残存的活菌数。将培养液在灭菌生理盐水中十倍逐级稀释至10^-8，并用MRS倾注，然后置于35℃静置培养24h。结果表明活菌存活率为99％。

以上试验结果表明，本发明冻干片中的益生菌益生性(耐热性、耐pH性、耐胆盐)较强，非常适合人体胃肠环境，在模拟胃肠环境中存活率大，可有效改善胃肠功能。

实施例11本发明冻干片小鼠肠道性能试验

选取普通昆明小白鼠60只，雌雄各半，18-20g，常规词养。从中随机挑选40只，每天早晨9:00灌胃盐酸林可霉素0.2mL(20mg)/只，其它作为对照组，每天同一时间灌胃等量灭菌生理盐水，连续一周，制备肠道菌群失调的小鼠模型。模型组小鼠饮食下降，未出现死亡和明显的腹泻现象，排软粪，外形正常含水分较多，垫料潮湿。将40只肠道菌群失调小鼠，随机分为2组，一组20只作为治疗组，每天灌胃保存好的益生菌溶液0.5ml(2×10¹⁰cfu/ml)/只，另20只作为自然恢复组，每天同一时间灌胃等量灭菌生理盐水，连续两周。整个试验期21天，每天观察小白鼠的生长和排便情况，于第8、21天对冻干片治疗组和自然恢复组的小鼠进行称重，计算各组体重平均增长率，结果如表4；每5天测各组小鼠粪便大肠杆菌数量，计算平均数，结果如表5。取小鼠粪便约0.1g，于无菌操作台内加入3粒玻璃珠(以0.1g粪样加0.5mL稀释液)，稀释并接种麦康凯琼脂培养基，计算每克湿便中的大肠杆菌数。

表4小鼠增重情况

分组	平均始重(g/只)	平均末重(g/只)	平均增长率(％)
				自然恢复组	20.69±1.33	27.34±1.59	32.14^a
治疗组	20.41±1.45	34.28±1.62	67.96^b

表5小鼠粪便中大肠杆菌数的情况

冻干片治疗组小鼠体重平均增长率(67.96％)显著高于自然恢复组(32.14％)；饲喂溶液后肠道大肠杆菌数量显著下降，降低97.07％，显著低于自然恢复组(24.78％)，表明本发明冻干片中的益生菌在小白鼠肠道内迅速定植，形成优势菌群，并有效抑制大肠杆菌等病原菌的生长繁殖，并且定植时间长，持续、有效改善了肠道性能。

实施例12本发明冻干片对机体免疫力的影响

1实验目的

通过运动耐力测试(小鼠游泳试验)，验证本发明冻干片的提高免疫力、抗疲劳作用。

2实验材料与试剂

2.1供试药物：

市售冻干片(G1)；市售冻干片(G2)；本发明实施例2-6制备的冻干片(G3-G7)。

2.2试剂：

肝/肌糖原测试盒，购自南京建成生物制品研究所；浓硫酸(AR)，南京化学试剂有限公司；生理盐水，山东长富洁晶药业有限公司。

3.实验动物

ICR小鼠，♂，清洁级，体重18-22g，由北京医科大学比较医学中心提供，实验期间小鼠自由饮食。

4.主要仪器

铝制游泳箱(50cm×50cm×40cm)，铅丝，低温高速离心机：5804R型，Eppendrof公司；水浴锅：DK-S26型，上海精宏实验设备有限公司；电子称：BS224S型，Sartorius公司；秒表，温度计

5.实验分组

5.1剂量分组及受试样品给予时间：随机将小鼠分为8组，每组10只，第1组至第7组分别给G1～G7的药物，第8组为空白对照组，给予等体积的双蒸水，每组每日均灌胃1次，灌胃体积为0.2ml/10g，连续给予受试样品30天。

5.2样品配制：第1组至第7组：称取2.25g药物样品，用蒸馏水配至150ml；空白对照组(第8组)：双蒸水150ml。

6.实验方法

6.1负重游泳实验末次给药30min后，置小鼠于游泳箱中，水深不少于30cm，水温25±1℃，鼠尾根部负荷5％体重的铅皮，记录小鼠游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。

6.2小鼠血清尿素测定末次给药30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后摘眼球采血0.5mL(不加抗凝剂),置4℃冰箱3h,血凝固后2000r/min离心15min,取血清送北京医科大学附属医院检验科检测。

6.3肝糖原的测定末次给药30min后，在温度为25±1℃的水中不负重游泳90min，颈椎脱臼处死小鼠，用生理盐水洗净，并用滤纸吸干水分后，准确称取肝脏100mg，肝糖原检测试剂盒检测小鼠肝糖原含量。

6.4血乳酸的测定末次给药30min后采血，然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止。乳酸仪测定方法：分别在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20μL加入40μL破膜液中，立即充分振荡破碎细胞用乳酸仪测定。(血乳酸曲线下面积＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min的血乳酸值+2×游泳后20min的血乳酸值)

7.观察指标负重游泳时间，血乳酸、尿素、肝糖原值

8.统计方法实验数据用表示，采用t检验进行组间比较

9.实验结果

9.1本发明冻干片对小鼠体重的影响

各组小鼠在给予G1～G7药物后，前、中，后期体重分别见下表所示,各组小鼠的初始体重和增重体重与对照组比较均无统计学差异(P＞0.05)，表明G1～G7药物均无明显的毒性。实验结果详见表6。

表6负重游泳实验小鼠的初始体重、中期体重和结束体重

9.2本发明冻干片对小鼠负重游泳时间的影响

经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物与空白对照组比较，可以明显延长小鼠负重游泳时间，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明冻干片G3～G7药物与空白对照组比较，可以显著延长小鼠负重游泳时间，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表7。

表7冻干片对小鼠负重游泳时间的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

“**”p<0.01vs空白对照；

9.3本发明冻干片对小鼠运动前后血乳酸的影响

经口给予小鼠本发明的冻干片后，本发明冻干片G3～G7药物对小鼠运动后血乳酸曲线下面积与对照组比较有统计学差异(P＜0.05)，G1～G2药物组小鼠血乳酸曲线下面积与对照组比较虽有所降低，但并无统计学差异(P＞0.05)。结果见表8。

表8本发明冻干片对小鼠运动前后血乳酸水平的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

9.4本发明冻干片对小鼠肝糖原的影响

经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明冻干片G3～G7药物与与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表9。

表9本发明冻干片对小鼠肝糖原含量的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

“**”p<0.01vs空白对照；

9.5本发明冻干片对小鼠血清尿素的影响

经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物组与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明冻干片G3～G7药物与与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表10。

表10本发明冻干片对小鼠血清尿素含量的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

“**”p<0.01vs空白对照；

10.实验结论

本实验主要通过小鼠负重游泳实验，同时检测小鼠肝糖原的储备来观察本发明冻干片提高免疫力、抗疲劳的效果。初步研究结果显示如下：

1、本发明G3～G7冻干片均能延长小鼠负重游泳时间(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的冻干片。

2、生化检测方面显示，本发明G3～G7冻干片各剂量组均能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)，而其它G1～G2的冻干片虽然也能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，但与对照组比较，无统计学差异(P＞0.05)；

3、本发明G3～G7冻干片各剂量组均能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的冻干片；

4、高尿酸模型发现，本发明G3～G7冻干片能显著降低小鼠游泳后血清中尿素的含量(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2冻干片；

11.结论

上述实验证明本发明冻干片能显著提高机体免疫力，提高小鼠的体力和耐力，降低小鼠运动后血清中尿素及乳酸的含量，且能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备，有助于缓解运动负荷引起的疲劳；能延长小鼠负重游泳至力竭的时间。

Claims

1.一种冻干片，主要由以下重量份数的原料制得：牛乳80-100份，水果30-50份，蔗糖10-15份，发芽糙米10-15份，中草药提取液5-7份，发酵剂7-9份，益生因子4-6份，保护剂3-5份，稳定剂0.1-0.3份；

所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖20-30份，低聚半乳糖20-30份，低聚果糖15-25份，低聚木糖15-25份，水苏糖10-15份，大豆低聚糖10-15份，棉子糖10-15份，低聚麦芽糖8-12份。

2.如权利要求1所述的冻干片，其特征在于，所述保护剂的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙冬青、唐古特红景天叶、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干，按质量比7-9:6-8:2-4:1-3均匀混合，加入混合物料质量0.1-1倍的pH值为3.8-4.5的乳酸润湿3-8h,于-18--22℃冷冻1-2h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3-5cm，粉碎物粒径0.5-3mm,接着加入粉碎物质量10-20倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5，于室温下在电场强度25-35kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理20-30min；然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提取15-20min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量3-5％的混合酶，于45-55℃酶解30-50min；酶解液过滤、滤液浓缩、干燥、粉碎即得保护剂；

所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比5-7:3-5:2-4:1-3:1-2均匀混合。

3.如权利要求1所述的冻干片，其特征在于，所述发芽糙米的制备方法，包括如下步骤：将糙米放在装有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中室温、功率200-400W、频率20-30KHz超声清洗5-10min，漂洗、沥干，置12-15℃水中浸泡6-8h，每隔10-20min通风一次，通风压力0.10-0.13MPa，同时于电场强度20-40kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率100-300Hz进行高压脉冲电场处理，直至糙米水分含量为35-38％；浸泡后的糙米沥干，在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持20-24℃，暗发芽时间为12-14h，期间喷洒水至糙米水分含量为42-44％；然后置温度为35-45℃的水中浸泡10-15min进行杀胚，直至糙米水分含量至43-45％；再浸泡后的糙米在发芽室内进行暗发芽，暗发芽温度保持23-25℃，暗发芽时间为18-22h；经再发芽后的糙米于频率2450MHz、功率3000W、温度50-60℃、料层厚度2-4cm条件微波辐照干燥，其中微波辐照10s，间隔10s，干燥至水分含量为12-14％，密封包装即得发芽糙米。

4.如权利要求1所述的冻干片，其特征在于，所述中草药提取液的制备方法，包括如下步骤：按重量份数计，称取黄芪15-17份，鱼腥草15-17份，淫羊藿13-16份，山楂12-15份，金银花12-15份，川芎8-12份，葛根6-10份，当归6-10份，党参6-10份，胖大海5-8份，女贞子3-7份；置盛有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗10-15min，沥干，将上述中草药粉碎至粒径为2mm以下，置容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水，得混合物料，控制温度70℃-90℃保持2-4h，接着降温至40-50℃，用乳酸调节pH值为3.5-4.5，在功率150-300W条件下进行微波提取10-15min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；然后加入混合物料总重量0.5-1.5％的复合酶进行酶解，用乳酸调节pH值为5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的质量比为1:1-3，控制温度至60℃-78℃保持3-4h，过滤，得第一滤液；添加滤渣1-3倍重量的水，控制温度85℃-95℃保持1-3h，然后降温至25-35℃，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤液按照质量比2-4:1-3合并,均匀混合即得中草药提取液；

5.如权利要求1所述的冻干片，其特征在于，所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成：改性膳食纤维10-15份，银耳多糖6-10份，明胶3-5份，果胶3-5份。

6.如权利要求5所述的冻干片，其特征在于，所述改性膳食纤维的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、小麦纤维、燕麦纤维按质量比4-6:4-6:3-5:2-4均匀混合，加入其质量3-7倍的水，室温200-300W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm，脉冲时间400-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min；用乳酸调节pH值为4.5-6.5，加入混合物质量0.1-0.3％的生物酶，于45-55℃酶解20-48min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得改性膳食纤维；

7.如权利要求1所述的冻干片，其特征在于，所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成：植物乳杆菌30-40份，两歧双歧杆菌25-35份，乳双歧杆菌15-25份，嗜热链球菌15-25份，长双歧杆菌15-20份，婴儿双歧杆菌15-20份，青春双歧杆菌13-18份，保加利亚乳杆菌12-15份，嗜酸乳杆菌10-15份，干酪乳杆菌8-10份，鼠李糖乳杆菌5-8份。

8.如权利要求7所述的冻干片，其特征在于，植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂按质量比1-3:4-6均匀混合。

9.如权利要求1-8任一所述的冻干片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

10.如权利要求9所述冻干片的制备方法，其特征在于，所述水果为下列一种或几种水果单独或组合而成：草莓、红莓、蓝莓、树莓、黄桃、樱桃、猕猴桃、桃、苹果、梨、菠萝、香蕉、荔枝、芒果、葡萄、海棠、沙果、西瓜、哈密瓜、香瓜、椰果、橙、桑葚。