CN105076648A - 一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖及其制备方法,属于蓝莓深加工技术领域,以蓝莓为主要原料,采用非热加工方法加工成蓝莓浆,与牛乳、蔗糖、中草药提取物、蜂蜜和稳定剂均匀混合,加入发酵剂,采用分段变温发酵的方式发酵制备成蓝莓酸奶,使益生菌最大限度地增殖且具有较好的抗冷热应激能力,然后加入具有较好抗冷冻作用的保护剂冻干成粉,得到益生菌活菌含量高且抗冷热能力强的功能性蓝莓酸奶冻干粉,最后与苜蓿提取物、发芽糙米、植物提取物、糊精、益生因子、硬脂酸镁等科学复配,经多冲旋转式压片机压片制得一种益生菌活菌含量高、稳定性好、保质期长的可提高人体免疫力和延缓衰老、具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖。
Description
技术领域
本发明涉及压片糖,特别涉及一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖及其制备方法。
背景技术
蓝莓又称越橘,俗称都市果,为多年生落叶或长绿果树,耐寒性极强,可抵御零下50℃的严寒,原产于北美、苏格兰和俄罗斯,是一种具有极高经济价值的新兴世界性小浆果果树。蓝莓是越橘属植物中营养成分最丰富的种类,其果实为浆果,呈蓝色,近圆形,果肉细腻,甜酸适度。果实除了含有糖、酸和维生素C外,还富含维生素E、维生素A、维生素B1、SOD、熊果甙、花青甙、蛋白质、脂肪等其他果品中少有的特殊成分及丰富的铁、锌、锰等微量元素。据科学研究,蓝莓果实具有防止脑神经衰老、增强心脏功能、明目抗癌等独特功效。
蓝莓含有大量对人类健康有益的物质,包括抗菌成分、抗氧化物、鞣酸、叶酸和食用纤维等。目前,研究较多的是蓝莓中的黄酮类化合物。研究发现,黄酮类化合物具有多种生物活性和药物功能,如清除体内自由基、消炎、降低心血管疾病发病率,以及抑制癌细胞生长和促进其凋亡等作用。蔓越莓及蓝莓中的花青苷、黄酮醇、前花青素、桂皮酸及二苯乙烯、三萜类化合物(熊果酸ursolicacid)等可抑制血管硬化、失血性中风、老年神经退化等。因此,蓝莓被誉为“浆果之王”,也是世界粮农组织推荐的五大健康水果之一。
随着我国人民生活水平的不断提高,对食品要求越来越高,蓝莓的加工产业必将有着广阔的发展前景,它将成为21世纪的另一个新兴产业。近年来,随着人们对健康的日益重视和人们对蓝莓保健功能认识的深入,蓝莓食品的开发利用引起了人们极大关注。目前国内以蓝莓果实为原料开发的食品种类繁多,主要有蓝莓乳制品、果汁饮料、果啤、果酒、果冻、果酱、软糖、果糕及一些休闲食品等。
国外对于蓝莓中活性成分的研究主要集中在花色苷上,研究了花色苷提取物的诸多生理功能及其抗氧化能力;对于蓝莓中活性成分的功能性也有研究。而国内对于蓝莓的研究还主要集中在引种栽培技术上,对于蓝莓中的活性成分及作用机理的研究还不够深入,且对蓝莓中的酚类物质的活性研究鲜有报道。有研究报道蓝莓中的酚类物质具有抑菌作用,采用醇提法从蓝莓中提取酚类物质,再经初步纯化后,进行酚类物质的抑菌作用的研究,为蓝莓中酚类物质的生产与应用提供参考。蓝莓作为抑菌物质的植物源,可以大量开发加以利用。国内对蓝莓中抑菌活性成分的研究还不够完备。
越橘属的浆果对食源性致病菌表现出一定的抑菌效果。有研究表明,欧洲越橘的粗提液可以强烈地抑制蜡样芽孢杆菌、产气荚膜梭菌、幽门螺杆菌和金黄色葡萄球菌的生长,但对鼠李糖乳杆菌并不产生抑制作用。蔓越莓粗提液可以破坏大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的外膜,影响菌体的正常新陈代谢而达到抑菌效果。矮丛蓝莓可以抑制食源性致病菌的正常生长,对益生菌则有保护作用。研究发现越橘属植物的蓝莓对体外革兰氏阳性细菌、阴性细菌和酵母菌有抑制活性作用。浆果类含有很多对人体健康有益的物质成分,是大量活性成分的丰富来源。浆果类富含纤维素、维生素和矿物质,尤其是野生的浆果富含酚类物质和有机酸等,这些化学成分具有很好的抑菌活性。如蓝莓、云莓和木莓的酚类物质可以抑制沙门氏菌,而黑加仑、越橘和蔓越莓的酚类提取物对沙门氏菌的生长则无抑制作用。蔓越莓对金黄色葡萄球菌具有潜在的抑菌效果,且其抑菌效果明显强于草莓、黑莓和覆盆子这些小浆果。同时比较发现,益生菌和蓝莓都可以降低糊精硫酸钠所引起的大肠炎,降低肠道细菌转移到肠系膜,使肠道细菌减少,肠道内羧基酸、丙酸量升高。蓝莓表现出对各种菌体的抑菌效果,是由于蓝莓中含有大量的抑菌活性成分,起主要作用的是酚类物质、有机酸类、多糖类及花青素类等。蓝莓具有广谱的抑菌效果,能对多种细菌有抑制作用。
因此,利用蓝莓广谱抑菌同时又保护益生菌的抑菌特性,将蓝莓与益生菌结合,制备蓝莓发酵乳制品,与其它深加工产品相比美容养颜效果更佳,是众多蓝莓深加工产品的首选。王菲菲等人以新鲜优质的蓝莓、蜂蜜和牛奶为主要原料,蔗糖、稳定剂为辅料,保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌为发酵剂,确定蓝莓蜂蜜酸奶的最佳配方为:每100mL纯牛乳中加入4%蓝莓汁、3%蜂蜜、3%蔗糖、发酵5h、发酵剂菌种3%、发酵温度42~43℃,得到组织状态、香气和口感均佳的酸奶(王菲菲,徐显利,田晓蕾等.蓝莓蜂蜜酸奶的工艺研究.农产品加工,2012(1):76-78.)。朱建荣等人加入蓝莓果酱研制蓝莓搅拌型酸奶,通过正交试验确定了搅拌型蓝莓酸奶的最佳工艺条件为:蓝莓果酱与牛奶的配比为1∶9,蔗糖量6%,菌种接种量3%,43℃发酵6h(朱建荣,胡颖,朱秋劲.蓝莓搅拌酸奶的研制.贵州畜牧兽医,2012(5):57-59.)。苏伟等人研究了蓝莓发酵乳饮料,确定最佳原料配比为:牛乳60%、蓝莓汁14%、蔗糖6.5%,最佳发酵工艺参数为接种量3.2%、发酵时间4.4h、发酵温度42℃(苏伟,简素平,徐静.乳酸发酵型蓝莓乳饮料的研制.乳业科学与技术,2012,35(1):25-28.)。上述公开的蓝莓发酵乳制品保质期短、活菌含量低、稳定性差,并且蓝莓活性物质损失较大。
将蓝莓与发酵乳有机结合加工成压片糖,可有望克服上述缺陷,中国专利CN103027176B公开了一种具有美容养颜功效的压片糖及其制备方法,属于食品加工领域。所述压片糖的原料组成主要包括蓝莓原浆、黑莓原浆、蔓越莓原浆、覆盆子原浆、冻干纳豆粉、变形淀粉、抗性糊精、维生素C、天然调味剂和粘结剂;所述制备方法为首先将原浆调配,然后与部分原料均匀混合,经高压均质机均质,最后经喷雾干燥制粉,再与部分原料混合均匀,过200目筛,经多冲旋转式压片机压片即得。上述公开的专利原料单一,蓝莓浆制备方法传统,有效成分损失大,且不含益生菌,美容养颜及抗菌效果不理想。中国专利CN103651789A公开了一种蓝莓奶昔粉,由白砂糖、酸奶粉、植脂末、蓝莓粉、蔗糖酯、羧甲基纤维素钠、紫甘薯色素组成,各组分的重量百分比如下:白砂糖35%~45%、酸奶粉25%~30%、植脂末15%~25%、蓝莓粉8%~10%、蔗糖酯0.8%~1.2%、羧甲基纤维素钠0.6%~0.8%、紫甘薯色素0.01%~0.02%,经配料,混合,微波杀菌,包装制成。上述公开的专利虽然含有酸奶粉,但不含活菌,蓝莓粉及酸奶粉制备方法传统,有效成分损失大,美容养颜及抗菌效果仍不理想。中国专利CN103109930B公开了一种添加丝胶抗冻肽的果味益生菌酸奶片,其原料由以下按重量份数的组分组成:脱脂奶粉10~14份、蔗糖2~5份、丝胶肽1~3份、果料1~4份、冻干的活性益生菌0.1~0.6份和硬脂酸镁0.1~0.4份,该发明还提供了产品的制备方法,主要工艺流程包括:脱脂乳食品级培养基的制备、益生菌的发酵、丝胶抗冻肽的添加、发酵乳的真空冷冻干燥、粉末压片等工艺,益生菌酸奶片中添加了丝胶抗冻肽和富含B族维生素的水果冻干粉,不仅使酸奶片中益生菌活菌数高,菌活性保存时间较长,而且提高了其口感风味。上述公开的专利乳酸菌或益生菌活菌含量仍然较低、发酵菌种过于传统、功能性较差、单独冻干果蔬和酸奶耗时能源消耗大、果蔬和酸奶预处理过程热力和剪切力致使营养物质损失大、果浆的传统加工使得可溶性纤维素含量较低、稳定性差、保质期短。
综上,将蓝莓和牛乳一起发酵制备成蓝莓酸奶,然后冻干成粉再压片有望制得益生菌活菌含量高、稳定性好、保质期长的可提高人体免疫力和延缓衰老、具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖。
发明内容
本发明所解决的技术问题是克服现有蓝莓压片糖的缺陷,以蓝莓为主要原料,采用非热加工方法加工成蓝莓浆,与牛乳、蔗糖、中草药提取物、蜂蜜和稳定剂均匀混合,加入发酵剂,采用分段变温发酵的方式发酵制备成蓝莓酸奶,使益生菌最大限度地增殖且具有较好的抗冷热应激能力,然后加入对益生菌具有较好抗冷冻作用的保护剂冻干成粉,得到益生菌活菌含量高且抗冷热能力强的功能性蓝莓酸奶冻干粉,最后与苜蓿提取物、发芽糙米、植物提取物、糊精、益生因子、硬脂酸镁等科学复配,经多冲旋转式压片机压片制得一种益生菌活菌含量高、稳定性好、保质期长的可提高人体免疫力和延缓衰老、具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖。
为了达到上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,主要由以下重量组分的原料制得:
蓝莓70-80份,牛乳50-60份,蔗糖20-40份,苜蓿提取物20-40份,发芽糙米20-30份,中草药提取物10-20份,蜂蜜10-18份,植物提取物8-10份,发酵剂7-9份,糊精5-9份,益生因子4-6份,保护剂3-5份,新鲜脱脂牛奶1-3份,5%淀粉溶液0.5-1份,硬脂酸镁0.5-1份,稳定剂0.1-0.3份。
所述牛乳为鲜牛乳,酸度不大于18°T,干物质含量不低于11.6%。
进一步地,所述苜蓿提取物是将异黄酮含量较高的苜蓿、大豆、洋葱、银杏等与芦荟科学复配,采用超声清洗、冷冻、粉碎、高压脉冲电场提取、超声辅助微波提取等低温提取技术而制得;
优选地,所述苜蓿提取物的制备方法,包括以下步骤:将红花苜蓿、紫花苜蓿、东北大豆、洋葱、银杏、芦荟分别放入装有0.3-0.5%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于100-300W、20-40KHz清洗12-15min,沥干,按质量比10-15∶5-7∶3-5∶1-3∶1-3∶1-2均匀混合,然后于-18--23℃冷冻5-10min;立即粉碎至粒径0.5-1.5mm;置容器中并添加10-15倍重量的石油醚,放入水浴振荡器中35-45℃震荡1-3h,抽滤、烘干得混合粉;加入混合粉质量15-25倍的60%乙醇,用乳酸调节pH值为3.5-5.5,于室温下在电场强度25-35kV/cm,脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-400Hz条件下进行高压脉冲电场处理;然后于30-40℃保温1-2h,接着升温至40-50℃在功率150-300W条件下进行微波辐照提取15-20min,同时在功率200-400W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取;提取液过滤,得滤液,滤渣用1-3倍重量45-60℃水漂洗3次,漂洗液与滤液合并,均匀混合,减压浓缩至固形物含量为15%以上,冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得苜蓿提取物;
更优选地,所述微波辐照提取为间歇式提取,即微波辐照10s,间隔20s;
采用上述方法制备的苜蓿提取物滤液中异黄酮的提取量为25.14-27.68mg/g,粗提物得率为38-40%,粗提物纯度为4.41%。
进一步地,所述发芽糙米是以糙米为原料,经浸泡、发芽、干燥而制备的一种功能性较强的食品原料,含有多种酶系和功能性、生物活性物质;
优选地,所述发芽糙米的制备方法,包括如下步骤:将糙米放在装有0.1-0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中室温、功率100-300W、频率20-30KHz超声清洗5-10min,漂洗、沥干,置16-18℃水中浸泡2-4h,同时于电场强度20-40kV/cm,脉冲时间300-500μs,脉冲频率100-300Hz进行高压脉冲电场处理,直至糙米水分含量为35-38%;浸泡后的糙米沥干,在发芽室内进行暗发芽,暗发芽温度保持23-25℃,暗发芽时间为15-17h,期间喷洒含有钠离子35-45mg/L、钾离子25-35mg/L、镁离子12-18mg/L、锌离子12-15mg/L和钙离子8-10mg/L的水溶液直至糙米水分含量至43-45%;停止喷洒,在发芽室内继续进行暗发芽,暗发芽温度保持24-26℃,暗发芽时间为13-15h;经再发芽后的糙米于频率2450MHz、功率3000W、温度50-60℃、料层厚度2-4cm条件微波辐照干燥,其中微波辐照10s,间隔10s,干燥至水分含量为12-14%,密封包装即得发芽糙米。
进一步地,所述中草药提取物是以显著提高乳酸菌抗冷、热应激性、抗病性和免疫力的中草药为原料而制备;
优选地,所述中草药提取物的制备方法,包括如下步骤:按重量份数计,称取黄芪15-17份,益母草15-17份,淫羊藿13-16份,首乌12-15份,陈皮12-15份,干姜8-12份,党参6-10份,菟丝子5-8份;置盛有0.1-0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗10-15min,沥干,将上述中草药粉碎至粒径为2mm以下,置容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水,得混合物料,控制温度70-90℃保持2-4h,接着降温至40-50℃,用乳酸调节pH值为3.5-4.5,在功率150-300W条件下进行微波提取10-15min,同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取;然后加入混合物料总重量0.5-1.5%的复合酶进行酶解,用乳酸调节pH值为5.5-6.8,酶解2-4h,最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物,乙醇和丙醇混合的质量比为1∶1-3,控制温度至60-78℃保持3-4h,过滤,得第一滤液;添加滤渣1-3倍重量的水,控制温度85-95℃保持1-3h,然后降温至25-35℃,过滤,得第二滤液;将第一滤液和第二滤液按照质量比2-4∶1-3合并,均匀混合,减压浓缩至固形物含量为15%以上,冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得中草药提取物;
所述复合酶为葡聚糖酶、木聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比2-4∶2-4∶1-3∶1-3均匀混合。
进一步地,所述蜂蜜为蓝莓花蜜、紫云英蜜、苜蓿花蜜、槐花蜜和荔枝蜜中的一种或几种;
优选地,所述蜂蜜为蓝莓花蜜。
进一步地,所述植物提取物是以具有显著美容养颜效果的植物为原料而制备;
优选地,所述植物提取物的制备方法,包括如下步骤:按重量份数计,称取珍珠20-40份,白芷20-30份,薰衣草20-30份,当归18-20份,丹参12-15份,玫瑰花8-12份,槐花6-10份,桃花5-8份,凌霄花5-8份,红花4-6份;置盛有0.1-0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗3-5min,沥干,将上述植物原料粉碎至粒径为2mm以下,置容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水,得混合物料,控制温度40-50℃,用乳酸调节pH值为3-4,在功率150-300W条件下进行微波提取20-40min,同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取;然后加入混合物料总重量0.5-1.5%的混合酶进行酶解,用乳酸调节pH值为5.5-6.8,酶解2-4h,最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物,乙醇和丙醇混合的质量比为1∶1-3,控制温度至60-70℃保持3-4h,过滤,得第一滤液;添加滤渣1-3倍重量的水,控制温度85-95℃保持1-2h,然后降温至25-35℃,过滤,得第二滤液;将第一滤液和第二滤液按照质量比3-5∶1-3合并,均匀混合,减压浓缩至固形物含量为15%以上,冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得植物提取物;
所述混合酶为葡聚糖酶、蛋白酶、木聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比4-6∶4-6∶2-4∶1-3∶1-3均匀混合。
进一步地,所述发酵剂包括以下益生菌粉剂中的任意一种或多种:例如:植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、两歧双歧杆菌(Bifidobacteriumbifidum)、婴儿双歧杆菌(B.infantis)、长双歧杆菌(B.longum)、短双歧杆菌(B.breve)、青春双歧杆菌(B.adolescentis)、乳双歧杆菌(Bifidobacteriumlactis)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus.Bulgaricus)、嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus);
优选地,所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成:植物乳杆菌25-35份,两歧双歧杆菌20-25份,乳双歧杆菌20-23份,嗜热链球菌20-23份,长双歧杆菌16-18份,婴儿双歧杆菌16-18份,青春双歧杆菌15-17份,保加利亚乳杆菌13-15份,嗜酸乳杆菌12-14份,干酪乳杆菌8-10份,鼠李糖乳杆菌6-8份;
优选地,所述植物乳杆菌粉剂是以中国专利CN101974467A中所公开的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)QZ-5为出发菌按常规方法制备的,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.4200。该菌种可以产生对多种病原菌和腐败菌具有抑制作用的细菌素,并且该细菌素具有很好的热稳定性和酸稳定性,并且对蛋白酶敏感,抑菌谱广;
优选地,所述植物乳杆菌粉剂是以中国专利CN104531578A中所公开的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)FM-LP1-1为出发菌按常规方法制备的,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCN0.9488。该菌株不仅具有高效降解亚硝酸盐能力、强产酸能力、较高的耐胆盐能力,并且该菌具有优良的发酵性能和耐渗透压性能,在含有200mg/LNaNO2的MRS培养液中,接种该菌的菌体密度为1.01×107-1.54×107cfu/ml,25℃条件下培养24h,NaNO2的降解率达到97.5%以上,培养48h,NaNO2的降解率达到99.1%以上;在MRS培养液中培养24h,培养液的pH值达到3.51;
更优选地,所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂以任意比例混合;
更优选地,所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂按质量比6-8∶3-5均匀混合。
进一步地,所述糊精为麦芽糊精、抗性糊精中的任意一种或两种混合;
优选地,所述糊精为麦芽糊精、抗性糊精按质量比7-8∶1-2均匀混合。
进一步地,所述益生因子重量组成为:低聚异麦芽糖10-15份,低聚半乳糖10-15份,低聚果糖8-10份,低聚木糖8-10份,水苏糖6-8份,大豆低聚糖6-8份,棉子糖6-8份,低聚麦芽糖5-7份。
进一步地,所述保护剂为以含有抗冻蛋白的动物或植物为原料,经高压脉冲电场提取、超声波辅助微波提取和复配酶酶解而制得的,可有效提高蓝莓酸奶中的乳酸菌在冷冻干燥过程乳酸菌存活率,显著提高蓝莓酸奶粉的活菌含量;
优选地,所述保护剂的制备方法,包括如下步骤:将冬黑麦、沙冬青、唐古特红景天叶、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干,按质量比8-10∶4-6∶3-5∶2-4均匀混合,加入混合物料质量0.1-1倍的pH值为3.8-4.5的乳酸润湿3-8h,于-18--22℃冷冻1-2h后立即进行粉碎,冷冻料层厚度3-5cm,粉碎物粒径0.5-3mm,接着加入粉碎物质量10-20倍的水,用乳酸调节pH值为3.5-5.5,于室温下在电场强度25-35kV/cm,脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理20-30min;然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提取15-20min,同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量3-5%的复配酶,于45-55℃酶解30-50min;酶解液过滤、滤液浓缩、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得保护剂;
所述复配酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比3-5∶3-5∶2-4∶2-4∶1-3均匀混合;
更优选地,所述微波辐照提取为间歇式提取,即微波辐照10s,间隔20s。
进一步地,所述稳定剂为改性膳食纤维、银耳多糖、明胶、果胶中的任意一种或几种以任意比例混合,可有效防止酸奶出现质地稀薄、分层及乳清析出现象,最终可使蓝莓酸奶质地、状态与口感均一、稳定、细腻;
优选地,所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成:改性膳食纤维16-20份,银耳多糖12-15份,明胶1-3份,果胶1-3份;
所述改性膳食纤维是将膳食纤维经物理、化学或生物的方法处理而得到的可溶性纤维素含量高、生物活性强、对人体益生菌群有重要的、积极作用的纤维素,与普通膳食纤维相比,其生物活性作用更强大;
优选地,所述改性纤维是由菊粉、苹果纤维、小麦纤维、燕麦纤维中的一种或多种经生物酶酶解而得到的;
更优选地,所述改性膳食纤维的制备方法,包括以下步骤:将菊粉、苹果纤维、小麦纤维按质量比4-6∶3-5∶2-4均匀混合,加入其质量3-7倍的水,室温200-300W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm,脉冲时间400-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min;用乳酸调节pH值为4.5-6.5,加入混合物质量0.1-0.3%的生物酶,于45-55℃酶解20-48min;酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得改性膳食纤维;
所述生物酶为纤维素酶、木聚糖酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比2-4∶1-3∶1-3∶1-2∶1-2均匀混合。
进一步地,所述新鲜脱脂牛奶固形物含量≥10%。
进一步地,所述淀粉溶液中淀粉为玉米淀粉、马铃薯淀粉、大米淀粉、小米淀粉等可溶性淀粉中的一种或多种;
优选地,所述淀粉为玉米淀粉;
更优选地,所述淀粉为糯玉米淀粉。
本发明另一目的是提供上述具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖的制备方法,包括如下步骤:
1)蓝莓浆的制备:按配方称取蓝莓,将蓝莓放入盛有0.1-0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中,于室温下200-400W、35-45KHz清洗5-10min,沥干、破碎,室温下于电场强度30-40kV/cm、脉冲时间600-800μs、脉冲频率200-400Hz高压脉冲电场处理5-10min,胶磨,使出口果浆粒径达到150-250μm,然后室温下于电场强度20-30kV/cm、脉冲时间400-600μs、脉冲频率200-400Hz高压脉冲电场处理3-5min,真空脱气得原果浆;向其中加入纤维素酶、果胶酶、单宁酶和蛋白酶,使其含量分别为80-100ppm、50-70ppm、50-60ppm和25-35ppm,于45-55℃酶解1-3h,升温至85-95℃保温3-5min,立即降温至室温,80-100目筛网过滤,滤液减压浓缩至固形物含量至30-40%即得蓝莓浆;
2)蓝莓酸奶的制备:牛乳经净乳后室温下于电场强度30-40kV/cm,脉冲时间400-600μs,脉冲频率300-500Hz进行高压脉冲电场杀菌10-20min,与蔗糖、中草药提取物、蜂蜜、稳定剂和步骤1)得到的蓝莓浆均匀混合,充分搅拌溶解后在55-65℃、18-22MPa下均质,然后降温至32-35℃于电场强度20-30kV/cm,脉冲时间200-400μs,脉冲频率200-400Hz进行高压脉冲电场杀菌5-10min,调整pH值为6.0-7.0,加入发酵剂质量的30-40%恒温发酵0.5-1h,接着以0.8-1.0℃/min的速率升温至40-45℃,加入发酵剂质量的60-70%恒温发酵2-4h,最后以0.6-0.8℃/min的速率升温至50-55℃,继续发酵至酸奶pH值为3.5-4.5终止发酵即得蓝莓酸奶;
3)蓝莓酸奶粉的制备:将新鲜脱脂牛奶和质量比为5%的淀粉溶液分别于121℃灭菌8-10min,立即降温至45-55℃,然后与保护剂均匀混合,充分溶解后加入步骤2)得到的蓝莓酸奶中,按常规方法冷冻干燥即得蓝莓酸奶粉;
4)压片:将发芽糙米于40-60℃粉碎至粒径0.1-0.3mm,与苜蓿提取物、植物提取物、糊精、益生因子、硬脂酸镁和步骤3)得到的蓝莓酸奶粉均匀混合,然后过50-100目筛,经多冲旋转式压片机制成压片糖果,即得具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖。
上述方法制备的蓝莓酸奶乳酸菌活菌含量为1.12×1012-1.36×1012CFU/ml,蓝莓酸奶粉的活菌含量为8.65×1011-9.78×1011CFU/g,蓝莓压片糖的活菌含量为8.22×1011-9.49×1011CFU/g,常温下,保质期30-36个月。
有益效果:
本发明以蓝莓为主要原料,采用非热加工方法加工成蓝莓浆,以防止过程杂菌感染、提高果汁出汁率和增加果浆的可溶性纤维素的含量,防止果浆褐变,最大限度地保留了蓝莓中的花青素、维生素C、维生素E、微量元素及膳食纤维等功能性有效成分的含量,胶原蛋白的合成需要维生素C参与,而胶原蛋白决定了皮肤的弹性,维生素C可以保护其他抗氧化成分,如维生素E、氧化酶、花青素,防止自由基对人体的伤害。花青素可以杀死附着在胃粘膜和泌尿系统上的细菌,可以预防胃病和妇科疾病;自由基可导致脂肪、蛋白质和核酸的氧化损害,花青素能清除自由基,从而保护蛋白不被氧化。花青素与胶原蛋白和硬弹性蛋白的结合,使得肥大细胞和嗜碱粒细胞的细胞膜上形成一层抗氧化的保护层,起到修复和保护细胞的作用。与牛乳、蔗糖、中草药提取物、蜂蜜和稳定剂均匀混合,加入含有可以产生对多种病原菌和腐败菌具有抑制作用的细菌素的植物乳杆菌CGMCCNo.4200和具有高效降解亚硝酸盐能力、强产酸能力、较高的耐胆盐能力的植物乳杆菌CGMCCNO.9488的发酵剂,可显著提高乳酸菌在肠道内的增殖、定植和解毒排毒能力,有效提高了人体免疫力和胃肠功能,相对于现有的发酵剂益生性、功能性更强。采用分段变温发酵的方式发酵制备成蓝莓酸奶,在酸奶制备过程采用高压脉冲电场非热杀菌技术代替了传统的巴氏杀菌,最大限度地保留了新鲜牛乳中的热敏性营养物质,有效防止了加工过程的杂菌污染,稳定和提高了酸奶的风味和口感,节省了能源;具有抗冷热应激性的中草药提取物、可有效防止酸奶出现质地稀薄、分层及乳清析出的稳定剂,变温酸奶发酵工艺可使乳酸菌增殖达到最大化、提高乳酸菌的抗冷热应激能力,可获得口感细腻、质地均一、状态稳定、活菌含量高的多功能蓝莓酸奶;然后加入对益生菌具有较好抗冷冻作用的保护剂冻干成粉,得到益生菌活菌含量高且抗冷热能力强的功能性蓝莓酸奶冻干粉,最后与苜蓿提取物、发芽糙米、植物提取物、糊精、益生因子、硬脂酸镁等科学复配,经多冲旋转式压片机压片制得一种益生菌活菌含量高、稳定性好、保质期长的可提高人体免疫力和延缓衰老、具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖(具体试验效果见实施例5-12)。蓝莓压片糖的活菌含量为8.22×1011-9.49×1011CFU/g,常温下,保质期30-36个月。具体技术原理如下:
1.本发明的苜蓿提取物是将异黄酮含量较高的苜蓿、大豆、洋葱、银杏等与芦荟科学复配,采用超声清洗、冷冻、粉碎、高压脉冲电场提取、超声辅助微波提取等低温提取技术而制得,最大限度地保留了原料中异黄酮的含量,且同时含有苜蓿异黄酮、大豆异黄酮、洋葱异黄酮等多种异黄酮,所得异黄酮提取率高、纯度更高、生理活性更强,与芦荟(凝胶)科学复配,增强了异黄酮的稳定性,降低了制备、储存和使用过程中的损失,协同功效更强;采用上述方法制备的苜蓿提取物滤液中异黄酮的提取量为25.14-27.68mg/g,粗提物得率为38-40%,粗提物纯度为4.41%;制备的苜蓿提取物可显著提高和平衡女性雌性激素水平;有效促进女性自身内分泌调节和女性器官(如卵巢、输卵管)营养物质吸收;促进对钙的吸收,减少钙流失;强力消减自由基,提高机体免疫力;最终增强人体免疫力和延缓衰老,达到美容养颜及抗菌的效果。同时降低了因原料而引入的农药残留、重金属离子和虫卵等,大大提高了原料的食品安全性。
2.本发明的植物提取物以具有显著美容养颜效果的花、草、中草药和珍珠科学复配,突破了传统蒸煮、研磨的食用方法,经超声清洗、低温酶解、水提醇提和超声波辅助微波提取而制备的,提取物有效成分含量高、损失低,原料利用率高、成本低,复配后美容效果好、协同作用强,可强肝养胃,活血调经,润肠通便,解郁安神,又可缓和情绪、平衡内分泌、补血气,还可舒缓情绪、消炎杀菌、消除疲劳、改善体质、润泽肌肤的功效,最终可调节内分泌、调高免疫力、延缓衰老和美容养颜且男女皆宜,同时降低了因原料而引入的农药残留、重金属离子和虫卵等,大大提高了原料的食品安全性。
3.本发明的发酵剂科学复配多种乳酸菌剂,种类多,功能全,益生性强,特别是植物乳杆菌CGMCCNo.4200可以产生对多种病原菌和腐败菌具有抑制作用的细菌素,并且该细菌素具有很好的热稳定性和酸稳定性,并且对蛋白酶敏感,抑菌谱广;植物乳杆菌CGMCCNO.9488不仅具有高效降解亚硝酸盐能力、强产酸能力、较高的耐胆盐能力,并且该菌具有优良的发酵性能和耐渗透压性能;相对于现有的酸奶发酵剂发酵力、益生性、功能性更强。
4.本发明的稳定剂是经多年潜心研究,通过大量的科学实验复配而成,不含具有任何毒副作用的化学添加剂,不会对人体产生任何潜在的危害,无添加量限制,主要为天然植物原料,食品安全性强,效果好,可有效防止酸奶出现质地稀薄、分层及乳清析出现象,最终可使蓝莓压片糖质地、状态与口感均一、稳定、细腻。其中的改性膳食纤维将超声提取、高压脉冲电场提取和生物酶解科学结合,所得改性膳食纤维可溶性纤维素含量高,更容易被益生菌利用,提高益生菌在人体肠道的生长及繁殖能力,增加益生菌菌群的种类和数量,降低人体肠道pH值,改善人体肠道微生态环境;吸附能力强,经改性后,纤维素的比表面积增大,网格结构丰富,吸附力增强,螯合、吸附胆固醇和胆汁酸类的有机分子能力更强、抑制人体对他们的吸收;离子交换能力增强,对金属元素,特别是重金属元素吸附效果更强,有效防止了人体重金属中毒;持水性、膨胀性、增稠性更强且不受酸、碱、盐的影响。调节和维持肠道菌群的定植时间,增强肠道的消化和吸收能力,提高机体免疫力;有效促进胃肠蠕动,减缓并消除胃胀、腹胀等不良反应;强大的包埋作用可防止环境(氧气、温度、光照、水分活度等)因素对产品品质的影响,稳定了压片糖的生物活性,延长了压片糖的保质期。
5.本发明的保护剂以含有抗冻蛋白的动物或植物为原料,经高压脉冲电场提取、超声波辅助微波提取和生物酶解而制得的,有效成分损失少、提取率高、效果明显,可有效提高蓝莓酸奶中的乳酸菌在冷冻干燥过程乳酸菌存活率,显著提高蓝莓压片糖的活菌含量;且原料单一、成分简单,最主要的是不含化学物质,食品安全性强,与脱脂牛奶和淀粉溶液科学复配,效果更佳。
6.本发明的发芽糙米含有丰富的生物活性物质和功能性物质,可为乳酸菌提供丰富的营养物质,其中含有的多种酶系(蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、磷酸酯酶等)一方面可以将自身的大分子物质:淀粉、蛋白质、脂肪、纤维素转变为小分子物质;发芽糙米发芽率达98%以上,芽长0.4-0.6mm,长度均一,发芽损失低为1-2%,功能性物质含量高,其中γ-氨基丁酸含量为305.8-316.6mg/100g,谷胱甘肽17.6-18.8mg/100g,六磷酸肌醇(IP6)459.7-491.6mg/100g,膳食纤维3.5-3.8mg/100g,增加了酸奶的功能性、稳定性和适口性。
7.本发明制备的中草药提取物科学复配显著提高乳酸菌抗冷、热应激性、抗病性和免疫力的中草药为原料,经超声清洗、低温酶解、水提醇提和超声波辅助微波提取而制备的,提取物有效成分含量高,成本低,可有效增强乳酸菌抗低温和高温的能力,适应温度变化环境,为适应变温发酵及冷冻干燥环境奠定了坚实的基础,有效提高压片糖活菌含量,同时可抑制乳酸菌后发酵,防止酸奶过酸以保持酸奶风味及口感协调,还可防止压片糖杂菌侵害,延长产品的保质期。
8.本发明蓝莓果浆制备过程采用超声清洗,可有效降低加工过程农药残留及重金属离子的引入,提高果汁的食品安全性;经破碎和胶磨后的果汁室温下经高压脉冲电场处理后其品质更加天然,榨汁率高、钝酶效果好、杂菌含量极低,显著优于商品果汁的质量指标;采用脱气工艺,有效降低了果汁生产过程中的溶解氧含量,有效提高了果汁的液相稳定性;将胶磨和生物酶解有机结合,在一定粒度范围内的果汁经科学复配后的复合酶酶解,果汁色素附着性更强、溶出量更大、分散力更强、色素的液相更加稳定;将多种非热加工技术结合处理果汁,有效防止过程杂菌感染、提高果汁出汁率和增加果浆的可溶性纤维素的含量,防止果浆褐变,保持果汁天然品质。
9.本发明的益生因子可为乳酸菌提供了丰富的营养物质,有利于益生菌在肠道的增殖和定植,抑制有害菌生长;抗性糊精的加入会促进小肠对氨基酸、矿物质和花青素的吸收,与麦芽糊精科学复配,效果更加显著。
10.本发明蓝莓压片糖的制备方法采用非热加工技术,工作效率高,能源消耗少,对环境友好,无污染,减少了食品添加剂和化学助剂的引入,有效提高了食品安全性,提高了产品质量和降低了生产成本,实现了低碳生产目标,可规模化、产业化发展。全程采用低温加工技术,优化了发酵菌种和工艺、添加了功能性原料,制备的压片糖口感细腻、质地均一、状态稳定、活菌数量高、营养丰富、品质天然、功能性强、保质期长、生物活性高、口感和风味及食欲性强、食品安全性高,可提高人体免疫力、抗病能力、耐力和抗疲劳能力、改善肠胃功能,需要说明的是该蓝莓压片糖的食用效果是各组分相互协同、相互作用的结果,并非简单的原料功能的叠加,各原料组分的科学复配和提取,产生的效果远远超过各单一组份功能和效果的叠加,具有较好的先进性和实用性。
具体实施方式
下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明,本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外,实施方案应理解为说明性的,而非限制本发明的范围,本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言,在不背离本发明实质和范围的前提下,对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。
实施例1原料制备
1.苜蓿提取物的制备:
所述苜蓿提取物的制备方法,包括以下步骤:将红花苜蓿、紫花苜蓿、东北大豆、洋葱、银杏、芦荟分别放入装有0.4%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗14min,沥干,按质量比12∶6∶4∶2∶2∶1.5均匀混合,然后于-20℃冷冻8min;立即粉碎至粒径1.0mm;置容器中并添加12倍重量的石油醚,放入水浴振荡器中40℃震荡2h,抽滤、烘干得混合粉;加入混合粉质量20倍的60%乙醇,用乳酸调节pH值为4.5,于室温下在电场强度30kV/cm,脉冲时间400μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理;然后于35℃保温1.5h,接着升温至45℃在功率200W条件下进行微波辐照提取18min,其中,微波辐照10s,间隔20s;同时在功率300W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取;提取液过滤,得滤液,滤渣用2倍重量52℃水漂洗3次,漂洗液与滤液合并,均匀混合,减压浓缩至固形物含量为15%以上,冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.2mm即得苜蓿提取物;
采用上述方法制备的苜蓿提取物滤液中异黄酮的提取量为27.68mg/g,粗提物得率为40%,粗提物纯度为4.41%。
2.植物提取物的制备:
所述植物提取物的制备方法,包括如下步骤:按重量份数计,称取珍珠30份,白芷25份,薰衣草25份,当归19份,丹参13份,玫瑰花10份,槐花8份,桃花6份,凌霄花6份,红花5份;置盛有0.4%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗4min,沥干,将上述植物原料粉碎至粒径为2mm以下,置容器中均匀混合并添加5倍重量的水,得混合物料,控制温度45℃,用乳酸调节pH值为3.5,在功率200W条件下进行微波提取30min,同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取;然后加入混合物料总重量1.0%的混合酶进行酶解,用乳酸调节pH值为5.2,酶解3h,最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物,乙醇和丙醇混合的质量比为1∶2,控制温度至65℃保持3.5h,过滤,得第一滤液;添加滤渣2倍重量的水,控制温度90℃保持1.5h,然后降温至30℃,过滤,得第二滤液;将第一滤液和第二滤液按照质量比4∶2合并,均匀混合,减压浓缩至固形物含量为15%以上,冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.2mm即得植物提取物;
所述混合酶为葡聚糖酶、蛋白酶、木聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比5∶5∶3∶2∶2均匀混合。
3.发芽糙米的制备:
所述发芽糙米的制备方法,包括如下步骤:将糙米放在装有0.2%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中室温、功率200W、频率25KHz超声清洗8min,漂洗、沥干,置17℃水中浸泡3h,同时于电场强度30kV/cm,脉冲时间400μs,脉冲频率200Hz进行高压脉冲电场处理,直至糙米水分含量为36%;浸泡后的糙米沥干,在发芽室内进行暗发芽,暗发芽温度保持24℃,暗发芽时间为16h,期间喷洒含有钠离子40mg/L、钾离子30mg/L、镁离子15mg/L、锌离子13mg/L和钙离子9mg/L的水溶液直至糙米水分含量至44%;停止喷洒,在发芽室内继续进行暗发芽,暗发芽温度保持25℃,暗发芽时间为14h;经再发芽后的糙米于频率2450MHz、功率3000W、温度55℃、料层厚度3cm条件微波辐照干燥,其中微波辐照10s,间隔10s,干燥至水分含量为13%,密封包装即得发芽糙米。
4.中草药提取物的制备:
所述中草药提取物的制备方法,包括如下步骤:按重量份数计,称取黄芪16份,益母草16份,淫羊藿15份,首乌13份,陈皮13份,干姜10份,党参8份,菟丝子6份;置盛有0.2%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗12min,沥干,将上述中草药粉碎至粒径为2mm以下,置容器中均匀混合并添加5倍重量的水,得混合物料,控制温度80℃保持3h,接着降温至45℃,用乳酸调节pH值为4.0,在功率200W条件下进行微波提取12min,同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取;然后加入混合物料总重量1.0%的复合酶进行酶解,用乳酸调节pH值为5.2,酶解3h,最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物,乙醇和丙醇混合的质量比为1∶2,控制温度至70℃保持3.5h,过滤,得第一滤液;添加滤渣2倍重量的水,控制温度90℃保持2h,然后降温至30℃,过滤,得第二滤液;将第一滤液和第二滤液按照质量比3∶2合并,均匀混合,减压浓缩至固形物含量为15%以上,冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.2mm即得中草药提取物;
所述复合酶为葡聚糖酶、木聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比3∶3∶2∶2均匀混合。
5.保护剂的制备:
所述保护剂的制备方法,包括如下步骤:将冬黑麦、沙冬青、唐古特红景天叶、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干,按质量比9∶5∶4∶3均匀混合,加入混合物料质量0.5倍的pH值为4.1的乳酸润湿5h,于-20℃冷冻1.5h后立即进行粉碎,冷冻料层厚度4cm,粉碎物粒径1.2mm,接着加入粉碎物质量15倍的水,用乳酸调节pH值为4.5,于室温下在电场强度30kV/cm,脉冲时间400μs,脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场处理25min;然后于室温在功率200W条件下进行微波辐照提取18min,其中,微波辐照10s,间隔20s,同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量4%的复配酶,于50℃酶解40min;酶解液过滤、滤液浓缩、低温粉碎至粒径为0.2mm即得保护剂;
所述复配酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比4∶4∶3∶3∶2均匀混合。
6.改性膳食纤维的制备:
所述改性膳食纤维的制备方法,包括以下步骤:将菊粉、苹果纤维、小麦纤维按质量比5∶4∶3均匀混合,加入其质量5倍的水,室温250W、35KHz条件超声提取12min,然后在电场强度30kV/cm,脉冲时间500μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理12min;用乳酸调节pH值为5.5,加入混合物质量0.2%的生物酶,于50℃酶解35min;酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.2mm即得改性膳食纤维;
所述生物酶为纤维素酶、木聚糖酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比3∶2∶2∶1.5∶1.5均匀混合。
以下实施例2-4所使用的苜蓿提取物、植物提取物、发芽糙米、中草药提取物、保护剂、改性膳食纤维均为实施例1制备,其它均为市购商品。
实施例2
一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,主要由以下重量组分的原料制得:
蓝莓75份,牛乳55份,蔗糖30份,苜蓿提取物30份,发芽糙米25份,中草药提取物15份,蓝莓花蜜14份,植物提取物9份,发酵剂8份,糊精7份,益生因子5份,保护剂4份,新鲜脱脂牛奶2份,5%糯玉米淀粉溶液0.8份,硬脂酸镁0.8份,稳定剂0.2份。
所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成:植物乳杆菌30份,两歧双歧杆菌22份,乳双歧杆菌21份,嗜热链球菌21份,长双歧杆菌17份,婴儿双歧杆菌17份,青春双歧杆菌16份,保加利亚乳杆菌14份,嗜酸乳杆菌13份,干酪乳杆菌9份,鼠李糖乳杆菌7份;
所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂按质量比7∶4均匀混合。
所述糊精为麦芽糊精、抗性糊精按质量比7.5∶1.5均匀混合。
所述益生因子重量组成为:低聚异麦芽糖12份,低聚半乳糖12份,低聚果糖9份,低聚木糖9份,水苏糖7份,大豆低聚糖7份,棉子糖7份,低聚麦芽糖6份。
所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成:改性膳食纤维18份,银耳多糖13份,明胶2份,果胶2份。
制备方法,包括如下步骤:
1)蓝莓浆的制备:按配方称取蓝莓,将蓝莓放入盛有0.1-0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中,于室温下300W、40KHz清洗8min,沥干、破碎,室温下于电场强度35kV/cm、脉冲时间700μs、脉冲频率300Hz高压脉冲电场处理8min,胶磨,使出口果浆粒径达到200μm,然后室温下于电场强度25kV/cm、脉冲时间500μs、脉冲频率300Hz高压脉冲电场处理4min,真空脱气得原果浆;向其中加入纤维素酶、果胶酶、单宁酶和蛋白酶,使其含量分别为90ppm、60ppm、55ppm和30ppm,于50℃酶解2h,升温至90℃保温4min,立即降温至室温,90目筛网过滤,滤液减压浓缩至固形物含量至35%即得蓝莓浆;
2)蓝莓酸奶的制备:牛乳经净乳后室温下于电场强度35kV/cm,脉冲时间500μs,脉冲频率400Hz进行高压脉冲电场杀菌15min,与蔗糖、中草药提取物、蜂蜜、稳定剂和步骤1)得到的蓝莓浆均匀混合,充分搅拌溶解后在60℃、20MPa下均质,然后降温至33℃于电场强度25kV/cm,脉冲时间300μs,脉冲频率300Hz进行高压脉冲电场杀菌8min,调整pH值为6.5,加入发酵剂质量的35%恒温发酵45min,接着以0.9℃/min的速率升温至42℃,加入发酵剂质量的65%恒温发酵3h,最后以0.7℃/min的速率升温至52℃,继续发酵至酸奶pH值为4.0终止发酵即得蓝莓酸奶;
3)蓝莓酸奶粉的制备:将新鲜脱脂牛奶和质量比为5%的糯玉米淀粉溶液分别于121℃灭菌9min,立即降温至50℃,然后与保护剂均匀混合,充分溶解后加入步骤2)得到的蓝莓酸奶中,按常规方法冷冻干燥即得蓝莓酸奶粉;
4)压片:将发芽糙米于55℃粉碎至粒径0.2mm,与苜蓿提取物、植物提取物、糊精、益生因子、硬脂酸镁和步骤3)得到的蓝莓酸奶粉均匀混合,然后过60目筛,经多冲旋转式压片机制成压片糖果,即得具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖。
上述方法制备的蓝莓酸奶乳酸菌活菌含量为1.36×1012CFU/ml,蓝莓酸奶粉的活菌含量为9.78×1011CFU/g,蓝莓压片糖的活菌含量为9.49×1011CFU/g,常温下,保质期36个月。
实施例3
一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,主要由以下重量组分的原料制得:
蓝莓70份,牛乳50份,蔗糖20份,苜蓿提取物20份,发芽糙米20份,中草药提取物10份,苜蓿花蜜10份,植物提取物8份,发酵剂7份,糊精5份,益生因子4份,保护剂3份,新鲜脱脂牛奶1份,5%玉米淀粉溶液0.5份,硬脂酸镁0.5份,稳定剂0.1份。
所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成:植物乳杆菌25份,两歧双歧杆菌20份,乳双歧杆菌20份,嗜热链球菌20份,长双歧杆菌16份,婴儿双歧杆菌16份,青春双歧杆菌15份,保加利亚乳杆菌13份,嗜酸乳杆菌12份,干酪乳杆菌8份,鼠李糖乳杆菌6份;
所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂按质量比6∶3均匀混合。
所述糊精为麦芽糊精、抗性糊精按质量比7∶1均匀混合。
所述益生因子重量组成为:低聚异麦芽糖10份,低聚半乳糖10份,低聚果糖8份,低聚木糖8份,水苏糖6份,大豆低聚糖6份,棉子糖6份,低聚麦芽糖5-7份。
所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成:改性膳食纤维16份,银耳多糖12份,明胶1份,果胶1份。
制备方法,包括如下步骤:
1)蓝莓浆的制备:按配方称取蓝莓,将蓝莓放入盛有0.1%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中,于室温下200W、35KHz清洗5min,沥干、破碎,室温下于电场强度30kV/cm、脉冲时间600μs、脉冲频率200Hz高压脉冲电场处理5min,胶磨,使出口果浆粒径达到150μm,然后室温下于电场强度20kV/cm、脉冲时间400μs、脉冲频率200Hz高压脉冲电场处理3min,真空脱气得原果浆;向其中加入纤维素酶、果胶酶、单宁酶和蛋白酶,使其含量分别为80ppm、50ppm、50ppm和25ppm,于45℃酶解1h,升温至85℃保温3min,立即降温至室温,80目筛网过滤,滤液减压浓缩至固形物含量至30%即得蓝莓浆;
2)蓝莓酸奶的制备:牛乳经净乳后室温下于电场强度30kV/cm,脉冲时间400μs,脉冲频率300Hz进行高压脉冲电场杀菌10min,与蔗糖、中草药提取物、蜂蜜、稳定剂和步骤1)得到的蓝莓浆均匀混合,充分搅拌溶解后在55℃、18MPa下均质,然后降温至32℃于电场强度20kV/cm,脉冲时间200μs,脉冲频率200Hz进行高压脉冲电场杀菌5min,调整pH值为6.0,加入发酵剂质量的30%恒温发酵0.5h,接着以0.8℃/min的速率升温至40℃,加入发酵剂质量的70%恒温发酵2h,最后以0.6℃/min的速率升温至50℃,继续发酵至酸奶pH值为4.5终止发酵即得蓝莓酸奶;
3)蓝莓酸奶粉的制备:将新鲜脱脂牛奶和质量比为5%的淀粉溶液分别于121℃灭菌8min,立即降温至45℃,然后与保护剂均匀混合,充分溶解后加入步骤2)得到的蓝莓酸奶中,按常规方法冷冻干燥即得蓝莓酸奶粉;
4)压片:将发芽糙米于40℃粉碎至粒径0.1mm,与苜蓿提取物、植物提取物、糊精、益生因子、硬脂酸镁和步骤3)得到的蓝莓酸奶粉均匀混合,然后过100目筛,经多冲旋转式压片机制成压片糖果,即得具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖。
上述方法制备的蓝莓酸奶乳酸菌活菌含量为1.12×1012CFU/ml,蓝莓酸奶粉的活菌含量为8.65×1011CFU/g,蓝莓压片糖的活菌含量为8.22×1011CFU/g,常温下,保质期30个月。
实施例4
一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,主要由以下重量组分的原料制得:
蓝莓80份,牛乳60份,蔗糖40份,苜蓿提取物40份,发芽糙米30份,中草药提取物20份,槐花蜜9份,荔枝蜜9份,植物提取物10份,发酵剂9份,糊精9份,益生因子6份,保护剂5份,新鲜脱脂牛奶3份,5%马铃薯淀粉溶液1份,硬脂酸镁1份,稳定剂0.3份;
所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成:植物乳杆菌35份,两歧双歧杆菌25份,乳双歧杆菌23份,嗜热链球菌23份,长双歧杆菌18份,婴儿双歧杆菌18份,青春双歧杆菌17份,保加利亚乳杆菌15份,嗜酸乳杆菌14份,干酪乳杆菌10份,鼠李糖乳杆菌8份;
所述植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂按质量比8∶5均匀混合。
所述糊精为麦芽糊精、抗性糊精按质量比8∶2均匀混合。
所述益生因子重量组成为:低聚异麦芽糖15份,低聚半乳糖15份,低聚果糖10份,低聚木糖10份,水苏糖8份,大豆低聚糖8份,棉子糖8份,低聚麦芽糖7份。
所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成:改性膳食纤维20份,银耳多糖15份,明胶3份,果胶3份。
制备方法,包括如下步骤:
1)蓝莓浆的制备:按配方称取蓝莓,将蓝莓放入盛有0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中,于室温下400W、45KHz清洗10min,沥干、破碎,室温下于电场强度40kV/cm、脉冲时间800μs、脉冲频率400Hz高压脉冲电场处理10min,胶磨,使出口果浆粒径达到250μm,然后室温下于电场强度30kV/cm、脉冲时间600μs、脉冲频率400Hz高压脉冲电场处理5min,真空脱气得原果浆;向其中加入纤维素酶、果胶酶、单宁酶和蛋白酶,使其含量分别为100ppm、70ppm、60ppm和35ppm,于55℃酶解3h,升温至95℃保温5min,立即降温至室温,100目筛网过滤,滤液减压浓缩至固形物含量至40%即得蓝莓浆;
2)蓝莓酸奶的制备:牛乳经净乳后室温下于电场强度40kV/cm,脉冲时间600μs,脉冲频率500Hz进行高压脉冲电场杀菌20min,与蔗糖、中草药提取物、蜂蜜、稳定剂和步骤1)得到的蓝莓浆均匀混合,充分搅拌溶解后在65℃、22MPa下均质,然后降温至35℃于电场强度30kV/cm,脉冲时间400μs,脉冲频率400Hz进行高压脉冲电场杀菌10min,调整pH值为7.0,加入发酵剂质量的40%恒温发酵0.5-1h,接着以1.0℃/min的速率升温至45℃,加入发酵剂质量的60%恒温发酵4h,最后以0.8℃/min的速率升温至55℃,继续发酵至酸奶pH值为3.5终止发酵即得蓝莓酸奶;
3)蓝莓酸奶粉的制备:将新鲜脱脂牛奶和质量比为5%的淀粉溶液分别于121℃灭菌10min,立即降温至55℃,然后与保护剂均匀混合,充分溶解后加入步骤2)得到的蓝莓酸奶中,按常规方法冷冻干燥即得蓝莓酸奶粉;
4)压片:将发芽糙米于60℃粉碎至粒径0.3mm,与苜蓿提取物、植物提取物、糊精、益生因子、硬脂酸镁和步骤3)得到的蓝莓酸奶粉均匀混合,然后过50目筛,经多冲旋转式压片机制成压片糖果,即得具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖。
上述方法制备的蓝莓酸奶乳酸菌活菌含量为1.24×1012CFU/ml,蓝莓酸奶粉的活菌含量为9.22×1011CFU/g,蓝莓压片糖的活菌含量为8.88×1011CFU/g,常温下,保质期32个月。
实施例5本发明蓝莓汁的抗菌效果试验
(1)取本发明实施例2制备的浓缩前的蓝莓汁滤液和市售同样浓度的蓝莓原汁,分别经0.22μm微孔滤膜过滤后,用于抗菌活性测定。
(2)采用营养琼脂培养基培养指示菌,用打孔法直接测定蓝莓汁的抗菌活性。营养琼脂培养基平板涂布培养好的100μL指示菌菌悬浮液(1×108cfu/ml),用直径6mm打孔器均匀打孔,每孔加制备好的蓝莓汁100μL,用无菌水做对照。37℃培养16h,记录抑菌圈大小。选大肠杆菌(Escherichiacoli)、金黄色葡萄球(Staphylococcusaureaus)、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、沙门氏菌(Salmonellaenteritidis)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)等细菌作为受试菌株。做霉菌抑菌实验时,在PDA培养基平板中间接种霉菌,培养1-2d后,在离菌落2cm处打孔,每孔加入制备好的蓝莓汁100μL,用无菌水做对照。28℃培养3-4d,记录抑菌情况。结果见表1:
表1:蓝莓汁抑菌活性结果
以上结果表明:本发明蓝莓汁和市售蓝莓汁均对大肠杆菌(Escherichiacoli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureaus)、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)、沙门氏菌(Salmonellaenteritidis)和枯草芽孢杆菌(Pseudomonasaeruginosa)等原核微生物具有一定的抑制作用。对丝状真菌绿色木霉(Trichodermaviride)、总状毛霉(Mucorracemosus)也具有一定的抑制作用,具有广谱抑菌效果,但是,本发明制备的蓝莓汁效果更加显著,是市售蓝莓汁抑菌效果的2倍左右。说明本发明制备的蓝莓汁酚类物质、有机酸类、多糖类及花青素类等抗菌有效物质含量高、加工损失低,与现有技术相比具有一定的先进性和实用性。
需要说明的是:本发明实施例3-4同样具有上述实验效果,各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
实施例6本发明保护剂效果试验
以本发明实施例2为试验组,在其它原料及组份、工艺等条件完全相同的条件下,仅仅保护剂种类不同,形成空白组(不添加保护剂)和对照组(丝胶肽为保护剂),测定冻干前和冻干后的活菌含量,结果如表2:
表2:不同组别活菌含量
项目 | 冻干前 | 空白组 | 对照组 | 试验组 |
活菌含量(CFU/g) | 1.36×1012 | 2.72×1010 | 9.52×1010 | 9.78×1011 |
活菌损失率(%) | 0 | 98 | 93 | 28 |
以上结果表明,便用本发明的保护剂作为冷冻保护剂,可显著提高蓝莓酸奶粉的活菌含量,同样条件下,经冷干燥后试验组活菌含量是对照组的近10倍,是空白组的36倍,活菌损失率与对照组、空白组相比分别降低65%和70%,具有非常好抗冷冻效果。
需要说明的是:本发明实施例3-4同样具有上述实验效果,各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
实施例7本发明压片糖美容效果试验
将本发明实施例2制备的压片糖在天津市和上海市试验一个月,每人每次服用1片(200mg/片),每日三次,使用者630人,其中600人效果明显,显著率高达95.2%。
食用者效果分析举例:
1.男,张某,经常上网工作,由于近日面对电脑时间较长,色斑增多,并且出现季节性蜕皮,经服用本发明实施例2制备的压片糖2周后,色斑几乎完全消失。
2.女,柳某,经常皮肤缺水、干燥,虽然每月做皮肤专业护理1次,但肌肤仍然松弛,缺乏弹性。经服用本发明实施例2制备的压片糖3周后,肤色润滑,细腻,上述症状彻底消失。
3.女,张某,经常上网工作,由于近日面对电脑时间较长,色斑增多,并且出现季节性蜕皮,经服用本发明实施例2制备的压片糖2周后,色斑几乎完全消失。
4.女,李某,气色差持续1年,鱼尾纹、抬头纹等逐步显现,经服用本发明实施例2制备的压片糖3周后,肤色正常,鱼尾纹、抬头纹几乎完全消失。
5.女,魏某,由于使用彩妆或化妆品,脸上干燥起皮、黯黄粗糙,并且随着年龄增长,皮肤问题越来越多,经服用本发明实施例2制备的压片糖3周后,肤色润滑,细腻,上述症状彻底消失。
6.女,黄某,由于经常晚睡、熬夜或出差,脸部出现色斑、毛孔粗大、起痘、油脂分泌旺盛,经服用本发明实施例2制备的压片糖周后,上述症状完全消失。
7.女,高某,由于使用彩妆或化妆品,脸上干燥起皮、黯黄粗糙,并且随着年龄增长,皮肤问题越来越多,经服用本发明实施例2制备的压片糖3周后,肤色润滑,细腻,上述症状彻底消失。
8.男,韩某,经常皮肤缺水、干燥,虽然每月做皮肤专业护理1次,但肌肤仍然松弛,缺乏弹性。经服用本发明实施例2制备的压片糖3周后,肤色润滑,细腻,上述症状彻底消失。
9.女,申某,由于经常晚睡、熬夜或出差,脸部出现色斑、毛孔粗大、起痘、油脂分泌旺盛,经服用本发明实施例2制备的压片糖3周后,上述症状完全消失。
10.女,贾某,经常皮肤缺水、干燥,鱼尾纹、抬头纹等逐步显现,经服用本发明实施例2制备的压片糖3周后,肤色正常,鱼尾纹、抬头纹几乎完全消失。
以上试验结果表明,本发明具有美容养颜及抗菌功效的压片糖对由不同原因造成的皮肤松弛、无弹性、色斑增多、抬头纹鱼尾纹增多等症状均具有显著治愈效果,具有较好的美容养颜效果,并且本发明产品口感好,易于服用,无异味,真正实现以食养颜。
需要说明的是:本发明实施例3-4同样具有上述实验效果,各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
实施例8本发明压片糖保质期内乳酸菌活菌含量稳定性试验
取本发明实施例2制备的压片糖于室温22-25℃、通风条件下分别储藏3个月、6个月、12个月、24个月、36个月并测定乳酸菌活菌含量,结果如表3:
表3:保质期内乳酸菌活菌含量检测结果
以上结果表明:本发明压片糖的储存稳定性较好,抗环境(温度、适度、氧气、光照、水分等)影响因素能力大,保质期内乳酸菌活菌含量损失率最大(36个月)为15%,比现有的同类产品活菌含量高、损失率低、保质期长,同时发映出压片糖的其它生物活性成分具有同样的储存稳定性。
需要说明的是:本发明实施例3-4同样具有上述实验效果,各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
实施例9本发明压片糖的感官品评试验
邀请24名人员对本发明实施例2制备的压片糖与市售两种同类相同生产日期的压片糖进行品评,感官打分,其中专业和非专业人员各12名,专业人员青年、中年、老年各4名,男女各半,非专业人员少年、青年、中年、老年各3名,男女各半;打分包括外观(20分)、质地(25分)、风味(30分)、口感(25分)四个方面,打分人员独立进行,互不影响,以保证品评结果准确。对品评结果进行了统计,均分值取近似值,保留整数,具体见表4:
表4:感官品评统计结果
注:同一行内标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),标不同大写字母表示差异极显著(P<0.01),标有相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
以上结果表明,本发明制备的压片糖从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明显优于市售压片糖,特别是外观、风味和口感极好,同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者食用。
需要说明的是:本发明实施例3-4制备的压片糖同样具有上述实验效果,各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
实施例10本发明压片糖益生性试验
将本发明实施例2制备的压片糖,用无菌水制备成活菌数为2×1010CFU/mL的益生菌溶液,于4℃保存备用;
1、取保存好的10mL益生菌溶液注入到试管1中,采用十倍逐级稀释至10-8,取1mL稀释液在平板上,将灭菌后冷却至45℃的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌)上,迅速摇匀。再将装有10mL益生菌溶液的试管2置于80-90℃水浴锅中加热15-25min,取加热后的益生菌溶液进行十倍逐级稀释至10-8,取1mL稀释液在平板上,将灭菌后冷却至45℃的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌)上并迅速摇匀。最后将加热前和加热后的平板均在35℃条件下培养24h,计算加热前后的数量。
结果表明,活菌存活率达到了88%以上。
2、模拟胃液及肠液的耐受试验:取100g/L的盐酸16.4mL加蒸馏水稀释,使pH值分别为1.5、2.5和3.5,取100mL稀盐酸溶液,分别加入1g胃蛋白酶,使其充分溶解,得模拟胃液,微孔滤膜除菌(0.22μm)备用。取磷酸二氢钾6.8g,加水500mL使溶解,用0.1moL/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8;另取胰蛋白酶10g,加水100mL使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,得模拟肠液,微孔滤膜除菌(0.22μm)备用。取1mL保存好的益生菌溶液加入到9mL的模拟胃液中(即十倍逐级稀释),并迅速在振荡器上充分混匀,然后置于30-45℃静置培养2-4h。分别在1h、2h、3h、4h的时候取出培养液并立即计数残存活菌数,与原活菌数进行比较,结果表明,活菌存活率为98%。然后取在人工胃液中消化不同时间的培养液各1mL,分别接种于9mLpH值为6.8的人工肠液中,置于30-45℃静置培养2-4h,并分别在0、3、6、24h取样,测定其活菌数,与原活菌数进行比较,结果表明活菌存活率为99%。
3、模拟胆盐的耐受试验:用胰液素制成1g/L的溶液,并在溶液中加入0.8%的猪胆盐,用10%的NaOH调整pH为8.0,然后用0.45μm微滤膜过滤并除菌。将0.5mL保存好的益生菌溶液接种到4.5mL模拟胆盐中,培养24h后得到培养液,计数残存的活菌数。将培养液在灭菌生理盐水中十倍逐级稀释至10-8,并用MRS倾注,然后置于35℃静置培养24h。结果表明活菌存活率为99%。
以上试验结果表明,本发明压片糖中的益生菌益生性(耐热性、耐pH性、耐胆盐)较强,非常适合人体胃肠环境,在模拟胃肠环境中存活率大,可有效改善胃肠功能。
需要说明的是:本发明实施例3-4制备的压片糖同样具有上述实验效果,各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
实施例11本发明压片糖小鼠肠道性能试验
将本发明实施例2制备的压片糖,用无菌水制备成活菌数为2×1010CFU/mL的益生菌溶液,于4℃保存备用;
选取普通昆明小白鼠60只,雌雄各半,18-20g,常规词养。从中随机挑选40只,每天早晨9:00灌胃盐酸林可霉素0.2mL(20mg)/只,其它作为对照组,每天同一时间灌胃等量灭菌生理盐水,连续一周,制备肠道菌群失调的小鼠模型。模型组小鼠饮食下降,未出现死亡和明显的腹泻现象,排软粪,外形正常含水分较多,垫料潮湿。将40只肠道菌群失调小鼠,随机分为2组,一组20只作为治疗组,每天灌胃保存好的益生菌溶液0.5ml(2×1010cfu/ml)/只,另20只作为自然恢复组,每天同一时间灌胃等量灭菌生理盐水,连续两周。整个试验期21天,每天观察小白鼠的生长和排便情况,于第8、21天对压片糖治疗组和自然恢复组的小鼠进行称重,计算各组体重平均增长率,结果如表5;每5天测各组小鼠粪便大肠杆菌数量,计算平均数,结果如表6。取小鼠粪便约0.1g,于无菌操作台内加入3粒玻璃珠(以0.1g粪样加0.5mL稀释液),稀释并接种麦康凯琼脂培养基,计算每克湿便中的大肠杆菌数。
表5:小鼠增重情况
分组 | 平均始重(g/只) | 平均末重(g/只) | 平均增长率(%) |
自然恢复组 | 20.69±1.33 | 27.34±1.59 | 32.14a |
治疗组 | 20.41±1.45 | 34.28±1.62 | 67.96b |
表6:小鼠粪便中大肠杆菌数的情况
压片糖治疗组小鼠体重平均增长率(67.96%)显著高于自然恢复组(32.14%);饲喂溶液后肠道大肠杆菌数量显著下降,降低97.07%,显著低于自然恢复组(24.78%),表明本发明压片糖中的益生菌在小白鼠肠道内迅速定植,形成优势菌群,并有效抑制大肠杆菌等病原菌的生长繁殖,并且定植时间长,持续、有效改善了肠道性能。
需要说明的是:本发明实施例3-4制备的压片糖同样具有上述实验效果,各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
实施例12本发明压片糖对机体免疫力的影响
1实验目的
通过运动耐力测试(小鼠游泳试验),验证本发明压片糖的提高免疫力、抗疲劳作用。
2实验材料与试剂
2.1供试药物:
市售美容养颜压片糖(G1);市售美容养颜压片糖(G2);本发明实施例2-4制备的压片糖(G3-G5)。
2.2试剂:
肝/肌糖原测试盒,购自南京建成生物制品研究所;浓硫酸(AR),南京化学试剂有限公司;生理盐水,山东长富洁晶药业有限公司。
3.实验动物
ICR小鼠,清洁级,体重18-22g,由北京医科大学比较医学中心提供,实验期间小鼠自由饮食。
4.主要仪器
铝制游泳箱(50cm×50cm×40cm),铅丝,低温高速离心机:5804R型,Eppendrof公司;水浴锅:DK-S26型,上海精宏实验设备有限公司;电子称:BS224S型,Sartorius公司;秒表,温度计
5.实验分组
5.1剂量分组及受试样品给予时间:随机将小鼠分为8组,每组10只,第1组至第5组分别给G1~G5的药物,第6组为空白对照组,给予等体积的双蒸水,每组每日均灌胃1次,灌胃体积为0.2ml/10g,连续给予受试样品30天。
5.2样品配制:第1组至第5组:称取2.25g药物样品,用蒸馏水配至150ml;空白对照组(第6组):双蒸水150ml。
6.实验方法
6.1负重游泳实验末次给药30min后,置小鼠于游泳箱中,水深不少于30cm,水温25±1℃,鼠尾根部负荷5%体重的铅皮,记录小鼠游泳开始至死亡的时间,作为小鼠游泳时间。
6.2小鼠血清尿素测定末次给药30min后,在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后摘眼球采血0.5mL(不加抗凝剂),置4℃冰箱3h,血凝固后2000r/min离心15min,取血清送北京医科大学附属医院检验科检测。
6.3肝糖原的测定末次给药30min后,在温度为25±1℃的水中不负重游泳90min,颈椎脱臼处死小鼠,用生理盐水洗净,并用滤纸吸干水分后,准确称取肝脏100mg,肝糖原检测试剂盒检测小鼠肝糖原含量。
6.4血乳酸的测定末次给药30min后采血,然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止。乳酸仪测定方法:分别在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20μL加入40μL破膜液中,立即充分振荡破碎细胞用乳酸仪测定。(血乳酸曲线下面积=5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min的血乳酸值+2×游泳后20min的血乳酸值)
7.观察指标负重游泳时间,血乳酸、尿素、肝糖原值
8.统计方法实验数据用表示,采用t检验进行组间比较
9.实验结果
9.1本发明压片糖对小鼠体重的影响
各组小鼠在给予G1~G5药物后,前、中,后期体重分别见下表所示,各组小鼠的初始体重和增重体重与对照组比较均无统计学差异(P>0.05),表明G1~G5药物均无明显的毒性。实验结果详见表7。
表7负重游泳实验小鼠的初始体重、中期体重和结束体重
9.2本发明压片糖对小鼠负重游泳时间的影响
经口给予小鼠G1~G5药物后,G1~G2药物与空白对照组比较,可以明显延长小鼠负重游泳时间,具有显著性差异(P<0.05),本发明压片糖G3~G5药物与空白对照组比较,可以显著延长小鼠负重游泳时间,具有极显著性差异(P<0.01),且明显优于G1~G2药物。结果详见表8。
表8压片糖对小鼠负重游泳时间的影响
“*”p<0.05vs空白对照;
“**”p<0.01vs空白对照;
9.3本发明压片糖对小鼠运动前后血乳酸的影响
经口给予小鼠本发明的压片糖后,本发明压片糖G3~G5药物对小鼠运动后血乳酸曲线下面积与对照组比较有统计学差异(P<0.05),G1~G2药物组小鼠血乳酸曲线下面积与对照组比较虽有所降低,但并无统计学差异(P>0.05)。结果见表9。
表9本发明压片糖对小鼠运动前后血乳酸水平的影响
“*”p<0.05vs空白对照;
9.4本发明压片糖对小鼠肝糖原的影响
经口给予小鼠G1~G5药物后,G1~G2药物与空白对照组比较,小鼠肝糖原含量均有明显的升高,具有显著性差异(P<0.05),本发明压片糖G3~G5药物与与空白对照组比较,小鼠肝糖原含量均有明显的升高,具有极显著性差异(P<0.01),且明显优于G1~G2药物。结果详见表10。
表10本发明压片糖对小鼠肝糖原含量的影响
“*”p<0.05vs空白对照;
“**”p<0.01vs空白对照;
9.5本发明压片糖对小鼠血清尿素的影响
经口给予小鼠G1~G5药物后,G1~G2药物组与空白对照组比较,小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低,具有显著性差异(P<0.05),本发明压片糖G3~G5药物与与空白对照组比较,小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低,具有极显著性差异(P<0.01),且明显优于G1~G2药物。结果详见表11。
表11本发明压片糖对小鼠血清尿素含量的影响
“*”p<0.05vs空白对照;
“**”p<0.01vs空白对照;
10.实验结论
本实验主要通过小鼠负重游泳实验,同时检测小鼠肝糖原的储备来观察本发明压片糖提高免疫力、抗疲劳的效果。初步研究结果显示如下:
1、本发明G3~G5压片糖均能延长小鼠负重游泳时间(P<0.01),且效果明显优于其它G1~G2的压片糖。
2、生化检测方面显示,本发明G3~G5压片糖各剂量组均能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),而其它G1~G2的压片糖虽然也能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量,但与对照组比较,无统计学差异(P>0.05);
3、本发明G3~G5压片糖各剂量组均能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备(P<0.01),且效果明显优于其它G1~G2的压片糖;
4、高尿酸模型发现,本发明G3~G5压片糖能显著降低小鼠游泳后血清中尿素的含量(P<0.01),且效果明显优于其它G1~G2压片糖;
11.结论
上述实验证明本发明压片糖能显著提高机体免疫力,提高小鼠的体力和耐力,降低小鼠运动后血清中尿素及乳酸的含量,且能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备,有助于缓解运动负荷引起的疲劳;能延长小鼠负重游泳至力竭的时间。
Claims (10)
1.一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,主要由以下重量组分的原料制得:蓝莓70-80份,牛乳50-60份,蔗糖20-40份,苜蓿提取物20-40份,发芽糙米20-30份,中草药提取物10-20份,蜂蜜10-18份,植物提取物8-10份,发酵剂7-9份,糊精5-9份,益生因子4-6份,保护剂3-5份,新鲜脱脂牛奶1-3份,5%淀粉溶液0.5-1份,硬脂酸镁0.5-1份,稳定剂0.1-0.3份;
所述植物提取物的制备方法,包括如下步骤:按重量份数计,称取珍珠20-40份,白芷20-30份,薰衣草20-30份,当归18-20份,丹参12-15份,玫瑰花8-12份,槐花6-10份,桃花5-8份,凌霄花5-8份,红花4-6份;置盛有0.1-0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗3-5min,沥干,将上述植物原料粉碎至粒径为2mm以下,置容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水,得混合物料,控制温度40-50℃,用乳酸调节pH值为3-4,在功率150-300W条件下进行微波提取20-40min,同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取;然后加入混合物料总重量0.5-1.5%的混合酶进行酶解,用乳酸调节pH值为5.5-6.8,酶解2-4h,最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物,乙醇和丙醇混合的质量比为1∶1-3,控制温度至60-70℃保持3-4h,过滤,得第一滤液;添加滤渣1-3倍重量的水,控制温度85-95℃保持1-2h,然后降温至25-35℃,过滤,得第二滤液;将第一滤液和第二滤液按照质量比3-5∶1-3合并,均匀混合,减压浓缩至固形物含量为15%以上,冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得植物提取物;
所述混合酶为葡聚糖酶、蛋白酶、木聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比4-6∶4-6∶2-4∶1-3∶1-3均匀混合。
2.如权利要求1所述的一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,其特征在于,所述苜蓿提取物的制备方法,包括以下步骤:将红花苜蓿、紫花苜蓿、东北大豆、洋葱、银杏、芦荟分别放入装有0.3-0.5%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于100-300W、20-40KHz清洗12-15min,沥干,按质量比10-15∶5-7∶3-5∶1-3∶1-3∶1-2均匀混合,然后于-18--23℃冷冻5-10min;立即粉碎至粒径0.5-1.5mm;置容器中并添加10-15倍重量的石油醚,放入水浴振荡器中35-45℃震荡1-3h,抽滤、烘干得混合粉;加入混合粉质量15-25倍的60%乙醇,用乳酸调节pH值为3.5-5.5,于室温下在电场强度25-35kV/cm,脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-400Hz条件下进行高压脉冲电场处理;然后于30-40℃保温1-2h,接着升温至40-50℃在功率150-300W条件下进行微波辐照提取15-20min,同时在功率200-400W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取;提取液过滤,得滤液,滤渣用1-3倍重量45-60℃水漂洗3次,漂洗液与滤液合并,均匀混合,减压浓缩至固形物含量为15%以上,冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得苜蓿提取物。
3.如权利要求1所述的一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,其特征在于,所述保护剂的制备方法,包括如下步骤:将冬黑麦、沙冬青、唐古特红景天叶、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干,按质量比8-10∶4-6∶3-5∶2-4均匀混合,加入混合物料质量0.1-1倍的pH值为3.8-4.5的乳酸润湿3-8h,于-18--22℃冷冻1-2h后立即进行粉碎,冷冻料层厚度3-5cm,粉碎物粒径0.5-3mm,接着加入粉碎物质量10-20倍的水,用乳酸调节pH值为3.5-5.5,于室温下在电场强度25-35kV/cm,脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理20-30min;然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提取15-20min,同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量3-5%的复配酶,于45-55℃酶解30-50min;酶解液过滤、滤液浓缩、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得保护剂;
所述复配酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比3-5∶3-5∶2-4∶2-4∶1-3均匀混合。
4.如权利要求1所述的一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,其特征在于,所述发芽糙米的制备方法,包括如下步骤:将糙米放在装有0.1-0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中室温、功率100-300W、频率20-30KHz超声清洗5-10min,漂洗、沥干,置16-18℃水中浸泡2-4h,同时于电场强度20-40kV/cm,脉冲时间300-500μs,脉冲频率100-300Hz进行高压脉冲电场处理,直至糙米水分含量为35-38%;浸泡后的糙米沥干,在发芽室内进行暗发芽,暗发芽温度保持23-25℃,暗发芽时间为15-17h,期间喷洒含有钠离子35-45mg/L、钾离子25-35mg/L、镁离子12-18mg/L、锌离子12-15mg/L和钙离子8-10mg/L的水溶液直至糙米水分含量至43-45%;停止喷洒,在发芽室内继续进行暗发芽,暗发芽温度保持24-26℃,暗发芽时间为13-15h;经再发芽后的糙米于频率2450MHz、功率3000W、温度50-60℃、料层厚度2-4cm条件微波辐照干燥,其中微波辐照10s,间隔10s,干燥至水分含量为12-14%,密封包装即得发芽糙米。
5.如权利要求1所述的一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,其特征在于,所述中草药提取物的制备方法,包括如下步骤:按重量份数计,称取黄芪15-17份,益母草15-17份,淫羊藿13-16份,首乌12-15份,陈皮12-15份,干姜8-12份,党参6-10份,菟丝子5-8份;置盛有0.1-0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗10-15min,沥干,将上述中草药粉碎至粒径为2mm以下,置容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水,得混合物料,控制温度70-90℃保持2-4h,接着降温至40-50℃,用乳酸调节pH值为3.5-4.5,在功率150-300W条件下进行微波提取10-15min,同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取;然后加入混合物料总重量0.5-1.5%的复合酶进行酶解,用乳酸调节pH值为5.5-6.8,酶解2-4h,最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物,乙醇和丙醇混合的质量比为1∶1-3,控制温度至60-78℃保持3-4h,过滤,得第一滤液;添加滤渣1-3倍重量的水,控制温度85-95℃保持1-3h,然后降温至25-35℃,过滤,得第二滤液;将第一滤液和第二滤液按照质量比2-4∶1-3合并,均匀混合,减压浓缩至固形物含量为15%以上,冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得中草药提取物;
所述复合酶为葡聚糖酶、木聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比2-4∶2-4∶1-3∶1-3均匀混合。
6.如权利要求1所述的一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,其特征在于,所述稳定剂由如下重量份数的原料均匀混合而成:改性膳食纤维16-20份,银耳多糖12-15份,明胶1-3份,果胶1-3份;
所述改性膳食纤维的制备方法,包括以下步骤:将菊粉、苹果纤维、小麦纤维按质量比4-6∶3-5∶2-4均匀混合,加入其质量3-7倍的水,室温200-300W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm,脉冲时间400-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min;用乳酸调节pH值为4.5-6.5,加入混合物质量0.1-0.3%的生物酶,于45-55℃酶解20-48min;酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得改性膳食纤维;
所述生物酶为纤维素酶、木聚糖酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比2-4∶1-3∶1-3∶1-2∶1-2均匀混合。
7.如权利要求1所述的一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,其特征在于,所述发酵剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成:植物乳杆菌25-35份,两歧双歧杆菌20-25份,乳双歧杆菌20-23份,嗜热链球菌20-23份,长双歧杆菌16-18份,婴儿双歧杆菌16-18份,青春双歧杆菌15-17份,保加利亚乳杆菌13-15份,嗜酸乳杆菌12-14份,干酪乳杆菌8-10份,鼠李糖乳杆菌6-8份。
8.如权利要求7所述的一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖,其特征在于,植物乳杆菌粉剂是由植物乳杆菌CGMCCNo.4200和植物乳杆菌CGMCCNO.9488按常规方法制备的粉剂按质量比6-8∶3-5均匀混合。
9.如权利要求1所述一种具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)蓝莓浆的制备:按配方称取蓝莓,将蓝莓放入盛有0.1-0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中,于室温下200-400W、35-45KHz清洗5-10min,沥干、破碎,室温下于电场强度30-40kV/cm、脉冲时间600-800μs、脉冲频率200-400Hz高压脉冲电场处理5-10min,胶磨,使出口果浆粒径达到150-250μm,然后室温下于电场强度20-30kV/cm、脉冲时间400-600μs、脉冲频率200-400Hz高压脉冲电场处理3-5min,真空脱气得原果浆;向其中加入纤维素酶、果胶酶、单宁酶和蛋白酶,使其含量分别为80-100ppm、50-70ppm、50-60ppm和25-35ppm,于45-55℃酶解1-3h,升温至85-95℃保温3-5min,立即降温至室温,80-100目筛网过滤,滤液减压浓缩至固形物含量至30-40%即得蓝莓浆;
2)蓝莓酸奶的制备:牛乳经净乳后室温下于电场强度30-40kV/cm,脉冲时间400-600μs,脉冲频率300-500Hz进行高压脉冲电场杀菌10-20min,与蔗糖、中草药提取物、蜂蜜、稳定剂和步骤1)得到的蓝莓浆均匀混合,充分搅拌溶解后在55-65℃、18-22MPa下均质,然后降温至32-35℃于电场强度20-30kV/cm,脉冲时间200-400μs,脉冲频率200-400Hz进行高压脉冲电场杀菌5-10min,调整pH值为6.0-7.0,加入发酵剂质量的30-40%恒温发酵0.5-1h,接着以0.8-1.0℃/min的速率升温至40-45℃,加入发酵剂质量的60-70%恒温发酵2-4h,最后以0.6-0.8℃/min的速率升温至50-55℃,继续发酵至酸奶pH值为3.5-4.5终止发酵即得蓝莓酸奶;
3)蓝莓酸奶粉的制备:将新鲜脱脂牛奶和质量比为5%的淀粉溶液分别于121℃灭菌8-10min,立即降温至45-55℃,然后与保护剂均匀混合,充分溶解后加入步骤2)得到的蓝莓酸奶中,按常规方法冷冻干燥即得蓝莓酸奶粉;
4)压片:将发芽糙米于40-60℃粉碎至粒径0.1-0.3mm,与苜蓿提取物、植物提取物、糊精、益生因子、硬脂酸镁和步骤3)得到的蓝莓酸奶粉均匀混合,然后过50-100目筛,经多冲旋转式压片机制成压片糖果,即得具有美容养颜及抗菌功效的蓝莓压片糖。
10.如权利要求9所述的制备方法,其特征在于,步骤3)所述淀粉溶液中淀粉为糯玉米淀粉。
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