CN103435546A

CN103435546A - 制备异喹啉化合物的方法

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Publication number: CN103435546A
Application number: CN2013103028220A
Authority: CN
Inventors: 迈克尔·道格拉斯·汤普森; 朴贞玟; 迈克尔·P·阿伦德
Original assignee: Fibrogen Inc
Current assignee: FIBROGEN (CHINA) MEDICINE TECHNOLOGY DEVELOPMENT Co.,Ltd.
Priority date: 2012-07-16
Filing date: 2013-07-15
Publication date: 2013-12-11
Anticipated expiration: 2033-07-15
Also published as: EP2872487A1; HUS2200030I1; JP2015524409A; JP6196671B2; ES2631655T3; HUE034409T2; US20160194285A1; NZ704660A; PT2872487T; CY2022018I1; CN106083719A; CY2022018I2; KR102145272B1; US9340511B2; KR20150058147A; EP2872487B1; CA2879238C; EP3219706A1; SG11201500234YA; DK2872487T3

Abstract

本发明涉及制备异喹啉化合物和由此获得的中间体化合物的方法。这样的化合物可以用于制备能够降低HIF羟化酶酶活性的化合物和组合物，从而提高缺氧诱导因子(HIF)的稳定性和/或活性。

Description

制备异喹啉化合物的方法

技术领域

本发明涉及制备异喹啉化合物和由此获得的中间体化合物的方法。

背景技术

已知异喹啉化合物能够有效地治疗和预防与HIF有关的病症和紊乱，包括由缺血和/或缺氧造成的贫血和组织损伤(参见例如Robinson等人(2008)Gastroenterology134(1)：145–155；Rosenberger等人(2008)Nephrol Dial Transplant23(11)：3472-3478)。具体地，此处所公开的化合物和方法可以用作或者用于制备抑制HIF羟化酶活性的异喹啉化合物，由此提高缺氧诱导因子(HIF)的稳定性和/或活性，其可以用于治疗和预防与HIF有关的病症和紊乱。

迄今为止，已经公开了许多制备取代的异喹啉化合物的合成路线。在1966年，Caswell等人(Heterocyclyl Chem1966，(3)，328-332)报道了优选于高温(105°C)在密封反应容器中，经由邻苯二酰亚氨乙酸酯与钠在甲醇中的Gabriel-Coleman重排反应，以合成4-羟基-3-羰基甲氧基-1(2H)-异喹啉及其6-和8-甲氧基取代的衍生物。这样的方法确实提供了一种过量的区域异构体，但取代度却是通过取代基的电子性质来支配的，而不是本领域技术人员的期望。

在1978年，Suzuki等人(Synthesis1978(6)，461-462)报道了经由4-甲氧基羰基-1,3-噁唑(其由邻苯二甲酸酐和异氰基乙酸甲酯来制备)的酸催化的开环和随后分子内的环化以合成4-羟基-3-碳甲氧基-1(2H)-异喹啉。Suzuki等人还报道了合成硝基取代的4-羟基-3-甲酯基-1(2H)-异喹啉，但是，其中公开的方法提供了6-和7-硝基异喹啉化合物的混合物。

Weidmann等人(US专利No.6093730)报道了如下不同的取代的异喹啉-3-酰胺的合成：色谱法分离由Caswell等人合成提供的4-羟基-3-甲酯基-1(2H)-异喹啉异构体，随后水解所述甲酯，将相应的酸活化成酸卤化物，并且与甘氨酸甲酯缩合。

在US专利7629357和US专利7928120中已经报道了制备取代的异喹啉化合物的其他方法。US专利7928120教导了如下取代的氰基异喹啉化合物的制备：由任选地取代的2-甲基苯甲酸酯经由与卤化试剂反应以提供相应的2-(卤甲基)苯甲酸酯，随后与N-保护的甘氨酸酯反应，最终使用碱和任选的氧化剂进行环化/芳化。这样的方法优于上文所述文献之处在于，所公开的方法仅仅提供了5-、6-、7-或者8-取代的异喹啉化合物的单个异构体。但是，仅仅提供了在异喹啉的1-位的卤素和氰基取代基。US专利7629357公开了用于合成在不同的取代的异喹啉化合物(包括1-甲基异喹啉化合物)的1-位不同的取代基的方法。US专利7629357的1-甲基异喹啉化合物是如下来制备的：首先将相应的1,4-二羟基异喹啉化合物与氯氧化磷或者溴氧化磷反应以提供1-氯或者1-溴异喹啉化合物，随后使用三甲基环硼氧烷与四(三苯基膦)钯或者过量的正丁基锂和随后的碘化甲烷进行甲基化。

发明概述

本发明涉及大规模安全和有效地合成不同取代的异喹啉化合物以及由此获得的中间体化合物的方法。具体地，本文公开的方法提供了期望的5-、6-、7-或者8-取代的异喹啉化合物作为单一区域异构体，而无需色谱法分离，并且不使用试剂如氯氧化磷、溴氧化磷、正丁基锂或者三甲基环硼氧烷，其在大规模使用时会是不安全的和/或昂贵的。

还提供了通过所述方法所获得的新的中间体化合物。本文公开的化合物可以用作或者用于制备抑制HIF羟化酶活性的异喹啉化合物，由此提高缺氧诱导因子(HIF)的稳定性和/或活性。这样的化合物能够用于治疗与缺血和缺氧有关的紊乱，和用于治疗红细胞生成素有关的紊乱，包括贫血等(参见例如US专利No.7629357)。

在一个方面，本发明涉及一种制备式I的化合物或者其立体异构体或其立体异构体混合物的方法：

所述方法包括在足以产生式I化合物的条件下，将式II的化合物与式III化合物接触：

其中

Z是O、NR¹或S；

R¹选自氢和烷基；

R²选自氢和未取代的或者用独立地选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中一种或多种取代基取代的烷基；

R³和R⁴独立地选自氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸和-X¹R⁸；

其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

每个R⁸独立地选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，条件是当X¹是–SO-或–SO₂-时，则R⁸不是氢；和

R⁹选自氢、烷基和芳基；

或者R³和R⁴与侧接到其上的碳原子一起形成环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基；

R⁵和R⁶独立地选自氢、卤素、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基和–X²R¹⁰；

其中X²是氧、-S(O)ⁿ-或–NR¹³-；

n是0、1或2；

R¹⁰选自烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基；和

R¹³选自氢、烷基和芳基；

或者当X²是–NR¹³-时，则R¹⁰和R¹³与和它们连接的氮原子一起可以结合以形成杂环基或取代的杂环基基团；和

每个R¹¹独立地选自烷基、苄基或芳基，或者两个R¹¹与和它们连接的氮原子一起形成4-8元杂环基或杂芳基。

在另一个方面，本发明涉及一种制备式IV的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

所述方法包括在足以产生式IV化合物的条件下，将式I的化合物与下面之一接触：

(a)式

的化合物、随后与式

的化合物；

(b)式R¹²-X³的化合物、随后与式

的化合物；或者

(c)式V的化合物：

其中

X³是卤素；

R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基，或者当存在两个R¹²时，两个R¹²与和它们连接的碳原子一起形成4-8元杂环基；和

Z、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹³、n、X¹和X²如上述式I中所定义。

在另一个方面，本发明涉及一种制备式VI的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

所述方法包括在足以产生式VI化合物的条件下，转化式IV的化合物：

其中

Z、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹³、n、X¹和X²如上述式I中所定义；和

R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基。

在另一个方面，本发明涉及式VIII的化合物或者其盐、酯、立体异构体或立体异构体混合物：

其中：

Z、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹³、n、X¹和X²如上述式I中所定义；

R⁷是–N(R¹¹)(R¹¹)或–OC(O)R¹²；和

R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基；

条件是所述化合物不是1-二甲基氨基甲基-4-羟基-7-苯基硫基-异喹啉-3-甲酸丁酯。

本发明另外的实施方案将在整个文件中描述。

发明详述

在描述化合物和方法之前，应当理解本发明不限于所述的具体化合物、组合物、方法、方案、细胞系、检测和试剂，因为它们可以变化。还应当理解此处所述的术语目的是描述本发明具体的实施方案，并非旨在限制所附权利要求所述的本发明范围。

定义

应当注意，如本文所用，和如所附权利要求中所用，单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括复数指代，除非上下文另有明确指示。

除非另有定义，此处所用的全部科技术语具有本发明所属领域的技术人员通常所理解的相同的含义。虽然类似或者等价于本文所述那些的任何方法和材料可以用于本发明的实践或者测试，但是现在描述的方法、装置和材料是优选的。本文所引用的全部公开文献以引用整体方式全部并入于此，目的是用于描述和公开文献中报道的可能与本发明一起使用的方法、试剂和工具。这并不意味着现有的发明提前公开了本发明的内容。

除非另有指示，本发明的实践将使用处于本领域技能中的化学、生物化学、分子生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学和药理学的常规方法。这样的技术已在文献中被充分解释。参见例如Gennaro，A.R.，ed.(1990)Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Co.；Colowick，S.等人，eds.，Methods In Enzymology，Academic Press，Inc.；D.M.Weir，和C.C.Blackwell，eds.(1986)Handbook of Experimental Immunology，第I-IV卷，Blackwell Scientific Publications；Maniatis，T.等人，eds.(1989)Molecular Cloning：A Laboratory Manual，第2版，第I-III卷，Cold Spring Harbor Laboratory Press；Ausubel，F.M.等人，eds.(1999)Short Protocols in Molecular Biology，第4版，John Wiley & Sons；Ream等人，eds.(1998)Molecular Biology Techniques：An Intensive Laboratory Course，Academic Press；Newton & Graham eds.(1997)PCR(Introduction to Biotechniques Series)，第2版，Springer Verlag。

术语“烷基”指的是具有1-10个碳原子，更具体地1-5个碳原子和甚至更具体地1-3个碳原子的饱和单价烃基。这个术语是通过基团如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、正戊基等来示例的。

术语“取代的烷基”指的是具有1-10个碳原子，更具体地1-5个碳原子的烷基，并且具有1-5个取代基或1-3个取代基，所述取代基各自独立地选自烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰基氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、氨基羰基氨基、氨基硫羰基氨基、氨基羰氧基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、芳氧基芳基、取代的芳氧基芳基、氰基、卤素、羟基、硝基、氧代(oxo)、硫代(thioxo)、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、硫代(thio)、烷硫基、取代的烷硫基、芳硫基、取代的芳硫基、环烷基硫基、取代的环烷基硫基、杂芳基硫基、取代的杂芳基硫基、杂环硫基、取代的杂环硫基、磺酰基、取代的磺酰基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环、取代的杂环、环烷氧基、取代的环烷氧基、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂环氧基、取代的杂环氧基、氧羰基氨基、氧硫羰基氨基、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂-取代的烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂-取代的芳基、-OS(O)₂-杂芳基、-OS(O)₂-取代的杂芳基、-OS(O)₂-杂环、-OS(O)₂-取代的杂环和-OSO₂-NR⁴⁰R⁴⁰、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-烷基、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-取代的烷基、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-芳基、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-取代的芳基、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-杂芳基、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-取代的杂芳基、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-杂环和-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-取代的杂环，其中每个R⁴⁰独立地选自氢或者烷基。这个基团示例为基团例如三氟甲基、苄基、吡唑-1-基甲基等。

术语“烷氧基”指的是基团“烷基-O-”，其包括例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基等。

术语“取代的烷氧基”指的是基团“取代的烷基-O-”。

术语“酰基”指的是基团H-C(O)-、烷基-C(O)-、取代的烷基-C(O)-、烯基-C(O)-、取代的烯基-C(O)-、炔基-C(O)-、取代的炔基-C(O)-、环烷基-C(O)-、取代的环烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、取代的芳基-C(O)-、杂芳基-C(O)-、取代的杂芳基-C(O)、杂环-C(O)-和取代的杂环-C(O)-，条件是所述杂环或者取代的杂环的氮原子不连接到-C(O)-基团上，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环如本文所定义。

术语“氨基酰基”或“酰胺”或者前缀“氨基甲酰”、“甲酰胺”、“取代的氨基甲酰”或者“取代的甲酰胺”指的是基团-C(O)NR⁴²R⁴²，其中每个R⁴²独立地选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环；或者其中每个R⁴²结合以与氮原子一起形成杂环或者取代的杂环，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环如本文所定义。

术语“酰氧基”指的是基团烷基-C(O)O-、取代的烷基-C(O)O-、烯基-C(O)O-、取代的烯基-C(O)O-、炔基-C(O)O-、取代的炔基-C(O)O-、芳基-C(O)O-、取代的芳基-C(O)O-、环烷基-C(O)O-、取代的环烷基-C(O)O-、杂芳基-C(O)O-、取代的杂芳基-C(O)O-、杂环-C(O)O-和取代的杂环-C(O)O-，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环如本文所定义。

术语“烯基”指的是乙烯基不饱和单价烃基，其具有2-6个碳原子或者2-4个碳原子，且具有至少1个或者1-2个位点的乙烯基(>C=C<)不饱和度。这样的基团示例为乙烯基(乙烯-1-基)、烯丙基、丁-3-烯基等。适当的，这个术语包括E(反式)和Z(顺式)异构体二者。它还包括E和Z组分二者的混合物。

术语“取代的烯基”指的是烯基，其具有1-3个取代基或者1-2个取代基，所述取代基选自烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰基氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环。适当的，这个术语包括E(反式)和Z(顺式)异构体二者。它还包括E和Z组分二者的混合物。

术语“炔基”指的是乙炔不饱和单价烃基，其具有2-6个碳原子或者2-3个碳原子，且具有至少1个或者1-2个位点的乙炔(-C≡C-)不饱和度。这个基团示例为乙炔-1-基、丙炔-1-基、丙炔-2-基等。

术语“取代的炔基”指的是具有1-3个取代基或者1-2个取代基的炔基，所述取代基选自烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰基氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环。这个基团示例为例如苯基乙炔基等基团。

术语“氨基”指的是基团–NH₂。

术语“取代的氨基”指的是基团–NR⁴¹R⁴¹，其中每个R⁴¹独立地选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环、取代的杂环、磺酰基和取代的磺酰基，或者R⁴¹基团可以与氮原子结合在一起以形成杂环或取代的杂环；条件是并非两个R⁴¹基团都是氢。这个基团示例为苯基氨基、甲苯基氨基等。这个基团进一步示例为例如(乙酸-2-基)氨基等基团。

术语“酰基氨基”指的是基团–NR⁴⁵C(O)烷基、-NR⁴⁵C(O)取代的烷基、-NR⁴⁵C(O)环烷基、-NR⁴⁵C(O)取代的环烷基、-NR⁴⁵C(O)烯基、-NR⁴⁵C(O)取代的烯基、-NR⁴⁵C(O)炔基、-NR⁴⁵C(O)取代的炔基、-NR⁴⁵C(O)芳基、-NR⁴⁵C(O)取代的芳基、-NR⁴⁵C(O)杂芳基、-NR⁴⁵C(O)取代的杂芳基、-NR⁴⁵C(O)杂环和-NR⁴⁵C(O)取代的杂环，其中R⁴⁵是氢或者烷基，且其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环如本文所定义。

术语“氧羰基氨基”指的是基团–NR⁴⁶C(O)O-烷基、-NR⁴⁶C(O)O-取代的烷基、-NR⁴⁶C(O)O-链烯基、-NR⁴⁶C(O)O-取代的链烯基、-NR⁴⁶C(O)O-炔基、-NR⁴⁶C(O)O-取代的炔基、-NR⁴⁶C(O)O-环烷基、-NR⁴⁶C(O)O-取代的环烷基、-NR⁴⁶C(O)O-芳基、-NR⁴⁶C(O)O-取代的芳基、-NR⁴⁶C(O)O-杂芳基、-NR⁴⁶C(O)O-取代的杂芳基、-NR⁴⁶C(O)O-杂环和-NR⁴⁶C(O)O-取代的杂环，其中R⁴⁶是氢或者烷基，和其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环如本文所定义。

术语“氧硫羰基氨基”指的是基团–NR⁴⁶C(S)O-烷基、-NR⁴⁶C(S)O-取代的烷基、-NR⁴⁶C(S)O-烯基、-NR⁴⁶C(S)O-取代的烯基、-NR⁴⁶C(S)O-炔基、-NR⁴⁶C(S)O-取代的炔基、-NR⁴⁶C(S)O-环烷基、-NR⁴⁶C(S)O-取代的环烷基、-NR⁴⁶C(S)O-芳基、-NR⁴⁶C(S)O-取代的芳基、-NR⁴⁶C(S)O-杂芳基、-NR⁴⁶C(S)O-取代的杂芳基、-NR⁴⁶C(S)O-杂环和-NR⁴⁶C(S)O-取代的杂环，其中R⁴⁶是氢或者烷基，且其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环如本文所定义。

术语“氨基羰氧基”或者前缀“氨基甲酰氧基”或者“取代的氨基甲酰氧基”指的是基团-OC(O)NR⁴⁷R⁴⁷，其中每个R⁴⁷独立地选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环；或者其中每个R⁴⁷结合以与氮原子一起形成杂环或者取代的杂环，且其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环如本文所定义。

术语“氨基羰基氨基”指的是基团–NR⁴⁹C(O)N(R⁴⁹)₂，其中每个R⁴⁹独立地选自氢和烷基。

术语“氨基硫羰基氨基”指的是基团–NR⁴⁹C(S)N(R⁴⁹)₂，其中每个R⁴⁹独立地选自氢和烷基。

术语“芳基(aryl)”或者“芳基(Ar)”指的是单价芳族6-14个碳原子碳环基团，具有单环(例如苯基)或者多个稠合环(例如萘基或者蒽基)，所述稠合环可以是或者可以不是芳族的(例如2-苯并噁唑啉酮、2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮-7-基等)，条件是连接点是芳基。优选的芳基包括苯基和萘基。

如本文所定义，术语“取代的芳基”指的是用1-4个，特别是1-3个选自下组的取代基取代的芳基：羟基、酰基、酰基氨基、酰氧基、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、脒基(-C(=NH)-氨基或者取代的氨基)、氨基、取代的氨基、氨基酰基、氨基羰氧基、氨基羰基氨基、氨基硫羰基氨基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、环烷氧基、取代的环烷氧基、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂环氧基、取代的杂环氧基、羧基、羧基酯、氰基、硫代(thio)、烷硫基、取代的烷硫基、芳硫基、取代的芳硫基、杂芳基硫基、取代的杂芳基硫基、环烷基硫基、取代的环烷基硫基、杂环硫基、取代的杂环硫基、环烷基、取代的环烷基、胍基(-NH-C(=NH)-氨基或者取代的氨基)、卤素、硝基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环、取代的杂环、氧羰基氨基、氧硫羰基氨基、磺酰基、取代的磺酰基、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂-取代的烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂-取代的芳基、-OS(O)₂-杂芳基、-OS(O)₂-取代的杂芳基、-OS(O)₂-杂环、-OS(O)₂-取代的杂环和-OSO₂-NR⁵¹R⁵¹、-NR⁵¹S(O)₂-NR⁵¹-烷基、-NR⁵¹S(O)₂-NR⁵¹-取代的烷基、-NR⁵¹S(O)₂-NR⁵¹-芳基、-NR⁵¹S(O)₂-NR⁵¹-取代的芳基、-NR⁵¹S(O)₂-NR⁵¹-杂芳基、-NR⁵¹S(O)₂-NR⁵¹-取代的杂芳基、 -NR⁵¹S(O)₂-NR⁵¹-杂环、-NR⁵¹S(O)₂-NR⁵¹-取代的杂环，其中每个R⁵¹独立地选自氢或者烷基，其中每个术语如本文所定义。这个基团示例为例如4-氟苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、4-叔丁基苯基、4-三氟甲基苯基、2-三氟甲氧基苯基、3-三氟甲氧基苯基、4-三氟甲氧基苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2-氯-6-氟苯基、2,4-二氯苯基、3,5-二氟苯基、4-甲氧基苯基、3-氰基苯基、4-氰基苯基、4-苯氧基苯基、4-甲烷磺酰基苯基、联苯-4-基等基团。

术语“芳氧基”指的是基团芳基-O-，其包括例如苯氧基、萘氧基等。

术语“取代的芳氧基”指的是取代的芳基-O-基团。

术语“芳氧基芳基”指的是基团-芳基-O-芳基。

术语“取代的芳氧基芳基”指的是用1-3个取代基在任一个或者两个芳基环上取代的芳氧基芳基，所述芳环如上述取代的芳基中所定义。

术语“羧基”指的是–COOH或者其盐。

术语“羧基酯”指的是基团-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-烯基、-C(O)O-取代的烯基、-C(O)O-炔基、–C(O)O-取代的炔基、-C(O)O-环烷基、-C(O)O-取代的环烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-C(O)O-杂环和-C(O)O-取代的杂环。

术语“氰基”指的是基团–CN。

术语“环烷基”指的是饱和的或者不饱和的但非芳族的成环烷基，具有3-10、3-8或者3-6个碳原子，其具有单环或者多环，包括例如金刚烷基、环丙基、环丁基、环戊基、环辛基、环己烯基等。

术语“取代的环烷基”指的是具有1-5个选自下组的取代基的环烷基：氧代(oxo)(=O)、硫代(thioxo)(=S)、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰基氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环。

术语“环烷氧基”指的是-O-环烷基。

术语“取代的环烷氧基”指的是-O-取代的环烷基。

术语“卤素(halo或halogen)”指的是氟、氯、溴或者碘。

术语“羟基”指的是基团–OH。

术语“杂芳基”指的是1-15个碳原子或者1-10个碳原子的芳族环，并且所述环内具有选自氧、氮和硫的1-4个杂原子。这样的杂芳基可以具有单个环(例如吡啶基、呋喃基或者噻吩基)或者多个稠合环(例如中氮茚基(indolizinyl)或苯并噻吩基)，条件是连接点是通过含有杂原子的环，并且所述环是芳族的。氮和/或硫环原子可以任选地被氧化以提供N-氧化物或者亚砜和砜衍生物。杂芳基的实例包括但不限于：吡啶基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、吲哚基、硫苯基、噻吩基和呋喃基。

术语“取代的杂芳基”指的是用选自与取代的芳基所定义相同的取代基基团的1-3个取代基取代的杂芳基。这个基团示例为基团例如5-氟-吡啶-3-基、1-苄基-1H-[1,2,3]三唑-4-基、5-溴-呋喃-2-基、三氟甲基-2H-吡唑-3-基等。

术语“杂芳氧基”指的是基团-O-杂芳基，“取代的杂芳氧基”指的是基团-O-取代的杂芳基。

术语“杂环基”和“杂环”在此是互换使用的。如本文所用，该术语指的是饱和或不饱和(但非芳族)基团，其具有单环或者多个稠合环，具有1-10个碳原子，且在所述环中具有选自氮、硫或氧的1-4个杂原子，其中在稠环体系中，一个或多个的所述环可以是芳基或者杂芳基，条件是连接点处于杂环上。氮和/或硫环原子可以任选地被氧化以提供N-氧化物或者亚砜和砜衍生物。

术语“取代的杂环基”或者“取代的杂环”指的是用与取代的环烷基定义相同的1-3个取代基取代的杂环基基团。

杂环基和杂芳基的实例包括但不限于吖丁啶基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、中氮茚基、异吲哚基、吲哚基、二氢吲哚基、吲唑基、嘌呤基、喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、酞嗪基、萘基吡啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌嗪基、喋啶基、咔唑基、咔啉基、菲啶基、吖啶基、菲咯啉基、异噻唑基、吩嗪基、异噁唑基、吩噁嗪基、吩噻嗪基、咪唑烷基、咪唑啉基、哌啶基、哌嗪基、吲哚啉基、邻苯二甲酰亚胺基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、4,5,6,7-四氢苯并[b]硫苯基、噻唑基、噻唑啉基、苯硫基、苯并[b]苯硫基、吗啉基、硫代吗啉基(也指的是硫吗啉基)、哌啶基、吡咯烷基、四氢呋喃基等。

术语“硝基”指的是基团–NO₂。

术语“氧代(oxo)”指的是原子(=O)或者原子(-O^-)。

术语“磺酰基”指的是基团-S(O)₂H。术语“取代的磺酰基”指的是基团-SO₂-烷基、-SO₂-取代的烷基、-SO₂-烯基、-SO₂-取代的烯基、-SO₂-炔基、-SO₂-取代的炔基、-SO₂-环烷基、-SO₂-取代的环烷基、-SO₂-环烯基、-SO₂-取代的环烯基、-SO₂-芳基、-SO₂-取代的芳基、-SO₂-杂芳基、-SO₂-取代的杂芳基、-SO₂-杂环、-SO₂-取代的杂环，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基如本文所定义。取代的磺酰基包括基团例如甲基-SO₂-、苯基-SO₂-和4-甲基苯基-SO₂-。

术语“杂环氧”指的是基团-O-杂环，“取代的杂环氧”指的是基团-O-取代的杂环。

术语“硫代(thio)”或者“巯基（mercapto）”指的是基团-SH。

术语“烷基硫基”、“烷硫基”或者“硫醚”指的是基团-S-烷基，其中烷基定义同上。

术语“取代的烷硫基”、“取代的烷基硫基”或者“取代的烷硫基”指的是基团-S-取代的烷基，其中取代的烷基定义同上。

术语“环烷基硫基”或者“环烷基硫基”指的是基团-S-环烷基，其中环烷基定义同上。

术语“取代的环烷基硫基”指的是基团-S-取代的环烷基，其中取代的环烷基定义同上。

术语“芳硫基”或者“芳基硫基”指的是基团-S-芳基，和“取代的芳硫基”指的是基团-S-取代的芳基，其中芳基和取代的芳基定义同上。

术语“杂芳基硫基”或者“杂芳基硫基”指的是基团-S-杂芳基，和“取代的杂芳基硫基”指的是基团-S-取代的杂芳基，其中杂芳基和取代的杂芳基定义同上。

术语“杂环硫基”或者“杂环硫基”指的是基团-S-杂环，和“取代的杂环硫基”指的是基团-S-取代的杂环，其中杂环和取代的杂环定义同上。

术语“酯”指的是本文公开的化合物，其包括基团–COOR⁵⁴，其中R⁵⁴是烷基或者取代的烷基。

术语“胺”指的是这样的有机化合物，其包括具有孤对电子的碱性氮原子。胺是氨的衍生物，其中一个或多个氢原子已经被取代基如烷基或芳基所代替。所述碱性氮原子也可以是杂环或者杂芳基环的一部分。

应当理解，在全部上面定义的取代基团中，通过用另外的取代基将取代基定义为它们本身而达到的聚合物(例如具有取代的芳基作为取代基的取代的芳基，其本身是用取代的芳基取代的，等等)并不打算包括在其中。同样也不包括的是无限数目的取代基，无论所述取代基是相同的还是不同的。在这样的情况中，这样的取代基最大的数目是3个。以上每个定义因此受到一定限定的限制，例如取代的芳基限于-取代的芳基-(取代的芳基)-取代的芳基。

同样应当理解，上面的定义并非打算包括不允许的取代形式(例如用5个氟基取代的甲基，或者在乙烯基或者乙炔基不饱和度的α位置的羟基)。这样的不允许的取代形式是本领域技术人员公知的。

术语化合物和分子是互换使用的。当使用措词“分子”或“化合物”时，本发明所预期的其他形式是盐、前药、溶剂化物、互变异构体、立体异构体和立体异构体混合物。在一些实施方案中，所述盐是药用盐。

术语“药用”指的是从毒物学和/或安全的观点来说对患者(例如人类患者)可以接受的性能和/或物质。

术语“盐”表示本发明化合物的盐，其可以用相对无毒的酸或碱来制备，这取决于在本文所述的化合物上所发现的具体的取代基。当本发明的化合物包含相对酸性的官能度(例如-COOH基团)时，碱加成盐可以通过将所述化合物(例如中性形式的这样的化合物)与足够量的期望的碱(纯的或者在合适的惰性溶剂中)接触来获得。药用碱加成盐的实例包括锂、钠、钾、钙、铵、有机氨基、镁和铝盐等。当本发明的化合物包含相对碱性的官能度(例如胺)时，酸加成盐可以例如通过将所述化合物(例如中性形式的这样的化合物)与足够量的期望的酸(纯的或者在合适的惰性溶剂中)接触来获得。药用酸加成盐的实例包括衍生自无机酸如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、单氢碳酸、磷酸、二磷酸、单氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、单氢硫酸、氢碘酸等的那些，以及衍生自相对无毒的有机酸如甲酸、乙酸、丙酸、异丁酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲烷磺酸、2-羟乙基磺酸、水杨酸、硬脂酸等的盐。还包括氨基酸的盐例如精氨酸盐等，和有机酸的盐如葡糖醛酸或者半乳糖醛酸等(参见例如Berge 等人，Journal of Pharmaceutical Science，1977，66：1-19)。本发明某些特殊化合物同时包含碱性和酸性官能度二者，其使得所述化合物转化成碱或酸加成盐。另外，抗衡离子可以使用本领域已知的常规方法来交换。

所述中性形式的化合物可以例如通过将所述盐与碱或酸接触，并且以常规形式分离母体化合物来再生。所述母体形式的化合物可以与不同的盐形式具有某些不同的物理性能，例如在极性溶剂中的溶解度，但在其他方面，为本发明公开的目的，所述盐等价于母体形式的化合物。

当化合物包括带负电荷的氧原子“O^-”例如在“-COO^-”中时，则所述式表示任选地包括质子或者有机或无机阳离子抗衡离子(例如Na⁺)。在一个实例中，所形成的盐形式的化合物是药用的。此外，当本发明的化合物包括酸性基团例如羧酸基团如写作取代基“–COOH”、“-CO₂H”或者“-C(O)₂H”时，则该式表示任选地包括相应的“脱质子化”形式的酸性基团例如分别是“-COO^-”、“-CO₂ ^-”或“-C(O)₂ ^-”。

同样的，当化合物包括带正电荷的氮原子“N⁺”时，则所述式表示任选地包括有机或无机阴离子抗衡离子(例如Cl^-)。在一个实例中，所形成的盐形式的化合物是药用的。此外，当本发明的化合物包括碱性基团例如胺时，则所述式表示任选地包括相应的“质子化”形式的碱性基团例如“NH⁺”。

本发明的化合物可以以全部的互变异构体形式存在，因此全部的互变异构体形式和互变异构体混合物包括在其中公开的化合物中。

本发明的化合物还可以以具体的几何形状或立体异构体形式存在。本发明预期全部这样的化合物，包括顺式-和反式-异构体、(-)-和(+)-对映异构体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体、其外消旋混合物及其的其他混合物，如富含对映异构的或者非对映异构的混合物，落入本发明的范围内。另外非对称碳原子可以存在于取代基例如烷基中。全部这样的异构体及其混合物旨在包括在本发明中。当本文所述的化合物包含烯属双键或者其他几何不对称中心时，并且除非另有明确指示，否则其目的是所述化合物包括E和Z几何异构体二者。

光学活性的(R)-和(S)-异构体和d和l异构体可以使用手性合成纤维或者手性试剂来制备，或者使用常规技术来分解。外消旋物的拆分可以例如通过常规方法来完成，例如在拆分剂存在下结晶；使用例如手性HPLC色谱柱进行色谱分析；或者用拆分剂衍生所述外消旋混合物以产生非对映异构体，经由色谱法分离所述非对映异构体，和除去拆分剂以产生富含对映异构体形式的初始化合物。可以重复上述任一程序来提高化合物的对映异构体纯度。如果例如本发明的具体对映异构体化合物是期望的，则它可以通过非对称合成或者通过用手性助剂衍生来制备，其中分离所形成的非对映异构体混合物，并且裂化所述辅助基团以提供纯的期望的对映异构体。可选择地，在其中所述分子包含碱性官能团如氨基或者酸性官能团如羧基的情况中，非对映异构体盐可以用适当的光学活性酸或碱来形成，随后通过本领域已知的分步结晶或者色谱法手段来拆分因此形成的非对映异构体，和随后回收纯的对映异构体。另外，对映异构体和非对映异构体的分离经常使用色谱法来完成，其使用手性固定相，任选地与化学衍生(例如由胺来形成氨基甲酸盐)相组合。

术语“反应条件”旨在表示化学反应在其下进行的物理和/或环境条件。反应条件的实例包括但不限于下面的一种或多种：反应温度、溶剂、pH、压力、反应时间、反应物摩尔比、碱或酸，或者催化剂的存在等。反应条件可以在其中使用所述条件的具体化学反应之后命名，例如偶合条件、氢化条件、酰基化条件、还原条件等。大部分反应的反应条件通常是本领域技术人员已知的或者能够通过文献容易的获得。还可以预期的是所述反应条件可以包括除了具体反应所列的那些之外的试剂。

术语“氨基保护性基团”指的是那些有机基团，其目的是保护氮原子抗在合成方法过程中不期望的反应，并且包括但不限于甲硅烷基醚，如2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基(SEM)醚，或者烷氧基甲基醚如甲氧基甲基(MOM)醚、叔丁氧基甲基(BUM)醚、苄氧基甲基(BOM)醚或甲氧基乙氧基甲基(MEM)醚。另外的保护性基团包括叔丁基、乙酰基、苄基、苄氧基羰基(碳苄氧基，CBZ)、对甲氧基苄氧基羰基、对硝基苄氧基羰基、叔丁氧基羰基(BOC)、三氟乙酰基等。

某些保护性基团会优于其他保护性基团，这归因于它们的便利性或者相对易于除去，或者归因于它们在随后的加工步骤中的立体效应。另外合适的氨基保护性基团在T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protecting Groups in Organic Synthesis，第三版，Wiley，纽约，1999和其中引用的参考文献教导，在此以引用方式将其全部并入本文。

术语“无水反应条件”旨在表示其中排除水的反应条件。这样的条件是本领域技术人员已知的，并且通常包括一种或多种的干燥或者蒸馏的溶剂和试剂，干燥的反应容器，和/或存在着干燥剂如活化的分子筛、硫酸镁、硫酸钠等。

术语“氢化条件”或者“氢化反应条件”旨在表示用于形成一种或多种新的C-H键的合适条件和催化剂。氢化条件或氢化反应条件通常包括催化剂例如基于铂族金属(铂、钯、铑和钌)的那些(例如Pd/C或PtO₂)。

术语“惰性气氛”旨在表示这样的气氛，其包括在期望的反应方法过程中不与反应物和试剂反应的气体。通常惰性气氛不包括氧气和/或湿气。示例性的气体包括氮气和氩气。

术语“在压力下”旨在表示在大于1大气压的压力下进行的反应条件。这样的反应可以在帕而氢化器中或者在密封反应容器(即，螺帽封闭的烧瓶)中进行，其中反应是在加热下进行的，以使得溶剂蒸发以提高所述反应容器中的压力。

术语“酸”旨在表示这样的化学物质，其能够贡献质子或者接受来自另一物质的一对电子。酸的实例包括有机酸，如羧酸(例如乳酸、乙酸、甲酸、柠檬酸、草酸、尿酸等)和磺酸(例如甲烷磺酸、对甲苯磺酸)，无机酸(例如盐酸、硝酸、磷酸、硫酸、硼酸、氢氟酸、氢溴酸)，路易斯酸等。术语“路易斯酸”在此用于表示这样的分子或离子，其能够通过与来自第二分子或离子的两个电子形成共价键，而与另一分子或离子结合。对于用于本发明的方法来说，路易斯酸被认为是缺乏电子的物质，其能够接受一对电子。能够用于本发明的路易斯酸的实例是金属的阳离子和它们的络合物，包括镁、钙、铝、锌、钛、铬、铜、硼、锡、汞、铁、锰、镉、镓和钡。它们的络合物可以包括氢氧化物、烷基、醇盐、卤化物和有机酸配体例如乙酸酯。用于本发明方法的优选的路易斯酸的实例是钛醇盐，特别是Ti(OEt)₄，其另外的具有脱水性能。

术语“碱”旨在表示这样的化学物质，其是质子受体。用于本发明的合适的碱包括无机或者有机碱。无机碱的实例包括但不限于氢氧化钾(KOH)、氢氧化钡(Ba(OH)₂)、氢氧化铯(CsOH)、氢氧化钠(NaOH)、氢氧化锶(Sr(OH)₂)、氢氧化钙(Ca(OH)₂)、氢氧化锂(LiOH)、氢氧化铷(RbOH)和氢氧化镁(Mg(OH)₂)。有机碱可以是中性或者带负电荷的化合物，其通常包括氮原子如胺和含氮的杂环化合物。中性含氮的有机碱的实例包括氨、吡啶、甲基胺、咪唑、2,2,6,6-四甲基哌啶、4-(二甲基氨基)吡啶等。带负电荷的有机碱的实例包括烷基锂试剂、二烷基酰胺锂、烷基氧化锂、烷基卤化镁等。

方法

本发明提供了用于合成不同的取代的异喹啉化合物的方法，和由此获得的中间体化合物。所述方法能够大规模地安全和有效制备异喹啉化合物，例如可预期商业化生产这样的化合物。

本发明方法优于以前公开的那些的一个优点是，本发明公开的方法不需要分离区域异构体。例如在Suzuki等人(在前面)、Weidmann等人(在前面)和US专利No.7629357中公开的方法提供了5-和8-取代的异喹啉化合物或6-和7-取代的异喹啉化合物的区域异构体混合物，其然后使用常规的色谱法来分离。但是，这样的分离并非理想的，因为所述步骤的最大理论产率仅仅会是50%。

本发明方法优于以前公开的那些的另一优点是，本发明公开的方法不使用有害的和/或昂贵的试剂。具体地，本发明公开的方法避免了卤化步骤和因此避免了试剂如氯氧化磷和溴氧化磷(参见例如在US专利No.7323475中在先公开的合成，其描述在方案E herein，E-400到E-500中)。这些试剂对黏膜、上呼吸道、眼睛和皮肤的组织具有极大的破坏性。另外，所述方法避免了试剂如正丁基锂和三甲基环三硼氧烷，这二者需要特殊的处理程序，因为它们对于湿气具有非常大的反应性。所以，本发明公开的方法优于这类利用非理想试剂的方法。

本发明的方法使用起始化合物，其可以由容易获得的起始材料或者本文公开的化合物，使用例如下面的通用方法和程序来制备。可以理解在给定了典型的或者优选的加工条件(即，反应温度、时间、反应物摩尔比、溶剂、压力等)的情况下，除非另有指示也可以使用其他加工条件。最佳反应条件可以随着所用的具体反应物或溶剂而变化，但是这样的条件可以由本领域技术人员通过常规的优化程序来确定。

另外，对本领域技术人员来说很显然的，为了防止某些官能团经历不期望的反应，常规的保护性基团会是必需的。用于不同的官能团的合适的保护性基团以及用于保护和脱保护具体官能团的合适的条件是本领域公知的。例如，众多的保护性基团描述在T.W.Greene和G.M.Wuts(1999)Protecting Groups in Organic Synthesis，第3版，Wiley，纽约和在其中引用的参考文献。

此外，本发明的方法可以使用包括一种或多种手性中心的化合物。因此，如果需要，这样的化合物可以作为纯立体异构体，即作为单个对映异构体或者非对映异构体，或者作为富含立体异构体的混合物来制备或分离。全部这样的立体异构体(和富含的混合物)包括在本发明的范围内，除非另有指示。纯立体异构体(或者富含的混合物)可以使用例如本领域公知的光学活性起始材料或者立体选择性试剂来制备。或者，这样的化合物的外消旋混合物可以使用例如手性柱色谱法、手性拆分剂等来分离。

用于下面的反应的起始材料是通常已知的化合物或者能够通过已知的程序或者其明显的变体来制备。例如许多起始材料获自市售供应商例如Aldrich Chemical Co.(美国威斯康星州密尔沃基)，Bachem(美国加州托兰斯)，Emka-Chemce或者Sigma(美国密苏里州的圣路易斯)。其他可以通过常规参考文献中所述的程序或者其明显的变体来制备，例如Fieser和Fieser的Reagents for Organic Synthesis，第1-15卷(John Wiley，和Sons，1991)，Rodd的Chemistry of Carbon Compounds，第1-5卷，和附录(Elsevier Science Publishers，1989)，Organic Reactions，第1-40卷(John Wiley，和Sons，1991)，March的Advanced Organic Chemistry，(John Wiley，和Sons，第5版，2001)，和Larock的Comprehensive Organic Transformations(VCH Publishers Inc.，1989)。

在一个方面，本发明涉及一种制备式I的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

所述方法包括在足以产生式I化合物的条件下，将式II的化合物与式III的化合物接触：

其中

Z是O、NR¹或S；

R¹选自氢和烷基；

R²选自氢和烷基，其是未取代的或者用独立地选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中一种或多种取代基取代的；

其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

R⁹选自氢、烷基和芳基；

其中X²是氧、-S(O)_n-或–NR¹³-；

n是0、1或2；

R¹³选自氢、烷基和芳基；

在具体的实施方案中，本发明涉及一种制备式IA的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括在足以产生式IA化合物的条件下，将式IIA的化合物与式III的化合物接触：

其中R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹³、n、X¹和X²如上述式I中所定义。

所述反应可以在冰醋酸或者极性非质子溶剂如二噁烷、四氢呋喃(THF)、二甲基甲酰胺(DMF)或者二甲基乙酰胺(DMAc)中进行，以使用或者不使用酸催化剂产生式I或IA的化合物。在某些实施方案中，所述反应条件包括酸。所述酸可以选自例如乙酸、三氟乙酸、硫酸、盐酸或者酸性离子交换树脂。在不同的实施方案中，可以使用大约0.1-14摩尔当量的酸。在一些实施方案中，所述酸是冰醋酸。在一些实施方案中，使用至少大约2摩尔当量的冰醋酸。在具体的实施方案中，使用大约7-大约8摩尔当量的冰醋酸。

在某些实施方案中，所述反应是在惰性气氛下如氩气或氮气氛下进行的。在一些实施方案中，所述反应是在氮气氛下进行的。

在某些实施方案中，所述反应条件是无水反应条件。这样的条件通常包括干燥性试剂(例如分子筛)，所述反应在惰性气氛下进行等。这样的方法是本领域公知的。

在某些实施方案中，所述反应是在室温(大约25℃)-110℃的温度和0-60psi的压力进行的。在一些实施方案中，所述反应是在升高的温度(即，大于大约30℃的温度)进行的。例如所述温度范围可以是大约50℃-大约60℃。

在某些实施方案中，使用大约1.1-大约1.5摩尔当量式III的化合物。

在某些实施方案中，所述反应是在冰醋酸中于大约50℃-大约60℃的温度范围下进行的；并且式III的化合物的R¹¹是C₁-C₄烷基。

在某些实施方案中，所述反应是在冰醋酸中在氮气氛下和大约50℃-大约60℃的温度范围下进行的；并且式III的化合物的R¹¹是C₁-C₄烷基。

在某些实施方案中，所述反应是在大约7-大约8摩尔当量冰醋酸中于大约50℃-大约60℃的温度范围中进行的，并且使用大约1.1-大约1.5摩尔当量的式III的化合物，其中R¹¹是C₁-C₄烷基。

在某些实施方案中，所述反应是在大约7-大约8摩尔当量的冰醋酸中在氮气氛下于大约50℃-大约60℃的温度范围下进行的，并且使用大约1.1-大约1.5摩尔当量的式III的化合物，其中R¹¹是C₁-C₄烷基。

在某些实施方案中，式III的化合物的R¹¹是C₁-C₄烷基。在某些实施方案中，式III的化合物包括式IIIA的化合物：

(a)式的化合物、随后与式

的化合物接触；

(b)式R¹²-X³的化合物、随后与式的化合物接触；或者

(c)式V的化合物：

其中

X³是卤素；

在一种实施方案中，本发明涉及一种制备式IVA的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括在足以产生式IVA化合物的条件下，将式IA的化合物与式V的化合物接触：

其中

R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹³、n、X¹和X²如上述式I中所定义。

所述反应可以在冰乙酸或者极性非质子溶剂例如二噁烷、THF、DMF或DMAc中使用或者不使用酸催化剂进行，。在某些实施方案中，所述反应条件包括酸。所述酸可以选自例如乙酸、三氟乙酸、硫酸、盐酸或者酸性离子交换树脂。在不同的实施方案中，可以使用大约0.1-14摩尔当量的酸。在一些实施方案中，所述酸是冰醋酸。在一些实施方案中，使用至少大约2摩尔当量的冰醋酸。在具体的实施方案中，使用大约7-大约8摩尔当量的冰醋酸。

在某些实施方案中，所述反应是在惰性气氛下例如氩气或氮气氛下进行的。在一些实施方案中，所述反应是在氮气氛下进行的。

在某些实施方案中，所述反应是在升高的温度(即，于大于大约30℃的温度)进行的。例如在某些实施方案中，所述温度是大约100℃。

在不同的实施方案中，使用大约1-大约4摩尔当量的式V的化合物。在具体的实施方案中，在反应前分离式I或者IA的化合物时，使用大约1摩尔当量的式V的化合物。在其他实施方案中，使用大约2-大约3摩尔当量的式V的化合物。在某些实施方案中，式V的化合物包括乙酸酐。

在某些实施方案中，所述反应条件包括式V的化合物，其中R¹²是C₁-C₄烷基；且所述反应是在高温进行的。

在某些实施方案中，所述反应条件包括式V的化合物，其中R¹²是C₁-C₄烷基；且所述反应是在大约100℃的温度下进行的。

在某些实施方案中，所述反应条件包括式V的化合物，其中R¹²是C₁-C₄烷基；且所述反应是在惰性气氛下和在升高的温度下进行的。在某些实施方案中，另外的式V的化合物是乙酸酐。

在某些实施方案中，所述反应条件包括大约2-大约3摩尔当量的式V的化合物，其中R¹²是C₁-C₄烷基；且所述反应是在大约100℃的温度下进行的。在某些实施方案中，另外的式V化合物是乙酸酐。

在某些实施方案中，所述反应条件包括大约2-大约3摩尔当量的式V的化合物，其中R¹²是C₁-C₄烷基；且所述反应是在氮气氛下和大约100℃的温度下进行的。在某些实施方案中，另外的式V的化合物是乙酸酐。

在某些实施方案中，所述反应条件进一步包括在足以产生式IV化合物的条件下，将式VII的化合物转化成式IV的化合物：

其中Z、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹³、n、X¹和X²如上述式I中所定义；和

R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基。

在某些实施方案中，所述反应条件进一步包括在足以产生式IVA化合物的条件下，将式VIIA的化合物转化成式IVA的化合物：

其中R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹³、n、X¹和X²如上述式I中所定义；和

R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基。

在某些实施方案中，所述反应是在选自二氯甲烷、乙酸乙酯或THF的溶剂中进行的。在具体的实施方案中，所述溶剂是二氯甲烷。

在某些实施方案中，所述反应条件包括胺。在一些实施方案中，所述胺是吗啉。在某些实施方案中，所述反应是在大约0℃-大约10℃的温度下进行的。

在某些实施方案中，所述反应条件包括吗啉；和所述反应是在二氯甲烷中和大约0℃-大约10℃的温度下进行的。

其中Z、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹³、n、X¹和X²如上述式I中所定义；和

R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基。

在另外一种实施方案中，本发明涉及一种制备式VIA的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括在足以产生式VIA化合物的条件下，转化式IVA的化合物：

R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基。

在某些实施方案中，所述产生VI或VIA的反应条件是氢化反应条件。这样的条件通常包括氢。这样的条件还通常包括催化剂，例如钯催化剂(例如Pd/C，也称作负载在碳上的钯(0))。或者，可以使用Pd(OH)₂/C或雷尼（Raney）镍。

在某些实施方案中，所述反应条件包括选自二氯甲烷、乙酸乙酯或甲醇的溶剂。在具体的实施方案中，所述反应条件包括二氯甲烷。在具体的实施方案中，所述反应条件包括乙酸乙酯。

在一些实施方案中，所述反应是在氢气氛下和压力下，例如在大约20-大约300psi或在大约60psi进行的。在一些实施方案中，所述反应条件包括碱如碳酸钠或碳酸氢钠。在一些实施方案中，所述氢化反应条件包括大约0.5-大约1摩尔当量的碳酸钠。

在某些实施方案中，所述反应条件包括氢、碳酸钠、乙酸乙酯、Pd/C和压力下的条件。

在某些实施方案中，所述反应条件包括氢、碳酸钠、乙酸乙酯、Pd/C和在大约60psi压力下的条件。

在某些实施方案中，本发明涉及一种制备式VI的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括下述步骤：

a)在足以提供式I化合物的反应条件下，将式II的化合物与式III的化合物接触

b)在足以产生式IV的化合物的条件下，将式I的化合物与下面之一接触：

(i)式

的化合物、随后式

的化合物；

(ii)式R¹²-X³的化合物、随后式的化合物；或者

(iii)式V的化合物：

c)任选地将式VII的化合物转化成式IV的化合物；和

d)在足以产生式VI化合物条件下，转化式IV的化合物；

其中

X³是卤素；

在某些实施方案中，本发明涉及一种制备式VIA的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括下述步骤：

a)在提供式IA的化合物的反应条件下，将式IIA的化合物与式III的化合物接触

b)在足以产生式IVA化合物的条件下，将式IA的化合物与式V的化合物接触；

c)任选地将式VIIA的化合物转化成式IVA的化合物；和

d)在足以产生式VIA的化合物的条件下转化式IVA的化合物；

其中R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹³、n、X¹和X²如上述式I中所定义；和

R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基。

在某些实施方案中，本发明涉及一种制备式VIC的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括下述步骤：

a)在足以提供式IC的化合物的反应条件下，将式IIC的化合物与式IIIA的化合物接触；

b)在足以产生式IVC化合物的条件下，将式IC的化合物与式VA的化合物接触；

c)任选地将式VIIC的化合物转化成式IVC的化合物；

和

d)在足以产生式VIC化合物的条件下，转化式IVC的化合物；

其中

R²选自氢和烷基，其是未取代的或者用独立地选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中一种或多种取代基取代的；和

R⁴选自氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸和-X¹R⁸；

其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

每个R⁸独立地选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，条件是当X¹是–SO-或者–SO₂-时，则R⁸不是氢；和

R⁹选自氢、烷基和芳基。

在某些实施方案中，本发明涉及一种制备式VID的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括下述步骤：

a)在提供式ID化合物的反应条件下，将式IID的化合物与式IIIA的化合物接触；

b)在足以产生式IVD化合物的条件下，将式ID的化合物与式VA的化合物接触；

c)任选地将式VIID的化合物转化成式IVD的化合物；

和

d)在足以产生式VID化合物的条件下，转化式IVD的化合物；

其中

R³选自氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸和-X¹R⁸；

其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

R⁹选自氢、烷基和芳基。

在上述方法的某些实施方案中，R²是氢。

在上述方法的某些实施方案中，R²是烷基。

在上述方法的某些实施方案中，R³是苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R³是4-甲氧基苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R³是3,5-二氟苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R⁴是苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R⁴是4-甲氧基苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R⁴是3,5-二氟苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R²是氢和R³是苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R²是氢和R³是4-甲氧基苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R²是氢和R³是3,5-二氟苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R²是氢和R⁴是苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R²是氢和R⁴是4-甲氧基苯氧基。

在上述方法的某些实施方案中，R²是氢和R⁴是3,5-二氟苯氧基。

在本文所述方法的某些实施方案中，式VI的化合物用式VIB表示：

其中R²、R³和R⁴如上述式I中所定义。

在上述方法的某些实施方案中，式II的化合物用式IIB表示：

其中R²、R³和R⁴如上述式I中所定义。

在上述方法的某些实施方案中，式III的化合物用式IIIA表示：

在上述方法的某些实施方案中，式III的化合物表示为：

在上述方法的某些实施方案中，式I的化合物用式IB表示：

其中R²、R³、R⁴和R¹¹如上述式I中所定义。

在上述方法的某些实施方案中，式V的化合物用式VA表示：

在上述方法的某些实施方案中，式V的化合物表示为：

在上述方法的某些实施方案中，式VII的化合物用式VIIB表示：

其中R²、R³和R⁴如上述式I中所定义，且R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基。

在上述方法的某些实施方案中，式IV的化合物用式IVB表示：

在一种可选择的实施方案中，本发明涉及一种制备式X所示的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物，及其药用盐、立体异构体、立体异构体混合物和酯的方法：

其包括下述步骤：

a)在足以提供式I化合物的反应条件下，将式II的化合物与式III的化合物接触；

b)在足以产生式IV化合物的条件下，将式I的化合物与下面之一接触：

(iv)式

的化合物、随后与式

的化合物；

(v)式R¹²-X³的化合物、随后与式

的化合物；或者

(vi)式V的化合物；

c)任选地将式VII的化合物转化成式IV的化合物；

d)在足以产生式VI化合物的条件下，转化式IV的化合物；和

e)在足以提供式X化合物的反应条件下，将式VI的化合物与式的化合物接触；

其中Z、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹³、n、X¹和X²如上述式I中所定义；

X³是卤素；

R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基，或者当存在两个R¹²时，两个R¹²与和它们连接的碳原子一起形成4-8元杂环基；

当R^a是-COOH时p是0；当R^a是–WR¹⁸时p是1；

W选自氧、-S(O)_n-和–NR¹⁹-，其中n是0、1或2，R¹⁹选自氢、烷基、取代的烷基、酰基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，且R¹⁸选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，或者当W是–NR¹⁹-时，则R¹⁸和R¹⁹与和它们连接的氮原子一起可以结合以形成杂环基或取代的杂环基基团；

R选自氢、氘和甲基；

R'选自氢、氘、烷基和取代的烷基；或者，R和R’与侧接于其上的碳可以结合以形成环烷基、取代的环烷基、杂环基或取代的杂环基基团；和

R''选自氢和烷基，或者R''与R'和侧接于其上的氮一起可以结合以形成杂环基或取代的杂环基基团。

在另外一种实施方案中，本发明涉及一种制备4-羟基-1-甲基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(3e)的方法：

其包括下述步骤：

a)在足以产生式3b化合物的条件下，将式3a的化合物与式IIIA的化合物接触；

b)在足以产生式3c化合物的条件下，将式3b的化合物与式VA的化合物接触；

c)任选地在足以产生式3c化合物的条件下，转化式3d的化合物；和

d)在足以产生式3e化合物的条件下转化式3c的化合物。

在另外一种实施方案中，本发明涉及一种制备2-(4-羟基-1-甲基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸(3f)的方法，

其包括在足以产生式3f化合物的条件下，将式3e的化合物与甘氨酸或甘氨酸钠接触；

用于此处公开的方法的式II的化合物可以根据公开的程序来制备(参见例如US专利No.7323475，其在此以其全部引入作为参考)：

在此上公开的方法的某些实施方案中，每个R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹和R¹⁰的定义如下：

R³和R⁴独立地选自氢、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸和-X¹R⁸；其中

X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

每个R⁸独立地选自氢、烷基、芳基、环烷基、杂芳基和杂环基，条件是当X¹是-SO-或-SO₂-时，则R⁸不是氢；和

R⁹选自氢、烷基和芳基；

或者R³和R⁴与侧接到其上的碳原子一起形成环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

R⁵和R⁶独立地选自氢、卤素、烷基、烷氧基、芳基、杂芳基和-X²R¹⁰；其中

X²是氧、-S(O)_n-或–NR¹³-；

n是0、1或2；

R¹⁰选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基；和

R¹³选自氢、烷基和芳基；

或者当X²是–NR¹³-时，则R¹⁰和R¹³与和它们连接的氮原子一起可以结合以形成杂环基基团；

其中上述每个烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基和杂环基可以任选的用1-3个R¹⁰⁰取代，

其中每个R¹⁰⁰独立地选自烷氧基、酰基、酰基氨基、酰氧基、氨基、氨基酰基、氨基羰基氨基、氨基硫羰基氨基、氨基羰氧基、芳基、芳氧基、芳氧基芳基、氰基、卤素、羟基、硝基、氧代(oxo)、硫代(thioxo)、羧基、羧基酯、环烷基、硫代(thio)、烷硫基、芳硫基、环烷基硫基、杂芳基硫基、杂环杂环硫基、磺酰基、杂芳基、杂环杂环基、环烷氧基、杂芳氧基、杂环氧、氧羰基氨基、氧硫羰基氨基、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂-杂芳基、-OS(O)₂-杂环基、-OSO₂-NR⁴⁰R⁴⁰、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-烷基、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-芳基、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-杂芳基和-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-杂环基，其中每个R⁴⁰独立地选自氢或者烷基。

在上述方法的某些实施方案中，R¹是氢。

在上述方法的某些实施方案中，R²是氢或烷基。

在上述方法的某些实施方案中，

R³和R⁴独立地选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸和-X¹R⁸；

其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

R⁹选自氢、烷基和芳基；

或者R³和R⁴与侧接到其上的碳原子一起形成环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基。

在上述方法的某些实施方案中，

R³和R⁴独立地选自氢、烷基、芳基、杂芳基、羟基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸和-X¹R⁸；其中

X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

R⁸是芳基或取代的芳基；和

R⁹是氢、烷基或芳基；

或者R³和R⁴与侧接到其上的碳原子一起形成环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。

在上述方法的某些实施方案中，

R³和R⁴独立地选自氢和-X¹R⁸；其中X¹是氧，且R⁸是芳基或取代的芳基。

在上述方法的某些实施方案中，

R⁵和R⁶独立地选自氢、卤素、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基和–X²R¹⁰；其中X²是氧、-S(O)_n-或–NR¹³-；

n是0、1或2；

R¹⁰是芳基或取代的芳基；和

R¹³选自氢、烷基和芳基。

在上述方法的某些实施方案中，

R⁵和R⁶独立地选自氢和–X²R¹⁰；其中X²是氧，且R¹⁰是芳基或取代的芳基。

在上述方法的某些实施方案中，R⁵和R⁶是氢。

在上述方法的某些实施方案中，

R²是氢或烷基；

其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

每个R⁸独立地选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，条件是当X¹是–SO-或–SO₂-，则R⁸不是氢；和

R⁹选自氢、烷基和芳基；

或者R³和R⁴与侧接于其上的碳原子一起形成环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基；和

R⁵和R⁶独立地选自氢、卤素、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基和–X²R¹⁰；

其中X²是氧、-S(O)_n-或–NR¹³-；

n是0、1或2；

R¹⁰是芳基或取代的芳基；和

R¹³选自氢、烷基和芳基。

在上述方法的某些实施方案中，

R²是氢或烷基；

X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

R⁸是芳基或取代的芳基；和

R⁹是氢、烷基或芳基；

或者R³和R⁴与侧接于其上的碳原子一起形成环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；和

在上述方法的某些实施方案中，

R²是氢或烷基；

R³和R⁴独立地选自氢和-X¹R⁸；其中X¹是氧，且R⁸是芳基或取代的芳基；和

R⁵和R⁶是氢。

在上述方法的某些实施方案中，R¹¹是C₁-C₄烷基。

在上述方法的某些实施方案中，R¹¹是甲基。

在上述方法的某些实施方案中，R¹²是C₁-C₄烷基。

在上述方法的某些实施方案中，R¹²是甲基。

在此上公开的方法的某些实施方案中，所述方法进一步包括形成所述化合物相应的盐的步骤。这样的方法是本领域公知的。

获得本发明化合物的其他改变是本领域技术人员公知的。例如C-4羟基可以通过常规手段变成相应的醚、酰氧基等来提供本发明的化合物。具体的，酯可以在常规的偶合条件下，通过含有羧酸的化合物与含有醇的化合物在合适的溶剂中，任选地在高温反应来制备。因此，此处公开的化合物的酯可以在任何的羧酸或羟基官能团处形成。典型的酯形成反应来提供本发明的化合物如下所示，其中R²如本文所定义。

上述化合物的N-氧化物衍生物也可以使用本领域技术人员公知的方法来制备。因此，本发明的化合物包括下式的N-氧化物衍生物：

本发明的化合物

其中：

Z是O、NR¹或S；

R¹选自氢和烷基；

其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

每个R⁸独立地选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，条件是当X¹是–SO或者-SO₂-时，则R⁸不是氢；和

R⁹选自氢、烷基和芳基；

其中X²是氧、-S(O)_n-或–NR¹³-；

n是0、1或2；

R¹³选自氢、烷基和芳基；

R⁷是–N(R¹¹)(R¹¹)或–OC(O)R¹²；

每个R¹¹独立地选自烷基、苄基或芳基，或者两个R¹¹与和它们连接的氮原子一起形成4-8元杂环基或杂芳基；和

R¹²选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基；

在某些实施方案中，本发明涉及式VIIIA的化合物或者其盐、酯、立体异构体或立体异构体混合物：

其中：

R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹²、R¹³、n、X¹和X²如上述式VIII中所定义；

在上述化合物的某些实施方案中，R²是氢、烷基或取代的烷基。

在某些实施方案中，R²是烷基。

在某些实施方案中，R³和R⁴独立地选自氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基、羟基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸和-X¹R⁸；其中

X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

R⁸是芳基或取代的芳基，和

R⁹是氢、烷基或芳基；

或者R³和R⁴与侧接于其上的碳原子一起形成环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。

在某些实施方案中，R⁵和R⁶是氢。

在某些实施方案中，R²是烷基，其是未取代的或者用独立地选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中一种或多种取代基取代的；且R⁵和R⁶是氢。

在某些实施方案中，R⁷是–OC(O)R¹²。在某些实施方案中，R⁷是–N(R¹¹)(R¹¹)。在某些实施方案中，R⁷是–N(R¹¹)(R¹¹)；且R¹¹是C₁-C₄烷基。在某些实施方案中，R⁷是-OC(O)R¹²；且R¹²是C₁-C₄烷基。

在某些实施方案中，Z是O。

在此上公开的化合物的某些实施方案中，每个R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸和R¹⁰定义如下：

X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

每个R⁸独立地选自氢、烷基、芳基、环烷基、杂芳基和杂环基；和

R⁹选自氢、烷基和芳基；

X²是氧、-S(O)_n-或–NR¹³-；

n是0、1或2；

R¹⁰选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基；和

R¹³选自氢、烷基和芳基；

其中上述每个烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基和杂环基可以任选地用1-3个R¹⁰⁰取代，

其中每个R¹⁰⁰独立地选自烷氧基、酰基、酰基氨基、酰氧基、氨基、氨基酰基、氨基羰基氨基、氨基硫羰基氨基、氨基羰氧基、芳基、芳氧基、芳氧基芳基、氰基、卤素、羟基、硝基、氧代(oxo)、硫代(thioxo)、羧基、羧基酯、环烷基、硫代(thio)、烷硫基、芳硫基、环烷基硫基、杂芳基硫基、杂环杂环硫基、磺酰基、杂芳基、杂环杂环基、环烷氧基、杂芳氧基、杂环氧、氧羰基氨基、氧硫羰基氨基、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂-杂芳基、-OS(O)₂-杂环基、-OSO₂-NR⁴⁰R⁴⁰、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-烷基、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-芳基、-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-杂芳基和-NR⁴⁰S(O)₂-NR⁴⁰-杂环基，其中每个R⁴⁰独立地选自氢或者烷基；

在另一个方面，本发明涉及4-羟基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(3a)：

在另一个方面，本发明涉及4-羟基-1-甲基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(3e)：

异喹啉合成

本发明的化合物和方法可以用于合成不同的异喹啉化合物。这样的化合物已知可以用于抑制HIF羟化酶活性，由此提高缺氧诱导因子(HIF)的稳定性和/或活性，并且可以用于治疗和预防HIF相关的病症和紊乱(参见例如US专利No.7323475)。示例性取代的异喹啉化合物(其可以使用此处公开的方法制备)包括式X表示的那些及其药用盐、立体异构体、立体异构体混合物和酯：

其中R³、R⁴、R⁵和R⁶如上述式I中所定义，和：

当R^a是-COOH时p是0；当R^a是–WR¹⁸时p是1；

W选自氧、-S(O)_n-和–NR¹⁹-，其中n是0、1或2，R¹⁹选自氢、烷基、取代的烷基、酰基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，且R¹⁸选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基；或者当W是–NR¹⁹-时，则R¹⁸和R¹⁹与和它们连接的氮原子一起可以结合以形成杂环基或取代的杂环基基团；

R选自氢、氘和甲基；

R'选自氢、氘、烷基和取代的烷基；或者，R和R'与侧接于其上的碳可以结合以形成环烷基、取代的环烷基、杂环基或者取代的杂环基基团；

R''选自氢和烷基，或者R''和R'与侧接于其上的氮一起可以结合以形成杂环基或取代的杂环基基团。

用于制备此处所述的化合物的示例性方法表示在下面的方案中，其中Z、X³、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R¹¹、R¹²、p、R^a、R、R'和R''如上述式I和式X中所定义，且PG是常规胺保护性基团。

方案A

用于方案A所示的反应中的化合物A-200可以如下来制备：将化合物A-100与合适的路易斯酸如硼酸三甲酯在卤化剂如二氯三苯基正膦和氯化亚砜存在下进行接触，以产生酰卤，其通过与式R²-OH的醇如甲醇接触，产生相应的卤化酯A-200。反应完成后，A-200可以通过常规技术如中和、萃取、沉淀、色谱法、过滤等来回收；或者可选择地，无需纯化和/或分离而用于接下来的步骤中。

通过将A-200与大约化学计量量的合适的式A-10的α-氨基酸(其中PG指的是合适的保护性基团如甲磺酰基、对甲苯磺酰基等)和催化量的碘化钠接触，可以将化合物A-200变成A-300(式II)。所述反应是在本领域公知的常规偶合条件下进行的。然后加入合适的碱如甲醇钠、乙醇钠或者其它在甲醇、DMF或其它合适的溶剂中的合适的碱。该反应进行直到它基本完成，这通常在大约1-72小时内进行。反应完成后，所述化合物A-300可以通过常规技术如中和、萃取、沉淀、色谱法、过滤等来回收。

通过方案B所示的本发明的方法可以将化合物A-300变成B-100(式I)。

方案B

例如在酸如乙酸存在下，将A-300与大约化学计量量或者稍过量的式A-20的化合物(式III)接触，提供化合物B-100。所述反应进行直到它基本完成，这通常在大约1-72小时内进行。反应完成后，所述化合物B-100可以通过常规技术如中和、萃取、沉淀、色谱法、过滤等来回收，或者无需分离和/或纯化而用于接下来的步骤中。

通过方案C所示的本发明的方法可以将化合物B-100(式I)变成化合物C-100(式VII)和C-200(式IV)。

方案C

例如，在酸如乙酸存在下，将B-100与过量(例如2–3当量)的化合物A-30(式V)接触，提供化合物C-100和C-200。或者，将B-100与式R¹²-C(O)X³的酰卤或式R¹²-X³的卤代烷接触，随后与式R¹²-C(O)OH的酸如乙酸接触，提供化合物C-100和C-200。所述反应通常在大约100°C的温度下进行，并且持续直到它基本完成，这通常在大约1-72小时内进行。化合物C-200可以通过本发明的方法来提供，如化合物C-100和C-200的混合物与胺如吗啉在合适的极性溶剂如DMF中进行。所述反应通常在低于室温的温度(即0-10°C)进行。一旦反应完成后，所述化合物C-200可以通过常规技术如中和、萃取、沉淀、色谱法、过滤等来回收。

在本发明的反应条件下可以将化合物C-200(式IV)变成C-300(式VI)。在某些实施方案中，所述反应条件是氢化反应条件。这样的条件通常包括处于氢气氛下的催化剂如钯催化剂(例如负载在碳上的钯(0))。在一些实施方案中，所述氢化反应是在压力下进行的。在一些实施方案中，所述氢化反应条件包括碱如碳酸钠。在一些实施方案中，所述氢化反应条件包括大约0.5-大约1摩尔当量的碳酸钠。

可以通过将化合物C-300(式VI)与至少化学计量量或合适的过量的氨基酸或其衍生物A-40(具体但不限于甘氨酸或其相应的盐)接触来合成化合物C-400(式X)。所述反应是在本领域公知的常规偶合条件下进行的。在一种实施方案中，所述反应是在甲醇钠、乙醇钠或另一在甲醇、DMF或另一合适溶剂中的合适的碱存在下，在升高的反应温度和特别是回流下进行的。所述反应持续直到它基本完成，这通常在大约1-72小时内进行。或者，所述反应可以于高温在微波炉中进行。一旦反应完成后，化合物C-400可以通过常规技术如中和、萃取、沉淀、色谱法、过滤等来回收。

用于制备这样的取代的异喹啉化合物的特定方法表示在下面的方案D中，其中R²、R³、R⁴、R⁵、R¹¹、R¹²、p、R^a、R、R'和R''如本文所定义，且PG是常规胺保护性基团。

方案D

用于方案D所示的反应中的化合物D-200可以如下来制备：将化合物A-100与合适的路易斯酸如硼酸三甲酯在二氯三苯基正膦和氯化亚砜存在下进行接触，以产生酰氯，其通过与醇如甲醇接触，产生相应的酯D-100。一旦反应完成后，D-100可以通过常规技术如中和、萃取、沉淀、色谱法、过滤等来回收；或者可选择地，无需纯化和/或分离而用于接下来的步骤中。

将D-100与大约化学计量量的合适的式D-10的α-氨基酸(其中PG指的是合适的保护性基团如甲磺酰基、甲苯磺酰基等)和催化量的碘化钠接触，可以将化合物D-100变成D-200(式IIA)。所述反应是在本领域公知的常规偶合条件下进行的。然后加入合适的碱如甲醇钠、乙醇钠或者另一在甲醇、DMF或另一合适溶剂中的合适的碱。该反应进行直到它基本完成，这通常在大约1-72小时内进行。一旦反应完成后，所述化合物D-200可以通过常规技术如中和、萃取、沉淀、色谱法、过滤等来回收。

通过本发明的方法可以将化合物D-200变成D-300(式IA)。例如在酸如乙酸存在下，将D-200与大约化学计量量或稍过量的式A-20化合物接触，提供化合物D-300。该反应持续直到它基本完成，这通常在大约1-72小时内进行。一旦反应完成后，所述化合物D-300可以通过常规技术如中和、萃取、沉淀、色谱法、过滤等来回收。

通过本发明的方法可以将化合物D-300变成化合物D-400(式VIIA)和D-500(式IVA)。例如在酸如乙酸存在下，将D-300与过量(例如2–3当量)的化合物A-30接触，提供化合物D-400和D-500。所述反应通常在大约100°C的温度下进行，并且持续直到它基本完成，这通常是在大约1-72小时内进行。化合物D-500可以通过本发明的方法来提供，如将化合物D-400和D-500的混合物与胺如吗啉在合适的极性溶剂如DMF中反应。所述反应通常在低于室温的温度(例如0-10°C)进行。一旦反应完成后，所述化合物D-500可以通过常规技术如中和、萃取、沉淀、色谱法、过滤等来回收。

在本发明的反应条件下可以将化合物D-500变成D-600(式VIA)。在某些实施方案中，所述反应条件是氢化反应条件。这样的条件通常包括处于氢气氛下的催化剂如钯催化剂(例如负载在碳上的钯(0))。在一些实施方案中，所述氢化反应是在压力下进行的。在一些实施方案中，所述氢化反应条件包括碱如碳酸钠。在一些实施方案中，所述氢化反应条件包括大约0.5-大约1摩尔当量的碳酸钠。

通过将化合物D-600与至少化学计量量或过量合适的氨基酸或其衍生物A-40(具体但不限于甘氨酸或其相应的盐)接触可以合成化合物C-400(式X)。所述反应是在本领域公知的常规偶合条件下进行的。在一种实施方案中，所述反应是在甲醇钠、乙醇钠或者另一在甲醇、DMF或另一合适溶剂中的合适的碱存在下，在升高的反应温度和特别是回流下进行的。该反应持续直到它基本完成，这通常在大约1-72小时内进行。或者，所述反应可以在高温在微波炉中进行。一旦反应完成后，化合物C-400可以通过常规技术如中和、萃取、沉淀、色谱法、过滤等来回收。

用于上面的方案所述的反应中的化合物A-100、A-10、A-20、A-30、A-40和D-10获自市售来源或者可以根据已知的文献程序来制备。本发明所提供的化合物的其他变体是本领域技术人员公知的。例如C-4羟基可以通过常规手段变成相应的醚、酰氧基等。另外，化合物A-40可以作为US专利No.7323475中所提供的来使用。

在本领域中，异喹啉化合物是根据这样的方法来制备的，其不是大规模生产所期望的(方案E，其中R²⁰是通用缩写，其代表了此处所述的取代基(即，烷基、烷氧基、芳基、芳氧基等))。示例性取代基包括烷基、烷氧基、杂烷基、芳基、芳氧基等，其中每个如本文所定义。例如根据US专利No.7323475所制备的异喹啉化合物包括不期望的区域异构体E-200和E-300色谱分离。可以预期的是这样的方法在大规模上将是低效率的。另外，将E-400转化成相应的溴化物E-500以提供化合物E-600的异喹啉环上的烷基取代需要使用溴氧化磷，其是有毒和潜在爆炸性的。与以前公开的方法相反，本发明方法的优势在于不需要使用这样的危险试剂来合成异喹啉化合物。

方案E

1-二甲基氨基甲基-4-羟基-7-苯基硫基-异喹啉-3-甲酸丁酯的合成已经在US专利No.7323475中报道，其使用了4-羟基-7-苯基硫基-异喹啉-3-甲酸丁酯、N,N-二甲基亚甲基碘化铵和碳酸钾在无水二氯甲烷中的混合物。但是，仅仅获得了16%的期望的1-二甲基氨基甲基-4-羟基-7-苯基硫基-异喹啉-3-甲酸丁酯。与以前公开的方法相反，本发明方法的优势在于提供了合成本文所述化合物的良好产率。

实施例

本发明进一步通过参考下面的实施例来理解，其目的纯粹是本发明的示例。本发明不限于示例性实施方案的范围，其仅仅用于说明本发明的单个方面。功能相等的任何方法处于本发明的范围内。对本领域技术人员来说，除了此处所述的那些之外，对本发明不同的改变从前述说明书而变得显而易见。这样的改变落入所附权利要求的范围内。

除非另有说明，否则全部的温度是摄氏度(℃)。同样，在这些实施例和其他之处，其中缩写具有下面的含义：

EtOH=乙醇

Et=乙基

g=克

h=小时

HPLC=高效液相色谱法

L=升

MeOH=甲醇

mg=毫克

min=分钟

mL=毫升

mM=毫摩尔量

mmol=毫摩尔

Ac=乙酰基

NaOMe=甲醇钠

实施例1

制备2-(4-羟基-1-甲基-5-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸

a)制备1-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基-5-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(1b)

可向配备有热电偶和冷凝器的圆底烧瓶中装入1a和乙酸(大约7摩尔当量±5%)。可将所述1a在乙酸中的悬浮液用磁搅拌强力搅拌(备注：对于更大规模的处理，应当进行顶置式（overhead）搅拌)。然后可以将稍微过量的双-二甲基氨基甲烷(大约1.25摩尔当量)缓慢加入到该混合物中[备注：反应是轻微放热的，可以观察到15-20℃的升温]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到55±5℃且保持至少8h。然后可以通过HPLC评价所述反应。如果1a的量大于0.5%，则可以将反应在55±5℃再搅拌2小时并通过HPLC再次评价。

b)制备1-((乙酰氧基)甲基)-4-羟基-5-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(1c)

可将来自实施例1a)的1b溶液冷却到低于25℃，此时，可以缓慢加入温度低于50℃的乙酸酐(大约3摩尔当量)[备注：反应是放热的，可以观察到20-25℃的升温。加入速率对于控制乙酸酐和1b的二甲基胺之间的放热反应是重要的。所产生的过量的热将会导致气态二甲基胺不安全地快速形成]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到100±5℃保持20-24小时。所述反应然后可以通过HPLC评价。如果1b的量大于2%，则可以将所述反应再搅拌2小时，然后通过HPLC再次评价。

1d可以通过下面的程序转化成1c。可将来自上述程序的1c和1d的溶液冷却到小于65±5℃，并且良好混合。如果所述反应温度低于30℃，则所述反应会凝固。可以缓慢和稳定的加入水(第一半可以在1小时后加入，其余部分在30分钟后加入)。所述混合物然后可以冷却并在20±5℃搅拌至少3小时，在此时，可以过滤所述混合物，并且用水(3X)洗涤湿饼，加入到配备有机械搅拌器的圆底烧瓶中。可以加入二氯甲烷和水(3：1体积)，并且将混合物搅拌30分钟。可以分离二氯甲烷(不包括界面或者含水层)，和将溶液用HPLC评价。

1c可以根据下面的步骤进一步纯化。上述溶液可以加入到安装有机械搅拌器的烧瓶中，并且冷却到5±5℃。可以加入吗啉，并且将所述混合物在5±5℃搅拌30-60分钟，和用HPLC评价。如果1d的量大于2%，则所述反应可以再搅拌1小时。一旦反应完成，则1c会从冷丙酮/甲醇溶液中沉淀，将其过滤、洗涤并在真空下和50±5℃进行干燥。

c)制备4-羟基-1-甲基-5-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(1e)

可向配备有4叶叶轮的玻璃衬里帕尔压力反应器容器中装入1c、Pd/C(大约0.4-0.5摩尔当量)、无水Na₂CO₃(大约0.5摩尔当量)和乙酸乙酯。所述烧瓶然后可以用氮气(3X)真空净化和用氢气(3X)真空净化。所述烧瓶然后可以用氢气加压到设定点60psi，并且在60℃搅拌6-8h，直到反应完成(1c<0.5%)。所述烧瓶然后可以冷却到20-25℃，压力释放到环境，将顶部空间用氮气净化三次和通过玻璃微滤滤纸进行过滤。滤出液可以浓缩并从冷甲醇中沉淀，在真空下于50±5℃干燥。

d)制备2-(4-羟基-1-甲基-5-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸(1f)

2-(4-羟基-1-甲基-5-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸可以由1e根据下面的步骤来制备。

压力玻璃反应烧瓶(其包括用于螺帽盖的顶部螺线)可以安装有磁搅拌器，装入1e、甘氨酸(大约3摩尔当量)、甲醇和甲醇钠溶液(具有1.2摩尔当量的NaOCH₃)，并且密封。所述反应然后可以加热到110℃保持至少6h，在此期间，所述反应形成了黄色悬浮液。所述反应然后可以冷却到20-25℃，并且通过HPLC评价。所述反应可以持续直到通过HPLC测量时剩余小于1%的1e，将其过滤、甲醇洗涤、真空干燥、用水溶解和用乙酸乙酯萃取以将杂质除去到低于0.1%。可以除去乙酸乙酯，并且可在1小时后加入乙酸溶液(具有3摩尔当量的乙酸)。所述悬浮液可以在室温搅拌至少3小时，过滤并将固体用水(3X)、冷丙酮(5-10℃，2X)洗涤，并用HPLC评价杂质。如果存在着丙酮可除去的杂质，则所述烧瓶可以装入丙酮，并回流至少8h，缓慢冷却到5-10℃，搅拌至少2-3h，过滤，用冷丙酮洗涤(5-10℃，3X)，真空下干燥以获得2-(4-羟基-1-甲基-5-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸。

实施例2

制备2-(4-羟基-1-甲基-6-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸

a)制备1-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基-6-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(2b)

向配备有热电偶和冷凝器的圆底烧瓶中可以装入2a和乙酸(大约7摩尔当量±5%)。可将所述2a在乙酸中的悬浮液用磁搅拌强力搅拌(备注：对于更大规模的处理，应当进行顶置式搅拌)。然后可以将稍微过量的双-二甲基氨基甲烷(大约1.25摩尔当量)缓慢加入到所述混合物中[备注：反应是轻微放热的，可以观察到15-20℃的升温]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到55±5℃，保持至少8h。所述反应然后可以通过HPLC评价。如果2a的量大于0.5%，则可以将所述反应在55±5℃在搅拌2小时，并通过HPLC再次评价。

b)制备1-((乙酰氧基)甲基)-4-羟基-6-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(2c)

可将来自实施例2a)的2b溶液冷却到低于25℃，在此时，可以缓慢加入温度低于50℃的乙酸酐(大约3摩尔当量)[备注：反应是放热的，可以观察到20-25℃的升温。加入速率对于控制乙酸酐和二甲基胺或者2b之间的放热反应是重要的。所产生的过量的热将会导致气态二甲基胺不安全地快速形成]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到100±5℃保持20-24小时。所述反应然后可以通过HPLC评价。如果2b的量大于2%，则可以将所述反应再搅拌2小时，然后通过HPLC再次评价。

2d可以通过下面的步骤转化成2c。可将来自上述步骤的2c和2d的溶液冷却到小于65±5℃，并且良好混合。如果所述反应温度低于30℃，则所述反应会凝固。可以缓慢和稳定的加入水(第一半可以在1小时后加入，其余部分在30分钟后加入)。所述混合物然后可以冷却和在20±5℃搅拌至少3小时，在此时，可以过滤该混合物，并且用水(3X)洗涤湿饼，加入到配备有机械搅拌器的圆底烧瓶中。可以加入二氯甲烷和水(3：1体积)，并且将所述混合物搅拌30分钟。可以分离二氯甲烷(不包括界面或者含水层)，并将溶液用HPLC评价。

2c可以根据下面的步骤进一步纯化。可将上面的溶液加入到安装有机械搅拌器的烧瓶中，并且冷却到5±5℃。可以加入吗啉，并且将所述混合物在5±5℃搅拌30-60分钟，并用HPLC评价。如果2d的量大于2%，则所述反应可以再搅拌1小时。一旦该反应完成，则2c会从冷丙酮/甲醇溶液中沉淀，将其过滤、洗涤，在50±5℃真空下进行干燥。

c)制备4-羟基-1-甲基-6-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(2e)

可向配备有4叶叶轮的玻璃衬里帕尔压力反应器容器中装入2c、Pd/C(大约0.4-0.5摩尔当量)、无水Na₂CO₃(大约0.5摩尔当量)和乙酸乙酯。所述烧瓶然后可以用氮气(3X)真空净化和用氢气(3X)真空净化。所述烧瓶然后可以用氢气加压到设定点60psi，并且在60℃搅拌6-8h，直到反应完成(2c<0.5%)。所述烧瓶然后可以冷却到20-25℃，压力释放到环境，将顶部空间用氮气净化三次和通过玻璃微滤滤纸进行过滤。滤出液可以浓缩并从冷甲醇中沉淀，在真空下在50±5℃干燥。

d)制备2-(4-羟基-1-甲基-6-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸(2f)

2-(4-羟基-1-甲基-6-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸是由2e根据下面的步骤来制备。

压力玻璃反应烧瓶(其包括用于螺帽盖的顶部螺线)可以安装有磁搅拌器，装入2e、甘氨酸(大约3摩尔当量)、甲醇和甲醇钠溶液(具有1.2摩尔当量的NaOCH₃)，并且密封。所述反应然后可以加热到110℃保持至少6h，在此期间，所述反应形成了黄色悬浮液。所述反应然后可以冷却到20-25℃，并且通过HPLC评价。所述反应可以持续直到通过HPLC测量时剩余小于1%的2e，将其过滤、甲醇洗涤、真空干燥、用水溶解和用乙酸乙酯萃取来将杂质除去到低于0.1%。可以除去乙酸乙酯，并且可在1小时后加入乙酸溶液(具有3摩尔当量的乙酸)。所述悬浮液可以在室温搅拌至少3小时，过滤，并将固体用水(3X)、冷丙酮(5-10℃，2X)洗涤，并用HPLC评价杂质。如果存在着丙酮可除去的杂质，则所述烧瓶可以装入丙酮并回流至少8h，缓慢冷却到5-10℃，搅拌至少2-3h，过滤，用冷丙酮洗涤(5-10℃，3X)并真空下干燥以获得2-(4-羟基-1-甲基-6-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸。

实施例3

制备2-(4-羟基-1-甲基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸

a)制备5-苯氧基苯并呋喃酮

向反应器中装入DMF(68Kg)，并且开始搅拌。所述反应器然后装入酚(51Kg)、乙酰基丙酮(8Kg)、5-溴苯并呋喃酮(85Kg)、溴化铜(9Kg)和碳酸钾(77Kg)。将混合物加热到高于85℃，并且保持直到反应完成，然后冷却。加入水。将固体过滤并用水洗涤。将固体溶解在二氯甲烷中，并且用HCl水溶液洗涤和然后用水洗涤。在压力下除去溶剂，并且加入甲醇。将所述混合物搅拌和过滤。固体用甲醇洗涤并在炉子中干燥，产生5-苯氧基苯并呋喃酮(产率：72%，HPLC：99.6%)。

b)制备2-氯甲基-4-苯氧基苯甲酸甲酯

向反应器中装入甲苯(24Kg)，并开始搅拌。然后向所述反应器中装入5-苯氧基苯并呋喃酮(56Kg)、亚硫酰氯(41Kg)、硼酸三甲酯(1Kg)、二氯三苯基正膦(2.5Kg)和碳酸钾(77Kg)。将所述混合物加热到回流，直到反应完成，除去溶剂以留下2-氯甲基-4-苯氧基苯甲酰氯。装入甲醇，将所述混合物加热到高于50℃，直到反应完成。除去溶剂，并用DMF置换。将所述产物甲基2-氯甲基-4-苯氧基苯甲酸甲酯在DMF中的溶液直接用于接下来的步骤中(HPLC：85%)。

c)制备4-羟基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(3a)

向反应器中装入于DMF中的2-氯甲基-4-苯氧基苯甲酸甲酯(～68Kg)溶液，并且开始搅拌。所述反应器然后装入对甲苯磺酰基甘氨酸甲酯(66Kg)、碳酸钾(60Kg)和碘化钠(4Kg)。将所述混合物加热到至少50℃直到反应完成。冷却所述混合物。装入于甲醇种中甲醇钠的溶液，将所述混合物搅拌直到反应完成。加入乙酸和水，并且将所述混合物搅拌、过滤和水洗。固体是通过丙酮研碎来纯化的，并且在炉子中干燥，产生3a(来自步骤b)的产率：58%；HPLC：99.4%)。¹HNMR(200MHz，DMSO-d6)d11.60(s，1H)，8.74(s，1H)，8.32(d，J=9.0Hz，1H)，7.60(dd，J=2.3&9.0Hz，1H)，7.49(m，3H)，7.24(m，3H)，3.96(s，3H)；MS-(+)-离子M+1=296.09

d)制备1-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(3b)

向烧瓶中装入3a(29.5g)和乙酸(44.3g±5%)，然后搅拌。缓慢加入双-二甲基氨基甲烷(12.8g±2%)。将所述混合物加热到55±5℃并保持直到反应完成。将反应产物用MS、HPLC和¹H NMR进行评价。¹HNMR(200MHz，DMSO-d6)d11.7(S，1H)，8.38(d，J=9.0Hz，1H)，7.61(dd，J=9.0，2.7Hz，1H)，7.49(m，3H)，7.21(m，3H)，5.34(s，2H)，3.97(s，3H)，1.98(s，3H)；MS-(+)-离子M+1=368.12。

e)制备1-((乙酰氧基)甲基)-4-羟基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(3c)

将来自上面a)的3b溶液冷却到低于25℃，在此时，加入乙酸酐(28.6g±3.5%)以保持温度低于50℃。将所形成的混合物加热到100±5℃直到反应完成。

将来自上面的3c和3d的溶液冷却到小于65±5℃。缓慢加入水(250mL)。然后将所述混合物冷却到低于20±5℃和过滤。用水(3x50mL)洗涤湿饼并加入到新的烧瓶中。加入二氯甲烷(90mL)和水(30mL)，并将所形成的混合物搅拌。将二氯甲烷层分离，用HPLC评价。

将有机层加入到烧瓶中和冷却5±5℃。加入吗啉并搅拌所述混合物直到反应完成。将溶剂用丙酮/甲醇混合物置换。冷却后，化合物3c沉淀，并且过滤、洗涤并在炉子中干燥(产率：81%，HPLC：>99.7%)。 ¹H NMR(200MHz，DMSO-d6)d11.6(S，1H)，8.31(d，J=9.0Hz，1H)，7.87(d，J=2.3Hz，1H)，7.49(m，3H)，7.24(m，3H)，3.95(s，3H)，3.68(s，2H)，2.08(s，6H)；MS-(+)-离子M+1=357.17。

f)制备4-羟基-1-甲基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(3e)

向反应器装入3c(16.0g)、Pd/C(2.08g)、无水Na₂CO₃(2.56g)和乙酸乙酯(120mL)。将所述烧瓶用氮气(3X)真空净化和用氢气(3X)真空净纯化。所述烧瓶然后可以用氢气加压，并且在大约60℃搅拌直到反应完成。将所述烧瓶冷却到20-25℃，压力释放到环境，将顶部空间用氮气净化三次并过滤混合物。将滤出液浓缩。加入甲醇。搅拌所述混合物，然后冷却。产物沉淀，过滤并在炉子中干燥(产率：90%，HPLC：99.7%)。

g)制备2-(4-羟基-1-甲基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸(3f)

2-(4-羟基-1-甲基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸是由3e根据下面的步骤来制备的。

向压力烧瓶中装入3e(30.92g)、甘氨酸(22.52g)、甲醇(155mL)、甲醇钠溶液(64.81g)，并密封(作为一个选项，使用甘氨酸钠来代替甘氨酸和甲醇钠)。将所述反应加热到大约110℃，直到反应完成。将所述混合物冷却、过滤，用甲醇洗涤、真空干燥，溶解在水中并用乙酸乙酯洗涤。除去乙酸乙酯，并且向所形成的含水层中加入乙酸(18.0g)溶液。将所述悬浮液在室温搅拌、过滤和将固体用水(3x30mL)洗涤、冷丙酮(5-10℃，2x20mL)洗涤，并且在真空下干燥以获得2-(4-羟基-1-甲基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸(产率：86.1%，HPLC：99.8%)。

实施例4

制备2-(4-羟基-1-甲基-8-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸

a)制备1-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基-8-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(4b)

可向配备有热电偶和冷凝器的圆底烧瓶中装入4a和乙酸(大约7摩尔当量±5%)。可将所述4a在乙酸中的悬浮液用磁搅拌强力搅拌(备注：对于更大规模的处理，应当进行顶置式搅拌)。然后可以将稍微过量的双-二甲基氨基甲烷(大约1.25摩尔当量)缓慢加入到所述混合物中[备注：反应是轻微放热的，可以观察到15-20℃的升温]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到55±5℃并保持至少8h。所述反应然后可以通过HPLC评价。如果4a的量大于0.5%，则可以将所述反应在55±5℃再搅拌2小时，并通过HPLC再次评价。

b)制备1-((乙酰氧基)甲基)-4-羟基-8-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(4c)

可将来自实施例4a)的4b溶液冷却到低于25℃，在此时，可以缓慢加入温度低于50℃的乙酸酐(大约3摩尔当量)[备注：反应是放热的，可以观察到20-25℃的升温。加入速率对于控制乙酸酐和二甲基胺4b之间的放热反应是重要的。所产生的过量的热将会导致气态二甲基胺不安全地快速形成]。在所述添加完成后，可以将该混合物加热到100±5℃保持20-24小时。该反应然后可以通过HPLC评价。如果4b的量大于2%，则可以将所述反应再搅拌2小时，然后通过HPLC再次评价。

4d可以通过下面的步骤转化成4c。将来自上述步骤的4c和4d的溶液可以冷却到小于65±5℃，并且良好混合。如果所述反应温度低于30℃，则该反应会凝固。可以缓慢和稳定的加入水(第一半可以在1小时后加入，其余部分在30分钟后加入)。所述混合物然后可以冷却并在20±5℃搅拌至少3小时，在此时，可以过滤该混合物，并且用水洗涤(3X)湿饼，加入到配备有机械搅拌器的圆底烧瓶中。可以加入二氯甲烷和水(3：1体积)，并且将该混合物搅拌30分钟。可以分离二氯甲烷(不包括界面或者含水层)，并将溶液用HPLC评价。

4c可以根据下面的步骤进一步纯化。上面的溶液可以加入到安装有机械搅拌器的烧瓶中，并且冷却到5±5℃。可以加入吗啉，并且将该混合物在5±5℃搅拌30-60分钟，并用HPLC评价。如果4d的量大于2%，则所述反应可以再搅拌1小时。一旦该反应完成，则4c会从冷丙酮/甲醇溶液中沉淀，将其过滤、洗涤，在真空下于50±5℃进行干燥。

c)制备4-羟基-1-甲基-8-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(4e)

可向配备有4叶叶轮的玻璃衬里帕尔压力反应器容器中装入4c、Pd/C(大约0.4-0.5摩尔当量)、无水Na₂CO₃(大约0.5摩尔当量)和乙酸乙酯。所述烧瓶然后可以用氮气(3X)真空净化和用氢气(3X)真空净化。该烧瓶然后可以用氢气加压到设定点60psi，并且在60℃搅拌6-8h，直到反应完成(4c<0.5%)。该烧瓶然后可以冷却到20-25℃，压力释放到环境，将顶部空间用氮气净化三次，并通过玻璃微滤滤纸进行过滤。滤出液可以浓缩并从冷甲醇中沉淀，在真空下于50±5℃干燥。

d)制备2-(4-羟基-1-甲基-8-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸(4f)

2-(4-羟基-1-甲基-8-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸是由4e根据下面的步骤来制备。

压力玻璃反应烧瓶(其包括用于螺帽盖的顶部螺线)可以安装有磁搅拌器，装入4e、甘氨酸(大约3摩尔当量)、甲醇和甲醇钠溶液(具有1.2摩尔当量的NaOCH₃)，并且密封。所述反应然后可以加热到110℃保持至少6h，在此期间，该反应形成了黄色悬浮液。所述反应然后可以冷却到20-25℃，并且通过HPLC评价。该反应可以持续到通过HPLC测量时剩余小于1%的4e，将其过滤、甲醇洗涤、真空干燥，用水溶解并用乙酸乙酯萃取以将杂质除去到低于0.1%。可以除去乙酸乙酯，并且在1小时后可以加入乙酸溶液(具有3摩尔当量的乙酸)。所述悬浮液可以在室温搅拌至少3小时，过滤，和将固体用水(3X)、冷丙酮(5-10℃，2X)洗涤，并且用HPLC评价杂质。如果存在着丙酮可除去的杂质，则所述烧瓶可以装入丙酮并回流至少8h，缓慢冷却到5-10℃，搅拌至少2-3h，过滤，用冷丙酮洗涤(5-10℃，3X)并真空下干燥以获得2-(4-羟基-1-甲基-8-苯氧基异喹啉-3-甲酰胺基)乙酸。

实施例5

制备2-[4-羟基-1-甲基-7-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸

a)制备1-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基-7-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(5b)

可向配备有热电偶和冷凝器的圆底烧瓶中装入5a和乙酸(大约7摩尔当量±5%)。可将所述5a在乙酸中的悬浮液用磁搅拌强力搅拌(备注：对于更大规模的处理，应当进行顶置式搅拌)。然后可以将稍微过量的双-二甲基氨基甲烷(大约1.25摩尔当量)缓慢加入到所述混合物中[备注：反应是轻微放热的，可以观察到15-20℃的升温]。在所述添加完成后，可以将该混合物加热到55±5℃，保持至少8h。所述反应然后可以通过HPLC评价。如果5a的量大于0.5%，则可以将该反应在55±5℃再搅拌2小时，并通过HPLC再次评价。

b)制备1-((乙酰氧基)甲基)-4-羟基-7-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(5c)

可将来自实施例5a)的5b溶液冷却到低于25℃，在此时，可以缓慢加入温度低于50℃的乙酸酐(大约3摩尔当量)[备注：反应是放热的，可以观察到20-25℃的升温。加入速率对于控制乙酸酐和二甲基胺或者5b之间的放热反应是重要的。所产生的过量的热将会导致气态二甲基胺不安全地快速形成]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到100±5℃保持20-24小时。该反应然后可以通过HPLC评价。如果5b的量大于2%，则可以将该反应再搅拌2小时，然后通过HPLC再次评价。

5d可以通过下面的步骤转化成5c。可将来自上述步骤的5c和5d的溶液冷却到小于65±5℃，并且良好混合。如果所述反应温度低于30℃，则该反应会凝固。可以缓慢和稳定地加入水(第一半可以在1小时后加入，其余部分在30分钟后加入)。所述混合物然后可以冷却并在20±5℃搅拌至少3小时，在此时，可以过滤该混合物，并且用水洗涤(3X)湿饼并加入到配备有机械搅拌器的圆底烧瓶中。可以加入二氯甲烷和水(3：1体积)，并且将该混合物搅拌30分钟。可以分离二氯甲烷(不包括界面或者含水层)，并将溶液用HPLC评价。

5c可以根据下面的步骤进一步纯化。上面的溶液可以加入到安装有机械搅拌器的烧瓶中，并且冷却到5±5℃。可以加入吗啉，并且将所述混合物在5±5℃搅拌30-60分钟，并用HPLC评价。如果5d的量大于2%，则所述反应可以再搅拌1小时。一旦该反应完成，则5c会从冷丙酮/甲醇溶液中沉淀，将其过滤、洗涤，在真空下于50±5℃进行干燥。

c)制备4-羟基-1-甲基-7-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(5e)

可向配备有4叶叶轮的玻璃衬里帕尔压力反应器容器装入5c、Pd/C(大约0.4-0.5摩尔当量)、无水Na₂CO₃(大约0.5摩尔当量)和乙酸乙酯。所述烧瓶然后可以用氮气(3X)真空净化和用氢气(3X)真空羧化。该烧瓶然后可以用氢气加压到设定点60psi，并且在60℃搅拌6-8h，直到反应完成(5c<0.5%)。该烧瓶然后可以冷却到20-25℃，压力释放到环境，将顶部空间用氮气羧化三次并通过玻璃微滤滤纸进行过滤。滤出液可以浓缩并从冷甲醇中沉淀，在真空下于50±5℃干燥。

d)制备2-[4-羟基-1-甲基-7-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸(5f)

2-[4-羟基-1-甲基-7-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸是由5e根据下面的步骤来制备的。

压力玻璃反应烧瓶(其包括用于螺帽盖的顶部螺线)可以安装有磁搅拌器，装入5e、甘氨酸(大约3摩尔当量)、甲醇和甲醇钠溶液(具有1.2摩尔当量的NaOCH₃)，并且密封。所述反应然后可以加热到110℃保持至少6h，在此期间，所述反应形成了黄色悬浮液。所述反应然后可以冷却到20-25℃，并且通过HPLC评价。所述反应可以持续到通过HPLC测量时剩余小于1%的5e，将其过滤、甲醇洗涤，真空干燥、用水溶解并用乙酸乙酯萃取以将杂质除去到低于0.1%。可以除去乙酸乙酯，并且在1小时后可以加入乙酸溶液(具有3摩尔当量的乙酸)。所述悬浮液可以在室温搅拌至少3小时，过滤，将固体用水(3X)、冷丙酮(5-10℃，2X)洗涤，并用HPLC评价杂质。如果存在着丙酮可除去的杂质，则所述烧瓶可以装入丙酮并回流至少8h，缓慢冷却到5-10℃，搅拌至少2-3h，过滤，用冷丙酮洗涤(5-10℃，3X)，真空下干燥以获得2-[4-羟基-1-甲基-7-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸。

实施例6

制备2-[4-羟基-1-甲基-6-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸

a)制备1-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基-6-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(6b)

可向配备有热电偶和冷凝器的圆底烧瓶中装入6a和乙酸(大约7摩尔当量±5%)。可将所述6a在乙酸中的悬浮液用磁搅拌强力搅拌(备注：对于更大规模的处理，应当进行顶置式搅拌)。然后可以将稍微过量的双-二甲基氨基甲烷(大约1.25摩尔当量)缓慢加入到所述混合物中[备注：反应是轻微放热的，可以观察到15-20℃的升温]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到55±5℃，保持至少8h。所述反应然后可以通过HPLC评价。如果6a的量大于0.5%，则可以将该反应在55±5℃再搅拌2小时，并通过HPLC再次评价。

b)制备1-((乙酰氧基)甲基)-4-羟基-6-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(6c)

可来自实施例6a)的6b溶液冷却到低于25℃，在此时，可以缓慢加入温度低于50℃的乙酸酐(大约3摩尔当量)[备注：反应是放热的，可以观察到20-25℃的升温。加入速率对于控制乙酸酐和二甲基胺或者6b之间的放热反应是重要的。所产生的过量的热将会导致气态二甲基胺不安全地快速形成]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到100±5℃保持20-24小时。该反应然后可以通过HPLC评价。如果6b的量大于2%，则可以将该反应再搅拌2小时，然后通过HPLC再次评价。

6d可以通过下面的步骤转化成6c。将来自上述步骤的6c和6d的溶液可以冷却到小于65±5℃，并且良好混合。如果所述反应温度低于30℃，则该反应会凝固。可以缓慢和稳定地加入水(第一半可以在1小时后加入，其余部分在30分钟后加入)。所述混合物然后可以冷却和在20±5℃搅拌至少3小时，在此时，可以过滤该混合物，并且用水(3X)洗涤湿饼并加入到配备有机械搅拌器的圆底烧瓶中。可以加入二氯甲烷和水(3：1体积)，并且将该混合物搅拌30分钟。可以分离二氯甲烷(不包括界面或者含水层)，并将溶液用HPLC评价。

6c可以根据下面的步骤进一步纯化。可将上面的溶液加入到安装有机械搅拌器的烧瓶中，并且冷却到5±5℃。可以加入吗啉，并且将该混合物在5±5℃搅拌30-60分钟，并用HPLC评价。如果6d的量大于2%，则所述反应可以再搅拌1小时。一旦所述反应完成，则6c会从冷丙酮/甲醇溶液中沉淀，将其过滤、洗涤，在真空下于50±5℃进行干燥。

c)制备4-羟基-1-甲基-6-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(6e)

可向配备有4叶叶轮的玻璃衬里帕尔压力反应器容器中装入6c、Pd/C(大约0.4-0.5摩尔当量)、无水Na₂CO₃(大约0.5摩尔当量)和乙酸乙酯。所述烧瓶然后可以用氮气(3X)真空净化和用氢气(3X)真空净化。该烧瓶然后可以用氢气加压到设定点60psi，并且在60℃搅拌6-8h，直到反应完成(6c<0.5%)。该烧瓶然后可以冷却到20-25℃，压力释放到环境，将顶部空间用氮气净化三次并通过玻璃微滤滤纸进行过滤。滤出液可以浓缩并从冷甲醇中沉淀，在真空下于50±5℃干燥。

d)制备2-[4-羟基-1-甲基-6-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸(6f)

2-[4-羟基-1-甲基-6-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸是由6e根据下面的步骤来制备的。

压力玻璃反应烧瓶(其包括用于螺帽盖的顶部螺线)可以安装有磁搅拌器，装入6e、甘氨酸(大约3摩尔当量)、甲醇和甲醇钠溶液(具有1.2摩尔当量的NaOCH₃)，并且密封。所述反应然后可以加热到110℃保持至少6h，在此期间，该反应形成了黄色悬浮液。该反应然后可以冷却到20-25℃，并且通过HPLC评价。该反应可以持续到通过HPLC测量时剩余小于1%的6e，将其过滤、甲醇洗涤、真空干燥，用水溶解并用乙酸乙酯萃取以将杂质除去到低于0.1%。可以除去乙酸乙酯，并且在1小时后可以加入乙酸溶液(具有3摩尔当量的乙酸)。所述悬浮液可以在室温搅拌至少3小时，过滤，并将固体用水(3X)、冷丙酮(5-10℃，2X)洗涤，并且用HPLC评价杂质。如果存在着丙酮可除去的杂质，则所述烧瓶可以装入丙酮并回流至少8h，缓慢冷却到5-10℃，搅拌至少2-3h，过滤，用冷丙酮洗涤(5-10℃，3X)，真空下干燥以获得2-[4-羟基-1-甲基-6-(4-甲氧基-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸。

实施例7

制备2-[4-羟基-1-甲基-7-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸

a)制备1-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基-7-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(7b)

可向配备有热电偶和冷凝器的圆底烧瓶中装入7a和乙酸(大约7摩尔当量±5%)。可将所述7a在乙酸中的悬浮液用磁搅拌强力搅拌(备注：对于更大规模的处理，应当进行顶置式搅拌)。然后可以将稍微过量的双-二甲基氨基甲烷(大约1.25摩尔当量)缓慢加入到所述混合物中[备注：反应是轻微放热的，可以观察到15-20℃的升温]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到55±5℃并保持至少8h。所述反应然后可以通过HPLC评价。如果7a的量大于0.5%，则可以将该反应在55±5℃再搅拌2小时，并通过HPLC再次评价。

b)制备1-((乙酰氧基)甲基)-4-羟基-7-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(7c)

可将来自实施例7a)的7b溶液冷却到低于25℃，在此时，可以缓慢加入温度低于50℃的乙酸酐(大约3摩尔当量)[备注：反应是放热的，可以观察到20-25℃的升温。加入速率对于控制乙酸酐和二甲基胺或者7b之间的放热反应是重要的。所产生的过量的热将会导致气态二甲基胺不安全地快速形成]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到100±5℃保持20-24小时。所述反应然后可以通过HPLC评价。如果7b的量大于2%，则可以将所述反应再搅拌2小时，然后通过HPLC再次评价。

7d可以通过下面的步骤转化成7c。可将来自上述步骤的7c和7d的溶液冷却到小于65±5℃，并且良好混合。如果所述反应温度低于30℃，则该反应会凝固。可以缓慢和稳定的加入水(第一半可以在1小时后加入，其余部分在30分钟后加入)。可将所述混合物然后冷却并在20±5℃搅拌至少3小时，在此时，可以过滤该混合物，用水(3X)洗涤湿饼并加入到配备有机械搅拌器的圆底烧瓶中。可以加入二氯甲烷和水(3：1体积)，并且将该混合物搅拌30分钟。可以分离二氯甲烷(不包括界面或者含水层)，并将溶液用HPLC评价。

7c可以根据下面的步骤进一步纯化。上面的溶液可加入到安装有机械搅拌器的烧瓶中，并且冷却到5±5℃。可以加入吗啉，并且将该混合物在5±5℃搅拌30-60分钟，并用HPLC评价。如果7d的量大于2%，则所述反应可以再搅拌1小时。一旦该反应完成，则7c会从冷丙酮/甲醇溶液中沉淀，将其过滤、洗涤，在真空下于50±5℃进行干燥。

c)制备4-羟基-1-甲基-7-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(7e)

可向配备有4叶叶轮的玻璃衬里帕尔压力反应器容器中装入7c、Pd/C(大约0.4-0.5摩尔当量)、无水Na₂CO₃(大约0.5摩尔当量)和乙酸乙酯。所述烧瓶然后可以用氮气(3X)真空净化和用氢气(3X)真空净化。该烧瓶然后可以用氢气加压到设定点60psi，并且在60℃搅拌6-8h，直到反应完成(7c<0.5%)。该烧瓶然后可以冷却到20-25℃，压力释放到环境，将顶部空间用氮气净化三次并通过玻璃微滤滤纸进行过滤。滤出液可以浓缩并从冷甲醇中沉淀，在真空下于50±5℃干燥。

d)制备2-[4-羟基-1-甲基-7-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸(7f)

2-[4-羟基-1-甲基-7-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸是由7e根据下面的步骤来制备的。

压力玻璃反应烧瓶(其包括用于螺帽盖的顶部螺线)可以安装有磁搅拌器，装入7e、甘氨酸(大约3摩尔当量)、甲醇和甲醇钠溶液(具有1.2摩尔当量的NaOCH₃)，并且密封。所述反应然后可以加热到110℃保持至少6h，在此期间，该反应形成了黄色悬浮液。所述反应然后可以冷却到20-25℃，并且通过HPLC评价。该反应可以持续到通过HPLC测量时剩余小于1%的7e，将其过滤、甲醇洗涤、真空干燥，用水溶解并用乙酸乙酯萃取以将杂质除去到低于0.1%。可以除去乙酸乙酯，并且在1小时后可以加入乙酸溶液(具有3摩尔当量的乙酸)。所述悬浮液可以在室温搅拌至少3小时，过滤，并将固体用水(3X)、冷丙酮(5-10℃，2X)洗涤，并用HPLC评价杂质。如果存在着丙酮可除去的杂质，则所述烧瓶可以装入丙酮并回流至少8h，缓慢冷却到5-10℃，搅拌至少2-3h，过滤，用冷丙酮洗涤(5-10℃，3X)，真空下干燥以获得2-[4-羟基-1-甲基-7-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸。

实施例8

制备2-[4-羟基-1-甲基-6-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸

a)制备1-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基-6-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(8b)

可向配备有热电偶和冷凝器的圆底烧瓶中装入8a和乙酸(大约7摩尔当量±5%)。可将所述8a在乙酸中的悬浮液用磁搅拌强力搅拌(备注：对于更大规模的处理，应当进行顶置式搅拌)。然后可以将稍微过量的双-二甲基氨基甲烷(大约1.25摩尔当量)缓慢加入到所述混合物中[备注：反应是轻微放热的，可以观察到15-20℃的升温]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到55±5℃并保持至少8h。该反应然后可以通过HPLC评价。如果8a的量大于0.5%，则可以将该反应在55±5℃再搅拌2小时，并通过HPLC再次评价。

b)制备1-((乙酰氧基)甲基)-4-羟基-6-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(8c)

可将来自实施例8a)的8b溶液冷却到低于25℃，在此时，可以缓慢加入温度低于50℃的乙酸酐(大约3摩尔当量)[备注：反应是放热的，可以观察到20-25℃的升温。加入速率对于控制乙酸酐和二甲基胺或者8b之间的放热反应是重要的。所产生的过量的热将会导致气态二甲基胺不安全地快速形成]。在所述添加完成后，可以将所述混合物加热到100±5℃保持20-24小时。所述反应然后可以通过HPLC评价。如果8b的量大于2%，则可以将该反应再搅拌2小时，然后通过HPLC再次评价。

8d可以通过下面的步骤转化成8c。可将来自上述步骤的8c和8d的溶液冷却到小于65±5℃，并且良好混合。如果所述反应温度低于30℃，则该反应会凝固。可以缓慢和稳定的加入水(第一半可以在1小时后加入，其余部分在30分钟后加入)。所述混合物然后可以冷却并在20±5℃搅拌至少3小时，在此时，可以过滤该混合物，用水(3X)洗涤湿饼并加入到配备有机械搅拌器的圆底烧瓶中。可以加入二氯甲烷和水(3：1体积)，并且将该混合物搅拌30分钟。可以分离二氯甲烷(不包括界面或者含水层)，并将溶液用HPLC评价。

8c可以根据下面的步骤进一步纯化。上面的溶液可以加入到安装有机械搅拌器的烧瓶中，并且冷却到5±5℃。可以加入吗啉，并且将该混合物在5±5℃搅拌30-60分钟，并用HPLC评价。如果8d的量大于2%，则所述反应可以再搅拌1小时。一旦该反应完成，则8c会从冷丙酮/甲醇溶液中沉淀，将其过滤、洗涤，在真空下于50±5℃进行干燥。

c)制备4-羟基-1-甲基-6-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酸甲酯(8e)

可向配备有4叶叶轮的玻璃衬里帕尔压力反应器容器中装入8c、Pd/C(大约0.4-0.5摩尔当量)、无水Na₂CO₃(大约0.5摩尔当量)和乙酸乙酯。所述烧瓶然后可以用氮气(3X)真空净化和用氢气(3X)真空净化。该烧瓶然后可以用氢气加压到设定点60psi，并且在60℃搅拌6-8h，直到反应完成(8c<0.5%)。该烧瓶然后可以冷却到20-25℃，压力释放到环境，将顶部空间用氮气净化三次并通过玻璃微滤滤纸进行过滤。滤出液可以浓缩并从冷甲醇中沉淀，在真空下于50±5℃干燥。

d)制备2-[4-羟基-1-甲基-6-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸(8f)

2-[4-羟基-1-甲基-6-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸是由8e根据下面的步骤来制备的。

压力玻璃反应烧瓶(其包括用于螺帽盖的顶部螺线)可以安装有磁搅拌器，装入8e、甘氨酸(大约3摩尔当量)、甲醇和甲醇钠溶液(具有1.2摩尔当量的NaOCH₃)，并且密封。所述反应然后可以加热到110℃保持至少6h，在此期间，该反应形成了黄色悬浮液。该反应然后可以冷却到20-25℃，并且通过HPLC评价。该反应可以持续到通过HPLC测量时剩余小于1%的8e，将其过滤、甲醇洗涤、真空干燥，用水溶解并用乙酸乙酯萃取以将杂质除去到低于0.1%。可以除去乙酸乙酯，并且在1小时后可以加入乙酸溶液(具有3摩尔当量的乙酸)。所述悬浮液可以在室温搅拌至少3小时，过滤，将固体用水(3X)、冷丙酮(5-10℃，2X)洗涤，并且用HPLC评价杂质。如果存在着丙酮可除去的杂质，则所述烧瓶可以装入丙酮并回流至少8h，缓慢冷却到5-10℃，搅拌至少2-3h，过滤，用冷丙酮洗涤(5-10℃，3X)，真空下干燥以获得2-[4-羟基-1-甲基-6-(3,5-二氟-苯氧基)-异喹啉-3-甲酰胺基]乙酸。

实施例9

生物学测试

本发明的化合物和方法可以用于合成不同的异喹啉化合物。已知这样的化合物能够用于抑制HIF羟化酶活性，由此提高缺氧诱导因子(HIF)的稳定性和/或活性，并且能够用于治疗和预防与HIF有关的病症和紊乱(参见例如US专利No.7323475，US公开No.2007/0004627，US公开No.2006/0276477和US公开No.2007/0259960，在此引入作为参考)。

示例性取代的异喹啉化合物的生物学活性可以使用任何常规已知的方法来评价。在具体的实施方案中，来源于动物组织(优选人类组织)的细胞，当通过本发明化合物进行刺激时其能够表达红细胞生成素被培养以用于生物体外生产内生蛋白质。预期用于该方法的细胞包括但不限于，来源于肝的、造血的、肾的和神经系统组织的细胞。

细胞培养技术通常是本领域可以利用的，并且包括任何这样的方法，其能够保持细胞存活性和促进内生蛋白质的表达。细胞通常是在优化用于细胞生长、存活和蛋白质生产的生长培养基中培养的。细胞可以处于悬浮液中或者附着到基质上上，并且培养基可以以分批供料或者连续流过的形式来供给。本发明的化合物以这样的水平被加入到培养基中，即刺激红细胞生成素的产生而不危及细胞存活性的水平。细胞所产生的红细胞生成素被分泌到培养基中。然后收集所述培养基，并且使用本领域技术人员已知的方法来纯化红细胞生成素。(参见例如Lai等人(1987)US专利No.4667016；和Egrie(1985)US专利No.4558006)。

合适的检测方法是本领域公知的。下面仅仅是作为实例提出，并非旨在限制本发明。

基于细胞的HIFα稳定性检测

将来源于不同组织的人类细胞(例如来自肝细胞组织的Hep3B细胞)分别接种到35mm培养皿中，并且在37℃、20%O₂、5%CO₂于常规培养基中例如DMEM(杜尔伯克改良伊格尔培养基)、10%FBS(小牛血清)中培养。当细胞层实现汇合时，将所述培养基替换为OPTI-MEM培养基(Invitrogen Life Technologies，Carlsbad CA)，将细胞层于37℃在20%O₂，5%CO₂中培养大约24小时。然后将化合物或0.013%的DMSO(二甲基亚砜)加入到现有的培养基中，并且持续培养一整夜。

在培养后，将所述培养基除去、离心分离和存储用于分析(参见下面的基于细胞的VEGF和EPO检测)。将所述细胞用冷的磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤两次，然后在1mL的10mM Tris(pH7.4)、1mMEDTA、150mM NaCl、0.5%IGEPAL(Sigma-Aldrich，St.Louis MO)和蛋白酶抑制剂混合物(Roche Molecular Biochemicals)中在冰上进行细胞溶解15分钟。将细胞溶解物在3000×g和4℃离心分离5分钟，并且收集细胞溶质部分(上清液)。将核(粒料)重新悬浮，并且在100μL的20mM HEPES(pH7.2)、400mM NaCl、1mM EDTA、1mM二硫苏糖醇和蛋白酶混合物(Roche Molecular Biochemicals)中溶解细胞，在13000×g和4℃离心分离5分钟，并且收集细胞核蛋白质部分(上清液)。

使用QUANTIKINE免疫检测(R&D Systems，Inc.，MinneapolisMN)根据制造商使用说明分析所收集细胞核蛋白质部分的HIF-1α。

基于细胞的EPO检测

将Hep3B细胞(人类肝细胞的癌细胞，来自ATCC，cat#HB-8064)接种到25000细胞/孔的96孔板中。第二天，将所述细胞用 DMEM(Cellgro，cat#10-013-CM)+0.5%小牛血清(Cellgro，cat#35-010-CV)洗涤一次，并用不同浓度的化合物或者溶剂对照(vehicle control)(0.15%的DMSO)在DMEM+0.5%小牛血清中培养72小时。通过转移到圆锥底的96孔板中，并且在2000rpm离心分离5分钟，以产生无细胞的培养上清液。使用人类EPO ELISA试剂盒(R&D Systems，cat#DEP00)将所述上清液定量EPO。

本文报道的所述化合物的EPO值(例如表1)是加上化合物的测量值减去相同细胞制剂的溶剂对照值的细胞测量值。本文所报道的试验中所用的细胞制剂的溶剂对照EPO值是从0到12.5mIU/ml变化的。

HIF-PH检测

酮戊二酸α-[1-¹⁴C]-钠盐、α-酮戊二酸钠盐和HPLC纯化的肽获自商业来源，例如分别获自Perkin-Elmer(WellesleyMA)、Sigma-Aldrich和SynPep Corp.(DublinCA)。用于所述检测的肽是上述的或者公开在国际公开WO2005/118836中的HIFα的片段，其在此引入作为参考。例如用于HIF-PH检测中的HIF肽是[甲氧基香豆素]-DLDLEALAPYIPADDDFQL-酰胺。HIF-PH，例如HIF-PH2(也称作EGLN1或者PHD2)是在例如昆虫Hi5细胞中表达的，并且例如通过SP离子交换色谱柱来进行部分纯化。酶活性是使用Kivirikko和Myllyla所述的检测(1982，Methods Enzymol.82：245-304)，通过捕获 ¹⁴CO₂来测定的。检测反应包含50mM HEPES(pH7.4)、100μM α-酮戊二酸钠盐、0.30μCi/mLα-酮戊二酸α-[1-¹⁴C]-钠盐、40μM FeSO₄、1mM抗坏血酸盐、1541.8单位/mL的过氧化氢酶，具有或不具有50μM的肽基质和不同浓度的本发明化合物。反应是通过加入HIF-PH酶来开始的。

肽相关百分比周转率（percent turnover）是用存在基质肽时的百分比周转率减去在不存在肽时的百分比周转率来计算的。抑制率百分比和IC₅₀是使用给定抑制剂浓度时的肽相关百分比周转率来计算的。每个抑制剂IC₅₀值的计算是使用GraFit软件(Erithacus Software Ltd.，Surrey UK)来进行的。结果汇总在表1中。

下表1目的是证明示例性取代的异喹啉化合物的药理学效用。通过抑制HIF脯氨酰羟化酶，取代的异喹啉化合物稳定了HIFα，HIFα然后与HIFβ结合以形成活性转录因子，所述活性转录因子提高了包括涉及响应低含氧和缺血条件的众多基因的表达，包括红细胞生成素(EPO)。

表1

*相比仅DMSO的对照，在DMSO中30μM化合物所测量的细胞EPO。

Claims

1.一种制备式I的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法，

其包括在足以产生式I的化合物的反应条件下，将式II的化合物与式III的化合物进行接触：

其中

Z是O、NR¹或S；

R¹选自氢和烷基；

其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-；

n是0、1或2；

R⁹选自氢、烷基和芳基；

其中X²是氧、-S(O)_n-或–NR¹³-；

n是0、1或2；

R¹³选自氢、烷基和芳基；

或者当X²是–NR¹³-时，则R¹⁰和R¹³与和它们键合的氮原子一起可以结合形成杂环基或取代的杂环基基团；和

2.制备式IA的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括在足以产生式IA的化合物的反应条件下，将式IIA的化合物与式III的化合物进行接触：

其中

R²选自氢和未取代的或者是用独立地选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中一种或多种取代基取代的烷基；

R³和R⁴独立地选自氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸其中n是0、1或2、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸、-X¹R⁸其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-其中n是0、1或2，或者R³、R⁴与侧接到其上的碳原子一起形成环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基；

R⁵和R⁶独立地选自氢、卤素、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基和–X²R¹⁰其中X²是氧、-S(O)_n-或–NR¹³-其中n是0、1或2，或者当X²是–NR¹³-时，则R¹³和R¹⁰与和它们键合的氮原子一起可以结合形成杂环基或取代的杂环基基团；

每个R⁸独立地选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，条件是当X¹是–SO-或-SO₂-时，则R⁸不是氢；

R⁹和R¹³独立地选自氢、烷基和芳基；

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述反应条件包括酸。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述酸是冰醋酸。

5.如权利要求1或2所述的方法，其中所述反应在大于大约30℃的温度进行。

6.如权利要求1或2所述的方法，其中所述反应在大约50℃-大约60℃的温度下进行。

7.如权利要求1或2所述的方法，其中R¹¹是C₁-C₄烷基。

8.制备式IV的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括在足以产生式IV的化合物的反应条件下，将式I的化合物：

与式

的化合物、随后与式

的化合物进行接触；与式R¹²-X³的化合物、随后与式

的化合物进行接触；或者与式V的化合物接触：

其中

Z是O、NR¹或S；

R¹选自氢和烷基；

R³和R⁴独立地选自氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸其中n是0、1或2、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸、-X¹R⁸其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-其中n是0、1或2，或者R³、R⁴与侧接到其上的碳原子一起形成环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基或者取代的杂芳基)；

R⁹和R¹³独立地选自氢、烷基和芳基；

R¹⁰选自烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基；

每个R¹¹独立地选自烷基、苄基或芳基，或者两个R¹¹与和它们连接的氮原子一起形成4-8元杂环基或杂芳基；

每个R¹²独立地选自烷基、芳基、杂芳基和杂环，或者当存在两个R¹²时，两个R¹²与和它们连接的碳原子一起形成4-8元杂环基；和

X³是卤素。

9.制备式IVA的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括在足以产生式IVA的化合物的反应条件下，将式IA的化合物与式V的化合物进行接触：

其中

R⁵和R⁶独立地选自氢、卤素、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基和–X²R¹⁰其中X²是氧、-S(O)_n-或–NR¹³-其中n是0、1或2，或者当X²是–NR¹³-时，则R¹³和R¹⁰与和它们连接的氮原子一起可以结合形成杂环基或取代的杂环基基团；

R⁹和R¹³独立地选自氢、烷基和芳基；

每个R¹²独立地选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基，或者两个R¹²与和它们连接的碳原子一起形成4-8元杂环基。

10.如权利要求8或9所述的方法，其中所述反应条件包括式V的化合物。

11.如权利要求8或9所述的方法，其中所述反应在惰性气氛下进行。

12.如权利要求8或9所述的方法，其中所述反应在氮气氛下进行。

13.如权利要求8或9所述的方法，其中所述反应条件是无水反应条件。

14.如权利要求8或9所述的方法，其中所述反应在大于约30℃的温度进行。

15.如权利要求8或9所述的方法，其中所述反应在大约100℃的温度下进行。

16.如权利要求8或9所述的方法，其中R¹¹和R¹²是C₁-C₄烷基。

17.如权利要求8或9所述的方法，其中R¹¹和R¹²是甲基。

18.如权利要求8或9所述的方法，其中所述反应条件包括式V的化合物，其中R¹²是C₁-C₄烷基；和其中所述反应在大约100℃的温度下进行。

19.如权利要求18所述的方法，进一步地，其中所述反应在氮气氛下进行。

20.如权利要求8或9所述的方法，其中所述反应条件进一步包括将式VII的化合物转化成式IV的化合物；

或者将式VIIA的化合物转化成式IVA的化合物，

21.如权利要求20所述的方法，其中所述反应条件包括胺。

22.如权利要求21所述的方法，其中所述胺是吗啉。

23.如权利要求20所述的方法，其中所述反应是在二氯甲烷中进行的。

24.如权利要求20所述的方法，其中所述反应在低于25℃的温度下进行。

25.如权利要求20所述的方法，其中所述反应在约0℃-约10℃的温度下进行。

26.如权利要求20所述的方法，其中所述反应条件包括吗啉；和其中所述反应在二氯甲烷和约0℃-约10℃的温度下进行。

27.制备式VI的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括在足以产生式VI的化合物的反应条件下转化式IV的化合物：

其中

Z是O、NR¹或S；

R¹选自氢和烷基；

R⁹和R¹³独立地选自氢、烷基和芳基；和

每个R¹²独立地选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基。

28.制备式VIA的化合物或者其立体异构体或其立体异构体混合物的方法：

其包括在足以产生式VIA的化合物的反应条件下转化式IVA的化合物：

其中

R³和R⁴独立地选自氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸其中n是0、1或2、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸、-X¹R⁸其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-其中n是0、1或2，或者R³、R⁴与侧接到其上的碳原子一起形成环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基或者取代的杂芳基；

R⁹和R¹³独立地选自氢、烷基和芳基；和

每个R¹²独立地选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基。

29.如权利要求27或28所述的方法，其中所述反应条件包括氢。

30.如权利要求27或28所述的方法，其中所述反应条件包括碱。

31.如权利要求30所述的方法，其中所述碱是碳酸钠。

32.如权利要求27或28所述的方法，其中所述反应条件包括乙酸乙酯。

33.如权利要求27或28所述的方法，其中所述反应条件包括催化剂。

34.如权利要求33所述的方法，其中所述催化剂是Pd/C。

35.如权利要求27或28所述的方法，其中所述反应条件包括在压力下的条件。

36.如权利要求27或28所述的方法，其中所述反应条件包括在大约60psi压力下的条件。

37.如权利要求27或28所述的方法，其中所述反应条件包括氢、碳酸钠、乙酸乙酯、Pd/C和在压力下的条件。

38.如权利要求27或28所述的方法，其中所述反应条件包括氢、碳酸钠、乙酸乙酯、Pd/C和在大约60psi的压力下的条件。

39.如权利要求27或28所述的方法，其中R¹²是C₁-C₄烷基。

40.如权利要求27或28所述的方法，其中R¹²是甲基。

41.制备式VI的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

所述方法包括下述步骤：

a)在足以产生式I的化合物的反应条件下，将式II的化合物与式III的化合物进行接触；

b)在足以产生式IV的化合物的反应条件下，将式I的化合物与式

的化合物、随后与式

的化合物进行接触；与式R¹²-X³的化合物、随后与式

的化合物进行接触；或者与式V的化合物接触；

c)任选地在足以产生式IV化合物的反应条件下，转化式VII的化合物；

和

d)在足以产生式VI的化合物的反应条件下转化式IV的化合物；

其中

Z是O、NR¹或S；

R¹选自氢和烷基；

R³和R⁴独立地选自氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸其中n是0、1或2、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸、-X¹R⁸其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-其中n是0、1或2，或者R³、R⁴与侧接于其上的碳原子一起形成环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基；

R⁹和R¹³独立地选自氢、烷基和芳基；和

每个R¹²独立地选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基，或者当存在两个R¹²时，两个R¹²与和它们连接的碳原子一起形成4-8元杂环基；和

X³是卤素。

42.制备式VIA的化合物或者其立体异构体或其立体异构体混合物的方法：

所述方法包括下述步骤：

a)在足以产生式IA的化合物的反应条件下将式IIA的化合物与式III的化合物进行接触；

b)在足以产生式IVA的化合物的反应条件下将式IA的化合物与式V的化合物进行接触；

c)任选地在足以产生式IVA的反应条件下，转化式VIIA的化合物；

和

d)在足以产生式VIA的反应条件下转化式IVA的化合物；

其中

R³和R⁴独立地选自氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸其中n是0、1或2、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸、-X¹R⁸其中X¹是氧，-S(O)_n-或-NR⁹-其中n是0、1或2，或者R³、R⁴与侧接到其上的碳原子一起形成环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基；

R⁵和R⁶独立地选自氢、卤素、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基和–X²R¹⁰其中X²是氧、-S(O)_n-或–NR⁹-其中n是0、1或2，或者当X²是–NR¹³-时，则R¹³和R¹⁰与和它们连接的氮原子一起可以结合形成杂环基或取代的杂环基基团；

R⁹和R¹³独立地选自氢、烷基和芳基；和

每个R¹¹独立地选自烷基、苄基或者芳基，或者两个R¹¹与和它们连结的氮原子一起形成4-8元杂环基或杂芳基；和

每个R¹²独立地选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基，或者两个R¹²与和它们连结的碳原子一起形成4-8元杂环基。

43.如权利要求41或42所述的方法，其中步骤a)和b)的反应条件包括酸。

44.如权利要求41或42所述的方法，其中R¹¹和R¹²是C₁-C₄烷基。

45.如权利要求41或42所述的方法，其中R¹¹和R¹²是C₁-C₄烷基，且R³、R⁵和R⁶是氢。

46.如权利要求41或42所述的方法，其中R¹¹和R¹²是C₁-C₄烷基，且R⁴、R⁵和R⁶是氢。

47.如权利要求41或42所述的方法，其中R¹¹和R¹²是甲基。

48.制备式VIC的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括下述步骤：

a)在足以产生式IC化合物的反应条件下，将式IIC的化合物与式IIIA的化合物接触；

b)在足以产生式IVC的化合物的反应条件下，将式IC的化合物与式VA的化合物接触；

c)任选地在足以产生式IVC的化合物的反应条件下转化式VIIC的化合物；

和

d)在足以产生式VIC的化合物的反应条件下转化式IVC的化合物；

其中

R⁴选自氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸其中n是0、1或2、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸、-X¹R⁸其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-其中n是0、1或2，或者R³、R⁴与侧接于其上的碳原子一起形成环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基；

每个R⁸独立地选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，条件是当X¹是–SO-或-SO₂-时，则R⁸不是氢；和

每个R⁹选自氢、烷基和芳基。

49.如权利要求48所述的方法，其进一步包括步骤：

e)在足以产生式XC的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的反应条件下，将式VIC的化合物与甘氨酸接触：

50.如权利要求48或49所述的方法，其中R²是氢，且R⁴是苯氧基。

51.如权利要求48或49所述的方法，其中R²是氢，且R⁴是4-甲氧基苯氧基。

52.如权利要求48或49所述的方法，其中R²是氢，且R⁴是3,5-二氟苯氧基。

53.制备式VID的化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的方法：

其包括下述步骤：

a)在足以产生式ID的化合物的反应条件下，将式IID的化合物与式IIIA的化合物接触；

c)任选地在足以产生式IVD化合物的条件下，转化式VIID的化合物；

和

d)在足以产生式VID化合物的条件下，转化式IVD的化合物；

其中

R³选自氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、氰基、-S(O)_n-N(R⁸)-R⁸其中n是0、1或2、-NR⁸C(O)NR⁸R⁸、-X¹R⁸其中X¹是氧、-S(O)_n-或-NR⁹-其中n是0、1或2，或者R³、R⁴与侧接于其上的碳原子一起形成环烷基、取代的环烷基、杂环基、取代的杂环基、芳基、取代的芳基、杂芳基或者取代的杂芳基；

每个R⁹选自氢、烷基和芳基。

54.如权利要求53所述的方法，其进一步包括步骤：

e)在足以产生式XD化合物或者其立体异构体或立体异构体混合物的条件下，将式VID的化合物与甘氨酸接触：

55.如权利要求53或54所述的方法，其中R²是氢，且R³是苯氧基。

56.如权利要求53或54所述的方法，其中R²是氢，且R³是4-甲氧基苯氧基。

57.如权利要求53或54所述的方法，其中R²是氢，且R³是3,5-二氟苯氧基。

58.如权利要求41、42、48或53任一项所述的方法，其中步骤a)的反应条件包括酸。

59.如权利要求58所述的方法，其中所述酸是冰醋酸。

60.如权利要求41、42、48或53任一项所述的方法，其中步骤a)在大于大约30℃的温度下进行。

61.如权利要求41、42、48或53任一项所述的方法，其中步骤a)在约50℃-约60℃的温度下进行。

62.如权利要求41、42、48或53任一项所述的方法，其中步骤b)在大于大约30℃的温度下进行。

63.如权利要求41、42、48或53任一项所述的方法，其中步骤b)在大约100℃的温度下进行。

64.如权利要求41、42、48或53任一项所述的方法，其中所述方法包括步骤c)。

65.如权利要求64所述的方法，其中步骤c)的反应条件包括胺。

66.如权利要求65所述的方法，其中所述胺是吗啉。

67.如权利要求64所述的方法，其中步骤c)在二氯甲烷中进行。

68.如权利要求64所述的方法，其中步骤c)在低于大约25℃的温度下进行。

69.如权利要求64所述的方法，其中步骤c)在约0℃-约10℃的温度下进行。

70.如权利要求41、42、48或53任一项所述的方法，其中步骤d)的反应条件包括氢。

71.如权利要求41、42、48或53任一项所述的方法，其中步骤d)的反应条件包括碱。

72.如权利要求71所述的方法，其中所述碱是碳酸钠。

73.如权利要求71所述的方法，其中步骤d)的反应条件包括约0.5-约1摩尔当量的碳酸钠。

74.如权利要求41、42、48或53任一项所述的方法，其中步骤d)的反应条件包括乙酸乙酯。

75.如权利要求41、42、48或53任一项所述的方法，其中步骤d)的反应条件包括催化剂。

76.如权利要求75所述的方法，其中所述催化剂是Pd/C。

77.如权利要求1或41所述的方法，其中使用约1.1-约1.5摩尔当量的式III的化合物。

78.如权利要求2或42所述的方法，其中使用约1.1-约1.5摩尔当量的式III的化合物。

79.如权利要求48或53所述的方法，其中使用约1.1-约1.5摩尔当量的式IIIA的化合物。

80.如权利要求8或41所述的方法，其中使用约2-约3摩尔当量的式V的化合物。

81.如权利要求9或42所述的方法，其中使用约2-约3摩尔当量的式V的化合物。

82.如权利要求48或53所述的方法，其中使用约2-约3摩尔当量的式VA的化合物。

83.一种式VIII的化合物或者其盐、酯、立体异构体或立体异构体混合物：

VIII

其中：

Z是O、NR¹或S；

R¹选自氢和烷基；

R⁷是–N(R¹¹)(R¹¹)或–OC(O)R¹²；

R⁹和R¹³独立地选自氢、烷基和芳基；

每个R¹¹独立地选自烷基、苄基或芳基，或者两个R¹¹与和它们连结的氮原子一起形成4-8元杂环基或杂芳基；和

每个R¹²独立地选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基；

84.一种式VIIIA的化合物或者其盐、酯、立体异构体或其立体异构体混合物：

其中：

R⁷是–N(R¹¹)(R¹¹)或–OC(O)R¹²；

R⁹和R¹³独立地选自氢、烷基和芳基；

每个R¹²独立地选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基；

85.如权利要求83或84所述的化合物，其中R²是未取代的烷基。

86.如权利要求83或84所述的化合物，其中R⁵和R⁶是氢。

87.如权利要求83或84所述的化合物，其中：

R²选自未取代的或者用独立地选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中一种或多种取代基取代的烷基；和

R⁵和R⁶是氢。

88.如权利要求83或84所述的化合物，其中R⁷是–N(R¹¹)(R¹¹)，且R¹¹是C₁-C₄烷基。

89.如权利要求83或84所述的化合物，其中R⁷是–OC(O)R¹²，且R¹²是C₁-C₄烷基。

90.如权利要求83或84所述的化合物，其中：

R²是未取代的或者用独立地选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中一种或多种取代基取代的烷基；

R⁵和R⁶是氢；

R⁷是–N(R¹¹)(R¹¹)；

R⁹选自氢、烷基和芳基；和

每个R¹¹独立地选自C₁-C₄烷基或芳基。

91.如权利要求83或84所述的化合物，其中：

R⁵和R⁶是氢；

R⁷是–OC(O)R¹²；

R⁹选自氢、烷基和芳基；和

每个R¹²独立地选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基。

92.一种化合物，其是4-羟基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(3a)：

93.一种化合物，其是4-羟基-1-甲基-7-苯氧基异喹啉-3-甲酸甲酯(3e)：