CN103168617A - 虎乳灵芝的段木栽培方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了虎乳灵芝的段木栽培方法。该方法包括虎乳灵芝母种、原种和段木栽培种制作，选地整地、段木栽培种埋土、田间管理和采收。本发明克服以前技术不足，模仿虎乳灵芝的野生生长环境，采用段木栽培方法培养虎乳灵芝，满足虎乳灵芝菌核营养需求，从而形成优质菌核。

Description

虎乳灵芝的段木栽培方法

技术领域

本发明涉及一种食药用菌的人工栽培方法，属于食药用菌人工栽培领域。

背景技术

虎乳灵芝Lignosus rhinocerus(Cooke) Ryvarden，隶属真菌门Eumycota, 担子菌亚门Basidiomycotin，层菌纲Hymenomycetes，非褶菌目Aphyllophorales,多孔菌科Polyporaceae,虎乳灵芝属Lignosus，也称虎奶，是一种被马来西亚原住民广泛使用的食药用真菌，大约有400年的应用历史。主要分布于马来西亚,菲律宾,斯里兰卡,澳大利亚和东非等，中国分布于海南省。菌核是其药用部位，有止咳定喘、健脾化湿的功效，民间常用于治疗哮喘及咳喘，疗效极佳。中医认为它是一种治疗肝炎、肝热、肝癌、胃病的良药。西医出身的马来西亚前首相马哈蒂尔在2002年马来西亚国际生物技术大会上提到虎乳灵芝治愈他久咳之病后更是名声大振。由于乱采乱挖、资源破坏现象严重, 目前野生资源逐渐枯竭，市场上虎乳灵芝供应不足，价格昂贵。

目前有关虎乳灵芝人工栽培的报道很少，只检索到一种代料栽培方法的报道（药用真菌新品种-虎乳灵芝的人工栽培实验，中国食用菌,1999,18(3):8-9）。该法存在的不足主要有：形成菌核无固定着点，数量多，个体小，发育差，商品价值较低。究其原因，代料栽培在经过半年的培养后，培养基中养料已耗光,菌核不可能再长大。虎乳灵芝生长周期较长，后期营养跟不上则没法继续生长，因此相比而言，野生虎乳灵芝菌核较大。本发明克服现有技术不足，模仿虎乳灵芝的野生生长环境，采用段木栽培方法培养虎乳灵芝，一般新鲜段木两三年内不会被完全分解，因此可以较长时间满足虎乳灵芝营养需求，从而形成优质、大个、商品价值高的菌核。

发明内容

本发明提供虎乳灵芝的段木栽培方法，所要解决的技术问题是：针对现有的虎乳灵芝人工栽培方法中存在的技术不成熟，产量低，菌核小等缺陷，提供一种新的人工栽培虎乳灵芝的方法。本发明摸索出了最适合于虎乳灵芝菌核形成的培养基成分、湿度、温度等环境因子，培养出来的菌核具有质量好、商品价值高的优点。

本发明目的是提供虎乳灵芝的段木栽培方法。

所述虎乳灵芝的段木栽培方法，包括如下步骤: 购买或分离获得虎乳灵芝菌种；将虎乳灵芝菌种接到母种培养基上扩大培养，获得虎乳灵芝母种；将虎乳灵芝母种接种于原种培养基培养获得原种；原种接种到段木上进行段木培养；培养好的段木埋入沙土进行菌核培养；菌核采收。

所述菌种购买自中国科学院微生物研究所或三明市真菌研究所；

所述分离，可从海南或马来西亚野外采集野生虎乳灵芝菌核，对其进行表面清洗，自来水冲洗数分钟后，干净纱布揩干后，进入超净工作台，用消毒酒精擦洗菌核外皮，无菌水冲洗几次，灭菌滤纸片吸干表面水分后，用无菌解剖刀将野生虎乳灵芝菌核切开，接种铲挖取切取0.4cm左右方块组织，0.1%升汞消毒3分钟后用镊子将菌核组织于培养皿培养基的中央，30℃培养5d后可见由组织块长出白色绒毛状菌，转试管1-2次可获得纯化的虎乳灵芝菌丝；

所述母种培养基，用液体母种培养基，配方为：酵母粉10g, 蛋白胨10g,葡萄糖20g, 磷酸二氢钾0. 3g，七水硫酸镁0.2g，琼脂粉15克，蒸馏水1000mL, pH6.0, 用250m1或500ml三角瓶，装量为三角瓶容积的40%，121℃灭菌25min，冷却至室温后接入虎乳灵芝菌种，在旋转式摇床上旋转，培养10-15天，成为虎乳灵芝液体母种；

所述母种培养基，用固体母种培养基，其配方为每1000ml上述液体母种培养基添加15克琼脂粉，121℃灭菌25min，冷却至室温后接入虎乳灵芝菌种，培养15-20天，成为虎乳灵芝固体母种；

所述原种培养基配方：阔叶树木屑20-50%、棉籽壳28-58%、麦麸20%、蔗糖1%、石膏粉1%，搅拌均匀后加水，最终培养基含水量为50-60%，优选培养基配方为阔叶树木屑30%、棉籽壳48%、麦麸20%、蔗糖1%、石膏粉1%，搅拌均匀后加水，最终培养基含水量55%；

所述原种培养基一般可制成500ml-750ml原种瓶；

所述母种、原种均为25℃-38℃恒温暗室培养，优选培养温度30℃；

所述虎乳灵芝段木培养生产工艺流程为：

树木选择→切段→装袋→灭菌→接种→菌丝培养→场地准备→埋沙土→管理、菌核培养→采收

所述树木选择，树种优选阔叶树，例如橡胶木、栎树、栲树、桦树、青冈木等，砍伐运输过程中，尽可能保持树皮完整；

所述切段为将所选树木切段，切段长度一般15-30cm，优选切段长度为18-22cm，切面要平，周围棱角要削平，以免刺破塑料袋；

所述装袋为将段木捆扎，在段木上下表面放含水量40-55%的棉籽皮后装袋；若段木过干，则浸水过夜再装袋，当段木干燥至含水量为35%-45%时，即可切段装袋；所述袋为聚丙烯袋，适用于高压灭菌；或聚乙烯袋，适于常压灭菌；

所述灭菌为常压灭菌，保持100℃,10-12h或高压灭菌121℃，保持1-1.5h；

所述菌丝培养为将接种后的段木菌袋放暗室培养，温度22℃-38℃，优选30℃；一般菌丝培养时间35-50d；通过开门窗换气增加袋内氧气，促进菌丝向木质部深层生长；

所述场地准备：栽培场在晴天翻土15-25cm，开畦，畦高10-15cm，畦宽1.5-1.8m，畦长按地形决定：畦面四周开好排水沟，沟深20-40cm；

所述埋土：菌木下面放置颗粒较大的粗沙，大小为体积20立方厘米左右，虎乳灵芝为好气性真菌，容易在阻力较小的空间形成菌核生长点，并以此为中心而扩展菌核；菌木间距4-l0cm，行距8-15cm，优选为间距6-8cm，行距10-12cm；菌木上覆沙土深浅厚薄视栽培场湿度大小酌情处理，以菌木不露为标准，上面铺一层树叶，以利保湿或防止曝晒；

所述管理、菌核培养，主要是: (1)温度 虎乳灵芝正常的生长温度为15℃-38℃，最适范围为25℃-32℃，夏天气温高时要注意搭荫棚降温，冬天或者初春、深秋气温较低时则需要覆膜保温。（2）湿度  保持菌木及沙土的湿度，既不能涝又不能旱，维持在含水量35-50%左右，较优为40-45%。段木栽培埋土5个月后可采收菌核，可维持近2年年采收3茬。根据我们几年的栽培数据统计显示，以1000kg干木材计，第一茬可收获45-66kg，第二茬收获32-43kg，第三茬9-15kg；

本发明方法是申请人对培养基、菌丝培养条件、菌核培养条件等影响因素及各因素之间相互影响关系进行多次优选组合而得到的，该方法简便易行，投资小、见效快，易于推广；本发明方法菌核个大、质量好、商品价值高。虎乳灵芝菌核在治疗哮喘及咳喘具有极佳疗效，又在治疗肝炎、肝热、肝癌方面有显著效果；同时虎乳灵芝无毒副作用，可以作为膳食纤维补充人体需要。目前市场上野生虎乳灵芝不能满足市场需求，价格昂贵，菌类学家认为虎乳灵芝是最有开发前途的药用真菌之一，市场前景广阔。人工栽培有望产生显著的经济效益。

具体实施方式

以下实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

虎乳灵芝菌种购自三明真菌研究所，将虎乳灵芝菌种扩大培养于固体母种培养基上15d获得虎乳灵芝母种，再接种于原种培养基培养40d，待菌丝长满后接种到段木袋上培养； 

固体母种培养基配方为：酵母粉10g, 蛋白胨10g,葡萄糖20g, 磷酸二氢钾0.3g，七水硫酸镁0.2g，琼脂粉15g，蒸馏水1000mL, pH6.0，121℃灭菌30min。原种培养基：阔叶树木屑80%、麦麸18%、蔗糖1%、石膏粉1%，搅拌均匀后加水，使培养基含水量达55～60%；原种培养基用500mL原种瓶，装量不超过400ml，以保证充足的空气；将固体母种挑一小块接入原种培养基中培养。

母种、原种培养条件为30℃恒温暗室培养；浙江省杭州地区安排生产，母种培养安排在1月中旬；原种安排在2月中上旬；段木菌袋培养开始于3月上旬，下地安排在3月中下旬；

段木培养工艺流程：

树木选择→切段→装袋→灭菌→接种→菌丝培养→场地准备→脱袋、埋土→管理、菌核生长→采收；

所述树木选择，树种优选阔叶树，例如橡胶木、栎树、栲树、桦树、悬铃木等；

所述切段为将所选树木切段，切段长度一般15-30cm，优选切段长度为18-22cm；切面要平，周围棱角要削平；

所述装袋，在两个切面放置含水量40-55%的棉籽皮后装袋，可以避免刺破塑料袋，又有利于原种接入后的菌丝快速吃料渗透；若段木过干，则浸水过夜再装袋；当段木含水量为35%～45%时，即可切段装袋；所述袋，聚丙烯袋，适用于高压灭菌；聚乙烯袋，适用于常压灭菌；

所述灭菌为常压灭菌，保持100℃，10h或高压灭菌121℃，保持1.5h；

所述接种为将一汤匙左右原种接入到灭菌后的段木袋中；

所述栽培场地准备：栽培场在晴天翻土15-25cm，开畦，畦高10-15cm，畦宽1.5-1.8m，畦长按地形决定：畦面四周开好排水沟，沟深20-40cm；

所述埋土：菌木下面放置颗粒较大的粗沙，大小为体积20立方厘米左右，虎乳灵芝为好气性真菌，容易在阻力较小的空间形成菌核生长点，并以此为中心而扩展菌核；菌木间距4-l0cm，行距8-15cm，优选为间距6-8cm，行距10-12cm；菌木上覆沙土深浅厚薄视栽培场湿度大小酌情处理，以菌木不露为标准，上面铺一层树叶，以利保湿或防止曝晒；

所述管理、菌核培养，主要是: (1)温度 虎乳灵芝正常的生长温度为15℃-38℃，最适范围为25℃-32℃，夏天气温高时要注意搭荫棚降温，冬天或者初春、深秋气温较低时则需要覆膜保温。（2）湿度  保持菌木及沙土的湿度，既不能涝又不能旱，一般维持在含水量35-50%左右，较优为40-45%。段木栽培埋土5个月后可采收菌核，可维持近2年年采收3茬。根据我们几年的栽培数据统计显示，以1000kg干木材计，第一茬可收获55-76kg，第二茬收获32-43kg，第三茬9-15kg。

实施例2

虎乳灵芝菌种购自中国科学院微生物研究所，将虎乳灵芝菌种在液体培养基上扩大培养10-15d获得虎乳灵芝母种。 

母种培养基选用液体培养基：酵母粉10g, 蛋白胨10g,葡萄糖20g, 磷酸二氢钾0.3g，七水硫酸镁0.2g，蒸馏水1000mL，pH6.0，121℃湿热灭菌25min。用250m1或500ml三角瓶，装量100m1或200ml，121℃灭菌30min，冷却至室温后接种虎乳灵芝菌种，在旋转式摇床上旋转，培养10-15天，成为虎乳灵芝液体母种。原种培养基采用栎树木屑80%、麦麸18%、蔗糖1%、石膏粉1%，搅拌均匀后加水，使培养基含水量达50～55%；原种培养基装在750mL原种瓶，装量不超过450ml，以保证充足的空气；液体母种接种到原种培养基上，吃料较快，一般25-30d后可以长满培养基。

其他操作方式同实施例1。

实施例3

虎乳灵芝菌种，从海南野生虎乳灵芝菌核分离得到，先对采集的野生虎乳灵芝菌核进行表面清洗，自来水冲洗数分钟后，干净纱布揩干后，进入超净工作台，用消毒酒精擦洗菌核外皮，无菌水冲洗几次，灭菌滤纸片吸干表面水分后，用无菌解剖刀将野生虎乳灵芝菌核切开，接种铲挖取切取0.4cm左右方块组织，0.1%升汞消毒3分钟后用镊子将菌核组织于培养皿培养基的中央，30℃培养5d后可见由组织块长出白色绒毛状菌，转试管1-2次可获得纯化的虎乳灵芝菌丝。

海南省安排生产，一年四季均可进行。

其他操作方式同实施例1。

Claims (5)

1.虎乳灵芝的段木栽培方法，其特征在于，包括：将虎乳灵芝菌丝接到母种培养基扩大培养，获得虎乳灵芝母种；将母种接于原种培养基培养获得原种；原种接种到段木上培养获得段木栽培种；将段木栽培种埋沙土，管理，收获菌核。

2.根据权利要求1所述虎乳灵芝的段木栽培方法，其特征在于，母种培养基配方为：酵母粉10g，蛋白胨10g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾0.3g，七水硫酸镁0.2g，蒸馏水1000mL，pH6.0，为液体母种培养基，若加琼脂粉15g，则为固体培养基。

3.根据权利要求1所述虎乳灵芝的段木栽培方法，其特征在于，原种培养基的配方：阔叶树木屑20-50%、棉籽壳28-58%、麦麸20%、蔗糖1%、石膏粉1%，搅拌均匀后加水，最终培养基含水量为50-60%。

4.根据权利要求1所述虎乳灵芝的段木栽培方法，其特征在于，所述母种、原种培养条件均为22℃～38℃恒温暗室培养。

5.根据权利要求1所述虎乳灵芝的段木栽培方法，其特征在于，所述段木栽培种工艺流程为：

树木选择→切段→装袋→灭菌→接种→菌丝培养→场地准备→脱袋、埋土→管理、菌核培养→采收；

所述灭菌为常压灭菌，保持100℃，8～12h或高压灭菌121℃，保持1～1.5h；

所述菌丝培养为将接种后段木菌袋放暗室培养，温度25℃～38℃；

所述栽培场地准备：栽培场应在晴天翻土15～25cm，开畦，畦高10～15cm，畦宽1.5～1.8m，畦长按地形决定；畦面四周开好排水沟，沟深20～40cm；

所述埋土：菌木下面放置的沙土为颗粒较大的粗沙；菌木间距4-l0cm，行距8-15cm；覆沙土深浅厚薄应视栽培场湿度大小酌情处理，以菌木不露为标准，上面铺一层树叶；

所述管理、菌核培养：(1)温度 虎乳灵芝正常的生长温度为15℃-38℃，夏天高温时搭荫棚降温，冬天或初春、深秋气温较低时覆膜保温（2）湿度  要保持菌木及沙土的湿度，既不能涝又不能旱，维持在含水量35-50%。