CN102448956A - 丙型肝炎病毒抑制剂 - Google Patents

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CN102448956A CN2010800249160A CN201080024916A CN102448956A CN 102448956 A CN102448956 A CN 102448956A CN 2010800249160 A CN2010800249160 A CN 2010800249160A CN 201080024916 A CN201080024916 A CN 201080024916A CN 102448956 A CN102448956 A CN 102448956A
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Abstract

本公开涉及本说明书中定义的式(I)的新化合物以及包含这些新化合物的组合物。这些化合物是有用的抗病毒药物，尤其用于抑制丙型肝炎病毒(HCV)编码的NS5A蛋白的功能。因此，本公开还涉及一种通过使用这些新化合物或者包含这些新化合物的组合物来治疗HCV相关疾病或病症的方法。

Description

丙型肝炎病毒抑制剂
相关申请的交叉参考
本申请要求2009年3月30日提交的美国临时申请序列号61/164,531的权益。
发明领域
本公开总的来讲涉及抗病毒化合物，更准确地讲涉及可以抑制由丙型肝炎病毒(HCV)编码的NS5A蛋白功能的化合物、包含这类化合物的组合物和用于抑制NS5A蛋白功能的方法。
发明背景
HCV是主要的人类病原体，估计感染全球1.7亿人--大约为人免疫缺陷病毒1型感染人数的5倍。这些HCV感染个体当中的相当一部分会发展成严重的进行性肝病，包括肝硬化和肝细胞癌
目前治疗HCV的标准方法，即使用聚乙二醇化-干扰素和利巴韦林的联合疗法，在达到持续病毒响应上没有理想的成功率并且引起多种副作用。因此，目前对开发解决当下这种医学需要的有效疗法存在一种明确且渴望感觉的需求。
HCV是正链RNA病毒。根据对推导出的氨基酸序列和5’非翻译区广泛相似性的比较，HCV被归类到黄病毒科(Flaviviridae family)单独的一个属内。黄病毒科的所有成员都是含有正链RNA基因组的有包膜病毒粒子，该基因组通过单个不间断可读框的翻译，编码所有已知的病毒特异性蛋白。
在贯穿于HCV基因组的所述核苷酸和编码氨基酸序列内发现大量的异质性，其归因于缺乏校对能力的编码RNA依赖性RNA聚合酶的高错误率。已鉴定至少6种主要的基因型，且已描述有超过50种亚型分布于世界范围内。HCV的基因异质性的临床意义已证实一种在单一疗法过程中出现的突变倾向，因此要求使用附加的治疗选项。基因类型对发病机理和治疗学可能的调节剂作用仍然难以捉摸。
单链HCV RNA基因组的长度约为9500个核苷酸并具有一个编码约3000个氨基酸的单一大的多聚蛋白的单一可读框(ORF)。在感染细胞中，该多聚蛋白在多个位点上被细胞蛋白酶和病毒蛋白酶切割，产生结构蛋白和非结构(NS)蛋白。就HCV而言，成熟的非结构蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)的生成是通过两种病毒蛋白酶实现的。一般认为，第一种是金属蛋白酶，在NS2-NS3接点进行切割；第二种是包含在NS3(本文中亦称NS3蛋白酶)N末端区内的丝氨酸蛋白酶并且介导NS3下游所有的后续切割，在NS3-NS4A切割位点为顺式，这两者在其余NS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B位点则为反式。NS4A蛋白通过充当NS3蛋白酶的辅因子和协助NS3和其它病毒复制酶组分的膜定位，似乎发挥出多重功能。NS3-NS4A复合体的形成对导致所述断裂的蛋白分解有效性增加的适当的蛋白酶活性是必要的。NS3蛋白也呈现出核苷三磷酸酶和RNA解旋酶的活性。NS5B(在此也被称为HCV聚合酶)是一种RNA-依赖性RNA聚合酶，其涉及复制酶复合体中HCV与其它HCV蛋白(包括NS5A)的复制。
需要用于治疗HCV感染患者的化合物，该化合物选择性地抑制HCV病毒的复制。具体地说，需要有效抑制NS5A蛋白功能的化合物。HCV NS5A蛋白描述于例如下列文献中：S.L.Tan，et al.，Virology，284：1-12(2001)；K.-J.Park，et al.，J.Biol.Chem.，30711-30718(2003)；T.L.Tellinghuisen，et al.，Nature，435，374(2005)；R.A.Love，et al.，J.Virol，83，4395(2009)；N.Appel，et al.，J.Biol.Chem.，281，9833(2006)；L.Huang，J.Biol.Chem.，280，36417(2005)；C.Rice，et al.，WO2006093867。
本公开提供可选择性抑制HCV病毒复制的化合物，其特征为下式(I)化合物或其药学上可接受的盐，
Figure BPA00001479917700031
其中：
L选自-O-、-CH2CH2-、-CH＝CH-、-C≡C-、-OCH2-、-CH2O-、-CH2OCH2-、
Figure BPA00001479917700032
X是氢(H)或卤素和Z是氢；或
X和Z与它们连接的碳原子一起形成一个5-8元芳族或非芳族稠合的环，该环任选包含一或二个独立地选自氮、氧和硫的杂原子；其中所述5-8元环任选被1、2或3个独立地选自下列的取代基取代：烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷基、芳基磺酰基、羧基、甲酰基、卤代、卤代烷氧基、卤代烷基、羟基、羟基烷基、-NRaRb、(NRaRb)烷基、(NRaRb)羰基、氧代和螺环；
X’是氢(H)或卤素和Z’是氢；或
X’和Z’与它们连接的碳原子一起形成一个5-8元芳族或非芳族稠合的环，该环任选包含一或二个独立地选自氮、氧和硫的杂原子；其中所述5-8元环任选被1、2或3个独立地选自下列的取代基取代：烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷基、芳基磺酰基、羧基、甲酰基、卤代、卤代烷氧基、卤代烷基、羟基、羟基烷基、-NRaRb、(NRaRb)烷基、(NRaRb)羰基、氧代和螺环；
Y和Y’各自独立地是-CH2-、-CH2CH2-或-CH2O-，其中绘制所述-CH2O-使得所述氧原子与被Rv和Rq或Rv’和Rq’取代的碳原子键合；
Rp是氢或C1-C4烷基；
Rq是氢、烷基或卤代；或者
Rp和Rq与它们连接的碳原子一起形成一个环烷基环；
Rv选自氢、烷基、卤代和羟基；或者
Rv和Rq与它们连接的碳原子一起形成一个乙烯基或环烷基环；
Rp’是氢或C1-C4烷基；
Rq’是氢、烷基或卤代；或者
Rp’和Rq’与它们连接的碳原子一起形成一个环烷基环；
Rv’独立地选自氢、烷基、卤代和羟基；或者
Rv’和Rq’与它们连接的碳原子一起形成一个乙烯基或环烷基环；
Rw和Rw’独立地选自氢和烷基；
R1是氢或-C(O)Rx；
R2是氢或-C(O)Ry；
Rx和Ry独立地选自环烷基、杂芳基、杂环基、烷氧基和烷基，所述烷基被一或多个选自下列的取代基取代：芳基、链烯基、环烷基、杂环基、杂芳基、-OR3、-C(O)OR4、-NRaRb和-C(O)NRcRd，
其中任何所述芳基和杂芳基可任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：链烯基、烷基、卤代烷基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、卤素、氰基、硝基、-C(O)OR4、-OR5、-NRaRb、(NRaRb)烷基和(MeO)(HO)P(O)O-，和
其中任何所述环烷基和杂环基可任选稠合在芳环上，并可任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：烷基、羟基、卤素、芳基、-NRaRb、氧代和-C(O)OR4；
R3是氢、烷基或芳基烷基；
R4是烷基或芳基烷基；
R5是氢、烷基或芳基烷基；
Ra和Rb独立地选自氢、烷基、环烷基、芳基烷基、杂芳基、-C(O)R6、-C(O)OR7、-C(O)NRcRd和(NRcRd)烷基，或者作为选择，Ra和Rb与它们连接的氮原子一起形成一个5或6元环或桥接双环环结构，其中所述5或6元环或桥接双环环结构任选可包含一或二个另外的独立选自氮、氧和硫的杂原子，并可包含1、2或3个独立地选自下列的取代基：C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、芳基、羟基、C1-C6烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和卤素；
R6是烷基；
R7是烷基、芳基烷基、环烷基或卤代烷基；和
Rc和Rd独立地选自氢、烷基、芳基烷基和环烷基。
在所述第一方面的第一实施方案中，本公开提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其进一步特征为式(Ia)，
Figure BPA00001479917700051
X是氢或氯(Cl)和Z是氢；或者
X和Z与它们连接的碳原子一起形成6元芳族或非芳族稠环；
X’是氢或氯(Cl)和Z’是氢；或者
X’和Z’与它们连接的碳原子一起形成6元芳族或非芳族稠环；
Y是-CH2-、-CH2CH2-或-CH2O-，其中绘制所述-CH2O-使得所述氧原子与被Rv和Rq取代的碳原子键合；
Rp是氢或C1-C4烷基；
Rq是氢、烷基或卤代；或者
Rp和Rq与它们连接的碳原子一起形成一个环烷基环；和
Rv选自氢、烷基、卤代和羟基；或
Rv和Rq与它们连接的碳原子一起形成一个乙烯基或环烷基环。
在所述第一方面的第二实施方案中，本公开提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其进一步的特征为式(Ib)，
Figure BPA00001479917700061
在所述第一方面的第三实施方案中，本公开提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其进一步的特征为式(Ic)，
Figure BPA00001479917700062
在所述第一方面的第四实施方案中，本公开提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其进一步特征为式(Id)，
Figure BPA00001479917700063
在本公开第一方面的第五实施方案中，本公开提供式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1是-C(O)Rx；
R2是-C(O)Ry；
Rx和Ry独立地是被至少一个-NRaRb取代的烷基，其特征为式(A)：
Figure BPA00001479917700064
其中：
M是0或1；
R8是氢或烷基；
R9选自氢、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基和任选被选自下列取代基取代的烷基：芳基、链烯基、环烷基、杂环基、杂芳基、杂双环基、-OR3、-C(O)OR4、-NRaRb和-C(O)NRcRd，
其中任何所述芳基和杂芳基可任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：烷基、卤代烷基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、卤素、氰基、硝基、-C(O)OR4、-OR5、-NRaRb、(NRaRb)烷基和(MeO)(HO)P(O)O-，和
其中任何所述环烷基和杂环基可任选稠合在芳环上，并任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：烷基、羟基、卤素、芳基、-NRaRb、氧代和-C(O)OR4；和
R3、R4、R5、Ra、Rb、Rc和Rd按式(I)中的定义。
在第一方面的第六实施方案中，本公开提供式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐，其中：
m是0；
R8是氢或C1-C4烷基；
R9选自氢、任选被下列基团取代的C1-C6烷基：-OR12、C3-C6环烷基、烯丙基、-CH2C(O)NRcRd、(NRcRd)烷基、
Figure BPA00001479917700071
Figure BPA00001479917700081
其中j是0或1；
k是1、2或3；
N是0或选自1-4的整数；
各R10独立地是氢、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、卤素、硝基、-OBn或(MeO)(OH)P(O)O-；
R11是氢、C1-C4烷基或苄基；
R12是氢、C1-C4烷基或苄基；
Ra是氢或C1-C4烷基；
Rb是C1-C4烷基、C3-C6环烷基、苄基、3-吡啶基、嘧啶-5-基、乙酰基、-C(O)OR7或-C(O)NRcRd；
R7是C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
Rc是氢或C1-C4烷基；和
Rd是氢、C1-C4烷基或C3-C6环烷基。
在第一方面的第七实施方案中，本公开提供式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐，其中：
m是0；
R8是氢；
R9是任选被1-5个独立地选自下列取代基取代的苯基：C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、卤素、C1-C6烷氧基、羟基、氰基和硝基；和
NRaRb是杂环基或杂双环基，其选自
Figure BPA00001479917700082
Figure BPA00001479917700091
其中n是0、1或2；
各R13独立地选自C1-C6烷基、苯基、三氟甲基、卤素、羟基、甲氧基和氧代；和
R14是C1-C6烷基、苯基、苄基或-C(O)OR15基团，其中R15是C1-C4烷基、苯基或苄基。
在第一方面的第八实施方案中，本公开提供式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐，其中：
m是1；
R8是氢；
R9是C1-C6烷基、芳基烷基或杂芳基烷基；
Ra是氢；和
Rb是-C(O)OR7，其中R7是C1-C6烷基。
在第一方面的第九实施方案中，本公开提供式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1是-C(O)Rx；
R2是-C(O)Ry；
Rx和Ry是杂芳基或杂环基，其独立地选自：
Figure BPA00001479917700092
Figure BPA00001479917700101
其中n是0或1-4的整数；
各R13独立地选自氢、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、苯基、苄基、C1-C6烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、杂环基、卤素、NRcRd、羟基、氰基和氧代，其中Rc和Rd独立地是氢或C1-C4烷基；和
R14是氢(H)、C1-C6烷基、苄基或-C(O)OR4，其中R4是C1-C6烷基。
在第一方面的第十实施方案中，本公开提供式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1是-C(O)Rx；
R2是-C(O)Ry；
Rx和Ry是环烷基，其独立地选自：
Figure BPA00001479917700102
其中
j是0、1、2或3；
k是0、1或2；
n是0或1-4的整数；
各R13独立地选自氢、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C6烷氧基、卤素、羟基、氰基和硝基；和
Ra和Rb各自独立地是氢、C1-C6烷基或-C(O)OR7，其中R7C1-C6烷基。
在第一方面的第十一实施方案中，本公开提供式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1是-C(O)Rx；
R2是-C(O)Ry；
Rx和Ry独立地是芳基烷基，其中所述芳基烷基的芳基部分被(NRaRb)烷基任选取代；和
Ra和Rb独立地是氢、C1-C6烷基或苄基，或者作为选择，Ra和Rb与它们连接的氮原子一起形成一个选自下列的5或6元环：
Figure BPA00001479917700111
其中R15是氢、C1-C6烷基或苄基。
在第一方面的第十二实施方案中，本公开提供式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1和R2相同并选自下列基团：
Figure BPA00001479917700112
Figure BPA00001479917700121
其中结构中的波形线
Figure BPA00001479917700122
表示一个与该键相连的立构中心，其可以是或者(R)-或者(S)-构型，只要不违反化学键和原理即可。
在第一方面的第十三实施方案中，本公开提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1是-C(O)Rx；
R2是-C(O)Ry；和
Rx和Ry都是叔丁氧基。
在第一方面的第十四实施方案中，本公开提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1和R2都是氢。
在第二方面，本公开提供式(II)化合物或其药学上可接受的盐，
其中
L选自-O-、-CH2CH2-、-CH＝CH-、-C≡C-、-OCH2-、-CH2O-、-CH2OCH2-、
Figure BPA00001479917700131
X和X’独立地是氢(H)或卤素；
Rp是氢或C1-C4烷基，和Rq是氢，或者作为选择，Rp和Rq与它们连接的碳原子一起形成一个环丙基环；
Rp’是氢或C1-C4烷基，和Rq’是氢，或者作为选择，Rp’和Rq’与它们连接的碳原子一起形成一个环丙基环；
R1是氢或-C(O)Rx；
R2是氢或-C(O)Ry；
Rx和Ry独立地选自环烷基、杂芳基、杂环基、烷氧基和烷基，该烷基被一或多个独立地选自下列的取代基取代：芳基、链烯基、环烷基、杂环基、杂芳基、-OR3、-C(O)OR4、-NRaRb和-C(O)NRcRd，
其中任何所述芳基和杂芳基可任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：烷基、卤代烷基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、卤素、氰基、硝基、-C(O)OR4、-OR5、-NRaRb、(NRaRb)烷基和(MeO)(HO)P(O)O-，和
其中任何所述环烷基和杂环基可任选稠合在芳环上，并任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：烷基、羟基、卤素、芳基、-NRaRb、氧代和-C(O)OR4；
R3是氢、烷基或芳基烷基；
R4是烷基或芳基烷基；
R5是氢、烷基或芳基烷基；
Ra和Rb独立地选自氢、烷基、环烷基、芳基烷基、杂芳基、-C(O)R6、-C(O)OR7、-C(O)NRcRd和(NRcRd)烷基，或者作为选择，Ra和Rb与它们连接的氮原子一起形成一个5或6元环或桥接双环环结构，其中所述5或6元环或桥接双环环结构任选可包含一或二个另外的独立选自氮、氧和硫的杂原子，并可包含1、2或3个独立地选自下列的取代基：C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、芳基、羟基、C1-C6烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和卤素；
R6是烷基；
R7是烷基、芳基烷基或卤代烷基；和
Rc和Rd独立地选自氢、烷基、芳基烷基和环烷基。
在第三方面，本公开提供一种组合物，其包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体，其中式(I)根据上文本公开第一方面中所述的任何实施方案所定义。
在所述第三方面的第一实施方案中，所述组合物还包含至少一种另外的具有抗-HCV活性的化合物。
在第三个方面的第二个实施方案中，至少一种另外的化合物为干扰素或利巴韦林。
在第三个方面的第三个实施方案中，干扰素选自干扰素α2B、聚乙二醇化干扰素α、复合α干扰素(consensus interferon)、干扰素α2A和类淋巴母细胞干扰素τ(tau)。
在第三个方面的第四个实施方案中，本公开提供一种组合物，所述组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐、药学上可接受的载体及至少一种具有抗HCV活性的另外的化合物，其中至少一种另外的化合物选自白介素2、白介素6、白介素12、促进产生1型辅助性T细胞应答的化合物、干扰RNA、反义RNA、咪喹莫德、利巴韦林、肌苷5′-一磷酸脱氢酶抑制剂、金刚烷胺和金刚乙胺。
在第三个方面的第五个实施方案中，本公开提供一种组合物，所述组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐、药学上可接受的载体及至少一种具有抗HCV活性的另外的化合物，其中至少一种另外的化合物有效抑制选自以下靶标的功能以治疗HCV感染：HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV装配、HCV脱出(HCV egress)、、HCV NS5A蛋白和IMPDH。
在第四方面中，本公开提供一种在患者中治疗HCV感染的方法，其包括给予该患者治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中式(I)根据上文本公开第一方面中所述的任何实施方案所定义。
在第四个方面的第一个实施方案中，该方法还包括在给予式(I)化合物或其药学上可接受的盐之前、之后或同时给予至少一种具有抗HCV活性的另外的化合物。
在第四个方面的第二个实施方案中，至少一种另外的化合物为干扰素或利巴韦林。
在第四个方面的第三个实施方案中，所述干扰素选自干扰素α2B、聚乙二醇化干扰素α、复合α干扰素、干扰素α2A和类淋巴母细胞干扰素τ。
在第四个方面的第四个实施方案中，本公开提供一种治疗患者的HCV感染的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐并且在给予式(I)化合物或其药学上可接受的盐之前、之后或同时给予至少一种具有抗HCV活性的另外的化合物，其中至少一种另外的化合物选自白介素2、白介素6、白介素12、促进产生1型辅助性T细胞应答的化合物、干扰RNA、反义RNA、咪喹莫德、利巴韦林、肌苷5′-一磷酸脱氢酶抑制剂、金刚烷胺和金刚乙胺。
在第四个方面的第五个实施方案中，本公开提供一种治疗患者的HCV感染的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐并且在给予式(I)化合物或其药学上可接受的盐之前、之后或同时给予至少一种具有抗HCV活性的另外的化合物，其中至少一种另外的化合物有效抑制选自以下靶标的功能以治疗HCV感染：HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV装配、HCV脱出、HCV NS5A蛋白和IMPDH。
本公开的化合物可有效抑制HCV NS5A蛋白的功能。特别是，本公开的化合物可有效抑制HCV 1b基因型或多种HCV的基因型。因此，本公开还包括：(1)包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体的组合物；和(2)一种在患者中治疗HCV感染的方法，其包括给予该患者治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
本公开的其它方面可包括本文公开的各实施方案的适当的组合。
还有其他方面和实施方案可在本文提供的说明书中发现。
本公开在本文中的描述应当解释为与化学成键的定律和原则一致。在某些情况下，为了在任何给定位置容纳取代基，可能必需去掉氢原子。
以下进一步说明式(I)结构的某些特征：
Figure BPA00001479917700161
在式(I)中，如上所示，“连接基团”左侧的“吡咯烷基-咪唑”部分在诸如下列方面独立于所述连接基团右侧的“吡咯烷基-咪唑”部分，例如(1)咪唑环的互变异构体形式，(2)吡咯烷环上的立构中心的绝对构型，和(3)吡咯烷氮上的取代基，即R1和R2彼此独立，虽然在某些情况下它们优选是相同的。
应理解的是“左”侧或“右”侧上的吡咯烷部分的描述仅供举例说明之目的，其不以任何方式限定本公开的范围。
在式(I)的连接基团中，“L”和两个苯环之间的连键包含所有下列组合：
Figure BPA00001479917700171
其中优选“对位-对位”、“对位-间位”和“间位-间位”连接。
同样地，在式(I)中，当L是亚苯基
Figure BPA00001479917700172
时，其可通过下列方式连接相邻的两个苯环：
其中优选“对位”和“间位”排列，并更优选“对位”排列。
在式(I)中，其中L是亚乙烯基(-CH＝CH-)基团，其可呈或者反式-或者顺式-构型，如下所示：
在式(I)中，其中L是亚环丙基基团时，两个苯取代基彼此可以是或者反式-或者顺式-，形成下列四个构型之一：
Figure BPA00001479917700176
Figure BPA00001479917700181
在吡咯烷基-咪唑部分的吡咯烷环中，与咪唑基连接的立构碳中心可以为或者(R)-或者(S)-构型，如下所示：
当环丙基环稠合在吡咯烷基-咪唑部分的吡咯烷环上时，即当(Rp，Rq)一起是-CH2-时，稠合的环丙基环的CH2基团可以在相对于吡咯烷环的α-或β-位，如下所示：
Figure BPA00001479917700183
因此，本公开意欲涵盖所有可能的立体异构体，甚至当结构中描述单一立体异构体或无立体化学异构体时。
在式(I)中，连接基团的苯环和吡咯烷基-咪唑部分的咪唑环之间的连接可以处于咪唑环的或者C-4或者C-5位(见下)。本领域普通技术人员将理解，由于咪唑环的互变异构化，苯环与C-4位的键可以等价于苯环与C-5位的键，如以下等式中所示：
Figure BPA00001479917700184
该例子的原理也可应用于取代基X或X’。
因此，本公开意欲涵盖所有可能的互变异构体，甚至当结构中只描述其中的一种时。
在本公开中，结构中的浮动键(例如
Figure BPA00001479917700191
)或浮动取代基(例如-R13)表示所述键或取代基可通过从可利用的位置上除去氢而连接在结构的任何可利用的位置上。应清楚的是在双环或多环结构中，除另有特别说明，浮动键或浮动取代基的位置不限于特定环的这样的键或取代基的位置。因此，下列两种取代基应认为是等价的：
Figure BPA00001479917700192
应清楚的是本公开所包括的化合物是用作药物时适当稳定的那些化合物。
分子中特定位置处的任何取代基或变量的定义意欲都独立于其在该分子中其它处的定义。例如，对于取代基(R10)n，当n是2时，两个R10基团中的每一个可以相同或不同。
本说明书中所引用的所有专利、专利申请和参考文献都通过引用其全部结合到本文中。在不一致的情况下，以本公开(包括定义)为准。
定义
以上对所定义的各个基团都提供了定义。另外，应使用下列定义。
本文所用的单数形式“一”、“一个”和“该”包括复数范围，除非文中另有明确说明。
除非另有说明，否则本公开的所有芳基、环烷基、杂芳基和杂环基基团可以如其各自相应定义中所述一样被取代。例如，芳基烷基中的芳基部分可以如术语“芳基”定义中所述一样被取代。
除另有说明，本公开的所有芳基、环烷基、杂芳基和杂环基可按其各自分别代表的定义中所述被取代。例如芳基烷基的芳基部分可按术语“芳基”定义中所述被取代。
本文所用术语“乙酰基”指-C(O)CH3。
本文所用术语“链烯基”指单价、直或支链烃，其在链中具有一或多个，优选一或两个双键。链烯基的双键可不结合或结合另一个不饱和基团。适合的链烯基包括，但不限于C2-C10链烯基，如乙烯基、烯丙基、丁烯基、戊烯基、己烯基、丁二烯基、戊二烯基、己二烯基、2-乙基己烯基、2-丙基-2-丁烯基、4-(2-甲基-3-丁烯)-戊烯基。链烯基可为未取代的或被一或两个适合的取代基取代。
本文所用的术语“烷氧基”是指通过氧原子与母体分子部分连接的烷基。烷氧基的代表性实例包括但不限于甲氧基(CH3O-)、乙氧基(CH3CH2O-)和叔丁氧基((CH3)3CO-)。
本文所用的术语“烷氧基烷基”是指被1、2或3个烷氧基取代的烷基。
本文所用的术语“烷氧基羰基”是指通过羰基与母体分子部分连接的烷氧基。
本文所用的术语“烷基”指衍生自通过从其中一个饱和碳中除去一个氢原子的直或支链饱和烃的基团。所述烷基优选包含1-10个碳原子。烷基的代表性实例包括但不限于甲基、乙基、异丙基和叔丁基。
本文所用的术语“烷基羰基”是指通过羰基与母体分子部分连接的烷基。烷基羰基的代表性实例包括但不限于乙酰基(-C(O)CH3)、丙酰基(-C(O)CH2CH3)、正丁酰基(-C(O)CH2CH2CH3)和2，2-二甲基丙酰基或新戊酰基(-C(O)C(CH3)3)。
本文所用的术语“烷基磺酰基”指通过磺酰基连接于母体分子部分的烷基。
本文所用的术语“烯丙基”指-CH2CH＝CH2。
本文所用的术语“芳基”指衍生自通过从芳环中除去氢原子的芳族碳环的基团。所述芳基可以是单环、双环或多环的，其中在双环或多环芳基中，所述芳族碳环可稠合在另一个4-至6-元芳族或非芳族碳环上。芳基的代表性实例包括但不限于苯基、茚满基、茚基、萘基和1，2，3，4-四氢萘-5-基。
本文所用的术语“芳基烷基”指被1、2或3个芳基取代的烷基，其中芳基烷基的芳基部分可任选被1-5个独立地选自下列的取代基取代：C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C6烷氧基、卤素、氰基和硝基。芳基烷基的代表性实例包括但不限于苄基、2-苯基-1-乙基(PhCH2CH2-)、(萘-1-基)甲基和(萘-2-基)甲基。
本文所用的术语“芳基磺酰基”指通过磺酰基连接于母体分子部分的芳基。
本文所用的术语“苄基”指其中氢原子之一被苯基取代的甲基，其中所述苯基可任选被1-5个独立地选自甲基、三氟甲基(-CF3)、甲氧基(-OCH3)、卤素和硝基(-NO2)的取代基取代。苄基的代表性实例包括但不限于PhCH2-、4-MeO-C6H4CH2-和2，4，6-三甲基-C6H4CH2-。
本文所用的术语“桥接双环”指在两个环成员之间包含一个桥头的环结构，其中所述环和桥头可任选独立地包含一或多个，优选1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。桥接双环环结构的示例性实例包括但不限于：
本文所用的术语“Cap”或“cap”指位于式(I)化合物中吡咯烷环的氮原子上的基团。应清楚的是：“Cap”或“cap”也可指为式(I)化合物中最终“cap”的前体的试剂，其用作增添吡咯烷氮上的基团的反应中的起始原料，以得到最终产物，即包含将存在于式(I)化合物中的官能化吡咯烷的化合物。
本文所用的术语“羰基”指-C(O)-。
本文所用的术语“羧基”指-CO2H。
本文所用的术语“氰基”指-CN。
本文所用的术语“环烷基”指衍生自通过从饱和碳环中除去氢原子的饱和碳环的基团，该碳环优选具有3-8个碳原子，其中所述饱和碳环可任选稠合于一或两个其它的芳族或非芳族碳环。环烷基的代表性实例包括但不限于环丙基、环戊基、环己基和1，2，3，4-四氢萘-1-基。
本文所用的术语“甲酰基”指-CHO。
本文所用的术语“卤代”或“卤素”指F、Cl、Br或I。
本文所用的术语“卤代烷氧基”指通过氧原子连接于母体分子部分上的卤代烷基。
本文所用的术语“卤代烷基”指被至少一个卤原子取代的烷基。卤代烷基可以是所有氢原子都被卤素取代的烷基。卤代烷基的代表性实例包括但不限于三氟甲基(CF3-)、1-氯乙基(ClCH2CH2-)和2，2，2-三氟乙基(CF3CH2-)。
本文所用的术语“杂芳基”指衍生自通过从其芳环中除去氢原子的含有至少一个芳环的单环、双环或多环化合物的基团，所述芳环包含一或多个，优选1-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。如本领域技术人员熟知的那样，杂芳基环比其全碳对应的环具有较小的芳香族特征。因此，对于本公开目的来讲，杂芳基仅需要具有一定程度的芳族特性。杂芳基的示例性实例包括但不限于吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡唑基(purazyl)、三嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、(1，2，3，)-和(1，2，4)-三唑基、吡嗪基、嘧啶基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异唑基、噻唑基、异
Figure BPA00001479917700222
唑基、唑基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并异
Figure BPA00001479917700224
唑基、苯并噻唑基、苯并噻吩基和吡咯并吡啶基。
本文所用的术语“杂芳基烷基”指被1、2或3个杂芳基取代的烷基。
本文所用的术语“杂双环基”指包含两个稠合或桥接环的环结构，其包括碳和一或多个，优选1-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。杂双环环结构是杂环的子集，且可以是饱和或不饱和的。杂双环环结构的实例包括但不限于莨菪烷、奎宁环和7-氮杂双环[2.2.1]庚烷。
本文所用的术语“杂环基”指衍生自通过从非芳环中除去氢原子的含有至少一个非芳环的单环、双环或多环化合物的基团，所述芳环包含一或多个，优选1-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。杂环基包含杂双环基。本公开的杂环基可通过该基团中的碳原子或氮原子连接于母体分子部分。杂环基的实例包括但不限于吗啉基、
Figure BPA00001479917700231
唑烷基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、四氢呋喃基、硫代吗啉基和吲哚啉基。
本文所用的术语“杂环基烷基”指被1、2或3个杂环基取代的烷基。
本文所用的术语“羟基”指-OH。
本文所用的术语“羟基烷基”指被1、2或3个羟基取代的烷基。
本文所用的术语“硝基”指-NO2。
本文所用的术语“-NRaRb”指通过氮原子连接于母体分子部分的两个基团Ra和Rb，或者可选择地，Ra和Rb与其连接的氮原子一起形成5-或6-元环或者稠合-或桥接双环环结构，其任选包含1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的其它杂原子。术语“-NRcRd”定义类似。
本文所用的术语“(NRaRb)烷基”指被1、2或3个-NRaRb基团取代的烷基。术语“(NRcRd)烷基”定义类似。
本文所用的术语“氧代”指＝O。
本文所用的术语“磺酰基”指-SO2-。
本文所用的术语“三烷基甲硅烷基”指-SiR3，其中各R是C1-C4烷基或苯基。三个R基团可以相同或不同。“三烷基甲硅烷基”的代表性实例包括但不限于三甲基甲硅烷基(TMS)、叔丁基二苯基硅烷基(TBDPS)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS或TBDMS)和三异丙基甲硅烷基(TIPS)。
在本公开的化合物中存在不对称中心。这些中心用符号“R”或“S”标注，这取决于手性碳原子周围取代基的构型。应该理解，本公开包括具有抑制NS5A的能力的所有立体化学异构体或其混合物。化合物的各个立体异构体可通过以下方法合成地制备：由含有手性中心的市售原料合成；或者通过制备对映体产物的混合物后，再通过例如转化成非对映体的混合物的分离后，再通过分离或重结晶、色谱技术；或者从手性色谱柱上直接分离出对映体。特定立体化学结构的起始化合物是市售可获得的的，或者可以通过本领域已知技术制备和拆分。
本公开的某些化合物还可以不同的稳定构象形式存在，这类构象形式是可分离的。由于不对称单键周围阻碍旋转(例如因空间位阻或环张力)所致的扭转不对称性，可以使不同的构象异构体分离开来。本公开包括这些化合物的每一种构象异构体及其混合物。
术语“本公开的化合物”和等同表述意指包括式(I)化合物和药学上可接受的对映体、非对映体及其盐。同样，提及中间体时意指包括本文允许的中间体的盐。
本公开意欲包括出现在本化合物中的所有原子的同位素。同位素包括具有相同原子数但不同质量数的那些原子。通常的例子但并非限定，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括13C和14C。本发明的同位素标记化合物一般可通过本领域技术人员熟知的常规技术制备，或者通过本文所述的类似方法制备，但是用适当同位素标记的试剂代替其它所用的非标记试剂进行。这样的化合物可具有多种潜在用途，例如用作确定生物活性中的标准品和试剂。在稳定的同位素的情况下，这样的化合物可具有较好改善生物学、药理学或药动学特性的潜力。
本公开的化合物可作为药学上可接受的盐存在。本文所用的术语“药学上可接受的盐”表示本公开的化合物的盐或两性离子形式，它们是水溶性或油溶性的，或是可分散的，它们在合理的医学判断范围内，适用于与患者组织接触而无过度毒性、刺激性、变态反应或者其它问题或并发症，此与合理的利益/风险比相称，并有效用于其既定用途。可在化合物最终的分离和纯化期间制备其盐，或者可单独使合适的氮原子与合适的酸反应来制备化合物的盐。代表性的酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐；二葡糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐(hemisulfate)、庚酸盐、己酸盐、甲酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、均三甲基苯磺酸盐(mesitylenesulfonate)、甲磺酸盐、亚萘基磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、扑姆酸盐(palmoate)、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、三氯乙酸盐、三氟乙酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。可用于形成药学上可接受的加成盐的酸的实例包括无机酸及有机酸，无机酸有例如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸，有机酸有例如草酸、马来酸、琥珀酸和柠檬酸。
可以在化合物最终的分离和纯化期间通过使羧基与合适的碱(例如金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐)反应或者与氨或有机伯胺、仲胺或叔胺反应来制备碱加成盐。药学上可接受的盐的阳离子包括锂、钠、钾、钙、镁和铝，以及无毒的季铵阳离子例如铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、二环己胺、普鲁卡因、二苄胺、N，N-二苄基苯乙胺和N，N’-二苄基乙二胺。用于形成碱加成盐的其它代表性的有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪。
当可用于治疗时，治疗有效量的式(I)化合物及其药学上可接受的盐可作为未加工的化学药品给予，还可作为药物组合物的活性成分提供。因此，本公开还提供药物组合物，该药物组合物包括治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐及一种或多种(优选1-3种)药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。本文所用的术语“治疗有效量”是指足以显示出有意义的患者益处(例如持续减少病毒负荷)的各活性组分的总量。当用于单独的活性成分单独给药时，该术语仅指该成分。当组合应用时，该术语则是指不论依次或同时联合给药时，都引起治疗效果的活性成分的合并量。式(I)化合物及其药学上可接受的盐如上所述。载体、稀释剂或赋形剂在其与制剂其它成分相容以及对其接受者无害的意义上来讲，必需是可接受的。根据本公开的另一个方面，还提供用于制备药物制剂的方法，该方法包括将式(I)化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种(优选1-3种)药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合。本文所用的术语“药学上可接受的”是指这样的化合物、原料、组合物和/或剂型，它们在合理医学判断的范围内，适用于与患者组织接触而无过度毒性、刺激性、变态反应或其它问题和并发症，此与合理的利益/风险比相称，并有效用于其既定用途。
药物制剂可呈单位剂型，每个单位剂量含有预定量的活性成分。本公开的化合物的剂量水平介于约0.01-约250毫克/千克(“mg/kg”)体重/天之间，优选介于约0.05-约100mg/kg体重/天之间，常常以单一疗法用于预防或治疗HCV介导的疾病。本公开的药物组合物通常将按每天约1次至约5次或者作为连续输注给予。这类给药法可用作长期或短期疗法。可与载体材料混合以制备单一剂型的活性成分的量将根据待治疗的疾病、病情的严重程度、给药时间、给药途径、所用化合物的排泄速率、疗程和患者年龄、性别、体重和身体状况而改变。优选的单位剂型制剂是含有本文上述活性成分的日剂量或分剂量或其适宜分数的单位剂型制剂。一般来说，用明显低于化合物最佳剂量的小剂量开始治疗。此后，以较小的增量来加大剂量直到在这类情况下达到最佳效果。一般而言，最理想地给予化合物的浓度水平是通常可在抗病毒方面提供有效结果而又不致于引起任何有害或有毒的副作用。
当本公开的组合物包含本公开的化合物及一种或多种其它治疗药或预防药的组合时，化合物和另外的药物二者的剂量水平通常在单一疗法方案中，占正常给药剂量的约10-150％，更优选占正常给药剂量的约10％至80％之间。
药物制剂可适合于通过任何合适的途径给药，例如通过口服(包括口颊或舌下含服)、直肠、鼻、局部(包括口颊、舌下或经皮)、阴道或胃肠外(包括皮下、皮内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内(intralesional)、静脉内或者真皮内注射或输注)途径。这类制剂可按药剂学领域的任何已知方法制备，例如通过将活性成分与载体或赋形剂混合。优选口服给药或注射给药。
适合于口服给药的药物制剂可按独立的单位提供，例如胶囊剂或片剂；散剂或颗粒剂；水性或非水性液体中的溶液剂或混悬剂；可食用泡沫制剂或起泡制剂(whips)；或水包油乳液剂或油包水乳液剂。
举例来说，对于以片剂或胶囊剂形式的口服给药，活性药物组分可与药学上可接受的口服无毒惰性载体(例如乙醇、甘油、水等)相混合。通过将化合物粉碎成合适的微细尺寸，并与被同样粉碎的药用载体(例如淀粉或甘露醇等可食用的碳水化合物)混匀来制备散剂。还可存在矫味剂、防腐剂、分散剂和着色剂。
通过制备如上所述的粉状混合物，并装填到成形的明胶壳内，来制备胶囊剂。在装填操作之前，可将助流剂和润滑剂(例如胶态二氧化硅、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙或固态聚乙二醇)加到粉状混合物中。还可加入崩解剂或增溶剂(例如琼脂、碳酸钙或碳酸钠)以改善胶囊剂摄入后的药物利用度。
此外，需要或必需时，也可将合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺到混合物中。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖(例如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味剂、天然和合成树胶(例如阿拉伯树胶、西黄蓍胶或藻酸钠)、羧甲基纤维素、聚乙二醇等。用于这些剂型的润滑剂包括油酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、皂土、黄原胶等。例如，通过制成粉状混合物，制粒或预压片(slugging)，添加润滑剂和崩解剂，压制成片，从而制成片剂。将适当粉碎的化合物与如上所述的稀释剂或基料，并任选与粘合剂(例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮)、溶液阻滞剂(例如石蜡)、吸收加速剂(例如季盐)和/或吸收剂(例如皂土、高岭土或磷酸二钙)混合，来制备粉状混合物。可用粘合剂(例如糖浆、淀粉浆、阿拉伯胶浆(acadia mucilage)或者纤维素材料或聚合材料溶液)润湿后加压过筛，将粉状混合物制粒。制粒的一个替代方法是，可将粉状混合物通过压片机，结果是将成形不佳的团块再击碎制成颗粒。可通过添加硬脂酸、硬脂酸盐、滑石粉或矿物油使颗粒润滑以防止粘到片剂成形冲模上。然后将经润滑的混合物压制成片剂。本公开的化合物还可与自由流动的惰性载体混合，无需通过制粒或预压片步骤便可直接压制成片剂。可提供透明或不透明的由虫胶密封衣、糖衣或聚合材料衣和蜡质抛光衣(polish coating of wax)组成的保护性包衣材料。可将染料加到这些包衣材料中以区别不同的单位剂量。
口服液体例如溶液剂、糖浆剂和酏剂可以剂量单位形式制备，从以使定量含有预定量的化合物。糖浆剂可通过将化合物溶于适当调味的含水溶液中来制备，而酏剂可通过使用无毒溶媒制备。还可加入增溶剂和乳化剂(例如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚)、防腐剂、矫味添加剂(例如薄荷油或天然甜味剂或糖精或其它人造甜味剂)等。
如果适当的话，可将用于口服给药的剂量单位制剂微胶囊化。也可将制剂制成延时或持续释放，例如通过将微粒材料包衣或包埋在聚合物、蜡等中。
式(I)化合物及其药学上可接受的盐还可以脂质体递药系统给予，例如小单层脂质体、大单层脂质体和多层脂质体。脂质体可由多种磷脂(例如胆固醇、十八烷基胺或磷脂酰胆碱)构成。
式(I)化合物及其药学上可接受的盐也可通过使用单克隆抗体作为单独的载体(化合物分子与之偶联)递药。化合物也可与作为可靶向药物载体的可溶性聚合物偶联。这类聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺苯酚、聚羟乙基天冬酰胺苯酚或被棕榈酰残基取代的聚氧化乙烯聚赖氨酸。此外，化合物可与一类生物可降解的聚合物偶联，用于达到药物的控释，这类聚合物为例如聚乳酸、聚ε-己内酯(polepsilon caprolactone)、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联共聚物或两亲性嵌段共聚物。
适于经皮给药的药物制剂可作为离散的贴剂(discrete patches)存在，以在长时间段内保持与接受者表皮密切接触。例如，活性成分可由贴剂通过离子电渗疗法传递，一般如在Pharm.Res.，3(6)：318(1986)中所述。
适合于局部给药的药物制剂可制成软膏剂、乳膏剂、混悬剂、洗剂、散剂、溶液剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油剂。
为治疗眼部或其它外部组织，例如口腔和皮肤，制剂优选作为局部软膏剂或霜剂使用。当制备软膏剂时，可使用所述活性成分与或者石蜡或者水-可溶混的软膏基质。或者，可将活性成分用水包油霜剂基质或油包水基质制成霜剂。
适用于局部给予眼睛的药物制剂包括滴眼液，其中活性组分溶解或悬浮于适当的载体，特别是水性溶剂中。
适用于口腔内局部给药的药物制剂包括锭剂、软锭剂和口腔洗剂。
适合于直肠给药的药物制剂可作为栓剂或作为灌肠剂提供。
适合于经鼻给药的药物制剂(其中载体为固体)包括粒径为例如20-500微米范围的粗粉剂，其通过以鼻吸入方式给药，即通过从接近鼻子的粉剂容器中通过鼻通道快速吸入。适合于作为鼻腔喷雾剂或滴鼻剂给药的合适制剂(其中载体为液体)包括活性成分的水性溶液剂或油性溶液剂。
适合于通过吸入给药的药物制剂包括微细粒子粉剂(dusts)或细雾剂(mists)，其可用不同类型计量的剂量压缩气溶胶、雾化吸入器或吹入器制备。
适合于阴道给药的药物制剂可以阴道栓、阴道塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾剂提供。
适于胃肠外给药的药物制剂包括水性和非水性无菌注射溶液剂及水性和非水性无菌混悬剂，水性和非水性无菌注射溶液剂可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂，并使制剂与待接受者血液等渗的溶质；水性和非水性无菌混悬剂可包括悬浮剂和增稠剂。制剂可以单位剂量或多剂量容器提供，例如密封的安瓿和小瓶，并可保存在冷冻-干燥(冻干)条件下，只需在临用前即刻加入无菌液体载体例如注射用水。临用时配制的注射溶液剂和混悬剂可由无菌粉针剂、颗粒剂和片剂制备。
应该理解，除了以上特别提到的成分以外，制剂还可包括与所述制剂类型有关的本领域常用的其它成分，例如适合于口服给药的这类制剂可包括矫味剂。
术语“患者”包括人和其它动物两者。
术语“治疗”是指：(i)在可易患疾病、障碍和/或病症但尚未被确诊患有疾病、障碍和/或病症的患者中防止疾病、障碍或病症的发生；(ii)抑制疾病、障碍或病症，即阻止其发展；和(iii)缓解疾病、障碍或病症，即使疾病、障碍和/或病症消退。
本公开的化合物还可与环孢菌素(例如环孢菌素A)一起给药。已表明，环孢菌素A在临床试验中具有抗HCV活性(Hepatology，38：1282(2003)；Biochem.Biophys.Res.Commun.，313：42(2004)；J.Gastroenterol.，38：567(2003))。
下表1中列出了一些可与本公开的化合物一起给药的示例性化合物的实例。在联合疗法中，本公开的化合物可与其它抗HCV活性化合物共同或分开给药，或者将化合物掺到组合物中。
表1
Figure BPA00001479917700301
Figure BPA00001479917700311
Figure BPA00001479917700331
Figure BPA00001479917700341
本公开的化合物还可用作实验室试剂。化合物可在为设计病毒复制实验、验证动物实验系统和结构生物学研究提供研究工具方面发挥作用，以进一步加深对HCV疾病机制的认识。此外，本公开的化合物可用于通过例如竞争性抑制来建立或确定其它抗病毒化合物的结合位点。
本公开的化合物还可用来处理或防止病毒污染材料，从而降低接触这类材料的实验室人员或医务人员或患者感染病毒的风险，所述材料为例如血液、组织、手术器械和衣物、实验室仪器和衣物及采血或输血设备和材料。
当通过合成方法制备，或者通过代谢过程(包括发生在人或动物身体内(体内)的那些过程)或者体外发生过程产生时，本公开意欲包括具有式(I)的化合物。
用于本申请的缩写，包括特别在下列示例性流程和实施例中的缩写为本领域技术人员所熟知。所使用的一些缩写如下：TFA代表三氟乙酸；min或min.或mins代表分钟；MeCN或ACN代表乙腈；LDA代表二异丙基氨化锂；DMSO代表二甲亚砜；h或hr或hrs代表小时；Boc或BOC代表叔丁氧基羰基；HATU表示六氟磷酸O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲
Figure BPA00001479917700351
RT或Rt或rt代表保留时间或室温(上下文中将指明)；Me代表甲基；DMF代表N，N-二甲基甲酰胺；Pd(Ph3P)4代表四三苯膦钯；MeOH代表甲醇；MeOD代表CD4OD；TEA代表三乙胺；Ph代表苯基；TBDPS代表叔丁基二苯基甲硅烷基；Et3N或TEA代表三乙胺；DMAP代表N，N-二甲氨基吡啶；EtOAc代表乙酸乙酯；TBAF代表氟化四丁基铵；THF代表四氢呋喃；DIEA或DIPEA或iPr2NEt代表二异丙基乙胺；NCS代表N-氯代琥珀酰亚胺；NBS代表N-溴代琥珀酰亚胺；DCM代表二氯甲烷；SEM代表2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；DCE代表1，2-二氯乙烷；EDCI代表1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺；DBU代表1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯；Pd(t-Bu3P)2代表双(三丁基膦)钯；HMDS代表六甲基二硅氮烷(hexamethyldisilazide)；TMSCHN2代表三甲基甲硅烷基重氮甲烷；H-D-Ser-OBzl代表D-丝氨酸苄基酯；i-PrOH代表异丙醇；LiHMDS代表六甲基二甲硅烷基氨基锂；DIBAL或DIBALH代表二异丁基氢化铝；TBDMS代表叔丁基二甲基甲硅烷基；CBz代表羰基苄氧基；Bn代表苄基；DEAD代表偶氮二甲酸二乙酯；mCPBA代表间氯过苯甲酸；TMSCN代表氰化三甲基甲硅烷；dpppe代表1，5-双(二苯膦基)戊烷；TMEDA代表四甲基乙二胺；OAc代表乙酸根；DMA代表N，N-二甲基甲酰胺；d代表天。
现结合某些实施方案本描述本公开，但并不意欲使这些实施方案限定其范围。相反地，本公开将涵盖可包括在权利要求范围内的所有替换、修饰和等价物。因此，包括在特定实施方案中的下列实施例将举例说明本公开的实施，应清楚的是这些实施例目的是用于示例性说明某些实施方案，并给出用以提供所认为是最有用的和易于理解其方法和概念性方面的说明。
起始原料可由商业来源获得或者通过本领域普通人员了解的已确立的文献方法制备。
实施例
除另有说明，纯度测定在Shimadzu LC系统上进行，保留时间(Rt)测定和低分辨质谱分析在加有Waters MICROMASS
Figure BPA00001479917700361
ZQ MS系统的Shimadzu LC系统上进行。应当注意的是，保留时间在不同机器之间略有不同。
条件1
色谱柱＝Phenomenex
Figure BPA00001479917700362
C18，3.0X 50mm，10m
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝2min
停止时间＝3min
流速＝4mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝含0.1％TFA的10％甲醇/90％水
溶剂B＝含0.1％TFA的90％甲醇/10％水
条件2
色谱柱＝XTERRA
Figure BPA00001479917700363
C18，3.0x 50mm，S7
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝2min
停止时间＝3min
流速＝5mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝含0.2％H3PO4的10％甲醇/90％水
溶剂B＝含0.2％H3PO4的90％甲醇/10％水
条件3
色谱柱＝Phenomenex
Figure BPA00001479917700371
C18，3.0X 50mm，10m
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝3min
停止时间＝4min
流速＝4mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝含0.1％TFA的10％甲醇/90％水
溶剂B＝含0.1％TFA的90％甲醇/10％水
条件4
色谱柱＝XTERRA
Figure BPA00001479917700372
C18，3.0x 50mm，S7
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝10min
停止时间＝11min
流速＝5mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝含0.2％H3PO4的10％甲醇/90％水
溶剂B＝含0.2％H3PO4的90％甲醇/10％水
条件5
色谱柱＝Phenomenex
Figure BPA00001479917700381
C18，3.0X 50mm，10m
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝4min
停止时间＝5min
流速＝4mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝含0.1％TFA的10％甲醇/90％水
溶剂B＝含0.1％TFA的90％甲醇/10％水
条件6
色谱柱＝Phenomenex-Luna，C18，4.6X 50mm，S10
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝3min
停止时间＝4min
流速＝4mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝含0.1％TFA的10％甲醇/90％水
溶剂B＝含0.1％TFA的90％甲醇/10％水
条件7
色谱柱＝Phenomenex-Luna，C18，4.6X 50mm，S10
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝2min
停止时间＝3min
流速＝4mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝含0.1％TFA的10％甲醇/90％水
溶剂B＝含0.1％TFA的90％甲醇/10％水
条件9
色谱柱＝Waters Sunfire，C18，4.6X150mm，3.5μm
起始％B＝10
终止％B＝50
梯度时间＝20min
停止时间＝25min
流速＝1mL/min
波长＝220&254nm
溶剂A＝含0.1％TFA的5％CH3CN/95％水
溶剂B＝含0.1％TFA的95％CH3CN/5％水
条件9a
与条件9相同，但停止时间＝35min
条件9a.1
色谱柱＝Waters Sunfire，C18，4.6X150mm，3.5μm
起始％B＝30
终止％B＝100
梯度时间＝20min
停止时间＝25min
流速＝1mL/min
波长＝220&254nm
溶剂A＝含0.1％TFA的5％CH3CN/95％水
溶剂B＝含0.1％TFA的95％CH3CN/5％水
条件10
色谱柱＝Waters Xbridge phenyl，C18，4.6X150mm，3μm
起始％B＝10
终止％B＝50
梯度时间＝20min
停止时间＝25min
流速＝1mL/min
波长＝220&254nm
溶剂A＝含0.1％TFA的5％CH3CN/95％水
溶剂B＝含0.1％TFA的95％CH3CN/5％水
条件10a
与条件10相同，但停止时间＝35min
条件10a.1
色谱柱＝Waters Xbridge phenyl，C18，4.6X150mm，3μm
起始％B＝40
终止％B＝100
梯度时间＝20min
停止时间＝25min
流速＝1mL/min
波长＝220&254nm
溶剂A＝含0.1％TFA的5％CH3CN/95％水
溶剂B＝含0.1％TFA的95％CH3CN/5％水
条件10b
色谱柱＝Sunfire，C18，3.0X 150mm，3.5μm
起始％B＝10
终止％B＝40
梯度时间＝15min
停止时间＝18min
流速＝1mL/min
波长1＝220nm
波长2＝254nm
溶剂A＝含0.1％TFA的5％MeCN/95％水
溶剂B＝含0.1％TFA的95％MeCN/5％水
条件10c
色谱柱＝Xbridge Phenyl，C18，3.0X 150mm，3.5μm
起始％B＝10
终止％B＝40
梯度时间＝15min
停止时间＝18min
流速＝1mL/min
波长1＝220nm
波长2＝254nm
溶剂A＝含0.1％TFA的5％MeCN/95％水
溶剂B＝含0.1％TFA的95％MeCN/5％水
条件10d
色谱柱＝PHENOMENEX
Figure BPA00001479917700411
-Luna，C18，2.0X 50mm，3μm
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝4min
停止时间＝5min
流速＝0.8mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝含0.1％TFA的10％甲醇/90％水
溶剂B＝含0.1％TFA的90％甲醇/10％水
柱温＝40℃
条件10e(Agilent 1200系列LC系统)
色谱柱＝Xbridge phenyl，C18，4.6X150mm，3.5μm
溶剂A＝缓冲液∶CH3CN(95∶5)
溶剂B＝缓冲液∶CH3CN(5∶95)
缓冲液＝含0.05％TFA的H2O(pH 2.5，用稀氨水调节)
起始％B＝10
终止％B＝100
梯度时间＝12min
等度时间＝3min
停止时间＝23min
流速＝1mL/min
波长＝220&254nm
条件10f(Agilent LC-1200系列，配备6140单通道四极质谱仪，ESI+ve模式)
色谱柱＝Zorbax SB，C18，4.6X50mm，5μm
溶剂A＝MeOH(10％)+含0.1％TFA的H2O(90％)
溶剂B＝MeOH(90％)+含0.1％TFA的H2O(10％)
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝3min
等度时间＝1min
停止时间＝5min
流速＝5mL/min
波长＝220nm
条件10g(Agilent LC-1200系列，配备6140单通道四极质谱仪，ESI+ve模式)
色谱柱＝Ascentis Express，C-8，2.1X5mm，2.7μm
溶剂A＝CH3CN(2％)+10mM NH4COOH的H2O溶液(98％)
溶剂B＝CH3CN(98％)+10mM NH4COOH的H2O溶液(2％)
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝1.5min
等度时间＝1.7min
停止时间＝4min
流速＝1mL/min
波长＝220nm
条件10h
色谱柱＝PHENOMENEX
Figure BPA00001479917700431
-Luna，C18，4.6X 30mm，S10
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝3min
停止时间＝4min
流速＝4mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝含0.1％TFA的10％甲醇/90％水
溶剂B＝含0.1％TFA的90％甲醇/10％水
条件11
色谱柱＝PHENOMENEX
Figure BPA00001479917700432
-Luna，C18，50X2mm，3μm
起始％B＝0
终止％B＝100
梯度时间＝4min
停止时间＝5min
流速＝0.8mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝5％甲醇/95％水∶10mM乙酸铵
溶剂B＝95％甲醇/5％水∶10mM乙酸铵
柱温＝40℃
条件12(Waters Acquity HPLC，配备Waters PDA UV-Vis检测器和Waters SQ MS-ESCI探针)
色谱柱＝Waters Acquity BEH，C18，150X 2.1mm ID，1.7m(at 35℃)
流动相A＝0.05％TFA的水溶液
流动相B＝0.05％TFA的乙腈溶液
溶剂系统：保持10％B：0-1min；10-98％B：1-32min；保持98％B：32-35min；98-10％B：35-35.3min；保持：10％B：35.3-40min
流速＝0.35ml/min
UV检测＝335nm
实施例
Figure BPA00001479917700441
将4，4’-氧基双-(苯甲酸)二甲酯(1.5g，5.24mmol)加入到氯碘甲烷(3.05mL，41.92mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中，将得到的溶液冷却至-78℃。滴加入1.8M LDA的四氢呋喃溶液(29mL，52mmol)，将得到的棕色混悬液在-78℃下搅拌15min。然后慢慢加入冰醋酸的四氢呋喃溶液(10mL于50mL中)，将该棕色混合物在-78℃下搅拌10min，然后使达到室温。将混合物溶于乙酸乙酯和盐水(1∶1，50mL)中，然后分离有机层，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。残留物进行快速层析(硅胶；15％乙酸乙酯/己烷)，得到OL-1a，为浅棕色固体(0.6g)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm5.17(s，4H)，7.22(d，J＝8.85Hz，4H)，8.06(d，J＝8.85Hz，4H)。LC(Cond.2)：RT＝1.53分钟，97％均一性指数。LCMS：(M-H)+C16H11Cl2O3分析计算值：321.01；实测值：321.30。
Figure BPA00001479917700451
将OL-1a(0.6g，1.85mmol)和二甲酰基氨化钠(0.42g，4.45mmol)在乙腈(20mL)中的混合物加热回流4h。减压除去溶剂，将得到的残留物再溶解于5％HCl的甲醇溶液(30mL)中，加热至回流2h。将混合物在冰水浴中冷却，过滤得到的沉淀，用乙醇和乙醚洗涤，真空干燥。回收的浅棕色固体不经进一步纯化而使用(0.66g)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 4.54(s，4H)，7.25(d，J＝8.85Hz，4H)，8.11(d，J＝8.55Hz，4H)，8.52(br.s，6H)。LC(Cond.1)：RT＝1.24min；LRMS：(M+H)+C16H17N2O3分析计算值：285.12；实测值：285.19。
Figure BPA00001479917700452
用15分钟，将N，N-二异丙基乙胺(1.13mL，6.47mmol)滴加入N-Boc-L-脯氨酸(0.8g，3.73mmol)、HATU(1.48g，3.88mmol)、OL-1b(0.66g，1.85mmol)和二甲基甲酰胺(15mL)的非均相混合物中，室温条件下搅拌4h。真空除去大部分挥发性成分，得到的残留物在乙酸乙酯(30mL)和水(20mL)之间分配。将有机层用水(20mL)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。自残留物制备硅胶筛目并进行快速层析(硅胶；65-85％乙酸乙酯/己烷)，得到OL-1c，为浅棕色固体(0.7g)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.39/1.34(旋转异构体，s，18H)，1.70-1.91(m，6H)，2.00-2.25(m，J＝8.55Hz，2H)，3.22-3.33(m，2H)，3.32-3.47(m，J＝10.68，10.68Hz，2H)，4.08-4.26(m，2H)，4.56(ddd，J＝36.93，18.16，5.34Hz，4H)，7.19(d，J＝8.85Hz，4H)，8.06(d，J＝7.93
Hz，4H)，8.11-8.24(m，J＝5.49Hz，2H)。LC(Cond.1)：RT＝2.55min；LRMS：(M+H)+C36H47N4O9分析计算值：679.33；实测值：679.44。
Figure BPA00001479917700461
在微波辐射下，将OL-1c(0.7g，1.025mmol)和乙酸铵(0.79g，10mmol)在二甲苯(5mL)中的混合物在密封管中于140℃加热1.2小时。真空除去挥发性成分，将残留物小心地在乙酸乙酯和水之间分配，加入足量的饱和碳酸酸氢钠溶液使得该两相系统振摇后的水相的pH略呈碱性。分离各层，将水层用另外的乙酸乙酯提取。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。使得到的物质经历快速层析(硅胶；15-25％丙酮/二氯甲烷)，得到OL-1d(0.13g)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.17/1.48(旋转异构体，s，18H)，1.76-1.93(m，4H)，1.93-2.06(m，J＝10.07Hz，2H)，2.10-2.30(m，2H)，3.32-3.39(m，2H)，3.45-3.62(m，2H)，4.69-4.80(m，1H)，4.83(d，J＝7.02Hz，1H)，6.97(d，J＝7.93Hz，4H)，7.00-7.22(m，1H)，7.40/7.62(旋转异构体，m，2H)，7.73(d，J＝8.55Hz，3H)，11.74/11.81/12.07(旋转异构体，s，2H).LC(Cond.2)：RT＝1.53分钟，93％均一性指数；LCMS：(M+H)+C36H44N6O5分析计算值：641.34；实测值：641.50。
Figure BPA00001479917700471
向OL-1d(0.13g，0.2mmol)的30mL二氯甲烷溶液中加入1mL4.0M HCl的二氧六环溶液。将反应物室温下搅拌2h，减压浓缩。将得到的残留物再溶解于极少量的甲醇中，将得到的产物用乙醚研磨，过滤并真空浓缩。回收浅黄褐色固体(0.11g)，不经进一步纯化而使用。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.92-2.07(m，2H)，2.12-2.25(m，2H)，2.37-2.47(m，4H)，3.30-3.47(m，4H)，4.90-5.02(m，2H)，7.15(d，J＝8.55Hz，4H)，7.91(d，J＝8.24Hz，4H)，7.97(s，2H)，9.74(br.s，2H)，10.25(br.s，2H)。注意：咪唑NH的信号太宽，故未指定化学位移。LC(Cond.1)：RT＝1.68min；LRMS：(M+H)+C26H29N6O分析计算值：441.24；实测值：441.30。
实施例OL-1
将HATU(52mg，0.137mmol)加入到OL-1e(35mg，0.06mmol)、二异丙基乙胺(58μL，0.33mmol)和Cap-1(22mg，0.12mmol)的二甲基甲酰胺(3mL)混合物中，将得到的混合物环境温度下搅拌3h。真空除去挥发性成分，残留物经反相HPLC系统纯化(水/甲醇/TFA)，得到实施例OL-1的TFA盐，为灰白色固体(32mg)。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 1.82-1.93(m，2H)，1.94-2.08(m，4H)，2.14-2.24(m，2H)，2.29-2.40(m，4H)，2.83(s，4H)，2.97-3.07(m，4H)，3.97(t，J＝8.24Hz，2H)，4.89-5.20(m，2H)，5.34-5.73(m，2H)，7.00-7.22(m，6H)，7.49-7.64(m，9H)，7.70-7.89(m，5H)，10.20(br.s，2H).LC(Cond.1)：RT＝2.48min；LRMS：(M+H)+C46H51N8O3分析计算值：763.41；实测值：763.56；HRMS：(M+H)+C46H51N8O3分析计算值：763.4084；实测值：763.4109。
Figure BPA00001479917700481
采用对实施例OL-1所述的相同方法，通过用各自的酸取代Cap-1，制备实施例OL-2和OL-3的TFA盐。
Figure BPA00001479917700482
Figure BPA00001479917700491
在密封管中，将3-溴苯甲酸甲酯(5g，23.2mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(5.3g，34.87mmol)、碳酸铯(15.12g，46.4mmol)、碘化亚酮(I)(0.44g，2.32mmol)和盐酸N，N-二甲酯(0.97g，6.96mmol)在二氧六环(100ml)中混合，将得到的混合物加热至90℃下15h。减压除去溶剂，将残留物溶于乙酸乙酯/水(1∶1，200mL)中。将有机层用饱和碳酸钠水溶液、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。得到的物质经快速层析纯化(硅胶，5％乙酸乙酯/己烷)，得到OL-4a，为澄清油状物，其放置后固化(5.8g)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 3.83(s，6H)，7.10(d，J＝8.55Hz，2H)，7.43(dd，J＝8.09，2.59Hz，1H)，7.56(s，1H)，7.61(t，J＝7.93Hz，1H)，7.81(d，J＝7.63Hz，1H)，7.98(d，J＝8.55Hz，2H)。LC(Cond.2)：RT＝1.53分钟；LCMS：(M+1)+C16H15O5分析计算值：287.01；实测值：287.23.
Figure BPA00001479917700492
根据制备OL-1a所用相同的方法，自OL-4a制备OL-4b。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 5.14(s，2H)，5.20(s，2H)，7.13(d，J＝8.85Hz，2H)，7.43-7.49(m，1H)，7.64(t，J＝8.09Hz，1H)，7.66-7.68(m，1H)，7.85(d，J＝7.93Hz，1H)，8.02(d，J＝8.85Hz，2H)。LC(Cond.1)：RT＝1.51min；LRMS：(M+H)+C16H13Cl2O3分析计算值：323.02；实测值：323.07.
根据制备实施例OL-1b所用相同的方法，自实施例OL-4b制备OL-4c。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm.4.52(s，2H)，4.56(s，2H)，7.16(d，J＝8.85Hz，2H)，7.51(dd，J＝8.24，2.44Hz，1H)，7.68(t，J＝7.93Hz，1H)，7.71-7.75(m，1H)，7.91(d，J＝7.63Hz，1H)，8.07(d，J＝8.85Hz，2H)，8.60(s，6H).LC(Cond.2)：C16H17N2O3(M+H)+分析计算值：285.12；实测值：285.15.
根据制备实施例OL-1c所用相同的方法，自实施例OL-4c制备实施例OL-4d。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.38/1.33(旋转异构体，s，18H)，1.69-1.91(m，6H)，1.95-2.19(m，2H)，3.20-3.31(m，2H)，3.32-3.47(m，2H)，4.08-4.23(m，2H)，4.43-4.68(m，4H)，7.10(d，J＝8.55Hz，2H)，7.42(dd，J＝8.09，1.98Hz，1H)，7.57-7.70(m，2H)，7.86(d，J＝7.02Hz，1H)，8.03(d，J＝7.93Hz，2H)，8.08-8.24(m，2H).LC(Cond.1)：RT＝2.53min；LRMS：C36H47N4O9(M+H)+分析计算值：679.33；实测值：679.42.
Figure BPA00001479917700511
根据制备实施例OL-1d所用相同的方法，自实施例OL-4d制备实施例OL-4e。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.14/1.17/1.38/1.40(旋转异构体，s，18H)，1.71-2.06(m，6H)，2.09-2.28(m，J＝25.79，13.89Hz，2H)，3.31-3.40(m，2H)，3.51(s，2H)，4.65-4.89(m，2H)，6.80(t，J＝8.39Hz，1H)，6.91-7.10(m，2H)，7.28-7.55(m，5H)，7.58-7.80(m，2H)，11.66-12.21(m，2H)。LC(Cond.1)：RT＝2.98min；LRMS：C36H45N6O5(M+H)+分析计算值：641.34；实测值：641.39。
Figure BPA00001479917700512
根据制备实施例OL-1e所用相同的方法，自实施例OL-4e制备实施例OL-4f。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.94-2.06(m，2H)，2.09-2.23(m，2H)，2.28-2.38(m，1H)，2.37-2.47(m，3H)，3.27-3.50(m，4H)，4.90(br.s，1H)，4.99(br.s，1H)，7.00(d，J＝7.93Hz，1H)，7.13(d，J＝8.55Hz，2H)，7.49(t，J＝7.93Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.69(d，J＝7.63Hz，1H)，7.92(d，J＝8.55Hz，2H)，7.99(s，2H)，9.58(br.s，1H)，9.84(br.s，1H)，10.25(br.d，J＝22.28Hz，2H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。LC(Cond.1)：RT＝1.72min；LRMS：C26H29N6O(M+H)+分析计算值：441.24；实测值：441.29。
实施例OL-4
根据制备实施例OL-1所用相同的方法，自实施例OL-4f制备实施例OL-4。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.83-1.92(m，4H)，1.95-2.09(m，8H)，2.11-2.23(m，4H)，2.75-2.88(m，2H)，2.92(s，1H)，2.96-3.12(m，2H)，3.97(t，J＝8.39Hz，2H)，5.14(dd，J＝17.70，7.02Hz，2H)，5.41(s，2H)，6.91-7.11(m，J＝49.75Hz，2H)，7.14(d，J＝7.93Hz，2H)，7.44-7.68(m，12H)，7.79(d，J＝8.54Hz，2H)，7.84-8.02(m，J＝9.16Hz，2H)，10.21(s，1H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。LC(Cond.1)：RT＝1.78min；LRMS：C46H51N8O3(M+H)+分析计算值：763.41；实测值：763.56.HRMS：C46H51N8O3(M+H)+分析计算值：763.4084；实测值：763.4067。
Figure BPA00001479917700521
根据对实施例OL-4所述相同的方法，通过用各自的酸取代Cap-1，制备实施例OL-5至OL-6的TFA盐。
Figure BPA00001479917700522
Figure BPA00001479917700531
Figure BPA00001479917700532
向4-(氯甲基)苯甲酸(8.53g，50mmol)和氢氧化钠(10g，0.25mol)的水(40mL)溶液中加入4-羟基苯甲酸(6.9g，50mmol)和氢氧化钠(6g，0.15mol)的水(50mL)溶液。将得到的混合物加热至回流温度15h，冷却至室温下后，过滤，用硫酸水溶液(1∶1，200mL)酸化。过滤得到的沉淀物，用水洗涤，真空干燥。灰白色固体(9.3g)不经进一步纯化而使用。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 5.27(s，1H)，7.10(d，J＝8.85Hz，2H)，7.56(d，J＝8.24Hz，2H)，7.89(d，J＝8.85Hz，2H)，7.96(d，J＝8.24Hz，2H)，12.36(br.s，2H)。LC(Cond.2)。注意：该分子在LC/MS系统中离子化不完全，因此未得到准确的质谱。
将(重氮甲基)三甲基甲硅烷(15mL，30mmol，2M己烷液)滴加到5℃(冰-水浴)下的实施例OL-7a(2.04g，7.5mmol)在甲醇(30mL)中的悬浮液中。当加入完毕后，移去冷却浴，将混合物室温下搅拌过夜。减压除去溶剂，将剩余的残留物溶于乙酸乙酯中，用水、碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。得到的物质经快速层析纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷)，得到实施例OL-7b，为白色固体(1.5g)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 3.80(s，3H)，3.85(s，3H)，5.29(s，2H)，7.13(d，J＝8.85Hz，2H)，7.59(d，J＝8.24Hz，2H)，7.91(d，J＝9.16Hz，2H)，7.98(d，J＝8.24Hz，2H)。LC(Cond.1)：RT＝2.56min；LRMS：C17H16O5(M+H)+分析计算值：301.11；实测值：301.22。
Figure BPA00001479917700542
根据制备实施例OL-1a所用的相同方法，自实施例OL-7b，制备实施例OL-7c。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 5.09(s，2H)，5.18(s，2H)，5.34(s，2H)，7.15(d，J＝8.85Hz，2H)，7.62(d，J＝8.55Hz，2H)，7.95(d，J＝9.16Hz，2H)，8.00(d，J＝8.55Hz，2H).LC(Cond.1)：RT＝2.36min；LRMS：C17H15Cl2O3(M+H)+分析计算值：337.04；实测值：337.09.
Figure BPA00001479917700551
根据制备实施例OL-1b所用的相同方法，自实施例OL-7c，制备实施例OL-7d。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 4.49(s，2H)，4.57(s，2H)，5.38(s，2H)，7.19(d，J＝8.85Hz，2H)，7.66(d，J＝8.24Hz，2H)，8.00(d，J＝8.85Hz，2H)，8.05(d，J＝8.24Hz，2H)，8.45(s，6H).LC(Cond.1)：RT＝1.26min；LRMS：C17H19Nl2O3(M+H)+分析计算值：299.14；实测值：299.19。
Figure BPA00001479917700552
根据制备实施例OL-1c所用的相同方法，自实施例OL-7d，制备实施例OL-7e。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.30-1.47(m，18H)，1.65-1.89(m，6H)，2.01-2.20(m，2H)，3.24-3.34(m，2H)，3.34-3.43(m，2H)，4.09-4.25(m，2H)，4.44-4.68(m，4H)，5.33(s，2H)，7.13(d，J＝8.85Hz，2H)，7.60(d，J＝8.24Hz，2H)，7.99(dd，J＝20.29，8.09Hz，4H)，8.04-8.22(m，J＝31.74Hz，2H)。LC(Cond.2)：RT＝1.53分钟，97％均一性指数；LCMS：C37H49N4O9(M+1)+分析计算值：693.35；实测值：693.32。
根据制备实施例OL-1d所用的相同方法，自实施例OL-7e，制备实施例OL-7f。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.06-1.52(m，18H)，1.69-2.08(m，6H)，2.08-2.30(m，2H)，3.33-3.43(m，2H)，3.52(s，2H)，4.75(s，1H)，4.83(s，1H)，5.06(s，2H)，6.92-7.10(m，J＝7.63Hz，2H)，7.20-7.33(m，1H)，7.40(d，J＝7.63Hz，2H)，7.46(d，J＝8.55Hz，1H)，7.64(d，J＝7.63Hz，2H)，7.75(d，J＝7.93Hz，2H)，11.47-12.18(m，2H)。LC(Cond.1)：RT＝2.94min；LRMS：C37H47N6O3(M+H)+分析计算值：655.36；实测值：655.39。
Figure BPA00001479917700562
根据制备实施例OL-1e所用的相同方法，自实施例OL-7f，制备实施例OL-7g。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.93-2.07(m，2H)，2.13-2.26(m，2H)，2.40-2.48(m，3H)，3.31-3.52(m，5H)，4.91-5.09(m，2H)，5.21(s，2H)，7.17(d，J＝8.85Hz，2H)，7.57(d，J＝8.24Hz，2H)，7.87(d，J＝8.85Hz，2H)，7.93(d，J＝8.24Hz，2H)，8.03(d，J＝16.79Hz，2H)，9.78(s，1H)，9.95(s，1H)，10.31(s，2H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。LC(Cond.2)：RT＝0.62分钟；LCMS：C27H31N6O(M+1)+分析计算值：455.26；实测值：455.34。
实施例OL-7
根据制备实施例OL-1所用的相同方法，自实施例OL-7g，制备实施例OL-7。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.90(d，J＝2.44Hz，2H)，2.04(d，J＝3.66Hz，4H)，2.21(s，2H)，2.36(d，J＝1.83Hz，2H)，2.42-2.46(m，4H)，2.83(br.s，4H)，2.99-3.11(m，2H)，3.98(d，J＝7.02Hz，2H)，5.18(s，4H)，5.42(d，J＝8.55Hz，2H)，7.08-7.28(m，3H)，7.50-7.67(m，11H)，7.73(d，J＝7.32Hz，2H)，7.80(d，J＝7.93Hz，2H)，7.85-7.98(m，J＝10.38Hz，1H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。LC(Cond.3)：RT＝2.94min；LRMS：C47H52N8O3(M+H)+分析计算值：777.42；实测值：777.51；HRMS：C47H53N8O3(M+H)+分析计算值：777.4241；实测值：777.4265。
根据实施例OL-7所述相同的方法，通过用各自酸取代Cap-1，制备实施例OL-8的TFA盐。
Figure BPA00001479917700572
Figure BPA00001479917700581
将披钯碳(10％，300mg)加入到4，4’-(乙烯-1，2-二基)二苯甲酸二甲酯(2g，6.76mmol)的甲醇(100mL)溶液中。将混悬液用N2吹洗，置于1大气压H2(气囊)下并在环境温度下搅拌过夜。然后将混合物通过硅藻土(CELITE
Figure BPA00001479917700582
)小柱过滤，减压浓缩溶剂。回收白色固体(1.42g)，其不经进一步纯化而使用。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 2.98(s，4H)，3.90(s，6H)，7.18(d，J＝7.32Hz，4H)，7.93(d，J＝7.32Hz，4H)。LC(Cond.1)：RT＝2.65min；LRMS：C18H19O4(M+H)+分析计算值：299.13；实测值：299.21。
Figure BPA00001479917700583
根据制备实施例OL-1a所用的相同方法，自实施例OL-9a，制备实施例OL-9b。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 3.02(s，4H)，4.67(s，4H)，7.25(d，J＝8.24Hz，4H)，7.86(d，J＝8.24Hz，4H)。LC(Cond.2)：RT＝0.62min；LCMS：C18H17Cl2O2(M+1)+分析计算值：335.06；实测值：335.12。
Figure BPA00001479917700591
根据制备实施例OL-1b所用的相同方法，自实施例OL-9b，制备实施例OL-9c。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 3.03(s，4H)，4.51(s，4H)，7.43(d，J＝8.55Hz，4H)，7.92(d，J＝8.24Hz，4H)，8.50(s，6H)。LC(Cond.3)：RT＝1.90min；LRMS：C18H21N2O2(M+H)+分析计算值：297.16；实测值：297.24。
Figure BPA00001479917700592
根据制备实施例OL-1c所用的相同方法，自实施例OL-9c，制备实施例OL-9d。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 1.38-1.56(m，18H)，1.83-2.00(m，4H)，2.08-2.38(m，4H)，3.01(s，4H)，3.32-3.65(m，4H)，4.28(br.s，1H)，4.39(br.s，1H)，4.63-4.71(m，2H)，4.72-4.84(m，J＝4.58Hz，2H)，7.01(s，1H)，7.18-7.33(m，4H)，7.47(s，1H)，7.87(d，J＝7.93Hz，4H)。LC(Cond.1)：RT＝2.56min；LRMS：C38H51N4O8(M+H)+分析计算值：691.37；实测值：691.48。
Figure BPA00001479917700593
根据制备实施例OL-1d所用的相同方法，自实施例OL-9d，制备实施例OL-9e。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.15/1.39(旋转异构体，s，18H)，1.75-1.92(m，3H)，1.96(s，3H)，2.09-2.27(m，J＝32.04Hz，2H)，2.81-2.90(m，4H)，3.31-3.40(m，2H)，3.52(s，2H)，4.66-4.88(m，J＝35.40Hz，2H)，7.14(d，J＝7.02Hz，4H)，7.21(s，1H)，7.31-7.41(m，1H)，7.51(d，J＝6.41Hz，1H)，7.61(d，J＝7.93Hz，3H)，11.62-12.08(m，2H)。LC(Cond.1)：RT＝2.20min；LRMS：C38H49N6O4(M+H)+分析计算值：653.38；实测值：653.47。
根据制备实施例OL-1e所用的相同方法，自实施例OL-9e，制备实施例OL-9f。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.92-2.05(m，2H)，2.11-2.25(m，2H)，2.40-2.47(m，4H)，2.89-3.03(m，4H)，3.32-3.39(m，2H)，3.40-3.49(m，2H)，5.02(t，J＝7.78Hz，2H)，7.32(d，J＝8.24Hz，4H)，7.80(d，J＝8.24Hz，4H)，9.91(s，2H)，10.32(s，2H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。LC(Cond.5)：RT＝2.52min；LRMS：C28H33N6(M+H)+分析计算值：453.28；实测值：453.31。
实施例OL-9
根据制备实施例OL-1所用的相同方法，自实施例OL-9f，制备实施例OL-9。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.82-1.95(m，2H)，1.97-2.10(m，4H)，2.15-2.27(m，J＝4.58Hz，2H)，2.28-2.45(m，4H)，2.72-2.88(m，4H)，2.94(s，5H)，2.98-3.07(m，2H)，3.97(t，J＝9.77Hz，2H)，5.17(d，J＝6.10Hz，2H)，5.41(s，2H)，7.12(s，1H)，7.38(d，J＝7.32Hz，4H)，7.51-7.62(m，9H)，7.69(d，J＝7.93Hz，4H)，7.93(s，2H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。LC(Cond.5)：RT＝2.87min；LRMS：C48H55N8O2(M+H)+分析计算值：775.44；实测值：775.51；HRMS：C48H55N8O2(M+H)+分析计算值：775.4448；实测值：775.4454。
Figure BPA00001479917700611
根据对实施例OL-9所述相同的方法，通过用各自的酸取代Cap-1，制备实施例OL-10至OL-13的TFA盐。
Figure BPA00001479917700612
Figure BPA00001479917700621
将三乙基硅烷(5.84mL，36.55mmol)滴加入4-甲酰基苯甲酸甲酯(5g，30.46mmol)和三溴化铋(0.273g，0.61mmol)的乙腈(75mL)溶液中，将该不透明溶液在环境温度下搅拌15min。减压除去挥发物，将剩余的残留物溶于乙酸乙酯中。然后将有机层用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。随后将回收的固体进行快速层析(硅胶；10-20％乙酸乙酯/己烷)，得到OL-14a(3.05g)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 3.84(s，6H)，4.65(s，4H)，7.51(d，J＝8.24Hz，4H)，7.95(d，J＝8.24Hz，4H)。LC(Cond.2)：RT＝1.68min；LCMS：C18H19O5(M+H)+分析计算值：315.12；实测值：315.26。
Figure BPA00001479917700622
根据制备实施例OL-1a所用的相同方法，自实施例OL-14a，制备实施例OL-14b。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 4.67(s，4H)，5.19(s，4H)，7.55(d，J＝8.24Hz，4H)，7.98(d，J＝8.24Hz，4H)。LC(Cond.5)：RT＝3.85min；LRMS：C18H17Cl2O3(M+H)+分析计算值：351.05；实测值：351.06。
Figure BPA00001479917700631
根据制备实施例OL-1b所用的相同方法，自实施例OL-14b，制备实施例OL-14c。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 4.55(s，4H)，4.69(s，4H)，7.57(d，J＝8.24Hz，4H)，8.02(d，J＝8.55Hz，4H)，8.53(s，6H)。LC(Cond.1)：RT＝1.29min；LRMS：C18H21N2O3(M+H)+分析计算值：313.15；实测值：313.21。
Figure BPA00001479917700632
根据制备实施例OL-1c所用的相同方法，自实施例OL-14c，制备实施例OL-14d。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.34/1.40(旋转异构体，s，18H)，1.70-1.92(m，6H)，1.99-2.20(m，2H)，3.24-3.33(m，2H)，3.35-3.44(m，2H)，4.11-4.25(m，2H)，4.50-4.65(m，4H)，4.66(s，4H)，7.53(d，J＝8.24Hz，4H)，7.99(d，J＝7.93Hz，4H)，8.09-8.23(m，2H)。LC(Cond.1)：RT＝2.49min；LRMS：C38H51N4O9(M+H)+分析计算值：707.36；实测值：707.50。
Figure BPA00001479917700633
根据制备实施例OL-1d所用的相同方法，自实施例OL-14d，制备实施例OL-14e。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.14/1.39(旋转异构体，s，18H)，1.76-2.06(m，6H)，2.08-2.30(m，2H)，3.31-3.41(m，2H)，3.52(s，2H)，4.49(s，4H)，4.70-4.78(m，1H)，4.79-4.90(m，1H)，7.29/7.35(旋转异构体，d，J＝7.93Hz，4H)，7.40-7.54(m，2H)，7.71/761(旋转异构体，d，J＝7.93Hz，4H)，11.72-12.19(m，2H)。LC(Cond.1)：RT＝2.14min；LRMS：C38H49N6O5(M+H)+分析计算值：669.38；实测值：669.53.
Figure BPA00001479917700641
根据制备实施例OL-1e所用的相同方法，自实施例OL-14e，制备实施例OL-14f。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.94-2.06(m，2H)，2.11-2.25(m，2H)，2.38-2.48(m，4H)，3.32-3.50(m，4H)，4.60(s，4H)，4.92-5.06(m，2H)，7.48(d，J＝7.93Hz，4H)，7.89(d，J＝7.93Hz，4H)，8.04(s，2H)，9.78(s，2H)，10.28(s，2H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。LC(Cond.1)：RT＝1.69min；LRMS：C28H33N6O(M+H)+分析计算值：469.27；实测值：469.34.
实施例OL-14
根据制备实施例OL-1所用的相同方法，自实施例OL-14f，制备实施例OL-14。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.82-2.11(m，6H)，2.18(d，J＝6.10Hz，2H)，2.31-2.47(m，4H)，2.98-3.10(m，2H)，3.92-4.07(m，2H)，4.59(s，4H)，5.10-5.22(m，2H)，5.42(s，2H)，7.07-7.13(m，2H)，7.40-7.51(m，4H)，7.54-7.67(m，10H)，7.75(d，J＝7.32Hz，4H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。该cap的Me基团的信号落在溶剂峰之下。LC(Cond.4)：RT＝1.83min；LRMS：C48H55N8O3(M+H)+分析计算值：791.44；实测值：791.60。HRMS：C48H55N8O3(M+H)+分析计算值：791.4397；实测值：791.4406。
Figure BPA00001479917700651
根据实施例OL-14所述相同的方法，通过用各自的酸取代Cap-1，制备实施例OL-15至OL-19的TFA盐。
Figure BPA00001479917700652
Figure BPA00001479917700661
Figure BPA00001479917700662
将氰化钠(0.76g，18.95mmol，60％wt)慢慢加入到4-(羟甲基)苯甲酸甲酯(3g，18.05mmol)的二甲基甲酰胺(25mL)溶液中。将得到的深蓝色溶液室温下搅拌15min，然后一次性加入3-(溴甲基)苯甲酸甲酯(3.76g，16.41mmol)。将得到的黄色溶液环境温度下搅拌1h，然后减压除去挥发物。将残留物溶于乙酸乙酯中，用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。残留物经快速层析纯化(硅胶；20％乙酸乙酯/己烷)得到实施例OL-20a，为澄清油状物，其放置后固化(2.49g)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm 3.91(d，J＝1.83Hz，6H)，4.61(d，J＝2.56Hz，4H)，7.39-7.49(m，3H)，7.54-7.61(m，1H)，7.93-8.00(m，1H)，7.99-8.07(m，3H)。LC(Cond.1)：RT＝2.56min；LRMS：C18H19O5(M+H)+分析计算值：315.12；实测值：315.22。
Figure BPA00001479917700671
根据制备实施例OL-1a所用的相同方法，自实施例OL-20a，制备实施例OL-20b。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 4.65(d，J＝4.58Hz，4H)，4.69(d，J＝3.36Hz，4H)，7.47-7.54(m，J＝7.63，7.63Hz，3H)，7.62(d，J＝7.63Hz，1H)，7.89(d，J＝7.93Hz，1H)，7.93-8.00(m，3H).LC(Cond.1)：RT＝2.34min；LRMS：C18H17Cl2O3(M+H)+分析计算值：351.05；实测值：351.12。
Figure BPA00001479917700672
根据制备实施例OL-1b所用的相同方法，自实施例OL-20b，制备实施例OL-20c。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 4.57(d，J＝2.93Hz，4H)，4.68(d，J＝5.85Hz，4H)，7.52-7.67(m，J＝8.60，8.60Hz，3H)，7.73(d，J＝7.68Hz，1H)，7.90-8.10(m，4H)，8.53(s，6H)。LC(Cond.1)：RT＝1.32min；LRMS：C18H21N2O3(M+H)+分析计算值：313.15；实测值：313.24。
Figure BPA00001479917700673
根据制备实施例OL-1c所用的相同方法，自实施例OL-20c，制备实施例OL-20d。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.39/1.34(旋转异构体，s，18H)，1.69-1.95(m，6H)，2.00-2.18(m，J＝23.80Hz，2H)，3.23-3.33(m，2H)，3.34-3.43(m，2H)，4.11-4.23(m，2H)，4.50-4.63(m，4H)，4.65(d，J＝6.71Hz，4H)，7.48-7.56(m，3H)，7.66(d，J＝7.63Hz，1H)，7.89-8.02(m，4H)，8.06-8.25(m，2H)。LC(Cond.1)：RT＝2.53min；LRMS：C38H51N4O9(M+H)+分析计算值：707.36；实测值：707.44。
Figure BPA00001479917700681
根据制备实施例OL-1d所用的相同方法，自实施例OL-20d，制备实施例OL-20e。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.14/1.39(旋转异构体，s，18H)，1.76-2.07(m，6H)，2.08-2.29(m，2H)，3.31-3.40(m，2H)，3.52(br.s，2H)，4.44-4.59(m，J＝8.55Hz，4H)，4.75(br.s，1H)，4.83(br.s，1H)，7.08-7.23(m，2H)，7.30(d，J＝7.63Hz，2H)，7.34-7.50(m，2H)，7.53-7.67(m，1H)，7.68-7.79(m，3H)，11.70-12.22(m，2H)。LC(Cond.1)；RT＝2.19min；LRMS：C38H48N6O5(M+H)+分析计算值：669.39；实测值：669.40。
Figure BPA00001479917700682
根据制备实施例OL-1e所用的相同方法，自实施例OL-20e，制备实施例OL-20f。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 1.94-2.08(m，2H)，2.12-2.24(m，2H)，2.39-2.48(m，J＝5.19Hz，4H)，3.27-3.49(m，4H)，4.61(d，J＝4.88Hz，4H)，4.94-5.09(m，J＝7.93Hz，2H)，7.38(d，J＝7.32Hz，1H)，7.45-7.53(m，3H)，7.83(d，J＝7.63Hz，1H)，7.90(d，J＝7.02Hz，3H)，8.07(s，2H)，9.86(br.s，2H)，10.33(br.s，2H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。LC(Cond.1)：RT＝1.75min；LRMS：C28H32N6O(M+H)+分析计算值：469.27；实测值：469.23。
实施例OL-20
根据制备实施例OL-1所用的相同方法，自实施例OL-20f，制备实施例OL-20。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.84-1.95(m，J＝5.19Hz，2H)，1.95-2.09(m，J＝8.24Hz，4H)，2.15-2.28(m，2H)，3.02(q，J＝7.73Hz，2H)，3.93-4.05(m，2H)，4.61(br.s，4H)，5.12-5.22(m，2H)，5.42(br.s，2H)，7.12(br.s，1H)，7.39(s，1H)，7.45-7.51(m，J＝7.32Hz，3H)，7.53-7.64(m，9H)，7.66-7.82(m，4H)，7.96(s，2H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。该cap的Me基团的信号落在溶剂峰之下。LC(Cond.4)：RT＝1.93min；LRMS：C48H55N8O3(M+H)+分析计算值：791.44；实测值：791.57.HRMS：C48H55N8O3(M+H)+分析计算值：791.4397；实测值：791.4373.
Figure BPA00001479917700691
根据对实施例OL-20所述相同的方法，通过用各自的酸取代Cap-1，制备实施例OL-21至OL-25的TFA盐。
Figure BPA00001479917700701
Figure BPA00001479917700711
用15分钟，将N，N-二异丙基乙胺(18mL，103.3mmol)滴加到N-Boc-L-脯氨酸(7.14g，33.17mmol)、HATU(13.32g，35.04mmol)、2-氨基-1-(4-溴苯基)乙酮HCl盐(8.13g，32.44mmol)和DMF(105mL)的非均相混合液中，在环境条件下搅拌55min。真空除去大部分挥发性成分，将得到的残留物在乙酸乙酯(300mL)和水(200mL)之间分配。将有机层用水(200mL)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。用残留物制备硅胶筛目进行快速层析(硅胶；50-60％乙酸乙酯/己烷)，得到白色固体的D-1a(12.8g)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm1.40/1.34(2个app br s，9H)，1.90-1.70(m，3H)，2.18-2.20(m，1H)，3.30-3.23(m，1H)，3.43-3.35(m，1H)，4.22-4.12(m，1H)，4.53(dd，J＝18.1，5.6，1H)，4.61(dd，J＝18.3，5.7，1H)，7.75(br d，J＝8.6，2H)，7.92(br d，J＝8.0，2H)，8.25-8.14(m，1H)。LC(Cond.7)：RT＝1.70min；LRMS：(M+Na)+C18H23BrN2NaO4分析计算值：433.07；实测值：433.09。
Figure BPA00001479917700712
在一密封管中，将D-1a(12.8g，31.12mmol)和NH4OAc(12.0g，155.7mmol)在二甲苯(155mL)中的混合物在140℃下加热2小时。真空除去挥发性成分，将残留物小心地在乙酸乙酯和水之间分配，加入足量饱和NaHCO3溶液使得该双相系统在振摇后的水相的pH稍显碱性。分离各层，将水层用另外的乙酸乙酯提取。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将得到的物质用乙酸乙酯/己烷重结晶，得到两批产物咪唑D-1b，为浅黄色、稠密固体，重5.85g。真空浓缩母液，进行快速层析(硅胶；30％乙酸乙酯/己烷)，得到另外的2.23g的实施例D-1b。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm1.40/1.15(app br s，9H)，2.30-1.75(m，4H)，3.36(m，1H)，3.52(app br s，1H)，4.86-4.70(m，1H)，7.72-7.46/7.28(m，5H)，12.17/11.92/11.86(m，1H).LC(Cond.7)：RT＝1.71min；LRMS：[M+H]+C18H23BrN3O2分析计算值：392.10；实测值：391.96；HRMS：[M+H]+ C18H23BrN3O2分析计算值：392.0974；实测值：392.0959。
实施例D-1b的两个样品的光学纯度根据以下所示的手性HPLC条件确定(ee＞99％合并的各批；ee＝96.7％快速层析的样品)：
色谱柱：Chiralpak AD，10um，4.6x 50mm
溶剂：2％乙醇/庚烷(等度)
流速：1mL/min
波长：220或者254nm
相对保留时间：2.83min(R)，5.34min(S)。
Figure BPA00001479917700721
将Pd(Ph3P)4(469mg，0.41mmol)加入到装有D-1b(4.01g，10.22mmol)、二硼酸二频哪醇酯(5.42g，21.35mmol)、乙酸钾(2.57g，26.21mmol)和1，4-二氧六环(80mL)混合液的压力管中。向压力管通入氮气，封盖，在80℃油浴中加热16.5h。将反应混合物过滤，真空浓缩滤液。将粗品残留物小心地在CH2Cl2(150mL)和水性介质(50mL水和10mL饱和NaHCO3溶液)之间分配。将水层用CH2Cl2提取，将合并的有机相干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。得到的残留物经快速层析纯化(用洗脱溶剂装载样品；20-35％乙酸乙酯/CH2Cl2)，得到实施例D-1c，污染有频哪醇，为灰白色密集固体；实施例D-1c与频哪醇的相对摩尔比约为10∶1(1H NMR)。暴露于高真空约2.5日后，样品重3.925g。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.45-1.10(m，21H)，2.27-1.77(m，4H)，3.36(m，1H)，3.52(app br s，1H)，4.86-4.70(m，1H)，7.79-7.50/7.34-7.27(m，5H)，12.22/11.94/11.87(m，1H)。LC(Cond.7)：RT＝1.64min；LRMS：[M+H]+ C24H35BN3O4分析计算值：440.27；实测值：440.23。
将四三苯膦钯(17.5mg，0.015mmol)一次性加入到搅拌的D-1c(320mg，0.85mmol)、1，4-二碘苯(100mg，0.30mmol)和碳酸氢钠(180mg，2.18mmol)在二甲氧基乙烷(2.4mL)和水(7mL)中的混悬液中，在90℃下加热2h。将反应物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将滤液溶于甲醇中，通过尼龙注射滤器过滤，然后经制备型HPLC纯化，得到D-1d，为白色固体(101.1mg，20％收率)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.17(br s，9H)，1.41(br s，9H)，1.80-2.06(m，4H)，2.13-2.32(m，4H)，3.35-3.43(m，2H)，3.56(br.s.，2H)，4.80(br s，2H)，7.54(d，J＝10.07Hz，2H)，7.73(d，J＝7.63Hz，4H)，7.79(s，4H)，7.83(d，J＝8.24Hz，4H)。LC(Cond.6)：RT＝2.55min；HRMS：(M+H)+C42H49N6O4分析计算值：701.3815；实测值：701.3790。
Figure BPA00001479917700741
根据制备OL-1e所用相同的方法，但用甲醇(1mL)代替二氯甲烷，自D-1d制备D-1e。得到为棕褐色固体的D-1e，为盐酸盐(101.5mg，96％收率)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.93-2.30(m，9H)，2.32-2.44(m，3H)，4.69-4.86(m，2H)，7.68-7.87(m，12H)，7.90(d，J＝8.24Hz，2H)，9.48-9.75(m，2H).LC(Cond.6)：RT＝1.99min；HRMS：(M+H)+C32H33N6分析计算值：501.2767；实测值：501.2753。
实施例D-1
根据制备实施例OL-1所用相同的方法，自D-1e制备实施例D-1(TFA盐)。给出实施例D-1，为棕褐色固体(37.8mg，54％收率)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 2.05(d，J＝8.55Hz，8H)，3.49-3.57(m，10H)，3.94(br s，2H)，5.52(d，J＝7.63Hz，2H)，7.31-7.47(m，10H)，7.72(d，J＝7.02Hz，2H)，7.87-8.01(m，12H).LC(Cond.6)：RT＝2.41min；HRMS：(M+H)+C52H51N8O6分析计算值：883.3932；实测值：883.3947。
Figure BPA00001479917700751
根据制备实施例OL-1所用相同的方法，自吡咯烷D-1e制备实施例D-2(TFA盐)。给出实施例D-2，为浅黄色固体(15.4mg，38％收率)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 2.50-1.70(m，14H)，2.98-2.62(m，6H)，4.05-2.98(m，4H)，5.79-5.12(m，4H)，8.20-7.10(m，24H)，10.25(br s，2H)。注意：咪唑NH的信号太宽而无法确定化学位移。LC(Cond.6)：RT＝2.08min；HRMS：(M+H)+C52H55N8O2分析计算值：823.4448；实测值：823.4467。
将溴化物(683μL，13.33mmol)的乙酸(7mL)溶液滴加到冷却的(10℃)6-溴-3，4-二氢化萘-1(2H)-酮(购自J & W PharmLab，LLC)(3.00g，13.33mmol)和48％溴化氢(20μL，13.33mmol)的乙酸(120mL)溶液中。加入完成后，将混合物温热至室温并在室温下搅拌1h，然后用二氯甲烷稀释，用水(3x)、饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。分离得到D-3a(4.19g，97％收率)，为无色油状物，真空放置下固化为白色固体。该物质不经进一步纯化而使用。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 7.85(1H，d，J＝8.5Hz)，7.71(1H，s)，7.62(1H，dd，J＝8.5，1.8Hz)，5.06(1H，dd，J＝6.1，3.7Hz)，2.93-3.15(2H，m)，2.55-2.64(1H，m)，2.32-2.42(1H，m).RT＝2.67min(Cond.6)；LC/MS：[M+H]+C10H9 79Br2O分析计算值：304.90；实测值：304.91。
实施例D-3b1和D-3b2(步骤b)
根据制备实施例M3，步骤g所用相同的方法，自D-3a和适当的Boc-保护的脯氨酸，制备D-3b1和D-3b2。
Figure BPA00001479917700761
实施例D-3c1和D-3c2(步骤c)
根据制备实施例M3，步骤h所用相同的方法，分别用D-3b1和D-3b2，制备D-3c1和D-3c2。
Figure BPA00001479917700762
Figure BPA00001479917700772
室温下，将乙炔基三甲基硅烷(0.59mL，4.25mmol)加入到在微波容器内的D-1b(1.5g，3.82mmol)、三苯膦(0.20g，0.77mmol)、二乙胺(4.25mL，40.70mmol)、碘化亚铜(I)(40mg，0.21mmol)和反式-二氯(双-三苯膦)钯(II)(149mg，0.21mmol)的无水DMF(1.4mL)溶液中。将容器封盖，在120℃下辐射25min。前后进行两份等同的1.5g反应。将反应混合物用乙醚和乙酸乙酯稀释，合并，与0.1N HCl一起振摇。放置20min后，将混悬液抽吸过滤，将滤饼用乙醚和乙酸乙酯洗涤。然后分离有机相，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩。分离粗产物(4.2g)，为棕红色泡沫状物，将其溶于二氯甲烷中，直接加入到Thompson110g硅胶柱上。将残留物用20％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液至100％乙酸乙酯梯度洗脱，直接蒸发洗脱液后，得到为黄色固体的D-3d1(2.8g，40％收率)。RT＝2.37min(Cond.3)；LC/MS：C23H32N3O2Si[M+H]+分析计算值：410.23；实测值410.12。
D-3d2至D-3d4根据对D-3d1所述的方法制备。
Figure BPA00001479917700781
Figure BPA00001479917700782
室温下，将碳酸钾(91mg，0.66mmol)一次性加入到搅拌的D-3d1(2.7g，6.6mmol)的MeOH(60mL)溶液中。将混合物搅拌1h，然后真空浓缩。将残留物溶于二氯甲烷中，直接加入到130g Thompson硅胶柱上。将残留物用15％乙酸乙酯的己烷溶液至100％乙酸乙酯梯度洗脱，蒸发洗脱液后，得到为黄色泡沫状物的D-3e1(2.04g，87％收率)。然后将少量产物(约20mg)进行制备型HPLC纯化，得到为灰白色固体的较纯样品D-3e1。1H NMR(500MHz，MeOD，咪唑N-H消失)δppm 7.68(2H，d，J＝7.9Hz)，7.46(2H，d，J＝8.2Hz)，7.34-7.40(1H，m)，4.89(1H，m)，3.64-3.73(1H，m)，3.49(1H，m)，3.49(1H，s)，3.31-3.34(1H，m)，2.25-2.44(1H，m)，1.99-2.11(3H，m)，1.25和1.47(9H，2s)。RT＝1.63min(Cond.3)，LC/MS：C20H24N3O2(M+H)+分析计算值：338.19；实测值：338.12。
D-3e2至D-3e5根据对炔D-3e1所述的方法制备。
Figure BPA00001479917700791
室温下，将四(三苯膦)钯(83mg，0.072mmol)一次性加入到装于厚壁、螺旋盖的小瓶内的搅拌的、氩气脱气的实施例D-3c1(300mg，0.717mmol)、D-3e1(315mg，0.932mmol)、三乙胺(0.40mL，2.87mmol)和碘化亚铜(I)(13.7mg，0.072mmol)的无水DMF(6mL)混合物中。将混合物室温下搅拌16h和在40℃下16h，然后加入另外的CuI(10mg)、TEA(0.4mL)和Pd(PPh3)4催化剂(40mg)，因为经LCMS判断32h后该反应未完成。将混合物再在60℃下搅拌10h，然后冷却至室温，用乙酸乙酯、THF和水稀释，抽吸过滤。分离滤液中的有机相，用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，然后经无水硫酸钠干燥并蒸发。将残留物溶于二氯甲烷中，直接加入到Thompson 80g硅胶柱上。将残留物用30％乙酸乙酯的己烷溶液至100％乙酸乙酯，接着0％甲醇的乙酸乙酯溶液至20％甲醇的乙酸乙酯溶液梯度洗脱，蒸发洗脱液后，得到为金棕色泡沫状物的D-3f1(366.7mg，68％收率)。然后将少量产物(约20mg)进行制备型HPLC纯化，得到实施例D-3f1较纯的样品。1H NMR(500MHz，MeOD，咪唑N-H消失)δppm 7.73(2H，d，J＝8.2Hz)，7.47-7.57(4H，m)，7.41(2H，br s)，4.96-5.09(1H，m)，4.89-4.96(1H，m)，3.69(2H，br s)，3.54(2H，br s)，3.04-3.13(2H，m)，2.83-2.94(2H，m)，2.30-2.50(2H，m)，1.94-2.17(6H，m)，1.27-1.49(18H，2s).RT＝2.06min(Cond.3)；LC/MS：C40H47N6O4(M+H)+分析计算值：675.37；实测值：675.26。
根据对于D-3f1所述的方法，制备D-3f2至D-3f4。
Figure BPA00001479917700811
将活性二氧化锰(2.0g，23.12mmol)一次性加入到搅拌的D-3f1(260mg，0.39mmol)的无水二氯甲烷(5mL)溶液中。将混悬液室温下搅拌6h，然后再加入活性二氧化锰(1.0g)。将混悬液在室温下再搅拌14h，然后通过硅藻土垫用MeOH抽吸过滤，将硅藻土垫再用额外的MeOH洗涤数次。然后真空浓缩滤液，得到D-3g1(225.1mg，82％收率)，为黄色固体。将少量产物(约20mg)进行制备型HPLC纯化，得到D-3g1较纯的样品，为浅黄棕色固体。1H NMR(500MHz，MeOD，咪唑N-H消失)δppm 8.43(1H，d，J＝8.5Hz)，8.19(1H，br s)，7.68-7.78(5H，m)，7.62(2H，d，J＝8.2Hz)，7.54(1H，s)，4.90-5.27(2H，m)，3.76-3.85(1H，m)，3.66-3.74(1H，m)，3.51-3.66(2H，m)，2.35-2.60(2H，m)，1.94-2.21(6H，m)，1.49(6H，br s)，1.27(6H，br s)，1.14(6H，br s).RT＝2.12min(Cond.3)；LC/MS：C40H45N6O4(M+H)+分析计算值：673.35；实测值：673.30。
根据对D-3g1所述的方法制备D-3g2。
Figure BPA00001479917700822
根据制备OL-1e所用相同的方法，但用甲醇(1mL)代替二氯甲烷，分别自D-3f1、D-3g1、D-3f2、D-3f3、D-3g2和D-3f4，制备D-3h1至D-3h6。真空浓缩溶剂后，得到D-3h1至D-3h6的盐酸盐(或者TFA盐，当用制备型HPLC进一步纯化时)。
Figure BPA00001479917700823
Figure BPA00001479917700832
根据制备实施例OL-1所用相同的方法，自D-3h1至D-3h6和适当的酸，制备实施例D-3至D-11。HPLC纯化后得到实施例D-3至D-11的TFA盐。
Figure BPA00001479917700841
Figure BPA00001479917700851
Figure BPA00001479917700862
将Pd(Ph3P)4(0.078g，0.067mmol)加入到一压力管中的(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(D-1b)(0.675g，1.721mmol)和1，2-双(三甲基甲锡烷基)乙炔(0.3134g，0.891mmol)的DMF(5mL)溶液中，将混合物用氮气吹洗1min，然后在90℃下加热15h。真空除去挥发性成分，将残留物直接进行BIOTAGE
Figure BPA00001479917700863
纯化(110g；EtOAc)，得到炔烃M1a，为黄橙色泡沫状物，带有未鉴定的杂质和残留溶剂(430mg)。1H NMR(DMSO，δ＝2.50ppm，400MHz)：12.23/11.98/11.91(三个br s，2H)，7.80-7.35(m，10H)，4.84-4.76(m，2H)，3.54(m，2H)，3.39-3.33(m，2H)，2.28-1.78(m，8H)，1.40(br s，7.54H)，1.16(br s，10.46H).LC/MS：[M+H]+ C38H45N6O4分析计算值：649.35；实测值：649.27。
将HCl/二氧六环(4N；8mL，32.0mmol)、CH2Cl2(1mL)和MeOH(1.0mL)加入到双-氨基甲酸酯M1a(0.427g，0.658mmol)中，将该非均相混合物搅拌5hr。真空除去挥发性成分，将残留物暴露于高真空下得到M1b(.4HCl)，为灰白色固体(452mg)，其可原样直接进行下一步骤反应。1H NMR分析表明该样品中可包含残留的二氧六环(～1molequiv)。1H NMR(DMSO，δ＝2.50ppm，400MHz)：10.29(br s，2H)，9.73(br s，2H)，8.11(s，2H)，7.96(d，J＝8.3，4H)，7.67(d，J＝8.6，4H)，4.97(br m，2H)，3.47-3.31(m，4H)，2.50-2.36(‘m’部分被溶剂信号遮蔽，4H)，2.23-2.14(m，2H)，2.07-1.95(m，2H).LC/MS：[M+H]+C28H29N6分析计算值：449.25；实测值：449.23。
实施例M1
将HATU(0.069g，0.181mmol)加入到吡咯烷M1b/4HCl(70.5mg，0.103mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(36.3mg，0.207mmol)和DIEA(0.1mL，0.573mmol)的DMF溶液中，在室温下搅拌70min。真空除去挥发性成分，将残留物溶解于MeOH中，进行反相HPLC纯化(MeOH/水/TFA)，得到实施例M1的TFA盐，为灰白色泡沫状物(68.9mg)。LC(Cond.9和10)：＞95％均一性指数；LC/MS(Cond.3)：Rt＝1.78min.1H NMR(DMSO，δ＝2.50ppm，400MHz)：8.10(br s，2H)，7.88-7.83(m，4H)，7.71(d，J＝8.3，3.91H)，7.34(d，J＝8.5，2H；NHCO2)，6.92(app br s，0.09H)，5.52(br m，0.17H)，5.12(app t，1.93H)，4.11(app t，2H)，3.89-3.77(m，4H)，3.54(s，5.52H)，3.33(s，0.48H)，2.41-2.33(m，2H)，2.21-1.93(m，8H)，0.89(app t，0.91H)，0.83/0.79(两个重叠d，J＝6.8/6.8，11.09H)。LC/MS：[M+H]+ C42H51N8O6分析计算值：763.39；实测值：763.33。
实施例M2至M2.1
根据对制备实施例M1所述的方法，但按下表中注释进行修改的纯化方案，自吡咯烷M1b和适当的酸，制备实施例M2至M2.1的TFA盐。
Figure BPA00001479917700881
Figure BPA00001479917700882
Figure BPA00001479917700891
向(S)-5-(羟甲基)吡咯烷-2-酮(10g，87mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中加入叔丁基氯二苯基硅烷(25.6g，93mmol)、Et3N(12.1mL，87mmol)和DMAP(1.06g，8.7mmol)。将混合物室温下搅拌直至原料吡咯烷酮消耗完全，然后用CH2Cl2(50mL)稀释，用水(50mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤并真空蒸发，粗产物经快速层析纯化(硅胶；30-100％EtOAc/己烷)，得到醚M3a，为无色油状物(22.7g，74％收率)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)7.69(br s，1H)，7.64-7.61(m，4H)，7.50-7.42(m，6H)，3.67-3.62(m，1H)，3.58-3.51(m，2H)，2.24-2.04(m，3H)，1.87-1.81(m，1H)，1.00(s，9H)。LC/MS(M+H)+＝354.58。
用10min，将固体的二碳酸二叔丁基酯(38.5g，177mmol)分次加入到甲硅烷基醚M3a(31.2g，88.3mmol)、Et3N(8.93g，88mmol)和DMAP(1.08g，8.83mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液中，在24℃下搅拌18h。真空除去大部分挥发性成分，将粗产物溶于20％EtOAc/己烷中，加入到装有1.3L硅胶的2L漏斗中，然后用3L 20％EtOAc/己烷和2L 50％EtOAc洗脱。用旋转蒸发仪浓缩所要求的流分，过滤形成的固体的白色浆状液，用己烷洗涤，真空干燥得到氨基甲酸酯M3b，为白色固体(32.65g，82％收率)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)7.61-7.59(m，2H)，7.56-7.54(m，2H)，7.50-7.38(m，6H)，4.18(m，1H)，3.90(dd，J＝10.4，3.6，1H)，3.68(dd，J＝10.4，2.1，1H)，2.68-2.58(m，1H)，2.40-2.33(m，1H)，2.22-2.12(m，1H)，2.01-1.96(m，1H)，1.35(s，9H)，0.97(s，9H)。LC/MS(M-Boc+H)+＝354.58。
向装有温度计和氮气入口的三颈烧瓶中，加入氨基甲酸酯M3b(10.05g，22.16mmol)和甲苯(36mL)，用-55°冷却浴降温。当混合物内温达到-50℃，用30min滴加入三乙基硼氢化锂(23mL of1.0M/THF，23.00mmol)，将混合物搅拌35min，同时保持内温在-50℃和-45℃之间。用10min滴加入Hunig’s碱(16.5mL，94mmol)。然后，一次加入DMAP(34mg，0.278mmol)，接着用15min加入三氟乙酸酐(3.6mL，25.5mmol)，同时保持内温在-50℃和-45℃之间。10min后移去外浴，将反应混合物搅拌14h，同时使温度上升至室温。用甲苯(15mL)稀释，用冰-水浴冷却，用5分钟用水(55mL)慢慢处理。分离各项，将有机层用水(50mL，2x)洗涤，真空浓缩。粗产物经快速层析纯化(硅胶；5％EtOAc/己烷)，得到二氢吡咯M3c，为无色粘稠油状物(7.947g，82％收率)。LC/MS(Cond.7)：Rt＝2.41min.1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)7.62-7.58(m，4H)，7.49-7.40(m，6H)，6.47(br s，1H)，5.07/5.01(overlapping br d，1H)，4.18(br s，1H)，3.89(br s，0.49H)，3.69(br s，1.51H)，2.90-2.58(br m，2H)，1.40/1.26(重叠br s，9H)，0.98(s，9H).LC/MS：[M+Na]+＝460.19。
用15min，将二乙基锌(19mL，约1.1M甲苯溶液，20.9mmol)滴加到冷却的(-30℃)二氢吡咯M3c(3.94g，9.0mmol)的甲苯(27mL)溶液中。用10min滴加入氯碘甲烷(用铜稳定；3.0mL，41.2mmol)，保持浴温在-25℃下搅拌1h，然后在-25℃和-21℃之间搅拌18.5h。将反应混合物对空气开放，通过慢慢加入50％饱和NaHCO3溶液(40mL)猝灭反应物，然后从冷却浴中移出，在环境温度下搅拌20min。通过滤纸过滤，将白色滤饼用50mL甲苯洗涤。分离滤液的有机相，用水(40mL，2x)洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩。粗产物采用BIOTAGE
Figure BPA00001479917700911
系统纯化(350g硅胶；样品用7％EtOAc/己烷装载；用7-20％EtOAc/己烷洗脱)，得到亚甲基吡咯烷(methano pyrrolidines)M3d-1和M3d-2的混合物，为无色粘稠油状物(3.69g，90.7％)。[注意：该阶段未测定准确的顺式/反式-异构体比率]。LC/MS(Cond.7)：Rt＝2.39min1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)7.62-7.60(m，4H)，7.49-7.40(m，6H)，3.77/3.67(重叠br s，3H)，3.11-3.07(m，1H)，2.23(appbr s，1H)，2.05-2.00(m，1H)，1.56-1.50(m，1H)，1.33(非常宽s，9H)，1.00(s，9H)，0.80(m，1H)，0.30(m，1H)。LC/MS：[M+Na]+＝474.14。
Figure BPA00001479917700912
用5min，将TBAF(7.27mL，1.0M THF溶液，7.27mmol)滴加到甲硅烷基醚M3d-1/-2(3.13g，6.93mmol)的THF(30mL)溶液中，将混合物室温下搅拌4.75h。加入饱和NH4Cl溶液(5mL)，然后真空除去大部分挥发性成分，将残留物在CH2Cl2(70mL)和50％饱和NH4Cl溶液(30mL)之间分配。将水相用CH2Cl2(30mL)提取，将合并的有机相干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩，然后暴露于高真空下过夜。粗产物采用BIOTAGE
Figure BPA00001479917700913
纯化(硅胶；40-50％EtOAc/己烷)，得到醇M3e-1和M3e-2的混合物，污染有痕迹量的较低Rf斑点，为无色油状物(1.39g，～94％收率)。[注意：该阶段未测定准确的顺式/反式-异构体比率]。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)4.70(t，J＝5.7，1H)，3.62-3.56(m，1H)，3.49-3.44(m，1H)，3.33-3.27(m，1H)，3.08-3.04(m，1H)，2.07(br m，1H)，1.93-1.87(m，1H)，1.51-1.44(m，1H)，1.40(s，9H)，0.76-0.71(m，1H)，0.26(m，1H).LC/MS(M+Na)+＝236.20。
Figure BPA00001479917700921
将NaIO4(6.46g，30.2mmol)在H2O(31mL)中的半溶液加入到醇M3e-1/-2(2.15g，10.08mmol)的CH3CN(20mL)和CCl4(20mL)溶液中。立即加入RuCl3(0.044g，0.212mmol)，将该非均相反应混合物剧烈搅拌75min。将反应混合物用H2O(60mL)稀释，用CH2Cl2(50mL，3x)提取。将合并的有机相用1mL MeOH处理，放置约5min，然后通过硅藻土层(CELITE
Figure BPA00001479917700922
)过滤。将CELITE
Figure BPA00001479917700923
用CH2Cl2(50mL)洗涤，真空浓缩滤液，得到浅炭黑色固体。粗产物的1H-NMR分析表明为推测的1.00∶0.04∶0.18摩尔比的反式酸M3f-1∶顺式酸M3f-2∶的副产物，3-氧代-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-甲酸叔丁酯。加热下，将粗产物溶解于EtOAc(～10mL)，加晶种下室温放置。冷却相下约15min后，发现结晶快速形成。约1h后，加入己烷(～6mL)，将混合物冷冻过夜(未出现另外的物质沉淀出来)。将混合物过滤，用冰/水-冷却的己烷/EtOAc(2∶1比率；20mL)洗涤，高真空下干燥得到第一批酸M3f-1(灰白色晶体，1.222g)。将母液真空浓缩，加热下将残留物溶解于～3mL EtOAc中，室温下放置1h，然后加入3mL己烷，在冰箱中储存约～15h。类似地回收第二批酸M3f-1(灰色晶体，0.133g)，混合总收率为59％。酸M3f-1：Rt＝1.48min，在以下HPLC条件下进行：溶剂梯度从100％A∶0％B至0％A∶100％B(A＝含0.1％TFA的1∶9 MeOH/H2O；B＝含0.1％TFA的9∶1MeOH/H2O)进行3min；检测波长220nm；PHENOMENEX-Luna 3.0X50mm S10柱。MP(dec.)第一批产物＝147.5-149.5℃。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)12.46(s，1H)，3.88(app br s，1H)，3.27(app br s，1H；与水信号重叠)，2.28(br m，1H)，2.07(app br s，1H)，1.56(app s，1H)，1.40/1.34(两个重叠s，9H)，0.71(m，1H)，0.45(m，1H)。13C-NMR(100.6MHz，DMSO-d6，δ＝39.21ppm)172.96，172.60，154.45，153.68，78.74，59.88，59.58，36.91，31.97，31.17，27.77，27.52，14.86，14.53，13.69.LC/MS[M+Na]+＝250.22.C11H17NO4分析计算值：C，58.13；H，7.54；N，6.16。实测值：(第一批产物)：C，58.24；H，7.84；N，6.07。旋光度(10mg/mL的CHCl3溶液)：[α]D＝-216和-212，分别为第一批和第二批数据。
用2min，将DIEA(1.3mL，7.44mmol)滴加到酸M3f-1(1.697g，7.47mmol)和2-溴-1-(4-溴苯基)乙酮(2.01g，7.23mmol)的CH3CN(30mL)半非均相混合物中，室温下搅拌8hr。真空除去挥发性成分，将残留物溶于CH2Cl2(100mL)中，用水(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩得到酮酯M3g，为灰白色粘稠半泡沫状油状物(3.076g)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)：7.92(d，J＝8.3，2H)，7.78(d，J＝8.5，2H)，5.61-5.42(m，2H)，4.16(m，1H)，3.34(‘m’部分被溶剂信号遮蔽，1H)，2.40(m，2H)，1.63(m，1H)，1.41/1.35(两个重叠‘s’，9H)，0.74(m，1H)，0.53(m，1H).LC/MS：[M+Na]+C19H22 79BrNNaO5分析计算值：446.06；实测值446.06。
向一350ml压力管中加入酮-酯M3g(3.07g，7.24mmol)、乙酸铵(5.48g，71.1mmol)和二甲苯(70mL)，封盖，用油浴(140℃)加热4.5hr。将反应混合物冷却至室温，真空除去挥发性成分。向残留物中加入CH2Cl2(100mL)和50％饱和NaHCO3溶液(30mL)，剧烈搅拌直至气体逸出停止，分离各相。将有机层干燥(MgSO4)，真空浓缩，用BIOTAGE
Figure BPA00001479917700942
纯化(240g硅胶；样品用CH2Cl2装载；用40-80％EtOAc/己烷洗脱)，得到咪唑M3h，为深黄色泡沫状物(2.40g)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)：12.21(s，0.11H)，1.93(s，0.89H)，7.69(d，J＝8.8，1.8H)，7.62-7.55(m，0.4H)，7.53(br d，J＝2，0.87H)，7.49(d，J＝8.5，1.8H)，7.29(br d，J＝1.6，0.13H)，4.59(m，1H)，3.41(m，1H)，2.37-2.17(br m，2H)，1.62(m，1H)，1.21(非常宽‘s’，9H)，0.75(m，1H)，0.54(m，1H)。LC/MS：[M+H]+C19H23 81BrN3O2分析计算值：406.10；实测值：406.14。
Figure BPA00001479917700943
根据对用溴化物D-1b合成吡咯烷M1b(.4HCl)所述的方法，自溴化物M3h制备吡咯烷M3i(4HCl)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)：10.51(app br s，4H)，8.08(s，2H)，7.92(d，J＝7.8，4H)，7.66(d，J＝8.5，4H)，4.78(m，2H)，3.42(m，2H)，2.65(m，2H)，～2.53(‘m’部分被溶剂信号遮蔽，2H)，1.94(m，2H)，1.10(m，2H)，0.86(m，2H)。LC/MS：[M+H]+ C30H29N6分析计算值：473.25；实测值：473.21。
实施例M3(和实施例M4-M7)
通过使用对合成实施例M1所述的方法，自吡咯烷M3i(.4HCl)和适当的酸，制备实施例M3以及下表中所示的其类似物实施例M4-M7的TFA盐。在实施例M7情况下，使用等摩尔(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸混合物进行所述偶合步骤，得到的产物的统计学混合物经对实施例M1所述的HPLC技术分离。实施例M3：LC(Cond.9和10)：＞95％均一性指数。LC/MS(Cond.3)：Rt＝1.89min.LC/MS：[M+H]+C44H51N8O6分析计算值：787.39；实测值：787.40。
Figure BPA00001479917700961
Figure BPA00001479917700962
将NCS(0.0195g，0.143mmol)加入到游离碱形式的实施例M3(通过标准MCX游离碱化方案得自其TFA盐；0.109g，0.139mmol)的DMF(2mL)溶液中，在室温下搅拌16hr，然后在50℃下搅拌25hr。真空除去大部分溶剂，将残留物溶解于MeOH中，进行反相HPLC纯化(MeOH/水/TFA)，得到实施例M8的TFA盐(50mg)和实施例M9(17.5mg)。
Figure BPA00001479917700963
Figure BPA00001479917700964
将NCS(0.021g，0.158mmol)加入到游离碱形式的实施例M6(通过标准MCX游离碱化方案得自其TFA盐；0.1059g，0.122mmol)的DMF(1.5mL)溶液中，在50℃下搅拌24hr。将反应混合物用MeOH(2.5mL)稀释，进行反相HPLC纯化条件(XTERRA，30X100mm，S5；MeOH/水/TFA)。得到的样品用不同的反相HPLC条件再纯化(Waters-Sunfire，30X100mm，S5；乙腈/水/TFA)，得到TFA盐形式的实施例M9.1(38.8mg)和实施例M9.2(32.6mg)。
Figure BPA00001479917700971
Figure BPA00001479917700972
氮气下，向冷却的(0℃)CH2Cl2(22mL)中加入二乙基锌(1M在己烷中，60.5mL，60.5mmol)，接着用15min滴加入三氟乙酸(5.1mL，66.2mmol)的10mL CH2Cl2溶液。将反应物搅拌15min，然后向反应物中滴加二碘甲烷(5.4mL，66.9mmol)的10mL CH2Cl2溶液。将反应物在0℃下继续搅拌1hr，然后加入(E)-1，2-二苯基乙烯(2g，11.10mmol)的10mL CH2Cl2溶液。将混合物从冷却浴中移出，在氮气下在约25℃搅拌20h。将反应物用0.1N HCl(50mL)猝灭，分离各层，将水层用己烷(2x 100mL)提取。将合并的有机相用饱和NaHCO3(aq)(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。残留物经硅胶快速层析纯化(己烷)，得到联苯M9.3a，为无色油状物(1.6g)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.34-7.31(m，4H)，7.24-7.17(m，6H)，2.22-2.18(m，2H)，1.51-1.47(m，2H)。
Figure BPA00001479917700981
向联苯M9.3a(3.3g，16.99mmol)的1，2-二乙氧基乙烷(197mL)和水(82mL)溶液中加入NBS(12.09g，67.9mmol)。将反应瓶用铝箔包裹并在室温下搅拌51hr。将反应物在乙醚和水之间分配，将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。残留物经历快速层析(样品用氯仿装载；用己烷洗脱)，得到二溴化产物的立体异构体混合物，为白色固体(3.1g)。该立体异构体混合物经手性SFC分离(Chiral pakAD-H柱，30X250mm，5μm；80％CO2-20％EtOH；35℃；150bar；70mL/min进行20min；220nm)，分离出两种对映体：M9.3b1(白色固体，1.1g)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.43(d，J＝8.6Hz，4H)，7.02(d，J＝8.6Hz，4H)，2.12-2.09(m，2H)，1.47-1.43(m，2H)；OR：+361.79，3.15mg在1mL CHCl3中，λ＝589nm，50mm旋光管。M9.3b2(白色固体，1.2g)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.43(d，J＝8.6Hz，4H)，7.02(d，J＝8.6Hz，4H)，2.12-2.09(m，2H)，1.47-1.43(m，2H)；OR：-376.70，3.03mg溶于1mL CHCl3，λ＝589nm，50mm cell。
Figure BPA00001479917700991
向二溴化物M9.3b1(0.8806g，2.501mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(2.71g，7.50mmol)的1，4-二氧六环(17mL)溶液中加入二氯双(三苯膦)-钯(II)(0.105g，0.150mmol)。将反应物用氮气彻底吹洗，密封，在80℃下加热16h。将反应物从加热器上移出，加入1N HCl(aq)(17mL)，将混合物搅拌4h。将混合物用水(20mL)稀释，用EtOAc(3x 50mL)提取。合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。残留物经快速层析(35％乙酸乙酯/己烷)，将回收的样品用己烷(3x 50mL)研磨，得到酮M9.3c，为灰白色固体(412.5mg)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.92(d，J＝8.5Hz，4H)，7.23(d，J＝8.6Hz，4H)，2.61(s，6H)，2.32-2.28(m，2H)，1.67-1.63(m，2H)。LC/MS：[M+H]+C19H19O2分析计算值：279.14；实测值：279.13。
Figure BPA00001479917700992
向酮M9.3c(0.4072g，1.463mmol)的THF(7mL)溶液中加入苯基三甲基三溴化铵(1.10g，2.93mmol)，将反应混合物在约25℃下搅拌约15h。真空除去挥发性成分，将残留物在水(25mL)和CH2Cl2(100mL)之间分配。有机层经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到二溴化物M9.3d，其不经进一步纯化而使用。LC/MS：[M+H]+C19H17 79Br2O2分析计算值：434.96；实测值：434.98。
Figure BPA00001479917700993
向二溴化物M9.3d(～1.463mmol)和酸M3f1(0.698g，3.07mmol)的乙腈(10mL)溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(0.537mL，3.07mmol)，将反应物在～25℃下搅拌5h。真空除去挥发性成分，将残留物溶于氯仿(4mL)中，装载于硅胶柱上，用8％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱1296mL溶剂，得到二酮酯M9.3e，为浅黄色泡沫状物，含有未鉴定的杂质(0.723g)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.90(d，J＝8.0Hz，4H)，7.37(d，J＝8.3Hz，4H)，5.59-5.40(m，3H)，4.24-4.09(m，2H)，3.37-3.25(m，2H)，2.47-2.36(m，5H)，1.87-1.80(m，2H)，1.72-1.68(m，2H)，1.57-1.49(m，2H)，1.41(s，7H)，1.35(s，11H)，0.80-0.67(m，2H)，0.58-0.48(m，2H).LC/MS：[M+H]+C41H48N2NaO10分析计算值：751.32；实测值：751.55。
将在一密封反应容器中的二酮酯M9.3e(0.723g，0.992mmol)和乙酸铵(1.529g，19.84mmol)在二甲苯(10mL)中的混合物在140℃下加热2.5h。将反应混合物冷却至室温后，真空除去挥发性成分。将残留物溶于20％MeOH/CHCl3(50mL)中，用饱和NaHCO3(aq)(20mL)处理，搅拌，分离各层。将水层用20％MeOH/CHCl3进一步提取(2x 50mL)，合并的有机相经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，将残留物溶于CHCl3(4mL)中，装载于硅胶柱上，用45％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱1296mL，得到咪唑M9.3f，为橙色固体(261.7mg)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.08(s，0.5H)，11.81(s，1.5H)，7.64(d，J＝8.3Hz，3H)，7.55(d，J＝8.3Hz，1H)，7.41(d，J＝1.7Hz，1.7H)，7.19-1.17(m，1.3H)，7.11(d，J＝8.3Hz，3H)，4.59(app br s，2H)，3.41(app br s，2H)，2.37-2.14(m，6H)，1.68-1.57(m，2H)，1.48-1.40(m，2H)，1.40-0.95(br s，18H)，0.79-0.69(m，2H)，0.59-0.48(m，2H)。LC/MS：[M+H]+ C41H49N6O4分析计算值：689.38；实测值：689.43。
Figure BPA00001479917701011
将氨基甲酸酯M9.3f(0.2391g，0.347mmol)在25％TFA/CH2Cl2(1.7mL)中的溶液在约25℃下搅拌1h。真空除去挥发性成分，得到吡咯烷M9.3g的TFA盐，为棕褐色泡沫状物(328mg)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.01(br s，2H)，7.70-7.68(m，6H)，7.20(d，J＝8.6Hz，4H)，4.63-4.58(m，2H)，3.37-3.33(m，2H)，2.51-2.42(m，6H)，2.24-2.20(m，2H)，1.93-1.86(m，2H)，1.51-1.47(m，2H)，1.16-1.09(m，2H)，0.084-0.78(m，2H)。LC/MS：[M+H]+C31H33N6分析计算值：489.28；实测值：489.26。
实施例M9.3
向吡咯烷M9.3g/TFA盐(0.0834g，0.088mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(0.034g，0.194mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.123mL，0.706mmol)的DMF(1.5mL)溶液中，加入HATU(0.070g，0.185mmol)，将混合物在25℃下搅拌4h。将反应混合物用MeOH(2.5mL)稀释，进行反相HPLC纯化(XTERRA，30X100mm，S5；MeOH/H2O/TFA)，得到实施例M9.3，为灰白色泡沫状物(58mg)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 14.90-14.20(bs，3H)，8.00(br s，2H)，7.68(d，J＝8.3Hz，4H)，7.34(d，J＝8.6Hz，4H)，7.25(d，J＝8.6Hz，2H)，5.00-4.96(m，2H)，4.42-4.39(m，2H)，3.79-3.69(m，2H)，3.54(s，6H)，2.38-2.31(m，5H)，2.16-2.07(m，2H)，1.95-1.88(m，2H)，1.61-1.58(m，2H)，0.97-0.90(m，8H)，0.80(d，J＝6.5Hz，8H).Rt＝1.96min(Cond.3)；＞95％均一性指数(Cond.9和10)；LC/MS：[M+H]+C45H55N8O6分析计算值：803.42；实测值：803.43。
Figure BPA00001479917701021
根据制备实施例M9.3所用相同的方法，自吡咯烷M9.3g/TFA盐和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸，制备实施例M9.4。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 15-14(bs，6H)，7.98(br s，2H)，7.66(d，J＝8.3Hz，4H)，7.34-7.32(m，5H)，4.98-4.94(m，2H)，4.50-4.46(m，2H)，3.84-3.78(m，6H)，3.54(s，6H)，3.32-3.18(m，4H)，2.39-2.29(m，4H)，2.11-1.97(m，2H)，1.97-1.88(m，2H)，1.60-1.57(m，2H)，1.51-1.26(m，8H)，0.99-0.87(m，2H)，0.84-0.72(m，2H)。Rt＝1.77min(Cond.3)；＞95％均一性指数(Cond.9和10)；LC/MS：[M+H]+C49H59N8O8分析计算值：887.45；实测值887.50。
根据对用相应的立体异构体二溴化物M9.3b1制备实施例M9.3和M9.4所述的方法，自二溴化物M9.3b2，制备实施例M9.5和M9.6的TFA盐。
Figure BPA00001479917701023
Figure BPA00001479917701031
根据制备实施例M9.3所用相同的方法，自二溴化物M9.3d盐和酸M12.2c，制备实施例M9.7(TFA盐)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 14.90-14.42(br s，4H)，8.02(br s，2H)，7.70(d，J＝8.5Hz，4H)，7.36(d，J＝8.6Hz，4H)，7.25(d，J＝8.3Hz，2H)，5.07(dd，J＝10.7Hz/7.1Hz，2H)，4.18-4.13(app t，2H)，4.12-4.08(app t，2H)，3.55(s，6H)，3.42-3.37(app t，2H)，2.49-2.39(m，2H)，2.37-2.31(app t，2H)，2.02-1.93(m，2H)，1.87-1.78(app q，2H)，1.62-1.59(app t，2H)，1.14(d，J＝6.3Hz，6H)，0.82(d，J＝6.5Hz，6H)，0.77(d，J＝6.8Hz，6H)。Rt＝3.12min(Cond.10d)；＞95％均一性指数(Cond.9和10)；LC/MS：[M+H]+C45H59N8O6分析计算值：807.46；实测值：807.45。
Figure BPA00001479917701032
根据对制备实施例M9.4所述的方法，自溴化物M9.3d和酸M12.2c，制备实施例M9.7(TFA盐)。Rt＝3.01min(Cond.10d)；＞95％均一性指数(Cond.9和10)；LC/MS：[M+H]+C49H63N8O8分析计算值：891.48；实测值：891.52。
Figure BPA00001479917701041
通过采用J.Med.Chem.，49：3520-3535(2006)中合成其乙酯类似物所述的方法，自(S)-5-氧代吡咯烷-2-甲酸甲酯，以5个步骤制备含有非对映体杂质的标题化合物。1H NMR(CDCl3，400MHz)：4.35(m，0.5H)，4.25(m，0.5H)，4.05(m，0.5H)，3.90(m，0.5H)，3.73(s，3H)，2.20(m，1H)，2.00(m，2H)，1.65(m，1H)，1.50/1.40(两个重叠br s，9H)，1.31(d，J＝6.0，3H)。
将氢氧化锂(0.23g，9.62mmol)的水(5mL)溶液滴加到酯M10a(1.8g，7.4mmol)的乙醇(10mL)溶液中，室温下搅拌17hr。蒸发大部分溶剂，将残留物用水稀释，滴加1N HCl使其pH为3。用乙酸乙酯(20mL，4x)提取，干燥(Na2SO4)，真空蒸发得到无色油状物，当溶解于EtOAc/己烷溶剂系统中并在室温放置时，生成结晶。过滤白色固体，真空干燥(1.42g)。1H NMR(CDCl3，400MHz，d＝7.24ppm)：4.35(m，1H)，3.95(m，1H)，2.35(m，1H)，2.05(m，2H)，1.70(m，1H)，1.50(br s，9H)，1.25(d，J＝7.1，3H)。
Figure BPA00001479917701051
向酸M10b(2.16g，9.42mmol)和2-溴-1-(4-溴苯基)乙酮(2.62g，9.42mmol)的乙腈(50mL)溶液中慢慢加入二异丙基乙胺(1.645mL，9.42mmol)，将反应混合物室温下搅拌5hr。真空除去溶剂，将残留物在乙酸乙酯和水之间分配(1∶1，100mL)。将有机层用饱和NaHCO3洗涤，干燥(Na2SO4)，真空浓缩得到酮酯M10c，为白色固体(3.9g)，其不经进一步纯化即可用于下一步骤中。1H NMR(400MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)：7.92(d，J＝8.3，2H)，7.78(d，J＝8.5，2H)，5.6-5.4(m，2H)，4.35(m，1H)，3.85(m，1H)，2.25(m，1H)，2.05(m，2H)，1.60(m，1H)，1.5/1.4(两个重叠br s，9H)，1.18(d，J＝6.6，3H).LC/MS：[M+Na]+ C19H24 81BrNaNO5分析计算值：450.07；实测值：450.00。
Figure BPA00001479917701052
向一500mL压力管中的酮酯M10c(3.9g，9.15mmol)的二甲苯(60mL)溶液中，加入乙酸铵(7.05g，91mmol)。将反应管密封并在140℃下加热5hr。真空除去溶剂，将残留物在CH2Cl2(100mL)和水(100mL)之间分配。将有机层洗涤(饱和NaHCO3)，干燥(Na2SO4)，真空蒸发。得到的粗品产物经快速层析纯化(30-100％EtOAc/己烷)，得到溴化物M10d，为棕色泡沫状物(3.0g，收率81％)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：11.77(s，1H)，7.70(d，J＝8.5，2H)，7.52(br s，1H)，7.50(d，J＝8.5，2H)，4.80(m，1H)，3.85(m，1H)，2.10(m，3H)，2.70(m，1H)，1.5/1.3(重叠br s，9H)，1.20(m，3H)。LC/MS：[M+H]+C19H25 79BrN3O2分析计算值：406.11；实测值：406.18。
Figure BPA00001479917701061
根据对用溴化物D1b合成吡咯烷M1b(HCl盐)所述的方法，用溴化物吡咯烷M10d，制备实施例M10e(HCl盐)。
实施例M10
根据对用吡咯烷M3i(HCl盐)合成实施例M1所述的方法，用溴化物吡咯烷M10e(HCl盐)，制备实施例M10(TFA盐)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：8.05(s，2H)，7.85(d，J＝8.1，4H)，7.69(d，J＝7.6，4H)，7.56(d，J＝8.0，2H)，5.5(m，0.4H)，5.0(m，1.6H)，4.75(1.6H)，4.10(m，0.4H)，3.95(m，2H)，3.50(s，6H)，2.50-2.30(m，4H)，2.10(m，2H)，1.85(m，4H)，1.46(d，J＝6.6，5H)，1.20(d，J＝6.8，1H)，0.9-0.9(m，7.2H)，0.74(d，J＝6.8，4.8H).LC(Cond.9和10)：＞95％均一性指数。LC/MS(Cond.3)：Rt＝2.03min.LC/MS：[M+H]+C44H55N8O6分析计算值：791.42；实测值：791.39。
实施例M11-M12
实施例M11-M12的TFA盐根据对实施例M10所述的方法并通过使用适当的酸来制备。
Figure BPA00001479917701062
Figure BPA00001479917701071
向吡咯烷M10e/HCl盐(119mg，0.191mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(49.0mg，0.226mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(40.9mg，0.233mmol)的DMF(5mL)溶液中加入DIEA(0.200mL，1.147mmol)和HATU(148mg，0.390mmol)，将混合物室温下搅拌1hr。真空除去溶剂，使残留物溶于甲烷，用反相HPLC纯化(MeOH/TFA/水)，分离产物的统计混合物，其中一种是实施例M12.1(TFA盐；浅黄色泡沫状物；55mg)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：8.09-7.82(m，6H)，7.68-7.55(m，6H)，5.00(m，2H)，4.64(app t，2H)，4.21-3.75(m，6H)，3.53(m，6H)，3.17(m，2H)，2.33-2.21(m，6H)，1.85(m，3H)，1.62-1.17(‘d’和‘m’重叠，J是‘d’＝6.6Hz，9H)，0.88(m，3.6H)，0.74(d，J＝6.8Hz，2.4H)。LC(Cond.9和10)：＞95％均一性指数。LC/MS(Cond.10h)：Rt＝1.92min.LC/MS：[M+H]+C46H57N8O7分析计算值：833.44；实测值：833.40。
实施例M12.2
Figure BPA00001479917701081
根据Tetrahedon Letters，2003，3203-3205中所述方法，自5-氧代吡咯烷-1，2-二甲酸(S)-1-叔丁基酯2-甲酯，制备以上三种酯。
Figure BPA00001479917701082
将硼烷-二甲硫醚复合物(5.44mL，10.88mmol)加入到酯M12.2a-2(1.4g，5.44mmol)的THF(25mL)溶液中，将反应混合物在40℃加热7hr。真空除去挥发性成分，将残留物在EtOAc和水之间分配(各50mL)。将水层用EtOAc(30mL)提取，将合并的有机相用Na2SO4干燥，真空浓缩。得到的无色油状物用快速层析纯化(0-50％EtOAc/己烷)，得到酯M12.2b，为无色油状物(0.77g)。1H NMR(CDCl3，δ＝7.24ppm，400MHz)：4.29-4.18(m，1H)，3.78-3.66(m，4H)，2.99(app t，J＝10.1，1H)，2.43-2.97(m，1H)，2.43-2.37(m，1H)，2.30-2.18(m，1H)，1.60-1.52(m，1H)，1.47/1.42(2个‘s’，9H)，1.08-1.05(m，3H)。
实施例M12.2，步骤c
Figure BPA00001479917701091
向酯M12.2b(1.69g，6.95mmol)的乙醇(10mL)溶液中加入LiOH(0.250g，10.42mmol)的水(5.00mL)溶液，将反应混合物室温下搅拌5hr。真空蒸发有机溶剂，将残留物用水(10mL)稀释，用乙醚(10mL)洗涤。在冰浴中冷却，用1N HCl酸化至pH约2的范围。然后用EtOAc提取(20mL，3x)。将有机层用Na2SO4干燥并真空浓缩，得到酸M12.2c，为无色油状物，长期暴露于高真空下变成白色固体(1.38g)。1H NMR(CDCl3，δ＝7.24ppm，400MHz)：4.39-4.22(m，1H)，3.80-3.69(m，0.91H)，3.59-3.35(m，0.18H)，3.03-2.89(m，0.91H)，2.51-2.22(m，2H)，1.98-1.91(m，0.71H)，1.68-1.60(0.29H)，1.50/1.44(2个‘s’，9H)，1.09(app m，3H)。
Figure BPA00001479917701092
向M12.2c(1.38g，6.02mmol)和2-溴-1-(4-溴苯基)乙酮(1.673g，6.02mmol)的乙腈(35mL)溶液中加入DIEA(1.051mL，6.02mmol)。室温下搅拌5hrs。真空蒸发溶剂，加入水(50mL)和EtOAc(70mL)，分离有机层，用饱和NaHCO3(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，真空蒸发得到粗品M12.2d，为红色油状物(2.71g)，不经进一步纯化直接用于下一步骤中。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：7.91(m，2H)，7.78(d，J＝8.5Hz，2H)，5.60-4.90(m，2H)，4.29(app t，1H)，3.61(m，1H)，2.85(m，1H)，2.35-1.80(m，2H)，1.65(m，1H)，1.40-1.32(2个s，9H)，1.02(d，J＝6.5Hz，3H).LC/MS：[M+Na]+C19H24 81BrNNaO5分析计算值：450.07；实测值：450.11。
Figure BPA00001479917701101
向装有酮酯M12.2d(2.57g，6.03mmol)的二甲苯(50mL)溶液的压力管中加入乙酸铵(4.65g，60.3mmol)。将该容器封盖并在1400C下加热5hrs。真空除去挥发性成分，将残留物在DCM(50mL)和水(40mL)之间分配。将有机层用Na2SO4干燥并真空浓缩。得到的粗品混合物用快速层析纯化(30-100％EtOAc/己烷)，得到咪唑M12.2.e，为棕色固体(1.24g)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：7.69(d，J＝8.5Hz，2H)，7.58-7.48(m，3H)，4.70(m，1H)，3.65(m，1H)，3.02(m，1H)，2.37(m，1H)，2.22(m，1H)，1.74-1.54(m，1H)，1.37-1.08(2个s，9H)，1.03(d，J＝6.3Hz，3H).LC/MS：[M+H]+ C19H25 79BrN3O2分析计算值：406.11；实测值：406.18。
Figure BPA00001479917701102
根据对用溴化物D1b合成吡咯烷M1b(HCl盐)所述的方法，用溴化物M12.2e制备吡咯烷M12.2f(HCl盐)。
实施例M12.2
向吡咯烷M12.2f/HCl盐(200mg，0.321mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(124mg，0.707mmol)的DMF(5mL)混合物中，加入DIEA(0.337mL，1.928mmol)和HATU(250mg，0.659mmol)，将混合物室温下搅拌2hrs。真空除去挥发性成分，残留物经反相HPLC纯化(Phenomenex-Luna 30X 100mm，S10 Axia，MeOH/TFA/水)。得到的样品用不同的反相HPLC再纯化(Water-Sunfire 30X100mm S5，ACN/TFA/水)，得到实施例M12.2的TFA盐，为浅黄色泡沫状物(77.1mg)。1H NMR(甲醇-d4，δ＝3.29ppm，400MHz)：7.90(s，2H)，7.74(d，J＝8.6Hz，4H)，7.67(d，J＝8.5Hz，4H)，5.18(m，2H)，4.30(app t，2H)，4.18(d，J＝7.3Hz，2H)，3.63(s，6H)，3.38(m，2H)，2.63(m，2H)，2.51(m，2H)，1.98(m，2H)，1.81(m，2H)，1.21(d，J＝6.3Hz，6H)，0.83-0.90(m，12H).LC(Cond.9和10)：＞95％均一性指数。LC/MS(Cond.10h)：Rt＝2.01min。LC/MS：[M+H]+ C44H55N8O6分析计算值：791.42；实测值：791.46。
Figure BPA00001479917701111
根据对制备实施例M12.2所述的方法，用吡咯烷M12.2f/HCl和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸，制备实施例M12.3(TFA盐)。RT：LC(Cond.9和10)：＞95％均一性指数。LC/MS(Cond.10h)：Rt＝1.89min。LC/MS：[M+H]+C48H59N8O8分析计算值：875.45；实测值：875.42.
Figure BPA00001479917701112
向实施例M12.2(采用MCX柱和2N NH3/MeOH游离碱化)(80mg，0.101mmol)的DMF(5mL)溶液中加入NCS(17.56mg，0.131mmol)，在50℃加热3hrs。向混合物中加入另外的NCS(5mg，0.037mmol)，继续加热5小时以上。真空除去挥发性成分，将残留物溶解于MeOH中，经反相HPLC条件(MeOH/TFA/水)，得到实施例M12.4/TFA盐(浅黄色泡沫状物，24mg)和实施例M12.5/TFA盐(浅黄色泡沫状物，28mg)。实施例M12.4/TFA盐：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：8.17(s，1H)，7.83-7.73(m，6H)，7.66(d，J＝8.6Hz，2H)，7.30(d，J＝8.3Hz，1H)，7.22(d，J＝8.3Hz，1H)，5.05(m，1H)，4.85(m，1H)，4.16-4.02(m，4H)，3.52(s，6H)，3.37(m，1H)，3.23(m，1H)，2.54-2.24(m，4H)，1.87-1.63(m，4H)，1.13-1.08(m，6H)，0.85-0.74(m，12H).LC(Cond.9a.1和10a.1)：＞95％均一性指数。LC/MS(Cond.11)：Rt＝4.26min.LC/MS：[M+H]+ C44H54ClN8O8分析计算值：825.39；实测值：825.50。实施例M12.5/TFA盐：(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：7.79(d，J＝8.4Hz，4H)，7.66(d，J＝8.4Hz，4H)，7.22(d，J＝8.3Hz，2H)，4.85(m，2H)，4.13(app t，2H)，4.04(app t，2H)，3.53(s，6H)，3.24(app t，2H)，2.39(m，2H)，2.26(m，2H)，1.90(m，2H)，1.66(m，2H)，1.09(d，J＝6.5Hz，6H)，0.85(d，J＝6.8Hz，6H)，0.80(d，J＝6.5Hz，6H).LC (Cond.9a and 10a.1)：＞95％均一性指数。LC/MS(Cond.11)：Rt＝4.44min。LC/MS：[M+H]+ C44H53Cl2N8O6分析计算值：859.35；实测值：859.30。
根据对制备实施例12.4-12.5所述的方法，自实施例M12.3制备实施例12.6-12.7的TFA盐。
Figure BPA00001479917701122
Figure BPA00001479917701131
Figure BPA00001479917701132
向吡咯烷M12.2f/HCl盐(120mg，0.193mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(35.1mg，0.200mmol)的DMF(2mL)混合液中，顺次加入DIEA(0.168mL，0.964mmol)和HATU(70.4mg，0.185mmol)，将混合物室温下搅拌1hr。真空除去挥发性成分，残留物溶解于MeOH中，经历反相HPLC条件(MeOH/TFA/水)，分离吡咯烷M12.8a的TFA盐，为黄色固体(36mg)。将样品游离碱化(MCX柱；MeOH冲洗；2NNH3/MeOH洗脱)，得到黄色固体22.3mg。LC/MS：[M+H]+C37H44N7O3分析计算值：634.35；实测值：634.35。
实施例M12.8
向吡咯烷M12.8a(22.3mg，0.035mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(12.99mg，0.060mmol)的DMF(2mL)溶液中加入DIEA(0.018mL，0.106mmol)和HATU(13.65mg，0.036mmol)，将混合物室温下搅拌2hr。真空除去挥发性成分，使残留物溶解于MeOH中，经历反相HPLC条件(柱：Phenomenex-Luna30X100mm，S10 Axia；MeOH/TFA/水)。得到的样品经反相HPLC再纯化(柱：Water-Sunfire 30X100mm S5；ACN/TFA/水)，得到实施例M12.8的TFA盐，为浅黄色泡沫状物(16mg)。1H NMR(甲醇-d4，δ＝3.29ppm，400MHz)：7.92(d，J＝5.0Hz，2H)，7.77(d，J＝8.5Hz，4H)，7.72-7.69(m，4H)，5.21(m，2H)，4.39-4.22(m，4H)，3.92(m，2H)，3.67(s，6H)，3.47-3.28(m，4H)，2.68(m，2H)，2.54(m，2H)，2.06-1.85(m，4H)，1.25(d，J＝6.5Hz，6H)，0.93(d，J＝6.7Hz，3H)，0.91(d，J＝7.3Hz，6H)。LC(Cond.9和10)：＞95％均一性指数。LC/MS(Cond.10d)：Rt＝3.10min。LC/MS：[M+H]+ C46H57N8O7分析计算值：833.44；实测值：833.
Figure BPA00001479917701141
在-50℃干冰/丙酮浴中，用10分钟，向M12.2a-1和M12.2a-2(4.75g，18.46mmol)混合物的溶液中滴加入三乙基硼氢化锂(Superhydride)(19.20mL，19.20mmol)中。加入Hunig′s碱(13.58mL，78mmol)，搅拌10min，加入固体的DMAP(0.122g，0.997mmol)，搅拌15min，用15mins滴加入三氟乙酸酐(2.98mL，21.08mmol)。然后移去干冰/丙酮浴，将反应混合物搅拌4hr，同时使其融化至室温。将反应混合物用水(50mL)、饱和NaCl(30mL)洗涤，真空浓缩。得到的粗物质经快速层析纯化(8-60％EtOAc/己烷)，得到酯M12.9a，为黄色固体(2.85g)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：6.36(s，0.5H)，6.25(s，0.5H)，4.70-4.57(m，1H)，3.78(s，3H)，2.96(m，1H)，2.54(m，1H)，1.70(s，3H)，1.50(s，4.5H)，1.44(s，4.5H)。
Figure BPA00001479917701151
用20min，将二乙基锌(1.1M在甲苯中，59.1mL，65.0mmol)滴加到冷却的(-23℃)酯M12.9a(5.23g，21.68mmol)的甲苯(60mL)溶液中，搅拌10min。用10min滴加入氯碘甲烷(9.44mL，130mmol)，将反应混合物于-21℃下搅拌16hr。向反应混合物中加入饱和NaHCO3(60mL)，移去冷却浴，将混合物搅拌10min。然后过滤，将滤饼用甲苯(50mL)洗涤。将滤液分配，将有机层用Na2SO4干燥，真空浓缩。得到的粗产物经快速层析纯化(2-10％EtOAc/己烷)，得到酯M12.9b-1(先洗脱；无色油状物；2.88g)和酯M12.9b-2(第二次洗脱；无色油状物；1.01g)。相对立体化学排列根据NOE研究确定。酯M12.9b-1：1HNMR(CDCl3，400MHz)：4.65-4.52(m，1H)，3.72(s，3H)，3.28-3.17(m，1H)，2.44-2.32(m，1H)，2.16-2.10(m，1H)，1.51-1.42(两个s，9H)，1.24(s，3H)，1.07(m，1H)，0.69-0.60(m，1H)。
实施例M12.9，步骤c
Figure BPA00001479917701161
向M12.9b-1(2.88g，11.28mmol)的乙醇(20mL)溶液中加入LiOH(0.324g，13.54mmol)的水(10.00mL)溶液，将混合物室温下搅拌6hr。真空除去大部分挥发性成分，将残留物在水(20mL)和乙醚(20mL)之间分配。将水层用冰-水浴冷冻，用1N HCl酸化至pH 2的范围，用EtOAc提取(30mL，4x)。合并的有机相经Na2SO4干燥，真空蒸发得到酸M12.9c，为粘性固体(2.55g)。1H NMR(CDCl3，400MHz)：4.64(m，1H)，3.25(appt s，1H)，2.70-2.40(m，1H)，2.14(m，1H)，1.54-1.44(m，9H)，1.27(s，3H)，1.10-0.80(m，1H)，0.67(m，1H)。
Figure BPA00001479917701162
向酸M12.9c(2.05g，8.50mmol)的乙腈(50mL)的溶液中顺次加入2-溴-1-(4-溴苯基)乙酮(2.361g，8.50mmol)和DIEA(1.484mL，8.50mmol)，将反应混合物室温下搅拌16hr。真空除去大部分挥发性成分，将残留物在EtOAc(50mL)和水(50mL)之间分配。将有机层用饱和NaHCO3(30mL)和饱和NaCl(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，真空蒸发得到酮酯M12.9d，为白色泡沫状物(3.5g)。LC/MS：[M+Na]+C20H24 81BrNNaO5分析计算值：462.07；实测值：461.91。
Figure BPA00001479917701163
向一压力管中的酮酯M12.9e(3.5g，7.99mmol)和二甲苯(80mL)混合物中，加入乙酸铵(6.16g，80mmol)，将反应混合物加盖并在140℃加热4.5hr。真空除去挥发性成分，将残留物在DCM(70mL)和水(70mL)之间分配。将有机层用饱和NaHCO3(30mL)洗涤，真空干燥。得到的粗产物经快速层析纯化(40-100％EtOAc/己烷)，得到咪唑M12.9e，为棕色固体(2.8g)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：7.68(m，2H)，7.57-7.49(m，3H)，5.08(m，1H)，3.20(m，1H)，2.45-2.09(M，2H)，1.69-1.52(m，1H)，1.42-1.16(m，12H)，0.62(m，1H)。LC/MS：[M+H]+C20H25 81BrN3O2分析计算值：420.11；实测值：420.02。
Figure BPA00001479917701171
向一装有溴化物M12.9e(0.354g，1.007mmol)和1，2-双(三甲基甲锡烷基)乙炔(0.354g，1.007mmol)的DMF(15mL)溶液的压力管中，加入Pd(Ph3P)4(0.070g，0.060mmol)，将反应混合物脱气10min，将反应容器加盖并在90℃加热14hr。真空除去大部分挥发性成分，将残留物在DCM(60mL)和水(40mL)之间分配。将有机层用Na2SO4干燥，真空蒸发。得到的粗产物经快速层析纯化(40-100％EtOAc/己烷)，得到炔M12.9f，为红色固体(0.3g)。LC/MS：[M+H]+C42H49N6O4分析计算值：701.38；实测值：701.43。
Figure BPA00001479917701172
将4N HCl的二氧六环溶液(3.90mL，128mmol)加入到氨基甲酸酯M12.9f(0.3g，0.428mmol)中，将混合物室温下搅拌5hr。真空除去挥发性成分，残留物在高真空下干燥过夜，得到吡咯烷M12.9g的HCl盐，为黄色固体(0.27g)。LC/MS：[M+H]+C32H33N6分析计算值：501.28；实测值：501.22。
实施例M12.9
向M12.9g/HCl盐(60mg，0.093mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(35.8mg，0.204mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入DIEA(0.097mL，0.557mmol)和HATU(72.7mg，0.191mmol)，将反应混合物室温下搅拌2hr。真空除去挥发性成分，将残留物溶解于MeOH中，经历反相HPLC(Phenomenex-Luna 30X100mm，S10Axia，MeOH/TFA/水)。得到的样品再经第二次反相HPLC纯化(Water-Sunfire30X150mm OBD，ACN/TFA/Water)，得到实施例M12.9的TFA盐，为浅黄色泡沫状物(37mg)。LC/MS(Cond.10d)：Rt＝3.08min.LC(Cond.9和10)：＞95％均一性指数。LC/MS：[M+H]+C46H55N8O6分析计算值：815.42；实测值：815.46。
Figure BPA00001479917701181
(SEM区域化学未确定)
向溴化物M3h(1.0g，2.47mmol)的DMF(25mL)溶液中加入氢化钠(60％；0.109g，2.72mmol)，将反应混合物室温下搅拌20min。然后滴加入(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(0.482mL，2.72mmol)，将反应物搅拌21h。真空除去挥发性成分，使残留物在乙酸乙酯(25mL)和水(25mL)之间分配。将水层用乙酸乙酯提取(2x 25mL)，将合并的有机相用盐水(25mL)洗涤，经MgSO4，干燥，过滤并真空浓缩。将残留物溶于CHCl3(2mL)中，装载于Thomson硅胶柱上，用25％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到未知其区域化学构型的溴化物M13a，为浅黄色泡沫状物(1.171g)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：7.71(s，1H)，7.69(d，J＝8.6，2H)，7.52(d，J＝8.6，2H)，5.62-5.31(br s，1H)，5.26(d，J＝10.8，1H)，4.84-4.66(app br s，1H)，3.57-3.36(app br s，1H)，3.50(t，J＝8.1，2H)，2.44-2.20(app br s，2H)，1.77-1.60(app br s，1H)，1.52-1.23(br s，4H)，1.23-0.96(br s，5H)，0.92-0.79(m，2H)，0.78-0.69(m，1H)，0.64-0.55(app br s，1H)，0.00(s，9H).LC/MS：[M+H]+C25H37 79BrN3O3Si分析计算值：534.18；实测值：533.99。
Figure BPA00001479917701191
向一密封反应容器中的溴化物M13a(0.5542g，1.037mmol)和三乙胺(0.434mL，3.11mmol)的2-丙醇(2.000mL)和水(1mL)溶液中顺次加入乙烯基三氟硼酸钾(0.181g，1.348mmol)和1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(0.085g，0.104mmol)。将反应混合物用氮气吹洗，顶端盖好，在100℃加热17h。真空除去挥发性成分，使残留物在乙酸乙酯(25mL)和水(25mL)之间分配，将水相用乙酸乙酯提取(2x 25mL)。合并的有机相经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。将残留物溶于CHCl3(4mL)中，装载于Thomson硅胶柱上，用25％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到烯烃M13b，为浅黄色粘稠油状物(345.4mg)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：7.71(d，J＝8.3，2H)，7.67(s，1H)，7.45(d，J＝8.3，2H)，6.72(dd，J＝17.6，11.1，1H)，5.8(dd，J＝0.8，17.6，1H)，5.60-5.29(app br s，1H)，5.26(d，J＝10.8，1H)，5.22(d，J＝11.8，1H)，4.83-4.67(app br s，1H)，3.59-3.35(app br s，1H)，3.51(t，J＝8.1，2H)，2.41-2.23(app br s，2H)，1.76-1.59(app br s，1H)，1.51-1.22(app br s，4H)，1.22-0.97(app br s，5H)，0.93-0.80(m，2H)，0.80-0.71(m，1H)，0.65-0.56(app br s，1H)，0.00(s，9H).LC/MS：[M+H]+C27H40N3O3Si分析计算值：482.28；实测值：482.24。
Figure BPA00001479917701201
向烯烃M13b(0.748g，1.552mmol)的CH2Cl2(2mL)溶液中加入第二代Grubbs催化剂(0.132g，0.155mmol)，在室温、氮气下搅拌18hr。将反应物装载于Thomson硅胶柱上，用30％乙酸乙酯/己烷洗脱得到M13c，为黄褐色泡沫状物(0.50g)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：7.74(d，J＝8.4，4H)，7.68(s，2H)，7.58(d，J＝8.3，4H)，7.22(s，2H)，5.72-5.34(bs，3H)，5.34-5.21(m，2H)，4.94-4.63(app br s，3H)，3.52(t，J＝7.8，4H)，2.45-2.20(app br s，4H)，1.88-1.57(app br s，2H)，1.57-1.26(br s，8H)，1.26-0.98(br s，10H)，0.93-0.80(m，4H)，0.80-0.69(m，2H)，0.69-0.51(app bs，2H)，0.00(s，18H)。
Figure BPA00001479917701211
将4N HCl/二氧六环(13mL)小心地加入到用冰/水浴冷却的装有M13c(0.4799g，0.513mmol)的烧瓶中。将水(4mL)和12N HCl(2mL)混合液加入到以上混合物中，移去冷却浴，继续搅拌反应混合物24h。向反应物中加入MeOH(2mL)，继续搅拌17h。真空除去所有溶剂，得到吡咯烷M13d(4HCl)，为黄色/黄褐色固体(317mg)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：10.78-9.87(very br s，～3H)，8.01(s，2H)，7.87(d，J＝8.4，4H)，7.71(d，J＝8.6，4H)，7.35(s，2H)，4.76(app t，J＝8.8，2H)，3.43(app t，J＝5.1，2H)，2.64(m，2H)，2.55-2.52(m，2H)，1.95(m，2H)，1.16-1.05(m，2H)，0.86(m，2H).LC/MS：[M+H]+C30H31N6分析计算值：475.26；实测值：475.26。
实施例M13
根据对制备实施例M1所述的方法，用吡咯烷M13d(4HCl)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸制备实施例M13的TFA盐。1HNMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：8.14-7.95(br s，2H)，7.80-7.74(m，8H)，7.40(s，2H)，7.25(d，J＝8.3，2H)，5.0(app t，J＝7.3，2H)，4.41(app t，J＝7.6，2H)，3.81-3.67(m，2H)，3.54(s，6H)，2.57-2.46(与DMSO-d6重叠)(m，2H)，2.44-2.31(m，2H)，2.19-2.05(m，2H)，1.98-1.87(m，2H)，1.02-0.89(m，7.5H)，0.89-0.70(m，8.5H).LC(Cond.3)：Rt＝1.92min；LC/MS：[M+H]+ C44H53N8O6分析计算值：789.41；实测值：789.46。
实施例M14-M15
通过使用对合成实施例M1所述的方法，用吡咯烷M13d和适当的酸，制备实施例M14(TFA盐)。在实施例M15情况下，用等摩尔的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸混合物进行偶合步骤，得到的统计学混合物通过实施例M1所述的HPLC技术分离。
Figure BPA00001479917701222
向2-氨基-1-(4-溴苯基)乙酮、HCl(4.0g，15.97mmol)的DCM(50.0mL)混悬液中加入碳酸氢钠(4.02g，47.9mmol)。然后向该溶液中加入Boc-酸酐(3.89mL，16.77mmol)，使反应混合物升温至室温并搅拌18hrs。然后加入DIEA(3mL，17.18mmol)，将反应混合物室温下搅拌2hrs，LCMS表明反应完成。将反应混合物用EtOAc和水稀释，将有机相用5％柠檬酸、水和饱和NaCl洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到溴化物N1A(5.0g)，为黄色固体，其不经进一步纯化用于下一步骤中。1H NMR(400MHz，MeOD)ppm 7.89(2H，m)，7.68(2H，m，J＝8.53Hz)，4.52(2H，s)，1.38-1.51(9H，m)。LC/MS(Cond.10d)：Rt＝3.56min.LC/MS：[M+Na]+ C13H16BrNaNO3分析计算值：336.03；实测值：335.97。
Figure BPA00001479917701231
向氨基甲酸酯N1a(2.0g，6.37mmol)的DMF(5mL)溶液中加入1，2-双(三甲基甲锡烷基)乙炔(1.119g，3.18mmol)。将反应混合物脱气，加入四(三苯膦)钯(0)(0.184g，0.159mmol)，将混合物在90℃加热4hrs。将粗品反应混合物加入到90g硅胶柱上，用0-60％EtOAc的己烷溶液梯度洗脱20min。收集炔N1b(0.83g)，为黄色固体。LC/MS(Cond.10d)：Rt＝4.1min。LC/MS：[M+Na]+C28H32NaN2O6分析计算值：515.23；实测值：515.10。
Figure BPA00001479917701232
向炔N1b(1.13g，2.294mmol)的1，4-二氧六环(5mL)溶液中加入4M HCl的二氧六环溶液(4mL，16.00mmol)。将反应混合物室温下搅拌2hrs。将反应混合物浓缩至干，得到黄色固体。将该固体用己烷和EtOAc洗涤，然后干燥得到氨基酮N1c，2HCl(0.508g)。1H NMR(400MHz，MeOD)ppm 8.10(4H，d，J＝8.53Hz)，7.78(4H，d，J＝8.53Hz)，4.64(4H，s)。LC/MS(Cond.10d)：Rt＝1.94min.LC/MS：[M+H]+C18H17N2O2分析计算值：293.12；实测值：293.07。
向(S)-1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟吡咯烷-2-甲酸(0.25g，0.995mmol)、氨基酮N1c，2HCl(0.182g，0.498mmol)、HATU(0.189g，0.498mmol)的DMF(2mL)混合物中加入DIEA(0.521mL，2.99mmol)。将反应混合物室温下搅拌3hrs。将粗品混合物加入到80g硅胶柱上，用0-100％EtOAc的己烷溶液梯度洗脱20min。收集酮基酰胺N1d(0.12g)，为黄色固体。LC/MS(Cond.10d)：Rt＝4.08min.LC/MS：[M+H]+C38H43F4N4O8分析计算值：759.29；实测值：759.03。
在一密封管中，将酮基酰胺N1d(0.12g，0.158mmol)和乙酸铵(0.122g，1.582mmol)在二甲苯(2mL)中的混合物在140℃下加热4hrs。将反应混合物在EtOAc和水之间分配，将有机层用饱和NaHCO3和饱和NaCl洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残留物溶解于少量二氯甲烷中，加入到40g硅胶柱上，用0-100％EtOAc的己烷溶液梯度洗脱20min。收集咪唑N1e(0.054g)，为黄色固体。LC/MS(Cond.10d)：Rt＝3.3min。LC/MS：[M+H]+C38H41F4N6O4分析计算值：721.3；实测值：721.10。
Figure BPA00001479917701251
向咪唑N1e(0.054g，0.075mmol)的1，4-二氧六环溶液中加入4MHCl的二氧六环溶液(0.5mL，2.0mmol)和几滴MeOH。将反应混合物室温下搅拌4hrs，浓缩得到吡咯烷N1f，4HCl(0.055g)，为浅黄色固体。LC/MS(Cond.10d)：Rt＝2.94min.LC/MS：[M+H]+C28H25F4N6分析计算值：520.2；实测值：521.10。
实施例N1
向(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(0.014g，0.079mmol)、吡咯烷N1f，4HCl(0.025g，0.038mmol)、HATU(0.030g，0.079mmol)在DMF(2mL)中的混合液中加入DIEA(0.039mL，0.225mmol)。将反应混合物室温下搅拌18hrs，用MeOH稀释，过滤，经反相HPLC纯化，得到实施例N1的TFA盐(0.026g)，为白色固体。LC(Cond.10b和10c)：＞95％均一性指数。LC/MS(Cond.10d)：Rt＝3.11min。LC/MS：[M+H]+C42H47F4N8O6分析计算值：835.35；实测值：835.16。
通过使用对合成实施例N1所述的方法，使吡咯烷N1f与2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸偶合。得到的三种非对映体(TFA盐)通过使用下列条件分离：柱＝Waters-Sunfire 30X 100mmS5；起始：％B＝0；终止：％B＝32；梯度时间＝25min；终止时间＝25min；流速＝40mL/min；波长＝220nm；溶剂A＝含0.1％TFA的10％MeCN/90％水；溶剂B＝含0.1％TFA的90％MeCN/10％水。
Figure BPA00001479917701261
实施例N5-N7
以氨基酮N1c和适当的自市售来源获得的原料为起始原料，通过对合成实施例N1所述的方法，制备实施例N5-N7(TFA盐)。
Figure BPA00001479917701262
Figure BPA00001479917701271
Figure BPA00001479917701272
根据对制备吡咯烷N1f所述的方法，采用氨基酮N1c和(1S，3S，5S)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸(其制备方法见WO2004/052850)为起始原料，制备吡咯烷N8a(HCl盐)。1H NMR(MeOD，δ＝3.33ppm，400MHz)：7.98(s，2H)，7.87(d，J＝8.4，4H)，7.69(d，J＝8.4，4H)，5.59(dd，J＝10.2，5.4，2H)，3.61-3.56(m，2H)，3.05-2.98(m，2H)，2.67(dd，J＝14.2，5.4，2H)，2.20-2.14(m，2H)，1.28-1.22(m，2H)，1.19-1.13(m，2H).LC/MS：[M+H]+C30H29N6分析计算值：473.24；实测值：473.2。
实施例N8
根据对制备实施例N1所述的方法，但纯化在改进的反相HPLC条件(ACN/水/NH4OAc)下进行，自吡咯烷N8a制备实施例N8。回收实施例N8，为浅黄色固体。LC(Cond.10e)：＞99％均一性指数。LC/MS(Cond.10f)：Rt＝2.21min.1H NMR(DMSO，δ＝2.50ppm，400MHz)：12.33(s，0.28H)，11.86(s，1.72H)，7.74(d，J＝8.4，3.42H)，7.65(d，J＝8.4，0.58H)，7.55(d，J＝8.4，0.58H)，7.51(s，2H)，7.49(d，J＝8.4，3..42H)，7.31(d，J＝8.8，2H)，5.39(app d，0.15H)，3.34(dd，J＝10.8，2.4，3.85H)，4.29(app t，2H)，3.90(br m，2H)，3.55(s，6H)，2.64-2.56(m，2H)，2.17(app d，2H)，2.08-1.98(m，2H)，1.79-1.74(m，4H)，0.92-0.83(m，14H).LC/MS：[M+H]+ C44H51N8O6分析计算值：787.39；实测值：787.8。
Figure BPA00001479917701281
根据对制备实施例N1所述的方法，但在其纯化中使用ACN/水/TFA溶剂系统，自吡咯烷N8a和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸制备化合物N9(TFA盐)。LC(Cond.10e)：＞97％均一性指数；LC/MS(Cond.10g)：Rt＝1.82min。LC/MS：[M+H]+ C48H55N8O8分析计算值：871.41；实施例；871.6。
实施例J1-J1.1
Figure BPA00001479917701291
将DIPEA(2.8mL，16mmol)加入到酸M3f(2.00g，8.80mmol)和2-溴-1-(3-溴苯基)乙酮(2.22g，8.00mmol)的乙腈(25mL)浆状液中，将反应混合物室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩，用Biotage Horizon纯化(80g SiO2，10-25％EtOAc/己烷)，得到酮酯J1a(3.37g)，为粘稠黄色油状物。
LC-MS保留时间1.853min；m/z 423和425.98(1∶1)(MH+)。LC数据采用Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，配备Waters Xterra MS7u C18 3.0x50mm色谱柱，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：2min，保持时间：1min，分析时间：3min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platfom，以电喷射模式测定。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.04(t，J＝1.8Hz，1H)，7.83(d，J＝7.8Hz，1H)，7.75(d，J＝8.0Hz，1H)，7.38(t，J＝7.9Hz，1H)，5.33-5.59(m，1H)，5.13-5.32(m，1H)，4.22(br s，1H)，3.40-3.63(m，1H)，2.52-2.63(m，1H)，2.46(dd，J＝13.1，9.3Hz，1H)，1.63-1.73(m，1H)，1.47(br s，9H)，0.86(br s，1H)，0.51(br s，1H)。
Figure BPA00001479917701301
将酮酯J1a(3.33g，7.85mmol)的二甲苯(75mL)溶液加入到压力容器内的乙酸铵(5.94g，77mmol)中，将反应混合物在氮气下搅拌5min。将反应容器密封，然后置于乙腈预加热至140℃的油浴中，将反应物在该温度下保持6h。将反应物冷却至室温，搅拌过夜，然后再在140℃加热5hr。加入额外的乙酸铵(3.0g)，将反应物在145℃搅拌8小时，冷却至室温，高真空浓缩得到棕色油状物。将该油状物在DCM(～200mL)和1/2饱和碳酸氢钠(～200mL)之间分配。将有机层干燥(MgSO4)、过滤并浓缩。粗品橙色固体化泡沫用Biotage Horizon纯化(20-50％EtOAc/己烷，160g SiO2)，得到咪唑J1b(2.03g)，为黄色固体化泡沫。
LC-MS保留时间2.450min；m/z 404和406.06(1∶1)(MH+)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.89(br s，1H)，7.65(d，J＝6.5Hz，1H)，7.32-7.44(m，2H)，7.26(t，J＝7.8Hz，1H)，4.66(br s，1H)，3.52-3.63(m，1H)，2.51(dd，J＝13.1，8.8Hz，1H)，2.25-2.37(m，1H)，1.66-1.75(m，1H)，1.29(br s，9H)，0.84(ddd，J＝8.2，6.0，5.8Hz，1H)，0.56-0.63(m，1H)。
实施例J1，步骤c
Figure BPA00001479917701311
将氮气鼓泡通入到搅拌的溴化物J1b(854mg，2.18mmol)和1，2-双(三甲基甲锡烷基)乙炔(403mg，1.15mmol)的DMF(10mL)溶液中10分钟。然后加入Pd(PPh3)4(79mg，0.069mmol)，向反应物中通入氮气1min，然后在氮气下，将反应物在90℃下加热17h。将反应混合物冷却至室温，浓缩至粘稠油状物，在Biotage Horizon上纯化(40gSiO2，70-100％EtOAc/己烷，用DCM装载)，得到炔J1c(500mg)，为黄色固体化泡沫状物。
LC-MS保留时间2.876min；m/z 649.51(MH+)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.89(s，2H)，7.67-7.74(m，2H)，7.35-7.44(m，6H)，4.85-5.04(m，2H)，3.64-3.74(m，2H)，3.47-3.56(m，2H)，2.29-2.45(m，2H)，1.90-2.13(m，6H)，1.48(br s，6H)，1.26(br s，12H)。
Figure BPA00001479917701312
将TFA(3mL，38.9mmol)加入到搅拌的氨基甲酸酯J1c(238mg，0.367mmol)的DCE(7mL)溶液中，将反应物室温下搅拌1h。将反应混合物减压浓缩，得到吡咯烷的J1d TFA盐(260mg)，为黄色固体。
LC-MS保留时间2.505min；m/z 449.22(MH+)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.96-8.00(m，2H)，7.79(dt，J＝6.6，2.1Hz，2H)，7.65(s，2H)，7.41-7.48(m，4H)，4.91(t，J＝7.8Hz，2H)，3.44-3.61(m，4H)，2.51-2.62(m，2H)，2.27-2.45(m，4H)，2.16-2.24(m，2H)。
实施例J1-J1.1
将HATU(61.8mg，0.162mmol)加入到搅拌的吡咯烷J1d的TFA盐(110mg，0.12mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(28.5mg，0.162mmol)的DMF(0.7mL)和Hunig′s碱(0.10mL，0.54mmol)的溶液中。将反应混合物室温下搅拌3小时，然后在氮气流下浓缩。反应物经制备型HPLC两次注射纯化(MeOH/水/10mM乙酸铵)，得到为浅黄色固体的实施例J1(31.5mg)和为浅黄色固体的实施例J1.1(41.1mg)。
实施例J1：LC-MS保留时间2.605min；m/z 763.36(MH+)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR代表4∶1旋转异构体混合物。主要旋转异构体为：1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.86(s，2H)，7.64-7.70(m，2H)，7.36-7.43(m，4H)，7.34(s，2H)，5.17(dd，J＝7.8，5.3Hz，2H)，4.24(d，J＝7.3Hz，2H)，3.95-4.04(m，2H)，3.84-3.92(m，2H)，3.66(s，6H)，2.17-2.42(m，6H)，2.00-2.13(m，4H)，0.96(d，J＝6.8Hz，6H)，0.91(d，J＝6.8Hz，6H)。
实施例J1.1：LC-MS保留时间2.620min；m/z 606.23(MH+)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的ShimadzuLC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速3mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR代表3∶1旋转异构体混合物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.94(s，1H)，7.87(s，1H)，7.74(ddd，J＝5.6，3.4，1.8Hz，1H)，7.65-7.70(m，1H)，7.51(s，1H)，7.36-7.44(m，6H)，7.35(s，1H)，5.18(dd，J＝7.7，5.4Hz，1H)，4.68(t，J＝7.8Hz，1H)，4.24(d，J＝7.5Hz，1H)，3.95-4.06(m，1H)，3.85-3.92(m，1H)，3.66(s，3H)，3.35-3.52(m，2H)，2.01-2.50(m，9H)，0.96(d，J＝6.8Hz，3H)，0.91(d，J＝6.8Hz，3H)。
Figure BPA00001479917701331
将HATU(118mg，0.310mmol)加入到搅拌的吡咯烷J1d的TFA盐(93.4mg，0.103mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(67.3mg，0.310mmol)的DIPEA(0.18mL，1.0mmol)和DMF(1mL)溶液中，将反应混合物室温下搅拌2h。将反应物在氮气流下浓缩，溶解于MeOH中，经制备型HPLC纯化(MeOH/水10mM乙酸铵)，得到实施例J2(18.1mg)，为浅粉红色固体。
LC-MS保留时间2.428min；m/z 847.39(MH+)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR呈现的是4∶1旋转异构体混合物。主要旋转异构体是：1H NMR(400MHz，MeOD)δppm7.83(s，2H)，7.62-7.67(m，2H)，7.33-7.42(m，6H)，5.15(dd，J＝7.5，5.5Hz，2H)，4.32(d，J＝8.3Hz，2H)，3.89-4.08(m，6H)，3.66(s，6H)，3.33-3.50(m，6H)，2.23-2.40(m，4H)，2.13-2.22(m，2H)，1.92-2.10(m，4H)，1.61-1.71(m，4H)，1.32-1.56(m，4H)。
Figure BPA00001479917701341
根据溴化物J1b所述的步骤，用酸M3f制备溴化物J3a。
Figure BPA00001479917701351
将氮气鼓泡通入到搅拌的溴化物J3a(825mg，2.041mmol)和1，2-双(三甲基锡烷基)乙炔(378mg，1.074mmol)的DMF(10mL)溶液中10min。然后向该反应混合物中加入Pd(PPh3)4(74.5mg，0.064mmol)，向该反应物中通入氮气1min，然后在氮气下，将反应物在90℃加热17h。将反应混合物冷却至室温，浓缩至稠厚黑色油状物，用DCM稀释，在Biotage Horizon上纯化(40g SiO2，60-100％EtOAc/己烷)，得到炔J3b(312mg)，为黄色固体。
LC-MS保留时间2.800min；m/z 671.53(MH-)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.89(s，2H)，7.70(ddd，J＝5.6，3.3，1.9Hz，2H)，7.38-7.43(m，6H)，4.69(br s，2H)，3.59(br s，2H)，2.53(dd，J＝13.2，8.9Hz，2H)，2.28-2.39(m，2H)，1.68-1.77(m，2H)，1.29-1.31(m，18H)，0.85(dt，J＝8.5，5.8Hz，2H)，0.58-0.64(m，2H)。
实施例J3，步骤c
Figure BPA00001479917701361
将TFA(3mL，38.9mmol)加入到搅拌的氨基甲酸酯J3b(316mg，0.470mmol)的DCE(7mL)溶液中，将反应物室温下搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到吡咯烷J3c的TFA盐(360mg)，为黄色固体。
LC-MS保留时间：2.711min；m/z 473.24(MH+)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。
实施例J3
将HATU(69.6mg，0.183mmol)加入到搅拌的吡咯烷J3c的TFA盐(56.7mg，0.061mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(32.1mg，0.183mmol)的DMF(0.7mL)和Hunig′s碱(0.11mL，0.61mmol)的溶液中，将反应混合物室温下搅拌3h。将反应物在氮气流下浓缩，溶解于MeOH中，经制备型HPLC两次注射纯化(MeOH/水10mM乙酸铵)，得到实施例J3(31.8mg)，为浅黄色固体。
LC-MS保留时间2.605min；m/z 787.36(MH+)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.87(s，2H)，7.65-7.71(m，2H)，7.37-7.43(m，4H)，7.36(s，2H)，5.16(dd，J＝8.8，4.8Hz，2H)，4.59(d，J＝6.5Hz，2H)，3.67(s，6H)，3.63-3.68(m，2H)，2.49-2.58(m，2H)，2.37-2.45(m，2H)，2.10-2.21(m，2H)，1.98-2.07(m，2H)，1.12(ddd，J＝8.7，5.6，5.5Hz，2H)，1.01(d，J＝6.8Hz，6H)，0.93(d，J＝6.8Hz，6H)，0.78(br s，2H)。
将HATU(120mg，0.317mmol)加入到搅拌的吡咯烷J3c的TFA盐(98mg，0.106mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(68.8mg，0.317mmol)的DIPEA(0.18mL，1.1mmol)和DMF(1mL)溶液中，将反应物室温下搅拌3h。将反应物在氮气流下浓缩，溶解于MeOH中，经制备型HPLC纯化(MeOH/水10mM乙酸铵)，然后经制备型HPLC再次纯化(MeOH/水0.1％TFA)，得到实施例J4的TFA盐(18mg)，为白色固体。
LC-MS保留时间2.463min；m/z 869.40(MH-)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.89-7.92(m，2H)，7.87(s，2H)，7.74(dt，J＝7.8，1.5Hz，2H)，7.61-7.66(m，2H)，7.54-7.60(m，2H)，5.11(dd，J＝9.0，7.0Hz，2H)，4.59(d，J＝7.5Hz，2H)，3.91-3.99(m，4H)，3.83(t，J＝4.8Hz，2H)，3.67(s，6H)，3.33-3.45(m，4H)，2.67(dd，J＝13.7，9.4Hz，2H)，2.43-2.52(m，2H)，2.02-2.14(m，4H)，1.39-1.63(m，8H)，1.03-1.11(m，2H)，0.83-0.90(m，2H)。
Figure BPA00001479917701381
将氮气鼓泡通入到搅拌的(S)-2-(4-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(溴化物D-1b)(400mg，1.02mmol)、4-乙炔基苯基硼酸(149mg，1.02mmol)和碳酸氢钠(214mg，2.55mmol)的DME(8mL)和水(2mL)溶液中15min。然后加入Pd(PPh3)4(58.9mg，0.051mmol)，继续通入氮气5min，然后将反应容器密封并在90℃加热过夜。将反应物冷却，用THF稀释，用盐水洗涤，浓缩至干。残留物经Biotage Horizon纯化(60-90％EtOAc/己烷)，得到氨基甲酸酯J5a(85mg)，为黄色固体。
LC-MS保留时间2.911min；m/z 723.64(MH-)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：3min，保持时间：1min，分析时间：4min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.78(d，J＝8.0Hz，2H)，7.72(d，J＝8.0Hz，2H)，7.64-7.69(m，4H)，7.58(d，J＝8.3Hz，2H)，7.52(d，J＝8.3Hz，2H)，7.31-7.41(m，2H)，4.86-5.03(m，2H)，3.68(br s，2H)，3.46-3.57(m，2H)，2.37(br s，2H)，1.89-2.13(m，6H)，1.47(br s，6H)，1.25(br s，12H)。
Figure BPA00001479917701391
将TFA(250μL，3.24mmol)加入到氨基甲酸酯J5a在DCE(1mL)的溶液中，将反应物室温下搅拌1.5hr。在氮气流下浓缩反应物，得到吡咯烷J5b的TFA盐(45mg)。LC-MS保留时间2.928min；m/z525.32(MH+)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C183.0x50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AVUV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：4min，保持时间：1min，分析时间：5min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。
实施例J5
将HATU(53mg，0.14mmol)加入到J5b的TFA盐(45mg，0.046mmol)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(24.2mg，0.138mmol)的DMF(0.7mL)和TEA(0.038mL，0.28mmol)溶液中，将反应物搅拌30min。将反应物用MeOH稀释，过滤，经制备型HPLC纯化(MeOH/水，带有10mM乙酸铵)，得到实施例J5(14.7mg)，为浅黄色固体。
LC-MS保留时间2.728min；m/z 839.57(MH+)。LC数据采用配备有Phenomenex-Luna 10u C18 3.0x50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪记录，采用SPD-10AV UV-Vis检测器，检测波长220nM。采用以下洗脱条件：流速4mL/min，梯度100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间：4min，保持时间：1min，分析时间：5min，其中溶剂A是5％MeOH/95％H2O/10mM乙酸铵和溶剂B是5％H2O/95％MeOH/10mM乙酸铵。MS数据采用LC的Micromass Platform，以电喷射模式测定。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.73-7.78(m，2H)，7.65-7.71(m，6H)，7.57-7.62(m，2H)，7.52(d，J＝8.5Hz，2H)，7.33-7.36(m，2H)，5.18(dt，J＝7.6，5.2Hz，2H)，4.21-4.27(m，2H)，3.96-4.05(m，2H)，3.84-3.92(m，2H)，3.66(s，6H)，2.17-2.42(m，6H)，2.00-2.13(m，4H)，0.95(dd，J＝6.8，1.3Hz，6H)，0.91(dd，J＝6.8，1.0Hz，6H)。
一般caps的合成
化合物分析条件：纯度测定和低分辨率质谱分析采用连接WatersMicromass ZQ MS系统的Shimadzu LC系统进行。应注意的是保留时间在不同仪器之间可稍有变化。本章节可应用其它LC条件，除非另有说明。
Cond.-MS-W1
Figure BPA00001479917701401
Cond.-MS-W2
Figure BPA00001479917701411
Cond.-MS-W5
Figure BPA00001479917701412
Cond.-D1
Figure BPA00001479917701413
Figure BPA00001479917701421
Cond.-D2
Cond.-MD1
Figure BPA00001479917701423
Cond.-M3
条件OL1
条件OL2
Figure BPA00001479917701433
Figure BPA00001479917701441
条件I
Figure BPA00001479917701442
条件II
条件III
Figure BPA00001479917701444
Figure BPA00001479917701451
Figure BPA00001479917701452
将10％Pd/C(2.0g)在甲醇(10mL)中的混悬液加入到(R)-2-苯基甘氨酸(10g，66.2mmol)、甲醛(33mL 37％wt.在水中)、1N HCl(30mL)和甲醇(30mL)混合物中，并暴露于H2(60psi)下3小时。将反应混合物通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917701453
)过滤，真空浓缩滤液。将得到的粗产物用异丙醇重结晶，得到Cap-1的HCl盐，为白色针状物(4.0g)。旋光度：-117.1°[c＝9.95mg/mL，H2O；λ＝589nm]。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，500MHz)：δ7.43-7.34(m，5H)，4.14(s，1H)，2.43(s，6H)；LC(Cond.I)：RT＝0.25；LC/MS：[M+H]+ C10H14NO2分析计算值：180.10；实测值：180.17；HRMS：[M+H]+ C10H14NO2分析计算值：180.1025；实测值：180.1017。
Figure BPA00001479917701454
用数分钟，将NaBH3CN(6.22g，94mmol)分次加入到冷却的(冰/水)(R)-2-苯基甘氨酸(6.02g，39.8mmol)和甲醇(100mL)的混合液中，搅拌5分钟。用10分钟滴加入乙醛(10mL)，继续在相同的冷却温度下搅拌45分钟，再在室温下搅拌～6.5小时。将反应混合物用冰水浴再冷却，用水(3mL)处理，然后用45分钟滴加入浓HCl进行猝灭，直至混合物的pH为约1.5-2.0。移去冷却浴，继续搅拌，同时加入浓HCl以保持混合物的pH在约1.5-2.0。将反应混合物搅拌过夜，过滤移出白色混悬物，真空浓缩滤液。将粗产物用乙醇重结晶，得到两批Cap-2的HCl盐，为亮白色固体(批-1：4.16g；批-2：2.19g)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：10.44(1.00，br s，1H)，7.66(m，2H)，7.51(m，3H)，5.30(s，1H)，3.15(br m，2H)，2.98(br m，2H)，1.20(app br s，6H)。批-1：[α]25-102.21°(c＝0.357，H2O)；批-2：[α]25-99.7°(c＝0.357，H2O)。LC(Cond.I)：RT＝0.43min；LC/MS：[M+H]+C12H18NO2分析计算值：208.13；实测值：208.26。
Figure BPA00001479917701461
将甲醛(5.0mL，89.1mmol)和10％Pd/C(720mg)在甲醇/H2O中(4mL/1mL)的混悬液顺次加入到冷却的(～15℃)(R)-2-苯基甘氨酸(3.096g，20.48mmol)、1N HCl(30mL)和甲醇(40mL)的混合液中。移去冷却浴，将反应混合物在H2气囊下搅拌17小时。再加入乙醛(10mL，178.2mmol)，并继续在H2气氛下搅拌24小时[注意：整个反应中如果需要再充填H2]。将反应混合物通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917701462
)过滤，真空浓缩滤液。将得到的粗产物从异丙醇中重结晶，得到(R)-2-(乙基氨基)-2-苯基乙酸的HCl盐，为亮白色固体(2.846g)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：δ14.15(br s，1H)，9.55(br s，2H)，7.55-7.48(m，5H)，2.88(brm，1H)，2.73(br m，1H)，1.20(app t，J＝7.2，3H).LC(Cond.I)：RT＝0.39min；＞95％均一性指数；LC/MS：[M+H]+ C10H14NO2分析计算值：180.10；实测值：180.18。
将10％Pd/C(536mg)的甲醇/H2O(3mL/1mL)混悬液加入到(R)-2-(乙基氨基)-2-苯基乙酸/HCl(1.492g，6.918mmol)、甲醛(20mL37％wt.在水中)、1N HCl(20mL)和甲醇(23mL)的混合液中。将反应混合物在H2气囊下搅拌～72小时，其中若需要时可再供应H2。将反应混合物通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917701471
)过滤，真空浓缩滤液。将得到的粗产物从异丙醇(50mL)中重结晶，得到Cap-3的HCl盐，为白色固体(985mg)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：δ10.48(br s，1H)，7.59-7.51(m，5H)，5.26(s，1H)，3.08(app br s，2H)，2.65(br s，3H)，1.24(br m，3H).LC(Cond.I)：RT＝0.39min；＞95％均一性指数；LC/MS：[M+H]+C11H16NO2分析计算值：194.12；实测值：194.18；HRMS：[M+H]+C11H16NO2分析计算值：194.1180；实测值：194.1181。
Figure BPA00001479917701472
用6min，将ClCO2Me(3.2mL，41.4mmol)滴加到冷却的(冰/水)(R)-2-氨基-2-苯基乙酸叔丁基酯/HCl(9.877g，40.52mmol)和二异丙基乙胺(14.2mL，81.52mmol)的THF(410mL)半溶液中，在相似温度下搅拌5.5小时。真空除去挥发性成分，将残留物在水(100mL)和乙酸乙酯(200mL)之间分配。将有机层用1N HCl(25mL)和饱和NaHCO3溶液(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将得到的无色油状物用己烷研磨，过滤，用己烷(100mL)洗涤，得到(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-苯基乙酸叔丁基酯，为白色固体(7.7g)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：7.98(d，J＝8.0，1H)，7.37-7.29(m，5H)，5.09(d，J＝8，1H)，3.56(s，3H)，1.33(s，9H).LC(Cond.I)：RT＝1.53min；～90％均一性指数；LC/MS：[M+Na]+C14H19NNaO4分析计算值：288.12；实测值：288.15。
用7min，将TFA(16mL)滴加入冷却的(冰/水)以上产物的CH2Cl2(160mL)溶液中，移去冷却浴，将反应混合物搅拌20小时。由于脱保护尚未完成，再加入TFA(1.0mL)，再继续搅拌2小时。真空除去挥发性成分，将得到的油状残留物用乙醚(15mL)和己烷(12mL)处理，得到沉淀物。过滤沉淀，用乙醚/己烷(～1∶3比率；30mL)洗涤，真空干燥得到Cap-4，为蓬松白色固体(5.57g)。旋光度：-176.9°[c＝3.7mg/mL，H2O；λ＝589nm].1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：δ12.84(br s，1H)，7.96(d，J＝8.3，1H)，7.41-7.29(m，5H)，5.14(d，J＝8.3，1H)，3.55(s，3H).LC(Cond.I)：RT＝1.01min；＞95％均一性指数；LC/MS：[M+H]+C10H12NO4分析计算值：210.08；实测值：210.17；HRMS：[M+H]+C10H12NO4分析计算值：210.0766；实测值：210.0756。
Figure BPA00001479917701481
将(R)-2-苯基甘氨酸(1.0g，6.62mmol)、1，4-二溴丁烷(1.57g，7.27mmol)和Na2CO3(2.10g，19.8mmol)在乙醇(40mL)中的混合物在100℃下加热21小时。将反应混合物冷却至室温，过滤，真空浓缩滤液。将残留物溶解于乙醇中，用1N HCl酸化至pH 3-4，真空除去挥发物。得到的粗产物经反相HPLC纯化(水/甲醇/TFA)，得到Cap-5的TFA盐，为半固体粘稠白色泡沫(1.0g)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，500MHz)δ10.68(br s，1H)，7.51(m，5H)，5.23(s，1H)，3.34(app br s，2H)，3.05(app br s，2H)，1.95(app br s，4H)；RT＝0.30min(Cond.I)；＞98％均一性指数；LC/MS：[M+H]+C12H16NO2分析计算值：206.12；实测值：206.25。
Cap-6
Figure BPA00001479917701491
通过使用制备Cap-5的方法，从(R)-2-苯基甘氨酸和1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷合成Cap-6的TFA盐。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，500MHz)δ12.20(br s，1H)，7.50(m，5H)，4.92(s，1H)，3.78(app br s，4H)，3.08(app br s，2H)，2.81(app br s，2H)；RT＝0.32min(Cond.I)；＞98％；LC/MS：[M+H]+C12H16NO3分析计算值：222.11；实测值：222.20；HRMS：[M+H]+C12H16NO3分析计算值：222.1130；实测值：222.1121。
将对甲苯磺酰氯(8.65g，45.4mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液滴加入冷却(-5℃)的(S)-2-羟基-2-苯基乙酸苄基酯(10.0g，41.3mmol)、三乙胺(5.75mL，41.3mmol)和4-二甲氨基吡啶(0.504g，4.13mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液中，同时保持温度在-5℃和0℃之间。将反应物在0℃搅拌9小时，然后在冰箱中(-25℃)储存14小时。将其融化至室温温度，用水(200mL)、1N HCl(100mL)和盐水(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩，得到2-苯基-2-(甲苯磺酰氧基)乙酸苄基酯，为粘稠油状物，起放置后固化(16.5g)。未检测该产物的手性完整性，产物不经进一步纯化直接用于下一步骤中。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，500MHz)δ7.78(d，J＝8.6，2H)，7.43-7.29(m，10H)，7.20(m，2H)，6.12(s，1H)，5.16(d，J＝12.5，1H)，5.10(d，J＝12.5，1H)，2.39(s，3H)。RT＝3.00(Cond.III)；＞90％均一性指数；LC/MS：[M+H]+C22H20NaO5S分析计算值：419.09；实测值：419.04。
将2-苯基-2-(甲苯磺酰氧基)乙酸苄基酯(6.0g，15.1mmol)、1-甲基哌嗪(3.36mL，30.3mmol)和N，N-二异丙基乙胺(13.2mL，75.8mmol)的THF(75mL)溶液在65℃下加热7小时。将反应物冷却至室温，真空除去挥发性成分。将残留物在乙酸乙酯和水之间分配，将有机层用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。得到的粗物质经快速层析纯化(硅胶，乙酸乙酯)，得到2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-苯基乙酸苄基酯，为橙棕色粘稠油状物(4.56g)。手性HPLC分析(Chiralcel OD-H)表明该样品为比例38.2∶58.7的对映体混合物。对映体分离如下进行：将产物溶解于120mL乙醇/庚烷(1∶1)中，注射(5mL/注射)到手性HPLC柱(Chiracel OJ，5cm ID x 50cm L，20μm)上，用85∶15庚烷/乙醇洗脱，流速75mL/min，于220nm检测。回收对映体-1(1.474g)和对映体-2(2.2149g)，为粘稠油状物。1H NMR(CDCl3，δ＝7.26，500MHz)7.44-7.40(m，2H)，7.33-7.24(m，6H)，7.21-7.16(m，2H)，5.13(d，J＝12.5，1H)，5.08(d，J＝12.5，1H)，4.02(s，1H)，2.65-2.38(app br s，8H)，2.25(s，3H)。RT＝2.10(Cond.III)；＞98％均一性指数；LC/MS：[M+H]+C20H25N2O2分析计算值：325.19；实测值：325.20。
将2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-苯基乙酸苄基酯的任一对映体(1.0g，3.1mmol)的甲醇(10mL)溶液加入到10％Pd/C(120mg)的甲醇(5.0mL)混悬液中。将反应混合物暴露于氢气气囊下小于50分钟，小心监测。反应完成后，立即通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917701501
)过滤混合物，真空浓缩滤液得到Cap-7，污染有苯基乙酸，为黄褐色泡沫状物(867.6mg；质量为以上理论收率)。该产物不经进一步纯化直接用于下一步骤中。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，500MHz)δ7.44-7.37(m，2H)，7.37-7.24(m，3H)，3.92(s，1H)，2.63-2.48(app.br s，2H)，2.48-2.32(m，6H)，2.19(s，3H)；RT＝0.31(Cond.II)；＞90％均一性指数；LC/MS：[M+H]+C13H19N2O2分析计算值：235.14；实测值：235.15；HRMS：[M+H]+C13H19N2O2分析计算值：235.1447；实测值：235.1440。
Cap-8和Cap-9的合成根据Cap-7的合成法进行，但用适当的胺进行SN2取代步骤(即，4-羟基哌啶用于Cap-8和(S)-3-氟吡咯烷用于Cap-9)，并改变分离各个立体异构中间体的条件，如下所示。
Figure BPA00001479917701511
中间体2-(4-羟基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸苄基酯的对映体分离通过采用下列条件进行：将所述化合物(500mg)溶解于乙醇/庚烷(5mL/45mL)中。将得到的溶液注射(5mL/注射)到手性HPLC柱(Chiracel OJ，2cm ID x 25cm L，10μm)上，用80∶20庚烷/乙醇以10mL/min流速洗脱，于220nm检测，得到186.3mg对映体-1和209.1mg对映体-2，为浅黄色粘稠油状物。根据制备Cap-7方法，将这些苄酯氢解得到Cap-8：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，500MHz)7.40(d，J＝7，2H)，7.28-7.20(m，3H)，3.78(s 1H)，3.46(m，1H)，2.93(m，1H)，2.62(m，1H)，2.20(m，2H)，1.70(m，2H)，1.42(m，2H)。RT＝0.28(Cond.II)；＞98％均一性指数；LC/MS：[M+H]+C13H18NO3分析计算值：236.13；实测值：236.07；HRMS：[M+H]+C13H18NO3计算值：236.1287；实测值：236.1283。
Figure BPA00001479917701512
中间体2-((S)-3-氟吡咯烷-1-基)-2-苯基乙酸苄基酯的对映体分离通过采用下列条件进行：将所述酯(220mg)在手性HPLC柱(ChiracelOJ-H，0.46cm ID x 25cm L，5μm)上分离，用95％CO2/含0.1％TFA的5％甲醇洗脱，柱压10巴，流速70mL/min，柱温35℃。浓缩HPLC洗脱的各立体异构体，将残留物溶解于CH2Cl2(20mL)，用水性介质洗涤(10mL水+1mL饱和NaHCO3溶液)。将有机相干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩，得到92.5mg流分-1和59.6mg流分-2。根据Cap-7的制备方法，将这些苄基酯氢解制备Caps 9a和9b。Cap-9a(非对映体-1：该样品为TFA盐，经反相HPLC纯化得到(用H2O/甲醇/TFA溶剂洗脱)：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，400MHz)7.55-7.48(m，5H)，5.38(d ofm，J＝53.7，1H)，5.09(br s，1H)，3.84-2.82(br m，4H)，2.31-2.09(m，2H)。RT＝0.42(Cond.I)；＞95％均一性指数；LC/MS：[M+H]+C12H15FNO2分析计算值：224.11；实测值：224.14。Cap-9b(非对映体-2)：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，400MHz)7.43-7.21(m，5H)，5.19(d of m，J＝55.9，1H)，3.97(s，1H)，2.95-2.43(m，4H)，2.19-1.78(m，2H).RT＝0.44(Cond.I)；LC/MS：[M+H]+C12H15FNO2分析计算值：224.11；实测值：224.14。
Figure BPA00001479917701521
向D-脯氨酸(2.0g，17mmol)和甲醛(2.0mL 37％wt在H2O中)的甲醇(15mL)溶液中加入10％Pd/C(500mg)在甲醇(5mL)中的混悬液中。在氢气气囊下，将混合物搅拌23小时。将反应混合物通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917701522
)过滤，真空浓缩得到Cap-10，为灰白色固体(2.15g)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，500MHz)3.42(m，1H)，3.37(dd，J＝9.4，6.1，1H)，2.85-2.78(m，1H)，2.66(s，3H)，2.21-2.13(m，1H)，1.93-1.84(m，2H)，1.75-1.66(m，1H)。RT＝0.28(Cond.II)；＞98％均一性指数；LC/MS：[M+H]+C6H12NO2分析计算值：130.09；实测值：129.96。
在氢气气囊下，将(2S，4R)-4-氟吡咯烷-2-甲酸(0.50g，3.8mmol)、甲醛(0.5mL of 37％wt.在H2O中)、12N HCl(0.25mL)和10％Pd/C(50mg)在甲醇(20mL)中的混合液搅拌19小时。将反应混合物通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917701531
)过滤，真空浓缩滤液。将残留物从异丙醇中重结晶，得到Cap-11的HCl盐，为白色固体(337.7mg)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，500MHz)5.39(d m，J＝53.7，1H)，4.30(m，1H)，3.90(ddd，J＝31.5，13.5，4.5，1H)，3.33(dd，J＝25.6，13.4，1H)，2.85(s，3H)，2.60-2.51(m，1H)，2.39-2.26(m，1H).RT＝0.28(Cond.II)；＞98％均一性指数；LC/MS：[M+H]+C6H11FNO2分析计算值：148.08；实测值：148.06。
Figure BPA00001479917701532
将L-丙氨酸(2.0g，22.5mmol)溶解于10％碳酸氢钠水溶液(50mL)中，向其中加入氯甲酸甲酯(4.0mL)的THF(50mL)溶液。将反应混合物在环境条件下搅拌4.5小时，真空浓缩。将得到的白色固体溶解于水中，用1N HCl酸化至pH～2-3。将得到的溶液用乙酸乙酯提取(3x100mL)，将合并的有机相干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到无色油状物(2.58g)。500mg该物质经反相HPLC纯化(H2O/甲醇/TFA)，得到150mg Cap-12，为无色油状物。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，500MHz)7.44(d，J＝7.3，0.8H)，7.10(br s，0.2H)，3.97(m，1H)，3.53(s，3H)，1.25(d，J＝7.3，3H)。
Figure BPA00001479917701533
在氢气气氛(50psi)下，将L-丙氨酸(2.5g，28mmol)、甲醛(8.4g，37wt.％)、1N HCl(30mL)和10％Pd/C(500mg)在甲醇(30mL)中的混合物搅拌5小时。将反应混合物通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917701534
)过滤，真空浓缩滤液，得到Cap-13的HCl盐，为油状物，起在真空下放置后固化(4.4g；以上物质为理论收率)。该物质不经进一步纯化而使用。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5，500MHz)δ12.1(br s，1H)，4.06(q，J＝7.4，1H)，2.76(s，6H)，1.46(d，J＝7.3，3H)。
Figure BPA00001479917701541
步骤1：0℃下，将(R)-(-)-D-苯基甘氨酸叔丁基酯(3.00g，12.3mmol)、NaBH3CN(0.773g，12.3mmol)、KOH(0.690g，12.3mmol)和乙酸(0.352mL，6.15mmol)混合物在甲醇中搅拌。用5分钟，向该混合物中滴加入戊二醛(2.23mL，12.3mmol)。将反应混合物搅拌，同时使其升温至室温，在相同温度下继续搅拌16小时。接着除去溶剂，将残留物用10％NaOH水溶液和乙酸乙酯分配。分离有机相，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩至干，得到澄清油状物。该物质经反相制备型HPLC纯化(Primesphere C-18，30x 100mm；CH3CN-H2O-0.1％TFA)，得到中间体酯(2.70g，56％)，为澄清油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.53-7.44(m，3H)，7.40-7.37(m，2H)，3.87(d，J＝10.9Hz，1H)，3.59(d，J＝10.9Hz，1H)，2.99(t，J＝11.2Hz，1H)，2.59(t，J＝11.4Hz，1H)，2.07-2.02(m，2H)，1.82(d，J＝1.82Hz，3H)，1.40(s，9H).LC/MS：C17H25NO2分析计算值：275；实测值：276(M+H)+。
步骤2：向搅拌的所述中间体酯(1.12g，2.88mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入TFA(3mL)。将反应混合物室温下搅拌4小时，然后浓缩至干，得到浅黄色油状物。该油状物采用反相制备型HPLC纯化(Primesphere C-18，30x 100mm；CH3CN-H2O-0.1％TFA)。合并适当的流分，真空浓缩至干。然后将残留物溶解于最少量的甲醇中，装载于MCX LP提取柱(2x 6g)上。将该柱用甲醇(40mL)漂洗，然后将所要求的化合物用2M氨的甲醇(50mL)溶液洗脱。合并含产物的流分，浓缩，然后使残留物溶于水中。冷冻干燥该溶液得到标题化合物(0.492g，78％)，为浅黄色固体。1H NMR(DMSO-d6)δ7.50(s，5H)，5.13(s，1H)，3.09(br s，2H)，2.92-2.89(m，2H)，1.74(m，4H)，1.48(br s，2H).LC/MS：C13H17NO2分析计算值：219；实测值：220(M+H)+。
Figure BPA00001479917701551
步骤1：2-溴-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯：向α-溴苯基乙酸(10.75g，0.050mol)、(S)-(-)-1-苯基乙醇(7.94g，0.065mol)和DMAP(0.61g，5.0mmol)的无水二氯甲烷(100mL)混合物中一次性全部加入固体EDCI(12.46g，0.065mol)。在室温、Ar下，将得到的溶液搅拌18小时，然后用乙酸乙酯稀释，洗涤(H2O x 2，盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，得到灰黄色油状物。该油状物经快速层析(SiO2/己烷-乙酸乙酯，4∶1)，得到标题化合物，为白色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.53-7.17(m，10H)，5.95(q，J＝6.6Hz，0.5H)，5.94(q，J＝6.6Hz，0.5H)，5.41(s，0.5H)，5.39(s，0.5H)，1.58(d，J＝6.6Hz，1.5H)，1.51(d，J＝6.6Hz，1.5H)。
步骤2：(R)-2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯：向2-溴-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(0.464g，1.45mmol)的THF(8mL)溶液中顺次加入三乙胺(0.61mL，4.35mmol)和碘化四丁基铵(0.215g，0.58mmol)。将反应混合物室温下搅拌5分钟，然后加入4-甲基-4-羟基哌啶(0.251g，2.18mmol)的THF(2mL)溶液。将混合物室温下搅拌1小时，然后在55-60℃(油浴温度)加热4小时。随后将冷却的反应混合物用乙酸乙酯(30mL)稀释，洗涤(H2O x2，盐水)，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残留物经硅胶层析纯化(0-60％乙酸乙酯-己烷)，先得到标题化合物的(S，R)-异构体(0.306g，60％)，为白色固体，然后得到对应的(S，S)-异构体(0.120g，23％)，也为白色固体。(S，R)-异构体：1H NMR(CD3OD)δ7.51-7.45(m，2H)，7.41-7.25(m，8H)，5.85(q，J＝6.6Hz，1H)，4.05(s，1H)，2.56-2.45(m，2H)，2.41-2.29(m，2H)，1.71-1.49(m，4H)，1.38(d，J＝6.6Hz，3H)，1.18(s，3H)。LCMS：C22H27NO3分析计算值：353；实测值：354(M+H)+。(S，S)-异构体：1H NMR(CD3OD)δ7.41-7.30(m，5H)，7.20-7.14(m，3H)，7.06-7.00(m，2H)，5.85(q，J＝6.6Hz，1H)，4.06(s，1H)，2.70-2.60(m，1H)，2.51(dt，J＝6.6，3.3Hz，1H)，2.44-2.31(m，2H)，1.75-1.65(m，1H)，1.65-1.54(m，3H)，1.50(d，J＝6.8Hz，3H)，1.20(s，3H)。LCMS：C22H27NO3分析计算值：353；实测值：354(M+H)+。
步骤3：(R)-2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸：向(R)-2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(0.185g，0.52mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)，将混合物室温下搅拌2小时。接着真空除去挥发物，残留物经反相制备型HPLC纯化(Primesphere C-18，20x 100mm；CH3CN-H2O-0.1％TFA)，得到标题化合物(为TFA盐)，为淡淡的浅蓝色固体(0，128g，98％)。LCMS：C14H19NO3分析计算值：249；实测值：250(M+H)+。
步骤1：2-(2-氟苯基)乙酸(S)-1-苯基乙酯：室温下，将2-氟苯基乙酸(5.45g，35.4mmol)、(S)-1-苯基乙醇(5.62g，46.0mmol)、EDCI(8.82g，46.0mmol)和DMAP(0.561g，4.60mmol)在CH2Cl2(100mL)中的混合物搅拌12小时。然后浓缩溶剂，将残留物用H2O-乙酸乙酯分配。分离各相，将水层用乙酸乙酯回提取(2x)。将合并的有机相洗涤(H2O，盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。残留物经硅胶层析纯化(Biotage/0-20％乙酸乙酯-己烷)，得到标题化合物，为无色油状物(8.38g，92％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.32-7.23(m，7H)，7.10-7.04(m，2)，5.85(q，J＝6.5Hz，1H)，3.71(s，2H)，1.48(d，J＝6.5Hz，3H)。
步骤2：2-(2-氟苯基)-2-(哌啶-1-基)乙酸(R)-((S)-1-苯基乙酯)：0℃下，向2-(2-氟苯基)乙酸(S)-1-苯基乙酯(5.00g，19.4mmol)的THF(1200mL)溶液中加入DBU(6.19g，40.7mmol)，将溶液温热至室温，同时搅拌30分钟。然后将该溶液冷却至-78℃，加入CBr4(13.5g，40.7mmol)的THF(100mL)溶液，将混合物温热至-10℃并在该温度下搅拌2小时。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液猝灭，分离各层。将水层用乙酸乙酯回提取(2x)，将合并的有机相洗涤(H2O，盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。向残留物中加入哌啶(5.73mL，58.1mmol)，将该溶液室温下搅拌24小时。然后真空浓缩挥发物，残留物经硅胶层析纯化(Biotage/0-30％乙醚-己烷)，得到纯的非对映体混合物(2∶1比率，经1H NMR确定)，为黄色油状物(2.07g，31％)，带有未反应原料(2.53g，51％)。将所述非对映体混合物进一步层析(Biotage/0-10％乙醚-甲苯)，得到标题化合物，为无色油状物(0.737g，11％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.52(ddd，J＝9.4，7.6，1.8Hz，1H)，7.33-7.40(m，1)，7.23-7.23(m，4H)，7.02-7.23(m，4H)，5.86(q，J＝6.6Hz，1H)，4.45(s，1H)，2.39-2.45(m，4H)，1.52-1.58(m，4H)，1.40-1.42(m，1H)，1.38(d，J＝6.6Hz，3H)。LCMS：C21H24FNO2分析计算值：341；实测值：342(M+H)+。
步骤3：(R)-2-(2-氟苯基)-2-(哌啶-1-基)乙酸：在室温和大气压力(H2气囊)下，将2-(2-氟苯基)-2-(哌啶-1-基)乙酸(R)-((S)-1-苯基乙酯)(0.737g，2.16mmol)和20％Pd(OH)2/C(0.070g)在乙醇(30mL)中的混合物氢化2小时。然后将该溶液用Ar吹扫，通过硅藻土(Celite)过滤，真空浓缩。得到标题化合物，为无色固体(0.503g，98％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.65(ddd，J＝9.1，7.6，1.5Hz，1H)，7.47-7.53(m，1H)，7.21-7.30(m，2H)，3.07-3.13(m，4H)，1.84(br s，4H)，1.62(br s，2H).LCMS：C13H16FNO2分析计算值：237；实测值：238(M+H)+。
Figure BPA00001479917701581
步骤1：(R)-2-(4-羟基-4-苯基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯：向2-溴-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(1.50g，4.70mmol)的THF(25mL)溶液中顺次加入三乙胺(1.31mL，9.42mmol)和碘化四丁基铵(0.347g，0.94mmol)。将反应混合物室温下搅拌5min，然后加入4-苯基-4-羟基哌啶(1.00g，5.64mmol)的THF(5mL)溶液。将混合物搅拌16小时，然后用乙酸乙酯(100mL)稀释，洗涤(H2O x2，盐水)，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残留物经硅胶柱纯化(0-60％乙酸乙酯-己烷)，得到约2∶1非对映体混合物，根据1HNMR判断。使用超临界流体色谱法分离这些异构体(Chiralcel OJ-H，30x 250mm；20％乙醇在CO2中，35℃)，先得到标题化合物的(R)-异构体(0.534g，27％)，为黄色油状物，接着得到对应的(S)-异构体(0.271g，14％)，也为黄色油状物。(S，R)-异构体：1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.55-7.47(m，4H)，7.44-7.25(m，10H)，7.25-7.17(m，1H)，5.88(q，J＝6.6Hz，1H)，4.12(s，1H)，2.82-2.72(m，1H)，2.64(dt，J＝11.1，2.5Hz，1H)，2.58-2.52(m，1H)，2.40(dt，J＝11.1，2.5Hz，1H)，2.20(dt，J＝12.1，4.6Hz，1H)，2.10(dt，J＝12.1，4.6Hz，1H)，1.72-1.57(m，2H)，1.53(d，J＝6.5Hz，3H).LCMS：C27H29NO3分析计算值：415；实测值：416(M+H)+；(S，S)-异构体：H1NMR(400MHz，CD3OD)δ7.55-7.48(m，2H)，7.45-7.39(m，2H)，7.38-7.30(m，5H)，7.25-7.13(m，4H)，7.08-7.00(m，2H)，5.88(q，J＝6.6Hz，1H)，4.12(s，1H)，2.95-2.85(m，1H)，2.68(dt，J＝11.1，2.5Hz，1H)，2.57-2.52(m，1H)，2.42(dt，J＝11.1，2.5Hz，1H)，2.25(dt，J＝12.1，4.6Hz，1H)，2.12(dt，J＝12.1，4.6Hz，1H)，1.73(dd，J＝13.6，3.0Hz，1H)，1.64(dd，J＝13.6，3.0Hz，1H)，1.40(d，J＝6.6Hz，3H)。LCMS：C27H29NO3分析计算值：415；实测值：416(M+H)+。
以类似方式制备下列酯：
Figure BPA00001479917701591
Figure BPA00001479917701601
测定保留时间的手性SFC条件
条件I
柱：Chiralpak AD-H柱，4.62x50mm，5μm
溶剂：90％CO2-含有0.1％DEA的10％甲醇，
温度：35℃
压力：150巴
流速：2.0mL/min
UV检测波长：220nm
进样量：1.0mg/3mL甲醇
条件II
柱：Chiralcel OD-H柱，4.62x50mm，5μm
溶剂：90％CO2-含有0.1％DEA的10％甲醇，
温度：35℃
压力：150巴
流速：2.0mL/min
UV检测波长：220nm
进样量：1.0mg/mL甲醇
Cap 17，步骤2：(R)-2-(4-羟基-4-苯基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸：向(R)-2-(4-羟基-4-苯基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯乙酯(0.350g，0.84mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)，将混合物室温下搅拌2小时。接着真空除去挥发物，残留物经反相制备型HPLC纯化(Primesphere C-18，20x 100mm；CH3CN-H2O-0.1％TFA)，得到标题化合物(为TFA盐)，为白色固体(0.230g，88％)。LCMS：C19H21NO3分析计算值：311.15；实测值：312(M+H)+。
以类似的方式制备光学纯形式的下列羧酸：
Figure BPA00001479917701611
测定保留时间的LCMS条件
条件I
柱：Phenomenex-Luna 4.6X 50mm S10
起始％B＝0
最终％B＝100
梯度时间＝4min
流速＝4mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％甲醇-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％甲醇-10％H2O-0.1％TFA
条件II
柱：Waters-Sunfire 4.6X 50mm S5
起始％B＝0
最终％B＝100
梯度时间＝2min
流速＝4mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％甲醇-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％甲醇-10％H2O-0.1％TFA
条件III
柱：Phenomenex 10μ3.0X 50mm
起始％B＝0
最终％B＝100
梯度时间＝2min
流速＝4mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％甲醇-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％甲醇-10％H2O-0.1％TFA
Figure BPA00001479917701631
步骤1：(R，S)-2-(4-吡啶基)-2-溴乙酸乙酯：0℃、氩气下，向4-吡啶基乙酸乙酯(1.00g，6.05mmol)的无水THF(150mL)溶液中加入DBU(0.99mL，6.66mmol)。用30分钟将反应混合物温热至室温，然后冷却至-78℃。向该混合物中加入CBr4(2.21g，6.66mmol)，继续在-78℃下搅拌2小时。然后将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液猝灭，分离各相。将有机相洗涤(盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤并减压浓缩。得到的黄色油状物立即经快速层析纯化(SiO2/己烷-乙酸乙酯，1∶1)，得到标题化合物(1.40g，95％)，为稍不稳定黄色油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.62(dd，J＝4.6，1.8Hz，2H)，7.45(dd，J＝4.6，1.8Hz，2H)，5.24(s，1H)，4.21-4.29(m，2H)，1.28(t，J＝7.1Hz，3H).LCMS：C9H10BrNO2分析计算值：242，244；实测值：243，245(M+H)+。
步骤2：(R，S)-2-(4-吡啶基)-2-(N，N-二甲氨基)乙酸乙酯：室温下，向(R，S)-2-(4-吡啶基)-2-溴乙酸乙酯(1.40g，8.48mmol)的DMF(10mL)溶液中加入二甲胺(2M的THF溶液，8.5mL，17.0mmol)。反应完成后(根据薄层色谱判断)，真空除去挥发物，残留物经快速层析纯化(Biotage，40+M SiO2柱；50％-100％乙酸乙酯-己烷)，得到标题化合物(0.539g，31％)，为浅黄色油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.58(d，J＝6.0Hz，2H)，7.36(d，J＝6.0Hz，2H)，4.17(m，2H)，3.92(s，1H)，2.27(s，6H)，1.22(t，J＝7.0Hz).LCMS：C11H16N2O2分析计算值：208；实测值：209(M+H)+。
步骤3：(R，S)-2-(4-吡啶基)-2-(N，N-二甲氨基)乙酸：室温下，向2-(4-吡啶基)-2-(N，N-二甲氨基)乙酸(R，S)-乙酯(0.200g，0.960mmol)的THF-甲醇-H2O混合液(1∶1∶1，6mL)的溶液中加入粉末状LiOH(0.120g，4.99mmol)。将该溶液搅拌3小时，然后用1N HCl酸化至pH 6。将水层用乙酸乙酯洗涤，然后冷冻干燥得到标题化合物的二盐酸盐，为黄色固体(含有LiCl)。该产物原样用于随后的步骤中。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.49(d，J＝5.7Hz，2H)，7.34(d，J＝5.7Hz，2H)，3.56(s，1H)，2.21(s，6H)。
下列实施例采用上述方法以类似的方式制备：
Figure BPA00001479917701641
Figure BPA00001479917701661
Figure BPA00001479917701662
步骤1：(R，S)-2-(喹啉-3-基)-2-(N，N-二甲基氨基)-乙酸乙酯：用氩气泡流鼓泡使N，N-二甲基氨基乙酸乙酯(0.462g，3.54mmol)、K3PO4(1.90g，8.95mmol)、Pd(t-Bu3P)2(0.090g，0.176mmol)和甲苯(10mL)的混合物脱气15分钟。然后将反应混合物在100℃下加热12小时，之后冷却至室温后倒入H2O中。混合物用乙酸乙酯萃取(2次)，合并的有机相经洗涤(H2O，盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤后真空浓缩。残余物先用反相制备型HPLC纯化(Primesphere C-18，30x 100mm；CH3CN-H2O-5mM NH4OAc)，然后用快速色谱法纯化(SiO2/己烷-乙酸乙酯，1∶1)，得到标题化合物(0.128g，17％，橙色油状物)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.90(d，J＝2.0Hz，1H)，8.32(d，J＝2.0Hz，1H)，8.03-8.01(m，2H)，7.77(ddd，J＝8.3，6.8，1.5Hz，1H)，7.62(ddd，J＝8.3，6.8，1.5Hz，1H)，4.35(s，1H)，4.13(m，2H)，2.22(s，6H)，1.15(t，J＝7.0Hz，3H)。LCMS：对于C15H18N2O2分析计算值：258；实测值：259(M+H)+。
步骤2：(R，S)-2-(喹啉-3-基)-2-(N，N-二甲基氨基)乙酸：将(R，S)-2-(喹啉-3-基)-2-(N，N-二甲基氨基)乙酸乙酯(0.122g，0.472mmol)和6M HCl(3mL)的混合物在100℃下加热12小时。真空除去溶剂后，得到标题化合物的二盐酸盐(0.169g，＞100％，浅黄色泡沫状物)。该含杂质的产物无需进一步纯化便可用于后续步骤。LCMS：对于C13H14N2O2分析计算值：230；实测值：231(M+H)+。
Figure BPA00001479917701671
步骤1：(R)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯乙基)酯和(S)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯乙基)酯：向(RS)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸(2.60g，13.19mmol)、DMAP(0.209g，1.71mmol)和(S)-1-苯基乙醇(2.09g，17.15mmol)在CH2Cl2(40mL)中的混合物中加入EDCI(3.29g，17.15mmol)，将混合物在室温下搅拌12小时。然后真空除去溶剂，残余物用乙酸乙酯-H2O进行分配。分离各层后，水层用乙酸乙酯反萃取(2次)，合并的有机相经洗涤(H2O，盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤后真空浓缩。残余物用硅胶色谱法纯化(Biotage/0-50％乙醚-己烷)。然后，所得纯的非对映体混合物用反相制备型HPLC分离(Primesphere C-18，30x 100mm；CH3CN-H2O-0.1％TFA)，先得到(R)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸(S)-1-苯乙基酯(0.501g，13％)，然后得到(S)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)-乙酸(S)-1-苯乙基酯(0.727g，18％)，均为其TFA盐。(S，R)-异构体：1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.65-7.70(m，1H)，7.55-7.60(ddd，J＝9.4，8.1，1.5Hz，1H)，7.36-7.41(m，2H)，7.28-7.34(m，5H)，6.04(q，J＝6.5Hz，1H)，5.60(s，1H)，2.84(s，6H)，1.43(d，J＝6.5Hz，3H)。LCMS：对于C18H20FNO2分析计算值：301；实测值：302(M+H)+；(S，S)-异构体：1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.58-7.63(m，1H)，7.18-7.31(m，6H)，7.00(dd，J＝8.5，1.5Hz，2H)，6.02(q，J＝6.5Hz，1H)，5.60(s，1H)，2.88(s，6H)，1.54(d，J＝6.5Hz，3H)。LCMS：对于C18H20FNO2分析计算值：301；实测值：302(M+H)+。
步骤2：(R)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸：在大气压(H2气囊)、室温下，使(R)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯乙基)酯的TFA盐(1.25g，3.01mmol)和20％Pd(OH)2/C(0.125g)在乙醇(30mL)中的混合物氢化4小时。溶液然后用氩气吹扫，通过硅藻土(Celite)过滤后，真空浓缩。这便得到标题化合物(0.503g，98％，无色固体)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.53-7.63(m，2H)，7.33-7.38(m，2H)，5.36(s，1H)，2.86(s，6H)。LCMS：对于C10H12FNO2分析计算值：197；实测值：198(M+H)+。
S-异构体可按类似方式由(S)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯乙基)酯的TFA盐获得。
Figure BPA00001479917701682
在大气压(H2气囊)、室温下，使(R)-(2-氯苯基)甘氨酸(0.300g，1.62mmol)、甲醛(35％水溶液，0.80mL，3.23mmol)和20％Pd(OH)2/C(0.050g)的混合物氢化4小时。溶液然后用氩气吹扫，通过硅藻土(Celite)过滤后，真空浓缩。残余物用反相制备型HPLC纯化(Primesphere C-18，30x 100mm；CH3CN-H2O-0.1％TFA)，得到标题化合物(R)-2-(二甲基氨基)-2-(2-氯苯基)乙酸的TFA盐(0.290g，55％，无色油状物)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.59-7.65(m，2H)，7.45-7.53(m，2H)，5.40(s，1H)，2.87(s，6H)。LCMS：对于C10H12ClNO2分析计算值：213；实测值：214(M+H)+。
Cap-40
向冰冷的(R)-(2-氯苯基)甘氨酸(1.00g，5.38mmol)和NaOH(0.862g，21.6mmol)在H2O(5.5mL)的溶液中滴加氯甲酸甲酯(1.00mL，13.5mmol)。将混合物在0℃下搅拌1小时后，加入浓HCl(2.5mL)将其酸化。混合物用乙酸乙酯萃取(2次)，合并的有机相经洗涤(H2O，盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤后真空浓缩，得到标题化合物(R)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(2-氯苯基)乙酸(1.31g，96％，橙黄色泡沫状物)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.39-7.43(m，2H)，7.29-7.31(m，2H)，5.69(s，1H)，3.65(s，3H)。LCMS：对于C10H10ClNO4分析计算值：243；实测值：244(M+H)+。
Figure BPA00001479917701692
向2-(2-(氯甲基)苯基)乙酸(2.00g，10.8mmol)的THF(20mL)悬浮液中加入吗啉(1.89g，21.7mmol)，将溶液在室温下搅拌3小时。然后反应混合物用乙酸乙酯稀释，用H2O萃取(2次)。将水相冻干后，残余物用硅胶色谱法纯化(Biotage/0-10％甲醇-CH2Cl2)，得到标题化合物2-(2-(吗啉代甲基)苯基)乙酸(2.22g，87％，无色固体)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.37-7.44(m，3H)，7.29-7.33(m，1H)，4.24(s，2H)，3.83(br s，4H)，3.68(s，2H)，3.14(br s，4H)。LCMS：对于C13H17NO3分析计算值：235；实测值：236(M+H)+。
同样采用Cap-41中所述方法制备以下实施例：
Figure BPA00001479917701701
Figure BPA00001479917701702
将HMDS(1.85mL，8.77mmol)加到(R)-2-氨基-2-苯基乙酸对甲苯磺酸盐(2.83g，8.77mmol)的CH2Cl2(10mL)的悬浮液中，将混合物在室温下搅拌30分钟。一次性加入异氰酸甲酯(0.5g，8.77mmol)，继续搅拌30分钟。反应物通过加入H2O(5mL)猝灭，将所得沉淀物过滤，用H2O和正己烷洗涤后，真空干燥。回收得到(R)-2-(3-甲基脲基)-2-苯基乙酸(1.5g；82％)，为白色固体，无需进一步纯化便可使用。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 2.54(d，J＝4.88Hz，3H)5.17(d，J＝7.93Hz，1H)5.95(q，J＝4.48Hz，1H)6.66(d，J＝7.93Hz，1H)7.26-7.38(m，5H)12.67(s，1H)。LCMS：对于C10H12N2O3分析计算值：208.08；实测值：209.121(M+H)+；HPLC Phenomenex C-18 3.0×46mm，0-100％B，2分钟内，1分钟停留时间，A＝90％水，10％甲醇，0.1％TFA，B＝10％水，90％甲醇，0.1％TFA，RT＝1.38min，均一性指数90％。
Figure BPA00001479917701711
所需的产物按照对Cap-45a中所述方法制备。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 0.96(t，J＝7.17Hz，3H)2.94-3.05(m，2H)5.17(d，J＝7.93Hz，1H)6.05(t，J＝5.19Hz，1H)6.60(d，J＝7.63Hz，1H)7.26-7.38(m，5H)12.68(s，1H).LCMS：C11H14N2O3分析计算值：222.10；实测值：223.15(M+H)+.HPLC XTERRA C-18 3.0×506mm，0-100％B进行2min，保持1min，A＝90％水，10％甲醇，0.2％H3PO4，B＝10％水，90％甲醇，0.2％H3PO4，RT＝0.87min，90％均一性指数。
Figure BPA00001479917701712
步骤1：(R)-2-(3，3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯：在10分钟内，向(R)-2-氨基-2-苯基乙酸叔丁酯(1.0g，4.10mmol)和Hunig碱(1.79mL，10.25mmol)的DMF(40mL)的搅拌溶液中滴加二甲氨基甲酰氯(0.38mL，4.18mmol)。在室温下搅拌3小时后，减压浓缩反应物，将所得残余物溶于乙酸乙酯。有机层用H2O、1N HCl水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤后减压浓缩。得到(R)-2-(3，3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯(0.86g；75％，白色固体)，无需进一步纯化便可使用。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.33(s，9H)2.82(s，6H)5.17(d，J＝7.63Hz，1H)6.55(d，J＝7.32Hz，1H)7.24-7.41(m，5H)。LCMS：对于C15H22N2O3分析计算值：278.16；实测值：279.23(M+H)+；HPLCPhenomenex LUNA C-184.6×50mm，0-100％B，4分钟内，1分钟停留时间，A＝90％水，10％甲醇，0.1％TFA，B＝10％水，90％甲醇，0.1％TFA，RT＝2.26min，均一性指数97％。
步骤2：(R)-2-(3，3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸：向((R)-2-(3，3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯(0.86g，3.10mmol)的CH2Cl2(250mL)的搅拌溶液中滴加TFA(15mL)，将所得溶液在室温下搅拌3小时。然后用EtOAC∶己烷(5∶20)的混合物从溶液中析出所需要的化合物，滤出后减压干燥。分离出(R)-2-(3，3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸(0.59g，86％，白色固体)，无需进一步纯化便可使用。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 2.82(s，6H)5.22(d，J＝7.32Hz，1H)6.58(d，J＝7.32Hz，1H)7.28(t，J＝7.17Hz，1H)7.33(t，J＝7.32Hz，2H)7.38-7.43(m，2H)12.65(s，1H)。LCMS：对于C11H14N2O3分析计算值：222.24；实测值：223.21(M+H)+。HPLC XTERRA C-18 3.0×50mm，0-100％B，2分钟内，1分钟停留时间，A＝90％水，10％甲醇，0.2％H3PO4，B＝10％水，90％甲醇，0.2％H3PO4，RT＝0.75min，均一性指数93％。
Figure BPA00001479917701721
步骤1：(R)-2-(3-环戊基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯：在10分钟内，向(R)-2-氨基-2-苯基乙酸盐酸盐(1.0g，4.10mmol)和Hunig碱(1.0mL，6.15mmol)的DMF(15mL)的搅拌溶液中滴加异氰酸环戊酯(0.46mL，4.10mmol)，在室温下搅拌3小时后，减压浓缩反应物，将所得残余物溶于乙酸乙酯。有机层用H2O和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤后减压浓缩，得到(R)-2-(3-环戊基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯(1.32g；100％，不透明油状物)，无需进一步纯化便可使用。1H NMR(500MHz，CD3Cl-D)δppm 1.50-1.57(m，2H)1.58-1.66(m，2H)1.87-1.97(m，2H)3.89-3.98(m，1H)5.37(s，1H)7.26-7.38(m，5H)。LCMS：对于C18H26N2O3分析计算值：318.19；实测值：319.21(M+H)+；HPLCXTERRA C-18 3.0×50mm，0-100％B，4分钟内，1分钟停留时间，A＝90％水，10％甲醇，0.1％TFA，B＝10％水，90％甲醇，0.1％TFA，RT＝2.82min，均一性指数96％。
步骤2：(R)-2-(3-环戊基脲基)-2-苯基乙酸：向(R)-2-(3-环戊基脲基)-2-苯基乙酸叔丁酯(1.31g，4.10mmol)的CH2Cl2(25mL)的搅拌溶液中滴加TFA(4mL)和三乙基硅烷(1.64mL；10.3mmol)，将所得溶液在室温下搅拌6小时。减压除去挥发性成分后，粗产物在乙酸乙酯/戊烷中重结晶，得到(R)-2-(3-环戊基脲基)-2-苯基乙酸(0.69g，64％，白色固体)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.17-1.35(m，2H)1.42-1.52(m，2H)1.53-1.64(m，2H)1.67-1.80(m，2H)3.75-3.89(m，1H)5.17(d，J＝7.93Hz，1H)6.12(d，J＝7.32Hz，1H)6.48(d，J＝7.93Hz，1H)7.24-7.40(m，5H)12.73(s，1H)。LCMS：对于C14H18N2O3分析计算值：262.31；实测值：263.15(M+H)+。HPLC XTERRA C-18 3.0×50mm，0-100％B，2分钟内，1分钟停留时间，A＝90％水，10％甲醇，0.2％H3PO4，B＝10％水，90％甲醇，0.2％H3PO4，RT＝1.24min，均一性指数100％。
Cap-49
Figure BPA00001479917701741
向2-(苄基氨基)乙酸(2.0g，12.1mmol)的甲酸(91mL)的搅拌溶液中加入甲醛(6.94mL，93.2mmol)。在70℃下经过5小时后，将反应混合物减压浓缩至20mL后，白色固体析出。过滤后，收集母液，再次减压浓缩，得到粗产物。用反相制备型HPLC纯化(Xterra 30X 100mm，在220nm下检测，流速35mL/min，0-35％B，8分钟内；A＝90％水，10％甲醇，0.1％TFA，B＝10％水，90％甲醇，0.1％TFA)，得到标题化合物2-(苄基(甲基)-氨基)乙酸的TFA盐(723mg，33％，无色蜡状物)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 2.75(s，3H)4.04(s，2H)4.34(s，2H)7.29-7.68(m，5H)。LCMS：对于C10H13NO2分析计算值：179.09；实测值：180.20(M+H)+。
Figure BPA00001479917701742
向搅拌的3-甲基-2-(甲基氨基)丁酸(0.50g，3.81mmol)的水(30mL)溶液中加入K2CO3(2.63g，19.1mmol)和苄基氯(1.32g，11.4mmol)。将反应混合物室温下搅拌18小时。将反应混合物用乙酸乙酯(30mL x 2)提取，减压浓缩水层得到粗产物，经反相制备型HPLC纯化(Xterra 30x 100mm，检测波长220nm，流速40mL/min，20-80％B进行6min；A＝90％水，10％甲醇，0.1％TFA，B＝10％水，90％甲醇，0.1％TFA)，得到2-(苄基(甲基)氨基)-3-甲基丁酸，TFA盐(126mg，19％)，为无色蜡状物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 0.98(d，3H)1.07(d，3H)2.33-2.48(m，1H)2.54-2.78(m，3H)3.69(s，1H)4.24(s，2H)7.29-7.65(m，5H)。LCMS：C13H19NO2分析计算值：221.14；实测值：222.28(M+H)+。
Figure BPA00001479917701751
将Na2CO3(1.83g，17.2mmol)加到L-缬氨酸(3.9g，33.29mmol)的NaOH(33mL 1M/H2O，33mmol)溶液中，所得溶液用冰水浴冷却。在15分钟内滴加氯甲酸甲酯(2.8mL，36.1mmol)，移开冷却浴后，将反应混合物在环境温度下搅拌3.25小时。反应混合物用乙醚(50mL，3x)洗涤，水相用冰水浴冷却，用浓HCl酸化至pH 1-2的范围后，用CH2Cl2(50mL，3x)萃取。有机相经干燥(MgSO4)并真空蒸发，得到Cap-51(6g，白色固体)。主要旋转异构体的1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，500MHz)：12.54(s，1H)，7.33(d，J＝8.6，1H)，3.84(dd，J＝8.4，6.0，1H)，3.54(s，3H)，2.03(m，1H)，0.87(m，6H)。HRMS：对于[M+H]+C7H14NO4分析计算值：176.0923；实测值：176.0922
Figure BPA00001479917701752
将DIEA(137.5mL，0.766mol)加入到(S)-2-氨基-3-甲基丁酸叔丁基酯盐酸盐(75.0g，0.357mol)的THF(900mL)混悬液中，将混合物冷却至0℃(冰/水浴)。用45分钟滴加入氯甲酸甲酯(29.0mL，0.375mol)，移去冷却浴，将该非均相混合物在室温下搅拌3h。减压除去溶剂，将残留物在EtOAc和水(各1L)之间分配，将有机层用H2O(1L)和盐水(1L)洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩。将粗产物通过硅胶柱(1kg)，用己烷(4L)和15∶85EtOAc/己烷(4L)洗脱，得到(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸叔丁基酯，为澄清油状物(82.0g，99％收率)。1H-NMR(500MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)7.34(d，J＝8.6，1H)，3.77(dd，J＝8.6，6.1，1H)，3.53(s，3H)，1.94-2.05(m，1H)，1.39(s，9H)，0.83-0.92(m，6H)。13C-NMR(126MHz，DMSO-d6，δ＝39.2ppm)170.92，156.84，80.38，60.00，51.34，29.76，27.62，18.92，17.95.LC/MS：[M+Na]+254.17。
将三氟乙酸(343mL，4.62mol)和Et3SiH(142mL，0.887mol)顺次加入到(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸叔丁基酯(82.0g，0.355mol)的CH2Cl2(675mL)溶液中，将混合物室温下搅拌4h。减压除去挥发性成分，将得到的油状物用石油醚(600mL)研磨。得到白色固体，过滤之并用己烷(500mL)和石油醚(500mL)洗涤。从EtOAc/石油醚中重结晶，得到Cap-51，为白色片状结晶(54.8g，88％收率)。MP＝108.5-109.5℃。1H NMR(500MHz，DMSO-d6，δ＝2.5ppm)12.52(s，1H)，7.31(d，J＝8.6，1H)，3.83(dd，J＝8.6，6.1，1H)，3.53(s，3H)，1.94-2.07(m，1H)，0.86(dd，J＝8.9，7.0，6H).13C NMR(126MHz，DMSO-d6，δ＝39.2ppm)173.30，156.94，59.48，51.37，29.52，19.15，17.98。LC/MS：[M+H]+＝176.11。C7H13NO4分析计算值：C，47.99；H，7.48；N，7.99。实测值：C，48.17；H，7.55；N，7.99。旋光度：[α]D＝-4.16(12.02mg/mL；MeOH)。光学纯度：＞99.5％ee。注意：该光学纯度评价在Cap-51的甲酯衍生物上进行，其在标准TMSCHN2(苯/MeOH)酯化方案下进行。HPLC分析条件：柱：ChiralPak AD-H(4.6x 250mm，5μm)，溶剂：95％庚烷/5％IPA(等度)；流速：1mL/min；柱温：35℃；UV 205nm检测。
[注释：Cap 51也可购自Flamm。]
Figure BPA00001479917701761
根据对合成Cap-51所述的方法，自L-丙氨酸合成Cap-52。为表征其特征，将部分粗产物经反相HPLC纯化(H2O/甲醇/TFA)，得到无色粘稠油状物的Cap-52。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，500MHz)：12.49(br s，1H)，7.43(d，J＝7.3，0.88H)，7.09(app br s，0.12H)，3.97(m，1H)，3.53(s，3H)，1.25(d，J＝7.3，3H)。
按照用于合成Cap-51所述的方法，由合适的原料制备Cap-53至Cap-64，若有任何改变就会注明。
Figure BPA00001479917701771
Figure BPA00001479917701781
Figure BPA00001479917701791
Figure BPA00001479917701792
在5分钟内，将氯甲酸甲酯(0.65mL，8.39mmol)滴加到冷却(冰-水)的Na2CO3(0.449g，4.23mmol)、NaOH(8.2mL 1M/H2O，8.2mmol)和(S)-2-氨基-3-羟基-3-甲基丁酸(1.04g，7.81mmol)的混合物中。搅拌反应混合物45分钟后，移开冷却浴，再继续搅拌3.75小时。反应混合物用CH2Cl2洗涤，水相用冰水浴冷却后，用浓HCl酸化至pH 1-2的范围。真空除去挥发性成分，将残余物溶于2∶1MeOH/CH2Cl2的混合物(15mL)，过滤并使滤液旋转蒸发，得到Cap-65(1.236g，半粘性白色泡沫状物)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：δ6.94(d，J＝8.5，0.9H)，6.53(br s，0.1H)，3.89(d，J＝8.8，1H)，2.94(s，3H)，1.15(s，3H)，1.13(s，3H)。
采用合成Cap-65的所述方法，由合适的可市售获得的原料制备Cap-66和Cap-67。
1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：δ12.58(br s，1H)，7.07(d，J＝8.3，0.13H)，6.81(d，J＝8.8，0.67H)，4.10-4.02(m，1.15H)，3.91(dd，J＝9.1，3.5，0.85H)，3.56(s，3H)，1.09(d，J＝6.2，3H)。[注意：仅记录NH的主要信号]。
Figure BPA00001479917701802
1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：12.51(br s，1H)，7.25(d，J＝8.4，0.75H)，7.12(br d，J＝0.4，0.05H)，6.86(br s，0.08H)，3.95-3.85(m，2H)，3.54(s，3H)，1.08(d，J＝6.3，3H)。[注意：仅记录NH的主要信号]。
Cap-68
Figure BPA00001479917701811
将氯甲酸甲酯(0.38mL，4.9mmol)滴加到1N NaOH(水溶液)(9.0mL，9.0mmol)、1M NaHCO3(水溶液)(9.0mL，9.0mol)、L-天冬氨酸β-苄酯(1.0g，4.5mmol)和二
Figure BPA00001479917701812
烷(9mL)的混合物中。将反应混合物在环境条件下搅拌3小时后，用乙酸乙酯(50mL，3x)洗涤。水层用12N HCl酸化至pH～1-2后，用乙酸乙酯(3x 50mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤后真空浓缩，得到Cap-68(1.37g；浅黄色油状物，质量超过理论收率，产物无需进一步纯化便可使用)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，500MHz)：δ12.88(br s，1H)，7.55(d，J＝8.5，1H)，7.40-7.32(m，5H)，5.13(d，J＝12.8，1H)，5.10(d，J＝12.9，1H)，4.42-4.38(m，1H)，3.55(s，3H)，2.87(dd，J＝16.2，5.5，1H)，2.71(dd，J＝16.2，8.3，1H)。LC(条件2)：RT＝1.90min；LC/MS：对于[M+H]+C13H16NO6分析计算值：282.10；实测值：282.12。
Figure BPA00001479917701813
将NaCNBH3(2.416g，36.5mmol)分批加入冰冷(～15℃)的丙氨酸(1.338g，15.0mmol)的水(17mL)/MeOH(10mL)溶液中。几分钟后，在4分钟内滴加乙醛(4.0mL，71.3mmol)，移开冷却浴，将反应混合物在环境条件下搅拌6小时。再次加入乙醛(4.0mL)后，搅拌反应物2小时。将浓HCl慢慢加到反应混合物中，直到pH达到～1.5后，将所得混合物在40℃下加热1小时。真空除去大部分挥发性成分，残余物用Dowex
Figure BPA00001479917701814
50WX8-100离子交换树脂纯化(柱用水洗涤，化合物用由18mL NH4OH和282mL水混合而制得的稀NH4OH洗脱)，得到Cap-69(2.0g，灰白色吸湿性软固体)。1HNMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：δ3.44(q，J＝7.1，1H)，2.99-2.90(m，2H)，2.89-2.80(m，2H)，1.23(d，J＝7.1，3H)，1.13(t，J＝7.3，6H)。
按照所述用于合成Cap-69的方法，采用合适的原料制备Cap-70至Cap-74x。
Figure BPA00001479917701821
Figure BPA00001479917701831
Figure BPA00001479917701832
将NaBH3CN(1.6g，25.5mmol)加入到冷却(冰/水浴)的H-D-Ser-OBzl HCl(2.0g，8.6mmol)的水(25mL)/甲醇(15mL)溶液中。在5分钟内滴加乙醛(1.5mL，12.5mmol)后，移开冷却浴，将反应混合物在环境条件下搅拌2小时。小心地用12N HCl猝灭反应物后，真空浓缩。将残余物溶于水，用反相HPLC纯化(MeOH/H2O/TFA)，得到(R)-2-(二乙基氨基)-3-羟基丙酸苄酯的TFA盐(1.9g，粘性无色油状物)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，500MHz)：δ9.73(br s，1H)，7.52-7.36(m，5H)，5.32(d，J＝12.2，1H)，5.27(d，J＝12.5，1H)，4.54-4.32(m，1H)，4.05-3.97(m，2H)，3.43-3.21(m，4H)，1.23(t，J＝7.2，6H)。LC/MS(条件2)：RT＝1.38min；LC/MS：对于[M+H]+C14H22NO3分析计算值：252.16；实测值：252.19.
Cap-75
将NaH(0.0727g，1.82mmol，60％)加到冷却(冰-水)的上文制备的(R)-2-(二乙基氨基)-3-羟基丙酸苄酯的TFA盐(0.3019g，0.8264mmol)的THF(3.0mL)溶液中，将混合物搅拌15分钟。加入甲基碘(56μL，0.90mmol)，在冰水浴中融化至环境条件的同时，继续搅拌18小时。反应物用水猝灭后，加到MeOH预处理的MCX(6g)柱体上，用甲醇洗涤后，化合物用2N NH3/甲醇洗脱。真空除去挥发性成分，得到Cap-75(100mg，被(R)-2-(二乙基氨基)-3-羟基丙酸污染，黄色半固体)。产物照原样使用无需进一步纯化。
Figure BPA00001479917701841
将NaCNBH3(1.60g，24.2mmol)分批加到冰冷(～15℃)的(S)-4-氨基-2-(叔丁氧基羰基氨基)丁酸(2.17g，9.94mmol)的水/MeOH(各为12mL)溶液中。几分钟后，在2分钟内滴加乙醛(2.7mL，48.1mmol)，移开冷却浴，将反应混合物在环境条件下搅拌3.5小时。再次加入乙醛(2.7mL，48.1mmol)后，搅拌反应物20.5小时。真空除去大部分MeOH成分，残余混合物用浓HCl处理，直到其pH达到～1.0后，在40℃下加热2小时。真空除去挥发性成分，残余物用4M HCl/二
Figure BPA00001479917701842
烷(20mL)处理，并在环境条件下搅拌7.5小时。真空除去挥发性成分，残余物用Dowex
Figure BPA00001479917701843
50WX8-100离子交换树脂纯化(柱用水洗涤，化合物用由18mL NH4OH和282mL水制备的稀NH4OH洗脱)，得到中间体(S)-2-氨基-4-(二乙基氨基)丁酸(1.73g，灰白色固体)。
在11分钟内，将氯甲酸甲酯(0.36mL，4.65mmol)滴加到冷却(冰-水)的Na2CO3(0.243g，2.29mmol)、NaOH(4.6mL 1M/H2O，4.6mmol)和上述产物(802.4mg)的混合物中。搅拌反应混合物55分钟后，移开冷却浴，再继续搅拌5.25小时。反应混合物用等体积水稀释，用CH2Cl2(30mL，2x)洗涤，水相用冰水浴冷却，用浓HCl酸化至pH 2的范围。然后真空除去挥发性成分，粗产物用MCX树脂进行游离碱化(free-based)(6.0g；柱用水洗涤，样品用2.0M NH3/MeOH洗脱)，得到含杂质的Cap-76(704mg，灰白色固体)。1H NMR(MeOH-d4，δ＝3.29ppm，400MHz)：δ3.99(dd，J＝7.5，4.7，1H)，3.62(s，3H)，3.25-3.06(m，6H)，2.18-2.09(m，1H)，2.04-1.96(m，1H)，1.28(t，J＝7.3，6H)。LC/MS：对于[M+H]+ C10H21N2O4分析计算值：233.15；实测值：233.24。
Figure BPA00001479917701851
如下进行Cap-77的合成：按对照Cap-7所述方法，采用7-氮杂双环[2.2.1]庚烷用于替换SN2步骤，并且通过采用下列条件，对中间体2-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)-2-苯基乙酸苄酯进行对映体分离：将中间体(303.7mg)溶于乙醇，将所得溶液注入手性HPLC柱(ChiracelAD-H柱，30x 250mm，5μm)上，在35℃温度下，用90％CO2-10％EtOH按70mL/min洗脱，得到124.5mg对映体-1和133.8mg对映体-2。这些苄酯按照Cap-7的制备法进行氢解，得到Cap-77：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：δ7.55(m，2H)，7.38-7.30(m，3H)，4.16(s，1H)，3.54(表观br s，2H)，2.08-1.88(m，4H)，1.57-1.46(m，4H)。LC(条件1)：RT＝0.67min；LC/MS：对于[M+H]+C14H18NO2的分析计算值：232.13；实测值：232.18。HRMS：对于[M+H]+C14H18NO2的分析计算值：232.1338；实测值：232.1340。
Figure BPA00001479917701852
将NaCNBH3(0.5828g，9.27mmol)加到(R)-2-(乙氨基)-2-苯基乙酸HCl盐(Cap-3合成中的中间体；0.9923mg，4.60mmol)和(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷(1.640g，9.40mmol)在MeOH(10mL)中的混合物中，半不均匀混合物用油浴在50℃下加热20小时。再次加入(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷(150mg，0.86mmol)和NaCNBH3(52mg，0.827mmol)，再加热反应混合物3.5小时。然后将其冷却至环境温度，用浓HCl酸化至约pH 2的范围后，将混合物过滤后进行旋转蒸发。将所得粗产物溶于i-PrOH(6mL)并加热进行溶解，滤出不溶解部分后，真空浓缩滤液。约1/3的所得粗产物用反相HPLC纯化(H2O/MeOH/TFA)，得到Cap-78的TFA盐(353mg，粘性无色油状物)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz；在D2O交换之后)：δ7.56-7.49(m，5H)，5.35(S，1H)，3.35(m，1H)，3.06(表观br s，1H)，2.66(m，1H)，1.26(t，J＝7.3，3H)，0.92(m，1H)，0.83-0.44(m，3H)。LC(条件1)：RT＝0.64min；LC/MS：对于[M+H]+C13H18NO2分析计算值：220.13；实测值：220.21。HRMS：对于[M+H]+C13H18NO2分析计算值：220.1338；实测值：220.1343。
将臭氧鼓泡通入冷却(-78℃)的Cap-55(369mg，2.13mmol)的CH2Cl2(5.0mL)溶液中约50分钟，直到反应混合物出现浅蓝色。加入Me2S(移液管10滴)，搅拌反应混合物35分钟。-78℃浴用-10℃浴代之，再继续搅拌30分钟后，真空除去挥发性成分，得到粘性无色油状物。
将NaBH3CN(149mg，2.25mmol)加到上述粗产物和吗啉(500μL，5.72mmol)的MeOH(5.0mL)溶液中，将混合物在环境条件下搅拌4小时。冷却至冰水温度，用浓HCl处理至其pH至～2.0后，搅拌2.5小时。真空除去挥发性成分，残余物用MCX树脂(MeOH洗涤；2.0N NH3/MeOH洗脱)结合反相HPLC(H2O/MeOH/TFA)进行纯化，得到Cap-79，其中含有含量不明的吗啉。
为了消耗掉吗啉污染物，将上述产物溶于CH2Cl2(1.5mL)，依次用Et3N(0.27mL，1.94mmol)和乙酸酐(0.10mL，1.06mmol)处理，并在环境条件下搅拌18小时。加入THF(1.0mL)和H2O(0.5mL)，继续搅拌1.5小时。真空除去挥发性成分后，使所得残余物通过MCX树脂(MeOH洗涤；2.0N NH3/MeOH洗脱)，得到含杂质的Cap-79，为粘性褐色油状物，无需进一步纯化便可用于下一步骤。
在15分钟内，将SOCl2(6.60mL，90.5mmol)滴加到冷却(冰-水)的(S)-3-氨基-4-(苄氧基)-4-氧代丁酸(10.04g，44.98mmol)和MeOH(300mL)的混合物中，移开冷却浴后，将反应混合物在环境条件下搅拌29小时。真空除去大部分挥发性成分，小心地使残余物在EtOAc(150mL)和饱和NaHCO3溶液之间分配。水相用EtOAc(150mL，2x)萃取，合并的有机相经干燥(MgSO4)，过滤后真空浓缩，得到(S)-2-氨基琥珀酸1-苄酯4-甲酯(9.706g，无色油状物)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：δ7.40-7.32(m，5H)，5.11(s，2H)，3.72(表观t，J＝6.6，1H)，3.55(s，3H)，2.68(dd，J＝15.9，6.3，1H)，2.58(dd，J＝15.9，6.8，1H)，1.96(s，2H)。LC(条件1)：RT＝0.90min；LC/MS：对于[M+H]+C12H16NO4分析计算值：238.11；实测值：238.22。
在1分钟内，将Pb(NO3)2(6.06g，18.3mmol)加到(S)-2-氨基琥珀酸1-苄酯4-甲酯(4.50g，19.0mmol)、9-溴-9-苯基-9H-芴(6.44g，20.0mmol)和Et3N(3.0mL，21.5mmol)的CH2Cl2(80mL)溶液中，将不均匀混合物在环境条件下搅拌48小时。将混合物过滤，滤液用MgSO4处理后再次过滤，浓缩最终的滤液。将所得粗产物进行Biotage纯化(350g硅胶，CH2Cl2洗脱)，得到(S)-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)琥珀酸1-苄酯4-甲酯(7.93g，十分粘稠的无色油状物)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：δ7.82(m，2H)，7.39-7.13(m，16H)，4.71(d，J＝12.4，1H)，4.51(d，J＝12.6，1H)，3.78(d，J＝9.1，NH)，3.50(s，3H)，2.99(m，1H)，2.50-2.41(m，2H，与溶剂有部分重叠)。LC(条件1)：RT＝2.16min；LC/MS：对于[M+H]+C31H28NO4分析计算值：478.20；实测值：478.19。
在10分钟内，将LiHMDS(9.2mL 1.0M/THF，9.2mmol)滴加到冷却(-78℃)的(S)-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)琥珀酸1-苄酯4-甲酯(3.907g，8.18mmol)的THF(50mL)溶液中，并搅拌～1小时。在8分钟内将MeI(0.57mL，9.2mmol)滴加到混合物中，然后在使冷却浴融化至室温的同时继续搅拌16.5小时。用饱和NH4Cl溶液(5mL)猝灭后，真空除去大部分有机成分，使残余物在CH2Cl2(100mL)和水(40mL)之间分配。有机层经干燥(MgSO4)，过滤后真空浓缩，所得粗产物用Biotage纯化(350g硅胶；25％EtOAc/己烷)，得到3.65g 3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)琥珀酸1-苄酯4-甲酯的2S/3S和2S/3R非对映体混合物，比率～1.0∶0.65(1H NMR)。此时未确定主要异构体的立体化学结构，混合物无需分离便可进行下一步骤。部分1H NMR数据(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：主要非对映体，δ4.39(d，J＝12.3，CH2的1H)，3.33(s，3H，与H2O信号重叠)，3.50(d，J＝10.9，NH)，1.13(d，J＝7.1，3H)；次要非对映体，δ4.27(d，J＝12.3，CH2的1H)，3.76(d，J＝10.9，NH)，3.64(s，3H)，0.77(d，J＝7.0，3H)。LC(条件1)：RT＝2.19min；LC/MS：对于[M+H]+C32H30NO4分析计算值：492.22；实测值：492.15。
在10分钟内，将二异丁基氢化铝(20.57mL 1.0M的己烷溶液，20.57mmol)滴加到冷却(-78℃)的上述制备的(2S)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)琥珀酸1-苄酯4-甲酯(3.37g，6.86mmol)的THF(120mL)溶液中，在-78℃下搅拌20小时。反应混合物从冷却浴取出后，快速倒入搅拌下的～1M H3PO4/H2O(250mL)中，混合物用乙醚(100mL，2x)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤后真空浓缩。制备粗产物的硅胶筛目(mesh)，并进行色谱法处理(25％EtOAc/己烷；重力洗脱)，得到1.1g(2S，3S)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯(被苯甲醇污染，粘性无色油状物)，以及(2S，3R)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯，含有(2S，3R)立体异构体杂质。后一样品用相同柱色谱法纯化条件再进行纯化，得到750mg纯产物，为白色泡沫状物。[注意：在上述条件下，(2S，3S)异构体先于(2S，3R)异构体洗脱出来]。(2S，3S)异构体：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：7.81(m，2H)，7.39-7.08(m，16H)，4.67(d，J＝12.3，1H)，4.43(d，J＝12.4，1H)，4.21(表观t，J＝5.2，OH)，3.22(d，J＝10.1，NH)，3.17(m，1H)，3.08(m，1H)，～2.5(m，1H，与溶剂信号重叠)，1.58(m，1H)，0.88(d，J＝6.8，3H)。LC(条件1)：RT＝2.00min；LC/MS：对于[M+H]+C31H30NO3分析计算值：464.45；实测值：464.22。(2S，3R)异构体：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)：7.81(d，J＝7.5，2H)，7.39-7.10(m，16H)，4.63(d，J＝12.1，1H)，4.50(表观t，J＝4.9，1H)，4.32(d，J＝12.1，1H)，3.59-3.53(m，2H)，3.23(m，1H)，2.44(dd，J＝9.0，8.3，1H)，1.70(m，1H)，0.57(d，J＝6.8，3H)。LC(条件1)：RT＝1.92min；LC/MS：对于[M+H]+C31H30NO3分析计算值：464.45；实测值：464.52。
DIBAL还原产物的相对立体化学排布是根据NOE研究做出的，该研究采用以下方案，用由每个异构体制备的内酯衍生物进行：将LiHMDS (50μl 1.0M/THF，0.05mmol)加到冷却(冰-水)的(2S，3S)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯(62.7mg，0.135mmol)的THF(2.0mL)溶液中，将反应混合物在同样的温度下大约搅拌2小时。真空除去挥发性成分，使残余物在CH2Cl2(30mL)、水(20mL)和饱和NH4Cl水溶液(1mL)之间分配。有机层经干燥(MgSO4)，过滤后真空浓缩，所得粗产物进行Biotage纯化(40g硅胶；10-15％EtOAc/己烷)，得到(3S，4S)-4-甲基-3-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)二氢呋喃-2(3H)-酮(28.1mg，无色固体膜状物)。将(2S，3R)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯按同样方法精制成(3S，4R)-4-甲基-3-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)二氢呋喃-2(3H)-酮。(3S，4S)-内酯异构体：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)，7.83(d，J＝7.5，2H)，7.46-7.17(m，11H)，4.14(表观t，J＝8.3，1H)，3.60(d，J＝5.8，NH)，3.45(表观t，J＝9.2，1H)，～2.47(m，1H，与溶剂信号有部分重叠)，2.16(m，1H)，0.27(d，J＝6.6，3H)。LC(条件1)：RT＝1.98min；LC/MS：对于[M+Na]+C24H21NNaO2分析计算值：378.15；实测值：378.42。(3S，4R)-内酯异构体：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)，7.89(d，J＝7.6，1H)，7.85(d，J＝7.3，1H)，7.46-7.20(m，11H)，3.95(dd，J＝9.1，4.8，1H)，3.76(d，J＝8.8，1H)，2.96(d，J＝3.0，NH)，2.92(dd，J＝6.8，3，NCH)，1.55(m，1H)，0.97(d，J＝7.0，3H)。LC(条件1)：RT＝2.03min；LC/MS：对于[M+Na]+ C24H21NNaO2分析计算值：378.15；实测值：378.49。
依次将TBDMS-Cl(48mg，0.312mmol)和咪唑(28.8mg，0.423mmol)加到(2S，3S)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯(119.5mg，0.258mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液中，将混合物在环境条件下搅拌14.25小时。然后反应混合物用CH2Cl2(30mL)稀释后，用水(15mL)洗涤，有机层经干燥(MgSO4)，过滤后真空浓缩。所得粗产物用Biotage纯化(40g硅胶；5％EtOAc/己烷)，得到(2S，3S)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯(124.4mg，被TBDMS基杂质污染，粘性无色油状物)。将(2S，3R)-4-羟基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯按同样方法精制成(2S，3R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯。(2S，3S)-甲硅烷基醚异构体：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)，7.82(d，J＝4.1，1H)，7.80(d，J＝4.0，1H)，7.38-7.07(m，16H)，4.70(d，J＝12.4，1H)，4.42(d，J＝12.3，1H)，3.28-3.19(m，3H)，2.56(dd，J＝10.1，5.5，1H)，1.61(m，1H)，0.90(d，J＝6.8，3H)，0.70(s，9H)，-0.13(s，3H)，-0.16(s，3H)。LC(条件1，其中过柱时间延长至4分钟)：RT＝3.26min；LC/MS：对于[M+H]+C37H44NO3Si分析计算值：578.31；实测值：578.40。(2S，3R)-甲硅烷基醚异构体：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)，7.82(d，J＝3.0，1H)，7.80(d，J＝3.1，1H)，7.39-7.10(m，16H)，4.66(d，J＝12.4，1H)，4.39(d，J＝12.4，1H)，3.61(dd，J＝9.9，5.6，1H)，3.45(d，J＝9.5，1H)，3.41(dd，J＝10，6.2，1H)，2.55(dd，J＝9.5，7.3，1H)，1.74(m，1H)，0.77(s，9H)，0.61(d，J＝7.1，3H)，-0.06(s，3H)，-0.08(s，3H)。
将氢气囊与(2S，3S)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯(836mg，1.447mmol)和10％Pd/C(213mg)在EtOAc(16mL)中的混合物连通，将混合物在室温下搅拌～21小时，需要时气囊再充入H2。反应混合物用CH2Cl2稀释，通过硅藻土(Celite-545
Figure BPA00001479917701911
)垫过滤，硅藻土垫用EtOAc(200mL)、EtOAc/MeOH(1∶1混合物，200mL)和MeOH(750mL)洗涤。将合并的有机相浓缩后，由所得粗产物制备硅胶筛目，进行快速色谱法处理(8∶2∶1EtOAc/i-PrOH/H2O的混合物)，得到(2S，3S)-2-氨基-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基丁酸(325mg，白色绒毛状固体)。将(2S，3R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-芴-9-基氨基)丁酸苄酯按同样方法精制成(2S，3R)-2-氨基-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基丁酸。(2S，3S)-氨基酸异构体：1H NMR(甲醇-d4，δ＝3.29ppm，400MHz)，3.76(dd，J＝10.5，5.2，1H)，3.73(d，J＝3.0，1H)，3.67(dd，J＝10.5，7.0，1H)，2.37(m，1H)，0.97(d，J＝7.0，3H)，0.92(s，9H)，0.10(s，6H)。LC/MS：对于[M+H]+ C11H26NO3Si分析计算值：248.17；实测值：248.44。(2S，3R)-氨基酸异构体：1H NMR(甲醇-d4，δ＝3.29ppm，400MHz)，3.76-3.75(m，2H)，3.60(d，J＝4.1，1H)，2.16(m，1H)，1.06(d，J＝7.3，3H)，0.91(s，9H)，0.09(s，6H)。对于[M+H]+C11H26NO3Si分析计算值：248.17；实测值：248.44。
将水(1mL)和NaOH(0.18mL 1.0M/H2O，0.18mmol)加到(2S，3S)-2-氨基-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基丁酸(41.9mg，0.169mmol)和Na2CO3(11.9mg，0.112mmol)的混合物中，超声处理约1分钟以使反应物溶解。然后混合物用冰水浴冷却，在30秒内加入氯甲酸甲酯(0.02mL，0.259mmol)，在同样温度下继续剧烈搅拌40分钟后，再在环境温度下搅拌2.7小时。反应混合物用水(5mL)稀释，用冰水浴冷却后，逐滴加入1.0N HCl水溶液(～0.23mL)进行处理。混合物再用水(10mL)稀释，用CH2Cl2(15mL，2x)萃取。合并的有机相经干燥(MgSO4)，过滤后真空浓缩，得到Cap-80a，为灰白色固体。将(2S，3R)-2-氨基-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-甲基丁酸按同样方法精制成Cap-80b。Cap-80a：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，400MHz)，12.57(br s，1H)，7.64(d，J＝8.3，0.3H)，7.19(d，J＝8.8，0.7H)，4.44(dd，J＝8.1，4.6，0.3H)，4.23(dd，J＝8.7，4.4，0.7H)，3.56/3.53(两个单峰，3H)，3.48-3.40(m，2H)，2.22-2.10(m，1H)，0.85(s，9H)，～0.84(d，0.9H，与t-Bu信号重叠)，0.79(d，J＝7，2.1H)，0.02/0.01/0.00(三个重叠单峰，6H)。LC/MS：对于[M+Na]+ C13H27NNaO5Si分析计算值：328.16；实测值：328.46。Cap-80b：1H NMR(CDCl3，δ＝7.24ppm，400MHz)，6.00(br d，J＝6.8，1H)，4.36(dd，J＝7.1，3.1，1H)，3.87(dd，J＝10.5，3.0，1H)，3.67(s，3H)，3.58(dd，J＝10.6，4.8，1H)，2.35(m，1H)，1.03(d，J＝7.1，3H)，0.90(s，9H)，0.08(s，6H)。LC/MS：对于[M+Na]+C13H27NNaO5Si分析计算值：328.16；实测值：328.53。粗产物无需进一步纯化便可使用。
Figure BPA00001479917701921
按照Falb等所述方案制备(Falb等，Synthetic Communications 1993，23，2839)。
Cap-82至Cap-85
按照Cap-51或Cap-13中所述方法，由合适的原料合成Cap-82至Cap-85。样品的光谱特征与其对映体(即分别为Cap-4、Cap-13、Cap-51和Cap-52)的光谱特征相似。
Figure BPA00001479917701931
在0℃下，向O-甲基-L-苏氨酸(3.0g，22.55mmol)、NaOH(0.902g，22.55mmol)在H2O(15mL)中的混合物中滴加ClCO2Me(1.74mL，22.55mmol)。将混合物搅拌12小时后，用1N HCl酸化至pH 1。水相用EtOAc(2x250mL)和10％MeOH的CH2Cl2溶液(250mL)萃取，合并的有机相经真空浓缩后，得到无色油状物(4.18g，97％)，其纯度足以用于后续步骤。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ4.19(s，1H)，3.92-3.97(m，1H)，3.66(s，3H)，1.17(d，J＝7.7Hz，3H)。LCMS：对于C7H13NO5分析计算值：191；实测值：190(M-H)-。
Figure BPA00001479917701932
在0℃下，向L-高丝氨酸(2.0g，9.79mmol)、Na2CO3(2.08g，19.59mmol)在H2O(15mL)中的混合物中滴加ClCO2Me(0.76mL，9.79mmol)。将混合物搅拌48小时后，用1N HCl酸化至pH 1。水相用EtOAc(2X250mL)萃取，合并的有机相经真空浓缩后，得到无色固体(0.719g，28％)，其纯度足以用于后续步骤。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ4.23(dd，J＝4.5，9.1Hz，1H)，3.66(s，3H)，3.43-3.49(m，2H)，2.08-2.14(m，1H)，1.82-1.89(m，1H)。LCMS：对于C7H13NO5分析计算值：191；实测值：192(M+H)+。
Figure BPA00001479917701941
将L-缬氨酸(1.0g，8.54mmol)、3-溴吡啶(1.8mL，18.7mmol)、K2CO3(2.45g，17.7mmol)和CuI(169mg，0.887mmol)在DMSO(10mL)中的混合物在100℃下加热12小时。使反应混合物冷却至室温后，倒入H2O(约150mL)中，用EtOAc洗涤(2次)。有机层用少量H2O萃取，合并的水相用6N HCl酸化至约pH 2。体积减至大约1/3时，加入20g阳离子交换树脂(Strata)。使浆状物静置20分钟后，加到阳离子交换树脂垫(Strata)(约25g)上。该垫依次用H2O(200mL)、MeOH(200mL)和NH3(3M的MeOH溶液，2X200mL)洗涤。合适的流分经真空浓缩，将残余物(约1.1g)溶于H2O，冷冻并冻干。得到标题化合物(1.02g，62％，泡沫状物)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.00(s，br，1H)，7.68-7.71(m，1H)，7.01(s，br，1H)，6.88(d，J＝7.5Hz，1H)，5.75(s，br，1H)，3.54(s，1H)，2.04-2.06(m，1H)，0.95(d，J＝6.0Hz，3H)，0.91(d，J＝6.6Hz，3H)。LCMS：对于C10H14N2O2分析计算值：194；实测值：195(M+H)+。
Figure BPA00001479917701942
将L-缬氨酸(1.0g，8.54mmol)、5-溴嘧啶(4.03g，17.0mmol)、K2CO3(2.40g，17.4mmol)和CuI(179mg，0.94mmol)在DMSO(10mL)中的混合物在100℃下加热12小时。使反应混合物冷却至室温后，倒入H2O(约150mL)中，并用EtOAc洗涤(2次)。有机层用少量H2O萃取，合并的水相用6N HCl酸化至约pH 2。体积减至大约1/3时，加入20g阳离子交换树脂(Strata)。将浆状物静置20分钟后，加到阳离子交换树脂垫(Strata)(约25g)上。该垫依次用H2O(200mL)、MeOH(200mL)和NH3(3M的MeOH溶液，2x200mL)洗涤。合适的流分经真空浓缩后，将残余物(约1.1g)溶于H2O，冷冻并冻干。得到标题化合物(1.02g，62％，泡沫状物)。1H NMR(400MHz，CD3OD)显示混合物含有缬氨酸，因而无法估计其纯度。该产物照原样用于后续反应。LCMS：对于C9H13N3O2分析计算值：195；实测值：196(M+H)+。
Figure BPA00001479917701951
按照Cap-1制备中所述方法制备Cap-90。粗产物照原样用于后续步骤。LCMS：对于C11H15NO2分析计算值：193；实测值：192(M-H)-。
下列各“cap”根据制备Cap-51所用的方法制备，除非另有说明：
Figure BPA00001479917701961
Figure BPA00001479917701981
Figure BPA00001479917701991
Cap-117至Cap-123
为制备Cap-117至Cap-123，所述Boc氨基酸从商业来源获得并通过用25％TFA的CH2Cl2溶液处理脱去保护。根据LCMS判断完成反应后，真空除去溶剂，并根据Cap-51所述的方法，将所述氨基酸的对应的TFA盐用氯甲酸甲酯进行氨基甲酸酯化(carbamoylated)。
Figure BPA00001479917702001
Figure BPA00001479917702012
按照用于Cap-51的方法，使L-苏氨酸叔丁酯的盐酸盐进行氨基甲酰基化。粗制反应混合物用1N HCl酸化至pH～1，混合物用EtOAc(2X50mL)萃取。合并的有机相经真空浓缩后，得到静置时固化的无色油状物。真空浓缩水层，所得产物和无机盐的混合物用EtOAc-CH2Cl2-MeOH(1∶1∶0.1)研磨，然后真空浓缩有机相，得到无色油状物，用LCMS显示为所需要的产物。合并两次产物，得到0.52g固体。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ4.60(m，1H)，4.04(d，J＝5.0Hz，1H)，1.49(d，J＝6.3Hz，3H)。LCMS：对于C5H7NO4分析计算值：145；实测值：146(M+H)+。
Figure BPA00001479917702013
向Pd(OH)2(20％，100mg)、水合甲醛(37％wt，4ml)、乙酸(0.5mL)的甲醇(15mL)混悬液中加入(S)-4-氨基-2-(叔丁氧基羰基氨基)丁酸(1g，4.48mmol)。将反应物通入氢气数次，室温下用氢气气囊下搅拌过夜。将反应混合物通过硅藻土层(Celite)过滤，真空除去挥发性组分。得到的粗物质原样用于下一步骤。LC/MS：C11H22N2O4分析计算值：246；实测值：247(M+H)+。
Cap-126
Figure BPA00001479917702021
该方法改编自用于制备Cap-51的方法。向0℃下的3-甲基-L-组胺(0.80g，4.70mmol)的THF(10mL)和H2O(10mL)混悬液中，加入NaHCO3(0.88g，10.5mmol)。将得到的混合物用ClCO2Me(0.40mL，5.20mmol)处理，将混合物在0℃下搅拌。搅拌约2h后，LCMS显示无原料剩余。将反应物用6N HCl酸化至pH 2。
真空除去溶剂，将残留物混悬于20mL 20％MeOH的CH2Cl2溶液中。将混合物过滤并浓缩，得到浅黄色泡沫状物(1.21g，)。LCMS和1H NMR表明该物质是9∶1所述甲酯和所要求产物的混合物。将该物质溶于THF(10mL)和H2O(10mL)中，冷却至0℃，加入LiOH(249.1mg，10.4mmol)。搅拌约1h后，LCMS表明无剩余的酯。因此，将混合物用6N HCl酸化，真空除去溶剂。LCMS和1H NMR确证不存在所述酯。得到标题化合物，为污染有无机盐的其HCl盐(1.91g，＞100％)。该化合物无需进一步纯化而原样用于随后的步骤中。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.84，(s，1H)，7.35(s，1H)，4.52(dd，J＝5.0，9.1Hz，1H)，3.89(s，3H)，3.62(s，3H)，3.35(dd，J＝4.5，15.6Hz，1H，部分被溶剂遮蔽)，3.12(dd，J＝9.0，15.6Hz，1H)。LCMS：C9H13N3O4分析计算值：227.09；实测值：228.09(M+H)+。
Figure BPA00001479917702022
根据以上Cap-126的方法，从(S)-2-氨基-3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)丙酸(1.11g，6.56mmol)、NaHCO3(1.21g，14.4mmol)和ClCO2Me(0.56mL，7.28mmol)制备Cap-127。得到标题化合物，为污染有无机盐的其HCl盐(1.79g，＞100％)。LCMS和1H NMR表明存在约5％的所述甲酯。该粗品混合物不需进一步纯化而原样使用。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.90(s，1H)，7.35(s，1H)，4.48(dd，J＝5.0，8.6Hz，1H)，3.89(s，3H)，3.62(s，3H)，3.35(m，1H)，3.08(m，1H)；LCMS：C9H13N3O4分析计算值：227.09；实测值：228(M+H)+。
Figure BPA00001479917702031
步骤1.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)戊-4-炔酸苄基酯(cj-27b)的制备.
Figure BPA00001479917702032
向0℃下的cj-27a(1.01g，4.74mmol)、DMAP(58mg，0.475mmol)和iPr2NEt(1.7mL，9.8mmol)的CH2Cl2(100mL)溶液中加入Cbz-Cl(0.68mL，4.83mmol)。0℃下，将该溶液搅拌4h，洗涤(1N KHSO4、盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。残留物经快速柱层析纯化(TLC 6∶1己烷∶EtOAc)，得到标题化合物(1.30g，91％)，为无色油状物。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.35(s，5H)，5.35(d，br，J＝8.1Hz，1H)，5.23(d，J＝12.2Hz，1H)，5.17(d，J＝12.2Hz，1H)，4.48-4.53(m，1H)，2.68-2.81(m，2H)，2.00(t，J＝2.5Hz，1H)，1.44(s，9H).LCMS：C17H21NO4分析计算值：303；实测值：304(M+H)+。
步骤2.3-(1-苄基-1H-1，2，3-三唑-4-基)-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸(S)-苄基酯(cj-28)的制备
Figure BPA00001479917702041
室温下，向2-(叔丁氧基羰基氨基)戊-4-炔基酸(S)-苄基酯(0.50g，1.65mmol)、抗坏血酸钠(0.036g，0.18mmol)、CuSO4-5H2O(0.022g，0.09mmol)和NaN3(0.13g，2.1mmol)的DMF-H2O(5mL，4∶1)混合物中加入BnBr(0.24mL，2.02mmol)，将混合物温热至65℃。5h后，LCMS表明较低的转化。再加入另一份NaN3(100mg)，继续加热12h。将反应物倒入EtOAc和H2O中并振摇。分离各层，将水层用EtOAc提取3x，将合并的有机相洗涤(H2O x3，盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残留物经快速纯化(Biotage，40+M 0-5％MeOH的CH2Cl2溶液；TLC 3％MeOH的CH2Cl2溶液)，得到浅黄色油状物，其放置后固化(748.3mg，104％)。NMR与所要求的产物一致，但表明存在DMF。该物质不经进一步纯化而原样使用。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.84(s，1H)，7.27-7.32(m，10H)，5.54(s，2H)，5.07(s，2H)，4.25(m，1H)，3.16(dd，J＝1.0，5.3Hz，1H)，3.06(dd，J＝5.3，14.7Hz)，2.96(dd，J＝9.1，14.7Hz，1H)，1.31(s，9H).LCMS：C24H28N4O4分析计算值：436；实测值：437(M+H)+。
步骤3.3-(1-苄基-1H-1，2，3-三唑-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)丙酸(S)-苄基酯(cj-29)的制备.
Figure BPA00001479917702051
向3-(1-苄基-1H-1，2，3-三唑-4-基)-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸(S)-苄基酯(0.52g，1.15mmol)的CH2Cl2溶液中加入TFA(4mL)中。将混合物室温下搅拌2h。将混合物真空浓缩，得到无色油状物，其放置后固化。将该物质溶解于THF-H2O中并冷却至0℃。顺次加入固体NaHCO3(0.25g，3.00mmol)和ClCO2Me(0.25mL，3.25mmol)。搅拌1.5h后，将混合物用6N HCl酸化至pH～2，然后倒入H2O-EtOAc中。分离各层，将水相用EtOAc提取2次。将合并的有机层洗涤(H2O，盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到无色油状物(505.8mg，111％，NMR表明存在未经确认的杂质)，其在抽气放置下固化。该物质不经进一步纯化而原样使用。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.87(s，1H)，7.70(d，J＝8.1Hz，1H)，7.27-7.32(m，10H)，5.54(s，2H)，5.10(d，J＝12.7Hz，1H)，5.06(d，J＝12.7Hz，1H)，4.32-4.37(m，1H)，3.49(s，3H)，3.09(dd，J＝5.6，14.7Hz，1H)，2.98(dd，J＝9.6，14.7Hz，1H)。LCMS：C21H22N4O4分析计算值：394；实测值：395(M+H)+。
步骤4.(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)丙酸(Cap-128)的制备
Figure BPA00001479917702052
在大气压力下，将3-(1-苄基-1H-1，2，3-三唑-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)丙酸(S)-苄基酯(502mg，1.11mmol)在Pd-C(82mg)存在下在MeOH(5mL)中氢化12h。将混合物通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917702053
)过滤并真空浓缩。得到无色胶状物的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)丙酸(266mg，111％)，其被污染有约10％的所述甲酯。该物质不经进一步纯化而使用。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.78(s，br，1H)，7.59(s，1H)，7.50(d，J＝8.0Hz，1H)，4.19-4.24(m，1H)，3.49(s，3H)，3.12(dd，J＝4.8Hz，14.9Hz，1H)，2.96(dd，J＝9.9，15.0Hz，1H).LCMS：C7H10N4O4分析计算值：214；实测值：215(M+H)+.
Figure BPA00001479917702061
步骤1.(S)-2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(cj-31)的制备
Figure BPA00001479917702062
在50℃下，将2-氧代氧杂环丁烷-3-基氨基甲酸(S)-苄基酯(0.67g，3.03mmol)和吡唑(0.22g，3.29mmol)在CH3CN(12mL)中的混悬液加热24h。将混合物冷却至室温过夜，过滤固体得到(S)-2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(330.1mg)。真空浓缩滤液，然后用少量CH3CN(约4mL)研磨，得到第二批产物(43.5mg)。总产量370.4mg(44％)。m.p.165.5-168℃。文献m.p.168.5-169.5[Vederas et al.J.Am.Chem.Soc.1985，107，7105]。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.51(d，J＝2.0，1H)，7.48(s，J＝1.5Hz，1H)，7.24-7.34(m，5H)，6.23m，1H)，5.05(d，12.7H，1H)，5.03(d，J＝12.7Hz，1H)，4.59-4.66(m，2H)，4.42-4.49(m，1H).LCMS：Anal.Calcd.for C14H15N3O4分析计算值：289；实测值：290(M+H)+。
步骤2.(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(Cap-129)的制备.
Figure BPA00001479917702071
在大气压力下，将(S)-2-(苄氧基羰基氨基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(0.20g，0.70mmol)在Pd-C(45mg)存在下，在MeOH(5mL)中氢化2h。产物似乎不溶于MeOH，因此，将反应混合物用5mL H2O和数滴6NHCl稀释。将该均相溶液通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917702072
)过滤，真空除去MeOH。将剩余的溶液冷冻并冷冻干燥，得到黄色泡沫状物(188.9mg)。将该物质悬浮于THF-H2O(1∶1，10mL)中，然后冷却至0℃。向该冷却的混合物中小心地加入NaHCO3(146.0mg，1.74mmol)(放出CO2)。气体溢出停止(约15min)后，滴加入ClCO2Me(0.06mL，0.78mmol)。将混合物搅拌2h，然后用6N HCl酸化至pH～2，倒入EtOAc中。分离各层，将水层用EtOAC提取(x5)。将合并的有机层洗涤(盐水)，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩得到标题化合物，为无色固体(117.8mg，79％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.04(s，1H)，7.63(d，J＝2.6Hz，1H)，7.48(d，J＝8.1Hz，1H)，7.44(d，J＝1.5Hz，1H)，6.19(app t，J＝2.0Hz，1H)，4.47(dd，J＝3.0，12.9Hz，1H)，4.29-4.41(m，2H)，3.48(s，3H).LCMS：C8H11N3O4分析计算值：213；实测值：214(M+H)+。
Figure BPA00001479917702073
通过采用类似于Calmes，M.；Daunis，J.；Jacquier，R.；Verducci，J.Tetrahedron，1987，43(10)，2285.中给出的方法，酰化可市售获得的(R)-苯基甘氨酸，制备Cap-130。
Figure BPA00001479917702081
步骤a：将二甲基氨基甲酰氯(0.92mL，10mmol)慢慢加入到2-氨基-3-甲基丁酸(S)-苄基酯盐酸盐(2.44g；10mmol)和Hunig’s碱(3.67mL，21mmol)的THF(50mL)溶液中。将得到的白色混悬液室温下搅拌过夜(16小时)，减压浓缩。将残留物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩。得到的黄色油状物经快速层析纯化，用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脱。真空浓缩收集的流分得到2.35g(85％)澄清油状物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm0.84(d，J＝6.95Hz，3H)，0.89(d，J＝6.59Hz，3H)，1.98-2.15(m，1H)，2.80(s，6H)，5.01-5.09(m，J＝12.44Hz，1H)，5.13(d，J＝12.44Hz，1H)，6.22(d，J＝8.05Hz，1H)，7.26-7.42(m，5H).LC(Cond.1)：RT＝1.76min；MS：[M+H]+C16H22N2O3分析计算值：279.17；实测值：279.03。
步骤b：向以上制备的中间体(2.35g；8.45mmol)的MeOH(50mL)溶液中加入Pd/C(10％；200mg)，将得到的黑色混悬液用N2(3x)冲洗并置于1个大气压H2下。将混合物在室温下搅拌过夜，通过微纤维滤器过滤除去催化剂。然后将得到的澄清溶液减压浓缩，得到1.43g(89％)Cap-131，为白色泡沫状物，其无需进一步纯化而使用。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 0.87(d，J＝4.27Hz，3H)，0.88(d，J＝3.97Hz，3H)，1.93-2.11(m，1H)，2.80(s，6H)，3.90(dd，J＝8.39，6.87Hz，1H)，5.93(d，J＝8.54Hz，1H)，12.36(s，1H).LC(Cond.1)：RT＝0.33min；MS：[M+H]+C8H17N2O3分析计算值：189.12；实测值：189.04。
Cap-132
Figure BPA00001479917702091
根据对Cap-132所述的方法，用2-氨基丙酸(S)-苄基酯盐酸盐，制备Cap-132。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.27(d，J＝7.32Hz，3H)，2.80(s，6H)，4.06(qt，1H)，6.36(d，J＝7.32Hz，1H)，12.27(s，1H).LC(Cond.1)：RT＝0.15min；MS：[M+H]+C6H13N2O3分析计算值：161.09；实测值：161.00。
根据对Cap-47所述的方法，用2-氨基-3-甲基丁酸(S)-叔丁基酯和氯甲酸2-氟乙基酯，制备Cap-133。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 0.87(t，J＝6.71Hz，6H)，1.97-2.10(m，1H)，3.83(dd，J＝8.39，5.95Hz，1H)，4.14-4.18(m，1H)，4.20-4.25(m，1H)，4.50-4.54(m，1H)，4.59-4.65(m，1H)，7.51(d，J＝8.54Hz，1H)，12.54(s，1H)。
Figure BPA00001479917702093
根据对Cap-51所述的方法，用(S)-二乙基苯胺和氯甲酸甲酯制备Cap-134。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 0.72-0.89(m，6H)，1.15-1.38(m，4H)，1.54-1.66(m，1H)，3.46-3.63(m，3H)，4.09(dd，J＝8.85，5.19Hz，1H)，7.24(d，J＝8.85Hz，1H)，12.55(s，1H).LC(Cond.2)：RT＝0.66min；LC/MS：[M+H]+C9H18NO4分析计算值：204.12；实测值：204.02。
Cap-135
Figure BPA00001479917702101
在25℃下，将D-2-氨基-(4-氟苯基)乙酸(338mg，2.00mmol)、1NHCl乙醚溶液(2.0mL，2.0mmol)和福尔马林(37％，1mL)的甲醇(5mL)的溶液经10％披钯碳(60mg)进行气囊氢化16h。然后将混合物通过硅藻土过滤，得到Cap-135的HCl盐，为白色泡沫状物(316mg，80％)。1H NMR(300MHz，MeOH-d4)δ7.59(dd，J＝8.80，5.10Hz，2H)，7.29(t，J＝8.6Hz，2H)，5.17(s，1H)，3.05(v br s，3H)，2.63(v br s，3H)；Rt＝0.19min(Cond.-MS-W5)；95％均一性指数；LRMS：[M+H]+C10H13FNO2分析计算值：198.09；实测值：198.10。
氮气下，向冷却的(-50℃)1-苄基-1H-咪唑(1.58g，10.0mmol)的无水乙醚(50mL)的混悬液中滴加入正丁基锂(2.5M己烷溶液，4.0mL，10.0mmol)。在-50℃下搅拌20min后，向反应混合物中鼓泡通入干燥的二氧化碳(通过Drierite)10min，然后温热至25℃。将在向反应混合物中加入二氧化碳时形成的大量沉淀过滤，得到一种吸湿性的、白色固体，将其溶于水(7mL)中，酸化至pH＝3，冷却，并通过刮擦诱发结晶。过滤该沉淀物得到白色固体，将其混悬于甲醇中，用1N HCl/乙醚(4mL)处理，真空浓缩。将水(5mL)中的残留物冷冻干燥，得到Cap-136的HCl盐，为白色固体(817mg，40％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.94(d，J＝1.5Hz，1H)，7.71(d，J＝1.5Hz，1H)，7.50-7.31(m，5H)，5.77(s，2H)；Rt＝0.51min(Cond.-MS-W5)；95％均一性指数；LRMS：[M+H]+C11H12N2O2分析计算值：203.08；实测值：203.11。
在氮气下，将1-氯-3-氰基异喹啉(188mg，1.00mmol；根据WO2003/099274中的方法制备)(188mg，1.00mmol)、氟化铯(303.8mg，2.00mmol)、双(三丁基膦)二氯化钯(10mg，0.02mmol)和2-(三丁基锡烷基)呋喃(378μL，1.20mmol)在无水二氧六环(10mL)中的混悬液于80℃加热16h，然后冷却至25℃，剧烈搅拌下用饱和、氟化钾水溶液搅拌1h。将混合物在乙酸乙酯和水之间分配，分离有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物经硅胶纯化(用0％-30％乙酸乙酯/己烷洗脱)得到Cap-137，步骤a(230mg，105％)，为白色固体，其直接进一步使用。Rt＝1.95min(Cond.-MS-W2)；90％均一性指数；LRMS：[M+H]+C14H8N2O分析计算值：221.07；实测值：221.12。
Cap-137
向Cap 137，步骤a，(110mg，0.50mmol)和高碘酸钠(438mg，2.05mmol)的四氯化碳(1mL)、乙腈(1mL)和水(1.5mL)的混悬液中加入水合三氯化钌(2mg，0.011mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h，然后在二氯甲烷和水之间分配。分离水层，用二氯甲烷提取2次以上，合并的二氯甲烷提取液经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残留物用己烷研磨得到Cap-137(55mg，55％)，为浅灰色固体。Rt＝1.10min(Cond.-MS-W2)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C11H8N2O2分析计算值：200.08；实测值：200.08。
Caps 138-158
合成策略.方法A.
Figure BPA00001479917702121
向搅拌的5-羟基异喹啉(根据WO 2003/099274中所述方法制备)(2.0g，13.8mmol)和三苯膦(4.3g，16.5mmol)的无水四氢呋喃(20mL)混悬液中分批加入无水甲醇(0.8mL)和偶氮二甲酸二乙酯(3.0mL，16.5mmol)。将混合物在室温下搅拌20h，然后用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残留物预吸附于硅胶上，层析(用40％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到Cap-138，步骤a(1.00g，45％)，为浅黄色固体。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ9.19(s，1H)，8.51(d，J＝6.0Hz，1H)，7.99(d，J＝6.0Hz，1H)，7.52-7.50(m，2H)，7.00-6.99(m，1H)，4.01(s，3H)；Rt＝0.66min(Cond.-D2)；95％均一性指数；LCMS：[M+H]+C10H10NO分析计算值：160.08；实测值：160.1。
Cap-138，步骤b
室温下，向搅拌的Cap 138，步骤a(2.34g，14.7mmol)的无水二氯甲烷(50mL)溶液中一次性加入间氯过苯甲酸(77％，3.42g，19.8mmol)。搅拌20h后，加入粉末状碳酸钾(2.0g)，室温下将该混合物搅拌1h，然后过滤并真空浓缩，得到Cap-138，步骤b(2.15g，83％)，为浅黄色固体，其纯度足以直接使用。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ8.73(d，J＝1.5Hz，1H)，8.11(dd，J＝7.3，1.7Hz，1H)，8.04(d，J＝7.1Hz，1H)，7.52(t，J＝8.1Hz，1H)，7.28(d，J＝8.3Hz，1H)，6.91(d，J＝7.8Hz，1H)，4.00(s，3H)；Rt＝0.92min，(Cond.-D1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C10H10NO2分析计算值：176.07；实测值：176.0。
Figure BPA00001479917702132
在室温、氮气下，向搅拌的Cap 138，步骤b(0.70g，4.00mmol)和三乙胺(1.1mL，8.00mmol)的无水乙腈(20mL)溶液中加入三甲基甲硅烷基氰化物(1.60mL，12.00mmol)。将混合物在75℃下加热20h，然后冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，然后经Na2SO4干燥，浓缩溶剂。残留物经硅胶快速层析纯化(用5％-25％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱)，得到为白色结晶固体的Cap-138，步骤c(498.7mg，68％)以及223mg(30％)从滤液中回收的另外的Cap-138，步骤c。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ8.63(d，J＝5.5Hz，1H)，8.26(d，J＝5.5Hz，1H)，7.88(d，J＝8.5Hz，1H)，7.69(t，J＝8.0Hz，1H)，7.08(d，J＝7.5Hz，1H)，4.04(s，3H)；Rt＝1.75min，(Cond.-D1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C11H9N2O分析计算值：185.07；实测值：185.10。
Cap-138
将Cap-138，步骤c(0.45g，2.44mmol)用5N氢氧化钠溶液(10mL)处理，将得到的混悬液在85℃下加热4h，冷却至25℃，用二氯甲烷稀释，用1N盐酸酸化。分离有机相，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，浓缩至1/4体积，过滤得到Cap-138(0.44g，88.9％)，为黄色固体。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ13.6(br s，1H)，8.56(d，J＝6.0Hz，1H)，8.16(d，J＝6.0Hz，1H)，8.06(d，J＝8.8Hz，1H)，7.71-7.67(m，1H)，7.30(d，J＝8.0Hz，1H)，4.02(s，3H)；Rt＝0.70min(Cond.-D1)；95％均一性指数；LCMS：[M+H]+C11H10NO3分析计算值：204.07；实测值：204.05。
合成方案.方法B(源自Tetrahedron Letters，2001，42，6707).
向装有氩气脱气的1-氯-6-甲氧基异喹啉(1.2g，6.2mmol；根据WO 2003/099274中所述方法制备)、氰化钾(0.40g，6.2mmol)、1，5-双(二苯膦基)戊烷(0.27g，0.62mmol)和乙酸钯(II)(70mg，0.31mmol)的无水甲苯(6mL)的混悬液的厚壁、带螺旋盖的玻璃瓶中，加入N，N，N’，N’-四甲基乙二胺(0.29mL，2.48mmol)。将该玻璃瓶密封，在150℃下加热22h，然后冷却至25℃。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物经硅胶纯化(用5％乙酸乙酯/己烷-25％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)，得到Cap-139，步骤a(669.7mg，59％)，为白色固体。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ8.54(d，J＝6.0Hz，1H)，8.22(d，J＝9.0Hz，1H)，7.76(d，J＝5.5Hz，1H)，7.41-7.39(m，1H)，7.13(d，J＝2.0Hz，1H)，3.98(s，3H)；Rt＝1.66min(Cond.-D1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C11H9N2O分析计算值：185.07；实测值：185.2。
Cap-139
根据对Cap 138所述的方法，用5NNaOH碱水解Cap-139，步骤a，制备Cap-139。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.63(v br s，1H)，8.60(d，J＝9.3Hz，1H)，8.45(d，J＝5.6Hz，1H)，7.95(d，J＝5.9Hz，1H)，7.49(d，J＝2.2Hz，1H)，7.44(dd，J＝9.3，2.5Hz，1H)，3.95(s，3H)；Rt＝0.64min(Cond.-D1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C11H10NO3分析计算值：204.07；实测值：204.05。
Figure BPA00001479917702151
在25℃、氮气下，向1，3-二氯-5-乙氧基异喹啉(482mg，2.00mmol；根据WO 2005/051410中方法制备)、乙酸钯(II)(9mg，0.04mmol)、碳酸钠(223mg，2.10mmol)和1，5-双(二苯膦基)戊烷(35mg，0.08mmol)的无水二甲基乙酰胺(2mL)的混合物中加入N，N，N’，N’-四甲基乙二胺(60mL，0.40mmol)。10min后，将混合物加热至150℃，然后在18小时内，用注射器泵以每次1mL加入丙酮合氰化氢储备液(用457μL丙酮合氰化氢在4.34mL DMA中制备)。然后将混合物在乙酸乙酯和水之间分配，分离有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物经硅胶纯化(用10％乙酸乙酯/己烷-40％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)，得到Cap-140，步骤a(160mg，34％)，为黄色固体。Rt＝2.46min(Cond.-MS-W2)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C12H9ClN2O分析计算值：233.05；实测值：233.08。
Cap-140
按照如下所述制备Cap 141所述的方法，通过用12N HCl酸水解Cap-140，步骤a，制备Cap-140。Rt＝2.24min(Cond.-MS-W2)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C12H11ClNO3分析计算值：252.04；实测值：252.02。
Figure BPA00001479917702161
根据对制备Cap-140，步骤a所述方法(同上)，用1-溴-3-氟异喹啉(采用J.Med.Chem.1970，13，613中所述方法，用3-氨基-1-溴异喹啉制备)制备Cap-141，步骤a。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.35(d，J＝8.5Hz，1H)，7.93(d，J＝8.5Hz，1H)，7.83(t，J＝7.63Hz，1H)，7.77-7.73(m，1H)，7.55(s，1H)；Rt＝1.60min(Cond.-D1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C10H6FN2分析计算值：173.05；实测值：172.99。
Cap-141
将Cap-141，步骤a(83mg，0.48mmol)用12N HCl(3mL)处理，将得到的浆状物在80℃下加热16h，然后冷却至室温，用水(3mL)稀释。将混合物搅拌10min，然后过滤得到Cap-141(44.1mg，48％)，为灰白色固体。将滤液用二氯甲烷稀释，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，浓缩得到Cap-141(29.30mg，32％)，其纯度足以直接进一步使用。1H NMR(DMSO-d6，500MHz)δ14.0(br s，1H)，8.59-8.57(m，1H)，8.10(d，J＝8.5Hz，1H)，7.88-7.85(m，2H)，7.74-7.71(m，1H)；Rt＝1.33min(Cond.-D 1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C10H7FNO2分析计算值：192.05；实测值：191.97。
Figure BPA00001479917702171
根据对制备Cap-138，步骤b和c两-步骤的所述方法，用4-溴异喹啉N-氧化物制备Cap-142，步骤a。Rt＝1.45min(Cond.-MS-W1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C10H6BrN2分析计算值：232.97；实测值：233.00。
向氩气脱气的Cap-142，步骤a(116mg，0.50mmol)、磷酸三钾(170mg，0.80mmol)、乙酸钯(II)(3.4mg，0.015mmol)和2-(二环己基膦基)联苯(11mg，0.03mmol)的无水甲苯(1mL)的混悬液中加入吗啉(61μL，0.70mmol)。将混合物在100℃加热16h，冷却至25℃，通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917702181
)过滤，浓缩。残留物经硅胶纯化(用10％-70％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱)，得到Cap-142，步骤b(38mg，32％)，为黄色固体，可直接进一步使用。Rt＝1.26min(Cond.-MS-W1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C14H14N3O分析计算值：240.11；实测值：240.13。
Cap-142
根据对Cap 138所述方法，用Cap-142，步骤b与5N氢氧化钠，制备Cap-142。Rt＝0.72min(Cond.-MS-W1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C14H15N2O3分析计算值：259.11；实测值：259.08。
Figure BPA00001479917702182
向搅拌的3-氨基-1-溴异喹啉(444mg，2.00mmol)的无水二甲基甲酰胺(10mL)溶液中一次性加入氢化钠(60％，未洗，96mg，2.4mmol)。将混合物在25℃下搅拌5min，然后加入2-溴乙醚(90％，250μL，2.00mmol)。将混合物再在25℃下搅拌5h并在75℃下搅拌72h，然后冷却至25℃，用饱和氯化铵溶液猝灭，用乙酸乙酯稀释。分离有机层，用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物经硅胶纯化(用0％-70％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱)，得到Cap-143，步骤a(180mg，31％)，为黄色固体。Rt＝1.75min(Cond.-MS-W1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C13H14BrN2O分析计算值：293.03；实测值：293.04。
Cap-143
向Cap-143，步骤a(154mg，0.527mmol)的无水四氢呋喃(5mL)的冷却的(-60℃)溶液中，加入正丁基锂的己烷溶液(2.5M，0.25mL，0.633mmol)。10min后，向反应混合物中鼓泡通入干燥的二氧化碳10min，然后用1N HCl猝灭，温热至25℃。然后将混合物用二氯甲烷(3x 30mL)提取，真空浓缩合并的有机提取液。残留物经反相HPLC纯化(MeOH/水/TFA)得到Cap-143(16mg，12％)。Rt＝1.10min(Cond.-MS-W1)；90％均一性指数；LCMS：[M+H]+C14H15N2O3分析计算值：259.11；实测值：259.08。
Figure BPA00001479917702191
将1，3-二氯异喹啉(2.75g，13.89mmol)分多次小份加入到发烟硝酸(10mL)和浓硫酸(10mL)的冷却的(0℃)溶液中。将混合物在0℃下搅拌0.5h，然后慢慢温热至25℃，期间搅拌16h。然后将混合物倒入装有碎冰和水的烧杯中，将得到的混悬液在0℃下搅拌1h，然后过滤得到Cap-144，步骤a(2.73g，81％)，为黄色固体，可直接使用。Rt＝2.01min(Cond.-D1)；95％均一性指数；LCMS：[M+H]+C9H5Cl2N2O2分析计算值：242.97；实测值：242.92。
Figure BPA00001479917702201
将Cap-144，步骤a(0.30g，1.23mmol)溶于甲醇(60mL)中，用氧化铂(30mg)处理，将该混悬液在7psi H2下进行Parr氢化1.5h，然后加入福尔马林(5mL)和另外的氧化铂(30mg)。再将该混悬液在45psiH2下进行Parr氢化13h，然后通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917702202
)抽吸过滤，浓缩至1/4体积。抽吸过滤随后产生的沉淀得到标题化合物，为黄色固体，经硅胶快速层析(用5％乙酸乙酯/己烷-25％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)，得到Cap-144，步骤b(231mg，78％)，为浅黄色固体。Rt＝2.36min(Cond.-D1)；95％均一性指数；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，7.95(d，J＝8.6Hz，1H)，7.57-7.53(m，1H)，7.30(d，J＝7.3Hz，1H)，2.88(s，6H)；LCMS：[M+H]+C11H11Cl2N2分析计算值：241.03；实测值：241.02。HRMS：[M+H]+C11H11Cl2N2分析计算值：241.0299；实测值：241.0296。
Figure BPA00001479917702203
根据对制备Cap-139，步骤a所述的方法，用Cap-144，步骤b制备Cap-144，步骤c。Rt＝2.19min(Cond.-D1)；95％均一性指数；LCMS：[M+H]+C12H11ClN3分析计算值：232.06；实测值：232.03。HRMS：[M+H]+C12H11ClN3分析计算值：232.0642；实测值：232.0631。
Cap-144
根据对Cap-141所述的方法，制备Cap-144。Rt＝2.36min(Cond.-D1)；90％；LCMS：[M+H]+C12H12ClN2O2分析计算值：238.01；实测值：238.09。
Caps-145至-162
除另有说明外，根据对制备Cap-138(方法A)或Cap-139(方法B)所述的方法，使用适合的1-氯异喹啉制备Caps-145至162，如下所概述的。
Figure BPA00001479917702211
Figure BPA00001479917702221
Figure BPA00001479917702231
Figure BPA00001479917702241
Figure BPA00001479917702251
向2-酮基丁酸(1.0g，9.8mmol)的乙醚(25ml)溶液中滴加入苯基溴化镁(22ml，1M在THF中)。在约25℃、氮气下，将反应物搅拌17.5h。将反应物用1N HCl酸化，将产物用乙酸乙酯提取(3x 100ml)。将合并的有机层用水和盐水顺次洗涤，并经MgSO4干燥。真空浓缩后，得到白色固体。将该固体用己烷/乙酸乙酯重结晶，得到Cap-163(883.5mg)，为白色针状物。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，500MHz)：12.71(br s，1H)，7.54-7.52(m，2H)，7.34-7.31(m，2H)，7.26-7.23(m，1H)，5.52-5.39(br s，1H)，2.11(m，1H)，1.88(m，1H)，0.79(app t，J＝7.4Hz，3H).
Figure BPA00001479917702253
在帕尔瓶(Parr bottle)中，将2-氨基-2-苯基丁酸(1.5g，8.4mmol)、甲醛(14mL，37％在水中)、1N HCl(10mL)和10％Pd/C(0.5mg)在MeOH(40mL)中的混合物暴露于50psi的H2下42h。将反应物经硅藻土过滤，真空浓缩，将残留物溶于MeOH(36mL)中，产物经反相HPLC纯化(MeOH/H2O/TFA)，得到Cap-164的TFA盐，为白色固体(1.7g)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，500MHz)7.54-7.47(m，5H)，2.63(m，1H)，2.55(s，6H)，2.31(m，1H)，0.95(app t，J＝7.3Hz，3H)。
向2-氨基-2-二氢化茚甲酸(258.6mg，1.46mmol)和甲酸(0.6ml，15.9mmol)的1，2-二氯乙烷(7ml)混合物中加入甲醛(0.6ml，37％水溶液)。在约25℃下，将混合物搅拌15min，然后在70℃下加热8h。真空除去挥发性组分，将残留物溶于DMF(14mL)中，经反相HPLC(MeOH/H2O/TFA)纯化，得到Cap-165的TFA盐，为粘稠油状物(120.2mg)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，500MHz)：7.29-7.21(m，4H)，3.61(d，J＝17.4Hz，2H)，3.50(d，J＝17.4Hz，2H)，2.75(s，6H).LC/MS：[M+H]+C12H16NO2分析计算值：206.12；实测值：206.07。
Figure BPA00001479917702262
Caps-166a和-166b的制备根据对合成Cap-7a和Cap-7b所述的方法，用(1S，4S)-(+)-2-甲基-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷(2HBr)进行，但所述苄基酯中间体的分离采用半制备Chrialcel OJ柱，20x 250mm，10μm，用85∶15庚烷/乙醇混合物洗脱，洗脱速度10mL/min，洗脱时间25min。Cap-166b：1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，500MHz)：7.45(d，J＝7.3Hz，2H)，7.27-7.19(m，3H)，4.09(s，1H)，3.34(app br s，1H)，3.16(app br s，1H)，2.83(d，J＝10.1Hz，1H)，2.71(m，2H)，2.46(m，1H)，2.27(s，3H)，1.77(d，J＝9.8Hz，1H)，1.63(d，J＝9.8Hz，1H).LC/MS：[M+H]+C14H19N2O2分析计算值：247.14；实测值：247.11。
在约25℃下，将外消旋Boc-1，3-二氢-2H-异吲哚甲酸(1.0g，3.8mmol)的20％TFA/CH2Cl2溶液搅拌4h。真空除去所有的挥发性成分。在帕尔瓶中，将得到的粗品物质、甲醛(15mL，37％水溶液)、1N HCl(10mL)和10％Pd/C(10mg)在MeOH中的混合液暴露于H2(40PSI)23h。将反应混合物经硅藻土过滤，真空浓缩，得到黄色泡沫状物的Cap-167(873.5mg)。1H NMR(DMSO-d6，δ＝2.5ppm，500MHz)7.59-7.38(m，4H)，5.59(s，1H)，4.84(d，J＝14Hz，1H)，4.50(d，J＝14.1Hz，1H)，3.07(s，3H).LC/MS：[M+H]+C10H12NO2分析计算值：178.09；实测值：178.
Figure BPA00001479917702272
根据对制备Cap-167所述的方法，用外消旋的Boc-氨基二氢化茚-1-甲酸制备外消旋的Cap-168。原样应用粗产物。
将2-氨基-2-苯基丙酸盐酸盐(5.0g，2.5mmol)、甲醛(15ml，37％在水中)、1N HCl(15ml)和10％Pd/C(1.32g)在MeOH(60mL)中的混合物置于帕尔瓶中，在氢气(55PSI)下振摇4日。将反应混合物通过硅藻土(Celite
Figure BPA00001479917702281
)过滤，真空浓缩。将残留物溶于MeOH中，经反相制备-HPLC纯化(MeOH/水/TFA)，得到Cap-169的TFA盐，为粘稠状半固体(2.1g)。1H NMR(CDCl3，δ＝7.26ppm，500MHz)：7.58-7.52(m，2H)，7.39-7.33(m，3H)，2.86(br s，3H)，2.47(br s，3H)，1.93(s，3H).LC/MS：[M+H]+C11H16NO2分析计算值：194.12；实测值194.12。
Figure BPA00001479917702282
向在水(15ml)溶液中的(S)-2-氨基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(505mg；3.18mmol；源自Astatech)加入碳酸钠(673mg；6.35mmol)，将得到的混合物冷却至0℃，然后用5分钟滴加入氯甲酸甲酯(0.26ml；3.33mmol)。将反应物搅拌18小时，期间用外浴解冻至室温。然后将反应混合物在1N HCl和乙酸乙酯之间分配。移去有机层，将水层再用2份乙酸乙酯进一步提取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到无色残留物的Cap-170。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 12.65(1H，br s)，7.44(1H，d，J＝8.24Hz)，3.77-3.95(3H，m)，3.54(3H，s)，3.11-3.26(2H，m)，1.82-1.95(1H，m)，1.41-1.55(2H，m)，1.21-1.39(2H，m)；LC/MS：[M+H]+C9H16NO5分析计算值：218.1；实测值：218.1。
Figure BPA00001479917702283
将2-(苄氧基羰基氨基)-2-(氧杂环丁-3-亚基)乙酸甲酯(200mg，0.721mmol；Il Farmaco(2001)，56，609-613)的乙酸乙酯(7ml)和CH2Cl2(4.00ml)溶液通过鼓泡通入氮气脱气10min。然后加入二碳酸二甲酯(0.116ml，1.082mmol)和Pd/C(20mg，0.019mmol)，将反应混合物装配氢气囊，然后室温下搅拌过夜，此时TLC(95∶5CH2Cl2/MeOH；用1g Ce(NH4)2SO4，6g钼酸铵、6ml硫酸和100ml水制成的染色剂显色)表明完成转化。将反应物通过硅藻土过滤并浓缩。残留物通过Biotage
Figure BPA00001479917702291
纯化(用二氯甲烷装载于25samplet；用二氯甲烷在25S柱上洗脱3CV，然后0-5％MeOH/二氯甲烷洗脱250ml，然后保持5％MeOH/二氯甲烷250ml；9ml流分)。收集含有所要求产物的流分，浓缩得到120mg(81％)的2-(甲氧基羰基氨基)-2-(氧杂环丁-3-基)乙酸甲酯，为无色油状物。1H NMR(500MHz，CHLOROFORM-D)δppm3.29-3.40(m，J＝6.71Hz，1H)3.70(s，3H)3.74(s，3H)4.55(t，J＝6.41Hz，1H)4.58-4.68(m，2H)4.67-4.78(m，2H)5.31(br s，1H).LC/MS：[M+H]+C8H14NO5分析计算值：204.2；实测值204.0。
向2-(甲氧基羰基氨基)-2-(氧杂环丁-3-基)乙酸甲酯(50mg，0.246mmol)的THF(2mL)和水(0.5mL)中加入氢氧化锂单水合物(10.33mg，0.246mmol)。将得到的溶液室温下搅拌过夜。TLC(1∶1EA/Hex；Hanessian染色剂[1g Ce(NH4)2SO4、6g钼酸铵、6ml硫酸和100ml水])表明剩余约10％原料。再加入另外3mg LiOH并在室温下搅拌过夜，此时TLC表明无剩余的原料。真空浓缩，置于高真空下过夜，得到为无色固体的55mg 2-(甲氧基羰基氨基)-2-(氧杂环丁-3-基)乙酸锂。1HNMR(500MHz，MeOD)δppm 3.39-3.47(m，1H)3.67(s，3H)4.28(d，J＝7.93Hz，1H)4.64(t，J＝6.26Hz，1H)4.68(t，J＝7.02Hz，1H)4.73(d，J＝7.63Hz，2H).
Figure BPA00001479917702292
Figure BPA00001479917702301
以下重氮化步骤改编自Barton，A.；Breukelman，S.P.；Kaye，P.T.；Meakins，G.D.；Morgan，D.J.J.C.S.Perkin Trans I 1982，159-164：将NaNO2(166mg，2.4mmol)的水(0.6mL)溶液缓慢加至搅拌的、冷却的(0℃)2-氨基-5-乙基-1，3-噻唑-4-甲酸甲酯(186mg，1.0mmol)、CuSO4·5H2O(330mg，1.32mmol)、NaCl(260mg，4.45mmol)和H2SO4(5.5mL)的水(7.5mL)溶液中。将该混合物在0℃下搅拌45min，然后温热至室温，期间再搅拌1h，然后加入CuCl(118mg)。将混合物再在室温下搅拌16小时，然后用盐水稀释，用乙醚提取2次。合并有机层，经MgSO4干燥，浓缩得到2-氯-5-乙基噻唑-4-甲酸甲酯(即Cap-172，步骤a)(175mg，85％)，为橙色油状物(80％纯度)，其直接用于下一步反应中。Rt＝1.99min(Cond.-MD1)；LC/MS：[M+H]+C7H9ClNO2S分析计算值：206.01；实测值：206.05。
Cap-172
向2-氯-5-乙基噻唑-4-甲酸甲酯(175mg)的THF/H2O/MeOH(20mL/3mL/12mL)溶液中加入LiOH(305mg，12.76mmol)。将混合物室温下搅拌过夜，然后浓缩，用1N HCl的乙醚溶液(25mL)中和。将残留物用乙酸乙酯提取2次，合并有机层，经MgSO4干燥并蒸发，得到为红色固体的Cap-172(60mg，74％)，其使用时不经进一步纯化。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 13.03-13.42(1H，m)，3.16(2H，q，J＝7.4Hz)，1.23(3H，t，J＝7.5Hz).Rt＝1.78min(Cond.-MD1)；LC/MS：[M+H]+C6H7ClNO2S分析计算值：191.99；实测值：191.99。
Cap-173
Figure BPA00001479917702311
以下重氮化步骤改编自Barton，A.；Breukelman，S.P.；Kaye，P.T.；Meakins，G.D.；Morgan，D.J.J.C.S.Perkin Trans I 1982，159-164：将NaNO2(150mg，2.17mmol)的水(1.0mL)溶液滴加至搅拌的、冷却的(0℃)2-氨基-5-乙基-1，3-噻唑-4-甲酸甲酯(186mg，1.0mmol)的50％H3PO2(3.2mL)溶液中。将该混合物在0℃下搅拌1h，然后温热至室温，期间再搅拌2h。再冷却至0℃，将混合物用NaOH(85mg)的水溶液(10mL)慢慢处理。然后将混合物用饱和NaHCO3溶液稀释，用乙醚提取2次。合并有机层，经MgSO4干燥，浓缩得到5-乙基噻唑-4-甲酸甲酯(即Cap-173，步骤a)(134mg，78％)，为橙色油状物(85％纯度)，其直接用于下一步反应中。Rt＝1.58min(Cond.-MD1)；LC/MS：[M+H]+C7H10NO2S分析计算值：172.05；实测值：172.05。
Cap-173
向5-乙基噻唑-4-甲酸甲酯(134mg)的THF/H2O/MeOH(18mL/2.7mL/11mL)溶液中加入LiOH(281mg，11.74mmol)。将混合物室温下搅拌过夜，然后浓缩，用1NHCl的乙醚溶液(25mL)中和。将残留物用乙酸乙酯提取2次，合并有机层，经MgSO4干燥并蒸发，得到为橙色固体的Cap-173(90mg，73％)，其使用时不经进一步纯化。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 12.74-13.04(1H，m)，3.20(2H，q，J＝7.3Hz)，1.25(3H，t，J＝7.5Hz).Rt＝1.27min(Cond.-MD1)；LC/MS：[M+H]+C6H8NO2S分析计算值：158.03；实测值：158.04。
Figure BPA00001479917702321
将三氟甲磺酸酐(5.0g，18.0mmol)滴加到冷却的(0℃)3-羟基吡啶甲酸甲酯(2.5g，16.3mmol)和TEA(2.5mL，18.0mmol)的CH2Cl2(80mL)溶液中。将混合物在0℃下搅拌1h，然后温热至室温，期间继续搅拌另外1h。然后将混合物用饱和NaHCO3溶液(40mL)猝灭，分离有机层，用盐水洗涤，经MgSO4干燥并蒸发得到3-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶甲酸甲酯(即Cap-174，步骤a)(3.38g，73％)，为深棕色油状物(＞95％pure)，其不经进一步纯化直接使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm 8.72-8.79(1H，m)，7.71(1H，d，J＝1.5Hz)，7.58-7.65(1H，m)，4.04(3H，s).Rt＝1.93min(Cond.-MD1)；LC/MS：[M+H]+C8H7F3NO5S分析计算值：286.00；实测值：286.08。
Cap-174
向3-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶甲酸甲酯(570mg，2.0mmol)的DMF(20mL)溶液中加入LiCl(254mg，6.0mmol)、三丁基(乙烯基)锡烷(761mg，2.4mmol)和双(三苯膦)二氯化钯(42mg，0.06mmol)。将混合物在100℃下加热过夜，然后在室温下向反应混合物中加入饱和KF溶液(20mL)。将混合物搅拌4h，然后通过硅藻土层(Celite)过滤，将硅藻土垫用乙酸乙酯洗涤。然后分离滤液的水相，真空浓缩。将残留物用4NHCl的二氧六环液(5mL)处理，将得到的混合物用甲醇提取，过滤并蒸发，得到Cap-174(260mg)，为绿色固体，其被无机盐稍稍污染，但使用时不必进一步纯化。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm8.21(1H，d，J＝3.7Hz)，7.81-7.90(1H，m)，7.09(1H，dd，J＝7.7，4.8Hz)，6.98(1H，dd，J＝17.9，11.3Hz)，5.74(1H，dd，J＝17.9，1.5Hz)，5.20(1H，d，J＝11.0Hz).Rt＝0.39min(Cond.-MD1)；LC/MS：[M+H]+C8H8NO2分析计算值：150.06；实测值：150.07。
向3-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶甲酸甲酯(即Cap 173，步骤a)(570mg，2.0mmol)、Cap-174的制备中的中间体，在DMF(20mL)的溶液中，加入LiCl(254mg，6.0mmol)、三丁基(乙烯基)锡烷(761mg，2.4mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(42mg，0.06mmol)。将混合物在100℃下加热4h，然后真空除去溶剂。将残留物溶解于乙腈(50mL)和己烷(50mL)中，将得到的混合物用己烷洗涤2次。然后分离乙腈层，通过硅藻土层过滤，并蒸发。采用Horizon仪器，将残留物快速层析纯化(25％乙酸乙酯/己烷至65％乙酸乙酯/己烷的梯度洗脱)，得到3-乙烯基吡啶甲酸甲酯(即Cap-175，步骤a)(130mg，40％)，为黄色油状物。1HNMR(300MHz，CDCl3)δppm 8.60(1H，dd，J＝4.6，1.7Hz)，7.94(1H，d，J＝7.7Hz)，7.33-7.51(2H，m)，5.72(1H，d，J＝17.2Hz)，5.47(1H，d，J＝11.0Hz)，3.99(3H，s).Rt＝1.29min(Cond.-MD1)；LC/MS：[M+H]+C9H10NO2分析计算值：164.07；实测值：164.06。
Figure BPA00001479917702341
将披钯碳(10％，25mg)加入到3-乙烯基吡啶甲酸甲酯(120mg，0.74mmol)的乙醇(10mL)溶液中。在室温、氢气气氛下，将该混悬液搅拌1h，然后通过硅藻土过滤，将该硅藻土垫(Celite
Figure BPA00001479917702342
)用甲醇洗涤。将滤液浓缩至干，得到3-乙基吡啶甲酸甲酯(即Cap-175，步骤b)，其直接用于下一步反应。Rt＝1.15min(Cond.-MD1)；LC/MS：[M+H]+C9H12NO2分析计算值：166.09；实测值：166.09。
Cap-175
向3-乙基吡啶甲酸甲酯的THF/H2O/MeOH(5mL/0.75mL/3mL)溶液中加入LiOH(35mg，1.47mmol)。将混合物室温下搅拌2日，然后再加入额外的LiOH(80mg)。再在室温下24h后，将混合物过滤，然后真空除去溶剂。然后将残留物用4NHCl的二氧六环(5mL)溶液处理，将得到的混悬液浓缩至干，得到Cap-175，为黄色固体，不经进一步纯化而使用。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 8.47(1H，dd，J＝4.8，1.5Hz)，7.82-7.89(1H，m)，7.53(1H，dd，J＝7.7，4.8Hz)，2.82(2H，q，J＝7.3Hz)，1.17(3H，t，J＝7.5Hz).Rt＝0.36min(Cond.-MD1)；LC/MS：[M+H]+C8H10NO2分析计算值：152.07；实测值：152.10。
Figure BPA00001479917702343
将1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-酮(15g，96mmol)的EtOAc(150mL)溶液加入到2-(苄氧基羰基氨基)-2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(21.21g，64.0mmol)的1，1，3，3-四甲基胍(10.45mL，83mmol)和EtOAc(150mL)的溶液中。将得到的溶液在室温下搅拌72h，然后用EtOAc(25mL)稀释。将有机层用1N HCl(75mL)、H2O(100mL)和盐水(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残留物经Biotage纯化(5％-25％EtOAc/己烷；300g柱)。然后将合并的含有产物的流分真空浓缩，将残留物从己烷/EtOAc中重结晶，得到白色晶体，其对应于2-(苄氧基羰基氨基)-2-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-亚基)乙酸甲酯(6.2g)。1H NMR(400MHz，CDCl3-d)δppm 7.30-7.44(5H，m)，6.02(1H，br.s.)，5.15(2H，s)，3.97(4H，s)，3.76(3H，br.s.)，2.84-2.92(2H，m)，2.47(2H，t，J＝6.40Hz)，1.74-1.83(4H，m).LC(Cond.OL1)：Rt＝2.89min.LC/MS：[M+Na]+C19H23NNaO6分析计算值：745.21；实测值：745.47。
Figure BPA00001479917702352
根据Burk，M.J.；Gross，M.F.and Martinez J.P.(J.Am.Chem.Soc.，1995，117，9375-9376及其中的参考文献)的方法，采用链烯Cap 176，步骤a制备酯Cap 176，步骤b：在N2覆盖下，向500mL高压瓶中加入链烯Cap 176，步骤a(3.5g，9.68mmol)的脱气MeOH(200mL)液。然后向该溶液中加入(-)-1，2-双((2S，5S)-2，5-二甲基磷杂环戊烷基(phospholano))乙烷(环辛二烯)铑(I)四氟硼酸盐(0.108g，0.194mmol)，然后将得到的混合物用N2冲洗(3x)，再加入H2(3x)。在室温、70psi的H2下，将该溶液剧烈振摇72h。减压除去溶剂，将遗留的残留物溶解于EtOAc中。然后将该棕色溶液通过硅胶小柱过滤，用EtOAc洗脱。真空浓缩溶剂，得到澄清油状物，其对应于酯Cap 176，步骤b(3.4g)。1H NMR(500MHz，CDCl3-d)δppm 7.28-7.43(5H，m)，5.32(1H，d，J＝9.16Hz)，5.06-5.16(2H，m)，4.37(1H，dd，J＝9.00，5.04Hz)，3.92(4H，t，J＝3.05Hz)，3.75(3H，s)，1.64-1.92(4H，m)，1.37-1.60(5H，m).LC(Cond.OL 1)：Rt＝1.95min.LC/MS：[M+H]+C19H26NO6分析计算值：364.18；实测值：364.27。
Figure BPA00001479917702361
将酯Cap 176，步骤b(4.78g，13.15mmol)溶解于THF(15mL)中，接着顺次加入水(10mL)、冰醋酸(26.4mL，460mmol)和二氯乙酸(5.44mL，65.8mmol)。将得到的混合物室温下搅拌72h，然后通过剧烈搅拌下慢慢加入固体Na2CO3直至不再有可见的气体放出来猝灭反应物。将粗产物提取至10％乙酸乙酯-二氯甲烷内，将有机层合并，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。得到的残留物通过Biotage(0-30％EtOAc/Hex；25g柱)纯化，得到酮Cap 176，步骤c(3.86g)，为澄清油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3-d)δppm 7.28-7.41(5H，m)，5.55(1H，d，J＝8.28Hz)，5.09(2H，s)，4.46(1H，dd，J＝8.16，5.14Hz)，3.74(3H，s)，2.18-2.46(5H，m)，1.96-2.06(1H，m)，1.90(1H，ddd，J＝12.99，5.96，2.89Hz)，1.44-1.68(2H，m，J＝12.36，12.36，12.36，12.36，4.77Hz).LC(Cond.OL 1)：Rt＝1.66min.LC/MS：[M+Na]+C17H21NNaO5分析计算值：342.13；实测值：342.10。
Cap176，步骤d
将Deoxo-Fluor(3.13mL，16.97mmol)加入到酮Cap 176，步骤c(2.71g，8.49mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中，接着加入催化量的EtOH(0.149mL，2.55mmol)。将得到的黄色溶液室温下搅拌过夜。将反应物通过加入饱和NaHCO3水溶液(25mL)猝灭，将混合物用EtOAc(3X75mL)提取。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤并干燥，得到黄色油状物。残留物通过Biotage色谱纯化(2％-15％EtOAc/Hex；90g柱)，回收白色固体，其对应于二氟氨基酸二氟化物Cap 176，步骤d(1.5g)。1H NMR(400MHz，，CDCl3-d)δppm 7.29-7.46(5H，m)，5.34(1H，d，J＝8.28Hz)，5.12(2H，s)，4.41(1H，dd，J＝8.66，4.89Hz)，3.77(3H，s)，2.06-2.20(2H，m)，1.83-1.98(1H，m)，1.60-1.81(4H，m)，1.38-1.55(2H，m).19F NMR(376MHz，CDCl3-d)δppm-92.15(1F，d，J＝237.55Hz)，-102.44(1F，d，J＝235.82Hz).LC(Cond.OL1)：Rt＝1.66min.LC/MS：[2M+Na]+C34H42F4N2NaO8分析计算值：705.28；实测值：705.18。
Figure BPA00001479917702373
将二氟化物Cap 176，步骤d(4g，11.72mmol)溶解于MeOH(120mL)中，加入Pd/C(1.247g，1.172mmol)。将该混悬液用N2冲洗(3x)，将反应混合物置于1atm的H2之下(气囊)。将混合物室温下搅拌48h。然后将混悬液通过硅藻土小柱过滤，真空浓缩得到油状物，其对应于氨基酸Cap 176，步骤e(2.04g)，其无需进一步纯化而使用。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.62(3H，s)，3.20(1H，d，J＝5.77Hz)，1.91-2.09(2H，m)，1.50-1.88(7H，m)，1.20-1.45(2H，m).19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δppm-89.39(1F，d，J＝232.35Hz)，-100.07(1F，d，J＝232.35Hz).13C NMR(101MHz，DMSO-d6)δppm 175.51(1C，s)，124.10(1C，t，J＝241.21，238.90Hz)，57.74(1C，s)，51.39(1C，s)，39.23(1C，br.s.)，32.02-33.83(2C，m)，25.36(1C，d，J＝10.02Hz)，23.74(1C，d，J＝9.25Hz).LC(Cond.OL2)：Rt＝0.95min.LC/MS：[2M+H]+C18H31F4N2O2分析计算值：415.22；实测值：415.40。
Figure BPA00001479917702381
将氯甲酸甲酯(1.495mL，19.30mmol)加入到氨基酸Cap 176，步骤e(2g，9.65mmol)和DIEA(6.74mL，38.6mmol)的CH2Cl2(100mL)溶液中。将得到的溶液室温下搅拌3h，减压除去挥发物。残留物通过Biotage纯化(0％-20％EtOAc/Hex；90g柱)。回收真空放置固化的澄清油状物，其对应于氨基甲酸酯Cap-176，步骤f(2.22g)。1H NMR(500MHz，CDCl3-d)δppm 5.27(1H，d，J＝8.55Hz)，4.39(1H，dd，J＝8.85，4.88Hz)，3.77(3H，s)，3.70(3H，s)，2.07-2.20(2H，m)，1.84-1.96(1H，m)，1.64-1.82(4H，m)，1.39-1.51(2H，m).19F NMR(471MHz，CDCl3-d)δppm-92.55(1F，d，J＝237.13Hz)，-102.93(1F，d，J＝237.12Hz).13C NMR(126MHz，CDCl3-d)δppm 171.97(1C，s)，156.69(1C，s)，119.77-125.59(1C，m)，57.24(1C，br.s.)，52.48(1C，br.s.)，52.43(1C，s)，39.15(1C，s)，32.50-33.48(2C，m)，25.30(1C，d，J＝9.60Hz)，24.03(1C，d，J＝9.60Hz).LC(Cond.OL1)：Rt＝1.49min.LC/MS：[M+Na]+C11H17F2NNaO4分析计算值：288.10；实测值：288.03。
Cap-176
将LiOH(0.379g，15.83mmol)的水(25mL)溶液加入到氨基甲酸酯Cap-176，步骤f(2.1g，7.92mmol)的THF(75mL)溶液中，将得到的混合物在室温下搅拌4h。真空除去THF，将剩余的水相用1N HCl溶液(2mL)酸化，然后用EtOAc提取(2X 50mL)。将合并的有机层干燥(MgSO4)、过滤并浓缩，得到白色泡沫状物，其对应于Cap-176(1.92g)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.73(1H，s)，7.50(1H，d，J＝8.78Hz)，3.97(1H，dd，J＝8.53，6.02Hz)，3.54(3H，s)，1.92-2.08(2H，m)，1.57-1.90(5H，m)，1.34-1.48(1H，m)，1.27(1H，qd，J＝12.72，3.26Hz).19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δppm-89.62(1F，d，J＝232.35Hz)，-99.93(1F，d，J＝232.35Hz).LC(Cond.OL2)：Rt＝0.76min.LC/MS：[M-H]+C10H14F2NO4计算值：250.09；实测值：250.10。
生物活性
本公开中采用了HCV复制子实验，并按共同所有的PCT/US2006/022197和在O’Boyle等，AntimicrobAgents Chemother.2005年4月；49(4)：1346-53中所述的方法进行了准备、实施和验证。还按所述(Apath.com)采用结合荧光酶报道基因的测定方法。
使用HCV-neo复制子细胞和在NS5A区域内含有突变的复制子细胞测试当前所述的化合物家族。测定所述化合物对含突变的细胞比野生性细胞具有不到十分之一的抑制活性。因此，本公开的化合物可有效抑制HCV NS5A蛋白的功能，而且我们认为本公开的化合物与在先申请PCT/US2006/022197和共同所有的WO/O4014852中的所述化合物在联合用药方面同样有效。此外，本公开的化合物可有效地针对HCV 1b基因型。应该理解，本公开的化合物可以抑制HCV的多种基因型。表2表明本公开的代表性化合物对抗HCV 1b基因型的EC50(有效抑制50％的浓度)值。在一实施方案中，本公开的化合物对1a、1b、2a、2b、3a、4a和5a基因型具有抑制作用。如下为抗HCV 1b的EC50值。A(10-350nM)；B(1-9.9nM)；C(0.1-0.99nM)；D(0.002-0.099nM)。
Figure BPA00001479917702401
Figure BPA00001479917702411
Figure BPA00001479917702421
Figure BPA00001479917702431
Figure BPA00001479917702441
Figure BPA00001479917702451
Figure BPA00001479917702471
Figure BPA00001479917702481
Figure BPA00001479917702491
Figure BPA00001479917702501
Figure BPA00001479917702511
本公开的化合物可通过除NS5A抑制以外或不同于NS5A抑制的机制来抑制HCV。在一个实施方案中，本公开的化合物抑制HCV复制子，在另一个实施方案中，本公开的化合物抑制NS5A。
对于本领域技术人员显而易见的是，本公开并不限于前述说明性实施例，而且可以体现在其它具体形式中而又不偏离其实质特性。因此，预期各实施例在所有方面都被视作说明性的且非限制性的，应参照所附权利要求书，而不是前述实施例，因此，在所附权利要求书等同内容的含义和范围内的所有变化都意欲包括在本文中。

Claims (19)

1.一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐，
Figure FPA00001479917600011
其中：
L选自-O-、-CH2CH2-、-CH＝CH-、-C≡C-、-OCH2-、-CH2O-、-CH2OCH2-、
Figure FPA00001479917600012
X是氢(H)或卤素和Z是氢；或
X和Z与它们连接的碳原子一起形成一个5-8元芳族或非芳族稠合的环，该环任选包含一或二个独立地选自氮、氧和硫的杂原子；其中所述5-8元环任选被1、2或3个独立地选自下列的取代基取代：烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷基、芳基磺酰基、羧基、甲酰基、卤代、卤代烷氧基、卤代烷基、羟基、羟基烷基、-NRaRb、(NRaRb)烷基、(NRaRb)羰基、氧代和螺环；
X’是氢(H)或卤素和Z’是氢；或
X’和Z’与它们连接的碳原子一起形成一个5-8元芳族或非芳族稠合的环，该环任选包含一或二个独立地选自氮、氧和硫的杂原子；其中所述5-8元环任选被1、2或3个独立地选自下列的取代基取代：烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷基、芳基磺酰基、羧基、甲酰基、卤代、卤代烷氧基、卤代烷基、羟基、羟基烷基、-NRaRb、(NRaRb)烷基、(NRaRb)羰基、氧代和螺环；
Y和Y’各自独立地是-CH2-、-CH2CH2-或-CH2O-，其中绘制所述-CH2O-使得所述氧原子与被Rv和Rq或Rv’和Rq’取代的碳原子键合；
Rp是氢或C1-C4烷基；
Rq是氢、烷基或卤代；或者
Rp和Rq与它们连接的碳原子一起形成一个环烷基环；
Rv选自氢、烷基、卤代和羟基；或者
Rv和Rq与它们连接的碳原子一起形成一个乙烯基或环烷基环；
Rp’是氢或C1-C4烷基；
Rq’是氢、烷基或卤代；或者
Rp’和Rq’与它们连接的碳原子一起形成一个环烷基环；
Rv’独立地选自氢、烷基、卤代和羟基；或者
Rv’和Rq’与它们连接的碳原子一起形成一个乙烯基或环烷基环；
Rw和Rw’独立地选自氢和烷基；
R1是氢或-C(O)Rx；
R2是氢或-C(O)Ry；
Rx和Ry独立地选自环烷基、杂芳基、杂环基、烷氧基和烷基，所述烷基被一或多个独立地选自下列的取代基取代：芳基、链烯基、环烷基、杂环基、杂芳基、-OR3、-C(O)OR4、-NRaRb和-C(O)NRcRd，
其中任何所述芳基和杂芳基可任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：链烯基、烷基、卤代烷基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、卤素、氰基、硝基、-C(O)OR4、-OR5、-NRaRb、(NRaRb)烷基和(MeO)(HO)P(O)O-，和
其中任何所述环烷基和杂环基可任选稠合在芳环上，并可任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：烷基、羟基、卤素、芳基、-NRaRb、氧代和-C(O)OR4；
R3是氢、烷基或芳基烷基；
R4是烷基或芳基烷基；
R5是氢、烷基或芳基烷基；
Ra和Rb独立地选自氢、烷基、环烷基、芳基烷基、杂芳基、-C(O)R6、-C(O)OR7、-C(O)NRcRd和(NRcRd)烷基，或者作为选择，Ra和Rb与它们连接的氮原子一起形成一个5或6元环或桥接双环环结构，其中所述5或6元环或桥接双环环结构任选可包含一或二个另外的独立选自氮、氧和硫的杂原子，并可包含1、2或3个独立地选自下列的取代基：C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、芳基、羟基、C1-C6烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和卤素；
R6是烷基；
R7是烷基、芳基烷基、环烷基或卤代烷基；和
Rc和Rd独立地选自氢、烷基、芳基烷基和环烷基。
2.权利要求1的化合物，其特征在于式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，
Figure FPA00001479917600031
X是氢或氯代(Cl)和Z是氢；或者
X和Z与它们连接的碳原子一起形成一个6元芳族或非芳族稠合的环；
X’是氢或氯代(Cl)和Z’是氢；或者
X’和Z’与它们连接的碳原子一起形成一个6元芳族或非芳族稠合的环；
Y是-CH2-、-CH2CH2-或-CH2O-，其中绘制所述-CH2O-使得所述氧原子与被Rv和Rq取代的碳原子键合；
Rp是氢或C1-C4烷基；
Rq是氢、烷基或卤代烷基；或者
Rp和Rq与它们连接的碳原子一起形成一个环烷基环；和
Rv选自氢、烷基、卤代和羟基；或
Rv和Rq与它们连接的碳原子一起形成一个乙烯基或环烷基环。
3.权利要求2的化合物，其特征在于式(Ib)化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，
Figure FPA00001479917600041
4.权利要求2的化合物，其特征在于式(Ic)化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，
Figure FPA00001479917600042
5.权利要求2的化合物，其特征在于式(Id)化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，
Figure FPA00001479917600043
6.权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其中：
R1是-C(O)Rx；
R2是-C(O)Ry；
Rx和Ry独立地是被至少一个-NRaRb取代的烷基，其特征在于式(A)：
Figure FPA00001479917600051
其中：
M是0或1；
R8是氢或烷基；
R9选自氢、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基和任选被选自下列取代基取代的烷基：芳基、链烯基、环烷基、杂环基、杂芳基、杂双环基、-OR3、-C(O)OR4、-NRaRb和-C(O)NRcRd，
其中任何所述芳基和杂芳基可任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：烷基、卤代烷基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、卤素、氰基、硝基、-C(O)OR4、-OR5、-NRaRb、(NRaRb)烷基和(MeO)(HO)P(O)O-，和
其中任何所述环烷基和杂环基可任选稠合在芳环上，并可任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：烷基、羟基、卤素、芳基、-NRaRb、氧代和-C(O)OR4；和
R3、R4、R5、Ra、Rb、Rc和Rd按权利要求1中的定义。
7.权利要求6的化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其中：
m是0；
R8是氢或C1-C4烷基；
R9选自氢、任选被以下基团取代的C1-C6烷基：-OR12、C3-C6环烷基、烯丙基、-CH2C(O)NRcRd、(NRcRd)烷基、
Figure FPA00001479917600052
Figure FPA00001479917600061
其中j是0或1；
k是1、2或3；
n是0或选自1-4的整数；
各R10独立地是氢、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、卤素、硝基、-OBn或(MeO)(OH)P(O)O-；
R11是氢、C1-C4烷基或苄基；
R12是氢、C1-C4烷基或苄基；
Ra是氢或C1-C4烷基；
Rb是C1-C4烷基、C3-C6环烷基、苄基、3-吡啶基、嘧啶-5-基、乙酰基、-C(O)OR7或-C(O)NRcRd；
R7是C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
Rc是氢或C1-C4烷基；和
Rd是氢、C1-C4烷基或C3-C6环烷基。
8.权利要求6的化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其中：
m是0；
R8是氢；
R9是任选被1-5个独立地选自下列取代基取代的苯基：C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、卤素、C1-C6烷氧基、羟基、氰基和硝基；和
NRaRb是杂环基或杂双环基，其选自
Figure FPA00001479917600071
其中
n是0、1或2；
各R13独立地选自C1-C6烷基、苯基、三氟甲基、卤素、羟基、甲氧基和氧代；和
R14是C1-C6烷基、苯基、苄基或-C(O)OR15基团，其中R15是C1-C4烷基、苯基或苄基。
9.权利要求6的化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其中：
m是1；
R8是氢；
R9是C1-C6烷基、芳基烷基或杂芳基烷基；
Ra是氢；和
Rb是-C(O)OR7，其中R7是C1-C6烷基。
10.权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其中：
R1是-C(O)Rx；
R2是-C(O)Ry；
Rx和Ry是独立地选自以下的杂芳基或杂环基：
Figure FPA00001479917600081
其中
n是0或1-4的整数；
各R13独立地选自氢、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、苯基、苄基、C1-C6烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、杂环基、卤素、NRcRd、羟基、氰基和氧代，其中Rc和Rd独立地是氢或C1-C4烷基；和
R14是氢(H)、C1-C6烷基、苄基或-C(O)OR4，其中R4是C1-C6烷基。
11.权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其中：
R1是-C(O)Rx；
R2是-C(O)Ry；
Rx和Ry是环烷基，其独立地选自：
Figure FPA00001479917600091
其中
j是0、1、2或3；
k是0、1或2；
n是0或1-4的整数；
各R13独立地选自氢、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C6烷氧基、卤素、羟基、氰基和硝基；和
Ra和Rb各自独立地是氢、C1-C6烷基或-C(O)OR7，其中R7是C1-C6烷基。
12.权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其中：
R1是-C(O)Rx；
R2是-C(O)Ry；
Rx和Ry独立地是芳基烷基，其中所述芳基烷基的芳基部分可被(NRaRb)烷基任选取代；和
Ra和Rb独立地是氢、C1-C6烷基或苄基，或者作为选择，Ra和Rb与它们连接的氮原子一起形成一个选自下列的5或6元环：
Figure FPA00001479917600092
其中R15是氢、C1-C6烷基或苄基。
13.权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐或其互变异构体，其中：
R1和R2相同并选自下列基团：
Figure FPA00001479917600101
其中结构中的波形线
Figure FPA00001479917600102
表示与该键相连的立构中心可呈现或者(R)-或者(S)-构型，只要不违反化学键合原理即可。
14.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1是-C(O)Rx；
R2是-C(O)Ry；和
Rx和Ry都是叔丁氧基。
15.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1和R2都是氢。
16.一种式(II)化合物或其药学上可接受的盐，
其中
L选自-O-、-CH2CH2-、-CH＝CH-、-C≡C-、-OCH2-、-CH2O-、-CH2OCH2-、
X和X’独立地是氢(H)或卤素；
Rp是氢或C1-C4烷基，和Rq是氢，或者作为选择，Rp和Rq与它们连接的碳原子一起形成一个环丙基环；
Rp’是氢或C1-C4烷基，和Rq’是氢，或者作为选择，Rp’和Rq’与它们连接的碳原子一起形成一个环丙基环；
R1是氢或-C(O)Rx；
R2是氢或-C(O)Ry；
Rx和Ry独立地选自环烷基、杂芳基、杂环基、烷氧基和烷基，所述烷基被一或多个独立地选自下列的取代基取代：芳基、链烯基、环烷基、杂环基、杂芳基、-OR3、-C(O)OR4、-NRaRb和-C(O)NRcRd，
其中任何所述芳基和杂芳基可任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：烷基、卤代烷基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、卤素、氰基、硝基、-C(O)OR4、-OR5、-NRaRb、(NRaRb)烷基和(MeO)(HO)P(O)O-，和
其中任何所述环烷基和杂环基可任选稠合在芳环上，并任选被一或多个独立地选自下列的取代基取代：烷基、羟基、卤素、芳基、-NRaRb、氧代和-C(O)OR4；
R3是氢、烷基或芳基烷基；
R4是烷基或芳基烷基；
R5是氢、烷基或芳基烷基；
Ra和Rb独立地选自氢、烷基、环烷基、芳基烷基、杂芳基、-C(O)R6、-C(O)OR7、-C(O)NRcRd和(NRcRd)烷基，或者作为选择，Ra和Rb与它们连接的氮原子一起形成一个5或6元环或桥接双环环结构，其中所述5或6元环或桥接双环环结构任选可包含一或二个另外的独立选自氮、氧和硫的杂原子，并可包含1、2或3个独立地选自下列的取代基：C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、芳基、羟基、C1-C6烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和卤素；
R6是烷基；
R7是烷基、芳基烷基或卤代烷基；和
Rc和Rd独立地选自氢、烷基、芳基烷基和环烷基。
17.一种化合物或其药学上可接受的盐，其选自：
(1)(1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(4-(2-((2S)-1-((2R)-2-(二甲氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-N，N-二甲基-2-氧代-1-苯基乙胺；
(2)(1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(4-(2-((2S)-1-((2R)-2-羟基-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙醇；
(3)(氧基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(2S)-2，1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(4)(1R)-2-((2S)-2-(4-(3-(4-(2-((2S)-1-((2R)-2-(二甲氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-N，N-二甲基-2-氧代-1-苯基乙胺；
(5)(1R)-2-((2S)-2-(4-(3-(4-(2-((2S)-1-((2R)-2-羟基-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙醇；
(6)((1R)-2-((2S)-2-(4-(3-(4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸甲酯；
(7)(1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(4-(2-((2S)-1-((2R)-2-(二甲氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苄基)氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-N，N-二甲基-2-氧代-1-苯基乙胺；
(8)((1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苄基)氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸甲酯；
(9)(1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(2-(4-((2S)-1-((2R)-2-(二甲氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)乙基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-N，N-二甲基-2-氧代-1-苯基乙胺；
(10)(1R，1’R)-2，2’-(1，2-乙烷二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(2S)-2，1-吡咯烷二基))双(2-氧代-1-苯乙醇)；
(11)(1，2-乙烷二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(2S)-2，1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(12)N’，N”’-(1，2-乙烷二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(2S)-2，1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2，1-乙烷二基)))双(1-乙基脲)；
(13)1-环戊基-3-((1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(2-(4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((环戊基氨基甲酰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)乙基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙基)脲；
(14)(1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-(二甲氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-N，N-二甲基-2-氧代-1-苯基乙胺；
(15)(1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-羟基-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙醇；
(16)(氧基双(亚甲基-4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(2S)-2，1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(17)1-甲基-3-((1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((甲基氨基甲酰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙基)脲；
(18)1-乙基-3-((1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((乙基氨基甲酰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙基)脲；
(19)1-环戊基-3-((1R)-2-((2S)-2-(4-(4-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((环戊基氨基甲酰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙基)脲；
(20)(1R)-2-((2S)-2-(4-(3-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-(二甲氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-N，N-二甲基-2-氧代-1-苯基乙胺；
(21)(1R)-2-((2S)-2-(4-(3-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-羟基-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙醇；
(22)(((1R)-2-((2S)-2-(4-(3-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((甲氧羰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸甲酯；
(23)1-甲基-3-((1R)-2-((2S)-2-(4-(3-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((甲基氨基甲酰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙基)脲；
(24)1-乙基-3-((1R)-2-((2S)-2-(4-(3-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((乙基氨基甲酰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙基)脲；
(25)1-环戊基-3-((1R)-2-((2S)-2-(4-(3-(((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((环戊基氨基甲酰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苄基)氧基)甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-苯基乙基)脲；
(26)(1，1’:4’，1”-三联苯-4，4”-二基双(1H-咪唑-4，2-二基(2S)-2，1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(27)(1R)-2-((2S)-2-(4-(4”-(2-((2S)-1-((2R)-2-(二甲氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-1，1’:4’，1”-三联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-N，N-二甲基-2-氧代-1-苯基乙胺；
(28)((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-((2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-4，5-二氢-1H-萘并[1，2-d]咪唑-7-基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(29)((1R)-2-((2S)-2-(4-(4-((2-((2S)-1-((2R)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-4，5-二氢-1H-萘并[1，2-d]咪唑-7-基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧基-1-苯基乙基)氨基甲酸甲酯；
(30)((1R)-2-((2S)-2-(7-((4-(2-((2S)-1-((2R)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)-1H-萘并[1，2-d]咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)-2-氧基-1-苯基乙基)氨基甲酸甲酯；
(31)((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-((2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-萘并[1，2-d]咪唑-7-基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(32)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(4-(4-((2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-萘并[1，2-d]咪唑-7-基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(33)((1R)-1-(((1R，3S，5R)-3-(7-((4-(2-((1R，3S，5R)-2-((2R)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-苯基乙酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)-1H-萘并[1，2-d]咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸甲酯；
(34)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(7-((2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-4，5-二氢-1H-萘并[1，2-d]咪唑-7-基)乙炔基)-4，5-二氢-1H-萘并[1，2-d]咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(35)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(7-((2-((3S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-萘并[1，2-d]咪唑-7-基)乙炔基)-1H-萘并[1，2-d]咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(36)((1S)-2-((1R，3S，5R)-3-(7-((2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-萘并[1，2-d]咪唑-7-基)乙炔基)-1H-萘并[1，2-d]咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
(37)((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-((4-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(38)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(2S)-2，1-吡咯烷二基((1R)-2-氧代-1-苯基-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(39)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(2S)-2，1-吡咯烷基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(40)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(4-(4-((4-(2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲氧基丙基)氨基甲酸甲酯；
(41)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(1R，3S，5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3，2-二基((2S)-1-氧代-1，2-丁烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(42)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(1R，3S，5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3，2-二基((1S)-1-环丁基-2-氧代-2，1-丁烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(43)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(1R，3S，5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3，2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(44)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(4-(4-((4-(2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(45)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(4-氯-5-(4-((4-(2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(46)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(4-氯-5-(4-((4-(4-氯-2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(47)((1S)-2-((1R，3S，5R)-3-(4-(4-((4-(4-氯-2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)乙炔基)苯基-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
(48)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基(4-氯-1H-咪唑-5，2-二基)(1R，3S，5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3，2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(49)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(4-(4-((1S，2S)-2-(4-(2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)环丙基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(50)((1S，2S)-1，2-环丙烷二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(1R，3S，5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3，2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(51)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(4-(4-((1R，2R)-2-(4-(2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)环丙基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(52)((1R，2R)-1，2-环丙烷二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(1R，3S，5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3，2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(53)((1S)-1-(((2S，4S)-2-(4-(4-((1S，2S)-2-(4-(2-((2S，4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)环丙基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(54)((1S)-1-(((2S，5S)-2-(4-(4-((4-(2-((2S，5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(55)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基((2S，5S)-5-甲基-2，1-吡咯烷二基)((2S)-1-氧代-1，2-丁烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(56)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基((2S，5S)-5-甲基-2，1-吡咯烷二基)((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(57)((1S)-1-(((2S，5S)-2-(4-(4-((4-(2-((2S，5S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-5-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(58)((1S)-1-(((2S，4S)-2-(4-(4-((4-(2-((2S，4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(59)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基((2S，4S)-4-甲基-2，1-吡咯烷二基)((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(60)((1S)-1-(((2S，4S)-2-(4-(4-((4-(4-氯-2-((2S，4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(61)((1S)-1-(((2S，4S)-2-(4-氯-5-(4-((4-(4-氯-2-((2S，4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(62)((1S)-2-((2S，4S)-2-(4-(4-((4-(4-氯-2-((2S，4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
(63)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基(4-氯-1H-咪唑-5，2-二基)((2S，4S)-4-甲基-2，1-吡咯烷二基)((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(64)((1S)-2-((2S，4S)-2-(4-(4-((4-(2-((2S，4S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-甲基-1-吡咯烷基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
(65)((1S)-1-(((1S，3S，5S)-3-(4-(4-((4-(2-((1S，3S，5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(66)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(4-(4-((E)-2-(4-(2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙烯基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(67)((E)-1，2-乙烯二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(1R，3S，5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3，2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(68)((1S)-2-((1R，3S，5R)-3-(4-(4-((E)-2-(4-(2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙烯基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
(69)((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-((4-(2-((2S)-4，4-二氟-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4，4-二氟-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(70)(乙炔-1，2-二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-5，2-二基((2S)-4，4-二氟吡咯烷-2，1-二基)((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙烷-2，1-二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(71)((1R)-2-((2S)-2-(5-(4-((4-(2-((2S)-4，4-二氟-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4，4-二氟吡咯烷-1-基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基甲酸甲酯；
(72)(乙炔-1，2-二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-5，2-二基((2S)-4，4-二氟吡咯烷-2，1-二基)((1R)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙烷-2，1-二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(73)((1S)-1-(((3S)-3-(4-(4-((4-(2-((3S)-4-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-3-吗啉基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-吗啉基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(74)((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-((4-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(75)((1S)-1-(((2S，4S)-4-羟基-2-(4-(4-((4-(2-((2S，4S)-4-羟基-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(76)((1S)-1-(((1S，3S，5S)-3-(4-(4-((4-(2-((1S，3S，5S)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(77)(1，2-乙炔二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(1S，3S，5S)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3，2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(78)((1S)-1-(((2S)-2-(4-(3-((3-(2-((2S)-1-((2S)-2((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(79)((1S)-2-甲基-1-(((2S)-2-(4-(3-((3-(2-((2S)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)丙基)氨基甲酸甲酯；
(80)(1，2-乙炔二基双(3，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(2S)-2，1-吡咯烷二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(81)((1S)-1-(((1R，3S，5R)-3-(4-(3-((3-(2-((1R，3S，5R)-2-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己-2-基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(82)(1，2-乙炔二基双(3，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基(1R，3S，5R)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3，2-二基((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(83)((1S，2S)-1，2-环丙烷二基双(4，1-亚苯基-1H-咪唑-4，2-二基((2S，4S)-4-甲基-2，1-吡咯烷二基)((1S)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，1-乙烷二基)))双(氨基甲酸甲酯)；
(84)((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4-((4-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-4-亚甲基-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-亚甲基-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(85)((1S)-1-(((2S，4R)-4羟基-2-(4-(4-((4-(2-((2S，4R)-4-羟基-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
(86)((1S)-1-(((2S)-2-(4-(4’-((4-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-4-基)苯基)乙炔基)-4-联苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯；
及其对应的立体异构体和互变异构体。
18.一种组合物，其包含权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
19.一种治疗患者的HCV感染的方法，其包含给予所述患者治疗有效量的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐。
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