CN108349945A - Hcv抑制剂、其制备方法与应用 - Google Patents

Hcv抑制剂、其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN108349945A
CN108349945A CN201680064884.4A CN201680064884A CN108349945A CN 108349945 A CN108349945 A CN 108349945A CN 201680064884 A CN201680064884 A CN 201680064884A CN 108349945 A CN108349945 A CN 108349945A
Authority
CN
China
Prior art keywords
base
alkyl
heteroaryl
heterocyclic ring
unit
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201680064884.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108349945B (zh
Inventor
苏熠东
匡远卓
王宝珠
冯卫东
钟慧娟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co Ltd
Shanghai Hansoh Biomedical Co Ltd
Original Assignee
Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co Ltd
Shanghai Hansoh Biomedical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co Ltd, Shanghai Hansoh Biomedical Co Ltd filed Critical Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co Ltd
Publication of CN108349945A publication Critical patent/CN108349945A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108349945B publication Critical patent/CN108349945B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems

Abstract

一种具有式I结构的HCV抑制剂、其制备方法与应用，其中式中的取代基与说明书中的定义相同。该系列化合物具有抑制HCV的活性的作用，可应用于治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染相关疾病药物的开发，具有广阔的应用前景。

Description

HCV抑制剂、其制备方法与应用 技术领域
本发明属于药物开发领域，具体涉及一种HCV抑制剂、其制备方法与应用。
背景技术
丙肝病毒HCV属于黄病毒科家族，黄病毒科家族包括至少三个属：瘟病毒属(pestiviruses)，主要在牛和猪中引起疾病；黄病毒属(flaviviruses)，为登革热和黄热病等疾病的主要原因；以及丙型肝炎病毒属(hepaciviruses)，HCV为此属唯一成员。黄病毒属成员超过68个，基于血清学亲缘关系可分为不同的组；临床症状呈现多样性，包括发热、脑炎和出血热等。全球所关注的与人类疾病有关的黄病毒属病毒包括登革出血热病毒(DHF)、黄热病病毒、休克综合征病毒和日本脑炎病毒。由于HCV基因组在结构和表型特征上与人黄病毒和瘟病毒相类似，将其归为黄病毒科HCV。丙型肝炎病毒是正链RNA病毒，在核衣壳外包绕含脂质的囊膜，囊膜上有刺突。HCV现有Huh7，Huh7.5，Huh7.5.1三种体外细胞培养系统。丙型肝炎病毒于1974年被首次发现，1989年美国科学家迈克尔·侯顿(Michael Houghton)和他的同事们利用分子生物学方法找到了该病毒的基因序列，并克隆出了丙肝病毒，命名本病及其病毒为丙型肝炎(Hepatitis C)和丙型肝炎病毒(HCV)。
HCV病毒体是包膜的正链RNA病毒，HCV-RNA大约有9500-10000bp组成，5′和3′非编码区(NCR)分别有319-341bp，和27-55bp，含有几个顺向和反向重复序列，可能与基因复制有关，基因组排列顺序为5'-C-E1-E2-p7-NS2-NS3-NS4A/4B-NS5A-NS5B-3'，能编码一长度大约为3014个氨基酸的多聚蛋白前体，后者可经宿主细胞和病毒自身蛋白酶作用后，裂解成10种病毒蛋白，包括三种结构蛋白，即分子量19KD的核衣壳蛋白(或称核心蛋白，Core)和两种糖蛋白(分子量为33KD的E1蛋白，分子量72Kd的E2蛋白)，p7编码一种膜内在蛋白，其功能可能是一种离子通道。非结构蛋白部分则包括NS2，NS3，NS4A，NS4B，NS5A和NS5B；非结构蛋白对病毒的生活周期非常重要。NS2/3和NS3/4A具有蛋白酶活性，参与病毒多聚蛋白前体的切割。此外，NS3蛋白还具有螺旋酶活性，参与解旋HCV-RNA分子，以协助RNA复制。NS5B具有RNA依赖的RNA聚合酶活性，参与HCV基因组复制；NS5B缺乏校读功能，所以HCV病毒基因组复制时发生突变的频率很高。NS5A的确切作用机理还不是很清楚，但NS5A可与多种宿主细胞蛋白相互作用，是病毒基因组复制以及病毒颗粒包装过程中不可缺少的一种蛋白，因此NS5A是开发HCV特异性抗病毒疗法的一个具吸引力的靶点。
已发现的HCV可分为六种基因型1-6,不同基因型对不同治疗的应答有所差别。HCV具有显著异源性和高度可变性，对已知全部基因组序列的HCV株进行分析比较发现其核苷酸和氨基酸序列存在较大差异，并且HCV基因组各部位的变异程度不相一致，如5′-NCR最保守，同源性在92-100％，而3′NCR区变异程度较高。在HCV的编码基因中，C区最保守、非结构(NS)区次之，编码囊膜蛋白E2/NS1可变性最高称为高可变区。研究人员根据HCV基因组的序列相似性将HCV病毒分为不同的基因型，每一基因型还可进一步分为不同的亚型，迄今已发现至少已发现6种基因型24个亚型。HCV不同基因型在世界各地分布不同，基因1型、2型、3型在世界各地均存在，基因4型和5型主要分布在中东和非洲，基因6型主要发现于东南亚。美国主要为基因1型，约占HCV病人的70％(其中1a约为36％，1b约为24％)，其余的30％主要为基因2型和基因3型。中国HCV病人约66％为基因1b型，14％为基因2a型。根据发表于2014年中华内科杂志的流行病学统计，中国各地有明显地域差异，基因2型、3型、6型在中国西部和南部占很高的比例。
丙型肝炎病毒(HCV)已经严重危及人类健康，其在大量的受感染个体(据估计为全世界人口的2-15％)中导致慢性肝脏疾病如肝硬化和肝细胞癌。HCV病毒主要通过体液传播，迄今还没有防止HCV感染的疫苗。根据世界卫生组织，全世界有超过2亿的受感染个体，每年至少有3至4百万人被感染。一旦被感染后，大约20％的人能清除该病毒，但是其余的人则成为HCV携带者。HCV病人是一个很大的群体，估计全球人口的3％约1.7亿为HCV病人。美国的HCV病人占人口的1.4％，约3-4百万人。中国缺乏权威性的HCV病人的流行病学数据，最保守的估计是人口的0.42％，有的报道认为中国HCV病人高达3.8％人口,按照这些数字估计中国HCV病人应在6百万-3千8百万之间。HCV病人中，10％至20％的慢性感染个体最终发展成肝脏破坏性的硬化或癌症。
在很长的一段时间甚至目前在很多发展中国家，无论是急性丙型肝炎，还是慢性丙型肝炎，标准治疗方案都是聚乙二醇干扰素(α-2a或α-2b)联合利巴韦林。聚乙二醇干扰素(α-2a或α-2b)联合利巴韦林的治疗方案存在很多问题，包括用药周期长，毒副作用大，病人应答比例低等。因此，需要发展更为有效和新型的疗法，以解决由HCV感染造成的未被满足的医疗需求。最近几年开发出的针对HCV靶点的药物(DAA,direct acting antivirals)在这几方面取得了巨大的进展，目前世界上HCV治疗的发展趋势是不需要干扰素和利巴韦林的DAA联合用药。主要的DAA药物为NS5B抑制剂，NS5A抑制剂，NS3/4A抑制剂。与干扰素联合利巴韦林相比，DAA联合用药的优势(或潜在优势)包括：高的持续性病毒应答率SVR(基本可以治愈)，缩短治疗周期，避免耐药性的产生，追求广谱性(可对HCV多种基因型有效)。
最先取得成功的DAA药物是NS3/4A抑制剂，包括Telaprevir(Vertex/Janssen),Boceprevir(Merck)，均在2011年获得FDA批准。NS5B抑制剂包括吉利德的Sofosvubir和艾伯维的三联药中的ABT-333。NS5A是这三类DAA最后开发成功的药物，包括BMS的Daclatasvir，吉利德的Ledipasvir(与Sofosbuvir联用)和GS-5816，艾伯维的三联药中的ABT-267，Achillion公司的ACH-3102，Merck的MK-8742等。与NS3/4A和NS5B抑制剂相比，NS5A抑制剂可使病人体内的病毒载量下降地更快和更多。此外，ACH-3102和GS-5816在很多Daclatasvir和Ledipasvir耐药突变上仍有活性。
发明内容
发明人在研究过程中发现了一类具有式(I)结构的HCV抑制剂、其制备方法与应用。该系列化合物既对野生型HCV具有很高的抑制活性，也对Daclatasvir和Ledipasvir耐药突变具有很高的抑制活性，可应用于治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染相关疾病药物的开发，具有广阔的应用前景。
本发明一方面提供一种具有如下式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
R1、R1’各自独立的选自氢、氘、卤素、羟基、氨基、C1-8烷基或C3-8环烷基，或者，R1和R1’与直接相连的碳原子形成3-6元碳环或3-6元杂环，
任选进一步被一个或多个选自卤素、羟基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、卤取代C1-8烷氧基、C1-8环烷基或C1-8环烷氧基的取代基所取代；
R2、R2’各自独立的选自氢、氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，
任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元 杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
R3、R3’各自独立的选自氢、氘、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、C5-10芳基、5-10元杂芳基、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、或-C0-8-C(O)NR6R7，
任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
R4、R4’各自独立的选自氢、氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，
或者，R4或R4’与其相连的四氢吡咯环一起形成6-10元含氮螺环、桥环或稠环，
任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
R5选自氢、氘、C1-8烷基、C3-8环烷基、卤取代C1-8烷基、C1-8烷氧C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-C(O)R10或-C(O)OR9，
任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
L选自键、C5-10芳基或5-10元杂芳基，任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元 杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
M选自键、C5-10芳基或5-10元杂芳基，任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、羟基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、卤取代C1-8烷基、卤取代C1-8烷氧基、C1-8烷基磺酰基的取代基所取代；
R6、R7各自独立的选自氢、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、C5-10芳基、5-10元杂芳基、C1-8烷基酰基或C1-8烷基酰氨基，
任选进一步被一个或多个选自卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、乙酰氨基、叠氮基、磺酰基、甲磺酰基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧羰基、C1-8烷基羰基、C1-8烷基羰基氧基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、氨基、单C1-8烷基氨基或二C1-8烷基氨基的取代基所取代；
R8选自氢、氘、C1-8烷基、C3-8环烷基、卤取代C1-8烷基、二C1-8烷基氨基、苯基或对甲基苯基；
R9选自氢、氘、C1-8烷基、C3-8环烷基、卤取代C1-8烷基或羟取代C1-8烷基；
R10选自氢、氘、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C3-8环烷基、C3-8环烷氧基、卤取代C1-8烷基、卤取代C1-8烷氧基、羟取代C1-8烷基或羟取代C1-8烷氧基；
L和M不同时为键；
m、m’各自独立的选自0～7；
r为0、1或2。
作为优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，R5选自氢、氘、C1-4烷基、C3-6环烷基、卤取代C1-4烷基、C1-4烷氧C1-4烷基、羟基C1-4烷基、-C(O)R10或-C(O)OR9，任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
作为进一步优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，R5选自氢、氘、甲基、乙基、异丙基、三氟甲基、环丙基或环已基。
作为优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，L选自键、苯基或萘基。
作为优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，M选自键、呋喃、噻吩、吡咯、噻唑、咪唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、吲哚、喹啉、苯并咪唑。
作为进一步优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，选自如下式(Ⅱ)或式(Ⅲ)化合物：
作为进一步优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，R1、R1’各自独立的选自氢、氘、卤素、羟基、氨基、C1-4烷基、卤取代C1-4烷基或C3-6环烷基，或者，R1和R1’与直接相连的碳原子形成3-6元碳环或3-6元杂环。
作为更进一步优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，R1、R1’各自独立的选自氢、氘、氟、羟基、氨基、甲基、乙基、环丙基或三氟甲基，或者，R1和R1’与直接相连的碳原子形成环丙基、环丁基、环戊基。
作为进一步优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，R4、R4’各自独立的选自氢、氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-4烷基、C2-6链烯基、C2-6链炔基、C3-6环烷基、3-6元杂环基、3-6元杂环基氧基、3-6元杂环基硫基、C5-8芳基、C5-8芳基氧基、C5-8芳基硫基、5-8元杂芳基、5-8元杂芳基氧基、5-8元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，
或者，R4或R4’与其相连的四氢吡咯环一起形成6-10元含氮螺环、桥环或稠环，
任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
作为更进一步优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，R4、R4’各自独立的选自氢、氘、氟、甲基、乙基或异丙基，或者，R4或R4’与其相连的四氢吡咯环一起形成6-10元含氮螺环、桥环或稠环，结构如下：
任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
作为进一步优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，R2、R2’各自独立的选自氢、氘、卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基、-C0-4-O-R9、-C0-4-C(O)R10、-C0-4-C(O)OR9、-C0-4-O-C(O)R10、-C0-4-NR6R7、 -C0-4-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9。
作为最优选的方案，所述的式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，选自如下化合物：
本发明另一方面提供一种前述式(I)化合物的制备方法，包括如下步骤：
其中，R1、R1’、R2、R2’、R3、R3’、R4、R4’、R5、R5’、R6、R7、R8、R9、R10、L、M、m、m’、r如式(I)化合物所定义。
作为进一步优选的方案，所述的缚酸剂为有机碱或无机碱，所述有机碱选自三甲胺、三乙胺、吡啶、哌啶、吗啉、二异丙基乙胺或其混合物，所述无机碱选自碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化锂，醋酸钠或其混合物；所述的缩合剂选自DIC、DCC、HOBT、EDCHCl、PyBOP、PyBroP、HATU、HCTU、DEPBT、EEDQ、CDI或其混合物。
本发明另一方面提供了一种药物组合物，其包括治疗有效剂量的任一前述化 合物、其立体异构体或其药学上可接受盐及可药用的载体。
本发明另一方面提供了任一前述化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐或前述的药物组合物在制备治疗或预防HCV感染药物中的应用。
具体实施方式
详细说明：除非有相反陈述，下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义。
“C1-8烷基”指包括1至8个碳原子的直链烷基和含支链烷基，烷基指饱和的脂族烃基团，优选C1-4烷基。C0-8是指不含碳原子或者C1-8烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基己基、3，3-二甲基己基、4，4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基或其各种支链异构体等。
烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，“C3-8环烷基”指包括3至8个碳原子的环烷基，优选3至6个碳原子的环烷基，例如：
单环环烷基的非限制性实施例包含环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等。
多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。“螺环烷基”指单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基基或多螺环烷基，螺环烷基的非限制性实施例包含：
“稠环烷基”指系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，稠环烷基的非限制性实施例包含：
“桥环烷基”指任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，桥环烷基的非限制性实施例包含：
所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实施例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。
环烷基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其中一个或多个环原子选自氮、氧或S(O)r(其中r是整数0、1、2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。“5-10元杂环基”指包含5至10个环原子的环基，“3-8元杂环基”指包含3至8个环原子的环基，优选3至6个环原子的环基。
单环杂环基的非限制性实施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等。
多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。“螺杂环基”指单环之间共用一 个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子选自氮、氧或S(O)r(其中r是整数0、1、2)的杂原子，其余环原子为碳。这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基。螺环烷基的非限制性实施例包含：
“稠杂环基”指系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子选自氮、氧或S(O)r(其中r是整数0、1、2)的杂原子，其余环原子为碳。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环烷基，稠杂环基的非限制性实施例包含：
“桥杂环基”指任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子选自氮、氧或S(O)r(其中r是整数0、1、2)的杂原子，其余环原子为碳。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，桥环烷基的非限制性实施例包含：
所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，非限制性实施例包含：
杂环基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、 3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
“芳基”指全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，具有共轭的π电子体系的多环(即其带有相邻对碳原子的环)基团，“C5-10芳基”指含有5-10个碳的全碳芳基，例如苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，非限制性实施例包含：
芳基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
“杂芳基”指包含1至4个杂原子的杂芳族体系，所述杂原子包括氮、氧和S(O)r(其中r是整数0、1、2)的杂原子，5-7元杂芳基指含有5-7个环原子的杂芳族体系，5-10元杂芳基指含有5-10个环原子的杂芳族体系，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，非限制性实施例包含：
杂芳基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
“烯基”指由至少两个碳原子和至少一个碳-碳双键组成的如上述定义的烷基，C2-8链烯基指含有2-8个碳的直链或含支链烯基，优选2-4个碳的直链或含支链烯基。例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-，2-或3-丁烯基等。
烯基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
“炔基”指至少两个碳原子和至少一个碳-碳三键组成的如上所定义的烷基，C2-8链炔基指含有2-8个碳的直链或含支链炔基，优选2-4个碳的直链或含支链炔基。例如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-，2-或3-丁炔基等。
炔基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
“烷氧基”指-O-(烷基)，其中烷基的定义如上所述。C1-8烷氧基指含1-8个碳的烷基氧基，优选1-4个碳的烷基氧基，非限制性实施例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等。
烷氧基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基，优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10 或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
“环烷氧基”指和-O-(未取代的环烷基)，其中环烷基的定义如上所述。C3-8环烷氧基指含3-8个碳的环烷基氧基，优选3-6个碳的环烷基氧基，非限制性实施例包含环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。
环烷氧基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选卤素、羟基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
“卤取代C1-8烷基”指烷基上的氢任选的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-8个碳烷基基团，优选烷基上的氢任选的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-4个碳烷基基团，例如二氟甲基、二氯甲基、二溴甲基、三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基等。
“卤取代C1-8烷氧基”烷基上的氢任选的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-8个碳烷氧基基团，优选烷基上的氢任选的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-4个碳烷氧基基团。例如二氟甲氧基、二氯甲氧基、二溴甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、三溴甲氧基等。
“C(O)R10”指R10取代的羰基，例如，“C0-8烷基羰基”指C0-8烷基取代的羰基，优选C0-4烷基取代的羰基；
“C1-8烷酰基氨基”指C1-8烷酰基取代的氨基，优选C1-4烷酰基取代的氨基，例如，C2烷酰基氨基指乙酰氨基。
“卤素”指氟、氯、溴或碘。
“THF”指四氢呋喃。
“DCM”指二氯甲烷。
“DMAP”指4-二甲氨基吡啶。
“DME”指二甲醚。
“DMF”指N、N-二甲基甲酰胺。
“MTBE”指甲基叔丁基醚。
“EA”指乙酸乙酯。
“DIPEA”指二异丙基乙胺。
“NBS”指N-溴代丁二酰亚胺。
“NFSI”指N-氟代双苯磺酰胺。
“NMM”指N-甲基吗啉。
“KHMDS”指六甲基二硅基胺基钾。
术语“缩合剂”是指能引起缩合反应的试剂。缩合反应是指两个或多个有机分 子相互作用后以共价键结合成一个大分子，同时失去水或其他比较简单的无机或有机小分子的反应。其中的小分子物质通常是水、氯化氢、甲醇或乙酸等。本发明中各种缩合剂的简称对应的中文名称如下表所示：
简称 中文名称
DIC N,N‐二异丙基碳二亚胺
DCC N,N‐二环己基碳二亚胺
HOBT 1‐羟基苯并三唑
EDC·HCl 1‐乙基‐3‐(3‐二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐
PyBOP 六氟磷酸苯并三唑‐1‐基‐氧基三吡咯烷基
PyBroP 三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸盐
HATU 2‐(7‐偶氮苯并三氮唑)‐N,N,N',N'‐四甲基脲六氟磷酸酯
HCTU 6‐氯苯并三氮唑‐1,1,3,3‐四甲基脲六氟磷酸酯
DEPBT 3‐(二乙氧基磷酰氧基)‐1,2,3‐苯并三嗪‐4‐酮
EEDQ 2‐乙氧基‐1‐乙氧碳酰基‐1,2‐二氢喹啉
CDI 羰基二咪唑
“任选”或“任选地”意味着随后所描述地事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
下面结合实施例对本发明做进一步详细、完整地说明，但决非限制本发明，本发明也并非仅局限于实施例的内容。
本发明的化合物结构是通过核磁共振(NMR)或/和液质联用色谱(LC-MS)来确定的。NMR化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为二甲亚砜(DMSO)和氘代氯仿(CDCl3)内标为四甲基硅烷(TMS)。
液质联用色谱LC-MS的测定用Agilent 1200Infinity Series质谱仪。HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)。
薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，TLC采用的规格是0.15mm～0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
本发明实施例中的起始原料是已知的并且可以在市场上买到，或者可以采用或按照本领域已知的方法来合成。
在无特殊说明的情况下，本发明的所有反应均在连续的磁搅拌下，在干燥氮气或氩气氛下进行，溶剂为干燥溶剂。
氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氮气气球。氩气氛或氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。
在无特殊说明的情况下，实施例中的溶液是指水溶液。反应的温度为室温。室温为最适宜的反应温度，为20℃～30℃。
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)或液质联用色谱(LC-MS)反应所使用的展开剂体系有：二氯甲烷和甲醇体系，正己烷和乙酸乙酯体系，石油醚和乙酸乙酯体系，丙酮，溶剂的体积比可根据化合物的极性不同而进行调节。柱层析的洗脱剂的体系包括：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，C：二氯甲烷和乙酸乙酯体系，D：乙酸乙酯和甲醇，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的氨水和醋酸等进行调节。
实施例化合物的制备
实施例1 甲基((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-(N-甲氧羰基)-O-甲基-L-苏氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：(2S,3aS,7aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氢-1H-吲哚-2-羧酸
0℃下将(2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-羧酸(50g)溶于THF(400mL)和水(200mL)的混合溶液中，控温10℃以下滴加2.5M NaOH水溶液(200mL)，在 0℃下搅拌15分钟，再控温10℃以下滴加二碳酸二丁酯(85.4g)，滴毕室温搅拌反应16小时。向反应液中加入水(500mL)，用MTBE(500mL)洗涤3次，1M柠檬酸水溶液调节水相PH至3-4，乙酸乙酯萃取(500mL)3次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩至干得到化合物(2S,3aS,7aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氢-1H-吲哚-2-羧酸(74.9g)。
LC-MS m/z:268.10[M-H]-。
第二步：叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((2-氨基-4-溴苯基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯和叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((2-氨基-5-溴苯基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯
0℃下将化合物(2S,3aS,7aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氢-1H-吲哚-2-羧酸(30g)，4-溴-1,2-二氨基苯(22.5g)，EDCI(23.5g)，HOBt(16.6g)溶于DMF(300mL)中，控温10℃以下滴加N-甲基吗啉(36.8ml)，室温搅拌反应12小时。LC-MS监测反应完毕，向反应液中加入水(1200ml)，乙酸乙酯(300mL)萃取3次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩至干得到叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((2-氨基-4-溴苯基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯和叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((2-氨基-5-溴苯基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯(共55.1g)。
LC-MS m/z:438.10[M+H]+,440.20[M+H]+。
第三步：叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯
将叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((2-氨基-4-溴苯基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯和叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((2-氨基-5-溴苯基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯(共55g)溶于乙酸(300mL)中，在65℃下反应，LC-MS监测反应完毕。反应液冷却至室温，减压蒸出溶剂，残余物溶于乙酸乙酯(300mL)，饱和碳酸氢钠溶液调节PH至大于7，水相用乙酸乙酯(300mL)萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩至干，残留物硅胶柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯)得到叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯(28g)。
LC-MS m/z:420.10[M+H]+,422.05[M+H]+。
第四步：叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯
氮气保护下，将叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯(10g,20.0mmol)、双(频哪醇基)二硼烷(12.1g,40.0mmol)、四三苯基膦钯(1.4g,1.0mmol)、碳酸钾(9.9g)溶于DME(100mL)和水(10mL)中，升温至80℃搅拌反应12小时。LC-MS监测反应完毕，冷却至室温，向反应液中滴加水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)，水相用乙酸乙酯(100mL)萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩至干，残余物硅胶柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯)得到叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯(9.8g)。
LC-MS m/z:468.25[M+H]+。
第五步：2-溴-9,9-二甲基-9H-芴
氮气保护下，将2-溴-9H-芴(30g,0.12mol)加入至1L的三口瓶中，加入四氢呋喃(300ml)，冷却至5℃，分批加入叔丁醇钾(37.3g,0.33mol)，搅拌30分钟，降温至-5℃，滴加碘甲烷(52.4g,0.36mol)，升温至25℃搅拌3小时。加入乙酸乙酯(300ml)后降温至5℃，滴加水(300ml)，搅拌后分出有机层，水相用乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到2-溴-9,9-二甲基-9H-芴(33.7g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.69-7.71(m,1H),7.60-7.57(m,2H),7.42-7.48(m,2H),7.34-7.36(m,2H),1.49(s,6H)。
第六步：2-溴-9,9-二甲基-7-硝基-9H-芴
氮气保护下，将2-溴-9,9-二甲基-9H-芴(7g)加入至250ml的三口瓶中，加入乙酸(84ml)，冷却至0℃，滴加发烟硝酸(20ml)，升温至25℃搅拌20小时。将反应液倒入冰水混合物中(600g)，搅拌30分钟，过滤，取出滤饼加入乙腈(400ml)，回流2小时，过滤，滤饼真空干燥得到2-溴-9,9-二甲基-7-硝基-9H-芴(5.6g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.28-8.25(m,2H),7.80-7.78(m,1H),7.67-7.63(m,2H),7.55-7.52(m,1H),1.59(s,6H)。
第七步：7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺
氮气保护下，将2-溴-9,9-二甲基-7-硝基-9H-芴(5.6g,17.6mmol)加入至1L的三口瓶中，加入氯化铵(1.9g,35.2mmol)、铁粉(2.95g,52.8mmol)、乙醇(250ml)、水(70ml)，回流反应4小时。加入饱和碳酸钠溶液(140ml)，搅拌1小时，过滤，滤液减压除去乙醇后，过滤，滤饼真空干燥得到7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺(4.9g)。
LC-MS m/z:288.10[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.55-7.38(m,4H),6.73(d,1H),6.67-6.55(m,1H),3.73(brs,2H),1.46(s,6H)。
第八步：叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯
在室温下，将7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺(4g,13.9mmol)，(2S,3aS,7aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氢-1H-吲哚-2-羧酸(5.6g,20.8mmol)、HATU(10.6g,27.8mmol)、DMAP(0.34g)溶于DMF(40mL)中，搅拌下滴加二异丙基乙基胺(5.4g,41.7mmol)，搅拌反应12小时。LC-MS监测反应完毕，向反应液中加入水(100mL)，用乙酸乙酯(30mL)萃取3次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩至干，残余物硅胶柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯)得到叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯(55.1g)。
LC-MS m/z:438.10[M-Boc+H]+,440.20[M-Boc+H]+。
第九步：叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯
氮气保护下，将叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯(1.0g,1.85mmol)、叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯(0.91g,1.94mmol)、四三苯基膦钯(0.64g,0.56mmol)、碳酸氢钠(0.52g,6.1 mmol)溶于DME(20mL)和水(2mL)中，升温至80℃搅拌反应12小时。LC-MS监测反应完毕，反应液冷却至室温，加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)，分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩至干，残余物硅胶柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯)得到叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯(270mg)。
LC-MS m/z:800.35[M+H]+。
第十步：(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺
室温下，将叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯(1.0g)溶于三氟醋酸(5mL)中，搅拌反应2小时。LC-MS监测反应完毕，浓缩反应液，将残余物溶于二氯甲烷(10ml)，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩至干得到(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺(760mg)，直接用于下一步。
LC-MS m/z:600.30[M+H]+。
第十一步：甲基((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-(N-(甲氧羰基)-O-甲基-L-苏氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
室温下，将(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺(0.15g,0.25mmol)、N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-苏氨酸(0.1g,0.52mmol)、EDCI(0.12g,0.63mmol)、HOBt(0.07g,0.55mmol)溶于DMF(1mL)中，向反应液逐滴滴加NMM(0.73mL，1.25mmol)，搅拌反应12小时。LC-MS监测反应完毕，向反应液滴加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取3次，合并有机相，无水硫酸钠干燥， 浓缩至干，残余物硅胶柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯)得到甲基((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-(N-(甲氧羰基)-O-甲基-L-苏氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯(40mg)。
LC-MS m/z:946.30[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.18(d,J＝9.2Hz,1H),10.05(s,1H),7.92-7.75(m,5H),7.66-7.49(m,6H),5.10(s,1H),4.48-4.37(m,2H),4.37-4.35(m,1H),4.10(t,J＝8.0Hz,2H),3.58(s,3H),3.55(s,3H),3.50-3.46(m,1H),3.40-3.37(m,1H),3.25(s,3H),3.18(s,3H),2.42(s,1H),2.36-2.08(m,4H),2.03-1.91(m,4H),1.77-1.69(m,5H),1.49(s,6H),1.43-1.29(m,4H),1.19-1.13(m,4H),1.10(t,J＝6.0Hz,3H),0.93(t,J＝6.0Hz,3H)。
实施例2 甲基(S)-5-((2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((S)-5-甲氧基-2-((甲氧羰基)氨基)-5-羰基戊酰基)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-基)-4-((甲氧羰基)氨基)-5-羰基戊酸酯
参照实施例1步骤11，得到甲基(S)-5-((2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((S)-5-甲氧基-2-((甲氧羰基)氨基)-5-羰基戊酰基)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-基)-4-((甲氧羰基)氨基)-5-羰基戊酸酯。
LC-MS m/z:1002.30[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.17(d,J＝18.0Hz,1H),10.17(s,1H),7.90-7.74(m,5H),7.66-7.48(m,6H),5.12-5.07(m,1H),4.45(t,J＝8.0Hz,1H),4.38-4.31(m,4H),3.60(s,3H),3.57-3.54(m,9H),2.41-2.18(m,10H),2.14-2.08(m,1H),2.05-1.58(m,11H),1.49(s,6H),1.26-1.23(m,8H)。
实施例3 甲基((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：叔-丁基(S)-2-((2-氨基-4-溴苯基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯和叔-丁基(S)-2-((2-氨基-5-溴苯基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯
以4-溴苯-1,2-二胺为原料，参照实施例1步骤2，得到叔-丁基(S)-2-((2-氨基-4-溴苯基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯和叔-丁基(S)-2-((2-氨基-5-溴苯基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:438.10[M+H]+,440.20[M+H]+。
第二步：叔-丁基(S)-2-(5-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(S)-2-((2-氨基-4-溴苯基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯和叔-丁基(S)-2-((2-氨基-5-溴苯基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤3，得到叔-丁基(S)-2-(5-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:366.10[M+H]+,368.05[M+H]+。
第三步：叔-丁基(S)-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(S)-2-(5-溴-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤4，得到叔-丁基(S)-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:413.20[M+H]+。
第四步：叔‐丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯
以叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，与叔-丁基(S)-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯偶联得到叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:745.30[M+H]+。
第五步：(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺
以叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:546.31[M+H]+。
第六步：甲基((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:860.35[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.20(s,1H),10.16(s,1H),7.84-7.71(m,5H),7.62(d,J＝8.0Hz,1H),7.55-7.51(m,4H),7.32(d,J＝8.4Hz,1H),5.22-5.20(m, 1H),4.47(t,J＝9.2Hz,1H),4.39-4.29(m,1H),4.07(t,J＝8.4Hz,1H),3.87-3.82(m,3H),3.55(d,J＝2.4Hz,6H),2.35-2.17(m,4H),2.13-1.86(m,7H),1.49(s,6H),1.29-1.16(m,4H),0.91-0.83(m,14H)。
实施例4 甲基((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-((3R)-3-甲氧基-2-((甲氧羰基)氨基)丁酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-((3R)-3-甲氧基-2-((甲氧羰基)氨基)丁酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:892.35[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.20(s,1H),10.15(s,1H),7.86-7.76(m,5H),7.62-7.60(m,2H),7.55-7.48(m,3H),7.28(d,J＝8.4Hz,1H),5.25-5.16(m,1H),4.45(t,J＝9.0Hz,1H),4.41-4.25(m,2H),4.10(t,J＝8.0Hz,1H),3.87-3.82(m,2H),3.54(d,J＝2.4Hz,6H),3.52-3.45(m,2H),3.24(s,3H),3.19(s,3H),2.36-2.17(m,2H),2.13-2.06(m,2H),1.99(s,3H),1.75-1.62(m,4H),1.49(s,6H),1.17(t,J＝7.2Hz,4H),1.08(t,J＝6.0Hz,6H)。
实施例5 甲基((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((1R,3S,4S)-2-(N-(甲氧羰基)-O-甲基-L-苏氨酰)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-3-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：叔-丁基(1R,3S,4S)-3-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-2-氮杂 二环[2.2.1]庚烷-2-羧酸酯
以7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺为原料，参照实施例1步骤8，得到叔-丁基(1R,3S,4S)-3-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-羧酸酯。
LC-MS m/z:411.10[M-Boc+H]+,413.05[M-Boc+H]+；
第二步：叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-(6-(7-((1R,3S,4S)-2-(叔-丁氧基羰基)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-3-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯
以叔-丁基(1R,3S,4S)-3-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-(6-(7-((1R,3S,4S)-2-(叔-丁氧基羰基)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-3-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:772.30[M+H]+。
第三步：(1R,3S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-3-甲酰胺
以叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-(6-(7-((1R,3S,4S)-2-(叔-丁氧基羰基)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-3-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(1R,3S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-3-甲酰胺。
LC-MS m/z:572.32[M+H]+。
第四步：甲基((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((1R,3S,4S)-2-(N-(甲氧羰基)-O-甲基-L-苏氨酰)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-3-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲 酸酯
以(1R,3S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-3-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((1R,3S,4S)-2-(N-(甲氧羰基)-O-甲基-L-苏氨酰)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-3-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:918.25[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.15(s,1H),7.72-7.70(m,2H),7.68(s,1H),7.63-7.51(m,5H),7.39(d,J＝8.0Hz,1H),5.46(t,J＝8.8Hz,1H),4.70-4.73(m,2H),4.53(s,1H),4.49(t,J＝6.4Hz,1H),4.34(s,1H),4.25-4.21(m,1H),3.81-3.79(m,1H),3.71(s,6H),3.65-3.60(m,1H),3.42(s,3H),3.29(s,3H),2.54-2.50(m,1H),2.41-2.34(m,1H),2.06-2.04(m,1H),1.96-1.68(m,8H),1.61-1.56(m,8H),1.45-1.41(s,1H),1.25(d,J＝6.0Hz,6H),1.10(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例6 甲基((S)-1-((1R,3S,4S)-3-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(1R,3S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-9H-芴-2-基)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-3-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((1R,3S,4S)-3-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:886.30[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.72(s,1H),7.82-7.46(m,8H),7.30(d,J＝8.4Hz,1H),5.47(d,J＝8.8Hz,1H),4.47-4.43(m,1H),4.32-4.27(m,1H),4.22(t,J＝8.4Hz,1H),3.70(s,6H),3.38(d,J＝10.4Hz,1H),3.15(s,1H),2.52-2.47(m,1H), 2.38-2.30(m,1H),1.74-1.68(m,6H),1.47-1.49(m,8H),1.44(s,2H),1.26(s,6H),1.07(d,J＝6.8Hz,4H),0.94-0.95(m,7H),0.79(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例7 甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙基)1-(叔-丁基)(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸酯
在0℃下，向2-溴-1-(4-溴苯基)乙烷-1-酮(20g,72mmol)和L-Boc脯氨酸(18.7g,87mmol)的乙腈(160mL)混合溶液中逐滴滴加三乙胺(15mL)，室温下搅拌2小时。反应完毕浓缩反应液，残余物溶于DCM(100mL)，饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥有机层，浓缩，残余物硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯)分离，得到2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙基)1-(叔-丁基)(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸酯(27g)。
第二步：叔-丁基(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯
将2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙基)1-(叔-丁基)(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸酯(27g)和醋酸铵(50.6g)溶于二甲苯(2700mL)，在140℃下搅拌直至原料反应完全。冷却至室温，真空除去溶剂，残余物溶于DCM(200mL)，经水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯)分离，得到叔-丁基(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯(15.7g)。
LC-MS m/z:392.10[M+H]+,394.20[M+H]+。
第三步：叔-丁基(S)-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯
氮气保护下，将叔-丁基(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯(10g)，双(频哪醇基)二硼烷(13.0g)，四三苯基膦钯(1.5g)，碳酸钾(10.5g)溶于DME(100mL)和水(10mL)中，80℃下搅拌反应12小时。反应完毕冷却至室温，加入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)分层，水相用乙酸乙酯萃取，合并有机相，经无水硫酸钠干燥，浓缩，残余物硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯)分离，得到叔-丁基(S)-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯(6.3g)。
LC-MS m/z:440.20[M+H]+。
第四步：叔-丁基(S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯
以7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺为原料，参照实施例1步骤8，得到叔-丁基(S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.69(br,1H),7.79(s,1H),7.57(d,1H),7.51-7.41(m,3H),7.32(d,1H),4.51-4.48(m,1H),3.52-3.25(m,2H),2.60-2.53(m,1H),2.04-1.94(m,3H),1.5-1.45(m,15H)。
第五步：叔-丁基(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:718.30[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.21-11.84(m,1H),10.09(d,1H),7.87-7.52(m,10H),4.86-4.79(m,1H),4.31-4.22(m,1H),3.58-3.51(m,1H),3.47-3.34(m,3H),2.28-2.15(m,2H),1.93-1.79(m,6H),1.48-1.30(m,18H),1.19-1.16(m,6H)。
第六步：(S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基) 苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:518.30[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.73(s,1H),9.82(br,1H),9.55-9.52(m,1H),9.20(br,1H),8.73-8.70(m,1H),7.92-7.81(m,8H),7.72-7.69(m,1H),7.61-7.57(m,1H),4.89-4.83(m,1H),4.39-4.36(m,1H),3.38-3.26(m,4H),2.46-2.38(m,2H),2.32-2.23(m,1H),2.21-2.11(m,1H),2.09-1.94(m,4H),1.50(s,6H)。
第七步:甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:832.50[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.13(br,1H),7.85-7.53(m,12H),7.35-7.27(m,2H),5.10-5.08(m,1H),4.51-4.48(m,1H),4.10-4.02(m,2H),3.89-3.79(m,3H),3.69-3.66(m,1H),3.54(d,J＝2Hz,6H),2.20-1.90(m,10H),1.48(s,6H),0.98-0.86(m,12H)。
实施例8 甲基((S)-1-((S)-2-(5-(7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步:叔-丁基(S)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(S)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:692.35[M+H]+。
第二步:(S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(S)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:492.30[M+H]+。
第三步:甲基((S)-1-((S)-2-(5-(7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-(5-(7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:806.35[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.19(s,1H),10.13(s,1H),7.88-7.74(m,4H),7.66-7.51(m,6H),7.34(t,J＝8.0Hz,1H),5.22(s,1H),4.51-4.48(m,1H),4.15-3.98(m,2H),3.88-3.81(m,2H),3.68-3.61(m,2H),3.55-3.52(m,6H), 2.29-2.15(m,3H),2.07-1.90(m,5H),1.48(s,6H),0.97(d,J＝6.8Hz,3H),0.91(d,J＝6.4Hz,3H),0.88-0.83(m,8H)。
实施例9 甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步:叔-丁基(2S,4S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯
以7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺为原料，参照实施例1步骤8，得到叔-丁基(2S,4S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.97(s,1H),7.84-7.70(m,4H),7.58-7.49(m,2H),5.36-5.22(m,1H),4.44-4.36(m,1H),3.69-3.62(m,2H),2.64-2.53(m,1H),2.32-2.23(m,1H),1.43-1.33(m,15H)。
第二步:叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(2S,4S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:736.30[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.22-11.84(m,1H),9.95(s,1H),7.85-7.52(m,11H),5.36-5.23(m,1H),4.87-4.78(m,1H),4.45-4.37(m,1H),3.70-3.54(m,3H),3.40-3.33(m,1H),2.68-2.56(m,2H),2.33-2.18(m,2H),1.96-1.83(m,2H),1.49-1.34(m,18H),1.19-1.16(m,6H)。
第三步:(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H- 芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:536.31[M+H]+。
第四步:甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:851.3[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.25-11.79(m,1H),10.02(s,1H),7.97-7.19(m,13H),5.48-5.34(m,1H),5.09-5.06(m,1H),4.70-4.67(m,1H),4.20-3.92(m,4H),3.84-3.78(m,2H),3.54(s,6H),2.60-2.55(m,1H),2.37-2.28(m,1H),2.18-2.13(m,2H),2.02-1.97(m,4H),1.49(s,6H),1.04-0.88(m,12H)。
实施例10 甲基((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步:叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(2S,4S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:710.35[M+H]+。
第二步:(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:510.30[M+H]+。
第三步:甲基((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:824.35[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.21(s,1H),9.97(s,1H),7.86-7.72(m,5H),7.67-7.45(m,5H),7.34(d,J＝8.4Hz,1H),5.22(s,1H),4.69(d,J＝10.0Hz,1H),4.21-3.81(m,6H),3.54(d,J＝2.8Hz,6H),2.38-2.20(m,3H),2.13-1.89(m,4H), 1.48(s,6H),1.04(d,J＝8.0Hz,3H),0.94(d,J＝6.4Hz,3H),0.88-0.83(m,8H)。
实施例11 甲基((S)-1-((2S,4S)-4-氟-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙基)1-(叔-丁基)(2S,4S)-4-氟吡咯烷-1,2-二羧酸酯
将2-溴-1-(4-溴苯基)乙烷-1-酮(10.0g,36.0mmol)溶解于乙腈(100ml)中，加入三乙胺(5.5g,54.0mmol)，20-30℃下分批加入(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-羧酸(10.1g,43.2mmol)，室温搅拌反应16小时。旋转蒸发除去乙腈，向残余物中加入100ml DCM，经水洗，饱和碳酸氢钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩至干得到2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙基)1-(叔-丁基)(2S,4S)-4-氟吡咯烷-1,2-二羧酸酯(10.5g)。
LC-MS m/z:330.1(M-Boc+H)+。
第二步：叔-丁基(2S,4S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯
将2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙基)1-(叔-丁基)(2S,4S)-4-氟吡咯烷-1,2-二羧酸酯(10.5g,24.4mmol)溶解于二甲苯(100ml)中，加入醋酸铵(18.8g,243.9mmol)，加热回流反应16小时。浓缩除去二甲苯，向残余物中加入DCM(100ml)，经水洗，浓缩有机相，残余物柱层析纯化得到叔-丁基(2S,4S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯(3.8g)。
LC-MS m/z:410.0[M+H]+。
第三步：叔-丁基(2S,4S)-4-氟-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯
将叔-丁基(2S,4S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯、双联频哪醇基二硼(4.7g,18.5mmol)、Pd(PPh3)4(0.54g,0.46mmol)和K2CO3(3.8g,27.8mmol)加入到DME(40ml)和水(4ml)混合溶剂中，氮气抽换气3次，回流搅拌反应16小时。浓缩除去DME，加乙酸乙酯(60ml)和水(20ml)，分液，有机相浓缩，残余物柱层析纯化得到叔-丁基(2S,4S)-4-氟-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯(1.4g)。
LC-MS m/z:458.2(M+H)+；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84-7.29(m,5H),5.49-5.25(m,2H),4.07-3.42(m,2H),2.91-2.47(m,2H),1.50-1.31(m,21H)。
第四步：叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(2S,4S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:754.30[M+H]+。
第五步：(2S,4S)-4-氟-N-(7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤11，得到(2S,4S)-4-氟-N-(7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:554.30[M+H]+。
第六步：甲基((S)-1-((2S,4S)-4-氟-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,4S)-4-氟-N-(7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((2S,4S)-4-氟-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:868.45[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.20(s,1H),7.85-7.74(m,2H),7.65-7.55(m,7H),7.48(d,J＝6.4Hz,1H),5.01(d,J＝9.2Hz,1H),4.36-4.07(m,4H),4.02-3.94(m,3H),3.70(s,6H),2.39-1.91(m,6H),1.48(s,6H),1.26(s,6H),1.08-1.02(m,8H)。
实施例12 甲基((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：2-碘-7-硝基-9H-芴
将2-硝基-9H-芴(18.6g,88.1mmol)和单质碘(11.1g,44.0mmol)加入到醋酸(560ml)中，搅拌下加入浓硫酸(56ml)和NaNO2(6.1g,88.1mmol)，回流搅拌反应2小时。冷却至室温，将反应液倒入至500g冰水中，过滤，将滤饼加入到150ml乙酸乙酯中，回流搅拌1小时，冷却至室温搅拌16小时，过滤，得到2-碘-7-硝基-9H-芴(24.0g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(d,J＝1.2Hz,1H),8.23(dd,J＝8.4Hz,J＝2.0Hz,1H),7.92(d,J＝1.2Hz,1H),7.78(d,J＝8.4Hz,1H),7.71(dd,J＝8.4Hz,J＝2.0Hz,1H),7.54(d,J＝8.0Hz,1H)。
第二步：9,9-二氟-2-碘-7-硝基-9H-芴
2-碘-7-硝基-9H-芴(10.1g,30mmol))与NFSI(30g)置于100ml三口瓶中，在氮气保护下，加入THF(210mL)，冷却至-30℃，缓慢滴加KHMDS溶液(1.0M,100ml)，加毕保持-20℃～0℃反应2小时，TLC检测反应基本完全，控温10℃以下倒入饱和氯化铵溶液(150mL)淬灭反应。分出有机相，水相用乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩至干，残余物硅胶柱层析分离得到9,9-二氟-2-碘-7-硝基-9H-芴(11.2g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.46(d,J＝1.6Hz,1H),8.39(dd,J＝8.4Hz,J＝1.6Hz,1H),7.85(d,J＝1.2Hz,1H),7.70(d,J＝8.4Hz,2H),7.54(d,J＝8.4Hz,1H)。
第三步：9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-胺
将9,9-二氟-2-碘-7-硝基-9H-芴(10.6g,30mmol)溶于乙酸乙酯(100ml)，加入二水合氯化亚锡(20.3g,90mmol)，加热至75℃反应2.5小时。冷却至室温，将反应液倒入乙酸乙酯150ml，依次用饱和碳酸钠水溶液与2N氢氧化钠水溶液洗涤，乙酸乙酯萃取水相，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩至干，残余物柱层析纯化得到得到9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-胺(4.0g)。
LC-MS m/z:344.00[M+H]+。
第四步：叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯
以9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-胺为原料，参照实施例1步骤8，得到叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:495.10[M-Boc+H]+。
第五步：叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯
以叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S) -1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:754.30[M+H]+。
第六步：(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺
以叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:554.20[M+H]+。
第七步：甲基((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:868.30[M+H]+；
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.28(d,J＝12Hz,1H),10.42(s,1H),8.15(s,1H),7.94(s,1H),7.89-7.76(m,4H),7.65-7.52(m,4H),7.32(d,J＝8.4Hz,1H),5.21(s,1H),4.44(t,J＝8.8Hz,1H)，4.37-4.31(m,1H),4.09(t,J＝8.4Hz,1H),3.87-3.82(m,3H),3.54(d,J＝2.4Hz,6H),2.34-1.91(m,10H),1.75-1.60(m,3H),1.45-1.16(m,4H),0.92-0.83(m,12H)。
实施例13 甲基((2S,3R)-1-((2S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-((3R)-3-甲氧基-2-((甲酯基)氨基)丁酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2- 基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((2S,3R)-1-((2S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-((3R)-3-甲氧基-2-((甲酯基)氨基)丁酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:900.30[M+H]+；
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.28(s，1H)，10.41(s，1H)，8.14(s，1H)，7.95(s，1H)，7.89-7.80(m，4H)，7.65-7.53(m，4H)，7.27(d，J＝7.6Hz，1H)，5.21-5.19(m，1H)，4.43(t，J＝9.2Hz，1H)，4.37-4.29(m，2H)，4.10(t，J＝8.0Hz，1H)，3.90-3.88(m，2H)，3.55(d，J＝2.0Hz，6H)，3.50-3.46(m，2H)，3.24(s，3H)，3.19(s，3H)，2.35-1.91(m，8H)，1.76-1.64(m，3H)，1.46-1.16(m，4H)，1.10-1.07(t，J＝5.6Hz，6H)。
实施例14 甲基((S)-1-((2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯
以叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2 S,3aS,7aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:808.30[M+H]+。
第二步：(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺
以(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤11，得到(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:608.30[M+H]+。
第三步：甲基((S)-1-((2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)氨基甲酰)八氢-1H-吲哚-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:922.30[M+H]+；
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.26(s，1H)，10.42(s,1H)，8.15(s，1H)，7.96(s，1H)，7.90-7.80(m,4H)，7.65-7.50(m，5H)，5.12-5.09(m，1H)，4.45(t，J＝8.8Hz，2H)，4.37-4.33(m，1H)，3.85(t，J＝8.4Hz，2H)，3.55(d，J＝4.4Hz，6H)，2.45-2.31(m，3H)，2.23-2.05(m，2H)，2.03-1.69(m，11H)，1.51-1.15(m，8H)，0.92-0.69(m，12H)。
实施例15 甲基((2S,3R)-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-(N-(甲酯基)-O-甲基-L-苏氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2- 基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-基)-3-甲氧基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氢-1H-吲哚-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氢-1H-吲哚-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((2S,3R)-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-(N-(甲酯基)-O-甲基-L-苏氨酰)八氢-1H-吲哚-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)八氢-1H-吲哚-1-基)-3-甲氧基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:954.40[M+H]+；
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.37(s，1H)，10.42(s，1H)，8.14(s，1H)，7.96(s，1H)，7.90-7.80(m，4H)，7.65-7.53(m，5H)，5.13-5.08(m，1H)，4.46-4.41(m，2H)，4.39-4.33(m，1H)，4.10(t，J＝6.8Hz，2H)，3.55(d，J＝4.0Hz，6H)，3.50-3.38(m，2H)，3.24(s，3H)，3.17(s，3H)，2.41-2.30(m，3H)，2.25-2.09(m，2H)，2.02-1.91(m，3H)，1.76-1.63(m，6H)，1.51-1.21(m，8H)，1.10(d，J＝6.4Hz，3H)，0.94(d，J＝6.4Hz，3H)。
实施例16 甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：叔-丁基(S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯
以9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-胺为原料，参照实施例1步骤8，得到叔-丁基(S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:441.0[M-100+H]+。
第二步：叔-丁基(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:726.36[M+H]+。
第三步：(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:526.30[M+H]+。
第四步：甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:858.40[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.0-11.65(m,1H),10.41(s,1H),8.11-7.57(m,10H),7.43-7.32(m,2H),7.07-6.98(m,1H),5.53-5.29(m,2H),4.48-4.45(m,1H),4.13-3.63(m,6H),3.55-3.53(m,6H),2.67-2.41(m,1H),2.23-2.18(m,2H),2.09-1.91(m,6H),1.06-0.82(m,12H)。
实施例17 甲基((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡 咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：叔-丁基(2S,4S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(2S,4S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:744.30[M+H]+。
第二步：(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(2S,4S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:544.30[M+H]+。
第三步：甲基((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:858.40[M+H]+；
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.73(br,1H),10.41(s,1H),8.11-7.57(m,10H),7.43(m,2H),7.01-6.98(m,1H),5.53-5.40(m,1H),5.34-5.29(m,1H),4.48-4.45(m,1H),4.11-3.66(m,6H),3.55-3.53(m,6H),2.52-2.48(m,1H),2.23-2.16(m,1H),2.10-1.91(m,6H),1.02-0.82(m,12H)。
实施例18 甲基((S)-1-((S)-2-((9,9-二氟-7-(2-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：叔-丁基(S)-2-((7-(2-((R)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(S)-2-((7-(2-((R)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:700.30[M+H]+。
第二步：(S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((R)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(S)-2-((7-(2-((R)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑 -5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((R)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:500.27[M+H]+。
第三步：甲基((S)-1-((S)-2-((9,9-二氟-7-(2-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((R)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-((9,9-二氟-7-(2-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:814.40[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.28(d,1H),10.39(s,1H),8.11-7.32(m,11H),5.21-5.19(m,1H),4.48-4.44(m,1H),4.11-4.00(m,2H),3.86-3.82(m,3H),3.69-3.66(m,1H),3.54(d,6H),2.24-1.91(m,10H),0.98-0.83(m,12H)。
实施例19 甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：叔-丁基(2S,4S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯
以9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-胺为原料，参照实施例1步骤8，得到叔-丁基(2S,4S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:459.00[M+H-Boc]+。
第二步：叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(2S,4S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:744.36[M+H]+。
第三步：(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:544.32[M+H]+。
第四步：甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:858.40[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.36(s,1H),7.89-7.49(m,10H),5.01(d,J＝8.8Hz,1H),4.44-4.16(m,4H),4.04-3.87(m,3H),3.71(s,6H),2.24-2.02(m,7H),1.26(s,6H),1.10-1.04(m,8H)。
实施例20 甲基((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(2S,4S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:662.38[M-Boc+H]+。
第二步：(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:562.28[M+H]+。
第三步：甲基((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:876.40[M+H]+；
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.64(s,1H),10.30(s,1H),8.09-7.28(m,13H),5.53-5.27(m,3H),4.69-4.67(m,1H),4.25-3.90(m,6H),3.55-3.53(m,6H),2.67-2.29(m,3H),2.10-1.91(m,3H),1.05-0.85(m,12H)。
实施例21 甲基((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(2S,4S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:718.40[M+H]+。
第二步：(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)氨基甲酰)-4-氟吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:518.31[M+H]+。
第三步：甲基((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
以(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:832.30[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.27(d,J＝12.1Hz,1H),10.29(s,1H),8.09(s,1H),7.94(s,1H),7.87-7.81(m,4H),7.66-7.44(m,4H),7.32(d,J＝8.4Hz,1H),5.22(s,1H),4.68(d,J＝10.4Hz,1H),4.13-3.80(m,6H),3.54(d,J＝2.8Hz,6H),2.23-3.21(m,3H),1.99-1.99(m,4H),1.04(d,J＝6.7Hz,3H),0.94(d,J＝6.5Hz,3H),0.90-0.81(m,8H)。
实施例22 甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯
第一步：7-碘-9H-芴-2-胺
将2-碘-7-硝基-9H-芴(3.0g,8.9mmol)、铁粉(1.5g,26.7mmol)、氯化铵(0.95g,17.8mmol)加入到乙醇(135ml)和水(8ml)的混合溶剂中，回流搅拌反应16小时。冷却至室温，加入10％碳酸钠溶液(75ml)搅拌0.5小时，过滤，滤饼加入到DCM(100ml)中，过滤，浓缩滤液，析出固体，过滤，水洗，滤饼烘干得到7-碘-9H-芴-2-胺(2.4g)。
第二步：叔-丁基(S)-2-((7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯
以7-碘-9H-芴-2-胺为原料，参照实施例1步骤8，得到叔-丁基(S)-2-((7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:405.10(M-Boc+H)+。
第三步：叔-丁基(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯
以叔-丁基(S)-2-((7-碘-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤9，得到叔-丁基(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯。
LC-MS m/z:690.30(M+H)+。
第四步：(S)-N-(7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺
以叔-丁基(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)氨基甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯为原料，参照实施例1步骤10，得到(S)-N-(7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS m/z:490.29[M+H]+。
第五步：甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨 基甲酸酯
以(S)-N-(7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺为原料，参照实施例1步骤11，得到甲基((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-缬氨酰)吡咯烷-2-碳杂草酰氨基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)氨基甲酸酯。
LC-MS m/z:804.40[M+H]+；
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.78(s,1H),10.13(s,1H),7.97(s,1H),7.88-7.80(m,5H),7.70-7.68(m,3H),7.52-7.50(m,2H),7.36-7.29(m,2H),5.10-5.08(m,1H),4.51-4.48(m,1H),4.09-4.02(m,2H),3.97(s,2H),3.83-3.81(m,3H),3.69-3.63(m,1H),3.54(d,J＝2.4Hz,6H),2.19-1.91(m,10H),0.98-0.85(m,12H)。
生物学评价
一、野生型丙肝病毒HCV基因1b抑制活性测定
本发明化合物对HCV复制的抑制活性是通过HCV复制子荧光素酶报告基因分析方法(HCV Replicon Reporter Luciferase Assay)测定的。
1、实验用的细胞模型：HCV复制子荧光素酶报告基因稳转的Huh-7细胞系。
2、实验溶液配制方法：
待测化合物贮备溶液用二甲基亚砜配制为10mM，实验时用DMSO稀释至试验最高浓度,然后用培养基进行3倍系列稀释，一般稀释成8到10个浓度点，每个浓度点设双复孔。二甲基亚砜终浓度为0.5％。每次实验均包含内参化合物，1个为参照化合物(Ledipasvir或Daclatasvir)，另1个为Cyclosporine。
3、实验测定步骤：
1)将细胞生长在96孔培养板上，24小时后将不同浓度的待测化合物和内参化合物加到培养的细胞。
2)48小时后，用酶标仪检测荧光素酶活性。
3)分析原始数据，计算受试化合物不同浓度点对荧光素酶活性的抑制即对HCV复制子的抑制百分比。
4)采用GraphPad Prism软件对抑制百分比数据进行非线性拟合分析得到化合物的半数抑制浓度IC50值。
4、实验结果：
本发明实施例化合物及参照化合物(Ledipasvir、Daclatasvir)的活性通过以上的试验进行测定，野生型丙肝病毒HCV基因1b抑制活性IC50值见表1：
二、NS5A突变的丙肝病毒HCV抑制活性测定
本发明化合物对NS5A突变的HCV复制的抑制活性是用HCV复制子荧光素酶报告基因分析方法(HCV Replicon Reporter Luciferase Assay)测定的。
1、实验用的细胞模型：HCV复制子荧光素酶报告基因瞬转的Huh-7细胞系，通过体外转录方法制备HCV复制子RNA，用电击穿孔法将RNA转染到Huh-7细胞中。
2、实验溶液配制方法：
待测化合物贮备溶液用二甲基亚砜配制为10mM，实验时用DMSO稀释至试验最高浓度,然后用培养基进行3倍系列稀释，一般稀释成8到10个浓度点，每个浓度点设双复孔。DMSO终浓度为0.5％。每次实验均包含1-2个内参化合物。
3、实验测定步骤：
1)将转染后的细胞生长在96孔培养板上，24小时后将不同浓度的待测化合物和内参化合物加到培养的细胞。
2)48小时后，用酶标仪检测荧光素酶活性。
3)分析原始数据，计算受试化合物不同浓度点对荧光素酶活性的抑制即对HCV复制子的抑制百分比。
4)采用GraphPad Prism软件对抑制百分比数据进行非线性拟合分析得到化合物的半数抑制浓度IC50值，
4、实验结果：
本发明实施例化合物及参照化合物(Daclatasvir)的活性通过以上的试验进行测定，HCV NS5A突变型复制子抑制活性IC50值见表2：
三、大鼠血浆PK分析
测试化合物的药物代谢动力学试验是用SD大鼠(上海史莱克)进行的。
■给药方式：单次灌胃给药。
■给药剂量：5mg/10mL/kg。
■制剂处方：45％1,2-丙二醇和15％聚乙二醇15羟硬脂酸酯。
■取样点：给药前和给药后2、4、6小时。
■血浆采样与样品处理：
1)颈静脉采血0.2ml，置于EDTA-2K试管中，4℃离心6000转5分钟分离血浆，于-80℃保存。
2)将160μL乙腈加入到40μL血浆样品、标品、和内参，涡旋3分钟，离心4000转10分钟，取100μL上清液，然后再加入100μL无离子水混匀，取10μL进行LC/MS/MS分析，血浆LC/MS/MS分析所用仪器为AB Sciex API 4000。
■液相分析：
●液相条件：Shimadzu LC-20AD泵
●色谱柱：phenomenex Gemiu 5um C18 50X 4.6mm
●移动相：A液为0.1％甲酸水溶液，B液为乙腈
●流速：0.8mL/min
●洗脱时间：0-3.01分钟，洗脱液如下：
时间/分钟 A液 B液
0.01 70％ 30％
1 10％ 90％
2 10％ 90％
2.01 70％ 30％
3 70％ 30％
■质谱分析：质谱仪设置条件：阳离子电喷雾电离(ESI)模式。
■试验结果：药代动力学的主要参数用WinNonlin 6.1计算得到，实验结果见表3：
四、大鼠肝脏药物分析
测试化合物的的吸收进入肝脏的药物浓度是用SD大鼠(上海史莱克)进行的。
■给药方式：单次灌胃给药。
■给药剂量：5mg/10mL/kg。
■制剂处方：45％1,2-丙二醇和15％聚乙二醇15羟硬脂酸酯。
■取样点：大鼠禁食一夜后给药,给药前和给药后2、4、6小时进行肝脏取样。■肝脏采样和样品处理：
1)肝脏各小叶采样后置于干冰上冷冻，于-80℃保存。
2)将PBS缓冲液加到肝脏样品(W/V＝1:5)中匀浆，将320μL乙腈加入到40μL肝脏样品、标品、和内参，涡旋3分钟，离心4000转10分钟，取100μL上清液，然后再加入50μL无离子水混匀，取10μL进行LC/MS/MS分析，LC/MS/MS分析所用仪器为AB Sciex API 4000。
■液相分析：
●液相条件：Shimadzu LC-20AD泵
●色谱柱：phenomenex Gemiu 5um C18 50X 4.6mm
●移动相：A液为0.1％甲酸水溶液，B液为乙腈
●流速：0.8mL/min
●洗脱时间：0-3.01分钟，洗脱液如下：
时间/分钟 A液 B液
0.01 70％ 30％
1 10％ 90％
2 10％ 90％
2.01 70％ 30％
3 70％ 30％
■质谱分析：质谱仪设置条件：阳离子电喷雾电离(ESI)模式。
■试验结果：药代动力学的主要参数用WinNonlin 6.1计算得到，实验结果见表4：

Claims (16)

  1. 一种具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
    其中：
    R1、R1’各自独立的选自氢、氘、卤素、羟基、氨基、C1-8烷基或C3-8环烷基，或者，R1和R1’与直接相连的碳原子形成3-6元碳环或3-6元杂环，
    任选进一步被一个或多个选自卤素、羟基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、卤取代C1-8烷氧基、C1-8环烷基或C1-8环烷氧基的取代基所取代；
    R2、R2’各自独立的选自氢、氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，
    任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
    R3、R3’各自独立的选自氢、氘、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、C5-10芳基、5-10元杂芳基、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、或-C0-8-C(O)NR6R7，
    任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
    R4、R4’各自独立的选自氢、氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、 C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，
    或者，R4或R4’与其相连的四氢吡咯环一起形成6-10元含氮螺环、桥环或稠环，
    任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
    R5选自氢、氘、C1-8烷基、C3-8环烷基、卤取代C1-8烷基、C1-8烷氧C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-C(O)R10或-C(O)OR9，
    任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
    L选自键、C5-10芳基或5-10元杂芳基，任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；
    M选自键、C5-10芳基或5-10元杂芳基，任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、羟基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、卤取代C1-8烷基、卤取代C1-8烷氧基、C1-8烷基磺酰基的取代基所取代；
    R6、R7各自独立的选自氢、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、C5-10芳基、5-10元杂芳基、C1-8烷基酰基或C1-8烷基酰氨基，
    任选进一步被一个或多个选自卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、乙酰氨基、叠氮基、磺酰基、甲磺酰基、C1-8烷基、卤取代C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧羰基、C1-8烷基羰基、 C1-8烷基羰基氧基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、氨基、单C1-8烷基氨基或二C1-8烷基氨基的取代基所取代；
    R8选自氢、氘、C1-8烷基、C3-8环烷基、卤取代C1-8烷基、二C1-8烷基氨基、苯基或对甲基苯基；
    R9选自氢、氘、C1-8烷基、C3-8环烷基、卤取代C1-8烷基或羟取代C1-8烷基；
    R10选自氢、氘、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C3-8环烷基、C3-8环烷氧基、卤取代C1-8烷基、卤取代C1-8烷氧基、羟取代C1-8烷基或羟取代C1-8烷氧基；
    L和M不同时为键；
    m、m’各自独立的选自0～7；
    r为0、1或2。
  2. 根据权利要求1所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，R5选自氢、氘、C1-4烷基、C3-6环烷基、卤取代C1-4烷基、C1-4烷氧C1-4烷基、羟基C1-4烷基、-C(O)R10或-C(O)OR9，任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
  3. 根据权利要求2所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，R5选自氢、氘、甲基、乙基、异丙基、三氟甲基、环丙基或环已基。
  4. 根据权利要求1所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，L选自键、苯基或萘基。
  5. 根据权利要求1所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，M选自键、呋喃、噻吩、吡咯、噻唑、咪唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、吲哚、喹啉或苯并咪唑。
  6. 根据权利要求1所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，选自如下式(Ⅱ)或式(Ⅲ)化合物：
  7. 根据权利要求1所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，R1、R1’各自独立的选自氢、氘、卤素、羟基、氨基、C1-4烷基、卤取代C1-4烷基或C3-6环烷基，或者，R1和R1’与直接相连的碳原子形成3-6元碳环或3-6元杂环。
  8. 根据权利要求7所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，R1、R1’各自独立的选自氢、氘、氟、羟基、氨基、甲基、乙基、环丙基或三氟甲基，或者，R1和R1’与直接相连的碳原子形成环丙基、环丁基、环戊基。
  9. 根据权利要求1所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，R4、R4’各自独立的选自氢、氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-4烷基、C2-6链烯基、C2-6链炔基、C3-6环烷基、3-6元杂环基、3-6元杂环基氧基、3-6元杂环基硫基、C5-8芳基、C5-8芳基氧基、C5-8芳基硫基、5-8元杂芳基、5-8元杂芳基氧基、5-8元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，
    或者，R4或R4’与其相连的四氢吡咯环一起形成6-10元含氮螺环、桥环或稠环，
    任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
  10. 根据权利要求9所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，R4、R4’各自独立的选自氢、氘、氟、甲基、乙基或异丙基，或者，R4、R4’与其相连的四氢吡咯环一起形成6-10元含氮螺环、桥环或稠环，结构如下：
    任选进一步被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C2-8链烯基、C2-8链炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基氧基、3-8元杂环基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元杂芳基、5-10元杂芳基氧基、5-10元杂芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
  11. 根据权利要求1所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，R2、R2’各自独立的选自氢、氘、卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基、-C0-4-O-R9、-C0-4-C(O)R10、-C0-4-C(O)OR9、-C0-4-O-C(O)R10、-C0-4-NR6R7、-C0-4-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9。
  12. 根据权利要求1-11任一项所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，选自如下化合物：
  13. 根据权利要求1-12任一所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐的制备方法，其特征在于，包括如下制备步骤：
    其中，R1、R1’、R2、R2’、R3、R3’、R4、R4’、R5、R5’、R6、R7、R8、R9、R10、L、M、m、m’、r如权利要求1所定义。
  14. 根据权利要求13所述的制备方法，其特征在于，所述的缚酸剂为有机碱或无机碱，所述有机碱选自三甲胺、三乙胺、吡啶、哌啶、吗啉、二异丙基乙胺或其混合物，所述无机碱选自碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化锂，醋酸钠或其混合物；所述的缩合剂选自DIC、DCC、HOBT、EDC·HCl、PyBOP、PyBroP、HATU、HCTU、DEPBT、EEDQ、CDI或其混合物。
  15. 药物组合物，其包括治疗有效剂量的根据权利要求1-12任一所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐及可药用的载体。
  16. 根据权利要求1-12任一所述的具有式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐、或根据权利要求15所述的药物组合物在制备治疗或预防HCV感染中的应用。
CN201680064884.4A 2015-11-06 2016-10-26 Hcv抑制剂、其制备方法与应用 Active CN108349945B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2015107507933 2015-11-06
CN201510750793 2015-11-06
PCT/CN2016/103336 WO2017076201A1 (zh) 2015-11-06 2016-10-26 Hcv抑制剂、其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108349945A true CN108349945A (zh) 2018-07-31
CN108349945B CN108349945B (zh) 2021-10-29

Family

ID=58661631

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680064884.4A Active CN108349945B (zh) 2015-11-06 2016-10-26 Hcv抑制剂、其制备方法与应用

Country Status (3)

Country Link
CN (1) CN108349945B (zh)
TW (1) TW201716395A (zh)
WO (1) WO2017076201A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019059687A1 (ko) * 2017-09-22 2019-03-28 서울대학교 산학협력단 플루오렌 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 hcv 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102427729A (zh) * 2009-03-27 2012-04-25 默沙东公司 丙型肝炎病毒复制的抑制剂
CN102448956A (zh) * 2009-03-30 2012-05-09 百时美施贵宝公司 丙型肝炎病毒抑制剂
CN102596936A (zh) * 2009-05-13 2012-07-18 吉里德科学公司 抗病毒化合物
WO2014175699A1 (ko) * 2013-04-26 2014-10-30 서울대학교 산학협력단 벤지딘 유도체, 이의 제조방법 및 이를 함유하는 c형 간염 바이러스에 의한 간질환 치료용 약학적 조성물.
CN104203940A (zh) * 2011-12-28 2014-12-10 爱尔兰詹森研发公司 作为hcv抑制剂的杂双环衍生物
WO2015042375A1 (en) * 2013-09-20 2015-03-26 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120195857A1 (en) * 2010-08-12 2012-08-02 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102427729A (zh) * 2009-03-27 2012-04-25 默沙东公司 丙型肝炎病毒复制的抑制剂
CN102448956A (zh) * 2009-03-30 2012-05-09 百时美施贵宝公司 丙型肝炎病毒抑制剂
CN102596936A (zh) * 2009-05-13 2012-07-18 吉里德科学公司 抗病毒化合物
CN104203940A (zh) * 2011-12-28 2014-12-10 爱尔兰詹森研发公司 作为hcv抑制剂的杂双环衍生物
WO2014175699A1 (ko) * 2013-04-26 2014-10-30 서울대학교 산학협력단 벤지딘 유도체, 이의 제조방법 및 이를 함유하는 c형 간염 바이러스에 의한 간질환 치료용 약학적 조성물.
WO2015042375A1 (en) * 2013-09-20 2015-03-26 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
WO2017076201A1 (zh) 2017-05-11
TW201716395A (zh) 2017-05-16
CN108349945B (zh) 2021-10-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4685775B2 (ja) セリンプロテアーゼ、とりわけｈｃｖｎｓ３−ｎｓ４ａプロテアーゼの阻害剤
CN103880862B (zh) 丙型肝炎病毒复制的抑制剂
CN105829334B (zh) 尿嘧啶核苷酸类似物及其制备方法和应用
JP6034883B2 (ja) ヘテロ三環状部分を有する抗ウイルス性化合物
WO2022021841A1 (zh) 一种新型冠状病毒主蛋白酶的抑制剂及其制备方法和用途
TW201033196A (en) Inhibitors of HCV NS5A
JP2006526011A5 (zh)
TW200523270A (en) Inhibitors of serine proteases, particularly HCV ns3-ns4a protease
EA013207B1 (ru) Ингибиторы вирусной полимеразы
JP2013504604A (ja) ウイルスポリメラーゼ阻害剤としてのキナゾリノン誘導体
JP2014534206A (ja) Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
CN105884779B (zh) 作为丙型肝炎抑制剂的化合物及其在药物中的应用
CN106883280B (zh) 一种前药、其制备方法、药物组合物及其用途
CN114057702A (zh) 一种新型冠状病毒主蛋白酶的抑制剂及其制备方法和用途
CN103420991B (zh) 作为丙型肝炎抑制剂的吡咯烷衍生物及其在药物中的应用
CN105873922A (zh) 9,9,10,10-四氟-9,10二氢菲类丙型肝炎病毒抑制剂及其应用
CN103298791B (zh) 病毒聚合酶抑制剂
CN105384792B (zh) 作为丙型肝炎抑制剂的化合物及其在药物中的应用
CN108349945A (zh) Hcv抑制剂、其制备方法与应用
CN103304551B (zh) 丙肝聚合酶抑制剂
CN108349907A (zh) 1,4(1,4)-二苯杂环六蕃-12,43-二基衍生物及其制备方法与应用
CN107074876B (zh) 一类抑制丙肝病毒的大环状杂环化合物及其制备和用途
JP6069491B2 (ja) Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤としてのピペラジン−ピペリジン化合物
CN108348504A (zh) 具有抑制hcv活性的化合物及其制备方法和应用
WO2020219808A1 (en) Dicarbamate inhibitors of ns5a for treatment of hepatitis c virus infections and related diseases

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant