TW201716395A - Ｈｃｖ抑制劑、其製備方法與應用 - Google Patents

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Abstract

本發明公開了HCV抑制劑、其製備方法與應用。具體地，本發明涉及一種具有式(I)結構的HCV抑制劑、其製備方法與應用，其中式中的各取代基與說明書中的定義相同。該系列化合物具有抑制HCV的活性的作用，可應用於治療丙型肝炎病毒(HCV)感染相關疾病藥物的開發，具有廣闊的應用前景。□

Description

HCV抑制劑、其製備方法與應用
本發明屬於藥物開發領域，具體涉及一種HCV抑制劑、其製備方法與應用。
丙肝病毒HCV屬於黃病毒科家族，黃病毒科家族包括至少三個屬：瘟病毒屬(pestiviruses)，主要在牛和豬中引起疾病；黃病毒屬(flaviviruses)，為登革熱和黃熱病等疾病的主要原因；以及丙型肝炎病毒屬(hepaciviruses)，HCV為此屬唯一成員。黃病毒屬成員超過68個，基於血清學親緣關係可分為不同的組；臨床症狀呈現多樣性，包括發熱、腦炎和出血熱等。全球所關注的與人類疾病有關的黃病毒屬病毒包括登革出血熱病毒(DHF)、黃熱病病毒、休克綜合症病毒和日本腦炎病毒。由於HCV基因組在結構和表型特徵上與人黃病毒和瘟病毒相類似，將其歸為黃病毒科HCV。丙型肝炎病毒是正鏈RNA病毒，在核衣殼外包繞含脂質的囊膜，囊膜上有刺突。HCV現有Huh7，Huh7.5，Huh7.5.1三種體外細胞培養系統。丙型肝炎病毒於1974年被首次發現，1989年美國科學家邁克爾．侯頓(Michael Houghton)和他的同事們利用分子生物學方法找到了該病毒的基因序列，並純株化丙肝病毒，命名本病及其病毒為丙型肝炎(HepatitisC)和丙型肝炎病毒(HCV)。
HCV病毒體是包膜的正鏈RNA病毒，HCV-RNA大約有9500-10000bp組成，5'和3'非編碼區(NCR)分別有319-341bp，和27-55bp，含有幾個順向和反向重複序列，可能與基因複製有關，基因組排列順序為5'-C-E1-E2-p7-NS2-NS3-NS4A/4B-NS5A-NS5B-3'，能編碼一長度大約為3014個胺基酸的多聚蛋白前體，後者可經宿主細胞和病毒自身蛋白酶作用後，裂解成10種病毒蛋白，包括三種結構蛋白，即分子量19KD的核衣殼蛋白(或稱核心蛋白，Core)和兩種糖蛋白(分子量為33KD的E1蛋白，分子量72Kd的E2蛋白)，p7編碼一種膜內在蛋白，其功能可能是一種離子通道。非結構蛋白部分則包括NS2，NS3，NS4A，NS4B，NS5A和NS5B；非結構蛋白對病毒的生活週期非常重要。NS2/3和NS3/4A具有蛋白酶活性，參與病毒多聚蛋白前體的切割。此外，NS3蛋白還具有螺旋酶活性，參與解旋HCV-RNA分子，以協助RNA複製。NS5B具有RNA依賴的RNA聚合酶活性，參與HCV基因組複製；NS5B缺乏校讀功能，所以HCV病毒基因組複製時發生突變的頻率很高。NS5A的確切作用機理還不是很清楚，但NS5A可與多種宿主細胞蛋白相互作用，是病毒基因組複製以及病毒顆粒包裝過程中不可缺少的一種蛋白，因此NS5A是開發HCV特異性抗病毒療法的一個具吸引力的靶點。
已發現的HCV可分為六種基因型1-6，不同基因型對不同治療的應答有所差別。HCV具有顯著異源性和高度可變性，對已知全部基因組序列的HCV株進行分析比較發現其核苷酸和胺基酸序列存在較大差異，並且HCV基因組各部位的變異程度不相一致，如5'-NCR最保守，同源性在92-100%，而3'NCR區變異程度較高。在HCV的編碼基因中，C區最保守、非結構(NS)區次之，編碼囊膜蛋白E2/NS1可變性最高稱為高可變區。研究人員根據HCV基因組的序列相似性將HCV病毒分為不同的基因型，每一基因型還可進一步分為不同的亞型，迄今已發現至少已發現6種基因型24個亞型。HCV不同基因型在世界各地分佈不同，基因1型、2型、3型在世界各地均存在，基因4型和5型主要分佈在中東和非洲，基因6型主要發現於東南亞。美國主要為基因1型，約占HCV病人的70%(其中1a約為36%，1b約為24%)，其餘的30%主要為基因2型和基因3型。中國HCV病人約66%為基因1b型，14%為基因2a型。根據發表于2014年中華內科雜誌的流行病學統計，中國各地有明顯地域差異，基因2型、3型、6型在中國西部和南部占很高的比例。
丙型肝炎病毒(HCV)已經嚴重危及人類健康，其在大量的受感染個體(據估計為全世界人口的2-15%)中導致慢性肝臟疾病如肝硬化和肝細胞癌。HCV病毒主要藉由體液傳播，迄今還沒有防止HCV感染的疫苗。根據世界衛生組織，全世界有超過2億的受感染個體，每年至少有3至4 百萬人被感染。一旦被感染後，大約20%的人能清除該病毒，但是其餘的人則成為HCV攜帶者。HCV病人是一個很大的群體，估計全球人口的3%約1.7億為HCV病人。美國的HCV病人占人口的1.4%，約3-4百萬人。中國缺乏權威性的HCV病人的流行病學資料，最保守的估計是人口的0.42%，有的報導認為中國HCV病人高達3.8%人口，按照這些數字估計中國HCV病人應在6百萬-3千8百萬之間。HCV病人中，10%至20%的慢性感染個體最終發展成肝臟破壞性的硬化或癌症。
在很長的一段時間甚至目前在很多發展中國家，無論是急性丙型肝炎，還是慢性丙型肝炎，標準治療方案都是聚乙二醇干擾素(α-2a或α-2b)聯合利巴韋林。聚乙二醇干擾素(α-2a或α-2b)聯合利巴韋林的治療方案存在很多問題，包括用藥週期長，毒副作用大，病人應答比例低等。因此，需要發展更為有效和新型的療法，以解決由HCV感染造成的未被滿足的醫療需求。最近幾年開發出的針對HCV靶點的藥物(DAA,direct acting antivirals)在這幾方面取得了巨大的進展，目前世界上HCV治療的發展趨勢是不需要干擾素和利巴韋林的DAA聯合用藥。主要的DAA藥物為NS5B抑制劑，NS5A抑制劑，NS3/4A抑制劑。與干擾素聯合利巴韋林相比，DAA聯合用藥的優勢(或潛在優勢)包括：高的持續性病毒應答率SVR(基本可以治癒)，縮短治療週期，避免耐藥性的產生，追求廣譜性(可對HCV多種基因型有效)。
最先取得成功的DAA藥物是NS3/4A抑制劑，包括Telaprevir(Vertex/Janssen),Boceprevir(Merck)，均在2011年獲得FDA批准。NS5B抑制劑包括吉利德的Sofosvubir和艾伯維的三聯藥中的ABT-333。NS5A是這三類DAA最後開發成功的藥物，包括BMS的Daclatasvir，吉利德的Ledipasvir(與Sofosbuvir聯用)和GS-5816，艾伯維的三聯藥中的ABT-267，Achillion公司的ACH-3102，Merck的MK-8742等。與NS3/4A和NS5B抑制劑相比，NS5A抑制劑可使病人體內的病毒載量下降地更快和更多。此外，ACH-3102和GS-5816在很多Daclatasvir和Ledipasvir耐藥突變上仍有活性。
發明人在研究過程中發現了一類具有式(I)結構的HCV抑制劑、其製備方法與應用。該系列化合物既對野生型HCV具有很高的抑制活性，也對Daclatasvir和Ledipasvir耐藥突變具有很高的抑制活性，可應用於治療丙型肝炎病毒(HCV)感染相關疾病藥物的開發，具有廣闊的應用前景。
本發明一方面提供一種具有如下式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽： 其中： R1、R1’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、羥基、胺基、C1-8烷基或C3-8環烷基，或者，R1和R1’與直接相連的碳原子形成3-6員碳環或3-6員雜環，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、鹵取代C1-8烷氧基、C1-8環烷基或C1-8環烷氧基的取代基所取代；R2、R2’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；R3、R3’各自獨立的選自氫、氘、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10 員雜芳基、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、或-C0-8-C(O)NR6R7，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；R4、R4’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C08-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，或者，R4或R4’與其相連的四氫吡咯環一起形成6-10員含氮螺環、橋環或稠環，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、 -C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；R5選自氫、氘、C1-8烷基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基、C1-8烷氧C1-8烷基、羥基C1-8烷基、-C(O)R10或-C(O)OR9，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；L選自鍵、C5-10芳基或5-10員雜芳基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；M選自鍵、C5-10芳基或5-10員雜芳基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、羥基、C1-8烷基、C1-8烷氧 基、鹵取代C1-8烷基、鹵取代C1-8烷氧基、C1-8烷基磺醯基的取代基所取代；R6、R7各自獨立的選自氫、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基、C1-8烷基醯基或C1-8烷基醯胺基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、乙醯胺基、疊氮基、磺醯基、甲磺醯基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧羰基、C1-8烷基羰基、C1-8烷基羰基氧基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、胺基、單C1-8烷基胺基或二C1-8烷基胺基的取代基所取代；R8選自氫、氘、C1-8烷基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基、二C1-8烷基胺基、苯基或對甲基苯基；R9選自氫、氘、C1-8烷基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷基；R10選自氫、氘、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C3-8環烷基、C3-8環烷氧基、鹵取代C1-8烷基、鹵取代C1-8烷氧基、羥取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷氧基；L和M不同時為鍵；m、m’各自獨立的選自0~7；r為0、1或2。
作為較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其 藥學上可接受鹽，R5選自氫、氘、C1-4烷基、C3-6環烷基、鹵取代C1-4烷基、C1-4烷氧C1-4烷基、羥基C1-4烷基、-C(O)R10或-C(O)OR9，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
作為進一步較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，R5選自氫、氘、甲基、乙基、異丙基、三氟甲基、環丙基或環已基。
作為較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，L選自鍵、苯基或萘基。
作為較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，M選自鍵、呋喃、噻吩、吡咯、噻唑、咪唑、吡啶、吡、嘧啶、嗒、吲哚、喹啉、苯並咪唑。
作為進一步較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，選自如下式(II)或式(III)化合物：
作為進一步較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，R1、R1’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、羥基、胺基、C1-4烷基、鹵取代C1-4烷基或C3-6環烷基，或者，R1和R1’與直接相連的碳原子形成3-6員碳環或3-6員雜環。
作為更進一步較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，R1、R1’各自獨立的選自氫、氘、氟、羥基、胺基、甲基、乙基、環丙基或三氟甲基，或者，R1和R1’與直接相連的碳原子形成環丙基、環丁基、環戊基。
作為進一步較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，R4、R4’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-4烷基、C2-6鏈烯基、C2-6鏈炔基、C3-6環烷基、3-6員雜環基、3-6員雜環基氧基、3-6員雜環基硫基、C5-8芳基、C5-8芳基氧基、C5-8芳基硫基、5-8員雜芳基、5-8員雜芳基氧基、5-8員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，或者，R4或R4’與其相連的四氫吡咯環一起形成6-10員含氮螺環、橋環或稠環，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10 芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
作為更進一步較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，R4、R4’各自獨立的選自氫、氘、氟、甲基、乙基或異丙基，或者，R4或R4’與其相連的四氫吡咯環一起形成6-10員含氮螺環、橋環或稠環，結構如下： 視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
作為進一步較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，R2、R2’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、甲基、乙基、異丙基、環丙基、-C0-4-O-R9、-C0-4-C(O)R10、-C0-4-C(O)OR9、-C0-4-O-C(O)R10、-C0-4-NR6R7、-C0-4-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9。
作為最較佳的方案，該式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，選自如下化合物：
本發明另一方面提供一種前述式(I)化合物的製備方法，包括如下步驟：
其中，R1、R1’、R2、R2’、R3、R3’、R4、R4’、R5、R5’、R6、R7、R8、R9、R10、L、M、m、m’、r如式(I)化合物所定義。
作為進一步較佳的方案，該縛酸劑為有機鹼或無機鹼，該有機鹼選自三甲胺、三乙胺、吡啶、哌啶、嗎啉、二異丙基乙胺或其混合物，該無機鹼選自碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸銫、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰、醋酸鈉或其混合物；該縮合劑選自DIC、DCC、 HOBT、EDC．HCl、PyBOP、PyBroP、HATU、HCTU、DEPBT、EEDQ、CDI或其混合物。
本發明另一方面提供了一種醫藥組成物，其包括治療有效劑量的任一前述化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽及可藥用的載體。
本發明另一方面提供了任一前述化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽或前述的醫藥組成物在製備治療或預防HCV感染藥物中的應用。
詳細說明：除非有相反陳述，下列用在說明書和申請專利範圍中的術語具有下述含義。
“C1-8烷基”指包括1至8個碳原子的直鏈烷基和含支鏈烷基，烷基指飽和的脂族烴基團，較佳為C1-4烷基。C0-8是指不含碳原子或者C1-8烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、 3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基或其各種支鏈異構體等。
烷基可以是取代的或未取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；“環烷基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，“C3-8環烷基”指包括3至8個碳原子的環烷基，較佳為3至6個碳原子的環烷基，例如：單環環烷基的非限制性實施例包含環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等。
多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。“螺環烷基”指單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)的多環基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完 全共軛的π電子系統。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺環烷基、雙螺環烷基基或多螺環烷基，螺環烷基的非限制性實施例包含：
“稠環烷基”指系統中的每個環與體系中的其他環共用毗鄰的一對碳原子的全碳多環基團，其中一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠環烷基，稠環烷基的非限制性實施例包含：
“橋環烷基”指任意兩個環共用兩個不直接連接的碳原子的全碳多環基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基，橋環烷基的非限制性實施例包含：
該環烷基環可以稠合於芳基、雜芳基或雜環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為環烷基，非限制性實施例包括茚滿基、四氫萘基、苯並環庚烷基等。
環烷基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、 羥基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；“雜環基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O)r(其中r是整數0、1、2)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。“5-10員雜環基”指包含5至10個環原子的環基，“3-8員雜環基”指包含3至8個環原子的環基，較佳3至6個環原子的環基。
單環雜環基的非限制性實施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌基、嗎啉基、硫代嗎啉基、高哌基等。
多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。“螺雜環基”指單環之間共用一個原子(稱螺原子)的多環雜環基團，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O)r(其中r是整數0、1、2)的雜原子，其餘環原子為碳。這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺雜環基、雙螺雜環基或多螺雜環基。螺環烷基的非限制性實施例包含：
“稠雜環基”指系統中的每個環與體系中的其他環共用毗鄰的一對原子的多環雜環基團，一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O)r(其中r是整數0、1、2)的雜原子，其餘環原子為碳。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠雜環烷基，稠雜環基的非限制性實施例包含：
“橋雜環基”指任意兩個環共用兩個不直接連接的原子的多環雜環基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O)r(其中r是整數0、1、2)的雜原子，其餘環原子為碳。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基，橋環烷基的非限制性實施例包含：
該雜環基環可以稠合於芳基、雜芳基或環烷基環上， 其中與母體結構連接在一起的環為雜環基，非限制性實施例包含：
雜環基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；“芳基”指全碳單環或稠合多環(也就是共用毗鄰碳原子對的環)基團，具有共軛的π電子體系的多環(即其帶有相鄰對碳原子的環)基團，“C5-10芳基”指含有5-10個碳的全碳芳基，例如苯基和萘基。該芳基環可以稠合於雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，非限制性實施例包含：
芳基可以是取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；“雜芳基”指包含1至4個雜原子的雜芳族體系，該雜原子包括氮、氧和S(O)r(其中r是整數0、1、2)的雜原子，5-7員雜芳基指含有5-7個環原子的雜芳族體系，5-10員雜芳基指含有5-10個環原子的雜芳族體系，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡基、咪唑基、四唑基等。該雜芳基環可以稠合於芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，非限制性實施例包含：
雜芳基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；“烯基”指由至少兩個碳原子和至少一個碳-碳雙鍵組成的如上述定義的烷基，C2-8鏈烯基指含有2-8個碳的直鏈或含支鏈烯基，較佳2-4個碳的直鏈或含支鏈烯基。例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-，2-或3-丁烯基等。
烯基可以是取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、 -C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；“炔基”指至少兩個碳原子和至少一個碳-碳三鍵組成的如上所定義的烷基，C2-8鏈炔基指含有2-8個碳的直鏈或含支鏈炔基，較佳為2-4個碳的直鏈或含支鏈炔基。例如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-，2-或3-丁炔基等。
炔基可以是取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；“烷氧基”指-O-(烷基)，其中烷基的定義如上所述。C1-8烷氧基指含1-8個碳的烷基氧基，較佳1-4個碳的烷基氧基，非限制性實施例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等。
烷氧基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基，較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳 基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；“環烷氧基”指和-O-(未取代的環烷基)，其中環烷基的定義如上所述。C3-8環烷氧基指含3-8個碳的環烷基氧基，較佳3-6個碳的環烷基氧基，非限制性實施例包含環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基、環己氧基等。
環烷氧基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選鹵素、羥基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；“鹵取代C1-8烷基”指烷基上的氫視需要的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-8個碳烷基基團，較佳烷基上的氫視需要的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-4個碳烷基基團，例如二氟甲基、二氯甲基、二溴甲基、三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基等。
“鹵取代C1-8烷氧基”烷基上的氫視需要的被氟、 氯、溴、碘原子取代的1-8個碳烷氧基基團，較佳為烷基上的氫視需要的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-4個碳烷氧基基團。例如二氟甲氧基、二氯甲氧基、二溴甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、三溴甲氧基等。
“C(O)R10”指R10取代的羰基，例如，“C0-8烷基羰基”指C0-8烷基取代的羰基，較佳為C0-4烷基取代的羰基；“C1-8烷醯基胺基”指C1-8烷醯基取代的胺基，較佳為C1-4烷醯基取代的胺基，例如，C2烷醯基胺基指乙醯胺基。
“鹵素”指氟、氯、溴或碘。
“THF”指四氫呋喃。
“DCM”指二氯甲烷。
“DMAP”指4-二甲胺基吡啶。
“DME”指二甲醚。
“DMF”指N、N-二甲基甲醯胺。
“MTBE”指甲基第三丁基醚。
“EA”指乙酸乙酯。
“DIPEA”指二異丙基乙胺。
“NBS”指N-溴代丁二醯亞胺。
“NFSI”指N-氟代雙苯磺醯胺。
“NMM”指N-甲基嗎啉。
“KHMDS”指六甲基二矽基胺基鉀。
術語“縮合劑”是指能引起縮合反應的試劑。縮合反應是指兩個或多個有機分子相互作用後以共價鍵結合成一個大分子，同時失去水或其他比較簡單的無機或有機小分 子的反應。其中的小分子物質通常是水、氯化氫、甲醇或乙酸等。本發明中各種縮合劑的簡稱對應的中文名稱如下表所示：
“視需要”或“視需要地”意味著隨後所描述地事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生地場合。例如，“視需要被烷基取代的雜環基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。
“取代的”指基團中的一個或多個氫原子，較佳為最多5個，更佳為1~3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取 代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學位置，本領域技術人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。
“醫藥組成物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物的目的是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。
下面結合實施例對本發明做進一步詳細、完整地說明，但決非限制本發明，本發明也並非僅局限於實施例的內容。
本發明的化合物結構是藉由核磁共振(NMR)或/和液質聯用色譜(LC-MS)來確定的。NMR化學位移(δ)以百萬分之一(ppm)的單位給出。NMR的測定是用Bruker AVANCE-400核磁儀，測定溶劑為二甲亞碸(DMSO)和氘代氯仿(CDCl3)內標為四甲基矽烷(TMS)。
液質聯用色譜LC-MS的測定用Agilent 1200 Infinity Series質譜儀。HPLC的測定使用安捷倫1200DAD高壓液相色譜儀(Sunfire C18 150×4.6mm色譜管柱)和Waters 2695-2996高壓液相色譜儀(Gimini C18 150×4.6mm色譜管柱)。
薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254 矽膠板，TLC採用的規格是0.15mm~0.20mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm~0.5mm。管柱層析一般使用煙臺黃海矽膠200~300目矽膠為載體。
本發明實施例中的起始原料是已知的並且可以在市場上買到，或者可以採用或按照本領域已知的方法來合成。在無特殊說明的情況下，本發明的所有反應均在連續的磁攪拌下，在乾燥氮氣或氬氣氛下進行，溶劑為乾燥溶劑。
氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氮氣氣球。氬氣氛或氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。
在無特殊說明的情況下，實施例中的溶液是指水溶液。反應的溫度為室溫。室溫為最適宜的反應溫度，為20℃~30℃。
實施例中的反應進程的監測採用薄層色譜法(TLC)或液質聯用色譜(LC-MS)反應所使用的展開劑體系有：二氯甲烷和甲醇體系，正己烷和乙酸乙酯體系，石油醚和乙酸乙酯體系，丙酮，溶劑的體積比可根據化合物的極性不同而進行調節。柱層析的洗脫劑的體系包括：A：二氯甲烷和甲醇體系，B：正己烷和乙酸乙酯體系，C：二氯甲烷和乙酸乙酯體系，D：乙酸乙酯和甲醇，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節，也可以加入少量的氨水和醋酸等進行調節。
實施例化合物的製備 實施例1 ((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7- ((2S,3aS,7aS)-1-(N-甲氧羰基)-O-甲基-L-蘇胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(2S,3aS,7aS)-1-(第三-丁氧基羰基)八氫-1H-吲哚-2-羧酸
0℃下將(2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-羧酸(50g)溶於THF(400mL)和水(200mL)的混合溶液中，控溫10℃以下滴加2.5M NaOH水溶液(200mL)，在0℃下攪拌15分鐘，再控溫10℃以下滴加二碳酸二丁酯(85.4g)，滴畢室溫攪拌反應16小時。向反應液中加入水(500mL)，用MTBE(500mL)洗滌3次，1M檸檬酸水溶液調節水相pH至3-4，乙酸乙酯萃取(500mL)3次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮至乾得到化合物(2S,3aS,7aS)-1-(第三-丁氧基羰基)八氫-1H-吲哚-2-羧酸(74.9g)。
LC-MS m/z：268.10[M-H]-。
第二步：(2S,3aS,7aS)-2-((2-胺基-4-溴苯基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸酯和第三-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((2-胺基-5-溴苯基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯
0℃下將化合物(2S,3aS,7aS)-1-(第三-丁氧基羰基)八氫-1H-吲哚-2-羧酸(30g)，4-溴-1,2-二胺基苯(22.5g)，EDCI(23.5g)，HOBt(16.6g)溶於DMF(300mL)中，控溫10℃以下滴加N-甲基嗎啉(36.8ml)，室溫攪拌反應12小時。LC-MS監測反應完畢，向反應液中加入水(1200ml)，乙酸乙酯(300mL)萃取3次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮至乾得到(2S,3aS,7aS)-2-((2-胺基-4-溴苯基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸酯和第三-丁基(2S,3aS,7aS)-2-((2-胺基-5-溴苯基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯(共55.1g)。
LC-MS m/z：438.10[M+H]+,440.20[M+H]+。
第三步：(2S,3aS,7aS)-2-(6-溴-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯
將(2S,3aS,7aS)-2-((2-胺基-4-溴苯基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯和(2S,3aS,7aS)-2-((2-胺基-5-溴苯基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯(共55g)溶於乙酸(300mL)中，在65℃下反應，LC-MS監測反應完畢。反應液冷卻至室溫，減壓蒸出溶劑，殘餘物溶於乙酸 乙酯(300mL)，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至大於7，水相用乙酸乙酯(300mL)萃取2次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮至乾，殘留物矽膠管柱層析分離(石油醚/乙酸乙酯)得到(2S,3aS,7aS)-2-(6-溴-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯(28g)。
LC-MS m/z：420.10[M+H]+,422.05[M+H]+。
第四步：(2S,3aS,7aS)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯
氮氣保護下，將(2S,3aS,7aS)-2-(6-溴-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯(10g,20.0mmol)、雙(頻哪醇基)二硼烷(12.1g,40.0mmol)、四三苯基膦鈀(1.4g,1.0mmol)、碳酸鉀(9.9g)溶於DME(100mL)和水(10mL)中，升溫至80℃攪拌反應12小時。LC-MS監測反應完畢，冷卻至室溫，向反應液中滴加水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)，水相用乙酸乙酯(100mL)萃取2次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮至乾，殘餘物矽膠管柱層析分離(石油醚/乙酸乙酯)得到(2S,3aS,7aS)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯(9.8g)。
LC-MS m/z：468.25[M+H]+。
第五步：2-溴-9,9-二甲基-9H-芴
氮氣保護下，將2-溴-9H-芴(30g,0.12mol)加入至1L的三口瓶中，加入四氫呋喃(300ml)，冷卻至5℃，分批加入第三丁醇鉀(37.3g,0.33mol)，攪拌30分鐘，降溫至-5℃，滴加碘甲烷(52.4g,0.36mol)，升溫至25℃攪拌3小時。加入乙酸乙酯(300ml)後降溫至5℃，滴加水(300ml)，攪拌後分出有機層，水相用乙酸乙酯萃取，合併有機相，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到2-溴-9,9-二甲基-9H-芴(33.7g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.69-7.71(m,1H),7.60-7.57(m,2H),7.42-7.48(m,2H),7.34-7.36(m,2H),1.49(s,6H)。
第六步：2-溴-9,9-二甲基-7-硝基-9H-芴
氮氣保護下，將2-溴-9,9-二甲基-9H-芴(7g)加入至250ml的三口瓶中，加入乙酸(84ml)，冷卻至0℃，滴加發煙硝酸(20ml)，升溫至25℃攪拌20小時。將反應液倒入冰水混合物中(600g)，攪拌30分鐘，過濾，取出濾餅加入乙腈(400ml)，回流2小時，過濾，濾餅真空乾燥得到2-溴-9,9-二甲基-7-硝基-9H-芴(5.6g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.28-8.25(m,2H),7.80-7.78(m,1H),7.67-7.63(m,2H),7.55-7.52(m,1H),1.59(s,6H)。
第七步：7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺
氮氣保護下，將2-溴-9,9-二甲基-7-硝基-9H-芴(5.6g,17.6mmol)加入至1L的三口瓶中，加入氯化銨(1.9g,35.2mmol)、鐵粉(2.95g,52.8mmol)、乙醇(250ml)、水(70ml)，回流反應4小時。加入飽和碳酸鈉溶液(140ml)，攪拌1小時，過濾，濾液減壓除去乙醇後，過濾，濾餅真空乾燥得到7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺(4.9g)。
LC-MS m/z：288.10[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.55-7.38(m,4H),6.73(d,1H),6.67-6.55(m,1H),3.73(brs,2H),1.46(s,6H)。
第八步：(2S,3aS,7aS)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯
在室溫下，將7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺(4g,13.9mmol)，(2S,3aS,7aS)-1-(第三-丁氧基羰基)八氫-1H-吲哚-2-羧酸(5.6g,20.8mmol)、HATU(10.6g,27.8mmol)、DMAP(0.34g)溶於DMF(40mL)中，攪拌下滴加二異丙基乙基胺(5.4g,41.7mmol)，攪拌反應12小時。LC-MS監測反應完畢，向反應液中加入水(100mL)，用乙酸乙酯(30mL)萃取3次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮至乾，殘餘物矽膠管柱層析分離(石油醚/乙酸乙酯)得到(2S,3aS,7aS)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲 哚-1-羧酸第三-丁酯(55.1g)。
LC-MS m/z：438.10[M-Boc+H]+,440.20[M-Boc+H]+。
第九步：(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(第三-丁氧基羰基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯
氮氣保護下，將(2S,3aS,7aS)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯(1.0g,1.85mmol)、(2S,3aS,7aS)-2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯(0.91g,1.94mmol)、四三苯基膦鈀(0.64g,0.56mmol)、碳酸氫鈉(0.52g,6.1mmol)溶於DME(20mL)和水(2mL)中，升溫至80℃攪拌反應12小時。LC-MS監測反應完畢，反應液冷卻至室溫，加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)，分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取2次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮至乾，殘餘物矽膠管柱層析分離(石油醚/乙酸乙酯)得到(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(第三-丁氧基羰基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯(270mg)。
LC-MS m/z：800.35[M+H]+。
第十步：(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺
室溫下，將(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(第三-丁氧基羰基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯(1.0g)溶於三氟醋酸(5mL)中，攪拌反應2小時。LC-MS監測反應完畢，濃縮反應液，將殘餘物溶於二氯甲烷(10ml)，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，無水硫酸鈉乾燥，抽濾，濾液濃縮至乾得到(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺(760mg)，直接用於下一步。
LC-MS m/z：600.30[M+H]+。
第十一步：((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-(N-(甲氧羰基)-O-甲基-L-蘇胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
室溫下，將(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺(0.15g,0.25mmol)、N-(甲氧基羰基)-O-甲基-L-蘇胺酸(0.1g,0.52mmol)、EDCI(0.12g,0.63mmol)、HOBt(0.07g,0.55mmol)溶於DMF(1mL)中，向反應液逐滴滴加NMM(0.73mL，1.25mmol)，攪拌反應12小時。LC-MS監測反應完畢，向反應液滴加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取3次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮至乾，殘餘物矽膠管柱層析分離(石油醚/乙酸乙酯)得到((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-(N-(甲氧羰基)-O-甲基-L-蘇胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯(40mg)。
LC-MS m/z：946.30[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ 12.18(d,J=9.2Hz,1H),10.05(s,1H),7.92-7.75(m,5H),7.66-7.49(m,6H),5.10(s,1H),4.48-4.37(m,2H),4.37-4.35(m,1H),4.10(t,J=8.0Hz,2H),3.58(s,3H),3.55(s,3H),3.50-3.46(m,1H),3.40-3.37(m,1H),3.25(s,3H),3.18(s,3H),2.42(s,1H),2.36-2.08(m,4H),2.03-1.91(m,4H),1.77-1.69(m,5H),1.49(s,6H),1.43-1.29(m,4H),1.19-1.13(m,4H),1.10(t,J=6.0Hz,3H),0.93(t,J=6.0Hz,3H)。
實施例2 (S)-5-((2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1- ((S)-5-甲氧基-2-((甲氧羰基)胺基)-5-羰基戊醯基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-基)-4-((甲氧羰基)胺基)-5-羰基戊酸甲酯
參照實施例1步驟11，得到(S)-5-((2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((S)-5-甲氧基-2-((甲氧羰基)胺基)-5-羰基戊醯基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-基)-4-((甲氧羰基)胺基)-5-羰基戊酸甲酯。
LC-MS m/z：1002.30[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ 12.17(d,J=18.0Hz,1H),10.17(s,1H),7.90-7.74(m,5H),7.66-7.48(m,6H),5.12-5.07(m,1H),4.45(t,J=8.0Hz,1H),4.38-4.31(m,4H),3.60(s,3H),3.57-3.54(m,9H),2.41-2.18(m,10H),2.14-2.08(m,1H),2.05-1.58(m,11H),1.49(s,6H),1.26-1.23(m,8H)。
實施例3 ((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,3a.S,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(S)-2-((2-胺基-4-溴苯基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯和(S)-2-((2-胺基-5-溴苯基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以4-溴苯-1,2-二胺為原料，參照實施例1步驟2，得到(S)-2-((2-胺基-4-溴苯基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯和(S)-2-((2-胺基-5-溴苯基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：438.10[M+H]+,440.20[M+H]+。
第二步：(S)-2-(5-溴-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(S)-2-((2-胺基-4-溴苯基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯和(S)-2-((2-胺基-5-溴苯基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟3，得到(S)-2-(5-溴-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：366.10[M+H]+,368.05[M+H]+。
第三步：(S)-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2- 基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(S)-2-(5-溴-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟4，得到(S)-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：413.20[M+H]+。
第四步：(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯
以(2S,3aS,7aS)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，與第三-丁基(S)-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯偶聯得到(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：745.30[M+H]+。
第五步：(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲 醯胺
以(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：546.31[M+H]+。
第六步：((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：860.35[M+H]+； 1H NMR(400MHz,DMSO)δ 12.20(s,1H),10.16(s,1H),7.84-7.71(m,5H),7.62(d,J=8.0Hz,1H),7.55-7.51(m,4H),7.32(d,J=8.4Hz,1H),5.22-5.20(m,1H),4.47(t,J=9.2Hz,1H),4.39-4.29(m,1H),4.07(t,J=8.4Hz,1H),3.87-3.82(m,3H),3.55(d,J=2.4Hz,6H),2.35-2.17(m,4H),2.13-1.86(m,7H),1.49(s,6H),1.29-1.16(m,4H),0.91-0.83(m,14H)。
實施例4 ((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-((3R)-3-甲氧基-2-((甲氧羰基)胺基)丁醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S)-2-(5-(7-((2S,3aS,7aS)-1-((3R)-3-甲氧基-2-((甲氧羰基)胺基)丁醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：892.35[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ 12.20(s,1H),10.15(s,1H),7.86-7.76(m,5H),7.62-7.60(m,2H),7.55-7.48(m,3H),7.28 (d,J=8.4Hz,1H),5.25-5.16(m,1H),4.45(t,J=9.0Hz,1H),4.41-4.25(m,2H),4.10(t,J=8.0Hz,1H),3.87-3.82(m,2H),3.54(d,J=2.4Hz,6H),3.52-3.45(m,2H),3.24(s,3H),3.19(s,3H),2.36-2.17(m,2H),2.13-2.06(m,2H),1.99(s,3H),1.75-1.62(m,4H),1.49(s,6H),1.17(t,J=7.2Hz,4H),1.08(t,J=6.0Hz,6H)。
實施例5 ((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((1R,3S,4S)-2-(N-(甲氧羰基)-O-甲基-L-蘇胺醯基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-3-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(1R,3S,4S)-3-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-2-羧酸第三-丁酯
以7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺為原料，參照實施例1步驟8，得到(1R,3S,4S)-3-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-2-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：411.10[M-Boc+H]+,413.05[M-Boc+H]+；
第二步：(2S,3aS,7aS)-2-(6-(7-((1R,3S,4S)-2-(第三-丁氧基羰 基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-3-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯
以(1R,3S,4S)-3-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-2-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(2S,3aS,7aS)-2-(6-(7-((1R,3S,4S)-2-(第三-丁氧基羰基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-3-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：772.30[M+H]+。
第三步：(1R,3S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-3-甲醯胺
以(2S,3aS,7aS)-2-(6-(7-((1R,3S,4S)-2-(第三-丁氧基羰基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-3-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(1R,3S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-3-甲醯胺。
LC-MS m/z：572.32[M+H]+。
第四步：((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((1R,3S,4S)-2-(N-(甲氧羰基)-O-甲基-L-蘇胺醯基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-3-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(1R,3S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-3-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((2S,3R)-3-甲氧基-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(7-((1R,3S,4S)-2-(N-(甲氧羰基)-O-甲基-L-蘇胺醯基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-3-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-基)-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：918.25[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.15(s,1H),7.72-7.70(m,2H),7.68(s,1H),7.63-7.51(m,5H),7.39(d,J=8.0Hz,1H),5.46(t,J=8.8Hz,1H),4.70-4.73(m,2H),4.53(s,1H),4.49(t,J=6.4Hz,1H),4.34(s,1H),4.25-4.21(m,1H),3.81-3.79(m,1H),3.71(s,6H),3.65-3.60(m,1H),3.42(s,3H),3.29(s,3H),2.54-2.50(m,1H),2.41-2.34(m,1H),2.06-2.04(m,1H),1.96-1.68(m,8H),1.61-1.56(m,8H),1.45-1.41(s,1H),1.25 (d,J=6.0Hz,6H),1.10(d,J=6.4Hz,3H)。
實施例6 ((S)-1-((1R,3S,4S)-3-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-2-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(1R,3S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-6-基)-9H-芴-2-基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-3-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11,得到((S)-1-((1R,3S,4S)-3-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-2-氮雜二環[2.2.1]庚烷-2-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：886.30[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.72(s,1H),7.82-7.46(m,8H),7.30(d,J=8.4Hz,1H),5.47(d,J=8.8Hz,1H),4.47-4.43(m,1H),4.32-4.27(m,1H),4.22(t,J=8.4Hz,1H),3.70(s,6H),3.38(d,J=10.4Hz,1H),3.15(s,1H),2.52-2.47(m,1H),2.38-2.30(m,1H),1.74-1.68(m,6H),1.47-1.49(m,8H),1.44(s,2H),1.26(s,6H),1.07(d,J=6.8Hz,4H),0.94-0.95(m,7H),0.79(d,J=6.4Hz,3H)。
實施例7 ((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙基酯)1-(第三-丁基酯)
在0℃下，向2-溴-1-(4-溴苯基)乙烷-1-酮(20g,72mmol)和L-Boc脯胺酸(18.7g,87mmol)的乙腈(160mL)混合溶液中逐滴滴加三乙胺(15mL)，室溫下攪拌2小時。反應完畢濃縮反應液，殘餘物溶於DCM(100mL)，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥有機層，濃縮，殘餘物矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯)分離，得到(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙酯)1-(第三-丁酯)(27g)。
第二步：(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
將(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙酯)1-(第三-丁酯)(27g)和醋酸銨(50.6g)溶於二甲苯(2700 mL)，在140℃下攪拌直至原料反應完全。冷卻至室溫，真空除去溶劑，殘餘物溶於DCM(200mL)，經水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯)分離，得到(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯(15.7g)。
LC-MS m/z：392.10[M+H]+,394.20[M+H]+。
第三步：(S)-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
氮氣保護下，將(S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯(10g)，雙(頻哪醇基)二硼烷(13.0g)，四三苯基膦鈀(1.5g)，碳酸鉀(10.5g)溶於DME(100mL)和水(10mL)中，80℃下攪拌反應12小時。反應完畢冷卻至室溫，加入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)分層，水相用乙酸乙酯萃取，合併有機相，經無水硫酸鈉乾燥，濃縮，殘餘物矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯)分離，得到(S)-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯(6.3g)。
LC-MS m/z：440.20[M+H]+。
第四步：(S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺為原料，參照實施例1步驟8，得到(S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.69(br,1H),7.79(s,1H),7.57(d,1H),7.51-7.41(m,3H),7.32(d,1H),4.51-4.48(m,1H),3.52-3.25(m,2H),2.60-2.53(m,1H),2.04-1.94(m,3H),1.5-1.45(m,15H)。
第五步：(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：718.30[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.21-11.84(m,1H),10.09(d,1H),7.87-7.52(m,10H),4.86-4.79(m,1H),4.31-4.22(m,1H),3.58-3.51(m,1H),3.47-3.34(m,3H),2.28-2.15(m,2H),1.93-1.79(m,6H),1.48-1.30(m,18H),1.19-1.16(m,6H)。
第六步：(S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H- 咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺
以(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：518.30[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.73(s,1H),9.82(br,1H),9.55-9.52(m,1H),9.20(br,1H),8.73-8.70(m,1H),7.92-7.81(m,8H),7.72-7.69(m,1H),7.61-7.57(m,1H),4.89-4.83(m,1H),4.39-4.36(m,1H),3.38-3.26(m,4H),2.46-2.38(m,2H),2.32-2.23(m,1H),2.21-2.11(m,1H),2.09-1.94(m,4H),1.50(s,6H)。
第七步：((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實 施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：832.50[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.13(br,1H),7.85-7.53(m,12H),7.35-7.27(m,2H),5.10-5.08(m,1H),4.51-4.48(m,1H),4.10-4.02(m,2H),3.89-3.79(m,3H),3.69-3.66(m,1H),3.54(d,J=2Hz,6H),2.20-1.90(m,10H),1.48(s,6H),0.98-0.86(m,12H)。
實施例8 ((S)-1-((S)-2-(5-(7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(S)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡 咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(S)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：692.35[M+H]+。
第二步：(S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺
以(S)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：492.30[M+H]+。
第三步：((S)-1-((S)-2-(5-(7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實 施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-(5-(7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：806.35[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.19(s,1H),10.13(s,1H),7.88-7.74(m,4H),7.66-7.51(m,6H),7.34(t,J=8.0Hz,1H),5.22(s,1H),4.51-4.48(m,1H),4.15-3.98(m,2H),3.88-3.81(m,2H),3.68-3.61(m,2H),3.55-3.52(m,6H),2.29-2.15(m,3H),2.07-1.90(m,5H),1.48(s,6H),0.97(d,J=6.8Hz,3H),0.91(d,J=6.4Hz,3H),0.88-0.83(m,8H)。
實施例9 ((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(2S,4S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-胺為原料，參照實施例1步驟8，得到(2S,4S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基 甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.97(s,1H),7.84-7.70(m,4H),7.58-7.49(m,2H),5.36-5.22(m,1H),4.44-4.36(m,1H),3.69-3.62(m,2H),2.64-2.53(m,1H),2.32-2.23(m,1H),1.43-1.33(m,15H)。
第二步：(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(2S,4S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：736.30[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.22-11.84(m,1H),9.95(s,1H),7.85-7.52(m,11H),5.36-5.23(m,1H),4.87-4.78(m,1H),4.45-4.37(m,1H),3.70-3.54(m,3H),3.40-3.33(m,1H),2.68-2.56(m,2H),2.33-2.18(m,2H),1.96-1.83(m,2H),1.49-1.34(m,18H),1.19-1.16(m,6H)。
第三步：(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺
以(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：536.31[M+H]+。
第四步：((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：851.3[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ 12.25-11.79(m,1H),10.02(s, 1H),7.97-7.19(m,13H),5.48-5.34(m,1H),5.09-5.06(m,1H),4.70-4.67(m,1H),4.20-3.92(m,4H),3.84-3.78(m,2H),3.54(s,6H),2.60-2.55(m,1H),2.37-2.28(m,1H),2.18-2.13(m,2H),2.02-1.97(m,4H),1.49(s,6H),1.04-0.88(m,12H)。
實施例10 ((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(2S,4S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：710.35[M+H]+。
第二步：(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H- 苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺
以(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：510.30[M+H]+。
第三步：((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,4S)-N-(9,9-二甲基-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-(5-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：824.35[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO)δ 12.21(s,1H),9.97(s,1H),7.86-7.72(m,5H),7.67-7.45(m,5H),7.34(d,J=8.4Hz,1H),5.22(s,1H),4.69(d,J=10.0Hz,1H),4.21-3.81(m,6H),3.54(d,J=2.8Hz,6H),2.38-2.20(m,3H),2.13-1.89(m,4H),1.48(s,6H),1.04(d,J=8.0Hz,3H),0.94(d,J=6.4Hz,3H),0.88-0.83(m,8H)。
實施例11 ((S)-1-((2S,4S)-4-氟-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(2S,4S)-4-氟吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙酯)1-(第三-丁酯)
將2-溴-1-(4-溴苯基)乙烷-1-酮(10.0g,36.0mmol)溶解於乙腈(100ml)中，加入三乙胺(5.5g,54.0mmol)，20-30℃下分批加入(2S,4S)-1-(第三-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-羧酸(10.1g,43.2mmol)，室溫攪拌反應16小時。旋轉蒸發除去乙腈，向殘餘物中加入100ml DCM，經水洗，飽和碳酸氫鈉溶液洗，無水硫酸鈉乾燥，抽濾，濃縮至乾 得到(2S,4S)-4-氟吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙酯)1-(第三-丁酯)(10.5g)。
LC-MS m/z：330.1(M-Boc+H)+。
第二步：(2S,4S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
將(2S,4S)-4-氟吡咯烷-1,2-二羧酸2-(2-(4-溴苯基)-2-羰基乙酯)1-(第三-丁酯)(10.5g,24.4mmol)溶解於二甲苯(100ml)中，加入醋酸銨(18.8g,243.9mmol)，加熱回流反應16小時。濃縮除去二甲苯，向殘餘物中加入DCM(100ml)，經水洗，濃縮有機相，殘餘物管柱層析純化得到(2S,4S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯(3.8g)。
LC-MS m/z：410.0[M+H]+。
第三步：(2S,4S)-4-氟-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
將(2S,4S)-2-(5-(4-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯、雙聯頻哪醇基二硼(4.7g,18.5mmol)、Pd(PPh3)4(0.54g,0.46mmol)和K2CO3(3.8g,27.8mmol)加入到DME(40ml)和水(4ml)混合溶劑中，氮氣抽換氣3次， 回流攪拌反應16小時。濃縮除去DME，加乙酸乙酯(60ml)和水(20ml)，分液，有機相濃縮，殘餘物管柱層析純化得到(2S,4S)-4-氟-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯(1.4g)。
LC-MS m/z：458.2(M+H)+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.84-7.29(m,5H),5.49-5.25(m,2H),4.07-3.42(m,2H),2.91-2.47(m,2H),1.50-1.31(m,21H)。
第四步：(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(第三-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(2S,4S)-2-((7-溴-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(第三-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：754.30[M+H]+。
第五步：(2S,4S)-4-氟-N-(7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺
以(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(第三-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟11，得到(2S,4S)-4-氟-N-(7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：554.30[M+H]+。
第六步：((S)-1-((2S,4S)-4-氟-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,4S)-4-氟-N-(7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((2S,4S)-4-氟-2-(5-(4-(7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二甲基-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：868.45[M+H]+； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.20(s,1H),7.85-7.74(m,2H),7.65-7.55(m,7H),7.48(d,J=6.4Hz,1H),5.01(d,J=9.2Hz,1H),4.36-4.07(m,4H),4.02-3.94(m,3H),3.70(s,6H),2.39-1.91(m,6H),1.48(s,6H),1.26(s,6H),1.08-1.02(m,8H)。
實施例12 ((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：2-碘-7-硝基-9H-芴
將2-硝基-9H-芴(18.6g,88.1mmol)和單質碘(11.1g,44.0mmol)加入到醋酸(560ml)中，攪拌下加入濃硫酸(56ml)和NaNO2(6.1g,88.1mmol)，回流攪拌反應2小時。冷卻至室溫，將反應液倒入至500g冰水中，過濾，將濾餅加入到150ml乙酸乙酯中，回流攪拌1小時，冷卻至室溫攪拌16小時，過濾，得到2-碘-7-硝基-9H-芴(24.0g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.33(d,J=1.2Hz,1H),8.23(dd,J=8.4Hz,J=2.0Hz,1H),7.92(d,J=1.2Hz,1H),7.78(d,J=8.4Hz,1H),7.71(dd,J=8.4Hz,J=2.0Hz,1H),7.54(d, J=8.0Hz,1H)。
第二步：9,9-二氟-2-碘-7-硝基-9H-芴
2-碘-7-硝基-9H-芴(10.1g,30mmol))與NFSI(30g)置於100ml三口瓶中，在氮氣保護下，加入THF(210mL)，冷卻至-30℃，緩慢滴加KHMDS溶液(1.0M,100ml)，加畢保持-20℃~0℃反應2小時，TLC檢測反應基本完全，控溫10℃以下倒入飽和氯化銨溶液(150mL)淬滅反應。分出有機相，水相用乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮至乾，殘餘物矽膠管柱層析分離得到9,9-二氟-2-碘-7-硝基-9H-芴(11.2g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.46(d,J=1.6Hz,1H),8.39(dd,J=8.4Hz,J=1.6Hz,1H),7.85(d,J=1.2Hz,1H),7.70(d,J=8.4Hz,2H),7.54(d,J=8.4Hz,1H)。
第三步：9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-胺
將9,9-二氟-2-碘-7-硝基-9H-芴(10.6g,30mmol)溶於乙酸乙酯(100ml)，加入二水合氯化亞錫(20.3g,90mmol)，加熱至75℃反應2.5小時。冷卻至室溫，將反應液倒入乙酸乙酯150ml，依次用飽和碳酸鈉水溶液與2N氫氧化鈉水溶液洗滌，乙酸乙酯萃取水相，合併有機相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮至乾，殘餘物管柱層析純 化得到得到9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-胺(4.0g)。
LC-MS m/z：344.00[M+H]+。
第四步：(2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯
以9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-胺為原料，參照實施例1步驟8，得到(2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：495.10[M-Boc+H]+。
第五步：(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯
以(2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：754.30[M+H]+。
第六步：(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲 醯胺
以(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：554.20[M+H]+。
第七步：((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：868.30[M+H]+； 1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ 12.28(d,J=12Hz,1H),10.42(s,1H),8.15(s,1H),7.94(s,1H),7.89-7.76(m,4H),7.65-7.52(m,4H),7.32(d,J=8.4Hz,1H),5.21(s,1H),4.44(t,J=8.8Hz,1H),4.37-4.31(m,1H),4.09(t,J=8.4Hz,1H),3.87-3.82(m,3H),3.54(d,J=2.4Hz,6H),2.34-1.91(m,10H),1.75-1.60(m,3H),1.45-1.16(m,4H),0.92-0.83(m,12H)。
實施例13 ((2S,3R)-1-((2S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-((3R)-3-甲氧基-2-((甲酯基)胺基)丁醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((2S,3R)-1-((2S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-((3R)-3-甲氧基-2-((甲酯基)胺基)丁醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：900.30[M+H]+；1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ 12.28(s,1H),10.41(s,1H), 8.14(s,1H),7.95(s,1H),7.89-7.80(m,4H),7.65-7.53(m,4H),7.27(d,J=7.6Hz,1H),5.21-5.19(m,1H),4.43(t,J=9.2Hz,1H),4.37-4.29(m,2H),4.10(t,J=8.0Hz,1H),3.90-3.88(m,2H),3.55(d,J=2.0Hz,6H),3.50-3.46(m,2H),3.24(s,3H),3.19(s,3H),2.35-1.91(m,8H),1.76-1.64(m,3H),1.46-1.16(m,4H),1.10-1.07(t,J=5.6Hz,6H)。
實施例14 ((S)-1-((2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(第三-丁氧基羰基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯
以(2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(第三- 丁氧基羰基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：808.30[M+H]+。
第二步：(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺
以(2S,3aS,7aS)-2-((7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-(第三-丁氧基羰基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟11，得到(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：608.30[M+H]+。
第三步：((S)-1-((2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫 -1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((2S,3aS,7aS)-2-((9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)八氫-1H-吲哚-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：922.30[M+H]+；1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ 12.26(s,1H),10.42(s,1H),8.15(s,1H),7.96(s,1H),7.90-7.80(m,4H),7.65-7.50(m,5H),5.12-5.09(m,1H),4.45(t,J=8.8Hz,2H),4.37-4.33(m,1H),3.85(t,J=8.4Hz,2H),3.55(d,J=4.4Hz,6H),2.45-2.31(m,3H),2.23-2.05(m,2H),2.03-1.69(m,11H),1.51-1.15(m,8H),0.92-0.69(m,12H)。
實施例15 ((2S,3R)-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-(N-(甲酯基)-O-甲基-L-蘇胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-基)-3-甲氧基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,3aS,7aS)-N-(9,9-二氟-7-(2-((2S,3aS,7aS)-八氫-1H-吲哚-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)八氫-1H-吲哚-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到 ((2S,3R)-1-((2S,3aS,7aS)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,3aS,7aS)-1-(N-(甲酯基)-O-甲基-L-蘇胺醯基)八氫-1H-吲哚-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)八氫-1H-吲哚-1-基)-3-甲氧基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：954.40[M+H]+；1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ 12.37(s,1H),10.42(s,1H),8.14(s,1H),7.96(s,1H),7.90-7.80(m,4 H),7.65-7.53(m,5H),5.13-5.08(m,1H),4.46-4.41(m,2H),4.39-4.33(m,1H),4.10(t,J=6.8Hz,2H),3.55(d,J=4.0Hz,6H),3.50-3.38(m,2H),3.24(s,3H),3.17(s,3H),2.41-2.30(m,3H),2.25-2.09(m,2H),2.02-1.91(m,3H),1.76-1.63(m,6H),1.51-1.21(m,8H),1.10(d,J=6.4Hz,3H),0.94(d,J=6.4Hz,3H)。
實施例16 ((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-胺為原料，參照實施例1步 驟8，得到(S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：441.0[M-100+H]+。
第二步：(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：726.36[M+H]+。
第三步：(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺
以(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：526.30[M+H]+。
第四步：((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲氧羰基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：858.40[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ 12.0-11.65(m,1H),10.41(s,1H),8.11-7.57(m,10H),7.43-7.32(m,2H),7.07-6.98(m,1H),5.53-5.29(m,2H),4.48-4.45(m,1H),4.13-3.63(m,6H),3.55-3.53(m,6H),2.67-2.41(m,1H),2.23-2.18(m,2H),2.09-1.91(m,6H),1.06-0.82(m,12H)。
實施例17 ((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(2S,4S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(2S,4S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：744.30[M+H]+。
第二步：(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺
以(2S,4S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-醯胺基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10,得到(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：544.30[M+H]+。
第三步：((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：858.40[M+H]+；1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ 11.73(br,1H),10.41(s,1H),8.11-7.57(m,10H),7.43(m,2H),7.01-6.98(m,1H),5.53-5.40(m,1H),5.34-5.29(m,1H),4.48-4.45(m,1H),4.11-3.66(m,6H),3.55-3.53(m,6H),2.52-2.48(m,1H),2.23-2.16(m,1H),2.10-1.91(m,6H),1.02-0.82(m,12H)。
實施例18 ((S)-1-((S)-2-((9,9-二氟-7-(2-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-6-基)-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(S)-2-((7-(2-((R)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(S)-2-((7-(2-((R)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：700.30[M+H]+。
第二步：(S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((R)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺
以(S)-2-((7-(2-((R)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((R)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：500.27[M+H]+。
第三步：((S)-1-((S)-2-((9,9-二氟-7-(2-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-6-基)-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((R)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-((9,9-二氟-7-(2-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-6-基)-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：814.40[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ 12.28(d,1H),10.39(s,1H),8.11-7.32(m,11H),5.21-5.19(m,1H),4.48-4.44(m,1H),4.11-4.00(m,2H),3.86-3.82(m,3H),3.69-3.66(m,1H),3.54(d,6H),2.24-1.91(m,10H),0.98-0.83(m,12H)。
實施例19 ((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(2S,4S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-胺為原料，參照實施例1步驟8，得到(2S,4S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：459.00[M+H-Boc]+。
第二步：(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(2S,4S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：744.36[M+H]+。
第三步：(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H- 咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺
以(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：544.32[M+H]+。
第四步：((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：858.40[M+H]+； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.36(s,1H),7.89-7.49(m,10H),5.01(d,J=8.8Hz,1H),4.44-4.16(m,4H),4.04-3.87(m,3H),3.71(s,6H),2.24-2.02(m,7H),1.26(s,6H),1.10-1.04(m,8H)。
實施例20 ((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(第三-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(2S,4S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(第三-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：662.38[M-Boc+H]+。
第二步：(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺
以(2S,4S)-2-((7-(4-(2-((2S,4S)-1-(第三-丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：562.28[M+H]+。
第三步：((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(4-(2-((2S,4S)-4-氟吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((2S,4S)-2-(5-(4-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-4-氟吡咯烷 -1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：876.40[M+H]+；1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ 11.64(s,1H),10.30(s,1H),8.09-7.28(m,13H),5.53-5.27(m,3H),4.69-4.67(m,1H),4.25-3.90(m,6H),3.55-3.53(m,6H),2.67-2.29(m,3H),2.10-1.91(m,3H),1.05-0.85(m,12H)。
實施例21 ((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(2S,4S)-2-((9,9-二氟-7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：718.40[M+H]+。
第二步：(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺
以(2S,4S)-2-((7-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9,9-二氟-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：518.31[M+H]+。
第三步：((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(2S,4S)-N-(9,9-二氟-7-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-5-基)-9H-芴-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-(5-(9,9-二氟-7-((2S,4S)-4-氟-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)-1H-苯並[d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：832.30[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ 12.27(d,J=12.1Hz,1H),10.29(s,1H),8.09(s,1H),7.94(s,1H),7.87-7.81(m,4H),7.66-7.44(m,4H),7.32(d,J=8.4Hz,1H),5.22(s,1H),4.68(d,J=10.4Hz,1H),4.13-3.80(m,6H),3.54(d,J=2.8Hz,6H),2.23-3.21(m,3H),1.99-1.99(m,4H),1.04(d,J=6.7Hz,3H),0.94(d,J=6.5Hz,3H),0.90-0.81(m,8H)。
實施例22 ((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
第一步：7-碘-9H-芴-2-胺
將2-碘-7-硝基-9H-芴(3.0g,8.9mmol)、鐵粉(1.5g,26.7mmol)、氯化銨(0.95g,17.8mmol)加入到乙醇(135ml)和水(8ml)的混合溶劑中，回流攪拌反應16小時。冷卻至室溫，加入10%碳酸鈉溶液(75ml)攪拌0.5小時，過濾，濾餅加入到DCM(100ml)中，過濾，濃縮濾液，析出固體，過濾，水洗，濾餅烘乾得到7-碘-9H-芴-2-胺(2.4g)。
第二步：(S)-2-((7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以7-碘-9H-芴-2-胺為原料，參照實施例1步驟8，得到(S)-2-((7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：405.10(M-Boc+H)+。
第三步：(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯
以(S)-2-((7-碘-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟9，得到(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯。
LC-MS m/z：690.30(M+H)+。
第四步：(S)-N-(7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺
以(S)-2-((7-(4-(2-((S)-1-(第三-丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)胺基甲醯基)吡咯烷-1-羧酸第三-丁酯為原料，參照實施例1步驟10，得到 (S)-N-(7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺。
LC-MS m/z：490.29[M+H]+。
第五步：((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯
以(S)-N-(7-(4-(2-((S)-吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)苯基)-9H-芴-2-基)吡咯烷-2-甲醯胺為原料，參照實施例1步驟11，得到((S)-1-((S)-2-(5-(4-(7-((S)-1-((甲酯基)-L-纈胺醯基)吡咯烷-2-醯胺基)-9H-芴-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-羰基丁烷-2-基)胺基甲酸甲酯。
LC-MS m/z：804.40[M+H]+；1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ 11.78(s,1H),10.13(s,1H),7.97(s,1H),7.88-7.80(m,5H),7.70-7.68(m,3H),7.52-7.50(m,2H),7.36-7.29(m,2H),5.10-5.08(m,1H),4.51-4.48(m,1H),4.09-4.02(m,2H),3.97(s,2H),3.83-3.81(m,3H),3.69-3.63(m,1H),3.54(d,J=2.4Hz,6H),2.19-1.91(m,10H),0.98-0.85(m,12H)。
生物學評價 一、野生型丙肝病毒HCV基因1b抑制活性測定
本發明化合物對HCV複製的抑制活性是藉由HCV複 製子螢光素酶報告基因分析方法(HCV Replicon Reporter Luciferase Assay)測定的。
1、實驗用的細胞模型：HCV複製子螢光素酶報告基因穩轉的Huh-7細胞系。
2、實驗溶液配製方法：待測化合物貯備溶液用二甲基亞碸配製為10mM，實驗時用DMSO稀釋至試驗最高濃度，然後用培養基進行3倍系列稀釋，一般稀釋成8到10個濃度點，每個濃度點設雙複孔。二甲基亞碸終濃度為0.5%。每次實驗均包含內參化合物，1個為參照化合物(Ledipasvir或Daclatasvir)，另1個為Cyclosporine。
3、實驗測定步驟：
1)將細胞生長在96孔培養板上，24小時後將不同濃度的待測化合物和內參化合物加到培養的細胞。
2)48小時後，用酶標儀檢測螢光素酶活性。
3)分析原始資料，計算受試化合物不同濃度點對螢光素酶活性的抑制即對HCV複製子的抑制百分比。
4)採用GraphPad Prism軟體對抑制百分比資料進行非線性擬合分析得到化合物的半數抑制濃度IC50值。
4、實驗結果：本發明實施例化合物及參照化合物(Ledipasvir、Daclatasvir)的活性藉由以上的試驗進行測定，野生型丙肝病毒HCV基因1b抑制活性IC50值見表1：
二、NS5A突變的丙肝病毒HCV抑制活性測定
本發明化合物對NS5A突變的HCV複製的抑制活性是用HCV複製子螢光素酶報告基因分析方法(HCV Replicon Reporter Luciferase Assay)測定的。
1、實驗用的細胞模型：HCV複製子螢光素酶報告基因瞬轉的Huh-7細胞系，藉由體外轉錄方法製備HCV複製子RNA，用電擊穿孔法將RNA轉染到Huh-7細胞中。
2、實驗溶液配製方法：待測化合物貯備溶液用二甲基亞碸配製為10mM，實 驗時用DMSO稀釋至試驗最高濃度，然後用培養基進行3倍系列稀釋，一般稀釋成8到10個濃度點，每個濃度點設雙複孔。DMSO終濃度為0.5%。每次實驗均包含1-2個內參化合物。
3、實驗測定步驟：
1)將轉染後的細胞生長在96孔培養板上，24小時後將不同濃度的待測化合物和內參化合物加到培養的細胞。
2)48小時後，用酶標儀檢測螢光素酶活性。
3)分析原始資料，計算受試化合物不同濃度點對螢光素酶活性的抑制即對HCV複製子的抑制百分比。
4)採用GraphPad Prism軟體對抑制百分比資料進行非線性擬合分析得到化合物的半數抑制濃度IC50值，
4、實驗結果：本發明實施例化合物及參照化合物(Daclatasvir)的活性藉由以上的試驗進行測定，HCV NS5A突變型複製子抑制活性IC50值見表2：
三、大鼠血漿PK分析
測試化合物的藥物代謝動力學試驗是用SD大鼠(上海史萊克)進行的。
■給藥方式：單次灌胃給藥。
■給藥劑量：5mg/10mL/kg。
■製劑處方：45% 1,2-丙二醇和15%聚乙二醇15羥硬脂酸酯。
■取樣點：給藥前和給藥後2、4、6小時。
■血漿採樣與樣品處理：
1)頸靜脈採血0.2ml，置於EDTA-2K試管中，4℃離心6000轉5分鐘分離血漿，於-80℃保存。
2)將160μL乙腈加入到40μL血漿樣品、標品、和內參，渦旋3分鐘，離心4000轉10分鐘，取100μL上清液，然後再加入100μL無離子水混勻，取10μL進行LC/MS/MS分析，血漿LC/MS/MS分析所用 儀器為AB Sciex API 4000。
■液相分析：
˙液相條件：Shimadzu LC-20AD泵
˙色譜管柱：phenomenex Gemiu 5um C18 50 X 4.6mm
˙移動相：A液為0.1%甲酸水溶液，B液為乙腈
˙流速：0.8mL/min
˙洗脫時間：0-3.01分鐘，洗脫液如下：
■質譜分析：質譜儀設置條件：陽離子電噴霧電離(ESI)模式。
■試驗結果：藥物代謝動力學的主要參數用WinNonlin 6.1計算得到，實驗結果見表3：
四、大鼠肝臟藥物分析
測試化合物的的吸收進入肝臟的藥物濃度是用SD大鼠(上海史萊克)進行的。
■給藥方式：單次灌胃給藥。
■給藥劑量：5mg/10mL/kg。
■製劑處方：45% 1,2-丙二醇和15%聚乙二醇15羥硬脂酸酯。
■取樣點：大鼠禁食一夜後給藥，給藥前和給藥後2、4、6小時進行肝臟取樣。
■肝臟採樣和樣品處理：
1)肝臟各小葉採樣後置於乾冰上冷凍，於-80℃保存。
2)將PBS緩衝液加到肝臟樣品(W/V=1：5)中勻漿，將320μL乙腈加入到40μL肝臟樣品、標品、和內參，渦旋3分鐘，離心4000轉10分鐘，取100μL上清液，然後再加入50μL無離子水混勻，取10μL進行LC/MS/MS分析，LC/MS/MS分析所用儀器為ABSciex API 4000。
■液相分析：
˙液相條件：Shimadzu LC-20AD泵
˙色譜管柱：phenomenex Gemiu 5um C18 50 X 4.6mm
˙移動相：A液為0.1%甲酸水溶液，B液為乙腈
˙流速：0.8mL/min
˙洗脫時間：0-3.01分鐘，洗脫液如下：
■質譜分析：質譜儀設置條件：陽離子電噴霧電離(ESI)模式。
■試驗結果：藥物代謝動力學的主要參數用WinNonlin 6.1計算得到，實驗結果見表4：

Claims (16)

  1. 一種具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽： 其中：R1、R1’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、羥基、胺基、C1-8烷基或C3-8環烷基，或者，R1和R1’與直接相連的碳原子形成3-6員碳環或3-6員雜環，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、鹵取代C1-8烷氧基、C1-8環烷基或C1-8環烷氧基的取代基所取代；R2、R2’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8 環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；R3、R3’各自獨立的選自氫、氘、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、或-C0-8-C(O)NR6R7，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；R4、R4’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、 -C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，或者，R4或R4’與其相連的四氫吡咯環一起形成6-10員含氮螺環、橋環或稠環，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；R5選自氫、氘、C1-8烷基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基、C1-8烷氧C1-8烷基、羥基C1-8烷基、-C(O)R10或-C(O)OR9，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；L選自鍵、C5-10芳基或5-10員雜芳基，視需要進 一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代；M選自鍵、C5-10芳基或5-10員雜芳基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、羥基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、鹵取代C1-8烷基、鹵取代C1-8烷氧基、C1-8烷基磺醯基的取代基所取代；R6、R7各自獨立的選自氫、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C5-10芳基、5-10員雜芳基、C1-8烷基醯基或C1-8烷基醯胺基，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、乙醯胺基、疊氮基、磺醯基、甲磺醯基、C1-8烷基、鹵取代C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧羰基、C1-8烷基羰基、C1-8烷基羰基氧基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、胺基、單C1-8烷基胺基或二C1-8烷基胺基的取代基所取代； R8選自氫、氘、C1-8烷基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基、二C1-8烷基胺基、苯基或對甲基苯基；R9選自氫、氘、C1-8烷基、C3-8環烷基、鹵取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷基；R10選自氫、氘、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C3-8環烷基、C3-8環烷氧基、鹵取代C1-8烷基、鹵取代C1-8烷氧基、羥取代C1-8烷基或羥取代C1-8烷氧基；L和M不同時為鍵；m、m’各自獨立的選自0~7；r為0、1或2。
  2. 如申請專利範圍第1項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，R5選自氫、氘、C1-4烷基、C3-6環烷基、鹵取代C1-4烷基、C1-4烷氧C1-4烷基、羥基C1-4烷基、-C(O)R10或-C(O)OR9，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
  3. 如申請專利範圍第2項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，R5選自氫、氘、 甲基、乙基、異丙基、三氟甲基、環丙基或環已基。
  4. 如申請專利範圍第1項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，L選自鍵、苯基或萘基。
  5. 如申請專利範圍第1項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，M選自鍵、呋喃、噻吩、吡咯、噻唑、咪唑、吡啶、吡、嘧啶、嗒、吲哚、喹啉或苯並咪唑。
  6. 如申請專利範圍第1項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其選自如下式(II)或式(Ⅲ)化合物：
  7. 如申請專利範圍第1項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，R1、R1’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、羥基、胺基、C1-4烷基、鹵取代C1-4烷基或C3-6環烷基，或者，R1和R1’與直接相連的碳原子形成3-6員碳環或3-6員雜環。
  8. 如申請專利範圍第7項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，R1、R1’各自獨立的選自氫、氘、氟、羥基、胺基、甲基、乙基、環丙基或三氟甲基，或者，R1和R1’與直接相連的碳原子 形成環丙基、環丁基、環戊基。
  9. 如申請專利範圍第1項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，R4、R4’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-4烷基、C2-6鏈烯基、C2-6鏈炔基、C3-6環烷基、3-6員雜環基、3-6員雜環基氧基、3-6員雜環基硫基、C5-8芳基、C5-8芳基氧基、C5-8芳基硫基、5-8員雜芳基、5-8員雜芳基氧基、5-8員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9，或者，R4或R4’與其相連的四氫吡咯環一起形成6-10員含氮螺環、橋環或稠環，視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
  10. 如申請專利範圍第9項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，R4、R4’各自獨立的選自氫、氘、氟、甲基、乙基或異丙基，或者， R4、R4’與其相連的四氫吡咯環一起形成6-10員含氮螺環、橋環或稠環，結構如下： 視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環烷基、3-8員雜環基、3-8員雜環基氧基、3-8員雜環基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10員雜芳基、5-10員雜芳基氧基、5-10員雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR8、-C0-8-O-R9、-C0-8-C(O)R10、-C0-8-C(O)OR9、-C0-8-O-C(O)R10、-C0-8-NR6R7、-C0-8-C(O)NR6R7、-N(R6)- C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9的取代基所取代。
  11. 如申請專利範圍第1項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其中，R2、R2’各自獨立的選自氫、氘、鹵素、甲基、乙基、異丙基、環丙基、-C0-4-O-R9、-C0-4-C(O)R10、-C0-4-C(O)OR9、-C0-4-O-C(O)R10、-C0-4-NR6R7、-C0-4-C(O)NR6R7、-N(R6)-C(O)R10或-N(R6)-C(O)OR9。
  12. 如申請專利範圍第1至11項中任一項所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽，其選自如下化合物：
  13. 一種申請專利範圍第1至12項中任一所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽的製備方法，其特徵在於，包括如下製備步驟： 其中，R1、R1’、R2、R2’、R3、R3’、R4、R4’、R5、R5’、R6、R7、R8、R9、R10、L、M、m、m’、r如申請專利範圍第1項所定義。
  14. 如申請專利範圍第13項所述的製備方法，其中，該縛酸劑為有機鹼或無機鹼，該有機鹼選自三甲胺、三乙胺、吡啶、哌啶、嗎啉、二異丙基乙胺或其混合物，該無機鹼選自碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸銫、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰、醋酸鈉或其混合物；該縮合劑選自DIC、DCC、HOBT、EDC．HCl、PyBOP、PyBroP、HATU、HCTU、DEPBT、EEDQ、CDI或其混合物。
  15. 一種醫藥組成物，其包括治療有效劑量的如申請專利範圍第1至12項中任一所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽及可藥用的載體。
  16. 一種申請專利範圍第1至12項中任一所述的具有式(I)化合物、其立體異構體或其藥學上可接受鹽、或申請專利範圍第15項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備治療或預防HCV感染的醫藥。
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