CN102388310A - 样品分析用具、样品分析用具的制造方法、以及抑制展开部件的液体浸透性降低的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种能够防止分析的反应性和重现性的降低的样品分析用具。本发明的样品分析用具(10)的特征在于：具备展开部件(11)和塑料基材(16)，上述展开部件(11)的至少一部分与上述塑料基材(16)接触，还具有亲水性成分层(15)，在上述塑料基材(16)的表面和上述展开部件(11)的表面中的至少一方的一部分或全部上形成有上述亲水性成分层(15)。上述亲水性成分层(15)特别优选包含蔗糖或N-甲基葡萄糖胺。本发明的样品分析用具(10)中，在上述塑料基材(16)的表面和上述展开部件(11)的表面中的至少一方的一部分或全部上形成有上述亲水性成分层(15)，由此可以防止来自上述塑料基材(16)的疏水性成分的附着。

Description

样品分析用具、样品分析用具的制造方法、以及抑制展开部件的液体浸透性降低的方法

技术领域

本发明涉及样品分析用具、样品分析用具的制造方法和抑制展开部件的液体浸透性降低的方法。

背景技术

以往，例如，在感染症的诊断等中，利用免疫反应检测细菌或病毒等病原体的抗原的样品分析用具正在普及。在上述样品分析用具中，由于可以简便且迅速地进行定量分析、半定量分析、定性分析等，因此广泛使用免疫色谱法(免疫分析方法)。近年来，也开发了将酶用于标识的免疫分析方法(有时称为酶免疫分析方法)(例如，参照专利文献1)。

如图6所示，以往的样品分析用具60通常是展开部件61收容在塑料盒体66内的形态。图6的(a)是上述样品分析用具的平面图。图6的(b)是从图6的(a)的III-III方向观察的截面图。上述两图中，对相同的部分标注相同的符号。在上述展开部件61中，从展开液流的上游至下游(图中从右侧至左侧)依次配置有展开液供给部62、样品供给部63和检测部64。上述检测部64中，固定化有抗体(以下，有时称为固定化抗体)。在上述塑料盒体66中，形成有展开液供给口67、样品供给口68和窗69。上述展开液供给口67以其下端部与上述展开液供给部62接触的方式配置。上述样品供给口68配置于上述样品供给部63的上方。上述窗69配置于上述检测部64的上方。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本专利文献特开2005-61910号公报

发明内容

发明要解决的课题

使用以往的样品分析用具，实施上述酶免疫分析方法等时，例如，在定性分析中，存在本应是阳性的样品被分析成阴性的所谓反应性降低的问题，或在定量分析中，存在定量值不一致的所谓重现性降低的问题。这样的问题不仅仅限于在免疫分析方法中使用的样品分析用具中存在，例如，在使样品液与试剂层中所含的试剂反应而进行分析的临床检查等通常的样品分析用具中也同样存在。

因此，本发明的目的在于，提供一种能防止分析的反应性和重现性的降低的样品分析用具、样品分析用具的制造方法和抑制展开部件的液体浸透性降低的方法。

解决课题的方法

为了实现上述目的，本发明的样品分析用具的特征在于，

具备展开部件和塑料基材，

上述展开部件的至少一部分与上述塑料基材接触，

还具备亲水性成分层，

上述塑料基材的表面和上述展开部件的表面中的至少一方的一部分或全部上形成有上述亲水性成分层。

另外，本发明的样品分析用具的制造方法的特征在于，

其为制造展开部件的至少一部分与塑料基材接触的样品分析用具的方法，其包括：

在上述塑料基材的表面和展开部件的表面中的至少一方的一部分或全部上形成亲水性成分层的亲水性成分层形成步骤。

另外，本发明的抑制展开部件的液体浸透性降低的方法的特征在于，

在具备展开部件和塑料基材、上述塑料基材含有疏水性成分、上述展开部件的至少一部分与上述塑料基材接触的样品分析用具中，在上述塑料基材的表面和上述展开部件的表面中的至少一方的一部分或全部上形成亲水性成分层，

通过上述亲水性成分层，防止上述疏水性成分在上述展开部件上附着，由此抑制液体对上述展开部件的浸透性的降低。

发明的效果

根据本发明，能够防止分析的反应性和重现性的降低。

附图说明

图1的(a)是示出本发明的一个实施方式中的样品分析用具所具备的展开部件的一个例子的构成的平面图；图1的(b)是从图1(a)所示的展开部件的I-I方向观察的截面图；图1的(c)是表示本发明的一个实施方式的样品分析用具的一个例子的构成的平面图；图1的(d)是从图1(c)所示的样品分析用具的II-II方向观察的截面图；

图2是表示在展开液供给部的表面形成的亲水性成分层的例子的图。

图3的(a)是说明本发明的一个实施方式中的免疫分析方法的截面图；图3的(b)是示出检测部中的抗原的检测的示意图；

图4是表示本发明的一个实施方式的样品分析用具的其他的例子的构成的截面图；

图5是表示本发明的一个实施方式的样品分析用具的另外的例子的构成的截面图；

图6的(a)是表示以往的样品分析用具的一个例子的构成的平面图；图6的(b)是从图6的(a)所示的样品分析用具的III-III方向观察的截面图。

具体实施方式

本发明人等为了实现上述目的，首先，以查明现有的样品分析用具中的分析的反应性和重现性的降低的原因为目标，不断进行了一系列研究。其结果是，本发明人等发现其原因在于：以往的样品分析用具中，例如，供给至展开液供给部或样品供给部等液体供给部的液体，向展开部件中的浸透性降低。所谓上述液体的浸透性的降低，是指例如上述液体不能浸透至上述展开部件中，或向上述展开部件浸透需要消耗大量时间等。由于该浸透性的降低，分析的反应性和重现性降低。基于该认识，本发明人等进一步不断研究，结果发现，在上述展开部件的至少一部分与塑料基材接触的样品分析用具中，如果在上述塑料基材的表面和上述展开部件的表面中的至少一方的一部分或全部上形成亲水性成分层，则能够抑制上述液体的浸透性的降低，从而完成了本发明。根据本发明，能够防止分析的反应性和重现性的降低。

本发明的样品分析用具例如可以为在上述展开部件的与上述塑料基材的接触部的一部分或全部上形成有上述亲水性成分层的形态。

本发明的样品分析用具，例如可以为上述展开部件具有液体供给部，且在上述液体供给部的一部分或全部的表面上形成有上述亲水性成分层的形态。上述液体供给部没有特别的限制，可举出例如展开液供给、样品供给部、试剂供给部、清洗液供给部等。

在本发明的样品分析用具和样品分析用具的制造方法中，例如，可以是上述展开部件的与上述塑料基材的接触部包含上述液体供给部的形态。

本发明的样品分析用具例如可以是上述液体供给部具有展开液供给部和样品供给部，在上述展开液供给部的表面和上述样品供给部的表面中的至少一方的一部分或全部上形成有上述亲水性成分层的形态。

在本发明的样品分析用具中，上述亲水性成分层优选含有不挥发性的亲水性成分。

在本发明的样品分析用具中，优选上述亲水性成分层含有例如糖类、水溶性聚合物、表面活性剂、胶体粒子、无机粒子等成分。作为上述糖类，可举出例如蔗糖、N-甲基葡萄糖胺、葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖等。其中，特别优选蔗糖或N-甲基葡萄糖胺。

本发明的样品分析用具，例如可以是上述塑料基材包含塑料盒体，上述展开部件配置于上述塑料盒体内的形态。

本发明的样品分析用具例如可以是含有样品的样品液和展开液分别从上述样品供给部和上述展开液供给部被供给的形态。

本发明的样品分析用具例如可以是以下的形态：上述展开部件还具有检测部，在上述展开部件中，从展开液流的上游至下游，依次配置有上述展开液供给部、上述样品供给部和上述检测部，在上述检测部中，固定化有与样品中的分析对象物特异性结合的物质，对上述样品供给部供给含有样品的样品液，对上述展开液供给部供给上述展开液，在与上述分析对象物特异性结合的标识化物质的存在下，通过上述供给的展开液在上述展开部件中的展开，上述供给的样品液被导入至上述检测部中，在上述检测部中，形成上述固定化了的特异性结合物质、上述分析对象物和上述标识化了的特异性结合物质的复合体，通过上述复合体中的上述标识的检测，进行上述分析对象物的分析。

上述特异性结合物质，例如，可以是根据分析对象物质适当选择的来自生物体的物质，也可是人工生产(合成)的物质。作为上述特异性结合物质，可举出例如抗体、抗原、探针等。

本发明的样品分析用具例如可以是上述塑料基材以夹持上述展开部件的方式形成的形态。

本发明的样品分析用具例如还可以是具备试剂层、上述塑料基材以夹持上述展开部件和上述试剂层的方式形成的形态。

在本发明的样品分析用具、样品分析用具的制造方法和抑制展开部件的液体浸透性降低的方法中，上述塑料基材优选含有疏水性成分。作为上述疏水性成分，例如可举出润滑剂、增塑剂、脱模剂、稳定剂或抗氧化剂等。

在本发明的样品分析用具的制造方法中的上述亲水性成分层形成步骤中，例如可以在上述展开部件的与上述塑料基材的接触部的一部分或全部上形成上述亲水性成分层。

在本发明的样品分析用具的制造方法中，例如可以是上述展开部件具有液体供给部，在上述亲水性成分层形成步骤中，在上述液体供给部的一部分或全部的表面上形成上述亲水性成分层。

在本发明的样品分析用具的制造方法中，例如可以是上述液体供给部具有展开液供给部和样品供给部，在上述亲水性成分层形成步骤中，在上述展开液供给部的表面和上述样品供给部的表面中的至少一方的一部分或全部上形成上述亲水性成分层。

在本发明的抑制展开部件的液体浸透性降低的方法中，例如可以是上述展开部件具有液体供给部，在上述液体供给部的至少一部与上述塑料基材接触的样品分析用具中的上述液体供给部的一部分或全部的表面上形成上述亲水性成分层。

在本发明的抑制展开部件的液体浸透性降低的方法中，例如可以是在上述液体供给部具有展开液供给部和样品供给部的样品分析用具中，在上述展开液供给部的表面和上述样品供给部的表面中的至少一方的一部分或全部上形成上述亲水性成分层。

接下来，对本发明进行详细地说明。但是，本发明并不受以下的记载限制。此外，在以下的图1至图6中，对相同的部分标注相同符号。另外，在附图中，为了说明的方便，有时将各部的结构适当地简略化表示，有时各部的尺寸等与实际情况不同。

(实施方式1)

本实施方式的样品分析用具是在使用了固定化抗体作为上述“固定化了的特异性结合物质”，使用了利用酶作为标识的标识化抗体(酶标识化抗体)作为上述“标识化了的特异性结合物质”的免疫分析方法(酶免疫分析方法)中使用的样品分析用具。

在图1中，示出了本实施方式的样品分析用具的一个例子的构成。图1的(a)是该例的样品分析用具所具备的展开部件的平面图。图1的(b)是从图1的(a)的I-I方向观察的截面图。如图所示，在该展开部件11中，从展开液流的上游至下游(图1的(a)中的从右侧至左侧)依次配置有展开液供给部12、样品供给部13和检测部14。此外，本实施方式中，上述展开液供给部12、上述样品供给部13和上述检测部14分别为上述展开部件11中的规定的区域。在上述展开液供给部12的表面上，以覆盖上述展开液供给部12的表面的全部的方式形成亲水性成分层15。上述检测部14中固定化有抗体(固定化抗体)。

图1的(c)是本实施方式的样品分析用具的平面图。图1的(d)是从图1的(c)所示的样品分析用具的II-II方向观察的截面图。如图所示，该例的样品分析用具10具备图1的(a)所示的上述展开部件11、和作为上述塑料基材的塑料盒体16。上述展开部件11配置于上述塑料盒体16内。上述塑料盒体16具有展开液供给口17、样品供给口18和窗19。上述展开液供给口17以其下端部与上述亲水性成分层15相接的方式配置。上述样品供给口18配置于上述样品供给部13的上方。上述窗19配置于上述检测部14的上方。

在该样品分析用具10中，如图2的(a)所示，上述亲水性成分层15以覆盖上述样品供给部12的表面的全部的方式被形成为圆形。但是，本发明不限定于该例子，例如也可以如图2的(b)所示，上述亲水性层15以覆盖上述样品供给部12的表面的全部的方式被形成为矩形，也可以如图2的(c)所示，上述亲水性层15以覆盖上述样品供给部12的表面的一部分的方式被形成为矩形，也可以如图2的(d)所示，上述亲水性层15以覆盖上述样品供给部12的表面的一部分的方式被形成为十字形。本实施方式的样品分析用具中，上述亲水性成分层15为在上述展开部件11(展开液供给部12)和上述塑料盒体16(展开液供给口17的下端部)的接触部形成的状态。另外，上述展开液供给口17的下端部与上述亲水性成分层15相接，但是本发明并不限定于该例子，上述展开液供给口17的下端部也可以不与上述亲水性成分层15相接。另外，该样品分析用具10中，上述亲水性成分层15形成于上述展开液供给部12的表面，但是本发明并不限定于该例子，上述亲水性成分层15例如可以形成于上述样品供给部13的一部分或全部的表面上，例如也可以形成在上述展开液供给部12和上述样品供给部13的两者上。

上述展开部件只要是起到毛细管作用的多孔质结构即可。作为上述展开部件的形成材料，例如，可举出多孔质膜、粒状物质或微粒粉末等。作为上述多孔质膜，例如可举出纤维素膜、乙酸纤维素、硝基纤维素等的纤维素衍生物膜、玻璃滤器、滤纸等。作为上述粒状物质或微粒粉末，例如可举出聚合物珠、玻璃珠、二氧化钛、纤维素、盐类、疏水化多糖类等。上述展开部件的尺寸没有特别的限制，例如，可以根据分析装置的规格等适当设定。

上述亲水性成分层可以含有亲水性成分。如上述所述，上述亲水性成分层在上述展开液供给部的一部分或全部的表面上形成。由此，抑制上述展开液的浸透性的降低，从而能够防止分析的反应性和重现性的降低。这样的效果推测为以下的机理。即，由于上述塑料盒体中所含的疏水性成分(例如，润滑剂、增塑剂、脱模剂、稳定剂、抗氧化剂等)附着在上述展开液供给部的一部分或全部的表面之上，上述展开液的浸透性会降低。例如在高温(例如，30℃以上)环境下保管、或长期间(例如，6个月以上)保管等情况下，上述疏水性成分的附着是特别显著的。对于本实施方式的样品分析用具，通过在上述展开液供给部的一部分或全部的表面上形成上述亲水性成分层，防止上述疏水性成分的附着，其结果可以抑制展开液的浸透性降低。但是，本发明并不受以上推测的限制。另外，在本发明中，形成有上述亲水性成分层的位置，不仅限定于上述的展开液供给部。若上述亲水性成分层形成于上述塑料基材表面和上述展开部件表面中的至少一方的一部分或全部上，则可以得到本发明的效果。

上述亲水性成分层可以含有亲水性成分。另外，作为上述亲水性成分，例如，可举出糖类、水溶性聚合物、表面活性剂、胶体粒子、无机粒子等成分。上述亲水性成分例如可以含有单独一种，也可以含有二种以上。作为上述糖类，可举出例如蔗糖、N-甲基葡萄糖胺、葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖等。其中，特别优选蔗糖或N-甲基葡萄糖胺。作为上述水溶性聚合物，可举出聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇等。作为上述表面活性剂，例如可举出聚氧乙烯脱水山梨糖醇烷基酯(Tween系表面活性剂等)、聚氧乙烯-对叔辛基苯基醚(Triton系表面活性剂等)、十二烷基硫酸钠(SDS)等。作为上述胶体粒子，例如，可举出金胶体粒子、氢氧化铁胶体粒子、银胶体粒子等。作为上述无机粒子，可举出例如二氧化硅粉末、氧化铝、二氧化钛、碳酸钙、碳酸镁等。

上述固定化抗体只要是与作为样品中的分析对象物的抗原结合的抗体即可。上述抗体可以根据后述的抗原等适当设定。上述抗体例如可以是来自生物体的抗体，也可以是人工合成的抗体。作为上述来自生物体的抗体，例如，可举出免疫球蛋白(Ig)、抗体片段、嵌合体(chimera)抗体等。作为上述免疫球蛋白，例如，可举出IgG、IgA、IgM、IgE、IgD等。作为上述抗体片段，例如，可举出Fab、Fab’、F(ab’)2等。作为上述嵌合体抗体，例如，可举出人化抗体等。上述抗体例如可以是来自小鼠、兔、牛、猪、马、绵羊、山羊等哺乳动物，鸡等鸟类，人等动物种类的抗体，没有特别限制。另外，作为上述抗体，例如，可以利用来自上述动物种类的血清采用以往公知的方法制作，或者可以利用市售的各种抗体，没有特别限制。作为上述抗体，例如，可以使用多克隆抗体和单克隆抗体的任一种。作为上述人工合成的抗体，例如可举出亲和抗体等。作为抗体在上述检测部中的固定化方法，例如可举出使用涂布装置将含上述抗体的抗体液涂布于多孔质膜等展开部件，利用干燥机等使其风干的方法等。

作为上述塑料盒体的材质，可举出例如聚乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯、丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚合合成树脂等。优选上述塑料盒体含有疏水性成分。作为上述疏水性成分，可举出例如润滑剂、增塑剂、脱模剂、稳定剂、抗氧化剂等。上述塑料盒体的形状和尺寸没有特别的限制，可以根据上述展开部件等的形状和尺寸适当设定。

本发明的样品分析用具没有特别限制，优选通过上述本发明的制造方法来制造。另外，在上述本发明的制造方法中，各步骤可以逐次进行，也可以同时进行。以下参照图1说明本实施方式的样品分析用具的制造方法的一个例子。

将亲水性成分层15形成于上述展开部件11中的展开液供给部12的一部分或全部的表面上。上述亲水性成分层例如按以下方式形成。即，首先，制备含有上述亲水性成分的溶液或混悬液等。上述溶液等中的上述亲水性成分的浓度例如为0.1～10重量％的范围，优选为0.5～7.5重量％的范围，更优选为1～5重量％的范围。上述溶液等例如可以通过将上述亲水性成分溶解或混悬在溶剂中来制备。作为上述溶剂，例如，可举出水、缓冲液等。作为上述缓冲液，没有特别的限制，例如可举出后述的缓冲液等。接着，将含有上述亲水性成分的溶液例如使用涂布装置等涂布于上述展开部件上，利用干燥机等使其风干，形成上述亲水性成分层。在该状态下，将上述展开部件11配置在上述塑料盒体16内。此时，使上述展开液供给口17的下端部和展开部件11(展开液供给部12)经由上述亲水性成分层15接触。这样，可制造图1所示的本实施方式的样品分析用具。但是，制造本实施方式的样品分析用具的方法，不限定于该例子。此外，上述塑料盒体16和上述展开部件11都可以购入市售品，也可以自行制作。

接着，使用了本实施方式的样品分析用具的酶免疫分析方法例如使用样品液、酶标识化抗体、展开液、基质等来实施。

上述样品液可以含有样品。作为上述样品，没有特别的限制，例如可举出生物体试样、食品等。上述样品可以是液状的样品，也可以将固体状的样品在缓冲液等中溶解、混悬或分散等而成的样品。作为上述液状的生物体试样，例如，可举出鼻腔吸引液、鼻腔清洗液、鼻腔擦拭液、鼻涕、咽喉擦拭液、含漱液、唾液、全血、血清、血浆、汗、尿等。作为上述固体状的生物体试样，例如，可举出细胞、粪便等。作为上述食品，例如，可举出动物和植物等食物或加工食品等。作为上述缓冲液，没有特别的限制，例如，可举出Tris缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液、硼酸缓冲液等。上述缓冲液的pH没有特别的限制，例如为pH4～10的范围，优选pH6～9的范围。

在上述免疫分析方法中，上述样品中的分析对象物是与上述的固定化抗体和上述的标识化抗体结合的抗原。作为上述抗原，没有特别的限制，例如，可举出甲型流感病毒、乙型流感病毒、丙型流感病毒、腺病毒、RS病毒、冠状病毒、星形病毒、诺罗病毒、麻疹病毒、轮状病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、人T细胞白血病病毒(HTLV-1)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、疱疹病毒、支原体、梅毒密螺旋体、沙眼衣原体、结核菌、大肠菌群、A群溶連菌、B群溶連菌、肺炎球菌、葡萄球菌、MRSA、军团杆菌、肠管出血性大肠菌O157、Vero毒素、沙门氏菌、艰难梭菌、幽门螺旋杆菌、CRP、HBs抗原、HBs抗体、HBc抗原、HBc抗体、HBe抗原、HBe抗体、前列腺特异抗原(PSA)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)、黄体生成激素(LH)、肌钙蛋白T、肌钙蛋白I、肌球素、D-二聚体、大便中血红蛋白、血红蛋白A1c、IgE抗体等病原体抗原、抗体、癌标记物、激素等生物体成分、残留农药、环境激素、食品中的过敏物质等。

上述样品液可以含有例如缓冲液、表面活性剂、抗菌剂等。作为上述缓冲液，没有特别的限制，例如可举出上述的缓冲液等。作为上述表面活性剂，没有特别的限制，例如可举出阴离子性表面活性剂、非离子性表面活性剂、两性表面活性剂等。作为上述抗菌剂，没有特别的限制，例如可举出叠氮化钠、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮等。

上述酶标识化抗体只要是与作为上述样品中的分析对象物的抗原结合的酶标识化了的抗体即可。作为上述酶标识化抗体的抗体，例如，可以举出与上述的各种抗原等对应的抗体，可以根据上述抗原等适当设定。作为上述抗体，例如可举出作为上述的固定化抗体的抗体而例示的抗体等。

作为上述酶标识化抗体的酶，没有特别的限制，可举出例如过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-D-半乳糖苷酶等。上述酶标识化抗体的制备方法没有特别的限制，例如可以使用以往公知的方法。

上述酶标识化抗体例如可以预先在上述样品液中含有，也可以预先浸渗在上述展开部件或另外设置的垫等中。但是，从例如不需要另外设置上述垫等且可以进行更高灵敏度分析的观点出发，优选在上述样品液中含有上述酶标识化抗体。

作为上述展开液，例如可以使用Tris缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液、硼酸缓冲液等缓冲液。上述展开液中，可以适当添加例如稳定化剂、抗菌剂等。另外，上述展开液的供给量例如可以根据上述样品液的供给量等进行适当设定。

上述基质没有特别的限制，例如优选与上述酶反应而发色或发光等的基质。上述基质的种类没有特别的限制，例如可以根据上述酶标识化抗体中的酶的种类进行选择。作为具体例，例如可举出2，2’-连氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)、3，3’，5，5’-四甲基联苯胺(TMB)、二氨基联苯(DAB)、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸(BCIP)、4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷(4MUG)、3-(2’-螺金刚烷)-4-甲氧基-4-(3”-β-D-吡喃型半乳糖基)苯基-1，2-二氧杂环丁烷(AMGPD)等。

上述基质例如通过上述展开液的展开，可以从上述展开液供给部经由上述样品供给部被导入至上述检测部。此时，例如可以在上述展开液中预先含有上述基质，也可以在上述样品液中预先含有上述基质，也可在上述展开部件等中浸渗上述基质。在上述展开部件等中浸渗有上述基质时，例如可以使上述基质浸渗至上述展开部件的上述样品供给部和上述检测部之间，或上述展开液供给部和上述样品供给部之间等。

接下来，基于图3具体地说明本实施方式中的免疫分析方法。

图3的(a)是样品分析用具的截面图。图3的(b)是表示检测部中的抗原的检测的示意图。

首先，如图3的(a)所示，通过上述样品供给口18，对上述样品供给部13供给上述样品液(箭头a)。此外，上述酶标识化抗体可以预先在供给前的上述样品液中配合，也可以预先浸渗于上述展开部件11的样品供给部13附近。接着，通过上述展开液供给口17，对表面整体被上述亲水性成分层15覆盖的上述展开液供给部12供给上述展开液(箭头b)。此时，由于上述展开液供给部12的表面全部被上述亲水性成分层15所覆盖，因此供给的上述展开液不会受到来自上述塑料盒体16的疏水性成分的不良影响，且一边将上述亲水性成分层15的上述亲水性成分溶解，一边如箭头c所示快速向上述展开部件11中浸透。在上述展开部件11中浸透的上述展开液如箭头d所示，在上述展开部件11中朝向上述检测部14(在该图中的左方向)从上述展开部件11的上游向下游展开。此时，预先在上述展开液供给部12附近的展开部件11中浸渗上述的基质时，通过上述展开液的展开，上述基质向上述检测部14移动。此外，上述基质也可以预先在供给前的展开液中配合。这样，在上述展开部件11中，上述标识化抗体的存在下，通过上述展开液的展开(箭头d)，上述基质、上述样品液和上述酶标识化抗体被导入至固定化有抗体33的上述检测部14。如图3的(b)所示，在上述检测部14中，形成固定化抗体33、作为上述样品的分析对象物的抗原32和上述酶标识化抗体31的复合体34。进而，上述复合体34中的酶35与同样被导入上述检测部14的上述基质反应，产生发色或发光等。这样，通过从上述窗19观察在上述检测部14中的通过上述酶35和上述基质的反应产生的发色或发光等，进行检测。由此，能够间接地检测上述抗原32(定量分析，半定量分析，定性分析等)。上述检测例如可以通过目视判定，也可以通过使用比色计、荧光光度计、光子计数器、感光膜等来进行。

在本实施方式中，上述样品分析用具为了促进上述展开液的展开，例如，还可以具备展开液接受垫和废液吸收垫。另外，本实施方式的免疫分析用具中使用的样品分析用具为了稳定地保持其形状，例如也可以具备支持体。具体而言，通过在上述支持体的上配置例如上述展开部件、展开液接受垫、废液吸收垫等，可以支持上述样品分析用具内部的各构成部件。

作为上述展开液接受垫和上述废液吸收垫的材质，没有特别的限制，例如可举出聚乙烯、玻璃纤维、人造丝、尼龙、纸、纤维素等。上述展开液接受垫的形状和尺寸没有特别的限制，例如可以根据上述展开部件的形状等适当设定。

作为上述支持体的材质，没有特别的限制，例如可举出聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚乙烯、聚苯乙烯、聚酯、乙酸纤维素等。另外，作为上述支持体的形状，没有特别的限制，可举出例如膜状、片状、板状等。上述支持体的形状和尺寸没有特别的限制，可以根据上述展开部件等适当设定。

上述展开部件、上述展开液接受垫和上述废液吸收垫例如可以利用通常方法在上述支持体上配置。具体而言，例如，可以使用两面胶带或粘接剂等固定于上述支持体上。

在图4的截面图中，示出了本实施方式的样品分析用具的其他的例的构成。如图所示，该样品分析用具40具备展开部件41、展开液接受垫42、废液吸收垫43、支持体44和塑料盒体46作为主要的构成部件。上述展开液接受垫42与上述展开部件41的上游侧(该图中的右侧)邻接地配置。上述废液吸收垫43与比上述展开部件41的检测部14更靠近下游侧(该图中为左侧)邻接地配置。上述展开部件41、上述展开液接受垫42和上述废液吸收垫43配置于上述支持体44上，在该状态下，收容于上述塑料盒体46内。上述塑料盒体46具有展开液供给口47、样品供给口48和窗49。在该样品分析用具40中，在与上述展开部件41的上游侧邻接地配置的(与展开部件41一体化)上述展开液接受垫42中，配置有上述展开液供给部12。以覆盖该展开液供给部12的表面的全部的方式形成上述亲水性成分层15。此外，在本实施方式中，上述展开液供给部12为上述展开液接受垫42中的规定的区域。除此以外的构成，与上述的样品分析用具10相同。

在使用了该样品分析用具40的免疫分析方法中，通过上述展开液供给口47对上述展开液接受垫42供给上述展开液。除此以外，与上述的免疫分析方法相同。另外，上述基质例如可以如上述那样预先在展开液中含有，也可以使其预先浸渗至上述展开液接受垫42中。

在本实施方式中，上述样品中的分析对象物为抗体时，例如可举出上述检测部含有固定化抗原来代替上述固定化抗体的形态。由此，形成上述酶标识化抗体或酶标识化抗原、作为上述样品中的分析对象物的抗体和上述固定化抗原的复合体，上述复合体中的上述酶和上述基质反应，产生发色或发光等。通过检测该发色或发光等，可以间接地检测上述抗体。作为上述样品中的分析对象物的抗体，没有特别的限制，可举出各种的抗体。作为上述固定化抗原的抗原，只要能与作为上述样品中的分析对象物的抗体结合的抗原即可。作为上述酶标识化抗体的抗体，没有特别的限制，只要是与作为上述样品中的分析对象物的抗体结合的抗体即可。另外，作为上述酶标识化抗原的抗原，没有特别的限制，只要是与作为上述样品中的分析对象物的抗体结合的抗原即可。此外，上述酶标识化抗体中的抗体的制备、标识化的方法，可以应用以往公知的方法，作为酶，例如与上述相同。另外，上述酶标识化抗原中的抗原的制备、标识化的方法可以应用以往公知的方法，作为酶，例如与上述相同。上述固定化抗原的制作方法例如可以举出以往公知的方法等，没有特别限制。另外，作为将上述固定化抗原固定在检测部的方法，例如可以应用以往公知的方法等，没有特别限制。

(实施方式2)

本实施方式的样品分析用具是使用了着色不溶性载体粒子作为标识化抗体的标识的免疫分析方法中使用的样品分析用具。

作为上述着色不溶性载体粒子，没有特别的限制，例如，可举出着色胶乳粒子、金属胶体粒子、着色聚甲基丙烯酸甲酯粒子、着色聚乳酸粒子、着色多孔性玻璃粒子、着色二氧化硅粒子、着色琼脂糖粒子、着色葡聚糖粒子等。作为上述着色胶乳粒子，没有特别的限制，例如可举出蓝色胶乳粒子、红色胶乳粒子等。作为上述金属胶体粒子，没有特别的限制，例如可举出金胶体粒子、铂胶体粒子等。

将上述着色不溶性载体粒子在抗体上标识化方法没有特别的限制，例如，可以通过将上述着色不溶性载体粒子在缓冲液等中混悬，在该混悬液中添加上述抗体，通过使上述两者反应来制备。作为上述缓冲液，没有特别的限制，例如可举出上述的缓冲液等。

在本发明中，例如可以将结合了上述着色不溶性载体粒子的标识化抗体预先在上述样品液中含有，也可在上述展开部件或另外设置的垫等中预先浸渗结合了上述着色不溶性载体粒子的标识化抗体。但是，例如从不需另外设置上述垫等且可以进行更高灵敏度的分析的观点出发，优选在上述样品液中含有结合了上述着色不溶性载体粒子的标识化抗体。

接着，说明本实施方式中的免疫分析方法。在本实施方式中，在检测部，通过对由上述着色不溶性载体粒子的凝聚引起的着色进行检测，来间接地检测上述抗原(定量分析、半定量分析、定性分析等)。此外，本实施方式中，不使用基质。上述检测例如可以通过目视来判定，也可以使用比色计等来进行。除此以外，与实施方式1相同。

(实施方式3)

本实施方式的样品分析用具是使用了荧光色素作为标识化抗体的免疫分析方法中使用的样品分析用具。

作为上述荧光色素，没有特别的限制，例如可举出FITC等。利用由荧光色素标识化了的抗体或抗原，例如，形成上述固定化抗体、作为分析对象物的抗原和上述标识化抗体的复合体，或形成上述固定化抗原、分析对象的抗体和上述标识化抗体或上述标识化抗原的复合体，对上述复合体照射激发光，由此可以检测上述标识化抗体或上述标识化抗原的荧光色素的发光。

(实施方式4)

本实施方式的样品分析用具是使样品液与试剂层中所含的试剂反应的分析方法中使用的样品分析用具。

在图5的(a)的截面图中，示出了本实施方式的样品分析用具的一个例子的构成。如图所示，该样品分析用具50具备具有样品供给部53的展开部件51、试剂层54和一对塑料基材56。在上述展开部件51的上述样品供给部53的相反侧的面上，配置有试剂层54。上述一对塑料基材56夹持着上述展开部件51和上述试剂层54。另外，以覆盖上述样品供给部53的表面的全部的方式形成亲水性成分层55。因此，本实施方式的样品分析用具能够防止来自上述塑料基材的疏水性成分向上述样品供给部的附着。其结果是，在本实施方式的样品分析用具中也可以得到本发明的效果。此外，本实施方式的样品分析用具并不限定于该例子，例如，如图5的(b)的截面图所示，可以是上述亲水性成分层55形成于上述展开部件51的与上述一对塑料基材56的接触部的形态。即使是这样的形态，也能够防止来自上述塑料基材的疏水性成分向的上述样品供给部的附着。另外，本实施方式的样品分析用具，例如，如图5的(c)的截面图所示，也可以是上述亲水性成分层55在上述样品供给部53和上述接触部上都形成的形态。即使是这样的形态，也能够防止来自上述塑料基材的疏水性成分向的上述样品供给部的附着。此外，本实施方式的样品分析用具中，上述塑料基材56为一对，但是本发明并不限定于该例子，例如也可是不同形状的塑料基材以挟持上述展开部件和上述试剂层的方式形成。

上述展开部件和上述亲水性成分层与上述相同。

上述试剂层例如是在多孔质部件浸渗试剂并使其干燥而成的层。作为上述多孔质部件，可使用以往公知的部件。上述浸渗的试剂的种类可以根据后述的样品中的分析对象物来适当决定。

上述一对塑料基材的材质没有特别的限制，可举出与上述的塑料盒体或支持体相同的材质。此外，在该样品分析用具50中，上述一对塑料基材56为夹持上述展开部件51和上述试剂层54的形状，但是塑料基材的形状没有特别的限制，例如可以为膜状、片状、板状，可以是层叠于上述展开部件51和上述试剂层54，支持上述展开部件51和上述试剂层54的形状的基材。

使用了本实施方式的样品分析用具的样品分析，可以按照以下方法实施。首先，对上述样品供给部53供给样品液。此时，由于上述样品供给部53的表面的全部被上述亲水性成分层55所覆盖，所以供给的样品液不受来自上述塑料基材56的疏水性成分的不良影响，且一边将上述亲水性成分层55的上述亲水性成分溶解，一边向上述展开部件51中迅速浸透。接下来，通过上述样品液与上述试剂层54接触，上述样品液中的检查对象物和试剂发生反应，产生发色、色调变化等。上述发色、色调变化等的检测可以通过目视来判定，也可以使用比色计等来进行。

上述样品液可以含有样品。作为上述样品中的分析对象物，例如，可举出葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、氨、尿酸、肌氨酸酐、尿素氮、钙、无机磷、镁、GGT、GOT、GPT、LDH、淀粉酶、总蛋白量、白蛋白、果糖胺、肌酸磷酸激酶、胆红素、碱性磷酸酶、HDL等。

(实施例)

接下来，对本发明的实施例与比较例一并进行说明。但是，本发明并不受下述的实施例和比较例任何限定。

[实施例1]

〔样品分析用具的制作〕

按照下述的顺序，制作图4所示的构成的样品分析用具40。即，首先，准备长度：50mm、宽度：4mm、厚度：5μm的硝基纤维素制的多孔质材作为展开部件41，准备长度：20mm、宽度：4mm、厚度：0.5mm的玻璃纤维制的多孔质材作为展开液接受垫42，准备长度：25mm、宽度：4mm、厚度：1.5mm的纤维素制的多孔质材作为废液吸收垫43，以及准备长度：80mm、宽度：4mm的背板片(PET)作为支持体44。在从上述展开部件41的一端(图4中的右侧端部)开始30mm的位置，涂布卵白过敏原提取蛋白质水溶液(用1mg/mL(5mmol/L)硼酸缓冲液(pH8.5)稀释后，进行了透析的水溶液)以使其达到宽度为1mm。这样，在上述展开部件41表面形成检测部14。另外，在从上述展开液接受垫42的一端(图4中的右侧端部)开始10mm的位置，涂布5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸(20mg/mL，勃林格殷格翰公司制，商品名“BCIP”)5μL作为基质，在37℃放置1小时，使其干燥。接下来，以覆盖上述展开液接受垫42的上述展开液供给部12的全部的方式，使用涂布装置涂布1重量％的蔗糖水溶液16μL(涂布面积：4～8mm²)，使其干燥，在上述展开液接受垫42上形成亲水性成分层15。将这些部件如图4所示的方式收容于塑料盒体46内，制作本实施例的样品分析用具40。接下来，将本实施例的样品分析用具40在60℃条件下保管1周。

[实施例2]

除了涂布5重量％的蔗糖水溶液16μL以外，与实施例1相同地制作本实施例的样品分析用具40。

[实施例3]

除了涂布5重量％的N-甲基葡萄糖胺水溶液16μL以外，与实施例1相同地制作本实施例的样品分析用具40。

[实施例4]

除了涂布1重量％的十二烷基硫酸钠(SDS)水溶液16μL以外，与实施例1相同地制作本实施例的样品分析用具40。

[实施例5]

除了涂布1重量％的聚乙烯基吡咯烷酮水溶液16μL以外，与实施例1相同地制作本实施例的样品分析用具40。

[比较例1]

除了不形成亲水性成分层15以外，与实施例1相同地制作本比较例的样品分析用具。

[比较例2]

除了涂布16μL水以外，与实施例1相同地制作本比较例的样品分析用具。

〔使用了样品分析用具的免疫分析〕

(1)样品液的制备

在50mmol/L Tris-HCl缓冲液(pH：7.4)中添加10μL的卵白特异IgE阳性血清和60μL的碱性磷酸酶标识化抗体(酶标识化抗体，10μg，取自山羊)，制备样品液。

(2)展开液的制备

制备100mmol/L碳酸钠/碳酸氢钠缓冲液(pH10.0)。将该缓冲液作为展开液。

(3)免疫分析方法的实施

使用各实施例和各比较例的样品分析用具，如以下所示进行免疫分析方法。即，首先，通过上述样品供给口48对上述样品供给部13供给上述样品液10μL。接着，通过上述展开液供给口47，对上述展开液供给部12供给上述展开液100μL。

〔展开液的浸透性评价〕

从展开液的供给开始经过1分钟后和20钟分后，通过目视观察上述展开液供给部12，基于下述的评价基准对展开液的浸透性进行评价。

展开液的浸透性评价基准

G：上述展开液完全浸透。

NG：上述展开液没有完全浸透，有残存。

〔免疫分析评价〕

从展开液的供给开始经过20分钟后，使用免疫分析装置(Arkray(株)制，商品名“SPOTCHEMIL SL-4720”)对上述检测部14的发色线进行分析。在上述免疫分析装置中，根据上述发色线的浓度，上述分析结果为0～6的数值，或用“E”来表示。此外，上述数值表示为“2～6”时，表示能确认发色线，表示分析为阳性(+)。另一方面，上述数值表示为“0或1”时，或表示为“E”时，表示不能确认发色线，是分析为阴性(-)的情况。

将各实施例的评价结果示于下述表1。将各比较例的评价结果示于下述表2。

(表1)

(表2)

如上述表1所示，在形成有亲水性成分层15的实施例1至5的样品分析用具40中，从展开液的供给开始经过1分钟后，展开液浸透在展开部件11中，浸透性良好。另外，在免疫分析评价中，分析为阳性。另一方面，如上述表2所示，在没有形成有亲水性成分层15的比较例1和涂布水的比较例2的样品分析用具中，从展开液的供给开始经过20分钟后，展开液没有浸透在展开部件11中，在上述展开液供给部12中以水滴的状态残存。即，展开液的浸透性差。另外，在免疫分析评价中，分析为阴性。

产业上的可利用性

如以上所述，根据本发明，能够防止分析的重现性和反应性的降低。本发明可以方便地用于例如，全血、血清、血浆、唾液、尿、脑脊液等中所含的特定物质的检测(定量分析、半定量分析、定性分析等)，可以应用于临床检查、生化学检查、医学研究等领域，其用途没有限制，能适用于广大技术领域。

附图标记说明

10，40，50，60样品分析用具

11，41，51，61展开部件

12，62展开液供给部

13，53，63样品供给部

14，64检测部

15，55亲水性成分层

16，46，66塑料盒体

17，47，67展开液供给口

18，48，68样品供给口

19，49，69窗

31酶标识化抗体

32抗原

33固定化抗体

34复合体

35酶

42展开液接受垫

43废液吸收垫

44支持体

54试剂层

56一对塑料基材

a，b，c，d箭头

Claims (23)

1.一种样品分析用具，其特征在于，

具备展开部件和塑料基材，

所述展开部件的至少一部分与所述塑料基材接触，

还具备亲水性成分层，

所述塑料基材的表面和所述展开部件的表面中的至少一方的一部分或全部上形成有所述亲水性成分层。

2.如权利要求1所述的样品分析用具，其中，

在所述展开部件的与所述塑料基材接触的接触部的一部分或全部上形成有所述亲水性成分层。

3.如权利要求1或2所述的样品分析用具，其中，

所述展开部件具有液体供给部，

在所述液体供给部的一部分或全部的表面上形成有所述亲水性成分层。

4.如权利要求3所述的样品分析用具，其中，所述展开部件的与所述塑料基材接触的接触部包含所述液体供给部。

5.如权利要求3或4所述的样品分析用具，其中，

所述液体供给部具有展开液供给部和样品供给部，

所述展开液供给部的表面和所述样品供给部的表面中的至少一方的一部分或全部上形成有所述亲水性成分层。

6.如权利要求1～5中任一项所述的样品分析用具，其中，所述亲水性成分层含有不挥发性的亲水性成分。

7.如权利要求1～5中任一项所述的样品分析用具，其中，

所述亲水性成分层含有选自糖类、水溶性聚合物、表面活性剂、胶体粒子、无机粒子中的至少一种成分。

8.如权利要求7所述的样品分析用具，其中，所述糖类包含蔗糖和N-甲基葡萄糖胺中的至少一种。

9.如权利要求1～8中任一项所述的样品分析用具，其中，

所述塑料基材包含塑料盒体，

所述展开部件配置于所述塑料盒体内。

10.如权利要求5～9中任一项所述的样品分析用具，其中，

分别从所述样品供给部和所述展开液供给部供给含有样品的样品液和展开液。

11.如权利要求5～10中任一项所述的样品分析用具，其中，

所述展开部件还具有检测部，

所述展开部件中，从展开液流的上游至下游依次配置所述展开液供给部、所述样品供给部和所述检测部，

在所述检测部中，固定化有与样品中的分析对象物特异性结合的物质，

对所述样品供给部供给含有样品的样品液，

对所述展开液供给部供给所述展开液，

在与所述分析对象物特异性结合的标识化物质的存在下，通过所述供给的展开液在所述展开部件中的展开，所述供给的样品液被导入至所述检测部中，

在所述检测部中，形成所述固定化了的特异性结合物质、所述分析对象物和所述标识化了的特异性结合物质的复合体，

通过所述复合体中的所述标识的检测，进行所述分析对象物的分析。

12.如权利要求11所述的样品分析用具，所述特异性结合物质为抗原或抗体。

13.如权利要求1～8中任一项所述的样品分析用具，所述塑料基材以夹持所述展开部件的方式形成。

14.如权利要求13所述的样品分析用具，还具备试剂层，

所述塑料基材以夹持所述展开部件和所述试剂层的方式形成。

15.如权利要求1～14中任一项所述的样品分析用具，其中，所述塑料基材含有疏水性成分。

16.一种样品分析用具的制造方法，其特征在于，其为制造展开部件的至少一部分与塑料基材接触的样品分析用具的方法，包括：

在所述塑料基材的表面和所述展开部件的表面中的至少一方的一部分或全部上形成亲水性成分层的亲水性成分层形成步骤。

17.如权利要求16所述的样品分析用具的制造方法，其中，在所述亲水性成分层形成步骤中，

在所述展开部件的与所述塑料基材接触的接触部的一部分或全部上形成所述亲水性成分层。

18.如权利要求16或17所述的样品分析用具的制造方法，其中，所述展开部件具有液体供给部，

在所述亲水性成分层形成步骤中，

在所述液体供给部的一部分或全部的表面上形成所述亲水性成分层。

19.如权利要求18所述的样品分析用具的制造方法，其中，所述展开部件的与所述塑料基材接触的接触部包含所述液体供给部。

20.如权利要求18或19所述的样品分析用具的制造方法，其中，

所述液体供给部具有展开液供给部和样品供给部，

在所述亲水性成分层形成步骤中，

在所述展开液供给部的表面和所述样品供给部的表面中的至少一方的一部分或全部上形成所述亲水性成分层。

21.一种抑制展开部件的液体浸透性降低的方法，其特征在于，

在具备展开部件和塑料基材、所述塑料基材含有疏水性成分、所述展开部件的至少一部分与所述塑料基材接触的样品分析用具中，在所述塑料基材的表面和所述展开部件的表面中的至少一方的一部分或全部上形成亲水性成分层，

通过所述亲水性成分层防止所述疏水性成分对所述展开部件的附着，由此，抑制液体向所述展开部件中的浸透性的降低。

22.如权利要求21所述的抑制展开部件的液体浸透性降低的方法，其中，

在所述展开部件具有液体供给部、所述液体供给部的至少一部和所述塑料基材接触的样品分析用具中，在所述液体供给部的一部分或全部的表面上形成所述亲水性成分层。

23.如权利要求22所述的抑制展开部件的液体浸透性降低的方法，其中，

在所述液体供给部具有展开液供给部和样品供给部的样品分析用具中，在所述展开液供给部的表面和所述样品供给部的表面中的至少一方的一部分或全部上形成所述亲水性成分层。

Images