JPWO2010116979A1 - 検体分析用具、検体分析用具の製造方法および展開部材の液体浸透性低下抑制方法 - Google Patents
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Abstract
Description
展開部材と、プラスチック基材とを備え、
前記展開部材の少なくとも一部が、前記プラスチック基材と接触しており、
さらに、親水性成分層を有し、
前記プラスチック基材の表面および前記展開部材の表面の少なくとも一方の一部または全部に、前記親水性成分層が形成されていることを特徴とする。
展開部材の少なくとも一部が、プラスチック基材と接触した検体分析用具を製造する方法であって、
前記プラスチック基材の表面および展開部材の表面の少なくとも一方の一部または全部に、親水性成分層を形成する親水性成分層形成ステップを含むことを特徴とする。
展開部材と、プラスチック基材とを備え、
前記プラスチック基材が、疎水性成分を含み、
前記展開部材の少なくとも一部が、前記プラスチック基材と接触している検体分析用具における、前記プラスチック基材の表面および前記展開部材の表面の少なくとも一方の一部または全部に、親水性成分層を形成し、
前記展開部材への前記疎水性成分の付着を、前記親水性成分層により防止することで、前記展開部材への液体の浸透性の低下を抑制することを特徴とする。
本実施形態の検体分析用具は、前記「固定化された特異的結合物質」として固定化抗体を用い、前記「標識化された特異的結合物質」として、酵素を標識として用いた標識化抗体(酵素標識化抗体)を用いた免疫分析方法(酵素免疫分析方法)に用いる検体分析用具である。
本実施形態の検体分析用具は、標識化抗体の標識として、着色不溶性担体粒子を用いた免疫分析方法に用いる検体分析用具である。
本実施形態の検体分析用具は、標識化抗体の標識として、蛍光色素を用いた免疫分析方法に用いる検体分析用具である。
本実施形態の検体分析用具は、検体液を、試薬層に含まれる試薬と反応させる分析方法に用いる検体分析用具である。
〔検体分析用具の作製〕
下記の手順により、図4に示す構成の検体分析用具40を作製した。すなわち、まず、長さ:50mm、幅:4mm、厚み:5μmのニトロセルロース製の多孔質材を展開部材41、長さ:20mm、幅:4mm、厚み:0.5mmのガラス繊維製の多孔質材を展開液受取パッド42、長さ:25mm、幅:4mm、厚み:1.5mmのセルロース製の多孔質材を廃液吸収パッド43、および長さ:80mm、幅:4mmのバッキングシート(PET)を支持体44として、それぞれ準備した。前記展開部材41の一端(図4における右側端部)から30mmの位置に卵白アレルゲン抽出蛋白質水溶液(1mg/mL(5mmol/L)ホウ酸緩衝液(pH8.5)で希釈後、透析した水溶液)を、幅1mmとなるように塗布した。このようにして、前記展開部材41表面に、検出部14を形成した。また、前記展開液受取パッド42の一端(図4における右側端部)から10mmの位置に、基質として、5−ブロモ−4−クロロ−3−インドリルリン酸(20mg/mL、ベーリンガーマンハイム社製、商品名「BCIP」)5μLを塗布し、37℃で1時間放置して乾燥させた。ついで、前記展開液受取パッド42の前記展開液供給部12の全部を覆うように、塗布装置を用いて、1重量%のスクロース水溶液16μLを塗布し(塗布面積:4〜8mm2)、乾燥させ、前記展開液受取パッド42に、親水性成分層15を形成した。これらの部材を、図4に示すように、プラスチックケース46内に収容し、本実施例の検体分析用具40を作製した。ついで、本実施例の検体分析用具40を、60℃で1週間保管した。
5重量%のスクロース水溶液16μLを塗布したこと以外は、実施例1と同様にして、本実施例の検体分析用具40を作製した。
5重量%のN−メチルグルコースアミン水溶液16μLを塗布したこと以外は、実施例1と同様にして、本実施例の検体分析用具40を作製した。
1重量%のドデシル硫酸ナトリウム(SDS)水溶液16μLを塗布したこと以外は、実施例1と同様にして、本実施例の検体分析用具40を作製した。
1重量%のポリビニルピロリドン水溶液16μLを塗布したこと以外は、実施例1と同様にして、本実施例の検体分析用具40を作製した。
親水性成分層15を形成しなかったこと以外は、実施例1と同様にして、本比較例の検体分析用具を作製した。
水16μLを塗布したこと以外は、実施例1と同様にして、本比較例の検体分析用具を作製した。
(1)検体液の調製
50mmol/L Tris−HCl緩衝液(pH:7.4)に、10μLの卵白特異IgE陽性血清、および60μLのアルカリホスファターゼ標識化抗体(酵素標識化抗体、10μg、ヤギ由来)を含ませて、検体液を調製した。
100mmol/L 炭酸ナトリウム/炭酸水素ナトリウム緩衝液(pH10.0)を調製した。この緩衝液を展開液とした。
各実施例および各比較例の検体分析用具を用いて、以下のようにして免疫分析方法を行った。すなわち、まず、前記検体供給口48を通して、前記検体供給部13に、前記検体液10μLを供給した。ついで、前記展開液供給口47を通して、前記展開液供給部12に、前記展開液100μLを供給した。
展開液の供給から、1分後および20分後に、前記展開液供給部12を目視で観察することにより、展開液の浸透性を、下記の評価基準に従って評価した。
G :前記展開液が、完全に浸透した。
NG:前記展開液が、完全には浸透せず、残存していた。
展開液の供給から、20分後に、前記検出部14の発色ラインを、免疫分析装置(アークレイ(株)製、商品名「スポットケムIL SL−4720」)を用いて分析を行った。前記免疫分析装置では、前記発色ラインの濃さに応じて、前記分析結果が0〜6の数値、または「E」で表示される。なお、前記数値が「2〜6」と表示された場合、発色ラインが確認され、陽性(+)と分析されたことを示す。一方、前記数値が「0または1」と表示された場合、または「E」が表示された場合は、発色ラインが確認されず、陰性(−)と分析されたことを示す。
実施例1 実施例2 実施例3 実施例4 実施例5
浸透性評価
1分後 G G G G G
20分後 G G G G G
免疫分析評価 + + + + +
(装置の表示) (3) (3) (3) (3) (3)
比較例1 比較例2
浸透性評価
1分後 NG NG
20分後 NG NG
免疫分析評価 − −
(装置の表示) (E) (E)
11、41、51、61 展開部材
12、62 展開液供給部
13、53、63 検体供給部
14、64 検出部
15、55 親水性成分層
16、46、66 プラスチックケース
17、47、67 展開液供給口
18、48、68 検体供給口
19、49、69 窓
31 酵素標識化抗体
32 抗原
33 固定化抗体
34 複合体
35 酵素
42 展開液受取パッド
43 廃液吸収パッド
44 支持体
54 試薬層
56 一対のプラスチック基材
a、b、c、d 矢印
Claims (23)
- 展開部材と、プラスチック基材とを備え、
前記展開部材の少なくとも一部が、前記プラスチック基材と接触しており、
さらに、親水性成分層を有し、
前記プラスチック基材の表面および前記展開部材の表面の少なくとも一方の一部または全部に、前記親水性成分層が形成されていることを特徴とする検体分析用具。 - 前記展開部材の前記プラスチック基材との接触部の一部または全部に、前記親水性成分層が形成されている、請求の範囲1記載の検体分析用具。
- 前記展開部材が、液体供給部を有し、
前記液体供給部の表面の一部または全部に、前記親水性成分層が形成されている、請求の範囲1または2記載の検体分析用具。 - 前記展開部材の前記プラスチック基材との接触部が、前記液体供給部を含む、請求の範囲3記載の検体分析用具。
- 前記液体供給部が、展開液供給部および検体供給部を有し、
前記展開液供給部の表面および前記検体供給部の表面の少なくとも一方の一部または全部に、前記親水性成分層が形成されている、請求の範囲3または4記載の検体分析用具。 - 前記親水性成分層が、不揮発性の親水性成分を含む、請求の範囲1から5のいずれか一項に記載の検体分析用具。
- 前記親水性成分層が、糖類、水溶性ポリマー、界面活性剤、コロイド粒子、無機粒子からなる群から選択される少なくとも一つの成分を含む、請求の範囲1から5のいずれか一項に記載の検体分析用具。
- 前記糖類が、スクロースおよびN−メチルグルコースアミンの少なくとも一方を含む、請求の範囲7記載の検体分析用具。
- 前記プラスチック基材が、プラスチックケースを含み、
前記展開部材が、前記プラスチックケース内に配置されている、請求の範囲1から8のいずれか一項に記載の検体分析用具。 - 検体を含む検体液および展開液が、それぞれ、前記検体供給部および前記展開液供給部から供給される、請求の範囲5から9のいずれか一項に記載の検体分析用具。
- 前記展開部材が、さらに、検出部を有し、
前記展開部材に、前記展開液供給部、前記検体供給部および前記検出部が、展開液の流れの上流から下流にかけて、前記順序で配置されており、
前記検出部には、検体中の分析対象物に特異的に結合する物質が固定化されており、
前記検体供給部に、検体含む検体液が供給され、
前記展開液供給部に、前記展開液が供給され、
前記分析対象物に特異的に結合する標識化物質の存在下、前記供給された展開液の前記展開部材における展開により、前記供給された検体液が前記検出部に導入され、
前記検出部において、前記固定化された特異的結合物質、前記分析対象物、および前記標識化された特異的結合物質の複合体が形成され、
前記複合体における前記標識の検出により、前記分析対象物の分析が行われる、請求の範囲5から10のいずれか一項に記載の検体分析用具。 - 前記特異的結合物質が、抗原または抗体である、請求の範囲11記載の検体分析用具。
- 前記プラスチック基材が、前記展開部材を挟持するように形成されている、請求の範囲1から8のいずれか一項に記載の検体分析用具。
- さらに、試薬層を備え、
前記プラスチック基材が、前記展開部材および前記試薬層を挟持するように形成されている、請求の範囲13記載の検体分析用具。 - 前記プラスチック基材が、疎水性成分を含む、請求の範囲1から14のいずれか一項に記載の検体分析用具。
- 展開部材の少なくとも一部が、プラスチック基材と接触した検体分析用具を製造する方法であって、
前記プラスチック基材の表面および前記展開部材の表面の少なくとも一方の一部または全部に、親水性成分層を形成する親水性成分層形成ステップを含むことを特徴とする検体分析用具の製造方法。 - 前記親水性成分層形成ステップにおいて、
前記展開部材の前記プラスチック基材との接触部の一部または全部に、前記親水性成分層を形成する、請求の範囲16記載の検体分析用具の製造方法。 - 前記展開部材が、液体供給部を有し、
前記親水性成分層形成ステップにおいて、
前記液体供給部の表面の一部または全部に、前記親水性成分層を形成する、請求の範囲16または17記載の検体分析用具の製造方法。 - 前記展開部材の前記プラスチック基材との接触部が、前記液体供給部を含む、請求の範囲18記載の検体分析用具の製造方法。
- 前記液体供給部が、展開液供給部および検体供給部を有し、
前記親水性成分層形成ステップにおいて、
前記展開液供給部の表面および前記検体供給部の表面の少なくとも一方の一部または全部に、前記親水性成分層を形成する、請求の範囲18または19記載の検体分析用具の製造方法。 - 展開部材と、プラスチック基材とを備え、
前記プラスチック基材が、疎水性成分を含み、
前記展開部材の少なくとも一部が、前記プラスチック基材と接触している検体分析用具における、前記プラスチック基材の表面および前記展開部材の表面の少なくとも一方の一部または全部に、親水性成分層を形成し、
前記展開部材への前記疎水性成分の付着を、前記親水性成分層により防止することで、前記展開部材への液体の浸透性の低下を抑制することを特徴とする展開部材の液体浸透性低下抑制方法。 - 前記展開部材が、液体供給部を有し、
前記液体供給部の少なくとも一部と前記プラスチック基材とが接触している検体分析用具における、前記液体供給部の表面の一部または全部に、前記親水性成分層を形成する、請求の範囲21記載の展開部材の液体浸透性低下抑制方法。 - 前記液体供給部が、展開液供給部および検体供給部を有する検体分析用具における、前記展開液供給部の表面および前記検体供給部の表面の少なくとも一方の一部または全部に、前記親水性成分層を形成する、請求の範囲22記載の展開部材の液体浸透性低下抑制方法。
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