CN1327159A - 测定被糖化蛋白的免疫分析方法、试剂及其装置 - Google Patents

Abstract

本发明提出测定被糖化蛋白(例如最终糖化蛋白;Advance GlycosylationEnd Products简称AGEs)的免疫分析方法及其试剂与装置,包括:测定被糖化蛋白的试剂,其具有显示载体悬浮液与固定于显示载体表面上的抗原或抗体及试验条,其包括:底板,装置于底板上的组成零件,该组成零件包括:样品吸水垫;多孔性的纤维膜,显示载体纤维块和至少一固定物质。经由凝集现象或伴随的吸光度变化或颜色变化来测定被糖化蛋白抗原与抗被糖化蛋白抗体的免疫反应可得知糖尿病的最终糖化蛋白是否存在而让医护人员能于最早的时期,防止糖尿病人并发症的发生,或进而阻断并发症的继续进行。

Description

测定被糖化蛋白的免疫分析方法、试剂及其装置

本发明是有关一种测定被糖化蛋白抗原或抗体的免疫分析方法，试剂与装置，其经由凝集现象或伴随的吸光度变化或颜色变化来测定被糖化蛋白抗原或抗被糖化蛋白抗体的免疫反应。

尽管今日我们对于糖尿病的致病机制已能充分掌握，例如得知在高血糖的状况下，蛋白质(例如：白蛋白)将被糖化成被糖化蛋白(例如：最终糖化蛋白)，此将引起不正常的细胞破坏，尤其是对糖尿病人而言。此外，目前虽也可利用药物有效地控制糖尿病人的血糖含量，但仍无法有效地经由早期预测来控制糖尿病并发症的发生。因此发展一种由特定的方式及试剂，来检验以得知糖尿病的最终糖化蛋白是否存在，而让医护人员能于最早的时期来防止糖尿病并发症的产生，或进而阻断并发症的继续进行。这些检验糖尿病的最终糖化蛋白所用的特定方式及试剂中，最具特异性且最灵敏者，为利用免疫分析技术来测定被糖化蛋白抗原或抗体，例如：最终糖化蛋白抗原或抗体。可惜的是至今尚无可测定被糖化蛋白的免疫分析技术供利用。

基于前述，本发明的目的是提供一种测定被糖化蛋白的免疫分析方法、试剂及其装置，利用本发明可得知糖尿病的最终糖化蛋白是否存在而让医护人员能于最早的时期，防止糖尿病人并发症的发生，或进而阻断并发症的继续进行。

本发明是本发明人经过精深研究而开发出测定被糖化蛋白抗原或抗体的免疫分析技术与装置，其基本上是经由凝集现象或伴随的吸光度变化或颜色变化来测定被糖化蛋白抗原或抗被糖化蛋白抗体的免疫反应，

于另一部份中：本发明提出使用抗被糖化蛋白抗体(被糖化蛋白抗原)测定被糖化蛋白抗原(抗体)的免疫分析技术，其包括利用免疫分析技术经由凝集现象或伴随的吸光度变化或颜色变化，来测定待测样品中是否含有被糖化蛋白抗原或抗体，例如：最终糖化蛋白抗原或抗体。

于再一部份中，本发明提出一种使用抗被糖化蛋白抗体(被糖化蛋白抗原)来测定被糖化蛋白抗原(抗体)的免疫分析试剂，其是经由，例如：抗被糖化蛋白抗体，与被糖化蛋白抗原(如最终糖化蛋白抗原)的免疫复合物形成的凝集现象，来判定被糖化蛋白抗原的存在与否。

于进一部份中，本发明提出另一种使用抗被糖化蛋白抗体(被糖化蛋白抗原)来测定被糖化蛋白抗原(抗体)的免疫分析试剂，其是经由，例如：抗被糖化蛋白抗体，与被糖化蛋白抗原(如最终糖化蛋白抗原)的免疫复合物形成所促成的吸光度变化，来判定被糖化蛋白抗原的存在与否。

于又一部份中，本发明提出一种使用抗被糖化蛋白抗体(被糖化蛋白抗原)来测定被糖化蛋白抗原(抗体)的免疫分析试验条，其是在一底板上经由，例如：抗被糖化蛋白抗体，与被糖化蛋白抗原(如最终糖化蛋白抗原)的免疫复合物形成，与相对于对照线所促成的颜色变化来判定被糖化蛋白抗原的存在与否。

本发明的特性、目的与优点可从下面参照附图的说明部份获得了解。

图1为本发明免疫色层试验条的立体结构图；

图2为一防水装置盒的立体外形图；该防水装置盒是用以盛装图1所示的免疫色层试验条；

图3为图2所示防水装置盒内装有本发明试验条的整体剖面示意图。

本发明是利用数种免疫分析技术来测定待测样品中被糖化蛋白抗原，例如：最终糖化蛋白抗原的存在与否。其中所用的抗体，是可经由用已纯化的抗原(例如最终糖化蛋白抗原)直接经兔子或山羊免疫而获得之(例如：多株抗体)，亦可经由小鼠免疫，制成融合瘤细胞而获得之(例如：单株抗体)。

传统所熟悉的免疫分析技术中，可参看，例如：Fujikawa H.，Igarashi，H.，于1988年发表文献，其是利用高密度乳胶颗粒制成快速乳胶凝集试剂，用以侦测萄葡球菌的内毒素(Enterotoxin)A～E(Appl.Envir.Microbiol.，54/10，2345-2348，1998)。Delanghe，JR.，Chapele，JP.，Vander schueren，SC.，于1990利用比浊法去测定Myoglobin(Clin.Chem.，36/9，1675-1678，1990)。WO88/08534(1988)述及所谓的免疫分析装置，利用免疫色层膜当介质测定HCG及LH。美国专利第5,238,652号(1993)揭示利用免疫色层技术以测定非蛋白质抗原。

然而上述先前技艺皆末提及本发明所述的用来测定被糖化蛋白抗原或抗体的免疫分析技术与装置。

于本发明的一部份中，提出一种使用抗被糖化蛋白抗体(被糖化蛋白抗原)来测定被糖化蛋白抗原(抗体)的免疫分析试剂，其是利用免疫凝集技术来测定被糖化蛋白抗原或抗体，例如：最终糖化蛋白抗原或抗体；其中包括：

一种显示载体悬浮液；和经固定于显示载体表面上的被糖化蛋白抗原或抗体，其经由该悬浮液试剂与待测样品接触之后，有否产生凝集现象来判断被糖化蛋白抗原或抗体的存在与否。

于一实施例中，是将一种或多种抗被糖化蛋白抗体固定于悬浮液中的显示载体上，再利用一种阻断蛋白将载体的空白处占满。当含有一定量的被糖化蛋白抗原，例如：最终糖化蛋白抗原的待测样品与已固定有一种或多种抗体的显示载体悬浮液，于反应板上混合反应时，将形成一种“显示载体—抗体或多种抗体—最终糖化蛋白抗原—抗体或多种抗体—显示载体-----，”的免疫复合体。此反应将于3-5分钟内形成一种肉眼可见的凝集反应，是为阳性反应。反之，若待测样品中不存在最终糖化蛋白抗原时，加入已固定有一种或多种抗体的显示载体悬浮液后，其与待测样品不产生凝集反应，是为阴性反应。本发明所称的显示载体为一种具颜色的微细颗粒，其大小在0.01微米—60微米之间。本发明所称的颗粒可为：乳胶微粒、染料微粒、脂微粒、金溶胶微粒，碳黑微粒，等。本发明所称的抗体为上述的—种或多种抗被糖化蛋白抗体。若于显示载体上固定一种结构式的被糖化蛋白抗原或多种结构式的被糖化蛋白抗原，即可用以测定待测样品中是否含有抗被糖化蛋白抗体；不凝集反应，是为阴性反应；凝集反应，是为阳性反应。

于本发明另一部份中，提出一种使用抗被糖化蛋白抗体(被糖化蛋白抗原)来测定被糖化蛋白抗原(抗被糖化蛋白抗体)的免疫分析试剂，其是利用免疫比浊或浊度技术来测定被糖化蛋白抗原或抗体，例如：最终糖化蛋白抗原或抗体；其中包括：

一种显示载体悬浮液；

其显示载体表面上是经固定有上述被糖化蛋白抗原或抗体；和

一种吸光度的测定装置；其在经由该试剂与待测物品接触之后，测定该显示载体有否产生吸光度变化，以判断该被糖化蛋白抗原或抗体的存在与否。

于一实施例中，是将一种或多种抗体固定于显示载体悬浮液上，再利用一种阻断蛋白将载体的空白处占满。准备一支阴性标准血清，及一支弱阳性标准血清，及一支未知待测样品，然后各取250微升的已固定一种或多种抗体显示载体悬浮液置入预备的三支比色试管A1、A2、及A3内；A1比色试管内加入20微升的阴性标准血清，A2比色试管内加入20微升的弱阳性标准血清，A3比色试管内加入20微升的未知样品；上述三支比色试管于加入样品后，应马上用比浊或浊度光学色谱分析仪于340纳米(nm)比色(事先以空气归零)、记录OD值(吸光度值)，并于加入样品后的第240秒再次比色、记录OD值(吸光度值)。将第二次比色的OD值减去第一次比色的OD值，即为反应OD差值。此时若未知样品的反应OD差值大于弱阳性标准血清的反应OD差值，就是阳性反应。若未知样品的反应OD差值小于弱阳性标准血清的反应OD差值，是为阴性反应。若准备已知浓度的标准液，例如：0单位/毫升、1单位/毫升、2单位/毫升、4单位/毫升、8单位/毫升、16单位/毫升，就可依据由标准液所绘成的标准曲线而计算出被测样品的浓度。本发明所称的显示载体是一种微粒或酵素：该微粒可为乳胶微粒、脂微粒、聚乙烯甘醇微粒、NAD微粒、碳微粒、染料微粒、酵素、NADH微粒等，大小是介于0.001～20微米之间，该比色范围可介于260纳米～840纳米之间。本发明所称的抗体为上述一种或多种的抗被糖化蛋白抗体；当然，若于显示载体上固定一种结构式的被糖化蛋白抗原，或多种结构式的被糖化蛋白抗原，即可用于测定待测样品中是否含有抗被糖化蛋白抗体。当然使用竞争法，亦将获得相同的实验结果，例如：依照上述的测定方法，将一定量的已知浓度的被糖化蛋白抗原或抗体各与待测样品、阳性标准液、阴性标准液，同时与显示载体(其上固定有抗体或抗原)悬浮液反应，即可测定结果。

于本发明另一部份中，提出一种使用抗被糖化蛋白抗体(被糖化蛋白抗原)来测定被糖化蛋白抗原(抗被糖化蛋白抗体)的免疫分析试验条，其是利用免疫色层分析技术来测定被糖化蛋白抗原或抗体，例如：最终糖化蛋白抗原或抗体。图1所示的免疫色层试验条10之13为具多孔性的纤维膜，其下联结有一底板17。11为样品吸水垫，位于试验条10最前端，并与具多孔性的纤维膜13重叠。12为显示载体纤维块，其上浸润有蓝色显示载体，且该载体上固定有抗体或抗原。显示载体纤维块12位于样品吸水垫11之下及多孔性纤维膜13之上，并与样品吸水垫11及多孔性纤维膜13相互重叠连接。14为判读区段(可为线或点)，其上固定有抗体或抗原，判读区段14位于多孔性纤维膜13表面上的一段内；判读区段14前端朝向显示载体纤维块12，后面适当距离处设为对照区段15(可为线或点)，亦位于多孔性纤维膜13表面的一段内；对照区段15上固定有抗体或抗原，其后端朝向一吸收垫16。上述的多孔性纤维膜13的材质为尼龙纤维膜、硝酸纤维膜、聚脂纤维膜、纤维素材质膜、或化学合成膜…等。

图2所示为内装免疫试验条10的一防水装置盒20。其中，21为样品孔。22为反应区孔。

图3为一内装有一试验条10的防水装置盒20的立体图。其中，样品吸水垫11是位于样品孔21之下，并与之接触。样品孔21的面积应小于样品吸水垫11。判读区段14及对照区段15位于反应区孔22内，但不与之接触，可肉眼直接观察。16吸收垫位于装置盒20的最后端内。由于显示载体纤维块12上的蓝色显示载体上固定有抗体或抗原，所以当显示载体纤维块12上的蓝色显示载体遇到待测样品时，此蓝色显示载体将可在试验条10上自由的往多孔性纤维膜13及吸收垫16的方向流动；底板17与装置盒20内部的底面相连接，且底板17上方连接有多孔性纤维膜13，该多孔性纤维膜13上设定有判读区段14及对照区段15，并经阻断蛋白完全覆盖占满其余的空白处。

当样品孔21处加入含被测物的待测液体样品时，此待测样品除了马上可与显示载体纤维块12上的蓝色显示载体所固定的抗体或抗原反应之外，并将带动蓝色显示载体往吸收垫16移动。若待测样品含有被糖化蛋白抗原，例如：最终糖化蛋白抗原时，会马上与蓝色显示载体上固定的一种抗被糖化蛋白抗体或多种抗被糖化蛋白抗体反应，并占满抗被糖化蛋白抗体的抗原结合部位；由于蓝色显示载体上固定的一种抗被糖化蛋白抗体或多种抗被糖化蛋白抗体的结合部位，将完全与被糖化蛋白抗原(例如：最终糖化蛋白抗原)结合并占满，因此无法与判读区段14上所固定的一种被糖化蛋白抗原或多种被糖化蛋白抗原结合，蓝色显示载体即可完全地通过判读区段14该线上不形成可见的蓝色线条；蓝色显示载体继续移动，并将与对照区段15上固定的抗体或抗原(例如：抗老鼠免疫球蛋白G抗体)结合，而形成一条肉眼可见的蓝色线条；因此判读区段14无蓝色线条出现即为阳性反应，而对照区段15不管阳性反应或阴性反应都将出现蓝色线条，用来作为自我品质的测试；反之，若被测物不出现在待测样品内，则部份蓝色显示载体上固定的一种或多种抗被糖化蛋白抗体，将与判读区段14上所固定的被糖化蛋白抗原结合(例如：最终糖化蛋白抗原)，形成一条肉眼可见的蓝色线条，其余的蓝色显示载体将结合于对照区段15上，是为竞争法反应。因此判读区段14出现蓝色线条是为阴性反应；吸收垫16则用来吸收所有流到末端的液体，使之持续形成毛细反应。

当然，以上述为例，只要将判读区段14所固定的被糖化蛋白抗原改成固定一种或多种抗被糖化蛋白抗体，即可执行三明治测定法。

本发明所用的多孔性纤维膜其孔径大小介于0.1微米—60微米之间。本发明所用的显示载体，为—种具颜色的微细颗粒、萤光物质或酵素；具颜色的微细颗粒其大小在0.01微米—20微米之间。本发明所称的微细颗粒可以是：乳胶微粒、染料微粒、脂微粒、金溶胶微粒，碳黑微粒、聚合微粒等。本发明所用的显示载体为—种具颜色的微细颗粒时，可直接判读结果，称为直接显示载体；本发明所用显示载体为一种酵素时，需经由呈色剂反应后，使能判读结果，称为间接显示载体。本发明所用的底板为一种具防水性的塑胶板或防水纸类。本发明所用的样品吸水垫及吸收垫其材质不限，但吸水性越高越好。本发明所用的显示载体纤维块为一种水不溶性的纤维。

本发明将于下文以非限制性实施例予以进一步阐明。

实施例一

抗被糖化蛋白抗体的培养

将已纯化的抗原(例如最终糖化蛋白抗原)直接经兔子或山羊免疫而获得的(例如：多株抗体)，或经由小鼠免疫，制成融合瘤细胞，进而获得的(例如：单株抗体)。

实施例二

被糖化蛋白抗原的免疫凝集检定

将显示载体微粒稀释为3％的浓度，显示载体可选用0.8微米的聚苯乙烯颗粒或其他具颜色的微粒。将实施例一中所得抗最终糖化蛋白抗体用磷酸缓冲液稀释成2毫克/毫升的浓度。各取10毫升置于玻璃管内混合之，并静置8小时。再加入1克的牛白蛋白于玻璃管内并混合之，并静置8小时。使用12000rpm离心30分钟后去除上清液，重复二次。加入2％牛白蛋白溶液至总量20毫升为止。再经由音震处理使成均匀悬浮液，制成显示载体悬浮液。

准备三支阴性标准血清其最终糖化蛋白抗原含量各为0单位/毫升，1单位/毫升，和2.5单位/毫升及一支弱阳性标准血清，其最终糖化蛋白抗原含量为5单位/毫升及一支强阳性标准血清，其最终糖化蛋白抗原含量为16单位/毫升及一支未知待测样品。

各取100微升的血清样品放入个别的检测原件上。接著在每一样品检测原件上，再加入50微升的显示载体悬浮液，并涂散开来，待3—5分钟后以肉眼判读结果。

结果：

	显示载体凝集悬浮液
		阴性标准血清0单位/毫升	-
阴性标准血清1单位/毫升	-
		阴性标准血清2.5单位/毫升	-
弱阳性血清检体5单位/毫升	+
		强阳性标准血清16单位/毫升	+
未知待测样品	+

有凝集反应者，为最终糖化蛋白抗原试验呈阳性反应。无凝集反应者，为最终糖化蛋白抗原试验呈阴性反应。将最低阳性反应值设定于5单位/毫升，则未知待测样品呈阳性反应时，表示此待测样品内所含最终糖化蛋白抗原其浓度≥5单位/毫升。

实施例三

被糖化蛋白抗原的免疫比浊或浊度检定

取显示载体微粒0.2克，置入1升蒸馏水制成悬浮液。显示载体可选用0.3微米的白色聚苯乙烯颗粒(亦可选用其他在不同波长下，具颜色的微粒)。加入30毫克的抗最终糖化蛋白抗体，充分混合之，并静置18小时。再加入4克的牛白蛋白混合之，并静置18小时。使用12000rpm离心30分钟，去除上清液，连续重复三次。加入1％白蛋白溶液至总量1升为止。再经由音震处理使成均匀悬浮液，制成显示载体悬浮液。

准备六支标准血清其最终糖化蛋白抗原含量各为0单位/毫升、1单位/毫升、2单位/毫升、4单位/毫升、8单位/毫升和16单位/毫升及一支未知待测样品。

各取250微升的显示载体悬浮液加到不同的比色试管之内，各取20微升的前述标准血清加到个别比色试管之内，再取20微升的未知待测样品，加到另一比色试管内。

将比浊比色分析仪先用340纳米波长空气归零。当分别加入20微升的标准血清及未知待测样品后，应马上将个别比色试管，用比浊比色分析仪测定其OD值(吸光值)，并于240秒时，再测定一次OD值(吸光值)。将第二次减去第一次的OD值，即得出反应OD差值。

将阳性反应值定于≥5单位/毫升，将各标准血清所得到的各个反应OD值，画成标准曲线图。就可依据由标准血清所绘成的标准曲线而计算出未知待测样品的定量浓度。未知待测样品的浓度约为9单位/毫升，呈阳性反应。

结果：

	0秒OD值	240秒OD值	反应OD值	单位
					标准血清A	0.86	0.85	0.01	0
标准血清B	0.92	0.87	0.05	1
					标准血清C	0.98	0.82	0.16	2
标准血清D	1.02	0.83	0.19	4
					标准血清E	0.94	0.69	0.25	8
标准血清F	0.99	0.69	0.3	16
					未知待测样品G	1.07	0.81	0.26	9

根据本实施例，亦可只准备阴性标准血清0单位/毫升及阳性标准血清5单位/毫升来执行定性测定。若未知待测样品的反应OD值≥阳性标准血清5单位/毫升的反应OD值，即为阳性反应。反之为阴性反应。

实施例四

以免疫试验条检定被糖化蛋白抗原

取3％的蓝色显示载体微粒或其他具颜色的微粒，该显示载体可选用0.3微米的聚苯乙烯颗粒。将抗最终糖化蛋白抗体用磷酸缓冲液稀释成2毫克/毫升的浓度。各取10毫升置于玻璃管内混合之，并静置8小时。再加入1克的牛白蛋白于玻璃管内混合之，并静置8小时。使用12000rpm离心30分钟，并去除上澄液，连续重复二次。加入2％牛白蛋白、10％蔗糖溶液至总量20毫升止。再经由音震处理使成均匀悬浮液，制成显示载体悬浮液。

将0.4公分宽，15公分长的显示载体纤维块条完全浸入含10％蔗糖的显示载体悬浮液，取出置入干燥箱中令其室温干燥。待干后，再置于冷冻干燥机中。干燥2小时后，置于含干燥剂的密闭封袋并保存于4℃下。

直接将一预定量的显示载体悬浮液置于样品吸水垫上或亦可置于多孔性纤维膜的最前端，但较不利于大量生产。

取一片长15公分，宽4.6公分的硝酸纤维膜于第1.8公分处喷涂固定最终糖化蛋白抗体(Anti-AGEs Ab)溶液，此喷涂线又称判读区段。再将含抗-兔子IgG(Anti-rabbit IgG)喷涂固定于第3.4公分处。此喷涂线又称对照线。再将硝酸纤维膜数片浸润于含5％牛白蛋白的磷酸缓冲液溶液。浸润至少2小时。接著取出硝酸纤维膜于清水溶液清洗，并置入干燥箱内室温干燥，再贴粘于塑胶底板上，从底板的第2公分处粘起，让其完全对齐覆盖住底板。再置入冷冻干燥机，干燥2小时后，置于含干燥剂的密闭封袋中保存在4℃下。

取一样品吸水垫长15公分，宽2公分。此样品吸水垫或吸水垫的材质不限，但吸收性越高越好，且样品吸水垫的大小是可变的。

将显示载体纤维块置于多孔性纤维膜的前端及底板之上，且显示载体纤维块与硝酸纤维膜相互重叠连接，再将样品吸收垫粘盖于显示载体纤维块及底板之上，并与显示载体纤维块相互重叠连接。最后再把吸收垫粘于多孔性纤维膜完成品的末端，底板末端之上。吸收垫至少一部份面积与纤维膜相互重叠连接。再裁成宽0.5公分的试验条完成品。

将试验条完成品置入一防水装置盒内，此装置盒的样品孔位置应于样品吸水垫之上，并相互接触。样品孔面积应小于样品吸水垫。而试验条的判读区段及对照线，应位于装置盒反应区孔之内，肉眼可见之处。

判读区段的前方为样品吸水垫。显示载体纤维块并与硝酸纤维膜、样品吸水垫相互重叠接触。判读区段之后为对照线。对照线之后为吸水垫。当加入待测样品后，约5分钟内可用肉眼于反应区孔内，直接判读结果。

于样品孔加入150微升阴性液体血清样品，蓝色的显示载体将因毛细原理而向反应线(判读区段与对照线)移动，并进入最后端的吸收垫。此阴性样品因不含最终糖化蛋白抗原，因此蓝色显示载体上固定的抗最终糖化蛋白抗体无法与判读区段所固定的抗最终糖化蛋白抗体结合，而不形成一条肉眼可见的蓝色线条。蓝色显示载体将与对照线上固定的抗-兔子IgG抗体结合形成一条肉眼可见的蓝色线条，是为阴性反应。吸收垫将吸收所有流来的液体，使之持续形成毛细反应。

于样品孔加入150微升的阳性血清样品，蓝色显示载体在未到达判读区段之前，其上固定的抗最终糖化蛋白抗体，将与血清样品中的最终糖化蛋白抗原结合。当蓝色显示载体移动到达判读区段，判读区段上固定的抗最终糖化蛋白抗体将再与最终糖化蛋白抗原结合，而形成一条肉眼可见的蓝色线条。剩余的蓝色显示载体将通过判读区段，并将结合于对照线上，是为三明治法阳性反应。

当然，直接取试验条完成品，将样品垫前段与待测样品接触，一段反应时间；亦可完成如上述的实验结果。

如之前所述，除了使用三明治法可完成以上的试验外，利用竞争法也是可行的。依照实施例四，只要更换判读区段上所喷涂的固定物质，例如，最终糖化蛋白抗原，即能执行竞争法的实验。

综上所述，经由本发明特定的试剂及方法来检验，可得知糖尿病的最终糖化蛋白是否存在，因而可让医护人员于最早的时期，防止糖尿病人并发症的进行或阻断并发症的继续进行。

Claims (47)

1.一种用以测定被糖化蛋白的试剂，其包括：

一种显示载体的悬浮液；和固定于该显示载体表面上的一亲和性物质；于是可经由待测样品与该试剂接触之后，有否产生凝集现象，来判断该待测样品中被糖化蛋白抗原或抗体的存在与否。

2.根据权利要求1所述的试剂，其特征是所述显示载体为一种具颜色的微粒。

3.根据权利要求1所述的试剂，其特征是所述显示载体的大小是介于0.01微米～60微米之间。

4.根据权利要求1所述的试剂，其特征是其可用来测定被糖化蛋白抗原或抗被糖化蛋白抗体。

5.根据权利要求1所述的试剂，其特征是所述亲和性物质为一种被糖化蛋白抗原。

6.根据权利要求1所述的试剂，其特征是所述亲和性物质为多种结构式的被糖化蛋白抗原。

7.根据权利要求1所述的试剂，其特征是所述亲和性物质为一种抗被糖化蛋白抗体。

8.根据权利要求1所述的试剂，其特征是所述亲和性物质为多种抗被糖化蛋白抗体。

9.根据权利要求1所述的试剂，其特征是其应用竞争法来测定被糖化蛋白抗原或抗被糖化蛋白抗体。

10.根据权利要求1所述的试剂，其特征是其应用三明治法来测定被糖化蛋白抗原或抗被糖化蛋白抗体。

11.一种测定被糖化蛋白的试剂，包括：

一种显示载体悬浮液；及固定于该显示载体表面上一亲和性物质；

藉此将某种待测样品与该试剂接触之后，可由一测定吸光度的装置测定该显示载体有否产生吸光度变化，来判断该被糖化蛋白抗原或抗体的存在与否。

12.根据权利要求11所述的试剂，其特征是所述显示载体为一种微粒或酵素。

13.根据权利要求12所述的试剂，其特征是所述微粒为一种乳胶微粒、脂微粒、染料微粒、聚乙烯甘醇微粒、NADH微粒、NAD微粒、聚合微粒或碳微粒。

14.根据权利要求11所述的试剂，其特征是所述显示载体的吸光度是介于260纳米-840纳米之间。

15.根据权利要求11所述的试剂，其特征是所述显示载体的大小是介于0.001微米～20微米之间。

16.根据权利要求11所述的试剂，其特征是所述亲和性物质为一种被糖化蛋白抗原。

17.根据权利要求11所述的试剂，其特征是所述亲和性物质为多种结构式的被糖化蛋白抗原。

18.根据权利要求11所述的试剂，其特征是所述亲和性物质为一种抗被糖化蛋白抗体。

19.根据权利要求11所述的试剂，其特征是所述亲和性物质为多种抗被糖化蛋白抗体。

20.根据权利要求11所述的试剂，其特征是所述被用来测定被糖化蛋白抗原或抗被糖化蛋白抗体。

21.根据权利要求20所述的试剂，其特征是所述测定是竞争法来进行。

22.根据权利要求20所述的试剂，其特征是所述测定是以三明治法来进行。

23.一种测定被糖化蛋白的免疫色层分析装置，包括：

一试验条，该试验条包括：

一底板；及位于该底板之上的组成零件，该组成零件包括：

a)样品吸水垫；位于试验条最前端，尾端并与一多孔性纤维膜的前端上下对应；

b)多孔性纤维膜；其是位于该底板之上，该多孔性纤维膜上设有判读区段，且判读区段前方设有显示载体纤维块；

c)显示载体纤维块，其位于样品吸水垫尾端，及多孔性纤维膜前端之间，且与该两者相互重叠连接；其上载有显示载体，显示载体上固定有亲和物质；和

d)至少一固定物质，其位于多孔性纤维膜上的判读段内；

于是，以上述所构成的试验条当待测样品加入于吸水垫一段反应时候，判读区段有无反应色出现来判断该待测样品中是否存在被糖化蛋白抗原或抗体。

24.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述具多孔性纤维膜其材质为尼龙纤维膜、硝酸纤维膜、聚脂纤维膜、纤维素材质膜、化学聚合膜。

25.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述多孔性纤维膜的孔径大小是在0.1微米-60微米之间。

26.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述显示载体为一种具颜色的微粒、酵素或萤光物质。

27.根据权利要求26所述的免疫色层分析装置，其特征是所述微粒为乳胶微粒、染料微粒、金溶胶微粒、碳黑微粒、金属微粒、脂微粒或聚合微粒。

28.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述显示载体的大小在0.01微米～20微米之间。

29.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述亲和物质为一种构造式的被糖化蛋白抗原。

30.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述亲和物质为多种构造式的被糖化蛋白抗原。

31.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述亲和物质为一种抗被糖化蛋白抗体。

32.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述亲和物质为多种抗被糖化蛋白抗体。

33.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述固定物质为一种构造式的被糖化蛋白抗原。

34.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述固定物质为多种构造式的被糖化蛋白抗原。

35.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述固定物质为一种抗被糖化蛋白抗体。

36.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述固定物质为多种抗被糖化蛋白抗体。

37.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是该装置被用来测定被糖化蛋白抗原或抗被糖化蛋白抗体。

38.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述显示载体为一种直接显示载体。

39.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是所述显示载体为一种间接显示载体。

40.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是在多孔性纤维膜的判读区段后方适当距离设有一对照区段，该对照区段上固定有抗体或抗原。

41.根据权利要求23所述的免疫色层分析装置，其特征是可经由光学测定结果或定量。

42.一种用以测定被糖化蛋白的方法，主要是利用一种具显示载体的悬浮液，使该显示载体固定有亲和性物质，再将待测样品与上述悬浮液混合，视该混合液是否产生凝集现象，以判断待测样品中是否存在被糖化蛋白抗原或抗体。

43.根据权利要求42所述的方法，其特征是所述亲和性物质为抗被糖化蛋白抗体。

44.根据权利要求42所述的方法，其特征是所述亲和性物质为被糖化蛋白抗原。

45.一种用以测定被糖化蛋白的方法，主要是利用一种具显示载体的悬浮液，使该显示载体固定有亲和性物质，适当量的显示载体的悬浮液与适量的待测样品、阳性标准液、阴性标准液于不同比色管内混合，在通过适当吸光度测定装置测定其个别的吸光度值变化，以进行比浊或浊度法的测定。

46.根据权利要求45所述的方法，其特征是所述亲和性物质为抗被糖化蛋白抗体。

47.根据权利要求45所述的方法，其特征是所述亲和性物质为被糖化蛋白抗原。

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