CN113366314A - 可控制样本的展开的、用于提取并测定糖链抗原的免疫色谱试剂盒 - Google Patents

可控制样本的展开的、用于提取并测定糖链抗原的免疫色谱试剂盒 Download PDF

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Abstract

本发明的目的在于，提供一种用于控制免疫色谱试验片上的样本的展开，并适当地控制基于酸性试剂、亚硝酸盐和中和试剂的处理的免疫色谱试剂盒及使用该试剂盒的免疫色谱方法。该免疫色谱试剂盒包括：(i)亚硝酸盐溶液或者酸性溶液；以及(ii)免疫色谱试验片，包括：样品垫，用于添加与亚硝酸盐或者酸性溶液混合的样本；标记体区域，包含标记糖链抗原的抗体的标记抗体；以及检测区域，将所述糖链抗原的抗体进行了固相化，在检测区域中形成抗体‑糖链抗原‑标记抗体的复合体，来测定糖链抗原，该免疫色谱试验片在所述标记体区域的上游具有浸渗有中和试剂的区域，而且，在该浸渗有中和试剂的区域的上游，在使用与亚硝酸盐混合而成的样本时，具有浸渗有固态酸性试剂的区域，在使用与酸性溶液混合而成的样本时，具有浸渗有亚硝酸盐的区域，该免疫色谱试验片用于提取样本中的糖链抗原进行测定，其中，亚硝酸盐或酸性溶液包含选自由聚氧乙烯辛基苯基醚、季铵化合物、磷酸、氢氧化钠、N‑乙酰基‑L‑半胱氨酸、NaCl、PVA、BSA以及NaBr构成的组中的一个以上。

Description

可控制样本的展开的、用于提取并测定糖链抗原的免疫色谱 试剂盒
技术领域
本发明涉及一种能够在免疫色谱试验片上进行糖链抗原的亚硝酸提取处理的、用于提取并测定糖链抗原的免疫色谱试剂盒。
背景技术
很多以免疫色谱法为原理的快速诊断试剂作为快速、简便地测定病毒或细菌感染症来确定治疗方案的一种手段，而被广泛使用。
一般的以免疫色谱法为原理的快速诊断试剂能够通过使样本悬浮于样本悬浮液后，将该悬浮液供给至免疫色谱试验片来快速且简便地进行测定。
为了检测A组β溶血性链球菌(A组β溶链菌)、口腔内链球菌等属于链球菌属的微生物，需要提取糖链抗原，并对糖链抗原进行测定。
例如，报告了通过如下操作即可在免疫色谱试验片上进行亚硝酸提取处理的方法：预先使免疫色谱试验片含有亚硝酸钠和中和试剂，从而仅由将样本悬浮于乙酸等酸性溶液而供给至免疫色谱试验片，(专利文献1)。
另外，还有如下方法：预先使免疫色谱试验片含有酸性试剂和中和试剂，将样本悬浮于亚硝酸盐并供给至免疫色谱试验片。
进一步报告了如下方法：在免疫色谱试验片上高效地进行糖链抗原的亚硝酸提取处理(专利文献2～4)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：国际公开WO2005/121794号公报
专利文献2：日本特开2018-151329号公报
专利文献3：日本特开2018-151330号公报
专利文献4：日本特开2018-151331号公报
发明内容
发明所要解决的技术问题
目前市售的以免疫色谱法作为原理的A组β溶链菌(Strep A)抗原检测试剂大多采用如下技术：使混合亚硝酸盐溶液(R1)与酸溶液(R2)而生成的酸性的亚硝酸通过免疫色谱法用检测试剂(试验片)上所存在的干燥状态的中和剂(R3)进行中和反应；还已知通过在衬垫涂布R1或者R2，而省略R1和R2的准备制备和提取工序的一步化的技术。在一步的Strep A抗原检测试剂中，为了在测试装置上进行提取工序，在滴加样品后，必须确保一定的提取时间。但是，若使用粘性高的样本，则确认到样品液停留于装置上的时间过长的现象。由此，存在如下问题：(1)样品不展开；(2)虽然展开，但由于展开延迟而在测定开始后5分钟时的灵敏度下降；(3)虽然展开，但发生非特异性反应，等等。
本发明的目的在于，提供一种用于控制在免疫色谱试验片上的样本的展开，并适当地控制基于酸性试剂、亚硝酸盐和中和试剂的处理的免疫色谱试剂盒及使用该试剂盒的免疫色谱方法。
用于解决问题的技术方案
本发明人等深入研究了控制免疫色谱试验片上的样本的展开，并适当地控制基于酸性试剂、亚硝酸盐和中和试剂的处理的方法。
其结果是，发现通过预先在样本悬浮液中添加表面活性剂、盐、化学合成物质(PVA)、蛋白质性物质(BSA)等化合物，能够缩短展开开始时间而从较早的时间段进行条带判定，另外，也能够减轻非特异反应，而完成了本发明。
即，本发明为如下所述。
[1]一种免疫色谱试剂盒，包括：
(i)亚硝酸盐溶液或者酸性溶液，以及
(ii)免疫色谱试验片，包括：样品垫，用于添加与亚硝酸盐或者酸性溶液混合而成的样本；标记体区域，包含标记对于糖链抗原的抗体的标记抗体；以及检测区域，将对于所述糖链抗原的抗体进行了固相化，在检测区域中形成抗体-糖链抗原-标记抗体的复合体，来测定糖链抗原，该免疫色谱试验片在所述标记体区域的上游具有浸渗有中和试剂的区域，而且，在浸渗有该中和试剂的区域的上游，在使用与亚硝酸盐混合而成的样本时，具有浸渗有固态酸性试剂的区域，在使用与酸性溶液混合而成的样本时，具有浸渗有亚硝酸盐的区域，该免疫色谱试验片用于提取并测定样本中的糖链抗原，其中，
亚硝酸盐或酸性溶液包含选自由聚氧乙烯辛基苯基醚、季铵化合物、磷酸、氢氧化钠、N-乙酰基-L-半胱氨酸、NaCl、PVA、BSA以及NaBr构成的组中的一个以上。
[2]根据[1]的免疫色谱试剂盒，其中，在样品垫上存在浸渗有固态酸性试剂或者亚硝酸盐的区域。
[3]根据[1]或[2]的免疫色谱试剂盒，其中，固态酸性试剂选自由丙二酸、苹果酸、马来酸、柠檬酸和酒石酸构成的组。
[4]根据[1]～[3]中任一项的免疫色谱试剂盒，其中，中和试剂为三羟甲基氨基甲烷或氢氧化钠。
[5]根据[1]～[4]中任一项的免疫色谱试剂盒，其中，糖链抗原为原生动物、真菌、细菌、支原体、立克次体、衣原体或病毒的糖链抗原。
[6]根据[1]～[5]中任一项的免疫色谱试剂盒，其中，聚氧乙烯辛基苯基醚为Triton X，季铵化合物为苯扎氯铵或苄索氯铵。
[7]一种测定样本中的糖链抗原的方法，使用[1]～[6]中任一项的免疫色谱试剂盒，通过免疫色谱法测定样本中的糖链抗原，上述方法包括：
在免疫色谱试验片具有浸渗有固态酸性试剂的区域时，将样本与亚硝酸溶液混合，当免疫色谱试验片具有浸渗有亚硝酸盐的区域时，将样本与酸性溶液混合，并添加至所述免疫色谱试验片的样品垫，
在浸渗有固态酸性试剂的区域或浸渗有亚硝酸盐的区域中，通过由亚硝酸盐与固态酸性试剂反应产生的亚硝酸的作用，从样本中提取糖链抗原，在浸渗有中和试剂的区域中，包含所述糖链抗原的酸性溶液被中和，
在检测区域中，形成抗体-糖链抗原-标记抗体的复合体，通过免疫色谱法控制免疫色谱试验片上的样本的展开速度、方向，并控制基于酸性试剂、亚硝酸盐和中和试剂的处理，对样本中的糖链抗原进行测定。
本说明书包含作为本申请的优先权的基础的日本专利申请第2019-012912号的公开内容。
发明的效果
能够提供一种通过在亚硝酸盐溶液(R1)或酸性溶液中添加表面活性剂、盐、N-乙酰基-L-半胱氨酸、BSA等蛋白质性物质、其他的化学合成剂中的任一种，即使在使用粘性高的咽拭子样本的情况下，也能够防止由展开不良、展开延迟导致的灵敏度不足、非特异反应的装置。
附图说明
图1是示意地示出具有固态酸性试剂区域和中和试剂区域的免疫色谱试验片，且示出固态酸性试剂区域兼做样品垫的免疫色谱试验片(两片垫试验片)的结构的图。
图2是示意地示出具有固态酸性试剂区域和中和试剂区域的免疫色谱试验片，且示出固态酸性试剂区域和中和试剂区域兼做样品垫的免疫色谱试验片(一片垫试验片)的结构的图。
图3是示意地示出具有固态酸性试剂区域和中和试剂区域的免疫色谱试验片，且示出固态酸性试剂区域兼做中和试剂区域，样品垫单独存在的免疫色谱试验片(两片垫试验片)的结构的图。
图4是示意地示出PET片材贴附于固态酸性试剂区域与中和试剂区域之间的、具有固态酸性试剂区域和中和试剂区域的免疫色谱试验片的结构的图。
图5是示意地示出PET片材贴附于固态酸性试剂区域与中和试剂区域之间的、具有固态酸性试剂区域和中和试剂区域的免疫色谱试验片的结构的图，且是表示各部分间的距离的图。
具体实施方式
下面，详细地说明本发明。
本发明涉及一种免疫色谱试剂盒，以在免疫色谱试验片上能进行糖链抗原的亚硝酸提取处理的方式加以简化，并能够快速且准确地测定作为被检测物质的糖链抗原。
该免疫色谱试剂盒包括浸渗有亚硝酸盐或酸性试剂的免疫色谱试验片以及亚硝酸溶液或酸性溶液。
免疫色谱试验片具备：具有将捕捉被检测物质(抗原等)的抗体(抗体1)固定化的检测区域的支撑体、具有能够移动的标记抗体(抗体2)的标记体区域、用于添加样本的样品垫、吸收展开后的样本液的吸收带、以及用于将这些部件贴合为一体的后衬片材等。
本发明的免疫色谱试验片也可以容纳于存放容器内，通过该存放容器能够防止例如由于紫外线、空气中的湿气所导致的劣化。另外，在使用具有污染性、感染性的样本试样的情况下，通过存放容器能够防止进行分析的试验者的污染或感染。例如，使用适当大小的树脂制壳体作为存放容器，将本发明的装置收纳于该壳体中即可。另外，可以用树脂制成的膜等(PET片材)覆盖将抗原或抗体固定化的试验片的表面。有时将存放容器和容纳于其中的试验片作为一体而称为免疫色谱装置。
需要说明的是，检测区域的数量和标记体区域所包含的标记抗体的种类不限于一个，可以通过使用与多个被检测物质对应的抗体，利用同一试验片对两个以上的抗原进行测定。
支撑体是具有将用于捕捉被检测物质(抗原)的抗体固定化的性能的材料，且具有不会妨碍液体在水平方向上通行的性能。优选为具有毛细管作用的多孔薄膜(膜)，且为能够通过吸收来输送液体和分散于其中的成分的材料。构成支撑体的材质没有特别限定，例如可列举：纤维素、硝基纤维素、纤维素乙酸酯、聚偏二氟乙烯(PVDF)、玻璃纤维、尼龙、聚酮等。其中，更优选为使用硝基纤维素制成薄膜或膜。将抗体固定化的膜被称为抗体固定化膜。
标记体区域由包括标记抗体的多孔基材构成，基材的材质可以使用通常使用的玻璃纤维(glass fiber)、无纺布等。为了浸渗大量的标记抗体，优选该基材的厚度为0.3mm～0.6mm左右的垫状。将浸渗有标记抗体并干燥后的多孔基材也称为干燥垫。
标记抗体的标记多使用碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶之类的酶、胶体金之类的胶体金属、二氧化硅颗粒、纤维素颗粒、磁性颗粒、荧光颗粒、着色聚苯乙烯颗粒和着色胶乳颗粒等。在使用胶体金属颗粒、着色聚苯乙烯颗粒或着色胶乳颗粒等着色颗粒的情况下，由于这些标记试剂通过进行凝聚而发生着色，因此对该着色进行测定。将对抗体进行了固定化的颗粒称为抗体固定化颗粒。
检测区域是指将捕捉被检测物质(抗原)的抗体固定化的支撑体的一部分的区域。在检测区域中，至少设置一个将用于捕捉抗原的抗体进行了固定化的区域。检测区域只要包含于支撑体即可，只要在支撑体上对抗体进行固定化即可。
样品垫是用于添加样本的部位，且是多孔材料。样品垫是位于免疫色谱试验片的最上游的部位。该材料可以使用通常使用的滤纸、玻璃纤维、无纺布等。为了在免疫测定中使用大量的样本，优选为厚度0.3mm～1mm左右的垫状。样本中还包含将样本悬浮于其他的溶液而得到的试样等使用样本制备而成的试样。
吸收带是用于吸收被供给至支撑体且在检测区域未参与反应的成分的部件。材料可以使用由通常的天然高分子化合物、合成高分子化合物等构成的保水性高的滤纸、海绵等，但为了促进样本的展开，优选吸水性高的物质。
后衬片材是用于将上述的所有的材料，即支撑体、样品垫、标记体区域、吸收带等局部重叠地贴附并固定的部件。关于后衬片材，只要这些材料以最佳的间隔配置并固定即可，不一定是必要的，但从制造上或者使用上的便利性来看，优选通常使用后衬片材。
本发明的免疫色谱试验片还可以存在对照显示区域(部件)。对照显示区域是表示准确实施了试验的部位。例如，对照显示区域存在于检测区域的下游，当样本试样通过检测区域到达对照显示区域时，通过着色等发现信号。在对照显示区域中，既可以预先将与结合有标记载体的抗体结合的物质固相化，也可以预先将当样本到达时颜色发生变化的pH指示剂等试剂固相化。在结合有标记载体的抗体是小鼠单克隆抗体的情况下，使用抗小鼠IgG抗体即可。
虽然免疫色谱试验片的大小没有被限定，但例如纵向长度为几cm～十几cm，横向长度为几mm～几cm左右。
在上述方式的试验片中，样本通过由样品垫、标记体区域、支撑体、检测区域、吸收带等一系列的连接形成的多孔流路。据此，在本方式中，这些全部成为样本移动区域。基于各构成材料的材质、方式，也可能为样本不渗透材料内部而在表面上通行的方式，但由于在本说明书中所定义的样本移动区域不考虑是材料的内部还是表面，因此该方式的试验片也包含于本说明书的范围内。
在使用本发明的免疫色谱试验片对样本中的糖链抗原进行测定的情况下，需要首先提取样本中的糖链抗原。糖链抗原的提取通过用亚硝酸处理包含糖链抗原的样本来进行。可以通过将亚硝酸钠等亚硝酸盐与酸进行混合而产生亚硝酸，用这样所产生的亚硝酸对包含糖链抗原的样本进行处理即可。提取出的抗原通过抗原抗体反应与在免疫色谱试验片上固相化的抗体结合，此时，反应体系中残留有酸时，反应体系呈酸性，抗原抗体反应受到阻碍。因此，需要中和反应体系中的酸。
在本发明中，在混合亚硝酸盐与酸而产生亚硝酸，通过该亚硝酸提取样本中的糖链抗原，并将酸中和后，使糖链抗原与在免疫色谱试验片上固相化的抗体结合，而对糖链抗原进行测定的方法中，列举以下的方法作为提取并测定糖链抗原的方法。在任一方法中，基于亚硝酸的糖链抗原的提取及中和在免疫色谱试验片上进行。为了在免疫色谱试验片上进行基于亚硝酸的糖链抗原的提取，只要在免疫色谱试验片上预先包含酸性试剂或亚硝酸盐即可。为了在免疫色谱试验片上进行中和，只要在免疫色谱试验片上预先浸渗中和试剂即可。
(A)预先混合样本与酸性溶液，添加至免疫色谱试验片的浸渗有亚硝酸盐和中和试剂的样品垫。若混合液到达浸渗有亚硝酸盐的区域，则亚硝酸盐与酸进行反应，产生亚硝酸，提取出样本中的糖链抗原。糖链抗原的提取液在免疫色谱试验片上的浸渗有中和试剂的区域得以中和，糖链抗原与在免疫色谱试验片上固相化的抗体结合，能够得以检测。在该方法中，作为所使用的酸性溶液，可列举：乙酸、盐酸、丙二酸、苹果酸、马来酸、柠檬酸、酒石酸等。
(B)预先混合样本与亚硝酸盐溶液，添加至免疫色谱试验片的浸渗有酸性试剂和中和试剂的样品垫。若混合液到达浸渗有酸性试剂的区域，则亚硝酸盐与酸进行反应，产生亚硝酸，而提取出样本中的糖链抗原。糖链抗原的提取液在免疫色谱试验片上的浸渗有中和试剂的区域得以中和，糖链抗原与在免疫色谱试验片上固相化的抗体结合，而能够得以检测。
关于用于进行上述(A)或(B)的方法的本发明的免疫色谱试验片，在相比标记体区域的更上游(样本流动的上游且存在样品垫的一侧)，即在样品垫内或样品垫与标记体区域之间浸渗有亚硝酸盐的免疫色谱试验片可以用于上述(A)的方法。另外，在样品垫内或样品垫与标记体区域之间浸渗有酸性试剂的免疫色谱试验片可以用于上述(B)的方法。需要说明的是，使用固态酸性试剂作为酸性试剂。通过这些方法，与被检试样的试验中供给的被检试样的量无关，能够准确且特异性地测定被检试样中的被检测物质。
将浸渗有固态酸性试剂的区域称为固态酸性试剂区域，将浸渗有酸性试剂的区域称为酸性试剂区域，将浸渗有中和试剂的区域称为中和试剂区域。
所述固态酸性试剂或亚硝酸盐可以浸渗于样品垫，也可以浸渗于样品垫以外的由无纺布等多孔材料构成的垫，将得到的浸渗有固态酸性试剂的多孔材料或浸渗有亚硝酸盐的多孔材料配置于样品垫与标记体区域之间，即标记体区域的上游侧。在此，浸渗有固态酸性试剂或亚硝酸盐的区域与样品垫或标记体区域可以接触，也可以不接触。在本发明中，将浸渗有试剂的区域也称为浸渗有试剂的垫。
所述中和试剂配置于相比浸渗有固态酸性试剂或亚硝酸盐的区域的更下游。中和试剂可以浸渗于支撑体，也可以浸渗于支撑体以外的由无纺布等多孔材料构成的垫，将得到的浸渗有中和试剂的多孔材料配置于浸渗有固态酸性试剂或亚硝酸盐的区域与标记体区域之间。即，在标记体区域的上游具有浸渗有中和试剂的区域，而且在该浸渗有中和试剂的区域的上游具有浸渗有固态酸性试剂或亚硝酸盐的区域。
在此，浸渗有中和试剂的区域与浸渗有固态酸性试剂或亚硝酸盐的区域或标记体区域可以接触，也可以不接触。
作为浸渗有亚硝酸试剂、酸性试剂或中和试剂的区域所使用的多孔材料的原材料，具体而言，可列举出由纤维素的棉纤维制成的滤纸或由玻璃纤维制成的玻璃滤纸等。
在具有固态酸性试剂区域或者亚硝酸盐区域以及中和试剂区域的免疫色谱试验片中，在支撑体上从上游起具有样品垫、固态酸性试剂区域或者亚硝酸盐区域、中和试剂区域、标记体区域、检测区域和吸收带，固态酸性试剂区域或亚硝酸盐区域也可以位于样品垫上。另外，样品垫、固态酸性试剂区域或者亚硝酸盐区域、中和试剂区域、标记体区域、检测区域和吸收带可以相邻的区域彼此接触，也可以不接触。
本发明所使用的固态酸性试剂在常温下为固态，在高温下不挥发。
作为本发明所使用的优选的固态酸性试剂，可列举出丙二酸、苹果酸、马来酸、柠檬酸、酒石酸。
另外，作为本发明所使用的优选的固态酸性试剂，例如如果使用柠檬酸之类的价数较高的酸，则可以用更少的量进行提取。另外，如果价数相同，则酸解离常数较小的例如马来酸、酒石酸的效率较好。
另外，作为本发明所使用的优选的固态酸性试剂，优选为在免疫色谱试验片上不会被着色之类的试剂，具体而言在干燥状态下为白色或不易被干燥热、氧化着色的试剂。
作为本发明所使用的亚硝酸盐，可列举出亚硝酸钠、亚硝酸钾等。
本发明所使用的固态酸性试剂或亚硝酸盐的使用量即浸渗于免疫色谱试验片的量没有被特别限定，通常，免疫色谱试验片的每一试验片为0.01μg～1mg左右，优选为0.1μg～0.1mg左右。最优选选择根据使用的固态酸性试剂或亚硝酸盐的种类、样本悬浮液的组分、添加量等能够得到效果的最佳的量。
为了使样品垫或多孔材料浸渗固态酸性试剂或亚硝酸盐，使固态酸性试剂或亚硝酸盐一次性溶解并涂布干燥。例如，涂布干燥0.1～几M的固态酸性试剂或亚硝酸盐溶液即可。
本发明所使用的中和试剂在常温下为固态，在高温下不挥发。将中和试剂也称为碱性试剂。
作为本发明所使用的优选的中和试剂，可列举出三碱(三羟甲基氨基甲烷)、氢氧化钠、磷酸氢二钾、柠檬酸三钠、在碱性区域具有缓冲性能的Good’s缓冲剂。
本发明所使用的中和试剂的使用量，即浸渗于免疫色谱试验片的量没有被特别限定，通常，免疫色谱试验片的每试验片为0.01μg～1mg左右，优选为0.1μg～0.1mg左右。最优选选择根据使用的中和试剂的种类、样本悬浮液的组分或添加量等能够得到效果的最佳的量。
为了使中和试剂浸渗于多孔材料，使中和试剂一次性溶解，并将溶液涂布于多孔材料，之后使其干燥即可。例如，涂布干燥0.1～几M的中和试剂溶液，优选为0.5～几M。
图1～3是示出了典型的免疫色谱试验片的一种优选方式的图。图1所示的免疫色谱试验片是浸渗有固态酸性试剂和中和试剂的免疫色谱试验片，但也可以浸渗亚硝酸盐来代替固态酸性试剂，在该情况下，成为浸渗有亚硝酸盐和中和试剂的免疫色谱试验片。即，在以下的试验片的说明中，有时设置亚硝酸盐试剂区域来代替固态酸性试剂区域。本领域技术人员能够适当地设计并制造浸渗有亚硝酸盐和中和试剂的免疫色谱试验片。需要说明的是，免疫色谱试验片不限定于图1～3所示的免疫色谱试验片。在图1中，1是指支撑体，2是指标记体区域，3是指检测区域，7是指吸收带，8是指后衬片材。
图1和2示出固态酸性试剂区域5兼做样品垫10的试验片。图1的A是顶视图，图1的B是剖视图。在图1的例子中，在标记体区域2的上游存在固态酸性试剂区域5和/或中和试剂区域6，使它们重叠，由此形成连续的横向流的流路。在图1所示的试验片中，固态酸性试剂区域5兼做样品垫10。即，固态酸性试剂区域5存在于样品垫10上。在该试验片中，由于固态酸性试剂区域5和中和试剂区域6分别设置于两片的多孔材料(垫)上，因此有时称为两片垫试验片。在固态酸性试剂区域的上游还可以存在样品垫。固态酸性试剂区域和样品垫可以分别存在。
在图2的试验片中，样品垫10兼做固态酸性试剂区域5和中和试剂区域6，固态酸性试剂区域5和中和试剂区域6存在于样品垫10上。图2的A是顶视图，图2的B是剖视图，图2的C示出中和试剂区域6与固态酸性试剂区域5或者亚硝酸试剂区域的位置关系。在该试验片中，由于固态酸性试剂区域5和中和试剂区域6设置于一片多孔材料(垫)上，因此，有时称为一片垫试验片。
在图3的试验片中，样品垫10与固态酸性试剂区域5和中和试剂区域6单独存在，固态酸性试剂区域5兼做中和试剂区域6，样品垫单独存在。使样品垫10未浸渗试剂，仅作为样品垫发挥功能。图3的A是顶视图，图3的B是剖视图，图3的C示出中和试剂区域6与固态酸性试剂区域5或者亚硝酸试剂区域的位置关系。在图3的试验片中，由于兼做固态酸性试剂区域和中和试剂区域的多孔材料(垫)与样品垫设置为单独的两片的多孔材料(垫)，因此可以称为两片垫试验片。虽然在图中没有示出，但样品垫10、固态酸性试剂区域5和中和试剂区域6这三个也可以单独存在。
通过使样本或使用样本制备而成的试样与亚硝酸盐溶液接触混合，使样本悬浮于亚硝酸盐溶液，添加至样品垫10、兼做固态酸性试剂区域5的样品垫10、或兼做中和试剂区域6和固态酸性试剂区域5的样品垫10进行供给来开始测定。此时，将样本5～100μL与0.1M～8M的亚硝酸盐0.01～2mL混合，将5～200μL供给至样品垫10、兼做固态酸性试剂区域5的样品垫10、或兼做中和试剂区域6和固态酸性试剂区域5的样品垫10即可。作为亚硝酸盐，可列举出亚硝酸钠、亚硝酸钾等。
供给至样品垫10、兼做固态酸性试剂区域5的样品垫10、或兼做中和试剂区域6和固态酸性试剂区域5的样品垫10的作为被检测物质的包含糖链抗原的样本通过毛细管作用向样品垫10、兼做固态酸性试剂区域5的样品垫10、或者兼做中和试剂区域6和固态酸性试剂区域5的样品垫10以及中和试剂区域6展开。此时，在固态酸性试剂区域5与中和试剂区域6之间，存在作为PET片材的顶部层压片材。因此，样本从固态酸性试剂区域5向中和试剂区域6的流动受到抑制，并且，能够阻碍暂时进入中和试剂区域6的样本逆流至固态酸性试剂区域5。接着，样本依次向标记体区域2、支撑体1、吸收带7沿着水平方向展开。在固态酸性试剂区域5中，混合于样本的亚硝酸盐与固态酸性试剂区域5上的固态酸性试剂反应，产生游离的亚硝酸，通过该亚硝酸的作用，从样本提取出糖链抗原。提取的糖链抗原与酸性的展开溶液一起向中和试剂区域6展开移动，在中和试剂区域6中，包含糖链抗原的酸性的展开溶液的pH值被中和调整至中性区域。其结果是，糖链抗原在中性条件下进一步向下游展开移动。在标记体区域2中，在样本试样展开的同时标记抗体被释放至液体中并向支撑体1展开。当在样本试样中存在糖链抗原时，在支撑体1的检测区域3中，糖链抗原被捕捉抗体特异性地捕捉，并且，糖链抗原通过特异性反应与标记抗体形成复合体。由此，在检测区域3中实现通过糖链抗原的抗体的夹心，能够在检测区域3对标记抗体-糖链抗原复合物进行测定。
本发明的免疫色谱试剂盒其特征在于，包含悬浮样本的亚硝酸盐溶液(R1)或酸性溶液(R2)，在悬浮该样本的亚硝酸盐溶液(R1)或酸性溶液(R2)使用咽拭子样本等粘性高的样本的情况下，添加防止由展开不良、展开延迟导致的灵敏度不足、非特异反应的物质。作为这样的物质，可列举出表面活性剂、盐、N-乙酰基-L-半胱氨酸(NALC)、BSA(牛血清白蛋白)等蛋白质性物质、磷酸、氢氧化钠、聚乙烯醇(PVA)、其他的化学合成剂。表面活性剂没有限定，但可以使用非离子系表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂中的任一种。具体而言，可列举出：Triton X-100、Triton X-114等聚氧乙烯辛基苯基醚；苯扎氯铵、苄索氯铵等季铵化合物；Tween 20、Tween 80等聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯；Brij-35、Brij-58等聚氧乙烯烷基醚；胆酸钠、脱氧胆酸等具有类固醇骨架的胆酸系；十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠等阴离子系表面活性剂等表面活性剂。其中，优选为Triton X-100、Triton X-114等聚氧乙烯辛基苯基醚；苯扎氯铵、苄索氯铵等季铵化合物。作为盐，可列举出NaCl、NaBr等。例示出的上述化合物的添加浓度的一例在下面示出。
Triton X-100(Tx-100)：0.5～5％，优选为1～3％，进一步优选为2％
苯扎氯铵：5～20％，优选为5～15％，进一步优选为10％
苄索氯铵：10mM～200mM，优选为50～150mM，进一步优选为100mM
磷酸缓冲液：100～500mM，优选为150～350mM，进一步优选为250mM
NAOH：0.05N～3N，优选为0.05N～2N，进一步优选为0.1N～1N
NALC：10mM～200mM，优选为50～150mM，进一步优选为100mMNaCl：1～5N，优选为2～4N，进一步优选为3N
BSA：0.5～3％，优选为0.5～2％，进一步优选为1％
NaBr：10mM～200mM，优选为50～150mM，进一步优选为100mM。
在上述之中，尤其PVA的效果较高，优选PVA的皂化度为70～90mol·％。另外，在PVA的浓度为0.01％～5％下确认到效果，更优选为0.01％～0.05％。
根据使用本发明的免疫色谱试剂盒的方法，由于样本中的糖链抗原的提取在免疫色谱试验片上进行，因此在使用免疫色谱试验片进行测定之前无需预先提取样本中的糖链抗原，可以通过一步对样本中的糖链抗原进行测定。
在使用本发明的免疫色谱试剂盒的方法中，成为样本的生物试样没有特别限定，可列举出血清、血浆、血液、尿、便、唾液、组织液、脊髓液、擦拭液等体液等或其稀释物。
在使用本发明的免疫色谱试剂盒的方法中，成为测定对象的被检测物质为可以通过利用免疫分析，即抗原抗体反应的分析进行测定的糖链抗原。作为抗原，可列举出通过亚硝酸提取处理提取的存在于细菌的细胞壁的作为糖链抗原的多糖体等。包含这些物质的原生动物、真菌、细菌、支原体、立克次体、衣原体、病毒等也可以进行测定。通过使用本发明的免疫色谱试验片的方法，可以确认受试物的生物试样中是否含有来源于原生动物、真菌、细菌、支原体、立克次体、衣原体、病毒等的糖链抗原，在含有糖链抗原的情况下，可以判断为受试物患有原生动物、真菌、细菌、支原体、立克次体、衣原体、病毒等引起的感染病症。例如，能够检测有无感染A组β溶血性链球菌(Streptococcus pyogenes)、大肠杆菌、军团菌、弯曲杆菌等。
本发明的试剂盒不限于使亚硝酸盐或酸性试剂和中和试剂浸渗于免疫色谱试验片的情况，也可以在使多个，即2个至n个的不同效果的试剂，且应避免保存中的反应的试剂浸渗于免疫色谱试验片上时利用该试剂盒。
实施例
通过以下的实施例具体地说明本发明，但本发明不受这些实施例的限定。
在以下的实施例中，在没有特别说明的情况下，％表示w/v％。
实施例1
A组溶血性链球菌测定用免疫色谱试验片的例子
使用了以下的亚硝酸盐、固态酸性试剂和中和试剂作为亚硝酸盐、固态酸性试剂和中和试剂。
亚硝酸盐(液态试剂)3.0M亚硝酸钠
固态酸性试剂(浸渗于免疫色谱试验片)1.0M柠檬酸
中和试剂(浸渗于免疫色谱试验片)3.0M三碱(Trizma BASE)。
1.抗Streptococcus pyogenes(A组β溶血性链球菌)抗体在硝基纤维素膜(支撑体)上的固定化
准备将抗Streptococcus pyogenes抗体稀释的液体和抗兔IgG抗体，分别在后衬有PET膜的硝基纤维素膜的样品垫侧线状地涂布抗Streptococcus pyogenes抗体，在吸收带侧线状地涂布抗兔IgG抗体。之后，使硝基纤维素膜干燥，得到了抗Streptococcuspyogenes抗体固定化膜。在本实施例中，将该膜称为“抗体固定化膜”。
2.抗Streptococcus pyogenes抗体在着色聚苯乙烯颗粒上的固定化
向抗Streptococcus pyogenes抗体稀释液中加入着色聚苯乙烯颗粒，搅拌后加入碳二亚胺，进一步进行搅拌。通过离心操作去除上清液，再悬浮于缓冲液，得到了结合有抗Streptococcus pyogenes抗体的着色聚苯乙烯颗粒悬浮液。在本实施例中，将该颗粒称为“抗体固定化颗粒(着色聚苯乙烯)”。
3.抗Streptococcus pyogenes抗体固定化着色聚苯乙烯颗粒的涂布和干燥
将2中制成的抗体固定化着色聚苯乙烯颗粒悬浮液按规定量涂布于无纺布，并使其干燥。在本实施例中，将得到的无纺布称为“C.Pad”。
4.中和试剂(碱性试剂)的涂布
将上述的中和试剂(碱性试剂)涂布于滤纸。
5.浸渗有固态酸性试剂的无纺布的制作
将上述的固态酸性试剂涂布于无纺布。涂布后立即进行干燥，得到了作为浸渗有固态酸性试剂的区域的浸渗有固态酸性试剂的无纺布。
6.Streptococcus pyogenes检测用免疫色谱试验片的制作
在试纸条的后衬片材上，首先将抗体固定化膜(支撑体)贴附于距下游20mm的部分。
在膜的下游贴附用于吸收液体的吸收带。
在膜的上游，以与膜之间重叠2mm的方式，贴附涂布有结合抗体的着色聚苯乙烯颗粒的10mm宽度的玻璃纤维(C.Pad)。
以C.Pad与浸渗有中和试剂的垫重叠4mm的方式，贴附浸渗有中和试剂的垫(浸渗有中和试剂的区域)。
与免疫色谱试验片的上部匹配地贴附作为PET片材的顶部层压片材(60mm)。
最后，以顶部层压片材介于之间并且浸渗有固态酸性试剂的垫(浸渗有固态酸性试剂的区域)与浸渗有中和试剂的垫接触的方式，使浸渗有固态酸性试剂的垫与免疫色谱试验片的上游(下端)匹配地贴附于浸渗有中和试剂的垫上。
在图4中示出这样制成的免疫色谱试验片的结构。另外，在图5中与各部分间的距离(mm)一起示出示意图。需要说明的是，在图4和图5中，浸渗有固态酸性试剂的垫和浸渗有中和试剂的垫表现为在两个垫之间不存在顶部层压的部位也不接触而分离，但实际上，在没有顶部层压的部分，两个垫也接触。
实施例2
将实施例1的免疫色谱试验片放入测试装置壳体(存放免疫色谱试验片的树脂制的壳体)。将仅包含3.0M亚硝酸Na溶液的溶液作为对照，准备了将Triton X-100、苯扎氯铵、苄索氯铵、磷酸、氢氧化钠、NALC、NaCl、PVA、BSA、NaBr按表1所记载的浓度加入3M亚硝酸Na溶液的各条件的溶液。使用已知发生非特异反应的阴性的人类鼻液样本，用添加了亚硝酸Na溶液和上述的各物质的亚硝酸Na溶液制备样本(溶液4：样本1)，制成试样。滴加75μL所制备的试样，在5分钟后进行了判定。
其结果是，与无添加的对照条件进行比较，在任意条件下，均能够使展开开始时间缩短，并从较早的时间段进行条带判定。另外，非特异反应的程度(非特异条带的显色的浓淡)也与对照相比减轻。尤其是在加入PVA的条件下，展开也得以改善，且非特异的抑制效果也最高(表1)。
[表1]
Figure BDA0003182716830000181
实施例3
将实施例1的免疫色谱试验片放入测试装置壳体。准备了(1)2M亚硝酸Na溶液(无PVA)、(2)2M亚硝酸Na+0.5％PVA作为亚硝酸Na溶液。用将Streptococcus pyogenes活菌加入人类咽拭子样本的各亚硝酸Na溶液制备样本，而制成试样。滴加75μL制备的试样，在5分钟后进行了判定。
其结果是，在有PVA的条件下，展开开始时间缩短，在阳性样本的情况下，能够从较早的时间段进行阳性判定，并且在判定时间为5分钟下的条带显色也成为较浓的结果。另外，在试验阴性样本的情况下，发生非特异性反应的频率下降了约4％(表2)。
[表2]
Figure BDA0003182716830000201
附图标记说明：
1：支撑体(包括检测区域)；
2：标记体区域；
3：检测区域；
5：固态酸性试剂区域；
6：中和试剂区域；
7：吸收带；
8：后衬片材；
9：顶部层压片材；
10：样品垫。
产业上的可利用性
使用本发明的免疫色谱装置，可以准确地检测A组β溶血性链球菌的感染。
本说明书中所引用的所有出版物、专利和专利申请通过引用而直接并入本说明书。

Claims (7)

1.一种免疫色谱试剂盒，包括：
(i)亚硝酸盐溶液或者酸性溶液，以及
(ii)免疫色谱试验片，包括：样品垫，用于添加与亚硝酸盐或者酸性溶液混合的样本；标记体区域，包含标记对于糖链抗原的抗体的标记抗体；以及检测区域，将对于所述糖链抗原的抗体进行了固相化，在检测区域中形成抗体-糖链抗原-标记抗体的复合体，来测定糖链抗原，所述免疫色谱试验片在所述标记体区域的上游具有浸渗有中和试剂的区域，而且，在浸渗有该中和试剂的区域的上游，在使用与亚硝酸盐混合的样本时，具有浸渗有固态酸性试剂的区域，在使用与酸性溶液混合的样本时，具有浸渗有亚硝酸盐的区域，所述免疫色谱试验片用于提取并测定样本中的糖链抗原，
亚硝酸盐或酸性溶液包含选自由聚氧乙烯辛基苯基醚、季铵化合物、磷酸、氢氧化钠、N-乙酰基-L-半胱氨酸、NaCl、PVA、BSA以及NaBr构成的组中的一个以上。
2.根据权利要求1所述的免疫色谱试剂盒，其中，
在样品垫上存在浸渗有固态酸性试剂或者亚硝酸盐的区域。
3.根据权利要求1或2所述的免疫色谱试剂盒，其中，
固态酸性试剂选自由丙二酸、苹果酸、马来酸、柠檬酸和酒石酸构成的组。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的免疫色谱试剂盒，其中，
中和试剂为三羟甲基氨基甲烷或氢氧化钠。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的免疫色谱试剂盒，其中，
糖链抗原为原生动物、真菌、细菌、支原体、立克次体、衣原体或病毒的糖链抗原。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的免疫色谱试剂盒，其中，
聚氧乙烯辛基苯基醚为Triton X，季铵化合物为苯扎氯铵或苄索氯铵。
7.一种测定样本中的糖链抗原的方法，使用权利要求1～6中任一项所述的免疫色谱试剂盒，通过免疫色谱法测定样本中的糖链抗原，所述测定样本中的糖链抗原的方法包括：
在免疫色谱试验片具有浸渗有固态酸性试剂的区域时，将样本与亚硝酸溶液混合，当免疫色谱试验片具有浸渗有亚硝酸盐的区域时，将样本与酸性溶液混合，并添加至所述免疫色谱试验片的样品垫，
在浸渗有固态酸性试剂的区域或浸渗有亚硝酸盐的区域中，通过由亚硝酸盐与固态酸性试剂反应产生的亚硝酸的作用，从样本中提取糖链抗原，
在浸渗有中和试剂的区域中，包含所述糖链抗原的酸性溶液被中和，
在检测区域中，形成抗体-糖链抗原-标记抗体的复合体，通过免疫色谱法控制免疫色谱试验片上的样本的展开速度、方向，并控制基于酸性试剂、亚硝酸盐和中和试剂的处理，对样本中的糖链抗原进行测定。
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Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1215166A (zh) * 1997-09-18 1999-04-28 松下电器产业株式会社 免疫色谱装置
WO2017038711A1 (ja) * 2015-08-28 2017-03-09 栄研化学株式会社 免疫学的測定用試薬組成物およびその用途
JP2018151330A (ja) * 2017-03-14 2018-09-27 デンカ生研株式会社 糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマトデバイス
JP2018151331A (ja) * 2017-03-14 2018-09-27 デンカ生研株式会社 検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片
JP2018151329A (ja) * 2017-03-14 2018-09-27 デンカ生研株式会社 非特異反応を防止し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片
CN108713142A (zh) * 2016-03-04 2018-10-26 田中贵金属工业株式会社 免疫层析装置

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101194112B1 (ko) 2004-06-07 2012-10-24 덴카 세이켄 가부시키가이샤 크로마토그래피식 검출 장치, 검사법 및 이것을 응용한키트
JP6217141B2 (ja) * 2013-05-30 2017-10-25 藤倉化成株式会社 細菌の検出方法、及び、検出器具
JP6688561B2 (ja) 2015-04-28 2020-04-28 デンカ生研株式会社 微生物抗原の回収法
JP6927768B2 (ja) 2017-06-30 2021-09-01 京セラ株式会社 水晶デバイス

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1215166A (zh) * 1997-09-18 1999-04-28 松下电器产业株式会社 免疫色谱装置
WO2017038711A1 (ja) * 2015-08-28 2017-03-09 栄研化学株式会社 免疫学的測定用試薬組成物およびその用途
CN108713142A (zh) * 2016-03-04 2018-10-26 田中贵金属工业株式会社 免疫层析装置
JP2018151330A (ja) * 2017-03-14 2018-09-27 デンカ生研株式会社 糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマトデバイス
JP2018151331A (ja) * 2017-03-14 2018-09-27 デンカ生研株式会社 検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片
JP2018151329A (ja) * 2017-03-14 2018-09-27 デンカ生研株式会社 非特異反応を防止し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片

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