CN102341380A - 布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、佐塞米和托拉塞米类似物、组合物和使用方法 - Google Patents

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J·J·帕特里德戈
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Abstract

本发明提供了布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物和包含这种类似物的组合物。本发明还提供包含这些布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物的药物组合物及其使用方法。所有这些类似物特别用于治疗和/或预防涉及Na+K+Cl-协同转运蛋白或GABAA受体的疾病，包括、但不限于成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征。

Description

布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、佐塞米和托拉塞米类似物、组合物和使用方法
相关申请的交叉参考
本国际专利申请要求2009年1月22日提交的美国临时专利申请号US61/146,336和2009年11月2日提交的美国临时专利申请号US61/257,238的优先权，将这些文献的公开内容引入本文参考。
发明领域
本发明涉及布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物，包括其衍生物、位置异构体和前体药物、包含它们的组合物及其制备方法和使用方法。本发明还涉及包含这些化合物的衍生物(包括前体药物)的药物组合物和这些化合物的衍生物的使用方法。布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的这种衍生物(包括前体药物)特别用于治疗和/或预防涉及Na+K+Cl-协同转运蛋白(NKCC1或NKCC2或其组合)的疾病、障碍和病症，包括、但不限于成瘾疾病、焦虑症、腹水、双相情感障碍、癌症、抑郁症、水肿、角膜内皮营养不良、癫痫症、青光眼、局部缺血、偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、眼病、疼痛、带状疱疹后神经痛和精神分裂症。本文所述的化合物还特别用于治疗和/或预防涉及GABAA受体的疾病、障碍和病症，包括、但不限于阿尔茨海默病、成瘾疾病、焦虑症、孤独症、双相情感障碍、抑郁症、癫痫症、亨廷顿病、失眠症、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、伤害性疼痛、疼痛、帕金森病、人格障碍、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征。
发明背景
Na+K+Cl-协同转运蛋白
在吸收和分泌上皮中，跨细胞离子转运依赖于介导离子进入细胞和从其中离开的特异性质膜蛋白。在几乎全部上皮基基底外侧膜(除了脉络膜丛)中，钠离开和钾进入通过Na+K+-腺苷三磷酸酶进行，从而生成构成Na+流入和K+流出的驱动力的电化学梯度。可以通过特异性离子通道实现这些离子遵循其梯度的转运，从而使得离子单独或通过转运蛋白通过膜，其中Na+或K+转运由其他离子或溶质、借助于几种不同溶质转运蛋白伴随。这些膜蛋白称作二次转运蛋白，因为离子或分子易位不依赖于ATP水解，而是依赖于主要转运蛋白产生的梯度。在上皮细胞中跨细胞离子转运中极为活跃的二次转运机制是这样一种机制，其中阳离子(Na+或K+)与氯离子以1∶1的化学计算量偶合；因此，离子易位不会产生跨膜电位改变。由于这一原因，这些转运蛋白称作电中性阳离子-Cl-偶合的协同转运蛋白。除与离子吸收和分泌机制强烈相关外，电中性阳离子-Cl-偶合的协同转运蛋白在维持和调节上皮和非上皮细胞中的细胞体积中起关键作用。因为通过电中性协同转运蛋白的Na+流入和K+流出被Na+K+-腺苷三磷酸酶快速校正，所以其活性的净效果是Cl-在细胞内部或外部运动。已知这一过程伴有细胞体积改变。最终，各种新的用于电中性协同转运蛋白的生理作用出现(例如调节神经元细胞内Cl-浓度且由此调节神经传递)。Gamba(2005)“MoleCular Physiology andPathophysiology of Electroneutral Cation-ChlorideCotransporters.”Physiol.Rev.85：423-493。
已经基于与氯离子偶合的阳离子、转运过程的化学计算量和对抑制剂的敏感性在功能上鉴定了4组电中性协同转运蛋白系统(也称作“协同转运子”)。这些系统包括：(1)苯并噻二嗪(或噻嗪)-敏感性Na+Cl-协同转运蛋白；(2)氨磺酰基苯甲酸(或布美他尼)敏感性Na+K+2Cl-协同转运蛋白；(3)氨磺酰基苯甲酸(或布美他尼)敏感性Na+Cl-协同转运蛋白；和(4)二氢茚基氧基-烷酸(DIOA)-敏感性K+Cl-协同转运蛋白。在最后2组中对抑制剂的敏感性方面存在一些重叠，因为Na+K+2Cl-和K+Cl-协同转运蛋白可以分别被高浓度DIOA或袢利尿剂抑制；然而，对抑制剂和偶合氯离子的阳离子的亲和力显然在两组转运蛋白之间不同。这些转运机制的生理学证据在20世纪80年代开始就可得到且在接下来的年中大量信息通过表征在许多不同细胞和实验条件中的这些转运系统而产生。Gamba(2005)“Molecular Physiology and Pathophysiology ofElectroneutral Cation-Chloride Cotransporters.”Physiol.Rev.85：423-493。
Na+K+Cl-协同转运蛋白(NKCC)NKCC1的一种同种型广泛分布于体内。NKCC1将钠、钾和氯离子转运入细胞。还发现NKCC1遍布于神经系统，其中它在星形细胞、少突神经胶质细胞和许旺细胞上被表达。Lenart等人(2004)The Journal of Neuroscience 24(43)：9585-9597。发现另一种同种型NKCC2主要在肾中，其中它用于从尿中提取钠、钾和氯离子。Haas(1994)“The Na-K-Cl cotransporters.”Am J Physiol CellPhysiol 267：C869-C885。布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米是具有有效利尿效果的袢利尿剂。袢利尿剂是享勒袢浓厚升支中的Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC2)的拮抗剂并且通过竞争起Cl-结合位点抑制钠和氯离子重吸收的作用。另外参见Russell(2000年1月)“Sodium-Potassium-Chloride Cotransport.”Physioglocal Reviews80(1)：211-275。
Cl-转运进出细胞的调节在维持细胞内容量和至少两种离子协同转运蛋白调节的GABA响应始神经元兴奋性中起关键作用：Cl-流入由介导Cl-流入的NKCC1和介导Cl-流出的KCC1或KCC2介导。Kahle等人(2004)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102(46)：16783-16788。胞内和胞外电解质动态平衡的维持是广泛基本生理过程所需的，包括一般功能(例如维持适当的细胞容量)、专门细胞功能(例如控制神经元兴奋性)和总体功能(例如调节血压)。这种动态平衡通过经执行跨膜电解质流动的离子通道、协同转运蛋白、交换剂和泵通过细胞膜的Na+、K+和Cl-的受调节的运动实现。Kahle等人(2004)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102(46)：16783-16788。
在细胞内维持细胞内容量作为对胞外张力改变响应的主要机制在于胞内Cl-浓度([Cl-]i)升高或降低、由此将跨膜水通量降至最低。[Cl-]i通过改变Cl-进出之间的平衡调节。Cl-进入的主要介体是NKCC1且Cl-离开主要由KCC1介导。这些协同转运蛋白都由胞外张力调节：高张性活化NKCC1并且抑制KCC1，而低张性具有相反效果。Kahle等人(2004)Proc. Natl.Acad.Sci.USA 102(46)：16783-16788。
类似系统在控制神经元兴奋性中起关键作用。在成年人大脑中，GABA是主要的抑制性神经递质。如果[Cl-]i低于其平衡电位，则Cl-进入细胞，从而导致超极化和抑制。如果[Cl-]i高于其平衡电位，则GABA诱导Cl-流出、除极化和神经元兴奋。因GABA神经传递不是均匀抑制性的这一发现而认识到[Cl-]i调节的重要性；它主要在新生儿期是兴奋性的。类似地，上交叉核神经元显示昼夜节律变化作为其对GABA的响应，从而显示动态调节[Cl-]i的能力。最终，外周神经系统中的GABA神经传递主要是兴奋性的。[Cl-]i在这些神经元中的变化由与控制细胞容量的那些高度类似的机制决定。Cl-流入主要通过NKCC1进行，而Cl-流出由神经元-特异性K-Cl协同转运蛋白KCC2介导。Kahle等人(2004)Proc.Natl. Acad.Sci.USA 102(46)：16783-16788。
跨细胞的Cl-协同转运的介体(Na-Cl协同转运蛋白、NKCC1、NKCC2、KCC1和KCC2)均是阳离子/Cl-协同转运蛋白SLC12A家族中的相关成员；它们各自利用向内Na+或向外K+梯度以使Cl-分别运动入或运动出细胞。该家族转运蛋白的重要性归因于其作为药理学靶标的应用(噻嗪类利尿剂对NCC起作用且袢利尿剂对NKCC2起作用)和其突变导致不同疾病。小鼠中NKCC1的破坏导致听力损失、疼痛感觉改变、神经元兴奋性和血压改变。Kahle等人(2004)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102(46)：16783-16788。
在过去十年中已经在溶质载体的分子鉴定和表征方面做出了重大发展。在2005年时，人类基因组组织(Human Genome Organization)(HUGO)命名委员会数据库(Nomenclature Committee Database)识别了43种溶质载体(SLC)家族，其包括总计298种编码单输送体(被动转运蛋白)、协同转运蛋白(偶合转运蛋白)、反向转运物(交换剂)、囊泡转运蛋白和线粒体转运蛋白的转运蛋白基因。这种溶质载体基因的量占已经计算构成人体基因组的总基因库的～1％。Gamba(2005)“MoleCular Physiologyand Pathophysiology of Electroneutral Cation-ChlorideCotransporters.”Physiol.Rev.85：423-493。
GABA受体
γ-氨基丁酸(GABA)是中枢神经系统(CNS)中的主要抑制性神经递质，其中全部突触的约30％使用GABA作为递质。存在三种类型的GABA受体：GABAA(配体门控离子通道)、GABAB(G蛋白偶联受体)和GABAC(配体门控离子通道)。氯化物通入细胞因结合GABA分子、使静息膜电位超极化和减少突触后神经元传送动作电位的机会而活化GABAA受体导致。GABAA受体是五聚化的并且从哺乳动物中克隆了约19个GABA受体亚单位(6α、3β、3γ、1δ、1ε、1θ、1π和3ρ亚单位)。通过交替剪接(例如γ2短和γ2长是两种主要的γ2剪接变体)进一步增加GABA亚单位的异质性。一般而言，功能性GABAA受体需要2α亚单位、2β亚单位和第三种“调节”亚单位(通常是γ或δ)。WO 2009/100040。特异性亚单位组合决定GABAA受体的药理学和配体结合特性。在CNS中发现最丰富的亚单位组合α1β2γ2。这种亚型代表脑中约40％的GABAA受体且它遍在CNS中被表达并且位于突触后细胞上。WO 2007/002359。
GABAA受体是广泛治疗剂和临床相关化合物的靶标，包括苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000051
类、巴比妥类、神经类固醇、乙醇、一些静脉麻醉剂和亚型特异性调节剂(例如唑吡坦)。这些化合物用作抗焦虑剂、镇静剂/安眠药、抗癫痫药(AED)和增强记忆药。这些治疗剂中许多显示功效，但因导致对α1和/或α2 GABAA变体的不需要的效应或因低治疗指数而导致副作用。例如，苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000052
类例如地西泮(VALIUM)是极佳的抗焦虑剂，但在临床使用时导致不需要的镇静效果。WO 2007/002359。
在细胞水平上，GABAA受体在突触后和突触外位点(相对突触)上被表达，其中它们对神经递质释放入突触间隙导致的GABA浓度显著改变起响应，并且在突触外被表达，其中所述受体对从突触接头处“渗漏”的较低浓度GABA起响应。突触后受体对神经元发放的急性改变起响应，而突触外受体负责维持神经元网络的总体品质。WO 2009/100040。紧张性抑制通过突触外(突触周)GABAA受体持续活化产生并且调节各神经元和神经网络的兴奋性。Jia等人(2008)The Journal of Pharmacology andExperimental Therapeutics 326(2)：475-482。
位于突触外位点上的突触前GABAA受体可以包含α4βδ和α6βδ同种型。突触外α4βδ和α6βδGABAA受体同种型显示对GABA、酒精和麻醉剂的显著敏感性，从而启示受体可以提供用于调节发育脑中生理和病理情况中的突触功能。Xiao等人(2007)“Presynaptic GABAA receptorsfacilitate GABAergic transmission to dopaminergic neurons in theventral tegmental area of young rats.”J Physiol.580(Pt.3)：731-43.”J Physiol.580(Pt.3)：731-43。例如，颞叶癫痫(TLE)、帕金森病(PD)和亨廷顿病(HD)是涉及GABA信号传导破坏的神经变性障碍。GABA是中枢神经系统(CNS)中的主要抑制性神经递质。TLE发作反映出兴奋过度，其可以因局部抑制性回路功能障碍导致。PD破坏纹状体γ-氨基丁酸能的(GABAergic)神经元输入且HD破坏纹状体γ-氨基丁酸能的神经元。控制GABA递送至特异性脑区域应有利于这些疾病中的每一个。指导GABA合成、降解、转运或受体可以控制GABA信号传导。靶向GABA合成、释放和结合的新药可以用于改善对癫痫症和帕金森病和亨廷顿病的治疗药治疗。K1eppner和Tobin(2001)“GABAsignaling：therapeutic targets for epilepsy，Parkinson’sdisease and Huntington’s disease.”Expert Opin Ther Targets.5(2)：219-39。另外参见Shumate等人(1998)Epilepsy Research(32)：114-128；Fritschy(2008)Frontiers in Molecular Neuroscience 1(5)：1-5；Roberts等人(2006)The Journal of Biological Chemistry281(40)：29431-29435；和Roberts等人PNAS 102(33)：11894-11899。
成瘾疾病
成瘾和/或强迫性障碍例如进食障碍(包括肥胖)、刺激剂、麻醉品(例如可卡因、海洛因)镇静药/安眠药和阿片类成瘾/躯体依赖性包括酒精中毒和吸烟是在多层面上影响社会的主要公共卫生问题。据估计仅物质滥用就在美国每年花费超过4千8百40亿美元。
还推定酒精敏感性α4βδ GABAA受体涉及酒精成瘾(酒精中毒)。例如，伏核(NAc)中包含α4亚单位的GABAA受体的表达减少降低了大鼠中的对酒精的自由消耗和优先选择。此外，伏核促成药物(包括酒精)的有益和增强效果，从而启示NAc中GABAA受体、特别是α4βδ同种型是酒精自身给药的重要介体。Rewal等人(2009年1月14日)The Journal ofNeuroscience 29(2)：543-549。
尽管大部分GABAA受体亚单位组合可以被高(麻醉)酒精浓度活化，但是迄今为止仅极为特异性GABAA受体亚单位组合(包含δ和β3亚单位)显示剂量-依赖性，其反映出与人轻度至中度中毒相关的血醇水平。包含δ亚单位的GABAA受体位于突触外部或周边，但不在亚突触膜中。WO2007/002359。
治疗成瘾疾病的最新策略包括心理咨询和支持、使用治疗剂或它们两者的组合。已知影响中枢神经系统的各种活性剂已经在多种情况下用于治疗大量直接或间接涉及成瘾行为的适应征，但对改进的成瘾疾病治疗剂存在巨大需求。对伏核具有作用的GABAA特异性活性剂可以是成瘾行为的有效治疗剂。
阿尔茨海默病
阿尔茨海默病(AD)是多年期限内发生的与年龄相关的不可逆的脑功能障碍。最初，人经历记忆丧失和意识错乱，可能犯记忆改变类型的错误，这些改变有时与正常的老化相关。然而，AD的症状逐步导致行为和人格改变、认知能力例如决策制定和语言技能下降和识别家族和朋友的问题。AD最终导致严重的精神功能缺失。AD是65岁以上人中最常见的痴呆原因。NINDS Alzheimer’s Disease Information Page(2009年9月23日)。
与AD疾病过程相关的脑中的三种主要标志包括淀粉质斑块和神经原纤维缠结。淀粉质斑块包含混合了其他蛋白质和神经元残留碎片集合体的β-淀粉样蛋白肽的片段。发现神经原纤维缠结(NFTs)在神经元内标并且包含tau蛋白。当神经元在脑中遍在死亡时，受侵害的区域开始萎缩。截止到AD最终阶段，损害是广泛的且脑组织显著萎缩。NINDS AlzheimerDisease Information Page(2009年9月23日)。
目前尚没有可以减缓AD进展的药物。然而，4种FDA-批准的药物用于治疗AD症状。令人遗憾的是，这些药物无法终止或逆转AD且它们看起来仅有助于个体几个月至几年。开据多奈哌齐(ARICEPT)、利斯的明(EXELON)和加兰他敏(REMINYL)处方以治疗轻度至中度AD症状。目前也批准多奈哌齐治疗严重AD。最新AD药物是美金刚(NAMENDA)，开据其处方以治疗中度至重度AD症状。NINDS Alzheimer’s Disease InformationPage(2009年9月23日)。使用GABAA拮抗剂印防己毒素治疗阿尔茨海默病转基因小鼠模型显示小鼠认知功能改善。Yoshiike等人(2008年8月21日)“GABAA receptor-mediated acceleration ofaging-associated memory decline in APP/PSl mice and itspharmacological treatment by picrotoxin.”PLoS One.3(8)：e3029另外，已经发现NKCC1表达在阿尔茨海默病患者中升高。Johanson等人(2004)Cerebrospinal Fluid Research 1∶3。因此，基于调节GABAA受体活性的新疗法可能缓解AD症状。
焦虑症
焦虑症被分类成几个亚型：焦虑、急性焦虑、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫观念与行为障碍(OCD)、创伤后精神紧张性障碍(PTSD)、一般焦虑症和特异恐怖。美国精神病学协会(American PsychiatricAssociation)。Diagnostic and Statistical Manual of Mentaldisorders，第4版(1994)。
作为群体，焦虑症在美国的所有精神病中具有最高发病率。Kessler等人(1994)“Lifetime and 12-month prevalence of DSM-III-Rpsychiatric disorders in the United States：Results from theNational Comorbidity Survey.”Arch Gen Psychiatry 51：8-19。焦虑症每年影响美国1570万人，且在某种程度上在美国影响3000万人生命。Lepine(2002)“The Epidemiology of Anxiety Disorders：Prevalence and Societal Costs.”J.Clin.Psychiatry.63：Suppl14：4-8。
已经研发了几种动物模型，本领域将其公认为可预示抗焦虑活性。它们包括Davis在Psychopharmacology 62：1；1979，Behav.Neurosci.100：814；1986和TiPS，1992年1月Vol.13，35-41中所述的害怕-增强惊恐模型、Lister在Psychopharmacol.92：180-185；1987中所述的高架十字模型和众所周知的例如在S.E.File编辑的“Psychopharmacology of Anxiolytics and Antidepressants”，pp.131-153，Raven Press，New York，1991中所述的处罚-响应(争斗)模型。
一般用药物和精神疗法治疗焦虑症。最常开据处方的用于所有焦虑类型的药物是苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000091
类，也使用其他精神活性药物例如选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)。然而，尽管这些药物显示功效，但是苯二氮杂
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类和SSRIs在治疗过程中还显示不良反应。Denys和de Geus(2005年8月)“Predictors of Pharmacotherapy Response in anxietydisorders.”Curr Psychiatry Rep.7(4)：252-7。例如，大量副作用与长期使用SSRIs相关，例如性功能障碍和体重增长。Hirschfeld(2003)“Long-term Side Effects of SSRIs：Sexual Dysfunction andWeight Gain.”J.Clin.Psychiatry.64：Suppl 18：20-4。此外，现存靶向突触后型GABAA受体的药物产生不期望的效果，因为它们无差别地靶向脑中的大部分GABAA受体。WO 2007/136838。鉴于无应答者和有害副作用，所以对改进的焦虑治疗剂存在巨大需求。
腹水
腹水是在腹部下组织与腹部器官之间的空间(腹腔)中流体过量，其典型地由肝病导致。可能与腹水相关的疾病包括：肝硬化、肝炎、门静脉血栓形成、缩窄性心包炎、充血性心力衰竭、肝癌、卵巢癌、蛋白质损失性肠病、肾病综合征和胰腺炎。可得到一些治疗腹水的活性剂，例如呋塞米，但对改进的腹水治疗剂仍然存在巨大需求。参见Shiozaki等人(2006)J.Physiol.Sci.56(6)：401-406。
孤独症
孤独症谱群疾病(ASD)是一定范围的复杂性神经发育障碍，其特征在于社交损害、语言交往困难和有限的、反复性的和刻板的行为模式。孤独性障碍有时称作孤独症或典型ASD，是最严重的ASD形式，而依照该谱系的其他病症包括称作阿斯佩格综合征的较为轻度的形式，称作Rett综合征的罕有的病症，和童年瓦解性障碍和未有特殊说明的全身性发育迟缓(通常称作PDD-NOS)。尽管ASD在特性和严重性方面显著改变，但是它在所有人种和社会经济群体中发生并且影响每一个年龄组。专家估计每1,000个人中就有3-6个人可能发生ASD。男性可能患有ASD的机率比女性高4倍。NINDS Autism Fact Sheet(2009年9月)。此外，不同GABA A亚单位类型例如α3变体序列和α4同种型与孤独症相关。WO2009/100040。无法治愈ASD，因此，对治疗孤独症的治疗剂存在巨大需求。
多线证据包括遗传和成像研究启示前扣带回皮质和γ-氨基-丁酸(GABA)系统可以在孤独症中受到影响。与对照组相比，孤独症患者显示前扣带回皮质(ACC)颗粒上层(46.8％)和颗粒下层(20.2％)中GABAA受体平均密度和颗粒上层(28.9％)和颗粒下层(16.4％)中苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000101
结合位点密度的显著减小。此外，在孤独症组中，在颗粒下层(17.1％)中发现苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000102
位点密度减小的趋势。这些发现启示在孤独症组中，这种ACC中苯二氮杂位点和GABAA受体的减量调节可能是干扰主要神经元细微兴奋/抑制平衡及其输出至关键边缘皮质靶标的GABA神经支配增加和/或释放增加的结果。这些干扰可能是孤独症中社交-情绪行为的核心改变的基础。Oblak等人(2009年8月)“Decreased GABAA receptors andbenzodiazepine binding sites in the anterior cingulate cortex inautism.”Autism Res.2009 Aug；2(4)：205-19。因此，靶向GABAA受体的治疗剂可以用于治疗孤独症。
双相情感障碍
双相情感障碍、也称作躁狂抑郁病是导致人体情绪、精力和能力起作用的不寻常转换的脑功能障碍。它们可以导致关系受损、工作或学校行为差且甚至导致自杀。大约570万美国成年人或约2.6％的18岁以上人群在任何指定的年龄中都存在双相情感障碍。双相情感障碍典型地在青春期晚期或早期成年期中发生。然而，一些人在其童年过程中就存在第一批症状并且一些在其生命晚期发生。通常不将其视为疾病且人可能在其被正确诊断和治疗前患病多年。National Institute of Mental Health“Bipolar Disorder”(2008)Complete Publication。
双相情感障碍导致显著的心境不稳-从过度“高”和/或易怒到悲伤和绝望、然后再次返回，两者期间通常存在正常情绪期。精力和行为的几种改变随这些情绪改变发生。高和低的期限称作躁狂和抑郁症发作。National Institute of Mental Health“Bipolar Disorder”(2008)Complete Publication。
躁狂(或躁狂性发作)的征兆和症状包括：精力、活动和烦乱不安增加；过度“高”、过度良好、精神愉快的情绪；极端易怒；疾行的思维和说话极快、从一个想法跳跃到另一个想法；注意涣散、难以集中；几乎无需睡眠；不切实际的精力和能力自信；判断困难；花费性戏耍；不同于通常的持久期限行为；性冲动增加；药物滥用特别是可卡因、酒精和睡眠药物；激发、干扰或攻击行为；和/或否认任何事情都是错误的。如果当天中多数时间、接近每天情绪升高随三种以上其他症状发生1周以上，则诊断躁狂性发作。National Institute of Mental Health“BipolarDisorder”(2008)Complete Publication。
抑郁症(或抑郁发作)的征兆和症状包括：持久悲哀、焦虑或心情空虚；绝望或悲观感觉；内疚、无价值或无助感觉；一旦享受包括性就在活动中失去兴趣或快乐；精力减少、疲劳感或“变迟钝”感；难以集中、记忆、做决定；烦乱不安或易怒；睡眠过度或不能入睡；食欲改变和/或非故意的体重减轻或增长；慢性痛或其他并非身体疾病或损伤导致的持续性身体症状；和/或死亡或自杀自杀思维，或企图。如果5种以上这些症状持续当天的大部分、接近每天发生2周以上，则诊断抑郁发作。National Institute of Mental Health“Bipolar Disorder”(2008)Complete Publication。
轻度至中度水平的躁狂称作轻症躁狂。轻症躁狂对经历它的人而言可以感觉良好且甚至可以与良好的功能和增强的生产力相关。因此，甚至当家族和朋友学习将心境不稳识别为双相情感障碍时，人可以否认任何事情是错误的。然而，如果不进行适当治疗，则轻症躁狂可能在一些人中达到严重躁狂或可以转变成抑郁症。
然而，在一些人中，躁狂和抑郁症的症状可以共同存在，称作混合型双极状态。混合状态的症状通常包括激动、睡眠烦恼、明显的食欲改变、精神病和自杀思维。人们可以具有极为悲哀、绝望情绪，同时感觉极端活跃。
涉及躁狂和抑郁症反复发作的疾病的典型形式称作I型双相情感障碍。然而，一些人始终未发生严重性躁狂，而是经历与抑郁症交替出现的轻症躁狂的较为轻度的发作；这种疾病形式称作II型双相情感障碍。当4种以上疾病发作出现在12个月期限内时，认为人具有快速循环性双相情感障碍。一些人在单周乃至单天内经历多次发作。快速循环倾向于在疾病过程晚期中发生并且在女性中比在男性中更常见。
通常开据称作“情绪稳定剂”的药物的处方以帮助控制双相情感障碍(例如锂或丙戊酸-DEPAKOTE/VALPROATE)。除药物外，精神社会治疗-包括一些形式的精神疗法通常用于治疗双相情感障碍。根据药物的不同，副作用包括体重增长、恶心、颤动、性冲动或行为减少、焦虑、脱发、运动问题或口腔干燥。锂治疗可以导致低甲状腺剂水平，从而导致对甲状腺剂补充的需求。另外，可以导致青少年女性的不良激素改变和20岁前开始服药的女性中的多囊卵巢综合征。此外，患有希望受孕或怀孕的双相情感障碍的女性因现存情绪稳定药物对发育胎儿和乳儿可能的有害效果而面对特殊挑战。National Institute of Mental Health“Bipolar Disorder”(2008)Complete Publication。可以研发起增加GABA活性作用的改进的双相情感障碍治疗剂。
尸体检查和遗传研究已经关联了神经精神障碍包括精神分裂症和双相情感障碍，其具有γ-氨基丁酸能的神经传递和各种特异性GABAA受体亚单位。此外，GABAA受体-相关蛋白涉及GABAA受体运输、靶向、成簇和锚定，它们通常以亚型-特异性方式执行这些功能。Charych等人(2009)“GABAA receptors and their associated proteins：implications inthe etiology and treatment of schizophrenia and related disorders.Neuropharmacology.57(5-6)：481-95。因此，改善抑制的GABAA受体特异性治疗剂可能是有益的，因为双极疾病是没有足够抑制的异常抑制/兴奋改变状态。
认知、学习和记忆
认为哺乳动物的认知能力依赖于皮质加工。一般可接受的是描述和理解皮质功能的最相关参数是活动的空间时间模式。特别地，长时程增强和长期抑郁症牵连记忆和学习并且可以在认知中起作用。哺乳动物脑中的振动和同步活动与不同行为状态相关。
认为自发神经元发放活动的同步是中枢神经系统中许多正常和病理生理过程的重要特征。实例包括群体活动的同步振动例如认为涉及认知的新皮质中的γ节律(Singer和Gray(1995)Annu.Rev.Neurosci.18：855-86)和认为在空间记忆和诱导突触可塑性中起作用的海马中的θ节律(Heurta和Lisman(1995)Neuron.15：1053-63；Heurta和Lisman(1996)J.Neurophysiol.75：877-84；O’Keefe(1993)Curr.Opin.Neurobiol.3：917-24)。迄今为止，大部分有关基于自发同步活动生成和维持的过程的研究集中于突触机制。然而，存在非突触机制也在调节中枢神经系统中正常和病理活动中的同步中起重要作用的证据。
抑郁症
抑郁症是常见、但严重的疾病，最常见的是严重抑郁障碍和心境恶劣障碍。严重抑郁障碍也称作严重抑郁，其特征在于干扰人工作、睡眠、研究、进食和享受曾经的娱乐活动的能力的症状组合。严重抑郁是残疾性的且阻止人进行正常功能活动。严重抑郁发作仅在人体寿命中出现一次，但更常见的是它复发在人生命的自始至终。National Institute ofMental Health  “Depression”(2008)Complete Publication。
抑郁症的形式包括：
心境恶劣障碍、也称作心境恶劣，其特征在于长期(2年以上)、但较不严重性的症状，其可能不会使人残疾，但可以阻止正常的功能活动或良好的感情。具有心境恶劣的人也可以在其寿命过程中经历一次或多次严重抑郁发作。
当严重抑郁症伴随一些形式的精神病例如与真实断绝关系、幻觉和妄想时发生精神病性抑郁症。如果新母亲在分娩后1个月内发生严重抑郁发作，则诊断为产后抑郁症。据估计10-15％的女性在分娩后经历产后抑郁症。
季节性情感障碍(SAD)，其特征在于当自然日光较少时冬季的数月过程中的抑郁症发作。抑郁症一般在春季和夏季过程中增多。可以用光疗法有效治疗SAD，但近来半数具有SAD的人对单独的光疗法无应答。抗抑郁药和精神疗法可以单独或与光疗法组合减轻SAD症状。NationalInstitute of Mental Health“Depression”(2008)CompletePublication。
可以用许多方法治疗抑郁症。大部分常用治疗是药物和精神疗法。抗抑郁药起正常化神经递质、特别是5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺的作用。最新和最普通型抗抑郁药中的药物称作选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)。SSRIs包括氟西汀
Figure BDA0000088452220000141
西酞普兰
Figure BDA0000088452220000142
舍曲林
Figure BDA0000088452220000143
等。5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRIs)与SSRIs类似且包括文拉法辛
Figure BDA0000088452220000144
和度洛西汀SSRIs和SNRIs比较老类型的抗抑郁药例如三环抗抑郁剂-根据其化学结构命名-和单胺氧化酶抑制剂(MAOIs)更普通，因为它们倾向于几乎没有副作用。然而，药物以不同方式影响每个人-不存在对药物的通用手段。National Institute of Mental Health“Depression”(2008)CompletePublication。
对所有类型的抗抑郁药而言，患者可以经历副作用。抗抑郁药可以在一些人中导致轻度且通常是暂时性的副作用，但它们通常不是长期的。最常见与SSRIs和SNRIs相关的的副作用包括：头痛、恶心、失眠症、神经过敏、激动和性问题。National Institute of Mental Health“Depression”(2008)Complete Publication。三环抗抑郁剂也可以导致副作用，包括：口腔干燥、便秘、膀胱问题、性问题、视力模糊和白天嗜睡。另外，服用MAOIs的患者必须坚持重要食物和药物限制以避免潜在的严重相互作用。他们必须避免一些包含高水平化学酪胺的食物，这些化学酪胺在许多干酪、酒和泡菜和一些药物包括解充血药中发现。MAOIs按照可以导致血压急剧升高这样的方式与酪胺发生相互作用，它可以导致中风。National Institute of Mental Health“Depression”(2008)Complete Publication。
GABA涉及临床抑郁症和抑郁症动物模型。Kram等人(October 2000)“Effects of learned helplessness on brain GABA receptors.”Neuroscience Research 38(2)：193-198。因此，基于γ-氨基丁酸能的系统的改进的抑郁症治疗剂可以提供更好的药物。
癫痫症
癫痫症的特征在于大脑神经元异常放电且典型地表现为各种类型的癫痫发作。使用可以使用电生理技术测定的神经元群体自发存在的同步放电鉴定癫痫样活动。癫痫症是最常见的神经性障碍之一，其影响约1％的人群。存在不同形式的癫痫症，包括特发性、症状性和隐原性的。认为遗传素质是特发性癫痫症的主要病原学因素。症状性癫痫症通常作为脑中结构异常的结果发生。
癫痫持续状态是癫痫发作的特别严重的形式，其表现为持续显著长的时间期限的多发性癫痫发作或在两次癫痫发作之间没有任何意识恢复的连续癫痫发作。在具有癫痫持续状态的成年人中的总体死亡率大约为20％。具有首次发作的患者处于未来发作和发生慢性癫痫症的巨大风险中。在美国癫痫持续状态的频率大约为每年150,000个病例，其中每年约55,000个死亡病例与癫痫持续状态相关。Sirven和Waterhouse(2003)“Management of Status Epilepticus”American Family Physician68：469-476。与癫痫持续状态相关的急性过程包括顽固性癫痫症、代谢紊乱(例如电解质异常、肾衰竭和脓毒症)、中枢神经系统感染(脑膜炎或脑炎)、中风、变性性疾病、头损伤、药物毒性和缺氧。癫痫持续状态的基础病理生理学涉及正常使孤立癫痫发作失败机制的失败。这种失败可以来源于异常持续性、过度兴奋或抑制的无效募集。研究已经证实兴奋性氨基酸受体的过度活化可以导致延迟的癫痫发作且启示兴奋性氨基酸可以起原因作用。癫痫持续状态还可以因青霉素和相关化合物导致，它们拮抗脑中主要抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)的效果。
癫痫症的一种早期诊断方法涉及口服给予大量水与注射加压素以防止伴随的多尿。发现这种方法在癫痫患者中诱发癫痫发作，但在非癫痫个体中罕见。Garland等人(1943)Lancet 2：566。通过静脉内注射甘露糖醇可以阻断卡英酸-处理大鼠中的癫痫持续状态。Baran等人(1987)Neuroscience 21：679。这种效果类似于通过在人体患者中静脉内注射脲达到的效果。Carter(1962)Epilepsia 3：198。在这些病例各自中的治疗增加了血液和细胞外液的渗透性，从而导致水从细胞中流出和脑中的细胞外隙增加。已经以实验方式研究了作为抗惊厥药的乙酰唑胺(ACZ)、即一种具有不同作用机制的利尿剂(碳酸酐酶抑制)(White等人(1986)Advance Neurol.44：695；Guillaume等人(1991)Epilepsia32：10)并且基于有限的基础在临床上使用(Tanimukai等人(1965)Biochem.Pharm.14：961；Forsythe等人(1981)Develop.Med.ChildNeurol.23：761)。尽管其抗惊厥药作用机制尚未确定，但是ACZ确实对大脑细胞外隙具有明显的效果。
传统抗癫痫药通过三种机制之一发挥其主要效果：(a)通过阻断电压依赖性钠通道抑制反复高频神经元发放；(b)γ-氨基丁酸强化(γ-氨基丁酸，GABA)-介导的突触后抑制；和(c)T-型钙通道阻滞。
许多当前抗癫痫药疗法对所有脑细胞发挥其药理学效果，而与其所牵连的癫痫活动无关。常见的副作用是镇静过度、头晕、记忆缺失和肝损害。此外，20-30％的癫痫症患者对目前的疗法而言是难治的。因此，对降低发病率和死亡率的改进的癫痫症治疗剂存在巨大需求。
青光眼
青光眼是一组可以损害眼视神经并且导致视力缺失和失明的疾病。青光眼在眼内正常液压缓慢升高时发。开角型青光眼是最常见的形式。其他类型的青光眼包括：(1)低眼压性青光眼或正常眼压性青光眼；(2)闭角型青光眼；(3)先天性青光眼；(4)继发性青光眼；和(5)色素性青光眼包括新生血管性青光眼。每个人都处于青光眼的风险中，但一些人群处于比其他人更高危的风险中，包括超过40岁的非洲裔美国人、年龄超过60岁的每个人和具有青光眼家族史的人。National Eye InstituteGlaucoma Fact Sheet(2008)。
青光眼通常通过综合性眼检验检测，包括：(a)视觉敏锐度试验；(b)视野试验；(c)膨胀的眼检验；(d)眼压测量法；和(e)厚度测量法。目前青光眼的治疗包括药物、激光帘成形术、常规手术或任意这些的组合，然而，对改进的青光眼疗法仍然存在巨大需求。National EyeInstitute Glaucoma Fact Sheet(2008)。
亨廷顿病
亨廷顿病(HD)因导致不受控制的运动、智能缺失和情绪紊乱的神经元变性导致。HD是因Htt基因中的CAG扩充导致的常染色体显性疾病，这种扩充导致疾病蛋白亨廷丁中的聚-谷氨酰胺扩充。γ-氨基丁酸能的内在神经元对突变的亨廷丁积累特别敏感且在HD发生的早期死亡。HD的一些早期症状是心境不稳、抑郁症、易怒或驾驶、学习新事物、记忆事实或做决定困难。当疾病发展时，集中于智力活动的注意力逐步变得困难且患者可能存在自我进食和吞咽困难。疾病进展率和发作年龄因人而异。遗传试验结合完整的医学史和神经学和实验室试验有助于临床医师诊断HD。处于携带HD基因风险中的个体可利用前症状试验。在具有HD的1-3％的个体中，未发现HD家族史。NINDS Publication“Huntington’s Disease：Hope Through Research”(2009)。
临床医师开据大量药物处方以有助于控制与HD相关的情绪和活动问题。在2008年8月，美国食品与药品管理局批准丁苯那嗪治疗亨廷顿舞蹈病(无意识的扭体运动)，使得它成为第一种在美国批准用于治疗该病的药物。然而，用于治疗HD症状的药物存在副作用例如疲劳、烦乱不安或超兴奋性。NINDS Publication“Huntington’s Disease：HopeThrough Research”(2009)。
亨廷顿病(HD)是涉及GABA信号传导破坏的神经变性疾病。GABA是中枢神经系统(CNS)中的主要抑制性神经递质。HD破坏纹状体γ-氨基丁酸能的神经元。指导GABA合成、降解、转运或受体可以控制GABA信号传导，且由此靶向这些GABA代谢方面的药物可以用于对亨廷顿病的改善的治疗。Kleppner和Tobin(2001)“GABA signaling：therapeutictargets for epilepsy，Parkinson’s disease and Huntington’sdisease.”Expert Opin Ther Targets.5(2)：219-39。
失眠症
失眠症是任意几种睡眠障碍的症状，其特征在于尽管有机会但持续难以入睡或保持睡眠。NHLBI Diseases and Conditions Index[Insomnia](2009年10月)。
尽管存在几种不同程度的失眠症，但是已经清楚地鉴定了三种类型的失眠症：暂时性的、急性的和慢性的。暂时失眠症持续几天至几周。它可以因另一种障碍、睡眠环境改变、睡眠时间、严重抑郁或应激导致。其后果-睡意和受损的精神运动性行为-类似于是睡眠剥夺的那些症状。急性失眠症是在三周至六个月期限内不能持续充分睡眠。慢性失眠症一次持续数年。它可以由另一种障碍导致或可以是主要障碍。其影响可以根据其原因改变。它们可以包括睡意、肌肉疲劳、幻觉和/或精神疲劳；但具有慢性失眠症的人通常显示警觉度增加。NHLBI Diseases andConditions Index[Insomnia](2009年10月)。
目前靶向GABAA受体的失眠症药物疗法安眠药(例如苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000171
类)可能存在不期望的副作用，因此，对改进的具有减少的副作用的失眠症治疗剂存在巨大需求。
局部缺血
局部缺血是供血受限，一般因血压因素导致，其中因氧合不足和组织营养物缺乏导致组织损害或功能障碍。供血不足导致组织变含氧量低，或如果完全无氧供应，则缺氧。与缺氧相反，表示氧不足的更一般的术语(通常是所呼吸的空气中缺氧的结果)，局部缺血是对器官供血绝对或相对不足。这可以导致坏死(例如细胞死亡)。在需氧组织例如心脏和脑中，在体温下因局部缺血在变成不可逆前通常需要花费约3-4小时。然后，因对组织缺乏足够供血造成代谢废物蓄积而导致更多的损害发生。这种器官的氧合完全停止20分钟以上典型地导致不可逆性损伤。
用布美他尼和呋塞米抑制NKCC1活性显著减小了大脑病灶性局部缺血后的梗死体积和大脑水肿，从而启示NKCC1拮抗剂可以用于治疗局部缺血。Chen和Sun(2005)“The role of Na-K-Cl co-ttansporter incerebral ischemia.”Neurol.Res.27(3)：280-286。局部缺血的典型治疗包括通常为在该期限内中风和心脏病发作给予的“溶栓剂(clot-buster)”药物(例如
Figure BDA0000088452220000181
)。然而，局部缺血期限后血流的恢复实际上可能比局部缺血更具有损害性，因为氧再引入导致损害性自由基更多产生，从而导致再灌注损伤。坏死在再灌注损伤中显著加速且由此对改进的局部缺血治疗剂存在巨大需求。
偏头痛
偏头痛影响美国人口的10-20％，据估计每年损失6400万工作日。偏头痛的特征在于搏动性头痛，为偶发性的、单边的或双边的，持续4-72小时且通常伴随恶心、呕吐和对光和/或声音的超敏反应。当伴随先兆症状例如视觉、感觉、言语或运动症状时，头痛称作“具有先兆的偏头痛”，在先称作典型偏头痛。当伴随这种症状时，头痛称作“无先兆的偏头痛”，在先称作普通型偏头痛。两种类型均证实强遗传要素且两者在女性中通常比男性多3倍。偏头痛的精确病因仍然待确定。理论上推断易于患偏头痛的人具有降低的神经元兴奋性阈值，可能是因抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)活性降低所致。GABA通常抑制神经递质5-羟色胺(5-HT)和谷氨酸活性，两者均显示涉及偏头痛发作。兴奋性神经递质谷氨酸牵连电现象，其称作皮层传播抑制，其可以启动偏头痛发作，而5-羟色胺牵连作为偏头痛进展发生的血管改变。
已经启示皮层传播抑制(CSD)构成偏头痛的基础，包括具有视觉先兆的偏头痛。还认为CSD构成作为三叉神经痛循环的组成部分的偏头痛的基础。CSD的特征在于枕叶皮质中强烈去极化的短脉冲，然后是神经元静止波和减小的诱发电位，它们促进在先通过大脑皮质表面。提出枕叶皮质神经元增强的兴奋性为CSD的基础。视皮质可以具有较低兴奋性阈值且由此最倾向于CSD。已经启示线粒体障碍、镁缺乏和突触前钙通道异常可以负责神经元超兴奋性。Welch(1997)“Pathogenesis ofMigraine.”Seminars in Neurobiol.17：4。在扩散性抑制事件中，出现明显的离子干扰，其包括间质酸化、胞外钾蓄积以及钠和氯离子再分布至细胞内的小室。此外，延长的神经胶质膨胀作为对改变的细胞外液组成和间质神经递质和脂肪酸蓄积的内环境稳定性反应而发生。研究已经证实呋塞米抑制麻醉猫中的再现性皮层传播抑制。Read等人(1997)Cephalagia 17：826。
为偏头痛的严重性和频度指定药物疗法。就偶然发作而言，可以指示急性治疗，而对每个月发生两次以上而言或当发作显著影响患者日常生活时，可以指示预防性疗法。急性和预防性治疗剂包括5-羟色胺活性剂、β-阻滞剂、三环抗抑郁剂、抗惊厥药和肉毒杆菌毒素A型注射的副作用可能限制其应用。
GABA主要通过GABAA受体调节感受伤害输入至三叉神经颈部复合体。因此，GABAA受体可以提供用于研发急性和预防性治疗头痛(包括偏头痛)的新治疗剂的靶标。Storer等人(2001)“GABA receptors modulatetrigeminovascular nociceptive neurotransmission in thetrigeminocervical complex.”Br J Pharmacol.134(4)：896-904。
伤害性疼痛
伤害性疼痛作为对外周感觉神经元特异性亚组即伤害感受器活化的响应出现。它一般是急性的(除了关节炎疼痛)、自我限制的且通过作为持续组织损伤的警告起作用而起保护性生物学功能。它典型地充分定位并且通常具有疼痛或搏动特性。其实例包括术后痛、扭伤、骨折、烧伤、结节性红斑、擦伤、炎症(因感染或关节炎病)、阻塞和肌筋膜疼痛。疼痛感受器是感觉并且对患有损伤的机体部位起响应的神经。它们对组织刺激、即将来临的损伤或实际损伤发出信号。当活化时，它们将疼痛信号(通过外周神经和脊髓)传送至脑。疼痛是典型地充分定位、持续不断并且通常伴随疼痛或搏动特性。内脏痛是涉及体内器官的伤害性疼痛亚型。其倾向于是偶发性的并且难以定位。
通常用阿片类和/或非甾体抗炎药(NSAIDS)治疗伤害性疼痛，但因低功效、不可接受和甚至严重的副作用和成瘾可能性，所以其应用可能受限。GABAA受体是治疗伤害性疼痛的治疗靶标。Hara等人(2004)“TheInteraction Between Gamma-Aminobutyric Acid Agonists andDiltiazem in Visceral Antinociception in Rats”Anesth Analg98：1380-1384报告GABA激动剂和L-型钙通道阻滞剂的组合可以用于减轻内脏痛。然而，已知GABAA激动剂具有副作用，包括镇静、头晕、安乐感、恶心和视力模糊。因此，对伤害性疼痛治疗剂存在巨大需求。
神经性疼痛
神经性疼痛和伤害性疼痛在其病因学、病理生理学、诊断和治疗方面不同。神经性疼痛是常见的慢性非恶性疼痛类型，其为外周或中枢神经系统中的损伤或功能障碍的结果并且不发挥保护性生物学功能。据估计它在美国人群中影响160万以上的人。神经性疼痛具有许多不同的病因且可以因创伤、糖尿病、感染带状疱疹(带状疱疹)、HIV/AIDS(周围神经病)、晚期癌症、切断术(包括乳房切除术)、腕管综合征、长期饮酒、接触射线而发生且可以表现为神经毒性治疗剂例如一些抗-HIV药和化疗药的非期望的副作用。
与伤害性疼痛相反，事实上通常将神经性疼痛描述为“烧灼”、“电感”、“麻刺感”或“击中感”。其特征通常在于慢性异常性疼痛(因一般不引起痛性响应的刺激(例如轻触)导致的疼痛)和痛觉过敏(对一般痛性刺激的敏感性增加)且可以持续超过任意损伤组织表观愈合的数月或数年。
泰素-诱导的周围神经病模型(TIPN)是本领域公认的神经性疼痛动物模型。Cavaletti等人(1995年5月)“Experimental peripheralneuropathy induced in adult rats by repeated intraperitonealadministration of taxol.”Exp Neurol.133(1)：64-72。Injectionofintraperitoneally to female Wistar rats induced aperipheral neuropathy that resembles neuropathy in humans.Id.64，69页。神经性疼痛的另一种动物模型包含对雄性Sprague-Dawley大鼠单次或五次腹膜内给予
Figure BDA0000088452220000212
(32mg/kg)。
Authier等人(2000年12月29日)“Description of a short-termTaxol-induced nociceptive neuropathy in rats.”Brain Res.887(2)：239-49。
在神经性疼痛脊髓损伤(SCI)模型中，NKCC1拮抗剂布美他尼显示止痛效果，启示正常或升高NKCC1活性在SCI-诱发的神经性疼痛的发生和维持中起作用。Cramer等人(2008)“The role of cation-dependentchloride transporters in neuropathic pain following spinal cordinjury.”Molecular Pain 4：36。
神经性疼痛难以治疗。有效针对伤害性疼痛的止痛药(例如阿片样麻醉品和非甾体抗炎药)几乎对神经性疼痛无效。类似地，在神经性疼痛中具有活性的药物通常对伤害性疼痛无效。已经用于治疗神经性疼痛的标准药物显示在指定患者中通常起选择性减轻一些症状的作用，但不减轻其他症状(例如缓解异常性疼痛，但不缓解痛觉过敏)。Bennett(1998)Hosp.Pract.(Off Ed).33：95-98。典型地用于控制神经性疼痛的治疗剂包括三环抗抑郁剂(例如阿米替林、丙咪嗪、去甲丙咪嗪和氯米帕明)、全身局部麻醉药和抗癫痫药(AED)(例如苯妥英、卡马西平、丙戊酸、氯硝西泮、加巴喷丁和普瑞巴林
Figure BDA0000088452220000213
)。参见Lowther(2005年9月/10月)“Pharmacotherapy Update from the Department ofPharmacy”Vol.VIII，No.5。常见的副作用包括过度镇静、头晕、记忆缺失和肝损害。此外，尽管传统上不视为用于治疗神经性疼痛，但是近期来自遗传修饰小鼠的研究显示仅靶向苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000214
(GABAA)受体亚型的活性剂可以提供对炎性和神经性疼痛的显著抗痛觉过敏活性。
Zeilhofer等人(2009)“Subtype-selective GABAA receptor mimetics-novel antihyperalgesic agents？”J Mol Med 87：465-469。因此，对改进的神经性疼痛治疗剂存在大量需求。
神经毒性
各种化学和生物学试剂以及一些病原体具有神经毒性效果。常见实例是急性酒精摄入的病理生理效应。狂饮性酒精中毒特征的偶发性的酒精中毒和戒断导致脑损伤。为模拟酒精在人体中的效应设计的动物模型显示单剂量的酒精连续给予5-10天导致内嗅皮层、齿状回和嗅球中神经变性，伴随大脑皮质水肿和电解质(Na+和K+)蓄积。与其他神经变性疾病一样，研究主要集中于基于突触的兴奋性毒素事件，其涉及谷氨酸能活性过度、胞内钙增加和γ-氨基丁酸减少。对改进的神经毒性治疗剂存在巨大需求。
带状疱疹后神经痛
带状疱疹后神经痛(例如带状疱疹、带状疱疹)是影响神经纤维和皮肤的痛性疾病。带状疱疹后神经痛是带状疱疹并发症，其为最初导致水痘的水痘带状疱疹病毒二次爆发。在水痘初次感染过程中，一些病毒保留在体内，休眠在神经细胞内部。数年后，该病毒可以再活化，从而导致带状疱疹。一旦再活化，则该病毒沿神经纤维传播，导致疼痛。当病毒达到皮肤时，它产生皮疹和水泡。带状疱疹病例(带状疱疹)通常在一个月内愈合。一些患者在皮疹和水泡愈合后持续感觉疼痛很久-称作带状疱疹后神经痛的疼痛类型。存在对带状疱疹后神经痛的各种治疗，不过，一些患者未经历完全缓解疼痛。
当带状疱疹爆发过程中神经纤维受损时，产生带状疱疹后神经痛。这些受损的神经经历长期的、通常是极痛苦的疼痛，可以持续数月-乃至数年-在首次出现带状疱疹的该区域中。这种带状疱疹并发症在老年成年人中更为频繁发生。约50％60岁以上的成年人在带状疱疹后经历带状疱疹后神经痛，而全部带状疱疹人群中仅10％发生类似情况。
带状疱疹后神经痛的症状一般限于带状疱疹爆发首次出现的皮肤区域包括剧烈和急促不清的、烧灼的或深度和酸性疼痛；对触摸和温度改变极度敏感；搔痒和麻木；和头痛。在罕见病例中，患者还可能经历肌肉虚弱或麻痹-条件是所涉及的神经还控制肌肉运动。对改进的带状疱疹后神经痛治疗剂存在巨大需求。
眼病(例如视觉障碍、眼科病)
据估计对所有在2000年出生的具有视力障碍的人而言，一生的花费总计将为25亿(2003美元)。一般参见Centers for disease Control andPrevention，Economic Costs Associated with Mental Retardation，Cerebral Palsy，Hearing Loss，& Vision Impairment，United States，2003，MMWR 2004；53：57-9。这些花费包括直接和间接花费。直接医疗花费例如医生出诊、处方药和住院病人停留，构成了这些花费的6％。直接非医疗花费例如家庭改变和特殊教育，构成了花费的16％。间接花费包括当人早期死亡、不能工作、他或她所做的工作数量或类型受限时所失去的工资价值构成了花费的77％。这些估计值不包括其他花费，例如医院对出院患者的随访、急诊科出诊和家庭现款支付的花费。视力障碍的实际经济花费由此甚至高于一般所报道的。美国专利US7,251,528。
NKCC和KCC2在内外丛状层中被表达并且共同定位于许多推定的无长突细胞和神经节细胞层细胞中。然而，推定的水平细胞身体细胞仅展示NKCC免疫反应性且许多双极细胞仅对KCC2是免疫阳性的。在外部视网膜中，施用NKCC活性特异性抑制剂布美他尼：(1)增加K+([K+](o))稳态胞外浓度和促进[K+](o)中光诱导的下降；(2)增加ERG的sPIII光感受器-依赖性成分成分；和(3)减小细胞外隙体积。相反，在外部视网膜中，施用KCC活性特异性抑制剂呋塞米减少了sPIII和光诱导的[K+](o)减少，但对稳态[K+](o)几乎没有影响。在视网膜内部，布美他尼增加光诱导的[K+](o)增加的持续性成分。这些发现由此显示NKCC和KCC2控制视网膜内[K+](o)和细胞外隙体积并且调节GABA-和甘氨酸-介导的突触传递。此外，解剖学和电生理学结果共同启示视网膜中所有主要神经元类型受氯离子协同转运蛋白活性影响。Dmitriev等人(2007年7月-8月)“Multiple functions of cation-chloride cotransporters in thefish retina.”Vis Neurosci 24(4)：635-45。
布美他尼-敏感性Na+K+2Cl-协同转运蛋白(NKCC)还明显促成Cl-吸收入色素上皮(PE)。这项工作强化了如下一般的一致性意见：Cl-的主动分泌是哺乳动物眼中眼房水形成的主要驱动力且进一步证明了完成经上皮Cl-转运的机制中的种类差异存在。Kong等人(2006年12月)“Chloridesecretion by porcine ciliary epithelium：New insight into speciessimilarities and differences in aqueous humor formation.”InvestOphthalmol Vis Sci.47(12)：5428-36。
另外，阳离子-氯离子协同转运蛋白通过介导视网膜中的神经计算涉及视网膜功能。DS神经节细胞的定向响应部分通过γ-氨基丁酸从星爆树突中定向释放介导且两种协同转运蛋白(K+Cl-协同转运蛋白和Na+K+Cl-协同转运蛋白)沿星爆(starburst)-细胞树突不对称分布介导定向选择性。Gavrikov等人(2003年12月23日)“Cation-chloridecotransporters mediate neural computation in the retina.Proc Natl Acad Sci USA 100(26)：16047-52。
此外，视网膜功能依赖于调节GABA的阳离子氯化物转运蛋白。特别地，视网膜神经元中的不同阳离子氯离子协同转运蛋白能够对GABA产生相反的响应。因此，在视网膜中，GABA对不同细胞类型和不同细胞区域的相反的效应可能主要由这两种氯离子协同转运蛋白的差别靶向决定。参见例如Barbour等人(1991年5月)“Electrogenic uptake ofglutamate and a spartate into glial cells isolated from thesalamander(Ambystoma)retina.”J Physiol.436：169-193；Keller等人(1988年1月)“Regulation of intracellular pH in culturedbovine retinal pigment epithelial cells.”Pflugers Arch.411(1)：47-52；和Vardi等人(2000年10月15日)“Evidence that differentcation chloride cotransporters in retinal neurons allow oppositeresponses to GABA.”Journal of Neuroscience 20(20)：7657-63。还参见Basu等人(1998年11月)“Proton-driyen dipeptide uptake inprimary cultured rabbit conjunctival epithelial cells.”InyestOphthalmol Vis Sci.39(12)：2365-73；Cia等人(2005年3月)Voltage-gated channels and calcium homeostasis inmammalian rodphotoreceptors.J Neurophysiol.93(3)：1468-75；Do等人(2006年6月)“Swelling-activated Cl-channels support Cl- secretion bybovine ciliary epithelium.”Inyest Ophthalmol Vis Sci.47(6)：2576-82；Hunt等人(2005年11月)“Aberrant retinal projections incongenitally deaf mice：how are phenotypic characteristicsspecified in development and evolution？”Anat Rec A Discov MolCell Evol Biol.287(1)：1051-66；MacLeish和Nurse(2007年7月)“Ion channel compartments in photoreceptors：evidence fromsalamander rods with intact and ablated terminals.”JNeurophysiol.98(1)：86-95；Mito等人(1993年3月)“Calcium-dependent regulation of cation transport in culturedhuman nonpigmented ciliary epithelial cells.”Am J Physiol.264(3Pt 1)：C519-26；Moody(1984)“Effects of intracellular H+on the electrical properties of excitable cells.”Annu RevNeurosci 7：257-78；Mroz和Lechene(1993年11月)“ExtracellularN-methyl-D-glucamine leads to loss of hair-cellsodium，potassium，and chloride.”Hear Res.70(2)：146-50；Schnetkamp(1980年5月8日)“Ion selectivity of the cationtransport system of isolated intact cattle rod outer segments：evidence for a direct communication between the rod plasmamembrane and the rod disk membranes.Biochim Biophys Acta.598(1)：66-90；和Uhl和Desel(1989年8月)“Optical probes ofintradiskal processes in rod photoreceptors.II：Light-scatteringstudy of ATP-dependent light reactions.”J Photochem Photobiol B.3(4)：549-64。
因此，许多威胁视觉的眼部障碍目前没有任何有效的疗法。治疗这种疾病中的一个主要问题在于不能将治疗剂递送入眼和维持它们以治疗有效浓度存在。因此，对治疗眼病的治疗剂存在巨大需求。
帕金森病
帕金森病(PD)属于称作运动系统障碍的一组疾病，其因产生多巴胺的脑细胞缺失导致。PD的四种主要症状是手、臂、腿、颚和面部颤动或震颤；四肢和躯干强直或僵硬；运动迟缓或运动缓慢；和体位不稳定性或平衡和协调受损。当这些症状变得更明显时，患者可以具有行走、交谈或完成其他简单任务困难。PD通常影响超过50岁的人。PD的早期症状是精细的且逐步发展。其他症状可以包括抑郁症和其他情绪改变；吞咽、咀嚼和讲话困难；排尿困难或便秘；皮肤问题；和睡眠破坏。NINDSParkinson’s Disease Information Page(2009年9月23日)。
目前，无法治愈PD，但各种药物提供了对症状的显著性缓解。通常对患者给予与卡比多巴联合的左旋多巴。卡比多巴延缓左旋多巴转化成多巴胺，直到它到达脑为止。神经细胞可以利用左旋多巴形成多巴胺并且补充脑减少的供应。尽管左旋多巴有助于至少四分之三的帕金森病病例，但是并非所有症状都对该药具有等同的响应。运动迟缓和强直响应最佳，而颤动仅勉强地得到减少。平衡和其他症状问题可能完全没有缓解。胆碱能拮抗剂可能有助于控制颤动和强直。其他药物例如溴隐亭、普拉克索和罗匹尼罗模拟多巴胺在脑中的作用，从而导致神经元如同它们对多巴胺反应时而反应。抗病毒药金刚烷胺也显示减轻症状。在2006年5月，FDA批准雷沙吉兰
Figure BDA0000088452220000261
与左旋多巴一起用于具有晚期PD的患者或作为单一药物治疗用于早期PD。NINDS Parkinson’s DiseaseInformation Page(2009年9月23日)。
帕金森病(PD)是涉及GABA信号传导破坏的神经变性疾病。GABA是中枢神经系统(CNS)中主要的抑制性神经递质。PD毁坏输入至纹状体γ-氨基丁酸能的神经元。使用新治疗剂靶向GABA合成、降解、转运或受体可以控制GABA信号传导且由此可以用于帕金森病的改进的治疗。Kleppner和Tobin(2001)“GABA signaling：therapeutic targets forepilepsy，Parkinson’s disease and Huntington’s disease.”ExpertOpin.Ther.Targets.5(2)：219-39。
精神分裂症
精神分裂症是影响指定年中约1.1％的美国18岁以上人群的慢性、严重性和残疾性脑功能障碍。具有精神分裂症的人有时听到他人未听到的声音、认为他人正在将其思维传播给世界或变得确信他人正在企图加害他们。这些经历可以使得他们恐惧和孤僻并且当他们试图与他人发生关系时出现困难。National Institute of Mental Health“Schizophrenia”website(2008)。
症状通常在十八、九岁或二十几岁的男性和二十几岁和三十几岁的女性中发生，但在罕见病例中，可以出现在儿童期。他们可以包括幻觉、妄想、思维混乱、运动障碍、情感贫乏、回避社交和认知缺陷。精神分裂症既无法确定原因，也没有任何治愈疗法；然而，抗精神病药用于治疗症状。National Institute of Mental Health“Schizophrenia”website(2008)。
此外，精神分裂症与γ-氨基丁酸能的神经元在皮层特别是皮质层中的数量减少和分布异常相关。Kaplan & Sadock’s ComprehensiveTextbook of Psychiatry(第7版)(2008)。在精神分裂症患者的尸体检查研究中，抗精神病药首次用药精神分裂症患者和非精神分裂症对照组显示在两组精神分裂症中包含内在神经元的GABA数量显著减少和这些内在神经元内GABA产生量减少。Nestler(1997)“Schizophrenia.Anemerging pathophysiology.Nature 385(6617)：578-9。因此，靶向GABA系统的治疗剂可以用于治疗精神分裂症。
耳鸣
耳鸣是在没有相应外部声音的存在下人耳内感觉到声音。耳鸣不是疾病，但是因一定范围的潜在原因导致的症状，这些原因可以包括耳部感染、耳中异物或蜡、防止(或诱导)流体消耗和导致蜡状物累积的鼻过敏和大声噪音导致的损伤。耳鸣还可以因听力损害导致和作为一些药物的副作用。一些耳鸣病例在医学上无法解释。
耳鸣可以在一侧耳或双侧耳内或头部中感觉到。它通常被描述为鸣震噪音，但在一些患者中，可能采用的形式是高音调哀鸣声、蜂鸣声、嘶嘶声、尖叫声、嗡嗡声、啼啭或哨声杂音或为滴答声、碎裂声、吼声、“蟋蟀”或“树蛙”或“蝗虫”调子、歌声或嘟嘟声。还可以将其描述为如风或波的“嘶嘶声”。耳鸣可以是间歇的或可以是连续的，其中它可能是巨大痛苦的原因。在一些个体中，耳鸣的强度可以因肩、头、舌、颚或眼运动而改变。迄今为止，尚无令人满意的治疗耳鸣的治疗剂存在。
部分传入神经阻滞在听觉系统中产生紧张性抑制缺失，这可以导致不适当的神经成形改变，最终表现为耳鸣的病理生理学。GABA的病理性减量调节提供这种抑制缺失的潜在机制。例如，在耳鸣动物模型中，GABA激动剂氨己烯酸完全和可逆地消除了耳鸣的精神躯体证据。Brozoski等人(2007)Vigabatrin，a GABA Transaminase Inhibitor，ReversiblyEliminates tinnitus in an Animal Model.J Assoc Res Otolaryngol.8(1)：105-118。此外，小鼠中NKCC1基因破坏导致听力损失。Kahle等人(2004)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102(46)：16783-16788。因此，靶向γ-氨基丁酸能的系统和/或NKCC1的治疗剂可以用于治疗耳鸣。
戒断综合征
戒断综合征一般与在突然停用具有产生躯体依赖性的药物(例如药物、休闲类药物和/或酒精)后的异常身体或精神特征相关(例如酒精戒断综合征、尼古丁戒断综合征、阿片戒断综合征、苯二氮杂戒断综合征、美沙酮戒断综合征、SSRI停药综合征、氢可酮戒断综合征)。常见的戒断症状包括出汗、颤动、呕吐、焦虑、失眠症和肌肉痛。存在戒断的不同阶段。一般而言，人开始感觉不断恶化，达到平稳期，然后症状开始消散。然而，从一些药物(例如苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000282
类、酒精)中戒断可能是致命的且由此不推荐突然停止任何类型的药物。
此外，许多添加包括影响γ-氨基丁酸能的(GABAerigic)系统的化合物，其包括、但不限于酒精和苯二氮杂类。因此，当人终止使用所述化合物时，γ-氨基丁酸能的系统涉及戒断综合征的症状。Nutt和Lingford-Hughes(2008)“Addiction：the clinical interface.”British Journal of Pharmacology 154(2)：397-405。因此，对γ-氨基丁酸能的系统起作用的活性剂可以提供治疗戒断综合征的治疗剂。
因此，对用于治疗和/或预防涉及Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC1和NKCC2)的疾病、障碍和病症的组合物和方法存在持续需求，包括、但不限于成瘾疾病、焦虑症、腹水、双相情感障碍、癌症、角膜内皮营养不良、水肿、抑郁症、癫痫症、青光眼、局部缺血、偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、眼病、疼痛、带状疱疹后神经痛和精神分裂症。另外，对用于治疗和/或预防涉及GABAA受体的疾病、障碍和病症的组合物和方法存在持续需求，包括、但不限于阿尔茨海默病、成瘾疾病、焦虑症、孤独症、双相情感障碍、抑郁症、癫痫症、亨廷顿病、失眠症、偏头痛、神经性疼痛、伤害性疼痛、疼痛、帕金森病、人格障碍、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征。
发明概述
本发明提供本文所述的式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI的化合物，它们是布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的类似物，包括其衍生物和前体药物。本发明所述化合物拮抗KCC1和/或GABAA受体。本发明所述化合物还可以用于治疗涉及NKCC1和/或GABAA受体的病症。
本发明的实施方案提供式I、II、III、IV、V和/或VI的化合物：
Figure BDA0000088452220000291
Figure BDA0000088452220000301
或其药学可接受的盐、溶剂合物、互变体或水合物，其中
R1不存在、是H、O或S；
R2不存在、是H或当R1是O或S时，R2选自氢、烷基、芳烷基、芳基、烷基氨基二烷基、烷基羰基氨基二烷基、烷氧羰基烷基、烷基羰基氧基烷基、烷基醛、烷基酮基烷基、烷基酰胺、烷芳基酰胺、芳基酰胺、烷基铵基、烷基羧酸，烷基杂芳基、烷基羟基、生物相容性聚合物例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲硫基烷基和甲硫基烷芳基，它们是未取代或取代的和当R1不存在时，R2选自氢、N，N-二烷基氨基、N，N-二烷芳基氨基、N，N-二芳基氨基、N-烷基-N-烷芳基氨基、N-烷基-N-芳基氨基、N-烷芳基-N-芳基氨基，它们是未取代或取代的；
R3选自芳基、卤素、羟基、烷氧基和芳氧基，它们是未取代或取代的；且
R4和R5各自独立地选自氢、烷基氨基二烷基、羰基烷基、羰基烷芳基、羰基芳基及其盐例如钠、钾、钙、铵、三烷基芳基铵和四烷基铵盐，条件是在一些实施方案中：当R1是O且R2、R4和R5是H时，式I的R3不是苯氧基，更具体地说，在一些实施方案中，式I的化合物不是布美他尼；当R1是O且R2、R4和R5是H时，式III的R3不是Cl，更具体地说，在一些实施方案中，式III的化合物不是呋塞米；当R1是O、R3是Cl以及R4和R5是H时，式III的R2不是甲基，更具体地说，在一些实施方案中，式III的化合物不是呋塞米甲基酯；当R1是O且R2、R4和R5是H时，式V的R3不是苯氧基，更具体地说，在一些实施方案中，式V的化合物不是吡咯他尼。
本发明的实施方案提供式VII的化合物：
Figure BDA0000088452220000311
或其药学可接受的盐、溶剂合物、互变体或水合物，其中
R3、R4和R5如上述所定义；且
R6选自烷氧羰基烷基、烷基氨基羰基烷基、烷基氨基二烷基、烷基羟基、生物相容性聚合物例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲硫基烷基和甲硫基烷芳基，它们是未取代或取代的，条件是，在一些实施方案中，当R4、R5和R6是H时，式VII的R3不是Cl，更具体地说，在一些实施方案中，式VII的化合物不是阿佐塞米。
本发明的实施方案提供式VIII的化合物：
Figure BDA0000088452220000321
或其药学可接受的盐、溶剂合物、互变体或水合物，其中
R7不存在或选自氢、烷氧羰基烷基、烷基氨基羰基烷基、烷基氨基二烷基、烷基羟基、生物相容性聚合物例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲硫基烷基和甲硫基烷芳基，它们是未取代或取代的；且
X-是卤离子例如溴离子、氯离子、氟离子、碘离子或阴离子部分例如甲磺酸根或甲苯磺酸根；或者，X-不存在且所述化合物形成“内”盐或两性离子盐(其中R7是H；参见如下结构VIIIa)，条件是，在一些实施方案中，R7始终存在且X-不存在且酸性质子已经从位于羰基和磺酰基部分侧翼的氮上被除去。更具体地说，在一些实施方案中，式VIII的化合物不是托拉塞米。
Figure BDA0000088452220000322
在一个方面中，本发明还涉及式IX的化合物：
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R6是烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R7是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R6和R7与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
条件是：
如果Z是氧或硫，则R7不存在；
如果Y是氧且Z是硫，则R6不是甲基；
如果Y是硫且Z是硫，则R6不是甲基或烷基氨基二烷基；
如果Y是氧且Z是氧，则R6不是甲基、乙基、丁基、氰基甲基、未取代的苄基、氯甲基、2，2，2-三氯乙基、乙基-N-吗啉基、N，N-二甲基-2-乙氨基、N，N-二甲基-3-丙氨基或(CH3)2C＝CHCH2CH2-(E)-(CH3)C＝CHCH2-；
如果Y是氧、Z是氮且R7是氢，则R6不是2-(4-哌嗪-1-基)乙基、3-吡啶基甲基、未取代的苄基或正丁基；
如果Y是氧且Z是氮，则R6和R7都不是未取代的苄基或乙基。
在另一个方面中，本发明涉及式X的化合物：
Figure BDA0000088452220000341
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R8是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R9是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R8和R9与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
R10是氢或烷基；
条件是：
如果Z是氧或硫，则R9不存在；
如果Z是氧且R8是氢，则R10不是氢或甲基；
如果Y是氧且Z是氧，则R8不是甲基、未取代的苄基、丁基或氰基甲基；
如果Y是氧、Z是氮且R9是氢，则R8不是氢、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基、3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基、2-(N-吗啉基)乙基、2-吡啶基甲基、3-吡啶基甲基、4-吡啶基甲基、2-(4-(2-氨基乙基)哌嗪-1-基)乙基或下式的磺内酰氨基(sultamyl)
如果Y是氧且Z是氮，则R8和R9都不是乙基或苄基；或
如果Y是氧且Z是氮，则R8和R9与它们所连接的氮原子一起不形成哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基或N-吗啉基。
在另一个方面中，本发明涉及式XI-XIII的化合物：
Figure BDA0000088452220000351
或其药学可接受的盐；
其中：
Y是O、S或Se；
R11是H，OR12、SR12，其中R12是氢、烷基、芳烷基、芳基、烷基氨基二烷基、烷基羰基氨基二烷基、烷氧羰基烷基、烷基羰基氧基烷基、烷基醛、烷基酮基烷基、烷基酰胺、烷芳基酰胺、芳基酰胺、烷基铵基、烷基羧酸，烷基杂芳基、烷基羟基、生物相容性聚合物例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲硫基烷基或甲硫基烷芳基，它们是未取代或取代的，或
R11是N，N-二烷基氨基、N，N-二烷芳基氨基、N，N-二芳基氨基、N-烷基-N-烷芳基氨基、N-烷基-N-芳基氨基或N-烷芳基-N-芳基氨基，它们是未取代或取代的；
R13是芳基、卤素、羟基、烷氧基或芳氧基，它们是未取代或取代的；且
R14和R15各自独立地是氢、烷基氨基二烷基、羰基烷基、羰基烷芳基或羰基芳基。
在另一个方面中，本发明涉及式XIV的化合物：
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R16是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、芳基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R17是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R16和R17与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R18和R19各自独立地是氢或烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R17不存在。
在另一个方面中，本发明涉及式XV的化合物：
Figure BDA0000088452220000362
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R20是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R21是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R20和R21与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R22和R23各自独立地是氢、烷基、烯基、烷氧基、烷芳氧基烷基或烷芳基。
本发明还提供是布美他尼衍生物包括其前体药物的化合物。本发明的实施方案提供式XVI的化合物：
Figure BDA0000088452220000371
(3-氨基磺酰基-5-N，N-二丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸)
式XVII的化合物：
Figure BDA0000088452220000372
或其药学可接受的盐，
其中：
Y1是-(CH2)x-，其中x是0、1或2；
R60是氢或烷基；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；且
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子。
式XVIII的化合物：
Figure BDA0000088452220000381
或其药学可接受的盐，
其中：
Y2是-(CH2)x-，其中x是0、1或2；
R60是氢或烷基；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；且
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子。
式XIX的化合物：
Figure BDA0000088452220000382
或其药学可接受的盐，
其中：
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；且
R63是烷基、氰基烷基、芳基、杂芳基、-CH2-C(O)-N(R64)-R65或-CH2-O-C(O)-R66，其中R64、R65和R66各自独立地是烷基。
式XX的化合物：
Figure BDA0000088452220000391
或其药学可接受的盐，
其中：
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；且
R67是氢、羟基或氨基。
式XXI的化合物：
Figure BDA0000088452220000392
或其药学可接受的盐，
其中：
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；
R68是-SO2-烷基或-N(R69)-R70；
R69是氢、芳基、杂芳基、环烯基、环烷基、杂环烷基、烷基环烯基、烷基环烷基、烷基芳基、烷基杂芳基或烷基杂环烷基；且
R70是氢或R69和R70与它们所连接的氮原子一起形成杂环烷基。
式XXII的化合物：
Figure BDA0000088452220000401
或其药学可接受的盐，
其中：
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；
R71是羟基或-N(R73)-R74；
R72是卤素、芳基、芳基氨基、杂芳基氨基、杂环烷基、杂芳基、杂芳氧基、杂环烷氧基或烷硫基；且
R73和R74各自独立地是烷基。
式XXIII的化合物：
Figure BDA0000088452220000411
或其药学可接受的盐，
其中：
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；
R75是烷基、芳基、环烯基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、环烷基烷基、杂芳基烷基或二烷基氨基烷基；且
R76是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基。
式XXIV的化合物：
Figure BDA0000088452220000412
或其药学可接受的盐，
其中：
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；
R77是羟基或-N(R79)-R80；
R78是-N(R81)-R82或杂环烷基；
R79是烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
R80和R81各自独立地是氢、烷基、烷芳基或烷基杂芳基；且
R82是氢、烷基、芳基或R81和R82与它们所连接的氮原子一起形成杂环烷基。
式XXV的化合物：
Figure BDA0000088452220000421
或其药学可接受的盐，
其中：
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；且
R83是卤素、芳基、杂芳基、芳基氨基、杂芳基氨基、芳氧基、杂芳氧基、芳硫基或杂芳硫基。
式XXV的化合物：
Figure BDA0000088452220000431
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；
R72是卤素、芳基、芳基氨基、杂芳基氨基、杂环烷基、杂芳基、杂芳氧基、杂环烷氧基或烷硫基；
R84是烯基、烷基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基环烯基、烷基环烷基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R85是氢、烯基、烷基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基环烯基、烷基环烷基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R86是-N(R87)-R88、环烯基、环烷基或杂环烷基；且
R87和R88各自独立地是氢、烷基、烷芳基或烷基杂芳基或R87和R88与它们所连接的氮原子一起形成杂环烷基，
条件是如果Z是氧或硫，则R85不存在。
使用方法
本发明的实施方案提供所述化合物的制备方法，所述化合物包括布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的类似物，包括本文所述的其衍生物和前体药物，且本发明实施方案还提供了通过本文所述合成方法形成的中间体化合物，以提供式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI的化合物。
在另一个方面中，本发明涉及治疗如下疾病的方法：成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、水肿、角膜内皮营养不良、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、具有先兆的偏头痛、偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍(seizure disorder)、耳鸣或戒断综合征，该方法包含给予有效量的式VII的化合物：
Figure BDA0000088452220000441
或其药学可接受的盐，
其中：
R3选自芳基、卤素、羟基、烷氧基和芳氧基，它们是未取代或取代的；
R4和R5各自独立地选自氢、烷基氨基二烷基、羰基烷基、羰基烷芳基、羰基芳基及其盐；且
R6选自烷氧羰基烷基、烷基氨基羰基烷基、烷基氨基二烷基、烷基羟基、生物相容性聚合物例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲硫基烷基和甲硫基烷芳基，它们是未取代或取代的。
在另一个方面中，本发明涉及治疗如下疾病的方法：成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、水肿、角膜内皮营养不良、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、具有先兆的偏头痛、偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣或戒断综合征，该方法包含给予有效量的式VIII的化合物：
Figure BDA0000088452220000451
或其药学可接受的盐或两性离子，
其中：
R7选自氢、烷氧羰基烷基、烷基氨基羰基烷基、烷基氨基二烷基、烷基羟基、生物相容性聚合物例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲硫基烷基和甲硫基烷芳基，它们是未取代或取代的；且
X-是卤离子或阴离子部分；或
X-不存在。
在另一个方面中，本发明涉及治疗如下疾病的方法：成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、水肿、角膜内皮营养不良、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、具有先兆的偏头痛、偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛(nociceptive neuralgia)、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣或戒断综合征，该方法包含给予有效量的式IX的化合物：
Figure BDA0000088452220000452
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R6是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；且
R7是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R6和R7与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R7不存在。
在一种优选的模式中，对该方法给予的所述化合物满足上述条件。
在另一个方面中，本发明涉及抑制Na+K+Cl-协同转运蛋白的方法，其包含给予治疗有效量的式IX的化合物：
Figure BDA0000088452220000461
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R6是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；且
R7是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R6和R7与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R7不存在。
在另一个方面中，本发明涉及抑制Na+K+Cl-协同转运蛋白的NKCC1(CCC1、BSC2)同种型的方法，其包含给予治疗有效量的式IX的化合物：
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R6是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；且
R7是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R6和R7与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R7不存在。
在另一个方面中，本发明涉及抑制Na+K+Cl-协同转运蛋白的NKCC2(CCC2、BSC1)同种型的方法，其包含给予治疗有效量的式IX的化合物：
Figure BDA0000088452220000472
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R6是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；且
R7是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R6和R7与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R7不存在。
在另一个方面中，本发明涉及抑制Na+K+Cl-协同转运蛋白的NKCC1(CCC1、BSC2)同种型和NKCC2(CCC2、BSC1)同种型的方法，其包含给予治疗有效量的式IX的化合物：
Figure BDA0000088452220000481
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R6是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；且
R7是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R6和R7与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R7不存在。
在另一个方面中，本发明涉及治疗如下疾病的方法：成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、水肿、角膜内皮营养不良、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、具有先兆的偏头痛、偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣或戒断综合征，该方法包含给予有效量的式X的化合物：
Figure BDA0000088452220000491
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R8是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R9是氢、烷基、烷芳基、二烷基氨基烷基或烷基杂环烷基；或
R8和R9与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R10是氢或烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R9不存在。
在一种优选的模式中，对该方法给予的所述化合物满足上述条件。
在另一个方面中，本发明涉及抑制Na+K+Cl-协同转运蛋白的方法，其包含给予治疗有效量的式X的化合物：
Figure BDA0000088452220000492
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R8是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R9是氢、烷基、烷芳基、二烷基氨基烷基或烷基杂环烷基；或
R8和R9与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R10是氢或烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R9不存在。
在另一个方面中，本发明涉及抑制Na+K+Cl-协同转运蛋白的NKCC1(CCC1、BSC2)同种型的方法，其包含给予治疗有效量的式X的化合物：
Figure BDA0000088452220000501
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R8是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R9是氢、烷基、烷芳基、二烷基氨基烷基或烷基杂环烷基；或
R8和R9与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R10是氢或烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R9不存在。
在另一个方面中，本发明涉及抑制Na+K+Cl-协同转运蛋白的NKCC2(CCC2、BSC1)同种型的方法，其包含给予治疗有效量的式X的化合物：
Figure BDA0000088452220000511
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R8是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R9是氢、烷基、烷芳基、二烷基氨基烷基或烷基杂环烷基；或
R8和R9与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R10是氢或烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R9不存在。
在另一个方面中，本发明涉及抑制Na+K+Cl-协同转运蛋白的NKCC1(CCC1、BSC2)同种型和NKCC2(CCC2、BSC1)同种型的方法，其包含给予治疗有效量的式X的化合物：
Figure BDA0000088452220000512
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R8是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R9是氢、烷基、烷芳基、二烷基氨基烷基或烷基杂环烷基；或
R8和R9与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R10是氢或烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R9不存在。
在另一个方面中，本发明涉及治疗如下疾病的方法：成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、水肿、角膜内皮营养不良、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、具有先兆的偏头痛、偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣或戒断综合征，该方法包含给予有效量的式XI-XIII的化合物：
Figure BDA0000088452220000521
或其药学可接受的盐；
其中：
Y是O、S或Se；
R11是H，OR12、SR12，其中R12是氢、烷基、芳烷基、芳基、烷基氨基二烷基、烷基羰基氨基二烷基、烷氧羰基烷基、烷基羰基氧基烷基、烷基醛、烷基酮基烷基、烷基酰胺、烷芳基酰胺、芳基酰胺、烷基铵基、烷基羧酸，烷基杂芳基、烷基羟基、生物相容性聚合物例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲硫基烷基或甲硫基烷芳基，它们是未取代或取代的，或
R11是N，N-二烷基氨基、N，N-二烷芳基氨基、N，N-二芳基氨基、N-烷基-N-烷芳基氨基、N-烷基-N-芳基氨基或N-烷芳基-N-芳基氨基，它们是未取代或取代的；
R13是芳基、卤素、羟基、烷氧基或芳氧基，它们是未取代或取代的；且
R14和R15各自独立地是氢、烷基氨基二烷基、羰基烷基、羰基烷芳基或羰基芳基。
在另一个方面中，本发明涉及治疗如下疾病的方法：成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、水肿、角膜内皮营养不良、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、具有先兆的偏头痛、偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣或戒断综合征，该方法包含给予有效量的式XIV的化合物：
Figure BDA0000088452220000531
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R16是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、芳基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R17是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R16和R17与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R18和R19各自独立地是氢或烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R9不存在。
在另一个方面中，本发明涉及治疗如下疾病的方法：成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、水肿、角膜内皮营养不良、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、具有先兆的偏头痛、偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣或戒断综合征，该方法包含给予有效量的式XV的化合物：
Figure BDA0000088452220000541
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R20是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R21是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R20和R21与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R22和R23各自独立地是氢、烷基、烯基、烷氧基、烷芳氧基烷基或烷芳基。
本发明还提供布美他尼的衍生物、包括其前体药物。本发明的实施方案提供式XVI的化合物：
(3-氨基磺酰基-5-N，N-二丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸)
本发明提供治疗选自如下疾病的方法：成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予有效量的式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI的化合物。在一个优选的实施方案中，这些化合物是NKCC1和/或特定GABAA受体的选择性拮抗剂。
本发明还提供使用所述式I-XXVI化合物治疗涉及Na+K+Cl-协同转运蛋白的障碍的方法，所述障碍包括、但不限于成瘾疾病(例如强迫性障碍、进食障碍(例如肥胖)、麻醉品成瘾或躯体依赖(phyisicaldependence)、酒精成瘾、麻醉品成瘾、可卡因成瘾、海洛因成瘾、阿片成瘾、酒精中毒和吸烟)；焦虑症(例如焦虑、急性焦虑、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫观念与行为障碍(OCD)、创伤后精神紧张性障碍(PTSD)、一般焦虑症和特异恐怖)；腹水(例如暖腔流体、腹膜液过量、腹水、腹水、与腹水相关的癌症、与腹水相关的肿瘤)；双相情感障碍(例如躁狂抑郁病、躁狂相、抑郁相、混合双极状态、I型双相情感障碍、II型双相情感障碍、快速循环性双相情感障碍、I型双相情感障碍、II型双相情感障碍、快速循环性双相情感障碍)；癌症(例如肿瘤、与腹水相关的癌症、与腹水相关的肿瘤)；抑郁症(例如精神病性抑郁症、产后抑郁症、季节性情感障碍(SAD)、皮层传播抑制、心境恶劣(轻性抑郁))；水肿(例如中枢神经系统水肿)；角膜内皮营养不良(例如房后眼病)；癫痫症(例如癫痫发作、癫痫性发作、簇性癫痫、急性癫痫(例如癫痫持续状态)、癫痫发作障碍(seizure disorder)和涉及癫痫的其他神经障碍(例如脑瘫、大田原综合征))；青光眼(例如眼内压增加、闭角型青光眼、新生血管性青光眼、开角型青光眼)；局部缺血(例如心肌缺血(心肌缺血)、肠缺血、肠系膜动脉缺血(急性肠系膜动脉缺血)、肝缺血和脑缺血症(脑缺血))；偏头痛(例如包括头痛的偏头痛、偏头痛变化形式、偏头痛头痛、颈部偏头痛综合征、急性精神错乱性偏头痛、具有先兆的偏头痛、无先兆的偏头痛)；神经性疼痛(例如糖尿病神经病变、神经损伤、神经束损伤、与内脏和/或躯体痛相关的神经性疼痛、周围神经病、化疗诱发的神经病、化疗诱发的周围神经病、神经痛、多神经病、单神经病、多发性单神经炎、自主神经病、对称性周围神经病、神经根病、大纤维周围神经病、小纤维周围神经病、特发性神经性疼痛)；感受伤害性神经痛；眼病(例如视网膜疾病-视网膜脱离和损伤响应；不同视网膜要素例如视杆、视锥、无长突和水平细胞之间的电传递疾病、视网膜神经节细胞活性、M üller(神经胶质)细胞功能障碍、视网膜色素上皮功能异常；发育中的视网膜形成以及成熟和发育后神经联接的适当维持的功能障碍；各种脉络膜视网膜和玻璃体视网膜疾病的正常电解质内环境稳定调节；糖尿病视网膜病变中的M üller细胞功能异常；视网膜变性疾病中的正常电活动性缺失、遗传和未知病因的那些；眼炎症疾病和病症例如脉络膜视网膜炎、多发性硬化；具有异常炎症和损伤响应的眼内的感染过程；葡萄膜炎；视网膜M üller细胞的功能异常及其疾病；RPE-视网膜色素上皮功能障碍(例如RPE疾病)；因原发性内皮功能障碍导致的内皮(后)角膜营养不良(例如Fuchs角膜内皮营养不良(FECD)、多形性角膜后层营养不良(PPCD)和先天性遗传性内皮营养不良(CHED))；色素性视网膜炎；老年性黄斑退化症(例如与年龄相关的黄斑变性、渗出性的与年龄相关的黄斑变性和近视性变性)；视网膜病(例如糖尿病视网膜病变、中毒性视网膜病变和中毒性视网膜病变)和眼房水形成疾病(例如青光眼))；疼痛(例如慢性炎性疼痛、与关节炎相关的疼痛、纤维肌痛、背痛、癌症-相关疼痛、化疗诱发的神经病、化疗诱发的周围神经病、与消化性疾病相关的疼痛、与克罗恩病相关的疼痛、与自身免疫病相关的疼痛、与内分泌疾病相关的疼痛、与糖尿病神经病变相关的疼痛、与带状疱疹或疱疹相关的疼痛、幻肢痛、自发性疼痛、慢性术后痛、慢性颞下颌疼痛、皮肤灼痛、带状疱疹后神经痛、AIDS-相关疼痛、I和II型复合性局部疼痛综合征、三叉神经痛、慢性背痛、与脊髓损伤相关的疼痛和/或复发性急性疼痛)；带状疱疹后神经痛(例如带状疱疹，带状疱疹)；和精神分裂症。在一个优选的实施方案中，这些化合物是选择性NKCC1拮抗剂。
本发明还提供使用所述式I-XXVI化合物治疗疾病的方法，所述疾病具有涉及GABAA受体，包括、但不限于阿尔茨海默病(AD)、成瘾疾病(例如强迫性障碍、进食障碍(例如肥胖、神经性厌食、食欲亢进)、麻醉品成瘾/躯体依赖、酒精成瘾、麻醉品成瘾、可卡因成瘾、海洛因成瘾、阿片成瘾、酒精中毒和吸烟)；焦虑症(例如焦虑、急性焦虑、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫观念与行为障碍(OCD)、创伤后精神紧张性障碍(PTSD)、一般焦虑症和特异恐怖)；孤独症(例如孤独症谱系障碍(ASD))；双相情感障碍(例如躁狂抑郁病、躁狂相、抑郁相、混合型双极状态、I型双相情感障碍、II型双相情感障碍、快速循环性双相情感障碍、I型双相情感障碍、II型双相情感障碍)；抑郁症(例如精神病性抑郁症、产后抑郁症、季节性情感障碍(SAD)、皮层传播抑制、心境恶劣(轻性抑郁))；癫痫症(例如癫痫、癫痫性发作、簇性癫痫、急性癫痫(例如癫痫持续状态)、癫痫发作障碍和涉及癫痫的其他神经障碍(例如脑瘫、大田原综合征))；亨廷顿病(HD)(例如亨廷顿舞蹈病)；失眠症、偏头痛(例如包括头痛的偏头痛、偏头痛变化形式(migraine variant)、偏头痛头痛、颈部偏头痛综合征、急性精神错乱性偏头痛、具有先兆的偏头痛、无先兆的偏头痛、慢性偏头痛、转化性偏头痛)；神经性疼痛(例如糖尿病神经丛集性头痛、集束性头痛、神经损伤、神经束损伤、与内脏和/或躯体痛相关的神经性疼痛、周围神经病、化疗诱发的神经病、化疗诱发的周围神经病、HIV-治疗诱发的神经病、HIV-治疗诱发的神经痛、神经痛、多神经病、单神经病、多发性单神经炎、自律神经病变、对称性周围神经病、神经根病、大纤维周围神经病、小纤维周围神经病、特发性神经性疼痛)；伤害性疼痛；疼痛(例如急性痛、慢性炎症疼痛、与关节炎相关的疼痛、纤维肌痛、背痛、癌症-相关疼痛、化疗诱发的神经病、化疗诱发的周围神经病、与消化性疾病相关的疼痛、与克罗恩病相关的疼痛、与自身免疫病相关的疼痛、与内分泌疾病相关的疼痛、与糖尿病神经病变相关的疼痛、与带状疱疹或疱疹相关的疼痛、幻肢痛、自发性疼痛、慢性术后痛、慢性颞下颌疼痛、皮肤灼痛、带状疱疹后神经痛、AIDS-相关疼痛、I和I I型复合性局部疼痛综合征、三叉神经痛、慢性背痛、与脊髓损伤、切开术后、创伤相关的疼痛、烧伤、复发性急性疼痛、头疼痛、头痛、非偏头痛性、特异性非-偏头痛性头痛、tic dolureaux、带状疱疹后神经痛、碎冰锥疼痛(ice pick headache))；帕金森病、人格障碍、精神病、癫痫发作障碍、人格障碍、精神分裂症、耳鸣和戒断综合征(例如酒精戒断综合征、尼古丁戒断综合征、阿片戒断综合征、苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000581
戒断综合征、美沙酮戒断综合征、SSRI停药综合征、氢可酮戒断综合征、可卡因戒断综合征、海洛因戒断综合征)。在一个优选的实施方案中，这些化合物是选择性GABAA受体拮抗剂。在一个优选的实施方案中，这些化合物是包含α6亚单位的GABAA受体选择性拮抗剂。在一个更优选的实施方案中，这些化合物是包含α5亚单位的GABAA受体的选择性拮抗剂。在一个更优选的实施方案中，这些化合物是包含α4亚单位的GABAA受体的选择性拮抗剂。
本发明还提供治疗诊断为具有选自如下疾病的危险因素的患者的方法：成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予有效量的式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI的化合物。在一个优选的实施方案中，这些化合物是NKCC1和/或GABAA受体的选择性拮抗剂。
本发明还提供使用所述式I-XXVI的化合物治疗诊断为具有涉及Na+K+Cl-协同转运蛋白的疾病危险因素的患者的方法，所述疾病包括、但不限于成瘾疾病(例如强迫性障碍、进食障碍(例如肥胖)、麻醉品成瘾/躯体依赖、酒精成瘾、麻醉品成瘾、可卡因成瘾、海洛因成瘾、阿片成瘾、酒精中毒和吸烟)；焦虑症(例如焦虑、急性焦虑、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫观念与行为障碍(OCD)、创伤后精神紧张性障碍(PTSD)、一般焦虑症和特异恐怖)；腹水(例如暖腔流体、腹膜液过量、腹水、腹水、与腹水相关的癌症、与腹水相关的肿瘤)；双相情感障碍(例如躁狂抑郁病、躁狂相、抑郁相、混合性双极状态、I型双相情感障碍、II型双相情感障碍、快速循环性双相情感障碍、I型双相情感障碍、II型双相情感障碍、快速循环性双相情感障碍)；癌症(例如肿瘤、与腹水相关的癌症、与腹水相关的肿瘤)；抑郁症(例如精神病性抑郁症、产后抑郁症、季节性情感障碍(SAD)、皮层传播抑制、心境恶劣(轻度抑郁症))；水肿(例如中枢神经系统水肿)；角膜内皮营养不良(例如房后眼病)；癫痫症(例如癫痫发作、癫痫性发作、簇性癫痫(a seizure cluster)、急性癫痫(例如癫痫持续状态)、癫痫发作障碍和涉及癫痫的其他神经障碍(例如脑瘫、大田原综合征))；青光眼(例如眼内压增加、闭角型青光眼、新生血管性青光眼、开角型青光眼)；局部缺血(例如心肌缺血(心肌缺血)、肠缺血、肠系膜动脉缺血(急性肠系膜缺血)、肝缺血和脑缺血症(脑缺血))；偏头痛(例如包括头痛的偏头痛、偏头痛变化形式、偏头痛头痛、颈部偏头痛综合征、急性精神错乱性偏头痛、具有先兆的偏头痛、无先兆的偏头痛)；神经性疼痛(例如糖尿病神经病变、糖尿病神经病变、神经损伤、神经束损伤、与内脏和/或躯体痛相关的神经性疼痛、周围神经病、化疗诱发的神经病、化疗诱发的周围神经病、HIV-治疗诱发的神经病、HIV-治疗诱发的神经痛、神经痛、多神经病、单神经病、多发性单神经炎、自主神经病、对称性周围神经病、神经根病、大纤维周围神经病、小纤维周围神经病、特发性神经性疼痛)；感受伤害性神经痛；眼病(例如视网膜疾病-视网膜脱离和损伤响应；不同视网膜要素例如视杆、视锥、无长突和水平细胞之间的电传递疾病、视网膜神经节细胞活性、M üller(神经胶质)细胞功能障碍、视网膜色素上皮功能异常；发育中的视网膜形成以及成熟和发育后神经联接的适当维持的功能障碍；各种脉络膜视网膜和玻璃体视网膜疾病的正常电解质内环境稳定调节；糖尿病视网膜病变中的M üller细胞功能异常；视网膜变性疾病中的正常电活动性缺失、遗传和未知病因的那些；眼炎症疾病和病症例如脉络膜视网膜炎、多发性硬化；具有异常炎症和损伤响应的眼内的感染过程；葡萄膜炎；视网膜M üller细胞的功能异常及其疾病；RPE-视网膜色素上皮功能障碍(例如RPE疾病)；因原发性内皮功能障碍导致的内皮(后)角膜营养不良(例如Fuchs角膜内皮营养不良(FECD)、多形性角膜后层营养不良(PPCD)和先天性遗传性内皮营养不良(CHED))；色素性视网膜炎；老年性黄斑退化症(例如与年龄相关的黄斑变性、渗出性的与年龄相关的黄斑变性和近视性变性)；视网膜病(例如糖尿病视网膜病变、增生性玻璃体视网膜病变和中毒性视网膜病变)和眼房水形成疾病(例如青光眼))；疼痛(例如慢性炎性疼痛、与关节炎相关的疼痛、纤维肌痛、纤维肌痛、背痛、癌症-相关疼痛、化疗诱发的神经病、化疗诱发的周围神经病、与消化性疾病相关的疼痛、与克罗恩病相关的疼痛、与自身免疫病相关的疼痛、与内分泌疾病相关的疼痛、与糖尿病神经病变相关的疼痛、与带状疱疹或疱疹相关的疼痛、幻肢痛、自发性疼痛、慢性术后痛、慢性颞下颌疼痛、皮肤灼痛、带状疱疹后神经痛、AIDS-相关疼痛、I和II型复合性局部疼痛综合征、三叉神经痛、慢性背痛、与脊髓损伤相关的疼痛和/或复发性急性疼痛)；带状疱疹后神经痛(例如带状疱疹，带状疱疹)；和精神分裂症。在一个优选的实施方案中，这些化合物是选择性NKCC1拮抗剂。
本发明还提供使用式I-XXVI所述化合物治疗诊断为具有涉及GABAA受体的疾病危险因素的患者的方法，所述疾病包括、但不限于阿尔茨海默病(AD)、成瘾疾病(例如强迫性障碍、进食障碍(例如肥胖、神经性厌食、食欲亢进)、麻醉品成瘾/躯体依赖、酒精成瘾、麻醉品成瘾、可卡因成瘾、海洛因成瘾、阿片成瘾、酒精中毒和吸烟)；焦虑症(例如焦虑、急性焦虑、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫观念与行为障碍(OCD)、创伤后精神紧张性障碍(PTSD)、一般焦虑症和特异恐怖)；孤独症(例如孤独症谱系障碍(ASD))；双相情感障碍(例如躁狂抑郁病、躁狂相、抑郁相、混合型双极状态、I型双相情感障碍、II型双相情感障碍、快速循环性双相情感障碍、I型双相情感障碍、II型双相情感障碍)；抑郁症(例如精神病性抑郁症、产后抑郁症、季节性情感障碍(SAD)、皮层传播抑制、心境恶劣(轻性抑郁))；癫痫症(例如癫痫、癫痫性发作、簇性癫痫、急性癫痫(例如癫痫持续状态)、癫痫发作障碍和涉及癫痫的其他神经障碍(例如脑瘫、大田原综合征))；亨廷顿病(HD)(例如亨廷顿舞蹈病)；失眠症、偏头痛(例如包括头痛的偏头痛、偏头痛变化形式(migraine variant)、偏头痛头痛、颈部偏头痛综合征、急性精神错乱性偏头痛、具有先兆的偏头痛、无先兆的偏头痛、慢性偏头痛、转化性偏头痛)；神经性疼痛(例如糖尿病神经病变、丛集性头痛、神经损伤、神经束损伤、与内脏和/或躯体痛相关的神经性疼痛、周围神经病、化疗诱发的神经病、化疗诱发的周围神经病、HIV-治疗诱发的神经病、HIV-治疗诱发的神经痛、神经痛、多神经病、单神经病、多发性单神经炎、自主神经病、对称性周围神经病、神经根病、大纤维周围神经病、小纤维周围神经病、特发性神经性疼痛)；伤害性疼痛；疼痛(例如急性痛、慢性炎症疼痛、与关节炎相关的疼痛、纤维肌痛、背痛、癌症-相关疼痛、化疗诱发的神经病、化疗诱发的周围神经病、与消化性疾病相关的疼痛、与克罗恩病相关的疼痛、与自身免疫病相关的疼痛、与内分泌疾病相关的疼痛、与糖尿病神经病变相关的疼痛、与带状疱疹或疱疹(shingles or herpes zoster)相关的疼痛、幻肢痛、自发性疼痛、慢性术后痛、慢性颞下颌疼痛、皮肤灼痛、带状疱疹后神经痛、AIDS-相关疼痛、I和II型复合性局部疼痛综合征、三叉神经痛、慢性背痛、与脊髓损伤、切开术后(incisional post operative)、创伤相关的疼痛、烧伤、复发性急性疼痛、头疼痛、头痛、非偏头痛性、特异性非-偏头痛性头痛、tic dolureaux、带状疱疹后神经痛、碎冰锥疼痛(ice pickheadache))；帕金森病、人格障碍、精神病、癫痫发作障碍、人格障碍、精神分裂症、耳鸣和戒断综合征(例如酒精戒断综合征、尼古丁戒断综合征、阿片戒断综合征、苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000611
戒断综合征、美沙酮戒断综合征、SSRI停药综合征、氢可酮戒断综合征、可卡因戒断综合征、海洛因戒断综合征)。在一个优选的实施方案中，这些化合物是选择性GABAA受体拮抗剂。在一个优选的实施方案中，这些化合物是包含α6亚单位的GABAA受体选择性拮抗剂。在一个更优选的实施方案中，这些化合物是包含α5亚单位的GABAA受体的选择性拮抗剂。在一个还更优选的实施方案中，这些化合物是包含α4亚单位的GABAA受体的选择性拮抗剂。
本发明的实施方案提供药物组合物，其包含式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI的化合物、其药学可接受的盐、溶剂合物、互变体、水合物或其组合和药学可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
本发明的实施方案提供所述化合物包括本文所述化合物的制备方法并且还提供通过本文所述合成方法形成的中间体化合物，以提供式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI的所述化合物。
本发明的实施方案提供试剂盒，其包括化合物，所述化合物包括本文所述的化合物。这些试剂盒可以用于本文公开的治疗方法。在另一个实施方案中，试剂盒可以包括说明书、指导、标签、警告或信息小册子。
本发明的实施方案还提供治疗疾病、病症或障碍、尤其是本文所述的疾病或障碍的方法。
本发明的实施方案提供所述化合物(包括本文所述的化合物)在制备进行上述举出的应用的药物中的应用。
此外，本发明的化合物可以用于调节神经病和神经性障碍和调节神经元同步化和改善CNS功能。在一些实施方案中，提供前体药物的所述化合物，其用量有效调节CNS障碍和/或涉及Na+K+Cl-协同转运蛋白的障碍和/或涉及GABAA受体的障碍。在具体的实施方案中，CNS障碍是阿尔茨海默病、成瘾疾病、焦虑症、孤独症、双相情感障碍、抑郁症、癫痫症、亨廷顿病、失眠症、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、伤害性疼痛、疼痛、帕金森病、人格障碍、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣或戒断综合征。
在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以用于神经保护方法(例如减轻中风后的损害和头损伤后的损害、减轻因神经变性疾病如阿尔茨海默病、亨廷顿病和帕金森病导致的损害)和减轻神经毒性(例如因乙醇导致的损害)。
在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以用于改善认知、学习或记忆的方法。或者，本文所述的化合物可以用作认知、学习或记忆辅助物。
在一个实施方案中，本文所述的化合物调节或改善具有不适当视网膜活性的眼病中的视网膜功能。在另一个实施方案中，本文所述的化合物调节视网膜色素上皮细胞的胞内pH。在另一个实施方案中，本文所述的化合物调整、改变或调节氯化物浓度以调节视网膜神经胶质细胞功能。
在一个优选的实施方案中，本文所述的化合物显示改善的CNS药理学特性和增加的通过血脑屏障(BBB)运输。
在一个优选的实施方案中，本文所述的化合物显示差别活性，对中枢神经系统的更强效果和较少的利尿效果。例如，本文所述的化合物可以用于长期(维持)疗法而没有明显的利尿效果。此外，本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物因其缺乏利尿效果而可以与利尿剂一起用于联合疗法。另外，当与利尿剂结合或同时给药时，本文所述的化合物不干扰利尿剂或导致严重副作用。
在一个优选的实施方案中，本文所述的化合物更特异性靶向治疗一种或多种所述的病症和疾病。此外，这些化合物显示对靶向的系统非的系统的作用情况更少。此外，当与其他药物联用时，本文所述的化合物几乎没有或没有副作用(例如较少的不期望的药物相互作用)。另外，可以以高水平(＞100mg)给予本文所述的化合物、尤其是类似物和前体药物而没有不良反应(例如所述化合物在高剂量下是充分耐受的)。
在一个优选的实施方案中，本文所述的化合物起调节中枢神经系统(CNS)细胞(例如神经胶质和神经元)中阴离子水平的作用。在一个更优选的实施方案中，本文所述的化合物起调节CNS细胞中胞内氯离子水平的作用。在另一个实施方案中，本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)降低CNS细胞中的胞内氯离子水平。
在另一个实施方案中，本文所述的化合物降低CNS细胞中的胞内氯离子水平(浓度)，其中所述CNS细胞是脊髓神经细胞、神经胶质细胞(例如少突胶质细胞、许旺细胞、星形胶质细胞、小神经胶质细胞)或神经元(例如中等多刺状γ-氨基丁酸能神经元或大胆碱能神经元)。
在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以与第二种活性剂联合给予。
在一个优选的实施方案中，可以预防性给予本文所述的化合物以预防、减轻本文所述疾病症状的严重性或延迟其发作。在另一个实施方案中，可以预防性给予本文所述的化合物以预防、减轻本文所述疾病复发的严重性或延迟其发作。
在一个优选的实施方案中，本文所述的化合物更特异性靶向治疗一种或多种所述的病症和疾病。此外，这些化合物显示对靶向的系统非的系统的作用情况更少。此外，当与其他药物联用时，本文所述的化合物几乎没有或没有副作用(例如较少的不期望的药物相互作用)。另外，可以以高水平(＞100mg/kg)给予本文所述的化合物、尤其是类似物和前体药物而没有或具有最低限度的不良反应(例如所述化合物在高剂量下是充分耐受的)。
选择性活性
本发明的实施方案提供能够通过血脑屏障的化合物(包括类似物和前体药物)，包含式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI的化合物或其药学可接受的盐、溶剂合物、互变体或水合物。在一些实施方案中，与衍生它们的利尿剂或利尿剂样化合物相比，本发明的化合物可以具有增加的亲脂性和/或减少的利尿效果。亲脂性可以通过测定亲水亲油平衡值(HLB)或分配系数(例如化合物在水与辛醇之间的分布)来确定。在其他实施方案中，当用于本文所述的调节(即预防、控制)和/或治疗方法时，本发明的所述化合物可以导致较少的不期望的副作用。
在一些实施方案中，给予有效量的下文提供的式I-XXVI的化合物后出现的利尿水平低于给予有效量的母体分子后出现的利尿水平的约99％、90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％或10％，所述化合物衍生自所述母体分子。例如，当以相同mg/kg剂量给药时，所述化合物可以具有低于母体分子的利尿性。或者，所述化合物比它所衍生自的母体分子更有效，使得需要更小剂量的所述化合物就可有效缓解症状且由此可以引起较少的利尿效果。类似地，所述化合物在治疗疾病过程中可以具有比母体分子长的作用期限。因此，可以以低于母体分子的频率给予本发明的化合物且由此可以在任意指定时间期限内导致较低的总体利尿效果。
在一个优选的实施方案中，本文所述的化合物显示对中枢神经系统的选择性活性，具有对中枢神经系统的更强的效果和有限的、最低程度的利尿效果或无利尿效果。布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米或托拉塞米的优选类似物产生的利尿效果低于母体化合物产生的利尿效果的五分之一、更优选七分之一。例如，本文所述的化合物(包括其前体药物)可以典型地用于长期疗法(例如维持疗法)而没有明显的利尿效果。此外，本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物可以与利尿剂一起用于联合疗法，因为它们产生最低程度的利尿效果。另外，当与利尿剂结合或同时给药时，本文所述的化合物(包括其前体药物)不干扰利尿或导致严重副作用。
本发明式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI的所述化合物可以用于调节包括预防、控制和治疗一定范围的疾病，所述疾病包括、但不限于涉及至少一种Na+K+Cl-协同转运蛋白的疾病。本发明的实施方案包括本文所述的化合物(包括其前体药物)，其调节、调整、抑制、刺激、活化和/或结合电中性阳离子-氯离子协同转运蛋白，所述蛋白包括、但不限于Na+Cl-协同转运蛋白(例如噻嗪-敏感性Na+Cl-协同转运蛋白)；顶端布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC2)；基底外侧布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC1)；和K+Cl-协同转运蛋白(例如KCC1、KCC2、KCC3、KCC4)。在一个优选的实施方案中，电中性阳离子-氯离子协同转运蛋白是布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC1、NKCC2)。
在一些实施方案中，与衍生它们的利尿剂或利尿剂样化合物相比，本发明的化合物可以具有增加的亲脂性和/或减少的利尿效果。亲脂性可以通过确定亲水亲油平衡值(HLB)或分配系数(例如化合物在水与辛醇之间的分布)来测定。在其他实施方案中，当用于本文所述的调节(即预防、控制)和/或治疗方法时，本发明所述的化合物产生较少的不期望的副作用。
在一个实施方案中，本发明包含抑制顶端布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC2)的方法，其包含给予一种组合物，该组合物包含有效量的式I-XXVI的化合物或其药学可接受的盐。在另一个实施方案中，本发明包含抑制基底外侧布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC1)的方法，其包含给予一种组合物，该组合物包含有效量的式I-XXVI的化合物或其药学可接受的盐。在另一个实施方案中，本发明包含抑制基底外侧布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC1)和顶端布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC2)的方法，其包含给予一种组合物，该组合物包含有效量的式I-XXVI的化合物或其药学可接受的盐。
在一个优选的实施方案中，本发明包含抑制基底外侧布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC1)的方法，其包含给予包含本文所述化合物的组合物，其中顶端布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC2)的抑制不超过对外侧布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC1)的抑制的效果的50％、更优选不超过25％或乃至更优选不超过15％。在另一个实施方案中，本发明包含抑制顶端布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC2)的方法，其包含给予包含本文所述化合物的组合物，其中抑制基底外侧布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC1)不超过对顶端布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC2)的效果的50％、更优选不超过25％或乃至更优选不超过15％。本文所述的一些优选的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物和衍生物对GABAA受体没有作用或仅显示对GABAA受体的最低程度的活性。
本文所述的本发明式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV和/或XXV的所述化合物可以用于调节(包括预防、控制和治疗)一定范围的疾病(包括、但不限于涉及至少一种GABAA受体的疾病)。
在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以对CNS中的GABAA受体亚组显示选择性效果且通常与对GABAA受体起作用的活性剂相关的副作用较少。例如，本文所述的化合物显示较少的镇静作用和较少的对呼吸、认知或运动功能的抑制。在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以显示对包含α5亚单位或α6亚单位的GABAA受体的选择性效果。在另一个实施方案中，本文所述的化合物显示对包含α4亚单位的GABAA受体的选择性效果。
在一个实施方案中，本发明包含拮抗突触旁(parasynaptic)GABAA受体的方法，其包含给予一种组合物，该组合物包含有效量的式I-XXVI的化合物或其药学可接受的盐。在另一个实施方案中，本发明包含拮抗包含α4亚单位的突触旁GABAA受体的方法，其包含给予一种组合物，该组合物包含有效量的式I-XXVI的化合物或其药学可接受的盐。在另一个实施方案中，本发明包含拮抗包含α5亚单位的突触旁GABAA受体的方法，其包含给予一种组合物，该组合物包含有效量的式I-XXVI的化合物或其药学可接受的盐。在另一个实施方案中，本发明包含拮抗包含α6亚单位的突触旁GABAA受体的方法，其包含给予一种组合物，该组合物包含有效量的式I-XXVI的化合物或其药学可接受的盐。
在另一个实施方案中，本发明包含拮抗包含α4亚单位的突触旁GABAA受体的方法，其包含给予包含本文所述化合物的组合物，其中具有α1亚单位的GABAA受体的拮抗作用不超过对具有α4受体的GABAA受体的效果的50％、更优选不超过25％或乃至更优选不超过15％。在另一个实施方案中，本发明包含拮抗包含α5亚单位的突触旁GABAA受体的方法，其包含给予包含本文所述化合物的组合物，其中具有α1亚单位的GABAA受体的拮抗作用不超过对具有α5受体的GABAA受体的效果的50％、更优选不超过25％或乃至更优选不超过15％。在另一个实施方案中，本发明包含拮抗包含α6亚单位的突触旁GABAA受体的方法，其包含给予包含本文所述化合物的组合物，其中具有α1亚单位的GABAA受体的拮抗作用不超过对具有α6受体的GABAA受体的效果的50％、更优选不超过25％或乃至更优选不超过15％。
本文所述的化合物可以优先结合GABAA受体。在一个实施方案中，本文所述的化合物可以优先结合包含α4亚单位的GABAA受体。在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以优先结合包含α5亚单位的GABAA受体。在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以优先结合包含α6亚单位的GABAA受体。在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以优先结合包含α3亚单位的GABAA受体。在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以优先结合包含α2亚单位的GABAA受体。
本文所述的化合物可以对位于突触旁的GABAA受体具有拮抗效果。在一个实施方案中，本文所述的化合物可以对位于突触旁的包含α4亚单位的GABAA受体具有拮抗效果。在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以对位于突触旁的包含α5亚单位的GABAA受体具有拮抗效果。在另一个实施方案中，本文所述的化合物可以对位于突触旁的包含α6亚单位的GABAA受体具有拮抗效果。
本发明所述的化合物的优先结合可以反映于有效浓度(EC50)，即所述化合物体外浓度，在该浓度下拮抗效果是通过相应化合物对特定受体所显示的最大拮抗作用的一半。特别地，本发明更优选的化合物可以是这样的化合物，其针对具有α6亚单位的GABAA受体的EC50不超过同一化合物针对具有α1亚单位的GABAA受体的EC50的50％、更优选不超过25％或乃至更优选不超过15％。甚至更优选这样的化合物，其针对包含α4的GABAA受体的EC50不超过同一化合物针对包含α1的GABAA受体的EC50的50％、更优选不超过25％或乃至更优选不超过15％。可以类似地表征对其他受体的优选结合。
本文所述的化合物在人和动物模型中有效减少癫痫、减轻头痛响应和减轻偏头痛。例如，本文所述的化合物可以优先结合GABAA受体亚型并且具有不同于传统苯二氮杂和巴比妥酸机制的对GABAA受体的拮抗效果。不同于许多布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物和衍生物，本文所述的化合物对Na+K+2Cl-协同转运蛋白(NKCC1或NKCC2)可能没有作用。不同于布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米，本文所述的化合物(例如NTP-2014)不会在动物模型中引起利尿效果。例如，本文所述化合物(例如NTP-2014)不会增加尿排出量、钠排泄或钾排泄。
本发明的实施方案还提供治疗本文所述疾病、病症或障碍的方法。在一个实施方案中，本发明提供本文所述的化合物在制备治疗本文所述疾病、病症或障碍的组合物中的应用。在另一个实施方案中，本发明提供用于治疗本文所述疾病、病症或障碍的包含本文所述化合物的组合物。
参照本文举出的附图和描述更详细解释本发明的上述和其他目的和方面。
附图简述
图1提供描述布美他尼类似物与对照组相比作为布美他尼类似物缓解焦虑能力测量值的对惊恐幅度差别的效果的图。参见实施例137
图2是显示包含环酰胺的硫代布美他尼类似物的不同合成途径的方案，所述包含环酰胺的硫代布美他尼类似物为布美他尼N-吗啉代硫代酰胺NTP-2024。参见Lawesson，S.-O.等人，Org.Syn，Coll.Vol.VII，1990，372-375和其中引述的参考文献。
图3-7是显示包含环酰胺的硫代布美他尼类似物合成的方案。硫代酰胺形成通过下列方式在两步内进行：a)使用试剂例如亚硫酰氯将羧酸转换成相应的酰卤；和b)通过使酰卤与伯或仲胺直接反应。硫代酰胺形成还可以通过羧酸和胺的1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺和1-羟基苯并三唑(EDC-HOBt)肽-型偶合一步进行。就图2中所示的每种合成而言，硫代酰胺键可以在一步中使用EDC-HOBt“肽-型”偶合形成。就二硫代布美他尼(即布美他尼二硫代酸)和一些无环硫代酰胺类的合成而言，参见美国专利申请公开号US2007/0149526A1。
图8是显示得到布美他尼N-吗啉代硫代酰胺的可替代选择方法的方案。参见Schwarz，G.，Org.Syn.，Coll.Vol.III，1955，332-334；Alper，H.等人，Angew.Chem.，Int.Ed.，1978，17，689.(31-56％)；Raucher，S.和Klein，P.，J.Org.Chem.，1981，46，3558.(80-95％)；Lawesson，S.-O.等人，Org.Syn.，Coll.Vol.VII，1990，372-375：A.Preparation；B.Thiolactam Formation；以及其中的26-30个文献；Davy，H.，Sulfur Lett.，1985，3，39-44和涉及的参考文献；″Synthesis of Thioamides and Thiolactams″，Schaumann，E.：Comprehensive Organic Synthesis，Trost，B.M.Editor-in-Chief，6卷，2.4章，Pergamon Press，Oxford，1991，pp.419-434；Lawesson，S.-O.等人，Org.Syn.，Coll.Vol.VII，1990，372-375和其中的参考文献；Fieser′s Reagents for Org.Syn.，Vol.8，1980，327；同上，Vol.9，1981，49-50；同上，Vol.10，1982，39；同上，Vol.11，1984，54-55；同上，Vol.12，1986，59；同上，Vol.13，1988，38-39；同上，Vol.15，1990，37，329；和同上，Vo1.16，1992，37-38；Davy，H.，JCS，Chem.Commun.，1982，457；Davy，H.，Sulfur Lett.，1985，3，39-44；Davy，H.，Chem.& Ind.，1985，824；Davy，H.，J.Chem.Res.(S)，1985，272；Davy，H.，J.Chem.Res.(M)，1985，2701-2712；″Synthesis of Thioesters andThiolactones″，Voss，J.，Comprehensive Organic Synthesis，Trost，B.M.Editor-in-Chief，6卷，Chapter 2.5，PergamonPress，Oxford，1991，pp.435-460；″Synthesis of Selenoesters ofAll Oxidation States″，Ogawa，A.和Sonoda，N.ComprehensiveOrganic Synthesis，Trost，B.M.Editor-in-Chief，6卷，2.6章，Pergamon Press，Oxford，1991，pp.461-484。
图9是显示得到布美他尼N-吗啉代硒基酰胺的可替代选择方法的方案。参见Rae，I.D.和Wade，M.J.，Int.J.Sulfur Chem.，1976，8，519；Voss，J.和Bruhn，F.-R.，Liebigs Ann.Chem.，1979，1931；Woollins，J.D.等人，Chemistry Europe J.，2005，11，6221-6227；″Synthesis of Selenoesters of All Oxidation States″，Ogawa，A.和Sonoda，N.：ComprehensiVe Organic Synthesis，Trost，B.M.Editor-in-Chief，6卷，2.6章，Pergamon Press，Oxford，1991，pp.461-484；Woollins，J.D.等人，Chem.Eur.J.，2005，11，6221-6227和其中的Woollins参考文献；″Synthesis of Thioamides andThiolactams″，Schaumann，E.，ComprehensiVe Organic Synthesis，Trost，B.M.Editor-in-Chief，6卷，2.4章，Pergamon Press，Oxford，1991，pp.419-434；Lawesson，S.-O.等人，Org.Syn.，Coll.Vol.VII，1990，372-375和其中的文献；Fieser′s Reagents for Org.Syn.，Vol.8，1980，327；同上，Vol.9，1981，49-50；同上，Vol.10，1982，39；同上，Vol.11，1984，54-55；同上，Vol.12，1986，59；同上，Vol.13，1988，38-39；同上，Vol.15，1990，37，329；和同上，Vol.16，1992，37-38；Davy，H.，JCS，Chem.Commun.，1982，457；Davy，H.，Sulfur Lett.，1985，3，39-44；Davy，H.，Chem.& Ind.，1985，824；Davy，H.，J.Chem.Res.(S)，1985，272；Davy，H.，J.Chem.Res.(M)，1985，2701-2712。
图10示例显示使用丁醛、在三乙酰氧基硼氢化钠的存在下一丁基甲基酯原料的丁基化反应的典型反应方案。该反应在二氯乙烷中、在乙酸的存在下进行。然后可以在例如酸性条件下使得到的二丁基甲基酯水解，在该反应方案的步骤3)后显示得到二丁基化苯甲酸产物。可以用正丁醛、在催化量的乙酸的存在下、在二氯甲烷中、在0℃处理布美他尼甲基酯，在原位形成希夫碱。然后向该混合物中加入三乙酰氧基硼氢化钠以便在还原烷基化条件下还原希夫碱，以便在布美他尼酯的3N-位上添加第二个正丁基。然后可以使这种二-正丁基化酯经历酯水解条件，得到3N-(正丁基)布美他尼-另称作3-(正丁基)布美他尼且更正式地称作：3-(二-正丁基氨基)-4-苯氧基-5-氨磺酰基苯甲酸。
图11描述NTP化合物和布美他尼对卡英酸注射后大鼠中癫痫发作诱导的效果。给大鼠i.p.注射卡英酸(KA，15mg/kg)并且用DMSO(媒介物)、NTP化合物(20μ摩尔/kg)和布美他尼(100mg/kg)治疗，检验癫痫诱导。如实施例143中所述对癫痫发作诱导分级。NTP-1(NTP-2011)；NTP-2(NTP-2022)；NTP-3(bumet)；NTP-4(NTP-2015)；NTP-5(甘露糖醇)；NTP-6(NTP-2007)；NTP-7(NTP-2024)；NTP-8(NTP-2012)；NTP-9(NTP-2008)；和Bumet(布美他尼)。
图12描述NTP化合物和布美他尼对卡英酸注射后大鼠中癫痫发作严重性(活性)的效果。给大鼠i.p.注射卡英酸(KA，15mg/kg)并且用DMSO(媒介物)、NTP化合物(20μ摩尔/kg)和布美他尼(100mg/kg)处理且检验癫痫发作严重性。如实施例143中所述对癫痫发作严重性分级。NTP-1(NTP-2011)；NTP-2(NTP-2022)；NTP-3(bumet)；NTP-4(NTP-2015)；NTP-5(甘露糖醇)；NTP-6(NTP-2007)；NTP-7(NTP-2024)；NTP-8(NTP-2012)；NTP-9(NTP-2008)；和Bumet(布美他尼)。
图13描述癫痫样活动的定量。参见Haglund和Hochman(2005年2月23日)J.Neurophysiol.94：907-918。
图14A-B显示呋塞米阻断人体受试者中的自发发作间的尖峰(spiking)。参见Haglund和Hochman(2005年2月23日)J. Neurophysiol.94：907-918。
图15A-B是癫痫样活动定量的描述。图15A显示4秒电刺激灵长类感觉皮层引起的后放电活动。图15B显示包含猝发的所有波峰的典型波峰振幅。封闭区域(area of envelope)合并了期限和波峰振幅测量值。它具有特别的相关性，因为有时期限可以因治疗显著减少，从而使波峰基本上是相同大小(由此峰高测量值在这种情况中下降)。偶然波峰振幅因治疗而显著减小，但持续许多秒的低振幅声(rumbling)可能因电刺激引起(由此期限测量值在这种情况中下降)。因此，封闭区域同时俘获了两种类型的改变并且可以被视为平均波峰振幅乘以期限(但在极短期限阶段内近似面积积分)。参见Haglund和Hochman(2005年2月23日)J.Neurophysiol.94：907-918。
图16显示福尔马林爪试验结果，其中布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物NTP-2006、NTP-2024和NTP-1007在神经性疼痛模型中均显示抗炎和止痛效果。VEH＝媒介物；分三种剂量给予NTP-2006、NTP-2024和NTP-1007：50μ摩尔/kg(23mg/kg，NTP-2006；21mg/kg，NTP-2024；和19mg/kg，NTP-1007)；250μ摩尔/kg(119mg/kg，NTP-2006；108mg/kg，NTP-2024；和217mg/kg，NTP-1007)；和500μ摩尔/kg(239mg/kg，NTP-2006；217mg/kg，NTP-2024；和193mg/kg，NTP-1007)。GBP＝以584μ摩尔/kg(100mg/kg)给予的加巴喷丁(*p＜0.05)(**p＜0.01)(***p＜0.001)
图17A-G显示呋塞米对在大鼠海马切片中放电活动后引起的刺激的效果。
图18A-R显示呋塞米阻断通过体外模型系列的自发癫痫样猝发放电。
图19A-H显示在乌拉坦麻醉的大鼠中呋塞米阻断卡英酸引起的电“癫痫持续状态”，其中EKG记录如上部迹线所示且皮质EEG记录如下部迹线所示。
图20显示在与环境有关的恐惧条件试验中的大鼠中在用布美他尼或呋塞米治疗的动物中，观察到比接受单独媒介物的动物显著减轻的僵硬程度(freezing)。
图21显示可以用布美他尼或呋塞米测试的大鼠恐惧增强的惊恐试验中的基线惊恐振幅。
图22显示给予单独的DMSO、布美他尼或呋塞米后即刻测定的单独恐惧试验中大鼠中的响应振幅。
图23显示在用DMSO、布美他尼或呋塞米治疗的大鼠中试验当天时的差别得分(单独的惊恐-恐惧增强的惊恐)。
图24显示给予DMSO、布美他尼或呋塞米后1周大鼠中的单独的惊恐振幅。
图25显示给予DMSO、布美他尼或呋塞米后1周大鼠中的差别得分。
图26显示用如下布美他尼类似物之一处理的大鼠中在测试当天时的差别得分(单独的惊恐-恐惧增强的惊恐)：布美他尼N，N-二乙基羟乙酰胺酯(称作2MIK053)；布美他尼甲基酯(称作3MIK054)；布美他尼N，N-二甲基羟乙酰胺酯(称作3MIK069-11)；布美他尼吗啉代二乙基酯(称作3MIK066-4)；布美他尼pivaxetil酯(称作3MIK069-12)；布美他尼氰基甲基酯(称作3MIK047)；布美他尼二苄基酰胺(称作3MIK065)；和布美他尼3-(二甲基氨基丙基)酯(称作3MIK066-5)。媒介物为DMSO。
图27示例蓄积尿量。使动物禁食过夜，然后给药并且在任何预治疗前禁止饮水。如果适合，在末端样品采集期间或采集血样的前6小时禁食物和水。在给予测试制品前，给全部动物预用单一IP剂量的胡椒基丁醚(“PBx”)治疗。在给药前的约5-6分钟，全部动物接受单一口服(PO)管饲剂量的0.9％注射用氯化钠USP，剂量体积为15mL/kg。通过单IP剂量以1mL/kg的剂量体积给予媒介物、DMSO和测试制品NTP-2024和NTP-2006。
图28示例示例蓄积钠排泄。使动物禁食过夜，然后给药并且在任何预治疗前禁止饮水。如果适合，在末端样品采集期间或采集血样的前6小时禁食物和水。在给予测试制品前，给全部动物预用单一IP剂量的胡椒基丁醚(“PBx”)治疗。在给药前的约5-6分钟，全部动物接受单一口服(PO)管饲剂量的0.9％注射用氯化钠USP，剂量体积为15mL/kg。通过单IP剂量以1mL/kg的剂量体积给予媒介物、DMSO和测试制品NTP-2024和NTP-2006。
图29示例示例蓄积钾排泄。使动物禁食过夜，然后给药并且在任何预治疗前禁止饮水。如果适合，在末端样品采集期间或采集血样的前6小时禁食物和水。在给予测试制品前，给全部动物预用单一IP剂量的胡椒基丁醚(“PBx”)治疗。在给药前的约5-6分钟，全部动物接受单一口服(PO)管饲剂量的0.9％注射用氯化钠USP，剂量体积为15mL/kg。通过单IP剂量以1mL/kg的剂量体积给予媒介物、DMSO和测试制品NTP-2024和NTP-2006。
图30示例给予布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米酯类和酰胺类似物(例如NTP-2014、NTP-2026、NTP-2024、NTP-2006、NTP-1007和NTP-1003)后近中颞叶(meisal temporal lobe)癫痫模型中海马放电的累积持续时间减少。将如下结果与治疗组包括DMSO和盐水媒介物对照组各自的前剂量条件校准。测试制品化合物的剂量为：50mg/kg，NTP-2014和NTP-2026；和150mg/kg，NTP-2024、NTP-2006、NTP-1007和NTP-1003。
图31示例给予布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米酯类和酰胺类似物(例如NTP-2014、NTP-2026、NTP-2024、NTP-2006、NTP-1007和NTP-1003)后近中颞叶癫痫模型中海马放电的累积次数减少。将如下结果与治疗组包括DMSO和盐水媒介物对照组各自的前剂量条件校准。测试制品化合物的剂量为：50mg/kg，NTP-2014和NTP-2026；和150mg/kg，NTP-2024、NTP-2006、NTP-1007和NTP-1003。
图32示例选择布美他尼衍生物NTP-2014，测试其抑制NKCC的能力。在两种不同的测试的体外细胞报道系统(reproter system)(A7r5无限增殖化细胞和初级细胞培养物)中，NTP-2014未显示对NKCC1氯化物转运的抑制。甚至在协同转运蛋白活化促分裂原(例如FGF)的存在下，NTP-2014也不抑制NKCC1或NKCC2(数据未显示)。
图33A-C示例选择布美他尼衍生物NTP-2014，测试其对尿排出量(33A)、钠排泄(33B)和钾排泄(33C)的效果。NTP-2014不增加尿排出量、钠排泄和钾排泄。
图34A-B示例选择布美他尼衍生物NTP-2014，显示海马切片模型中自发IPSCs显著增加，其中NTP-2014显示抑制事件之间的时间显著减少(例如事件频率增加)。NTP-2014将两次实验中抑制事件之间的平均间隔从257ms减少至205ms(图34A)和从535至401ms(图34B)。
图35A-B示例选择布美他尼衍生物NTP-2014，显示海马切片模型中微型IPSCs显著增加，其中NTP-2014显示抑制事件之间的时间显著减少(例如事件频率增加)。NTP-2014将两次实验中抑制事件之间的平均间隔从315ms减少至162ms(图35A)和从361至160ms(图35B)。
图36A-C示例典型γγ-氨基丁酸能的药物(例如苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000751
类)是增加包含α1亚单位的GABAA受体，中抑制电流振幅和时程的激动剂。如下所示：(A)FIRISUM(氯巴占)抗惊厥药；(B)AMBIEN(唑吡坦)睡眠助剂；和(C)VALIUM(地西泮)抗焦虑药，它们均增加包含GABAA受体的α1亚单位中抑制电流的振幅和时程。
图37A-C示例选择布美他尼衍生物NTP-2014，显示在如下浓度下α4GABAA受体同种型中的电流抑制：(A)1μM GABA；(B)10μM GABA；和(C)100μM GABA。较高GABA浓度(例如100μM GABA)导致更大的抑制，从而启示NTP-2014起这些GABAA受体的非竞争性抑制剂的作用。
图38是本文所述化合物的作用的可能机制的示例图，所述化合物选择性拮抗γ-氨基丁酸能的中间神经元中突触旁α4 GABAA受体同种型。在建议的机制中，(1)GABA从突触前末梢被活化的抑制性神经元释放；(2)GABA结合活化它们的突触后GABAA受体，由此增加抑制(例如突触后神经元超极化)；(3)GABA还结合突触旁(例如突触前和突触外)GABAA受体；(4)在一种可能的作用机制中，本文所述的化合物(例如NTP-2014)选择性结合突触旁α4变体GABAA受体(抑制负反馈圈)，由此增加GABA释放。这通过增加施加于突触后神经元的抑制性刺激导致兴奋和抑制平衡恢复。
图39A-C示例NTP-2014对α1β3γ2 GABAA受体同种型中电流的效应。
电流振幅未随在激动剂活性剂如苯二氮杂
Figure BDA0000088452220000761
类的增加而增加，实际上，它在发现高放电率的GABA浓度下减小。
图40A-B示例NTP-2014对α1/α2/α3/α5 GABAA受体同种型中电流的效应。在包含α2、α3、α5亚单位亚型的GABAA受体同种型中，10μMNTP-2014在高GABA浓度下抑制这些同种型。
图41A-C示例NTP-2014对包含α4或α6的GABAA受体同种型中电流的抑制效应：(A)α6β3γ2在0.1μM GABA、1μM GABA和10μM GABA和(B)α4β3γ2在0.1μM GABA、1μM GABA和10μM GABA。图41C示例NTP-2014在包含α4或α6的GABAA受体同种型中EC50＝20.2μM。
图42A-C示例在100μM GABA下布美他尼(A)和NTP-2014(B)对α4β3γ2 GABAA受体同种型的抑制作用的比较。与NTP-2014相反，布美他尼直到100μM浓度对GABAA受体同种型也无效果。这种效应图示在图42C中，其中NTP-2014显示IC50＝16μM。
图43示例严重神经性疼痛小鼠模型(例如晚期福尔马林爪模型)中，多种NTP化合物在缓解头痛方面比加巴喷丁更有效或与之相当。
图44A-D示例NTP-2014显示在小鼠伤害性疼痛模型(例如用尾试验)中的有效止痛效果。
图45示例NTP-2014显示在化疗诱发的(紫杉醇)神经性疼痛模型中的有效止痛效果。
图46A-C示例NTP-2014显示小鼠，神经性疼痛Chung模型中的有效止痛效果。
详细描述
现在相应于本文所述的实施方案更详细描述本发明的上述和其方面。应理解本发明可以以不同形式具体化且不应被视为限于本文举出的实施方案。而提供这些实施方案是为了充分和完整地进行这种公开并且向本领域技术人员完整传达本发明的范围。
定义
本文本发明说明书中使用的术语的的仅在于描述具体的实施方案，而不指定限制本发明。除非上下文中另外清楚地表示，否则本发明实施方案和待批权利要求说明中使用的单数形式“一种(a)”、“一个(an)”和“该或所述的(the)”欲也包括复数形。此外，本文所用的“和/或”指和包括一种或多种相关举出的项目的任意和所有可能的组合。此外，本文所用的“约”在指可测定的值例如化合物的量、剂量、时间、温度时指包括具体量的20％、10％、5％、1％、0.5％或乃至0.1％的变化。除非另有定义，否则本说明书中使用的全部术语包括技术和科学术语具有与本发明所属技术领域普通技术人员通常所理解的相同的含义。
将本文举出的全部公开文献、专利申请、专利和其他参考文献完整引入参考。
本文所用的“给药”广泛指对患者给予组合物的任意方式。除非另有指示，否则优选的给药途径是口服，本文的任意提及的“给药”包括“口服给药”。
本文所用的“烯基”广泛指具有一个或多个双键并且包含2-20个碳原子的直连或支链烃基。烯基的实例包括丙烯基、丁烯基、戊烯基等。本文所用的“环烯基”或“环状烯基”指不含杂原子的碳环且包括单-、双-和三环饱和碳环以及稠合环系。环烯基的实例包括环丙烯基、环戊烯基、环己烯基、环戊二烯基、环己二烯基等。这种烯基和环烯基可以任选如本文所述被取代。
本文所用的“烷基”广泛指直连或支链饱和烃基。“烷基”还广泛指环状(即环烷基)烷基。烷基的实例包括、但不限于直链烷基包括甲基、乙基、正-丙基、正丁基、正-戊基、正-己基、正-庚基、正-辛基；和支链烷基包括异丙基、叔-丁基、异-戊基、新戊基、异-戊基等。本文所用的“环烷基”或“环状烷基”指不含杂原子的碳环且包括单-、双-和三环饱和碳环以及稠合环系以及稠合环系。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。环烷基可以是取代或未取代的且环烷基包括环丙基、环戊基、环己基、环庚基等。这种烷基可以任选如本文所述被取代。
“氰基烷基”广泛指与氰基(即C≡N)键合的直链或支链、饱和或部分不饱和烃基。
“卤代烷基”广泛指与卤素(例如氟、氯、溴和碘)键合的直链或支链、饱和或部分不饱和烃基。
本文所用的“烷芳基”广泛指与芳基键合的直链或支链、饱和烃基。烷芳基的实例包括、但不限于苄基、4-氯苄基、甲基苄基、二甲基苄基、乙基苯基、丙基-(4-硝基苯基)等。这种烷芳基可以任选如本文所述被取代。
本文所用的“烯基”广泛指具有两个末端一价残基中心的直链或支链，其通过从直连母体烷的两个末端碳原子各自除去一个氢原子衍生。
本文所用的“芳基”或“Ar”广泛指芳族基团或与一个或多个任选取代的芳族基团稠合的任选取代的芳族基团，其任选被适合的取代基取代，所述取代基包括、但不限于低级烷基、低级烷氧基、低级烷硫基(loweralkylsulfanyl)、低级烷基次磺酰基、低级烷基磺酰基、氧代、羟基、巯基、任选被烷基取代的氨基、羧基、任选被烷基取代的氨基甲酰基、任选被烷基取代的氨基磺酰基、酰基、芳酰基、杂芳酰基、酰氧基、芳酰氧基、杂芳酰氧基、烷氧基羰基、硝基、氰基、卤素或低级全氟烷基、允许多取代度。芳基的实例包括、但不限于苯基、2-萘基、1-萘基等。
本文所用的单独或作为另一基团的组成部分的“烷氧基”广泛指如本文所定义的烷基，其通过氧基悬挂于母体分子部分上。在一些实施方案中，烷基可以被一个或多个杂原子(例如O、S或N)间隔。烷氧基的实例包括、但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、叔-丁氧基、戊基氧基、己基氧基、乙基氧基乙基等。
本文所用的“烷芳氧基”或“氧基烷芳基”广泛指基团-O-烷基-芳基，其中Ar是芳基。实例包括、但不限于苄基氧基、氧基苄基、2-萘基氧基和氧基-2-萘基。
本文所用的“烷芳氧基烷基”或“烷氧基烷芳基”广泛指基团-烷基-O-烷基-芳基，其中Ar是芳基。实例包括、但不限于苄基氧基乙基。
本文所用的“类似物”广泛指母体化合物上一个或多个化学部分的修饰或取代且可以包括母体化合物的衍生物、位置异构体和前体药物。
本文所用的“芳氧基”广泛指基团-ArO，其中Ar是芳基或杂芳基。实例包括、但不限于苯氧基、苄基氧基和2-萘基氧基。
本文所用的“氨基”广泛指-NH2，其中一个或两个氢原子可以任选被烷基或芳基替代或各自之一可以任选被取代。
本文所用的“烷硫基”或“硫代烷基”单独或作为另一基团的组成部分广泛指本文所定义的烷基，其通过硫部分悬挂于母体分子部分上。烷硫基有代表性的实例包括、但不限于甲硫基、硫代甲基、乙硫基、硫代乙基、正-丙硫基、硫代-正-丙基、异丙硫基、硫代-异丙基、正丁硫基、硫代-正丁基等。
本文所用的“芳硫基”或“硫代芳基”广泛指基团-ArS，其中Ar是芳基。实例包括、但不限于苯硫基、硫代苯基、2-萘硫基和硫代-2-萘基。
本文所用的“烷芳硫基”或“硫代烷芳基”广泛指基团-S-烷基-芳基，其中Ar是芳基。实例包括、但不限于苄硫基、硫代苄基、2-萘硫基和硫代-2-萘基。
本文所用的“烷基杂环烷基”指本文所用的广泛指与杂环烷基键合的直链或支链、饱和烃基。
本文所用的“生物相容性聚合物”广泛指基本上无毒性且不倾向于产生显著免疫应答、凝血或其他不期望的效应的聚合物。根据本发明的一些实施方案，聚亚烷基二醇是生物相容性聚合物，其中本文所用的聚亚烷基二醇指直链或支链聚亚烷基二醇聚合物，例如聚乙二醇、聚丙二醇和聚丁二醇，且还包括聚亚烷基二醇的一烷基醚。在本发明的一些实施方案中，聚亚烷基二醇是低级烷基聚亚烷基二醇部分，例如聚乙二醇部分(PEG)、聚丙二醇部分或聚丁二醇部分。PEG具有式-HO(CH2CH2O)nH，其中n可以在约1-约4000或更大的范围。在一些实施方案中，n为1-100，而在其他实施方案中，n为5-30。PEG部分可以是直链或支链的。在其他实施方案中，PEG可以与例如羟基、烷基、芳基、酰基或酯这样的基团连接。在一些实施方案中，PEG可以是烷氧基PEG，例如甲氧基-PEG(或mPEG)，其中一端是相对惰性的烷氧基，而另一端是羟基。
本文所用的“生物利用度”广泛指给药后动物对药物的利用度且可以与“全身接触”互换使用(例如药物的生物利用度表示为细胞与药物的全身接触)。
本文所用的“羧基”广泛指基团-CO2H。
本文所用的“环烷基”指不含杂原子的碳环且包括单-、双-和三环饱和碳环以及稠合环系。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。环烷基可以是取代或未取代的。
本文所用的“有效量”或“有效”广泛指导致通过临床测试和评价、患者观察结果等注意到的疾病或障碍症状的缓解。“有效量”或“有效”还可以指定导致生物或化学活性的可检测到的改变的剂量。可检测到的改变可以由领域技术人员针对相关机制或过程检测和/或进一步定量。此外，“有效量”或“有效”可以指定维持期望生理学状态的用量，即减轻或预防所关注病症显著恶化和/或促进其改善。正如本领域一般可理解的，剂量将根据给药途径、症状、患者体重的不同而改变，而且取决于所给予的所述化合物。
本文所用的“卤素”广泛指溴、氯、氟或碘。或者，本文所用的术语“卤化物或卤离子”广泛指溴化物或溴离子、氯化物或氯离子、氟化物或氟离子或碘化物或碘离子。
本文所用的“羟基”广泛指基团-OH。
本文所用的“杂芳基”指芳族5-或6-元环，其中至少一个原子由杂原子(例如O、S或N)组成且其余原子是碳。5-元环具有两个双键且6-元环具有三个双键。杂芳基可以是单环或双环(稠合或非稠合)的。单环杂芳基的实例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等。双环杂芳基的实例包括吲嗪基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基等。杂芳基可以是取代或未取代的。
本文所用的“杂环烷基”指环烷基，其中环上的至少一个碳原子被杂原子(例如O、S或N)替代。杂环烷基可以是单环或双环(稠合或非稠合)的。单环杂环烷基的实例包括氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、高哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、1-氧代硫代吗啉基、1，1-二氧代硫代吗啉基、四氢噁唑基、四氢异噁唑基、四氢咪唑基、四氢吡唑基、四氢噻唑烷基、四氢异噻唑烷基、四氢嘧啶基、四氢哒嗪基、4-哌啶酮基等。双环非稠合杂环烷基的实例包括奎宁环基、金刚烷基、2-偶氮双环[3.2.1]辛基等。稠合杂环烷基的实例包括任意上述举出的与另一环烷基或杂环烷基稠合的单环杂环烷基。杂环烷基可以是取代或未取代的。
本文所用的“水合物”广泛指当溶剂是水时的所述化合物。
本文所用的“增加的”或“增加”广泛指可测定的特性的定量改变，其大于测定技术中的内在误差界限，优选相对对照组测量值增加约2-倍或更大，更优选增加约5-倍或更大且最优选增加约10-倍或更大。特别地，本文所用的术语“增加”广泛指使得作为数字、大小、强度或特性的数值更大；加入；和/或增大。本文所用的“增加”还包括膨胀、延伸、延长、增长、扩大、生长、发展和/或溶胀。本文所用的“增加”还包括这样的情况，其中指定参数(例如水平、用量、大小、范围、期限、重量)在数字、大小、强度或特性上大于它过去的数值。此外，可以将指定参数的任意数字、大小、强度或质量的“增加”确定在两个或更多个时间点之间，尤其是如果在治疗、事件或给予活性剂或组合物的前后。此外，“增加”广泛指功能、分析和/或临床上显著或可检测到的所关注的指定参数的数字、大小、强度或特性的改变。
本文所用的“哺乳动物”广泛指哺乳动物类别的任意和所有的温血脊椎动物，包括人，其特征在于皮肤上覆盖毛发，且在雌性中，产奶的乳腺用于滋养年幼动物。哺乳动物的实例包括、但不限于羊驼、穿山甲、水豚、猫、黑猩猩、栗鼠类、牛、狗、山羊、大猩猩、仓鼠、马、人、狐猴、美洲驼羊、小鼠、非人类的灵长类、猪、大鼠、绵羊、鼩鼱和貊。哺乳动物包括、但不限于牛、犬、马、猫、鼠、牛、猪、灵长类和啮齿类动物。哺乳动物还包括National Museum of Natural History，Smithsonian Institution in Washington DC维护的Mammal Species ofthe World上举出的任意和全部那些动物，将该文献完整引入本文参考。
本文所用的“N-氧化物”或“胺N-氧化物”广泛指具有N-O键的化学结构，其中氮带正电荷且氧带负电荷。
本文所用的“N-取代的磺酰胺”广泛指具有-SO2-NH(R)基团的化学结构。在本文上下文中，R-基团包括、但不限于低级烷基(例如C1-C5烷基)、低级烯基(例如C2-C6烯基)、烷芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基和杂芳基。
本文所用的“N，N-二取代的磺酰胺”广泛指具有-SO2-NRR’基团的化学结构。在本文上下文中，R和R’相同或不同且独立地是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基、杂芳基或与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以是取代或未取代的并且可以具有一个或多个杂原子(例如N、O或S)。
本文所用的“突触旁”广泛指定位于突触外部或周边(例如神经间隙)的受体(例如GABAA受体)。此外，“突触旁”广泛指突触周围、突触外和突触前定位的任意受体。
本文所用的“患者”广泛指需要治疗以缓解疾病状态或预防疾病状态发生或复发的任意动物。此外，本文所用的“患者”广泛指预先被诊断具有危险因素、病史、易感性、症状、征兆的任意动物，其处于风险中或是疾病患者群体的成员。患者可以是临床患者例如人或兽类患者例如陪伴动物、家养动物、家畜类、外来动物或动物园动物。动物可以是哺乳动物、爬行动物、鸟类、两栖动物或无脊椎动物。
本文所用的“药学可接受的盐”广泛指许可其应用或作为药物的制剂并且保持特定化合物的游离酸和碱的生物有效性的化合物的盐形式，其不是生物学上或其他方面不期望的。
本文所用的“预防有效量”广泛指当对患者给药以预防疾病或预防疾病复发时足以进行这种预防疾病或复发的化合物用量。预防有效量可以是有效预防征兆和/或症状发生的用量。“预防有效量”可以根据疾病及其严重性和所治疗患者的年龄、体重、医学史、对疾病的易感性、预先存在的疾病的不同而改变。
本文所用的“预防”广泛指疗法过程，其中征兆和/或症状在患者中不存在、消退或预先存在于患者中。预防包括防止疾病在治疗患者疾病后发生。此外，预防包括治疗可能潜在发生疾病的患者，尤其是易感疾病的患者(例如患者人群的成员、处于危险因素中或处于发生疾病风险中的那些成员)。
本文所用的“保护性”广泛指减少患者疾病的发生率或严重性。本文所用的保护性广泛指抑制疾病、阻止疾病或其临床症状发展和/或导致疾病或其临床症状消退。预防还优选包括预防或减少患者疾病的发生率或严重性。
本文所用的“保护性有效量”广泛指当对患者给药时减轻征兆和/或症状发生的严重性、减缓征兆和/或症状生发发展、预防征兆和/或症状发生发展的化合物用量。“保护性有效量”可以根据疾病及其严重性和所治疗患者的年龄、体重、医学史、对疾病的易感性、预先存在的疾病的不同而改变。
本文所用的“季铵”广泛指“鎓”态氮上具有与带有正电荷的氮的四个键的化学结构，即“R4N+”或“季氮”，其中R是有机取代基例如烷基或芳基。本文所用的术语“季铵盐”广泛指季铵阳离子与阴离子结合。
本文所用的疾病“征兆”广泛指在检查患者时可发现的指示疾病的任意异常；疾病的客观适应证，与症状相反，其是疾病的主观适应证。
本文所用的疾病“症状”广泛指患者所经历并且表示疾病的来自正常结构、功能或感觉的任意病态现象或破坏。
本文所用的“受试者”广泛指适合于根据本发明治疗的任何对象，包括、但不限于鸟类和哺乳动物受试者，且优选哺乳动物。本发明的哺乳动物包括、但不限于犬、猫、牛、山羊、马、羊、猪、啮齿类(例如大鼠和小鼠)、兔类动物、灵长类、人等和在子宫内的哺乳动物。需要根据本发明治疗的任意哺乳动物是适合的。优选人类受试者。可以根据本发明治疗两种性别和任意发育阶段的人类受试者(即初生婴儿、儿童、青少年、青年、成年)。
本发明还可以对动物受试者进行，特别是用于哺乳动物受试者，例如小鼠、大鼠、狗、猫、牛、山羊、绵羊和马这样的兽类目标和用于药物筛选和药物研发目的。本发明还可以对鸟类进行，包括小鸡、鸭、火鸡、鹅、鹌鹑、雉鸡(例如驼鸟)和家养鸟(例如鹦鹉和金丝雀)和卵内鸟。“受试者”与“患者”可以互换使用。
本文所用的“溶剂合物”广泛指意欲涉及特定化合物的药学可接受的溶剂合物形式，其保持这种化合物的生物活性，例如因所述化合物与一种或多种溶剂分子缔合产生。溶剂合物的实例包括、但不限于本发明化合物与水、1-丙醇、2-丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸或乙醇胺的组合。
本文所用的“取代的”广泛指基团的一个或多个氢原子被本领域技术人员公知的取代基替代并且产生如下所述的稳定化合物。适合的替代基团的实例包括、但不限于烷基、酰基、烯基、炔基、环烷基、芳基、烷芳基、羟基、硫代、烷氧基、芳氧基、酰基、氨基、酰氨基、羧基、羧基烷基、硫代羧基烷基、羧基芳基、硫代羧基芳基、卤素、氧代、巯基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、脒基、氨基甲酰基、环烷基、杂环烷基、二烷基氨基烷基、羧酸、羧酰氨基(carboxamido)、卤代烷基、二卤代烷基、三卤代烷基、三卤代烷氧基、烷硫基、芳烷基、烷基磺酰基、芳硫基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、胍基、脲基、硝基等。当这种组合产生稳定用于指定目的的化合物时，允许取代。例如，当得到的化合物足以从反应混合物中稳定分离至有用程度纯度存在并且配制成治疗剂或诊断剂或试剂时，允许取代。
本文所用的“疗法”或“治疗”广泛指治疗疾病、阻止或减少疾病或其临床症状发生和/或缓解疾病、导致疾病或其临床症状消退。疗法包括疾病、疾病征兆和/或症状的防止、预防、治疗、治愈、方案、药物、最小化、减轻、缓解和/或提供从疾病、疾病征兆和/或症状的缓解。疗法包括缓解具有进行的疾病征兆和/或症状的患者的征兆和/或症状(例如疼痛、炎症)。疗法还包括“防止”和“预防”。防止包括预防疾病在治疗患者疾病后发生或减少患者疾病的发生率或严重性。用于疗法目的的术语“减轻”广泛指征兆和/或症状的临床显著减轻。疗法包括治疗复发或再发性征兆和/或症状(例如疼痛征兆和/或症状)。疗法包括、但不限于排除征兆和/或症状表现和减轻存在的征兆和/或症状和消除存在的征兆和/或症状。疗法包括治疗慢性疾病(“维持”)和急性疾病。
疗法可以用于具有危险因素的患者、处于易感人群风险中的患者、具有疾病史的患者、具有症状的患者、具有征兆的患者、具有征兆但无症状的患者和具有症状但无征兆的患者。疗法还可以用于无危险因素的患者、未处于风险中的患者、未处于易感人群中的患者、无疾病史的患者、无症状的患者、无征兆的患者。疗法可以缓解、缓和、减弱、减轻、缩短、减少、减轻、减小、减轻、使得更好、变健康、缓和、减轻、平定、解除、康复、纠正、修复和/或缓和疾病、疾病征兆和/或疾病症状。
本文所用的“治疗”或“治疗”广泛指疗法过程，其中征兆和/或症状存在于患者中。目的在于疗法的术语“减轻”广泛指征兆和/或症状临床显著减轻。治疗包括治疗慢性疾病(“维持”)和急性疾病。治疗可以用于具有危险因素的患者、处于易感人群风险中的患者、具有疾病史的患者和/或具有症状的患者、具有征兆的患者。治疗可以缓解、缓和、减弱、减轻、缩短、减少、减轻、减小、减轻、使得更好、变健康、缓和、减轻、平定、解除、康复、纠正、修复和/或缓和疾病、疾病征兆和/或疾病症状。通过术语涉及Na+K+Cl-协同转运蛋白的疾病的“治疗”或“医治”欲意指与没有治疗的存在下可能发生的情况相比，减轻疾病严重性或疾病症状或部分或完全消除疾病。治疗无需获得疾病的完全治愈。所谓涉及Na+K+Cl-协同转运蛋白的疾病的术语“预防”或“防止”应指与没有治疗的存在下可能发生的情况相比，本发明的方法消除或减少疾病发生或发作。或者认为，与没有治疗的存在下发生的情况相比，本发明的方法缓解、延迟、控制或减少受试者疾病的可能性或概率。此外，涉及GABAA受体的疾病的术语“治疗”或“医治”意欲指与没有治疗的存在下发生的情况相比，减轻疾病严重性或疾病症状，或部分或完全消除疾病。治疗无需获得疾病的完全治愈。
本文所用的“治疗有效量”广泛指当对患者给药治疗疾病时足以实现这种该疾病治疗的化合物用量。治疗有效量可以是预防有效量和/或有效用于预防的用量。治疗有效量可以是有效减轻的用量、有效预防征兆/症状发生的用量、减轻征兆/症状发生严重性、消除征兆/症状发生、减缓征兆/症状发生发展、预防征兆/症状发生发展和/或对征兆/症状发生进行预防的用量。“治疗有效量”可以根据疾病及其严重性和所治疗患者的年龄、体重、医学史、疾病易感性、预先存在的疾病的不同而改变。术语“有效量”与用于本发目的的“治疗有效量”是同义词。
1.化合物
根据一些实施方案，本发明提供新化合物。因此，可以不包括或修饰本文所定义的任意R基团，以排除已知化合物和/或提供新化合物。本发明的化合物可以包括式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV和/或XVI的化合物：
Figure BDA0000088452220000861
Figure BDA0000088452220000871
或其药学可接受的盐、溶剂合物、互变体或水合物，其中
R1不存在，是H、O或S；
R2不存在，是H或当R1是O或S时，R2选自氢、烷基、芳烷基、芳基、烷基氨基二烷基、烷基羰基氨基二烷基、烷氧羰基烷基、烷基羰基氧基烷基、烷基醛、烷基酮基烷基、烷基酰胺、烷芳基酰胺、芳基酰胺、烷基铵基、烷基羧酸、烷基杂芳基、烷基羟基、生物相容性聚合物例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲硫基烷基和甲硫基烷芳基，它们是未取代或取代的，且当R1不存在时，R2选自氢、N，N-二烷基氨基、N，N-二烷芳基氨基、N，N-二芳基氨基、N-烷基-N-烷芳基氨基、N-烷基-N-芳基氨基、N-烷芳基-N-芳基氨基，它们是未取代或取代的；
R3选自芳基、卤素、羟基、烷氧基和芳氧基，它们是未取代或取代的；
且
R4和R5各自独立地选自氢、烷基氨基二烷基、羰基烷基、羰基烷芳基、羰基芳基及其盐例如钠、钾、钙、铵、三烷基芳基铵和四烷基铵盐，条件如下，在一些实施方案中：当R1是O且R2、R4和R5是H时，式I的R3不是苯基氧基，更具体地说，在一些实施方案中，式I的化合物不是布美他尼；当R1是O且R2、R4和R5是H时，式III的R3不是Cl，更具体地说，在一些实施方案中，式III的化合物不是呋塞米；当R1是O、R3是Cl且R4和R5是H时，式III的R2不是甲基，更具体地说，在一些实施方案中，式III的化合物不是呋塞米甲基酯；当R1是O且R2、R4和R5是H时，式V的R3不是苯基氧基，更具体地说，在一些实施方案中，式V的化合物不是吡咯他尼。
在本发明的一些实施方案中，式I的化合物可以是布美他尼、布美他尼醛、布美他尼甲基酯、布美他尼氰基甲基酯、布美他尼乙基酯、布美他尼异戊基酯、布美他尼辛基酯、布美他尼苄基酯、布美他尼二苄基酰胺、布美他尼二乙基酰胺、布美他尼吗啉代乙基酯、布美他尼3-(二甲基氨基丙基)酯、布美他尼N，N-二乙基羟乙酰氨基酯、布美他尼N，N-二甲基羟乙酰氨基酯、布美他尼pivaxetil酯、布美他尼propaxetil酯、布美他尼甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基酯、布美他尼苄基三甲基铵盐和布美他尼十六烷基三甲基铵盐。在特定的实施方案中，所述化合物不是布美他尼。
在本发明的其他实施方案中，式I的化合物可以是布美他尼[-(C＝O)-SH]硫代酸，布美他尼S-甲基硫酯、布美他尼S-氰基甲基硫酯、布美他尼S-乙基硫酯、布美他尼S-异戊基硫酯、布美他尼S-辛基硫酯、布美他尼S-苄基硫酯、布美他尼S-(吗啉代乙基)硫酯、布美他尼S-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、布美他尼S-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、布美他尼S-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、布美他尼S-pivaxetil硫酯、布美他尼S-propaxetil硫酯、布美他尼S-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、布美他尼[-(C＝O)-S-]苄基三甲基铵硫代酸盐和布美他尼[-(C＝O)-S-]十六烷基三甲基铵硫代酸盐。
在本发明的一些实施方案中，式I I的化合物可以是亚稳的布美他尼[-(C＝S)-OH]硫代酸，布美他尼O-甲基硫酯、布美他尼O-氰基甲基硫酯、布美他尼O-乙基硫酯、布美他尼O-异戊基硫酯、布美他尼O-辛基硫酯、布美他尼O-苄基硫酯、布美他尼O-(吗啉代乙基)硫酯、布美他尼O-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、布美他尼O-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、布美他尼、O-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、布美他尼O-pivaxetil硫酯、布美他尼O-propaxetil硫酯、布美他尼O-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、布美他尼[-(C＝S)-O-]苄基三甲基铵硫代酸盐和布美他尼[(C＝S)-O-]十六烷基三甲基铵硫代酸盐。
在本发明的一些实施方案中，式I I的化合物可以是布美他尼硫醛、布美他尼[-(C＝S)-SH]二硫代酸、布美他尼甲基二硫酯、布美他尼氰基甲基二硫酯、布美他尼乙基二硫酯、布美他尼异戊基二硫酯、布美他尼辛基二硫酯、布美他尼苄基二硫酯、布美他尼二苄基硫代酰胺、布美他尼二乙基硫代酰胺、布美他尼吗啉代乙基二硫酯、布美他尼3-(二甲基氨基丙基)二硫酯、布美他尼N，N-二乙基羟乙酰氨基二硫酯、布美他尼N，N-二甲基羟乙酰氨基二硫酯、布美他尼pivaxetil二硫酯、布美他尼propaxetil二硫酯、布美他尼甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基二硫酯、布美他尼苄基三甲基铵二硫代酸盐和布美他尼十六烷基三甲基铵二硫代酸盐。
在本发明的其他实施方案中，式III的化合物可以是呋塞米、呋塞米醛、呋塞米甲基酯、呋塞米氰基甲基酯、呋塞米乙基酯、呋塞米异戊基酯、呋塞米辛基酯、呋塞米苄基酯、呋塞米二苄基酰胺、呋塞米二乙基酰胺、呋塞米吗啉代乙基酯、呋塞米3-(二甲基氨基丙基)酯、呋塞米N，N-二乙基羟乙酰氨基酯、呋塞米N，N-二甲基羟乙酰氨基酯、呋塞米pivaxetil酯、呋塞米propaxetil酯、呋塞米甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基酯、呋塞米苄基三甲基铵酸盐和呋塞米十六烷基三甲基铵酸盐。在特定的实施方案中，所述化合物不是呋塞米。
在本发明的其他实施方案中，式III的化合物可以是呋塞米[-(C＝O)-SH]硫代酸，呋塞米S-甲基硫酯、呋塞米S-氰基甲基硫酯、呋塞米S-乙基硫酯、呋塞米S-异戊基硫酯、呋塞米S-辛基硫酯、呋塞米S-苄基硫酯、呋塞米S-(吗啉代乙基)硫酯、呋塞米S-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、呋塞米S-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、呋塞米S-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、呋塞米S-pivaxetil硫酯、呋塞米S-propaxetil硫酯、呋塞米S-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、呋塞米[-(C＝O)-S”]苄基三甲基铵硫代酸盐和呋塞米[-(C＝O)-S”]十六烷基三甲基铵硫代酸盐。
在本发明的其他实施方案中，式IV的化合物可以是亚稳的呋塞米[-(C＝S)-OH]硫代酸，呋塞米O-甲基硫酯、呋塞米O-氰基甲基硫酯、呋塞米O-乙基硫酯、呋塞米O-异戊基硫酯、呋塞米O-辛基硫酯、呋塞米O-苄基硫酯、呋塞米O-(吗啉代乙基)硫酯、呋塞米O-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、呋塞米O-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、呋塞米O-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、呋塞米O-pivaxetil硫酯、呋塞米O-propaxetil硫酯、呋塞米O-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、呋塞米[-(C＝S)-O-]苄基三甲基铵硫代酸盐和呋塞米[-(C＝S)-O-]十六烷基三甲基铵硫代酸盐。
在本发明的其他实施方案中，式IV的化合物可以是呋塞米硫醛、呋塞米[-(C＝S)-SH]二硫代酸，呋塞米甲基二硫酯、呋塞米氰基甲基二硫酯、呋塞米乙基二硫酯、呋塞米异戊基二硫酯、呋塞米辛基二硫酯、呋塞米苄基二硫酯、呋塞米二苄基酰胺、呋塞米二乙基酰胺、呋塞米二苄基硫代酰胺、呋塞米二乙基硫代酰胺、呋塞米吗啉代乙基二硫酯、呋塞米3-(二甲基氨基丙基)二硫酯、呋塞米N，N-二乙基羟乙酰氨基二硫酯、呋塞米N，N-二甲基羟乙酰氨基二硫酯、呋塞米pivaxetil二硫酯、呋塞米propaxetil二硫酯、呋塞米甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基二硫酯、呋塞米苄基三甲基铵二硫代酸盐和呋塞米十六烷基三甲基铵二硫代酸盐。
在本发明的其他实施方案中，式V的化合物可以是吡咯他尼、吡咯他尼醛、吡咯他尼甲基酯、吡咯他尼氰基甲基酯、吡咯他尼乙基酯、吡咯他尼异戊基酯、吡咯他尼辛基酯、吡咯他尼苄基酯、吡咯他尼二苄基酰胺、吡咯他尼二乙基酰胺、吡咯他尼吗啉代乙基酯、吡咯他尼3-(二甲基氨基丙基)酯、吡咯他尼N，N-二乙基羟乙酰胺酯、吡咯他尼二甲基羟乙酰胺酯、吡咯他尼pivaxetil酯、吡咯他尼propaxetil酯、吡咯他尼甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基酯、吡咯他尼苄基三甲基铵盐和吡咯他尼十六烷基三甲基铵盐。在特定的实施方案中，所述化合物不是吡咯他尼。还关注吡咯他尼一烷基(取代和未取代的)酰胺类和硫代酰胺类及其药学可接受的盐。这种吡咯他尼一烷基酰胺类的非限制性实例包括吡咯他尼一苄基酰胺、吡咯他尼一乙基酰胺、吡咯他尼一苄基硫代酰胺、吡咯他尼一乙基硫代酰胺及其药学可接受的盐。
在本发明的一些实施方案中，式V的化合物可以是吡咯他尼[-(C＝O)-SH]硫代酸，吡咯他尼S-甲基硫酯、吡咯他尼S-氰基甲基硫酯、吡咯他尼S-乙基硫酯、吡咯他尼S-异戊基硫酯、吡咯他尼S-辛基硫酯、吡咯他尼S-苄基硫酯、吡咯他尼S-(吗啉代乙基)硫酯、吡咯他尼S-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、吡咯他尼S-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、吡咯他尼S-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、吡咯他尼S-pivaxetil硫酯、吡咯他尼S-propaxetil硫酯、吡咯他尼S-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、吡咯他尼[-(C＝O)-S”]苄基三甲基铵硫代酸盐和吡咯他尼[-(C＝O)-S”]十六烷基三甲基铵硫代酸盐。
在本发明的其他实施方案中，式VI的化合物可以是亚稳的吡咯他尼[-(C＝S)-OH]硫代酸，吡咯他尼O-甲基硫酯、吡咯他尼O-氰基甲基硫酯、吡咯他尼O-乙基硫酯、吡咯他尼O-异戊基硫酯、吡咯他尼O-辛基硫酯、吡咯他尼O-苄基硫酯、吡咯他尼O-(吗啉代乙基)硫酯、吡咯他尼O-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、吡咯他尼O-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、吡咯他尼、O-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、吡咯他尼O-pivaxetil硫酯、吡咯他尼O-propaxetil硫酯、吡咯他尼O-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、吡咯他尼[-(C＝S)-O-]苄基三甲基铵硫代酸盐和吡咯他尼[-(C＝S)-O-]十六烷基三甲基铵硫代酸盐。
在本发明的一些实施方案中，式VI的化合物可以是吡咯他尼硫醛、吡咯他尼[-(C＝S)-SH]二硫代酸，吡咯他尼甲基二硫酯、吡咯他尼氰基甲基二硫酯、吡咯他尼乙基二硫酯、吡咯他尼异戊基二硫酯、吡咯他尼辛基二硫酯、吡咯他尼苄基二硫酯、吡咯他尼二苄基硫代酰胺、吡咯他尼二乙基硫代酰胺、吡咯他尼吗啉代乙基二硫酯、吡咯他尼3-(二甲基氨基丙基)二硫酯、吡咯他尼N，N-二乙基羟乙酰氨基二硫酯、吡咯他尼N，N-二甲基羟乙酰氨基二硫酯、吡咯他尼pivaxetil二硫酯、吡咯他尼propaxetil二硫酯、吡咯他尼甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基二硫酯、吡咯他尼苄基三甲基铵二硫代酸盐和吡咯他尼十六烷基三甲基铵二硫代酸盐。还关注吡咯他尼一烷基(取代和未取代的)硫代酰胺类及其药学可接受的盐。这种吡咯他尼一烷硫基酰胺类的非限制性实例包括吡咯他尼一苄基硫代酰胺、吡咯他尼一乙基硫代酰胺及其药学可接受的盐。
在本发明的其他实施方案中，式VII的化合物可以是四唑基-取代的阿佐塞米(例如甲氧基甲基四唑基-取代的阿佐塞米、甲硫基甲基四唑基-取代的阿佐塞米和N-mPEG350-四唑基-取代的阿佐塞米)、阿佐塞米苄基三甲基铵盐和/或阿佐塞米十六烷基三甲基铵盐。
在本发明的一些实施方案中，式VIII的化合物可以是吡啶-取代的托拉塞米季铵盐或相应内盐(两性离子)。实例包括、但不限于甲氧基甲基吡啶鎓托拉塞米盐、甲硫基甲基吡啶鎓托拉塞米盐和N-mPEG350-吡啶鎓托拉塞米盐。
本发明的实施方案还提供通过本文所述合成方法形成的中间体化合物，以提供式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI的所述化合物。这些中间体化合物可以具有作为本文所述范围适应证的治疗剂和/或另外合成方法和反应的试剂的应用性。
如上所述，可以从本发明所述化合物中排除如本文所定义的任意R基团，特别参照本发明显示的新化合物。
在一些实施方案中，本发明包括下列化合物，包括其酯类、酰胺类、N-取代的磺酰胺类和N，N-二取代的磺酰胺类：
Figure BDA0000088452220000941
Figure BDA0000088452220000951
在其他实施方案中，本发明包括下列化合物，包括其酯类和酰胺类：
Figure BDA0000088452220000961
Figure BDA0000088452220000971
Figure BDA0000088452220000981
Figure BDA0000088452220000991
在其他实施方案中，本发明包括下列化合物：
Figure BDA0000088452220001001
在其他实施方案中，本发明包括下列化合物，包括其酯类、酰胺类、N-取代的磺酰胺类和N，N-二取代的磺酰胺类：
Figure BDA0000088452220001011
Figure BDA0000088452220001021
在其他实施方案中，本发明包括下列化合物，包括其N-取代的磺酰胺类和N，N-二取代的磺酰胺类：
Figure BDA0000088452220001031
Figure BDA0000088452220001051
Figure BDA0000088452220001061
在其他实施方案中，本发明包括下列化合物，其N-取代的磺酰胺类和N，N-二取代的磺酰胺类：
Figure BDA0000088452220001081
Figure BDA0000088452220001091
在其他实施方案中，本发明包括下列化合物，包括其酯类、酰胺类、N-取代的磺酰胺类和N，N-二取代的磺酰胺类：
Figure BDA0000088452220001111
Figure BDA0000088452220001121
在其他实施方案中，本发明包括下列化合物，包括其酯类和酰胺类：
Figure BDA0000088452220001131
Figure BDA0000088452220001141
Figure BDA0000088452220001151
Figure BDA0000088452220001161
Figure BDA0000088452220001171
Figure BDA0000088452220001181
在其他实施方案中，本发明包括下列化合物，包括其N-取代的磺酰胺类和N，N-二取代的磺酰胺类：
Figure BDA0000088452220001201
2.合成方法
本发明的实施方案提供修饰利尿剂或利尿剂样化合物的方法以增加利尿剂或利尿剂样化合物的亲脂性。亲脂性可以通过测定亲水亲油平衡值(HLB)或分配系数(例如化合物在水与辛醇之间的分布)来确定。在一些实施方案中，所述化合物是利尿剂或利尿剂样化合物，在具体的实施方案中，所述化合物称作“袢利尿剂”。就利尿剂的药理学特性讨论而言，参见generally，Hardman，Limbird和Gilman，(Eds.)(2001)Goodman& Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics，McGraw-HillMedical Publishing Division(第10版)，
还作为利尿剂或利尿剂样化合物包括的是影响阳离子-氯离子协同转运蛋白的化合物。本文所用的协同转运蛋白是电中性的，从而能够使等量的带相反电荷的离子种类从膜的一侧运到至另一侧。本文所用的阳离子-氯离子协同转运蛋白指使一个或几个阳离子与等量的氯离子一起运动的协同转运蛋白。典型的阳离子氯离子协同转运蛋白包括、但不限于脑中的袢利尿剂-敏感性Na+、K+、2Cl-协同转运蛋白(NKCC1)和噻嗪敏感性Na+、Cl-协同转运蛋白(NCC)。有关阳离子-氯离子协同转运蛋白的分子分类、其生理学和药理学的讨论可以在Mount等人(1998)“Theelectroneutral cation-chloride cotransporters.”J Exp Biol 201：2091-2102；Russell(2000年1月)“Sodium-potassium-chloridecotransport.”Physiol Rev.80(1)：211-76中找到。
NKCC1脑-特异性协同转运蛋白是其肾类似物NKCC2的亚型。呋塞米和布美他尼是NKCC拮抗剂的典型实例。
噻嗪-敏感性协同转运蛋白被噻嗪利尿剂拮抗。典型的噻嗪利尿剂包括、但不限于氯噻嗪、氢氯噻嗪和苄噻嗪。
利尿剂或利尿剂样化合物的修饰可以包括使利尿剂或利尿剂样化合物与官能团和/或化合物反应，所述官能团和/或化合物选自氢化铝、烷基卤、醇、醛、烷芳基卤、一-和二烷基胺、一-和二烷芳基胺、一-和二芳基胺和季铵盐，它们是未取代或取代的或其组合。可以用作原料的化合物的非限制性实例以如下为典型。
Figure BDA0000088452220001211
Figure BDA0000088452220001221
可以使用本领域技术人员众所周知的传统合成技术合成式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI所述的化合物。更具体的合成途径如下所述。
A.布美他尼类似物、硫代布美他尼类似物和二硫代布美他尼类似物
1.硫代布美他尼和二硫代布美他尼
Figure BDA0000088452220001231
通过使布美他尼的羧酸部分与不同试剂反应合成硫代布美他尼类似物。例如，通过用亚硫酰氯处理可以将布美他尼转化成相应的硫代酸，形成相应的布美他尼酰氯，然后通过Noble，P.和Tarbell，，Org.Synth.， Coll.Vol.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法与硫氢化钠反应，得到硫代布美他尼[-(C＝O)-SH]，也称作布美他尼[-(C＝O)-SH]硫代酸。参见方案1。可以使用亚硫酰氯将硫代布美他尼转化成相应的布美他尼硫代酰氯，然后通过类似方法用硫氢化钠处理硫代酰氯，得到二硫代布美他尼[-(C＝S)-SH]，也称作布美他尼[-(C＝S)-SH]二硫代酸。布美他尼硫代酰氯与仲胺类反应，得到相应的布美他尼硫代酰胺类。布美他尼还可以与五硫化磷反应，得到布美他尼二硫代酸。就该化学主体的综述而言，参见“Thioacyl Halides，”“ThiocarboxylicO-Acid Esters”和“Dithiocarboxylic Acid Esters，”，均由Glass.R.S.在Science of Synthesis中撰写(Charette，A.B.，Ed.)，Volume22，Thieme Chemistry，2005，Chapters 22.1.2，22.1.3和22.1.4及其中的参考文献。另外参见“Synthesis of Thioamides and Thiolactams”，Schaumann，E.：Comprehensive Organic Synthesis，(Trost，B.M.和Fleming，I.，Eds.)，Pergamon Press，1991，6卷，2.4章，pp.450-460及其中的参考文献，将这些文献各自完整引入本文参考。
方案1.硫代布美他尼{布美他尼[-(C＝O)-SH]硫代酸}的合成
Figure BDA0000088452220001241
2.布美他尼和S-硫代布美他尼类似物
通过使布美他尼的羧酸部分与不同试剂反应合成布美他尼类似物。例如，布美他尼可以通过与醇类包括直链、支链、取代或未取代的醇类反应进行酯化。布美他尼或硫代布美他尼还可以通过与适当取代和未取代的烷基卤和烷芳基卤包括氯乙腈、苄基氯、1-(二甲基氨基)丙基氯、2-氯-N，N-二乙基乙酰胺等反应被烷基化。可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeO-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成PEG型酯类。还可以通过使用烷基卤例如新戊酸氯甲酯或丙酸氯甲酯烷基化形成“Axetil”-型酯类。布美他尼还可以通过在转化成酰氯后与适当取代和未取代的烷基胺类或芳基胺类反应或通过使用活化剂例如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)进行酰胺化。布美他尼或硫代布美他尼还可以与季铵氢氧化物例如氢氧化苄基三甲基铵或氢氧化十六烷基三甲基铵反应，形成布美他尼或硫代布美他尼季铵盐。方案2、3和4提供式I的一些典型化合物的方案。
方案2.式I的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001251
方案3.式I的典型化合物的合成
通过本领域众所周知的方法，布美他尼盐、硫代布美他尼和S-硫代布美他尼酯类应易于进行酸-和碱-催化的水解，产生包含羧酸的布美他尼(参见Yang，W.和Drueckhammer，D.G.，J.Amer.Chem.Soc.，2001，123(44)、11004-11009及其中的参考文献)。(参见方案4)。
方案4.布美他尼、硫代布美他尼和S-硫代布美他尼酯类的水解
Figure BDA0000088452220001271
3.O-取代的硫代布美他尼类似物和二硫代布美他尼类似物
可以通过用亚硫酰氯处理将布美他尼转化成相应的硫代酸，形成相应的酰氯，然后通过Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法与氢氧化钠或硫氢化钠反应，得到亚稳的O-硫代布美他尼和二硫代布美他尼(参见方案5和6)。
方案5.亚稳的硫代布美他尼{布美他尼[-(C＝S)-OH]硫代酸}的合成
Figure BDA0000088452220001281
方案6.二硫代布美他尼{布美他尼[-(C＝S)-SH]二硫代酸}的合成
Figure BDA0000088452220001282
依次通过使S-硫代布美他尼的硫代羧酸部分与不同试剂反应合成硫代布美他尼类似物。例如，S-硫代布美他尼可以通过与硫醇类包括直链、支链、取代或未取代的醇类和硫醇类反应进行酯化。S-硫代布美他尼还可以通过与适当取代和未取代的烷基卤和烷芳基卤包括氯乙腈、苄基氯、1-(二甲基氨基)丙基氯、2-氯-N，N-二乙基乙酰胺等反应被烷基化。可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeO-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成PEG型酯类。还可以通过使用烷基卤例如新戊酸氯甲酯或丙酸氯甲酯烷基化形成“Axetil”-型酯类。S-硫代布美他尼还可以与季铵氢氧化物例如氢氧化苄基三甲基铵或氢氧化十六烷基三甲基铵反应，形成硫代布美他尼季铵盐。参见方案7、8和9，得到式II的一些典型化合物。
方案7.式II的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001291
方案8.式II的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001301
硫代布美他尼、硫代布美他尼酰胺类、O-硫代布美他尼酯类和二硫代布美他尼酯类应易于通过本领域众所周知的方法进行酸-和碱-催化的水解，产生包含羧酸的分子布美他尼(参见Yang，w.和Drueckhammer，D.G.，J.Amer.Chem.Soc.，2001，123(44)，11004-11009及其中的参考文献)。就该化学主体的问题综述而言，参见“Thioacyl Halides”，“Thiocarboxylic O-Acid Esters”和“Dithiocarboxylic Acid Esters”，均由Glass，R.S.在Science of Synthesis，(Charette，A.B.，Ed.)中撰写，Volume 22，Thieme Chemistry，2005，Chapters 22.1.2，22.1.3和22.1.4及其中的参考文献。另外参见“Synthesis of Thioamides andThiolactams，”Schaumann，E.：Comprehensive Organic Synthesis，(Trost，B.M.和Fleming，I.，Eds.)，Pergamon Press，1991，6卷，2.4章，pp.450-460及其中的参考文献(参见方案9)。
方案9.硫代布美他尼、硫代布美他尼酰胺类、O-硫代布美他尼酯类和二硫代布美他尼酯类的水解
Figure BDA0000088452220001311
4.包含环酰胺类的硫代-和硒代布美他尼类似物
如图2中所示，布美他尼可以通过二硫代布美他尼中间体被转化成包含环酰胺的硫代布美他尼类似物。在图2中，包含环酰胺的硫代布美他尼类似物是布美他尼N-吗啉代硫代酰胺。同一二硫代布美他尼中间体可以用于制备各种其他包含环酰胺的硫代布美他尼类似物，如图3-7中所示。得到布美他尼N-吗啉代硫代酰胺的可替代选择方法如图8中所示。类似化学方法一般可以用于得到硒代布美他尼类似物且特别是包含环酰胺类的硒代布美他尼类似物。例如，如图8中所示替代P2S5，P2Se5或相当的试剂可以用于生成包含环酰胺的相应硒代布美他尼类似物，如图8A中所示。Rae，I.D.和Wade，M.J.，Int.J.Sulfur Chem.，1976，8，519；Voss，J.和Bruhn，F.-R.，Liebigs Ann.Chem.，1979，1931；和Woollins，J.D.等人，Chemistry Europe J.，2005，11，6221-6227。
B.呋塞米类似物，硫代呋塞米类似物和二硫代呋塞米类似物
1.硫代呋塞米和二硫代呋塞米
通过使呋塞米的羧酸部分与不同试剂反应合成硫代呋塞米类似物。例如，通过用亚硫酰氯处理形成相应的呋塞米酰氯将呋塞米转化成相应的硫代酸、然后通过Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法与硫氢化钠反应，得到硫代呋塞米[-(C＝O)-SH]，也称作呋塞米[-(C＝O)-SH]硫代酸(参见方案10)。
硫代呋塞米可以使用亚硫酰氯转化成相应的呋塞米硫代酰氯，然后通过类似复发用硫氢化钠处理硫代酰氯，得到二硫代呋塞米[-(C＝S)-SH]，也称作呋塞米[-(C＝S)-SH]二硫代酸(参见方案10)。呋塞米硫代酰氯与仲胺类反应得到相应的呋塞米硫代酰胺类。呋塞米还可以与五硫化磷进行反应，得到呋塞米二硫代酸。就该化学主体的问题综述而言，参见“Thioacyl Halides”，“Thiocarboxylic O-Acid Esters”和“Dithiocarboxylic Acid Esters”，均由Glass，R.S.在Science ofSynthesis，(Charette，A.B.，Ed.)中撰写，Volume 22，ThiemeChemistry，2005，Chapters 22.1.2，22.1.3和22.1.4及其中的参考文献。另外参见“Synthesis of Thioamides and Thiolactams，”Schaumann，E.：Comprehensive Organic Synthesis，(Trost，B.M.和Fleming，I.，Eds.)，Pergamon Press，1991，6卷，2.4章，pp.450-460及其中的参考文献。
方案10.硫代呋塞米{呋塞米[-(C＝O)-SH]硫代酸}的合成
2.呋塞米和S-呋塞米类似物
通过与用于布美他尼类似物合成类似的方法合成呋塞米类似物是。呋塞米可以通过与醇类包括直链、支链、取代或未取代的醇类反应进行酯化。呋塞米或硫代呋塞米还可以通过与适当取代和未取代的烷基卤和烷芳基卤包括氯乙腈、苄基氯、1-(二甲基氨基)丙基氯、2-氯-N，N-二乙基乙酰胺等反应被烷基化。可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeO-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成PEG型酯类。还可以通过使用烷基卤例如新戊酸氯甲酯或丙酸氯甲酯烷基化形成“Axetil”-型酯类。呋塞米还可以通过在转化成酰氯后与适当取代或未取代的烷基胺类或芳基胺类反应或通过使用活化剂例如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)进行酰胺化。呋塞米或硫代呋塞米还可以与季铵氢氧化物例如氢氧化苄基三甲基铵或氢氧化十六烷基三甲基铵反应，形成呋塞米或硫代呋塞米季铵盐。方案11、12和13提供式III的一些典型化合物。
方案11.式III的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001351
方案12.式III的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001361
方案13.硫代呋塞米盐和S-硫代呋塞米酯类的水解
Figure BDA0000088452220001371
3.O-取代的硫代呋塞米和二硫代呋塞米类似物
采用Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，JohnlWiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927.的方法(参见方案14和15)，还可以通过用亚硫酰氯处理将呋塞米转化成相应的硫代酸，形成相应的酰氯，然后与氢氧化钠或硫氢化钠反应，得到O-硫代呋塞米和二硫代呋塞米。
方案14.亚稳的硫代呋塞米{呋塞米[-(C＝S)-OH]硫代酸)的合成
Figure BDA0000088452220001381
方案15.二硫代呋塞米{呋塞米[-(C＝S)-SH]二硫代酸}的合成
Figure BDA0000088452220001382
依次通过使硫代呋塞米的硫代羧酸部分与不同试剂反应合成硫代呋塞米类似物。例如，硫代呋塞米可以通过与醇类或硫醇类包括直链、支链、取代或未取代的醇类和硫醇类反应进行酯化。S-硫代呋塞米还可以通过与适当取代和未取代的烷基卤和烷芳基卤包括氯乙腈、苄基氯、1-(二甲基氨基)丙基氯、2-氯-N，N-二乙基乙酰胺等反应被烷基化。可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeO-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成PEG型酯类。还可以通过使用烷基卤例如新戊酸氯甲酯或丙酸氯甲酯烷基化形成“Axetil”-型酯类。硫代呋塞米还可以与季铵氢氧化物例如氢氧化苄基三甲基铵或氢氧化十六烷基三甲基铵反应，形成硫代呋塞米季铵盐。方案14、15、16、17和18提供式IV的一些典型化合物的方案。
方案16.式IV的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001391
方案17.式IV的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001401
硫代呋塞米、硫代呋塞米酰胺类和S-硫代呋塞米酯类应易于通过本领域众所周知的方法进行酸-和碱-催化的水解(参见Yang，W.和Drueckhammer，D.G.，J.Amer.Chem.Soc.，2001，123(44)，11004-11009及其中的参考文献)。就该化学主体的问题综述而言，参见“Thioacyl Halides”，“Thiocarboxylic O-Acid Esters”和“Dithiocarboxylic Acid Esters”，均由Glass，R.S.在Science ofSynthesis，(Charette，A.B.，Ed.)中撰写，Volume 22，ThiemeChemistry，2005，Chapters 22.1.2，22.1.3和22.1.4及其中的参考文献。另外参见“Synthesis of Thioamides and Thiolactams，”Schaumann，E.：Comprehensive Organic Synthesis，(Trost，B.M.和Fleming，I.，Eds.)，Pergamon Press，1991，6卷，2.4章，pp.450-460及其中的参考文献(参见方案18)。
方案18.硫代呋塞米、硫代呋塞米酰胺类和S-硫代呋塞米酯类的水解
C.吡咯他尼类似物、硫代吡咯他尼类似物和二硫代吡咯他尼类似物
1.硫代吡咯他尼和二硫代吡咯他尼
Figure BDA0000088452220001421
通过使吡咯他尼的羧酸部分与不同试剂反应合成吡咯他尼类似物。例如，可以通过用亚硫酰氯处理吡咯他尼转化成相应的硫代酸，形成相应的吡咯他尼酰氯，然后通过Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法与硫氢化钠反应，得到硫代吡咯他尼[-(C＝O)-SH]，也称作吡咯他尼[-(C＝O)-SH]硫代酸。参见方案19。可以用亚硫酰氯将硫代吡咯他尼转化成相应的吡咯他尼硫代酰氯，然后通过类似方法用硫氢化钠处理硫代酰氯，得到二硫代吡咯他尼[-(C＝S)-SH]，也称作吡咯他尼[-(C＝S)-SH]二硫代酸。吡咯他尼硫代酰氯与仲胺类反应，得到相应的吡咯他尼硫代酰胺类。吡咯他尼还可以与五硫化磷反应，得到吡咯他尼二硫代酸。就该化学主体的问题综述而言，参见“Thioacyl Halides”，“Thiocarboxylic O-Acid Esters”和“Dithiocarboxylic Acid Esters”，均由Glass，R.S.在Science of Synthesis，(Charette，A.B.，Ed.)中撰写，Volume 22，Thieme Chemistry，2005，Chapters 22.1.2，22.1.3和22.1.4及其中的参考文献。另外参见“Synthesis of Thioamides andThiolactams，”Schaumann，E.：Comprehensive Organic Synthesis，(Trost，B.M.和Fleming，I.，Eds.)，Pergamon Press，1991，6卷，2.4章，pp.450-460及其中的参考文献。
方案19.硫代吡咯他尼{吡咯他尼[-(C＝O)-SH]硫代酸}的合成
Figure BDA0000088452220001431
2.吡咯他尼和S-硫代吡咯他尼类似物
吡咯他尼可以通过与醇类包括直链、支链、取代或未取代的醇类反应进行酯化。吡咯他尼或硫代吡咯他尼还可以通过与适当取代和未取代的烷基卤和烷芳基卤包括氯乙腈、苄基氯、1-(二甲基氨基)丙基氯、2-氯-N，N-二乙基乙酰胺等反应被烷基化。可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeO-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成PEG型酯类。还可以通过使用烷基卤例如新戊酸氯甲酯或丙酸氯甲酯烷基化形成“Axetil”-型酯类。硫代呋塞米还可以与季铵氢氧化物例如氢氧化苄基三甲基铵或氢氧化十六烷基三甲基铵反应，形成硫代呋塞米季铵盐。方案19、20、21和22提供式V的一些典型化合物的方案。
方案20.式V的典型化合物的合成
方案21.式V的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001451
硫代吡咯他尼盐和S-硫代吡咯他尼酯类应易于通过本领域众所周知的方法进行酸-和碱-催化的水解，得到包含羧酸的分子布美他尼(参见Yang，W.，Drueckhammer D.G.，J.Amer.Chem.Soc.，2001，123(44)，11004-11009及其中的参考文献)。(参见方案22)。
方案22.硫代吡咯他尼盐和S-硫代吡咯他尼酯类的水解
Figure BDA0000088452220001461
3.O-取代的硫代吡咯他尼类似物二硫代吡咯他尼类似物
通过用亚硫酰氯处理可以将吡咯他尼转化成相应的硫代酸，形成相应的酰氯，然后通过Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法与氢氧化钠或硫氢化钠反应，得到亚稳的O-硫代吡咯他尼和二硫代吡咯他。参见方案23和24。
方案23.亚稳的硫代吡咯他尼{吡咯他尼[-(C＝S)-OH]硫代酸}的合成
方案24.二硫代吡咯他尼{吡咯他尼[-(C＝S)-SH]二硫代酸}的合成
Figure BDA0000088452220001481
通过与吡咯他尼类似物合成中使用的类似的方法合成硫代吡咯他尼类似物。特别地，硫代吡咯他尼可以通过与硫醇类包括直链、支链、取代或未取代的硫醇类反应进行酯化。硫代吡咯他尼还可以通过与适当取代和未取代的烷基卤和烷芳基卤包括氯乙腈、苄基氯、1-(二甲基氨基)丙基氯、2-氯-N，N-二乙基乙酰胺等反应被烷基化。可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeO-PEG35O-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成PEG型酯类。还可以通过使用烷基卤例如新戊酸氯甲酯或丙酸氯甲酯烷基化形成“Axetil”-型酯类。硫代呋塞米还可以与季铵氢氧化物例如氢氧化苄基三甲基铵或氢氧化十六烷基三甲基铵反应，形成硫代吡咯他季铵盐。方案23、24、25、26和27提供式VI的一些典型化合物。
方案25.式VI的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001491
方案26.式VI的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001501
硫代吡咯他尼、硫代吡咯他尼酰胺类和硫代吡咯他尼酯类应易于通过本领域众所周知的方法进行酸-和碱-催化的水解，产生包含羧酸的分子吡咯他尼(参见Yang，W.和Drueckhammer，D.G.，J.Amer.Chem.Soc.，2001，123(44)，11004-11009及其中的参考文献)。就该化学主体的问题综述而言，参见“Thioacyl Halides”，“Thiocarboxylic O-AcidEsters”和“Dithiocarboxylic Acid Esters”，均由Glass，R.S.在Science of Synthesis，(Charette，A.B.，Ed.)中撰写，Volume 22，Thieme Chemistry，2005，Chapters 22.1.2，22.1.3和22.1.4及其中的参考文献。另外参见“Synthesis of Thioamides and Thiolactams，”Schaumann，E.：Comprehensive Organic Synthesis，(Trost，B.M.和Fleming，I.，Eds.)，Pergamon Press，1991，6卷，2.4章，pp.450-460及其中的参考文献(参见方案27)。
方案27.硫代吡咯他尼、硫代吡咯他尼酰胺类和硫代吡咯他尼酯类的水解
Figure BDA0000088452220001511
D.阿佐塞米类似物
通过使不同试剂与阿佐塞米的四唑基部分反应合成阿佐塞米类似物。阿佐塞米可以在加成醛的情况下进行羟基烷基化，由此形成羟基烷基官能团。醇可以任选与醛反应，得到醚。烷硫醇可以任选被加成到醛上，形成硫醚。还可以通过添加适合的烷基卤或烷芳基卤包括包含醚或硫醚键的烷基或烷芳基卤例如甲基氯甲基醚和苄基氯甲基硫醚使阿佐塞米烷基化。可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeO-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成PEG型酯类。还可以通过添加烷基卤例如新戊酸氯甲酯或丙酸氯甲酯形成“Axetil”-型酯类。阿佐塞米还可以与季铵盐例如苄基三甲基铵溴化物和碱例如氢氧化钠或十六烷基三甲基铵溴化物和碱例如氢氧化钠反应，以形成阿佐塞米季铵盐。下面的方案28提供式VII的一些典型化合物的方案。
方案28.式VII的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001531
E.托拉塞米类似物
托通过使不同试剂与托拉塞米的吡啶部分反应合成拉塞米(也称作托拉塞米)类似物。还可以通过添加适合的烷基或烷芳基卤包括苄基氯托使拉塞米烷基化，形成N-取代的季铵盐。包含醚键的烷基卤和烷芳基卤包括甲基氯甲基醚和苄基氯甲基醚可以用于形成N-取代的醚季铵盐。包含硫醚键的烷基卤和烷芳基卤包括甲基氯甲基硫醚和苄基氯甲基硫醚可以用于形成N-取代的硫醚季铵盐。可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤
例如MeO-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成PEG型酯类。还可以通过添加烷基卤例如新戊酸氯甲酯或丙酸氯甲酯形成“Axetil”-型酯类。下面的方案29提供式VIII的一些典型化合物的方案。
方案29.式VIII的典型化合物的合成
Figure BDA0000088452220001551
F.布美他尼、吡咯他尼和呋塞米的苯甲醛类似物
通过文献方法、使用胺-取代的铵氢化物例如双(4-甲基哌嗪基)铝氢化物可以将取代的苯甲酸布美他尼、吡咯他尼和呋塞米选择性还原成相应的布美他尼醛、吡咯他尼醛和呋塞米醛。参见Muraki，M.和Mukiayama，T.，Chem.Letters，1974，1447；Muraki，M.和Mukiayama，T.，Chem.Letters，1975，215；和Hubert，T.，D.，Eyman，D.P.和Wiemer，D.F.，J.Org.Chem.，1984，2279.(参见方案30)。众所周知更具亲脂性的苯甲醛类易于在空气中氧化成更具亲水性的苯甲酸且苯甲醛类在体内也通过利用NADPH辅因子和大量氧化P450酶被代谢成相应的苯甲酸。
方案30.布美他尼、吡咯他尼和呋塞米的典型苯甲醛类似物的合成
Figure BDA0000088452220001561
就用于将苯甲酸转化成相应的苯甲醛的还原程度而言，参见Muraki，M.和Mukiayama，T.，Chem.Letters，1974，1447；同上，1975，215；Hubert，T.，D.，Eyman，D.P.和Wiemer，D.F.，J.Org.Chem.，1984，2279
还可以通过处理试剂包括硫化氢和五硫化二磷由相应的苯甲醛制备亲脂性硫代苯甲醛(参见Smith，M.B.和March，J.，March’s AdvancedOrganic Chemistry，第5版，2001，John Wiley & Sons，Inc.，New York，Part 2，Chapter 16，pp.1185-1186.C.Sulfur Nucleophiles，Section 16-10 The Addition of H2S and Thiols to Carbonyl Compounds.)(参见方案31)。这些硫代苯甲醛在水解条件下依次易于被转化回相应的苯甲醛。众所周知更具亲脂性的苯甲醛类易于在空气中氧化成更具亲水性的苯甲酸且苯甲醛类在体内也通过利用NADPH辅因子和大量氧化P450酶被代谢成相应的苯甲酸。类似的机制可以应用于将硫代苯甲醛转化成硫代苯甲酸、然后转化成苯甲酸。
方案31.布美他尼、吡咯他尼和呋塞米的典型硫代苯甲醛类似物的合成
G.布美他尼、吡咯他尼和呋塞米及其硫代酸对应物硫代布美他尼、硫代吡咯他尼、硫代呋塞米二硫代布美他尼、二硫代吡咯他尼和二硫代呋塞米的PEG-型类似物
可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeG-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯类例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成布美他尼、呋塞米和吡咯他尼的PEG-型酯类。(参见方案32)。
方案32.布美他尼、呋塞米和吡咯他尼的典型聚乙二醇酯类的的合成
Figure BDA0000088452220001591
PEG-X是X-(CH2)m(OCH2CH2)n-1Y，其中X是卤素或其他离去基(甲磺酸酯“OMs”、甲苯磺酸酯“OTs”且Y是OH或醇保护基，例如烷基、芳基、酰基或酯基，且其中m＝1-5且n＝1-100。
可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeO-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯类例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成硫代布美他尼、硫代呋塞米和硫代吡咯他尼的PEG-型酯类。(参见方案33)。
方案33.硫代布美他尼、硫代呋塞米和硫代吡咯他尼的典型聚乙二醇治疗的合成
Figure BDA0000088452220001601
PEG-X是X-(CH2)m(OCH2CH2)n-1Y，其中X是卤素或其他离去基(甲磺酸根“OMs”、甲苯磺酸根“OTs”且Y是OH或醇保护基，例如烷基、芳基、酰基或酯基，且其中m＝1-5且n＝1-100。
可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeO-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯类例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成二硫代布美他尼、二硫代呋塞米和二硫代吡咯他尼的PEG-型酯类。(参见方案34)。
方案34.二硫代布美他尼、二硫代呋塞米和二硫代吡咯他尼的典型聚乙二醇酯类的合成
Figure BDA0000088452220001611
PEG-X是X-(CH2)m(OCH2CH2)n-1-Y，其中X是卤素或其他离去基(甲磺酸根“OMs”、甲苯磺酸根“OTs”)且Y是OH或醇保护基，例如烷基、芳基、酰基或酯基，且其中m＝1-5且n＝1-100。
阿佐塞米和托拉塞米的PEG-型类似物
可以通过使用烷氧基(聚烷氧基)烷基卤例如MeO-PEG350-Cl等或甲苯磺酸烷氧基(聚烷氧基)烷基酯类例如MeO-PEG1000-OTs等烷基化形成阿佐塞米和托拉塞米的PEG-型醚类。(参见方案35)。
方案35.典型阿佐塞米和托拉塞米的典型亚烷基聚乙二醇醚类的合成
Figure BDA0000088452220001621
PEG-X是X-(CH2)m(OCH2CH2)n-1-Y，其中X是卤素或其他离去基(甲磺酸酯“OMs”、甲苯磺酸酯“OTs”)且Y是OH或醇保护基，例如烷基、芳基、酰基或酯基，且其中m＝1-5且n＝1-100。
I.其他布美他尼类似物
可以根据如下方案36-66所示的合成来合成其他布美他尼类似物。就具有一个R31基团的N-取代的磺酰胺而言，R31是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基或杂芳基。就具有两个R31基团的二取代的磺酰胺而言，每个R31基团相同或不同且独立地是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基、杂芳基或与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以是取代或未取代的并且可以带有一个或多个杂原子(例如N、O或S)。
方案36.布美他尼的典型4-苯氨基类似物的合成
Figure BDA0000088452220001641
方案37.布美他尼的典型4-硫代苯基类似物的合成
Figure BDA0000088452220001651
方案38.布美他尼的合成
Figure BDA0000088452220001661
方案39.N-取代的布美他尼的合成
方案40.4-苯氨基-N-取代的布美他尼的合成
Figure BDA0000088452220001681
方案41.4-氯-N-取代的布美他尼的合成
方案42.4-氟-N-取代的布美他尼的合成
Figure BDA0000088452220001701
方案43.3-芳基布美他尼和3-芳基-N-取代的布美他尼的合成
Figure BDA0000088452220001711
方案44.3-硫代芳基-N-取代的布美他尼的合成
Figure BDA0000088452220001721
方案45.4-氯布美他尼
Figure BDA0000088452220001731
参见Feit，P.W.，Loevens KemiskeFabr./Leo Pharmaceuticals，US Patent 3,806,534(1974年4月23日)
方案46.4-氟布美他尼
Figure BDA0000088452220001741
参见Feit，P.W.，Loevens KemiskeFabr./Leo Pharmaceuticals.USPatent 3,806,534(1974年4月23日)
方案47和48.布美他尼酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类
Figure BDA0000088452220001751
Figure BDA0000088452220001761
其中R24是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苄基…
方案49和50.4-苯氨基布美他尼酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类
Figure BDA0000088452220001781
其中R24是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苄基…
方案51和52.4-硫代芳基布美他尼酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类
Figure BDA0000088452220001791
Figure BDA0000088452220001801
其中R24是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苄基…
方案53和54.4-氯布美他尼酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类
Figure BDA0000088452220001821
其中R24是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苄基…
方案55和56.4-氟布美他尼酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类
Figure BDA0000088452220001831
其中R24是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苄基…
方案57和58.4-苯基布美他尼酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类
Figure BDA0000088452220001851
Figure BDA0000088452220001861
其中R24是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苄基…
方案59.4-杂环布美他尼
Figure BDA0000088452220001871
方案60.4-(3-或4-吡啶基)布美他尼
Figure BDA0000088452220001881
方案61、62、63和64. 4-呋喃基布美他尼酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类
Figure BDA0000088452220001891
其中R24是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苄基…
Figure BDA0000088452220001921
其中R24是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苄基…
方案65和66. 4-吡啶基布美他尼酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类
Figure BDA0000088452220001931
按照类似方式制备“4-(3-吡啶基)布美他尼”酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类。
Figure BDA0000088452220001941
其中R24是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苄基…
按照类似方式制备3-N-取代的“4-(3-吡啶基)布美他尼”酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类。
J.其他呋塞米类似物
可以根据如下方案67-70所示的合成来合成其他呋塞米类似物。就具有一个R31基团的N-取代的磺酰胺而言，R31是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基或杂芳基。就具有两个R31基团的二取代的磺酰胺而言，每个R31基团相同或不同且独立地是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基、杂芳基或与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以是取代或未取代的并且可以带有一个或多个杂原子(例如N、O或S)。
方案67.呋塞米的合成
Figure BDA0000088452220001961
Stuerm，K.，等人.Hoechst.US3,058,882(1962年10月16日)
方案68.4-取代的呋塞米的合成
Figure BDA0000088452220001971
方案69.呋塞米酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类
Figure BDA0000088452220001981
方案70. 4-取代的呋塞米酯类、酰胺类、磺酰胺类、醛类和腈类
Figure BDA0000088452220001991
K.其他吡咯他尼类似物
可以根据如下方案71-74所示的合成来合成其他吡咯他尼类似物。就具有一个R31基团的N-取代的磺酰胺而言，R31是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基或杂芳基。就具有两个R31基团的二取代的磺酰胺而言，每个R31基团相同或不同且独立地是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基、杂芳基或与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以是取代或未取代的并且可以带有一个或多个杂原子(例如N、O或S)。
方案71.吡咯他尼的合成
Figure BDA0000088452220002011
Bormann.D..Merkel，W.，和Muschaweck.R..(Hoechst)美国专利 4,010,273(1977年3月1日)。
25页专利，62个实施例，8个权利要求-公开了不同的4-取代基，但未请求保护
方案72.4-取代的吡咯他尼的合成
Figure BDA0000088452220002021
方案73.吡咯他尼酯类、酰胺类和磺酰胺类
Figure BDA0000088452220002031
方案74.4-取代的吡咯他尼酯类、酰胺类和磺酰胺类
Figure BDA0000088452220002041
L.其他阿佐塞米类似物
可以根据如下方案75-78所示的合成来合成其他阿佐塞米类似物。就具有一个R31基团的N-取代的磺酰胺而言，R31是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基或杂芳基。就具有两个R31基团的二取代的磺酰胺而言，每个R31基团相同或不同且独立地是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基、杂芳基或与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以是取代或未取代的并且可以带有一个或多个杂原子(例如N、O或S)。
方案75.阿佐塞米的合成
Figure BDA0000088452220002061
Popelak.A..等人(Boehrinaer Mannheim).美国专利3.665.002(1972年5月23日)。
5页专利、2个实施例、7个权利要求-请求保护几种4-取代基-卤素、三氟、叠氮基
方案76.4-取代的阿佐塞米的合成
Figure BDA0000088452220002071
方案77.阿佐塞米酯类、酰胺类和磺酰胺类
方案78. 4-取代的阿佐塞米酯类、酰胺类和磺酰胺类
Figure BDA0000088452220002091
M.其他托拉塞米类似物
可以根据如下所示方案79-82合成其他托拉塞米类似物。
方案79.托拉塞米的合成
Delarge，J.E.，，等人(A.Christiaens)，US4,018,929(1977年4月19日)Kordova，M.(TEVA)，US6,670,478 B2整体引述(2003年12月30日)
方案80.4-取代的托拉塞米的合成
Figure BDA0000088452220002111
方案81.托拉塞米类似物
Figure BDA0000088452220002121
方案82.4-取代的托拉塞米类似物
Figure BDA0000088452220002131
N.其他布美他尼类似物
还可以合成为布美他尼异构体和那些异构体的类似物的化合物。它们称作“布美他尼-呋塞米杂化物”化合物，这是因布美他尼N-丁基连接在呋塞米可以带有其呋喃基甲基氨基的同一位置上这一事实所致，
可以根据如下方案83-89所示的合成来合成它们。就具有一个R31基团的N-取代的磺酰胺而言，R31是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基或杂芳基。就具有两个R31基团的二取代的磺酰胺而言，每个R31基团相同或不同且独立地是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基、杂芳基或与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以是取代或未取代的并且可以具有一个或多个杂原子(例如N、O或S)。
方案83.其他布美他尼类似物的合成
方案84和85. N-取代的布美他尼类似物的合成
Figure BDA0000088452220002161
Figure BDA0000088452220002171
方案86和87. 布美他尼和N-取代的布美他尼类似物
Figure BDA0000088452220002181
方案88和89. 4-取代的布美他尼和4-取代的N-取代的布美他尼类似物
Figure BDA0000088452220002211
O.阿佐塞米其类似物
还可以合成为阿佐塞米衍生物及其类似物的化合物。它们称作“阿佐塞米-布美他尼-呋塞米杂化物”化合物，这是因它们具有阿佐塞米四唑和布美他尼N-丁基、其连接在呋塞米可以带有其呋喃基甲基氨基的同一位置上这一事实所致，可以根据如下方案90-94所示的合成来合成它们。就具有一个R31基团的N-取代的磺酰胺而言，R31是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基或杂芳基。就具有两个R31基团的二取代的磺酰胺而言，每个R31基团相同或不同且独立地是低级烷基、低级烯基、烷芳基、芳基、杂环烷基、杂芳基或与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以是取代或未取代的并且可以带有一个或多个杂原子(例如N、O或S)。
方案90.阿佐塞米类似物的合成
Figure BDA0000088452220002221
方案91. N-取代的阿佐塞米类似物的合成
Figure BDA0000088452220002231
方案92、93和94.阿佐塞米类似物
Figure BDA0000088452220002241
Figure BDA0000088452220002251
Figure BDA0000088452220002261
合成本发明化合物的原料还可以包括美国专利US3,634,583；美国专利US3,806,534；美国专利US3,058,882；美国专利US4,010,273；美国专利US3,665,002；和美国专利US3,665,002中所述的化合物。
本发明的化合物可以包括其异构体、互变体、两性离子、对映体、非对映体、外消旋物或立体化学混合物。本发明的化合物还可以包括等排物。
本文所用的术语“等排物”广泛指具有不同分子式、但显示类似或相同物理特性的元素、官能团、取代基、分子或离子。例如，四唑是羧酸的等排物，因为尽管它们具有不同分子式，但是它模拟羧酸的特性。典型地，两种等排分子具有类似或相同容量和形状。等排化合物通常共有的其他物理特性包括沸点、密度、粘度和导热性。然而，一些特性通常不同：双极矩、极性、极化、大小和形状，因为外部轨道可以以不同方式被杂化。
本文所用的术语“异构体”广泛指具有相同原子数和类型和由此的相同分子量、但在原子空间排列或构型方面不同的化合物。另外，术语“异构体”包括立体异构体和几何异构体。本文所用的术语“立体异构体”或“旋光异构体”指具有至少一个手性原子或受限旋转以产生垂直不对称平面(例如一些联苯类、丙二烯类和螺环化合物)并且可以使平面偏振光旋转的稳定异构体。因为不对称中心和其他化学结构可以存在于本发明所述化合物中，从而产生立体异构现象，所以本发明关注其立体异构体和混合物。本发明所述化合物及其盐可以包括不对称碳原子且由此可以作为单一立体异构体、外消旋物和对映体和非对映体混合物存在。典型地，可以将这种化合物制备成外消旋混合物。然而，如果需要，则可以制备这种化合物或将其作为纯立体异构体分离，即各对映体或非对映体或富含立体异构体的混合物。互变体是易于互变的结构异构体并且在配体结合性方面存在改变，如在乙酰乙酸乙酯的酮基或烯醇形式中(包括任意所述化合物的互变体)。两性离子是在同一分子上具有酸性和碱性基团的内盐或双极化合物。在中性pH下，大部分两性离子的阳离子和阴离子是等同离子化的。
3.药物组合物
可以将本发明所述化合物(例如类似物、衍生物和前体药物)或其药学可接受的盐配制称不同剂型的药物组合物。为了制备本发明的药物组合物，根据药物制剂领域普通技术人员众所周知的技术将至少一种化合物或其药学可接受的盐作为活性成分与适合的载体和添加剂紧密混合。Remington，The Science and Practice of Pharmacy，第20版(Gennaro，A.R.，Chief Editor)，Philadelphia College of Pharmacy and Science，2000，将该文献完整引入参考。
本文所述的化合物的药学可接受的盐包括所述化合物的盐形式，其允许其应用或配制成药物并且保持特定化合物游离酸和碱的生物有效性且非生物学或其他方面不期望的。这种盐的实例描述在Wermuth和Stahl，(Eds.)(2002)Handbook of Pharmaceutical Salt：Properties，Selection and Use，Wiley-Verlag Helvetica Acta，Z ürich中，将该文献完整引入本文参考。这种盐的实例包括碱金属盐和游离酸和碱加成盐。药学可接受的盐的实例包括、但不限于硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氢氯酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、二甲苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、γ-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、丙磺酸盐、甲苯磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐和扁桃酸盐。在一些实施方案中，药学可接受的盐包括钠、钾、钙、铵、三烷基芳基铵和四烷基铵盐。
用于这种药物组合物的载体和添加剂可以采取各种形式，这取决于预期的给药方式。因此，口服给药用组合物可以是固体制剂，其包括、但不限于片剂、包糖衣片、硬胶囊、软胶囊、颗粒、锭剂和粉末，其中适合的载体和添加剂是淀粉、糖、粘合剂、稀释剂、制粒剂、润滑剂和崩解剂。由于其易于应用和较高的患者依从性，所以片剂和胶囊代表了用于许多医学疾病的有利的口服剂型。
类似地，用于液体制剂的组合物包括溶液、乳剂、分散液、混悬剂、糖浆剂和酏剂，其中适合的载体和添加剂包括、但不限于水、醇类、油、乙二醇类、防腐剂、矫味剂、着色剂和助悬剂。典型的用于胃肠外给药的制剂包含活性成分与载体，例如无菌水和胃肠外可接受的油，包括、但不限于聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、花生油或芝麻油，还可以包括用于辅助溶解或防腐的其他添加剂。就溶液而言，可以被冻干成粉且然后在使用前即刻再溶解。就分散液和混悬剂而言，适合的载体和添加剂包括水性树胶、纤维素、硅酸盐或油。
本发明实施方案的药物组合物包括适合于口服、直肠、局部、鼻部、吸入(例如通过气雾剂)、口含(例如舌下)、阴道、局部(例如皮肤和粘膜表面包括气道表面)、透皮给药和胃肠外(例如皮下、肌内、真皮内、关节内、胸膜内、腹膜内、鞘内、大脑内、颅内、动脉内或静脉内)这样的组合物，不过，在任意指定情况中最适合的途径取决于所治疗疾病的性质和严重性以及所使用的具体活性剂的性质。本发明的药物组合物特别适合于口服、舌下、胃肠外、鼻部和吸入给药。
注射用组合物将包括活性成分与适合的载体、包括有机溶剂、丙二醇-醇-水、等渗水、灭菌注射用水(USP)、
Figure BDA0000088452220002291
-醇-水、
Figure BDA0000088452220002292
或其他本领域技术人员公知的适合的载体。这些载体可以单独使用或与其他常用增溶剂(例如乙醇、乙二醇)或本领域技术人员公知的其他试剂联用。
如果本发明所述的化合物以溶液或注射剂的形式施用，则可以通过溶于或混悬于任意常用稀释剂使用所述化合物。稀释剂包括、但不限于生理盐水、林格液、葡萄糖水溶液、右旋糖水溶液、醇、脂肪酸酯、甘油、乙二醇、来源于植物或动物来源的油和石蜡。可以根据本领域技术人员公知的任意常规方法制备这些制剂。
可以将用于鼻部给药的组合物配制成气雾剂、滴剂、粉剂和凝胶剂。气雾剂典型地包含活性成分在生理学可接受的水或非水溶剂中的溶液或混悬液。这种制剂典型地以单剂量或多剂量的无菌形式存在于密闭容器中。密闭容器可以是药筒或再填充雾化装置使用。或者，密闭容器可以是单元调配装置例如单一应用的鼻用吸入器、泵式喷雾器或安装设定为递送治疗有效量的计量阀门的气雾剂调配器，其指定用于一旦使用完内含物则需处理掉。当剂型包含气雾剂调配器时，它将包含喷射剂例如压缩气体、作为实例的空气或有机喷射剂包括氟氯烃或氟烃。
适合于口含或舌下给药的组合物包括、但不限于片剂、锭剂和软锭剂，其中用载体例如糖和阿拉伯胶、黄蓍胶或明胶和甘油配制活性成分。
用于直肠给药的组合物包括、但不限于包含常用栓剂基质例如可可脂的栓剂。
用于透皮给药的组合物包括、但不限于软膏剂、凝胶剂和贴剂。
本领域技术人员公知的其他组合物也可以施用于经皮或皮下给药，例如硬膏剂。
此外，在制备这种包含活性成分或成分与配制组合物所必须的组分的混合物的药物组合物的过程中，可以掺入其他常用的药理学可接受的添加剂，包括、但不限于赋形剂、稳定剂、抗菌剂、湿润剂、乳化剂、润滑剂、甜味剂、着色剂、矫味剂、等渗剂、缓冲剂和抗氧化剂。添加剂包括、但不限于淀粉、蔗糖、果糖、右旋糖、乳糖、葡萄糖、甘露糖醇、山梨醇、沉淀碳酸钙、结晶纤维素、羧甲基纤维素、葡聚糖、明胶、阿拉伯胶、EDTA、硬脂酸镁、滑石粉、羟丙基甲基纤维素和焦亚硫酸钠。
可以将本发明的化合物与有利于将活性剂递送至中枢神经系统的递送系统结合使用。例如，如果需要，可以使用不同的血脑屏障渗透促进剂，以暂时和可逆地增加血脑屏障对治疗剂的渗透性。这种BBB渗透促进剂包括、但不限于白三烯类、缓激肽激动剂、组胺、紧密连接破坏剂(例如zonulin、zot)、高渗溶液(例如甘露糖醇)、细胞支架收缩剂和短链烷基甘油(例如1-O-戊基甘油)。口服、舌下、胃肠外、植入、鼻部和吸入途径可以提供将活性剂递送至CNS。在一些实施方案中，可以以对外周神经系统最低的效应将本发明所述的化合物给药至CNS。
在其他实施方案中，本发明提供试剂盒，其包括一个或多个容器，该容器包含药物剂量单元，所述药物剂量单元包含有效量的一种或多种本发明的化合物。试剂盒可以包括说明书、指导、标签、警告或信息小册子。
4.前体药物
本发明还提供包含本文所述化合物的前体药物。可以使用可水解的偶合本文所述的化合物形成前体药物。Ettmayer等人(2004)“LessonsLearned from Marketed and Investigational Prodrugs.”J.Med. Chem.47(10)：2394-2404 Testa和Mayer(2003)Hydrolysis in Drug  and Prodrug Metabolism：Chemistry，Biochemistry and EnzymologyWiley-Verlag Helvetica Chimica Acta，Zuerich(Chapters 1-12)：1-780。
术语“前体药物”欲意指在生理条件下通过溶剂解或代谢转化成药学/药理学活性的特定化合物的化合物。前体药物可以是本发明的化合物，其已经被化学衍生，使得它保持其母体药物化合物的一些、全部或无一生物活性并且在受试者体内被代谢成母体药物化合物。本发明的前体药物还可以是“部分前体药物”，即所述化合物已经以化学方式被衍生，使得它保持其母体药物化合物的一些、全部或无一生物活性并且在受试者体内被代谢成所述化合物的生物活性衍生物。
血脑屏障(BBB)是中枢神经系统(CNS)中血管与CNS自身大部分区域之间细胞转运机制的物理屏障和系统。BBB通过限制潜在的有害化学物质进入血液和通过允许进入必需的营养物维持动态平衡。然而，对治疗疾病或维持或促进正常和期望的脑功能例如认知、学习和记忆而言，BBB可能对将药理学活性剂递送至CNS提供难克服的屏障。本发明的前体药物能够通过血脑屏障并且可以通过CNS酯酶进行水解以得到活性化合物。此外，本文提供的前体药物还可以显示改善的生物利用度、改善的水溶性、改善的被动肠吸收、改善的转运蛋白-介导的肠吸收、防止加速代谢、组织选择性递送、较少(或很少)的副作用、减少或没有与其他药物治疗的药物相互作用和/或靶组织中被动富集。
本发明的前体药物可以包括本文所述的化合物，包括、但不限于布美他尼、布美他尼醛、布美他尼甲基酯、布美他尼氰基甲基酯、布美他尼乙基酯、布美他尼异戊基酯、布美他尼辛基酯、布美他尼苄基酯、布美他尼一苄基酰胺、布美他尼一乙基酰胺、布美他尼一苄基硫代酰胺、布美他尼一乙基硫代酰胺、布美他尼二苄基酰胺、布美他尼二乙基酰胺、布美他尼吗啉代乙基酯、布美他尼3-(二甲基氨基丙基)酯、布美他尼N，N-二乙基羟乙酰胺酯、布美他尼二甲基羟乙酰胺酯、布美他尼pivaxetil酯、呋塞米、呋塞米乙基酯、呋塞米氰基甲基酯、呋塞米苄基酯、呋塞米吗啉代乙基酯、呋塞米3-(二甲基氨基丙基)酯、呋塞米N，N-二乙基羟乙酰胺酯、呋塞米一乙基酰胺、呋塞米二乙基酰胺、呋塞米一苄基酰胺、呋塞米二苄基酰胺、呋塞米一苄基硫代酰胺、呋塞米一乙基硫代酰胺、呋塞米苄基三甲基铵盐、呋塞米十六烷基三甲基铵盐，呋塞米N，N-二甲基羟乙酰胺酯、吡咯他尼一乙基酰胺、吡咯他尼一苄基酰胺、呋塞米pivaxetil酯、呋塞米propaxetil酯、吡咯他尼、吡咯他尼甲基酯、吡咯他尼氰基甲基酯、吡咯他尼苄基酯、吡咯他尼吗啉代乙基酯、吡咯他尼3-(二甲基氨基丙基)酯、吡咯他尼N，N-二乙基羟乙酰胺酯、吡咯他尼二乙基酰胺、吡咯他尼二苄基酰胺、吡咯他尼苄基三甲基铵盐，吡咯他尼十六烷基三甲基铵盐，吡咯他尼N，N-二甲基羟乙酰胺酯、吡咯他尼pivaxetil酯、吡咯他尼propaxetil酯、四唑基-取代的阿佐塞米、吡啶鎓-取代的托拉塞米盐(也称作吡啶-取代的托拉塞米季铵盐)和S-硫代布美他尼、O-硫代布美他尼、二硫代布美他尼、S-硫代呋塞米、O-硫代呋塞米、二硫代呋塞米、S-硫代吡咯他尼、O-硫代吡咯他尼和二硫代吡咯他尼的类似酸、酸式盐、酯和酰氨基衍生物。参见本文提供的方案。
此外，正如在先提供的方案所示，前体药物可以如下形成：通过使用在生理条件下可降解的键结合生物相容性聚合物乙烯、例如上述包括聚乙二醇(PEG)的那些与本发明的化合物。另外参见Schacht等人(1997)Poly(ethylene glycol)Chemistry and BiologicalApplications，American Chemical Society，San Francisco，CA297-315。PEG与蛋白质结合可以用于减少免疫原性和/或延长本文提供的所述化合物的半衰期。可以使用任意的常规聚乙二醇化方法，条件是聚乙二醇化试剂保持至少一些药物活性。
5.使用方法
疾病和病症
本文所述的式I-XXVI的化合物可以用于调节包括预防、控制和治疗一定范围的病症，包括、但不限于涉及Na+K+Cl-协同转运蛋白和/或GABAA受体的疾病。
NKCC相关疾病的治疗
本文所述的化合物调节、调制、抑制、刺激、活化和/或结合电中性阳离子-氯离子协同转运蛋白，包括、但不限于Na+Cl-协同转运蛋白(例如噻嗪-敏感性Na+Cl-协同转运蛋白)；顶端布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC2)；基底外侧布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC1)；和K+Cl-协同转运蛋白(例如KCC1、KCC2、KCC3、KCC4)。在一个优选的实施方案中，电中性阳离子-氯离子协同转运蛋白是布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(例如NKCC1、NKCC2)。
疾病中的GABAA受体
GABAA受体具有五聚化结构，其一般包含两个α亚单位和两个β亚单位与第五个调节亚单位。特异性GABAA亚单位遍在脑中以不同空间和发育模式被表达，并且显示对已知药理学调节剂的不同响应。认为GABAA α1变体受体是介导GABA在大部分抑制突触上的作用的主要突触后受体，且照此不仅负责药物对GABAA α1变体受体起作用的有效特性，而且负责这些药物的镇静作用。GABAA α2和α3变体受体在海马、丘脑和其他CNS位置中表达且认为它介导苯二氮杂
Figure BDA0000088452220002331
类的抗焦虑作用。包含α4的GABAA受体位于海马中且认为在癫痫症中起作用。包含α5的GABAA受体在海马中表达且认为在学习和记忆中起作用。包含α4和α6的GABAA受体对苯二氮杂
Figure BDA0000088452220002332
类不敏感。特异性GABAA亚单位例如α1和α4显示在具有癫痫症的患者中增加的表达。GABAA受体的α4变体在对突触前GABA释放时的负反馈圈起作用中是重要的，其中刺激α4变体GABAA受体起抑制GABA释放的作用。
小“调节”亚单位ε和θ特别在CNS位置中表达例如皮质、黑质、扁桃体和下丘脑，而另一种小亚单位π在CNS外部的子宫和乳腺组织中表达(已经在乳腺癌中观察到了π超表达)。另一种“调节”亚单位γ是苯二氮杂
Figure BDA0000088452220002333
-敏感性GABAA受体的成分。认为GABAA亚单位γ2和δ是涉及一些单遗传形式癫痫症的病理学。此外GABAA α2和δ亚单位牵连饮酒和酒精成瘾。WO 2009/100040。
GABAA受体以突触和突触外水平定位。鉴于突触GABAA受体涉及期抑制，突触外GABAA受体负责紧张性抑制。紧张性抑制是因持续型抑制传导所致，这种传导促成脑中的“信号整合”，因为它为动作电位生成设置阈值并且分流兴奋性突触输入。因此，紧张性抑制在调节神经元兴奋性中起决定性作用，因为它为动作电位生成设置阈值并且整合兴奋信号。这种传导由“环境”GABA维持-存在于细胞外隙中的神经递质的量。环境GABA来源于在邻近突触上释放的神经递质溢出、星形细胞或非囊泡释放。此外，GABAA受体在突触和突触外区域(例如突触前细胞)上集簇。GABAA受体集簇作为紧张性抑制的另一种调节因子起作用，因为集簇的突触外GABAA受体可以介导较大的紧张性电流。Petrini等人(2004)“Clustering of Extrasynaptic GABAA Receptors Modulates TonicInhibition in Cultured Hippocampal Neurons.”The Journal ofBiological Chemistry 279(44)：45833-45843。
α4 GABAA受体变体主要位于突触前或突触外(例如在突触前细胞上)。参见图38。活化α4 GABAA受体变体导致突触前细胞超极化，从而减少GABA释放且由此减少抑制(例如对α4 GABAA受体变体具有特异性的激动剂导致GABA释放减少，然后导致抑制性信号传导减少)。相反，抑制(拮抗)α4 GABAA受体变体减少突触前细胞超极化，由此能够使GABA持续释放-延长和强化对突触后细胞的抑制信号(例如对α4 GABAA受体变体具有特异性的拮抗剂导致GABA释放增加，然后导致抑制性信号传导增加)。实际上，对α4 GABAA受体变体具有特异性的拮抗剂实现了与在目前GABA激动剂中观察到的类似的生理学效应。
突触前GABAA受体活化使突触前神经末梢去极化。神经元的突触前作用可以抑制或增强神经递质释放，即分别称作突触前抑制和突触前易化的过程。一些最佳分析的突触前抑制和易化的实例是在解剖细胞组织培养物中研究的无脊椎动物神经元中和脊椎动物机械感受器传入神经元(背根神经节细胞)中。这些研究和在哺乳动物完整脊髓中的那些研究表明存在至少两种突触前抑制机制。一种是归因于增加的Cl-的传导，其导致突触介导的Ca2+通道阻抑，从而导致Ca2+流入末梢减少。另一种是归因于增加的Cl-的传导，其导致突触前末梢中动作电位高度减小(或短路)。作为结果，产生较少的去极化，较少Ca2+通道被动作电位活化，且由此较少Ca2+流入末梢。活化GABAA突触前受体具有后一种类型。受体拮抗可以由此导致突触前易化。相反，突触前易化是因Ca2+流入增强所致。神经递质抑制K+通道，由此增宽动作电位并且能够使Ca2+流入以持续较长时间期限。
适当的神经活动依赖于维持兴奋与抑制之间适当的平衡。任何平衡过度倾向于抑制都会导致镇静，而相反，过度倾向于兴奋可以引起癫痫。例如，包含突触外δ亚单位的GABAA受体通过减少抑制输入锯齿颗粒细胞上和增加抑制性内在神经元抑制促成颞叶癫痫。Peng等人(2004)“Altered expression of the δ subunit of the GABAA receptor ina mouse model of temporal lobe epilepsy.”J.Neurosci.24：8629-8639。这种抑制性内在神经元抑制的增加通过减少抑制信号传递使平衡过度倾向于兴奋，从而导致癫痫发作。
突触前作用也倾向于在感觉流入点发生。例如，在视网膜、脊髓和背柱核中发现突触前抑制。突触前作用是重要的，因为它们能够选择性控制各神经元分支的作用。轴轴突触可以通过改变Ca2+流入抑制或有利于递质释放。突触前抑制可以作为突触后细胞即突触前抑制性神经元或突触前易化神经元活动的结果发生。在突触前抑制中，突触前抑制神经元活动的结果在于导致Ca2+电流阻滞，伴随突触前神经元的动作电位。因为Ca2+流入减少导致释放的神经递质的量减少，所以突触后细胞中的突触电位受阻。在突触前易化中，突触前易化神经元的活动导致突触前神经元中的K+电流阻滞，从而导致在动作电位过程中增加和由此的Ca2+电流。因此，神经递质释放增加，且作为结果，因此，是突触后细胞中的突触电位振幅。Kandel和Schwartz Principles of Neural Science第2版(1985)128-131页。
α4 GABAA变体以高水平在海马、纹状体和丘脑中表达，其中它促成突触旁GABAA受体介导的紧张性抑制。此外，α4表达因电休克、接触酒精/戒断、类固醇戒断、社会隔离和癫痫症而显著改变。α4 βδ亚型由非苯二氮杂
Figure BDA0000088452220002361
γ-氨基丁酸能的药物如类固醇、麻醉药和酒精调节。Chandra等人(2006年10月10日)Proc.Natl.Acad.Sci.103(41)：15230-15235。
认为几种临床疾病部分来源于GABA神经传递之间的失衡，包括、但不限于亨廷顿病、帕金森病、痉挛状态、癫痫症、精神分裂症、双极疾病和迟发性运动障碍。例如，GABA受体牵连睡眠调节和节律以及抗焦虑、健忘、镇静和酒精的麻醉效果。Jia等人(2008)The Journal ofPharmacology and Experimental Therapeutics 326(2)：475-482。减少的GABA活性显然促进这些疾病的发病机制。此外，认为镇痛和饱满感由GABA活性调节。几种疾病和病症至少部分是因中枢神经系统中兴奋与抑制之间失衡导致，包括、但不限于阿尔茨海默病、成瘾疾病、焦虑症、孤独症、双相情感障碍、抑郁症、癫痫症、亨廷顿病、失眠症、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、伤害性疼痛、疼痛、帕金森病、人格障碍、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征。因此，对α4 GABAA受体变体具有特异性的拮抗剂导致GABA释放增加和随后的抑制性信号传导增加，这些拮抗剂可以用于治疗这些疾病和病症，因为它们通过增加抑制起恢复中枢神经系统中兴奋与抑制之间平衡的作用。例如，对α4 GABAA受体变体具有特异性的拮抗剂(例如本文所述的布美他尼衍生物)结合突触外拮抗剂α4 GABAA受体变体，从而通过环境GABA防止其活化。这一结果防止了突触前细胞超极化，从而能够延长GABA释放入导致更长、更强抑制信号的突触间隙。由此提供一种方式，通过该方式中枢神经系统中兴奋与抑制之间适当的平衡可以通过增加抑制以抵消兴奋过度或缺乏抑制得以恢复。
本文所述的化合物选择性拮抗GABAA受体。在一个优选的实施方案中，GABAA受体是包含至少一种α4亚单位的GABAA受体同种型。在一个实施方案中，本发明包含组合物，该组合物包含本文所述的具有GABAA受体拮抗剂活性的化合物。在另一个实施方案中，本发明涉及药物组合物，其包含至少一种具有GABAA受体拮抗剂活性的化合物和药学可接受的赋形剂。在一个实施方案中，本文所述的化合物具有GABAA受体拮抗剂活性。在另一个实施方案中，本文所述的化合物对GABAB受体不具有效果。
特别地，本文所述的式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI、XVII、XVIII、XIX、XX、XXI、XXII、XXIII、XXIV、XXV和/或XXVI可以用于调节包括预防、防止、诊断、预测、控制和治疗涉及GABAA受体的一定范围的疾病，包括、但不限于本文所述的疾病。
在另一个实施方案中，本文所述的化合物显示对CNS中GABAA受体的选择性效果和较少的与通常对GABAA受体起作用的活性剂相关的副作用。例如，本文所述的化合物显示较少的镇静、呼吸减弱、认知减少或运动功能减少。
例如，本文所述的化合物在人和动物中有效减轻癫痫发作、减少疼痛响应和减轻偏头痛。一种衍生物NTP-2014优先结合GABAA受体亚型并且具有不同于典型苯二氮杂
Figure BDA0000088452220002371
和巴比妥盐机制的对GABAA受体的拮抗效应。
不同于许多布美他尼类似物，NTP-2014对Na+K+2Cl-协同转运蛋白(NKCC1或NKCC2)无作用。关注其他类似地对NKCC1或NKCC2无效的布美他尼类似物。不同于布美他尼，本文所述的布美他尼类似物(例如NTP-2014)不会在动物模型中引起利尿。NTP-2014不会增加尿排出量、钠排泄或钾排泄。此外，已经证实NTP-2014在动物的几种CNS功效模型中有活性。例如，NTP-2014、NTP-2024和NTP-2026显示在三种稳定和具有高度预测性的癫痫症模型、三种疼痛模型(两种神经病型和一种感受伤害型)和偏头痛皮层传播抑制模型中的强功效，将其结果概述在表1-4中。
Figure BDA0000088452220002381
Figure BDA0000088452220002391
Figure BDA0000088452220002401
Figure BDA0000088452220002411
Figure BDA0000088452220002421
Figure BDA0000088452220002431
Figure BDA0000088452220002441
Figure BDA0000088452220002451
总之，NTP-2014在毒理学方面耐受良好并且显示口服给药后无CNS副作用。基于本文提供的信息，发明人令人意外地发现NTP-2014特异性起作用以通过新作用机制(非NKCC依赖性)增加神经元抑制。发明人令人意外地发现NTP-2014对调节神经元发放的内在神经元末梢起作用，且由此NTP-2014抑制异常发放。更具体地说，NTP-2014增加突触前抑制，而不会抑制全部GABA受体。这种高度选择性作用机制是新的并且与广泛的非特异性苯二氮杂
Figure BDA0000088452220002461
类和巴比妥类活性相反。已知苯二氮杂
Figure BDA0000088452220002462
类和巴比妥类是有效的，但难以耐受，因为这些化合物活化大部分GABAA亚型受体(例如“消防水带效应”)。相反，NTP-2014通过对特异性GABAA受体亚型、优选GABAA的α4变体的作用促进抑制。由于NTP-2014的选择性，所以它避免了通常与已知γ-氨基丁酸能的化合物相关的典型的CNS副作用(例如镇静)。
NTP-2014显示对GABA内在神经元末梢的高度选择性。使用NTP-2014进行的体外电生理学研究显示对突触前和/或突触外(突触旁)末梢的选择性活性，从而表明GABA释放增加(抑制)。不受特定作用理论约束，发明人认为NTP-2014是如根据抑制性突触后电流(IPSCs)确定的增加抑制事件数量的GABAA受体拮抗剂。例如，本文所述的化合物(例如NTP-2014)增加自发IPSCs的频率(动作电位与释放GABA的微小事件的组合)并且增加微小IPSCs的频率(微小事件是因包含GABA的突触小泡增强释放入突触前间隙所致)。
就本文讨论的结果而言，发明人令人意外地发现NTP-2014增加GABAA抑制性驱动，因为频率增加显示了突触前机制。该数据显示微小与自发抑制性突触后电流(分别为mIPSCs和sIPSCs)事件之间的间隔在NTP-2014的存在下基本上减少。得到的效果显示抑制事件的频率非常明显地增加。尽管不排除NTP-2014的其他效应，但是这些数据启示增加GABA从神经元中释放突触前机制，因为NTP-2014拮抗突触前细胞上的GABAA受体，从而预防末梢前细胞的超极化。这能够使其他GABA释放入突触间隙，从而导致GABA-介导的抑制更长和更强。
GABAA可以位于突触旁(例如突触前和突触外)并且可以是控制IPSCs频率的原因。不限于特定的机制，发明人认为本文所述选择的化合物(例如NTP-2014)通过突触结末梢上的GABA抑制负反馈在突触旁位点起作。当突触间隙中存在足够的GABA结合和活化这些突触旁GABAA受体时，突触旁GABAA受体起减少GABA释放的作用(例如负反馈圈)。通过抑制这种负反馈圈，本文所述的化合物(例如NTP-2014)增加突触间隙中的GABA水平并且减少神经元发放。这种GABA增加恢复用于正常神经元活性的适合兴奋/抑制平衡。
NTP-2014选择性拮抗特异性GABAA受体同种型(例如α4变体)。在突触旁位点上发现α4 GABAA受体变体并且其占哺乳动物脑中GABAA受体的1％以下。活化α4 GABAA受体同种型可以抑制GABA从γ-氨基丁酸能的神经元中释放(例如活化α4 GABAA受体导致突触末梢超极化，它可以减缓GABA从突触小泡中释放并且使得减少突触间隙中GABA量的GABA清除机制成为可能，导致突触间隙中GABA减少)。此外，发明人令人意外地发现抑制突触旁α4 GABAA受体同种型导致GABA释放增加，导致对突触后神经元的抑制性刺激增加。这种特异性突触旁作用支持本文所述化合物(例如NTP-2014)显示的CNS抑制作用(例如镇静)缺乏的可能机制，甚至在极高全身接触下也是如此(例如剂量＞100mg/kg/天后)。这种作用机制明显与以低GABA浓度起作用的苯二氮杂
Figure BDA0000088452220002481
类活化GABAA受体相反。
中枢和外周神经系统中的许多疾病的药理介入病灶在于减轻神经元超兴奋性。目前用于治疗这种疾病的大部分活性剂通过例如调节兴奋性神经递质释放或活性、强化抑制途径、阻断涉及脉冲发生的离子通道和/或作为膜稳定剂而靶向兴奋性途径中的突触活动。用于治疗中枢和外周神经系统疾病的常用活性剂和治疗手段由此减轻了神经元兴奋性并且抑制突触发放。这些疗法的一个严重缺陷在于它们是非选择性的并且对正常和异常神经元群体发挥其作用。这导致负面和不期望的副作用，可以影响正常CNS功能，例如认知、学习和记忆，并且在所治疗的患者中产生不良生理学和心理学效应。常见副作用包括过度镇静、头晕、记忆缺失和肝损害。
例如，典型抗惊厥药和抗伤害感受药通过无差别地对多种GABAA受体同种型起作用的非选择性γ-氨基丁酸能的药物(例如苯二氮杂
Figure BDA0000088452220002482
类和巴比妥类)减轻兴奋或增加抑制。尽管它会产生良好功效，但是非选择性γ-氨基丁酸能的药物导致不期望的CNS副作用。相反，NTP-2014对特异性GABAA受体同种型(例如α4 GABAA变体)的选择性作用产生过度兴奋状态的强功效(例如癫痫症、偏头痛、疼痛)，而不会产生典型的CNS副作用，例如镇静和认知减退。
剂量
本发明治疗组合物中活性化合物的量可以根据如下因素的不同而改变：例如疾病状态、年龄、性别、体重、患者病史、危险因素、对疾病的易感性、给药途径、预先存在的治疗方案(例如可能的与其他药物的相互作用)和个体体重。可以调整剂量方案以提供最佳治疗响应。例如，可以给予单次快速灌注剂，可以随时间给予几个分次剂量或可以根据治疗情况的紧急状态所示按比例减少或增加剂量。
尤其有利的是配制易于给药和剂量均匀的剂量单元形式的胃肠外组合物。本文所用的剂量单元形式指适合于作为用于所治疗哺乳动物受试者的剂量单元的物理分散单元；每一单元包含预定量的混合了所需药用载体的活性化合物，经计算该预定量可产生期望的治疗效果。本发明剂量单元的说明书根据活性化合物的独特特性和所达到的特定治疗效果和本领域中为治疗个体敏感性混合这种活性化合物的固有限制决定并且直接依赖于它们。在治疗哺乳动物(例如人)疾病的治疗应用中，本发明所述化合物或其适合的药物组合物针对所述疾病是有效的，可以以有效量给予本发明所述的化合物。适合于本发明的剂型可以是组合物、药物组合物或本文所述的任意其他组合物。
就每一个所述的实施方案而言，用于患者的剂量可以约为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09或0.10μg以及约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1.0μg以及约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10μg以及约10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20μg以及约10、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100μg以及约100、200、300、400、500、600、700、800、900或1,000μg和其中的所有增量值。优选用于患者的剂量可以约为0.05-5μg和其中的所有增量值。或者，用于患者的剂量可以约为1-10μg和其中的所有增量值。用于患者的剂量还可以约为10-40μg和其中的所有增量值，约6-24μg和其中的所有增量值，约20-80μg和其中的所有增量值，约40-80μg和其中的所有增量值，约100-250μg和其中的所有增量值或约100-500μg和其中的所有增量值。更优选剂量可以约为0.5、1、2、5、6、10、12、18、20、24、30、40、50、80或90μg。优选剂量可以为0.5、2、6、8、10、12、18、20、30、40或80μg。
或者，就每一个所述的实施方案而言，用于患者的剂量可以约为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09或0.10mg以及约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1.0mg以及约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10g以及约10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20mg以及约10、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100mg以及约100、200、300、400、500、600、700、800、900或1，000mg和其中所有的增量值。优选用于患者的剂量可以约为0.05-5mg和其中所有的增量值。或者，用于患者的剂量可以约为1-10mg和其中所有的增量值。用于患者的剂量还可以约为10-40mg和其中所有的增量值，约6-24mg和其中所有的增量值，约20-80mg和其中所有的增量值，约40-80mg和其中所有的增量值，约100-250mg和其中所有的增量值或约100-500mg和其中所有的增量值。更优选剂量可以约为0.5、1、2、5、6、10、12、18、20、24、30、40、50、80或90mg。优选剂量可以为0.5、2、6、8、10、12、18、20、30、40或80mg。
或者，就每一个所述的实施方案而言，用于患者的剂量可以约为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09或0.10g以及约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1.0g以及约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10g以及约10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20g以及约10、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100g以及约100、200、300、400、500、600、700、800、900或1,000g和其中所有的增量值。优选用于患者的剂量可以约为0.05-5g和其中所有的增量值。或者，用于患者的剂量可以约为1-10g和其中所有的增量值。用于患者的剂量还可以约为10-40g和其中所有的增量值，约6-24g和其中所有的增量值，约20-80g和其中所有的增量值，约40-80g和其中所有的增量值，约100-250g和其中所有的增量值或约100-500g和其中所有的增量值。更优选剂量可以约为0.5、1、2、5、6、10、12、18、20、24、30、40、50、80或90g。优选剂量可以为0.5、2、6、8、10、12、18、20、30、40或80g。
就每一个所述的实施方案而言，用于患者的剂量可以约为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09或0.10μg/kg以及约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1.0μg/kg以及约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10μg/kg以及约10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20μg/kg以及约10、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100μg/kg以及约100、200、300、400、500、600、700、800、900或1,000μg/kg和其中所有的增量值。优选用于患者的剂量可以约为0.05-5μg/kg和其中所有的增量值。或者，用于患者的剂量可以约为1-10μg/kg和其中所有的增量值。用于患者的剂量还可以约为10-40μg/kg和其中所有的增量值，约6-24μg/kg和其中所有的增量值，约20-8μg/kg和其中所有的增量值，约40-80μg/kg和其中所有的增量值，约100-250μg/kg和其中所有的增量值或约100-500μg/kg和其中所有的增量值。更优选剂量可以是约0.5、1、2、5、6、10、12、18、20、24、30、40、50、80或90μg/kg。
优选剂量可以是0.5、2、6、8、10、12、18、20、30、40或80μg/kg。或者，就每一个所述的实施方案而言，用于患者的剂量可以约为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09或0.10mg/kg以及约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1.0mg/kg以及约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10mg/kg以及约10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20mg/kg以及约10、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100mg/kg以及约100、200、300、400、500、600、700、800、900或1,000mg/kg和其中所有的增量值。优选用于患者的剂量可以约为0.05-5mg/kg和其中所有的增量值。或者，用于患者的剂量可以约为1-10mg/kg和其中所有的增量值。用于患者的剂量还可以约为10-40mg/kg和其中所有的增量值，约6-24mg/kg和其中所有的增量值，约20-80mg/kg和其中所有的增量值，约40-80mg/kg和其中所有的增量值，约100-250mg/kg和其中所有的增量值或约100-500mg/kg和其中所有的增量值。更优选剂量可以约为0.5、1、2、5、6、10、12、18、20、24、30、40、50、80、90或100mg/kg。优选剂量可以为0.5、2、6、8、10、12、18、20、30、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、80、85、90或100mg/kg。
或者，就每一个所述的实施方案而言，用于患者的剂量可以约为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09或0.10g/kg以及约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1.0g/kg以及约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10g/kg以及约10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20g/kg以及约10、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100g/kg以及约100、200、300、400、500、600、700、800、900或1,000g/kg和其中所有的增量值。优选用于患者的剂量可以约为0.05-5g/kg和其中所有的增量值。或者，用于患者的剂量可以约为1-10g/kg和其中所有的增量值。用于患者的剂量还可以约为10-40g/kg和其中所有的增量值，约6-24g/kg和其中所有的增量值，约20-80g/kg和其中所有的增量值，约40-80g/kg和其中所有的增量值，约100-250g/kg和其中所有的增量值或约100-500g/kg和其中所有的增量值。更优选剂量可以是约0.5、1、2、5、6、10、12、18、20、24、30、40、50、80或90g/kg。优选剂量可以是0.5、2、6、8、10、12、18、20、30、40或80g/kg。
就每一个所述的实施方案而言，典型地将所述剂量每天给予一次、两次或三次，不过，更频繁的给药间隔是可能的。可以每天、每2天、每3天、每4天、每5天、每6天和/或每7天(每周一次)给予一次剂量。在一个实施方案中，可以将所述剂量每天给予至多且包括30天，优选7-10天。在另一个实施方案中，可以将所述剂量每天给予两次，持续10天。如果患者需要治疗慢性疾病或病症，则只要征兆和/或症状持续就可以给予所述剂量。患者可能需要“维持治疗”，其中患者接受每天剂量，持续数月、数年或其生命的剩余期限。此外，本发明的组合物可以对复发症状进行预防。例如，可以将所述剂量每天给予一次或两次以预防处于危险中的患者、尤其是无症状患者的症状发作。
就每一个所述的实施方案而言，患者可以接受用本文所述的化合物“预治疗”，其中每天、每2天、每3天、每4天、每5天、每6天和/或每7天(每周一次)给予一次本文所述的化合物。在一个实施方案中，可以将所述剂量每天给予至多且包括30天，优选7-10天。在另一个实施方案中，可以将所述剂量每天给予两次，持续10天。如果患者需要治疗需要延长治疗的慢性疾病或病症，则只要症状持续就可以给予所述碱的剂量。
在一个实施方案中，在治疗的第一天时，给予本文所述的化合物的初始剂量是20-80mg，然后在第二天给予约至少两次剂量的40mg。在另一个实施方案中，在治疗的第一天时，给予本文所述的化合物的初始剂量是0.5-2mg，然后在第二天给予约2mg的至少两次剂量。在另一个实施方案中，在治疗的第一天时，给予本文所述的化合物的初始剂量是10-20mg，然后在第二天给予约20mg的至少两次剂量。在另一个实施方案中，在治疗的第一天时，给予本文所述的化合物的初始剂量是5-10mg，然后在第二天给予约10mg的至少两次剂量。
为了通过注射给药，在一个实施方案中，治疗作为在0、12、24和36小时的4次注射过程开始。然后只要征兆和/或症状持续就持续注射每天一次、两次或三次。或者，可以维持注射以预防疾病复发。此外，可以给予注射作为对处于危险中的患者、尤其是无症状患者的预防措施。
可以将所述剂量作为单剂量、双倍剂量、三倍剂量、四倍剂量和/或五倍剂量给予。可以单独、同时和依次给予所述剂量。
就每一个所述的实施方案而言，本文所述的化合物的剂量可以是本文所述的化合物的治疗有效量，用于有效预防和急性治疗的用量或用于有效预防的用量。本文所述的化合物的剂量可以是有效减少疾病征兆或症状的用量、有效预防疾病征兆和/或症状、减轻疾病征兆和/或症状严重性、消除疾病征兆和/或症状、延缓疾病征兆和/或症状发展、预防疾病征兆和/或症状发展或对疾病征兆或症状进行预防的用量。
剂型可以是本领域技术人员已知的任意释放形式。可以将本发明的组合物配制成提供活性成分的速释或活性成分的缓释或控释。在缓释或控释制剂中，活性成分的释放可以以这样的速率进行，使得血液水平维持在治疗范围内，但在延长时间期限内低于毒性水平(例如4-24小时)。优选的剂型包括速释、延长释放、搏动释放、可变释放、控释、定时释放、缓释、延缓释放、长效剂型及其组合。得到速释、延长释放、搏动释放、可变释放、控释、定时释放、缓释、延缓释放、长效特征及其组合的能力是本领域公知的。
将要被理解的是可以使用本领域公知的药理学模型监测组合物的药理学活性。此外，将要被理解的是可以将本发明组合物掺入或包囊入适合的聚合物基质或位点特异性递送膜或可以使用能够进行位点特异性递送的特异性靶向剂官能化。例如，可以制备剂型以使它优选在中枢神经系统或外周神经系统中释放。这些技术和其他递药技术是本领域众所周知的。测定用于特定情况的最佳剂量属于本领域技术人员能力范围。参见例如Gennaro(2000)Remington，The Science and  Practice of Pharmacv，第20版，Philadelphia College of Pharmacyand Science。
在其他实施方案中，可以给予每天1.5-6mg的本发明布美他尼类似物，例如，每天1片或1粒胶囊，每天三次。在一些实施方案中，可以给予60-240mg/天的本发明呋塞米类似物，例如，每天1片或1粒胶囊，每天三次。在其他实施方案中，可以给予每天10-20mg的本发明吡咯他尼类似物，例如，每天1片或1粒胶囊，每天一次。在一些实施方案中，可以给予60mg/天的本发明阿佐塞米类似物。在其他实施方案中，可以给予每天10-20mg的本发明托拉塞米类似物，例如每天1片或1粒胶囊，每天一次。应注意可以给予较低剂量，特别是对IV给药而言。此外，低于对母体化合物的给药的剂量的给药可以防止不期望的周围效应的发生，例如利尿。
在其他实施方案中，以约0.5、1.0或2.0mg给予布美他尼类似物；每日以约20-80mg或两次40mg剂量给予呋塞米类似物；以0、200、500或1,250mg/kg、优选以约10-30mg/kg或200-500mg/kg给予吡咯他尼类似物；以5、10、20、40或200mg给予托拉塞米类似物。更优选口服和每日以约1、10或20mg给予类似物。
给药途径
可以以如下任意途径给予本文所述的组合物：口含、表皮、硬膜外、输注、吸入、动脉内、贲门内、脑室内、真皮内、肌内、鼻内、眼内、腹膜内、脊柱内、鞘内、静脉内、口服、胃肠外、肺、通过灌肠剂或栓剂经直肠、皮下、真皮下、舌下、透皮和跨粘膜。优选的给药途径是口含和口服。给药可以是局部的，其中邻近、在局部区域中、接近、在、近似在或在邻近疾病部位例如炎症或全身直接给予组合物，其中将组合物给予患者并且使其完全通过身体，由此达到疾病部位。局部给药可以是对细胞、组织、器官和/或器官系统给药，所述细胞、组织、器官和/或器官系统包括疾病和/或受疾病侵害，或其中疾病征兆和/或症状是活动的或可能发生。给药可以是具有局部效应的局部给药，将组合物直接施用于需要其起效的部位。给药可以是经肠的，其中期望的效果是全身的(非局部)，通过消化道给予组合物。给药可以是胃肠外的，其中期望的效果是全身的，通过非消化道的其他途径给予组合物。
药物组合物
“药物组合物”指适合于对受试者(例如哺乳动物)给药的化学或生物组合物。特别为通过一种或多种途径给药配制这种组合物，包括、但不限于口含、皮肤、表皮、硬膜外、输注、吸入、动脉内、贲门内、脑室内、真皮内、肌内、鼻内、眼内、腹膜内、脊柱内、鞘内、静脉内、口服、胃肠外、肺、通过灌肠剂或栓剂经直肠、皮下、真皮下、舌下、透皮和跨粘膜。此外，给药可以通过胶囊、滴剂、泡沫、凝胶、树胶、注射、液体、贴剂、丸剂、多孔药袋、粉末、片剂方式或其他给药方式进行。
“药用赋形剂”或“药学可接受的赋形剂”是其中配制了活性治疗剂的载体，通常是液体。赋形剂一般不对制剂提供任何药理学活性，不过，它可以提供化学和/或生物学稳定性和释放特性。典型制剂可以在例如Remington，The Science and Practice of Pharmacy，第20 版，(Gennaro，A.R.，Chief Editor)，Philadelphia College ofPharmacy and Science，2000中找到，将该文献完整引入参考。
本文所用的“药学可接受的载体”或“赋形剂”包括任意和所有的生理学相容性的溶剂、分散介质、包衣衣料、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂。在一个实施方案中，载体适合于胃肠外给药。或者，载体可以适合于静脉内、腹膜内、肌内、舌下或口服给药。药学可接受的载体包括无菌水溶液或分散液和用于临时制备无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。这种介质和试剂在药物活性物质中的应用是本领域众所周知的。除任意常用介质或试剂与活性化合物不相容外，关注它们在本发明药物组合物中的应用。还可以将补充活性化合物掺入组合物。
药物组合物典型地必须是无菌的且在制备和贮存条件下稳定。可以将组合物配制成溶液、微乳、脂质体或其他适合于高药物浓度的有序结构。载体可以是溶剂或分散介质，其包含，例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)及其适合的混合物。例如，可以通过使用包衣衣料例如卵磷脂、通过维持分散液所需的粒度和通过使用表面活性剂维持适当的流动性。
在许多情况中，优选在组合物中包括等渗剂，例如糖类、多醇类例如甘露糖醇、山梨醇或氯化钠。可以通过在组合物中包括延迟吸收的试剂例如单硬脂酸盐和明胶带来可注射组合物的延长吸收。此外，可以将本文所述的化合物配制成定时释放制剂，例如在组合物中包括缓释聚合物。可以使用防止所述化合物快速释放的载体例如控释制剂，包括植入物和微囊化递送系统制备活性化合物。可以使用可生物降解的、生物相容性聚合物，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酸酐类、聚乙醇酸、胶原蛋白、聚原酸酯类、聚乳酸和聚乳酸、聚乙二醇共聚物(PLG)。用于制备这种制剂的许多方法是本领域技术人员公知的。
本发明中优选的给药形式是制药领域公知的口服形式。可以通过口服给予作为胶囊(硬或软)、片剂(薄膜衣、肠溶衣或不包衣)、粉末、颗粒(包衣或不包衣)或液体(溶液或混悬液)的本发明的药物组合物。可以便利地通过本领域众所周知的任意方法常规制备制剂。本发明的药物组合物可以包括一种或多种适合的生产助剂或赋形剂，包括填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、稀释剂、流动剂、缓冲剂、湿润剂、防腐剂、着色剂、甜味剂、矫味剂和药物相容性载体。
就每一个所述的实施方案而言，可以通过作为本领域公知的各种剂型给予所述化合物。关注本领域技术人员公知的任意生物学可接受的剂型及其组合。这种剂型的实例包括、但不限于咀嚼片、速溶片、泡腾片、再溶解粉末、酏剂、液体、溶液、混悬剂、乳剂、片剂、多层片、双层片、胶囊、软胶囊、硬胶囊、胶囊形片剂、锭剂、咀嚼锭剂、珠、粉末、口胶剂(gum)颗粒、粒子、微粒、可分散颗粒、扁囊剂、灌注剂、栓剂、霜剂、局部用制剂。吸入剂、气雾剂吸入剂、贴剂、颗粒吸入剂、植入物、长效植入物、可摄取制剂、注射剂(包括皮下、肌内、静脉内和真皮内)、输注液及其组合。
混合物中可以包括的其他化合物是，例如医学惰性成分(例如固体和液体稀释剂)例如用于片剂或胶囊的乳糖、葡萄糖、蔗糖、纤维素、淀粉或磷酸钙；用于软胶囊的橄榄油或油酸乙酯和用于混悬剂或乳剂的水或植物油；润滑剂例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁或硬脂酸钙和/或聚乙二醇；胶凝剂例如胶态粘土；增稠剂例如西黄蓍胶或藻酸钠、粘合剂例如淀粉、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂例如淀粉、藻酸、藻酸盐或羟基乙酸淀粉钠；泡腾混合物；染料；甜味剂；湿润剂例如卵磷脂、聚山梨醇酯类或月桂基硫酸盐；和其他治疗可接受的辅助成分例如保湿剂、防腐剂、缓冲剂和抗氧化剂，它们是用于这种制剂的已知添加剂。
用于口服给药的液体分散体可以是糖浆剂、乳剂、溶液或混悬剂。糖浆剂可以包含例如蔗糖或蔗糖与甘油和/或甘露糖醇和/或山梨醇作为载体。混悬剂和乳剂可以包含载体，例如天然树胶、琼脂、藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯醇。
营养组合物
本文所述化合物的组合物可以用于如下或以如下形式被消耗：营养补充剂；膳食补充剂；医疗食品；营养制剂；食品例如药物-益处食品(例如“phoods”)；饮料包括强化饮料(例如含钙橙汁)；传统(例如标准燕麦片、全麦面包)和“设计”产品(例如蛋白棒、精巧的糊状食品、精巧的棒状物、能量棒)。可以将本文所述的化合物配制成保健棒、蜜饯、动物饲料、谷物、膳食补充剂、酸乳、谷物涂料、食品、营养食品、功能食品及其组合。
第二种活性剂
与本发明组合物联用于治疗的第二种活性剂包括、但不限于苯妥英、卡马西平、巴比妥类、苯巴比妥、甲苯比妥、三甲双酮、美芬妥英、甲乙双酮、苯噻妥英钠(phenthenylate)、苯乙酰脲、美沙比妥、贝克拉胺、苯琥胺、扑米酮、甲琥胺、乙苯妥英、氨鲁米特(aminoglutethinide)、地西泮、氯硝西泮、氯卓酸钾、磷苯妥英、乙琥胺、乙琥胺、非尔氨酯、加巴喷丁、拉科酰胺、拉莫三嗪、瑞替加滨、卢非酰胺、托吡酯、vigrabatrin、普瑞巴林、噻加宾、唑尼沙胺、氯巴占、硫喷妥、咪达唑仑、丙泊酚、左乙拉西坦、奥卡西平、CCPene、GYK152466、5-羟色胺受体激动剂、麦角胺、双氢麦角胺、舒马普坦、普萘洛尔、美托洛尔、阿替洛尔、噻吗洛尔、纳多洛尔、硝苯地平(nifeddipine)、尼莫地平、维拉帕米、阿司匹林、酮洛芬、tofenamicacid、甲芬那酸、萘普生、美西麦角、对乙酰氨基酚、可乐定、利舒脲、异丙佐罗、布他比妥、苯二氮杂
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类、双丙戊酸钠和其他相似类型的化合物。参见美国专利uS6,495,601和美国专利申请公开号US2002/0082252。
例如，除本文所述的组合物外，还可以用如下药物治疗患者：抗抑郁药(例如三环抗抑郁剂[例如阿米替林
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地昔帕明
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丙咪嗪
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去甲替林(
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)]；5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRIs)[例如文拉法辛
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度洛西汀去甲肾上腺素和多巴胺再摄取抑制剂(NDRIs)[例如安非他酮
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]；联用再摄取抑制剂和受体阻滞剂[例如曲唑酮
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奈法唑酮
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马普替林、mirtazpine]；单胺氧化酶抑制剂(MAOIs)[例如异卡波肼
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苯乙肼
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tranlcypromine
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]和选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)[例如西酞普兰
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依地普仑
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氟西汀
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帕罗西汀舍曲林
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]氟伏沙明
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和阿米替林)；稳定受损神经导致的异常中枢神经系统中电活性的抗惊厥药(例如加巴喷丁
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普瑞巴林
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卡马西平
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拉莫三嗪
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托吡酯
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非尔氨酯
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噻加宾
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直肠用地西泮苯巴比妥、苯妥英
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扑米酮
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丙戊酸盐
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氨己烯酸、奥卡西平
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唑尼沙胺
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和左乙拉西坦
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类固醇(例如皮质类固醇)；止痛药(例如对乙酰氨基酚
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可待因(Tylenol#2，3，4
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)、propoyl APA
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propoeylphene
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芬太尼贴剂
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氢吗啡酮吗啡(MS
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)、羟可酮
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喷他佐辛(Talwin
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)、曲马朵APAP
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曲马朵
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氢可酮APAP)；锂和非甾体抗炎药(NSAID)(例如
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水杨酸盐类(例如乙酰水杨酸(阿司匹林)、amoxiprin、贝诺酯/贝诺酯、水杨酸胆碱镁、
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乙水杨胺、faislamine、水杨酸甲酯、水杨酸镁、双水杨酸酯和水杨酰胺)、芳基烷酸(例如
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和
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)2-芳基丙酸(profens)(例如
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Tiaprofenicaeid)；N-芳基邻氨基苯甲酸类(灭酸类)(例如甲芬那酸、氟芬那酸、甲氯芬那酸、托芬那酸、吡唑烷衍生物、
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和)；和昔康类(例如
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和
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)。
可以在同一制剂(例如同一丸剂)或在作为本发明所述化合物的单独制剂中给予这第二种活性剂。优选将上述第二种活性剂与本发明所述的化合物共同给予。
可以将本文所述的第二种活性剂与本发明所述的化合物同时、依次给予或在给予本发明所述化合物之前或之后给予。如果同时给予本文所述的第二种活性剂，则一同或在极短的时间间隔内(例如5分钟)给予第二种活性剂和本发明所述化合物。如果将第二种活性剂的给药作为预治疗给予，则在给予本发明所述化合物之前给予第二种活性剂，持续本文所关注的任意时间期限。
精神疗法
本文所述的化合物、药物组合物和治疗方案可以与精神疗法联用。在一个实施方案中，治疗成瘾疾病、焦虑症、双相情感障碍和/或抑郁症还包含精神疗法。
几种类型的精神疗法-或“谈心疗法”-可以有助于具有抑郁症的人。在一些实施方案中，方案是短期的(例如10-20周)且其他方案是更长期的(例如1-10年)，这取决于个体的需要。已经证实两种主要类型的精神疗法-认知-行为疗法(CBT)和人际关系疗法(IPT)有效治疗神经精神障碍(例如成瘾疾病、焦虑症、双相情感障碍和抑郁症)。
本说明书中举出的全部公开文献(例如非专利文献)、专利、专利申请公开文献和专利申请表示本发明所属技术领域普通技术人员的水平。将所有这种公开文献(例如非专利文献)、专利、专利申请公开文献和专利申请引入本文参考，就如同将每篇公开文献、专利、专利申请公开文献或专利申请各自特别和分别引入参考一样。
现在参照下列实施例描述本发明的其他实施方案。通过示例提供本文包含的实施例且它们不以任何方式起限定作用。
实施例1
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲酯(布美他尼甲基酯)
在氮气气氛中在5分钟内向布美他尼(1.2g，3.29mmol)在甲醇(12mL)中的淤浆中加入亚硫酰氯(70μL)在甲醇(6mL)中的混合物。搅拌5分钟后，该反应混合物变可溶。将该反应体系再搅拌30分钟，此时通过薄层色谱法(TLC)发现反应完成。减压除去甲醇，将残余物溶于乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠、水和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥乙酸乙酯，浓缩至得到1.1g(89％)3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲酯，为白色固体。可以使用类似方法制备布美他尼乙基酯、布美他尼异戊基酯、布美他尼辛基酯和布美他尼苄基酯。
实施例2
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基硫代苯甲酸(硫代布美他尼、布美他尼-(C＝O)-SH硫代酸)
可以通过Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法使布美他尼与亚硫酰氯反应，以制备相应的酰氯，然后其可以与硫氢化钠反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基硫代苯甲酸(硫代布美他尼、S-布美他尼硫代酸)。
实施例3
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基硫代苯甲酸硫代布美他尼、布美他尼-(C＝O)-SH硫代酸)
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基硫代苯甲酸，钠盐硫代布美他尼钠盐、布美他尼-(C＝O)-SNa硫代酸钠盐)
可以使布美他尼甲基酯与硫化氢或硫氢化钠反应，酸化钠盐后得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基硫代苯甲酸(硫代布美他尼、布美他尼硫代酸)。
实施例4
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸硫代甲酯(布美他尼S-甲基硫酯)
按照与实施例1类似的方式，可以使布美他尼与催化量的亚硫酰氯在甲硫醇(甲基硫醇)反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸硫代甲酯。可以使用类似的方法采用布美他尼和相应硫醇，制备布美他尼S-乙基硫酯、布美他尼S-异戊基硫酯、布美他尼S-辛基硫酯和布美他尼S-苄基硫酯。可以使用类似的方法采用二硫代布美他尼和相应醇类，制备布美他尼O-乙基硫酯、布美他尼O-异戊基硫酯、布美他尼O-辛基硫酯和布美他尼O-苄基硫酯。
实施例5
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-二硫代苯甲酸(二硫代布美他尼、布美他尼-(C＝S)-SH二硫代酸)
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基二硫代苯甲酸，钠盐二硫代布美他尼钠盐、布美他尼-(C＝S)-SNa二硫代酸钠盐)
可以通过Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法使硫代布美他尼与亚硫酰氯反应，以制备相应的硫代酰氯，然后其可以与硫氢化钠反应，在酸化钠盐后，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-二硫代苯甲酸(二硫代布美他尼、布美他尼二硫代酸)。
实施例6
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-二硫代苯甲酸甲酯(布美他尼甲基二硫酯)
按照与实施例1类似的方式，可以使二硫代布美他尼与催化量的亚硫酰氯在甲硫醇(甲基硫醇)反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基二硫代苯甲酸甲酯。可以使用类似的方法，制备布美他尼乙基二硫酯、布美他尼异戊基二硫酯、布美他尼辛基二硫酯和布美他尼苄基二硫酯。
实施例7
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸氰基甲酯(布美他尼氰基甲基酯)
将布美他尼(1.0g，2.7mmol)溶于二甲基甲酰胺(DMF)，加入氯乙腈(195μL，2.7mmol)，然后加入三乙胺(465μL)。将该反应体系加热至100℃12小时，TLC和液相色谱法-结合质谱法(LC/MS)显示反应完成。将该反应体系冷却至室温，溶于二氯甲烷，用水、饱和氯化铵洗涤，减少至得到淤浆。向该淤浆中加入水(25mL)，粗产物沉淀为灰白色固体。通过在乙腈中重结晶得到纯的3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸氰基甲酯(850mg)。可以使用类似方法制备布美他尼乙基酯、布美他尼异戊基酯、布美他尼辛基酯和布美他尼苄基酯。
实施例8
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸苄酯(布美他尼苄基酯)
将布美他尼(1.15g，3.15mmol)溶于二甲基甲酰胺(DMF，10mL)，加入苄基氯(400μL，2.8mmol)，然后加入三乙胺(480μL)。将该反应体系加热至80℃12小时，TLC和LC/MS显示反应完成。将该反应体系冷却至室温，溶于二氯甲烷，用水、饱和氯化铵洗涤，浓缩至得到浓稠淤浆。向该淤浆中加入水(25mL)，过滤得到的固体，在50℃真空烘箱干燥12小时，得到1.0g(80％)固体3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸苄酯。
实施例9
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸2-(4-吗啉代)乙酯(布美他尼4-吗啉代乙基酯)
将布美他尼(1.2g，3.29mmol)溶于二甲基甲酰胺(DMF，12mL)，加入4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐(675mg，3.62mmol)，然后加入三乙胺(1mL)和碘化钠(500mg 3.33mmol)。将该反应体系加热至95℃8小时，TLC和LC/MS显示反应完成。将该反应体系冷却至室温，溶于二氯甲烷，用水、饱和氯化铵洗涤，浓缩至干。通过Biotage硅胶快速色谱法纯化后，纯化的稀洗脱液在真空蒸发时得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸2-(4-吗啉代)乙酯，为白色固体(600mg，62％)。
实施例10
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯[布美他尼3-(N，N-二甲基氨基丙基)酯]
按照与实施例54类似的方式，可以使布美他尼与3-(二甲基氨基)丙基氯盐酸盐、三乙胺和碘化钠在二甲基甲酰胺(DMF)中反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯。
实施例11
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-二硫代苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯[布美他尼3-(N，N-二甲基氨基丙基)二硫酯]
按照与实施例10类似的方式，可以使二硫代布美他尼与3-(二甲基氨基)丙基氯盐酸盐、三乙胺和碘化钠在二甲基甲酰胺(DMF)中反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-二硫代苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯。
实施例12
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸N，N-二乙基氨基羰基甲酯(布美他尼N，N-二乙基羟乙酰氨基酯)
将布美他尼(1.2g，3.29mmol)溶于二甲基甲酰胺(12mL)，加入2-氯-N，N-二乙基乙酰胺(500mg，3.35mmol)，然后加入三乙胺(0.68mL)和碘化钠(500mg 3.33mmol)。将该反应体系加热至95℃8小时，TLC和LC/MS显示反应完成。将该反应体系冷却至室温，溶于二氯甲烷，用水、饱和氯化铵洗涤，浓缩至得到浓稠淤浆。向该淤浆中加入水(25mL)，得到的固体从溶液中沉淀。过滤产物，在50℃真空烘箱干燥12小时，得到1.0g固体3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸N，N-二乙基氨基羰基甲酯。
实施例13
N，N-二乙基3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼二乙基酰胺)
将布美他尼(1.16g，3.2mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC，690mg，3.6mmol)，5分钟后加入N-羟基苯并三唑(HOBt，498mg，3.6mmol)。将该溶液再搅拌5分钟。加入二乙胺(332μL，3.2mmol)，将该反应体系搅拌2小时。用饱和碳酸氢钠、水、盐水洗涤该反应体系，用无水硫酸镁干燥。减压除去二氯甲烷，得到860mg(65％)纯的N，N-二乙基3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例14
N，N-二乙基3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基硫代苯甲酰胺(布美他尼二乙基硫代酰胺)
按照与实施例5类似的方式，可以使二硫代布美他尼与亚硫酰氯反应，得到硫代酰氯，可以使其与二乙胺按照实施例13的方式反应，得到N，N-二乙基3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基硫代苯甲酰胺。
实施例15
N，N-二苄基3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼二苄基酰胺)
将布美他尼(960mg，2.6mmol)溶于二甲基甲酰胺(DMF，10mL)，加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC，560mg，3.6mmol)，10分钟后，加入1-羟基苯并三唑(HOBt，392mg，2.9mmol)，将该溶液再搅拌10分钟。加入二苄基胺(1mL，5.2mmol)，将该反应体系搅拌2小时，此时通过LC/MS发现反应完成。将该反应体系倾入饱和氯化铵(20mL)，用乙酸乙酯(2x100mL)萃取。用饱和碳酸氢钠、水、盐水洗涤乙酸乙酯，用无水硫酸镁干燥。减压除去乙酸乙酯，得到1.0g(75％)N，N-二苄基3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺，为白色固体。
实施例16
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸苄基三甲基铵(布美他尼苄基三甲基铵盐)
在5分钟期限内向苄基三甲基铵氢氧化物(451mg，2.7mmol)在水(10mL)中的溶液中加入布美他尼(1g，2.7mmol)。搅拌10分钟后该反应混合物变澄清。减压除去水，得到无色油状物。通过用水和庚烷重结晶该油状物得到纯产物，得到690mg 3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸苄基三甲基铵，为浅粉色结晶。
实施例17
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸十六烷基三甲基铵(布美他尼十六烷基三甲基铵盐)
按照与实施例16类似的方式，可以使布美他尼与十六烷基三甲基铵氢氧化物在水中反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸十六烷基三甲基铵。
实施例18
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸N，N-二甲基氨基羰基甲酯(布美他尼N，N-二甲基羟乙酰氨基酯)
将布美他尼(1.2g，3.29mmol)溶于二甲基甲酰胺(DMF，10mL)，加入2-氯-N，N-二甲基乙酰胺(410μL，3.9mmol)，然后加入三乙胺(0.70mL)和碘化钠(545mg，3.6mmol)。将该反应体系加热至50℃10小时，TLC和LC/MS显示反应完成。减压除去溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠、水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥。减压除去乙酸乙酯，通过硅胶快速色谱法纯化产物，得到685mg(60％)纯3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸N，N-二甲基氨基羰基甲酯。
实施例19 3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯(布美他尼Pivaxetil酯)
将布美他尼(1.2g，3.29mmol)溶于二甲基甲酰胺(DMF，10mL)，加入新戊酸氯甲酯(575μL，3.9mmol)，然后加入三乙胺(0.70mL)和碘化钠(545mg，3.6mmol)。将该反应体系加热至50℃10小时，TLC和LC/MS显示反应完成。减压除去溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠、水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥。减压除去乙酸乙酯，通过硅胶快速色谱法纯化产物，得到653mg(60％)纯3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯。
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-二硫代苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯(布美他尼Pivaxetil二硫酯)
按照与实施例19类似的方式，可以使二硫代布美他尼与新戊酸氯甲酯、三乙胺和碘化钠在二甲基甲酰胺(DMF)中反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-二硫代苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯。
实施例20
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸乙基羰基氧基甲酯(布美他尼Propaxetil酯)
按照与实施例19类似的方式，可以使布美他尼与丙酸氯甲酯、三乙胺和碘化钠在二甲基甲酰胺(DMF)中反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸乙基羰基氧基甲酯。
实施例21
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-二硫代苯甲酸乙基羰基氧基甲酯(布美他尼Propaxetil二硫酯)
按照与实施例20类似的方式，可以使二硫代布美他尼与丙酸氯甲酯、三乙胺和碘化钠在二甲基甲酰胺(DMF)中反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-二硫代苯甲酸乙基羰基氧基甲酯。
实施例22
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸甲酯(吡咯他尼甲基酯)
按照与实施例1类似的方式，可以使吡咯他尼与亚硫酰氯和甲醇反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸甲酯。可以使用类似方法制备吡咯他尼乙基酯、吡咯他尼异戊基酯、吡咯他尼辛基酯和吡咯他尼苄基酯。
实施例23
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)-硫代苯甲酸(硫代吡咯他尼、吡咯他尼-(C＝O)-SH硫代酸)
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)-硫代苯甲酸，钠盐(硫代吡咯他尼钠盐，吡咯他尼-(C＝O)-SNa硫代酸钠盐)
可以通过Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法使吡咯他尼与亚硫酰氯反应，制备相应的酰氯，然后使其与硫氢化钠反应，酸化钠盐后得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)-硫代苯甲酸(硫代吡咯他尼、S-吡咯他尼硫代酸)。
实施例24
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)-硫代苯甲酸(硫代吡咯他尼、吡咯他尼-(C＝O)-SH硫代酸)
可以使吡咯他尼甲基酯与硫化氢或硫氢化钠反应，酸化钠盐后得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)-硫代苯甲酸(硫代吡咯他尼、S-吡咯他尼硫代酸)。
实施例25
硫代甲基3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸酯(吡咯他尼S-甲基硫酯)
按照与实施例1类似的方式，可以使吡咯他尼与催化量的亚硫酰氯在甲硫醇(甲基硫醇)中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸硫代甲酯。使用与吡咯他尼和相应的硫醇类的类似方法，可以制备吡咯他尼S-乙基硫酯、吡咯他尼S-异戊基硫酯、吡咯他尼S-辛基硫酯和吡咯他尼S-苄基硫酯。使用与二硫代吡咯他尼和相应的醇类的类似方法，可以制备吡咯他尼O-乙基硫酯、吡咯他尼O-异戊基硫酯、吡咯他尼O-辛基硫酯和吡咯他尼O-苄基硫酯。
实施例26
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)-二硫代苯甲酸(二硫代吡咯他尼、吡咯他尼-(C＝S)-SH二硫代酸)
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)-二硫代苯甲酸，钠盐(二硫代吡咯他尼钠盐，吡咯他尼-(C＝S)-SNa二硫代酸钠盐)
可以通过Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vo1.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法使硫代吡咯他尼与亚硫酰氯反应，制备相应的硫代酰氯，然后可以使其与硫氢化钠反应，酸化钠盐后，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)-二硫代苯甲酸(二硫代吡咯他尼、吡咯他尼二硫代酸)。
实施例27
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)-二硫代苯甲酸甲酯(吡咯他尼甲基二硫酯)
按照与实施例1类似的方式，可以使二硫代吡咯他尼与催化量的亚硫酰氯在甲硫醇(甲基硫醇)中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)-二硫代苯甲酸甲酯。使用类似的方法，可以制备吡咯他尼乙基二硫酯、吡咯他尼异戊基二硫酯、吡咯他尼辛基二硫酯和吡咯他尼苄基二硫酯。
实施例28 3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸氰基甲酯(吡咯他尼氰基甲基酯)
按照与实施例7类似的方式，可以使吡咯他尼与氯乙腈和三乙胺在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸氰基甲酯。
实施例29
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸苄酯(吡咯他尼苄基酯)
按照与实施例8类似的方式，可以使吡咯他尼与苄基氯和三乙胺在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸苄酯。
实施例30
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸2-(4-吗啉代)乙酯(吡咯他尼4-吗啉代乙基酯)
按照与实施例9类似的方式，可以使吡咯他尼与4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐、三乙胺和碘化钠在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸2-(4-吗啉代)乙酯。
实施例31
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯[吡咯他尼3-(N，N-二甲基氨基丙基)酯]
按照与实施例10和53类似的方式，可以使吡咯他尼与3-(二甲基氨基)丙基氯盐酸盐、三乙胺和碘化钠在二甲基甲酰胺(DMF)中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯。
实施例32
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)二硫代苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯[吡咯他尼3-(N，N-二甲基氨基丙基)二硫酯]
按照与实施例31类似的方式，可以使二硫代吡咯他尼与3-(二甲基氨基)丙基氯盐酸盐、三乙胺和碘化钠在二甲基甲酰胺(DMF)中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)二硫代苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯。
实施例33
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸N，N-二乙基氨基羰基甲酯(吡咯他尼N，N-二乙基羟乙酰胺酯)
按照与实施例12类似的方式，可以使吡咯他尼与2-氯-N，N-二乙基乙酰胺、三乙胺和碘化钠在二甲基甲酰胺(DMF)中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸N，N-二乙基氨基羰基甲酯。
实施例34
N，N-二乙基3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酰胺(吡咯他尼二乙基酰胺)
按照与实施例13类似的方式，吡咯他尼可以与EDC，HOBt和二乙基胺在DMF中反应，得到N，N-二乙基3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酰胺。
实施例35
N，N-二乙基3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酰胺(吡咯他尼二乙基硫代酰胺)
按照与实施例34类似的方式，可以使二硫代吡咯他尼与EDC、HOBt和二乙胺在DMF中反应，得到N，N-二乙基3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)硫代苯甲酰胺。
实施例36
N，N-二苄基3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酰胺(吡咯他尼二苄基酰胺)
按照与实施例15类似的方式，可以使吡咯他尼与EDC、HOBt和二苄基胺在DMF中反应，得到N，N-二苄基3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酰胺。
实施例37
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸苄基三甲基铵(吡咯他尼苄基三甲基铵盐)
按照与实施例16类似的方式，可以使吡咯他尼与苄基三甲基铵氢氧化物反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸苄基三甲基铵。
实施例38
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸十六烷基三甲基铵(吡咯他尼十六烷基三甲基铵盐)
按照与实施例17类似的方式，可以使吡咯他尼与十六烷基三甲基铵氢氧化物在水中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸十六烷基三甲基铵。
实施例39
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸N，N-二甲基氨基羰基甲酯(吡咯他尼N，N-二甲基羟乙酰氨基酯)
按照与实施例18类似的方式，可以使吡咯他尼与2-氯-N，N二甲基乙酰胺、三乙胺和碘化钠在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸N，N-二甲基氨基羰基甲酯。
实施例40
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯(吡咯他尼Pivaxetil酯)
按照与实施例19类似的方式，可以使吡咯他尼与新戊酸氯甲酯、三乙胺和碘化钠在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯。
实施例41
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)二硫代苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯(吡咯他尼Pivaxetil二硫酯)
按照与实施例40类似的方式，可以使二硫代吡咯他尼与新戊酸氯甲酯、三乙胺和碘化钠在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)二硫代苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯。
实施例42
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸乙基羰基氧基甲酯(吡咯他尼Propaxetil酯)
按照与实施例20类似的方式，可以使吡咯他尼与丙酸氯甲酯、三乙胺和碘化钠在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸乙基羰基氧基甲酯。
实施例43
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸乙酯(呋塞米乙基酯)
Bundgaard等人(1988)Int.J.Pharmaceutics 42：217-224的方法可以用于制备5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸乙酯，m.p.163-165°。可以使用类似方法制备呋塞米甲基酯、呋塞米异戊基酯、呋塞米辛基酯和呋塞米苄基酯。
实施例44
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸甲酯(呋塞米甲基酯)
Bundgaard，H.，Norgaard，T.和Nielsen，N.M.，Int.J.Pharmaceutics，1988，42，217-224的方法可以用于制备5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸甲酯。
实施例45
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]硫代苯甲酸(硫代呋塞米、呋塞米-(C＝O)-SH硫代酸)
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]硫代苯甲酸，钠盐(硫代呋塞米钠盐，呋塞米-(C＝O)-SNa硫代酸钠盐)
可以通过Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法使呋塞米与亚硫酰氯反应，制备相应的酰氯，然后其可以与硫氢化钠反应，酸化钠盐后得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]硫代苯甲酸(硫代呋塞米、S-呋塞米硫代酸)。
实施例46
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]硫代苯甲酸(硫代呋塞米、呋塞米-(C＝O)-SH硫代酸)
可以使呋塞米甲基酯与硫化氢或硫氢化钠反应，酸化后，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基硫代苯甲酸(硫代呋塞米、S-呋塞米硫代酸)。
实施例47
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸硫代甲酯(呋塞米S-甲基硫酯)
按照与实施例1类似的方式，可以使布美他尼与催化量的亚硫酰氯在甲硫醇(甲基硫醇)中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸硫代甲酯。使用与呋塞米和相应的硫醇类的类似方法，可以制备呋塞米S-乙基硫酯、呋塞米S-异戊基硫酯、呋塞米S-辛基硫酯和呋塞米S-苄基硫酯。使用与二硫代呋塞米和相应的醇类的类似方法，可以制备呋塞米O-乙基硫酯、呋塞米O-异戊基硫酯、呋塞米O-辛基硫酯和呋塞米O-苄基硫酯。
实施例48
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]-二硫代苯甲酸(二硫代呋塞米、呋塞米-(C＝S)-SH二硫代酸)
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]-二硫代苯甲酸，钠盐(二硫代呋塞米钠盐，呋塞米-(C＝S)-SNa二硫代酸钠盐)
可以通过Noble，P.和Tarbell，D.S.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1963，924-927的方法使硫代呋塞米与亚硫酰氯反应，制备相应的硫代酰氯，然后其可以与硫氢化钠反应，酸化钠盐后得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]-二硫代苯甲酸(二硫代呋塞米、呋塞米二硫代酸)。
实施例49
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]二硫代苯甲酸甲酯(呋塞米甲基二硫酯)
按照与实施例1类似的方式，可以使二硫代呋塞米与催化量的亚硫酰氯在甲硫醇(甲基硫醇)中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]二硫代苯甲酸甲酯。使用类似的方法，可以制备呋塞米乙基二硫酯、呋塞米异戊基二硫酯、呋塞米辛基二硫酯和呋塞米苄基二硫酯。
实施例50
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸氰基甲酯(呋塞米氰基甲基酯)
按照与实施例7类似的方式，可以使呋塞米与氯乙腈和三乙胺在DMF中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸氰基甲酯。
实施例51
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸苄酯(呋塞米苄基酯)
按照与实施例8类似的方式，可以使呋塞米与苄基氯和三乙胺在DMF中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸苄酯。
实施例52
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸2-(4-吗啉代)乙酯(呋塞米4-吗啉代乙基酯)
Mork，N.，Bundgaard，H.，Shalmi，M.和Christensen，S.，Int.J.Pharmaceutics，1990，60，163-169的方法可以用于制备2-(4-吗啉代)乙基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸酯，m.p.134-135°。
实施例53
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯[呋塞米3-(N，N-二甲基氨基丙基)酯]
Mork，N.，Bundgaard，H.，Shalmi，M.和Christensen，S.，Int.J.Pharmaceutics，1990，60，163-169的方法可以用于制备5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯，m.p.212-213°。
实施例54
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]二硫代苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯[呋塞米3-(N，N-二甲基氨基丙基)二硫酯]
按照与实施例53类似的方式，可以使二硫代呋塞米与3-(二甲基氨基)丙基氯盐酸盐、三乙胺和碘化钠在二甲基甲酰胺(DMF)中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]二硫代苯甲酸3-(N，N-二甲基氨基丙酯。
实施例55
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸N，N-二乙基氨基羰基甲酯(呋塞米N，N-二乙基羟乙酰氨基酯)
Mork，N.，Bundgaard，H.，Shalmi，M.和Christensen，S.，Int.J.Pharmaceutics，1990，60，163-169的方法可以用于制备5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸N，N-二乙基氨基羰基甲酯，m.p.135-136°。
实施例56
N，N-二乙基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺(呋塞米二乙基酰胺)
按照与实施例13类似的方式，呋塞米可以与EDC，HOBt和二乙基胺在DMF中反应，得到N，N-二乙基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺。
实施例57
N，N-二乙基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺(呋塞米二乙基硫代酰胺)
按照与实施例56类似的方式，可以使二硫代呋塞米与EDC、HOBt和二乙胺在DMF中反应，得到N，N-二乙基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]硫代苯甲酰胺。
实施例58
N，N-二苄基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺(呋塞米二苄基酰胺)
按照与实施例15类似的方式，可以使呋塞米与EDC、HOBt和二苄基胺在DMF中反应，得到N，N-二苄基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺。
实施例59
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸苄基三甲基铵(呋塞米苄基三甲基铵盐)
按照与实施例16类似的方式，可以使呋塞米与苄基三甲基铵氢氧化物反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸苄基三甲基铵。
实施例60
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸十六烷基三甲基铵(呋塞米十六烷基三甲基铵盐)
按照与实施例17类似的方式，呋塞米可以与十六烷基三甲基铵氢氧化物在水中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸十六烷基三甲基铵。
实施例61
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸N，N-二甲基氨基羰基甲酯(呋塞米N，N-二甲基羟乙酰氨基酯)
Bundgaard，H.，Norgaard，T.和Nielsen，N.M.，Int.J.Pharmaceutics，1988，42，217-224的方法可以用于制备5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸N，N-二甲基氨基羰基甲酯，m.p.193-194°。
实施例62
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯(呋塞米Pivaxetil酯)
Mork，N.，Bundgaard，H.，Shalmi，M.和Christensen，S.，Int.J.Pharmaceutics，1990，60，163-169的方法可以用于制备5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯。
实施例63
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]二硫代苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯(呋塞米Pivaxetil二硫酯)
按照与实施例62类似的方式，可以使二硫代呋塞米与新戊酸氯甲酯、三乙胺和碘化钠在二甲基甲酰胺(DMF)中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]二硫代苯甲酸叔-丁基羰基氧基甲酯。
实施例64
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸乙基羰基氧基甲酯(呋塞米Propaxetil酯)
Mork，N.，Bundgaard，H.，Shalmi，M.和Christensen，S.，Int.J.Pharmaceutics，1990，60，163-169的方法可以用于制备5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸乙基羰基氧基甲酯，m.p.141-142°。
实施例65
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]二硫代苯甲酸乙基羰基氧基甲酯(呋塞米Propaxetil二硫酯)
按照与实施例64类似的方式，Mork，N.，Bundgaard，H.，Shalmi，M.和Christensen，S.，Int J.Pharmaceutics，1990，60，163-169的方法可以用于将二硫代呋塞米转化成5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]二硫代苯甲酸乙基羰基氧基甲酯。
实施例66
5-[1-(叔-丁基羰基氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-2-氯-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺(四唑基-取代的阿佐塞米)
按照与实施例19类似的方式，可以使阿佐塞米与新戊酸氯甲酯、三乙胺和碘化钠在DMF中反应，得到5-[1-(叔-丁基羰基氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-2-氯-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺。
实施例67
2-氯-5-[1-(乙基羰基氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺(四唑基-取代的阿佐塞米)
按照与实施例19类似的方式，可以使阿佐塞米与丙酸氯甲酯，三乙胺和碘化钠在DMF中反应，得到2-氯-5-[1-(乙基羰基氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺。
实施例68
2-氯-5-[1-(羟基甲基)-1H-四唑-5-基]-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺(四唑基-取代的阿佐塞米)
可以使阿佐塞米与甲醛在二氯甲烷、二氯甲烷-DMF混合物或DMF中反应，得到2-氯-5-[1-(羟基甲基)-1H-四唑-5-基]-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺。
实施例69
2-氯-5-[1-(甲氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺(四唑基-取代的阿佐塞米)
可以使阿佐塞米与甲醛、甲醇和强酸在二氯甲烷、二氯甲烷-DMF混合物或DMF中反应，得到2-氯-5-[1-(甲氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺。
实施例70
2-氯-5-[1-(甲硫基甲基)-1H-四唑-5-基]-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺(四唑基-取代的阿佐塞米)
可以使阿佐塞米与甲醛、甲硫醇和强酸在二氯甲烷、二氯甲烷-DMF混合物或DMF中反应，得到2-氯-5-[1-(甲硫基甲基)-1H-四唑-5-基]-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺。
实施例71
5-[1-(苄基氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-2-氯-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺(四唑基-取代的阿佐塞米)
可以使阿佐塞米与苄基氯甲基醚、三乙胺和碘化钠在DMF中反应，得到5-[1-(苄基氧基甲基)-1H-四唑-5-基]-2-氯-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺。
实施例72
2-氯-5-(1H-四唑-5-基)-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺的苄基三甲基铵盐(阿佐塞米苄基三甲基铵盐)
按照与实施例16类似的方式，可以使阿佐塞米与苄基三甲基铵氢氧化物在水中反应，得到2-氯-5-(1H-四唑-5-基)-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺的苄基三甲基铵盐。
实施例73
2-氯-5-(1H-四唑-5-基)-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺的十六烷基三甲基铵盐(阿佐塞米十六烷基三甲基铵盐)
按照与实施例16类似的方式，可以使阿佐塞米与十六烷基三甲基铵氢氧化物在水中反应，得到2-氯-5-(1H-四唑-5-基)-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺的十六烷基三甲基铵盐。
实施例74
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓叔-丁基羰基氧基甲基氯化物(methochloride)(吡啶鎓-取代的托拉塞米盐)
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓叔-丁基羰基氧基甲基两性离子(吡啶鎓-取代的托拉塞米两性离子)
按照与实施例19类似的方式，可以使托拉塞米与新戊酸氯甲酯、三乙胺和碘化钠在DMF中反应，得到3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓叔-丁基羰基氧基甲基氯化物和一些3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓叔-丁基羰基氧基甲基氯化物。然后用弱碱例如碳酸氢钠水溶液和三乙胺水溶液处理可以得到相应的纯两性离子。
实施例75
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓乙基羰基氧基甲基氯化物(吡啶鎓-取代的托拉塞米盐)
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓乙基羰基氧基甲基两性离子(吡啶鎓-取代的托拉塞米两性离子)
按照与实施例19类似的方式，可以使托拉塞米与丙酸氯甲酯、三乙胺和碘化钠在DMF中反应，得到3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓乙基羰基氧基甲基氯化物和一些3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓乙基羰基氧基甲基氯化物。然后用弱碱例如碳酸氢钠水溶液和三乙胺水溶液处理可以得到相应的纯两性离子。
实施例76
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓苄基氧基甲基氯化物(吡啶鎓-取代的托拉塞米盐)
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓苄基氧基甲基两性离子(吡啶鎓-取代的托拉塞米两性离子)
按照与实施例8类似的方式，可以使托拉塞米与苄基氯甲基醚和三乙胺在DMF中反应，得到3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓苄基氧基甲基氯化物。然后用弱碱例如碳酸氢钠水溶液和三乙胺水溶液处理可以得到相应的纯两性离子。
实施例77
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲氧基甲基氯化物(吡啶鎓-取代的托拉塞米盐)
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲氧基甲基两性离子(吡啶鎓-取代的托拉塞米两性离子)
按照与实施例8类似的方式，可以使托拉塞米与甲基苄基氯甲基醚和三乙胺在DMF中反应，得到3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲氧基甲基氯化物。然后用弱碱例如碳酸氢钠水溶液和三乙胺水溶液处理可以得到相应的纯两性离子。
实施例78
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓苯基甲基氯化物(吡啶鎓-取代的托拉塞米盐)
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓苯基甲基两性离子(吡啶鎓-取代的托拉塞米两性离子)
按照与实施例8类似的方式，可以使托拉塞米与苄基氯和三乙胺在DMF中反应，得到3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓苯基甲基氯化物。然后用弱碱例如碳酸氢钠水溶液和三乙胺水溶液处理可以得到相应的纯两性离子。
实施例79
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓苄基硫代甲基氯化物(吡啶鎓-取代的托拉塞米盐)
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓苄基硫代甲基两性离子(吡啶鎓-取代的托拉塞米两性离子)
按照与实施例8类似的方式，可以使托拉塞米与苄基氯甲基硫醚和三乙胺在DMF中反应，得到3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓苄基硫杂甲基氯化物。然后用弱碱例如碳酸氢钠水溶液和三乙胺水溶液处理可以得到相应的纯两性离子。
实施例80
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲硫基甲基氯化物(吡啶鎓-取代的托拉塞米盐)
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲硫基甲基两性离子(吡啶鎓-取代的托拉塞米两性离子)
按照与实施例8类似的方式，可以使托拉塞米与甲基氯甲基硫醚和三乙胺在DMF中反应，得到3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓苄基硫杂甲基氯化物。然后用弱碱例如碳酸氢钠水溶液和三乙胺水溶液处理可以得到相应的纯两性离子。
实施例81
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(布美他尼mPEG350酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使布美他尼与MeO-PEG350-Cl(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-106-350)和三乙胺在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在7-8的范围。
实施例82
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(S-布美他尼mPEG350硫酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使硫代布美他尼与MeO-PEG350-C1(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-106-350)和三乙胺在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-硫代苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在7-8的范围。
实施例83
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(布美他尼mPEG1000酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使布美他尼与MeO-PEG1000-OTs(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在19-24的范围。按照类似方式，可以使用S-硫代布美他尼、MeO-PEG1000-OTs(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中形成S-布美他尼mPEG1000硫酯类。
实施例84
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(布美他尼mPEG1000二硫酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使二硫代布美他尼与MeO-PEG1000-OTs  (Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基-二硫代苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在19-24的范围。
实施例85
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基n-1-乙酯(吡咯他尼mPEG350酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使吡咯他尼与MeO-PEG350-C1(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-106-350)和三乙胺在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在7-8的范围。按照类似方式，可以使用二硫代布美他尼、MeO-PEG350-C1(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-106-350)和三乙胺在DMF中形成布美他尼mPEG350二硫酯类。
实施例86
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(S-吡咯他尼mPEG350硫酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使硫代吡咯他尼与MeO-PEG350-C1(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-106-350)和三乙胺在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)硫代苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在7-8的范围。
实施例87
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(吡咯他尼mPEG1000酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使吡咯他尼与MeO-PEG1000-OTs(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在19-24的范围。按照类似方式，可以使用S-硫代吡咯他尼、MeO-PEG1000-OTs(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中形成S-吡咯他尼mPEG1000硫酯类。
实施例88
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(吡咯他尼mPEG1000二硫酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使二硫代吡咯他尼与MeO-PEG1000-OTs  (Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)二硫代苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在19-24的范围。按照类似方式，可以使用二硫代吡咯他尼、MeO-PEG1000-OTs  (Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中形成吡咯他尼mPEG1000二硫酯类。
实施例89
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(呋塞米mPEG350酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使呋塞米与MeO-PEG350-C1(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-106-350)和三乙胺在DMF中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在7-8的范围。
实施例90
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(S-呋塞米mPEG350硫酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使硫代呋塞米与MeO-PEG350-C1(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-106-350)和三乙胺在DMF中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]硫代苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在7-8的范围。
实施例91
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(呋塞米mPEG1000酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使呋塞米与MeO-PEG1000-OTs(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在19-24的范围。
实施例92
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯(呋塞米mPEG1000二硫酯类)
按照与实施例8类似的方式，可以使二硫代呋塞米与MeO-PEG1000-OTs  (Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]二硫代苯甲酸甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙酯，其中n在19-24的范围。按照类似方式，可以使用二硫代呋塞米、MeO-PEG350-C1(Biolink  Life  Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-106-350)和三乙胺在DMF中形成呋塞米mPEG350二硫酯类。
实施例93
5-[1-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]-1H-四唑-5-基]-2-氯-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺类(N-mPEG350-四唑基-取代的阿佐塞米)
按照与实施例8类似的方式，可以使阿佐塞米与MeO-PEG350-C1(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-106-350)和三乙胺在DMF中反应，得到5-[1-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]-1H-四唑-5-基]-2-氯-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺类，其中n在7-8的范围。
实施例94
5-[1-甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]-1H-四唑-5-基]-2-氯-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺类(N-mPEG1000-四唑基-取代的阿佐塞米)
按照与实施例8类似的方式，可以使阿佐塞米与MeO-PEG1000-OTs(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中反应，得到5-[1-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]-1H-四唑-5-基]-2-氯-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯磺酰胺类，其中n在19-24的范围。
实施例95
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基氯(N-mPEG350-吡啶鎓托拉塞米盐)
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基两性离子(N-mPEG350-吡啶鎓托拉塞米两性离子)
按照与实施例8类似的方式，可以使托拉塞米与MeO-PEG350-C1(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-106-350)和三乙胺在DMF中反应，得到3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基氯化物(ethochloride)，其中n在7-8的范围。然后用弱碱例如碳酸氢钠水溶液和三乙胺水溶液处理可以得到相应的纯两性离子。
实施例96
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基氯化物(N-mPEG1000-吡啶鎓托拉塞米盐)
3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基两性离子(N-mPEG1000-吡啶鎓托拉塞米两性离子)
按照与实施例8类似的方式，可以使托拉塞米与MeO-PEG1000-OTs(Biolink Life Sciences，Inc.，Cary，NC，BLS-107-1000)和三乙胺在DMF中反应，得到得到3-异丙基氨基甲酰基磺酰氨基-4-(3’-甲基苯基)氨基吡啶鎓甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基氯化物，其中n在19-24的范围。然后用弱碱例如碳酸氢钠水溶液和三乙胺水溶液处理可以得到相应的纯两性离子。
实施例97
3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲醛(布美他尼醛)
通过Muraki和Mukiayama的方法(Chem.Letters，1974，1447和Chem.Letters，1975，215)，可以使布美他尼与双(4-甲基哌嗪基)铝氢化物反应，得到3-氨基磺酰基-5-丁基氨基-4-苯氧基苯甲醛。
实施例98
3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲醛(吡咯他尼醛)
通过Muraki和Mukiayama的方法(Chem.Letters，1974，1447和Chem.Letters，1975，215)，可以使吡咯他尼与双(4-甲基哌嗪基)铝氢化物反应，得到3-氨基磺酰基-4-苯氧基-5-(1-吡咯烷基)苯甲醛.
实施例99
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲醛(呋塞米醛)
通过Muraki和Mukiayama(Chem.Letters，1974，1447和Chem.Letters，1975，215)的方法，可以使呋塞米与双(4-甲基哌嗪基)铝氢化物反应，得到5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲醛。
实施例100
辛基-5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯甲酸甲酯(呋塞米辛基酯；NTP-1014)
将呋塞米(10.0g，0.032mol)、氯辛烷(4.96g，0.033mol)、碘化钠(0.452g，0.003mol)、三乙胺(6.11g，0.060mol)在N，N-二甲基甲酰胺(60mL)中的混合物在70℃加热18小时。18小时后，液相色谱法/质谱法(LC/MS)显示不存在原料。将该反应混合物冷却至室温。然后将该反应混合物倾入水(300mL)，用乙酸乙酯(3x150mL)萃取。用饱和碳酸氢钠溶液、亚硫酸钠溶液和盐水洗涤有机层。用无水硫酸钠干燥有机层，浓缩，得到黄褐色固体。
实施例101
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸癸酯(呋塞米癸基酯；NTP-1015)
将呋塞米(10.0g，30.2mmol)、癸基氯(5.88g，33mmol)、碘化钠(0.45g，3mmol)和三乙胺(6.11g，0.60mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(60mL)中的混合物在70℃加热15小时。液相色谱法/质谱法(LC/MS)显示不存在原料(将期望的产物检测为负模式的[M-1]峰)。将该反应混合物倾入水(300mL)，用乙酸乙酯(3x150mL)萃取。用饱和碳酸氢钠溶液、亚硫酸钠溶液(100mL)、水(2x100mL)、亚硫酸钠溶液和盐水洗涤有机层。用无水硫酸钠干燥乙酸乙酯溶液，浓缩，得到黄褐色固体。将产物在叔-丁基甲基醚(MTBE)/庚烷(1∶1)(5mL/g)中搅拌成淤浆，得到8.3g(61％)5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸癸酯。
实施例102
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸异戊二烯酯(呋塞米异戊二烯基酯；NTP-1016)
在四氢呋喃(THF)(200mL)中搅拌呋塞米(10.0g，30.2mmol)和1，1’-羰基二咪唑(CDI)(5.3g，33.2mmol)，在40℃加热，形成黄色均匀溶液2.5小时。在单独的烧瓶中，将3-甲基-2-丁烯-1-醇(异戊二烯醇，3.38g，39.3mmol)与作为1M在THF中的溶液的叔-丁醇钾(36.2mmol)一起搅拌。在添加醇盐溶液至原始反应体系中时，该混合物变成橙色，形成即刻溶解的沉淀。20分钟后，LC/MS显示完成完成，由此用乙酸乙酯(300mL)稀释该反应溶液，用水(200mL)洗涤，用乙酸乙酯(300mL)萃取，用饱和碳酸氢钠(200mL)洗涤，用无水硫酸镁干燥合并的有机相，过滤。浓缩有机溶液至得到黄色固体，在50℃真空干燥。通过经硅胶垫、首先用二氯甲烷/乙酸乙酯98/2、然后用二氯甲烷/甲醇95/5洗脱纯化粗产物，得到6.8g(56％)5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸异戊二烯酯。
实施例103
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸4-甲氧基苄酯(呋塞米对-甲氧基苄基酯；NTP-1018)
将呋塞米(7.5g，22.7mmol)、对-甲氧基苄基氯(4.62g，29.5mmol)和三乙胺(2.3g，22.7mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(60mL)中在60℃搅拌3.5小时。将温度加热至75℃，搅拌过夜。LC/MS确定反应完成91％，由此冷却该反应体系，用氯化铵(30mL)使反应停止，用乙酸乙酯(2x120mL)萃取，得到白色沉淀。用水(8x60mL)和1N氢氧化钠(60mL)洗涤有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。将产物在异丙醇(10mL/g)中搅拌成淤浆，过滤，得到7.8g(76％)5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸4-甲氧基苄酯。
实施例104
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸2-苯基乙酯(呋塞米苯乙基酯；NTP-1020)
在THF(200mL)中搅拌呋塞米(10.0g，30.2mmol)和CDI(5.3g，33.2mmol)，在40℃加热，形成黄色均匀溶液3小时。在单独的烧瓶中，将2-苯基乙醇(苯乙醇，4.8g，39.3mmol)与作为1M在THF中的溶液的叔-丁醇钾(36.2mmol)一起搅拌。在添加醇盐溶液至原始反应体系中时，该混合物变成橙色。30分钟后，LC/MS显示完成完成，由此用乙酸乙酯(300mL)稀释该反应溶液，用水(200mL)洗涤，用乙酸乙酯(300mL)萃取，用饱和碳酸氢钠(150mL)洗涤，用无水硫酸镁干燥合并的有机相，过滤。浓缩有机溶液至得到黄色固体，在50℃真空干燥。通过经硅胶垫用二氯甲烷/乙酸乙酯98/2洗脱纯化粗产物，得到8.81g(67％)5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸2-苯基乙酯。
实施例105
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸(R)-α-甲基苄酯(呋塞米(R)-α-甲基苄基酯；NTP-1022)
使呋塞米(10g，30.2mmo l)与CDI(5.3g，33.2mmol)在THF(200mL)中在40℃反应3小时。将(R)-(+)-2-苯基乙醇(66mmol)与作为1M的THF溶液(66mmol)的叔丁醇钾合并，然后在室温加入到原始反应体系中，使其反应20分钟，然后在40℃反应1小时。用乙酸乙酯(200mL)和水(100mL)稀释反应体系。向水层中加入氯化钠(50g)，然后用乙酸乙酯萃取。用饱和碳酸钠(40mL)、盐水(2x40mL)洗涤合并的有机层。通过硅胶塞纯化(用0％-5％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脱)，然后在庚烷中重结晶，得到8.74g(67％)5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸(R)-α-甲基苄酯。
实施例106
5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸(S)-α-甲基苄酯(呋塞米(S)-α-甲基苄基酯；NTP-1023)
反应与实施例104(NTP-1022)相同进行，除了使用(S)-(-)-2-苯基乙醇。反应得到8.48g(65％)5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酸(S)-α-甲基苄酯。
实施例107
N-乙基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺(呋塞米一乙基酰胺、呋塞米乙基酰胺；NTP-1026)
在DMF中(68mL)合并呋塞米(8.5g，25.7mmol)、乙胺(2.0M甲醇溶液，30.8mmol)、N-羟基苯并三唑(HOBt)(1.74g，12.85mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)(5.67g，29.6mmol)，在室温搅拌过夜。用乙酸乙酯(140mL)稀释该反应体系，用水(60mL)洗涤，用乙酸乙酯(3x140mL)萃取水层。用水(5x100mL)洗涤合并的有机层，用无水硫酸镁干燥，浓缩至得到白色固体。将产物在异丙醇(10mL/g)中搅拌成淤浆20分钟，过滤，用异丙醇(30mL)洗涤，在40℃真空干燥3天，得到8.3g(90％)N-乙基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺。
实施例108
N-苄基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺(呋塞米一苄基酰胺、呋塞米苄基酰胺；NTP-1027)
将呋塞米(11.0g，33.3mmol)在THF中搅拌30分钟，然后添加羰基二咪唑(CDI，6.48g，39.96mmol)，再搅拌30分钟。加入苄胺(3.92g，36.6mmol)；放热反应在30分钟内完成。浓缩该反应混合物，将残余物溶于乙酸乙酯(200mL)，用1M盐酸(100mL)洗涤，用乙酸乙酯(200mL)反萃取水层，用饱和碳酸氢钠、1N氢氧化钠(50mL)洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩至得到浓稠黄色固体。将该固体在乙醇(5mL/g)中搅拌成淤浆，过滤，在40℃真空干燥3天，得到8.81g(63％)N-苄基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺。
实施例109
N-哌啶基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺(呋塞米N-哌啶基酰胺；NTP-1029)
反应与实施例108(NTP-1027)类似地使用呋塞米(13g，39.9mmol)、CDI(7.65g，47.2mmol)和哌啶(3.68g，43.2mmol)在THF(57mL)中进行。浓缩反应体系，将残余物溶于乙酸乙酯(200mL)，用10％硫酸铜溶液(100mL)洗涤。用乙酸乙酯(150mL)萃取水层，用1N NaOH(100mL)洗涤有机层，用无水硫酸镁干燥，浓缩至得到黄色固体。黑色固体从氢氧化钠层中沉淀出来，使其从沸腾的乙醇中重结晶，热滤。
实施例110
N-吗啉基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺(呋塞米N-吗啉基酰胺；NTP-1030)
在DMF(56mL)中合并呋塞米(7g，21.2mmol)、吗啉(3.69g，42.4mmol)和N-羟基苯并三唑(HOBt，1.43g，10.6mmol)，然后加入EDC(8.13g，42.4mmol)，同时搅拌并且加热至55℃30分钟。冷却该反应体系，用乙酸乙酯(120mL)稀释，用水(50mL)洗涤。再用乙酸乙酯(4x120mL)萃取水层。用无水硫酸镁干燥合并的有机层，过滤，浓缩，在40℃真空干燥，得到6.8g(80％)N-吗啉基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺。
实施例111
3-(N，N-二甲基氨基丙基)5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺(呋塞米3-(N，N-二甲基氨基丙基)酰胺；NTP-1031)
反应与实施例107(NTP-1027)类似地使用呋塞米(10g，30.2mmol)、CDI(5.3g，33.3mmol)和3-(二甲基氨基)-1-丙基胺(3.4g，33.3mmol)在THF(200mL)中进行。用水(200mL)稀释该反应混合物，用乙酸乙酯(2x400mL)萃取，用饱和碳酸氢钠(400mL)洗涤，用无水硫酸镁干燥有机相，过滤，浓缩至得到白色固体，在50℃真空干燥，得到11.5g(92％)3-(N，N-二甲基氨基丙基)5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺。
实施例112
3-(N，N-二甲基氨基丙基)-N-甲基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺(呋塞米3-(N，N-二甲基氨基丙基)-N-甲基酰胺；NTP-1032)
反应与实施例110(NTP-1031)类似地使用呋塞米(10g，30.2mmol)、CDI(5.3g，33.3mmol)和N，N，N’-三甲基-1，3-丙二胺(3.6g，33.3mmol)在THF(200mL)中进行。用水(200mL)稀释该反应混合物，用乙酸乙酯(2x400mL)萃取，用饱和碳酸氢钠(400mL)洗涤，用无水硫酸镁干燥有机相，过滤，浓缩至得到白色固体，在50℃真空干燥，得到11.5g(90％)3-(N，N-二甲基氨基)丙基-N-甲基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺。
实施例113
2-(1-哌啶基)乙基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺(呋塞米哌啶基乙基酰胺；NTP-1033)
反应与实施例107(NTP-1027)类似地使用呋塞米(10g，30.2mmol)、CDI(5.88g，36.2mmol)和2-(1-哌啶基)乙胺(4.26g，33.2mmol)在THF(44mL)中进行。浓缩该反应混合物，溶于乙酸乙酯(200mL)，用1M盐酸(100mL)、然后用1N氢氧化钠(100mL)洗涤有机相。然后用无水硫酸镁干燥有机相，过滤，浓缩。酸层中形成沉淀，通过过滤除去。用1N氢氧化钠将滤液中和至pH＝8，用乙酸异丙酯(2x200mL)萃取。分离有机相，浓缩，然后在40℃真空干燥，得到5.3g(40％)收率的2-(1-哌啶基)乙基5-氨基磺酰基-4-氯-2-[(呋喃基甲基)氨基]苯甲酰胺。
实施例114
3-氨基磺酰基-5-N，N-二丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲酯(布美他尼二丁基氨基甲基酯)
在1，2-二氯乙烷(DCE)(90mL)中合并布美他尼甲基酯(7.56g，20mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(5.93g，28mmol)和乙酸(119mmol)，冷却至0℃。通过注射泵(1mL/小时)在12小时内调配丁醛(1.8mL，20mmol)的DCE(10mL)溶液，温至室温过夜。HPLC显示51∶38原料/期望产物，由此再加入三乙酰氧基硼氢化钠(5.93g，28mmol)，冷却该反应体系，再通过注射泵加入丁醛(1.8mL，20mmol)的DCE(10mL)溶液过夜。HPLC显示24∶62∶6原料/期望产物/双烷基化产物。第三次添加三乙酰氧基硼氢化钠和丁醛显示15∶62∶9原料/期望产物/双烷基化产物。用饱和碳酸氢钠使反应停止，用二氯甲烷萃取，浓缩。将粗产物溶于二氯甲烷(5mL)，用庚烷(200mL)稀释，选择性蒸发二氯甲烷，得到沉淀。最终通过硅胶色谱法纯化靶子化合物(5-50％乙酸乙酯的庚烷溶液)，得到2.89g(33％)3-氨基磺酰基-5-N，N-二丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲酯。
实施例115
3-氨基磺酰基-5-N，N-二丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸(N-丁基布美他尼；NTP-2014)
向干燥的5升烧瓶中加入布美他尼(998g，2.744摩尔，1eq)和THF(1.9L)。将得到的澄清溶液搅拌15分钟，在1小时内一次加入CDI(466g，2.88摩尔，1.05Eq)。混合物逐步变浓稠，将其在室温搅拌2小时。向浓稠的白色混合物中加入MeOH(600mL)，将该混合物在室温搅拌2小时，然后冷却至0℃10分钟。一次加入KO tbu(339g，3.01摩尔，1.1Eq)以维持反应温度在0-10℃。将得到的混合物搅拌6小时，直到HPLC显示完全转化。
通过旋转蒸发除去溶剂，用乙酸乙酯(2L)和水(2L)稀释，搅拌。分离水层，用乙酸乙酯(2x500ML)萃取，用盐水洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到酯2(1200g，85％纯度)。用水(4L)稀释这种白色固体，温至80℃1.5小时(仍然不均匀)，冷却至55℃，然后过滤。用水(1L)洗涤过滤的固体，在滤器上干燥12小时，然后转入真空烘箱(35℃)，干燥18小时，得到酯2(788g，76％收率，通过HPLC发现纯度为92％)。
向干燥的50升烧瓶中加入布美他尼甲基酯2(3.12Kg，8.27摩尔，1.0Eq)、乙酸(2.5L，43.7摩尔，5.3Eq)、丁醛(850mL，9.5摩尔，1.15Eq)和二氯乙烷(16.5L)。将不均匀黄褐色混合物搅拌5分钟，然后在2小时内冷却至0℃。在2小时内一次加入三乙酰氧基硼氢化钠(4Kg，19摩尔，2.3Eq)。将适度澄清的混合物在0℃静置过夜。HPLC显示无原料保。在0℃缓慢加入水(10L)，然后搅拌2小时。终止搅拌，分离各层。用水(3L)洗涤有机层，用CH2Cl2(2x2L)萃取合并的水层，用盐水洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到粗酯3。将这种浓稠的灰白色固体和庚烷(9L)加入到50L反应器中，剧烈搅拌6小时。过滤得到的白色混悬液，用庚烷(1L)洗涤固体。将这种粗白色固体放入12L反应器，加入乙酸乙酯(2L)和庚烷(1.75L)，使该混合物达到回流30分钟。除去搅拌桨，将该混合物冷却过夜。在真空烘箱内(60℃)干燥得到的白色固体过夜，得到酯3(1790g，50％，通过HPLC发现纯度为98％)。
向5升烧瓶中加入NaOH(285g，6.6摩尔，2.5Eq)和水(1.75L)。将混合物冷却至0℃，加入EtOH(2.5L)，将该混合物静置5分钟。在15分钟内向该澄清混合物中一次加入布美他尼二丁基氨基甲基酯3(1.1Kg，2.61摩尔，1.0Eq)。将不均匀混合物在16小时内温至室温。通过HPLC对现在均匀的混合物取并且测定完全。过滤该混合物，通过旋转蒸发浓缩一半。将该溶液放回到反应器中，滴加盐酸(5M，水溶液)，导致最终产物沉淀。再持续加入酸至pH达到2.5(900mL 5M HCl)。将浓稠白色淤浆搅拌1小时，过滤固体，用水(1L)和庚烷(3L)洗涤。HPLC分析显示0.1％布美他尼和1.4％磺酰胺烷基化产物。然后将白色固体放入真空烘箱(60℃)，干燥过夜，得到NTP2014(476g，47％收率，98％纯度)。参见图10。
实施例116
N，N-二甲基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼二甲基酰胺；NTP-2015)
在THF(80mL)中合并布美他尼(12.4g，34.3mmol)、HOBt(4.63g，34.3mmol)和EDC(13.15g，68.6mmol)，然后添加作为2.0M的THF的溶液(80mL)的二甲胺，将该混合物搅拌2小时。用水(250mL)和二氯甲烷(150mL)稀释该反应混合物，用水和1N氢氧化钠洗涤有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。通过硅胶色谱法纯化产物(20％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液)，得到9.64g(72％)N，N-二甲基3-氨基磺酰基-5-N，N-二丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例117
N-苄基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼一苄基酰胺、布美他尼苄基酰胺；NTP-2018)
在THF(150mL)中合并布美他尼(10.92g，30mmol)、HOBt(4.05g，30mmol)、苄胺(16.06g，150mmol)和EDC(11.49g，60mmol)，回流加热45分钟。冷却该反应混合物，用二氯甲烷(200mL)稀释，用1N氢氧化钠(50mL)、然后用水(100mL)洗涤有机相，用无水硫酸镁干燥有机层，过滤，蒸发，通过硅胶垫、使用二氯甲烷过滤残余物，蒸发，得到7.2g(53％)N-苄基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例118
N-苄基-N-甲基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼苄基甲基酰胺；NTP-2019)
在室温在THF(160mL)中合并布美他尼(11.93g，32.8mmol)、HOBt(2.21g，16.4mmol)、N-苄基甲基胺(19.87g，164mmol)和EDC(12.06g，62.9mmol)。蒸发反应溶剂，向残余物中加入二氯甲烷(125mL)和水(125mL)。用1N氢氧化钠(10mL)洗涤有机相，分离各层。用水(100mL)洗涤水相。将有机相与水(50mL)混合，加入和1N盐酸，直到混合物的pH约为pH 8。然后分离有机相，用水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥有机相，蒸发，通过硅胶色谱法纯化(用二氯甲烷、5％乙酸乙酯和10％乙酸乙酯洗脱)，得到11.56g(75％)N-苄基-N-甲基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例119
(R)-α-甲基苄基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺((R)-布美他尼α-甲基苄基胺；NTP-2020)
使用布美他尼和(1R)-1-苯基乙胺制备该化合物。
实施例120
(S)-α-甲基苄基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺((S)-布美他尼α-甲基苄基胺；NTP-2021)
使用布美他尼和(1S)-1-苯基乙胺制备该化合物。
实施例121
N-甲基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼一甲基酰胺、布美他尼甲基酰胺；NTP-2016)
反应与实施例109(NTP-1030)类似地使用布美他尼(11.66g，32.0mmol)、HOBt(4.54g，33.6mmol)、EDC(12.22g，63.7mmol)和甲胺(2.0M的THF溶液，160mmol)在THF(120mL)中进行。蒸发溶剂，将二氯甲烷(175mL)和水(100mL)加入残余物。分离有机相并用1N氢氧化钠洗涤有机相。然后用水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。使产物从二氯甲烷/庚烷中重结晶，得到7.41g(61％)N-甲基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例122
N-乙基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼一乙基酰胺、布美他尼乙基酰胺；NTP-2017)
反应与实施例119(NTP-2016)类似地使用布美他尼(11.77g，32.4mmol)、HOBt(4.37g，32.4mmol)、乙胺(2M的THF溶液，140mmol)和EDC(12.42g，64.5mmol)在THF(150mL)中进行。最初将该反应体系加热至50℃，使其冷却，反应过夜。蒸发溶剂，使残余物分配在二氯甲烷(250mL)与水之间。沉淀形成，通过过滤除去。用水洗涤有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸发。使产物从乙酸乙酯中重结晶，得到9.25g(73％)N-乙基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例123
N-(3-(二甲基氨基)丙基)-N-甲基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼N-(3-(二甲基氨基)丙基)-N-甲基酰胺；
NTP-2026)
反应与实施例119(NTP-2016)类似地使用布美他尼(9.71g，26.6mmo l)、HOBt(3.6g，26.6mmol)、N，N，N’-三甲基-1，3-丙二胺(9.29g，80mmol)和EDC(10.2g，53mmol)在THF(150mL)中进行。45分钟后，蒸发反应溶剂，使残余物分配在二氯甲烷(150mL)与水(100mL)之间。用1N氢氧化钠洗涤有机层，然后加入水。分离有机相，用无水硫酸镁干燥，过滤，蒸发。用Biotage硅胶柱、使用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(90∶9∶1)纯化粗产物，回收6.41g(52.1％)期望的N-(3-(二甲基氨基)丙基)-N-甲基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例124
N-哌啶基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼N-哌啶基酰胺；NTP-2023)
与实施例119(NTP-2016)类似地、采用布美他尼(11.64g，32mmo1)、HOBt(2.16g，16mmol)、哌啶(12.75g，150mmol)和EDC(9.2g，48mmol)在THF(120mL)中进行反应。将该反应体系回流加热过夜。蒸发反应溶剂，使残余物分配在二氯甲烷(150mL)与水(150mL)之间。用1N氢氧化钠(75mL)、然后用水(75mL)、0.1M盐酸(75mL)、饱和碳酸氢钠(75mL)和水(75mL)洗涤有机相。用无水硫酸镁干燥有机相，过滤，浓缩。通过硅胶色谱法纯化粗产物(10％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液)，得到8.17g(59％)N-哌啶-1-基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例125
N-吗啉基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼N-吗啉基酰胺；NTP-2024)
反应与实施例119(NTP-2016)类似地使用布美他尼(11.48g，31.5mmol)、HOBt(2.13g，15.8mmol)、吗啉(13.72g，158mmol)和EDC(9.66g，50.4mmol)在THF(160mL)中进行。5小时后，反应完成85％，由此再加入EDC(2g，10.4mmol)，将该反应体系加热至50℃。冷却该反应混合物，蒸发溶剂。使残余物分配在二氯甲烷(150mL)、水(100mL)和1N氢氧化钠(20mL)之间。然后用水(100mL)洗涤有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸发，通过硅胶色谱法进一步纯化残余物(25％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液)，得到12.63g(92％)N-吗啉基3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例126
2-丁基氨基-N-(3-二甲基氨基-丙基)-4-苯氧基-5-氨磺酰基-苯甲酰胺(布美他尼(3-(N，N-二甲基氨基丙基)酰胺；NTP-2025
反应与实施例119(NTP-2016)类似地使用布美他尼(9.57g，26mmol)、HOBt(3.54g，26mmol)、3-二甲基氨基丙基胺(8.0g，79mmol)和EDC(10.1g，53mmol)在THF(150mL)中进行。将该反应体系加热至回流45分钟，冷却，蒸发溶剂。使残余物分配在二氯甲烷(150mL)和水之间。用水(2x100mL)洗涤有机相，然后用无水硫酸镁干燥，过滤，蒸发，使用硅胶色谱法纯化残余物(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵90∶9∶1)，得到6.15g(53％)3-(N，N-二甲基氨基)丙基)3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例127
N-吡咯烷基氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺(布美他尼N-吡咯烷基酰胺；NTP-2022)
反应与实施例118(NTP-2016)类似地使用布美他尼(11.69g，32mmol)、HOBt(4.33g，32mmol)、EDC(12.3g，64mmol)、吡咯烷(6.84g，96mmol)和EDC(12.3g，64mmol)在THF(150mL)中进行。在回流45分钟后反应完成。蒸发溶剂，使残余物分配在二氯甲烷(200mL)和水之间。用水(2x100mL)洗涤有机相，然后用无水硫酸镁干燥，过滤，蒸发，使用硅胶垫、使用乙酸乙酯过滤粗产物，得到7.25g(54％)N-吡咯烷基氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰胺。
实施例128
3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸(R)-α-甲基苄酯((R)-布美他尼α-甲基苄基酯；NTP-2035)
按照与实施例127类似的方式、仅使用(R)-1-苯基乙醇制备该化合物。
实施例129
3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸(S)-α-甲基苄酯((S)-布美他尼α-甲基苄基酯；NTP-2036)
在室温在THF(100mL)中合并布美他尼(12g，32.9mmol)和羰基二咪唑(6.08g，37.5mmol)。将该反应体系在室温搅拌约1.5小时，此时形成白色沉淀。加入二乙基醚(360mL)，将该反应体系再搅拌1.5小时。真空通过漏斗过滤该反应混合物，得到3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰基咪唑。用二乙基醚洗涤沉淀，在漏斗上干燥20分钟。将沉淀溶于乙腈(106mL)，加入(S)-1-苯基乙醇(13.05g，106.8mmol)。将该反应体系在室温搅拌10分钟。加入三水合碳酸铜(Cu(CO3)2●3H2O；1.2g)。加入硝酸(0.01N，2.7mL)，此时淡蓝色不均匀混合物形成。将该反应混合物在45℃加热约8小时。真空浓缩该反应混合物。将得到的浓缩液溶于乙酸乙酯(1.1L)，用氢氧化铵(700mL)洗涤。用无水硫酸镁干燥有机层，蒸发，通过硅胶色谱法纯化。
实施例130
3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸对-甲氧基苄酯(布美他尼2-甲氧基苄基酯；NTP-2032)
在室温在THF(100mL)中合并布美他尼(12g，32.9mmol)和羰基二咪唑(6.08g，37.5mmol)。将该反应体系在室温搅拌约1.5小时，此时形成白色沉淀，然后溶解。加入二乙基醚(360mL)。再向反应混合物中加入2部分二乙基醚(2x200mL)。将该反应体系再搅拌1.5小时。真空通过漏斗过滤该反应混合物，得到3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰基咪唑。用二乙基醚洗涤沉淀，干燥。将沉淀溶于乙腈(107mL)，加入2-甲氧基苄醇(14.87g，107.6mmol)。将该反应体系在室温搅拌5分钟。加入三水合碳酸铜(Cu(CO3)2●3H2O；1.3g)。加入硝酸(0.01N，2.7mL)。将该反应混合物在45℃加热约8小时。真空浓缩该反应混合物。将得到的浓缩液溶于甲醇和二氯甲烷的1∶9混合物，形成混悬液。通过硅胶垫、使用二氯甲烷和乙酸乙酯的9∶1混合物洗脱。
实施例131
3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸2-苯基乙酯(布美他尼苯乙基酯；NTP-2033)
将羰基二咪唑(CDI，6.08g，37.5mmol)加入到布美他尼(12g，32.5mmol)的THF溶液(99mL)中，形成白色沉淀，45分钟后溶解。加入甲基叔-丁基醚(MTBE，760mL)，形成沉淀。加入庚烷(400mL)，将不均匀混合物搅拌30分钟。过滤固体产物氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰基咪唑，用庚烷洗涤，用过滤漏斗过滤。将这种酰基咪唑(12.31g，29.7mmol)与2-苯基乙醇(14.5g，118.8mmol)在乙腈(118mL)中合并，然后加入三水合硝酸铜(II)(1.44g，5.94mmol)和硝酸(0.01N溶液，2.96mL)，形成深蓝色混合物。将该反应体系加热至45℃，2.5小时后沉淀形成。再经过4小时后，蒸发反应体系，得到紫色固体，将其溶于/混悬于乙酸乙酯(1300mL)，用氢氧化铵(2M溶液，700mL)洗涤。用无水硫酸镁干燥有机相，过滤，浓缩。将粗产物在温庚烷中搅拌成淤浆，过滤，得到7.4g(48％)3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸2-苯基乙酯。
实施例132
3-氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸4-苯基丁酯(布美他尼苯基丁基酯；NTP-2034)
按照与实施例129类似的方式、仅使用4-苯基丁-1-醇制备该化合物。
实施例133氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸正-辛基酯(布美他尼正辛基酯；NTP-2027)
在DMF中(80mL)合并布美他尼(10g，27.4mmol)、碘化钠(0.41g，2.74mmol)、三乙胺(5.54g，54.8mmol)和1-氯辛烷(4.4g，30.2mmol)，加热至70℃过夜。加入更多1-氯辛烷(4.07g，27.4mmol)，再次将反应体系搅拌过夜。加入水(400mL)，导致沉淀形成。用乙酸乙酯/MTBE(1∶1，2x400mL)萃取，然后用1N氢氧化钠(150mL)洗涤有机层，导致有机层中再沉淀。过滤以除去不需要的固体后，用无水硫酸镁干燥有机层，浓缩。将粗产物在MTBE中搅拌成淤浆，过滤，得到7.1g(54％)氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸N-辛酯。
实施例134氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸正-癸酯(布美他尼正癸基酯；NTP-2028)
反应与实施例119(NTP-2016)类似地进行，其中在DMF中(80mL)合并布美他尼(10g，27.4mmol)、碘化钠(0.41g，2.74mmol)、三乙胺(5.54g，54.8mmol)和1-氯癸烷(6.51g，41.1mmol)，加热至70℃过夜。再加入1-氯癸烷(13.65g，27.4mmol)，用乙酸乙酯(200mL)、MTBE(200mL)和水(400mL)稀释。用乙酸乙酯/MTBE(1∶1，450mL)洗涤水层，用1N氢氧化钠(150mL)洗涤合并的有机相，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。将粗产物在乙醇(5mL/g)中搅拌成淤浆，过滤，得到6.6g(48％)氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸N-癸酯。
实施例135
3-甲基丁2-烯基氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸甲酯(布美他尼异戊二烯基酯；NTP-2029)
反应与实施例129(NTP-2033)类似地通过下列步骤进行：首先制备中间体氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酰基咪唑(11.64g的不纯产物，28.1mmol)，将其与3-甲基丁-2-烯-1-醇(异戊二烯醇，9.68g，112.3mmol)、三水合硝酸铜(II)(1.35g，5.6mmol)和硝酸(0.01N，2.8mL)在乙腈(112mL)中混合，加热至45℃5小时。浓缩该反应混合物，将残余物溶于二氯甲烷/甲醇(9∶1)，导入硅胶垫，用二氯甲烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脱。蒸发产物级分至干。再通过在温庚烷(45℃)中搅拌成淤浆20分钟、过滤和干燥进一步纯化固体，得到8.3g(68％)氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸3-甲基丁-2-烯酯。
实施例136氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸4-甲氧基苄酯(布美他尼对-甲氧基苄基酯；NTP-2031)
在DMF中(64mL)合并布美他尼(8g，21.95mmol)、4-甲氧基苄基氯(4.47g，28.54mmol)和三乙胺(2.22g，21.95mmol)，在70℃搅拌过夜。冷却至室温后，用饱和氯化铵(32mL)稀释该反应体系，用乙酸乙酯(2x120mL)萃取，用水和(8x60mL)和1N氢氧化钠(60mL)洗涤有机相。然后用无水硫酸镁干燥有机相，过滤，浓缩。将固体产物在异丙醇(10mL/g)中搅拌成淤浆15分钟，然后过滤，得到6.5g(61％)氨基磺酰基-5-N-丁基氨基-4-苯氧基苯甲酸4-甲氧基苄酯。
实施例137布美他尼类似物在缓解焦虑中的治疗潜能评价(恐惧强化的惊恐范例)
目的
为了评价布美他尼类似物在两种试验中大鼠中焦虑的效果，在焦虑的恐惧强化的惊恐范例(FPS)中评价布美他尼类似物(布美他尼3-(二甲基氨基丙基)酯、布美他尼苄基三甲基铵盐，布美他尼二苄基酰胺、布美他尼氰基甲基酯、布美他尼N，N-二乙基羟乙酰氨基酯、布美他尼N，N-二甲基羟乙酰氨基酯、布美他尼吗啉代乙基酯、布美他尼pivaxetil酯、布美他尼甲基酯、布美他尼二乙基酰胺和苄基酯)。使用呋塞米类似物、吡咯他尼类似物、阿佐塞米类似物和托拉塞米类似物重复这些研究。
FPS设计
FPS常用于评价抗焦虑药在大鼠中的治疗价值。大鼠接受30min期限的对FPS仪器的习惯。24-hr后，采集基线惊恐振幅。给予基线惊恐振幅将大鼠分成2个匹配的组。在采集基线惊恐振幅后，在连续2天内2个期限时递送20光照/电击对(即每天10次光照/电击对)。在最后一天时，1组大鼠接受注射(i.v.)布美他尼类似物，另一组仅接受媒介物。注射后即刻在单独的惊恐试验和惊恐+恐惧(光照，然后惊恐)试验中评价惊恐振幅。比较治疗组之间恐惧强化的惊恐(光照+惊恐振幅-单独的惊恐振幅)。
方法
恐惧强化的惊恐
训练动物并且在4个相同的稳定度测试器装置(Med-Associates)中测试。简言之，将每只大鼠放入小树脂玻璃圆筒。稳定度测试器的底部由间隔18mm的6-mm-直径不锈钢棒材组成，通过它可以递送电击。圆筒运动导致加速度传感器移位，其中产生的电压与笼移位的速度成正比。将惊恐振幅定义为递送惊恐刺激后首个0.25秒过程中出现的最大加速度传感器电压。放大加速度传感器的模拟输出，以0-4096单位等级进行数字处理，贮存在微型计算机中。将每一稳定度测试器包封在通风的光照-和声音-减弱盒中。使用精密声级计进行全部声级测定。与没有木制盒子的侧壁连接的通风扇噪声产生64dB的总体背景噪声水平。惊恐刺激是又白噪声发生器产生的50ms白噪声猝发(5ms上升衰减时间)。所用的视觉条件刺激是与白噪声源相邻的电灯泡照明。非条件刺激是由4个位于室外部的恒定电流电击器产生的0.5秒期限的0.6mA足部电击。全部刺激的提供和排序在微型计算机控制下进行。
FPS方法由5天测试组成；在1和2天过程中采集基线惊恐响应，在第3天和第4天递送光照/电击对，在第5天测试恐惧强化的惊恐。
匹配.在前2天时，将全部大鼠放入树脂玻璃圆筒，3min后，以30秒的刺激间期间隔提供30次惊恐刺激。使用105dB强度。将在第2天时通过30次惊恐刺激的平均惊恐振幅用于使用相似方法将大鼠分入治疗组。
训练.在接下来的2天时，将大鼠放入树脂玻璃圆筒。在进入后的3min后的每一天，递送10次CS-电击对。以4min的平均试验间隔(范围，3-5min)在3.7秒CSs的最后0.5秒递送电击。
测试.将全部大鼠放入相同的惊恐盒子，其中训练它们并且在3min后，提供18次引起惊恐的刺激(全部在105dB)。这些最初的惊恐刺激用于再次使大鼠习惯于听觉惊恐刺激。最后这些刺激后的30秒，每只动物接受60次惊恐刺激，其中一半接受单独的刺激(单独惊恐试验)，而另一半以30秒(在20-40秒之间随机改变)的平均刺激间期间隔在3.7秒CSs启动后3.2秒提供(CS-惊恐试验)。
测量.比较治疗组CS-惊恐与单独惊恐试验(恐惧强化)之间有关惊恐振幅的差异。
一般而言，本研究显示本发明布美他尼类似物横过血脑屏障的能力。布美他尼类似物显示调节涉及NKCC协同转运蛋白的疾病的潜能，其中证实布美他尼类似物影响惊恐振幅，其中恐惧强化的惊恐下降程度越大，则认为化合物更易于递送至CNS。此外，证实几种布美他尼类似物比布美他尼更有效或至少与之功效相同。参见下表5和图1。
表5动物编号
Figure BDA0000088452220003231
因此，本文所述的化合物可以用于治疗焦虑的方法中。
实施例138
布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物在缓解强度焦虑或创伤后精神紧张性(精神)障碍中的治疗潜能的评价(与环境有关的恐惧条件反射模型)
目的
为了评价布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物在缓解大鼠与环境有关的恐惧条件反射中的强度焦虑。
设计
与环境有关的恐惧条件反射涉及不良反应配对，在这种情况中，是使用特征性环境的中等程度的足部电击。使用强直即大鼠中的种类典型防御反应评价恐惧记忆的强度，所述的大鼠中的种类典型防御反应以完全不动性为标志，除了呼吸。如果将大鼠放入特征性环境并且即刻电击，则它们不会学习到对环境的恐惧。然而，如果使它们探查特征性环境，则在即刻电击前有时它们显示强度焦虑，并且当放入相同环境时会恐惧。通过将环境相关的恐惧反射条件按照程序分成两期，则一期可以单独研究治疗对来自学习环境与电击之间相关性或经历电击不良反应(取决于情绪反应线路包括扁桃体)的环境记忆的影响(特别是基于海马的过程)。已经证实人创伤后应激障碍(PTSD)与扁桃体中情绪反应线路相关，由于这一原因，所以环境记忆条件反射是广泛接受的PTSD模型。
本实验使用24只大鼠。每只大鼠接受单一5-min的小的新环境的探查期限。72-hr后，将它们放入相同环境并且它们即刻接受单一中度的足部电击。24-hr后，12只大鼠接受注射(i.v.)布美他尼类似物。剩余的12只大鼠接受注射媒介物。将每只大鼠再放入相同环境8-min，在此过程中测定强直度，作为Pavlovian条件反射性恐惧的指数。
方法
在本实验中，使用4个相同的室(20 X 20 X 15cm)。事件定时和控制的所有方面均在微型计算机控制下(MedPC，MedAssociates Inc，Vermont，USA)。通过与微型计算机连接的高架摄像机进行强直度测定并且使用转用软件块FreezeFrame自动评分。在1期中，将大鼠各自放入室内5分钟。72hr后2期开始，此时再将大鼠各自放入同一室，但它们接受即刻的足部电击(1mA，2s)。30秒后，从室内取出它们。24hr后的3期，将大鼠放回到室中8min，在此过程中，对强直度即条件反射性恐惧指数进行评分。用一种方式ANOVA与作为组内因素的药物剂量分析总计强直时间。
因此，本文所述的化合物可以用于治疗焦虑或创伤后精神紧张性障碍的方法中。
实施例139
用于CNS-靶向药物的制剂
口服制剂
就口服给药而言，以在胶囊中包含的约10-60mg药物物质的范围使用药物成分与不同非活性成分例如微晶纤维素和其他赋形剂。或者，片剂剂型中提供的药物物质包括约10-60mg药物物质与微晶纤维素、羟丙基纤维素、硬脂酸镁和其他赋形剂。
另外，就口服给药而言，以在胶囊中包含的约10-100mg/kg药物物质的范围使用药物成分与不同非活性成分例如微晶纤维素和其他赋形剂。或者，片剂剂型中提供的药物物质包括约10-100mg/kg药物物质与微晶纤维素、羟丙基纤维素、硬脂酸镁和其他赋形剂。
静脉内制剂
就静脉内给药而言，每毫升无菌溶液可以包括用约20-40％丙二醇、约0-10％乙醇、任选水、缓冲剂例如约5％苯甲酸钠和苯甲酸作为缓冲剂和防腐剂约1.5％苄醇作为防腐剂配制的约1-25mg/kg药物物质。
此外，就静脉内给药而言，每毫升无菌溶液可以包括用约20-40％丙二醇、约0-10％乙醇、任选水、缓冲剂例如约5％苯甲酸钠和苯甲酸作为缓冲剂和防腐剂约1.5％苄醇作为防腐剂配制的约1-25mg药物物质。
实施例140
体外药理学：Na+K+Cl-协同转运蛋白测定
体外评价选择的布美他尼类似物(前体药物)对Na+K+Cl-协同转运蛋白的效应。参见Gamba(2005)“Molecular Physiology andPathophysiology of Electroneutral Cation-ChlorideCotransporters.”Physiol.Rev.85：423-493。
测定体外A7r5细胞中Na+K+Cl-协同转运蛋白活性，通过在37℃10分钟内测定其86Rb吸收(0.2μCi)来进行，正如通过闪烁计数检测的。参见Chassande等人(1988)“The Na+/K+/Cl-Cotransport in C6glioma cells.Properties and role in volume regulation.”Eur.J.Biochem.171：425-433。布美他尼是使用的阳性对照化合物，以建立比活性。测定体外A7r5细胞中测试选择的布美他尼类似物(例如NTP-2016、NTP-2018、NTP-2018、NTP-2020、NTP-2021、NTP-2022、NTP-2023、NTP-2024、NTP-2025、NTP-2028、NTP-2029、NTP-2031、NTP-2034、NTP-2035和NTP-2036)对Na+/K+/Cl-协同转运蛋白活性的抑制，通过在37℃10分钟内测定其86Rb吸收(0.2μCi)来进行，正如通过闪烁计数在1.0X 10-5M检测的。
将结果表示为，在选择的布美他尼类似物(例如NTP-2004、NTP-2005、NTP-2006，NTP-2007、NTP-2008、NTP-2011、NTP-2012、NTP-2013、NTP-2014、NTP-2016，NTP-2018、NTP-2020、NTP-2021、NTP-2022、NTP-2023、NTP-2024、NTP-2025、NTP-2028，NTP-2029、NTP-2031、NTP-2034、NTP-2035和NTP-2036)的存在下得到的对照比活性百分比[(测定的比活性/对照比活性)X100]和对照比活性抑制百分比[100-((测定的比活性/对照比活性)X100)]。将这些结果表示为在10μM的抑制％。
表6
  化合物   对照值％   对照值抑制％
  布美他尼   24.0   76
  NTP-2004   81.0   19
  NTP-2005   48.7   51
  NTP-2006   49.6   50
  NTP-2007   70.4   30
  NTP-2008   82.8   17
  NTP-2011   87.4   13
  NTP-2012   65.5   35
  NTP-2013   69.2   31
  NTP-2014   103.6   -4
  NTP-2016   107.2   -7
  NTP-2018   87.3   13
  NTP-2020   93.5   7
  NTP-2021   72.6   27
  NTP-2022   92.7   7
  NTP-2023   77.3   23
  NTP-2024   80.2   20
  NTP-2025   127.2   -27
  NTP-2028   84.4   16
  NTP-2029   88.4   12
  NTP-2031   92.6   7
  NTP-2034   78.9   21
  NTP-2035   74.5   26
  NTP-2036   80.1   20
显示20-50％的“对照值抑制％”的布美他尼类似物表示弱至中等的抑制作用。显示低于20％的“对照值抑制％”的布美他尼类似物表示布美他尼类似物与媒介物对照值之间无显著性差异。
实施例141
腹膜内(i.p.)给药后选择的布美他尼前体药物的血和脑水平和肾功能评价
将选择的布美他尼前体药物(例如NTP-2006和NTP-2024通过i.p注射用DMSO配制的100mg/kg剂量给予大鼠。由于布美他尼在大鼠种类(Schwartz 1981)中快速代谢，所以用一般的代谢抑制剂胡椒基丁醚(“PBx”)预治疗大鼠(Halladay，1978)。用该抑制剂预治疗能够测定前体药物和/或布美他尼类似物的血液水平，同时测定前体药物和/或布美他尼的脑穿透力。此外，预治疗能够评价与布美他尼全身接触相关的利尿效果。给予布美他尼前体药物后，得到了前体药物和布美他尼在动物血液和脑中的浓度-时程。结果如下表7-10中所示：
表7
100mg/kg IP给药后大鼠血液中发现的NTP-2024和布美他尼浓度
概述
Figure BDA0000088452220003311
表8
Figure BDA0000088452220003321
表9
100mg/kg IP给药后大鼠血液中发现的NTP-2006和布美他尼浓度
概述
Figure BDA0000088452220003331
表10
Figure BDA0000088452220003341
因此，当将选择的布美他尼前体药物(例如NTP-2006和NTP-2024)i.p.给予大鼠时，前体药物和布美他尼在大鼠血液中存在和稳定给药后的6小时以上。此外，NTP-2024在血液中不易于降解成布美他尼。i.p.给药后NTP-2006降解成布美他尼。在给予NTP-2024、NTP-2006和媒介物对照品的动物中在6小时给药后期间内测定肾功能评价包括蓄积的尿量、钠排泄和钾排泄。
给药前使动物禁食过夜，在任何预治疗前不饮水。如果适合，在采集末端样品自始至终或血样采集的前6小时禁食物和水。在检品给药前，用单IP剂量的PBx预治疗全部动物。在给药前约5-6分钟，全部动物接受单一口腔(PO)管饲剂量的0.9％注射用氯化钠USP，剂量体积为15mL/kg。通过单一IP剂量以1mL/kg的剂量体积给予媒介物、DMSO和检品NTP-2024和NTP-2006。蓄积尿量、钠排泄量和钾排泄量示意图示例在图27、28和29中。
因此，本文所述的化合物可以用于治疗和/或预防(预防性)本文所述的疾病和病症的方法中，可以给予它们并且在患者血液和血浆中检测到它们。此外，本文所述的布美他尼类似物在给药后降解成布美他尼。
实施例142
口服给药后选择的呋塞米前体药物的脑和血浆水平
可以口服给予大鼠30mg/kg剂量的用0.5％CMC和/或PEG-200配制的呋塞米和选择的呋塞米前体药物。30或60分钟后，测定前体药物和布美他尼存在于大鼠血浆和脑中的量。
实施例143
布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(前体药物)减少卡英酸诱发的癫痫性发作大鼠模型中的癫痫发作
癫痫症是一种慢性神经性疾病，其特征在于由异常大脑神经细胞活动导致的再发性发作。将癫痫症分类为特发性的或症状性的。神经细胞以两种方式将信号传递至大脑并且从其中传递出信号：(1)改变细胞内的盐(钠、钾、钙)浓度；和(2)释放称作神经递质的化学物质(例如γ氨基丁酸，GABA)。盐浓度的改变将冲动从神经细胞一个末梢传导至另一个末梢。在末梢上释放神经递质，其携带冲动至下一个神经细胞。神经递质减缓或终止细胞与细胞通讯(称作抑制性神经递质)或刺激这种过程(称作兴奋性神经递质)。通常，脑中的神经传递以有序的方式进行，使得电活动性平滑性流动。细胞内不适合的盐浓度和任一类型的神经递质的活动过度可以破坏有序的神经细胞传递并且引起癫痫发作活动。一些脑区域比其他区域更有可能涉及癫痫发作活动。负责身体运动的运动皮质和颞叶包括涉及记忆的海马对引起异常脑细胞活动的生化改变(例如氧水平下降、代谢失衡、感染)特别敏感。
布美他尼是治疗心衰的氨磺酰类型的袢利尿剂。它通常用于高剂量呋塞米无效的患者中。两种物质之间的主要差异在于生物利用度。呋塞米在肠中吸收不完全(40％)且在生物利用度方面存在个体间和各人间的很大差异(范围在10-90％)。布美他尼在口服给药后显示接近完全的吸收(≥80％)，并且在与食物一起摄取时，吸收不会改变。认为这是更可预测的利尿剂，即在更可预测的效果中反映出可预测的吸收。布美他尼的效力是呋塞米的40倍(对具有正常肾功能的患者而言)。
近期研究显示布美他尼可以有助于治疗难以用现存的抗惊厥药控制的新生儿癫痫发作。常用的抗惊厥药-苯巴比妥和苯二氮杂
Figure BDA0000088452220003361
类-对新生儿无效，因为其脑在生化方面不同于成年人的脑。常用的抗惊厥药通过模拟GABA即脑中天然抑制性化学物质的作用、通过活化脑细胞表面上的GABA受体起作用。在成年人神经细胞中，GABA活化启动了使氯离子进入细胞的通道。细胞由此获取了负电荷并且变成兴奋性较低，从而抑制癫痫发作活动。但在新生儿中，氯离子已经较高且由此活化GABA受体导致氯离子离开神经细胞，从而生成反常的兴奋反应，实际上它可能加剧癫痫发作。
两种分子调节细胞氯离子水平：KCC2，它将氯化物转运出细胞；和NKCC1，它将氯化物带入细胞。大鼠中的在先研究已经证实成年神经细胞大部分具有KCC2，使得其内部氯化物浓度低于外部浓度。因此，当GABA受体被活化时，氯化物倾向于进入，伴有抑制效应。在新生大鼠中，情况相反：其大部分神经细胞具有NKCC1，由此氯化物在内部主动转运，使得最初的氯化物浓度极高。作为结果，GABA活化导致氯化物离开细胞，伴有兴奋性效应。参见例如Cohen(1981)“Pharmacologyof bumetanide.”J.Clin.Pharmacol.21：537-542；Dzhala等人(2005)“NKCC1 transporter facilitates seizures in thedeveloping brain.”Nat Med.11：1205-1213；Martinez等人(1998)“Soy isoflavonoids exhibit in vitro biological activities ofloop diuretics.”Am.J.Clin.Nutr.68：1354S-1357S，将这些文献各自的公开内容完整引入本文参考。
布美他尼抑制肾中NKCC2活性并且启示药物可能在脑中具有类似效应，从而降低了氯离子水平并且使得神经细胞对GABA活化有应答。在幼年大鼠中的研究发现布美他尼实际上抑制癫痫发作活动，而苯巴比妥例如在人中的作用差。
因此，测试布美他尼(“Bumet”)和选择的布美他尼前体药物(例如NTP-2007、NTP-2008、NTP-2011、NTP-2012、NTP-2015、NTP-2022、NTP-2024)在大鼠癫痫发作模型中卡英酸(“KA”)诱发的癫痫大鼠中的功效。特别地，测试布美他尼和选择的布美他尼前体药物(例如NTP-2007、NTP-2008、NTP-2011、NTP-2012、NTP-2015、NTP-2022、NTP-2024)在卡英酸诱发的癫痫发作大鼠模型中抑制癫痫发作的能力。
为了测定所述化合物在大鼠癫痫发作模型中的功效，给Sprague-Dawley大鼠(“SD大鼠”)腹膜内(“i.p.”)注射15mg/kg卡英酸和媒介物或化合物(甘露糖醇或布美他尼)并且检查癫痫发作诱发和癫痫发作的严重性。给大鼠腹膜内快速浓注卡英酸(15mg/kg)±布美他尼类似物或布美他尼并且检查因癫痫发作活动导致的改变或对癫痫发作活动的预防。腹膜内(i.p.)给予卡英酸(15mg/kg)显示癫痫发作活性。给予布美他尼(100mg/kg)或布美他尼类似物(20μ摩尔/kg)显示所述化合物对卡英酸注射后行为减少(例如癫痫发作活动)的不同效应。这些数据启示一些布美他尼类似物和布美他尼显示在大鼠癫痫发作模型中在大鼠卡英酸诱发的癫痫发作中i.p.注射后抗惊厥活性。
方法和材料
动物
使体重260-300克的Sprague-Dawley大鼠(Charles River Labs，NC)各自给予自由取食和饮水，然后进行实验。它们是首次用于实验的大鼠(即未预先药物治疗或用于其他实验)。如果动物在研究完成前死亡(在任意时间点)，则从本研究中排除它们。
实验组
动物经历卡英酸诱发的癫痫发作并且将其分成对照组(盐水，n＝10)、媒介物组(DMSO，n＝10)或通过腹膜内注射卡英酸(15mg/kg)治疗的治疗组(NTP-2007、NTP-2008、NTP-2011、NTP-2012、NTP-2015、NTP-2022，NTP-2024、布美他尼和甘露糖醇，n＝10)。用NTS作为储备溶液，通过用贮存在4℃的(100％)盐水再溶解卡英酸配制卡英酸。媒介物对照组接受盐水溶液。快速IP注射卡英酸在0时开始并且同时开始给予NTP化合物或布美他尼。研究人员不知晓治疗组的情况。
通过将5ml DMSO加入到包含预先称重量的量的化合物的小瓶中配制选择的布美他尼类似物。每日恰在使用前新鲜制备溶液；在制备给药溶液后的单一天对全部10只大鼠给予任意指定的化合物。以1ml/kg给予全部选择的布美他尼类似物+DMSO对照品。将未使用的残留给药溶液冷冻贮存。
KA-诱导的癫痫持续状态
根据National Institutes of Health Guidelines for Care and Useof Laboratory Animals的原则和程序将动物维持在温度-和光照-受控的环境中。通过注射KA(15mg/kg，i.p.)在成年雄性Sprague-Dawley大鼠(260-300g)中诱发癫痫发作。此外，在卡英酸后给动物注射测试化合物，以测定对癫痫症的预防效果。注射后监测动物癫痫发作行为2小时。
行为
最初在注射KA后2小时期限内将癫痫发作活动表征为是(1)或否(0)。基于如下0-IV等级得到的最大效应指定癫痫发作严重性的等级：0，无响应；I，单一肢体阵挛和搔抓；II，多肢体阵挛和蹒跚步态；III，肢体阵挛、四肢强直性伸展和跌到；IV，连续III级癫痫发作超过30min(癫痫持续状态)。
统计学分析
将结果表示为平均值±标准偏差(SD)。使用单向方差分析(ANOVA)、然后使用Fisher事后检验分析癫痫数据中的差异显著性。使用监测数据计算重复测量值ANOVA并且通过Fisher事后检验评价组中的差异显著性。
治疗组
全部组都接触卡英酸。对动物(100只动物)i.p.给予所示剂量体积的DMSO媒介物或布美他尼类似物。
表11
癫痫症的卡英酸大鼠模型：
  组   化合物   剂量体积   途径
  1(n＝10只大鼠)   DMSO   1ml/kg   IP
  2(n＝10只大鼠)   NTP-2011(20μ摩尔/kg)   1ml/kg   IP
  3(n＝10只大鼠)   NTP-2022(20μ摩尔/kg)   1ml/kg   IP
  4(n＝10只大鼠)   布美他尼(20μ摩尔/kg)   1ml/kg   IP
  5(n＝10只大鼠)   NTP-2015(20μ摩尔/kg)   1ml/kg   IP
  6(n＝10只大鼠)   甘露糖醇(20μ摩尔/kg)   1ml/kg   IP
  7(n＝10只大鼠)   NTP-2007(20μ摩尔/kg)   1ml/kg   IP
  8(n＝10只大鼠)   NTP-2024(20μ摩尔/kg)   1ml/kg   IP
  9(n＝10只大鼠)   NTP-2012(20μ摩尔/kg)   1ml/kg   IP
  10(n＝10只大鼠)   NTP-2008(20μ摩尔/kg)   1ml/kg   IP
终点
选择的布美他尼类似物对防止卡英酸诱发的损伤的效果。
将全部试验组提供给NTS；卡英酸和布美他尼作为固体物质被商购。卡英酸购自Sigma(#K0250)和布美他尼购自Sigma(#B3023)。以如上所示的剂量给予试验组中的全部动物。
结果
卡英酸诱发的大鼠中的癫痫发作
给动物注射KA和选择的布美他尼类似物并且检验2小时对癫痫发作的诱发效果。将使用卡英酸诱发大鼠中的癫痫发作测定为有癫痫发作(1)或无癫痫发作(0)。表12示例了每组中的癫痫发作数量。
表12癫痫发作活动的减少百分比
1将减少百分比与相应DMSO对照组动物比较。
与DMSO对照组相比具有显著性差异。
癫痫发作
癫痫发作在卡英酸注射的动物中显著增加。当用选择的布美他尼类似物或布美他尼治疗时，癫痫发作活动的严重性显著减轻(表12)。将癫痫发作严重性的减轻百分比提供在表12中。正如表中所示，布美他尼显示癫痫发作活动减少88.9％。
死亡率：
在本研究中无死亡。
大鼠中卡英酸癫痫发作的强度。
如上所述注射动物并且在选择的布美他尼类似物(例如NTP-2007、NTP-2008、NTP-2011、NTP-2012、NTP-2015、NTP-2022、NTP-2024)或布美他尼治疗后评价癫痫发作强度或严重性。评价这些研究中癫痫发作的相对严重性。
将癫痫发作严重性绘制在表13中。正如在数据中观察到的，布美他尼在两种不同剂量下显示70.8％和95.8％的癫痫发作严重性减低(剂量分别是20u摩尔/kg和274u摩尔/kg)。选择的布美他尼类似物显示严重性降低的变异性。
表13癫痫发作严重性降低百分比
Figure BDA0000088452220003421
1将降低百分比与相应DMSO对照组动物比较。
与DMSO对照组相比具有显著性差异。
袢利尿剂代表了一类重要的口服有效药物，它们在控制和减轻不同疾病中的水肿形成方面起主要作用。这些化合物通过抑制升肾袢腔中的Na+-K+-2C1-协同转运蛋白和抑制膜离子转运起作用。它们还增加肾血流和外周小静脉容量。近期研究已经证实布美他尼可以有助于治疗新生儿中难以用现存的抗惊厥药治疗的癫痫发作。常用的抗惊厥药苯巴比妥和苯二氮杂
Figure BDA0000088452220003431
类对新生儿无效，因为其脑在生化方面不同于成年人的脑。常用的抗惊厥药通过模拟γ-氨基丁酸(GABA)即脑中天然抑制性化学物质的作用、通过活化脑细胞表面上的GABA受体起作用。在成年人神经细胞中，GABA活化启动了使氯化物进入细胞的通道。细胞由此获取了负电荷并且变成兴奋性较低，从而抑制癫痫发作活动。但在新生儿中，氯化物已高且由此活化GABA受体，导致氯化物离开神经细胞，从而生成反常的兴奋反应，实际上它可能加剧癫痫发作。
在本研究中，在卡英酸诱发的大鼠癫痫发作模型中检验选择的布美他尼类似物(例如NTP-2007、NTP-2008、NTP-2011、NTP-2012、NTP-2015、NTP-2022、NTP-2024)和布美他尼以测试它们对癫痫发作的预防功效。参见图11和12。
当通过静脉内给药时，发现布美他尼类似物对卡英酸诱发的大鼠癫痫发作有预防作用。因此，本文所述的化合物可以用于治疗和/或预防(预防性)癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病(例如那些涉及癫痫发作的神经变性疾病)的方法中。特别地，本文所述的化合物用于治疗癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病的方法中，其中所述神经变性疾病涉及癫痫发作，该方法包含给予有效量的本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)。
实施例144
灵长类癫痫症模型
呋塞米和布美他尼抑制癫痫样活动
呋塞米抑制急性灵长类癫痫发作模型中的癫痫样活动和患有顽固性癫痫症的人中的癫痫样活动。布美他尼也抑制急性灵长类癫痫发作模型中的癫痫样活动，比呋塞米更显著。布美他尼的酰胺前体药物(例如NTP-2024)有效地抑制灵长类癫痫发作模型中的癫痫样活动。
癫痫样活动的定量
图13描述了使用用于自动定量癫痫样活动的软件生成的癫痫样尖峰和猝发。图13A描述了4秒电刺激灵长类感觉皮层引起的后放电活动。Haglund和Hochman(2007)研发的软件发现在猝发峰值周围的封闭(envelope)并且计算了猝发的期限、猝发内的峰数和包含猝发的全部峰的平均峰值振幅。
图13B描述了灵长类运动皮质中急性荷苞牡丹碱病灶生成的典型尖峰。荷苞牡丹碱模型生成癫痫样活动，其与人体受试者中自发的发作间的尖峰类似。软件对数据的分析鉴定了每一尖峰发生的时间及其峰与峰的振幅。该软件可以自动加工由来自多迹线的记录数据时间组成的整体数据组并且生成数据输出。来自多次实验的数据组的统计学分析随后可以用于分析不同治疗的效果(例如抑制癫痫样活动的化合物)。参见Haglund和Hochman(2007)“Imaging of Intrinsic OpticalSignals in Primate Cortex during Epileptiform Activity.”Epilepsia 48(Suppl.4)：65-74；另外参见Haglund和Hochman(2005年2月23日)J.Neurophysiol.94：907-918。
呋塞米阻断人体受试者中自发发作间的尖峰
使用本文所述的方法分析图14中的数据。图14A显示来自个体患者的数据，以示例呋塞米给药后自发发作间的尖峰中的改变(图14B)。在给予20mg静脉内快速浓注呋塞米前(图14A)和之后(图4B)，记录来自位于皮质表面(海马旁回)上的EEG电极的所示电生理学活动。记录来自发作间病灶上的电极的较深的迹线，且重叠的较浅迹线显示来自1cm远的电极的背景活动。测定呋塞米给药前20分钟间隔的发作间病灶的平均活动；将水平虚线表示的与平均活动差异多于3个标准偏差的事件计数为尖峰。呋塞米显著抑制给药后20分钟内的自发活动频率。迹线最左侧上的箭头标志在较快时间过程时绘制的尖峰(图14A-B)。用呋塞米治疗的5位患者内平均每分钟出现的尖峰数的示意图如图14B中所示，其中根据数据拟合的平滑立方条样曲线提供了基于平均值的非参数估计。在计算群体平均值和置信区间前，首先通过除以呋塞米前尖峰频率的平均值校准每位患者的数据。黑色箭头表示其中给予呋塞米；误差条显示0.90置信区间。当比较呋塞米前数据与呋塞米后数据时，这5位患者内的尖峰频率的平均减少约为60％。发现在呋塞米给药前，全部5位患者内采集的数据的平均峰间期(即连续自发发作间的尖峰发生之间的时间，所述峰距离平均电压至少3个标准偏差)为9.6s，其中[7.9s，11.3s]的置信区间(CI)为99％且平均值的标准误差(SEM)为0.65。在呋塞米治疗后，平均峰间期增加至21.9s(99％CI＝[11.8s，31.9s]；SEM＝3.9)。呋塞米治疗前后出现的峰间期的平均值的t-检验拒绝治疗没有效果的检验假设(p＜.0001)。自发性尖峰在全部患者中更显著地被抑制并且在记录期的最后5分钟过程中的3位患者中被完全阻断。参见Haglund和Hochman(2005)“Furosemide and Mannitol Suppression of Epileptic Activity inthe Human Brain.”J Neurophysiol 94：907-918。因此，布美他尼、布美他尼前体药物(类似物)、呋塞米和呋塞米(类似物)减少了导致完全癫痫性发作的癫痫样活动。
呋塞米增加人体受试者皮质中后放电阈值
如图15C所示将双极刺激电极置于皮质表面上。两个刺激电极之间的距离为5mm。将记录电极置于刺激电极1cm内。以不同电流递送4-秒刺激(60Hz；双相；1ms/相)；刺激期限由在迹线开始处包含的蓝色方块代表。在呋塞米治疗前，测定三次连续试验中引起至少5秒后放电所必需的最小电流；将其定义为‘后放电阈值电流’(图15A)。每一迹线上的水平条标志后放电活动发作。呋塞米给药后，每2-5分钟进行一次刺激试验，持续接下来的40分钟。在该患者中，后放电活动在呋塞米治疗后被迅速突然阻断(图15A，下部迹线)。为了测定后放电活动阻滞是否由后放电阈值增加介导，逐步递增刺激电流(图15B)。经测定可以由增加的刺激电流引起持续至少与前呋塞米试验过程中观察到的一样长的后放电发作。这种结果启示呋塞米增加皮质后放电阈值。这些研究对8位患者进行(6MTE，2NE)。呋塞米治疗导致后放电活动期限和振幅完全阻滞(4位患者；3MTE；1NE)或下降超过50％(4位患者；3MTE；1NE)(图15A)。在这8位患者中刺激引起的后放电活动期限的平均下降为85％≤14.6％(SD)。在与呋塞米治疗前后的后放电活动平均期限比较过程中，威尔科克森秩和检验显示了显著性(p＜0.01)。Hochman等人(1995年10月6日)“Dissociation ofSynchronization and Excitability in Furosemide Blockade ofEpileptiform Activity.”Science 270：99-102。因此，在癫痫发作(例如癫痫性发作)后，布美他尼、布美他尼前体药物(类似物)、呋塞米和呋塞米(类似物)增加导致二次(例如随后)癫痫性发作的阈值(图15)。
因此，本文所述的化合物可以用于治疗和/或预防(预防性)癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病(例如那些涉及癫痫发作的神经变性疾病)的方法中。特别地，本文所述的化合物用于治疗癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病的方法中，其中所述神经变性疾病涉及癫痫发作，该方法包含给予有效量的本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)。
实施例145
选择的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物抑制近中颞叶癫痫症(MTLE)小鼠模型中的海马放电
近中颞叶癫痫症
近中颞叶癫痫症是最常见的人癫痫症形式且其病理生理学基础(stubstrate)通常是海马硬化，即具有癫痫症的患者中遇到的最常见的致癫痫损害。与近中颞叶癫痫症相关的致残疾癫痫发作典型地对抗癫痫药有耐药性，但可以通过手术治疗在大部分患者中根除。因此，前中颞颥切除术是最常见的为治疗癫痫症所执行的手术操作，且立体定位的植入的大脑内电极是一些患者中所需的，以便对致癫痫区域进行定位。Engel(2001)“Mesial Temporal Lobe Epilepsy：What HaveWe Learned？”The Neuroscientist 7(4)：340-352。
在成年小鼠中海马内注射卡英酸再现了在具有颞叶癫痫症的患者中观察到的大部分海马硬化的形态特征(神经元缺失、神经胶质增生、神经递质受体重组、苔状纤维萌发、颗粒细胞分散)。然而，在卡英酸盐治疗诱发的最初癫痫持续状态后即刻观察到一些神经元缺失，大部分重组过程在几周期限内逐步发展且动物发生自发性癫痫发作，其表明癫痫症。
海马内脑动电流描记记录显示卡英酸(在50nl中1nmol)单侧注入成年小鼠背海马后发作性(paroxystic)活动的三个不同期：(i)非惊厥性癫痫持续状态；(ii)持续约2周的潜伏期，在此过程中未记录有组织化的活动；和(iii)具有高振幅尖波发作表征的再发性海马发作性放电的慢性癫痫发作活动期。这些再发性癫痫发作在注射后约2周首次发现。它们限于注射区并且在大脑皮质、对侧海马或同侧扁桃体中未观察到。对侧海马和大脑皮质的次级繁殖是罕见的。此外，海马发作性放电对急性卡马西平、苯妥英或丙戊酸盐治疗无应答，而可以受到地西泮抑制。Riban等人(2002)“Evolution of hippocampalepileptic activity during the development of hippocampalsclerosis in a mouse model of temporal lobe epilepsy.”Neuroscience 270：99-102，将该文献的公开内容完整引入本文参考。近中颞叶癫痫症小鼠模型
抗癫痫方案：给至多8只成年小鼠(C57/B16)注射卡英酸盐(在50nl中1nmol)并且在全身麻醉状态下使用立体定位技术在背海马中植入双极电极。在KA注射后3-7周，以随机顺序给它们注射布美他尼或呋塞米药物或媒介物对照品(两次注射之间1周)。药物条件是平衡的，使用动物作为自身的对照组。在注射前20min和注射后80min在自由活动的动物中进行数字EEG记录。比较注射化合物与媒介物注射和参比期限(给药前或前剂量)的效应。在完成本实验时，进行标准组织学分析，以验证电极位置、CA1、CA3和门中的细胞缺失以及齿状回分散。仅具有全部MTLE特征的动物用于数据分析。
布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米酯类和酰胺类似物减少这种近中颞叶癫痫症模型中海马放电累积期限和次数(例如NTP-2014、NTP-2026、NTP-2024、NTP-2006、NTP-1007和NTP-1003)。将如下结果对各治疗组(包括DMSO和盐水媒介物对照组)的给药前条件校准。检品化合物的剂量是NTP-2014和NTP-2026为50mg/kg且NTP-2024、NTP-2006、NTP-1007和NTP-1003为150mg/kg。参见图30和31。因此，本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米酯类和酰胺类似物可以用于治疗癫痫发作的治疗方法中。
实施例146
小鼠福尔马林爪试验中用于止痛/抗炎活性(晚期)的选择的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物小鼠中的福尔马林爪试验(晚期)
本文所述的方法检测止痛/抗炎活性，一般针对疼痛缓解、特别是糖尿病神经病变或感受伤害性神经病用于测试化合物。参见Wheeler-Aceto等人(1991)Psychopharmacology 104：35-44。
方法
给小鼠左后爪足底内注入5％福尔马林(25μl)。这种治疗诱发对照组动物舔舐爪。在注射福尔马林后15-50分钟之间的1分钟间隔短暂观察小鼠，并且记录观察到小鼠舔舐注射的爪的次数。每组10只小鼠并且进行“盲”形式试验。
在每3次剂量时评价布美他尼类似物(例如NTP-2006、NTP-2024)和呋塞米类似物(例如NTP-1007)，在本试验前30分钟(即福尔马林前15分钟)i.p.给药并且与常用媒介物对照组比较。将在相同实验条件下给予的吗啡(8mg/kg i.p.)或加巴喷丁(100mg/kg i.p.)或文拉法辛(32mg/kg i.p.)用作参比物。本实验包括11组。通过比较治疗组与媒介物对照组、使用未配对Mann-Whitney U检验分析数据。参见图16。
所用种类
在实验开始时称重20-30g(每次实验的最大范围＝5g)的雄性Rj：NMRI小鼠，期获自Elevage Janvier，53940Le Genest-Saint-Isle，France。
动物寄居
使小鼠10只一组寄居在模克隆笼(25x19x13cm)中的木屑(Litalabo-SPPS，95100 Argenteuil，France)上，可自由取食(Code113-SAFE，89290 Augy，France)和饮水，直到测试为止(或如另外部分所述)。将动物室维持在7:00-19:00(12小时)的人工照明中，受控环境温度为21±3℃且相对湿度在30-80％。
处死
在实验结束时通过接触O2/CO2混合物(20％/80％)、然后接触CO2处死小鼠，除了如实验方法中的另外部分所示。
表14
Figure BDA0000088452220003511
表15
Figure BDA0000088452220003521
对每只动物记录的数据是在2分钟期限内花费在舔舐受侵害爪的时间数量。这2分钟期限以5分钟间隔发生并且持续45分钟。对花费舔舐的时间与时间绘图揭示出特征性双相响应。根据该图计算每只动物在急性和炎症阶段过程中曲线下的面积(AUC)。对对照组和药物治疗组显示了每期的AUC。将每一药物治疗动物的AUC与来自对照组的平均结果比较，得到对照百分比平均值(使用SEM和p值报道)。这种数量的显著性降低表示舔舐减少且感觉的疼痛减轻。
因此，本文所述的化合物可用于治疗和/或预防(预防性)疼痛的方法中(例如神经性疼痛，且在其他实施方案中，神经性疼痛与神经或神经束损伤相关或是身体和/或内脏痛。在另一个实施方案中，疼痛是慢性炎症疼痛、与关节炎相关的疼痛、纤维肌痛、背痛、癌症-相关疼痛、与消化性疾病相关的疼痛、与克罗恩病相关的疼痛、与自身免疫病相关的疼痛、与内分泌疾病相关的疼痛、与糖尿病神经病变相关的疼痛、幻肢痛、自发性疼痛、慢性术后痛、慢性颞下颌疼痛、皮肤灼痛、带状疱疹后神经痛、AIDS-相关疼痛、I和II型复合性局部疼痛综合征、三叉神经痛、慢性背痛、与脊髓损伤相关的疼痛和/或复发性急性痛)。特别地，本文所述的化合物用于治疗疼痛的方法中(例如神经性疼痛，且在其他实施方案中，神经性疼痛是与神经或神经束损伤相关或是身体和/或内脏痛。在另一个实施方案中，疼痛是慢性炎症疼痛、与关节炎相关的疼痛、纤维肌痛、背痛、癌症-相关疼痛、与消化性疾病相关的疼痛、与克罗恩病相关的疼痛、与自身免疫病相关的疼痛、与内分泌疾病相关的疼痛、与糖尿病神经病变相关的疼痛、幻肢痛、自发性疼痛、慢性术后痛、慢性颞下颌疼痛、皮肤灼痛、带状疱疹后神经痛、AIDS-相关疼痛、I和II型复合性局部疼痛综合征、三叉神经痛、慢性背痛、与脊髓损伤相关的疼痛和/或复发性急性痛)，该方法包含给予有效量的本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)。
实施例147
小鼠福尔马林爪试验中用于止痛/抗炎活性的选择的布美他尼类似物
福尔马林试验
根据
Figure BDA0000088452220003531
等人(1992年10月)“The formalin test：anevaluation of the method.”Pain 51(1)：5-17的方法进行福尔马林试验。将0.5％福尔马林注入小鼠右后爪足底区。这引起不同的行为特征作为对福尔马林注射的响应，其特征在于小鼠舔舐受侵害的爪。该行为的特征实际上是双期的。例如，在注射后小鼠即刻激烈舔爪约5-10分钟(“min.”)。这种初步行为被视为1期(急性)并且认为主要由局部C-纤维的化学活化介导。急性期后是短暂的潜伏(通常＜5min)期，其中几乎没有或没有行为活动。更长的(约20-30min)舔舐期随即发生，它构成了响应的2期(晚期)。参见例如
Figure BDA0000088452220003541
等人(1991年2月7日)“Antinociceptive effect of paracetamol in rats ispartly dependent on spinal serotonergic systems.Eur J Pharmacol.193(2)：193-201和
Figure BDA0000088452220003542
等人(1991年6月)Lesions ofbulbo-spinal serotonergic or noradrenergic pathways reducenociception as measured by the formalin test.Acta Physiol Scand.142(2)：229-36，将这些文献各自的公开内容完整引入本文参考。
在给予选择的布美他尼类似物(例如NTP-2008、NTP-2011、NTP-2012、NTP-2024)或媒介物之一前，每只小鼠在位于反光镜前的几个6”高树脂玻璃笼(4”直径)之一中进行15-min条件反射期。正是在这些笼道中，然后观察小鼠在实验期限过程中的舔舐活动。在条件反射以后，以与MESED50相等的剂量通过腹膜内给予测试化合物并且使小鼠返回其原笼道中。在药物的TPE，将福尔马林经皮下注入右侧后爪的足底表面。使用连接汉密尔顿氏注射器的27号不锈钢针给予20μl体积。将针头斜面面向下置于皮肤表面。在注射福尔马林后，观察每只动物5-min期限的前2min，直到自给予选择的布美他尼类似物(例如NTP-2008、NTP-2011、NTP-2012、NTP-2024)后经过45min为止。测定每一2-min时间期限的舔舐累积持续时间。接受必需体积媒介物的动物与每只给予选择的布美他尼类似物(例如NTP-2008、NTP-2011、NTP-2012和NTP-2024)之一的小鼠交替进行。在实验结束后对动物实施安乐死。
使用GraphPad Prism Version 3.03测定曲线下的面积(AUC)和随后的药物治疗动物组的对照百分比。计算试验组和对照组的急性和炎症期的总AUC。还计算了每期的各动物的AUC并且将其转化成对照的总AUC百分比。计算药物治疗组和对照组百分比的平均值和S.E.M.并且检验显著性差异。
表16
Figure BDA0000088452220003561
因此，布美他尼和布美他尼类似物可以用于治疗和/或预防(预防性)疼痛的方法中(例如神经性疼痛，且在其他实施方案中，神经性疼痛与神经或神经束损伤相关或是身体和/或内脏痛。在另一个实施方案中，疼痛是慢性炎症疼痛、与关节炎相关的疼痛、纤维肌痛、背痛、癌症-相关疼痛、与消化性疾病相关的疼痛、与克罗恩病相关的疼痛、与自身免疫病相关的疼痛、与内分泌疾病相关的疼痛、与糖尿病神经病变相关的疼痛、幻肢痛、自发性疼痛、慢性术后痛、慢性颞下颌疼痛、皮肤灼痛、带状疱疹后神经痛、AIDS-相关疼痛、I和II型复合性局部疼痛综合征、三叉神经痛、慢性背痛、与脊髓损伤相关的疼痛和/或复发性急性痛)。特别地，本文所述的化合物用于治疗疼痛的方法中(例如神经性疼痛，且在其他实施方案中，神经性疼痛与神经或神经束损伤相关或是身体和/或内脏痛。在另一个实施方案中，疼痛是慢性炎症疼痛、与关节炎相关的疼痛、纤维肌痛、背痛、癌症-相关疼痛、与消化性疾病相关的疼痛、与克罗恩病相关的疼痛、与自身免疫病相关的疼痛、与内分泌疾病相关的疼痛、与糖尿病神经病变相关的疼痛、幻肢痛、自发性疼痛、慢性术后痛、慢性颞下颌疼痛、皮肤灼痛、带状疱疹后神经痛、AIDS-相关疼痛、I和II型复合性局部疼痛综合征、三叉神经痛、慢性背痛、与脊髓损伤相关的疼痛和/或复发性急性痛)，该方法包含给予有效量的布美他尼、布美他尼类似物(前体药物)、呋塞米和/或呋塞米类似物(前体药物)以及吡咯他尼和吡咯他尼类似物(前体药物)。
实施例148
呋塞米对海马切片中癫痫样放电的效果
在这些研究过程中，通过各种处理引起自发性癫痫样活动。断头处死Sprague-Dawley大鼠(雄性和雌性；25-35日龄)，快速取出头盖骨顶端并且用冰冷充氧的切片介质冷冻大脑。切片介质是基于蔗糖的人工脑脊液(sACSF)，其由220mM蔗糖、3mM KCl、1.25mM NaH2PO4、2mM MgSO4、26mM NaHCO3、2mM CaCl2和10mM葡萄糖(295-305mOsm)组成。封闭包含海马的脑半球并且与Vibroslicer(Frederick Haer，Brunsick，ME)台胶粘(氰基丙烯酸粘合剂)。在4℃切下400μm厚的水平或横切片，充氧(95％O2；5％CO2)切片介质。即刻将切片转入保持室，其中将它们保持浸入充氧的浴介质(ACSF)，其由124mM NaCl、3mMKCl、1.25mM NaH2PO4、2mM MgSO4、26mM NaHCO3、2mM CaCl2和10mM葡萄糖(295-305mOsm)组成。将切片保持在室温下至少45分钟，然后转入浸没型记录室(所有其他实验)。在记录室中，在34-35℃给切片灌注充氧的记录介质。根据NIH and University of Washington动物保护原则实施全部动物过程。
在大部分切片实验中，同时发生的胞外场电极记录获自CA1和CA3区域。将双极钨刺激电极置于Schaffer侧突上以引起在CA中的突触-驱动的场应答。刺激由在4倍群峰电位阈强度下的100-300μsec期限脉冲组成。后放电由在60Hz递送的这种刺激的2秒串联(train)引起。在根据如下改变或添加到浴介质中处理的切片中观察到自发发作间-样猝发：10mM钾(6个切片；4只动物；平均值-81次猝发/min.)；200-300μM 4-氨基吡啶(4个切片；2只动物；平均值-33次猝发/min.)；50-100μM荷苞牡丹碱(4个切片；3只动物；平均值-14次猝发/min)；[美国专利号US7,214,711实施例1中使用的Mg的插入量]Mg++(1小时灌注-3个切片；2只动物；平均值-20次猝发/min.或3小时灌注-2个切片；2只动物)；0钙/6mM KCl和2mM EDTA(4个切片；3只动物)。在全部治疗中，一旦建立连续水平的猝发，则将呋塞米加入到记录介质中。
在这些过程的第一个中，通过电刺激Schaffer侧突引起后放电(Stasheff等人Brain Res.344：296，1985)并且监测CA1锥体细胞区中的胞外场应答(13个切片；8只动物)。使浴介质中Mg+的浓度降至0.9mM，并且通过以4倍群峰电位阈值的强度下在60Hz刺激2秒引起后放电(群峰电位阈强度在100-300μsec脉冲持续时间时在20-150μA之间改变)。在刺激试验之间使组织恢复10分钟。在每一实验中，首先通过记录单一刺激脉冲引起的场电位测试CA1对突触输入的最初应答。在对照条件下，Schaffer侧突刺激引起单一群峰电位(图17A，插入部分)。强直刺激引起约30秒的与内在信号巨大改变相关(图17A，右侧)的后放电(图17A，左侧)。
为了使内在光信号成像，将组织放入位于直立显微镜台上的灌注室并且用通过显微镜集光器定向的白光束照明(钨丝灯和透镜系统；DedoInc.)。控制并且调节光(电源-Lamda Inc.)，以将波动降至最低并且过滤(695nm长久通过(longpass))，使得切片被长波(红色)透照。通过选择显微镜物镜测定视野和放大倍数(4X用于监测整个切片)。如下获取影像-框：使用在30HZ的电荷耦合器件(CCD)照相机(Dage MTIInc.)，并且使用Imaging Technology Inc.Series 151显像系统以8比特与512X480像素空间分辨率数字化；将照相机控制盒和A/D转化器的获取和补偿进行调整以优化系统的灵敏度。成像硬件由486-PC兼容计算机控制。为了增加信/噪比，平均-影像由16个单独的在0.5秒内整合并且求共同的平均值的影像-框组成。实验系列典型地涉及在几分钟时间期限内连续获取一系列平均-影像；至少10个这些平均-影像作为刺激前对照-影像获取。通过从随后获取的影像中扣除首次对照影像并且将颜色查找表指定于像素值计算伪彩色影像。对这些影像而言，通常线性低通滤波器用于除去高频噪声，而线性-直方图扩展(stretch)用于对系统动态范围内的像素值作图。对这些影像进行的全部操作是线性的，从而保护定量信息。将噪声定义为指定获取系列内对照影像序列的AR/R波动的最大标准偏差，其中AR/R代表了通过组织的光透过的改变强度。通过取全部差异-影像并且除以第一次对照影像计算δR/R：(随后的影像-第一次对照-影像)/第一次-对照-影像。对每一选择的影像序列而言，噪声始终＜0.01。在一些实验中，通过将中性滤色片置于照相机与光源之间后获取影像估计通过组织的光透过的绝对改变。平均而言，照相机电子设备和成像系统电子设备比数字化前放大信号10-倍，使得通过组织的光透过绝对改变峰值通常在1％-2％。
图17D中所示的灰度照片是在记录室内典型海马切片的视频影像。用于固定组织就位的细金-丝网可以被观察为透过切片对角运动的暗线。可以在CA1的放线层上的右上方观察到刺激电极。将记录电极(过薄以致于难以在照片中观察到)插入白色箭头所示的点。图17A示例放电活动后引起的60Hz下的2秒刺激并且显示胞外电极记录的典型后放电发作。图17A的插图显示对递送至Schaffer侧突的单一200秒测试脉冲(箭头处的加工品)的CA1场响应。图17B显示由Schaffer侧突刺激引起的通过组织的光传播的峰改变的图。最大光学改变区域对应于刺激电极任一侧上CA1顶端和基底树突区。图17C示例显示对用包含2.5mM呋塞米的介质灌注20分钟后刺激响应的样品迹线。电后放电活动(图17C中所示)和刺激引起的光学改变(图17D中所示)被阻断。然而，存在对测试脉冲(插入图)的超兴奋场响应(多群峰电位)。图17E和17F示例使用标准浴介质灌注45分钟后观察到始初响应模式的恢复。
呋塞米-阻断刺激引起的后放电的相反效应和对测试脉冲的突触响应伴随增加示例了两个关键结果：(1)呋塞米阻断癫痫样活动；和(2)同步化(如自发性癫痫样活动反映出的)和兴奋性(如通过对单一突触输入响应反映出的)分离。检验呋塞米的剂量依赖性的实验确定需要1.25mM的最低浓度以阻断后放电和光学改变。
可以预计其他化合物包括本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物和前体药物具有类似的效果。本文所述的化合物(包括类似物和前体药物)可以用于治疗和/或预防(预防性)癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病(例如那些涉及癫痫发作的神经变性疾病)的方法中。特别地，本文所述的化合物用于治疗癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病的方法中，其中所述神经变性疾病涉及癫痫发作，该方法包含给予有效量的本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)。
实施例149
呋塞米对灌注高-K+(10mM)浴介质的海马切片中癫痫样放电的效果
用高-K+溶液灌注如上所述制备的大鼠海马切片，直到在CA3(上部迹线)和CA1(下部迹线)锥体细胞区中同时记录自发性发作间样猝发延长期限(图18A和18B)。用包含呋塞米的介质(2.5mM呋塞米)灌注15分钟后，猝发放电强度增加(图18C和18D)。然而，呋塞米灌注45分钟后，以可逆方式阻断猝发(图18E、18F、18G和18H)。在整个呋塞米灌注次序过程中，对递送至Schaffer侧突的单一测试脉冲的突触响应未改变或增强(数据未显示)。可能的情况是，放电振幅的初始增加反映出呋塞米-诱导的抑制减少。Misgeld等人(1986)Science 232：1413；Thompson等人(1988)J.Neurophysiol.60：105；Thompson和Gahwiler(1989)J.Neuropysiol.61：512；和Pearce(1993)Neuron10：189。呋塞米阻断海马切片中抑制性电流成分，其潜伏期(＜15min)与本文观察到的兴奋性增加发作时间类似。另外参见Pearce(1993)Neuron 10：189。呋塞米-阻断自发性猝发的较长潜伏期可以对应于在高-K+条件下充分阻断呋塞米-敏感性细胞容量调节机制所需的额外时间。
在测试呋塞米对用高-K+灌注的切片的效果后，使用各种其他突触在癫痫样放电体外模型中的常见研究进行类似的研究。Galvan等人(1982)Brain Res.241：75；Schwartzkroin和Prince(1980)Brain Res.183：61；Anderson等人(1986)Brain Res.398：215；和Zhang等人(1995)Epilepsy Res.20：105，将这些文献各自完整引入本文参考。在延长的(2-3小时)接触不含镁的介质(0-Mg+)后，已经证实切片发生耐受通常在临床上使用的抗惊厥药的癫痫样放电。Zhang等人(1995)Epilepsy Res.20：105，将该文献完整引入本文参考。来自内嗅皮层(图18I)和菌丝层(未显示)的记录显示，3小时灌注0-Mg++介质后，切片展示猝发模式，其显然与上述这些“抗惊厥药抗性”猝发类似。将呋塞米添加到浴介质后1小时，这些猝发被阻断(图18J)。呋塞米还阻断使用如下添加/改变浴介质观察到的自发性猝发放电：(1)添加200-300μM 4-氨基吡啶(4-AP；钾通道阻滞剂)(图18K和18L)；(2)添加50-100μM GABA拮抗剂荷苞牡丹碱(图18M和18N)；(3)除去镁(0-Mg+)-1小时灌注(图180和18P)；和(4)除去钙+胞外螯合(0-Ca2+)(图18Q和18R)。由于使用了这些操作的每一种，所以同时记录了来自CA1和CA3亚场的自发性发作间样模式(图18K、18L、18M和18N仅显示CA3迹线且图180、18P、18Q和18R仅显示CA1迹线)。在0-Ca2+实验中，5mM呋塞米阻断具有15-20分钟潜伏期的猝发。就所有其他方案而言，用2.5mM呋塞米阻断了具有20-60分钟潜伏期的猝发。呋塞米可逆地阻断了所有实验中CA1和CA3中的自发性猝发活动(图18L、18N、18P和18R)。
可以预计其他化合物包括本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物和前体药物具有类似的效果。本文所述的化合物(包括类似物和前体药物)可以用于治疗和/或预防(预防性)癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病(例如那些涉及癫痫发作的神经变性疾病)的方法中。特别地，本文所述的化合物用于治疗癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病的方法中，其中所述神经变性疾病涉及癫痫发作，该方法包含给予有效量的本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)。
实施例150呋塞米对通过在麻醉大鼠中i.v.注射卡英酸诱发的癫痫样活动的效果
本实施例示例通过将卡英酸(KA)i.v.注入麻醉大鼠诱发癫痫样活动的体内模型。Lothman等人(1981)Neurology 31：806，将该文献完整引入本文参考。结果示例在图3A-3H中。用乌拉坦(1.25g/kg i.p.)麻醉Sprague-Dawley大鼠(4只动物；体重250-270g)并且通过根据需要再注射乌拉坦(0.25g/kg i.p.)维持麻醉。使用直肠温度探头监测体温并且用热垫维持在35-37℃；连续监测心率(EKG)。在颈静脉一侧插套管以便静脉内给药。将大鼠放入Kopf脑功能区定位装置(在顶部头盖骨水平)并且将对0.5mm顶尖部绝缘的双极不锈钢微电极插入距离皮质表面0.5-1.2mm深度，以记录顶额皮质中的脑动电流描记(EEG)活动。在一些实验中，使包含2M NaCl-的吸移管降至2.5-3.0mm深度，以记录海马EEG。将数据贮存在VHS录像带上并且离线分析。
在手术准备和电极放置后，使动物恢复30分钟，然后通过注射卡英酸(10-12mg/kg i.v.)启动实验。诱发具有约30分钟潜伏期的强烈癫痫发作活动、心率增加和触须快速动作。一旦稳定电癫痫发作明显，则每30分钟递送一次20mg/kg呋塞米推注，总计3次注射。使用静脉内给予乌拉坦终止实验。根据NIH原则和University of WashingtonAnimal Care Committee批准的进行动物护理。
图19A-19H显示呋塞米阻断卡英酸引起的乌拉坦麻醉大鼠中的电“癫痫持续状态”。EKG记录如上部迹线所示且EEG记录如下部迹线所示。在该模型中，在KA注射(10-12mg/kg)后30-60分钟记录来自皮质的强烈放电(电“癫痫持续状态”)(图19C和19D)。对照组实验(和先前的报道，Lothman等人，Neurology，31：806，1981)显示这种状态样活动可在3小时内得到充分维持。然后静脉内注射呋塞米(累积剂量：40-60mg/kg)阻断了具有30-45分钟潜伏期的癫痫发作活动，通常产生相对平坦的EEG(图19E、19F、19G和19H)。甚至在呋塞米注射后90分钟，皮质活动仍然保持接近正常基线水平(即在KA和呋塞米注射前观察到的)。对呋塞米在大鼠中的药代动力学研究表明用于本实施例的剂量充分低于毒性水平。Hammarlund和Paalzow(1982)Biopharmaceutics Drug Disposition，3：345。
可以预计其他化合物包括本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物和前体药物具有类似的效果。本文所述的化合物(包括类似物和前体药物)可以用于治疗和/或预防(预防性)癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病(例如那些涉及癫痫发作的神经变性疾病)的方法中。特别地，本文所述的化合物用于治疗癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病的方法中，其中所述神经变性疾病涉及癫痫发作，该方法包含给予有效量的本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)。
实施例151
CA1和CA3实验方法中区域中的自发性癫痫样猝发的定时终止
如上所述由Sprague-Dawley成年大鼠制备海马切片。用振动切片机将海马横切片切成100μm厚度。切片典型地包含完整的海马和下托。切片后，将切片贮存在在室温充氧的保存室内至少1小时，然后记录。在34°-35℃在具有充氧的(95％O2，5％CO2)人造脑脊髓液(ACSF)的界面型室内获取全部记录。标准ACSF包含(以mmol/l计)：124NaCl、3KCl、1.25NaH2PO4、1.2MgSO4、26NaHCO3、2CaCl2和10葡萄糖。
给用于来自CA1和CA3锥体细胞的胞内记录的灵敏电极灌注4M乙酸钾。使用灌注了2M NaCl的低电阻玻璃电极获取来自CA1和CA3细胞体层的场记录。为了刺激Schaffer侧突或门途径，将小的单极钨电极置于切片表面。将来自场和胞内记录的自发性和刺激引起的活动数字化(Neurocorder，Neurodata Instruments，New York，NY.)并且贮存在录像带上。个人计算机上的AxoScope软件(Axon Instruments)用于离线分析数据。
在一些实验中，使用标准或低-氯化物介质，其包含荷苞牡丹碱(20μM)、4-氨基吡啶(4-AP)(100EM)或高-K+(7.5或12mM)。在全部实验中，通过用Na+-葡糖酸盐(Sigma)等摩尔替代NaCl制备低-氯化物溶液(7和21mM[Cl]o)。制备全部溶液，使得它们在35℃和使用95％O2/5％CO2的羧基生成平衡的条件下具有约7.4的pH和290-300mOsm的容积渗摩尔浓度。
在放入界面室后，将切片以约1ml/min表面灌流。在这一流速下，需要8-10分钟完全改变灌流介质。在本文所报道的所有时间都要考虑到这种延迟并且具有约+/-2分钟的误差。
调节同步化活动的因素相对贡献在CA1与CA3区域之间可变。这些因素包括局部线路差异和细胞压积和细胞外隙体积分数的区域特异性。如果阴离子或氯离子-协同转运蛋白拮抗作用的抗癫痫效果是因神经元定时放电中的去同步化所致，则可以预计氯离子-协同转运蛋白阻滞差别影响区域CA1和CA3。为了测试这一结果，进行一系列实验以表征区域CA1和CA3中自发性癫痫样活动定时阻滞的差异。
同时记录区域CA1和CA3中的场活动(CA3区最近端与远端范围之间的近似中间位置)并且自发性猝发通过用高-[K+]o(12μM；n＝12)、荷苞牡丹碱(20mM；n＝12)或4-AP(100μM；n＝5)治疗而诱发。每30秒将单一电刺激递送至Schaffer侧突，即区域CA1与CA3之间的中间位置，使得可以在每一实验期限的自始至终监测区域CA1和CA3中的场响应。在所有实验中，在转变成包含低[Cl-]o(21mM)或呋塞米(2.5mM)的介质前观察到至少20分钟的连续自发性癫痫样猝发。
在所有情况中，接触呋塞米或低-氯化物介质30-40分钟后，区域CA1中的自发性猝发停止，然后区域CA3中的猝发停止。典型地观察到的事件的时间程序包括猝发频率和自发场事件振幅初步增加，然后是CA1中比CA3中更快速的猝发放电振幅降低。CA1变静止后，CA3持续放电5-10分钟，直到它也不再显示自发性癫痫样事件为止。
使用所有测试的诱发癫痫样治疗观察到这种猝发停止的时间模式，与用于阻断自发性猝发的活性剂是呋塞米还是低[Cl-]o介质无关。在这些实验的所有阶段自始至终，刺激Schaffer侧突引起CA1和CA3细胞体层中的过度兴奋的场响应。在区域CA1和CA3中自发性猝发被阻断后，仍然可以引起超兴奋性群峰电位。
CA1变静止后CA3持续自发放电的观察结果无法预计，因为一般认为CA3中的群体放电通过兴奋性突触传递引起CA1中放电。如上所述，甚至在阻断自发性猝发后，递送至Schaffer侧突的单一脉冲刺激仍然引起CA1中的多群峰电位；因此，CA3-至-CA1突触中的超兴奋性兴奋性突触传递是完整的。由于得到了突触传递的这种维持功效和CA3中连续的自发性场放电，所以CA1中的自发性猝发缺失是因输入的兴奋驱动的同步化减少所致。此外，由于CA3中自发性癫痫样放电最终也停止，所以这种去同步化过程可能在不同时间在两个海马子域中出现。
氯离子-协同转运蛋白拮抗剂对CA1和CA3场群体放电的同步化的效果
本文提供的结果启示接触包含低-[Cl-]o或呋塞米的介质与自发性猝发活动特征之间的时间相关性。此外，这种相关性在区域CA1与CA3之间有差异。为了更好地表征这种时间相关性，比较自发性和刺激引起的猝发放电过程中CA1动作电位的发生与CA1和CA3子域场响应中的群峰电位事件。
胞内记录获自CA1锥体细胞，其中胞内电极定位于接近(＜100μM)CA1场电极。每20秒用递送至Schaffer侧突的单一刺激来刺激切片。在建立连续自发性猝发至少20分钟后，将浴介质转换至包含荷苞牡丹碱的低-[Cl-]o(21mM)介质。约20分钟后，猝发频率和振幅达到其最大值。在此过程中的同时场和胞内记录显示CA1场和胞内记录接近同步于CA3场放电。在每一自发性放电过程中，CA3场响应在CA1放电之前几毫秒。在刺激引起的事件过程中，CA1锥体细胞的动作电位放电接近同步于CA3和CA1场放电。
由于持续接触低-[Cl-]o介质，所以区域CA1和CA3中的自发性放电之间的潜伏期增加，其中最大潜伏期为发生在接触包含荷苞牡丹碱的低-氯化物介质30-40分钟后的30-40毫秒。在此过程中，CA1和CA3自发性场放电的振幅下降。在此过程中刺激引起的放电接近模拟形态和相对潜伏期中的自发出现的放电。然而，初始的刺激引起的神经元去极化(推定为单突触的EPSP)开始而没有任何显著性的潜伏期增加。在获取这些数据过程中的时间间隔相当于CA1中自发性猝发停止前即刻的时间。
灌注低-[Cl-]o介质40-50分钟后，自发性猝发在CA1中接近消除，而在CA3中不受影响。在此过程中Schaffer侧突刺激显示单突触引起的CA1锥体细胞响应在没有任何潜伏期显著增加的情况下发生，但刺激引起的场响应几乎被消除。在获取这些数据过程中的时间间隔相当于CA3中自发性猝发停止前即刻的瞬间。
在长期接触低-[Cl-]o介质后，大增加(＞30毫秒)在Schaffer侧突刺激与随后发生的CA3场放电之间的潜伏期中发生。最终，区域CA1和CA3中的Schaffer侧突刺激可能无法引起场响应。然而，来自CA1锥体细胞对Schaffer侧突刺激响应的动作电位放电可以由响应潜伏期中几乎不变而引起。实际上，就实验的完整性期限而言(大于2小时)，来自CA1锥体细胞的动作电位放电可以由Schaffer侧突刺激在短潜伏期时引起。此外，尽管刺激引起的CA3超兴奋性放电最终在延长接触低-[Cl-]o介质后被阻断，但是在CA3中的逆向响应得到保持。
氯离子-协同转运蛋白拮抗剂对CA锥体细胞中猝发放电的效果
上述数据启示场响应的消失可能是因神经元中动作电位出现的去同步化导致。即，尽管突触驱动的CA1锥体细胞兴奋未得到保持，但是CA1神经元群体中动作电位同步不足以累积成可测定的DC场响应。为了测试这一结果，与CA1场响应同时获取CA1锥体细胞的配对胞内记录。在这些实验中，将胞内电极和场记录电极置于彼此相距200μm内。
在包含荷苞牡丹碱的低-[Cl-]o介质诱发的最大自发性活动期限过程中，记录显示CA1神经元对与CA1场放电之间的动作电位在自发和刺激引起的放电过程中均紧密同步化。在持续接触低-[Cl-]o介质后，当CA1场放电振幅开始变宽和减小时，自发和刺激引起的放电显示，CA1神经元对之间的动作电位、和动作电位与场响应之间的动作电位的出现定时的去同步化。这种去同步化与CA1场振幅抑制一致。截止到CA1中自发性猝发停止时，潜伏期显著增加在突刺激与CA1场放电之间发生。此时，配对的胞内记录显示，神经元对之间和Schaffer侧突刺激引起的动作电位出现与场放电之间显著的动作电位放电定时的去同步化。
可能的情况是观察到的CA1动作电位放电去同步化是因突触驱动的动作电位生成的必需机制随机化所致，例如突触释放定时的破坏或神经元过程中的随机传导失败。如果是这种情况，则可以预计指定神经元对之间的动作电位发生可以相应于刺激与刺激彼此的不同而随机改变。这通过比较Schaffer侧突的多种连续刺激之间的神经元对的对动作电位放电模式来测试。在每一刺激事件过程中，动作电位互相在接近相同的时间时出现并且显示从刺激到刺激几乎相同的猝发形态。检验在自发性场放电过程中指定神经元对之间的动作电位发生是否在时间上固定。当动作电位出现接近去同步化时，在此过程中连续自发性场猝发之间比较来自指定CA1神经元对的动作电位放电模式。就上述刺激引起的动作电位放电激而言，在自发性群体放电过程中生成的动作电位彼此在接近相同的时间时出现并且显示从一种自发性放电到下一种自发性放电的接近相同的猝发形态。
低-氯化物治疗对自发性突触活动的效果
可能的情况是，与氯离子-协同转运蛋白拮抗作用相关的抗癫痫效果由对递质释放的一些作用介导。阻断氯化物-协同转运可以改变从末梢释放的递质的量或定时，由此影响神经元同步化。为了测试低-[Cl-]o接触是否影响与递质释放相关的机制，在处理过程中与CA1和CA3场响应同时记录胞内CA1响应，所述的处理显著增加递质从突触前末梢的自发性突触释放。
通过用4-AP(100μM)处理诱发递质自发性释放增加。40分钟接触包含4-AP的介质后，记录区域CA1和CA3中的自发性同步化猝发放电。如上所示，转换至包含4-AP的低-[Cl-]o介质最初导致自发性猝发增强。高度结构化(High-grain)的胞内记录显示通过4-AP处理引起高-振幅自发性突触活动。再接触低-氯化物介质阻断了CA1中的自发性猝发放电，不过，CA3持续自发性放电。此时，CA1胞内记录显示自发性突触噪声进一步增加且保持延长的接触包含4-AP的低-氯化物介质的时间。这些数据启示负责从末梢的突触释放机制不会以一种方式被低-氯化物接触不良影响，所述方式可以解释4-AP-诱发的CA1中自发性猝发阻断。这些结果还消除了低-[Cl-]o接触影响是因CA1树突特性改变所致的可能性，这种树突特性的改变可以危害它们在将PSPs传导至躯体中的功效。
在所有下列实验中，通过用Na+-葡糖酸盐等摩尔替代NaCl降低[Cl-]o。因几个原因使用葡糖酸盐而非其他阴离子替代。首先，膜片钳研究已经证实葡糖酸盐显然实际上对氯化物通道是非渗透性的，而其他阴离子(包括硫酸根、羟乙基磺酸根和乙酸根)可渗透至不同程度。第二，当胞外氯化物被葡糖酸盐替代时，胞外钾通过神经胶质NKCC1协同转运的转运被阻断，而当被羟乙基磺酸盐替代时，不被完全阻断。由于这种呋塞米-敏感性协同转运蛋白在细胞溶胀和细胞外隙(ECS)体积变化中起显著作用，所以适合的阴离子替代物的应用确保了本发明治疗方法的效果与在先的呋塞米实验相当。Hochman等人(1995)Science 270：99-102和美国专利US5,902,732，将这两篇文献的内容完整引入本文参考。第三，当用作Cl-取代物并且导致胞内pH迅速下降时，甲酸盐、乙酸盐和丙酸盐产生弱酸；葡糖酸盐保留在胞外且未报道诱发胞内pH变换。第四，为了比较目的，使用在之前研究中已经使用的相同阴离子替代物，其已经用于检验低-[Cl-]o对活动引起的ECS改变的效果研究。
存在一些启示，即一些阴离子替代物可以螯合钙。尽管后续工作难以证实阴离子取代物螯合钙的任何显著能力，对文献中有关这一问题仍然存在一些关注。钙螯合在下列实验中未显示成为问题，因为静息膜电位保持正常且突触响应(实际上是超兴奋性突触响应)甚至在接触介质几小时后可以引起，在所述介质中，已经通过葡糖酸盐替代降低了[Cl-]o。此外，根据用Ca2+-选择性微电极进行的测量证实低-[Cl-]o-介质中的钙浓度与对照组-介质中相同。
如上所述准备Sprague-Dawley成年大鼠。简言之，用振动切片机将海马横切片切成400μm厚度。切片典型地包含完整的海马和下托。切片后，将切片贮存在充氧的保存室内至少1小时，然后记录。在34°-35℃在具有充氧的(95％O2，5％CO2)人造脑脊髓液(ACSF)的界面型室内获取全部记录。标准ACSF包含(以mmol/l计)：124NaCl、3KCl、1.25NaH2PO4、1.2MgSO4、26NaHCO3、2CaCl2和10葡萄糖。在一些实验中，使用标准或低-氯化物介质，其包含荷苞牡丹碱(20μM)、4-AP(100EM)或高-K+(12mM)。通过用Na+-葡糖酸盐(SigmaChemical Co.，St.Louis，MO)等摩尔替代NaCl制备低-氯化物溶液(7、16和21mM[Cl-]o)。制备全部溶液，使得它们在35℃和使用95％O2/5％CO2的羧基生成平衡的条件下具有约7.4的pH和290-300mOsm的容积渗摩尔浓度。
灌注4M乙酸钾的灵敏电极用于来自CA1锥体细胞的胞内记录。使用灌注了NaCl(2M)的低电阻玻璃电极获取来自CA1或CA3细胞体层的场记录。为了刺激Schaffer侧突途径，将小的单极电极置于区域CA1与CA3之间中间位置的切片表面上。将来自场和胞内记录的自发性和刺激引起的活动数字化(Neurocorder，NeurodataInstruments，New York，N.Y.)并且贮存在录像带上。个人计算机上的AxoScope软件(Axon Instruments)用于离线分析数据。
根据本领域众所周知的标准方法制造离子-选择性微电极。拉出双筒型吸管并且打断至尖部直径约为3.0μm。给参比筒灌注ACSF并且将另一个筒sylanized且给尖部反灌注对K+具有选择性的树脂(Corning 477317)。给Sylanized筒的剩余部分灌注KCl(140mM)。通过Ag/AgCl导线使每个筒连至高阻抗双重-差示放大器(WPI FD223)。通过使用已知离子组成的溶液校准每一离子-选择性微电极，且如果其特征在于接近-Nemstian斜率的响应且如果它在实验期间自始至终保持稳定，则被视为适合。
在放入界面室后，将切片以约1ml/min表面灌流。在这一流速下，需要8-10分钟完全改变灌流介质。在本文所报道的所有时间都要考虑到这种时间延迟并且具有约+/-2分钟的误差。
低-[Cl-]o对CA1场记录的效果
其他研究已经证实延长皮质和海马切片接触低-[Cl-]o不会影响基本的内在和突触特性，例如输入电阻、静息膜电位、除极化-诱发的动作电位生成或兴奋性突触传递。之前研究还部分表征了低-[Cl-]o接触海马CA1区域的致癫痫特性。进行下列研究以观察低-[Cl-]o-诱发的超兴奋性和超同步化的发作和可能的停止时间。最初用标准介质灌注切片(n＝6)，直到分别在CA1锥体细胞和CA1细胞体层中建立稳定的胞内和场记录为止。在两种实验中，将相同细胞保持在整个实验期限的自始至终(大于2小时)。在其余的实验中(n＝4)，在介质变化顺序过程中最初的胞内记录消失且其他记录从不同细胞中获取。在这些实验中神经元活动的模式与在观察单一细胞时观察到的那些模式相同。
将场和胞内电极始终彼此邻近放置(＜200μm)。在每种情况中，在接触低-[Cl-]o-介质(7mM)约15-20分钟后，自发猝发发生，首先是在细胞水平上，然后是在场中。这种自发性场活动代表了神经元大群体中同步化的猝发放电，其持续5-10分钟，此后场记录变静止。当场首先变静止时，细胞持续自发性放电。这一结果启示群体活动已经“去同步化”，而各细胞放电的能力尚未受到影响。在接触低-[Cl-]o-介质约30分钟后，胞内记录显示细胞持续自发性放电，即使场保持静止。在两个时间点细胞对胞内电流注射的响应显示细胞生成动作电位的能力尚未受到低-[Cl-]o接触影响。此外，CA1放线层中的电刺激引起猝发放电，表明超兴奋性状态在组织中得以维持。
低-[Cl-]o对高-[K+]o-诱发的CA1中的癫痫样活动的效果
上述组的实验显示组织接触低-[Cl-]o介质诱发的自发性场电位猝发的短暂期限在10分钟内停止。如果[Cl-]o降低实际上最终能够阻断自发性癫痫样(即同步化)猝发，则这些结果启示抗癫痫样效果可能仅在这一猝发活动初期停止后观察到。检验低-[Cl-]o-处理对高-[K+]o-诱发的猝发活动的时间影响。使切片(n＝12)接触介质，其中[K+]o已经增加至12mM且使用CA1细胞体层中的场电极记录场电位。在至少20分钟时观察到自发性场电位猝发，然后使切片接触介质，其中将[K+]o维持在12mM，而[Cl-]o降至21mM。在组织接触低-[Cl-]o/高-[K+]o-介质后的15-20分钟内，猝发振幅增加且每一场事件具有更长的期限。在这一短暂期限促进场活动(持续5-10分钟)后，猝发停止。为了测试这种阻断是否可逆，在至少10分钟的场电位静止后，转换回具有标准[Cl-]o的高-[K+]o-介质。猝发在20-40分钟内恢复。在每一实验的自始至终，监测对Schaffer侧突刺激的CA1场响应。当自发性猝发具有最大振幅时，在此过程中，恰在自发性猝发停止前记录最大的场响应。然而，甚至在阻断自发性猝发后，Schaffer侧突刺激仍然可以引起群峰电位，表明突触传递是未受影响的且组织保持超兴奋性。
在4个切片中，获取来自CA1锥体细胞的胞内记录与CA1场记录。在高-[K+]o-诱发的自发性猝发期限过程中，将超极化电流注入细胞，使得可以更好地观察到突触后电位(PSPs)。在低-[Cl-]o-阻断自发性猝发后，仍然可以观察到自发出现的动作电位和PSPs。这些观察结果进一步支持了突触活动本身未因低-[Cl-]o处理而被阻断这一观点。
CA1和CA3中4-AP、高-[K+]o和荷包牡丹碱诱发的癫痫样活动的低-[Cl-]o-阻断
测试呋塞米处理显示的低-[Cl-]o处理是否可以阻断不同药理学处理引起的区域CA1和CA3中的癫痫样活动。对该组实验而言，测试低-[Cl-]o处理对高-[K+]o(12mM)(n＝5)、4-AP(100μM)(n＝4)和荷包牡丹碱(20和100μM)(n＝5)诱发的自发性猝发的效果。在每组实验中，同时记录来自区域CA1和CA3的场响应，并且在每种情况中，区域CA1和CA3中的自发性癫痫样活动在灌注介质中的[Cl-]o降至21mM后30分钟内可逆地被阻断。这些数据启示，如呋塞米、低-[Cl-]o可逆地阻断癫痫样活动体外模型中最常研究的几种自发性猝发。
低-[Cl-]o与呋塞米之间对高-[K+]o-诱发的癫痫样活动阻断的比较
来自上述组实验的数据与推定一致，所述推定为低-[Cl-]o和呋塞米的抗癫痫效果由对相同生理学机制起作用介导。为了进一步测试这种推定，比较低-[Cl-]o(n＝12)和呋塞米(2.5和5mM)(n＝4)对高-[K+]o-诱发的猝发的效果的时间顺序，如用CA1中的场电极所记录。低-[Cl-]o和呋塞米处理均诱发类似的效果时间顺序：场活动振幅在最初短暂期限增加，然后自发性场活动阻断(可逆)。在两种情况中，Schaffer侧突的电刺激甚至在自发性猝发被阻断后仍然引起超兴奋性响应。
延长接触低-[Cl-]o介质与可变[K+]o的结果
在上述实验中，在低-[Cl-]o接触阻断自发性猝发后，监测一些切片中的场活动＞1小时以上。在这种延长的低-[Cl-]o接触后，自发的长效去极化变化发生。这些迟发性场事件的形态和频率显然与胞外钾和氯化物浓度相关。进行一组实验，其中[Cl-]o和[K+]o全身可变，且在迟发性自发性场事件时观察到这些离子改变的效果。
在第一组实验中，使切片接触包含低-[Cl-]o(7mM)和标准-[K+]o(3mM)的介质(n＝6)。接触该介质50-70分钟后，记录区域CA1中的自发性事件；这些事件显然在DC场中负移动5-10mV，其中首次发作持续30-60秒。每一随后的发作比在先的发作长。这一观察结果启示，作为浴介质中离子浓度的结果，离子稳态机制随时间减少。在一些实验中(n＝2)，其中已经诱发了这些负DC场移动，同时获取来自CA1锥体细胞的胞内记录与CA1场记录。
就这些实验而言，获取彼此接近的胞内和场记录(＜200μm)。在每一负场移动前(10-20秒)，神经元开始去极化。细胞去极化表示为静息膜电位减小、自发发放频率增加和动作电位振幅下降。与负场移动发作一致，细胞变得充分去极化，使得它们不能发放自发或电流引起的(未显示)动作电位。由于神经元去极化在场移动前10-20秒开始，所以可以逐步增加胞外钾，从而导致神经元群体去极化，由此启动这些场事件。这种[K+]o的增加可能是因氯化物依赖性神经胶质协同转运机制改变所致，这种机制通常将钾从胞外移至胞内空间。为了测试[K+]o增加是否在这些负场移动(和平行的细胞去极化)前，进行实验(n＝2)，其中K+-选择性微电极用于记录[K+]o改变。
在每一实验中，将K+-选择性微电极和场电极始终彼此邻近置于CA1锥体层(＜200μm)，且每20秒将刺激脉冲递送至Schaffer侧突，使得可以监测群峰电位强度。通过灌注低-[Cl- o](7mM)介质引起多次自发出现的负场移动。每一事件都与[K+]o显著增加相关，其中在负场移动发作前几秒钟[K+]o开始增加。在每一事件发作前几秒钟，在约1-2分钟时间间隔内出现[K+]o缓慢增加1.5-2.0mM。刺激-引起的场响应随时间与增加的[K+]o在振幅方面缓慢增加，直到恰在负场移动前为止。
在第二组实验中(n＝4)，[K+]o增加至12mM且[Cl-]o增加至16mM。在50-90分钟接触该介质后，记录区域CA1中的缓慢振动。这些振动的特征在于在场电位上的5-10mV负DC移动和具有约1周期/40秒的周期性。最初，这些振动间歇发生并且具有不规则形态。随时间的推移，这些振动变得连续并且发生有规则的波形。在接触呋塞米(2.5mM)时，振动振幅逐步下降且频率增加，直到振动完全被阻断为止。组织切片中这种低-[Cl-]o-诱发的振动尚未报道。然而，振动事件的时间特征具有与上述纯轴突制备中所述的低-[Cl-]o-诱发的[K+]o振动的显著相似性。
在第三组实验中(n＝5)，[Cl-]o进一步增加至21mM且[K+]o下降回3mM。在这些实验中，单一的不常出现的场电位负移动在40-70分钟内发生(数据未显示)。这些持续40-60秒的事件(5-10mV)在随机间隔发生并且在实验的自始至终期限中维持相对恒定。这些事件有时可以由递送至Schaffer侧突的单一电刺激引起。
最终，在最终一组实验中(n＝5)，[Cl-]o保持在21mM且[K+]o升至12mM。在这些实验中，在实验过程中未观察到迟发性自发性场事件(2-3小时)。
低-氯化物接触过程中的[K+]o改变
如上所述准备Sprague-Dawley成年大鼠。用振动切片机将海马横切片切成400μm厚度，并且将切片贮存在充氧的保存室内1小时，然后记录。浸没型室用于K+-选择性微电极记录。在34°-35℃用具有充氧的(95％O2，5％CO2)人造脑脊髓液(ACSF)灌注切片。标准ACSF包含10mM葡萄糖、124mM NaCl、3mM KCl、1.25mM NaH2PO4、1.2mM MgSO4、26mM NaHCO3和2mM CaCl2。在一些实验中，使用标准或低-氯化物介质，其包含100μM 4-氨基吡啶(4-AP)。通过用Na+-葡糖酸盐(Sigma Chemical Co.)等摩尔替代NaCl制备低-氯化物溶液(21mM[Cl]o)。
使用灌注了NaCl(2M)的低阻抗玻璃电极获取来自CA1或CA3细胞体层的场记录。就刺激Schaffer侧突途径而言，将单极不锈钢电极置于区域CA1与CA3之间的切片中间位置表面上。将所有记录数字化(Neurorocorder，Neurodata Instruments，New York，N.Y.)并且贮存在录像带上。
根据标准方法制造K+选择性微电极。简言之，给双筒型吸管的参比筒灌注ACSF并且将另一个筒sylanized且给尖部反灌注KCl与K+-选择性树脂(Corning 477317)。校准离子-选择性微电极，且如果它们具有Nemstian斜率响应且在实验期间自始至终保持稳定，则被视为适合。
已经证实海马切片接触低-[Cl--]o介质包括如上所述对CA1锥体细胞活动的时间依赖性顺序改变，其中存在三个特征期。简言之，接触低-[Cl--]o介质导致短暂期限的超兴奋性和自发性癫痫样放电增加。由于再接触低-[Cl-]o介质，所以自发性癫痫样活动被阻断，而细胞超兴奋性保留且动作电位发放次数彼此同步化减少。最终，由于延长接触，所以动作电位发放次数变得充分去同步化，使得刺激-引起的场响应完全消失，而各细胞持续减缓单突触引起的对Schaffer侧突刺激的响应。下面的结果证实呋塞米对氯离子-协同转运蛋白拮抗作用的抗癫痫样效果不依赖于对兴奋性突触传递的直接作用且是与任意兴奋性下降相关的群体活动的去同步化的结果。
在6个海马切片中，将K+-选择性和场微电极置于CA1细胞体层中并且将刺激电极置于Schaffer侧突途径上，且每20秒递送一次单脉冲刺激(300μs)。在观察到稳定基线[K+]o至少20分钟后，将灌注转换至低-[Cl-]o介质。在接触低-[Cl-]o介质1-2分钟内，场响应变成超兴奋性，因为[K+]o开始上升。在约4-5分钟接触低-[Cl-]o介质后，场响应强度下降，直到完全消除。相应的[K+]o记录显示在接触低-[Cl-]o介质后钾即刻开始上升，且这种[K+]o上升峰值在时间上对应于最大超兴奋性CA1场响应。与场响应强度下降一致，[K+]o开始下降，直到8-10分钟接触低-[Cl-]o介质后变得在其余实验期限在1.8-2.5mM保持恒定，高于对照组水平。将4个切片转换回对照介质并且使期完全恢复。然后用置于放线层中的K+-选择性微电极重复本实验。在树突层中观察到[K+]o改变的类似顺序，其中[K+]o值为0.2-0.3mM，低于在细胞体层中观察到的结果。
在4个海马切片中，对照条件之间与CAI场响应后的[K+]o中刺激引起的改变响应完全被低-[Cl-]o接触消除，并进行比较。在每一切片中，首先获取细胞体层中的[K+]o-选择性测量值，然后在允许对照介质中完全恢复后，使用移动至放线层的K+-选择性电极重复实验。每一试验由递送至Schaffer侧突5秒的10Hz一系列冲动组成。[K+]o的峰值升高在对照条件与延长接触低-[Cl-]o介质后之间和细胞体与树突层之间类似。然而，在延长接触低-[Cl-]o后观察到的恢复时间明显长于对照条件过程中观察到的结果。
这些结果证实给予呋塞米导致细胞外隙中[K+]o增加。脑组织接触低-[Cl-]o介质即刻诱发[K+]o升高1-2mM，在接触期限的自始至终保持并且与CA1场响应的最初兴奋性增加和最终消除一致。这种CA1场响应在低-[Cl-]o接触过程中缺失最有可能是因神经元发放时间去同步化所致。在细胞体和树突层中刺激引起的[K+]o显著增加在完全低-[Cl-]o阻断CA1场响应前后接近相同。这种数据启示相当的刺激引起的突触驱动和动作电位生成在对照条件下和低[Cl-]o场阻断后发生。
这些数据共同证实氯离子-协同转运蛋白拮抗剂呋塞米的抗癫痫样和去同步化效果不依赖于对兴奋性突触传递的直接作用且是在没有兴奋性下降的情况下群体活动去同步化的结果。
可以预计其他化合物包括本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物和前体药物具有类似的效果。本文所述的化合物(包括类似物和前体药物)可以用于治疗和/或预防(预防性)癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病(例如那些涉及癫痫发作的神经变性疾病)的方法中。特别地，本文所述的化合物用于治疗癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病的方法中，其中所述神经变性疾病涉及癫痫发作，该方法包含给予有效量的本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)。
在低-氯化物接触过程中的胞外pH改变
阴离子/氯化物-依赖性协同转运蛋白拮抗剂例如呋塞米和低-[Cl--]o可以影响胞外pH瞬时值，它们可以促成维持同步化群体活动。如实施例80所述制备大鼠海马脑切片，除了用等摩尔量HEPES(26nM)取代NaHCO3并且使用界面型室。
在4个海马脑切片中，通过接触包含100μM 4-AP的介质引起连续自发性猝发。同时获取来自细胞体层区域CA1和CA3中的场记录。在实验期限的自始至终每30秒递送一次刺激给Schaffer侧突。在观察到连续猝发至少20分钟后，使切片接触标称不含碳酸氢盐的包含4-AP的HEPES介质。在因延长接触(0.2小时)HEPES介质产生的自发性或刺激引起的场响应中未观察到存在显著性改变。在使切片接触至少2小时HEPES介质后，将灌注转换至包含4-AP的HEPES介质，其中[Cl-]o降至21mM。接触低-[Cl-]oHEPES介质诱发相同顺序的事件，且在相同时间过程中，如预先用包含低-[Cl-]oNaHCO3的介质观察到的结果。在完全阻断自发性猝发后，将灌注介质转换回具有标准[Cl-]o的HEPES介质。在20-40分钟内，自发性猝发重新开始。此时，自发性猝发已经重新开始，给切片灌注标称不含碳酸氢盐的HEPES介质多于3小时。
该数据启示氯离子-协同转运对同步化和兴奋性的拮抗作用不依赖于对胞外pH动力学的影响。可以预计其他化合物包括本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物和前体药物具有类似的效果。本文所述的化合物(包括类似物和前体药物)可以用于治疗和/或预防(预防性)癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病(例如那些涉及癫痫发作的神经变性疾病)的方法中。特别地，本文所述的化合物用于治疗癫痫发作、癫痫发作障碍、癫痫症、癫痫性发作和其他神经变性疾病的方法中，其中所述神经变性疾病涉及癫痫发作，该方法包含给予有效量的本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)。
实施例152
呋塞米在缓解神经性疼痛动物模型疼痛症状中的治疗功效
可以使用神经性疼痛Chung模型在啮齿动物中检验本文所述的化合物(例如布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米及其类似物和前体药物)缓解疼痛的能力。Walker等人(1999)Mol.Med.Today 5：319-321。本研究中可以使用16只成年雄性Long-Evans大鼠。全部大鼠可以如下文详细描述的接受L5神经的脊柱结扎。16只大鼠中的8只可以接受注射(静脉内)呋塞米且其余8只可以仅接受静脉内注射媒介物。可以使用机械爪退缩试验即刻评价疼痛阈值。可以比较两组之间的疼痛阈值差异。本文所述的化合物(例如布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米及其类似物和前体药物)缓解疼痛的能力的证据可以作为疼痛阈值高于接受媒介物的组观察到。
神经病的Chung模型
在将动物置于俯卧位以接近左侧L4-L6脊神经的情况下，在异氟烷麻醉下进行脊神经结扎。在放大倍数下，取出约三分之一的横突。鉴定L5脊神经并且从相邻L4脊神经中谨慎剖离，然后使用6-0丝缝线紧固结扎。用消毒溶液处理伤口，缝合肌肉层，并且用创伤夹封闭切口。机械爪退缩阈值的行为测试在切开后3-7天期限内进行。简言之，将动物置于树脂玻璃室(20X10.5X40.5cm)内并且使其习惯15min。将室固定在筛网的上部，使得可以将机械刺激给予两后爪的足底表面。使用上/下法与8根von Frey单丝(5、7、13、26、43、64、106和202mN)得到每一后爪的机械阈限测量值。每一试验从13mN von Frey力开始，该力被递送至右后爪约1秒，然后是左后爪。如果没有退缩响应，则递送下一个更高的力。如果有响应，则递送下一个较低的力。将该程序进行至在最高力(202mN)下无响应或最初响应后给予4种刺激。使用下列公式计算每一爪的50％爪退缩阈值：[Xth]log＝[vFr]log+ky，其中[vFr]是最后使用的von Frey力，k＝0.2268，其为von Frey单丝之间的平均间隔(以log单位计)，y是依赖于退缩响应模式的值。如果动物对最高von Frey毛发(202mN)无应答，则y＝1.00且将该爪的50％机械爪退缩响应计算为340.5mN。将机械爪退缩阈值测试进行3次，并且求3次试验中50％退缩值的平均值，以确定每只动物右和左爪的平均机械爪退缩阈值。
实施例153呋塞米和布美他尼在缓解紧张性焦虑或创伤后精神紧张性障碍症状中的治疗功效
检验呋塞米和布美他尼在治疗创伤后精神紧张性障碍中的治疗有用性，通过测定这些化合物缓解大鼠与环境相关的恐惧条件反射中的紧张性焦虑的能力来进行。
与环境有关的恐惧条件反射涉及不良反应配对，在这种情况中，是使用特征性环境的中等程度的足部电击。使用强直即大鼠中的种类典型防御反应评价恐惧记忆的强度，所述的大鼠中的种类典型防御反应以完全不动性为标志，除呼吸外。如果将大鼠放入特征性环境并且即刻电击，则它们不会学习到对环境的恐惧。然而，如果在即刻电击前使它们探查特征性环境一定时间，则它们显示强度焦虑，并且当放入相同环境时会恐惧。通过将环境相关的恐惧反射条件按照程序分成两期，分别研究治疗对来自学习环境与电击之间相关性或经历电击不良反应(取决于情绪反应线路包括扁桃体)的环境记忆的影响(特别是基于海马的过程)。已经证实人创伤后应激障碍(PTSD)与扁桃体中情绪反应线路相关，由于这一原因，所以环境记忆条件反射是广泛接受的PTSD模型。
本实验使用24只大鼠。每只大鼠接受单一5-min的小的新环境的探查期限。72小时后，将它们放入相同环境并且它们即刻接受两次中度的足部电击(1毫安)，间隔53秒。24小时后，8只大鼠接受注射(i.v.)在媒介物(DMSO)中的呋塞米(100mg/kg)，给8只大鼠I.V.注射在媒介物(DMSO)中的布美他尼(50mg/kg)。剩余的8只大鼠接受注射单独的DMSO。将每只大鼠再放入相同环境8-min，在此过程中测定强直度，作为巴甫洛夫条件反射性恐惧的指数。
使用4个相同的室(20X20X15cm)。事件定时和控制的所有方面均在微型计算机控制下(MedPC，MedAssociates Inc，Vermont，USA)。通过与微型计算机连接的高架摄像机进行强直度测定并且使用转用软件块FreezeFrame(OER Inc.，Reston，VA.)自动评分。用单向方差分析(ANOVA)检验与作为组内因素的药物剂量分析总计强直时间。
正如图20中所示，在用布美他尼或呋塞米治疗的动物中观察到的强制明显少于接受的单独的媒介物的动物中观察到的结果，这表明布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米可以有效地用于治疗创伤后精神紧张性障碍和其他焦虑症(例如焦虑、急性焦虑、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫观念与行为障碍(OCD)、创伤后精神紧张性障碍(PTSD)、一般焦虑症和特异恐怖)。
实施例154
呋塞米和布美他尼在减轻焦虑中的治疗功效
检验呋塞米和布美他尼在缓解焦虑中的治疗功效，通过评价这些化合物在大鼠恐惧强化的惊恐(FPS)试验中的效果来进行。本试验常用于区别抗焦虑药物效应与非特异性效应，例如镇静/肌肉松弛。24只大鼠接受30min期限的对FPS仪器的习惯。24小时后，采集基线惊恐振幅。然后基于基线惊恐振幅将大鼠分成3个配对的组。大鼠之一显示明显高于其他大鼠的基线惊恐且从实验中将其排除。1和2组由此由各8只大鼠组成，而3组由7只大鼠组成。在采集基线惊恐振幅后，在连续2天内2个期限时递送20个光照/电击对(即每天10个光照/电击对)。在最后一天时(第5天)，2和3组大鼠接受注射(i.v.)在媒介物(DMSO)中的呋塞米(100mg/kg)或布美他尼(70mg/kg)，1组仅接受单独的媒介物。注射后即刻在单独的惊恐试验和惊恐+恐惧(光照，然后惊恐)试验中评价惊恐振幅。比较治疗组之间恐惧强化的惊恐(光照+惊恐振幅-单独的惊恐振幅)。
巴甫洛夫条件反射性恐惧
训练动物并且在4个相同的稳定度测试器装置(Med-Associates)中测试。简言之，将每只大鼠放入小树脂玻璃圆筒。各稳定度测试器的底部由间隔18mm的6-mm-直径不锈钢棒材组成，通过它可以递送电击。圆筒运动导致加速度传感器移位，其中产生的电压与笼移位的速度成正比。将惊恐振幅定义为递送惊恐刺激后首个0.25秒过程中出现的最大加速度传感器电压。放大加速度传感器的类似输出，以0-4096单位等级进行数字化，贮存在微型计算机中。将每一稳定度测试器包封在通风的光照-和声音-减弱盒中。使用精密声级计进行全部声级测定。与每个木制盒子的侧壁连接的通风扇噪声产生64dB的总体背景噪声水平。惊恐刺激是由白噪声发生器产生的50ms白噪声猝发(5ms上升衰减时间)。所用的视觉条件刺激是与白噪声源相邻的电灯泡照明。非条件刺激是由4个位于室外部的恒定电流电击器产生的0.5秒期限的0.6mA足部电击。全部刺激的提供和排序在微型计算机控制下进行。
FPS方法由5天测试组成；在1和2天过程中采集基线惊恐响应，在第3天和第4天递送光照/电击对，在第5天测试恐惧强化的惊恐。
匹配：在前2天时，将全部大鼠放入树脂玻璃圆筒，3min后，以30秒的刺激间期间隔提供30次惊恐刺激。使用105dB强度。将在第2天时通过30次惊恐刺激的平均惊恐振幅用于使用相似方法将大鼠分入治疗组。
训练：在接下来的2天时，将大鼠放入树脂玻璃圆筒。在进入后的3min后的每一天，递送10次CS-电击对。以4min的平均试验间隔(范围，3-5min)在3.7秒CSs的最后0.5秒递送电击。
测试：将全部大鼠放入相同的惊恐盒子，其中训练它们并且在3min后，提供18次引起惊恐的刺激(全部在105dB)。这些最初的惊恐刺激用于再次使大鼠习惯于听觉惊恐刺激。最后这些刺激后的30秒，每只动物接受60次惊恐刺激，其中单独提供一半刺激(单独惊恐试验)，而3.7sec CS发作后3.2秒另一半(CS-惊恐试验)。以20-40秒之间随机改变的平均30秒刺激间间隔提供全部惊恐刺激。
测量：比较治疗组CS-惊恐与单独惊恐试验(恐惧强化)之间有关惊恐振幅的差异。
图21显示测试当天前测定的每组大鼠的基线惊恐振幅。图22显示注射单独的DMSO、布美他尼或呋塞米后即刻在试验当天测定的单独恐惧试验时的响应振幅，图23显示在试验当天时的差别得分(单独的惊恐-恐惧增强的惊恐)。正如图中所示，在用呋塞米或布美他尼治疗的大鼠中观察到的得分以具有统计学显著性差异的方式低于用单独的媒介物治疗的大鼠中观察到的结果，这表明呋塞米和布美他尼有效地减轻焦虑。
图24和25分别显示用呋塞米或布美他尼治疗后1周单独的惊恐振幅和差别得分。发现用呋塞米或布美他尼治疗的动物具有高于单独媒介物治疗的动物的差别得分。可以预计其他化合物包括本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物和前体药物具有类似的效果。本文所述的化合物(包括类似物和前体药物)可以用于治疗和/或预防(预防性)焦虑症(例如焦虑、急性焦虑、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫观念与行为障碍(OCD)、创伤后精神紧张性障碍(PTSD)、一般焦虑症和特异恐怖)的方法中，特别地，本文所述的化合物(包括类似物和前体药物)可以用于治疗和/或预防(预防性)焦虑症(例如焦虑、急性焦虑、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫观念与行为障碍(OCD)、创伤后精神紧张性障碍(PTSD)、一般焦虑症和特异恐怖)的方法中，该方法包含给予有效量的本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)。
实施例155
本文所述选择的化合物可以对Na+K+2Cl-协同转运蛋白(NKCC1)无作用
测试选择的布美他尼衍生物NTP-2014与对照品布美他尼相比抑制NKCC1的能力。本方案根据Panet和Alan The Journal of CellBiology，Volume 114，1991年7月2日，337-342进行。以3种浓度接种人成年皮肤成纤维细胞：在具有补充了10％FCS和4mM谷氨酰胺(37℃，CO2)的DMEM的96孔培养板上3000/5000/10000。用补充了0.2％FCS、4mM谷氨酰胺和20mM HEPES(37℃，CO2)的DMEM替代培养基。根据Chassande等人(1988)“The Na+/K+/Cl-cotransport inC6 glioma cells.”Eur.J.Biochem.171：425-433所述的标准操作方法进行NKCC测定。
在所示的数据中，100％表示在不使用布美他尼的情况下对照组细胞中的Rb+流入量，0％表示在使用30μM布美他尼的情况下对照组细胞中的Rb+流入量。在测试的两种不同体外细胞报道系统(A7r5无限增殖化细胞和初级细胞培养物)中，NTP-2014未显示对NKCC1氯化物转运的抑制。甚至在协同转运蛋白活化促分裂原(例如FGF)的存在下，NTP-2014也不抑制NKCC1。参见图32。因此，本文所述的化合物对NKCC1无作用，且预计不具有利尿效果。这使得给予本文所述的化合物不会产生不需要的利尿副作用。
实施例156
本文所述的化合物不具有利尿效果(例如NTP-2014)
给药前使动物禁食过夜，在任何预治疗前不饮水。如果适合，在采集末端样品自始至终或血样采集前6小时禁食物和饮水。在检品给药前，用单IP剂量的PBX预治疗全部动物。在给药前约5-6分钟，全部动物接受单一口腔(PO)管饲剂量的0.9％注射用氯化钠USP，剂量体积为15mL/kg。通过单一IP剂量以1mL/kg的剂量体积给予媒介物、DMSO和测试化合物(例如NTP-2014)。给予动物10mg/kg、50mg/kg或100mg/kg的媒介物对照品、布美他尼PO(30mg/kg+PBx)或NTP-2014。蓄积尿量结果如图33A中所示。蓄积钠排泄量结果如图33B中所示。蓄积钾排泄量结果如图33C中所示。
布美他尼曲线显示明显的脲排泄(图33A)、钠(图33B)和钾(图33C)。另一方面，NTP-2014完全不同于媒介物对照品。因此，本文所述的化合物(例如NTP-2014)不显示利尿效果并且可以以高剂量给予(例如100mg/kg)而没有不需要的利尿副作用。此外，预计用所述化合物(包括其前体药物)包括本文所述的布美他尼衍生物治疗具有类似的效果。
实施例157
化合物可以具有弱的或无利尿效果
给药前使动物禁食过夜，在任何预治疗前不饮水。如果适合，在采集末端样品自始至终或血样采集前6小时禁食物和饮水。在检品给药前，用单IP剂量的PBx预治疗全部动物。在给药前约5-6分钟，全部动物接受单一口腔(PO)管饲剂量的0.9％注射用氯化钠USP，剂量体积为15mL/kg。通过单一IP剂量以1mL/kg的剂量体积给予媒介物、DMSO和检品NTP-2024和NTP-2006。图27示例蓄积的尿量。
给药前使动物禁食过夜，在任何预治疗前不饮水。如果适合，在采集末端样品自始至终或血样采集前6小时禁食物和饮水。在检品给药前，用单IP剂量的PBX预治疗全部动物。在给药前约5-6分钟，全部动物接受单一口腔(PO)管饲剂量的0.9％注射用氯化钠USP，剂量体积为15mL/kg。通过单一IP剂量以1mL/kg的剂量体积给予媒介物、DMSO和检品NTP-2024和NTP-2006。图28示例蓄积的钠排泄量。
给药前使动物禁食过夜，在任何预治疗前不饮水。如果适合，在采集末端样品自始至终或血样采集前6小时禁食物和饮水。在检品给药前，用单IP剂量的PBX预治疗全部动物。在给药前约5-6分钟，全部动物接受单一口腔(PO)管饲剂量的0.9％注射用氯化钠USP，剂量体积为15mL/kg。通过单一IP剂量以1mL/kg的剂量体积给予媒介物、DMSO和检品NTP-2024和NTP-2006。图29示例蓄积的钾排泄量。
图30示例给予布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米酯类和酰胺类似物(例如NTP-2014、NTP-2026、NTP-2024、NTP-2006、NTP-1007和NTP-1003)后近中颞叶癫痫模型中海马放电的累积次数减少。将如下结果与治疗组包括DMSO和盐水媒介物对照组各自的前剂量条件校准。测试制品化合物的剂量为：50mg/kg，NTP-2014和NTP-2026；和150mg/kg，NTP-2024、NTP-2006、NTP-1007和NTP-1003。
图31示例给予布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米酯类和酰胺类似物(例如NTP-2014、NTP-2026、NTP-2024、NTP-2006、NTP-1007和NTP-1003)后近中颞叶癫痫模型中海马放电的累积次数减少。将如下结果与治疗组包括DMSO和盐水媒介物对照组各自的前剂量条件校准。测试制品化合物的剂量为：50mg/kg，NTP-2014和NTP-2026；和150mg/kg，NTP-2024、NTP-2006、NTP-1007和NTP-1003。
此外，观察到几种类似物具有明显低于一般与呋塞米或布美他尼相关的利尿效果。
因此，可以预计其他化合物包括本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物和前体药物具有类似的效果。本文所述的化合物(包括类似物和前体药物)可以用于治疗和/或预防(预防性)癫痫症(例如癫痫、癫痫发作、癫痫症和其他涉及癫痫的神经变性疾病(例如脑瘫，大田原综合征))的方法中。特别地，本文所述的化合物用于治疗癫痫症(例如癫痫、癫痫发作、癫痫症和其他涉及癫痫的神经变性疾病(例如脑瘫，大田原综合征))的方法中，该方法包含给予有效量的本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)。
实施例158
微小和自发抑制性突触后电流(mIPSCs和sIPSCs)的体外海马记录
使用标准技术测定神经元细胞中的离子流。Kandel和SchwartzPrinciples of Neural Science第2版(1985)，例如，参见128-131页。在体外海马切片(CA1锥体细胞层)中进行记录。为了记录GABAA-IPSCs，通过将DNOX(50μM)、AP-5(50μM)和SCH50911(20mM)加入介质阻断谷氨酸能和GABAB传递。胞内溶液包含CsCl和OX314。将测试的布美他尼衍生物(例如NTP-2014)施用于浴介质。结果如图34A-B中所示。
NTP-2014显示增加GABAA抑制性驱动，包括海马切片明显中自发性IPSCs显著增加，其中NTP-2014自始至终显示抑制时间之间的时间显著减少(例如事件频率增加)。NTP-2014将抑制事件之间的平均间隔从257ms减少至205ms(图34A)和535-401ms(图34B)。
NTP-2014还显示增加GABAA抑制性驱动，包括海马切片明显中微小IPSCs显著增加，其中NTP-2014自始至终显示抑制时间之间的时间显著减少(例如事件频率增加)。NTP-2014将抑制事件之间的平均间隔从315ms减少至162ms和361-160ms。结果如图35A-B中所示。
本文提供的数据显示微小与自发性抑制性突触后电流(分别为mIPSCs和sIPSCs)事件之间的间隔在NTP-2014的存在下基本上减少。产生的效果显示抑制性事件的频率非常显著地增加。这些数据启示通过本文所述化合物的作用增加GABA从神经元中释放的突触前机制。
因此，本文所述的化合物(例如NTP-2014)在突触旁起作用并且可以以高剂量给予(例如100mg/kg)，而没有不需要的通常与γ-氨基丁酸能的化合物相关的副作用(例如苯二氮杂
Figure BDA0000088452220003941
类导致的镇静作用)。此外，预计用本文所述的化合物包括本文所述的化合物治疗具有类似的效果。
实施例159
选择的布美他尼衍生物对GABAA受体同种型的体外分子试验
用于选择性筛选的实验设计
将GABA添加到γ-氨基丁酸能的细胞中活化了重组表达的GABAA受体，从而通过GABAA受体中的离子通道生成离子运动。可以对氯化物离子运动入细胞产生的电流定量。
用大鼠或人GABAA受体亚单位瞬时转染HEK-293T细胞。除非另有指示，否则在-50mV进行全细胞膜片钳记录。从新鲜制备的DMSO的储备溶液稀释测试化合物，由冷冻储备溶液制备GABA。对每一实验而言，将GABA或GABA+测试化合物施用5秒，测定流入细胞的氯化物离子产生的电流并且记录为电流迹线与时间的关系。
典型γ-氨基丁酸能的药物
典型γ-氨基丁酸能的药物(例如苯二氮杂
Figure BDA0000088452220003951
类)是增加GABAA受体中抑制性电流振幅和时程的非选择性激动剂。如图36中所示，在(A)抗惊厥药FRISIUM(氯巴占)；(B)睡眠辅助剂AMBIEN(唑吡坦)；和(C)抗焦虑药物VALIUM(地西泮)的存在下，均增加GABAA受体中抑制性电流振幅和时程。GABAA受体激动剂以低GABA浓度活化GABAA受体，同时还有效地诱发CNS副作用，包括镇静、呼吸减弱、认知下降和运动功能受损。
布美他尼衍生物
在高和低GABA浓度下对多种GABAA受体同种型(例如α1β3γ2、α2β3γ2、α3β3γ2、α4β3γ2、α5β3γ2、α6β3γ2)测试本文所述的化合物(例如NTP-2014)。NTP-2014通过抑制α4 GABAA受体同种型中的电流选择性拮抗α4 GABAA受体同种型。较高GABA浓度导致抑制程度较高，启示NTP-2014起非竞争性抑制剂的作用。结果如图37中所示。
NTP-2014抑制γ-氨基丁酸能的内在神经元中突触旁α4 GABAA受体同种型中的电流。
α1β3γ2 GABAA受体同种型
包含α1的受体未显示对10μM NTP-2014响应的显著活化。α1亚单位是成年大脑中的主要α亚单位。一般而言，电流振幅不受影响，而在最高浓度(10μM)下观察到时间延迟增加和振幅下降的混合，但在低浓度下不改变。这一结果与使用苯二氮杂
Figure BDA0000088452220003961
类和其他典型GABA-ergic活性剂的作用观察到的显著正调节增加相反(参见图37A-C)。结果如图39中所示。
α2/α3/α5 GABAA受体同种型
包含α2、α3、α5亚单位亚型的GABAA受体同种型，10μMNTP-2014在(A)1μM和(B)100μM GABA下减缓了衰变率。存在可变量的对稳态电流的抑制，在较高GABA浓度下，显然尤其是以包含α2-和α5-的受体为显著。对包含α2的受体在低GABA浓度下观察到NTP-2014的小的正效果和负效果的混合。结果如图41中所示。
α4/α6GABAA受体同种型
NTP-2014在较高GABA浓度下抑制包含α4和α6亚单位的受体，但在低GABA浓度下不受影响。结果如图41中所示。这一结果与开放通道阻滞的非竞争性抑制一致且明显不同于呋塞米的抑制作用。这些受体对抑制的敏感性显然极为类似，其中IC50为10-30μM。图41C示例NTP-2014在α4或在α6 GABAA受体同种型中的EC50＝20.2μM。这种抑制作用显然在一定程度上也是依赖于电压的，其中在正膜电位下抑制更强。
此外，当与NTP-2014比较时，直到100μM浓度布美他尼都对GABAA受体同种型无效。NTP-2014显示IC50＝16μM。这些结果如图42中所示。
NTP-2014显然具有对GABAA受体的变体作用机制。主要效应在于在一会减少总GABA“驱动”的氯化物电流。对α4、然后对α6、α5、α2、然后对α3最佳地观察到与非竞争性拮抗即开放通道阻滞一致。
NTP-2014的活性通过至少两种包含特异性亚单位例如α4的受体路径抑制并且通过缺乏对α1的正调节发生。通过在突触的GABA释放增加而增加的作用可以导致对这些受体的正调节且由此可以预计导致焦虑和癫痫发作频率减少。它们还可以减轻疼痛、尤其是神经性疼痛。抑制仅是对包含α4、α5和α6-的受体观察到的效应。这些效应可能需要γ亚单位，因为包含δ的受体不受10μM NTP-2014影响。
实施例160
神经性疼痛福尔马林爪模型
小鼠中的福尔马林爪试验(晚期)
本文所述的方法检测一般用于测试化合物疼痛缓解特别是糖尿病性神经病变或感受伤害性神经病的止痛/抗炎活性。参见Wheeler-Aceto等人(1991)Psychopharmacology 104：35-44.
万法
将5％福尔马林(25μl)注入小鼠左后爪足底内。这种处理诱发对照组动物舔爪。在注射福尔马林后15-50分钟的1分钟间隔短暂观察小鼠并且记录观察小鼠舔舐注射爪的机会次数。每组有10只小鼠且以“双盲”进行测试。
在3种剂量下各自评价布美他尼衍生物(例如NTP-2014、NTP-2026、NTP-2024)，测试前30分钟i.p.给药(即福尔马林前15分钟)并且与常用的媒介物对照组比较。在相同实验条件下给予的加巴喷丁(100mg/kg i.p.)用作参比物质。本实验包括几个组。通过比较治疗组与媒介物对照组、使用未配对Mann-Whitney U检验分析数据。
使用的种类
NMRI小鼠，在实验开始时称重20-30g(每次实验的最大范围＝5g)的雄性Rj：NMRI小鼠，其获自Elevage Janvier，53940 LeGenest-Saint-Isle，France。
动物寄居
使小鼠10只一组寄居在模克隆笼(25x19x13cm)中的木屑(Litalabo-SPPS，95100 Argenteuil，France)上，可自由取食(Code 113-SAFE，89290 Augy，France)和饮水，直到测试为止(或如另外部分所述)。将动物室维持在7:00-19:00(12小时)的人工照明中，受控环境温度为21±3℃且相对湿度在30-80％。
处死
在实验结束时通过接触O2/CO2混合物(20％/80％)、然后接触CO2处死小鼠。
测试前30分钟(即福尔马林前15分钟)i.p.给予NTP-2014(21、105和210mg/kg)。与媒介物对照组相比，NTP-2014显然减少了注射福尔马林后15-50分钟的舔舐得分(分别为：-38％，p＜0.05；-99％，p＜0.001和-90％，p＜0.001)。测试前30分钟(即福尔马林前15分钟)i.p.给予NTP-2026(116和231mg/kg)。与媒介物对照组相比，NTP-2026以剂量依赖性减少了注射福尔马林后15-50分钟的舔舐得分(分别为：-49％，p＜0.01和-82％，p＜0.001)。将NTP-2026分散于0.2％HPMC的生理盐水溶液，其中加入一滴80(2％总体积)以匀化制备物。它在23.1mg/kg下无效果。与媒介物对照组相比，在相同条件下给予加巴喷丁(100mg/kg i.p.)显著减少了注射福尔马林后15-50分钟的舔舐得分(-68％，p＜0.001)。这些结果启示在小鼠福尔马林爪试验晚期过程中NTP-2014(21-210mg/kg i.p.)和NTP-2026(在116和231mg/kg i.p.)存在明显的止痛/抗炎活性。结果如图43中所示。
因此，本文所述的化合物(例如NTP-2014)在突触旁起作用并且可以给药以治疗神经性疼痛，而没有不需要的通常与γ-氨基丁酸能的化合物相关的副作用(例如苯二氮杂类导致的镇静作用)。此外，预计用本文所述的化合物包括本文所述的化合物治疗具有类似的效果。
实施例161
用尾试验
受试者：雄性CD-1(25-35g，Charles River)用于所有研究。使小鼠以5只的组寄居在树脂玻璃室内，可随意取食或饮水。将动物维持在12hr光照/黑暗循环(在7:00AM照明)的温度和适度受控动物寄居处中。在运抵时检验本研究中使用的动物的健康状态。仅使健康状态良好的动物适应实验室条件并且用于本研究。在动物饲养所的适应环境期限最少为7天。根据公关机构的指导原则并且根据采用的Guidefor the Care and Use of Laboratory和National Institutes of Health发布的经批准的方案进行全部动物实验。
行为测试：使用52℃温热水用尾试验评价测试化合物的功效。将快速用尾试验的首次征兆的潜伏期视为行为终点(Jannsen等人1963)。首次测试每只小鼠的基线潜伏期，通过将其尾部进入水并且记录响应时间来进行。从另外的测试中排除5秒内无应答小鼠。然后注射测试化合物并且使小鼠在注射后10、20、30、45、60、90、120和180分钟休息热潜伏期(如果对于药物效应低于20％的组平均值，则对该组停止测试)。通过下列公式计算抗痛作用：％抗痛作用＝100x(测试潜伏期-对照潜伏期)/(10-对照潜伏期)。将最大得分指定(100％)给在10秒内无应答的动物以避免组织损害。
测试物质的制备：将NTP-2014(m.w.420.52，游离碱；批号：004JXS047)溶于0.2％的羟丙基甲基纤维素(HPMC)生理盐水溶液，得到的终浓度在3.2-10mg/ml(pH～7.4)。NTP-2024(m.w.433.52，游离碱；批号：024DGM048)溶于0.2％HPMC的生理盐水溶液，得到的终浓度为5.6-18mg/ml(pH～7.4)。首先将NTP-2026(m.w.462.61，游离碱；批号：002JRA064)溶于100％ETOH(10x溶液)，然后使用0.2％HPMC的生理盐水溶液(pH～7.4)将该储备溶液稀释至终浓度为5.6-10mg/ml。最终ETOH浓度约为10％。将Tween 80(1-2滴)加入到全部溶液中以有助于化合物的增溶。类似的媒介物用作对照品。将硫酸吗啡溶于生理盐水。
实验组：媒介物对照品(含有2滴Tween 80的0.2％HPMC)吗啡对照品NTP-2014(32，56和100mg/kg)、NTP-2024(56，100和180mg/kg)、NTP-2026(56，100和180mg/kg)。全部组包含n＝8-10只小鼠。
结果概述：镇痛A50值(和95％CL)：吗啡A50：9.84(8.79-11.01)mg/kg；NTP-2014A50：53.71(44.41-64.95)mg/kg；NTP-2024A50：未测定，在180mg/kg～48％＊；NTP-2026A50：未测定，在56mg/kg  ～25％＊＊ ＊作为在最高测试剂量下微溶的结果(180mg/kg或18mg/ml)＊＊在最高测试剂量下明显溶解结果(100mg/kg或10mg/ml)。结果如图44A-D中所示。
因此，本文所述的化合物(例如NTP-2014)在突触旁起作用并且可以被给予以治疗疼痛，而没有不需要的通常与γ-氨基丁酸能的化合物相关的副作用(例如苯二氮杂
Figure BDA0000088452220004011
类导致的镇静作用)。此外，预计用本文所述的化合物包括本文所述的化合物治疗具有类似的效果。
实施例162
泰素诱发的神经病模型
周围神经病是当神经受到创伤、疾病、代谢不全或一些药物和毒素损伤时产生的慢性疾病。与化疗剂例如紫杉醇(泰素)相关的感觉障碍从轻度麻刺感到自发性烧灼感，典型地在外周例如手和足中发生。症状随疗法的持续变得更强烈且可以导致虚弱、共济失调、麻木和疼痛，从而限制了剂量和/或使用化疗剂治疗。
在本研究中，将泰素-诱发的感觉神经病动物模型用于使用机械性异常性疼痛的von Frey试验评价资助测试化合物在对触觉敏感性响应中的效果。还测试了热痛觉过敏，但发现在该模型中的终点不适合，因为结果不确定；大鼠在泰素治疗后未持续发生痛觉过敏。因此，泰素-诱发的机械性异常性疼痛用作确定的行为终点。
加巴喷丁100mg/kg IP能够减轻作为泰素-诱发的神经性疼痛结果观察到的机械性异常性疼痛。类似地，当与媒介物对照组比较时，用NTP-2014(75mg/kg，IP)治疗的大鼠显示异常性疼痛的显著改善。
与在第31天时的前剂量值对比，给予NTP-2026的大鼠在第32天时显示轻度改善，不过，未接近显著性。该组中9只动物中的3只显示异常性疼痛完全逆转。
由于大鼠中NTP-2024的快速和近完全代谢，所以用代谢抑制剂(胡椒基丁醚，PBx)预治疗用于增加对所述化合物的全身接触。尽管它不能增加NTP-2024改善疼痛的能力，但是其对机械性异常性疼痛的活性改善了使用NTP-2024解释的结果。此外，基于后剂量临床观察结果，PBx给药的急性效应可以导致疼痛增加并且导致动物痛苦。
溶液/混悬液的制备
匀化测试物质并且使用研钵和研杵在用作媒介物的0.2％羟丙基甲基纤维素(HPMC)的生理盐水溶液中调配。以10mL/kg体重的剂量体积经腹膜内给予测试制品。新鲜制备测试制品以便每天给药。
代谢抑制剂胡椒基丁醚的制备
在测试制品NTP-2024和媒介物对照组给药前，用在测试制给药前30分钟和10分钟使用一般代谢抑制剂胡椒基丁醚的DMSO溶液(150mg/kg i.p.)以1mL/kg体积预治疗大鼠。
在指导本研究过程中的修改方案除去了用于本研究第二部分给予作为NTP-2024的预治疗的胡椒基丁醚(150mg/kg i.p.)(3组)。用盐水预治疗动物作为本研究的第二部分。
用盐水将参比制品加巴喷丁配制成100mg/mL浓度并且以1mL/kg体重的剂量体积皮下递送(给药浓度为100mg/kg)。
实验方法
动物
从Harlan Sprague Dawley Inc.，Indianapolis，Indiana，USA安排总计一百一十四只(114)雄性Sprague Dawley大鼠。这些动物在到达MDSPS-Efficacy Pharmacology时无特异病原体且约7周龄。分两批接收动物，第一批包含63只动物且第二批包含51只动物。
在收到时，动物未打包并且放在笼中。对每只动物进行视觉健康检查，包括评价外皮、四肢和口腔。还检验了每只动物的任何姿态或运动异常征兆。一只动物在到达时因为眼闭合且可能失明，在到达的当天对该动物实施安乐死。无影响其他动物的感染或创伤适应征并且接受其余动物用于研究。
环境
使动物寄居以每个笼子两只(2)寄居在MDSPS的透明聚碳酸酯塑料笼中并且接受富含的Enrich-o-cobs垫层形式。设定温度以维持在18-26℃(64-79°p)与相对湿度30-70％。每日监测温度和湿度并且记录最小值和最大值。有几次湿度间断地溢出范围(低于30％)。当动物在本研究过程中保持健康时，认为对本研究无影响。
食物和水
动物可随意摄取来自MDSPS Efficacy Pharmacology的居室产生的椭圆形颗粒Certified Picolab Rodent膳食20(PMI Feeds Inc.，Richmond，Indiana，USA)和去离子水。由制造商分析啮齿动物膳食的特定重金属、黄曲霉毒素、有机磷酸盐和特定营养物的水平。将食物和水的分析检验证明保存在MDSPS-Efficacy Pharmacology档案中。并不预期饲料和水中的已知污染物水平受到本研究目的或指导的干扰。
笼和动物鉴定
分别根据接收时指定的独特耳标鉴定动物。此外，附在其笼子上的笼子卡片确定了研究编号、动物编号、治疗命名、种类/品系和性别。
分配入治疗组
为了包含入研究(第一部分)，使动物进行基线热爪试验，在泰素注射前测定。从研究中排除具有热爪得分15秒以上的动物。从研究中排除具有热爪得分15秒以上的两只(2)动物。61只(61)动物满足选择标准并且接受泰素。
在第28天时，测试接受泰素的全部动物的热痛觉过敏。动物需要至少从基线降低20％以包含入本研究的治疗阶段。满足该标准的动物不足，且修改本研究以使用机械性异常性疼痛(von Frey)替代热痛觉过敏作为主要终点。
安排其他动物并且接受以满足组大小。全部动物进行基线前剂量von Frey试验，在泰素注射前测定。为了包含入本研究，动物需要具有高于12的基线von Frey得分。8只(8)动物具有的von Frey得分低于12并且从本研究中排除。43只(43)动物满足选择标准并且接受泰素。
在第31天，使用von Frey测试给予泰素的全部动物的机械性异常性疼痛。将接受13分以下得到的动物指定入治疗组。综述每组及机械性异常性疼痛得分以确保平均值和标准偏差均匀。将大鼠指定入治疗组，每组9只动物。
在适应环境期限过程中、在第一天给药前和本研究过程中每周测量体重。
临床观察结果
观察动物对泰素的异常反应征兆。从第一天泰素注射开始每天记录每只动物的临床观察结果并且在最后泰素注射后持续1周。动物的每日观察结果可能溢出本研究，但不记录，除非有异常发现出现。
泰素给药
在第1、3、5和7天时，对全部动物给予泰素2mg/kg，IP，剂量体积为1mL/kg。
检品给药
在第32天，全部动物接受单一腹膜内注射表1和2的检品或媒介物。就第1组(媒介物)而言，在媒介物给药前30分钟和10分钟用胡椒基丁醚(150mg/kg IP，1mL/kg剂量体积)预治疗大鼠。在媒介物给药前30分钟和10分钟用胡椒基丁醚(150mg/kg IP，1mL/kg剂量体积)预治疗3组的4只动物(NTP-2024)。在检品给药前30分钟和10分钟组2、3、4和5用盐水(1mL/kg剂量体积，IP)预治疗大鼠。除2组中的动物外，在机械性异常性疼痛测试前30min动物接受IP注射媒介物或检品。以1mL/kg的体积给予动物。
2组动物在机械性异常性疼痛测试前90分钟接受IP注射加巴喷丁。以10mL/kg的体积给予动物。
行为测试-适应环境
在基线测试前使动物适应两次机械性异常性疼痛仪器的环境。这使得大鼠习惯于测试装置，由此它们在测试时保持平静。
机械性异常性疼痛(von Frey)
全部动物进行用于机械性异常性疼痛的von Frey测试。在测试当天，使动物返回室中并且在测试前使其探索周围环境约15分钟。将一系列丝施加于左后爪。首先将2.0g丝施加于足面，如果动物对该丝有应答(通过舔舐其爪)，则施加下一个较小的丝。相反，如果动物无应答，则施加下一个较大的丝。在“上下”法中重复该过程，以便响应首次初步改变改变后有4次响应。
尸检在第32天时的最终行为测试后，用二氧化碳窒息对动物实施安乐死。不进行尸检或进行组织采集。
研究设计的改变
原始研究设计使用热痛觉过敏作为检验测试化合物改善与泰素注射相关的疼痛的能力的主要参数。将治疗包含的内容设定在如在第28天时侧的从基线值下降20％。获自全部动物的值不足以满足本研究的需求。修改研究设计以使用机械性异常性疼痛作为测试参数。将阳性对照从吗啡改变成加巴喷丁，它更适合于这种测试参数。对异常性疼痛验证而言，这将测试天从第28天改成了第31天，而就测试制品功效而言，将第29天改变成了第32天。接受其他动物以完成足大小的指定。仅测试这些动物的机械性异常性疼痛。然后进一步修改本研究以除去作为3组预治疗的胡椒基丁醚(NTP-2024)。可以感觉到代谢抑制剂具有混乱的结果。因为本研究分两部分进行，所以来自3组的4只(4)动物接受代谢抑制剂且5只(5)动物接受盐水作为预治疗。治疗该组的结果作为单独的组(3组和3a组)用于数据分析。
一般健康状况和观察结果
接受泰素的全部动物在本研究过程的自始至终保持健康。动物体重增长并且未注意到临床发现。代谢抑制剂在给药后可能导致对大鼠的刺激，表现为发声、不适和/或一些面对笼交配的兴奋。
机械性异常性疼痛
使用两种方式ANOVA、然后使用Bonferroni事后检验分析组结果平均值与媒介物对照组的关系。使用配对t-检验检验剂量前和剂量后的每个组。加巴喷丁能够显著逆转治疗后的痛觉丧失(p＜0.0001)。异常性疼痛得分恢复至基线值。在5组中观察到NTP-2014显著的治疗效果(p＜0.0001)，其中数值与阳性对照加巴喷丁相当。
用代谢抑制剂预治疗的3组平均异常性疼痛得分(NTP-2024)为14.92g，而除去代谢抑制剂预治疗的得分为8.04g。用代谢抑制剂预治疗的异常性疼痛逆转是与应激诱发的止痛相关而非治疗效果的行为响应。在也用代谢抑制剂预治疗的媒介物对照组中显示了类似的响应。结果如图45中所示。
因此，本文所述的化合物(例如NTP-2014)在突触旁起作用并且可以给药以治疗神经性疼痛，而没有不需要的通常与γ-氨基丁酸能的化合物相关的副作用(例如因苯二氮杂
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类导致的镇静)。此外，预计用本文所述的化合物包括本文所述的布美他尼衍生物(包括其前体药物)治疗具有类似效果本。
实施例163
啮齿动物神经性疼痛模型
受试者
雄性CD-1小鼠(25-35g，Charles River)用于所有研究。使小鼠以5只的组寄居在树脂玻璃室内，可随意取食或饮水。将动物维持在12hr光照/黑暗循环(在7:00AM照明)的温度和适度受控动物寄居处中。在运抵时检验本研究中使用的动物的健康状态。仅使健康状态良好的动物适应实验室条件并且用于本研究。在动物饲养所的适应环境期限最少为7天。根据公关机构的指导原则并且根据采用的Guide for theCare and Use of Laboratory和National Institutes of Health发布的经批准的方案进行全部动物实验。
药物和注射
NTP提供了足量的NTP-2014和NTP-2026类似物与制备注射溶液的详细说明。将加巴喷丁(Gallipot，St.Paul，Minnesota)溶于生理盐水。使用具有30-号针头的1-mL注射器以10ml/kg体重的体积进行注射。在手术前测定动物体重，然后在第7天早晨(SNL测试后)测定动物体重。为了进行i.p.给药，牢固握住小鼠颈项并且在技师的后两根手指和手掌之间挤进尾部。使小鼠背部适当向后弯曲以基础腹部区。将针头通过皮肤和腹部肌肉组织插入恰好离开中线的腹腔。即刻使小鼠返回测试笼直到行为测试为止。
实验组
NTP2026(56，100和180mg/kg，i.p.)；NTP 2014(32，56和100mg/kg，i.p.)；加巴喷丁(100mg/kg，i.p.)；媒介物对照品(10％TPGS的苯甲酸甲酯缓冲液的溶液，i.p.)。
SNL手术
给予对大鼠描述的方法进行SNL手术(Kim和Chung，1992)并且对小鼠进行修改(Wang等人，2001)。用在O2中0.5％氟烷维持麻醉并且使用热水套维持体温。在对小鼠进行手术准备后，在L4-S2水平切开1-cm脊柱旁切口。暴露L5和L6脊神经并且使用4-0丝缝线紧密结扎。在背根神经节远端、但在纤维连接坐骨神经前进行结扎。然后封闭切口并且使动物恢复。从即将开始的测试中排除显示运动缺陷(例如爪拖曳或跛行步态)或难以显示随后的触觉超敏反应的动物(典型地低于10％的动物被排除)。通过测定使用一系列如下所述校准的von Frey丝探测的爪退缩阈值确定机械阈限。
行为试验
通过测定使用一系列校准的(使用对数标度0.02-2.34gm)vonFrey丝(“上下”法)、根据Chaplan等人(1994)所述探测爪退缩潜伏期确定有害感觉阈值并且使用Dixon(1980)非参数检验分析。将结果表示为平均退缩阈值。在手术前、第7天早晨且然后在测试药物给药后20-60分钟测定基线潜伏期/阈值。给药后的时间相当于这些化合物在轻打尾测定中的最大活性时间。
行为观察
NTP-2014和NTP-2026在神经性疼痛小鼠SNL模型中均产生剂量依赖性触觉超敏反应逆转。在高剂量组中注意到一些最轻的镇静作用。使用这些化合物未注意到其他明显毒性。加巴喷丁还在这种模型中产生了剂量依赖性活性，其中具有的镇静作用最轻并且在高剂量(100mg/kg，i.p.)下注意到了动作失调。结果如图46A-C中所示。
因此，本文所述的化合物(例如NTP-2014)在突触旁起作用并且可以给药以治疗神经性疼痛，而没有不需要的通常与γ-氨基丁酸能的化合物相关的副作用(例如因苯二氮杂类导致的镇静)。此外，预计用本文所述的化合物包括本文所述的化合物治疗具有类似效果。
实施例164
布美他尼类似物在缓解焦虑中的治疗功效
在如上所述的大鼠中使用恐惧强化的惊恐(FPS)检验试验几种布美他尼类似物在缓解焦虑中的治疗功效。
图26显示用如下布美他尼类似物之一治疗的大鼠中在测试当天时的差别评分(单独的惊恐-恐惧强化的惊恐)：布美他尼N，N-二乙基羟乙酰胺酯(称作2MIK053)；布美他尼甲基酯(称作3MIK054)；布美他尼N，N-二甲基羟乙酰胺酯(称作3MIK069-11)；布美他尼吗啉代乙基酯(称作3MIK066-4)；布美他尼pivaxetil酯(称作3MIK069-12)；布美他尼氰基甲基酯(称作3MIK047)；布美他尼二苄基酰胺(称作3MIK065)；或布美他尼3-(二甲基氨基丙基)酯(称作3MIK066-5)。媒介物是DMSO。正如可以从够图26中观察到的，给予大部分布美他尼类似物后得到的差别评分明显低于在给予单独的媒介物后观察到的结果，从而显示这些类似物可以有效地用于减轻焦虑。此外，观察到几种布美他尼类似物具有明显少于一般与呋塞米或布美他尼相关的利尿效应。
实施例165
成瘾疾病的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为成瘾疾病的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为成瘾疾病的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg任意一种所述的化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为海洛因成瘾的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg任意一种所述的化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为酒精成瘾的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg任意一种所述的化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
实施例166
焦虑症的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为焦虑症的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为成瘾疾病的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含40mg/kg任意一种所述的化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
实施例167
腹水的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为腹水的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米类似物(包括前体药物)或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为腹水的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg任意一种所述的化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为腹水的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为腹水的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为腹水的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为与腹水相关的癌症的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为与腹水相关的肿瘤的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
实施例168
青光眼的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为青光眼的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为眼内压增加的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为眼闭角型青光的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为新生血管性青光眼的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为开角型青光眼的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
实施例169
局部缺血的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为局部缺血的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为心肌局部缺血(心肌缺血)的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为肠缺血的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为肠系膜动脉缺血(急性肠系膜缺血)的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为肝缺血(急性肠系膜缺血)的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为脑缺血(脑局部缺血)的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
实施例170
偏头痛的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为偏头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为偏头痛变化形式的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为偏头痛性头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为偏头痛综合征的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为急性精神错乱性偏头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为具有先兆的偏头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为没有先兆偏头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为偏头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
诊断为处于偏头痛危险中的人体患者接受预防性治疗，包含给予药物组合物，该药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据偏头痛发作延迟和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为头痛医学史的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据疼痛复发延迟和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为偏头痛变化形式的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为偏头痛变化形式复发的延迟或预防医学史的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据偏头痛变化形式和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为偏头痛性头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为偏头痛性头痛医学史的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据偏头痛性头痛症状发作延迟、复发预防和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为颈部偏头痛综合征的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为处于颈部偏头痛综合征危险中的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据颈部偏头痛复发减少和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为急性精神错乱性偏头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为处于急性精神错乱性偏头痛危险中的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据急性精神错乱性偏头痛发作延迟、复发减少和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为具有先兆的偏头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为具有先兆的偏头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据具有先兆的偏头痛发作延迟或预防和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为没有先兆的偏头痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过预防性给予药物组合物治疗处于偏头痛危险中的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种化合物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述的任意一种化合物或其组合以预防偏头痛。根据减轻症状、副作用发生和预防偏头痛发作监测和治疗人体患者。
实施例171
神经性疼痛的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为神经性疼痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为糖尿病神经病变的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为神经性疼痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为神经性疼痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为糖尿病的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据糖尿病神经病变发作的延迟、糖尿病神经病变发生的预防和/或与糖尿病神经病变相关的症状减轻监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为带状疱疹后神经痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
实施例172
感受伤害性神经痛的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为感受伤害性神经痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
实施例173
带状疱疹后神经痛的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为带状疱疹后神经痛的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为带状疱疹的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为带状疱疹感染的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
实施例174
癫痫的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为癫痫的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物7-10天，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为癫痫症的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为癫痫性发作的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为癫痫发作的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为脑瘫(涉及癫痫的神经性疾病)的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为癫痫的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生并且能够通过监测活性剂血清水平的假稳态浓度监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为癫痫症的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为癫痫性发作的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为癫痫发作的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为脑瘫(涉及癫痫的神经性疾病)发作的人体患者，所述药物组合物包含本文所述的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含20mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
实施例175
具有至少一种肿瘤的患者的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为至少一种肿瘤的人体患者，所述药物组合物包含本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含10mg/kg本文所述布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的任意一种类似物或其组合(包括前体药物)。根据减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
实施例176
戒断综合征的治疗
可以通过给予药物组合物治疗诊断为已经停止可卡因使用和处于患有可卡因戒断综合征危险的可卡因成瘾的人体患者，所述药物组合物包含本文的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含40mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据戒断综合征减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为已经停止海洛因使用和处于患有可卡因戒断综合征危险的海洛因成瘾的人体患者，所述药物组合物包含本文的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含40mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据戒断综合征减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为已经停止奥施康定使用和处于患有奥施康定戒断综合征危险的阿片成瘾例如奥施康定成瘾的人体患者，所述药物组合物包含本文的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含40mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据戒断综合征减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
可以通过给予药物组合物治疗诊断为已经停止饮用乙醇和处于患有酒精戒断综合征危险的酒精中毒的人体患者，所述药物组合物包含本文的任意一种类似物或其组合。对人体患者每日口服给予药物组合物，其包含40mg/kg本文所述的任意一种类似物或其组合。根据戒断综合征减轻症状和/或副作用发生监测和治疗人体患者。
表17化合物命名/化学名/化学结构
Figure BDA0000088452220004311
Figure BDA0000088452220004321
Figure BDA0000088452220004331
Figure BDA0000088452220004351
尽管已经为清楚理解目的通过示例和实施例在一定程度上详细描述了本发明，但是显然可以在待批权利要求范围内实施一些改变和变型。指定药学、药理学、微生物学和/或相关领域的普通技术人员而言显而易见的用于实施本发明的上述方式的变型属于下列权利要求的范围。
本说明书中举出的全部公开文献(例如非专利文献)、专利申请公开文献和专利申请表示本发明所属技术领域普通技术人员的水平。将所有这种公开文献(例如非专利文献)、专利申请公开文献和专利申请引入本文参考，就如同将每篇公开文献、专利、专利申请公开文献或专利申请各自特别和分别引入参考一样。

Claims (191)

1.式IX的化合物：
Figure FDA0000088452210000011
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R6是烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R7是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R6和R7与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
条件是：
如果Z是氧或硫，则R7不存在；
如果Y是氧和Z是硫，则R6不是甲基；
如果Y是硫和Z是硫，则R6不是甲基或烷基氨基二烷基；
如果Y是氧和Z是氧，则R6不是甲基、乙基、丁基、氰基甲基、未取代的苄基、氯甲基、2，2，2-三氯乙基、乙基-N-吗啉基、N，N-二甲基-2-乙氨基、N，N-二甲基-3-丙氨基或(CH3)2C＝CHCH2CH2-(E)-(CH3)C＝CHCH2-；
如果Y是氧，Z是氮和R7是氢，则R6不是2-(4-哌嗪-1-基)乙基、3-吡啶基甲基、未取代的苄基或正丁基；
如果Y是氧和Z是氮，则R6和R7都不是未取代的苄基或乙基。
2.权利要求1的化合物，其中Y和Z是氧。
3.权利要求2的化合物，其中R6是辛基、癸基、异戊二烯基、2-氰基乙基、对-甲氧基苄基、间-甲氧基苄基、2-苯基乙基、4-苯基丁基、R-1-苯基乙基或S-1-苯基乙基。
4.权利要求1的化合物，其中Y是氧和Z是硫。
5.权利要求1的化合物，其中Y是硫和Z是硫。
6.权利要求1的化合物，其中Y是氧和Z是氮。
7.权利要求6的化合物，其中R7是氢和R6是乙基、2-(1-哌啶基)乙基或烷基氨基二烷基。
8.权利要求6的化合物，其中R6是烷基氨基二烷基且R7是甲基。
9.权利要求6的化合物，其中R6和R7与它们所连接的原子一起形成氮杂环丁烷环、吡咯烷环、哌啶环或吗啉环。
10.权利要求6的化合物，其中R6和R7与它们所连接的原子一起形成高哌啶环。
11.权利要求1的化合物，其中R6是烷芳氧基烷基。
12.药物组合物，包含权利要求1的化合物和药学可接受的赋形剂。
13.式X的化合物：
Figure FDA0000088452210000031
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R8是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R9是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R8和R9与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
R10是氢或烷基；
条件是：
如果Z是氧或硫，则R9不存在；
如果Z是氧和R8是氢，则R10不是氢或甲基；
如果Y是氧和Z是氧，则R8不是甲基、未取代的苄基、丁基或氰基甲基；
如果Y是氧，Z是氮和R9是氢，则R8不是氢、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基、3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基、2-(N-吗啉基)乙基、2-吡啶基甲基、3-吡啶基甲基、4-吡啶基甲基、2-(4-(2-氨基乙基)哌嗪-1-基)乙基或下式的磺内酰氨基：
Figure FDA0000088452210000032
如果Y是氧和Z是氮，则R8和R9都不是乙基或苄基；或
如果Y是氧和Z是氮，则R8和R9与它们所连接的氮原子一起不形成哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基或N-吗啉基。
14.权利要求13的化合物，其中Y和Z是氧。
15.权利要求14的化合物，其中R8是辛基、癸基、异戊二烯基、2-氰基乙基、对-甲氧基苄基、间-甲氧基苄基、2-苯基乙基、4-苯基丁基、R-1-苯基乙基、S-1-苯基乙基或2-(1-哌啶基)乙基。
16.权利要求13的化合物，其中Y是氧和Z是硫。
17.权利要求13的化合物，其中Y是硫和Z是硫。
18.权利要求13的化合物，其中Y是氧和Z是氮。
19.权利要求18的化合物，其中R9是氢且R8是苄基、甲基、乙基或烷基氨基二烷基。
20.权利要求18的化合物，其中R9是氢且R8是R-1-苯基乙基或S-1-苯基乙基。
21.权利要求18的化合物，其中R8是甲基和R9是苄基。
22.权利要求18的化合物，其中R8是烷基氨基二烷基且R9是甲基或烷基氨基二烷基。
23.权利要求13的化合物，其中R8是烷芳氧基烷基。
24.权利要求18的化合物，其中R8和R9与它们所连接的原子一起形成氮杂环丁烷环、吡咯烷环或哌啶环。
25.权利要求18的化合物，其中R8和R9与它们所连接的原子一起形成高哌啶环。
26.权利要求15、19、20、21、22或24之一所述的化合物，其中R10是氢。
27.权利要求13的化合物，其中Y是氧，Z是氧，R8是氢且R10是烷基。
28.权利要求27的化合物，其中所述烷基是甲基、乙基、正-丙基、正丁基、正-戊基、正-己基、正-庚基或正-辛基。
29.权利要求13的化合物，其中Y是硫，Z是氮和R8和R9与它们所连接的原子一起形成哌嗪、四氢嘧啶、四氢哒嗪、哌啶酮、四氢咪唑、吡唑烷、噻唑烷或异噻唑烷环。
30.权利要求13的化合物，其中Y是硫，Z是氮，R8和R9与它们所连接的原子一起形成哌嗪、四氢咪唑、吡唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、四氢嘧啶、四氢哒嗪、哌啶酮、吗啉和硫代吗啉，其中所述杂环的至少一个碳原子被至少一个烷基、环烷基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂环基、酰基、硫代酰基、磺酰基、磺酰胺、卤素，氰基、羟基、氨基、烷氧基、烯基或炔基取代基取代。
31.权利要求13的化合物，其中Y是硫，Z是氮且R8和R9与它们所连接的原子一起形成哌嗪、四氢嘧啶、四氢哒嗪、四氢咪唑或吡唑烷环，其中杂环烷基环内非Z的氮原子被烷基、环烷基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂环基、酰基、硫代酰基、磺酰基或磺酰胺取代基取代。
32.药物组合物，包含权利要求13的化合物和药学可接受的赋形剂。
33.治疗疾病的方法，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予有效量的式IX的化合物：
Figure FDA0000088452210000061
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧，硫或硒；
Z是氧，硫或氮；
R6是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；且
R7是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R6和R7与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R7不存在。
34.权利要求33的方法，其中Y和Z是氧。
35.权利要求34的方法，其中R6是辛基、癸基、异戊二烯基、2-氰基乙基、对-甲氧基苄基、间-甲氧基苄基、2-苯基乙基、4-苯基丁基、R-1-苯基乙基或S-1-苯基乙基。
36.权利要求34的方法，其中R6是氰基甲基。
37.权利要求33的方法，其中Y是氧且Z是硫。
38.权利要求33的方法，其中Y是硫且Z是硫。
39.权利要求33的方法，其中Y是氧且Z是氮。
40.权利要求39的方法，其中R6是氢且R7是苄基、乙基或3-(哌啶-1-基)丙基。
41.权利要求39的方法，其中R6是烷基氨基二烷基且R7是甲基或烷基氨基二烷基。
42.权利要求39的方法，其中R6和R7与它们所连接的原子一起形成氮杂环丁烷环、吡咯烷环、哌啶环或吗啉环。
43.权利要求39的方法，其中R6和R7与它们所连接的原子一起形成高哌啶环。
44.权利要求的化合物33，其中R6是烷芳氧基烷基。
45.治疗疾病的方法，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予有效量的式X的化合物：
Figure FDA0000088452210000081
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R8是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R9是氢、烷基、烷芳基、烷基氨基烷基或烷基杂环烷基；或
R8和R9与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R10是氢或烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R9不存在。
46.权利要求45的方法，其中Y和Z是氧。
47.权利要求46的化合物，其中R8是辛基、癸基、异戊二烯基、2-氰基乙基、对-甲氧基苄基、间-甲氧基苄基、2-苯基乙基、4-苯基丁基、R-1-苯基乙基、S-1-苯基乙基或2-(哌啶-1-基)乙基。
48.权利要求46的化合物，其中R8是氰基甲基。
49.权利要求45的方法，其中Y是氧和Z是硫。
50.权利要求45的方法，其中Y是氧且Z是硫。
51.权利要求45的方法，其中Y是氧且Z是氮。
52.权利要求51的方法，其中R9是氢和R8是苄基。
53.权利要求51的方法，其中R9是氢且R8是甲基。
54.权利要求51的方法，其中R9是氢且R8是乙基。
55.权利要求51的化合物，其中R9是氢且R8是R-1-苯基乙基或S-1-苯基乙基。
56.权利要求51的化合物，其中R8是甲基且R9是苄基。
57.权利要求51的化合物，其中R8是烷基氨基二烷基且R9是甲基或烷基氨基二烷基。
58.权利要求45的方法，其中R8是烷芳氧基烷基。
59.权利要求45的方法，其中R8和R9与它们所连接的原子一起形成氮杂环丁烷环、吡咯烷环或哌啶环。
60.权利要求51的方法，其中R8和R9与它们所连接的原子一起形成高哌啶环。
61.权利要求47、52、55、56、57或59之一的方法，其中R10是氢。
62.权利要求45的方法，其中Y是氧，Z是氧，R8是氢且R10是烷基。
63.权利要求62的方法，其中Y是氧，Z是氧，R8是氢且R10是丁基。
64.权利要求45的方法，其中Y是氧，Z是氧，R8是甲基且R10是烷基。
65.权利要求64的方法，其中Y是氧，Z是氧，R8是甲基且R10是丁基。
66.权利要求45的方法，其中Y是硫，Z是氮且R8和R9与它们所连接的原子一起形成哌嗪、四氢嘧啶、四氢哒嗪、哌啶酮、四氢咪唑、吡唑烷、噻唑烷或异噻唑烷环。
67.权利要求45的方法，其中Y是硫，Z是氮，R8和R9与它们所连接的原子一起形成哌嗪、四氢咪唑、吡唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、四氢嘧啶、四氢哒嗪、哌啶酮、吗啉和硫代吗啉，其中所述杂环的至少一个碳原子被至少一个烷基、环烷基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂环基、酰基、硫代酰基、磺酰基、磺酰胺、卤素，氰基、羟基、氨基、烷氧基、烯基或炔基取代基取代。
68.权利要求45的方法，其中Y是硫，Z是氮且R8和R9与它们所连接的原子一起形成哌嗪、四氢嘧啶、四氢哒嗪、四氢咪唑或吡唑烷环，其中杂环烷基环内非Z的氮原子被烷基、环烷基、芳烷基、芳基、杂芳基、杂环基、酰基、硫代酰基、磺酰基或磺酰胺取代基取代。
69.权利要求45的方法，其中Y是硫，Z是氮，R8是氢且R9是苄基。
70.权利要求45的方法，其中Y是硫，Z是氮，R8是氢且R9是乙基。
71.治疗疾病的方法，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予有效量的式XI-XIII的化合物：
或其药学可接受的盐；
其中：
Y是O、S或Se；
R11是H、OR12、SR12，其中R12是氢、烷基、芳烷基、芳基、烷基氨基二烷基、烷基羰基氨基二烷基、烷氧羰基烷基、烷基羰基氧基烷基、烷基醛、烷基酮基烷基、烷基酰胺、烷芳基酰胺、芳基酰胺、烷基铵基、烷基羧酸，烷基杂芳基、烷基羟基、生物相容性聚合物、例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、杂芳基、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲硫基烷基或甲硫基烷芳基，它们是未取代或取代的，或
R11是N，N-二烷基氨基、N，N-二烷芳基氨基、N，N-二芳基氨基、N-烷基-N-烷芳基氨基、N-烷基-N-芳基氨基、N-烷芳基-N-芳基氨基，它们是未取代或取代的；
R13是芳基、卤素，杂芳基、羟基、烷氧基、芳氧基或杂芳氧基，它们是未取代或取代的；且
R14和R15各自独立地是氢、烷基氨基二烷基、羰基烷基、羰基烷芳基、羰基芳基或羰基杂芳基。
72.权利要求71的方法，其中所述化合物是布美他尼甲基酯、布美他尼氰基甲基酯、布美他尼二苄基酰胺、布美他尼二乙基酰胺、布美他尼吗啉代乙基酯、布美他尼3-(二甲基氨基丙基)酯、布美他尼pivaxetil酯、布美他尼甲氧基(聚亚乙氧基) n-1-乙基酯、布美他尼苄基三甲基铵酸盐，布美他尼十六烷基三甲基铵酸盐，布美他尼[-C＝O-SH]硫代酸，布美他尼S-甲基硫酯、布美他尼S-氰基甲基硫酯、布美他尼S-乙基硫酯、布美他尼S-异戊基硫酯、布美他尼S-辛基硫酯、布美他尼S-苄基硫酯、布美他尼S-(吗啉代乙基)硫酯、布美他尼S-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、布美他尼S-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、布美他尼S-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、布美他尼S-pivaxetil硫酯、布美他尼S-propaxetil硫酯、布美他尼S-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、布美他尼[-C＝O-S--]苄基三甲基铵硫代酸盐和布美他尼[-C＝O-S-]十六烷基三甲基铵硫代酸盐，布美他尼[-C＝S-OH]硫代酸，布美他尼O-甲基硫酯、布美他尼O-氰基甲基硫酯、布美他尼O-乙基硫酯、布美他尼O-异戊基硫酯、布美他尼O-辛基硫酯、布美他尼O-苄基硫酯、布美他尼O-(吗啉代乙基)硫酯、布美他尼O-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、布美他尼O-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、布美他尼、O-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、布美他尼O-pivaxetil硫酯、布美他尼O-propaxetil硫酯、布美他尼O-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、布美他尼[-C＝S-O-]苄基三甲基铵硫代酸盐和布美他尼[-C＝S-O-]十六烷基三甲基铵硫代酸盐、布美他尼硫醛、布美他尼[-C＝S-SH]二硫代酸、布美他尼甲基二硫酯、布美他尼氰基甲基二硫酯、布美他尼乙基二硫酯、布美他尼异戊基二硫酯、布美他尼辛基二硫酯、布美他尼苄基二硫酯、布美他尼二苄基硫代酰胺、布美他尼二乙基硫代酰胺、布美他尼吗啉代乙基二硫酯、布美他尼3-(二甲基氨基丙基)二硫酯、布美他尼N，N-二乙基羟乙酰氨基二硫酯、布美他尼N，N-二甲基羟乙酰氨基二硫酯、布美他尼pivaxetil二硫酯、布美他尼propaxetil二硫酯、布美他尼甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基二硫酯、布美他尼苄基三甲基铵二硫代酸盐或布美他尼十六烷基三甲基铵二硫代酸盐。
73.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是氧，R11是2-(N-吗啉基)乙基氧基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
74.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是氧，R11是OR12，R12是2(-N，N-二乙基氨基)-2-氧代乙基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
75.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是氧，R11是N，N-二乙基氨基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
76.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是氧，R11是OR12，R12是2(-N，N-二甲基氨基)-2-氧代乙基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
77.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是氧，R11是OR12，R12是新戊酰氧基甲基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
78.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是氧，R11是N，N-二甲基氨基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
79.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是氧，R11是哌啶-1-基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
80.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是氧，R11是N-吗啉基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
81.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是氧，R11是3-(N，N-二甲基氨基)丙基氨基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
82.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是氧，R11是N-3-(N，N-二甲基氨基)丙基-N-甲基氨基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
83.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是硫，R11是N-四氢噁唑基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
84.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是硫，R11是N-四氢异噁唑基，R13是苯氧基和R14和R15是氢.
85.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是硫，R11是N-吗啉基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
86.权利要求71的式XI的化合物，其中Y是硫，R11是N-硫代吗啉基，R13是苯氧基且R14和R15是氢。
87.权利要求71的方法，其中所述化合物是呋塞米甲基酯、呋塞米氰基甲基酯、呋塞米二苄基酰胺、呋塞米二乙基酰胺、呋塞米吗啉代乙基酯、呋塞米3-(二甲基氨基丙基)酯、呋塞米pivaxetil酯、呋塞米甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基酯、呋塞米苄基三甲基铵酸盐、呋塞米十六烷基三甲基铵酸盐、呋塞米[-C＝O-SH]硫代酸、呋塞米S-甲基硫酯、呋塞米S-氰基甲基硫酯、呋塞米S-乙基硫酯、呋塞米S-异戊基硫酯、呋塞米S-辛基硫酯、呋塞米S-苄基硫酯、呋塞米S-(吗啉代乙基)硫酯、呋塞米S-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、呋塞米S-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、呋塞米S-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、呋塞米S-pivaxetil硫酯、呋塞米S-propaxetil硫酯、呋塞米S-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、呋塞米[-C＝O-S-]苄基三甲基铵硫代酸盐和呋塞米[-C＝O-S-]十六烷基三甲基铵硫代酸盐、呋塞米[-C＝S-OH]硫代酸、呋塞米O-甲基硫酯、呋塞米O-氰基甲基硫酯、呋塞米O-乙基硫酯、呋塞米O-异戊基硫酯、呋塞米O-辛基硫酯、呋塞米O-苄基硫酯、呋塞米O-(吗啉代乙基)硫酯、呋塞米O-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、呋塞米O-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、呋塞米O-N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、呋塞米O-pivaxetil硫酯、呋塞米O-propaxetil硫酯、呋塞米O-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、呋塞米[-C＝S-O-]苄基三甲基铵硫代酸盐和呋塞米[-C＝S-O-]十六烷基三甲基铵硫代酸盐、呋塞米硫醛、呋塞米[-C＝S-SH]二硫代酸、呋塞米甲基二硫酯、呋塞米氰基甲基二硫酯、呋塞米乙基二硫酯、呋塞米异戊基二硫酯、呋塞米辛基二硫酯、呋塞米苄基二硫酯、呋塞米二苄基硫代酰胺、呋塞米二乙基硫代酰胺、呋塞米吗啉代乙基二硫酯、呋塞米3-(二甲基氨基丙基)二硫酯、呋塞米N，N-二乙基羟乙酰氨基二硫酯、呋塞米N，N-二甲基羟乙酰氨基二硫酯、呋塞米pivaxetil二硫酯、呋塞米propaxetil二硫酯、呋塞米甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基二硫酯、呋塞米苄基三甲基铵二硫代酸盐或呋塞米十六烷基三甲基铵二硫代酸盐。
88.权利要求71的式XII的化合物，其中Y是氧，R11是OR12，R12是苄基，R13是氯且R14和R15都是氢。
89.权利要求71的式XII的化合物，其中Y是氧，R11是N，N-二乙基氨基，R13是氯和R14和R15都是氢。
90.权利要求71的式XII的化合物，其中Y是氧，R11是N，N-二苄基氨基，R13是氯且R14和R15都是氢。
91.权利要求71的式XII的化合物，其中Y是氧，R11是OR12，R12是2-苯基乙基，R13是氯且R14和R15都是氢。
92.权利要求71的式XII的化合物，其中Y是氧，R11是哌啶-1-基，R13是氯且R14和R15都是氢。
93.权利要求71的式XII的化合物，其中Y是氧，R11是N-吗啉基，R13是氯且R14和R15都是氢。
94.权利要求71的式XII的化合物，其中Y是氧，R11是3-(N，N-二甲基氨基)丙基氨基，R13是氯且R14和R15都是氢。
95.权利要求71的方法，其中所述化合物是吡咯他尼甲基酯、吡咯他尼氰基甲基酯、吡咯他尼二苄基酰胺、吡咯他尼二乙基酰胺吡咯他尼吗啉代乙基酯、吡咯他尼3-(二甲基氨基丙基)酯、吡咯他尼pivaxetil酯、吡咯他尼甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基酯、吡咯他尼苄基三甲基铵酸盐、吡咯他尼十六烷基三甲基铵酸盐、吡咯他尼[-C＝O-SH]硫代酸、吡咯他尼S-甲基硫酯、吡咯他尼S-氰基甲基硫酯、吡咯他尼S-乙基硫酯、吡咯他尼S-异戊基硫酯、吡咯他尼S-辛基硫酯、吡咯他尼S-苄基硫酯、吡咯他尼S-(吗啉代乙基)硫酯、吡咯他尼S-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、吡咯他尼S-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、吡咯他尼S-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、吡咯他尼S-pivaxetil硫酯、吡咯他尼S-propaxetil硫酯、吡咯他尼S-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、吡咯他尼[-C＝O-S-]苄基三甲基铵硫代酸盐、吡咯他尼[-C＝O-S-]十六烷基三甲基铵硫代酸盐、吡咯他尼[-C＝S-OH]硫代酸、吡咯他尼O-甲基硫酯、吡咯他尼O-氰基甲基硫酯、吡咯他尼O-乙基硫酯、吡咯他尼O-异戊基硫酯、吡咯他尼O-辛基硫酯、吡咯他尼O-苄基硫酯、吡咯他尼O-(吗啉代乙基)硫酯、吡咯他尼O-[3-(二甲基氨基丙基)]硫酯、吡咯他尼O-(N，N-二乙基羟乙酰氨基)硫酯、吡咯他尼、O-(N，N-二甲基羟乙酰氨基)硫酯、吡咯他尼O-pivaxetil硫酯、吡咯他尼O-propaxetil硫酯、吡咯他尼O-[甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基]硫酯、吡咯他尼[-C＝S-O-]苄基三甲基铵硫代酸盐，吡咯他尼[-C＝S-O-]十六烷基三甲基铵硫代酸盐、吡咯他尼硫醛、吡咯他尼[-C＝S-SH]二硫代酸，吡咯他尼甲基二硫酯、吡咯他尼氰基甲基二硫酯、吡咯他尼乙基二硫酯、吡咯他尼异戊基二硫酯、吡咯他尼辛基二硫酯、吡咯他尼苄基二硫酯、吡咯他尼二苄基硫代酰胺、吡咯他尼二乙基硫代酰胺、吡咯他尼吗啉代乙基二硫酯、吡咯他尼3-(二甲基氨基丙基)二硫酯、吡咯他尼N，N-二乙基羟乙酰氨基二硫酯、吡咯他尼N，N-二甲基羟乙酰氨基二硫酯、吡咯他尼pivaxetil二硫酯、吡咯他尼propaxetil二硫酯、吡咯他尼甲氧基(聚亚乙氧基)n-1-乙基二硫酯、吡咯他尼苄基三甲基铵二硫代酸盐或吡咯他尼十六烷基三甲基铵二硫代酸盐。
96.治疗疾病的方法，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予有效量的包含吡咯他尼一烷基酰胺、吡咯他尼一烷硫基酰胺的化合物或其药学可接受的盐。
97.权利要求96的方法，其中吡咯他尼一烷基酰胺是一苄基酰胺衍生物。
98.权利要求96的方法，其中吡咯他尼一烷基酰胺是一乙基酰胺衍生物。
99.权利要求96的方法，其中吡咯他尼一烷硫基酰胺是一苄基硫代酰胺衍生物。
100.权利要求96的方法，其中吡咯他尼一烷硫基酰胺是一乙基硫代酰胺衍生物。
101.治疗疾病的方法，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予有效量的式VII的化合物：
Figure FDA0000088452210000181
或其药学可接受的盐，
其中：
R3选自芳基、卤素、杂芳基、羟基、烷氧基、芳氧基和杂芳氧基，它们是未取代或取代的；
R4和R5各自独立地选自氢、烷基氨基二烷基、羰基烷基、羰基烷芳基、羰基芳基、羰基烷基杂芳基、羰基杂芳基及其盐；且
R6选自烷氧羰基烷基、烷基氨基羰基烷基、烷基氨基二烷基、烷基羟基、生物相容性聚合物例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲基氧基烷基杂芳基、甲硫基烷基、甲硫基烷芳基和甲硫基烷基杂芳基，它们是未取代或取代的。
102.治疗疾病的方法，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予有效量的式VIII的化合物：
Figure FDA0000088452210000191
或其药学可接受的盐或两性离子，
其中：
R7选自氢、烷氧羰基烷基、烷基氨基羰基烷基、烷基氨基二烷基、烷基羟基、生物相容性聚合物例如烷氧基(聚烷氧基)烷基羟基、聚乙二醇(PEG)、聚乙二醇酯(PEG酯)和聚乙二醇醚(PEG醚)、甲基氧基烷基、甲氧基烷芳基、甲基氧基烷基杂芳基、甲硫基烷基、甲硫基烷芳基和甲硫基烷基杂芳基，它们是未取代或取代的；且
X-是卤离子或阴离子部分；或
X-不存在。
103.权利要求102的方法，其中R7是氢。
104.治疗疾病的方法，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予有效量的式XIV的化合物：
Figure FDA0000088452210000201
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R16是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R17是氢、烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R16和R17与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R18和R19各自独立地是氢或烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R9不存在。
105.权利要求104的方法，其中所述化合物是下式的化合物：
Figure FDA0000088452210000211
Figure FDA0000088452210000221
或其药学可接受的盐。
106.治疗疾病的方法，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予有效量的式XV的化合物：
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R20是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R21是氢、烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R20和R21与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R22和R23各自独立地是氢、烷基、烯基、烷氧基、烷芳氧基烷基、烷芳基或烷基杂芳基。
107.权利要求106的方法，其中所述化合物是下式的化合物：
Figure FDA0000088452210000241
Figure FDA0000088452210000251
Figure FDA0000088452210000252
或其药学可接受的盐。
108.式X的化合物：
Figure FDA0000088452210000253
X
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R8是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R9是氢、烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基氨基烷基或烷基杂环烷基；或
R8和R9与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；且
R10是氢或烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R9不存在。
109.式IX的化合物：
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R6是氢、烷基、烯基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；且
R7是氢、烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基氨基二烷基或烷基杂环烷基；或
R6和R7与它们所连接的原子一起形成杂环烷基；
条件是如果Z是氧或硫，则R7不存在。
110.化合物，包括呋塞米癸基酯、呋塞米异戊二烯基酯、呋塞米对-甲氧基苄基酯、呋塞米苯乙基酯、呋塞米(R)-α-甲基苄基酯、呋塞米(S)-α-甲基苄基酯、呋塞米乙基酰胺、呋塞米N-哌啶基酰胺、呋塞米N-吗啉基酰胺、呋塞米3-(N，N-二甲基氨基丙基)酰胺、呋塞米3-(N，N-二甲基氨基丙基)-N-甲基酰胺、呋塞米哌啶基乙基酰胺、布美他尼二丁基氨基甲基酯、布美他尼二甲基酰胺、布美他尼苄基酰胺、布美他尼苄基甲基酰胺、(R)-布美他尼α-甲基苄基胺、(S)-布美他尼α-甲基苄基胺、布美他尼甲基酰胺、布美他尼乙基酰胺、布美他尼N-(3-(二甲基氨基)丙基)-N-甲基酰胺、(布美他尼N-哌啶基酰胺、布美他尼(3-(N，N-二甲基氨基丙基)酰胺、布美他尼N-吡咯烷基酰胺、(R)-布美他尼α-甲基苄基酯、(S)-布美他尼α-甲基苄基酯、布美他尼2-甲氧基苄基酯、布美他尼苯乙基酯、布美他尼苯丁基酯、布美他尼正辛基酯、布美他尼正癸基酯、布美他尼异戊二烯基酯、布美他尼对-甲氧基苄基酯；或药学可接受的盐。
111.权利要求102的化合物，其中式X的所述化合物是布美他尼二丁基氨基甲基酯、布美他尼二甲基酰胺、布美他尼苄基酰胺、布美他尼苄基甲基酰胺、(R)-布美他尼α-甲基苄基胺、(S)-布美他尼α-甲基苄基胺、布美他尼甲基酰胺、布美他尼乙基酰胺、布美他尼N-(3-(二甲基氨基)丙基)-N-甲基酰胺、(布美他尼N-哌啶基酰胺、布美他尼N-吗啉基酰胺、布美他尼(3-(N，N-二甲基氨基丙基)酰胺、布美他尼N-吡咯烷基酰胺、(R)-布美他尼α-甲基苄基酯、(S)-布美他尼α-甲基苄基酯、布美他尼2-甲氧基苄基酯、布美他尼苯乙基酯、布美他尼苯丁基酯、布美他尼正辛基酯、布美他尼正癸基酯、布美他尼异戊二烯基酯、布美他尼对-甲氧基苄基酯或药学可接受的盐。
112.权利要求103的化合物，其中式IX的所述化合物是呋塞米癸基酯、呋塞米异戊二烯基酯、呋塞米对-甲氧基苄基酯、呋塞米苯乙基酯、呋塞米(R)-α-甲基苄基酯、呋塞米(S)-α-甲基苄基酯、呋塞米乙基酰胺、呋塞米苄基酰胺、呋塞米N-哌啶基酰胺、呋塞米N-吗啉基酰胺、呋塞米3-(N，N-二甲基氨基丙基)酰胺、呋塞米3-(N，N-二甲基氨基丙基)-N-甲基酰胺、呋塞米哌啶基乙基酰胺或药学可接受的盐。
113.呋塞米N-吗啉基酰胺的制备方法，其包含：
(a)合并布美他尼和至少两种偶合剂，得到反应中间体；和
(b)使该反应中间体与吗啉反应，得到呋塞米N-吗啉基酰胺。
114.权利要求113的方法，其中至少两种偶合剂包含1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)和1-羟基苯并三唑(HOBt)。
115.式XVI的化合物：
Figure FDA0000088452210000281
或其药学可接受的盐。
116.药物组合物，包含权利要求115的化合物和药学可接受的赋形剂。
117.拮抗GABAA受体的方法，其包含给予包含有效量的式XVI的化合物或其药学可接受的盐的组合物：
Figure FDA0000088452210000291
118.治疗疾病的方法，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予包含有效量的式XVI的化合物或其药学可接受的盐的组合物：
119.治疗涉及GABAA受体的疾病的方法，其包含给予布美他尼衍生物。
120.权利要求的方法119，其中所述疾病是阿尔茨海默病、成瘾疾病、焦虑症、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、癫痫症、亨廷顿病、失眠症、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、伤害性疼痛、疼痛、帕金森病、人格障碍、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣或戒断综合征。
121.权利要求119的方法，其中所述GABAA受体包含α4亚单位。
122.权利要求119的方法，其中所述GABAA受体包含α5亚单位。
123.权利要求119的方法，其中所述GABAA受体包含α6亚单位。
124.拮抗GABAA受体的方法，其包含给予布美他尼衍生物。
125.权利要求的方法124，其中所述GABAA受体包含α4亚单位。
126.权利要求的方法124，其中所述GABAA受体包含α5亚单位。
127.权利要求的方法124，其中所述GABAA受体包含α6亚单位。
128.式XVII的化合物：
Figure FDA0000088452210000301
或其药学可接受的盐，
其中：
Y1是-(CH2)x-，其中x是0、1或2；
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；且
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子。
129.式XVIII的化合物：
Figure FDA0000088452210000311
或其药学可接受的盐，
其中：
Y2是-(CH2)x-，其中x是0、1或2；
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；且
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子。
130.式XIX的化合物：
Figure FDA0000088452210000312
或其药学可接受的盐，
其中：
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；且
R63是烷基、氰基烷基、芳基、杂芳基、-CH2-C(O)-N(R64)-R65或-CH2-O-C(O)-R66，其中R64、R65和R66各自独立地是烷基。
131.权利要求130的化合物，其中R63是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、氰基甲基、苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基或三嗪基。
132.权利要求130的化合物，其中R64、R65和R66独立地是甲基、乙基、丙基、丁基或戊基。
133.式XX的化合物：
Figure FDA0000088452210000321
或其药学可接受的盐，
其中：
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；且
R67是氢、羟基或氨基。
134.权利要求133的化合物，其中R67是氢。
135.权利要求133的化合物，其中R67是羟基。
136.权利要求133的化合物，其中R67是氨基。
137.式XXI的化合物：
Figure FDA0000088452210000331
或其药学可接受的盐，
其中：
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；
R68是-SO2-烷基或-N(R69)-R70；
R69是氢、芳基、杂芳基、环烯基、环烷基、杂环烷基、烷基环烯基、烷基环烷基、烷基芳基、烷基杂芳基或烷基杂环烷基；且
R70是氢或R69和R70与它们所连接的氮原子一起形成杂环烷基。
138.权利要求137的化合物，其中R68是甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基、丁磺酰基或戊磺酰基。
139.权利要求137的化合物，其中R68是-N(R69)-R70，其中：
R69是氢、苯基、环戊二烯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、环戊基、环己基、吡咯烷基、哌啶基、环戊基甲基甲基、苄基、哌啶基甲基、环戊二烯基甲基、吡咯基甲基、呋喃基甲基、噻吩基甲基、吡啶基甲基或吡咯烷基甲基。
140.权利要求137的化合物，其中R68是-N(R69)-R70，其中R70是氢。
141.权利要求137的化合物，其中R68是-N(R69)-R70，其中：
R69和R70与它们所连接的氮原子一起形成1-吗啉基。
142.式XXII的化合物：
Figure FDA0000088452210000341
或其药学可接受的盐，
其中：
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；
R71是羟基或-N(R73)-R74；
R72是卤素、芳基、芳基氨基、杂芳基氨基、杂环烷基、杂芳基、杂芳氧基、杂环烷氧基或烷硫基；且
R73和R74各自独立地是烷基。
143.权利要求142的化合物，其中R71是羟基。
144.权利要求142的化合物，其中R71是-N(R73)-R74，其中：
R73和R74各自独立地是甲基、乙基、丙基、丁基或戊基。
145.权利要求142的化合物，其中R72是氟、氯、溴、苯基氨基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡咯烷基、吗啉基、哌嗪基、吡咯基氧基、噻吩基氧基、吡啶基氧基、哌啶基氧基、吡咯烷基氧基、呋喃基氧基、吡啶基、哌啶基、甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁硫基或戊硫基。
146.式XXIII的化合物：
或其药学可接受的盐，
其中：
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；
R75是烷基、芳基、环烯基、环烷基、杂芳基、杂环烷基、环烷基烷基、杂芳基烷基或二烷基氨基烷基；且
R76是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基。
147.权利要求146的化合物，其中R75是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯基、环戊二烯基、环戊基、环己基、环庚基、吡咯烷基、哌啶基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基、二甲基氨基丙基、二甲基氨基乙基、环戊二烯基甲基、吡咯基甲基、呋喃基甲基、甲基噻吩基、吡啶基甲基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、苄基或吡啶基。
148.权利要求140的化合物，其中R76是氢、甲基、乙基、丙基、丁基或戊基。
149.式XXIV的化合物：
Figure FDA0000088452210000361
或其药学可接受的盐，
其中：
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；
R77是羟基或-N(R79)-R80；
R78是-N(R81)-R82或杂环烷基；
R79是烷基、烷芳基或烷基杂芳基；
R80和R81各自独立地是氢、烷基、烷芳基或烷基杂芳基；且
R82是氢、烷基、芳基或R81和R82与它们所连接的氮原子一起形成杂环烷基。
150.权利要求149的化合物，其中R77是羟基。
151.权利要求149的化合物，其中R77是-N(R79)-R80，其中：
R79是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯基、环戊二烯基、环戊基、环己基、环庚基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡咯烷基、哌啶基、吡啶基、苄基、环戊二烯基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基、二甲基氨基丙基、二甲基氨基乙基、呋喃基甲基、甲基噻吩基、吡咯基甲基或吡啶基甲基。
152.权利要求149的化合物，其中R77是-N(R79)-R80，其中：
R80是氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯基、环戊二烯基、环戊基、环己基、环庚基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡咯烷基、哌啶基、吡啶基、苄基、环戊二烯基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基、二甲基氨基丙基、二甲基氨基乙基、呋喃基甲基、甲基噻吩基、吡咯基甲基或吡啶基甲基。
153.权利要求149的化合物，其中R78是-N(R81)-R82，其中：
R81和R82各自独立地是氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯基或苄基。
154.权利要求149的化合物，其中R78是吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、吡咯基、噻吩基、呋喃基或硫代吗啉基。
155.权利要求149的化合物，其中R78是-N(R81)-R82，其中：
R81和R82与它们所连接的氮原子一起形成1-吡咯啉基、1-吡咯烷基、1-咪唑啉基、1-咪唑烷基、1-吡咯啉基、1-吡唑烷基、1-哌啶基、1-吗啉基、4-硫代吗啉基或1-哌嗪基。
156.式XXV的化合物：
Figure FDA0000088452210000381
或其药学可接受的盐，
其中：
R60是氢、烷基、芳烷基或杂芳基烷基；且
R83是卤素、芳基、杂芳基、芳基氨基、杂芳基氨基、芳氧基、杂芳氧基、芳硫基或杂芳硫基。
157.权利要求156的化合物，其中R83是氟、溴、苯基、吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、苯基氨基、呋喃基氨基、噻吩基氨基、吡咯基氨基、噁唑基氨基、噻唑基氨基、咪唑基氨基、吡唑基氨基、异噁唑基氨基、异噻唑基氨基、噁二唑基氨基、噻唑基氨基、噻二唑基氨基、吡啶基氨基、哒嗪基氨基、嘧啶基氨基、吡嗪基氨基、三嗪基氨基、苯氧基、呋喃基氧基、噻吩基氧基、吡咯基氧基、噁唑基氧基、噻唑基氧基、咪唑基氧基、吡唑基氧基、异噁唑基氧基、异噻唑基氧基、噁二唑基氧基、噻唑基氧基、噻二唑基氧基、吡啶基氧基、哒嗪基氧基、嘧啶基氧基、吡嗪基氧基、三嗪基氧基、苯基硫基、呋喃基硫基、噻吩基硫基、吡咯基硫基、噁唑基硫基、噻唑基硫基、咪唑基硫基、吡唑基硫基、异噁唑基硫基、异噻唑基硫基、噁二唑基硫基、噻唑基硫基、噻二唑基硫基、吡啶基硫基、哒嗪基硫基、嘧啶基硫基、吡嗪基硫基或三嗪基硫基。
158.式XXVI的化合物：
Figure FDA0000088452210000391
或其药学可接受的盐，
其中：
Y是氧、硫或硒；
Z是氧、硫或氮；
R61是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基；
R62是氢、低级烷基、低级烯基、烷芳基、烷基杂芳基、芳基、环烯基、环烷基、二烷基氨基烷基、杂环烷基或杂芳基或R61和R62与它们连接的氮原子一起形成4-8元环，其可以被取代或未被取代并且可以具有一个或多个杂原子；
R72是卤素，芳基、芳基氨基、杂芳基氨基、杂环烷基、杂芳基、杂芳氧基、杂环烷氧基或烷硫基；
R84是烯基、烷基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基环烯基、烷基环烷基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R85是氢、烯基、烷基、氰基烷基、卤代烷基、烷芳基、烷基杂芳基、烷基环烯基、烷基环烷基、烷基杂环烷基或烷基氨基二烷基；
R86是-N(R87)-R88、环烯基、环烷基或杂环烷基；且
R87和R88各自独立地是氢、烷基、烷芳基或烷基杂芳基或R87和R88与它们所连接的氮原子一起形成杂环烷基，
条件是如果Z是氧或硫，则R85不存在。
159.权利要求128、129、133、137、142或156所述的化合物，其中R60是氢。
160.权利要求128、129、133、137、142或156所述的化合物，其中R60是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、丁基、苄基、呋喃基甲基、甲基噻吩基、吡咯基甲基或吡啶基甲基。
161.权利要求128、129、130、133、142、146、149或158所述的化合物，其中R61和R62各自独立地是氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、苄基、苯基、萘基、环戊二烯基、环己二烯基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、二甲基氨基丙基、二乙基氨基丙基、二甲基氨基丁基、二乙基氨基丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基或三嗪基；或R61和R62与它们所连接的氮原子一起形成1-吡咯啉基、1-吡咯烷基、1-咪唑啉基、1-咪唑烷基、1-吡唑啉基、1-吡唑烷基、1-哌啶基、1-吗啉基、4-硫代吗啉基、1-高哌啶基或1-哌嗪基。
162.治疗疾病的方法，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该方法包含给予一种组合物，该组合物包含有效量的权利要求1-33、108-112、115、116和128-161任一项的化合物。
163.权利要求162的方法，其中所述化合物与选自布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的袢利尿剂相比具有增加的亲脂性。
164.权利要求163的方法，其中根据分配系数测量所述亲脂性。
165.权利要求162的方法，其中所述化合物与选自布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的袢利尿剂相比具有减少的利尿效果。
166.权利要求162的方法，其中所述化合物优选抑制基底外侧布美他尼-敏感性Na+K+Cl-协同转运蛋白(NKCC1)。
167.权利要求166的方法，其中NKCC2的抑制不超过对NKCC1的作用的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
168.权利要求162的方法，其中化合物是包含α4亚单位的GABAA受体的拮抗剂。
169.权利要求168的方法，其中包含α1亚单位的GABAA受体的拮抗作用不超过对包含α4亚单位的GABAA受体的作用的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
170.权利要求168的方法，其中所述化合物对包含α4亚单位的GABAA受体的有效浓度(EC50)不超过同一化合物对包含α1亚单位的GABAA受体的EC50的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
171.权利要求162的方法，其中化合物是包含α5亚单位的GABAA受体的拮抗剂。
172.权利要求171的方法，其中包含α1亚单位的GABAA受体的拮抗作用不超过对包含α5亚单位的GABAA受体的作用的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
173.权利要求171的方法，其中所述化合物对包含α5亚单位的GABAA受体的有效浓度(EC50)不超过同一化合物对包含α1亚单位的GABAA受体的EC50的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
174.权利要求162的方法，其中化合物是包含α6亚单位的GABAA受体的拮抗剂。
175.权利要求174的方法，其中包含α1亚单位的GABAA受体的拮抗作用不超过对包含α6亚单位的GABAA受体的作用的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
176.权利要求174的方法，其中所述化合物对包含α6亚单位的GABAA受体的有效浓度(EC50)不超过同一化合物对包含α1亚单位的GABAA受体的EC50的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
177.治疗疾病的组合物，所述疾病选自成瘾疾病、阿尔茨海默病、焦虑症、腹水、孤独症、双相情感障碍、癌症、抑郁症、角膜内皮营养不良、水肿、癫痫症、青光眼、亨廷顿病、失眠症、局部缺血、偏头痛、具有先兆的偏头痛、神经性疼痛、感受伤害性神经痛、伤害性疼痛、眼病、疼痛、帕金森病、人格障碍、带状疱疹后神经痛、精神病、精神分裂症、癫痫发作障碍、耳鸣和戒断综合征，该组合物包含有效量的权利要求1-30、102-106、109、110和112-160任一项的化合物。
178.权利要求177的组合物，其中所述化合物与选自布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的袢利尿剂相比具有增加的亲脂性。
179.权利要求178的组合物，其中根据分配系数测量所述亲脂性。
180.权利要求177的组合物，其中所述化合物与选自布美他尼、呋塞米、吡咯他尼、阿佐塞米和托拉塞米的袢利尿剂相比具有减少的利尿效果。
181.权利要求177的组合物，其中所述化合物优选抑制基底外侧布美他尼-敏感性Na+K+C1-协同转运蛋白(NKCC1)。
182.权利要求的181的组合物，其中NKCC2的抑制不超过对NKCC1的作用的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
183.权利要求177的组合物，其中化合物是包含α4亚单位的GABAA受体的拮抗剂。
184.权利要求183的组合物，其中包含α1亚单位的GABAA受体的拮抗作用不超过对包含α4亚单位的GABAA受体的作用的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
185.权利要求183的组合物，其中所述化合物对包含α4亚单位的GABAA受体的有效浓度(EC50)不超过同一化合物对包含α1亚单位的GABAA受体的EC50的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
186.权利要求177的组合物，其中化合物是包含α5亚单位的GABAA受体的拮抗剂。
187.权利要求186的组合物，其中包含α1亚单位的GABAA受体的拮抗作用不超过对包含α5亚单位的GABAA受体的作用的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
188.权利要求186的组合物，其中所述化合物对包含α5亚单位的GABAA受体的有效浓度(EC50)不超过同一化合物对包含α1亚单位的GABAA受体的EC50的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
189.权利要求177的组合物，其中化合物是包含α6亚单位的GABAA受体的拮抗剂。
190.权利要求189的组合物，其中包含α1亚单位的GABAA受体的拮抗作用不超过对包含α6亚单位的GABAA受体的作用的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
191.权利要求189的组合物，其中所述化合物对包含α6亚单位的GABAA受体的有效浓度(EC50)不超过同一化合物对包含α1亚单位的GABAA受体的EC50的50％、优选不超过25％、更优选不超过15％。
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