CN101346375A - 调节门离子通道用组合物和方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及式(1)表示的吡咯并异喹啉化合物，其中R3优选地是羟基，南环优选地是苯环。这些化合物和其药学可接受的盐用于调节门离子通道，以治疗疼痛、炎性疾病、神经紊乱或与生殖泌尿系统或胃肠系统有关的疾病。

Description

调节门离子通道用组合物和方法
相关申请
本申请要求2005年11月23日提交的美国临时申请No.60/739,600，名称为“调节门离子通道用组合物和方法”，代理人标签NoPCI-034-1的优先权。全部本说明书中提到的任何专利，专利申请和参考文献的内容在此全部引入作为参考。
技术领域
本发明涉及调节门离子通道活性的组合物和方法以及其用途。
背景
哺乳动物细胞膜对结构完整性和许多细胞和组织的活性是重要的。特别重要的研究反式薄膜门离子通道，其起到直接和间接控制多种药理学，生理学和细胞代谢过程的作用已经识别出多种门离子通道，并研究测定其在细胞功能中的作用。
门离子通道涉及接受，集成，转换，实施和传输细胞例如神经或肌细胞中信号。门离子通道可以决定薄膜易兴奋性。门离子通道还可以影响薄膜的剩余电位，动作电位的波形和频率和兴奋阈。门离子通道通常表达于电兴奋细胞，例如神经神经元细胞，并且是多亚基体(multimeric)。还可以在不可兴奋细胞(例如脂肪细胞或肝细胞)中发现门离子通道，在其中它们可以起例如信号转换作用。
多种迄今识别的门离子通道是对例如调制电压，温度，化学环境，pH值，配体浓度和/或机械刺激敏感的通道。具体调节剂的实施例包括：ATP，辣椒素，神经递质(例如，乙酰胆碱)，离子，例如Na+，Ca+，K+，Cl-，H+，Zn+，Cd+和/或缩氨酸，例如，FMRF。对这些刺激敏感的门离子通道实例是DEG/ENaC，TRPV和P2X基因超序列的成分。
DEG/ENaC基因超序列的成分表现出高度功能不均匀性，具有宽组织分布，其包括运输上皮以及神经兴奋性组织。DEG/ENaC蛋白质是薄膜蛋白质，其特征为两种跨膜结构域(transmembranes panning domains)，细胞内的N和C末端以及富有半胱氨酸的细胞外回路。根据其在细胞中功能，DEG/ENaC通道在构成上是有效的，如上皮细胞钠通道(ENaC)，其涉及钠动态平衡，或由机械刺激如假定C.elegans degnerins活化，或被配体例如缩氨酸(和得自庭园大蜗牛的FaNaC情况一样，其是FMRF酰胺缩氨酸活化通路并涉及神经传递)，或被质子活化，如酸感应离子通道(ASICs)情况下。该基因序列的哺乳动物成分迄今已知为αENaC(也称为SCNN1A或scnn1A)，βENaC(也称为SCNN1B或scnn1B)，γENaC(也称为SCNN1G或scnn1G)，δENaC(也称为ENaCd，SCNN1D，scnn1D dNaCh)，ASIC1a(也称为ASIC，ASIC1，BNaC2，hBNaC2，ASICalpha，ACCN2和Accn2)，ASIC1b(也称为ASICbeta)，ASIC2a(也称为BNC1，MDEG1，BNaC1和ACCN1)，ASIC2b(也称为MDEG2，ASIC2b)，ASIC3(也称为hASIC3，DRASIC，TNaC1，SLNAC1，ACCN3和Accn3)，ASIC4(也称为BNaC4，SPASIC，ACCN4和Accn4)，BLINaC(也称为hINaC，ACCN5和Accn5)，和hINaC。近来关于这些基因超序列的综述参见Kellenberger，S.Schild，L.(2002)Physiol.Rev.82：735，此处引入作为参考。
目前已知七种P2X基因超序列成分；P2X1(也称为P2RX1)，P2X2(也称为P2RX2)，P2X3(也称为P2RX3)，P2X4(也称为P2RX4)，P2X5(也称为P2RX5)，P2X6(也称为P2RX6)和P2X7(也称为P2RX7)。P2X蛋白质结构类似于ASIC蛋白质结构，它们包含两个跨膜结构域，细胞内N和C末端以及富有半胱氨酸的细胞外回路。全部P2X受体开放响应释放细胞外ATP，并且可渗透较小离子，并具有一些明显钙渗透性。P2X受体大量分布于神经原，神经胶质，上皮，内皮，骨骼，肌肉和组织。近来对于基因超序列的综述，参见North，R.A.(2002)Physiol.Rev.82：1013，此处引入作为参考。
表达于感觉神经元对辣椒中刺激性成分有反应产生烧灼痛的受体是辣椒素(TRPV或vanilloid)受体，表示为TRPV1(也称为VR1，TRPV1alpha，TRPV1beta)。TRPV1受体形成非选择性阳离子通路，其被辣椒素和resiniferatoxin(RTX)以及热毒(＞43℃)活化，具有被质子例如H+离子增强的唤起反应。酸pH值也能够引发类似脊神经后根神经节中天然质子敏感电流的缓慢钝化电流。虽然主要在第一级感觉神经元中，也在多种脑核和脊髓中发现TRPV1的表达(Physiol.Genomics 4：165-174，2001)。
两种结构上相关受体，TRPV2(也称为VRL1和VRL)和TRPV4(也称为VRL-2，Trp12，VROAC，OTRPC4)不响应辣椒素，酸或中等热量，而是被高温活化(Caterina M.J.，等人(1999)Nature.398(6726)：436-41)。此外，该受体序列例如TRPV或vanilloid序列包含ECAC-1(也称为TRPV5和CAT2，CaT2)和ECAC-2(也称为TRPV6，CaT，ECaC，CAT1，CATL和OTRPC3)受体，其是钙选择性通路(Peng，J.B.，等人(2001)Genomics 76(1-3)：99-109)。近来对于TRPV(vanilloid)受体的综述参见Szallasi，A.和Blumberg，P.M.(1999)Pharmacol.Rev.51：159，此处引入作为参考。
门离子通道的成分性能响应多种刺激例如化学(例如离子)，热和机械刺激，并且其位置贯穿身体，例如脊神经后根神经节和三叉神经节中较小直径第一级感觉神经元，此外得自活体外和活体内模型数据提示这些通道多种神经病，紊乱(disorders)和老化。例如，已经证明小鼠ASIC2a沟道被相同变异例如导致Celegans中神经退化活化。此外，这些受体被细胞外质子例如H+浓度增加活化。通过注入低pH值的溶液进入皮肤或肌肉，以及延长真皮内注入低pH值的溶液形成细胞外pH值的改变，其模仿慢性疼痛的痛觉过敏。此外，转基因的老鼠，例如ASIC2a，ASIC3，P2X3转基因的老鼠全部具有改进对有害和非有害刺激物反应。因此，门离子通道的生物物理学，解剖学和药理学性能与其涉及伤害感受性一致。
研究表明ASICs在疼痛，神经病和紊乱，胃肠疾病和紊乱，泌尿生殖器疾病和紊乱和炎症中起作用。例如，已经表明ASICs在痛觉中起作用(Price，M.P.等人，Neuron.2001；32(6)：1071-83；Chen，C.C.等人，Neurobiology 2002；99(13)8992-8997)，包括内脏和身体疼痛(Aziz，Q.，Eur.J.Gastroenterol.Hepatol.2001；13(8)：891-6)；伴随心脏局部缺血的胸痛(Sutherland，S.P.等人(2001)Proc NatlAcad Sci USA 98：711-716)，和慢性痛觉过敏(Sluka，K.A.等人，Pain.2003；106(3)：229-39)。中央神经原中ASICs已经表明可能有助于与脑局部缺血和癫痫症有关的神经神经元细胞死亡(Chesler，M.，Physiol.Rev.2003；83：1183-1221；Lipton，P.，Physiol.Rev.1999；79：1431-1568)。ASICs也表明有助于恐惧老化，突触可塑性，记忆和复原的神经机制(Wemmie，J.等人，J.Neurosci.2003；23(13)：5496-5502；Wemmie，J.等人，Neuron.2002；34(3)：463-77)。ASICs已经表明涉及炎症相关持久疼痛和发炎肠(Wu，L.J.等人，J.Biol.Chem.2004；279(42)：43716-24；Yiangou，Y.，等人，Eur.J.Gastroenterol.Hepatol.2001；13(8)：891-6)，和胃肠郁滞(Holzer，Curr.Opin.Pharm.2003；3：618-325)。近代人类研究表明ASICs是酸引发疼痛的基本传感器(Ugawa等人，J.Clin.Invest.2002；110：1185-90；Jones等人，J.Neurosci.2004；24：10974-9)。此外，在Drosophila中ASICs也被认为在配子发育和早期胚胎发育中起作用(Darboux，I.等人，J.Biol.Chem.1998；273(16)：9424-9)，内脏中underlie mechanosensory功能(Page，A.J.等人Gastroenterology.2004；127(6)：1739-47)，已经表明涉及内分泌腺(Grunder，S.等人，Neuroreport.2000；11(8)：1607-11)。因此，调节这些门离子通道的化合物可用于处理该疾病和紊乱。
发明概述
一个方面中，本发明提供了一种式1，式2，式3，式4或式5的化合物，以及选自下列的化合物：5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-苯基-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，3-二甲基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；8-乙基-5-(2-甲氧基-苯基)-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；5-(2-乙氧基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟.
一个方面中，本发明提供了一种调节门离子通道活性的方法，包括接触表达门离子通道细胞与有效量本发明化合物。
本发明另一个实施方式中，接触细胞与有效量本发明化合物抑制门离子通道活性。又一个实施方式中，门离子通道由选自DEG/ENaC，P2X和TRPV基因超序列的至少一种亚组组成。另一个实施方式中，门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：ENaC，ENaC，ENaC，ENaC，ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3，ASIC4，BLINaC，hINaC，P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6，P2X7，TRPV1，TRPV2，TRPV3，TRPV4，TRPV5和TRPV6。另一个实施方式中，门离子通道是同源多聚体(homomultimeric)。又一个实施方式中，门离子通道是异源多聚体(heteromultimeric)。另一个实施方式中，DEG/ENaC门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：ENaC，ENaC，ENaC，ENaC，BLINaC，hINaC，ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和ASIC4。另一个实施方式中，DEG/ENaC门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和ASIC4。另一个实施方式中，门离子通道包含ASIC1a和/或ASIC3。另一个实施方式中，P2X门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6和P2X7。另一个实施方式中，TRPV门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：TRPV1，TRPV2，TRPV3，TRPV4，TRPV5和TRPV6。另一个实施方式中，异源多聚门离子通道包括下列门离子通道的组合：αENaC，βENaC γENaC；αENaC，βENaC和δENaC；ASIC1a和ASIC3；ASIC1b和ASIC3；ASIC2a和ASIC3；ASIC2b和ASIC3；ASIC1a，ASIC2a和ASIC3；P2X1和P2X2；P2X1和P2X5；P2X2和P2X3；P2X2和P2X6；P2X4和P2X6；TRPV1和TRPV2；TRPV5和TRPV6；和TRPV1和TRPV4。另一个实施方式中，异源多聚体门离子通道包括下列门离子通道的组合：ASIC1a和ASIC2a；ASIC2a和ASIC2b；ASIC1b和ASIC3；和ASIC3和ASIC2b。
本发明另一个实施方式中，门离子通道的活性与疼痛有关。又一个实施方式中，门离子通道的活性与发炎性疾病有关。再一个实施方式中，门离子通道的活性与神经紊乱有关。
另一个实施方式中，该疼痛选自皮肤疼痛，身体疼痛，内脏疼痛和神经性疼痛。再一个实施方式中，该疼痛是急性疼痛或慢性疼痛。又一个实施方式中，皮肤疼痛与损伤，外伤，割伤，裂伤，刺伤，烧伤，外科手术伤口，感染或急性炎症有关。另一个实施方式中，身体疼痛与肌骨胳和连接系统的损伤、疾病或紊乱有关。再一个实施方式中，损伤，疾病或紊乱选自挫伤，骨折，关节炎，牛皮癣，湿疹和缺血性心脏病。又一个实施方式中，其中内脏疼痛与循环系统，呼吸系统，胃肠系统或生殖泌尿系统的损伤，疾病或紊乱有关。另一个实施方式中，循环系统的疾病或紊乱选自缺血性(ischaemic)心脏病，心绞痛，急性心肌梗塞，心脏心律不齐，静脉炎，间歇性跛行，曲张静脉和痔。再一个实施方式中，呼吸系统的疾病或紊乱选自哮喘，呼吸道感染，慢性支气管炎和肺气肿。又一个实施方式中，胃肠系统的疾病或紊乱选自胃炎，十二指肠炎，过敏性肠综合征，结肠炎，克罗恩病，胃肠返流疾病，溃疡和憩室炎。
另一个实施方式中，生殖泌尿系统的疾病或紊乱选自膀胱炎，尿路感染，肾小球肾炎(glomuerulonephritis)，多囊肾疾病，肾结石和生殖泌尿系统癌症。再一个实施方式中，其中身体疼痛选自关节痛，肌肉痛，慢性腰部疼痛，幻肢痛，癌症伴随疼痛，牙疼，纤维肌痛，自发疼痛紊乱，慢性非特定疼痛，慢性骨盆疼痛，后作用疼痛和关联痛。又一个实施方式中，神经性疼痛与神经系统的损伤，疾病或紊乱有关。另一个实施方式中，神经系统的损伤，疾病或紊乱选自神经痛，神经病，头痛，偏头痛，心因性疼痛，慢性头部疼痛和脊髓损伤。
本发明另一个实施方式中，门离子通道的活性选自肌骨胳和结缔组织系统，呼吸系统，循环系统，生殖泌尿系统，胃肠系统或神经系统的发炎性疾病。另一个实施方式中，肌骨胳和结缔组织系统的发炎性疾病选自关节炎，牛皮癣，肌炎(myocitis)，皮肤炎和湿疹。再一个实施方式中，呼吸系统的发炎性疾病选自哮喘，支气管炎，窦炎，咽炎，喉炎，气管炎，鼻炎，囊性纤维化，呼吸道感染和急性呼吸困难综合征。又一个实施方式中，循环系统的发炎性疾病选自脉管炎，血尿并发症状，动脉粥样硬化，动脉炎，静脉炎，心脏炎和冠心病。另一个实施方式中，胃肠系统的发炎性疾病选自发炎内脏紊乱，溃疡性结肠炎，克罗恩病，憩室炎，病毒感染，细菌传染，消化性溃疡，慢性肝炎，齿龈炎，牙周炎(periodentitis)，口腔炎，胃炎和胃肠返流疾病。再一个实施方式中，生殖泌尿系统的发炎性疾病选自膀胱炎，多囊肾疾病，肾炎的并发症状，尿路感染，胱氨酸症，前列腺炎，输卵管炎，子宫内膜异位症和泌尿生殖器癌症。
另一个实施方式中，神经紊乱选自精神分裂症，双极紊乱，抑郁症，阿尔茨海默氏症，癫痫症，多发性硬化，肌萎缩性侧索硬化，中风，成瘾，脑缺血，神经病，视网膜色素退化，青光眼，心脏心律不齐，带状疱疹，亨廷顿氏舞蹈病，帕金森氏症，焦虑紊乱，恐慌紊乱，恐惧症，焦虑癔症(hyteria)，普通焦虑紊乱和神经病。
另一个方面中，本发明提供了一种患者需要的治疗疼痛方法，包括为患者施用有效量的本发明化合物。一个实施方式中，患者是哺乳动物。再一个实施方式中，哺乳动物是人。
又一个实施方式中，疼痛选自皮肤疼痛，身体疼痛，内脏疼痛和神经性疼痛。再一个实施方式中，该疼痛是急性疼痛或慢性疼痛。
另一个方面中，本发明提供了一种患者需要的治疗发炎性疾病方法，包括为患者施用有效量的本发明化合物。一个实施方式中，患者是哺乳动物。再一个实施方式中，哺乳动物是人。
又一个实施方式中，发炎性疾病是肌骨胳和结缔组织系统，呼吸系统，循环系统，生殖泌尿系统，胃肠系统或神经系统的发炎性疾病。
另一个方面中，本发明提供了一种患者需要的治疗神经紊乱方法，包括施用有效量本发明化合物。一个实施方式中，患者是哺乳动物。再一个实施方式中，哺乳动物是人。
又一个实施方式中，神经紊乱选自精神分裂症，双极紊乱，抑郁症，阿尔茨海默氏症，癫痫症，多发性硬化，肌萎缩性侧索硬化，中风，成瘾，脑缺血，神经病，视网膜色素退化，青光眼，心脏心律不齐，带状疱疹，亨廷顿氏舞蹈病，帕金森氏症，焦虑紊乱，恐慌紊乱，恐惧症，焦虑癔症(hyteria)，普通焦虑紊乱和神经病。
另一个方面中，本发明提供了一种患者需要的治疗与泌尿生殖器和/或胃肠系统有关的疾病或紊乱的方法，包括为患者施用有效量的本发明化合物。另一个实施方式中，患者是哺乳动物。再一个实施方式中，哺乳动物是人。
又一个实施方式中，胃肠系统的疾病或紊乱选自胃炎，十二指肠炎，过敏性肠综合征，结肠炎，克罗恩病，溃疡和憩室炎。另一个实施方式中，生殖泌尿系统的疾病或紊乱选自膀胱炎，尿路感染，肾小球肾炎，多囊肾疾病，肾结石和生殖泌尿系统癌症。
本发明另一个实施方式中，方法进一步包括施用辅助剂组合物。又一个实施方式中，其中辅助剂成分选自阿片类镇痛剂，非阿片类镇痛剂，局部麻醉剂，皮质类甾醇，非甾体的抗炎药物，非选择性的COX抑制剂，非选择性COX2抑制剂，选择性COX2抑制剂，镇癫痫剂，巴比妥类药物，抗抑郁剂，大麻和局部镇痛剂。
附图简要说明
附图1A，1B和1C图解了化合物E，F和G对实施例1中所述hASIC1a活性的抑制作用剂量响应曲线。用hASIC1a和细胞转染的HEK293细胞暴露于没有和存在增加浓度化合物E，F或G的酸性缓冲液。通过利用钙选择性荧光染料，测量细胞内钙变体，确定门通路活性。化合物E，F和G剂量依赖抑制酸引发hASIC1a活性。
附图2A和2B图解了化合物A和H对酸引发峰值内部电流的抑制作用，其中内部电流是在用小鼠ASIC1a或小鼠ASIC3转染的HEK293中引起的，如实施例2中所述。存在和没有增加浓度化合物A或化合物H，利用衬片夹紧方法(电压钳模式)的整个细胞结构记录酸引发内部电流。化合物A和H剂量依赖抑制酸引发rASIC1a和rASIC3活性。
附图3图解了CHO细胞中，化合物A对酸唤起稳定转染人类ASIC1a活性的抑制作用。附图3A展示了化合物A和基准化合物氨氯吡脒对pH值诱发响应尺寸的剂量依赖作用。该实例中，通过测量响应曲线下面积(总电荷传送)，并校正至控制响应，测定pH值唤起响应的尺寸。附图3B描绘了由pH值6.8-缓冲溶液(得自pH值7.4)存在或没有化合物A(3μM)唤起的hASIC1a电流(整个细胞电压钳，-60mV)实例。
附图4A和4B图解了化合物A对酸引发重组细胞同数的hASIC1a(附图4A)和异数hASIC1a+3(附图4B)通路活性的抑制作用，如实施例2中所述。用hASIC1a单独或转染HEK293细胞，或用hASIC1a和hASIC3共转染。存在和没有化合物A(10μM)，利用衬片夹紧方法(电压钳模式)的整个细胞结构，记录酸引发内部电流。
附图5A和5B图解了化合物A对酸引发重组细胞同数的hASIC1a(附图5A)和异数hASIC1a+3(附图5B)通路活性的抑制作用，如实施例3中所述。利用两种电极电压夹紧方法，存在和没有化合物A(30μM)，从爪蟾卵母细胞记录酸引发电流。用hASIC1a编码cDNA单独微注入卵母细胞，或用hASIC1a和hASIC3 encoding cDNA共注入。这些数据表明化合物A有效地调节这些的门离子通道的活性。
附图6A和6B图解了化合物A(图6A)和H(图6B)对从原始培养中小鼠脊神经后根神经节记录的天然质子栅电流的抑制作用，如实施例4中所述。利用衬片夹紧方法(电压钳模式)的整个细胞结构，存在和没有化合物A(1μM)或化合物H(1μM)，记录这些内源的质子活化内部电流。这些数据表明化合物A和H可以封闭天然ASIC反应。
附图7A和7B图解了化合物A(图7A)和H(图7B)对从原始培养中小鼠脊神经后根神经节神经原记录的酸感应作用电位产生的抑制作用，如实施例4中所述。利用衬片夹紧方法(电流夹紧模式)的整个细胞结构，存在和没有化合物A(1μM)或化合物H(1μM)，记录酸唤起动作电位。附图7A和7B展示了化合物A和H降低分别由pH值6.5和6.8引发的动作电位发放速度。
附图8图解了不同浓度化合物A对甲醛液引发小鼠中疼痛的作用。附图8A描绘了内足底(intraplantar)注入甲醛液后，随时间的总疼痛特性(例如畏缩，舔，咬)，附图8B展示了舔和咬事件的数量。这些结果表明化合物A产生小鼠中疼痛行为的剂量依赖减少。
附图9描绘了化合物A对甲醛液引发疼痛的剂量依赖作用。附图9A是化合物A对甲醛液测试的相IIa中总疼痛得分(附图8A)的化合物A剂量响应关系。疼痛得分减少一半的有效剂量(ED50)是12mg/kg。附图9B表明化合物给药1.5小时后，化合物A和等离子体水平之间的线性关系。
附图10A和10B图解了化合物B和H分别对小鼠甲醛液测试中自发化学引发疼痛的作用，如实施例5中所述。这些结果表明两种化合物产生用畏缩行为评估的疼痛强度的剂量依赖减小。
附图11A，11B和11C图解了化合物A，化合物H和吗啡分别对小鼠中发炎疼痛的作用，如实施例6中所述。通过将complete Freund’sadjucant(CFA)注入雌鹿爪引发炎症。这些结果表明化合物A和H产生疼痛强度的剂量依赖减小，并用双足平衡法(incapacitance)测量计测量nocifensive行为(后爪重量具有差异)。
附图12图解了慢性发炎疼痛的CFA模型中，化合物A的剂量依赖止痛作用：与媒介物治疗的小鼠相比，由化合物A CFA引发热痛觉过敏的活体内剂量依赖减小。某模型中，基准化合物吗啡的相对高剂量(6mg/kg)和抗炎吲哚酸(30mg/kg)是完全有效的。
附图13A和13B图解了化合物J和K对hASIC1a活性的抑制作用剂量响应曲线，如实施例1中所述。用hASIC1a和细胞转染的HEK293细胞暴露于没有和存在增加浓度化合物J或K的酸性缓冲液。通过利用钙选择性荧光染料，测量细胞内钙变体，确定门通路活性。化合物E，F和G剂量依赖抑制酸引发hASIC1a活性。
附图14A和14B图解了化合物J(图14A)和K(图14B)对实施例2中从CHO细胞表达hASIC1a记录的质子栅电流的抑制作用。利用衬片夹紧方法(电压钳模式)的整个细胞结构，存在和没有化合物J(1μM)或化合物K(1μM)，记录这些内源的质子活化内部电流。
发明详述
本发明至少部分基于识别可用于调制门离子通道活性的化合物。门离子通道涉及接受，实施和传输细胞(例如电兴奋细胞，例如神经或肌细胞)中信号。门离子通道可以决定薄膜易兴奋性(例如细胞响应刺激并转化为感官冲动的性能)。门离子通道还可以影响薄膜的剩余电位，动作电位的波形和频率和兴奋阈。门离子通道通常表达于电兴奋细胞，例如细胞，并是多亚基体的；它们可以形成同源多聚体(例如由一种类型亚组构成)，或异源多聚体结构(例如由多种亚组构成)。还可以在不可兴奋细胞(例如脂肪细胞或肝细胞)中发现门离子通道，在其中它们可以起例如信号转换作用。
本发明关注的门离子通道一般是由亚组构成的同源或异源(homomeric or heteromeric)络合物，包含至少一种属于DEG/ENaC，TRPV和/或P2X基因超序列的亚组。DEG/ENaC接受基因超序列的非限定实例包括上皮细胞的Na+通路，例如，αENaC，βENaC，γENaC和/或δENaC，和酸感应离子通道(ASICs)，例如，ASIC1，ASIC1a，ASIC1b，ASIC2，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和/或ASIC4。P2X接受基因超序列的非限定实例包括P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6和P2X7。TRPV接受基因超序列的非限定实例包括TRPV1(也称为VR1)，TRPV2(也称为VRL-1)，TRPV3(也称为VRL-3)，TRPV4(也称为VRL-2)，TRPV5(也称为ECAC-1)和/或TRPV6(也称为ECAC-2)。
异源多聚体门离子通道的非限定实例包括αENaC，βENaC和γENaC；αENaC，βENaC和δENaC；ASIC1a和ASIC2a；ASIC1a和ASIC2b；ASIC1a和ASIC3；ASIC1b和ASIC3；ASIC2a和ASIC2b；ASIC2a和ASIC3；ASIC2b和ASIC3；ASIC1a，ASIC2a和ASIC3；ASIC3和P2X，例如P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6和P2X7，优选ASIC3和P2X2；ASIC3和P2X3；和ASIC3，P2X2和P2X3 ASIC4和至少一种ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，和ASIC3；BLINaC(或hINaC)和至少一种ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3，和ASIC4；δENaC和ASIC，例如ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和ASIC4；P2X1和P2X2，P2X1和P2X5，P2X2和P2X3，P2X2和P2X6，P2X4和P2X6，TRPV1和TRPV2，TRPV5和TRPV6，TRPV1和TRPV4。
基于以上所述，需要一种调节离子通道活性的组合物，和其使用方法，用于治疗涉及疼痛，炎症，神经病系统，胃肠系统和生殖泌尿系统的状况，疾病和紊乱。
定义
此处使用的术语“酸”是指羧酸，磺酸，亚磺酸，氨基磺酸，膦酸和硼酸官能团。
术语“烷基”包括饱和脂族基，包括直链烷基(例如甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基，庚基，辛基，壬基，癸基等)，支链烷基(异丙基，叔丁基，异丁基等)，环烷基(脂环)基(环丙基，环戊基，环己基，环庚基，环辛基)，烷基取代环烷基和环烷基取代烷基。此外，表达“Cx-Cy-烷基”，(其中x是1-5，y是2-10)表示具有特定范围碳的特定烷基(线性或支链)。例如，表达C1-C4烷基包括但是不局限于甲基，乙基，丙基，丁基，异丙基，叔丁基和异丁基。
术语烷基进一步包括可以进一步包括取代烃主链一个或多个碳的氧，氮，硫或三价磷原子的烷基。一个实施方式中，直链或支链烷基主链中具有10个或更少碳原子(例如，对于直链C1-C10，对于支链C3-C10)，更优选6或更少碳。同样，优选环结构中具有4-7碳原子的环烷基，更优选环结构中具有5或6个碳。
此外，烷基(例如甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基等)包括“未取代的烷基”和“取代烷基”，后者是指具有取代基取代烃主链一个或多个碳上氢的烷基部分，其允许分子发挥其预期功能。术语“取代”是用于描述具有取代基取代一个或多个原子例如分子C，O或N上氢的部分。该取代基可以包括例如烯基，炔基，卤素，羟基，烷基羰氧基，芳基羰氧基，烷氧基羰氧基，芳氧基羰氧基，碳酸酯，烷基羰氧基，芳基羰基，烷氧基羰基，氨基羰基，烷基氨基羰基，二烷基氨基羰基，烷基硫基羰基，烷氧基，磷酸盐，磷酸基，磷基(phosphinato)，氨基(包括烷基氨基，二烷基氨基，芳基氨基，二芳基氨基，烷基氨基氨基)，酰基氨基(包括烷基羰氧基氨基，芳基羰基氨基，氨基甲酰基和脲基)，脒基，亚氨基，巯基，烷基硫基，芳基硫基，硫基碳酸酯，硫酸酯，烷基亚磺酰基，硫酸根，氨磺酰，磺酰胺，硝基，三氟甲基，氰基，叠氮基，杂环，烷基芳基，吗啉代，苯酚，苄基，苯基，哌嗪(piperizine)，环戊烷，环己烷，吡啶，5H-四唑，三唑，哌啶或芳族或杂芳族部分。
本发明的取代基其它非限定实例包括选自下列的部分：线性或支化烷基(优选C1-C5)，环烷基(优选C3-C8)，烷氧基(优选C1-C6)，硫代烷基(优选C1-C6)，烯基(优选C2-C6)，炔基(优选C2-C6)，杂环，碳环，芳基(例如苯基)，芳氧基(例如苯氧基)，芳烷基(例如苄基)，芳氧基烷基(例如，苯氧基烷基)，芳基亚氨代乙酰基(arylacetamidoyl)，烷基芳香基，杂芳烷基，烷基羰基和芳基羰基或其它该酰基，杂芳基羰基，或杂芳基，(CR’R”)0-3NR’R”(例如，-NH2)，(CR’R”)0-3CN(例如，-CN)，-NO2，卤素(例如，-F，-Cl，-Br或-I)，(CR’R”)0-3C(卤素)3(例如，-CF3)，(CR’R”)0-3CH(卤素)2，(CR’R”)0-3CH2(卤素)，(CR’R”)0-3CONR’R”，(CR’R”)0-3(CNH)NR’R”，(CR’R”)0-3S(O)1-2NR’R”，(CR’R”)0-3CHO，(CR’R”)0-3O(CR’R”)0-3H，(CR’R”)0-3S(O)0-3R’(例如，-SO3H，-OSO3H)，(CR’R”)0-3O(CR’R”)0-3H(例如，-CH2OCH3和-OCH3)，(CR’R”)0-3S(CR’R”)0-3H(例如，-SH和-SCH3)，(CR’R”)0-3OH(例如，-OH)，(CR’R”)0-3COR’，(CR’R”)0-3(取代或未取代的苯基)，(CR’R”)0-3(C3-C8环烷基)，(CR’R”)0-3CO2R’(例如，-CO2H)，或(CR’R”)0-3OR’基团，或任何容易出现氨基酸的侧链；其中R’和R”各自独立是氢，C1-C5烷基，C2-C5烯基，C2-C5炔基或芳基。该取代基可以包括例如卤素，羟基，烷基羰氧基，芳基羰氧基，烷氧基羰氧基，芳氧基羰氧基，羧酸酯，烷基羰基，烷氧基羰基，氨基羰基，烷基硫基羰基，烷氧基，磷酸盐，磷酸基，磷基，氰基，氨基(包括烷基氨基，二烷基氨基，芳基氨基，二芳基氨基和烷基芳基氨基)，酰胺基(包括烷基羰基氨基，芳基羰基氨基，氨基甲酰基和脲基)，脒基，亚氨基，肟，硫醇，烷基硫基，芳基硫基，硫基碳酸酯，硫酸酯，硫酸根，氨磺酰，磺酰胺，硝基，三氟甲基，氰基，叠氮基，杂环烃基(heterocyclyl)或芳族或杂芳族部分。某些实施方式中，羰基部分(C＝O)可以进一步被肟部分衍生，例如，醛部分可以衍生为其肟(-C＝N-OH)类似物。本技术领域中的技术人员可以理解，如果合适的话，在烃链上取代的结构部分本身能够被取代。例如，环烷基可以进一步被如上所述取代基取代。“芳烷基”部分是被芳基(例如苯基甲基(即苄基))取代的烷基。
术语“胺”或“氨基”应该被广泛理解为分子或部分或官能团，如本领域一般理解，并且可以是伯，仲或叔的。术语“胺”或“氨基”包括其中氮原子共价键合至至少一个碳，氢或杂原子的氮原子。该术语包括例如但是不局限于“烷基氨基”，“芳基氨基”，“二芳基氨基”，“烷基氨基氨基”，“烷基氨基芳基”，“芳基氨基烷基”，“烷基氨基烷基”，“酰胺”，“酰胺基”和“氨基羰基”。术语“烷基氨基”包括其中氮键合至至少一个其它烷基的基团和化合物。术语“二烷基氨基”包括其中氮键合至至少两个其它烷基的基团和化合物。术语“芳基氨基”和“二芳基氨基”包括其中氮键合至至少一个或分别两个芳基的基团。术语“烷基氨基氨基”，“烷基氨基芳基”或“芳基氨基烷基”是指键合至至少一个烷基和至少一个芳基的氨基。术语“烷基氨基烷基”是指键合至氮原子的烷基，烯基或炔基，其中氮原子也键合至烷基。
术语“酰胺”，“酰胺基”或“氨基羰基”包括含有氮原子的化合物或部分，其中氮原子键合至羰基或硫基羰基的碳。术语包括“烷基氨基羰基”或“烷基氨基羰基”，其包括键合至氨基的烷基，烯基，芳基或炔基，其中氨基键合至羰基。它包括芳基氨基羰基和芳基羰基氨基，其包括键合至氨基的芳基或杂芳基部分，其中氨基键合至羰基或硫基羰基的碳。术语“酰胺”中包括术语“烷基氨基羰基”，“烯基氨基羰基”，“炔基氨基羰基”，“芳基氨基羰基，”“烷基羰氧基氨基，”“烯基羰基氨基，”“炔基羰基氨基”和“芳基羰基氨基”。酰胺还包括脲基(氨基羰基氨基)和氨基甲酸酯(氧基羰基氨基)。
本发明特别实施方式中，术语“胺”或“氨基”是指式的取代基N(R8)R9或C1-6-N(R8)R9，其中R8和R9各自独立选自-H和-(C1-4烷基)0-1G，其中G选自-COOH，-H，-PO3H，-SO3H，-Br，-Cl，-F，-O-C1-4烷基，-S-C1-4烷基，芳基，-C(O)OC1-C6-烷基，-C(O)C1-4烷基-COOH，-C(O)C1-C4-烷基-C(O)-芳基；或N(R8)R9是吡咯基、四唑基、吡咯烷基、吡咯烷基-2-酮、二甲基吡咯基、咪唑基和吗啉代。
术语“芳基”包括5和6元单环芳族基，其可以包括零到四个杂原子，例如，苯基，吡咯，呋喃，噻吩，噻唑，异噻唑，咪唑，三唑，四唑，吡唑，恶唑，异恶唑，吡啶，吡嗪，哒嗪和嘧啶等。此外，术语“芳基”包括多环芳基，例如三环，二环的，例如萘，苯并恶唑，苯并二恶唑，苯并噻唑，苯并咪唑，苯并噻吩，亚甲基二氧化苯基，喹啉，异喹啉，蒽基，菲基，萘啶(napthridine)，吲哚，苯并呋喃，嘌呤，苯并呋喃，去氮嘌呤(deazapurine)或中氮茚。环结构中具有杂原子的芳基还可以称为“芳基杂环”，“杂环”，“杂芳基”或“杂芳族”。芳香环可以在一个或多个环位置被如上所述取代基取代，实例为烷基，卤素，羟基，烷氧基，烷基羰氧基，芳基羰氧基，烷氧基羰氧基，芳氧基羰氧基，碳酸酯，烷基羰氧基，烷基氨基羰基，芳烷基氨基羰基，烯基氨基羰基，烷基羰氧基，芳基羰基，芳烷基羰氧基，烯基羰基，烷氧基羰基，氨基羰基，烷基硫基羰基，磷酸盐，磷酸基，磷基，氰基，氨基(包括烷基氨基，二烷基氨基，芳基氨基，二芳基氨基，烷基氨基氨基)，酰基氨基(包括烷基羰氧基氨基，芳基羰基氨基，氨基甲酰基和脲基)，脒基，亚氨基，巯基，烷基硫基，芳基硫基，硫基碳酸酯，硫酸酯，烷基亚硫酰基，硫酸根，氨磺酰，磺酰胺，硝基，氰基，叠氮基，杂环烃基，烷基芳基或芳族或杂芳族部分。芳基还可以熔合或型桥接脂环或非芳族杂环，使得形成多环(例如四氢萘)。
应该指出的是，本发明一些化合物的结构包括不对称碳原子。根据非对称性，可以理解的是，本范围包括异构体(例如全部对映异构体和非对映体)。此类异构体能够通过传统的分离技术和通过用立体化学方法控制合成方法以基本上纯净形式获得。此外，本申请中讨论的结构和其它化合物和部分还包括全部其互变异构体。可以用已知合成策略获得此处描述的化合物。
另外，术语“其任何组合”意思是许多列举官能团和分子可以合并形成较大分子结构。例如，术语“苯基”，“羰基”(或“＝O”，“-O-”，“-OH”，C1-6(即，-CH3和-CH2CH2CH2-)可以合并形成3-甲氧基-4-丙氧基苯甲酸取代基。可以理解的是，当结合官能团和分子形成较大分子结构时，可以根据需要除去或加入氢，以满足每个原子的化合价。
此处使用的，术语“门离子通道”或“门通路”可交换地使用，并用于指的是哺乳动物(例如小鼠，老鼠，人类)多亚基体络合物，其对例如电压变化(例如薄膜去极或超极化)，温度(例如，高于或低于37°C)，pH值(例如高于或低于7.4的pH值)，配体浓度和/或机械刺激起反应。具体调节剂的实例包括，但是不局限于，内源的细胞外配体例如花生四烯乙醇胺(anandamide)，ATP，合氨酸，半胱氨酸，甘氨酸，γ-氨基丁酸(GABA)，组氨酸，血清素(5HT)，乙酰胆碱，肾上腺素，新肾上素，质子，离子，例如，Na+，Ca++，K+，Cl-，H+，Zn+和/或缩氨酸，例如Met-脑啡肽，Leu-脑啡肽，强啡肽，神经营养因子(neurotrophins)和/或RFamide相关缩氨酸，例如FMRF氨基化合物(FMRFamide)或FLRF氨基化合物(FLRFamide)；内源的细胞内配体例如环核苷酸(例如环腺苷酸，环GMP)，ATP，Ca++和/或G-蛋白质；外源的细胞外配体或调节剂例如-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异酚酞丙酸酯，氨氯吡脒，辣椒素，辣椒平(capsazepine)，地棘蛙素，镉，钡，钆，胍(guanidium)，红藻氨酸盐，N-甲基-D-天冬氨酸酯(NMDA)。门离子通道还包括对毒素易感应的络合物，其实例包括但是不局限于漏斗网蛛毒素(Agatoxin)(例如α-漏斗网蛛毒素IVA，IVB，ω-漏斗网蛛毒素IVA，TK)，蝎毒素(Agitoxins)(蝎毒素2)，蜜蜂神经毒素，蜘蛛毒素(Argiotoxins)，蛙毒，双鞭甲藻神经毒素(例如短菌毒素PbTx-2，PbTx-3，PbTx-9)，北非蝎毒素，蝎氯毒素(Chlorotoxins)，西加毒素，芋螺毒素(例如α-芋螺毒素GI，GIA，GII，IMI，MI，MII，SI，SIA，SII和/或EI；δ-芋螺毒素，μ-芋螺毒素GIIIA，GIIIB，GIIIC和/或GS，ω-芋螺毒素GVIA，MVIIA MVIIC，MVIID，SVIA和/或SVIB)，树突毒素，智利蜘蛛毒素(Grammotoxins)(GsMTx-4，ω-智利蜘蛛毒素SIA)，木藜芦毒素类，哈那毒素(Hanatoxins)，非洲蝎毒(Iberiotoxins)，猗姆普拉毒素(Imperatoxins)，久罗毒素(Jorotoxins)，东亚钳蝎蝎毒(Kaliotoxins)，南非蝎毒素(Kurtoxins)，海南捕鸟蛛毒素(Leiurotoxin 1)，苦毒素(Pricotoxins)，普萨莫毒素(Psalmotoxins)，(例如，普萨莫毒素1(PcTx1))，玛格毒素，诺克休斯毒素(Noxiustoxins)，智利火乌蛛(Phrixotoxins)，PLTX II，海藻毒素，海葵毒素(Stichodactyla Toxins)，海葵毒素(例如得自埃里根司马海葵毒素(Anthopleura elegantissima)的APETx2)，河豚毒素，钳蝎属毒素K-α，缘青蟹毒素(Scyllatoxins)和/或管箭毒碱。
优选实施方式中，本发明化合物调节ASIC1a和/或ASIC3的活性。
“门离子通道传递活性”通常是在门离子通道的存在下，直接或间接调节(例如抑制或促进)的生物活性。门离子通道-传递活性包括例如接受，集成，转换，实施和传输细胞例如神经或肌细胞中信号。通过特定门离子通道例如ASIC1a或ASIC3传递的生物活性此处参考门离子通道，例如ASIC1a或ASIC3传递活性。为了确定化合物的性能，以抑制门离子通道传递活性，可以使用此处描述的活体外和活体内分析。
此处使用的“神经传递”是以调制方式从一个神经原至另一个细胞快速通过小信号分子，即神经递质的过程。通常，与引入动作电位有关的去极化后，从突触前的神经末端分泌神经递质。然后该神经递质分散横过突触裂，作用于突触后细胞的特定受体，其最通常是神经原，但是还可以是另一个细胞类型(例如在肌神经接点的肌纤维)。神经递质的作用可以是刺激性的，去极化突触后的细胞，或抑制性的，导致过极化。神经传递可以被神经调节剂快速增加或减少，其中神经调节剂通常起预突触或后突触作用。门离子通道ASIC1a已经表明可能有助于神经传递[Babini等人，J Biol Chem.277(44)：41597-603(2002)]。
门离子通道传递活性的实例包括但是不局限于疼痛(例如发炎疼痛，急性疼痛，慢性恶性疼痛，慢性非恶性疼痛和神经性疼痛)，发炎性疾病，泌尿生殖器和胃肠系统的疾病和紊乱，以及神经紊乱(例如神经变性或神经精神病学紊乱)。
“疼痛”定义为与实际或潜在组织损伤或描述该损伤有关使人不愉快的感觉和情绪经历(疼痛研究国际协会-IASP)。最通常基于持续时间(即急性对慢性疼痛)和基础病理生理学(即感受伤寒的对神经性疼痛)分类疼痛。
急性的疼痛可以被称作响应组织外伤和疾病出现的感情和认知，以及感觉，特征，并用作防卫机制的使人不愉快经历。急性疼痛通常伴随有病理学(例如外伤，外科手术劳动，医药措施，急性病状态)，并且通过治愈基础损伤解决疼痛。急性疼痛主要是感受伤寒的，但是还可以是神经性的。
慢性疼痛是延长超出治愈周期的疼痛，具有通常较低并且不足以说明存在的疼痛强度和/或程度的识别病理学级别(美国疼痛学会-APS)。不同于急性疼痛，慢性疼痛没有提供适应的用途。慢性疼痛可以是感受伤寒的，神经性的或两者，并且由损伤(例如外伤或外科手术)，恶性老化或多种慢性老化(例如关节炎，纤维肌痛和神经病)引起。有时候，慢性疼痛存在没有明显的原因。
“感受伤寒的疼痛”是由于组织和器官损伤产生的疼痛。感受伤寒的疼痛由身体的表面或深处组织中疼痛受体的行动活性引起。感受伤寒的疼痛进一步表征为“身体疼痛”，包括“皮肤疼痛”和“深处身体疼痛”和“内脏疼痛”。“身体疼痛”包括“皮肤疼痛”和“深处身体疼痛”。皮肤疼痛由皮肤和相关器官的损伤，疾病和紊乱引起。与皮肤疼痛有关的老化实例包括但是不局限于切口，烧伤，感染，裂伤，外伤性损伤和手术后或外科手术疼痛(例如在切口位置)。
“深处身体疼痛”由肌骨胳组织的损伤，疾病或紊乱产生，其中肌骨胳组织包括结带，腱，骨骼，血管和结缔组织。与深处身体疼痛有关的深处身体疼痛或老化的实例包括但是不局限于扭伤，骨折骨骼，关节痛，脉管炎，肌肉痛和肌筋膜疼痛。关节痛是指由伤害的关节(例如挫伤，骨折或错位)和/或发炎(例如关节炎)所引起的疼痛。Vaculitis是指具有疼痛的血管炎症。肌肉痛是指来源于肌肉的疼痛。Myofascial疼痛是指得自筋膜和/或肌肉的损伤或炎症的疼痛填塞。
“内脏”疼痛与身体器官和内部腔的损伤，炎症或疾病有关，其中身体器官和内部腔包括但是不限于循环系统，呼吸系统，胃肠系统，生殖泌尿系统，免疫系统以及耳朵，五官科。内脏疼痛还可以与影响身体器官和组织的传染性和寄生疾病有关。内脏疼痛非常难以定位，几种内脏组织损伤表现出牵涉性痛，其中感觉定位至与损伤位置完全无关的区域。假性肢痛是得自肢的痛觉，其不再具有或不再得到由假性肢痛和四肢瘫痪的几乎普遍报道的感受。
“神经性疼痛”或“神经原疼痛”是由神经系统中原发性损害，机能不良或扰动引发或引起的疼痛。”神经性疼痛”可以周围神经系统的外伤，炎症或疾病(“外围神经性疼痛”)和中枢神经系统(“中枢性疼痛”)结果的形式存在。例如，神经性疼痛可以由刺激，俘获，压紧的(pinched)，隔断或发炎(神经炎)神经或精神引起。存在许多神经性疼痛并发症状，例如糖尿病性神经病变，三叉神经痛，带状疱疹神经痛(“带状疱疹”)，中风后疼痛，和复合局部疼痛并发症状(也称为反射交感性营养不良或“RSD”和灼痛)。
此处使用的术语“炎性疾病或紊乱”包括由炎症至少部分产生或加重的疾病或紊乱，其中一般特征为增加血流水肿，免疫细胞活化(例如，增殖，细胞活素产生，或增加噬菌作用)，热量，发红(redness)，溶胀，疼痛和影响组织和器官中损失功能。炎症的原因可以是由于物理损坏，化学物质，微生物，组织坏死，癌症或其它试剂。发炎性疾病包括急性发炎性疾病，慢性发炎性疾病和周期性发炎性疾病。急性发炎性疾病一般是相对短时期，持续约几分钟至约一至两天，尽管它们能够持久几星期。急性发炎性疾病的主要特征包括增加血流，液体和血浆蛋白质(水肿)渗出以及白血球例如嗜中性的迁移。慢性发炎性疾病一般具有比较长的持续时间，例如几星期至几月至几年或更长，并在组织结构中伴随淋巴球和巨噬细胞的存在，以及血管和结缔组织的增殖。周期性发炎性疾病包括经过一段时间以后重现或具有周期事件的紊乱。一些紊乱可以在一个或多个种类内。
术语“神经紊乱”和“神经变性的紊乱”指的是神经系统的损伤，疾病和机能不良，包括周围神经系统和中枢神经系统。神经紊乱和神经变性的紊乱包括但是不局限于与门离子通道传递生物活性有关的疾病和紊乱。神经紊乱的实例包括但是不局限于阿尔茨海默氏症癫痫症，癌症，神经肌肉的疾病，多发性硬化，肌萎缩性侧索硬化，中风，脑缺血，神经病(例如化疗引发神经病，糖尿病性神经病变)，视网膜色素退化，亨廷顿氏舞蹈病和帕金森氏症，焦虑紊乱例如憎恶紊乱(例如广场恐怖症，幽闭恐怖症)，恐慌紊乱恐惧症，焦虑癔症(hyteria)，一般焦虑紊乱和神经病)，和共济失调毛细血管扩张。
此处使用的“神经病”定义为输送信息往返于脑和脊髓的神经故障，导致一种或多种疼痛，损失感觉，并且不能控制肌肉。有时候，控制血管，肠和其它器官的神经故障产生反常的血压，消化问题，并且损失其它机身进程。周围神经病可以包括损伤单个神经或神经基(单一神经病变)或可以影响多个神经(多神经病)。
术语“治疗的”，“正在治疗”或“治疗”包括消除或减轻要治疗的至少一个与疼痛，发炎性疾病，神经紊乱，泌尿生殖器紊乱或胃肠机能紊乱(例如与门离子通道传递活性或由其所引起的症状有关)有关。某些实施方式中，治疗包括用门离子通道调节化合物调节门离子通道(例如ASIC1a和/或ASIC3)的相互作用，其中随后减低或缓和至少一个与要治疗门离子通道传递活性有关或由其所引起的症状。例如，治疗可以消除一种或几种紊乱症状，或全部根除紊乱。
此处使用的术语化合物的“治疗有效量”是需要量或足够治疗或防止疼痛，发炎性疾病，神经紊乱，胃肠机能紊乱或泌尿生殖器紊乱的量(例如防止门离子通道传递活性的多种症状)。一个实例中，有效量化合物是足够缓和至少一个紊乱症状的量，其中紊乱例如为患者中疼痛，炎症，神经紊乱，胃肠机能紊乱或泌尿生殖器紊乱。
术语“患者”包括动物，其能够遭遇或被门离子通道伴随状态或门离子通道伴随紊乱折磨，或任何直接或间接包括门离子通道活性的紊乱。患者的实例包括哺乳动物，例如人类，狗，牛，马，猪，羊，山羊，猫，老鼠，兔子，小鼠和转基因的非人类动物。某些实施方式中，患者是人类，例如遇到，可能遇到，或可能遇到疼痛，炎症，神经紊乱，胃肠机能紊乱或泌尿生殖器紊乱(例如与门通路伴随活性有关)人类。
术语“门离子通道调节剂”是指调节，即抑制，促进或相反改变门离子通道活性的化合物。例如，门离子通道调节剂可以抑制，促进或相反改变门离子通道对例如电压变化(例如薄膜去极化或过极化)，温度(例如高于或低于37℃，pH值例如高于或低于7.4pH值)，配体浓度和/或机械刺激的响应。门离子通道调节剂的实例包括本发明化合物(即式1，2，3，4和5，以及化合物A，B，C，D，E，F，G，H，I，J和K)，包括其盐，例如药学可接受的盐。特定实施方式中，本发明门离子通道调节剂可用于治疗患者需要的与疼痛，炎症，神经紊乱，胃肠机能紊乱或泌尿生殖器紊乱有关的疾病或紊乱。另一个实施方式中，本发明化合物可用于患者需要的治疗发炎性疾病。
离子通道活性调节剂
本发明提供了调节门离子通道活性的化合物。一些实施方式中，本发明化合物调节由属于DEG/ENaC，TRPV和/P2X基因超序列的至少一种亚组组成的门离子通道活性。一些实施方式中，本发明化合物调节由选自下列至少一种亚组构成的门离子通道活性：αENaC，βENaC，γENaC，δENaC，ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3，ASIC4，BLINaC，hINaC，P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6，P2X7，TRPV1，TRPV2，TRPV3，TRPV4，TRPV5和TRPV6。其它实施方式中，本发明化合物调节由选自下列至少一种亚组构成的DEG/ENaC门离子通道活性：αENaC，βENaC，γENaC，δENaC，BLINaC，hINaC，ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和ASIC4。某些实施方式中，本发明化合物调节由选自下列至少一种亚组构成的DEG/ENaC门离子通道活性：ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和ASIC4。某些实施方式中，本发明化合物调节由选自下列至少两种亚组构成的DEG/ENaC门离子通道活性：ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和ASIC4。其它实施方式中，本发明化合物调节由选自下列至少三种亚组构成的DEG/ENaC门离子通道活性：ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和ASIC4。某些实施方式中，本发明化合物调节由ASIC，即ASIC1a或ASIC1b构成的门离子通道活性。某些实施方式中，本发明化合物调节由ASIC3构成门离子通道的活性。某些实施方式中，本发明化合物调节由下列构成的门离子通道活性：ASIC1a和ASIC2a；ASIC1a和ASIC3；ASIC1b和ASIC3；ASIC2a和ASIC2b；ASIC2a和ASIC3；ASIC2b和ASIC3；和ASIC1a，ASIC2a和ASIC3。其它实施方式中，本发明化合物调节由选自下列至少一种亚组构成的P2X门离子通道活性：P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6和P2X7。某些实施方式中，本发明化合物调节由P2X2，P2X3或P2X4构成的门离子通道活性。某些实施方式中，本发明化合物调节由下列构成的门离子通道活性：P2X1和P2X2，P2X1和P2X5，P2X2和P2X3，P2X2和P2X6和P2X4和P2X6。本发明另一个方面中，本发明化合物调节由选自下列至少一种亚组构成的TRPV门离子通道活性：TRPV1，TRPV2，TRPV3，TRPV4，TRPV5和TRPV6。某些实施方式中，本发明化合物调节由TRPV1或TRPV2构成的门离子通道的活性。某些实施方式中，本发明化合物调节由下列构成的门离子通道活性：TRPV1和TRPV2，TRPV1和TRPV4和TRPV5和TRPV6。
特定实施方式中，本发明化合物调节ASIC1a和/或ASIC3的活性。
本发明化合物的名称遵照标准约定。“南”苯基环表示为以下：
Figure A20068004401000401
一个方面中，调节门离子通道活性的化合物具有式1，
Figure A20068004401000402
和其药学可接受的盐，对映异构体，立体异构体，旋转异构体，互变异构体，非对映体或外消旋体；其中虚线表明单键或双键；R1选自氢，烷基，烷氧基-烷基，羟基烷基，烷氧基-羰基-烷基，烷基羰基-氧基-烷基，环烷基，环烷基-烷基，烯基，炔基，烷氧基，磺酰胺，氨基，磺酰基，磺酸，脲，苯基或苄基，其中苯基或苄基任选被下列基团取代：卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基烷基，烷氧基，磺酰胺，烯基，炔基，氨基，磺酰基，磺酸和脲；R2选自氢，羟基，烷基，烯基，炔基，-(CH2)1-4S(O)3H，-C(O)C1-4烷基和-S(O)2C1-4烷基；R3选自氢，羟基，烷基，酰基，苯基，苄基，-COOH，-C(O)N(CH3)2，-O-苯基，-OCF3，烷氧基，-O(CH2)0-4OCH3，-C(O)H，-C(O)CH3，
Figure A20068004401000411
R4和R5各自独立选自卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基，烷基，烷氧基，苯氧基和苯基，或式-SO2NR′R″基团，其中R′和R″各自独立代表氢或烷基。
式1的一个实施方式中，R1选自氢，烷基，烯基和炔基；R2选自氢，羟基，烷基，烯基和炔基；R3选自氢，羟基，烷基，酰基，苯基，苄基和-COOH；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基，烷基，烷氧基，苯氧基和苯基。式1的另一个实施方式中，R1选自氢和烷基；R2选自氢，羟基，烷基，烯基和炔基；R3选自氢，羟基，烷氧基和烷基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，烷基，苯氧基和烷氧基。式1又一个实施方式中，虚线表示双键；R1选自烷基；R2选自氢和烷基；R3是羟基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，烷基，苯氧基和烷氧基。
式1的优选实施方式表现式2，
Figure A20068004401000412
和其药学可接受的盐，对映异构体，立体异构体，旋转异构体，互变异构体，非对映体或外消旋体；其中R1选自氢，烷基，烷氧基-烷基，烷氧基-羰基-烷基，烷基羰基-氧基-烷基，环烷基，环烷基-烷基，烯基，炔基，烷氧基，磺酰胺，氨基，磺酰基，磺酸，脲，苯基或苄基，其中苯基或苄基任选被下列基团取代：卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基烷基，烷氧基，磺酰胺，烯基，炔基，氨基，磺酰基，磺酸和脲；R2选自氢，羟基，烷基，烯基，炔基，-(CH2)1-4S(O)3H，-C(O)C1-4烷基和-S(O)2C1-4烷基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基，烷基，烷氧基，苯氧基和苯基，或式-SO2NR′R”基团，其中R′和R”各自独立代表氢或烷基。式2一个实施方式中，R1选自氢，烷基，烯基，和炔基；R2选自氢，羟基，烷基，烯基和炔基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基，烷基，烷氧基，苯氧基和苯基.
式2的又一个实施方式中，R1选自氢和烷基；R2选自氢，羟基，烷基，烯基和炔基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，烷基，苯氧基和烷氧基。
式2的再一个实施方式中，R1选自烷基；R2选自氢和烷基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，烷基，苯氧基和烷氧基。
式2的一个实施方式中，R1选自氢，C1-4-烷基，C1-4-烯基，和C1-4-炔基；R2选自氢，羟基，C1-4-烷基，C1-4-烯基和C1-4-炔基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基和苯基。式2又一个实施方式中，R1选自氢和C1-4-烷基；R2选自氢，羟基，C1-4-烷基，C1-4-烯基和C1-4-炔基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，C1-4-烷基，苯氧基和C1-4-烷氧基。
式2的再一个实施方式中，R1选自C1-4-烷基；R2选自氢和C1-4-烷基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，C1-4-烷基，苯氧基和C1-4-烷氧基。
式2的另一个实施方式中，R1选自-CH3和-CH2CH3；R2选自氢；R4和R5各自独立选自卤素，烷基和烷氧基。
式2的另一个实施方式中，R1选自-CH3和-CH2CH3；R2选自氢；R4和R5各自独立选自卤素，C1-4-烷基和C1-4-烷氧基。
式2的另一个实施方式中，R1是CH3或CH2CH3.
式2的又一个实施方式中，R2是H.
式2的再一个实施方式中，R4是卤素。
式2的另一个实施方式中，R5是烷氧基。
式2的又一个实施方式中，R4是氟或氯(fluoro or chloro)。
式2的另一个实施方式中，R5是-OCH3.
式2的再一个实施方式中，R4和R5都是烷基。
式2的另一个实施方式中，R4和R5都是CH3.
式1的另一个优选实施方式表示为式3，
和其药学可接受的盐，对映异构体，立体异构体，旋转异构体，互变异构体，非对映体或外消旋体；其中R1选自氢，烷基，烷氧基-烷基，烷氧基-羰基-烷基，烷基羰基-氧基-烷基，环烷基，环烷基-烷基，烯基，炔基，烷氧基，磺酰胺，氨基，磺酰基，磺酸，脲，苯基或苄基，其中苯基或苄基任选被下列基团取代：卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基烷基，烷氧基，磺酰胺，烯基，炔基，氨基，磺酰基，磺酸和脲；和R4和R5各自独立选自卤素，苯氧基，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基，烷基，烷氧基和苯基，或式-SO2NR′R″基团，其中R′和R″各自独立代表氢或烷基。
式3的一个优选实施方式中，R5在芳基环的2位置，R4在芳基环的5位置，或R4在芳基环的3位置，R5在芳基环的5位置。
式3的一个实施方式中，R1选自氢，烷基，烯基，和炔基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基，烷基，烷氧基，苯氧基和苯基。
式3的另一个实施方式中，R1选自氢和烷基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，烷基，苯氧基和烷氧基。
式3的又一个实施方式中，R1选自烷基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，烷基，苯氧基和烷氧基。
式3的再一个实施方式中，R1选自-CH3和-CH2CH3；R4和R5各自独立选自卤素，苯氧基和烷氧基。
式3的一个实施方式中，R1选自氢，C1-4-烷基，C1-4-烯基，和C1-4-炔基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基和苯基。
式3的另一个实施方式中，R1选自氢和C1-4-烷基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，C1-4-烷基，苯氧基和C1-4-烷氧基。
式3的又一个实施方式中，R1选自C1-4-烷基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，C1-4-烷基，苯氧基和C1-4-烷氧基。
式3的再一个实施方式中，R1选自-CH3和-CH2CH3；R4和R5各自独立选自卤素，苯氧基和C1-4-烷氧基。
式3的又一个实施方式中，R1是CH3或CH2CH3。
式3的又一个实施方式中，R4是卤素。
式3的再一个实施方式中，R5是烷氧基。
式3的另一个实施方式中，R4是氟或氯。
式3的另一个实施方式中，R5是-OCH3。
式3的再一个实施方式中，R4和R5都是烷基。
式4的又一个实施方式中，R4和R5都是CH3。
式1的另一个优选实施方式表示为式4，
和其药学可接受的盐，对映异构体，立体异构体，旋转异构体，互变异构体，非对映体或外消旋体；其中R1选自-CH3和-CH2CH3；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，烷基，和烷氧基。
式4的一个优选实施方式中，R5在芳基环的2位置，R4在芳基环的5位置，或R4在芳基环的4位置，R5在芳基环的5位置。
式4的又一个实施方式中，R1选自-CH3和-CH2CH3；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，C1-4-烷基，和C1-4-烷氧基。
式4的一个实施方式中，R4和R5各自独立选自卤素，烷基和烷氧基。式4一个实施方式中，R4和R5各自独立选自卤素，C1-4-烷基和C1-4-烷氧基。
式4的另一个实施方式中，R4是氟，R5是-OCH3，R4是被氯取代，R5是-OCH3，或R4和R5都是CH3。
式4的一个优选实施方式是
5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮(化合物A)：
Figure A20068004401000451
和其药学可接受的盐。
式4的另一个优选实施方式是5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮(化合物B)：
Figure A20068004401000452
和其药学可接受的盐。
式4的另一个优选实施方式是5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮(化合物C)：
Figure A20068004401000461
和其药学可接受的盐。
式4的另一个优选实施方式是5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮(化合物D)：
和其药学可接受的盐。
式4的另一个优选实施方式是5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮(化合物E)：
Figure A20068004401000463
和其药学可接受的盐。
式4的另一个优选实施方式是5-(2，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮(化合物F)：
Figure A20068004401000471
和其药学可接受的盐。
式4的另一个优选实施方式是5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮(化合物G)：
Figure A20068004401000472
和其药学可接受的盐。
式4的另一个优选实施方式是5-(2，3-二甲基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮-3-肟(化合物I)：
Figure A20068004401000473
和其药学可接受的盐。
另一个方面中，本发明化合物具有式5，
Figure A20068004401000481
和其药学可接受的盐，对映异构体，立体异构体，旋转异构体，互变异构体，非对映体或外消旋体；其中R1选自氢，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基-C1-4-烷基，C1-4-烷氧基-羰基-C1-4-烷基，C1-4-烷基-羰基-氧基-C1-4-烷基，C3-6-环烷基，C3-6-环烷基-C1-4-烷基，C1-4-烯基，C1-4-炔基，C1-4-烷氧基，磺酰胺，氨基，磺酰基，磺酸，脲，苯基或苄基，其中苯基或苄基任选被下列基团取代：卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基-C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，磺酰胺，C1-4-烯基，C1-4-炔基，氨基，磺酰，磺酸和脲；R4和R5各自独立选自氢，卤素，苯氧基，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基和苯基，或式-SO2NR′R”基团，其中R′和R”各自独立代表氢或C1-4-烷基。
式5的一个优选实施方式中，R5在芳基环的3位置，R4在芳基环的2位置，或R4在芳基环的2位置，R5是氢。
式5的一个实施方式中，R1选自C1-4-烷基，C1-4-烯基和C1-4-炔基；R4和R5各自独立选自氢，卤素，CF3，硝基，氨基，氰基，羟基，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，苯氧基和苯基。
式5的另一个实施方式中，R1选自氢和C1-4-烷基；R4和R5各自独立选自氢，卤素，CF3，C1-4-烷基，苯氧基和C1-4-烷氧基。
式5的另一个实施方式中，R4是C1-4-烷氧基，R5氢。
式5的又一个实施方式中，R1选自-CH3和-CH2CH3；R4和R5各自独立选自氢，CH3，OCH3和OEt。
式5的一个优选实施方式是5-苯基-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮(化合物H)：
Figure A20068004401000491
和其药学可接受的盐。
式5的另一个优选实施方式是8-乙基-5-(2-甲氧基-苯基)-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟(化合物J)：
Figure A20068004401000492
和其药学可接受的盐。
式5的另一个优选实施方式是5-(2-乙氧基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟(化合物K)：
Figure A20068004401000493
和其药学可接受的盐。
根据需要可以理解的是，全部如上所述式1，2，3，4和5的化合物将进一步包括在相邻原子之间的双键，以满足每个原子的化合价。即，加入双键，以提供每个下列类型原子总键数量：碳：四个键；氮：三键；氧：两个键；和硫：两或六个键。
应该指出的是，本发明一些化合物的结构包括不对称碳原子。根据非对称性，可以理解的是，本范围包括异构体(例如全部对映异构体和非对映体)，除非另外表示。此类异构体能够通过传统的分离技术和通过用立体化学方法控制合成方法以基本上纯净形式获得。此外，本申请中讨论的结构和其它化合物和部分还包括全部其互变异构体。可用已知合成策略获得此处描述的化合物。
本发明一个实施方式中，调节门离子通道活性的本发明化合物能够与包括以下的门离子通道相互化学作用：ENaC，ENaC，ENaC，ENaC，ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3，ASIC4，BLINaC，hINaC，P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6，P2X7，TRPV1，TRPV2，TRPV3，TRPV4，TRPV5，TRPV6。术语“化学相互作用”包括但是不局限于可逆的相互作用例如疏水性/亲水性，离子(例如库仑吸引/排斥，离子-偶极子，电荷转移)，共价键，Van der Waals和氢键键合。某些实施方式中，化学相互作用是可逆的迈克尔加成。特定实施方式中，迈克尔加成至少部分包括形成共价键。
特定实施方式中，化合物A可用于患者需要的治疗疼痛。一个实施方式中，患者是人类。
另一个实施方式中，化合物A可用于患者需要的治疗炎症。一个实施方式中，患者是人类。
另一个实施方式中，化合物A是AMPA拮抗物。
可以根据本领域已知标准有机合成程序合成本发明化合物。类似于本发明化合物的化合物典型合成程序可以在美国专利No.5,780,493，美国专利No.5,843,945，美国专利No.6,727,260和美国专利申请No.10/737,747和11/241,805中找到，此处引入作为参考。
下面是利用有机原料的本发明特定实施方式流程图和有机化学合成中已知的合成步骤：
Figure A20068004401000511
化合物A
合成化合物A的合成细节可以在实施例8中发现。
可以用传统方法，例如萃取，结晶，蒸馏，色谱等离析此处描述的反应最终产物。
本发明化合物的酸加成盐最适合由药学可接受的酸形成，并包括例如用无机酸例如盐酸，氢溴酸，硫或磷酸和有机酸例如琥珀酸，马来酸，乙酸或富马酸形成的。其它非药学可接受的盐例如草酸盐可以用于分离本发明化合物的实例，用于实验室使用或用于随后转化为药学可接受的酸加成盐。此外本发明范围内包括本发明溶剂化物和水合物。
通过应用标准技术转化指定化合物盐至所需化合物盐，其中用碱溶液例如碳酸钠或氢氧化钾处理指定盐水溶液，以释放游离碱，然后萃取进入合适的溶剂例如醚中。然后从含水部分分离游离碱，干燥，并用必要的酸处理，以产生所需盐。
可以通过用所需酯的氯化酰基，在惰性溶剂例如二氯甲烷或氯仿中，在碱的存在下处理具有游离羟基或氨基官能度化合物，形成本发明某些化合物的体内可水解酯或酰胺。合适的碱包括三乙胺或吡啶。相反地，可以利用标准条件酯化具有游离羧基的本发明化合物，其中可以包括活化，随后用所需醇在合适碱的存在下处理。
药学可接受的加成盐的实例包括但是不限于无毒的无机和有机酸加成盐，例如得自盐酸的盐酸盐，得自氢溴酸的氢溴化物，得自硝酸的硝酸盐，得自过氯酸的高氯酸盐，得自磷酸的磷酸盐，得自硫酸的硫酸酯，得自甲酸的甲酸酯，得自乙酸的乙酸盐，得自乌头酸的阿康酸盐，得自抗坏血酸的抗坏血酸盐，得自苯磺酸的苯磺酸盐，得自苯甲酸的苯甲酸盐，得自肉桂酸的肉桂酸盐，得自柠檬酸的柠檬酸盐，得自双羟萘酸的双羟萘酸盐，得自庚酸的庚酸盐，得自富马酸的富马酸盐，得自谷氨酸的谷氨酸盐，得自乙醇酸的羟乙酸盐，得自乳酸的乳酸盐，得自马来酸的马来酸盐，得自丙二酸的丙二酸盐，得自杏仁酸的苦杏仁酸盐，得自甲烷磺酸的甲烷磺酸盐，得自萘-2-磺酸的萘-2-磺酸盐，得自苯二甲酸的邻苯二甲酸盐，得自水杨酸的水杨酸盐，得自山梨酸的山梨酸盐，得自硬脂酸的硬脂酸盐，得自丁二酸的琥珀酸盐，得自酒石酸的酒石酸盐，得自对甲苯磺酸的甲苯对磺酸盐等。特别优选盐是本发明化合物的钠，赖氨酸和精氨酸盐。可以用本领域已知描述的方法形成该盐。
不认为在药学可接受的其它酸例如草酸可以用于制备可用作中间体的盐，以获得本发明化合物和其药学可接受的酸加成盐。
本发明化合物的金属盐包括碱金属盐，例如含有羧基的本发明化合物的钠盐。
本发明上下文中含N化合物“翁盐”也可作为药学可接受的盐。优选“翁盐”包括烷基翁盐，环烷基翁盐和环烷基翁盐。
可以可溶解或不能溶解的形成提供本发明化合物和药学可接受的溶剂例如水，乙醇等。可溶解的形式还可以包括水合形式例如一水合物，二水合物，半水化合物，三水合物，四水合物等。通常，考虑可溶解的形式相当于用于本发明目的不能溶解的形式。
A.立体异构体
本发明化合物可以存在(+)和(-)形式以及消旋形式。这些异构体和单个异构体本身的外消旋物在本发明范围内。可以用已知方法和技术，将消旋形式分解为旋光对映体。一种分离非对映盐的方法是通过利用旋光活性酸，并通过用碱处理释放旋光活性胺化合物。另一种分解外消旋物成为旋光对映体的方法基于旋光基质的色谱。因此通过例如分级结晶d-或1-(酒石酸盐，苦杏仁酸盐或樟脑磺酸盐)盐，本发明外消旋化合物可以被分解为旋光对映体。
通过反应本发明化合物与旋光活性活化羧酸，形成非对映的酰胺，也可以分解本发明化合物，其中旋光活性活化羧酸例如得自(+)或(-)苯丙氨酸，(+)或(A)苯基甘氨酸，(+)或(A)樟脑酸，或通过反应本发明化合物与旋光活性氯甲酸酯等，形成非对映的氨基甲酸酯。
其它分解光学异构体的方法是本领域已知的。该方法包括JaquesJ，Collet A，和Wilen S在“对映异构体，外消旋物和分辩率”，JohnWiley and Sons，New York(1981)中描述的方法。
也可以从旋光的原料制备旋光的化合物。
此外，本发明的一些化合物是肟，因此根据-C-N-双键周围取代基的布置，可以存在两种形式，顺式和反式(Z和E形式)。本发明的化合物可以是顺式或反式(Z和E形式)，或可以是其混合物。可以理解的是，特定化合物的顺式和反式(Z和E形式)在本发明范围内，即使在该化合物以一种或另一个形式表现(即通过名称或分子的实际绘图时)。
又一个实施方式中，本发明涉及包括此处描述调节门离子通道化合物和药物可接受载体的药物组合物。
另一个实施方式中，本发明包括包含此处描述本发明化合物的任何新化合物或药物组合物。例如，包含此处陈述化合物(例如本发明化合物)的化合物和药物组合物是本发明部分，包括其盐例如药学可接受的盐。
分析
本发明涉及一种调节门离子通道活性的方法。此处使用的术语“调节”的多种形式包括刺激(例如增加或上调特定响应或活性)和抑制(例如降低或下调特定响应或活性)。一个方面中，本发明方法包括接触细胞与有效量门离子通道调节剂化合物，例如本发明化合物，从而调节门离子通道活性。某些实施方式中，有效量本发明化合物抑制门离子通道活性。
本发明门离子通道调节由属于DEG/ENaC，TRPV(也称为vanilloid)和/P2X基因超序列的至少一种亚组组成。一个方面中，门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：αENaC，βENaC，γENaC，δENaC，ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3，ASIC4，BLINaC，hINaC，P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6，P2X7，TRPV1，TRPV2，TRPV3，TRPV4，TRPV5和TRPV6。一个方面中，DEG/ENaC门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：αENaC，βENaC，γENaC，δENaC，BLINaC，hINaC，ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和ASIC4。某些实施方式中，DEG/ENaC门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和ASIC4。某些实施方式中，门离子通道由ASIC1a，ASIC1b或ASIC3组成。本发明另一个方面中，P2X门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6和P2X7。本发明又一个方面中，TRPV门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：TRPV1，TRPV2，TRPV3，TRPV4，TRPV5和TRPV6。另一个方面中，门离子通道是异源多聚体门离子通道，包括但不限于αENaC，βENaC和γENaC；αENaC，βENaC和δENaC；ASIC1a和ASIC2a；ASIC1a和ASIC2b；ASIC1a和ASIC3；ASIC1b和ASIC3；ASIC2a和ASIC2b；ASIC2a和ASIC3；ASIC2b和ASIC3；ASIC1a，ASIC2a和ASIC3；ASIC3和P2X，例如P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6和P2X7，优选ASIC3和P2X2；ASIC3和P2X3；ASIC3，P2X2和P2X3；ASIC4和至少一种ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，和ASIC3；BLINaC(or hINaC)和至少一种ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3，和ASIC4；δENaC和ASIC，例如ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3和ASIC4；P2X1和P2X2，P2X1和P2X5，P2X2和P2X3，P2X2和P2X6，P2X4和P2X6，TRPV1和TRPV2，TRPV5和TRPV6，TRPV1和TRPV4。
测定本发明范围内调节门离子通道活性化合物性能的分析是本领域中已知的，并在实施例部分中描述。其它用于测定调节门离子通道活性化合物性能的分析对于熟练技术人员是容易的。
可以利用下列筛选法鉴别本发明门离子通道调节化合物，其中方法包括后面的步骤(i)通过调节pH值至酸性水平，令含门离子通道细胞经历选择性活化剂例如质子的作用，灌注缓冲剂中足够量ATP稀释ATP，或通过加热灌注缓冲剂至高于37℃温度；(ii)令含门离子通道细胞经历化合物(可以共施加，预施加或后施加的化合物)的作用；和(iii)监测由于活化剂例如质子，含门离子通道细胞上的膜电位改变或引发的离子电流。替代地，可以使用荧光图像监测活化剂例如质子引发的对含门离子通道细胞作用。
可以利用任何适当的酸或缓冲剂，包括有机酸例如甲酸，乙酸，柠檬酸，抗坏血酸，2-吗啉代乙烷磺酸(MES)和乳酸，和无机酸例如盐酸，氢溴酸和硝酸，过氯酸和磷酸，通过调节pH值至酸性水平，令含门离子通道细胞经历质子作用。本发明方法中，可以用电生理学的方法例如衬片夹紧或两电极电压夹紧技术监测横过含门离子通道细胞薄膜，由活化剂例如质子引发的电流。替代地，可以利用荧光法监测用门离子通道活化剂例如含门离子通道细胞的质子引发的膜电位改变。当利用荧光法时，用膜电位指示剂培养含门离子通道细胞，该指示剂可以测定由加入活化剂例如质子所引起的细胞膜电位改变。该膜电位指示剂包括荧光指示计，优选DiBAC4(3)，DiOC5(3)，DiOC2(3)，DiSBAC2(3)和FMP(FLIPR膜电位)染料(Molecular Devices)。另一个可选择实施方式中，可以通过评估细胞内某些离子例如钙，钠，钾，镁，质子的浓度，并用荧光测量细胞中氯化物，测量活化剂例如质子对门离子通道的引发的门离子通道活性改变。可以利用板极读出器，例如FLIPR分析(荧光图像板读出器；可从Molecular Devices获得)，例如利用荧光钙指示剂，例如如下列文献中所述，以多次板极进行荧光分析：例如，SullivanE。，等人(1999)Methods Mol Biol.114：125-33，Jerman，J.C.，等人(2000)Br J Pharmacol 130(4)：916-22，和U.S.Patent No 6608671，此处引入其内容作为参考。当利用荧光法时，用选择性离子指示剂培养含门离子通道细胞，该指示剂可以测定由加入活化剂例如质子所引起的细胞内离子浓度改变。该离子指示剂包括荧光钙指示剂，优选Fura-2，Fluo-3，Fluo-4，Fluo4FF，Fluo-5F，Fluo-5N，Calcium Green，Fura-Red，Indo-1，Indo-5F和rhod-2，荧光钠指示剂，优选SBFI，Sodium Green，CoroNa Green，荧光钾指示剂优选PBFI，CD222，荧光镁指示剂，优选Mag-Fluo-4，Mag-Fura-2，Mag-Fura-5，Mag-Fura-Red，Mag-indo-1，Mag-rho-2，Magnesium Green，荧光氯化物指示剂，优选SPQ，Bis-DMXPQ，LZQ，MEQ和MQAE，荧光pH值指示剂，优选BCECF BCPCF。
本发明门离子通道拮抗化合物在低于以下浓度表现出活性：2M，1.5M，1M，500mM，250mM，100mM，750μM，500μM，250μM，100μM，75μM，50μM，25μM，10μM，5μM，2.5μM，或低于1μM。其最优选实施方式中，ASIC拮抗化合物在低微摩尔和纳米摩尔范围中表现出活性。
此处使用的，术语“接触”(即接触细胞例如神经神经元细胞与化合物)包括活体外培养化合物和细胞(例如加入化合物至培养中细胞)或施用患者化合物，使得化合物和患者细胞活体内接触。术语“接触”不包括暴露细胞至患者中天然可以出现的调节剂或化合物(即暴露可以天然生理过程产物的形式存在)。
A.活体外分析
可以用标准生物技术或化学合成容易地产生此处公开的分析用门离子通道多肽。例如，可以在合适的条件下培养包含核苷酸序列编码所需门离子通道的用表达媒介物转染的寄主细胞，以允许缩氨酸表达出现。替代地，可以通过培养原发细胞系，或建立可以产生门离子通道的细胞系，获得门离子通道。
可以活体外实践本发明方法，例如细胞基培养筛选分析中筛选可能键合，活化或调节门离子通道功能的化合物。该方法中，调节化合物可以与样品或培养物中门离子通道相互作用，并消除任何特殊功能。调节化合物还可以用于控制神经神经元细胞培养物中门离子通道活性。
天然存在门离子通道的活体外分析用细胞，包括多种细胞，例如其中特定老鼠或小鼠皮层的神经神经元细胞中的外皮神经神经元细胞，和特定HEK293细胞系中人类胚肾(HEK)细胞。例如，可以从初期的人类细胞，新生的人类细胞和成人人类细胞培养细胞。初生细胞培养物也能够用于本发明的方法中。例如，还可以从不同动物物种分离感觉神经神经元细胞，并体外培养。最广泛使用的流程使用从新生(Eckert，等人(1997)J Neurosci Methods 77：183-190)和初期(Vasko，等人(1994)JNeurosci 14：4987-4997)小鼠分离的感觉神经元。培养物中三叉神经和脊神经后根神经节感觉神经元表现出某些活体内感觉神经元特征。替代地，门离子通道例如门通路，例如质子门离子通道可以是所讨论细胞的外部，并用DNA重组技术可以特定引入，例如转染，显微注射或感染。该细胞包括中国仓鼠卵巢(CHO)细胞，HEK细胞，非洲绿猴肾细胞系(得自COS细胞，例如COS-1和COS-7的CV-1或CV-1)爪蟾卵母细胞，或任何其它能够表达门离子通道的细胞系。
本发明门离子通道的核苷酸和氨基酸序列是本领域已知的。例如，人类门通路的序列可以在Genbank GI Accession Nos中发现：GI：40556387(ENaCalpha智人)；GI：4506815(ENaCalpha智人)；GI：4506816(ENaCbeta智人)；GI：4506817(ENaCbeta智人)；GI：34101281(ENaCdelta智人)；GI：34101282(ENaCdelta智人)；GI：42476332(ENaCgamma智人)；GI：42476333(ENaCgamma智人)；GI：31442760(HINAC智人)；GI：31442761(HINAC智人)；GI：21536350(ASIC1a智人)；GI：21536351(ASIC1a智人)；GI：21536348(ASIC1b智人)；GI：21536349(ASIC1b智人)；GI：34452694(ASIC2；transcript 1智人)；GI：34452695(ASIC2；isoform1智人)；GI：34452696(ASIC2；transcript 2智人)；GI：9998944(ASIC2；isoform 2智人)；GI：4757709(ASIC3；transcript 1智人)；
GI：4757710(ASIC3；isoform 1智人)；GI：9998945(ASIC3；transcript 2智人)；GI：9998946(ASIC3；isoform 2智人)；GI：9998947(ASIC3；transcript 3智人)；GI：9998948(ASIC3；isoform3智人)；GI：33519441(ASIC4；transcript 1智人)；GI：33519442(ASIC4；isoform 1智人)；GI：33519443(ASIC4；transcript 2智人)；GI：33519444(ASIC4；isoform 2智人)；GI：27894283(P2X1智人)；GI：4505545(P2X1智人)；GI：28416917(P2X2；transcript 1智人)；GI：25092719(P2X2；isoform A智人)；GI：28416922(P2X2；transcript 2智人)；GI：28416923(P2X2；isoform B智人)；GI：28416916(P2X2；transcript 3智人)；GI：7706629(P2X2；isoform C智人)；GI：28416918(P2X2；transcript 4智人)；GI：25092733(P2X2；isoform D智人)；GI：28416920(P2X2；transcript 5智人)；GI：28416921(P2X2；isoform H智人)；GI：28416919(P2X2；transcript 6智人)；GI：27881423(P2X2；isoform I智人)；GI：28416924(P2X3智人)；GI：28416925(P2X3智人)；GI：28416926(P2X4；transcript 1智人)；GI：28416927(P2X4；isoform A智人)；GI：28416928(P2X4；transcript 2智人)；GI：28416929(P2X4；isoform B智人)；GI：28416930(P2X4；transcript 3智人)；GI：28416931(P2X4；isoform C智人)；GI：28416932(P2X5；transcript 1智人)；GI：28416933(P2X5；isoform A智人)；GI：28416934(P2X5；transcript 2智人)；GI：28416935(P2X5；isoform B智人)；GI：28416936(P2X5；transcript 3智人)；GI：28416937(P2X5；isoform C智人)；GI：38327545(P2X6智人)；GI：4885535(P2X6智人)；GI：34335273(P2X7；transcript 1智人)；GI：29294631(P2X7；isoform A智人)；GI：34335274(P2X7；transcript 2智人)；GI：29294633(P2X7；isoform B智人)；GI：18375666(TRPV1；transcript1智人)；GI：18375667(TRPV1；vanilloid受体子类型1智人)；GI：18375664(TRPV1；transcript 2智人)；GI：18375665(TRPV1；vanilloid受体子类型1智人)；GI：18375670(TRPV1；transcript 3智人)；GI：18375671(TRPV1；vanilloid受体子类型1智人)；GI：18375668(TRPV1；transcript 4智人)；GI：18375669(TRPV1；Vanilloid受体子类型1智人)；GI：7706764(VRL-1；transcript 1智人)；GI：7706765(VRL-1；vanilloid受体类蛋白质1智人)；GI：22547178(TRPV2；transcript 2智人)；GI：20127551(TRPV2；vanilloid受体类蛋白质1智人)；GI：22547183(TRPV4；transcript 1智人)；GI：22547184(TRPV4；isoform A智人)；GI：22547179(TRPV4；transcript 2智人)；GI：22547180(TRPV4；isoform B智人)；GI：21361832(TRPV5智人)；GI：17505200(TRPV5智人)；GI：21314681(TRPV6智人)；GI：21314682(TRPV6智人)；GI：34452696(ACCN1；transcript 2；智人)。此处引入这些记录的内容作为参考。另外，可以容易地使用用于其它物种通路序列，并可由本领域熟练技术人员得到。
可以利用cDNA，mRNA或基因组DNA作为模板，和合适的低聚核苷酸底料，根据标准PCR扩大技术，扩大用于本发明方法的核酸分子编码门离子通道。可以仿制如此放大的核酸成为合适的媒介物，并用DNA序列分析表征。利用全部或部分该核酸序列，可以利用标准杂交和仿制技术分离本发明核酸分子(例如，公开于Sambrook等人，ed.，MolecularCloning：A Laboratory Manual，第二版，Cold Spring Harbor LaboratoryPress，Cold Spring Harbor，NY，1989)。
利用标准技术将表达媒介物，包含核酸编码门离子通道，例如门离子通道亚组蛋白质，例如ENaC，ENaC，ENaC，ENaC，ASIC1a，ASIC1b，ASIC2a，ASIC2b，ASIC3，ASIC4，BLINaC，hINaC，，P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5，P2X6，P2X7，TRPV1，TRPV2，TRPV3，TRPV4，TRPV5，和TRPV6蛋白质(或其部分)引入细胞并operably连接到调整序列。例如Goeddel Methods in Enzymology：Gene ExpressionTechnology vol.185，Academic Press，San Diego，CA(1991)中公开了该调整序列。调整序列包括在多种寄主细胞中直接结构表达核苷酸序列，和仅在某些寄主细胞中直接表达核苷酸序列(例如，特定组织调整序列)。本领域熟练技术人员可以理解的是，表达媒介物的设计可以根据该因素，作为要转变寄主细胞的选择，所需蛋白质表达水平等。本发明表达媒介物可以引入寄主细胞，从而产生蛋白质或缩氨酸，包括熔合蛋白质或缩氨酸，用此处公开的核酸编码。
在酵母S cerevisiae中表达的媒介物实例包括pYepSec1(Baldari等人，1987，EMBO J.6：229-234)，pMFa(Kurjan Herskowitz，1982，Cell 30：933-943)，pJRY88(Schultz等人，1987，Gene 54：113-123)，pYES2(Invitrogen Corporation，San Diego，CA)和pPicZ(InvitrogenCorp，San Diego，CA)。
可用于在培养昆虫细胞(例如，Sf 9细胞)中表达蛋白质的杆状病毒媒介物包括pAc系列(Smith等人，1983，Mol.Cell Biol.3：2156-2165)和pVL系列(Lucklow Summers，1989，Virology 170：31-39)。
哺乳动物表达媒介物实例包括pCDM8(Seed，1987，Nature 329：840)，pMT2PC(Kaufman等人，1987，EMBO J.6：187-195)，pCDNA3.当用于哺乳动物细胞时，表达媒介物的控制功能通常由病毒调整成分提供。例如，通常使用得知多形瘤，腺病毒2，巨细胞病毒和猿猴病毒40的促进剂。其它合适真核细胞的表达系统参见Sambrook等人的16和17章
B.活体内分析
能够以动物模型分析此处公开的本发明调节一种或多种门离子通道活性(例如门离子通道调节剂，例如本发明化合物)化合物活性，以测定用该试剂治疗的功效，毒性或副作用。替代地，此处公开的鉴别试剂可用于动物模型，以测定该试剂的作用机理。
测定调节门离子通道生物活性本发明化合物的性能动物模型是熟练技术人员已知的，并且熟练技术人员容易使用。疼痛和炎症的动物模型实例包括但是不局限于表1列出的模型。研究神经紊乱的动物模型包括但是不局限于Morris等人公开的(Learn.Motiv.1981；12：239-60)和Abeliovitch等人，Cell 1993；75：1263-71).研究智力和行为紊乱的动物模型实例是Geller-Seifter paradigm，如Psychopharmacology(Berl)所述1979 Apr 11；62(2)：117-21.
泌尿生殖器模型包括通过注入硫酸鱼精蛋白和氯化钾降低测试动物的膀胱容量(参见，Chuang，Y.C.等人，Urology 61(3)：664-670(2003))或稀释乙酸(参见，Sasaki，K.等人，J.Urol.168(3)：1259-1264(2002))进入膀胱。尿路紊乱包括利用膀胱内施用膀胱硫酸鱼精蛋白，如Chuang等人所述(2003)Urology 61：664-70。这些方法还包括使用尿路紊乱较好接受的模型，包括利用膀胱内施用膀胱乙酸，如Sasaki等人所述(2002)J.Urol.168：1259-64。测试治疗脊髓伤害病人功效的方法如Yoshiyama等人所述(1999)Urology 54：929-33。
神经性疼痛的动物模型基于予以神经(主要是坐骨神经)的损伤，如Bennett等人公开1988，Pain 33：87-107；Seltzer等人，1990，Pain 43：205-218；Kim等人，1992，Pain 50：355-363；Decosterd等人，2000，Pain 87：149-158 DeLeo等人，1994，Pain 56：9-16。还有糖尿病性神经病变模型(STZ引发糖尿病神经病变-Courteix等人，1994，Pain 57：153-160)和药物诱发的神经病(长春新碱引发神经病-Aley等人，1996，Neuroscience 73：259-265；肿瘤学相关免疫疗法，抗GD2抗体-Slart等人，1997，Pain 60：119-125)。可以利用在鼠科动物中化学刺激再现人类中急性疼痛：Martinez等人，Pain 81：179-186；1999(在老鼠中扭动测试-腹内乙酸)，dubuisson等人Pain1977；4：161 161-74(内足底(intraplantar)注入甲醛液)。急性疼痛模型的其它类型公开于Whiteside等人，2004，Br J Pharmacol 141：85-91(incisional模型，手术后疼痛模型)和Johanek Simone，2004，Pain 109：432-442(灼伤模型)。利用完全弗氏佐剂(内足底(intraplantar)注入)的发炎疼痛动物模型公开于Jasmin等人，1998，Pain 75：367-382。使用囊内注入刺激剂(全部Freund’s辅助剂，碘醋酸盐，辣椒素，晶体等)形成动物中关节炎模型(Fernihough等人，2004，Pain 112：83-93；Coderre Wall，1987，Pain 28：379-393；Otsuki等人，1986，Brain Res.365：235-240)。压力引发痛觉过敏模型公开于Quintero等人，2000，Pharmacology，BiochemistryBehavior 67：449-458。此外疼痛的动物模型公开于Walker等人1999Molecular Medicine Today 5：319-321，比较不同类型疼痛模型，其是急性疼痛，慢性/发炎疼痛和慢性/神经性疼痛，根据行为迹象。抑郁症的动物模型公开于E.Tatarczynska等人，Br.J.Pharmacol.132(7)：1423-1430(2001)P.J.M.Will等人，Trends inPharmacological Sciences 22(7)：331-37(2001))；焦虑模型公开于D.Treit，“研究抗焦虑剂动物模型的动物模型：综述，”Neuroscience & Biobehavioral Reviews 9(2)：203-222(1985)。此处例证部分中还公开了其它的疼痛动物模型。
胃肠模型可以发现于：Gawad，K.A.，等人，猪流动长期pH值监测，Surg Endosc，(2003)；Johnson，S.E.等人，在健康狗中食道酸清除试验，Can.J.Vet.Res.53(2)：244-7(1989)；和Cicente，Y.等人，食道酸清除：比运动性依赖健康小猪中更加体积依赖，J.Pediatr.Gastroenterol.Nutr.35(2)：173-9(2002)。多种分析模型可用于评估内脏运动和对直肠扩张的疼痛反应。参见例如Gunter等人，Physiol.Behav.，69(3)：379-82(2000)，Depoortere等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.，294(3)：983-990(2000)，Morteau等人，Fund.Clin.Pharmacol.，8(6)：553-62(1994)，Gibson等人，Gastroenterology(Suppl.1)，120(5)：A19-A20(2001)Gschossmann等人，Eur.J.Gastro.Hepat.，14(10)：1067-72(2002)此处引入其中全部内容作为参考。
可以基于活体内记录伴随整个动物中肠肌肉收缩的机械或电学事件，或在器官浴中活体外记录分离胃肠肠的肌肉制剂活性，评估胃肠运动性(参见例如Yaun等人，Br.J.Pharmacol.，112(4)：1095-1100(1994)，Jin等人，J.Pharm.Exp.Ther.，288(1)：93-97(1999)Venkova等人，J.Pharm.Exp.Ther.，300(3)：1046-1052(2002)).Tatersall等人Bountra等人，EuropeanJournal of Pharmacology，250：(1993)R5 249：(1993)R3-R4 Milano等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.，274(2)：951-961(1995)。
表1
Figure A20068004401000651
Figure A20068004401000661
替代地，该化合物还可以分析包含外部序列编码一种或多种门离子通道的非人类转基因动物。此处使用的“转基因的动物”是非人类动物，优选哺乳动物，更加优选啮齿动物例如小鼠或老鼠，其中动物的一种或多种细胞包括转基因。其它转基因的动物实例包括非人类灵长类，羊，狗，牛，山羊，小鸡，两栖动物等。通过胚胎手术和显微注射产生转基因动物的方法，特别是动物例如老鼠，已经变为本领域传统，并且例如公开于美国专利Nos.4,736,866 4,870,009，美国专利No.4,873,191 in Hogan，Manipulating the Mouse Embryo，Cold Spring HarborLaboratory Press，Cold Spring Harbor，N.Y.，1986。类似方法用于产生其它转基因动物。
同系的重组体动物还可以用于分析本发明化合物。可以根据已知的技术产生该动物(参见例如，Thomas和Capecchi，1987，Cell 51：503；Li等人，1992，Cell 69：915；Bradley，畸胎癌和初期的干细胞：实际方法，Robertson，Ed.，IRL，Oxford，1987，pp.113-152；Bradley(1991)生物/技术中电流鉴定2：823-829和PCT公开号WO90/11354，WO 91/01140，WO 92/0968和WO 93/04169)。
可以产生其它有用的转基因非人类动物，其中包括选择允许调节转基因表达的系统(参见例如Lakso等人(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：6232-6236)。重组酶系统的另一个实例是发面酵母的FLP重组酶体系(O′Gorman等人，1991，Science 251：1351-1355)。
药物组合物
本发明还提供了药物组合物。该组合物包括治疗(或prophylactically)有效量门离子通道调节剂，并优选一种或多种如上所述本发明化合物，以及药学可接受的载体或赋形剂。合适的药学可接受的载体包括但是不局限于盐水，缓冲盐水，葡萄糖，水，丙三醇，乙醇和其组合物。载体和组合物可以是无菌的。配方应该适合给药方式。
术语“药学可接受的载体”是本领域已知的，并包括药学可接受的材料，组合物或媒介物，适于施用本发明化合物至哺乳动物。载体包括液体或固体填料，稀释剂，赋形剂，溶剂或包封材料，涉及输送或转移患者药剂从身体的一个器官或部分到身体的另一个器官或部分。每种载体必须是″可接受″的，在一定意义上适合配方其它成分并且对患者无害。可以用作药学可接受的载体的材料一些实例包括：糖，例如乳糖，葡萄糖，右旋糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素和其衍生物，例如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素，甲基纤维素和醋酸纤维素；粉末黄芪胶；麦芽；凝胶；滑石；赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；油剂，例如花生油，棉子油，红花油，芝麻油，橄榄油，玉米油，蓖麻油，四甘醇和豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如丙三醇，山梨醇，甘露糖醇和聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯，聚乙二醇酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁，氢氧化钠，氢氧化钾，碳酸酯，三乙醇胺，醋酸酯，乳酸酯，柠檬酸钾和氢氧化铝；藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇；磷酸盐缓冲液；和其它无毒的药物配方中采用的相容物质。
组合物中还可以存在润湿剂，乳化剂和润滑剂，例如月桂醇硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂，脱模剂，涂布剂，香化，调味品和香料，防腐剂和抗氧化剂。
药学可接受的抗氧化剂的实例包括：水溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸，盐酸半胱氨酸，硫酸氢钠，焦亚硫酸钠，亚硫酸钠等；油溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸棕榈酸酯，丁基羟基苯甲醚(BHA)，丁基化羟基甲苯(BHT)，卵磷脂，培酸丙酯，α-生育酚和衍生物例如维生素E生育酚等；和金属螯合剂，例如柠檬酸，乙二胺四乙酸(EDTA)，山梨醇，酒石酸，磷酸，柠檬酸钠等。
合适的药学可接受的载体包括但是不局限于水，盐溶液(例如NaCl)，醇，阿拉伯树胶，植物油，苯甲醇，聚乙二醇凝胶，碳水化合物例如乳糖，糖淀粉或淀粉，环糊精，硬脂酸镁，滑石，硅酸，粘性石蜡烃，芳香油，脂肪酸酯，羟甲基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮等。药物制剂可以是灭菌的，并且如果需要，混合助剂例如润滑剂，防腐剂，稳定剂，润湿剂，乳化剂，影响渗透压力的盐，缓冲剂，颜料，香料和/或芳香物等，其与活性化合物没有有害反应。药学可接受的载体还包括张力调节药剂例如右旋糖，丙三醇，甘露糖醇和氯化钠。
如果需要，组合物还可以包括少量浸润或乳化剂，或pH值缓冲剂。该组合物可以是液体溶液，悬浮液，乳液，片剂，药丸，胶囊剂，持续释放配方或粉末。可以将组合物与传统粘合剂和载体例如三酸甘油酯配制为栓剂。口服配方可以包括标准载体例如药物等级甘露糖醇，乳糖，淀粉，硬脂酸镁，聚乙烯吡咯酮(pyrollidone)，糖钠，纤维素，碳酸镁等。可以根据适合于人类静脉内给药的药物组合物常用方法配制组合物。通常，用于静脉内给药的组合物是在无菌等渗压含水缓冲剂中的溶液。如果必要，该组合物还可以包括增溶剂和局部麻醉，以减轻在注入位置的疼痛。通常，单独提供成分，或以元件剂型混合在一起，例如作为密闭容器例如标明有效剂量的安瓿或小袋中干燥冻干粉末或无水的浓缩物。如果通过注射给药组合物，可以无需包含无菌药物等级水，生理盐水或葡萄糖/水的输液瓶。如果通过注射给药组合物，可以提供灭菌注射水或生理盐水的安瓿剂，使得可以在给药之前混合成分。
本发明药物组合物还可以包括控制释放门离子通道调节剂化合物的试剂，从而提供计时或持续释放组合物。本发明还涉及此处公开的门离子通道调节剂前体药物，以及包含该前体药物的药物组合物。例如，还可以制备包含酸官能团或羟基的本发明化合物，并作为与合适醇或酸的相应酯给药。然后通过内在的酶裂解酯，在患者体内产生活性剂。
本发明配方包括适用于口，鼻，局部，粘膜，透过皮肤，口腔，舌下，直肠，阴道和/或肠胃外给药。配方可以方便地存在于单元剂型中，并可以用任何药剂学领域已知的方法制备。可以与载体结合产生单个剂型的活性成分量通常是产生治疗效果的化合物量。通常，在百分之百以外，该量为约1％至约99％活性成分，优选约5％至约70％最优选约10％至约30％。
制备这些配方或组合物的方法包括接触本发明缔合化合物与载体又任选一种或更多种助剂的步骤。通常，制备配方通过均匀亲密地接触本发明缔合化合物与液体载体，或细分散的固体载体，或二者，然后如有必要形成产品。
本发明适用于口服配方可以是胶囊剂，扁囊剂，药丸，片剂锭剂(使用调味基体，通常为蔗糖和洋槐或黄芪胶)，粉末，颗粒形式，或作为含水或非水液体中溶液或悬浮液形式，或作为水包油或油包水液体乳液，或作为酏剂或糖浆，或作为锭剂(使用惰性基体，例如凝胶和丙三醇，或蔗糖和洋槐)和/或作为漱口剂等，每种包含预定量本发明化合物作为活性成分。本发明化合物还可以作为大丸剂，干药糖剂或糊剂给药。
本发明用于口服固体剂型(胶囊剂，片剂，药丸，糖锭，粉末，颗粒等)中，混合活性成分与一种或更多种药学可接受的载体，例如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或任何下列：填料或膨胀剂，例如淀粉，乳糖，蔗糖，葡萄糖，甘露糖醇和/或硅酸；粘合剂，例如羧甲基纤维素，褐藻酸盐，凝胶，聚乙烯基吡咯烷酮，蔗糖和/或洋槐；湿润剂，例如丙三醇；分裂剂，例如琼脂，碳酸钙，马铃薯或木薯淀粉，藻酸，某些硅酸盐和碳酸钠；溶液阻滞剂，例如石蜡；吸收促进剂，例如季铵化合物；润湿剂，例如十六烷醇和单硬脂酸甘油酯；吸收剂，例如高岭土和皂土；润滑剂，例如滑石，硬脂酸钙，硬脂酸镁，固体聚乙二醇，月桂醇硫酸钠和其混合物；和着色剂。在胶囊剂，片剂和药丸的情况下，药物组合物还可以包含缓冲剂。类似类型的固体组合物还可以用作使用赋形剂例如乳糖或乳糖，以及高分子量聚乙二醇等的柔性和硬填充胶囊中填料。
可以通过任选用一种或更多种助剂，压缩或模制生产片剂。可以使用粘合剂(例如凝胶或羟丙基甲基纤维素)，润滑剂，惰性稀释剂，防腐剂，崩解剂(例如淀粉羟基乙酸钠或交联羧甲基纤维素钠)，表面活性剂或分散剂，制备压制片。可以通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉末化合物混合物，生产模制片。
可以任选用涂层和壳体例如肠溶衣和其它药物配制领域已知的涂层scored或制备本发明药物组合物的片剂和其它固体剂型，例如糖锭，药丸和颗粒。还可以配制它们，以在使用中提供缓慢的活性成分或控制释放，例如不同比例的羟丙基甲基纤维素提供所需释放分布，其它聚合物基体，脂质体和/或微球。可以通过细菌保留过滤，或通过立即使用之前引入可以溶解在无菌水或其它无菌可注射的介质中无菌固体组合物形式杀菌剂灭菌。这些组合物还可以任选包含不透明剂，并可以具有仅或优选在胃肠道某一部分释放活性成分(一种或多种)的成分，任选以延迟方式释放。可以使用的嵌入成分实例包括聚合物和蜡。活性成分还可以是微囊密封的形式，如果合适具有一种或多种上述公开的赋形剂。
本发明化合物用于口服的液体剂型包括药学可接受的乳液，微乳液，溶液，悬浮液，糖浆和酏剂。除了活性成分，液体剂型可以包含通常用于该领域的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂，增溶剂和，例如乙醇，异丙醇碳酸乙酯，乙酸乙酯，苯甲醇，苄基苯甲酸，丙二醇，1，3-丁二醇，油剂(特别是棉籽，野豆，玉米，胚芽，橄榄，海狸和芝麻油剂)，丙三醇，四氢呋喃醇，脱水山梨糖醇的聚乙二醇和脂肪酸酯，和其混合物。
除了惰性稀释剂，口服配方还可以包括助剂例如润湿剂，乳化和悬浮剂，甜味剂，调味料，颜料，香水和防腐剂。
除了活性物质，悬浮液可以包含悬浮剂例如乙氧基化异硬脂酰基醇，聚氧化乙烯山梨醇和脱水山梨糖醇酯，微晶纤维素，甲基氢氧化铝，琼脂和黄芪胶和其混合物。
可以栓剂提供本发明用于直肠或阴道的给药药物组合物配方，制备其可以通过混合一种或更多种本发明化合物与一种或更多种合适的无刺激性的赋形剂或载体，包括例如可可脂，聚乙二醇，栓剂蜡或水杨酸酯，其在室温下是固体，但是在体温为液体，因此在直肠或阴道腔内溶化，并释放活性物质。
适用于阴道给药的本发明配方还包括含有本领域已知合适载体的阴道栓剂，止血塞，乳酪，凝胶剂，糊剂，泡沫或喷雾配方。局部或透过皮肤给药本发明化合物的剂型包括粉末，喷雾剂，软膏，糊剂，面霜，洗液，凝胶，溶液，衬片和吸入剂。可以在无菌条件下混合活性化合物和药学可接受的载体，以及任何可能需要的防腐剂，缓冲剂或推进剂。
除了本发明活性化合物，软膏，糊剂，面霜和凝胶可以包含赋形剂，例如动物和植物脂肪，油剂，蜡，石蜡烃，淀粉，黄芪胶，纤维素衍生物，聚乙二醇，硅氧烷，膨润土，硅酸，滑石和氧化锌或其混合物。
除了本发明化合物，粉末和喷雾剂可以包含赋形剂例如乳糖，滑石，硅酸，氢氧化铝，硅酸钙和聚酰胺粉末，或这些物质的混合物。喷雾剂另外可以通常的推进剂，例如含氯氟烃和挥发性未取代的烃，例如丁烷和丙烷。
透过皮肤衬片已经增加了提供控制本发明化合物递送至身体的优点。可以在适当的介质中通过溶解或分散化合物，生产该剂型。此外可使用吸收增强剂增加化合物穿过皮肤的流动。可以通过提供速度控制薄膜或在聚合物基体或凝胶中分散活性化合物，控制该流动速度。
此外眼用配方，眼膏，粉末，溶液等也在本发明范围内。
本发明适于肠胃外投药法的药物组合物包括一种或多种本发明化合物，与一种或多种药学可接受的无菌的等压含水或非水的溶液，分散体，悬浮液或乳液，或可以就在使用之前重构成为无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末，其可以包含抗氧化剂，缓冲剂，抑菌剂，溶质(其使得配方与预定接受者血液等渗压)或悬浮或增稠剂。
可以用于本发明药物组合物的合适的含水和非水载体实例包括水，乙醇，多元醇(例如丙三醇，丙二醇，聚乙二醇等)，和其合适的混合物，植物油，例如橄榄油，和可注射的有机酯，例如油酸乙酯。例如，通过使用涂布材料，例如卵磷脂，通过在分散体情况下保持所需粒径，并通过使用表面活性剂，可以保持适当的流动性。
此外这些组合物可以包含辅助剂例如防腐剂，润湿剂，乳化剂和分散剂。可以通过包含多种抗菌剂和抗真菌剂例如对羟苯甲酸，氯代丁醇，苯酚山梨酸等，保证防止微生物的作用。此外合乎需要的是组合物包括等渗压试剂，例如糖，氯化钠等。此外，可以通过包含延迟吸收的试剂例如单硬脂酸铝和凝胶，延长可注射的药物形式吸收。
有时候，为了延长药物的作用，合乎需要的是从皮下或肌肉注射减慢药物吸收。这可以通过使用具有较差水溶性结晶或无定形物质的液体悬浮液实现。那么药物的吸收速度取决于其溶解速度，其随后可能取决于晶体尺寸和晶形。替代地，通过在油剂载体中溶解或悬浮药物，实现肠胃外施用药物的延迟吸收。
通过令化合物在可生物降解的聚合物例如聚交酯-聚乙交酯中形成微胶囊基质，产生可注射的储存形式。根据药物与聚合物比例，采用的特定的聚合物性质，可以控制药物释放速度。其它可生物降解的聚合物实例包括聚(正酯)和聚(酸酐)。此外通过使药物陷入与身体组织相容的脂质体或微乳液中，制备可储存注射的配方。
给药方法
本发明提供了一种用患者中门离子通道活性调节治疗老化的方法，包括但不限于痛苦，发炎性疾病，神经系统紊乱，胃肠机能紊乱和泌尿生殖器紊乱。该方法包括为患者施用治疗门离子通道调节剂的步骤。治疗的老化可以是任何至少部分由门离子通道活性(例如ASIC1a和/或ASIC3)调节的老化。
给药指定化合物的数量取决于单人，并且至少部分由个体大小，要治疗的症状严重程度和调查结果确定。此处描述门离子通道活性调节剂可以单独给药，或给药包括调节剂，可接受载体或稀释剂和任选一种或多种其它药物的药物组合物。
这些化合物可以通过任何合适的给药途径为治疗的人和其它动物给药。可以皮下，静脉内，非肠道，腹膜内，真皮内肌内注射，局部，肠内(例如口头)，直肠，鼻腔，向颊，舌下，系统，阴道给药门离子通道调节剂，通过吸入喷雾剂，通过药物泵或通过植入容器，以包含传统无毒，生理学可接受载体或媒介物配方剂量给药。优选通过口服递送的给药方法。给药(例如糖浆，酏剂，胶囊剂，片剂，溶液，泡沫，乳液，凝胶，溶胶)形式部分取决于给药路径。例如，用于粘膜(例如口腔粘膜，直肠粘膜，肠粘膜，支气管粘膜)给药，可以使用滴鼻剂，烟雾剂，吸入剂，喷雾器，滴眼剂或栓剂。可以给药本发明化合物和试剂与其它生物活性剂，例如镇痛剂，麻醉剂，消炎剂，例如NSAIDs，麻醉剂和其它可以控制一种或多种症状或导致门离子通道调节老化的试剂。
特定实施方式中，合乎需要的是局部给药本发明试剂至治疗所需局部区域；实现此事可以通过例如利用导管，利用栓剂或利用植入物，在手术期间局部注入，局部施用，透过皮肤patches，通过注入，但这不是限定，所述植入物具有多孔，无孔或凝胶材料，包括薄膜，例如sialastic薄膜或纤维。例如，该试剂可以注入关节或膀胱。
本发明化合物可以任选结合给药一种或多种其它的药物，例如已知治疗和/或缓和由门离子通道(例如ASIC1a和/或ASIC3)调节老化症状的药物。其它的药物可以与本发明化合物同时给药，或顺序给药。例如，可以结合给药本发明化合物与至少一种镇痛剂，消炎剂，麻醉剂，皮质类甾醇(例如地塞米松，倍氯米松二丙酸盐(BDP)治疗)，抗惊厥剂，抗抑郁剂，抗反胃剂，抗精神病试剂，心血管试剂(例如β-阻断剂)或癌症治疗剂。某些实施方式中，结合给药本发明化合物与疼痛药物。此处使用的术语“疼痛药物”是指镇痛剂，消炎剂，麻醉剂，皮质类甾醇，镇癫痫剂，巴比土酸盐，抗抑郁剂和大麻。
上述组合治疗可以在给药本发明组合物之前，同时或之后开始。因此，本发明方法可以进一步包括施用第二治疗的步骤，例如疾病或紊乱的第二治疗，或改善其它治疗的副作用。该第二治疗可以包括例如抗炎症的药物和任何关于治疗疼痛的治疗。另外或替代地，进一步治疗可以包括给药药物，以进一步治疗疾病或治疗疾病或其它治疗(例如抗反胃药物，抗炎症的药物，兴奋剂，抗精神病学药物，抗惊厥剂，类固醇，心血管药物和癌症化学治疗剂)的副作用。
此处使用的“镇痛剂”是减少或降低疼痛或任何其迹象或症状(例如痛觉过敏，异常性疼痛(allodynia)，感觉迟钝，感觉过敏，痛觉过敏，感觉异常)并且此外可以导致减少炎症的试剂，例如消炎剂。镇痛剂可以再分成NSAIDs(非甾体的抗炎药物)，麻醉止痛剂，包括鸦片样物质镇痛剂，和非麻醉止痛剂。NSAIDs可以进一步再分成非选择性的COX(环加氧酶)抑制剂和选择性的COX2抑制剂。鸦片样物质镇痛剂可以是天然，合成或半合成鸦片样物质镇痛剂，并包括例如吗啡，可待因，派替啶，右丙氧芬(propxyphen)，氧可酮，氢吗啡酮，海洛因，反胺苯环醇和芬太奴。非麻醉止痛剂(也称为非鸦片样物质)镇痛剂包括例如对乙酰氨基酚，可乐宁，NMDA对抗剂，香草酸受体拮抗体(例如TRPV1对抗剂)，普加巴林，内源性大麻素类和大麻素类。非选择性的COX抑制剂包括但是不局限于乙酰水杨酸(ASA)，布洛芬，甲氧萘丙酸，酮基布洛芬，吡罗昔康，依托度酸和溴芬酸。选择性的COX2抑制剂包括但是不局限于塞来考昔，伐地考昔，帕瑞考昔和艾托考昔。
此处使用的“麻醉剂”是干扰接近给药位置感觉，局部麻醉，或产生意识改变或意识丧失的药剂，例如系统麻醉剂。局部麻醉剂包括但是不局限于昔罗卡因和布比卡因(buvicaine)。
镇癫痫剂的非限定实例是酰胺咪嗪，二苯乙内酰脲和加巴喷丁。抗抑郁药的非限定实例是阿米替林和地昔帕明(desmethylimiprimine)。
抗炎药物的非限定实例包括皮质类甾醇(例如皮质甾醇，可的松，泼尼松，氢化尼松，甲基泼尼松，氟羟脱氢皮醇，氟氢化泼尼松，培他米松和地塞米松)，水杨酸酯，NSAIDs，抗组胺药和H2受体拮抗体。
此处使用的术语“肠胃外投药”和“肠胃外给药”是指除肠内和局部给药通常通过注射以外的给药模式，并包括，但是不限于静脉内，肌肉内，动脉内，鞘内，囊内，眶内，心内，真皮内，腹膜内，经气管，皮下，表皮下，关节内，囊下，蛛网膜下，脊柱内和胸骨内注射和注入。
此处使用的“系统的给药”，“系统地给药”，“周围给药”和“外围地给药”术语是指除直接进入中枢神经系统以外，给药化合物，药物或其它材料，使得它进入患者系统，因此经受新陈代谢和其它类似过程，例如，皮下给药。
不考虑选择的给药途径，可以合适的水合形式使用的本发明化合物，和/或用本领域已知传统方法，配制本发明药物组合物成为药学可接受的剂型。
本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平可以改变，以获得有效获得特定患者所需治疗响应的量，对患者无毒的组合物和给药模式。
选择剂量水平取决于多种因素，包括使用的本发明特定化合物或其酯，盐或酰胺的活性，给药途径，给药时间，使用的特定化合物排出速度，治疗持续时间，与使用的特定化合物结合使用的其它药物，化合物和/或材料，治疗患者的年龄，性别，重量，身体状况，平时健康情况和先前病历，和医药领域已知的类似因素。
具有本领域普通技能的医师或兽医可以容易地确定需要药物组合物和开处方有效量。例如，可以使用治疗状态动物模型，通过导出剂量反应曲线，确定本发明化合物剂量。例如，医师或兽医可以提议用于药物组合物的本发明化合物剂量水平低于所需，以获得所需治疗效果，并逐步增加剂量，直至获得预期效果。
通常，本发明化合物合适的日剂量是最小产生治疗效果的有效剂量的化合物量。该有效剂量通常取决于上面描述的因素。通常，当用于达到止痛效果时，用于患者的本发明化合物的静脉内和皮下的剂量为约0.0001至约100毫克每公斤体重每天，更优选约0.01至约100毫克每千克每天，更加优选约1.0至约50毫克每千克每天。有效量是治疗门离子通道伴随状态或门离子通道紊乱的量。
如果需要，活性物质的可以在整天内合适间隔，单独给药2，3，4，5，6或更多副剂量活性物质的有效日剂量，任选为单元剂型。
虽然可以单独给药本发明化合物，优选以药物组合物给药化合物。
治疗方法
上述化合物可以用于给药患者，用于调节门离子通道调节活动，涉及，但是不限于疼痛，炎性紊乱，神经系统紊乱和任何被至少部分被门离子通道调节活动调节的细胞，器官或生理系统的异常功能。另外，应当理解该化合物还可以减轻或治疗一种或更多种其它此处讨论的疾病或紊乱症状。
因此，一个方面中，本发明化合物可用于治疗疼痛，包括急性，慢性，恶性和非恶性身体疼痛(包括皮肤上的疼痛和深部身体疼痛)，内脏疼痛和神经病疼痛。此外可以理解的是，该化合物还可以减轻或治疗一种或更多种另外的疼痛和感觉缺乏病征或症状(例如，痛觉过敏，异常性疼痛，感觉迟钝，感觉过敏，痛觉过敏，感觉异常)。
本发明该方面一定实施方式中，本发明化合物可用于治疗身体或皮肤上伤害伴随的疼痛，皮肤和相关器官的炎症，疾病和紊乱，包括但不限于切口，烧伤，裂伤，刺穿，切痕，外科疼痛，手术后疼痛，口牙手术，牛皮癣，湿疹，皮肤炎和变应性。本发明化合物还可以治疗恶性和非恶性皮肤和相关器官瘤(例如黑瘤，皮肤基底细胞癌)伴随的身体疼痛。
本发明该方面的其它实施方式中，本发明化合物可用于治疗肌与骨和连接组织伤害，炎症，疾病和紊乱伴随的深部身体疼痛包括但不限于关节痛，肌痛，纤维肌痛，肌筋膜疼痛并发症，牙科疼痛，腰部疼痛，劳动和输送期间疼痛，外科疼痛，手术后疼痛，头痛，偏头痛，自发疼痛紊乱，挫伤，骨折，骨损伤，骨质疏松症，剧烈的烧伤，痛风，关节炎(arthiritis)，骨关节炎，肌炎和背病(例如，椎骨脱离，半脱位，坐骨神经痛和斜颈)。本发明化合物还可以治疗恶性和非恶性肌与骨和结缔组织(例如肉瘤，横纹肌肉瘤和骨癌)伴随的深部身体疼痛。
本发明该方面的其它实施方式中，本发明化合物可用于治疗循环系统，呼吸系统，生殖泌尿系统，胃肠系统和眼睛，耳朵，五官科伤害，炎症，疾病或紊乱伴随的内脏疼痛。
例如，本发明化合物可用于治疗循环系统损失，炎症和紊乱伴随的内脏疼痛，包括但是不局限于缺血性(ischaemic)疾病，缺血性(ischaemic)心脏疾病，例如心绞痛，急性心肌梗塞，冠状动脉血栓形成，冠状动脉供血不足)，血液和淋巴管疾病(例如周围性血管疾病，间歇性跛行，曲张静脉，痔，静脉栓塞症或血栓症，静脉炎，血栓性静脉炎淋巴腺炎，淋巴管炎)，和恶性和非恶性的循环系统瘤(例如淋巴瘤，骨髓瘤，霍奇金病)伴随的内脏疼痛。
另一个实例中，本发明化合物可用于治疗呼吸系统伤害，炎症，疾病和紊乱伴随的内脏疼痛，包括不局限于上呼吸道感染(例如鼻咽炎，窦炎和鼻炎)，流行性感冒，肺炎(例如细菌，病毒，寄生虫和真菌)，下呼吸道感染(例如支气管炎，细支气管炎，气管支气管炎)，空隙肺疾病，肺气肿，支气管扩张，哮喘性支气管，哮喘，肺纤维化，慢性梗阻性肺疾病(COPD)，胸膜疾病，和恶性和非恶性呼吸系统瘤(例如小细胞癌，肺癌，喉气管瘤)伴随的内脏疼痛。
另一个实例中，本发明化合物可用于治疗胃肠系统损失，炎症和紊乱伴随的内脏疼痛，包括但是不局限于牙齿和口腔粘膜的损失，炎症和紊乱(例如阻生牙，龋齿，牙周病，口部口疮，牙髓炎，齿龈炎，牙周炎和口腔炎)，食道，胃和十二指肠的损失，炎症和紊乱(例如溃疡，消化不良，食管炎，胃炎，十二指肠炎，憩室炎和阑尾炎)，肠的损失，炎症和紊乱(例如克罗恩氏病，麻痹性肠梗阻，肠梗阻，过敏性肠综合征，神经性肠，巨结肠，炎症性肠病，溃疡性结肠炎和肠胃炎)，腹膜的损失，炎症和紊乱(例如腹膜炎)，肝的损失，炎症和紊乱(例如肝炎，肝坏疽，肝梗死，肝的静脉闭塞疾病)胆，胆道和胰腺的损失，炎症和紊乱(例如胆石病，胆囊石病，胆总管石病，胆汁和胰腺炎)伴随的内脏疼痛，官能腹痛并发症状(FAPS)，胃肠运动性紊乱，以及胃肠系统恶性和非恶性瘤(例如食道，胃，小肠，结肠，肝和胰腺瘤)伴随的内脏疼痛。
另一个实例中，本发明化合物可用于治疗生殖泌尿系统的伤害，炎症，疾病和紊乱，包括但是不局限于肾的损失，炎症和紊乱(例如肾石病，血管球性肾炎，肾炎，间质性肾炎，肾盂炎，肾盂肾炎)，尿路损伤，炎症和紊乱(例如包括尿石病，尿道炎，尿路感染)，膀胱的损伤，炎症和紊乱(例如膀胱炎，神经性膀胱囊，神经性膀胱机能不良，过度活化的膀胱，膀胱颈梗阻)，男性生殖器的损伤，炎症，疾病(例如前列腺炎，睾丸炎和附睾炎)，女性生殖器的损伤，炎症，疾病(例如盆腔炎症性疾病，子宫内膜异位症，痛经，卵巢囊肿)伴随的内脏疼痛，以及生殖泌尿系统恶性和非恶性瘤伴随的疼痛(例如膀胱，前列腺，胸部，卵巢瘤)。
本发明该方面的另一个实施方式中，本发明化合物可用于治疗包括中枢神经系统和周围神经系统的神经系统损伤，炎症，疾病和紊乱伴随的神经性疼痛。该神经性疼痛伴随的损伤，炎症，疾病或紊乱实例包括但是不局限于神经病(例如糖尿病性神经病变，药物引发神经病，放射治疗引发神经病)，神经炎，神经根病，脊神经根炎，神经变性疾病(例如肌营养障碍)，脊髓损伤，周围神经损伤，癌症伴随的精神损伤，Morton神经瘤，头痛(例如非器质性慢性头痛，紧张型头痛，集束性头痛和偏头痛)，偏头痛，多重躯体化并发症状，带状疱疹神经痛(带状疱疹)，三叉神经痛复合局部疼痛并发症状(也称为灼痛或反射交感性营养不良)，神经根痛，假肢痛，慢性头部疼痛，神经干疼痛，躯体形疼痛紊乱，中枢性疼痛，非心脏胸痛，中心中风后疼痛。
另一个方面中，本发明化合物可用于治疗皮肤和相关器官，肌与骨和结缔组织系统，呼吸系统，循环系统，生殖泌尿系统和胃肠系统的损伤，疾病或紊乱伴随的炎症。
本发明该方面的一些实施方式中，可以用本发明化合物治疗的皮肤和相关器官的炎性老化，疾病或紊乱实例包括但是不局限于变应性，异位性皮炎，牛皮癣和皮肤炎。
本发明该方面的其它实施方式中，可以用本发明化合物治疗的肌与骨和结缔组织系统的炎性老化，疾病或紊乱实例包括但是不局限于关节炎，骨关节炎和肌炎。
本发明该方面的其它实施方式中，可以用本发明化合物治疗的呼吸系统的炎性老化，疾病或紊乱实例包括但是不局限于变应性，哮喘，鼻炎，神经性的炎症，肺纤维化，慢性阻塞性肺病(COPD)，成人呼吸窘迫综合征，鼻咽炎，窦炎和支气管炎。
本发明该方面的其它实施方式中，可以用本发明化合物治疗的循环系统的炎性老化，疾病或紊乱包括但是不局限于心内膜炎，心包炎，心肌炎，静脉炎，淋巴腺炎和动脉粥样硬化。
本发明的该方面另一个实施方式中，可以用本发明化合物治疗的生殖泌尿系统炎性老化，疾病或紊乱包括但是不局限于肾炎症(例如肾炎，间质性肾炎)，膀胱炎症(例如膀胱炎)，尿道炎症(例如尿道炎)，男性生殖器炎症(例如前列腺炎)，女性生殖器炎症(例如盆腔炎症性疾病)。
本发明该方面的另一个实施方式中，可以用本发明化合物治疗的胃肠系统炎性老化，疾病或紊乱包括但是不局限于胃炎，肠胃炎，结肠炎(例如溃疡性结肠炎)，炎性肠并发症状，克罗恩病，胆汁，胰腺炎和阑尾炎。
本发明该方面的另一个实施方式中，可以用本发明化合物治疗的炎性老化，疾病或紊乱包括但是不局限于微生物传染伴随的炎症(例如细菌，病毒和真菌传染)，物理试剂(例如烧伤，辐射和外伤)，化学试剂(例如毒素和腐蚀性物质)，组织坏疽和多种类型的免疫反应和自身免疫疾病(例如红斑狼疮)。
另一个方面中，本发明化合物可用于治疗神经系统的损伤，疾病或紊乱，包括但不限于神经变性的疾病(例如阿尔茨海默氏症，杜兴氏疾病)，癫痫症，多发性硬化，肌萎缩性侧索硬化，中风，脑缺血，神经病(例如化疗引发神经病，糖尿病性神经病变)，视网膜色素退化，中枢神经系统的创伤(例如脊髓损伤)，和神经系统癌症(例如成神经细胞瘤，成视网膜细胞瘤，脑癌和神经胶质瘤)，和其它某些癌症(例如黑瘤，胰腺癌)。
本发明的另一个方面中，本发明化合物还可以用于治疗其它皮肤和相关器官(例如头发损失)的紊乱，循环系统的紊乱(例如心脏心律不齐和纤维性颤动和交感超过神经分布)，和生殖泌尿系统的紊乱(例如神经性膀胱机能不良和过度活化的膀胱)。
本发明提供了一种治疗患者的方法，其得益于给药本发明组合物。可以用本发明方法治疗任何得益于门离子通道调节剂的治疗征候。本方法包括为患者施用本发明组合物的步骤，使得治疗疾病或紊乱。
本进一步提供了一种预防患者可以给药本发明组合物治疗疾病或紊乱的方法。“在危险中”患者可以或没有可检测疾病，并且在此处叙述治疗方法之前，可以或不能展示可检测的疾病。“在危险中”代表基于常规风险评估方法确定更可能形成症状的个体，或具有一个或更多涉及研制可以根据本发明方法治疗的疾病或紊乱的风险系数。例如，风险系数包括家族史，药物治疗历史，和已知或怀疑增加疾病风险的暴露至环境物质的历史。可以用此处试剂治疗的疾病或老化危险中的患者也可以用例如任何本领域熟练技术人员已知的诊断或预兆分析或组合识别。在疾病或紊乱的症状特征显示之前，可以给药预防试剂，使得预防病原或紊乱，或替代地延迟其发展。
本发明范例：
进一步用下列可用于检查本发明化合物门离子通道调节活性的实施例说明本发明。该实施例不应该被认为是进一步限定。整个实施例使用的动物模型为接受的动物模型，这些动物模型中效果证明是人类中功效的预兆。
实施例1：使用钙图像标识ASIC对抗剂
细胞培养
在培养基(用10％ FBS DMEM)中，于聚苯乙烯培养瓶(175平方毫米)以5％二氧化碳湿润环境中37℃生长表达ASIC1a HEK293细胞。细胞的Confluency应该为区图的day的80-90％。用10毫升PBS漂洗细胞，并通过加入培养基再悬浮，并用25毫升移液管粉碎。
以大约1x106细胞/毫升(100μl/阱)密度在黑色壁，透明底部中种植细胞，用10毫克/1聚D-溶素(75/阱预治疗96阱板(30分钟)。用染料装载之前，可以增殖Plated细胞。
装载荧光钙染料荧光4/AM
在912μl二甲亚砜中溶解荧光4/AM(1mg，分子探测剂)。用培养基稀释荧光4/AM贮备溶液(1毫米)至最终的2？M(装载溶液)浓度。
从阱吸出培养基，并将50μl荧光4/AM装载溶液加入每个阱。在37℃培养该细胞30分钟。
钙测量
装载周期后，吸出装载溶液，并用100μl改性分析缓冲剂(145mMNaCl，5mM KCl，5mM CaCl2，1mM MgCl2，10mM HEPES，pH值7.4)洗涤两次细胞，以除去细胞外的染料。第二次洗涤后，将100μl改性分析缓冲剂加入每个阱，并在FLIPR或FlexStation(MolecularDevices，USA)，或任何其它本领域熟练技术人员已知的合适设备测量荧光。
FLIPR设定(ASIC1a)
温度：室温(20-22℃)
首先加入：以30μl/秒的速度加入50μl测试溶液，起始高度100μl
第二次加入：以35μl/秒的速度加入50μl MES溶液(20mM，5mM最终浓度)，起始高度150μl。
读取间隔：预培养10秒x 7和3秒x 3对抗剂相-3秒x 17和10秒x 12
添加板(化合物检验片和MES板)分别设置在FLIPR塔板中右边和左边。设置细胞板在中间设置，并实行ASIC1a程序。然后FLIPR将根据上述设定间隔进行适当测量。校正激励后获得荧光为平均基底荧光(改性分析缓冲剂中)。
命中证实并表征活性物质
测试物质存在下，相对MES反应单独表达MES-诱发峰钙反应。一式三份再测试阻塞MES-诱发钙反应的测试物质。选择证实采样数，进一步通过进行全剂量反应曲线表征，以确定每个由IC50值(即阻止50％MES-诱发钙反应的测试物质浓度；参见例如图1A，1B和1C，和图13A和13B)表现的命中化合物的药效。
钙活动试验得到的本发明化合物IC50值概要显示如下。
n＝3-7
Figure A20068004401000881
实施例2：在异种的表达系统中ASIC对抗剂的屏蔽和生物分析
该实施例描述另外的本发明化合物活动活体外评估。
活体外评价方法的另一个实例包括使用本领域已知的哺乳动物异种的表达系统，并包括许多哺乳动物细胞系例如COS，HEK，例如，HEK293和/或CHO，细胞。用门离子通道(一种或多种)转染细胞系，并用于进行如下电生理学：
在室温下(20-25℃)以电压钳，使用传统的整体细胞衬片夹钳方法进行全部实验(Neher，E.，等人(1978)Pfluegers Arch 375：219-228)。
使用的放大器是由Macintosh G3电脑经由ITC-16界面运行的EPC-9(HEKA-电子设备，Lambrect，Germany)。用伴随放大器的脉冲软件设定实验条件。低通滤波数据，并以3倍截止频率的速度将样本传至硬盘。
使用水平线电极拔出器(Zeitz-Instrumente，Augsburg，Germany)从硼硅玻璃拉出移液管。用于这些实验的移液管电阻在盐水中是2-3莫姆。移液管电极是氯化银线，基准是固定到实验室的氯化银颗粒状物电极(In Vivo Metric，Healdsburg，USA)。就在密封之前，用中开口移液管确定电极零点电极。
具有细胞的盖片转移至在由Nomarski光学装置提供的反相显微镜(IMT-2，Olympus)阶段安装的15μl实验室。以2.5ml/分钟的速度用细胞外生理盐水连续溢出细胞。形成十亿密封后，通过吸取获得整体细胞结构。以-60mV保持电压保持细胞，并在每个实验开始时，连续测量45秒电流，以确定稳定的基线。通过定做的重力驱动流管，从细胞放置大约50μm的尖端，传递低pH值的(＜7)溶液至小室。当用脉冲软件控制的阀门压缩连接到流管浴盆时，触发应用。最初，每60秒施加5秒低pH值(通常，pH值6.5)。当施加550秒时间隔取样。获得稳定的反应后，细胞外的生理盐水以及低pH值的溶液转到要测试包含化合物的溶液。化合物存在直到完成重复的放大反应。在反应峰值测量电流放大，就在包括化合物之前，按照用化合物平衡振幅除以引起电流振幅，计算化合物结果。
使用下列盐溶液：细胞外的溶液(mM)：NaCl(140)，KCl(4)，CaCl2(2)，MgCl2(4)，HEPES(10，pH值7.4)；细胞内溶液(mM)：KCl(120)，KOH(31)，MgCl2(1.785)，EGTA(10)，HEPES(10，pH值7.2)。通常，以使用最高的500倍浓度，在50％ DMSO中溶解测试化合物。
使用化合物A和化合物H的衬片夹钳实验证明了阻止重组体鼠ASIC门通道，如图2A和2B中图解。用rASIC1a或rASIC3转染HEK293细胞，并用于用化合物A，化合物H和氨氯吡脒进行全部剂量抑制曲线。用没有测试物质获得的对照峰值电流部份表示结果。这些数据表明与氨氯吡脒相比较，化合物A和H是更有力的对抗剂。
图3中展示了类似的发现，使用CHO细胞中转染稳定的人ASIC1a。图3A比较了化合物A和氨氯吡脒之间的剂量反应关系[通过测量反应曲线下面积(全体电荷转移)，并正规化控制响应]。化合物A(图3B)和氨氯吡脒能够剂量依赖方式中人ASIC1apH值诱发反应。然而，化合物A是大约100倍效力。图14A和14B展示了类似于化合物J和K的结果。
图4A和4B说明从HEK293细胞单独hASIC1a表达或HEK293细胞共表达hASIC1a和hASIC3记录的有或没有10mM化合物A中对酸性生理盐水的反应[电压钳为-60mV，从pH值7.4至pH值6.5迅速改变包围细胞的细胞外溶液5秒](n＝3)。这些图中数据证明化合物A有效调整这些门离子通道的活性。
实施例3：在爪蟾卵母细胞中屏蔽和生物分析ASIC对抗剂
该实施例描述另外的本发明化合物活动活体外评估。
如下在爪蟾卵母细胞表达门离子通道中进行二电极电压钳的电生理学试验：
通过手术从成人爪蟾除去卵母细胞，并在室温下用Barth’s溶液中1mg/ml类型I胶原酶(Sigma)，在轻微搅动下治疗2小时。原子显微注射包含编码门离子通道亚组蛋白质的2.5-5ng合适表达矢量，例如pCDNA3之前，用手去卵母细胞(defolliculated)在阶段IV-V选择的卵母细胞。该实验中，卵母细胞在其表面表达了同源多聚体质子-门离子通道。交替实验中，在卵母细胞核心同时注射1，2，3或更多包含不同门离子通道亚组的编码序列的媒介物。后者情况下，卵母细胞表达异源多聚体质子门离子通道。例如，以1∶1 cDNA比例共同注射pcDNA3媒介物中的ASIC2a和/或ASIC3亚组。在包含50mg/ml庆大霉素和1.8mM CaCl2的Barth’s溶液，以19℃表达2-4天后，通过施加酸性溶液(pH值＜7)活化门离子通道，并使用OC-725B放大器(警报器仪器)在二电极的电压钳结构中记录电流。在Apple Imac G3电脑上用A/DNB-MIO-16XL界面(National Instruments)以500Hz数字化得到的电流，并且在Axograph(Axon Instruments)中以100Hz后滤波记录道(Neher，E.and Sakmann，B.(1976)Nature 260：799-802)。一旦用显微电极刺穿，以10-12ml/分钟，用包含97mM NaCl，2mM KCl，1.8mM CaCl2和10mM HEPES的修正Ringer’s溶液连续溢出卵母细胞，用NaOH使之达到pH值7.4(控制振铃器)。通过用MES代替HEPES，并调整pH值至所需酸性值，准备Test Ringer溶液。在控制和测试林格氏溶液中制备本发明化合物，并在室温下通过计算机控制的开关阀系统施加于卵母细胞。用氯化胆碱调节全部溶液克分子渗透压浓度至235毫克渗透压。类似地，在自动化多通道卵母细胞系统例如OpusExpressTM(Molecular Devices，Sunnyvale，USA)中得到的记录。
图5A和5B展示了通过在OpusExpressTM系统中没有和有30μM化合物A，使用pH值6.5测试ringer溶液引起的内部电流。使用此处描述二电极的电压钳结构程序，从卵母细胞表达同数的hASIC1a(图5A)或异数hASIC1a+3(图5B)获得记录。这些图中数据证明化合物A有效调整这些门离子通道的活性。
实施例4：在原电池系统中ASIC对抗剂的屏蔽和生物分析
该实施例描述了利用原始培养中感觉神经元的衬片钳电生理学，另一个活体外评估本发明化合物禁止活性。
可以隔离感觉神经元，并不同的动物种类进行体外培养。最广泛使用的规程利用从初生儿隔离感觉神经元(Eckert，等人(1997)JNeurosci Methods 77：183-190)和胚胎(Vasko，等人(1994)J Neurosci14：4987-4997)鼠。培养物中三叉神经和脊神经后根神经节感觉神经元显示出确定的体内感觉神经元特征。如实施例2中所述类似地进行电生理学。电压钳模式中，记录转移膜电流，如图6A和6B所示，其中化合物A和H以1mM阻止pH值6.5诱发内部电流。电流钳模式中，记录转移膜电位改变。在酸性条件(例如pH值6.5)下，薄膜depolarizes，引入动作电位加热，如图7A和7B所示。化合物A和H以1mM阻止酸诱发薄膜去极化，并降低动作电位加热的发生强度。这些图中展示数据证明化合物A和H有效地调整这些当地人感觉神经原门离子通道的活性(n＝3)。
实施例5：甲醛溶液模型-急性强直疼痛
该实施例描述本发明化合物抑制活性的体内评估。
在文献中描述了大量建设好的疼痛模型，并且是本领域熟练技术人员已知的(参见例如表1)。该实施例描述了利用甲醛溶液测试。
雄性Sprague-Dawley鼠是在标准大气条件下成群居住的三种动物，其具有不受限制的食物和水入口。根据合乎规格指南进行全部实验，研究有意识动物中的试验性疼痛(Zimmerman，1983)。
利用Automated Nociception Analyser(University ofCalifornia，San Diego，USA)作出在正常，未受损伤鼠(体重150-180g)中甲醛溶液诱发畏缩行为评估。简短地，这包括在测试鼠后爪上放置较小C型金属带(10mm宽x27mm长)。然后根据试验性范例施用药或载体之前，在圆柱形有机玻璃观察室(直径30.5cm和高度15cm)中放置鼠(每个试验阶段包括四个鼠)20分钟进行适应。适应后，温和地抑制个体鼠，并利用27G针将甲醛溶液(5％生理盐水中，50μl，sc)进入后爪的脚底表面。然后鼠回到分隔的观察室，每个依次设置在包括用来产生电磁场的二个电磁感应圈围绕检测装置上，其中可以探测金属谱带的运动。然后数字化模拟信号，并且软件算法(LabView)用于从其它爪运动区别畏缩行为。利用1分钟抽样间隔，并且基于得到的反应模式，识别感受伤寒行为的5个阶段，并打分：第一阶段(P1；0-5分钟)，中间阶段(Int；6-15分钟)，第二阶段(P2；60分钟)，阶段2A(P2A；16-40分钟)和阶段2B(P2B；41-60分钟)。
人工每5分钟通过测量四种行为种类花费的时间确定感受伤寒的行为：0，难从对侧的爪区分注射后爪的治疗；1，注射爪有很少或没有放在上面；2，注射爪举起没有接触任何表面；3，注射爪被舔，咬或摇动。通过增加用类别重量花费的时间，合计这些结果，并除以每个时间块5分钟的总时间(Coderre等人，Pain 1993；54：43)。基于得到的反应模式，识别感受伤寒行为的2个阶段，并打分：第一阶段(P1；0-5分钟)，中间阶段(Int；6-15分钟)，第二阶段(P2；60分钟)，阶段2A(P2A；16-40分钟)和阶段2B(P2B；41-60分钟)。
利用棱镜4.01软件包(GraphPad，San Diego，CA，USA)进行统计分析。利用ANOVA，按照Bonferroni’s方法分析试验组和对照载体组之间响应水平的差异，进行事后配对比较。p值＜0.05被认为是重要的。
图8和9是通过内足底(intraplantar)甲醛注射引发基于疼痛的化合物A效果典型实例。甲醛30分钟之前腹腔注射化合物A。化合物A能够降低甲醛测试的阶段1和2中总疼痛得分性能(畏缩，舔，刺痛)(图8A)。当仅观察(图8B)(n＝6-8)特定疼痛例如liking和刺痛时，这些对阶段1和2影响是相当出色的。图9中概括了这些实验形成结果，如果总疼痛得分的阶段2的清晰剂量反应关系可以是具有约12mg/kg ED50的观看(图9A)。这些实验中，观察剂量和等离子曝射量之间的线性关系(图9B)。使用上面描述的Automate Nociceptive Analyzer(n＝6-8)展示化合物B和H(图10A，和B)类似结果。这些结果表明化合物A，B和H可以阻塞由甲醛注射在爪中引发的急性强直疼痛。
实施例6：CFA模式-慢性炎性疼痛模式
在鼠后爪中完成注射弗氏佐剂(CFA)已经表明产生持久炎性老化，其与行为痛觉过敏有关，并在注射部位allodynia(Hylden等人，Pain37：229-243，1989)(Blackburn-Munro等人，2002)。赋予小鼠(体重260-300g)sc注射CFA(在生理盐水中50％，100μl，σ)进入brief氟烷麻醉下后爪的脚底表面。24小时后，测试后爪重量负荷反应，如使用Incapacitance Tester(Linton Instrumentation，UK)，(Zhu等人，2005)评估。设备引入单独测量动物重量的双通道天平分给每个后爪。虽然正常小鼠在两个后爪之间体重分布相同(50-50)，损伤和非损伤爪之间的重量分布差异是损伤爪的不适水平(nocifensive性能)。在设计使得每个后爪停留在单独的换能器衬垫上的塑料室中设置小鼠。设置中和剂记录5s内换能器上载荷，并且两个量显示代表了每个爪上鼠体重分布(g)。对于每个鼠，从每个读取3次，然后平均。从3次试验(右爪读数-左爪读数)后爪之间差异的绝对值的平均数计算一边与另一边重量负荷差异。
评估热痛觉过敏：根据Hargreaves(Hargreaves等人，1988)，使用脚底测试止痛测量计(IITC，WoodlHills，CA，模式#_336)，测量基线和后处理收回潜伏状态至有害的热刺激。刺激强度设定为最大输出的30％，截止时刻设定为30秒。加热在玻璃板设置的小鼠至28℃，并在每个试验阶段之前使之习惯实验室至少15分钟。施加热刺激至爪脚底表面，并使用每个爪上3次读数的平均等待时间作为每次位置的潜伏值。热阀值定义为第一疼痛性能潜伏时间，其包括促进爪nocifensive爪收回，畏缩，刺痛和/或舔。测定每个试验组损伤和正常爪的平均值和标准平均误差(SEM)。
图11A、11B和11C表明化合物A，化合物H和吗啡对CFA治疗小鼠中自发性疼痛性能的效果。在CFA注射后爪之前，在雄性Sprague-Dawley小鼠中测量后爪重量负荷反应2-3天。测量二十四小时后基线反应，然后给药小鼠化合物A(5，10和20mg/kg，离子对)，化合物H(10、30和60mg/kg)和吗啡(3，6和10mg/kg)。然后在注射药物或载体后，30、60和120分钟测量重量负荷反应(展示在60分钟数据)。化合物A和H以及吗啡在与载体相比CFA引发改变重量负荷中，产生标记剂量依赖衰减。数据可以表示为平均值+/-SEM。*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001对基线；+++：P＜0.001对载体。全部组n＝7-8。
图12描述了用化合物A CFA引发热痛觉过敏的剂量依赖反转。在测试化合物A之前，注入CFA 48小时。离子对给药化合物A后，测量热痛觉过敏3小时。化合物A能够用ED50 6.5mg/kg完全反转热痛觉过敏。用于比较，用吗啡(6mg/kg sc)和消炎痛(30mg/kg po)展示了结果。这些结果表明化合物A在机械和热形态是有效的。数据可以表示为平均值±SEM，(n＝10)。**P＜0.01，对基线。
实施例7：无性繁殖和表达ASICs
可以从鼠聚(A)+mRNA无性繁殖ASIC1a和ASIC3的cDNA，并根据hesselager等人(J Biol Chem.279(12)：11006-152004)投入表达矢量。全部结构表达于CHO-K1细胞(ATCC No CCL61)或HEK293细胞。在5％ CO2和95％空气的湿润环境中以37℃培养CHO-K1细胞，并且每周通过两次。用10％胎儿牛血清和2mM L-脯氨酸(Life Technologies)补充DMEM中(10mM HEPES，2mM glutamax)保持细胞。根据制造者规程，使用lipofectamine PLUS转染kit Life Technologies)或Lipofectamine2000(Invitrogen)，用含有ASICs的质体和编码增强绿荧光蛋白质(EGFP)质体共转染CHO-K1细胞。使用产生合理范围(0.5nA-10nA)内整个细胞电流的DNA量进行每个转染，以避免饱和衬片钳放大器(大约50ngASIC1a和ASIC3)。转染后进行16-48小时电生理学测量。胰蛋白酶化细胞，并在进行电生理学记录当天，用聚D-赖氨酸预涂布玻璃盖片。
实施例8：化合物A合成方法
5-溴-8-硝基异喹啉(II)
根据以下文献中方法从相应异喹啉(I)制备5-溴-8-硝基异喹啉：William Dalby Brown Alex Haahr Gouliaev，Organic Syntheses 81卷，98页。
5-溴-1，2，3，4-四氢-2-甲基-8-硝基异喹啉(III)
在无水DMF(20mL)中氮气氛下悬浮5-溴-8-硝基异喹啉(II，5g，19.7mmol)，并加热混合物直至异喹啉完全溶解。滴加甲基对甲苯磺酸酯(4g，21.5mmol)，然后在85℃加热24小时。在冰浴中冷却后，过滤收集固体，并用醚和丙酮洗涤，以得到异喹啉铵盐(使用没有进一步纯化)。
在乙酸(30ml)中溶解异喹啉盐，并加入氢化硼钠(0.87g)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。在真空下除去乙酸，然后用水稀释。用10NNaOH碱化溶液(pH值＝8)，并过滤收集析出产物，用水洗涤，并在真空下干燥，以得到感光5-溴-1，2，3，4-四氢-2-甲基-8-硝基异喹啉4.7g)。
5-溴-1，2，3，4-四氢-2-甲基异喹啉-8-胺(IV)
向乙醇(50ml)中N-甲基-5-溴-8-硝基-1，2，3，4-四氢异喹啉(III，4.7gm，17.3mmol)加入拉内镍(水溶液，1.5g)。在H2下将反应混合物在室温下搅拌过夜。通过硅藻土过滤混合物，并在真空下除去溶剂，得到IV。
N-(5-溴-1，2，3，4-四氢-2-甲基异喹啉-8-基)-2-(肟基)乙酰胺(V)
回流H2O∶EtOH(3∶1，50mL)中5-溴-1，2，3，4-四氢-2-甲基异喹啉-8-胺(IV，3.25g，13.5mmol)，水合氯醛(2.3g)，盐酸羟胺(2.9g)，12g Na2SO4(12g)的混合物1小时，冷却至60℃，并用4N NaOH小心碱化至pH值＝7，并冷却。通过过滤收集固体，用水洗涤，并在真空下干燥，得到V。
5-溴-6，7，8，9-四氢-8-甲基-1H-吡咯并[3，2，-h]异喹啉-2，3-二 酮(VI)
在30分钟内分批向预热硫酸(20mL，70℃)加入N-(5-溴-1，2，3，4-四氢-2-甲基异喹啉-8-基-2-(肟基)乙酰胺(V，3.5g)。继续加热1小时。冷却反应混合物至室温，并通过浇注冰冷的水(100mL)猝灭，然后用含水10N NaOH中和。过滤析出产物，用水洗涤，得到靛红VI。
5-溴-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2，-h]异喹啉 -2(3H)-酮(VII)
向甲醇(50ml)中靛红VI(3.5g)溶液加入盐酸羟胺(2.0g)，并回流混合物1小时。冷却反应混合物至室温，并通过过滤收集固体，用乙醇和乙醚洗涤，并在真空下干燥。
化合物A
在微波(120℃，10分钟)下辐照5-溴-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮(VII，100mg)，5-氟-2-甲氧基苯基硼酸(60mg)，磷酸钾(72mg)，二氯双(三苯膦)钯(II)(11mg)，水(1.5mL)和DMF(3mL)的混合物。在真空下蒸发溶剂，并在硅胶色谱分离残余物，得到
5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2，-h]异喹啉-2(3H)-酮.
等效物
本领域熟练技术人员认识到至多使用常规实验确定许多相当于此处叙述发明特定实施方式的。该等效物确定为被下列权利要求包括。
并入作为参考文献
此处提到的全部专利，公开专利申请和其它参考文献的全部内容在此特别引入作为参考。

Claims (98)

1.一种调节门离子通道活性的方法，包括使表达门离子通道细胞接触有效量的式1代表的化合物：
和其药学上可接受的盐、对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、非对映体或外消旋体；
其中
虚线表明单键或双键；
R1选自氢、烷基、烷氧基-烷基、羟基-烷基、烷氧基-羰基-烷基、烷基-羰基-氧-烷基、环烷基、环烷基-烷基、烯基、炔基、烷氧基、磺酰胺、氨基、磺酰、磺酸、脲、苯基或苄基，其中苯基或苄基任选被卤素、CF3、硝基、氨基、氰基、羟基-烷基、烷氧基、磺酰胺、烯基、炔基、氨基、磺酰基、磺酸和脲取代；
R2选自氢、羟基、烷基、烯基、炔基、-(CH2)1-4S(O)3H，-C(O)C1-4烷基-S(O)2C1-4烷基；
R3选自氢、羟基、烷基、酰基、苯基、苄基、-COOH，-C(O)N(CH3)2、-O-苯基、-OCF3、烷氧基、-O(CH2)0-4OCH3、-C(O)H、-C(O)CH3
Figure A2006800440100002C2
和R4和R5各自独立选自卤素、CF3、硝基、氨基、氰基、羟基、烷基、烷氧基、苯氧基和苯基，或式-SO2NR′R″基团，其中R′和R″各自独立代表氢或烷基。
2.权利要求1的方法，其中所述化合物是由式2代表的，
Figure A2006800440100003C1
和其药学可接受的盐，对映异构体，立体异构体，旋转异构体，互变异构体，非对映体或外消旋体；
其中
R1选自氢、C1-4-烷基、C1-4-烯基、和C1-4-炔基；R2选自氢、羟基、C1-4-烷基、C1-4-烯基和C1-4-炔基；R4和R5各自独立选自卤素、CF3、硝基、氨基、氰基、羟基、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基、苯氧基和苯基。
3.权利要求2的方法，其中R1选自氢和C1-4-烷基；R2选自氢，羟基，C1-4-烷基，C1-4-烯基和C1-4-炔基；R4和R5各自独立选自卤素，CF3，C1-4-烷基，苯氧基和C1-4-烷氧基。
4.权利要求2的方法，其中R1选自C1-4-烷基；R2选自氢和C1-4-烷基；R4和R5各自独立选自卤素、CF3、C1-4-烷基、苯氧基和C1-4烷氧基。
5.权利要求2的方法，其中R1选自-CH3和-CH2CH3；R2选自氢；R4和R5各自独立选自卤素，C1-4-烷基和C1-4-烷氧基。
6.权利要求1的方法，其中化合物是由式3代表的，
Figure A2006800440100003C2
或其药学可接受的盐，
其中
R1选自氢、烷基、烷氧基-烷基、烷氧基-羰基-烷基、烷基羰基-氧基-烷基、环烷基、环烷基-烷基、烯基、炔基、烷氧基、磺酰胺、氨基、磺酰基、磺酸、脲苯基或苄基、其中苯基或苄基任选被卤素、CF3、硝基、氨基、氰基、羟基烷基、烷氧基、磺酰胺、烯基、炔基、氨基、磺酰基、磺酸和脲取代；和
R4和R5各自独立选自卤素、苯氧基、CF3、硝基、氨基、氰基、羟基、烷基、烷氧基和苯基，或式-SO2NR′R″基团，其中R′和R″各自独立代表氢或烷基。
7.权利要求6的方法，其中R5在芳基环2位置，R4在芳基环的5位置，或R4在芳基环的3位置，R5在芳基环的5位置。
8.权利要求6的方法，其中R1选自氢、C1-4-烷基、C1-4-烯基和C1-4-炔基；R4和R5各自独立选自卤素、CF3、硝基、氨基、氰基、羟基、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基、苯氧基和苯基。
9.权利要求6的方法，其中R1选自氢和C1-4-烷基；R4和R5各自独立选自卤素、CF3、C1-4-烷基、苯氧基和C1-4-烷氧基。
10.权利要求6的方法，其中R1选自C1-4-烷基；R4和R5各自独立选自卤素、CF3、C1-4-烷基、苯氧基和C1-4-烷氧基。
11.权利要求6的方法，其中R1选自-CH3和-CH2CH3；R4和R5各自独立选自卤素、苯氧基C1-4-烷氧基。
12.权利要求6的方法，其中R1是CH3或CH2CH3。
13.权利要求6的方法，其中R4是卤素。
14.权利要求6的方法，其中R5是烷氧基。
15.权利要求13的方法，其中R4是氟或氯。
16.权利要求14的方法，其中R5是-OCH3。
17.权利要求6的方法，其中R4和R5都是烷基。
18.权利要求17的方法，其中R4和R5都是CH3。
19.权利要求6的方法，其中R4是氟，R5是-OCH3，R4是氯，R5是-OCH3，或R4和R5都是CH3。
20.权利要求6的方法，其中化合物选自5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，3-二甲基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮。
21.一种调节门离子通道活性的方法，包括使表达门离子通道细胞接触有效量的选自下列的化合物：5-苯基-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；8-乙基-5-(2-甲氧基-苯基)-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；5-(2-乙氧基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟。
22.权利要求1-21任何一项的方法，其中接触细胞与有效量化合物抑制门离子通道的活性。
23.权利要求1-22任何一项的方法，其中门离子通道由选自DEG/ENaC，P2X和TRPV基因超序列成分的至少一种亚组组成。
24.权利要求1-22任何一项的方法，其中门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：ENaC、ENaC、ENaC、ENaC、ASIC1a、ASIC1b、ASIC2a、ASIC2b、ASIC3、ASIC4、BLINaC、hINaC、P2X1、P2X2、P2X3、P2X4、P2X5、P2X6、P2X7、TRPV1、TRPV2、TRPV3、TRPV4、TRPV5和TRPV6。
25.权利要求23或24的方法，其中门离子通道是同源多聚体。
26.权利要求23或24的方法，其中门离子通道是异源多聚体。
27.权利要求23-26任何一项的方法，其中DEG/ENaC门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：ENaC、ENaC、ENaC、ENaC、BLINaC、hINaC、ASIC1a、ASIC1b、ASIC2a、ASIC2b、ASIC3和ASIC4。
28.权利要求23-26任何一项的方法，其中DEG/ENaC门离子通道由选自下列的至少一种亚组组成：ASIC1a、ASIC1b、ASIC2a、ASIC2b、ASIC3和ASIC4。
29.权利要求23-26任何一项的方法，其中门离子通道包括ASIC1a和/或ASIC3。
30.权利要求23-26任何一项的方法，其中P2X门离子通道包含至少一种选自下列的亚组：P2X1、P2X2、P2X3、P2X4、P2X5、P2X6和P2X7。
31.权利要求23-26任何一项的方法，其中TRPV门离子通道包含至少一种选自下列的亚组：TRPV1、TRPV2、TRPV3、TRPV4、TRPV5和TRPV6。
32.权利要求26的方法，其中异源多聚体门离子通道包括下列门离子通道的组合：αENaC、βENaC、γENaC；αENaC、βENaC和δENaC；ASIC1a和ASIC3；ASIC1b和ASIC3；ASIC2a和ASIC3；ASIC2b和ASIC3；ASIC1a、ASIC2a和ASIC3；P2X1和P2X2；P2X1和P2X5；P2X2和P2X3；P2X2和P2X6；P2X4和P2X6；TRPV1和TRPV2；TRPV5和TRPV6；TRPV1和TRPV4。
33.权利要求26的方法，其中异源多聚体门离子通道包括下列门离子通道的组合：ASIC1a和ASIC2a；ASIC2a和ASIC2b；ASIC1b和ASIC3；ASIC3和ASIC2b。
34.权利要求1-21任何一项的方法，其中门离子通道的活性与疼痛有关。
35.权利要求1-21任何一项的方法，其中门离子通道的活性与发炎性疾病有关。
36.权利要求1-21任何一项的方法，其中门离子通道的活性与神经紊乱有关。
37.权利要求34的方法，疼痛选自皮肤疼痛，身体疼痛，内脏疼痛和神经性疼痛。
38.权利要求34的方法，其中疼痛是急性疼痛或慢性疼痛。
39.权利要求37的方法，其中皮肤疼痛与损伤，外伤，割伤，裂伤，刺伤，烧伤，外科手术伤口，感染或急性炎症有关。
40.权利要求37的方法，其中身体疼痛与肌骨胳和连接系统的损伤、疾病或紊乱有关。
41.权利要求40的方法，其中损伤，疾病或紊乱选自挫伤，骨折，关节炎，牛皮癣，湿疹和缺血性心脏病。
42.权利要求37的方法，其中内脏疼痛与循环系统，呼吸系统，胃肠系统或生殖泌尿系统损伤，疾病或紊乱有关。
43.权利要求42的方法，其中循环系统的疾病或紊乱选自缺血性心脏病、心绞痛、急性心肌梗塞、心脏心律不齐、静脉炎、间歇性跛行、曲张静脉和痔。
44.权利要求42的方法，其中呼吸系统的疾病或紊乱选自哮喘、呼吸道感染、慢性支气管炎和肺气肿。
45.权利要求42的方法，其中胃肠系统的疾病或紊乱选自胃炎、十二指肠炎、过敏性肠综合征、结肠炎，克罗恩病、胃肠返流、溃疡和憩室炎。
46.权利要求42的方法，其中生殖泌尿系统的疾病或紊乱选自膀胱炎、尿路感染、肾小球肾炎、多囊肾疾病、肾结石和生殖泌尿系统癌症。
47.权利要求42的方法，其中身体疼痛选自关节痛、肌肉痛、慢性腰部疼痛、幻肢痛、癌症伴随疼痛、牙疼、纤维肌痛、自发疼痛紊乱、慢性非特定疼痛、慢性骨盆疼痛、后作用疼痛和关联痛。
48.权利要求42的方法，其中神经性疼痛与神经系统的损伤、疾病或紊乱有关。
49.权利要求48的方法，其中神经系统的损伤，疾病或紊乱选自神经痛、神经病、头痛、周期性偏头痛、心因性疼痛、慢性头疼和脊髓损伤。
50.权利要求1-21任何一项的方法，其中门离子通道的活性选自肌骨胳和结缔组织系统、呼吸系统、循环系统、生殖泌尿系统、胃肠系统或神经系统的发炎性疾病。
51.权利要求50的方法，其中肌与骨胳的和结缔组织系统的发炎性疾病选自关节炎、肌炎、皮肤炎和湿疹。
52.权利要求50的方法，其中呼吸系统的发炎性疾病选自哮喘、支气管炎、鼻窦炎、咽炎、喉炎、气管炎、鼻炎、囊性纤维化、呼吸道感染和急性呼吸困难综合征。
53.权利要求50的方法，其中循环系统的发炎性疾病选自脉管炎、血尿并发症状、动脉粥样硬化、动脉炎、静脉炎、心脏炎和冠心病。
54.权利要求50的方法，其中胃肠系统的发炎性疾病选自发炎内脏紊乱、溃疡性结肠炎、克罗恩病、憩室炎、病毒感染、细菌传染、消化性溃疡、慢性肝炎、齿龈炎、牙周炎、口腔炎、胃炎和胃肠返流疾病。
55.权利要求50的方法，其中生殖泌尿系统的发炎性疾病选自膀胱炎、多囊肾疾病、肾炎并发症状、尿路感染、胱氨酸症、前列腺炎、输卵管炎、子宫内膜异位症和泌尿生殖器癌症。
56.权利要求36的方法，神经紊乱选自精神分裂症、双极紊乱、抑郁症、阿尔茨海默氏症、癫痫症、多发性硬化、肌萎缩性侧索硬化、中风、成瘾、脑缺血、神经病、视网膜色素退化、青光眼、心脏心律不齐、带状疱疹、亨廷顿氏舞蹈病、帕金森氏症、焦虑紊乱、恐慌紊乱、恐惧症、焦虑癔症、普通焦虑紊乱和神经病。
57.一种患者需要的治疗疼痛的方法，包括为患者施用有效量式1、式2、式3或式4化合物。
58.权利要求57的方法，其中化合物选自5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，3-二甲基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮。
59.一种患者需要的治疗疼痛的方法，包括为患者施用有效量选自下列的化合物：5-苯基-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；8-乙基-5-(2-甲氧基-苯基)-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；和5-(2-乙氧基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟。
60.权利要求57-59任何一项的方法，其中患者是哺乳动物。
61.权利要求60的方法，其中哺乳动物是人。
62.权利要求57-59任何一项的方法，其中疼痛选自皮肤疼痛，身体疼痛，内脏疼痛和神经性疼痛。
63.权利要求57-59任何一项的方法，其中疼痛是急性疼痛或慢性疼痛。
64.一种患者需要的治疗发炎性疾病的方法，包括为患者施用有效量式1、式2、式3或式4化合物。
65.权利要求64的方法，其中化合物选自5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，3-二甲基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮。
66.一种患者需要的治疗发炎性疾病的方法，包括为患者施用有效量选自下列的化合物：5-苯基-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；8-乙基-5-(2-甲氧基-苯基)-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；5-(2-乙氧基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟。
67.权利要求63-66任何一项的方法，其中患者是哺乳动物。
68.权利要求67的方法，其中哺乳动物是人。
69.权利要求64-66任何一项的方法，其中发炎性疾病是肌骨胳和结缔组织系统、呼吸系统、循环系统、生殖泌尿系统、胃肠系统或神经系统的发炎性疾病。
70.一种患者需要的治疗神经紊乱方法，包括施用有效量的式1、式2、式3或式4化合物。
71.权利要求70的方法，其中化合物选自5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，3-二甲基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮。
72.一种患者需要的治疗神经紊乱的方法，施用有效量选自下列的化合物：
5-苯基-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；8-乙基-5-(2-甲氧基-苯基)-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；和5-(2-乙氧基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟。
73.权利要求70-72任何一项的方法，其中患者是哺乳动物。
74.权利要求73的方法，其中哺乳动物是人。
75.权利要求70-72任何一项的方法，其中神经紊乱选自精神分裂症、双极紊乱、抑郁症、阿尔茨海默氏症、癫痫症、多发性硬化、肌萎缩性侧索硬化、中风、成瘾、脑缺血、神经病、视网膜色素退化、青光眼、心脏心律不齐、带状疱疹、亨廷顿氏舞蹈病、帕金森氏症、焦虑紊乱、恐慌紊乱、恐惧症、焦虑癔症、普通焦虑紊乱和神经病。
76.一种患者需要的治疗与泌尿生殖器和/或胃肠系统有关的疾病或紊乱的方法，包括为患者施用有效量式1、式2、式3或式4化合物。
77.权利要求76的方法，其中化合物选自5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，3-二甲基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮。
78.一种患者需要的治疗与泌尿生殖器和/或胃肠系统有关疾病或紊乱的方法，包括为患者施用有效量的选自下列的化合物：5-苯基-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；8-乙基-5-(2-甲氧基-苯基)-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；5-(2-乙氧基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟。
79.权利要求76-78任何一项的方法，其中患者是哺乳动物。
80.权利要求79的方法，其中哺乳动物是人。
81.权利要求76-78任何一项的方法，其中胃肠系统的疾病或紊乱选自胃炎、十二指肠炎、过敏性肠综合征、结肠炎、克罗恩病、溃疡和憩室炎。
82.权利要求76-78任何一项的方法，其中生殖泌尿系统的疾病或紊乱选自膀胱炎、尿路感染、肾小球肾炎、多囊肾疾病、肾结石和生殖泌尿系统癌症。
83.权利要求1、57、64、70或76任何一项的方法，其中方法进一步包括施用辅助剂成分。
84.权利要求83的方法，其中辅助剂成分选自阿片类镇痛剂、非阿片类镇痛剂、局部麻醉剂、皮质类甾醇、非甾体的抗炎药物、非选择性的COX抑制剂、非选择性COX2抑制剂、选择性COX2抑制剂、镇癫痫剂、巴比妥类药物、抗抑郁剂、大麻和局部镇痛剂。
85.一种由式2代表的化合物，
Figure A2006800440100015C1
和其药学可接受的盐、对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、非对映体或外消旋体；
其中
R1选自氢、C1-4-烷基、C1-4-烯基、和C1-4-炔基；R2选自氢、羟基、C1-4-烷基、C1-4-烯基和C1-4-炔基；R4和R5各自独立选自卤素、CF3、硝基、氨基、氰基、羟基、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基、苯氧基和苯基。
86.权利要求85的化合物，其中R1选自氢和C1-4-烷基；R2选自氢、羟基、C1-4-烷基、C1-4-烯基和C1-4-炔基；R4和R5各自独立选自卤素、CF3、C1-4-烷基、苯氧基和C1-4-烷氧基。
87.权利要求85的化合物，其中R1选自C1-4-烷基；R2选自氢和C1-4-烷基；R4和R5各自独立选自卤素、CF3、C1-4-烷基、苯氧基和C1-4-烷氧基。
88.权利要求85的化合物，其中R1选自-CH3和-CH2CH3；R2选自氢；R4和R5各自独立选自卤素、C1-4-烷基和C1-4-烷氧基。
89.权利要求85的化合物，其中R1是CH3或CH2CH3。
90.权利要求85的化合物，其中R4是卤素。
91.权利要求85的化合物，其中R5是烷氧基。
92.权利要求90的化合物R4是氟或氯。
93.权利要求91的化合物R5是-OCH3。
94.权利要求85的化合物，其中R4和R5都是烷基。
95.权利要求85的化合物，其中R4和R5都是CH3。
96.权利要求85的化合物，其中R4是氟，R5是-OCH3，R4是氯，R5是-OCH3，或R4和R5都是CH3。
97.权利要求85的化合物，其中化合物选自5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氟-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-甲基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(3，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，5-二甲基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；5-(2，3-二甲基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮。
98.一种化合物，选自5-苯基-6，7，8，9-四氢-3-(肟基)-8-乙基-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2(3H)-酮；8-乙基-5-(2-甲氧基-苯基)-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟；和5-(2-乙氧基-苯基)-8-乙基-6，7，8，9-四氢-1H-吡咯并[3，2-h]异喹啉-2，3-二酮3-肟。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103732583A (zh) * 2011-06-17 2014-04-16 葛兰素史密斯克莱知识产权（第2号）有限公司 Trpv4拮抗剂
CN105492423A (zh) * 2013-08-29 2016-04-13 株式会社大熊制药 四氢环戊并吡咯衍生物及用于制备其的方法
CN109364248A (zh) * 2018-10-16 2019-02-22 哈尔滨医科大学 ENaC及其抑制剂在预防、缓解和/或治疗动脉粥样硬化中的应用

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU4910500A (en) * 1999-05-19 2000-12-12 Neurosearch A/S Inhibitors of proton-gated cation channels and their use in the treatment of ischaemic disorders
US8377691B2 (en) * 2006-01-26 2013-02-19 Integral Molecular, Inc. Lipoparticles comprising ion channels, methods of making and using the same
EP2043650A2 (en) 2006-07-14 2009-04-08 Medical Research Council Treatment for demyelinating disease
WO2008144931A1 (en) * 2007-05-30 2008-12-04 Painceptor Pharma Corporation Compositions and methods for modulating gated ion channels
EP2288922B1 (en) * 2008-05-08 2016-08-17 University of Utah Research Foundation Sensory receptors for chronic fatigue and pain and uses thereof
AU2009332651A1 (en) * 2008-12-26 2011-12-01 Glenmark Pharmaceuticals, S.A. Fused imidazole derivatives as TRPV3 antagonist
US9211313B2 (en) * 2011-01-14 2015-12-15 The Research Foundation Of State University Of New York Methods and compound to inhibit Ca2+ permeable cation conductance
JP5971657B2 (ja) 2011-04-20 2016-08-17 塩野義製薬株式会社 Ｔｒｐｖ４阻害活性を有する芳香族複素環誘導体
US9499533B2 (en) 2012-03-27 2016-11-22 Shionogi & Co., Ltd. Aromatic 5-membered heterocyclic derivative having TRPV4-Inhibiting activity
WO2015021988A1 (en) 2013-08-12 2015-02-19 Aros Pharma Aps Pyrrolo-isoquinoline compounds for treatment of pain associated with interstitial cystitis/bladder pain syndrome
JPWO2015046193A1 (ja) 2013-09-25 2017-03-09 塩野義製薬株式会社 Ｔｒｐｖ４阻害活性を有する芳香族複素環式アミン誘導体
WO2018151240A1 (ja) * 2017-02-17 2018-08-23 第一三共株式会社 ３，６，７，８－テトラヒドロシクロペンタ［ｅ］インドール化合物
WO2018151239A1 (ja) * 2017-02-17 2018-08-23 第一三共株式会社 ３，６－ジヒドロ－２Ｈ－フロ［２，３－ｅ］インドール化合物

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX9204914A (es) 1991-08-28 1993-07-01 Frank Watjen Nuevos derivados de isatinoxima, metodo para su preparacion y composicion farmaceutica que los comprende.
EP0664807B1 (en) 1992-10-13 1997-09-10 Warner-Lambert Company Quinoxalinedione derivatives as eaa antagonists
US5843945A (en) 1993-05-13 1998-12-01 Neurosearch A/S AMPA antagonists and a method of treatment
JP3439215B2 (ja) * 1993-05-13 2003-08-25 ノイロサーチ アクティーゼルスカブ Ａｍｐａ拮抗薬およびそれを用いての治療方法
DK81593D0 (da) 1993-07-07 1993-07-07 Neurosearch As Nye isatinoximderivater, deres fremstilling og anvendelse
ATE188701T1 (de) 1994-09-14 2000-01-15 Neurosearch As Kondensierte indole und chinoxalinderivate, ihre herstellung und verwendung als glutamatantagonisten
US5917053A (en) 1994-09-14 1999-06-29 Neurosearch A/S Indole-2,3-dione-3-oxime derivatives, their preparation and use
UA54403C2 (uk) 1996-10-01 2003-03-17 Н'Юросерч А/С Похідні індол-2,3-діон-3-оксиму, фармацевтична композиція, спосіб лікування розладу чи захворювання ссавців, у тому числі людини та спосіб одержання похідних індол-2,3-діон-3-оксиму
DE69922936T2 (de) 1998-03-31 2005-12-08 Neurosearch A/S Verwendung von indol-2,3-dione-3-oximderivate als ampa-antagonisten
ATE229954T1 (de) 1998-06-12 2003-01-15 Sod Conseils Rech Applic Betacarbolinverbindungen
AU4910500A (en) * 1999-05-19 2000-12-12 Neurosearch A/S Inhibitors of proton-gated cation channels and their use in the treatment of ischaemic disorders
WO2001055110A1 (en) 2000-01-24 2001-08-02 Neurosearch A/S Isatine derivatives with neurotrophic activity
CA2311483A1 (en) * 2000-06-12 2001-12-12 Gregory N Beatch IMIDAZO [1,2-A] PYRIDINIC ETHERS AND USES THEREOF
US7632948B2 (en) 2002-08-22 2009-12-15 Neurosearch A/S Method of preparing enantiomers of indole-2,3-dione-3-oxime derivatives
CL2004000409A1 (es) 2003-03-03 2005-01-07 Vertex Pharma Compuestos derivados de 2-(cilo sustituido)-1-(amino u oxi sustituido)-quinazolina, inhibidores de canales ionicos de sodio y calcio dependientes de voltaje; composicion farmaceutica; y uso del compuesto en el tratamiento de dolor agudo, cronico, neu
CN1894222A (zh) 2003-08-05 2007-01-10 沃泰克斯药物股份有限公司 作为电压门控离子通道抑制剂的稠合嘧啶化合物
TW200530235A (en) 2003-12-24 2005-09-16 Renovis Inc Bicycloheteroarylamine compounds as ion channel ligands and uses thereof

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103732583A (zh) * 2011-06-17 2014-04-16 葛兰素史密斯克莱知识产权（第2号）有限公司 Trpv4拮抗剂
CN103732583B (zh) * 2011-06-17 2015-12-23 葛兰素史密斯克莱知识产权（第2号）有限公司 Trpv4拮抗剂
CN105492423A (zh) * 2013-08-29 2016-04-13 株式会社大熊制药 四氢环戊并吡咯衍生物及用于制备其的方法
CN105492423B (zh) * 2013-08-29 2018-04-06 株式会社大熊制药 四氢环戊并吡咯衍生物及用于制备其的方法
CN109364248A (zh) * 2018-10-16 2019-02-22 哈尔滨医科大学 ENaC及其抑制剂在预防、缓解和/或治疗动脉粥样硬化中的应用
CN109364248B (zh) * 2018-10-16 2021-05-18 哈尔滨医科大学 ENaC及其抑制剂在预防、缓解和/或治疗动脉粥样硬化中的应用

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