CN102266054A - 一种冬虫夏草酵素及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种利用珍贵药食用真菌特别是冬虫夏草进行发酵制得发酵产品，以及它的制备方法。制备其活性成分的原料包括冬虫夏草菌株1-2环或冬虫夏草、沙棘、野桃、桑葚、乌梅、橘子等。其制备方法包括制备培养物；制备虫草酵素原汁；制备水果酵素原汁；益生菌发酵。本发明具有的有益效果是：利用冬虫夏草发酵累积功能成分，达到虫草补肺益肾、增强免疫、抗氧化、抗辐射等多功效的目的。

Description

一种冬虫夏草酵素及其制备方法

技术领域：

本发明涉及一种利用珍贵药食用真菌特别是冬虫夏草进行发酵制得发酵产品，以及它的制备方法。

背景技术：

冬虫夏草是非常名贵的药食用真菌。现代医学研究表明，冬虫夏草对人体许多生理机能有重要的影响，能明显促进机体免疫能力，对多种肿瘤、癌症、心脑血管病、肾脏系统病、糖尿病都有很好的预防、保健、康复和治疗作用，因此，冬虫夏草已经引起我国、日本、韩国乃至欧美医药学界的广泛关注。

酵素是一种由氨基酸组成的具有特殊生物活性的物质，它存在于所有活的动植物体内，是维持机体正常功能，消化食物，修复组织等生命活动的一种必需物质。酵素是生命正常新陈代谢中氧化还原反应不可或缺的催化剂。

现代生物技术的介入使名贵的冬虫夏草在量上有了质的突破，但是，对冬虫夏草产品的开发较少，作为发酵产品又少之甚少。因此，迫切需要开发一种发酵功能性虫草食饮品，以顺应追求健康、品质生活的人们的需求。

发明内容：

本发明要解决的问题就是针对以上不足而提供一种发酵功能性虫草食饮品，以及它的制备方法。其技术方案如下：

制备其活性成分的原料包括冬虫夏草菌株1-2环或冬虫夏草10-15份、沙棘10-15份、野桃10-15份、山楂10-15份、苹果10-15份、木瓜10-15份、葡萄10-15份、西瓜10-15份、樱桃10-15份、猕猴桃10-15份、草莓10-15份、桑葚10-15份、乌梅10-15份、橘子10-15份。

其制备方法包括以下步骤：

1)制备培养物：

①制备种子培养液：取蔗糖2份，麸皮1份，大米粉12份，青稞粉0.5份，pH6.5的磷酸二氢钾0.05份，水1000份，混匀备用；

②制备发酵培养基：青稞粉1份，大米粉2份，葡萄糖1份，蛋白胨0.5份，水800-1000份，混匀装好瓶后在121℃灭菌25分钟备用；

2)制备虫草酵素原汁：

①菌种斜面活化：

取1-2环冬虫夏草菌株接入到斜面活化培养基上，在20-25℃条件下培养8-14天；

②制备虫草孢子悬液：

将活化好的菌株斜面振荡，充分打散孢子，制备成浓度为10⁶个/mL的均一虫草孢子悬液；

③接种：

将虫草孢子悬液以6-10％的接种量接入种子培养液中，150r/min，20-25℃(±1℃)培养5-6天，制备二级种子，备用；

④培养：

将制备好的二级种子接入到发酵培养基中，在22℃-24℃、空气相对湿度为65％-75％条件下发酵培养18-22天，得虫草酵素原汁；

3)制备水果酵素原汁：

选取西藏水果沙棘10-15份、野桃10-15份、山楂10-15份、苹果10-15份、木瓜10-15份、葡萄10-15份、西瓜10-15份、樱桃10-15份、猕猴桃10-15份、草莓10-15份、桑葚10-15份、乌梅10-15份、橘子10-15份洗净，切片后装入发酵容器，加入5-10份糖或蜂蜜，3-5份醋，室温密封30天，得到野生水果酵素原汁；

4)益生菌发酵：

取虫草酵素原汁70--90份，野生水果酵素原汁10--30份混合，接种1-5份双歧杆菌菌液或乳酸杆菌菌液，室温发酵20-30天，得益生菌群酵素汁；

5)醋酸杆菌再次发酵：

在益生菌群酵素汁中转接入1-5％的醋酸杆菌，室温存放15-30天，得冬虫夏草发酵酵素汁。

与现有技术相比本发明具有的有益效果是：利用冬虫夏草发酵累积功能成分，达到虫草补肺益肾、增强免疫、抗氧化、抗辐射等多功效的目的。

附图说明：

图1，是本发明工艺流程图。

具体实施方式：

实施例一：

制备其活性成分的原料包括冬虫夏草菌株1环、沙棘15份、野桃(西藏地区生长的一种野桃子)10份、山楂15份、苹果10份、木瓜15份、葡萄10份、西瓜15份、樱桃10份、猕猴桃15份、草莓10份、桑葚15份、乌梅10份、橘子15份。

其制备方法包括以下步骤：

1)制备培养物：

①制备种子培养液：蔗糖2份，麸皮1份，大米粉12份，青稞粉0.5份，pH6.5的磷酸二氢钾0.05份，水1000份，混匀备用；

②制备发酵培养基：青稞粉1份，大米粉2份，葡萄糖1份，蛋白胨0.5份，水800份，混匀装好瓶后在121℃灭菌25分钟备用；

2)制备虫草酵素原汁：

①菌种斜面活化：

取1环冬虫夏草菌株接入到斜面活化培养基上，在20℃条件下培养14天；

斜面活化培养基由马铃薯200g，麦麸50g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH₂PO₄3g，MgSO₄2.5g，维生素B₁0.01g，琼脂20g，水1000mL混合制成。

②制备虫草孢子悬液：

将活化好的菌株斜面用无菌生理盐水洗下孢子，振荡，充分打散孢子，制备成浓度为10⁶个/mL的均一虫草孢子悬液；

③接种：

将虫草孢子悬液以6％的接种量接入种子培养液中，150r/min，20℃(±1℃)培养6天，制备二级种子，备用；

④培养：

将制备好的二级种子接入到发酵培养基中，在22℃、空气相对湿度为65％条件下发酵培养18天，得虫草酵素原汁；

3)制备水果酵素原汁：

选取西藏水果沙棘15份、野桃10份、山楂15份、苹果10份、木瓜15份、葡萄10份、西瓜15份、樱桃10份、猕猴桃15份、草莓10份、桑葚15份、乌梅10份、橘子15份洗净，切片后装入发酵容器，加入5份糖或蜂蜜，3份醋，室温密封30天，得到野生水果酵素原汁；

4)益生菌发酵：

取虫草酵素原汁70份，野生水果酵素原汁30份混合，接种1份双歧杆菌菌液或乳酸杆菌菌液，室温发酵20天，得益生菌群酵素汁；

双歧杆菌菌液是双歧杆菌在发酵温度20℃下经过活化培养30小时后获得；

乳酸杆菌菌液是乳酸菌在发酵温度20℃下经过活化培养30小时后获得。

5)醋酸杆菌再次发酵：

在益生菌群酵素汁中转接入1％的醋酸杆菌，室温存放30天，得冬虫夏草发酵酵素汁。

醋酸杆菌是在温度20℃下活化培养30小时后获得。

实施例二：

制备其活性成分的原料包括冬虫夏草菌株2环、沙棘15份、野桃10份、山楂15份、苹果10份、木瓜15份、葡萄10份、西瓜15份、樱桃10份、猕猴桃15份、草莓10份、桑葚15份、乌梅10份、橘子15份。

其制备方法包括以下步骤：

1)制备培养物：

①制备种子培养液：蔗糖2份，麸皮1份，大米粉12份，青稞粉0.5份，pH6.5的磷酸二氢钾0.05份，水1000份，混匀备用；

②制备发酵培养基：青稞粉1份，大米粉2份，葡萄糖1份，蛋白胨0.5份，水800份，混匀装好瓶后在121℃灭菌25分钟备用；

2)制备虫草酵素原汁：

①菌种斜面活化：

取2环冬虫夏草菌株接入到斜面活化培养基上，在25℃条件下培养8天；

斜面活化培养基：马铃薯200g，麦麸50g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH₂PO₄3g，MgSO₄2.5g，维生素B₁0.01g，琼脂20g，水1000mL。

②制备虫草孢子悬液：

将活化好的菌株斜面用无菌生理盐水洗下孢子，振荡，充分打散孢子，制备成浓度为10⁶个/mL的均一虫草孢子悬液；

③接种：

将虫草孢子悬液以10％的接种量接入种子培养液中，150r/min，25℃(±1℃)培养5天，制备二级种子，备用；

④培养：

将制备好的二级种子接入到发酵培养基中，在24℃、空气相对湿度为75％条件下发酵培养22天，得虫草酵素原汁；

3)制备水果酵素原汁：

选取西藏水果沙棘15份、野桃10份、山楂15份、苹果10份、木瓜15份、葡萄10份、西瓜15份、樱桃10份、猕猴桃15份、草莓10份、桑葚15份、乌梅10份、橘子15份洗净，切片后装入发酵容器，加入10份糖或蜂蜜，5份醋，室温密封30天，得到野生水果酵素原汁；

4)益生菌发酵：

取虫草酵素原汁90份，野生水果酵素原汁10份混合，接种5份双歧杆菌菌液或乳酸杆菌菌液，室温发酵30天，得益生菌群酵素汁；

双歧杆菌菌液是双歧杆菌在发酵温度40℃下经过活化培养15小时后获得；

乳酸杆菌菌液是乳酸菌在发酵温度40℃下经过活化培养15小时后获得。

5)醋酸杆菌再次发酵：

在益生菌群酵素汁中转接入5％的醋酸杆菌，室温存放15天，得冬虫夏草发酵酵素汁。

醋酸杆菌是在温度40℃下活化培养15小时后获得。

实施例三：

制备其活性成分的原料包括冬虫夏草菌株2环、沙棘13份、野桃13份、山楂13份、苹果13份、木瓜13份、葡萄13份、西瓜13份、樱桃13份、猕猴桃13份、草莓13份、桑葚13份、乌梅13份、橘子13份。

其制备方法包括以下步骤：

1)制备培养物：

①制备种子培养液：蔗糖2份，麸皮1份，大米粉12份，青稞粉0.5份，pH6.5的磷酸二氢钾0.05份，水1000份，混匀备用；

②制备发酵培养基：青稞粉1份，大米粉2份，葡萄糖1份，蛋白胨0.5份，水800份，混匀装好瓶后在121℃灭菌25分钟备用；

2)制备虫草酵素原汁：

①菌种斜面活化：

取2环冬虫夏草菌株接入到斜面活化培养基上，在23℃条件下培养11天；

斜面活化培养基：马铃薯200g，麦麸50g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH₂PO₄3g，MgSO₄2.5g，维生素B₁0.01g，琼脂20g，水1000mL。

②制备虫草孢子悬液：

将活化好的菌株斜面用无菌生理盐水洗下孢子，振荡，充分打散孢子，制备成浓度为10⁶个/mL的均一虫草孢子悬液；

③接种：

将虫草孢子悬液以8％的接种量接入种子培养液中，150r/min，23℃(±1℃)培养5天，制备二级种子，备用；

④培养：

将制备好的二级种子接入到发酵培养基中，在23℃、空气相对湿度为70％条件下发酵培养20天，得虫草酵素原汁；

3)制备水果酵素原汁：

选取西藏水果沙棘13份、野桃13份、山楂13份、苹果13份、木瓜13份、葡萄13份、西瓜13份、樱桃13份、猕猴桃13份、草莓13份、桑葚13份、乌梅13份、橘子13份洗净，切片后装入发酵容器，加入7份糖或蜂蜜，4份醋，室温密封30天，得到野生水果酵素原汁；

4)益生菌发酵：

取虫草酵素原汁80份，野生水果酵素原汁20份混合，接种3份双歧杆菌菌液或乳酸杆菌菌液，室温发酵25天，得益生菌群酵素汁；

双歧杆菌菌液是双歧杆菌在发酵温度30℃下经过活化培养23小时后获得；

乳酸杆菌菌液是乳酸菌在发酵温度30℃下经过活化培养23小时后获得。

5)醋酸杆菌再次发酵：

在益生菌群酵素汁中转接入3％的醋酸杆菌，室温存放23天，得冬虫夏草发酵酵素汁。

醋酸杆菌是在温度30℃下活化培养23小时后获得。

以上还可以用蛹虫草菌株、蚕虫草菌株、古尼虫草菌株替换冬虫夏草菌株，它们分别是从采集的新鲜蛹虫草、蚕虫草、古尼虫草中分离出来的蛹虫草菌株、蚕虫草菌株、古尼虫草菌株。

以上糖可用砂糖、果糖及其它糖；醋可用米醋、果醋或青稞醋。

实施例四：

制备其活性成分的原料包括冬虫夏草10份、沙棘15份、野桃10份、山楂15份、苹果10份、木瓜15份、葡萄10份、西瓜15份、樱桃10份、猕猴桃15份、草莓10份、桑葚15份、乌梅10份、橘子15份。

其制备方法包括以下步骤：

1)浸提虫草提取物：

取冬虫夏草10份经过粉碎后，用100份50％的乙醇水溶液对虫草进行回流提取2小时，收集提取液，即得虫草提取物。

2)制备水果酵素原汁：

选取西藏水果沙棘15份、野桃10份、山楂15份、苹果10份、木瓜15份、葡萄10份、西瓜15份、樱桃10份、猕猴桃15份、草莓10份、桑葚15份、乌梅10份、橘子15份洗净，切片后装入发酵容器，加入5份糖或蜂蜜，3份醋，室温密封30天，得到野生水果酵素原汁；

3)益生菌发酵：

取虫草提取物70份，野生水果酵素原汁30份混合，接种1份双歧杆菌菌液或乳酸杆菌菌液，室温发酵20天，得益生菌群酵素汁；

4)醋酸杆菌再次发酵：

在益生菌群酵素汁中转接入1％的醋酸杆菌，室温存放30天，得冬虫夏草发酵酵素汁。

实施例五：

制备其活性成分的原料包括冬虫夏草15份、沙棘10份、野桃15份、山楂10份、苹果15份、木瓜10份、葡萄15份、西瓜10份、樱桃15份、猕猴桃10份、草莓15份、桑葚10份、乌梅15份、橘子10份。

其制备方法包括以下步骤：

1)浸提虫草提取物：

取冬虫夏草15份经过粉碎后，用120份70％的乙醇水溶液对虫草进行回流提取4小时，收集提取液，即得虫草提取物。

2)制备水果酵素原汁：

选取西藏水果沙棘10份、野桃15份、山楂10份、苹果15份、木瓜10份、葡萄15份、西瓜10份、樱桃15份、猕猴桃10份、草莓15份、桑葚10份、乌梅15份、橘子10份洗净，切片后装入发酵容器，加入10份糖或蜂蜜，5份醋，室温密封30天，得到野生水果酵素原汁；

3)益生菌发酵：

取虫草提取物90份，野生水果酵素原汁10份混合，接种5份双歧杆菌菌液或乳酸杆菌菌液，室温发酵30天，得益生菌群酵素汁；

4)醋酸杆菌再次发酵：

在益生菌群酵素汁中转接入5％的醋酸杆菌，室温存放15天，得冬虫夏草发酵酵素汁。

实施例六：

制备其活性成分的原料包括冬虫夏草12份、沙棘13份、野桃13份、山楂13份、苹果13份、木瓜13份、葡萄13份、西瓜13份、樱桃13份、猕猴桃13份、草莓13份、桑葚13份、乌梅13份、橘子13份。

其制备方法包括以下步骤：

1)浸提虫草提取物：

取冬虫夏草12份经过粉碎后，用110份60％的乙醇水溶液对虫草进行回流提取3小时，收集提取液，即得虫草提取物；

2)制备水果酵素原汁：

选取西藏水果沙棘13份、野桃13份、山楂13份、苹果13份、木瓜13份、葡萄13份、西瓜13份、樱桃13份、猕猴桃13份、草莓13份、桑葚13份、乌梅13份、橘子13份洗净，切片后装入发酵容器，加入7份糖或蜂蜜，4份醋，室温密封30天，得到野生水果酵素原汁；

3)益生菌发酵：

取虫草提取物80份，野生水果酵素原汁20份混合，接种3份双歧杆菌菌液或乳酸杆菌菌液，室温发酵25天，得益生菌群酵素汁；

4)醋酸杆菌再次发酵：

在益生菌群酵素汁中转接入3％的醋酸杆菌，室温存放23天，得冬虫夏草发酵酵素汁。

以上可以用中药材蛹虫草、蚕虫草、古尼虫草替换冬虫夏草。

使用本发明方法制得的冬虫夏草发酵酵素汁可机械加工成虫草酵素液或固体虫草酵素，应用于食品及保健品领域的饮料、胶囊、含片、颗粒剂等。

Claims (3)

1.一种冬虫夏草酵素，其特征在于制备其活性成分的原料包括冬虫夏草菌株1-2环或冬虫夏草10-15份、沙棘10-15份、野桃10-15份、山楂10-15份、苹果10-15份、木瓜10-15份、葡萄10-15份、西瓜10-15份、樱桃10-15份、猕猴桃10-15份、草莓10-15份、桑葚10-15份、乌梅10-15份、橘子10-15份。

2.根据权利要求1所述冬虫夏草酵素的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)制备培养物：

①制备种子培养液：蔗糖2份，麸皮1份，大米粉12份，青稞粉0.5份，pH6.5的磷酸二氢钾0.05份，水1000份，混匀备用；

②制备发酵培养基：青稞粉1份，大米粉2份，葡萄糖1份，蛋白胨0.5份，水800份，混匀装好瓶后在121℃灭菌25分钟备用；

2)制备虫草酵素原汁：

①菌种斜面活化：

取1-2环冬虫夏草菌株接入到斜面活化培养基上，在20-25℃条件下培养8-14天；

②制备虫草孢子悬液：

将活化好的菌株斜面振荡，充分打散孢子，制备成浓度为10⁶个/mL的均一虫草孢子悬液；

③接种：

将虫草孢子悬液以6-10％的接种量接入种子培养液中，150r/min，20-25℃(±1℃)培养5-6天，制备二级种子，备用；

④培养：

将制备好的二级种子接入发酵培养基中，在22℃-24℃、空气相对湿度为65％-75％条件下发酵培养18-22天，得虫草酵素原汁；

3)制备水果酵素原汁：

选取水果沙棘10-15份、野桃10-15份、山楂10-15份、苹果10-15份、木瓜10-15份、葡萄10-15份、西瓜10-15份、樱桃10-15份、猕猴桃10-15份、草莓10-15份、桑葚10-15份、乌梅10-15份、橘子10-15份洗净，切片后装入发酵容器，加入5-10份糖或蜂蜜，3-5份醋，室温密封30天，得到野生水果酵素原汁；

4)益生菌发酵：

取虫草酵素原汁70--90份，野生水果酵素原汁10--30份混合，接种1-5份双歧杆菌菌液或乳酸杆菌菌液，室温发酵20-30天，得益生菌群酵素汁；

5)醋酸杆菌再次发酵：

在益生菌群酵素汁中转接入1-5％的醋酸杆菌，室温存放15-30天，得冬虫夏草发酵酵素汁。

3.根据权利要求2所述冬虫夏草酵素的制备方法，其特征在于将制备虫草酵素原汁替换为浸提虫草提取物：

取冬虫夏草10-15份，用100-120份50-70％的乙醇水溶液对虫草进行回流提取2-4小时，收集提取液，即得虫草提取物。

Images