CN110973423A - 红曲诺丽果饮料及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种红曲诺丽果饮料及其制备方法。该红曲诺丽果固体饮料制备方法，以功能红曲菌种ZSH‑G‑002为原料制得，其微生物保藏编号是：CCTCC NO:M 2019174。该功能红曲诺丽果固体饮料制备方法，包括（1）取烘干诺丽果片、研磨制粉或者诺丽果鲜果打浆，备用；（2）将功能红曲菌种ZSH‑G‑002接种于以诺丽果粉为主要原料的物料中，发酵，得到红曲诺丽果。本发明采用诺丽果为主要发酵基质，并以大米、黄豆、菊粉、低聚果糖及小麦胚芽粉为辅料，将红曲诺丽果发酵液功能性红曲特有的生理功能与诺丽果等发酵原料中含有的丰富营养物质进行了结合，本发明的红曲诺丽果拥有了较高的药食同源价值，可广泛应用于食品、保健及医药等领域。

Description

红曲诺丽果饮料及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种饮料及其制备方法，具体涉及红曲诺丽果饮料及其制备方法。本发明属于微生物发酵技术领域。

背景技术

诺丽果(Noni)是海滨木巴戟（Morinda citrifolia L.）的果实。其果实具有富含人体细胞体细胞之成份。生活在南太平洋印度尼西亚岛屿的人民首先发现一种遍布该地的小型开花灌木灌木"诺丽树。

诺丽果主要生长在南太平洋群岛，在世界其他热带区也可找到变种，变异的诺丽果。南半球的印度尼西亚、瓦努阿图，库克群岛，斐济，萨摩亚都盛产诺丽果，北半球的夏威夷群岛、东南亚的菲律宾，塞班岛、澳大利亚、泰国，柬埔寨，国内则在海南岛、西沙群岛和台湾岛都有分布。

诺丽果包含有赛洛宁原、活性酵素、β-胡萝卜素、烟碱素、蛋白质、碳酸盐、叶酸、生物素、泛酸、血清素、膳食纤维、酵素、维生素A、维生素B群、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、钙、铁、镁、锌、碘、磷、铜、铬、锰、硫、钠、钾、硒、锗、钼等150多种营养元素。

中国发明专利CN 104195051 A公开一种功能火龙果红曲的制备方法及制品，其制备方法为分别制备火龙果培养基、红曲菌丝体及制备功能火龙果红曲，所述的红曲菌丝体是以红曲红曲菌（Monascus purpureus yangTY622）为菌种、经斜面培养基、液态摇瓶培养基的培养，同时采用紫外线-硫酸二乙酯对菌种进行复合诱变，之后接入发酵培养基，经液态发酵培养而制成；所述的功能火龙果红曲为将红曲菌丝体、益生菌或乳酸菌接入火龙果果浆培养基中经液态发酵获得。本发明提供的功能火龙果红曲，其兼有火龙果和红曲的多种保健功能，不仅具有红曲的降血脂、降血压、降血糖等作用，还具有火龙果的排毒养颜、防年老病变、解除重金属中毒等功效，能满足更多人的需求。

上述文献主要的方案如下：

火龙果培养基：

将火龙果洗净、去皮，按重量比为火龙果果肉1：无菌水1-10置于打浆机中经打浆制成果浆，然后在每升果浆中添加米粉1-3g,KH2P040.1-0.9g,NaN030.6-0.8g,MgS040.5-0.6g,马铃薯0.9-1.2g。

红曲菌丝体：

选取红曲红曲菌Monascus purpureus yangTY622菌株为菌种，其微生物保藏编号为CGMCC4110;在30-40℃下经斜面培养基、液态摇瓶培养基的培养，同时采用紫外线-硫酸二乙酯对菌种进行复合诱变，以降低桔霉素含量，之后接入发酵培养基，进行液态发酵培养生产生成红曲菌丝体；

功能火龙果红曲的制备：

以步骤（1）所述的火龙果培养基的重量为基准，按重量百分比计加入步骤（2）所述的红曲菌丝体10-60%、无菌水20-30%，在120℃灭菌25min,再按重量百分比计接种5-10%的益生菌或乳酸菌，在25-35℃发酵培养6-8天，即可生产得到功能火龙果红曲。

以上功能火龙果红曲的制备方法及制品，对红曲菌丝体在30-40℃下经斜面培养基、液态摇瓶培养基的培养，同时采用紫外线-硫酸二乙酯对菌种进行复合诱变，以降低桔霉素含量，其缺陷是，需要采用紫外-硫酸二乙酯对菌种进行复合诱变，不具有重现性，不满足实用性的要求。

中国发明专利CN 108887376 A公开了一种延长卤制蔬菜保质期的复配混合物及其制备方法，其中复配混合物由功能性红曲粉、诺丽果提取物、山奈提取物、FSCY86变性淀粉、水、麦芽糊精、青梅有机酸提取物制备而成；所述青梅有机酸提取物为腌制的青梅，经过去核→粉碎→榨汁→浓缩→干燥→喷粉制得酸度为25-30%的粉末状物质。本发明利用诺丽果提取物、变性淀粉及配方各组分间的交互复合作用，形成了具有强渗透力而且稳定的抗菌体系，能够在生产过程中渗透进入藕片及豆干等紧密组织结构的原料中，形成稳定的抑菌效果，进而延长保质期。

具有以下缺点：

（1）功能性红曲粉、诺丽果提取物等简单混合；

（2）设定挤压前区温度60摄氏度，后区温度85摄氏度，最好100摄氏度。

发明内容

本发明的目的在于，提供红曲诺丽果饮料及其制备方法，具体本发明提供了一种以诺丽果为主要原料，以大米、黄豆、菊粉等为辅料的功能红曲的制备方法，通过该方法制备所得的功能红曲在预防心脑血管疾病方面功效显著，可广泛应用于利于人类健康的食品、药品领域;其感官及功效方面同时得到提升。

本发明所需要解决的技术问题，可以通过以下技术方案来实现：

作为本发明的第一方面， 红曲诺丽果饮料，其特征在于，包括：按照重量份数计，其配方为：红曲菌种 10-15、诺丽果粉20-30和辅料4.5-16；所述辅料为黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1。

优选的配方为：红曲菌种 10-12、诺丽果粉20-25和辅料4.5-16；所述辅料为黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1。

其中，所述红曲菌种，其微生物保藏编号是：CCTCC NO:M 2019174。

其中，所述饮料制成固体、液体、胶囊剂型。

作为本发明的第二方面， 一种红曲诺丽果饮料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、预处理：制备诺丽果粉，准备辅料；

S2、配料；按以下重量份数取各原料：取S1诺丽果粉20-30和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，调pH3-4；

S3、灭菌：灭菌S2中的物料；

S4：发酵：将红曲菌种，接种于S3灭菌后的物料中，发酵发酵培养，得红曲诺丽果。

其中，将S4制备的红曲诺丽果制成饮料，所述饮料制成固体、液体、胶囊剂型。

进一步，包括下述的步骤：

S1:预处理：诺丽果切片制粉；黄豆温水浸泡2-12h，打浆；

S2:配料：按以下重量份数取各原料：取S1诺丽果粉20-30和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，调pH3-4；

S3:灭菌S2中的物料；

S4：接入液体功能红曲菌种ZSH-G-002 10-15,发酵培养，得诺丽果功能红曲发酵液，将发酵液烘干，检测色价，粉碎，得红曲诺丽果。

更进一步，包括下述的步骤：

S1:预处理：诺丽果清洗后，切片粉碎，黄豆温水浸泡2-12h,打浆；

S2:配料：按以下重量份数取各原料：取S1中的诺丽果粉20-30和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，调pH3-4；

S3:灭菌S2中的物料；

S4：接入液体功能红曲菌种ZSH-G-002 10-15,发酵培养，红曲诺丽果发酵液，将发酵液烘干，检测色价，粉碎，得红曲诺丽果。

更进一步，包括下述的步骤：

S1:将诺丽果及黄豆预处理：诺丽果制粉，温水浸泡黄豆2-12h,利用打浆机得二者的混合浆液; 菊粉1-10，小麦胚芽粉0.01-0.15；

S2:配料：按以下重量份数取各原料：取S1中的诺丽果粉20-25和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，利用乳酸调pH3-4；

S3:灭菌S2中的物料；

S4：接入液体功能红曲菌种10-15，种龄48小时，接种量5-20%，发酵培养5-15天，得红曲诺丽果发酵液，加麦芽糊精喷雾干燥，然后添加蜂蜜、乳清蛋白粉得到红曲诺丽果饮料。

其中， S3中，灭菌步骤是在1kg/cm ²、121℃下灭菌20分钟。

本发明原理：

诺丽果包含有赛洛宁原、活性酵素、β-胡萝卜素、烟碱素、蛋白质、碳酸盐、叶酸、生物素、泛酸、血清素、膳食纤维、酵素、维生素A、维生素B群、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、钙、铁、镁、锌、碘、磷、铜、铬、锰、硫、钠、钾、硒、锗、钼等150多种营养元素。

本产品以大米作为红曲发酵主要碳源，米中含碳水化合物75%左右，蛋白质7%-8%，脂肪1.3%-1. 8%，并含有丰富的B族维生素等。大米中的碳水化合物主要是淀粉，所含的蛋白质主要是米谷蛋白，其次是米胶蛋白和球蛋白，其蛋白质的生物价和氨基酸的构成比例都比小麦、大麦、小米、玉米等禾谷类作物高，消化率66.8%-83.1%，也是谷类蛋白质中较高的一种。中医认为大米味甘性平，具有补中益气、健脾养胃、益精强志、和五脏、通血脉、聪耳明目止烦、止渴、止泻的功效，称誉为"五谷之首"，是中国的主要粮食作物，约占粮食作物栽培面积的四分之一。世界上有一半人口以大米为主食。大米，入脾、胃、肺经，具有补中益气、滋阴润肺、健脾和胃、除烦渴的作用。古代养生家还倡导"晨起食粥"以生津液，因此，因肺阴亏虚所致的咳嗽、便秘患者可早晚用大米煮粥服用。经常喝点大米粥有助于津液的生发，可在一定程度上缓解皮肤干燥等不适。煮粥时若加点梨，中医养生效果更好。

本产品以黄豆作为红曲发酵主要氮源，着眼于黄豆本身的保健功能方面，由于黄豆中含有大量的生物活性物质，对心血管疾病及动脉粥样硬化起到了积极的预防作用。例如，黄豆除含有丰富的黄豆蛋白为，可做氮源外，同时也包括少量的葡萄糖、果糖及半乳糖，黄豆低聚糖可促进肠道中的有益菌双歧杆菌的增殖，改善肠道细菌群体结构，同时由于双歧杆菌的诱导免疫作用，可增强人体免疫力。曾有试验证明嗜酸乳杆菌可通过影响β-羟基-β-甲基戊二单酰辅酶A还原酶的活性，控制胆固醇的合成，起到降血压降血脂的作用。因此，黄豆被广泛应用于食品保健领域。黄豆对于微生物发酵而言，黄豆多肽对微生物生长发育及次级代谢产物的积累具有积极的促进作用。除此之外，黄豆中含有多种氨基酸物质可对红曲生长起到重要的生长因子的作用。

本发明采用的辅料主要包括菊粉及小麦胚芽粉，菊粉是自然界中天然存在的可溶性膳食纤维之一，在控制血糖及胆固醇方面功效显著，菊粉在人体代谢过程中不需要胰岛素，可减少糖尿病人对胰岛素的依赖性，控制血糖。菊糖在降血脂方面的机理包括：吸附肠腔内胆酸汁，减少胆酸汁的重吸收，阻断胆固醇在肠腔内循环；降低膳食中胆固醇的吸收率；被大肠内有益菌发酵降解，所产生的短链脂肪酸和乳酸盐对肝脏胆固醇的生物合成有抑制作用。除此之外，菊粉能提高钙、铁、钾、锰、锌、镁等矿物质的吸收，这是因为菊粉在发酵中被降解，其产生的短链脂肪酸使肠道内部的pH值降低1~2个单位，增加了金属离子溶解度，因此，菊糖可促进新鲜水果中金属离子的吸收，使更多金属离子进入肠细胞供人体吸收。

小麦被誉为“五谷之尊”，其中含有丰富的膳食纤维、维生素、类胡萝卜素（人体内转化为维生素A）、不饱和脂肪酸、优质全价蛋白质、谷肤甘肤和小麦黄酮，而且还含有人体必需的多种矿物质。小麦胚芽作为小麦粒的核心和生命中枢，具有极高的综合营养价值，已被世界各国营养学家誉为“人类天然的营养宝库”。小麦胚芽粉中含有的谷胱甘肽是一种含硫抗氧化物，由此形成一定的健康保健功效。小麦胚芽粉和菊粉的共同特点在于皆含有丰富的膳食纤维，对人体肠道菌群起到重要的调节作用，但是小麦胚芽粉的优势在于小麦胚芽中含有丰富的亚油酸，该不饱和脂肪酸在降低血清胆固醇浓度，防治动脉粥样硬化方面作用显著，同时其中含有的小麦黄酮对心血管疾病也具有一定的功效。

以上述原料为发酵基质对功能性红曲进行液体发酵，我国早在古代便开始食用红曲，《本草纲目》中曾记载有红曲的特性，其气味“甘温、无毒”，功用主治“女人气血痛及产后恶血不尽”。《饮膳正要》中描述红曲“健脾益气、温中”，《本草衍义补遗》称红曲可“活血消食、建暖胃、治赤白痢下水谷”。在现代研究中功能红曲在代谢过程中可提供多种活性酶，如淀粉酶、糖化酶、蛋白酶等，红曲霉在这些酶的作用下，产生功能糖类、不饱和脂肪酸、降压因子（如莫纳克林K、麦角固醇及γ-氨基丁酸等）等物质，从而使红曲发酵物拥有了降血脂、降血压、降血糖、抗疲劳、调节胃肠道健康等广泛的保健作用。

因此，结合诺丽果、黄豆、大米、菊粉、低聚果糖、小麦胚芽粉及红曲的复合保健功能而成的产品-红曲诺丽果，在预防心脑血管疾病方面功效显著，可广泛应用于利于人类健康的食品、药品领域。

本发明的有益效果在于：

（1）本发明采用诺丽果粉为主要发酵基质，并以黄豆、大米，菊粉、低聚果糖及小麦胚芽粉为辅料，利用乳酸调节发酵液pH，将红曲诺丽果发酵液功能性红曲特有的生理功能与诺丽果等发酵原料中含有的丰富营养物质进行了结合，如赛洛宁原、活性酵素、β-胡萝卜素、烟碱素、蛋白质、维生素等，使本发明的红曲诺丽果拥有了较高的药食同源价值，可广泛应用于食品、保健及医药等领域；

（2）本发明采用诺丽果为主要原料，同时菊粉的加入可延长碳源的供应时间，但不提高血糖，减轻糖尿病患者对胰岛素的依赖性，除此之外，诺丽果诺丽果包含有赛洛宁原、活性酵素、β-胡萝卜素、烟碱素、蛋白质、碳酸盐、叶酸、生物素、泛酸、血清素、膳食纤维、酵素、维生素A、维生素B群、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、钙、铁、镁、锌、碘、磷、铜、铬、锰、硫、钠、钾、硒、锗、钼等150多种营养元素。

（3）本发明采用干燥喷雾技术对红曲诺丽果发酵液喷雾干燥，使其更易储存及应用。红曲诺丽果在感官方面，口感差，香气差，后期加麦芽糊精包埋，喷雾干燥，再调配口感和香味，在功效方面，结合了多种原料及红曲代谢物的生理活性功能，因此，红曲诺丽果具有较高的营养保健及应用价值。

（4）本发明红曲菌种，编号为ZSH-G-002，其微生物保藏编号是：CCTCC NO:M2019174。红曲粉、诺丽果经过充分发酵，相对于对比文件公开专利的简单混合相比，本发明采用功能红曲菌种与诺丽果一起发酵得到含有功能红曲成分的系列产物，工艺优化，生物活性物质多的优点；

（5）本发明制成的各种剂型，可以经过105-121摄氏度的高温，不会影响品质和口感。

附图说明

图1为实施例4中本发明的红曲诺丽果色谱图。

图2为本发明方法制备的红曲诺丽果发酵时间与洛伐他汀含量曲线。红曲诺丽果发酵液中洛伐他丁含量mg/ml随发酵时间的变化，横坐标为发酵时间（天），纵坐标为红曲诺丽果发酵液中伐他汀含量（mg/ml）。

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。

实施例1

以功能红曲诺丽果固体饮料制备方法为例，其步骤如下：

S1:诺丽果及黄豆预处理：

将诺丽果切片，烘干（温度：100℃，时间：1h），制粉（500rpm，得100目粉）。

温水浸泡黄豆2-12h，利用打浆机（ 500 rpm，10min）得二者的混合浆液。

S2:配料：按以下重量份数取各原料：取S1中的诺丽果20和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，利用乳酸调pH3-4；

S3:灭菌S2中的物料；灭菌条件是：1kg/cm ²、121℃下灭菌20分钟；

S4：接入液体功能红曲菌种（其微生物保藏编号是：CCTCC NO:M 2019174湖北藻上好生物科技有限公司购买，下同），种龄48小时，接种量12%，发酵培养10天，得红曲诺丽果发酵液，加麦芽糊精喷雾干燥，然后添加蜂蜜、乳清蛋白粉得到功能红曲诺丽果固体饮料。

实施例2

功能红曲诺丽果固体饮料制备方法，其步骤如下：

S1:诺丽果及黄豆预处理：诺丽果切片，烘干，制粉。黄豆温水浸泡,二者混合利用打浆机制得浆液;

S2:配料：按以下重量份数取各原料：取S1中的诺丽果25和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，利用乳酸调pH3-4；

S3:灭菌S2中的物料；

S4：接入液体功能红曲菌种，种龄48小时，接种量5-15%，发酵培养15天，至洛伐他丁含量为2.0mg/g为止，得红曲诺丽果发酵液，加麦芽糊精喷雾干燥，然后添加蜂蜜、乳清蛋白粉得到功能红曲诺丽果固体饮料。

实施例3

功能红曲诺丽果固体饮料制备方法，其步骤如下：

S1:诺丽果及黄豆预处理：诺丽果鲜果，黄豆温水浸泡,二者混合利用打浆机制得浆液;

S2:配料：按以下重量份数取各原料：取S1中的诺丽果30和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，利用乳酸调pH3-4；

S3:灭菌S2中的物料；

S4：接入液体功能红曲菌种，种龄48小时，接种量10%，发酵培养13天，至洛伐他丁含量为2.0mg/g为止，得红曲诺丽果发酵液，加麦芽糊精喷雾干燥，然后添加蜂蜜、乳清蛋白粉得到功能红曲诺丽果固体饮料。

实施例4

取实施例1-3中所得的红曲诺丽果，测定其中的洛伐他丁的含量，具体的检测方法如下：

（1）试样处理：准确称取红曲诺丽果粉0.1-0.5g试样于50ml容器瓶中。加入75%乙醇至接近刻度线，再超声60min,之后冷却至室温，用75%乙醇定容至50ml。以2000-4000r/min的旋转速度离心5-15min。去上清液经0.45μm微孔过滤膜过滤，滤液待用。

（2）液相色谱柱参考条件

色谱柱：C18柱

柱温：室温20-25℃

紫外检测器：238nm检测波长

流动相：甲醇：水：磷酸=（300-400）：（100-120）：（0.1-0.2）

流速：0.5-1.5ml/min

进样量：20μ1

（3）标准曲线制备

配制浓度为0.1、1、10、30、75、150、300μg/ml洛伐他汀标准溶液。分析时，用洗脱液平衡分析柱，基线稳定后将不同浓度的洛伐他汀标准液进行HPLC分析，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，以洛伐他汀含量为横坐标，线性关系良好，r在0.9995以上时进行后续样品测定。

(4)色谱分析

将处理好的样品提取液20μ1进样，与标准溶液保留时间对照定性，用被测组分内脂及酸式洛伐他汀峰面积之和与标准洛伐他汀（内脂）的峰面积之比进行定量。色谱结果如说明书附图图1所示。图1为实施例4中本发明的红曲诺丽果色谱图。

(5)结果计算

X=(H1+H2) ×C×50/(H3×m)

式中：X-试样中莫纳克林K含量，单位mg/g;

H1-样品中内脂式洛伐他汀面积；

H2-样品中酸式洛伐他汀峰面积；

C-标准洛伐他汀（内脂）溶液浓度，单位ml;

50-试样定容体积

H3-标准洛伐他汀（内脂）溶液峰面积。

如图2所示，本发明方法制备的红曲诺丽果发酵时间与洛伐他汀含量曲线图。

关于本发明的功能红曲不提高血糖，减轻糖尿病患者对胰岛素的依赖性新鲜水果中含有丰富的多酚类物质，此类物质可作为高血压及高血脂的抑制剂，黄豆及小麦胚芽粉中丰富的不饱和脂肪酸也具有预防动脉粥样硬化，降低胆固醇的功效，此类降血压、降血脂的功效结合红曲中生理活性因子，如莫纳克林K等因子的降胆固醇等功效，使红曲诺丽果拥有了天然的预防心脑血管疾病的作用。

实施例5

对实施例1制备的产品做了降血脂的功能性评价试验，根据血脂异常的类型，降低血脂功能按照受试物作用机制的不同，设立分类的动物试验。试验表明，实施例1产品能够有效改善血脂小鼠的血脂谱以及氧化应激状态，以高剂量时效果最为显著，能够使血清中TC和LDL-C含量分别降低52.5%和35.4%；同时使血清T-AOC和SOD水平分别提高83.2%和13.4%，并可达到与正常组相当的水平。评价试验方法如下：

原理

用含有胆固醇、蔗糖、猪油、胆酸钠的饲料喂养动物可形成脂代谢紊乱动物模型，再给予动物受试样品，可检测受试样品对高脂血症的影响，并可判定受试样品对脂质的吸收、脂蛋白的形成、脂质的降解或排泄产生的影响。

材料与仪器

常规饲料成分：碳水化合物：59%，蛋白质：21.1%，纤维：4.9%，脂肪：4.2%，灰分：8%，磷：1%，钙：1.8%。

高脂饲料成分: 碳水化合物：48%，蛋白质：21.1%，脂肪：4.2%，纤维：4.7%，灰分：8%，磷：1%，钙：1.8%,猪油10%，胆酸盐0.2%，胆固醇1%。

上述饲料均购于北京动物实验中心。

甘油三酯测定试剂盒（GPO-POD法），胆固醇测定试剂盒（CO-POD法），低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒（直接法），高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒（直接法），总超氧化物歧化酶（T-SOD）测试盒，总抗氧化能力（T-AOC）测定试剂盒，南京建成科技有限公司；其他试剂均为国产分析纯。

SpectraMax13连续波长多功能酶标仪，美国Molecular Devices公司；SIGMA 3K15台式离心机，北京五洲东方科技发展有限公司；SIGMA 1-14台式离心机，北京五洲东方科技发展有限公司；TBA-40全自动生化分析仪，日本东芝医疗系统株式会社。

动物分组及造模方法

先将ICR小鼠（雄性，18-22g,北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：SCXK（京）2012-0001.）饲养一周，室内通风条件良好，正常昼夜变化（8:00am-8:00pm）,相对湿度为55+5%,室温:23+2℃。饲喂正常饲料，自由采水、采食。1周后按体重随机分成6组，即正常组，高脂饲料组，血脂康组，实施例1产品低（70mg/kg.d）、中（140mg/kg.d）、高剂量组（210mg/kg.d）。除正常对照组喂饲普通饲料外，其余各组均喂饲高脂饲料，各组动物自由采水、采食。试验周期为12周。

降脂试验

动物实验开始后，实施例1产品及血脂康均按上述剂量进行灌胃，正常组和高脂饲料组采用蒸馏水进行灌胃。连续12周，每三天称重1次，随体重调整给药量。试验结束前一天给药后晚上开始禁食，禁食12-14h,不限饮水，次日眼眶取血，测定血清总胆固醇（TC）,总甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、总抗氧化能力（T-AOC）和超氧化物歧化酶（SOD）含量。

降脂试验指标的测定

5.1血脂的测定

取血清100μL,然后用生理盐水稀释至400μL。用全自动生化分析仪测定血清TC,TG,LDL-C和HDL-C的含量。TC的测定采用CHOD-PAP法；TG的测定采用GPO-PAP法；,LDL-C和HDL-C的测定均采用清除法；以上指标采用日本东芝医疗系统株式会社TBA-40全自动生化分析仪测定，具体操作按试剂盒说明进行（南京建成生物工程研究所）。

5.2血清氧化指标的测定

血清T-AOC:每1mL血清在37℃每分钟使反应体系的吸光度值每增加0.01时，为一个总抗氧化能力单位。

血清SOD:黄嘌呤氧化酶法，每1mL反应液中SOD抑制率达50%时所对应的SOD量为一个SOD活力单位。

以上指标采用紫外可见分光光度仪测定，具体操作按试剂盒说明进行（南京建成生物工程研究所）。

数据处理和结果判定

一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，36F值<F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≧F0.05,P≦0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

动物实验结果判定:

降低血脂功能结果判定：模型对照组和空白对照组比较，血清甘油三酯升高，血清总胆固醇或低密度脂蛋白胆固醇升高，差异均有显著性，判定模型成立。

（1）各剂量组与模型对照组比较，任一剂量组血清总胆固醇或低密度脂蛋白胆固醇降低，且任一剂量组血清甘油三酯降低，差异均有显著性，同时各剂量组血清高密度脂蛋白胆固醇不显著低于模型对照组，可判定该受试样品辅助降低血脂功能动物实验结果阳性。

（2）各剂量组与模型对照组比较，任一剂量组血清总胆固醇或低密度脂蛋白胆固醇降低，差异均有显著性，同时各剂量组血清甘油三酯不显著高于模型对照组，各剂量组血清高密度脂蛋白胆固醇不显著低于模型对照组，可判定该受试样品辅助降低胆固醇功能动物实验结果阳性。

（3）各剂量组与模型对照组比较，任一剂量组血清甘油三酯降低，差异均有显著性，同时各剂量组血清总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇不显著高于模型对照组，血清高密度脂蛋白胆固醇不显著低于模型对照组，可判定该受试样品辅助降低甘油三酯功能动物实验结果阳性。

以上对本发明的具体实施方式进行了说明，但本发明并不以此为限，只要不脱离本发明的宗旨，本发明还可以有各种变化。

Claims (10)

1.红曲诺丽果饮料，其特征在于，包括：按照重量份数计，其配方为：红曲菌种 10-15、诺丽果粉20-30和辅料4.5-16；所述辅料为黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1。

2.根据权利要求1所述的红曲诺丽果饮料，其特征在于，其配方为：红曲菌种 10-12、诺丽果粉20-25和辅料4.5-16；所述辅料为黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1。

3.根据权利要求1所述的红曲诺丽果饮料，其特征在于，所述红曲菌种，其微生物保藏编号是：CCTCC NO:M 2019174。

4.根据权利要求1所述的红曲诺丽果饮料，其特征在于，所述饮料制成固体、液体、胶囊剂型。

5.一种如权利要求1所述的红曲诺丽果饮料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、预处理：制备诺丽果粉，准备辅料；

S2、配料；按以下重量份数取各原料：取S1诺丽果粉20-30和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，调pH3-4；

S3、灭菌：灭菌S2中的物料；

S4：发酵：将红曲菌种，接种于S3灭菌后的物料中，发酵发酵培养，得红曲诺丽果。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，将S4制备的红曲诺丽果制成饮料，所述饮料制成固体、液体、胶囊剂型。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，包括下述的步骤：

S1:预处理：诺丽果切片制粉；黄豆温水浸泡2-12h，打浆；

S2:配料：按以下重量份数取各原料：取S1诺丽果粉20-30和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，调pH3-4；

S3:灭菌S2中的物料；

S4：接入液体功能红曲菌种ZSH-G-002 10-15,发酵培养，得诺丽果功能红曲发酵液，将发酵液烘干，检测色价，粉碎，得红曲诺丽果。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，包括下述的步骤：

S1:预处理：诺丽果清洗后，切片粉碎，黄豆温水浸泡2-12h,打浆；

S2:配料：按以下重量份数取各原料：取S1中的诺丽果粉20-30和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，调pH3-4；

S3:灭菌S2中的物料；

S4：接入液体功能红曲菌种ZSH-G-002 10-15,发酵培养，红曲诺丽果发酵液，将发酵液烘干，检测色价，粉碎，得红曲诺丽果。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于包括下述的步骤：

S1:将诺丽果及黄豆预处理：诺丽果制粉，温水浸泡黄豆2-12h,利用打浆机得二者的混合浆液; 菊粉1-10，小麦胚芽粉0.01-0.15；

S2:配料：按以下重量份数取各原料：取S1中的诺丽果粉20-25和黄豆1-5，大米1-5，菊粉1-3，低聚果糖1-2，小麦胚芽粉0.5-1，利用乳酸调pH3-4；

S3:灭菌S2中的物料；

S4：接入液体功能红曲菌种10-15，种龄48小时，接种量5-20%，发酵培养5-15天，得红曲诺丽果发酵液，加麦芽糊精喷雾干燥，然后添加蜂蜜、乳清蛋白粉得到红曲诺丽果饮料。

10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于， S3中，灭菌步骤是在1kg/cm ²、121℃下灭菌20分钟。

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