CN104522750A - 一种藻类保健食品 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种藻类保健食品，其由下列重量百分比的组分组成：云芝提取物6%～30%，破壁螺旋藻8%～35%，植物乳杆菌0.5%～3.0%，富硒酵母3.0%～12%，鼠李糖乳杆菌0.5%～3.0%，其余为辅料。本发明选取破壁螺旋藻和云芝提取物，云芝提取物采用双酶水解法提取而成，很大程度上去除了大分子蛋白。同时益生菌的添加可促进其他营养成分的吸收。本发明原料组成简单、合理，成分天然，配比恰当，服用方便，兼具提高机体免疫力、抗肿瘤、促进消化吸收等作用，是一种能强身健体的藻类保健食品。
Description
技术领域
本发明涉及保健食品技术领域，具体是一种藻类保健食品。
背景技术
螺旋藻是成功开发并实现产业化生产的微藻。1980年联合国粮农组织(FAO)正式确认螺旋藻理想的蛋白质标准和各种生理参数,并将螺旋藻誉为“21世纪人类蛋白质的来源”。螺旋藻由于含有丰富而均衡的营养,故即可治疗营养不良又可作为食品添加剂提高产品的生物效率和蛋白质的利用率。但螺旋藻由于螺旋藻外层有细胞壁和胶质鞘，这些复杂的多层结构在服用过程中人体内的消化酶不易直接与螺旋藻中的营养成份接触并降解，造成螺旋藻的吸收不完全，而螺旋藻又有特殊的腥味，为了去除这些不利，因此采取益生菌进行破壁处理，制成的破壁螺旋藻能够更好地为人体所利用。同时，螺旋藻培养基是一个多重缓冲溶液系统，而且在培养螺旋藻的过程中，溶液的pH会发生明显的变化，导致溶液中的某些离子型态发生变化，相互之间产生一系列的复杂化学反应，形成了一部分难溶物，对螺旋藻藻粉的灰分产生了很大的影响。加上螺旋藻蛋白含量较高，因此市场上螺旋藻产品多以灰分高、微生物超标等不合格现象发生。而且螺旋藻本身的腥味不能给人愉悦的感觉，因此在保证产品合格的同时改善其口感，是螺旋藻产品开发的一项新的课题。
关于藻类保健食品，已有相关报道。如申请号为200810049436.4的“学生用螺旋藻片及其制备方法”，该发明中采用了螺旋藻粉、金针菇多糖、牛磺酸等为主要原料压制成片剂。但其所用螺旋藻粉未经过破壁处理，且金针菇多糖蛋白质含量很高，二者复配容易造成微生物指标不合格，并且影响人体的吸收。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服上述现有技术的不足， 提供一种原料组成简单、合理，成分天然，配比恰当，服用方便，能强身健体的藻类保健食品。
本发明解决上述技术问题采用的技术方案是：一种藻类保健食品，其特征在于：其由下列重量百分比的组分组成：云芝提取物6%～30%，破壁螺旋藻8%～35%，植物乳杆菌0.5%～3.0%，富硒酵母3.0%～12%，鼠李糖乳杆菌0.5%～3.0%，其余为辅料。可根据片剂制备工艺进行压片制备成片剂。
进一步的，所述辅料可以由L- 阿拉伯糖、硬脂酸镁、木糖醇、奶香香精组成。
进一步的优选方案是，所述的各组分的重量百分比为：云芝提取物 20%，破壁螺旋藻28%，植物乳杆菌1.0%，富硒酵母5.0%，鼠李糖乳杆菌3.0%，辅料43%；所述的辅料中L- 阿拉伯糖为21%、硬脂酸镁1.2%、木糖醇20%、奶香香精0.8%。
进一步的，所述云芝提取物中云芝多糖含量超过30-40%，从云芝中提取出水溶性多糖上清液，经脱色后的上清液中加入纤维素酶和中性蛋白酶，其中酶浓度为1.5%的纤维素酶的加入量是上清液的4-6%，酶浓度为1.5%的蛋白酶的加入量是上清液的2-4%，调节pH6.5，温度45-55℃，时间60-90min，减压浓缩抽滤取其清液，而后用无水乙醇洗涤、沉淀，干燥得云芝提取物。
本发明云芝提取物是采用双酶水解法提取而成，云芝提取物主要活性成分为云芝多糖,云芝多糖具有免疫调节功能，是良好的免疫增强剂，具有增强免疫细胞功能和识别能力，提高IgM的量等作用；云芝多糖同时具有保肝护肝作用，可显著降低血清转氨酶，对肝组织病变和肝坏死有明显的修复作用。破壁螺旋藻具有高蛋白、低糖、低脂肪、低热量的特点，很容易被人体消化吸收，消化率达可达95%，所以对维护人体健康特别有益。胃炎、胃溃疡患者食用破壁螺旋藻，可帮助胃黏膜的恢复。对肝炎患者，破壁螺旋藻能减少病毒不复制，而且能使肝细胞、肝功能恢复得较快，提高免疫功能。此外，破壁螺旋藻可激发消化酶的活性，恢复人的正常代谢功能，促进胰岛素分泌，参与糖代谢，对治疗糖尿病有积极意义。破壁螺旋藻是通过益生菌群发酵，使螺旋藻细胞壁破裂而制成的，其改善口感的同时，去除了螺旋藻粉培养基中残留的难溶物，降低了灰分。植物乳杆菌能在肠道中发挥有益作用。植物乳杆菌能阻止病原菌对肠道的入侵和定植，抑制病原菌和抗感染，维持肠道的微生态平衡，预防和抑制肿瘤的发生，增强机体免疫力，促进消化，降低胆固醇，抑制内毒素的生产，延缓衰老和抗辐射等。鼠李糖乳杆菌有调节微生态平衡，增强宿主肠道抵抗力，预防和治疗腹泻，消除过敏的功能，能够在人和动物肠道内定植，起到调节肠道菌群、预防和治疗腹泻、排除毒素、预防龋齿和提高机体免疫力等作用。富硒酵母就是在培养酵母的过程中加入硒元素，酵母生长时吸收利用了硒，使硒与酵母体内的蛋白质和多糖有机结合转化为生物硒，从而消除了化学硒（如亚硒酸钠）对人体的毒副反应和肠胃刺激，使硒能够更高效、更安全地被人体吸收利用。
本发明采用了破壁螺旋藻，使其营养成分更好地被吸收。云芝提取物经过双酶提纯，可减少大分子蛋白的残留，避免产品中微生物的滋生。螺旋藻采用破壁处理，改善口感的同时，去除了螺旋藻粉培养基中残留的难溶物，降低了灰分。双酶法提取的云芝提取物，去除了大分子蛋白，避免了螺旋藻与云芝多糖协同作用而导致微生物滋生。云芝提取物和富硒酵母的加入可协同增强螺旋藻的抗免疫功能，其中，硒不仅可以喝螺旋藻相互作用促进硒的吸收，同时，硒和云芝多糖作用能提高机体各组织的谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物岐化酶活性，降低脂质过氧化物的含量，表明硒云芝多糖能有效的提高机体抗氧化能力.这为防止或减轻脂质过氧化损伤提供了理论依据。本发明还添加了益生菌，使得改善了传统螺旋藻片的口感差，减轻了其腥味，是新型藻类保健食品。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明。
一种藻类保健食品，其由下列重量百分比的组分组成：云芝提取物6%～30%，破壁螺旋藻8%～35%，植物乳杆菌0.5%～3.0%，富硒酵母3.0%～12%，鼠李糖乳杆菌0.5%～3.0%，其余为辅料。可根据片剂制备工艺进行压片制备成片剂。
进一步的，所述辅料可以由L- 阿拉伯糖、硬脂酸镁、木糖醇、奶香香精组成。
进一步的优选方案是，所述的各组分的重量百分比为：云芝提取物 20%，破壁螺旋藻28%，植物乳杆菌1.0%，富硒酵母5.0%，鼠李糖乳杆菌3.0%，辅料43%；所述的辅料中L- 阿拉伯糖21%、硬脂酸镁1.2%、木糖醇20%、奶香香精0.8%。
进一步的，所述云芝提取物中云芝多糖含量超过30-40%，从云芝中提取出水溶性多糖上清液，经脱色后的上清液中加入纤维素酶和中性蛋白酶，其中酶浓度为1.5%的纤维素酶的加入量是上清液的4-6%，酶浓度为1.5%的蛋白酶的加入量是上清液的2-4%，调节pH6.5，温度45-55℃，时间60-90min，减压浓缩抽滤取其清液，而后用无水乙醇洗涤、沉淀，干燥得云芝提取物。其具体步骤如下：
1）称取一定质量的云芝粉末，按料液比1:20-25加入的水，浸泡60-90min，于50-60℃恒温水浴下回流，浸提两次。
2）将步骤1）所得溶液离心过滤，取其上清液，然后经过树脂吸附脱去颜色，静置24h。
3）将步骤2）得到的上清液加入纤维素酶和中性蛋白酶进行酶解，其中酶浓度为1.5%的纤维素酶的加入量是上清液的4-6%，酶浓度为1.5%的蛋白酶的加入量是上清液的2-4%，调节pH6.5，温度45-55℃，时间60-90min，时间60-90min，减压浓缩至原体积的70%，抽滤取其清液。
4）将步骤3）得到的清液用四倍体积的无水乙醇洗涤、沉淀，干燥得云芝提取物，其中云芝多糖含量为32%-40%。
本发明所述各组分功效如下：
云芝是最具药用价值的真菌之一，具有清热、解毒、消炎、抗癌、保肝等功效。云芝中主要活性成分为云芝多糖,云芝多糖具有免疫调节功能，是良好的免疫增强剂，具有增强免疫细胞功能和识别能力，提高IgM的量等作用；云芝多糖同时具有保肝护肝作用，可显著降低血清转氨酶，对肝组织病变和肝坏死有明显的修复作用。
本发明采用水提醇沉法从云芝中提取出水溶性多糖，经过双酶酶解发酵提取云芝提取物，其中云芝多糖含量为32%-40%。利用酶反应具有高度专一性等特性，根据植物药材细胞壁的构成，纤维素酶能将细胞壁的组成成分水解或降解，破坏细胞壁结构，使有效成分充分暴露出来，溶解、混悬或胶溶于溶剂中，从而达到提取细胞内有效成分的目的。中性蛋白酶能进行去蛋白处理，使蛋白质沉淀，减少水溶性多糖中大分子蛋白的残留。避免了大分子蛋白带来的溶解度低等缺点，增加了云芝多糖的生物活性，能更好地被人体吸收和利用。
螺旋藻有“明天最理想和最完美的食品”的美誉。经分析，它以其特殊的生命形式吸纳了丰富的营养成分，比其他任何食物含有更丰富、更均衡的优质蛋白质及多种维生素、矿物质、β-胡萝卜素、叶绿素、γ-亚麻酸等不饱和脂肪酸，含有人体不能合成的8种必需氨基酸。破壁螺旋藻具有高蛋白、低糖、低脂肪、低热量的特点，很容易被人体消化吸收，消化率达可达95%，所以对维护人体健康特别有益。胃炎、胃溃疡患者食用破壁螺旋藻，可帮助胃黏膜的恢复。对肝炎患者，破壁螺旋藻能减少病毒不复制，而且能使肝细胞、肝功能恢复得较快，提高免疫功能。此外，破壁螺旋藻可激发消化酶的活性，恢复人的正常代谢功能，促进胰岛素分泌，参与糖代谢，对治疗糖尿病有积极意义。
植物乳杆菌与人类的生活关系密切，能在肠道中发挥有益作用。植物乳杆菌己知的生理功能主要表现为：阻止病原菌对肠道的入侵和定植，抑制病原菌和抗感染，维持肠道的微生态平衡，预防和抑制肿瘤的发生，增强机体免疫力，促进消化，降低胆固醇，抑制内毒素的生产，延缓衰老和抗辐射等。
鼠李糖乳杆菌，从属于乳杆菌，它有调节微生态平衡，增强宿主肠道抵抗力，预防和治疗腹泻，消除过敏的功能，若干动物和人体试验显示该菌有一定的抑菌效果和加强免疫系统的功效，保证健康的肠道菌群。近年来，国外的科学家通过大量的动物实验和人体临床实验证明它能够耐受动物消化道环境，并能够在人和动物肠道内定植，起到调节肠道菌群、预防和治疗腹泻、排除毒素、预防龋齿和提高机体免疫力等作用。
富硒酵母就是在培养酵母的过程中加入硒元素，酵母生长时吸收利用了硒，使硒与酵母体内的蛋白质和多糖有机结合转化为生物硒，从而消除了化学硒（如亚硒酸钠）对人体的毒副反应和肠胃刺激，使硒能够更高效、更安全地被人体吸收利用。富硒酵母也是迄今为止国内最高效、最安全、营养最均衡的补硒制剂。
本发明采用了破壁螺旋藻，使其营养成分更好地被吸收。云芝提取物经过双酶提纯，可减少大分子蛋白的残留，避免产品中微生物的滋生。螺旋藻采用破壁处理，改善口感的同时，去除了螺旋藻粉培养基中残留的难溶物，降低了灰分。双酶法提取的云芝提取物，去除了大分子蛋白，避免了螺旋藻与云芝多糖协同作用而导致微生物滋生。云芝提取物和富硒酵母的加入可协同增强螺旋藻的抗免疫功能，其中，硒不仅可以喝螺旋藻相互作用促进硒的吸收，同时，硒和云芝多糖作用能提高机体各组织的谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物岐化酶活性，降低脂质过氧化物的含量，表明硒云芝多糖能有效的提高机体抗氧化能力.这为防止或减轻脂质过氧化损伤提供了理论依据。本发明还添加了益生菌，使得改善了传统螺旋藻片的口感差，减轻了其腥味，是新型藻类保健食品。
实施例1：一种藻类保健食品，由以下配比组成：云芝提取物 6%，破壁螺旋藻8%，植物乳杆菌0.5%，富硒酵母3.0%，鼠李糖乳杆菌0.5%，其余为辅料L- 阿拉伯糖、硬脂酸镁、木糖醇、奶香香精。
实施例2：一种藻类保健食品，可由以下配比组成：云芝提取物 30%，破壁螺旋藻35%，植物乳杆菌3.0%，富硒酵母12%，鼠李糖乳杆菌3.0%，其余为辅料。
实施例3：一种藻类保健食品，可由以下配比组成：云芝提取物 15%，破壁螺旋藻20%，植物乳杆菌2.0%，富硒酵母7%，鼠李糖乳杆菌1%，其余为辅料。
实施例4：一种藻类保健食品，可由以下配比组成：云芝提取物 20%，破壁螺旋藻28%，植物乳杆菌1.0%，富硒酵母5.0%，鼠李糖乳杆菌3.0%，其余为辅料。所述的辅料中L- 阿拉伯糖21%、硬脂酸镁1.2%、木糖醇20%、奶香香精0.8%。
下面通过动物实验来进一步说明其具有增强免疫力的功能。
1、材料和方法
1.1、样品：取本发明实施例-4分别制备出的500mg的片剂。人体口服推荐量为每日1次，每次2片，成人体重按60kg计算，折合剂量0.167g/kg.bw。
1.2、实验动物与分组：体重为18g-22g的SPF级昆明种雌性小鼠50只，由河南省实验动物中心提供，生产许可证号SCXK(豫)2005-0001。饲料由长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供，生产许可证号为SCXK(湘)2006-0001。随机分为对照组、实施例1-4组。对照组以等剂量的淀粉喂食。
1.3、实验环境条件：实验条件为屏障环境，温度22℃-24℃，湿度52%-54%。
1.4、主要仪器与试剂：
主要仪器：洁净工作台、二氧化碳培养箱、酶标仪、离心机、722分光光度计、无菌手术器械、细胞计数器、计时器、血色素吸管等；
试剂：绵羊红细胞（SRBC）、生理盐水、Hank’s液(pH7.2-7.4)、RPMI1640培养液、 小牛血清、青链霉素、ConA、1mol/L的 HCl溶液、酸性异丙醇(96mL异丙醇加1mol/L的HCl溶液4mL)、MTT、PBS缓冲液(pH7.2-7.4)、补体、SA缓冲液、琼脂糖、都式试剂、YAC-1细胞、乳酸钠、硝基氯化四氮、吩嗪二甲酯硫酸盐、氧化型辅酶I、0.2mol/L的Tris-HCl缓冲液、2.5％的Triton、 印度墨汁、0.1％的碳酸钠、鸡红细胞、甲醇、Giemsa 染液等。
1.5、实验方法：
1.5.1、 ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验（MTT法）：无菌取脾，制成细胞悬液，Hank’s 液洗2次，调整细胞浓度为3×106个/ml。将细胞悬液分两孔加入到24孔培养板中，每孔1ml，一孔加75ulConA 液(7.5ug/ml)，另一孔为对照，置5％二氧化碳，37℃培养72h。培养结束前4h，每孔吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT(5mg/ml)50ul/孔， 继续培养4h。培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解，以570nm波长测定光密度值。
1.5.2、抗体生成细胞检测（Jerne改良玻片法）：取羊血用生理盐水洗涤3次，将压积SRBC用生理盐水配成2%（v/v）的细胞悬液，每鼠腹腔注射0.2ml。免疫5天后，处死小鼠，取脾，200目筛网过滤，洗涤、离心2次，最后将细胞悬浮于8mlHanks液中。调整细胞浓度为5×106个/ml。将表层培养基加热溶解，与等量2倍浓度Hanks液混合，分装小试管，每管0.5ml，加入50ul10％SRBC，20ul脾细胞悬液，混匀，倒片，二氧化碳培养箱中温育1.5h，加入用SA液稀释的补体(1∶8)，继续温育1.5h，计数溶血空斑数。
1.5.3、NK细胞活性的测定（乳酸脱氢酶测定法）：受试小鼠颈椎脱臼处死，无菌取脾，制成脾细胞悬液，Hank’s液洗2次，调整细胞浓度为2×107个/ml。取靶细胞和效应细胞各100ul(效靶比50∶1)，加入U型96孔培养板， 靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100ul，靶细胞最大释放孔加靶细胞和2.5％Triton各100ul，均设三个平行孔，于37℃、5％CO2培养箱中培养4h，每孔吸取上清液 100ul置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100ul，反应3min-10min，每孔加入1mol/L的HCl30ul，在酶标仪490nm处测定光密度（OD）。其中，
NK细胞活性=[（反应孔OD-自然释放孔OD）/(最大释放孔OD-自然释放孔OD）]×100%
1.6、实验数据统计：用Spss11.0软件进行统计分析。
2、结果
2.1 样品对淋巴细胞转化能力的影响。
表1 样品对小鼠淋巴细胞转化能力的影响
| 组别 | 动物数 | 淋巴细胞增殖能力（OD差值） | |
| （只） | x平±s | P值 | |
| 对照组 | 10 | 0.017±0.012 | - |
| 实施例1 | 10 | 0.016±0.013 | 0.043 |
| 实施例2 | 10 | 0.035±0.021 | 0.032 |
| 实施例3 | 10 | 0.036±0.022 | 0.044 |
| 实施例4 | 10 | 0.038±0.025 | 0.036 |
由表1可见，经口给予不同实施例的样品30天，实施例4能增加小鼠淋巴细胞转化能力，与对照组比较差异有显著性（P<0.05）。
2.2 样品对体液免疫的影响。
表2 样品对小鼠抗体生成细胞数的影响
| 组别 | 动物数 | 溶血空斑数 | |
| （只） | （个/106个脾细胞）x平±s | P值 | |
| 对照组 | 10 | 111±43 | - |
| 实施例1 | 10 | 129±44 | 0.035 |
| 实施例2 | 10 | 141±43 | 0.048 |
| 实施例3 | 10 | 163±32 | 0.019 |
| 实施例4 | 10 | 159±34 | 0.017 |
由表2可知，经口给予小鼠不同实施例的样品30天，实施例4能增加小鼠抗体生成细胞数，与对照组比较差异有显著性（P<0.05）。
2.3 样品对小鼠NK细胞活性的影响
表3样品对小鼠NK细胞活性的影响
| 组别 | 动物数 | NK细胞活性 | NK细胞活性 | |
| （只） | x平±s | 平方根反正弦转换值x平±s | P值 | |
| 对照组 | 10 | 28.7±12.4 | 18.1±9.1 | - |
| 实施例1 | 10 | 31.4±10.8 | 21.7±11.3 | 0.035 |
| 实施例2 | 10 | 33.1±10.5 | 29.3±8.5 | 0.039 |
| 实施例3 | 10 | 34.8±12.8 | 31.0±11.2 | 0.019 |
| 实施例4 | 10 | 35.4±13.6 | 32.1±7.6 | 0.017 |
由表3可见，经口给予小鼠不同实施例的样品30天，实施例4能增加小鼠NK细胞活性，与对照组比较差异有显著性（P<0.05）。
从实验数据可以看出，在实验室条件下，经口给予小鼠实施例1-4生产出的样品30天，实施例4能增加小鼠小鼠淋巴细胞转化能力、抗体生成细胞数、小鼠NK细胞活性，与对照组比较差异有显著性（P<0.05），说明本发明具有增强免疫力的功能，且以实施例4为最佳。
Claims (4)
1. 一种藻类保健食品，其特征在于：其由下列重量百分比的组分组成：云芝提取物6%～30%，破壁螺旋藻8%～35%，植物乳杆菌0.5%～3.0%，富硒酵母3.0%～12%，鼠李糖乳杆菌0.5%～3.0%，其余为辅料。
2.根据权利要求1所述的藻类保健食品，其特征在于：所述辅料由L- 阿拉伯糖、硬脂酸镁、木糖醇、奶香香精组成。
3.根据权利要求1或2所述的藻类保健食品，其特征在于：所述的各组分的重量百分比为：云芝提取物 20%，破壁螺旋藻28%，植物乳杆菌1.0%，富硒酵母5.0%，鼠李糖乳杆菌3.0%，辅料43%；所述的辅料中L- 阿拉伯糖为21%、硬脂酸镁1.2%、木糖醇20%、奶香香精0.8%。
4.根据权利要求1所述的藻类保健食品，其特征在于：所述云芝提取物中云芝多糖含量超过30-40%，从云芝中提取出水溶性多糖上清液，经脱色后的上清液中加入纤维素酶和中性蛋白酶，其中酶浓度为1.5%的纤维素酶的加入量是上清液的4-6%，酶浓度为1.5%的蛋白酶的加入量是上清液的2-4%，调节pH6.5，温度45-55℃，时间60-90min，减压浓缩抽滤取其清液，而后用无水乙醇洗涤、沉淀，干燥得云芝提取物。
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