CN101849506A - 鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法 - Google Patents

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刘晓宏
苏家乐
李淑顺
唐玲
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Abstract

本发明涉及一种鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法。采用NN69为基本培养基，通过一系列的灭菌过程后，对鸡爪槭茎段进行离体培养，利用激素调控，建立起鸡爪槭的快速繁殖体系，成功地培养出完整的生根的再生植株，移栽成活率达到90％左右。其中，初代接种的启动培养基为NN69+NAA0.1mg/L+TDZ 0.3mg/L+蔗糖30g/L，pH5.8，增殖培养基为NN69+蔗糖30g/L+NAA0.1mg/L+KT-300.8mg/L，生根培养基为1/2NN69+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+活性炭0.2g/L。本发明克服鸡爪槭常规育苗周期长，扦插繁殖系数低等缺点，实现了鸡爪槭苗木的工厂化生产。

Description

鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法
一、技术领域
本发明目涉及植物苗木的培养技术，是一种鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法。
二、背景技术
鸡爪槭(Acer.palmatum Thunb.)是槭树科槭属落叶小乔木或乔木，树冠伞形，姿态雅丽。变种繁多叶形、叶色多样，有掌状、羽状分裂，有红色、紫色和黄色等，是著名的园林观赏和庭院绿化树种，也是珍贵的家庭盆栽品种。对二氧化硫和烟尘抗性较强，较耐阴，在高大树木庇荫下长势良好。鸡爪槭属于难生根的树种，扦插成活率低，我们采用组培技术已经实现了鸡爪槭苗木的工厂化生产。
目前国内尚无鸡爪槭组织培养技术研究的相关报道。
三、发明内容
本发明目的：提供一种鸡爪槭的组培快繁方法，为鸡爪槭的规模化育苗提供一条有效途径，使这一优良彩叶树种更快地应用到园林绿化中去。
本发明的技术方案：采用NN69为基本培养基，利用鸡爪槭茎段进行启动培养，通过激素调控，诱导腋芽成活率提高至100％。在成功建立的无菌体系的基础上，调整外植体灭菌处理的条件和培养基配方，成功地抑制了外植体的褐化和污染，从而使继代增殖成功进行，培养出完整的生根的再生植株。
本发明建立的鸡爪槭茎段快速繁殖方法如下：
(1)将消毒好的鸡爪槭茎段接种在启动培养基上，添加激素NAA 0.1mg/L和TDZ 0.3mg/L诱导腋芽萌发；
(2)萌发的腋芽在添加激素NAA0.1mg/L和KT-300.8mg/L的增殖培养基上继代增殖；
(3)继代增殖的小苗在添加激素NAA 0.2mg/L和活性炭0.2g/L的生根培养基上进行生根培养；
(4)将生根幼苗移栽至草炭和珍珠岩体积比是1∶1配置的基质中，移栽成活的幼苗定植于大田中。
本发明的优点：应用组织培养的手段，克服鸡爪槭常规育苗周期长，扦插繁殖系数低等缺点，对组织培养的各个环节实施监控，生根率为91.4％，移栽成活率为90％左右，大大提高了繁殖速度和移栽成活率，且该繁殖方法性能稳定，试验重复性好，试管苗分化良好。
四、具体实施方式
1、材料处理
于晴朗的上午，从田间选取生长健壮、无病虫害、上年观察叶片色彩较好的植株，取幼嫩枝条做外植体。剪取外植体，去掉叶片(仅留顶部1～2片叶)，以防止枝条失水。外植体用软毛刷蘸洗洁精仔细刷洗，再用自来水淋洗30min，备用。
2、初代接种
在无菌室超净台上，用70％酒精处理30s，再用0.1％的HgCl2消毒25min，最后用无菌水冲洗5～6次。将外植体切成1.0～1.5cm长的带芽茎段，吸干表面水分接种在启动培养基(NN69+NAA 0.1mg/L+TDZ0.3mg/L+蔗糖30g/L)上，每瓶接种一个外植体。培养室温度为(24±1)℃，光照时间12h/d，光照强度为2000LX。期间注意观察，随时剔除污染的材料，以免交叉感染。
3、增殖培养
将伸长的腋芽切割成一叶一段转接到增殖培养基(NN69+蔗糖30g/L+NAA 0.1mg/L+KT-300.8mg/L)上。每个芽可增殖5倍以上。培养条件不变。
4、生根培养
1个节带叶的茎段，转入生根培养基(1/2NN69+NAA 0.2mg/L+蔗糖20g/L+活性炭0.2g/L))进行生根培养。茎段基部先产生少量愈伤组织，从愈伤上长根，根系粗壮，生长良好，生根率为91.4％。培养条件不变。
5、移栽
将培养30d左右小苗根长至1～2cm并有4条以上根时，移入温室，松口炼苗1～2d，然后洗去附着在根部的培养基，定植在草炭∶珍珠岩＝1∶1的基质中并浇透水。盖膜保湿，光照过强时适当遮荫，培养1周左右后逐渐揭开薄膜，成活率为90％左右。

Claims (8)

1.一种鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法，其特征在于：
(1)通过一系列的灭菌过程后，初代培养鸡爪槭茎段接种在启动培养基上诱导腋芽萌发；
(2)萌发的腋芽在增殖培养基上继代增殖；
(3)继代增殖的小苗在生根培养基上进行生根培养；
(4)将生根幼苗移栽至草炭和珍珠岩体积比是1∶1配置的基质中，移栽成活的幼苗定植于大田中。
2.根据权利要求1所述的鸡爪槭组培快繁方法，其特征是初代培养、增殖培养、生根培养的培养基均加入0.5％的琼脂，pH 5.8，培养室温度为(24±1)℃，光照时间12h/d，光照强度为2000LX。
3.根据权利要求1所述的鸡爪槭组培快繁方法，外植体选取生长健壮、无病虫害、上年观察叶片色彩较好的植株；取幼嫩枝条用软毛刷蘸洗洁精仔细刷洗，再用自来水淋洗30min。
4.根据权利要求1或2所述的鸡爪槭组培快繁方法，将冲洗干净的外植体放入三角瓶中，在无菌室超净台上，用70％酒精处理30s，再用0.1％的HgCl2消毒25mm，最后用无菌水冲洗5～6次。
5.根据权利要求1或2所述的鸡爪槭组培快繁方法，其特征在于初代接种所选用的启动培养基为NN69+NAA 0.1mg/L+TDZ 0.3mg/L+蔗糖30g/L。
6.根据权利要求1或2所述的鸡爪槭组培快繁方法，其特征在于增殖培养基为NN69+蔗糖30g/L+NAA0.1mg/L+KT-300.8mg/L。
7.根据权利要求1或2所述的鸡爪槭组培快繁方法，其特征在于生根培养基为1/2NN69+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+活性炭0.2g/L。
8.根据权利要求1或2所述的鸡爪槭组培快繁方法，其特征在于将生根苗移入温室，松口炼苗1～2d，然后洗去附着在根部的培养基，定植在草炭∶珍珠岩＝1∶1的基质中并浇透水。盖膜保湿，光照过强时适当遮荫，培养1周左右后逐渐揭开薄膜。
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