CN103404437A - 一种鸡爪槭组培快繁新方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种鸡爪槭组培快繁新方法，它包括以下步骤：S1.切取外植体：采集鸡爪槭幼嫩茎段，切割成2～3cm长的茎段；S2.灭菌：将外植体放入超净工作台，用酒精和升汞灭菌；S3.启动培养：将灭菌后的外植体接种于启动培养基中培养，启动培养基为WPM+GA30.1mg/L+TDZ0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L；S4.生根培养：选取经启动培养后茎长为1～2cm的鸡爪槭带芽茎段，将腋芽切下后转移至生根培养基中进行培养，生根培养基为1/2WPM+NAA0.05mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5g/L。本发明采用的培养基配方简单、成本低；鸡爪槭外植体茎段只需经启动培养和生根培养就能快速繁殖出鸡爪槭无菌苗，显著缩短了繁殖时间；本发明方法操作方便，可以在较短的时间内增大扩繁基数，为工厂化育苗供了技术支持。

Description

一种鸡爪槭组培快繁新方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鸡爪槭组培快繁新方法。
背景技术
鸡爪槭（Acer paimatum）别名雅枫，系槭树科槭树属，是城市景观中名贵的观赏树种。原产中国长江流域，日本、朝鲜半岛也有分布。我国主要分布于长江流域各省，多生于海拔1200m以下山地、丘陵之林缘或疏林中。鸡爪槭属落叶小乔木，高约8m，树皮深灰色，当年生枝紫色或淡紫绿色；多年生枝淡灰色、紫色或深紫色。鸡爪槭叶对生，直径7-10厘米，基部截形，掌状深裂，裂片5-9个，通常7裂，裂片卵状长圆形或披针性，顶端锐尖或长锐尖，边缘有不整齐的重锯齿，嫩叶密生柔毛。叶片在春天先红后绿，到秋季变成红色。伞房花序顶生，发叶后开花，花紫红色。翅果初为紫红色，成熟后为棕黄色，小坚果球形，直径7毫米，脉纹显著；翅与小坚果共长2-2.5厘米，宽1厘米，张开成钝角。花期5月，果期9月。
鸡爪槭喜温暖、湿润气候及半阴环境，不耐涝，较耐旱，在阳光直射处孤植夏季易遭日灼之害；适生于肥沃、湿润而排水良好之土壤，耐寒性不强，酸性、中性及石灰质土均能适应，是近年来竞相培育的优良观赏树种。
鸡爪槭具有极高的观赏价值，对城市景观的表现具有相当重要的作用，高速公路绿化带、公园、广场、小区绿地等地方随处可见到其优美的身姿。我国著名的苏州古典园林中的留园西部假山周围遍植鸡爪槭，春夏绿叶如盖，秋季红叶似火，与山水、亭台构成一副绝妙的美景；南京的植物园红枫园极具特色，树体高大，气势非凡的鸡爪槭是其主体树种。鸡爪槭不仅能给城市绿化增加了绿量，而且能给城市风景增添绚丽多姿的色彩，极大地丰富城市景观，使城市景观充满活力与生机；同时，该植物具有较高的药用价值，其枝条、叶片可熬制成药，具有行气止痛，去毒消肿等功效。因此栽鸡爪槭具有很高的园林观赏价值和良好的经济效益。
组织培养是指在无菌条件下利用人工培养基对植物组织进行培养，是生物工程研究的基础，是进行遗传转化和植物改良研究的基本环节。中国专利CN101849506A公布了鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法，该方法采用NN69为基本培养基，通过一系列的灭菌过程后，对鸡爪槭茎段进行离体培养，利用激素调控，建立起鸡爪槭的快速繁殖体系，成功地培养出完整的生根的再生植株，移栽成活率达到90%，该方法虽克服了鸡爪槭常规育苗周期长，扦插繁殖系数低等缺点，实现了鸡爪槭苗木的工厂化生产，但该方法以NN69为基本培养基，培养基中还需添加激素KT-30，增加生产成本，且外植体要经过启动培养、继代培养、生根培养，生产周期较长，仍不利于工厂化生产。
发明内容
本发明的目的即在于克服现有技术的不足，提供一种鸡爪槭组培快繁新方法，该方法培养基简单、培育时间短，操作方便，可以在较短的时间内增大扩繁基数，为工厂化育苗提供了技术支持。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种鸡爪槭组培快繁新方法，它包括以下步骤：
S1. 切取外植体：采集无病害的鸡爪槭幼嫩茎段，切割成2～3cm长的茎段，于流水中冲洗5～10min后，吸干水分；
S2. 灭菌：将冲洗后的外植体放入超净工作台，用浓度为70～75%的酒精消毒13～18s，用无菌水冲洗4～6次，再放入浓度为0.1～0.2%的升汞中灭菌5～10min，用无菌水冲洗4～6次，置于无菌纸上晾干；
S3. 启动培养：将灭菌后的外植体接种于启动培养基中培养，其中，启动培养基为WPM+GA3 0.1mg/L+TDZ 0.05 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH为5.5～6.5，培养条件为：光照强度2800～3200LX，光照时间14～18h，温度23～25℃，培养时间14～21d，经启动培养后腋芽伸长2～4cm；
S4. 生根培养：选取经启动培养后茎长为1～2cm的鸡爪槭带芽茎段，将腋芽切下后转移至生根培养基中进行培养，其中，生根培养基为1/2WPM+NAA 0.05mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5g/L，pH为5.5～6.5，培养条件为：光照强度2800～3200LX，光照时间14～18h，温度23～25℃，培养时间14～21d，经生根培养后，植株生长3～4cm，生根数为2～4，根长3～5cm。
本发明的有益效果是：本发明采用的是WPM培养基，配方简单、成本低；鸡爪槭外植体茎段只需经启动培养、生根培养就能快速繁殖出鸡爪槭无菌苗，显著缩短了繁殖时间。本发明方法操作方便，可以在较短的时间内增大扩繁基数，为工厂化育苗提供了技术支持。
附图说明
图1为鸡爪槭启动培养示意图；
图2为启动培养基中的鸡爪槭腋芽示意图；
图3为生根培养后的鸡爪槭生根组培苗示意图；
图4为鸡爪槭生根组培苗根系示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所述。
实施例1：一种鸡爪槭组培快繁新方法，它包括以下步骤：
S1. 切取外植体：采集无病害的鸡爪槭幼嫩茎段，切割成2cm长的茎段，于流水中冲洗5min后，吸干水分；
S2. 灭菌：将冲洗后的外植体放入超净工作台，用浓度为70%的酒精消毒13s，用无菌水冲洗4次，再放入浓度为0.1%的升汞中灭菌5min，用无菌水冲洗4次，置于无菌纸上晾干；
S3. 启动培养：将灭菌后的外植体接种于启动培养基中培养，其中，启动培养基为WPM+GA3 0.1mg/L+TDZ 0.05 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH为5.5，培养条件为：光照强度2800LX，光照时间14h，温度23℃，培养时间14d，经启动培养后腋芽伸长2cm；
S4. 生根培养：选取经启动培养后茎长为1cm的鸡爪槭带芽茎段，将腋芽切下后转移至生根培养基中进行培养，其中，生根培养基为1/2WPM+NAA 0.05mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5g/L，pH为5.5，培养条件为：光照强度2800LX，光照时间14h，温度23℃，培养时间14d，经生根培养后，植株生长3cm，生根数为2，根长3cm。
实施例2：一种鸡爪槭组培快繁新方法，它包括以下步骤：
S1. 切取外植体：采集无病害的鸡爪槭幼嫩茎段，切割成3cm长的茎段，于流水中冲洗10min后，吸干水分；
S2. 灭菌：将冲洗后的外植体放入超净工作台，用浓度为75%的酒精消毒18s，用无菌水冲洗6次，再放入浓度为0.2%的升汞中灭菌10min，用无菌水冲洗6次，置于无菌纸上晾干；
S3. 启动培养：将灭菌后的外植体接种于启动培养基中培养，其中，启动培养基为WPM+GA3 0.1mg/L+TDZ 0.05 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH为6.5，培养条件为：光照强度3200LX，光照时间18h，温度25℃，培养时间21d，经启动培养后腋芽伸长4cm；
S4. 生根培养：选取经启动培养后茎长为2cm的鸡爪槭带芽茎段，将腋芽切下后转移至生根培养基中进行培养，其中，生根培养基为1/2WPM+NAA 0.05mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5g/L，pH为6.5，培养条件为：光照强度3200LX，光照时间18h，温度25℃，培养时间21d，经生根培养后，植株生长4cm，生根数为4，根长5cm。
实施例3：一种鸡爪槭组培快繁新方法，它包括以下步骤：
S1. 切取外植体：采集无病害的鸡爪槭幼嫩茎段，切割成2.5cm长的茎段，于流水中冲洗8min后，吸干水分；
S2. 灭菌：将冲洗后的外植体放入超净工作台，用浓度为73%的酒精消毒15s，用无菌水冲洗5次，再放入浓度为0.2%的升汞中灭菌8min，用无菌水冲洗5次，置于无菌纸上晾干；
S3. 启动培养：将灭菌后的外植体接种于启动培养基中培养，其中，启动培养基为WPM+GA3 0.1mg/L+TDZ 0.05 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH为5.5～6.5，培养条件为：光照强度3000LX，光照时间15h，温度24℃，培养时间18d，经启动培养后腋芽伸长3cm；
S4. 生根培养：选取经启动培养后茎长为1～2cm的鸡爪槭带芽茎段，将腋芽切下后转移至生根培养基中进行培养，其中，生根培养基为1/2WPM+NAA 0.05mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5g/L，pH为6，培养条件为：光照强度3000LX，光照时间15h，温度24℃，培养时间18d，经生根培养后，植株生长3.6cm，生根数为3，根长4cm。
实施例4：一种鸡爪槭组培快繁新方法，它包括以下步骤：
S1. 切取外植体：采集无病害的鸡爪槭幼嫩茎段，切割成3cm长的茎段，于流水中冲洗10min后，吸干水分；
S2. 灭菌：将冲洗后的外植体放入超净工作台，用浓度为70%的酒精消毒18s，用无菌水冲洗5次，再放入浓度为0.1%的升汞中灭菌7min，用无菌水冲洗6次，置于无菌纸上晾干；
S3. 启动培养：将灭菌后的外植体接种于启动培养基中培养，其中，启动培养基为WPM+GA3 0.1mg/L+TDZ 0.05 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH为6，培养条件为：光照强度3200LX，光照时间18h，温度23℃，培养时间16d，经启动培养后腋芽伸长3cm；
S4. 生根培养：选取经启动培养后茎长为2cm的鸡爪槭带芽茎段，将腋芽切下后转移至生根培养基中进行培养，其中，生根培养基为1/2WPM+NAA 0.05mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5g/L，pH为6.5，培养条件为：光照强度3000LX，光照时间14h，温度24℃，培养时间21d，经生根培养后，植株生长4cm，生根数为4，根长5cm。 

Claims (1)

1.一种鸡爪槭组培快繁新方法，其特征在于，它包括以下步骤：
S1. 切取外植体：采集无病害的鸡爪槭幼嫩茎段，切割成2～3cm长的茎段，于流水中冲洗5～10min后，吸干水分；
S2. 灭菌：将冲洗后的外植体放入超净工作台，用浓度为70～75%的酒精消毒13～18s，用无菌水冲洗4～6次，再放入浓度为0.1～0.2%的升汞中灭菌5～10min，用无菌水冲洗4～6次，置于无菌纸上晾干；
S3. 启动培养：将灭菌后的外植体接种于启动培养基中培养，其中，启动培养基为WPM+GA3 0.1mg/L+TDZ 0.05 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH为5.5～6.5，培养条件为：光照强度2800～3200LX，光照时间14～18h，温度23～25℃，培养时间14～21d，经启动培养后腋芽伸长2～4cm；
S4. 生根培养：选取经启动培养后茎长为1～2cm的鸡爪槭带芽茎段，将腋芽切下后转移至生根培养基中进行培养，其中，生根培养基为1/2WPM+NAA 0.05mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5g/L，pH为5.5～6.5，培养条件为：光照强度2800～3200LX，光照时间14～18h，温度23～25℃，培养时间14～21d，经生根培养后，植株生长3～4cm，生根数为2～4，根长3～5cm。
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