一种鸡爪槭橙之梦的组培快繁方法
技术领域
本发明涉及植物无性繁殖技术领域,具体涉及一种鸡爪槭橙之梦的组培快繁方法。
背景技术
鸡爪槭(Acerpalmatum)又名鸡爪枫,属槭树科槭树属落叶小乔木或灌木。作为优良的观赏彩色叶植物,在我国园林中的应用历史悠久,在现今城市园林中的应用则更为普遍。橙之梦(Acerpalmatum‘OrangeDream’)是鸡爪槭园艺变异品种之一。春天新叶金黄色,边缘为橙红,非常漂亮。夏季叶片变为浅绿到黄绿。秋季叶片颜色又变为亮黄到橙色。该品种直立生长,株型紧凑,可以高达3米高。生长强劲。又可作为小乔木栽培。橙色代表着深邃,像梦幻般美丽,结合起来能表达一种幽雅的境界。喜光、耐高温、耐寒性强、抗风性强、适应于各种土壤、可忍受一定的大气污染,尤其耐臭氧和二氧化硫,适应城市环境。适合庭院,也适合做造型盆景。极具观赏价值和经济价值。
目前,橙之梦以播种繁殖和扦插繁殖为主,但是出芽率和成活率都不高,远不能满足国内对种苗的需求。同时,目前橙之梦的常规扦插繁殖方法繁育周期长,生根率不稳定,根系欠发达,表现为主根明显、侧根发育不良,造林后生长表现欠佳,不利于橙之梦的规模化生产和开发应用。因此,探索一条能快速繁殖橙之梦的有效途径是亟待解决的问题。
发明内容
有鉴于此,本申请提供一种鸡爪槭橙之梦的组培快繁方法,所述方法培育周期短、根系良好、成活率高。
为解决以上技术问题,本发明提供的技术方案是一种鸡爪槭橙之梦的组培快繁方法,包括以下步骤:
A、取橙之梦的当年生幼嫩的茎段,清洗干净;采用酒精和升汞灭菌处理后,得外植体;
B、将步骤A所得外植体接种到启动培养基上进行培养,直至所述外植体分化出芽、生根,所述启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.1—0.5mg/LIAA、0.02—0.08mg/LIBA、0.1—0.5mg/LNAA、0.02—0.08mg/LGA3、10—50g/L蔗糖、2—10g/L琼脂。
进一步地,所述外植体选取及灭菌的具体操作为:取鸡爪槭橙之梦的当年生幼嫩的茎段,切割成2—3cm带芽茎段,先用洗涤剂溶液浸泡10—30min,再用毛刷刷洗腋芽部位,刷洗干净后在流水下冲洗过夜;在无菌操作台上,用75%的酒精处理8—15s,用无菌水冲洗2—3次,再用0.1%的升汞处理8—13min,无菌水冲洗4—6次,晾干即可。
进一步地,所述启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.2—0.4mg/LIAA、0.04—0.06mg/LIBA、0.1—0.3mg/LNAA、0.04—0.06mg/LGA3、20—40g/L蔗糖、4—6g/L琼脂。
进一步地,所述启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.3mg/LIAA、0.05mg/LIBA、.2mg/LNAA、0.05mg/LGA3、30g/L蔗糖、5g/L琼脂。
进一步地,所述步骤B中,培养温度为24—28℃,光照强度为2000—3000Lx,光照时间为14—18h/d。
进一步地,所述启动培养基的pH值为6.3—6.7。
进一步地,将所述步骤B得到的生长健壮的组培生根苗,洗掉培养基后,直接移栽进温室大棚苗床中,遮光,降温保湿,控制大棚内温度为20~30℃。
进一步地,所述苗床的基质的配方原料体积比配比:腐殖质:珍珠岩为2:1。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本发明所述的组培快繁方法与播种方法及扦插繁殖相比,具有简单易行、效高价廉、繁殖速度快、繁殖系数高的优点,不用播种节约种子且其繁殖栽植后初期生长速度明显增加,生长量大,适应性强。
利用本发明所述的组培快繁方法所使用的培养基配方简单、培养基成本低,培养流程简便,提高了橙之梦繁殖的系数、效率,能快速获得遗传性状一致的橙之梦生根苗,为进一步开展品种改良奠定基础。
本发明所述的组培快繁方法,芽诱导率高、移栽成活率高,进行外植体培养获得了橙之梦无菌苗,不受季节气候变化、自然灾害的影响。能够良好的保持优良品系的特征特性,可以直接应用于实际生产,具有较好经济效益、社会效益和生态效益。
具体实施方式
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案,下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
本发明所述的鸡爪槭橙之梦的组培快繁方法,包括以下步骤:
1)、取橙之梦的当年生幼嫩的茎段,清洗干净;采用酒精和升汞灭菌处理后,得外植体;
所述外植体选取及灭菌的具体操作为:取鸡爪槭橙之梦的当年生幼嫩的茎段,切割成2—3cm带芽茎段,先用洗涤剂溶液浸泡10—30min,再用毛刷刷洗腋芽部位,刷洗干净后在流水下冲洗过夜;在无菌操作台上,用75%的酒精处理8—15s,用无菌水冲洗2—3次,再用0.1%的升汞处理8—13min,无菌水冲洗4—6次,晾干即可。
2)、将步骤1所得外植体接种到启动培养基上进行培养,培养温度为24—28℃,光照强度为2000—3000Lx,光照时间为14—18h/d,直至所述外植体分化出芽、生根,其中,腋芽伸长1~3cm;生长2~5条根,根长2~5cm。所述启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.1—0.5mg/LIAA、0.02—0.08mg/LIBA、0.1—0.5mg/LNAA、0.02—0.08mg/LGA3、10—50g/L蔗糖、2—10g/L琼脂。所述启动培养基的pH值为6.3—6.7。
3)、将所述步骤2得到的生长健壮的组培生根苗,洗掉培养基后,直接移栽进温室大棚苗床中,遮光,降温保湿,控制大棚内温度为20~30℃。所述苗床的基质的配方原料体积比配比:腐殖质:珍珠岩为2:1。
在具体实施中,本发明以鸡爪槭橙之梦的繁殖作为本发明的一个应用。
对照组1—现有播种繁殖鸡爪槭橙之梦幼苗
采用播种繁殖鸡爪槭橙之梦首先要对苗圃进行疏松,并配上肥料,然后将种子播下并适当浸水以使其萌发。后期对其进行光照、施肥等工序得到幼苗,然后移栽使其生根。
对照组2—现有扦插繁殖鸡爪槭橙之梦幼苗
插穗扦插在5月-8月,选择背风向阳、透水性好的地方建露天扦插床,扦插床以粗沙垫底,铺设扦插基质。将采集到的穗条进行处理成可以扦插的插穗,最后将插穗扦插到扦插床上,然后进行繁殖。
实验组1—本发明所述的组培快繁方法繁殖鸡爪槭橙之梦幼苗
取鸡爪槭橙之梦的当年生幼嫩的茎段,切割成2—3cm带芽茎段,先用洗涤剂溶液浸泡10—30min,再用毛刷刷洗腋芽部位,刷洗干净后在流水下冲洗过夜;在无菌操作台上,用75%的酒精处理8—15s,用无菌水冲洗2—3次,再用0.1%的升汞处理8—13min,无菌水冲洗4—6次,晾干即可取得外植体。
将所得外植体接种到启动培养基上进行培养,培养温度为24—28℃,光照强度为2000—3000Lx,光照时间为14—18h/d,直至所述外植体分化出芽、生根,其中,腋芽伸长1~3cm;生长2~5条根,根长2~5cm,得到组培生根苗。所述启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.1—0.5mg/LIAA、0.02—0.08mg/LIBA、0.1—0.5mg/LNAA、0.02—0.08mg/LGA3、10—50g/L蔗糖、2—10g/L琼脂。所述启动培养基的pH值为6.3—6.7。
将得到的生长健壮的组培生根苗,洗掉培养基后,直接移栽进温室大棚苗床中,遮光,降温保湿,控制大棚内温度为20~30℃,然后进行繁殖。其中苗床的基质的配方原料体积比配比:腐殖质:珍珠岩为2:1。
实施例1—鸡爪槭橙之梦幼苗生根对照试验
以繁殖鸡爪槭橙之梦苗木为例,分别对上述实施例进行试验,所繁殖得到的鸡爪槭橙之梦苗木在移栽后,同样的条件下均采用同一方式管理,以常规水肥方式管理直至出圃。移栽后60天测量所得鸡爪槭橙之梦苗木的生根天数,所得数据列表1如下:
表1—鸡爪槭橙之梦苗木生根天数实验
实验对象 |
对照组1 |
对照组2 |
实验组1 |
生根天数 |
70-90天 |
50-70天 |
30-50天 |
实施例2—鸡爪槭橙之梦幼苗成活率对照试验
以繁殖鸡爪槭橙之梦苗木为例,分别对上述实施例进行试验,所繁殖得到的鸡爪槭橙之梦苗木在移栽后,同样的条件下均采用同一方式管理,以常规水肥方式管理直至出圃。移栽后60天测量所得鸡爪槭橙之梦苗木的成活率,所得数据列表2如下:
表2—鸡爪槭橙之梦苗木成活率实验
实验对象 |
对照组1 |
对照组1 |
实验组1 |
成活率 |
41.2%—68.6% |
90.3%-94% |
98%以上 |
本发明的具体实施方式如下:
具体实施方式1:所述的启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.2mg/LIAA、0.04mg/LIBA、0.1mg/LNAA、0.04mg/LGA3、20g/L蔗糖、4g/L琼脂。
具体实施方式2:所述的启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.2mg/LIAA、0.04mg/LIBA、0.3mg/LNAA、0.06mg/LGA3、20g/L蔗糖、4g/L琼脂。
具体实施方式3:所述的启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.2mg/LIAA、0.04mg/LIBA、0.3mg/LNAA、0.06mg/LGA3、40/L蔗糖、6g/L琼脂。
具体实施方式4:所述的启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.4mg/LIAA、0.06mg/LIBA、0.3mg/LNAA、0.06mg/LGA3、20g/L蔗糖、4g/L琼脂。
具体实施方式5:所述的启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.4mg/LIAA、0.06mg/LIBA、0.3mg/LNAA、0.06mg/LGA3、40g/L蔗糖、6g/L琼脂。
具体实施方式6:所述启动培养基的组成为:1/2WPM基本培养基,补充0.3mg/LIAA、0.05mg/LIBA、.2mg/LNAA、0.05mg/LGA3、30g/L蔗糖、5g/L琼脂。
同样以繁殖鸡爪槭橙之梦苗木为例,采用上述具体实施方式1-6进行繁殖。采用前述同样的方式去管理,发芽后90天检测同样的数据,所得数据列表3如下:
表3—本发明具体实施方式
具体实施方式 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
生根天数(天) |
40-45 |
40-45 |
35-45 |
35-45 |
40-45 |
30-35 |
成活率(%) |
98.2% |
98.2% |
98.6% |
98.6% |
98.2% |
99% |
从表1、表2可以看出:对照组中鸡爪槭橙之梦苗木生根天数为18—200天,最快也是40-60天;成活率为41.2%—68.6%,较优的90.3%-94%;实验组中鸡爪槭橙之梦苗木生根天数为30—45天,成活率为98%以上,大大缩短了生根时间,且提高了成活率,提高繁殖周期。
从表3可以看出:采用具体实施方式6即本发明最佳实施方式应用到扦插鸡爪槭橙之梦苗木,大大缩短了生根时间,且提高了成活率,提高繁殖周期。
本发明中,培养基成分解释:
本申请所述WPM基本培养基具有较高的硝态氮,钙和钾离子含量也较高,培养基不含碘,多用于木本植物的培养,能够保证组织生长所需的矿质营养,还能加速愈伤组织的生长,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,部分植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。
本申请所述的IAA为吲哚乙酸,是一种植物生长激素,能够调节植物的生长,不仅能促进生长,而且具有抑制生长和器官建成的作用。在细胞水平上,可刺激形成层细胞分裂、刺激枝的细胞伸长、抑制根细胞生长、促进木质部、韧皮部细胞分化、促进插条发根、调节愈伤组织的形态建成,因此可用作植物组织培养。
本申请所述的IBA为吲哚丁酸,是一种植物生长激素,主要用于插条生根,可诱导根原体的形成,促进细胞分化和分裂,有利于新根生成和维管束系统的分化,促进插条不定根的形成。
本申请所述的NAA为萘乙酸,是一种植物生长激素,在植物使用扦插法繁殖时使用,也可用于植物组织培养,能促进细胞分裂与扩大,诱导形成不定根增加座果,防止落果,改变雌、雄花比率等,可经叶片、树枝的嫩表皮,种子进入到植株内,随营养流输导到全株。
本申请所述的GA3为赤霉素,是一种植物生长调节剂,主要用于刺激在培养中形成的不定胚发育成小植株,促进幼苗茎的伸长生长;另外,赤霉素还用于打破休眠,促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发;在器官形成后,添加赤霉素可促进器官或胚状体的生长。
以上仅是本发明的优选实施方式,应当指出的是,上述优选实施方式不应视为对本发明的限制,本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明的精神和范围内,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。