CN105145363B - 一种显著提高杉木组培生产出苗率的方法 - Google Patents

一种显著提高杉木组培生产出苗率的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种显著提高杉木组培生产出苗率的方法。本发明方法,包括以下步骤:(1)将杉木单芽接种到增殖诱导培养基进行增殖诱导,丛生芽萌发后去掉原单芽顶端继代培养获得丛生继代苗;(2)将丛生继代苗转接到壮苗培养基进行驯化培养,获得驯化丛苗;(3)将驯化丛苗剪单芽转接生根诱导培养基进行生根诱导得到生根苗;(4)将生根苗移栽到表层砂质黄壤土。利用该方法,杉木无性系组培苗增殖倍数可达到6‑8倍,单瓶驯化继代苗可出50‑70个生根苗,生根率达到100%,移栽成活率达到98%以上;可以显著提高杉木组培苗生产的出苗率,节约成本、提高生产效益,而且生根苗移栽种植后侧芽分化减少,顶端优势明显。

Description

一种显著提高杉木组培生产出苗率的方法
技术领域
[0001]本发明属于植物无性系组织培养领域,具体涉及一种显著提高杉木组培生产出苗 率的方法。
背景技术
[0002] 杉木(Cunninghamia lanceolata)是我国南方最重要的速生丰产树种,具有速生、 丰产、材性好、用途广等优良特性,在我国人工林中具有重要的地位,尤其是近年来,速生桉 树大规模种植产生的弊端日益突显之后,速生杉木种植量更是与日倶增,大有赶超速生桉 树的潜力。由于杉木是异花授粉树种,用种子繁殖,个体分化大,难以保持杉木母本的性状; 而采用常规的扦插、压条或者嫁接等无性繁殖方法,繁育速度慢,育苗出圃率低,难以满足 曰益增长的市场需求。组织培养方法是一种快速无性繁殖技术,选择杉木优良无性系材料, 采用组织培养方法,既可以保持母本的优良性状,又可以有效的节约生产成本,还可以提高 育苗速度,满足市场需求。目前,虽已有部分杉木组织培养研宄,但基本停留在繁殖、生根、 或是控制污染等某一方面的研究,育苗周期长、生根率低、成活率差等问题仍未完善,也极 少提到组培苗壮苗环节。
[0003] 在杉木组培生产技术研究转化为生产应用中,影响工厂化生产效益的关键因素是 组培瓶苗的出苗率,而出苗率受组培苗的生长增殖倍数、生长周期、生长分化的同步性、生 根率、移栽成活率等影响,其中增殖倍数和壮苗培养环节是直接影响出苗率的关键因素。木 本植物不同于草本,经过增殖诱导的丛芽,生长分化不齐,需经过特定的壮苗培养,经过壮 苗后的瓶苗分化整齐度越高,出苗率越高,生产成本越低。瓶苗的整齐度受壮苗配方和壮苗 培养环境的影响,因此壮苗所选择的培养基配方,培养环境既要保障苗木的增殖生长,又要 能促进苗木的同步分化,还要根据不同的时间,控制苗木的生长以便避免季节对苗木移栽 成活率的影响。
发明内容
[0004] 本发明针对现有技术中生产上杉木组培增殖倍数低、苗木弱、分化不整齐等导致 出苗率低,生根率差、移栽成活率低的问题,提供一种显著提高杉木组培生产出苗率的方 法。该方法能在实际生产上能提高杉木组培增殖倍数、并通过壮苗培养提高瓶苗分化生长 的整齐度,促进出苗率和生根率,改进现有的增殖、壮苗、生根、移栽等技术,提高杉木组培 苗的出瓶率,生根率,移栽生活率,降低生产成本,从而完善杉木组培苗的产业化生产与应 用。
[0005] 本发明的显著提高杉木组培生产出苗率的方法,包括以下步骤:
[0006] a.增殖培养:将杉木无菌单芽接种到增殖诱导培养基上进行增殖诱导培养,当单 芽基部萌发出2-5芽点时,去掉原单芽顶端后转接到新鲜的增殖诱导培养基上,在相同条件 下继续培养,由此形成丛生继代苗;所述的增殖诱导培养基的配方,每升含有:0-3mg的6-BA (6-苄氨基嘌呤)、〇-1呢的NAA(萘乙酸)、30g的白砂糖和3_3_5g的琼脂粉,余量为MS培养基, pH值为5 • 8-5 • 9;培养条件为:温度25 ± 2°C,湿度20 %-40 %,光照强度2000-3000Lx,光照时 长12小时/天;
[0007] b.壮苗培养:将丛生继代苗转接到壮苗培养基上进行壮苗培养,当茎段半木质化 时即形成了利于生根的驯化丛苗;所述的壮苗培养基配方,每升含有:〇_〇.5mg的6-BA,0-0.5mg的NM、20_30g的白砂糖、3-3.5g的琼脂粉和〇-lg的活性炭,余量为1/2MS培养基,pH值 为5.8-5• 9;培养条件为:温度27±2°C,湿度20%-40%,光照强度3000-5000LX,光照时长 13-16小时/天;
[0008] C.生根培养:剪取驯化丛苗转入生根诱导培养基进行生根诱导,由此获得生根苗; 所述的生根诱导培养基的配方,每升含有:0-3mg的IBA (卩引哚丁酸)、0-2mg的NAA、15g的白砂 糖和3-3 • 5g的琼脂粉,余量为1/2MS,pH值为5.8-5 • 9;培养的条件为:温度为27 ± 2°C,湿度 20%-40%,光照强度2000-30001^,光照时长14小时/天;
[0009] d •炼苗移栽:将生根苗炼苗,待根系生长至粗壮、发白时,即可移栽。
[0010] 优选,所述的步骤a的增殖诱导培养基的配方,每升含有:l.〇mg的6BA、0.1mg的 NAA、30g的白砂糖、3 • 2g的琼脂粉和余量的MS培养基,pH值为5.85;
[0011] 所述的步骤b的壮苗培养基的配方,每升含有:30g的白砂糖、3.2g的琼脂粉、0.5g 的活性炭和余量的1/2MS培养基,pH值为5.85;
[0012] 所述的步骤c的生根诱导培养基的配方,每升含有:l.〇mg的IBA、0.2mg的NAA、15g 的白砂糖、3 • 2g的琼脂粉和余量的1/2MS培养基,pH值为5.85。
[0013] 所述的步骤b的壮苗培养基,优选使用650ml的兰花组培瓶分装,100-110ml/瓶,用 含有直径0.8-1(^透气膜的螺纹盖封瓶口,在121°(:和1.11^.(^2条件下,高压蒸汽灭菌 15min〇
[0014] 所述的步骤d的生根苗炼苗优选是在炼苗棚中炼苗7-15天,待根系生长至0.5〜 2cm长,粗壮、发白时,将生根苗置于清水中漂洗,洗去根部的培养基后,在800-1000倍的消 毒液中浸泡10-30min,然后置于保水保湿保温的环境中,48小时内移栽种植完;移栽基质采 用表层砂质黄壤土。
[0015] MS培养基为国际通用的培养基,其成份和配置方法见Murashige T,Skoog F (1962) (A revised medium for rapid growth and bioassay with tobacco tissue cultures.Physiol Plant l5:473-497)〇l/2MS培养基是指将MS培养基中大量元素减半,其 余成份不变。
[0016] 本发明的显著提高杉木组培苗生产出苗率的方法,包括杉木丛生芽的增殖诱导、 壮苗培养、生根培养、移栽等步骤。选择从优良无性系筛选出来的杉木嫩芽作为试验材料, 经7〇%-75%酒精、〇.1%-〇.5°乂升汞的常规灭菌消毒后,得到杉木无菌单芽,将其接到增殖 诱导培养基上,经过诱导获得丛生芽后,转移到壮苗培养基培养,经过壮苗培养,可获得大 量粗壮、整齐、本木质化、可用于诱导生根的驯化丛状芽,将驯化丛状芽剪单株接在生根诱 导培养基上,待根长度约0.2-2cm时移入炼苗棚炼苗7-15天后,移栽到营养杯育苗。
[0017]本发明方法是经过生产实践的,能提高杉木组培增殖倍数,通过壮苗环节提高组 培出苗的方法,主要是组培增殖配方和壮苗配方以及培养环境在生产实践上的应用,促进 继代瓶苗的分化生长的整齐度,从而达到提高瓶苗出苗率和移栽成活率的方法,完善杉木 组培苗的生产应用,达到降低生产成本,提高生产效率的目的,使得杉木组培真正应用于生 产,服务于林业,为实现杉木组培苗产业化开辟一条新路。
[0018]相对于现有的技术,本发明具有的有点和有益效果如下:
[0019] 1 •本发明提供一种显著提高杉木组培苗生产出苗的方法,主要从影响生产出苗的 两个重要因素-增殖倍数和壮苗培养出发,利用壮苗培养克服新增殖杉木丛生芽分化生长 时长势不均,良莠不齐的问题,且通过壮苗培养减少外源细胞分裂素对生根苗的影响,降低 生根诱导中植株内细胞分类素的含量,提高植物生长素的作用进而提高苗木的生根率,同 时降低苗木移栽后激素的滞后影响作用,促使移栽苗分支少,顶端优势明显,进一步提高了 移栽苗的质量。
[0020] 2 •本发明以杉木优良无性系单芽为材料,经过增殖诱导获得丛生芽,经过简单的 去顶端继代方式,显著提高增殖倍数,达到6-8倍,经过壮苗培养,使丛芽的长势整齐,叶子 展开、深绿,叶面光亮,丛芽利用率高,单瓶可剪出生根植株50-70株;使用本方法既能缓解 增殖芽水肿、玻璃化的导致利用率不高的问题,又能显著提高增殖倍数,可以在短时间内批 量工厂化生产遗传稳定性高、健壮、整齐、生根率1〇〇%,移栽成活率98%以上的继代丛苗, 达到显著提高组培生产出苗的目的。
[0021] 3•本发明的显著提高杉木组培苗生产出苗的方法,培养基配方成分更少,操作更 加简单,成本低,生产效益明显。尤其是提出采用650ml兰花组培瓶作为培养容器,这既能满 足容器的采光、透气的需要,又能满足苗木在培养容器内对生长空间的需要,同时在大批量 生产的培养基配制、灭菌、接苗以及培养等各个环节中,使用兰花组培瓶相对比其他容器降 低3-6倍的生产成本,且增殖倍数不受影响,这显著提高了工厂化的生产效益。
具体实施方式
[0022]以下实施例是对本发明的进一步说明,而不是对本发明的限制。
[0023]下列实例中未具体注明的实验方法,均可按照常规方法进行,或按照所用产品生 产厂商的使用说明。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可通过商业途径 得到。
[0024] 实施例1
[0025] 1、芽增殖诱导培养
[0026]将长约1 • 5-2 • 5cm的杉木无菌单芽接种到增殖诱导培养基上进行增殖诱导,当基 部萌发出2_5芽点时转接到新鲜的增殖诱导培养基上,转接时去掉原单芽顶端,以促进新芽 的生长,由此形成丛生继代苗。
[0027]所述的增殖诱导;1¾•养基配方为,每升含有:1. 〇呢的6}^、0. lmg的NAA、30g的白砂 糖、3.2g的琼脂粉,余量为MS培养基,调节其灭菌前的ph值为5• 85 (配制方法是将上述成份 混合均匀后,调pH值,然后灭菌备用,下同);培养温度25±2°C,湿度20%-40%,光照时间12 小时/天,光照强度2500Lx,培养35天。
[0028] 2、壮苗培养
[0029]将丛生继代苗转接到壮苗培养基上进行生根前的复壮,壮苗培养主要以促进丛生 继代苗的丛状芽生长为主,当丛状芽长势整齐、植株健壮,叶子展开、叶面深绿,茎段基本半 木质化时即形成了利于生根的驯化丛苗。
[0030]所述的壮苗培养基配方为,每升含有:30g的白砂糖、3.2g的琼脂粉,0.5g的活性炭 和余量的1/2MS培养基,调节其灭菌前的pH值为5.85 (配制方法是将上述成份混合均勾后, 调pH值,下同);壮苗培养基用650ml的兰花组培瓶分装,l〇〇ml/瓶,用含有直径〇 • 8-1 • Ocm透 气膜的螺纹盖封瓶口,在121。(:和1.1kg. cm2条件下,高压蒸汽灭菌15min,接种继代丛芽后 在温度27 ± 2°C,湿度在20 % -40 %,光照时间16小时/天,光照强度3000LX的培养室内培养 30天。
[0031] 3、生根诱导培养
[0032] 取驯化丛苗,剪取粗壮、翠绿、活性强、1.5cm高度以上的驯化丛苗转入生根诱导培 养基进行生根诱导,由此获得生根苗。
[0033] 所述的生根诱导培养基的配方为,每升含有:1. 〇mg的IBA、0.2mg的NAA、15g的白砂 糖、3.2g的琼脂粉和余量的1/2MS培养基,pH值为5.85 (配制方法是将上述成份混合均匀后, 调pH值,然后灭菌备用,下同);培养室温度27±2°C,湿度在20%-40%,光照时间14小时/ 天,光照强度2500LX,培养20天。
[0034] 4、炼苗、移栽
[0035] 生根苗于炼苗棚中炼苗10天,待根系0.5-2cm长,粗壮、发白时即可进行移栽。生根 苗移栽前,先将生根苗植株置于清水中漂洗,洗去根部的培养基后,在800倍稀释的多菌灵 或是甲基托布津的消毒液中浸泡lOmin,然后置于保水保湿保温的泡沫箱,48小时内移栽种 植完。移栽基质米用表层砂质黄壤土。
[0036] 本实施例的芽增殖诱导培养步骤中,经过简单的去单芽顶端继代方式,显著提高 增殖倍数,达到8倍;经过壮苗培养,丛芽的长势整齐,叶子展开、深绿,叶面光亮,丛芽利用 率大大提高,单瓶可剪出生根植株50-70株;丛苗生根率达100%,移栽成活率达98%。而且 移栽苗分支少,顶端优势明显。通过采用650ml兰花组培瓶作为培养容器,能更好的满足苗 木在培养容器内对生长空间的需要,而且在大批量生产的培养基配制、灭菌、接苗以及培养 等各个环节中,使用兰花组培瓶相对比其他容器降低6倍的生产成本。
[0037] 实施例2
[0038] 1、芽增殖诱导培养
[0039] 将长约1 • 5-2 • 5cm的杉木无菌单芽接种到增殖诱导培养基上进行增殖诱导,当基 部萌发出2-5芽点时转接到新鲜的增殖诱导培养基上,转接时去掉原单芽顶端,以促进新芽 的生长,由此形成丛生继代苗。
[0040] 所述的增殖诱导培养基的配方为,每升含有:0 • 5mg的6BA、0.05mg的NAA、30g的白 砂糖、3 • 2g的琼脂粉和余量的MS培养基,调节其灭菌前的pH值为5.85;培养温度25 ± 2°C,湿 度20%-40%,光照时间12小时/天,光照强度2500Lx,培养35天。
[0041] 2、壮苗培养
[0042]将丛生继代苗转接到壮苗培养基上进行生根前的复壮,壮苗培养主要以促进丛生 继代苗的丛状芽生长为主,当丛状芽长势整齐、植株健壮,叶子展开、叶面深绿,茎段基本半 木质化时即形成了利于生根的驯化丛苗。
[0043] 所述的壮苗培养基的配方为,每升含有:0 • 5mg的6BA、20g的白砂糖、3. Og的琼脂粉 和余量的1/2MS培养基,调节其灭菌前的pH值为5.8;壮苗培养基用650ml的兰花组培瓶分 装,100ml/瓶,用含有直径0.8-1 _0cm透气膜的螺纹盖封瓶□,在121°C和1.1kg.cm2条件下, 高压蒸汽灭菌15min,接种继代丛芽后在温度27 ± 2 °C,湿度20 % -40 %,光照强度3000Lx,光 照时长13小时的培养室内培养25天。
[0044] 3、生根诱导培养
[0045] 取驯化丛苗,剪取粗壮、翠绿、活性强、1.5cm高度以上的驯化丛苗转入生根诱导培 养基进行生根诱导,由此获得生根苗。
[0046] 所述的生根诱导培养基的配方为,每升含有:2mg的NAA、15g的白砂糖和3 • 0g的琼 脂粉,余量的1/2MS培养基,pH值为5 • 8;培养室温度27 ± 2°C,湿度在20 %-40 %,光照时间14 小时/天,光照强度3000LX,培养20天。
[0047] 4、炼苗、移栽
[0048] 生根苗在炼苗棚炼苗15天,待根系〇.5-2cm长,粗壮、发白时即可进行移栽。生根瓶 苗移栽前,先将生根植株置于清水中漂洗,洗去根部的培养基后,在1000倍稀释的多菌灵消 毒液中浸泡30min,然后置于保水保湿保温的泡沫箱,48小时内移栽种植完。移栽基质采用 表层砂质黄壤土。
[0049] 本实施例的芽增殖诱导培养步骤中,增殖倍数达到6倍;壮苗培养后,单瓶可剪出 生根植株50-70株;丛苗生根率达100 %,移栽成活率达99 %。而且移栽苗分支少,顶端优势 明显。生产成本降低3倍。
[0050] 实施例3
[0051] 1、芽增殖诱导培养
[0052] 将长约1.5-2.5cm的杉木无菌单芽接种到增殖诱导培养基上进行增殖诱导,当基 部萌发出2-5芽点时转接到新鲜的增殖诱导培养基上,转接时去掉原单芽顶端,以促进新芽 的生长,由此形成丛生继代苗。
[0053] 所述的增殖诱导培养基的配方,每升含有:3.0mg的6BA、30g的白砂糖、3.5g的琼脂 粉和余量的MS培养基,调节其灭菌前的pH值为5.8;培养温度25±2°C,湿度20%-40%,光照 时间12小时/天,光照强度3000Lx,培养35天。
[0054] 2、壮苗培养
[0055] 将丛生继代苗转接到壮苗培养基上进行生根前的复壮,壮苗培养主要以促进丛生 继代苗的丛状芽生长为主,当丛状芽长势整齐、植株健壮,叶子展开、叶面深绿,茎段基本半 木质化时即形成了利于生根的驯化丛苗。
[0056] 所述的壮苗培养基的配方,每升含有:20g的白砂糖、3.2g的琼脂粉,0.2g的活性 炭,和余量的1/2MS培养基,调节其灭菌前的pH值为5 • 85;壮苗培养基用650ml的兰花组培瓶 分装,l〇〇ml/瓶,用含有直径0.8-1.0cm透气膜的螺纹盖封瓶口,在121 °C和1. lkg. cm2条件 下,高压蒸汽灭菌15min,接种继代丛芽后在温度27 ± 2°C,湿度20 %-40 %,自然光照强度 5000LX,光照时长14小时/天的培养室内培养25天。
[0057] 3、生根诱导培养
[0058] 取驯化丛苗,剪取粗壮、翠绿、活性强、1.5cm高度以上的驯化丛苗转入生根诱导培 养基进行生根诱导,由此获得生根苗。
[0059] 所述的生根诱导培养基的配方为,每升含有:3 • Omg的IBA、15g的白砂糖和3.5g的 琼脂粉,余量的1/2MS培养基,pH值为5 • 9;培养室温度27± 2°C,湿度在20%-40%,光照时间 14小时/天,光照强度2000LX,培养25天。
[0060] 4、炼苗、移栽
[0061] 生根苗在炼苗棚中炼苗7天,待根系0.5-2cm长,粗壮、发白时即可进行移栽。生根 苗移栽前,先将生根苗置于清水中漂洗,洗去根部的培养基后,在900倍稀释的甲基托布津 消毒液中浸泡20min,然后置于保水保湿保温的泡沫箱,48小时内移栽种植完。移栽基质采 用表层砂质黄壤土。
[0062] 本实施例的芽增殖诱导培养步骤中,增殖倍数达到8倍;壮苗培养后,单瓶可剪出 生根植株50〜7〇株;丛苗生根率达100 %,移栽成活率达98%。而且移栽苗分支少,顶端优势 明显。生产成本降低4倍。
[0063] 实施例4
[0064] 1、芽增殖诱导培养
[0065] 将长约1.5-2.5cm的杉木无菌单芽接种到增殖诱导培养基上进行增殖诱导,当基 部萌发出2-5芽点时转接到新鲜的增殖诱导培养基上,转接时去掉原单芽顶端,以促进新芽 的生长,由此形成丛生继代苗。
[0066] 所述的增殖诱导培养基的配方为,每升含有:lmg的NM、30g的白砂糖、3.0g的琼脂 粉,余量的MS培养基,调节其灭菌前的pH值为5.9;培养温度25±2°C,湿度20%_40%以下, 光照时间12小时/天,光照强度2000LX,培养40天。
[0067] 2、壮苗培养
[0068] 将丛生继代苗转接到壮苗培养基上进行生根前的复壮,壮苗培养主要以促进丛生 继代苗的丛状芽生长为主,当丛状芽长势整齐、植株健壮,叶子展开、叶面深绿,茎段基本半 木质化时即形成了利于生根的驯化丛苗。
[0069] 所述的壮苗培养基的配方为,每升含有:〇.5mg的NAA、20g的白砂糖、3.5g的琼脂 粉,lg的活性炭和余量的1/2MS培养基,调节其灭菌前的pH值为5.9;壮苗培养基用650ml的 兰花组培瓶分装,l〇〇ml/瓶,用含有直径0.8-1.0cm透气膜的螺纹盖封瓶口,在121°C和 1. lkg. cm2条件下,高压蒸汽灭菌15min,接种继代丛芽后在温度27 ± 2°C,湿度20 %-40%, 光照强度2000LX,光照时长16小时的培养室内培养30天。
[0070] 3、生根诱导培养
[0071] 取驯化丛苗,剪取粗壮、翠绿、活性强、1.5cm高度以上的驯化丛苗转入生根诱导培 养基进行生根诱导,由此获得生根苗。
[0072] 所述的生根诱导培养基的配方为,每升含有:3. 〇mg的IBA、1如的白砂糖和3.5g的 琼脂粉,余量的1/2MS培养基,pH值为5 •9;培养室温度27± 2°C,湿度在2〇%-40%,光照时间 14小时/天,光照强度2000LX,培养25天。
[0073] 4、炼苗、移栽
[0074] 生根苗于炼苗瓶中炼苗15天,待根系0 • 2-2cm长,粗壮、发白时即可进行移栽。生根 苗移栽前,先将生根苗置于清水中漂洗,洗去根部的培养基后,在8〇〇倍稀释的多菌灵消毒 液中浸泡lOmin,然后置于保水保湿保温的泡沫箱,48小时内移栽种植完。移栽基质采用表 层砂质黄壤土。
[0075] 本实施例的芽增殖诱导培养步骤中,增殖倍数达到6倍;壮苗培养后,单瓶可剪出 生根植株50-70株;丛苗生根率达1〇〇%,移栽成活率达99%。而且移栽苗分支少,顶端优势 明显。生产成本降低4倍。

Claims (3)

1. 一种显著提高杉木组培生产出苗率的方法,包括以下步骤: a •增殖培养:将杉木无菌单芽接种到增殖诱导培养基上进行增殖诱导培养,当单芽基 部萌发出2-5芽点时,去掉原单芽顶端后转接到新鲜的增殖诱导培养基上,在相同条件下继 续培养,由此形成丛生继代苗;所述的增殖诱导培养基的配方,每升含有:1. Omg的6BA、
0. lmg的NAA、30g的白砂糖、3 • 2g的琼脂粉和余量的MS培养基,pH值为5.85;培养条件为:温 度25 ± 2°C,湿度20 %-40 %,光照强度2000-3000LX,光照时长12小时/天; b. 壮苗培养:将丛生继代苗转接到壮苗培养基上进行壮苗培养,当茎段半木质化时即 形成了利于生根的驯化丛苗;所述的壮苗培养基配方,每升含有:30g的白砂糖、3.2g的琼脂 粉、0 • 5g的活性炭和余量的1/2MS培养基,pH值为5.85 ;培养条件为:温度27 ± 2°C,湿度 2〇%-40%,光照强度3000-5000Lx,光照时长13-16小时/天; c. 生根培养:剪取驯化丛苗转入生根诱导培养基进行生根诱导,由此获得生根苗;所述 的生根诱导培养基的配方,每升含有:1. Omg的IBA、0.2mg的NM、15g的白砂糖、3.2g的琼脂 粉和余量的1/2MS培养基,pH值为5.85;培养的条件为:温度为27 ± 2°C,湿度20%-40%,光 照强度2000-3000LX,光照时长14小时/天; d •炼苗移栽:将生根苗炼苗,待根系生长至粗壮、发白时,即可移栽。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤b的壮苗培养基是使用650ml的 兰花组培瓶分装,100-110ml/瓶,用含有直径0.8-lcm透气膜的螺纹盖封瓶口,在121°C和
1. lkg. cm2条件下,高压蒸汽灭菌15min。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤d的生根苗炼苗是在炼苗棚中 炼苗7-15天,待根系生长至0.5〜2cm长,粗壮、发白时,将生根苗置于清水中漂洗,洗去根部 的培养基后,在800-1000倍的消毒液中浸泡10-30min,然后置于保水保湿保温的环境中,48 小时内移栽种植完;移栽基质采用表层砂质黄壤土。
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