CN103229723B - 一种杉木试管苗生根诱导方法 - Google Patents

一种杉木试管苗生根诱导方法 Download PDF

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本发明公开了一种杉木试管苗生根诱导方法，先切取1-2cm的增殖继代小苗，接种于预生根培养基中培养，预生根培养基以1/2MS-MS为基本培养基，还包括NAA0.02-0.08mg/L、蔗糖2.5%和琼脂0.7%。经过15-25天预生根培养后，再进行生根培养，生根培养基以改良1/2MS为基本培养基、还包括IBA0.10-0.25mg/L和IAA0.05-0.08mg/L、蔗糖2.5%和琼脂0.7%，然后置于适宜环境中培养，获得带根试管苗。采用该方法进行杉木生根培养后，能提高杉木试管苗的生根率，根系数量以及根系萌发整齐度，提供更多优质带根试管苗供生产应用，具有较好的经济效益和社会效益。

Description

一种杉木试管苗生根诱导方法
技术领域
本发明涉及无性繁殖技术，尤其是涉及一种杉木试管苗生根诱导方法。
背景技术
杉木(Cunninghamialanceolata)为杉科常绿乔木，在我国有一千多年的栽培史，在林业发展中发挥着重要作用，堪称中国南方“木中之王”。杉木作为我国南方的主要造林树种，栽培面积大，用途广泛，备受广大群众的亲睐，因此，大力发展杉木育苗技术，满足市场对优质苗木的需求是目前面临的重要问题之一。组织培养技术是一种快速无性繁殖技术，采用组织培养手段繁育杉木苗木，是加速杉木良种推广使用的重要手段，是促进我国杉木快速发展的有效途径。生根诱导是杉木组织培养过程中的关键环节，据报道，一些学者采用瓶外生根的方法解决杉木组培苗生根问题，取得了一定的成效。
中国专利CN102217539A的一种杉木无性系离体生根培养方法。具体操作如下：(1)选取杉木优良无性系原株的树干的基部萌条为组织培养材料，接入继代增殖培养基进行继代增殖培养，诱导分化出不定芽，然后将不定芽转入MS培养基上进行伸长培养：其中继代增殖培养基配方为3/4MS+6BA0.3mg/L+蔗糖3％；(2)步骤(1)的不定芽伸长到2-3cm时，转入诱导生根培养基培养，得生根试管苗：诱导生根培养基以1/2MS或1/4MS为基本培养基，在其中添加植物生长调节剂和2％蔗糖；植物生长调节剂为IBA0.05-0.4mg/L、NAA0.05-0.4mg/L、IAA0.1-1.0mg/L、或IBA0.05-0.4mg/L和NAA0.05-0.4mg/L混合；(3)移栽生根试管苗，选用黄土、泥炭土3∶1比例混合后用作移栽基质。该方法虽然能在一定程度上提高了杉木苗的生根率，但是仍不能解决杉木苗生根不整齐、根系不粗壮的问题。
中国专利CN101480166提供一种杉木组织培养生根方法，切取杉木增殖继代小苗，接种于杉木生根培养基进行组织培养生根。杉木生根培养基由改良MS培养基、ABT1#0.4-0.8mg/L、IBA0.1-0.5mg/L和根太阳稀释液2-6mg/L组成。采用该方法进行杉木生根培养后，能缩短杉木的生根时间，提高杉木的生根率，但仍旧不能解决杉木苗生根不统一，根系数量少以及根系不粗壮的问题。
发明内容
本发明的目的在于改进现有的生根诱导技术，提供一种能提高杉木试管苗的生根率，根系数量以及根系萌发整齐度，提供更多优质带根试管苗供生产应用的杉木试管苗生根诱导方法。
本发明的技术方案如下：
一种杉木试管苗生根诱导方法，选取增殖继代小苗，先进行预生根培养，然后再进行生根培养，置于适宜环境中培养，获得带根试管苗，具体操作步骤如下：
(1)预生根培养：切取1-2cm的增殖继代小苗，切取小苗时保留一小团愈伤组织，接种于预生根培养基中培养；
(2)生根培养：待步骤(1)中增殖继代小苗经过15-25天预生根培养后，将小苗转接入生根培养基中培养。
以上所述的预生根培养基以1/2MS-MS为基本培养基，还包括NAA0.02-0.08mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％。
以上所述的生根培养基由改良1/2MS为基本培养基、还包括IBA0.10-0.25mg/L和IAA0.05-0.08mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％。
以上所述的改良1/2MS基本培养基中NH4NO3含量为660mg/L，FeSO4·7H2O含量为27.8-32.4mg/L。
以上所述的培养条件为温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h/d、湿度40-45％。
本发明的优点及积极效果如下：
1.本杉木试管苗生根诱导方法，在生根诱导前采用低浓度NAA对小苗进行预生根培养，然后再进行生根培养，可使试管苗发根统一，发根速度快，根系粗壮且数量较多。
2.本杉木试管苗生根诱导方法，增殖继代小苗经过15-25天时间预生根培养后转入生根培养，即可达到预生根培养效果，又避免了小苗在预生根培养阶段长出根系而使后期生根培养发根不整齐。
3.本杉木试管苗生根诱导方法，调整生根诱导培养基FeSO4·7H2O含量，可有效促进试管苗根系的萌发和增加根系数量。
4.本杉木试管苗生根诱导方法，生根培养基蔗糖浓度为2.5％，琼脂浓度为0.7％，培养基渗透压较低，有利于根系生长。
5.本杉木试管苗生根诱导方法，切取小苗时保留一小团愈伤组织，有利于根系的萌发。
6.本杉木试管苗生根诱导方法，预生根培养和生根培养均在较强光照强度下进行，有利于根系萌发。
附图说明
图1为杉木试管苗生根效果图。
图2为杉木试管苗根系生长情况效果图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1：
一种杉木试管苗生根诱导方法，切取1-2cm的增殖继代小苗，切取小苗时保留一小团愈伤组织，将小苗接种于以1/2MS为基本培养基，还包括NAA0.02mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％的预生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h/d、湿度40-45％的环境中培养。
经过15天预生根培养后，将小苗转接入由NH4NO3含量为660mg/L，FeSO4·7H2O含量为27.8mg/L的改良1/2MS基本培养基,还包括IBA0.10mg/L、IAA0.05mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％组成的生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h/d、湿度40-45％的环境中培养。试管苗的生根率为88.9％，平均根数/条为4.98，不定根形成能力为4.42。
实施例2：
一种杉木试管苗生根诱导方法，切取1-2cm的增殖继代小苗，切取小苗时保留一小团愈伤组织，将小苗接种于以1/2MS为基本培养基，还包括NAA0.06mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％的预生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h/d、湿度40-45％的环境中培养。
经过20天预生根培养后，将小苗转接入由NH4NO3含量为660mg/L，FeSO4·7H2O含量为27.8mg/L的改良1/2MS基本培养基，还包括IBA0.15mg/L、IAA0.05mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％琼脂组成的生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h/d、湿度40-45％的环境中培养。试管苗的生根率为90.1％，平均根数/条为5.02，不定根形成能力为4.52。
实施例3：
一种杉木试管苗生根诱导方法，切取1-2cm的增殖继代小苗，切取小苗时保留一小团愈伤组织，将小团愈伤组织接种于以1/2MS为基本培养基，还包括NAA0.08mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％的预生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h/d、湿度40-45％的环境中培养。
经过20天预生根培养后，将小苗转接入由NH4NO3含量为660mg/L，FeSO4·7H2O含量为30.9mg/L的改良1/2MS基本培养基，还包括IBA0.20mg/L、IAA0.06mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％组成的生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h/d、湿度40-45％的环境中培养。试管苗的生根率为93.1％，平均根数/条为5.89，不定根形成能力为5.48。
实施例4：
一种杉木试管苗生根诱导方法，切取1-2cm的增殖继代小苗，切取小苗时保留一小团愈伤组织，将小团愈伤组织接种于以1/2MS为基本培养基，还包括NAA0.08mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％的预生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h/d、湿度40-45％的环境中培养。
经过25天预生根培养后，将小苗转接入由NH4NO3含量为660mg/L，FeSO4·7H2O含量为32.4mg/L的改良1/2MS基本培养基，还包括IBA0.25mg/L、IAA0.08mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％组成的生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h/d、湿度40-45％的环境中培养。试管苗的生根率为93.6％，平均根数/条为5.76，不定根形成能力为5.39。
实施例5：
一种杉木试管苗生根诱导方法，切取1-2cm的增殖继代小苗，切取小苗时保留一小团愈伤组织，将小团愈伤组织接种于以3/4MS为基本培养基，还包括NAA0.06mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％的预生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为h/d、湿度40-45％的环境中培养。
经过15天预生根培养后，将小苗转接入由NH4NO3含量为660mg/L，FeSO4·7H2O含量为27.8mg/L的改良1/2MS的基本培养基，还包括IBA0.20mg/L、IAA0.08mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％组成的生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为h/d、湿度40-45％的环境中培养。试管苗的生根率为93.3％，平均根数/条为5.45，不定根形成能力为5.08。
实施例6：
一种杉木试管苗生根诱导方法，切取1-2cm的增殖继代小苗，切取小苗时保留一小团愈伤组织，将小团愈伤组织接种于以MS为基本培养基，还包括NAA0.06mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％的预生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h、湿度40-45％的环境中培养。
经过20天预生根培养后，将小苗转接入由NH4NO3含量为660mg/L，FeSO4·7H2O含量为30.9mg/L的改良1/2MS基本培养基，还包括IBA0.15mg/L、IAA0.08mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％组成的生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为h/d、湿度40-45％的环境中培养。试管苗的生根率为96.7％，平均根数/条为6.17，不定根形成能力为5.96。
实施例7：
一种杉木试管苗生根诱导方法，切取1-2cm的增殖继代小苗，切取小苗时保留一小团愈伤组织，将小团愈伤组织接种于以MS为基本培养基，还包括NAA0.08mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％的预生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h、湿度40％-45％的环境中培养。
经过25天预生根培养后，将小苗转接入由NH4NO3含量为660mg/L，FeSO4·7H2O含量为32.4mg/L的改良1/2MS基本培养基，还包括IBA0.25mg/L、IAA0.10mg/L、蔗糖2.5％和琼脂0.7％组成的生根培养基中。置于温度23±2℃、光照强度2200-2400LX，光照时间为13h/d、湿度40-45％的环境中培养。试管苗的生根率为96.7％，平均根数/条为5.68，不定根形成能力为5.49。

Claims (3)

1.一种杉木试管苗生根诱导方法，其特征在于：选取增殖继代小苗，先进行预生根培养，然后再进行生根培养，置于适宜环境中培养，获得带根试管苗，具体操作步骤如下：
（1）预生根培养：切取1-2 cm的增殖继代小苗，切取小苗时保留一小团愈伤组织，接种于预生根培养基中培养；所述的预生根培养基以1/2MS-MS为基本培养基，还包括NAA 0.02-0.08 mg/L、蔗糖2.5 %和琼脂0.7 %；
（2）生根培养：待步骤（1）中增殖继代小苗经过15-25天预生根培养后，将小苗转接入生根培养基中培养。
2.根据权利要求1所述的一种杉木试管苗生根诱导方法，其特征在于：所述的生根培养基由改良1/2 MS为基本培养基、还包括IBA 0.10-0.25 mg/L和IAA 0.05-0.08 mg/L、蔗糖2.5 %和琼脂0.7 %；
所述的改良1/2 MS基本培养基中NH4NO3含量为660 mg/L，FeSO4·7H2O含量为27.8-32.4 mg/L。
3.根据权利要求1所述的一种杉木试管苗生根诱导方法，其特征在于：培养条件为温度23±2 ℃、光照强度2200-2400 LX，光照时间为13 h/d、湿度40-45%。
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Denomination of invention: A method for inducing rooting of test tube seedlings of cunninghamia lanceolata

Granted publication date: 20140730

License type: Common License

Record date: 20221228

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