CN104304000B - 一种杉木无性系组培苗生根诱导方法及生根培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种杉木无性系组培苗生根诱导方法，包括以下步骤：(1)将杉木不定芽进行继代增殖，获得继代苗；(2)将所述继代苗进行诱导生根培养，获得生根诱导的单芽苗；(3)将经生根诱导的单芽苗的基部浸泡于浓度为200ppm的ABT生根粉1号溶液中获得组培苗。本发明提供的杉木无性系组培苗生根诱导方法可以显著提高杉木组培苗的生根率和移栽成活率，为难生根杉木无性系组培苗规模化生产和推广应用提供技术支撑，利用该技术，难生根杉木无性系组培苗生根率可提高到80‑85％，移栽成活率亦可高达80‑85％。
Description
技术领域
本发明涉及植物无性系组织培养领域，特别涉及一种杉木无性系组培苗生根诱导方法及生根培养基。
背景技术
杉木是我国特有的重要速生用材树种，具有生长快、产量高、材性好、用途广、栽培历史悠久的优点，是南方各省区最重要的造林树种之一，栽培区域遍及南方17省(区)，杉木人工林的面积、蓄积量和林业产值均居我国主要造林树种的前茅。近年来，由于木材深加工产业的发展和市场消费对于实木用材需求的增加，使经营杉木人工林的经济效益不断提升，各地营造杉木人工林的积极性逐年增高，对杉木良种壮苗的需求非常迫切。近年来，为了使选育出的杉木良种尽快地应用到林业生产中去，开展了杉木优良无性系选育和组培快繁技术研究，无性系的组培苗已进入规模化生产和推广应用，促进了杉木人工林速生丰产优质。但由于不同基因型的杉木优良无性系组培苗的生根能力存在差异，部分试验筛选出来的萌芽能力强、继代增殖倍数高的优良无性系在现有常规组培技术条件下仍然存在生根诱导难、生根率低和生根率不稳定的问题，导致无法建立高效的组培快繁技术体系，极大地影响了这些优良无性系组培苗规模化生产以及推广应用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：提供一种生根率、移栽成活率高的杉木无性系组培苗生根诱导方法及生根培养基。
为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
一种杉木无性系组培苗生根诱导方法，包括以下步骤：
(1)将杉木不定芽进行继代增殖，获得继代苗；
(2)将所述继代苗切割为2cm-2.5cm的单芽，将所述单芽接种到生根培养基中进行诱导生根培养，所述生根培养基的配方包括以下组分：1/4MS、0.3-0.5mg/L的IBA、0.05-0.1mg/L的NAA、0.1-0.5mg/L的IAA、质量浓度为15％的蔗糖和6.5g/L-7.0g/L的琼脂，调节所述生根培养基的pH值为5.6-6.0，在温度为25℃±2℃条件下进行培养，获得生根诱导的单芽苗；
(3)将经生根诱导的单芽苗移出培养基，用水洗净经生根诱导的单芽苗基部，将清洗后的单芽苗用湿布覆盖，将单芽苗的基部浸泡于浓度为200ppm的ABT生根粉1号溶液中，浸泡深度为单芽苗基部以上0.5-1cm，浸泡时间为20-30min，获得组培苗。
本发明的杉木无性系组培苗生根诱导方法的有益效果在于：
(1)通过同时考虑IBA、NAA和IAA三者的含量分别对杉木组培苗的生根的影响、和三者对杉木组培苗的生根的协同作用，设计出杉木组培苗生根培养基配方，在使用所述生根培养基诱导获得单芽苗的步骤中提高杉木组培苗的诱导生根率；
(2)通过将瓶内诱导生根培养后获得的单芽苗进行瓶外ABT生根粉1号溶液的浸泡处理，使得单芽苗在激素的作用下生根率进一步提高；
(3)本发明的杉木无性系组培苗生根诱导方法改进现有的杉木无性系组织培养生根诱导方法，改善生根形态建成，提高生根率，为难生根杉木无性系组培苗规模化生产和推广应用提供技术支撑，利用该技术，难生根杉木无性系组培苗生根率可提高到80-85％。
本发明还公开一种杉木组培苗生根培养基，所述杉木组培苗生根培养基的配方包括以下组分：1/4MS、0.3-0.5mg/L的IBA、0.05-0.1mg/L的NAA、0.1-0.5mg/L的IAA、质量浓度为15％的蔗糖和6.5-7.0g/L的琼脂，所述杉木组培苗生根培养基的pH值为5.6-6.0。
本发明的杉木组培苗生根培养基的有益效果在于：所述杉木组培苗生根培养基的配方同时包括IBA、NAA和IAA，并通过同时考虑三者的含量分别对杉木组培苗的生根的影响、和三者对杉木组培苗的生根的协同作用，得出具体的生根培养基配方，从而本发明的杉木组培苗生根培养基具有提高杉木组培苗诱导生根率的有益效果。
具体实施方式
为详细说明本发明的技术内容、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式详予说明。
本发明最关键的构思在于：将杉木组培苗相继进行瓶内诱导生根培养和瓶外激素浸泡处理，从而提高杉木组培苗的生根率。
本发明提供的一种杉木无性系组培苗生根诱导方法，包括以下步骤：
(1)将杉木不定芽进行继代增殖，获得继代苗；
(2)将所述继代苗切割为2cm-2.5cm的单芽，将所述单芽接种到生根培养基中进行诱导生根培养，所述生根培养基的配方包括以下组分：1/4MS、0.3-0.5mg/L的IBA、0.05-0.1mg/L的NAA、0.1-0.5mg/L的IAA、15％的蔗糖和6.5g/L-7.0g/L的琼脂，调节所述生根培养基的pH值为5.6-6.0，在温度为25℃±2℃条件下进行培养，获得生根诱导的单芽苗；
(3)将所述经生根诱导的单芽苗移出培养基，用水洗净经生根诱导的单芽苗基部，将清洗后的单芽苗用湿布覆盖，将单芽苗的基部浸泡于浓度为200ppm的ABT生根粉1号溶液中，浸泡深度为单芽苗基部以上0.5-1cm，浸泡时间为20-30min，获得组培苗。
本发明的杉木无性系组培苗生根诱导方法的有益效果在于：
(1)通过同时考虑IBA、NAA和IAA三者的含量分别对杉木组培苗的生根的影响、和三者对杉木组培苗的生根的协同作用，设计出杉木组培苗生根培养基配方，在使用所述生根培养基诱导获得单芽苗的步骤中提高杉木组培苗的诱导生根率；
(2)通过将瓶内诱导生根培养后获得的单芽苗进行瓶外ABT生根粉1号溶液的浸泡处理，使得单芽苗在激素的作用下生根率进一步提高；
(3)本发明的杉木无性系组培苗生根诱导方法改进现有的杉木无性系组织培养生根诱导方法，改善生根形态建成，提高生根率，为难生根杉木无性系组培苗规模化生产和推广应用提供技术支撑，利用该技术，难生根杉木无性系组培苗生根率可提高到80-85％。
进一步的，步骤(1)中所述继代增殖为将杉木不定芽接种到继代培养基中进行，所述继代培养基的配方包括以下组分：1/2MS、0.3mg/L的BA、0.1-0.2mg/L的IBA、30g/L的蔗糖和5.6-6.0g/L的琼脂，调节所述继代增殖培养基的pH值为5.6-6.0，在温度为25℃±2℃条件下，将接种杉木不定芽的继代培养基进行暗培养，暗培养的时间为5天，然后将暗培养后的接种杉木不定芽的继代培养基在光照强度为1500-2000lx、光照时间为12-14h/d的条件下进行光培养，光培养的时间为30-35天，获得继代苗。
进一步的，步骤(2)中所述培养为：将接种到生根培养基的单芽进行暗培养，暗培养的时间为5天，然后将暗培养后的接种到生根培养基的单芽在光照强度为1500-2000lx，光照时间为12h/d的条件下进行光培养，光培养的时间为10天。
进一步的，将所述步骤(2)中的经生根诱导的单芽苗置于覆盖遮光率为50％的遮阳网下进行炼苗处理，所述炼苗处理的温度为15-35℃，炼苗处理的时间为10-15d；经生根诱导的单芽苗经炼苗，可对幼苗进行锻炼，使其定植后能够迅速适应露地的不良环境条件，缩短缓苗时间，本发明的炼苗时间比常规的炼苗时间短，可提高炼苗场所的利用率和降低管理成本。
进一步的，还包括步骤(4)：将所述组培苗移栽至拱棚内，控制拱棚内空气的相对湿度保持在80-95％，所述拱棚上覆盖塑料薄膜和遮阳网，所述遮阳网的遮光率为50％，喷施1500倍的百菌清或甲基托布津1次，之后每7-10天喷施1000-1500倍的多菌灵、百菌清或甲基托布津1次，当组培苗生根长度达1cm时，撤除拱棚的塑料薄膜；加强光照强度，直至撤除遮阳网转入全光育苗；所述步骤(4)中将所述组培苗移栽至拱棚15-20d后，喷施0.05-0.1％的磷酸二氢钾1次，之后每10-15天用0.05-0.2％的尿素追肥1次，苗木封顶前1个月停止追肥。
进一步的，将所述步骤(1)中的杉木不定芽为：选取杉木无性系原株的树干基部萌芽条为组织培养外植体，由所述外植体经诱导培养而得，从树木的发育年龄来讲，基部萌芽条的幼态程度大，生长非常活跃，容易组培诱导成功，同时能避免针叶树位置生长效应的出现和发生，保证组培苗生长的直立性，因此，选择“杉木无性系原株的树干基部萌芽条”为外植体。
本发明还提供了一种杉木组培苗生根培养基，所述杉木组培苗生根培养基的配方包括以下组分：1/4MS、0.3-0.5mg/L的IBA、0.05-0.1mg/L的NAA、0.1-0.5mg/L的IAA、质量浓度为15％的蔗糖和6.5-7.0g/L的琼脂，所述杉木组培苗生根培养基的pH值为5.6-6.0。
本发明的杉木组培苗生根培养基的有益效果在于：所述杉木组培苗生根培养基的配方同时包括IBA、NAA和IAA，并通过同时考虑三者的含量分别对杉木组培苗的生根的影响、和三者对杉木组培苗的生根的协同作用，得出具体的生根培养基配方，从而本发明的杉木组培苗生根培养基具有提高杉木组培苗诱导生根率的有益效果。
实施例一
一种杉木组培苗生根培养基，所述杉木组培苗生根培养基的配方包括以下组分：1/4MS、0.5mg/L的IBA、0.1mg/L的NAA、0.5mg/L的IAA、质量浓度为15％的蔗糖和6.5-7.0g/L的琼脂，所述杉木组培苗生根培养基的pH值为5.6-6.0。
实施例二
一种杉木组培苗生根培养基，其特征在于，所述杉木组培苗生根培养基的配方包括以下组分：1/4MS、0.3mg/L的IBA、0.05mg/L的NAA、0.1mg/L的IAA、质量浓度为15％的蔗糖和6.5-7.0g/L的琼脂，所述杉木组培苗生根培养基的pH值为5.6-6.0。
实施例三
一种杉木组培苗生根培养基，所述杉木组培苗生根培养基的配方包括以下组分：1/4MS、0.4mg/L的IBA、0.08mg/L的NAA、0.3mg/L的IAA、质量浓度为15％的蔗糖和6.5-7.0g/L的琼脂，所述杉木组培苗生根培养基的pH值为5.6-6.0。
实施例四
一种杉木无性系组培苗生根诱导方法
步骤1：选取杉木优良无性系原株的树干基部萌芽条为组织培养外植体，经诱导培养出不定芽，然后将不定芽转接入继代培养基上进行继代增殖；继代增殖培养基的配方包括以下组分：1/2MS、0.3mg/L的BA、0.1-0.2mg/L的IBA、30g/L的蔗糖和5.6-6.0g/L的琼脂，调节pH值为5.6-6.0，培养周期为35d-40d，培养条件为温度控制在25℃±2℃。接种后暗培养5d，再转入光照培养，光照培养中光照强度为1500-2000lx，光照时间为12-14h/d。
步骤2：组培苗瓶内生根培养
将组织培养继代苗切割为2-2.5cm的单芽接种到生根培养基诱导生根，生根培养基的配方包括以下组分：1/4MS、0.3-0.5mg/L的IBA、0.05-0.1mg/L的NAA、0.1-0.5mg/L的IAA、15％的蔗糖和6.5-7.0g/L的琼脂，调节pH值为5.6-6.0。培养温度为25℃±2℃，接种后先暗培养5d，再转入光照培养10d。光照培养中光照强度为1500-2000lx，光照时间为12h/d。
步骤3：炼苗培养
将组培瓶苗从培养室转移至炼苗温室或大棚炼苗。覆盖遮光率为50％的遮阳网，环境温度为15-35℃，炼苗10-15d。
步骤4：瓶外激素处理
炼苗后，用清水洗净组培苗基部的培养基，用浓度为200ppm的ABT生根粉1号溶液浸泡组培苗基部20-30min,浸泡深度为0.5-1cm。处理过程中，组培苗用湿布覆盖保湿。
步骤5：移栽
经ABT生根粉处理后，组培苗直接进行大田移栽，移栽适宜时间为1-4月、以及12月。在苗床面上铺3-5cm厚的黄心土，移栽前2-3d，用0.3-0.5％的高锰酸钾溶液将床面黄心土淋透消毒。用竹签在苗床上打孔后将组培苗植入，深度为1-2cm，株行距为8cm×8cm或10cm×10cm。移栽后及时浇定根水，喷施1500倍的百菌清或甲基托布津1次。移栽后应立即搭建小拱棚，覆盖塑料薄膜和遮阳网遮光保湿，遮阳网遮光率为50％，保持苗床土壤湿润，小拱棚内空气相对湿度保持在80-95％，每7-10d喷施1000-1500倍的多菌灵、百菌清、甲基托布津等杀菌剂1次。当组培苗生根长度达1cm时，可逐渐撤除小拱棚的塑料薄膜；8月中下旬后逐渐加强光照强度，直至撤除遮阳网转入全光育苗。移栽15-20d后，可喷施0.05-0.1％的磷酸二氢钾1次，以后每10-15d用0.0-0.2％的尿素或复合肥追肥1次。苗木封顶前1个月停止追肥。
本发明的实验效果数据及分析
1试验材料和方法
1.1试验材料
本试验的实验材料选自杉木优良无性系4C的无菌继代苗，组培材料起源于优良无性系原株树干基部萌芽条。杉木优良无性系4C是福建省林业科学研究院郑仁华等选育出的杉木优良无性系，具有速生、优质、高红心材率的优良特性。该无性系为组培快繁试验筛选出来的萌芽能力强、继代增殖倍数高的优良无性系，但在现有常规组培技术条件下仍然存在生根诱导难、生根率低和生根率不稳定的问题。
1.2试验方法
1.2.1单一生长素对生根的影响
以1/4MS培养基为基本培养基，分别单独添加植物生长素IBA、NAA，浓度设4个水平，分别为0.1、0.3、0.5、1.0mg·L-1，进行单因素试验，培养60d后调查统计生根率、平均生根数及生长情况。生根率＝生根的株数÷接种的总株数×100％；平均生根数＝根的总数÷生根的株数×100％。
表1为单一生长素对杉木优良无性系4C组培苗生根的影响表。表1列出了生根培养基中添加单一生长素对杉木优良无性系4C组培苗生根的影响。
表1
| 处理 | 培养基配方(mg/L) | 接种数(株) | 生根率(％) | 平均生根数(条) |
| 1 | 1/4MS+IBA0.1 | 30 | 0 | 0 |
| 2 | 1/4MS+IBA0.3 | 30 | 13.33 | 1 |
| 3 | 1/4MS+IBA0.5 | 30 | 13.33 | 1 |
| 4 | 1/4MS+IBA1.0 | 30 | 20 | 1.7 |
| 5 | 1/4MS+NAA0.1 | 30 | 6.67 | 1 |
| 6 | 1/4MS+NAA0.3 | 30 | 16.67 | 1.2 |
| 7 | 1/4MS+NAA0.5 | 30 | 20 | 2 |
| 8 | 1/4MS+NAA1.0 | 30 | 26.67 | 2.3 |
从表1可见：以1/4MS为基本培养基时，单独添加IBA、NAA能诱导杉木优良无性系4C组培苗生根，生根率和平均生根数随着生长素浓度的增加呈增加的趋势。当IBA、NAA浓度范围为0.1-0.5mg/L时，组培苗不生根或生根率低，生根率为0-20％；当生长素浓度为1.0mg/L时，生根率最高仅达26.67％。试验结果表明，生根培养基中添加单一生长素能诱导杉木优良无性系4C组培苗生根，但生根率低，不能满足组培苗规模化生产的要求。
1.2.2培养基中同时添加3种生长素对生根的影响
表2为杉木优良无性系4C组培苗生根培养基筛选试验结果表。以1/4MS培养基为基本培养基，同时添加不同浓度的植物生长素NAA、IBA和IAA进行试验。采用正交实验设计L9(34),试验因素及水平为：NAA浓度为0.05、0.1、0.3mg/L，IBA浓度为0.1、0.3、0.5mg/L，IAA浓度为0.1、0.3、0.5mg/L，培养60d后调查统计生根率、平均生根数、愈伤组织发生和生长情况，生根率百分率数据先进行反正弦(arcsin)转换后进行统计分析。
表2
由表2可知，当同样以1/4MS培养基为基本培养基时，在生根培养基中同时添加植物生长素NAA、IBA和IAA，杉木优良无性系4C组培苗生根率普遍提高；9个处理中以第5号处理，即1/4MS培养基同时添加0.1mg/L的NAA、0.3mg/L的IBA和0.5mg/L的IAA为最好，生根率达50％，组培苗生长状况良好。由此可见，在生根培养基中采用NAA、IBA和IAA复配比单独添加NAA或IBA更有利于组培苗生根。经极差分析后，由表3可见，极差R最大的因素是NAA浓度，其次是IBA和IAA的浓度，所以3种生长素中，对组培苗生根影响最大的是NAA浓度，其次是IBA和IAA的浓度；其中，NAA浓度以0.05mg/L水平为好，IBA浓度以0.3mg/L水平为好，IAA浓度以0.1mg/L为好。
表3为生根培养基筛选正交试验结果极差分析表。表4为杉木优良无性系4C组培苗生根培养基筛选试验结果。
表3
表4
因极差分析结果的最佳水平组合不在已做过的试验中，将极差分析得出的最佳组合与表3中的第5号处理进行了对比试验。表4列出了2种生根培养基的对比试验结果，由表4可见，采用极差分析结果的最佳水平组合(第10号处理)，杉木优良无性系4C组培苗生根率达53.33％，比第5号处理提高了3.33％；单芽苗基部产生的愈伤组织较少，愈伤组织直径为0.4cm，比第5号处理缩小了0.2cm。试验结果表明，杉木优良无性系4C组培苗最佳生根培养基配方为1/4MS培养基同时添加NAA0.05mg/L、IBA0.3mg/L和IAA0.1mg/L。
1.2.3“瓶内一步生根法”组培苗生根培养效果分析
杉木优良无性系组培苗被诱导生根是评判其组织培养是否成功的重要标志。生根率高，生根质量好是杉木优良无性系进行组培规模化生产和推广应用的必备条件之一。目前，杉木优良无性系组培快繁技术常规的组培苗的生根培养采用的方法为：选取生长健壮的组培继代苗切割为2-3cm的单芽后接种到生根培养基中进行不定根诱导；组培苗生根后，经炼苗、出瓶洗苗后进行移栽；这种组培苗生根培养的方法可简称为“瓶内一步生根法”。
上述试验结果表明：采用“瓶内一步生根法”，在生根培养基中只添加NAA或IBA时，杉木优良无性系4C组培苗生根时间长，生根率低，60d生根率最高仅达26.67％(表1中第8号处理)；在生根培养基中同时添加NAA、IBA和IAA时，在3种生长素的协同作用下，无性系组培苗生根率提高到53.33％(表4中第10号处理)，生根时间缩短3～5d，但单芽苗基部产生愈伤组织较多，愈伤组织直径达0.4～0.6cm，而单芽苗基部产生的愈伤组织较多会影响生根质量，不利于移栽成活，移栽成活率为46～53％。因此，采用“瓶内一步生根法”，杉木优良无性系4C组培苗生根的效果不佳，存在组培苗生根时间长、生根率较低、单芽苗基部产生的愈伤组织较多、移栽成活率较低等问题，达不到组培苗规模化生产的要求。
1.3本发明的“瓶内外两步生根法”对生根的影响
1.3.1组培苗瓶内生根培养
将组织培养继代苗切割为2-2.5cm的单芽接种到生根培养基诱导生根，生根培养基配方为1/4MS、0.3-0.5mg/L的IBA、0.05-0.1mg/L的NAA、0.1-0.5mg/L的IAA、15％的蔗糖和6.5-7.0g/L的琼脂，调节pH值为5.6-6.0。培养条件：温度为25℃±2℃，光照强度为1500-2000lx，光照时间为12h/d。接种后先暗培养5d，再转入光照培养10d。
1.3.2炼苗培养
将组培瓶苗从培养室转移至炼苗温室或大棚炼苗。覆盖遮光率为50％的遮阳网，环境温度为15-35℃，炼苗10-15d。
1.3.3瓶外激素处理
炼苗后，用清水洗净组培苗基部的培养基，用浓度为200ppm的ABT生根粉1号溶液浸泡组培苗基部20-30min,浸泡深度为0.5cm。处理过程中，组培苗用湿布覆盖保湿。
1.3.4移栽及苗木管理
经ABT生根粉处理后，组培苗直接进行大田移栽，移栽适宜时间为1-4月、以及12月。在苗床面上铺35cm厚的黄心土，移栽前2-3d，用0.3-0.5％的高锰酸钾溶液将床面黄心土淋透消毒。用竹签在苗床上打孔后将组培苗植入，深度为1-2cm，株行距为8cm×8cm或10cm×10cm。移栽后及时浇定根水，喷施1500倍的百菌清或甲基托布津1次。移栽后应立即搭建小拱棚，覆盖塑料薄膜和遮阳网遮光保湿，遮阳网遮光率为50％，保持苗床土壤湿润，小拱棚内空气相对湿度保持在80-95％，每7-10d喷施1000-1500倍的多菌灵、百菌清、甲基托布津等杀菌剂1次。当组培苗生根长度达1cm时，可逐渐撤除小拱棚的塑料薄膜；8月中下旬后逐渐加强光照强度，直至撤除遮阳网转入全光育苗。移栽15-20d后，可喷施0.05-0.1％的磷酸二氢钾1次，以后每10-15d用0.05-0.2％的尿素或复合肥追肥1次。苗木封顶前1个月停止追肥。
以不经ABT生根粉处理直接移栽的组培苗为对照，移栽30d后统计生根率，移栽60d后统计成活率与生长情况。
表5为杉木优良无性系4C组培苗“瓶内外两步生根法”试验结果表
表5
由表5可见，用浓度为200ppm的ABT生根粉1号溶液浸泡组培苗基部20min～30min后，移栽30d后组培苗的平均生根率可达86.67％，比对照高52％；且单芽苗基部仅在下部切口处形成少量紧密型的黄白愈伤组织，不定根主要形成自苗茎皮层组织，根系白色，生长旺盛，生根质量良好；移栽60d后经ABT生根粉处理的组培苗成活率达82.67％，比对照高56.67％，苗木生长健壮。试验结果表明，采用“瓶内外两步生根法”，能有效缩短难生根杉木优良无性系组培苗生根时间，提高组培苗的生根率，改善发根形态和提高生根质量，组培苗移栽成活率高，能满足组培苗规模化生产和推广应用的要求。
综上所述，本发明提供的杉木无性系组培苗生根诱导方法可以显著提高杉木组培苗的生根率和移栽成活率，为难生根杉木无性系组培苗规模化生产和推广应用提供技术支撑，利用该技术，难生根杉木无性系组培苗生根率可提高到80-85％，移栽成活率亦可高达80-85％。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (9)
1.一种杉木无性系组培苗生根诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将杉木不定芽进行继代增殖，获得继代苗；
(2)将所述继代苗切割为2cm-2.5cm的单芽，将所述单芽接种到生根培养基中进行诱导生根培养，所述生根培养基的配方为以下组分：1/4MS、0.3-0.5mg/L的IBA、0.05-0.1mg/L的NAA、0.1-0.5mg/L的IAA、15％的蔗糖和6.5g/L-7.0g/L的琼脂，调节所述生根培养基的pH值为5.6-6.0，在温度为25℃±2℃条件下进行培养，获得生根诱导的单芽苗；
(3)将经生根诱导的单芽苗移出培养基，用水洗净经生根诱导的单芽苗基部，将清洗后的单芽苗用湿布覆盖，将单芽苗的基部浸泡于浓度为200ppm的ABT生根粉1号溶液中，浸泡深度为单芽苗基部以上0.5-1cm，浸泡时间为20-30min，获得组培苗；
(4)将所述组培苗直接进行大田移栽，选用黄心土作移栽基质。
2.根据权利要求1所述的杉木无性系组培苗生根诱导方法，其特征在于，步骤(2)中所述培养为：将接种单芽的生根培养基进行暗培养，暗培养的时间为5天，然后将暗培养后的接种单芽的生根培养基在光照强度为1500-2000lx，光照时间为12h/d的条件下进行光培养，光培养的时间为10天。
3.根据权利要求1所述的杉木无性系组培苗生根诱导方法，其特征在于，步骤(1)中所述继代增殖为将杉木不定芽接种到继代培养基中进行，所述继代培养基的配方包括以下组分：1/2MS、0.3mg/L的BA、0.1-0.2mg/L的IBA、30g/L的蔗糖和5.6-6.0g/L的琼脂，调节所述继代增殖培养基的pH值为5.6-6.0，在温度为25℃±2℃条件下，将接种杉木不定芽的继代培养基进行暗培养，暗培养的时间为5天，然后将暗培养后的接种杉木不定芽的继代培养基在光照强度为1500-2000lx、光照时间为12-14h/d的条件下进行光培养，光培养的时间为30-35天，获得继代苗。
4.根据权利要求1所述的杉木无性系组培苗生根诱导方法，其特征在于，将所述步骤(2)中的单芽苗置于覆盖遮光率为50％的遮阳网下进行炼苗处理，所述炼苗处理的温度为15-35℃，炼苗处理的时间为10-15d。
5.根据权利要求1或4所述的杉木无性系组培苗生根诱导方法，其特征在于，还包括步骤(4)：将所述组培苗移栽至拱棚内，控制拱棚内空气的相对湿度保持在80-95％，所述拱棚上覆盖塑料薄膜和遮阳网，所述遮阳网的遮光率为50％，喷施1500倍的百菌清或甲基托布津1次，之后每7-10天喷施1000-1500倍的多菌灵、百菌清或甲基托布津1次，当组培苗生根长度达1cm时，撤除拱棚的塑料薄膜；加强光照强度，直至撤除遮阳网转入全光育苗。
6.根据权利要求5所述的杉木无性系组培苗生根诱导方法，其特征在于，所述步骤(4)中将所述组培苗移栽至拱棚15-20d后，喷施0.05-0.1％的磷酸二氢钾1次，之后每10-15天用0.05-0.2％的尿素追肥1次，苗木封顶前1个月停止追肥。
7.根据权利要求1所述的杉木无性系组培苗生根诱导方法，其特征在于，将所述步骤(1)中的杉木不定芽为：选取杉木无性系原株的树干基部萌芽条为组织培养外植体，由所述外植体经诱导培养而得。
8.一种杉木组培苗生根培养基，其特征在于，所述杉木组培苗生根培养基的配方为以下组分：1/4MS、0.3-0.5mg/L的IBA、0.05-0.1mg/L的NAA、0.1-0.5mg/L的IAA、质量浓度为15％的蔗糖和6.5-7.0g/L的琼脂，所述杉木组培苗生根培养基的pH值为5.6-6.0。
9.根据权利要求8所述的杉木组培苗生根培养基，其特征在于，所述杉木组培苗生根培养基的配方包括以下组分：1/4MS、0.3mg/L的IBA、0.05mg/L的NAA、0.1mg/L的IAA、质量浓度为15％的蔗糖和6.5-7.0g/L的琼脂，所述杉木组培苗生根培养基的pH值为5.6-6.0。
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