CN1305371C - 丛生竹组培快繁的生根方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种丛生竹组培快繁的生根方法，它是以竹子的幼枝为外植体，在芽诱导培养基上培养建立了无菌株系，无菌苗又在增殖培养基上通过丛生芽快速繁殖途径形成大量的幼芽，幼芽再经分株壮苗后依次接种于第一生根培养基和第二生根培养基上培养诱导出完整的根系。本发明所提供的丛生竹组培快繁的生根方法解决了竹子组培苗难于生根的难题，为优良竹种的快速繁殖提供了技术保证，将对竹资源的开发和利用起到积极的推动作用，具有重要的经济和社会效益。
Description
技术领域
本发明涉及一种丛生竹子的生根方法，尤其涉及一种利用组织培养进行快速繁殖的生根方法。
背景技术
竹子是重要的森林资源，再生能力强、生长迅速、成材期短、产量高，具有一次造林可“永久”利用的特点，被誉为“砍不败的产业”。其竹材具有纵向强度好、弹性大、耐磨损、耐腐蚀、抗弯曲、能防蛀、能阻燃等特点，与木材相比具有硬度强、稳定性高、胶合度好、外观美丽等优点。全世界年产竹材约1600多万吨，除传统的用于建房、制作家具和工艺品外，主要用于制作竹质人造板和高级竹制纸，其需求量与日俱增；竹的幼芽——竹笋，清脆爽口，营养丰富，其富含18种氨基酸和多种人体必须的微量元素，是天然的保健食品，已发展成为鲜笋、笋干、笋罐头等系列产品，也已成为竹资源开发利用的一大支柱产品；竹子还是一个四季长青的常绿物种，其纵横交错的地下竹鞭系统(散生竹)或竹蔸和须根发达的根茎系统(丛生竹)具有强大的固土保水功能，其地上部分年年抽笋，尽管每年择伐老龄竹秆和挖取鲜笋，也能保持较为稳定的林相结构，因此竹林在保持水土、涵养水源、调节气候、净化空气和美化环境等方面还具有一般林木无可比拟的优点。因此对优良竹种进行快速繁殖对开发和利用宝贵的竹资源具有重要的意义。
关于竹子的组织培养，自1982年Metha等首先用印度刺竹种子合子胚诱导愈伤组织，形成胚芽和再生植株以来，国内外在这方面进行了一些研究，主要是采用种子、种胚、花序、花药、叶片、嫩茎尖、幼根、成熟竹幼枝节段等材料作为外植体，通过愈伤组织途径和腋芽萌生途径获得再生植株，但组培苗的生根效果不很理想。
巨龙竹和龙竹是世界上最大的两种丛生竹，其杆高可达20～30m，茎粗15～30cm，杆基部的壁厚可以达到3～4cm，节间长30～40cm，竹材产量是毛竹的5～8倍，其笋又适合加工笋干，他们是很有发展前途的两个竹种。该竹种仅在中国云南省局部地区有零星分布，且其竹节育苗生根十分困难，采用传统方法无法大批量培育种苗。研究利用组织培养的方法获得大量的优质种苗是发展龙竹及其产业的关键，但其组培苗生根极为困难，用常规的组织培养生根方法和培养基达不到效果，满足不了需求。
发明内容
本发明的目的是提供一种丛生竹组培快繁的生根方法。
本发明所设计的丛生竹组培快繁的生根方法包括无菌株系的建立过程、继代增殖培养过程、诱导生根过程、试管苗的移栽过程。所述无菌株系的建立过程是将竹子的幼枝节段做为外植体，先用乙醇进行表面消毒，然后再浸入氯化汞溶液中消毒，接着取出用无菌水进行清洗，并用无菌滤纸吸干水分后接种于芽诱导培养基上进行避光培养，再转入自然光下培养，以诱导幼枝腋芽的萌发。所述继代增殖培养过程是把在诱导培养阶段所形成的芽切割后接种于增殖培养基上，并在光照条件下培养，以诱导形成丛生芽，接着将形成的丛生芽再分割成芽丛接种于相同的培养基上进行继代增殖。所述诱导生根过程是将丛生芽分切成数个芽为单丛接种到第一生根培养基中培养后，再转接到第二生根培养基中培养，以促进其长出完整的根系。所述试管苗的移栽过程是把生根的瓶苗移到自然室温下炼苗，取出小苗清洗培养基后移栽在“椰糠+河砂+少许泥土”基质上，并保持湿润，待小苗长到一定高度时，可移入二级苗圃培植成商品苗。以上所说的各个培养基都是以MS培养基为基础培养基，并添加有其他组分，以满足各个过程的需要。
本发明所提供的丛生竹组培快繁的生根方法解决了竹子组培苗难于生根的难题，为优良竹种的快速繁殖提供了技术保证，将对竹资源的开发和利用起到积极的推动作用，具有重要的经济和社会效益。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行详细说明。
本发明所设计的丛生竹组培快繁的生根方法包括无菌株系的建立过程、继代增殖培养过程、诱导生根过程、试管苗的移栽过程。
1、无菌株系的建立过程 取经过精选的竹子幼枝条小心地去除叶片，经洗洁精溶液浸泡后用自来水冲洗干净，将枝条切成带节的小段，在无菌条件下用70％-80％的乙醇进行表面消毒，再把节段取出投入氯化汞水溶液中进行消毒处理，期间不断地进行摇动，使竹节段始终浸泡在氯化汞水溶液中；取出节段用无菌水冲洗，接着用无菌滤纸吸干水分；正向将节段接种到预备好的诱导培养基上，先避光培养6-8天，再转入自然光下培养，以诱导幼枝腋芽的萌发。所述诱导培养基是以MS培养基为基础培养基，然后按比例添加有6BA 1.8～2.2mg.L-1、NAA0.1～0.3mg.L-1、PVP200～280mg.L-1、蔗糖20～40g.L-1、卡拉胶6～8g.L-1。
2、继代增殖培养过程 把在诱导培养阶段所形成的芽切割后接种于增殖培养基上，先于自然光散射光下或800～1200Lx的光照条件下培养18-20天，以诱导形成丛生芽，形成的丛生芽再分割成带2～3个芽的芽丛接种于相同的增殖培养基上进行继代增殖。所述增殖培养基是以MS培养基为基础培养基，然后按比例添加有6BA 1.8～2.2mg.L-1、KT 0.3～0.6mg.L-1、椰子水80～150ml.L-1、蔗糖20～40g.L-1、卡拉胶6～8g.L-1。
3、诱导生根过程 将丛生芽分切成2～3个芽为1丛接种到第一生根培养基中培养15～20天，再转接到第二生根培养基中培养20～25天便可长出完整的根系，生根率达95％。所述第一生根培养基是以1/2MS培养基为基础培养基，然后按比例添加有2，4-D 0.1～2.0mg.L-1+NAA1.8～2.2mg.L-1+IAA1.8～2.2mg.L-1、蔗糖20～40g.L-1、卡拉胶6～8g.L-1。所述第二生根培养基是以1/2MS培养基为基础培养基，然后按比例添加有NAA1.8～2.2mg.L-1+IAA1.8～2.2mg.L-1、蔗糖20～40g.L-1、卡拉胶6～8g.L-1。
4、试管苗的移栽过程 把生根的瓶苗移到自然室温下炼苗5～7天，取出小苗并清洗培养基后用1000倍的70％甲基托布津或1000倍多菌灵液浸泡，再移栽在遮光度约70-90％左右的“椰糠+河砂+少许泥土”基质上，并保持湿润，移栽成活率达98％以上。待小苗长到16-25cm时，可移入二级苗圃培植成商品苗。
Claims (1)
1、一种丛生竹组培快繁的生根方法，其特征在于：
(1)、无菌株系的建立：取经过精选的竹子幼枝条小心地去除叶片，经洗洁精溶液浸泡后用自来水冲洗干净，将枝条切成带节的小段，在无菌条件下用70％-80％的乙醇进行表面消毒，再把节段取出投入氯化汞水溶液中进行消毒处理，期间不断地进行摇动，使竹节段始终浸泡在氯化汞水溶液中；取出节段用无菌水冲洗，接着用无菌滤纸吸干水分；正向将节段接种到诱导培养基上，先避光培养6-8天，再转入自然光下培养，以诱导幼枝腋芽的萌发；所述诱导培养基是以MS培养基为基础培养基，然后按比例添加有6BA 1.8～2.2mg.L-1、NAA0.1～0.3mg.L-1、PVP200～280mg.L-1、蔗糖20～40g.L-1和卡拉胶6～8g.L-1；
(2)、继代增殖培养：把在诱导培养阶段所形成的芽切割后接种于增殖培养基上，先于自然散射光下或800～1200Lx的光照条件下培养18-20天，以诱导形成丛生芽，形成的丛生芽再分割成带2～3个芽的芽丛接种于相同的增殖培养基上进行继代增殖；所述增殖培养基是以MS培养基为基础培养基，然后按比例添加有6BA 1.8～2.2mg.L-1、KT 0.3～0.6mg.L-1、椰子水80～150ml.L-1、蔗糖20～40g.L-1和卡拉胶6～8g.L-1；
(3)、诱导生根：将丛生芽分切成2～3个芽为1丛接种到第一生根培养基中培养15～20天，再转接到第二生根培养基中培养20～25天，长出完整的根系，生根率95％；所述第一生根培养基是以1/2MS培养基为基础培养基，然后按比例添加有2，4-D 0.1～2.0mg.L-1、NAA1.8～2.2mg.L-1、IAA1.8～2.2mg.L-1、蔗糖20～40g.L-1和卡拉胶6～8g.L-1；所述第二生根培养基是以1/2MS培养基为基础培养基，然后按比例添加有NAA1.8～2.2mg.L-1、IAA1.8～2.2mg.L-1、蔗糖20～40g.L-1和卡拉胶6～8g.L-1；
(4)、试管苗的移栽：把生根的瓶苗移到自然室温下炼苗5～7天，取出小苗并清洗培养基后用1000倍的70％甲基托布津或1000倍多菌灵液浸泡，再移栽在遮光度70-90％的椰糠+河砂+少许泥土的基质上，并保持湿润，移栽成活率98％以上；待小苗长到16-25cm时，移入二级苗圃培植成商品苗。
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