CN105104210B - 一种规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法，它将泡桐种子通过搓揉去除膜状翅，再装入纱布袋进行漂洗、消毒后，接入固体培养基，培养20～30d，种子萌发长成幼苗；将幼嫩幼苗剪切成带一个茎节的小段转入增殖继代培养基上，培养30～40d可继代一次，增殖系数达4～5，直到达到所需的种苗量，再转入壮苗生根培养基，培养40～50d后，小苗生长健壮，根3～4条，即可移栽。与现有技术相比，本发明可直接用于工厂化规模化的种苗生产，具有污染少，增殖速度快，变异率低，种苗整齐健壮，生产成本低，移栽成活率高等优势。
Description
技术领域
本发明属于植物的栽培技术领域，具体涉及一种规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法。
背景技术
泡桐属(Paulownia Sieb.et Zucc.)多为落叶乔木，热带为常绿。该属共7种，均产中国，除东北北部、内蒙古、新疆北部、西藏等地区外全国均有分布。泡桐是中国的特产树种，具有很强的速生性，是平原绿化、营建农田防护林、四旁植树和林粮间作的重要树种。泡桐木材纹理通直、花纹美观、色泽悦目、材质轻软、密度低、尺寸稳定、不翘不裂，是生产单板材如胶合板、拼板、集成材等最优良的材料。泡桐材保温、隔热、绝缘性能优良，共振性非常好，辐射阻尼高，内摩擦小，是优良的弦乐器用材，可与著名的乐器用材鱼鳞云杉媲美。泡桐材的木纤维含量高达50％以上，也是生产刨花板、纤维板和造纸的优良原料。通过组培的方法可一年四季不间断大规模繁殖泡桐种苗，满足栽培生产的需要。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法，以解决现有技术存在的栽培效率不高的问题。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下；
一种规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法，它包括如下步骤：
(1)选取泡桐种子，搓揉去除膜质翅后，放入纱布袋扎上袋口后，于流水中冲洗10min，再用去污剂清洗10min，最后用流水冲洗20min；冲洗完成后在超净工作台上将纱布袋挤干水分，先浸泡于70～75％体积分数的乙醇水溶液45～60s，再浸泡于氯化汞水溶液中6～8min，最后用无菌水冲洗5～7次；冲洗完成后用镊子取出种子备用；
(2)将经步骤(1)处理后得到的泡桐种子播种于固体培养基中培养20～30天，培养完成后，种子萌发成4～5cm的泡桐小苗；
(3)将步骤(2)中得到的泡桐小苗在超净工作台上修剪成带1个节的小段，接种于增殖继代培养基中培养30～45天；培养完成后即可重新继代培养，增殖系数达4～5；
(4)将经步骤(3)处理后的泡桐小苗转接到壮苗培养基中培养40～50天，培养完成后，得到泡桐成苗；
(5)将步骤(4)中得到的泡桐成苗移植到带有外遮阴的大棚温室苗床上，以自然光作为光源进行驯化培养，10～15天后取出泡桐成苗，用水冲洗去除培养基后，移栽至基质上。
步骤(1)中，所述的去污剂为家用洗衣粉。
步骤(1)中，所述的氯化汞水溶液中，溶质氯化汞的质量分数为0.1％～0.15％。
步骤(2)中，培养条件为22～25℃，光照强度为500～1000勒克斯，光照时间为11～13h/d；其中，所述的固体培养基的配方包括：萘乙酸(NAA)0～1mg/L+蔗糖25～30g/L+WPM培养基+pH 5.6～5.8。
步骤(3)中，培养条件为25～28℃，光照强度为1000～2000勒克斯，光照时间为11～13h/d；其中，所述的增殖继代培养基的配方包括：萘乙酸(NAA)0～0.3mg/L+6-苄氨基嘌呤(6-BA)2～3mg/L+土豆汁60～80g/L+蔗糖25～30g/L+WPM培养基+琼脂4.5～6g/L+pH 5.6～5.8。
步骤(4)中，培养条件为25～28℃，光照强度为1000～2000勒克斯，光照时间为11～13h/d；其中，所述的壮苗培养基的配方包括：萘乙酸(NAA)0～0.3mg/L+蔗糖25～30g/L+White培养基+琼脂4.5～6g/L+pH 5.6～5.8；其中，壮苗培养基的优选配方包括：萘乙酸(NAA)0-0.3mg/L+香蕉泥60-80g/L+蔗糖25～30g/L+White培养基+琼脂4.5～6g/L+pH 5.6～5.8。
步骤(5)中，苗床内温度控制为25～30℃。
步骤(5)中，所述的基质为由田园土、蛭石和泥炭土以3：2：1的体积比混合而成。
有益效果：本发明与现有技术相比，具有如下优点：
1、泡桐种子较小，有膜状翅，采用搓揉的方法去除膜状翅，并用纱布袋包裹消毒，相比现有消毒方法，种子消毒更彻底，损失少。
2、泡桐种子消毒后，将种子播散到步骤(2)中的固体培养基中，采用WPM并配以适当的激素，与现有的种子萌发培养基相比，该方法种子萌发时间大大缩短至20～30d，并且萌发率高达90％以上，变异率小于1％，出芽整齐。
3、步骤(3)所述的继代增殖培养基中，采用WPM并配以适当的激素和天然附加物，与传统的继代增殖培养基相比，该方法能更好更快的促进小苗的生长和分枝，增殖系数可达到4～5。
4、步骤(4)所述的壮苗生根培养基中，采用White培养基并配合适当的激素与天然附加物，与传统的壮苗生根培养基相比，该方法能更好促进小苗迅速生根且根较粗壮。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1
一种规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法，它包括以下步骤：
(1)将泡桐的种子搓揉，去除种子的膜质翅，用纱布袋包裹种子并扎好袋口，置于流水中冲洗10min，用家用洗衣粉清洗10min，再用流水冲洗20min，挤干水分带入超净工作台，在超净工作台上，用75％体积分数酒精浸泡45-60s，0.1％升汞浸泡6～8min，无菌水冲洗5～7次。然后剪开纱布袋，用镊子夹出种子，备用。
(2)将步骤(1)得到的泡桐树种子播种于固体培养基中，在22～25℃、光照度500～1000勒克斯、光照时间11～13h/d的条件下，培养20～30d，种子萌发形成4-5cm的幼弱的小苗，萌发率达70％，取小苗备用；其中，所述的固体培养基组成为：萘乙酸(NAA)0.5mg/L+蔗糖25～30g/L+WPM培养基+pH 5.6～5.8；
(3)将步骤(2)得到的幼弱小苗在超净工作台上剪成带1个节的小段，接种于增殖继代培养基中，在25～28℃、光照度1500勒克斯、光照时间12h/d的条件下培养30-45d，即可重新继代培养，增殖系数达4～5；黄化、白化等不良变异率低于1％，其中，所述的继代增殖培养基组成为萘乙酸0.1mg/L+6-苄氨基嘌呤2.5mg/L+土豆汁60g/L+蔗糖30g/L+WPM培养基+琼脂6g/L+pH 5.8；
(4)将步骤(3)中得到泡桐树小苗转接到壮苗生根培养基中，在25～28℃、光照度1500勒克斯左右、光照时间12h/d的条件下培养45天左右，其中，所述的壮苗生根培养基组成为：萘乙酸0.1mg/L+香蕉泥60g/L+蔗糖30g/L+White培养基+琼脂6g/L+pH5.8；
(5)将步骤(4)得到的成苗移至有外遮荫的大棚温室苗床上，温度控制在25～30℃，利用太阳光或自然光作为光源进行驯化培养，驯化10～15d得到成苗。将苗从瓶内取出用清水冲洗去除培养基后，移栽入栽培基质上。
实施例2：
与实施例1基本相同，步骤(2)、步骤(3)、步骤(4)中种子萌发，继代增殖培养、壮苗生根培养三个阶段分别以表1所列培养基组合进行筛选，以优选最适培养基组合配方。表1说明如下：
①培养基配方优化主要是设计不同的基础培养基、激素浓度等对培养基进行了优化设计,本实例中均设计成固体培养基，每种配方中琼脂浓度均为6g/L,蔗糖为30g/L，培养环境为温度25℃、光照度1000～2000勒克斯、光照时间12h/d培养室内。②针对生产，不同的培养阶段设计了不同的培养基配方，种子播种阶段主要观察种子萌发的快慢、长势、颜色(翠绿为佳)等指标判断配方是否合理；继代增殖阶段主要观察小苗分枝情况(越多越好)、玻璃化程度等指标判断配方是否合理；壮苗生根培养阶段，主要通关观察苗的生长势、生根速度、玻璃化程度(越低越好)、颜色等指标来判断配方的好坏。通过观察和各项指标的测定，并用“★”和“☆”的多少代表配方的好坏，★越多表示越好，☆比★要低一个等次。
表1培养基配方筛选
试验表明，腋芽萌发阶段(步骤2)18种配方组合中，基础培养基和激素组合范围为萘乙酸(NAA)0～1mg/L+蔗糖25～30g/L+WPM培养基+pH 5.6～5.8，在此范围内，种子萌发率高，生长快，是较适宜的组合配方组合，种子播种后20-30d左右即可分化成小苗；继代增殖阶段(步骤3)32种配方组合中，基础培养基、激素及天然添加物组合范围为萘乙酸(NAA)0～0.3mg/L+6-苄氨基嘌呤(6-BA)2～3mg/L+土豆汁60～80g/L+蔗糖25～30g/L+WPM培养基+琼脂4.5～6g/L+pH 5.6～5.8，在此范围内，苗的生长势良好、增殖速度快、玻璃化程度低，3～4个月，苗的增殖系数可达3～4；壮苗阶段(步骤4)，结果表明，萘乙酸(NAA)0-0.3mg/L+香蕉泥60-80g/L+蔗糖25～30g/L+White培养基+琼脂4.5～6g/L+pH 5.6～5.8为优选培养基配方组合。在试验中还发现土豆对泡桐小苗的增殖发有较好的促进作用，香蕉汁在一定程度上促进其生根。
Claims (5)
1.一种规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法，其特征在于，它包括如下步骤：
(1)选取泡桐种子，搓揉去除膜质翅后，放入纱布袋封上袋口后，于流水中冲洗10min，再用去污剂清洗10min，最后用流水冲洗20min；冲洗完成后将纱布袋挤干水分，先浸泡于70～75％体积分数的乙醇水溶液45～60s，再浸泡于氯化汞水溶液中6～8min，最后用无菌水冲洗5～7次；冲洗完成后取出种子备用；
(2)将经步骤(1)处理后得到的泡桐种子播种于固体培养基中培养20～30天，培养完成后，种子萌发成泡桐小苗；
(3)将步骤(2)中得到的泡桐小苗修剪成带1个节的小段，接种于增殖继代培养基中培养30～45天；
(4)将经步骤(3)处理后的泡桐小苗转接到壮苗培养基中培养40～50天，培养完成后，得到泡桐成苗；
(5)将步骤(4)中得到的泡桐成苗移植到苗床上进行驯化培养，10～15天后取出泡桐成苗，用水冲洗去除培养基后，移栽至基质上；
其中，
步骤(2)中，培养条件为22～25℃，光照强度为500～1000勒克斯，光照时间为11～13h/d；其中，所述的固体培养基的配方包括：萘乙酸0～1mg/L+蔗糖25～30g/L+WPM培养基+pH5.6～5.8；
步骤(3)中，培养条件为25～28℃，光照强度为1000～2000勒克斯，光照时间为11～13h/d；其中，所述的增殖继代培养基的配方包括：萘乙酸0～0.3mg/L+6-苄氨基嘌呤2～3mg/L+土豆汁60～80g/L+蔗糖25～30g/L+WPM培养基+琼脂4.5～6g/L+pH5.6～5.8；
步骤(4)中，培养条件为25～28℃，光照强度为1000～2000勒克斯，光照时间为11～13h/d；其中，所述的壮苗培养基的配方包括：萘乙酸0-0.3mg/L+蔗糖25～30g/L+White培养基+琼脂4.5～6g/L+pH5.6～5.8。
2.根据权利要求1所述的规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的去污剂为家用洗衣粉。
3.根据权利要求1所述的规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的氯化汞水溶液中，溶质氯化汞的质量分数为0.1％～0.15％。
4.根据权利要求1所述的规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法，其特征在于，步骤(5)中，苗床内温度控制为25～30℃。
5.根据权利要求1所述的规模化高效快速繁殖泡桐试管苗的方法，其特征在于，步骤(5)中，所述的基质由田园土、蛭石和泥炭土以3：2：1的体积比混合而成。
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-
2015
- 2015-09-30 CN CN201510639756.5A patent/CN105104210B/zh active Active
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105104210A (zh) | 2015-12-02 |
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